CN101513176A - 黄曲条跳甲实验种群的饲养方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种黄曲条跳甲实验种群的饲养方法，旨在提供一种对卵和幼虫几乎没有伤害，孵化率高，存活率高，准确的各个虫态，龄期齐整的黄曲条跳甲实验种群的饲养方法。本发明的技术方案是用蔬菜叶喂食成虫，使其产卵在黑布和蔬菜叶上，然后再用萝卜皮喂食幼虫，直至老熟，再将老熟幼虫放到1％～1.5％的湿沙中，让其羽化成成虫。本发明主要用于为完成对黄曲条跳甲的生物学、生态学和防治技术等领域的深入系统研究提供充足的实验种群。

Description

黄曲条跳甲实验种群的饲养方法

技术领域：

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种黄曲条跳甲实验种群的饲养方法。

背景技术：

黄曲条跳甲Phyllotreta striolata(Fabricius)属鞘翅目，叶甲科，别名狗虱子、菜蚤子、土跳蚤、黄跳蚤，是主要为害十字花科蔬菜的一种世界性害虫，在亚洲、欧洲、北美洲、南非均有分布，国内几乎遍及各省。

黄曲条跳甲成虫咬食叶片形成大量孔洞，影响蔬菜的品质和商品价值；幼苗子叶被成虫取食后整株死亡，造成缺苗，严重时甚至需要重播。幼虫取食根部，剥食菜根表皮，使植株凋萎枯死；萝卜块根受害时，造成许多黑褐色虫斑，严重影响质量和产量。

近几年来，十字花科蔬菜种植面积不断扩大，单一连续的种植方式为黄曲条跳甲提供了充足的食物来源，如今对于黄曲条跳甲的控制一直以来主要依赖化学药剂防治，且多以防治成虫为主。叶面施药无法兼顾土中幼虫、蛹和卵，药剂持效期一过，成虫不断羽化出土为害，菜农增加喷药次数和加大用药量，导致杀虫剂防效下降，且严重污染环境，降低了蔬菜品质。如辛硫磷等药施用之后还会使蔬菜变黄，严重影响蔬菜品质，降低菜农收入。同时，无公害蔬菜生产对化学防治提出了更严格的要求和限制。因此需要一种安全的无公害防治方法。

但是由于黄曲条跳甲成虫体小，善于跳跃，产卵于茎基部或土表根系间；幼虫于地表下1-10cm内取食植株根部表皮，老熟后做土室化蛹。黄曲条跳甲的这些生活习性给室内大量饲养带来很多困难，进而阻碍了对其生物学、生态学和防治技术等领域的深入系统研究。

曾有前人对黄曲条跳甲的饲养方法进行研究，将根部或整株幼苗放入培养皿中供幼虫取食，由于通气性差，往往容易导致根部腐烂。或者采用“整苗大瓶罩笼法”，用滤纸和黑布将洗净的幼苗根部包裹后放入大指形管中，再用塑料瓶罩住带幼苗的大指形管，用以饲养成虫和幼虫。这种饲养方法能够使黄曲条跳甲完成世代，但存在诸多问题。首先，成虫将卵产在幼苗根部、茎或叶柄基部，或者滤纸上，挑检卵时容易受到伤害，降低卵的孵化率。其次，检查幼虫发育和存活时，需要将滤纸和黑布解开后再剥开植株根部表皮查找，幼虫幼嫩体小，且与根部表皮的颜色非常接近，寻找时不仅费时费力，而且容易弄死幼虫；现有的文献报道中记载的用“整苗大瓶笼罩法”饲养黄曲条跳甲未成熟期最高存活率为63.3％(饲养黄曲条菜跳甲实验种群的一种新方法，刘芸、尤民生、侯有明，昆虫知识，第42卷第5期，第578～581页，2005年)；此外，由于无法直接观察到幼虫，进而不能得到准确的各龄期幼虫。再者，“整苗大瓶罩笼法”材料繁多，工序复杂，大量饲养时需要较大的空间来放置塑料瓶，不适宜实验室大量饲养。

发明内容：

本发明的一个目的是提供了一种对卵和幼虫几乎没有伤害，孵化率高，存活率高，室内大量培养黄曲条跳甲实验种群的方法。

本发明进一步目的是提供了一种能够得到准确的各个虫态，龄期齐整的黄曲条跳甲实验种群的饲养方法，以克服现有技术的不足。

本发明通过以下技术方案予以实现的：

本发明所述的黄曲条跳甲实验种群的饲养方法，包括以下步骤：

(a)成虫的饲养和卵的收集：

在养虫盒中放入深色布质材料，挑取黄曲条跳甲成虫于养虫盒中，用新鲜的蔬菜叶饲喂，使成虫将卵产在深色布质材料或菜叶下面，每隔一段时间，所述时间不超过48h，将深色布质材料和带有卵的菜叶，与成虫分开，将深色布质材料和带有卵的菜叶放在一个养虫盒中，成虫放在另外一个含有新的蔬菜叶和深色布质材料的养虫盒中，重复上述卵和成虫分开的步骤，直至成虫产卵完，常规培养条件下，保持湿度为75％-85％；

