CN101491589A - 一种分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种分离中药总生物碱的方法，尤其是一种从中药白屈菜、血水草或飞龙掌血提取液中分离总生物碱的方法，属中药领域。该方法包括如下技术方案：取白屈菜、血水草或飞龙掌血提取液，调整pH值1至7，滤过，取滤液加于阳离子交换树脂柱上，先以水洗脱除杂，再用0.5％～15％酸液洗脱，检查无生物碱为止，收集洗脱液，加碱中和，经脱盐处理，浓缩干燥得白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱。该方法克服了现有技术提取率低、有机溶剂用量大、工艺复杂、无法大生产等不足，可以高效率地从白屈菜、血水草或飞龙掌血提取液中分离高纯度的白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱。

Description

一种分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法

技术领域

本发明涉及一种中药有效成分的提取分离方法，特别是涉及一种从中药白屈菜、血水草或飞龙掌血提取液中提取分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，属中药领域。

背景技术

生物碱是自然界中广泛存在的一大类碱性含氮化合物，是许多中草药的有效成分，是自然界中存在的一类重要物质。研究表明，白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱是三者的主要抗癌活性部位。白屈菜为罂栗科植物白屈菜Chelidonium majus L.的全草，为民间常用中草药，性凉、味苦、有小毒，具有镇痛、止咳、平喘、消肿等功效。其主要成分为白屈菜碱(Chelidonine)、白屈菜红碱(Chelerythrine)、血根碱(Sanguinarine)、α-，β-，γ-高白屈菜碱(α-，β-，γ-homochelidonine)、普托品(Protopine)、小檗碱(Berberine)、黄连碱等，尚含白屈菜酸、胆碱、芸香甙等，临床主要用于胃痛、慢性支气管炎、百日咳等的治疗。血水草为罂粟科血水草(EomeconChionanthaHance)，又名水黄连，性苦寒、有小毒，具有清热解毒、活血止血等功效。血水草主要含白屈菜红碱(Chelery thrine)、血根碱(Sanguinarine)、原阿片碱(Protopine)、α-别隐品碱(α-allocyptopine)，临床报道有抗菌作用，对人的白细胞及多种哺乳动物细胞有抑制作用，能降低体内部分酶的活性，能抗各种实验性心律失常等，应用非常广泛。飞龙掌血系芸香科植物飞龙掌血Toddalia asiatica Lam.的根或叶，性微温、味甘苦，具散瘀止血、祛风除湿、消肿解毒等功效。飞龙掌血主要含白屈菜红碱(chelerythrine，toddaline)、二氢白屈菜红碱(dihydrochelerythrine，toddalinine)，临床主要用于子宫出血、风湿肿痛、肋间神经痛、跌打损伤、疮疖肿毒等的治疗。因此，白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱有效部位制剂临床需求量很大。

现阶段，中药生物碱的提取工艺已较成熟，根据生物碱的理化特性，采用适宜的溶剂如水、酸水、酸醇及碱醇等，利用浸渍、渗漉、煎煮、回流、超声、酶解等技术将生物碱类成分提取出来，提取率能达到90％以上。但由于生物碱在中药中的相对含量较低(多数含量为0.01％～1％)，提取时势必引入大量的其他药物成分和杂质类成分，要保证最后