(b)幼虫的饲养：

对(a)步骤收集的一个批次的卵，在孵化的前一天放入新鲜的白萝皮，用白萝卜皮饲喂黄曲条跳甲幼虫，直至成长到老熟幼虫，常规培养条件下，保持湿度为75％-85％，并处于黑暗环境中；

(c)蛹的饲养：

待黄曲条跳甲老熟幼虫准备化蛹时，将其转移到湿度为1％～1.5％的湿沙中，老熟幼虫钻入沙中化蛹，蛹羽化后成成虫，黑暗环境下，常规条件培养。

由于黄曲条跳甲成虫会吞食卵，因此每隔一段时间将成虫与卵分开，这样即保证了产卵的量，又可以使得卵的孵化时间基本一致，有利于获得龄期比较齐整的虫子，一般相隔的时间越短，其龄期更加的齐整，但是为了操作的方便，一般每隔12-48h将成虫与卵分开一次。

本发明所述的在幼虫饲养阶段的孵化前一天，其孵化的时间与卵所处的培养条件有关，本发明在25±1℃条件下，一般成虫产卵四天以后开始孵化，此时孵化的前一天，即指产卵后的第四天。

本发明所述的一个批次的卵，是指成虫产卵后，每隔一段时间将卵和成虫分开，每一次分开的卵即为一个批次。

本发明在成虫饲养时段，加入小团蘸满质量分数为10％蜂蜜水的吸附物来饲喂成虫，蜂蜜水可以延长成虫的寿命，所述的吸附物可以为棉花。

本发明人发现黄曲条跳甲一龄和二龄幼虫准备蜕皮时具有一个不食不动，呈“C”字形的静止期，因此本发明还可在幼虫饲养阶段，在幼虫在蜕皮前爬出萝卜块到深色布质材料上，呈不食不动的“C”字形，将呈“C”字形准备蜕皮的幼虫用小描笔挑至另外一个放有深色布质材料的养虫盒中，并放入新鲜萝卜皮，供刚蜕皮的幼虫取食，由于深色布质材料与幼虫颜色对比比较强烈，很容易的辨别幼虫，因此可以用小描笔小心的挑至另外一个放有深色布质材料和新鲜萝卜皮的养虫盒中，这样既可避免挑虫时候对幼虫的损害，又可使幼虫的龄期更加的齐整。本发明在一龄幼虫蜕皮时，呈“C”字形的静止期进行挑取幼虫或者/和在二龄幼虫蜕皮时，进行挑取幼虫，为了操作的方便，一般进行一次幼虫的挑取。

本发明还可在幼虫饲养阶段，幼虫蜕皮前爬出萝卜块到深色布质材料上，呈不食不动的“C”字形时，将旧萝卜皮移出，放入新鲜的萝卜皮在旧的养虫盒中供蜕皮后的下一龄幼虫取食，这样不仅可以在不受损伤的情况下给幼虫更换食料，而且更加容易观察幼虫的发育情况。

黄曲条跳甲是严重危害十字花科的主要害虫之一，主要取食菜薹(Brassicaparachinensis L.H.Bariley)、萝卜(Raphanus sativus L)、油菜(Brassica campestris L)等十字花科蔬菜，本发明所述的蔬菜叶最好是黄曲条跳甲喜食的一些蔬菜叶，如上海青、黑叶白、菜薹、萝卜等。

本发明所述的深色布质布料，大小小于养虫盒的底面积，基本不透光，其主要是模拟黄曲条跳甲的土栖性环境，能够让成虫在其背面产卵(隐蔽的地方)，并可以让幼虫在蜕皮的时候能够爬上去蜕皮，其中以黑布最好，其材质可以棉，麻、纱、纶或丝。

本发明所述的湿沙是粒度为0.250-0.425mm，通过将洗净烘干的沙子先后用40目和60目的筛子筛除过粗和过细的沙子，灭菌后用无菌水配制而成。

本发明所述的养虫盒是保鲜盒、塑料盒等有盖的塑料盒子，在盖子上挖一个较大的通气孔，再用60目的不锈钢网封住，或者用事先扎好孔的保鲜膜和橡皮圈封住玻璃培养皿，或者用纱网和不锈钢制成的大型养虫笼。

本发明通过改变饲喂黄曲条跳甲的食物，用蔬菜叶和萝卜皮代替了植株根或幼苗，直接让成虫产卵到蔬菜叶和深色布质材料上，不用挑拣卵，避免了在卵收集的阶段，挑检卵时对卵的伤害从而大大提高了卵的孵化率，其孵化率可达到92％，本发明在幼虫饲喂阶段用萝卜皮来饲喂，辅以深色布质材料在养虫盒。幼虫在进行蜕皮时会爬到深色布质材料上面，呈不食不动的“C”字形，这可能是因为幼虫寻找隐蔽场所蜕皮的缘故。此时便于观察幼虫的发育状况，还可将呈“℃”字形准备蜕皮的幼虫用小描笔挑至放有新的深色布质材料的养虫盒中用萝卜皮进行饲喂，这样就会使得黄曲条跳甲种群的龄期更加齐整，因此应用本发明所述的方法，能使黄曲条跳甲在室内完成其生活史，并且在完成生活史的过程中，卵和幼虫几乎没有伤害，存活率高，未成熟期存活率在75％以上，所述的未成熟期是指从卵到成虫羽化这段时期。本发明可得到大量完好的卵、准确的各龄幼虫和蛹，本方法简单，易于掌握，为完成对黄曲条跳甲的生物学、生态学和防治技术等领域的深入系统研究提供了充足的实验种群。

具体实施例子：

实施例1：

(1)在密封保鲜盒(长19cm，宽12cm，高7cm)的盒盖中央开一口(长15cm，宽8cm)后用60目的不锈钢网封住，制成养虫盒。在养虫盒中加入两张黑棉布(直径9cm)，养虫盒一角放一小团脱脂棉，用10％的蜂蜜水湿润。将上海青洗净后于清水中浸泡30分钟，取出晾干后剪下绿叶部分放入养虫盒中。放入约30对成虫于养虫盒中取食产卵，每两天将成虫转移至另一装有新鲜上海青菜叶和黑布的养虫盒中供其继续取食产卵，原养虫盒中的黑布和带有卵的蔬菜叶留在养虫盒中，上述卵与成虫的分开动作的持续时间一般直到成虫产卵完，记录成虫产卵时间。这样使得同一养虫盒中的卵的发育时间基本一致，以使得黄曲条跳甲的种群的龄期一致。养虫盒放在空调养虫室(25±1℃，相对湿度75％-85％)的养虫笼内，光照时间12L∶12D。

(2)在25±1℃，相对湿度75％-85％情况下，产卵后的第四天，将洗净的新鲜萝卜切成厚2-3cm的小块，剥皮后切成面积为6-8cm²的长方形小块，取4-5块放入装有即将孵化的卵的养虫盒内，四天后卵开始孵化，用萝卜皮引诱初孵幼虫取食，统计孵化率为92％。每天观察幼虫的存活情况，3天以后一龄幼虫落在黑布上呈“C”字型，呈不食不动的静止期准备蜕皮。将准备蜕皮的幼虫用小描笔挑至另外一个放有黑布的养虫盒中，同时放入4-5块萝卜皮供刚蜕皮的二龄幼虫取食，这样可使得黄曲条跳甲种群龄期的齐整，用萝卜皮喂食幼虫，幼虫在进行蜕皮时会爬到深色布质材料上面，呈不食不动的“C”字形，这可能是因为幼虫寻找隐蔽场所蜕皮的缘故。此时，在黑布上挑取幼虫，可清晰的看见幼虫，从而克服现有技术中的由于在根部表皮上挑取幼虫时候幼虫和根部颜色相近，而挑取幼虫的难度，降低了幼虫的死亡率，二龄虫蜕皮时同样会爬到黑布上去，呈“C”字型的静止状态，用萝卜皮饲喂幼虫直至老熟，在幼虫饲养阶段，养虫盒处于黑暗环境下，并保持湿度为75-85％，其他为常规的培养条件。

(3)即将化蛹的老熟幼虫性情活跃，在养虫盒内四处爬动，寻找合适的地方化蛹。将洗净烘干的沙子，先后用40目和60目的筛子筛除过粗和过细的沙子，其粒度0.250-0.425mm，灭菌后用无菌水配制成湿度为1.5％的湿沙。湿沙放在玻璃培养皿(直径15cm，高3cm)中至2cm高处，将老熟幼虫挑到湿沙上，幼虫即钻入沙中化蛹。相同大小的培养皿盖住，封口膜封口后放在养虫室内，黑暗环境，常规条件下培养。7天以后开始羽化成成虫，经统计未成熟期存活率为76％。

实施例2

(1)在玻璃培养皿(直径15cm，高3cm)中加入1张黑棉布(直径13cm)，边缘放一小团脱脂棉，用10％的蜂蜜水湿润。自田间采集未施过农药的萝卜叶，洗净晾干后放入培养皿中。在保鲜膜上用一次性注射器针头(1ml)扎大约300个孔，封住培养皿后，放入约20对成虫，再用橡皮圈箍住培养皿。每隔12h将黑布和带有卵的萝卜叶转移到另外一个培养皿中，成虫留在原培养皿中，加入新的黑布和新鲜的萝卜叶，供成虫继续取食产卵，重复上述卵和成虫分开，直至成虫产卵结束，记录成虫产卵时间。培养皿放在空调养虫室(25±1℃，相对湿度75-85％)的养虫笼内，光照时间12L∶12D。

(2)在25±1℃，相对湿度75％-85％情况下，产卵后的第四天，将洗净的新鲜萝卜切成厚2-3cm的小块，剥皮后切成面积为6-8cm²的长方形小块，取4-5块放入装有即将孵化的卵的养虫盒内，四天后卵开始孵化，用萝卜皮引诱初孵幼虫取食，统计孵化率为91％。每天观察幼虫的存活情况。3天以后一龄幼虫落在黑布上呈“C”字型准备蜕皮，将旧萝卜皮转移到另外一个养虫盒中，放入4-5块新鲜萝卜皮供刚蜕皮的二龄幼虫取食，到二龄虫蜕皮时，重复上述操作，用萝卜皮饲养幼虫直至老熟，这样不仅可以在不受损伤的情况下给幼虫更换食料，而且更加容易观察幼虫的发育情况。

(3)即将化蛹的老熟幼虫性情活跃，在养虫盒内四处爬动，寻找合适的地方化蛹。将洗净烘干的沙子，先后用40目和60目的筛子筛除过粗和过细的沙子，其粒度0.250-0.425mm，灭菌后用无菌水配制成湿度为1％的湿沙。湿沙放在玻璃培养皿(直径15cm，高3cm)中至2cm高处，将老熟幼虫挑到湿沙上，幼虫即钻入沙中化蛹。相同大小的培养皿盖住，封口膜封口后放在养虫室内，黑暗环境，常规条件下培养。7天以后开始羽化成成虫，经统计未成熟期存活率为78％。

Claims (8)

1.一种黄曲条跳甲实验种群的饲养方法，其特征在于包括下列步骤：

(a)成虫的饲养和卵的收集：

在养虫盒中放入深色布质材料，挑取黄曲条跳甲成虫于养虫盒中，用新鲜的蔬菜叶饲喂，使成虫将卵产在深色布质材料或菜叶下面，每隔一段时间，所述时间不超过48h，将深色布质材料和带有卵的菜叶，与成虫分开，将深色布质材料和带有卵的菜叶放在一个养虫盒中，成虫放在另外一个含有新的蔬菜叶和深色布质材料的养虫盒中，重复上述卵和成虫分开的步骤，直至成虫产卵完，常规培养条件下，保持湿度为75％-85％；

(b)幼虫的饲养：

对(a)步骤收集的一个批次的卵，在孵化的前一天放入新鲜的白萝皮，用白萝卜皮饲喂黄曲条跳甲幼虫，直至成长到老熟幼虫，常规培养条件下，保持湿度为75％-85％，并处于黑暗环境中；

(c)蛹的饲养：

待黄曲条跳甲老熟幼虫准备化蛹时，将其转移到湿度为1％～1.5％的湿沙中，老熟幼虫钻入沙中化蛹，蛹羽化后成成虫，黑暗环境下，常规条件培养。

2.根据权利要求1所述的饲养方法，其特征在于在成虫饲养时段，加入小团蘸满质量分数为10％蜂蜜水的吸附物来饲喂成虫。

3.根据权利要求1所述的饲养方法，其特征在于在幼虫饲养阶段，在一龄幼虫蜕皮前，爬到深色布质材料上的时候，用小描笔将深色布质材料上的幼虫挑至放有深色布质材料的另外一个养虫盒中，并放入新鲜萝卜皮，供刚蜕皮的幼虫取食。

4.根据权利要求1所述的饲养方法，其特征在于在幼虫饲养阶段，在一龄幼虫蜕皮前，爬到黑布上的时候，将旧萝卜皮移出，放入新鲜的萝卜皮在旧的养虫盒中供蜕皮后的下一龄幼虫取食。

5.根据权利要求1所述的饲养方法，其特征在于所述的蔬菜叶为上海青、黑叶白、菜心、萝卜或芥菜。

6.根据权利要求1所述的饲养方法，其特征在于所述的深色布质材料为黑布。

7.根据权利要求6所述的饲养方法，其特征在于所述的黑布材质为棉、麻、纱、纶或丝。

8.根据权利要求1所述的饲养方法，其特征在于所述的湿沙的粒度为0.250-0.425mm。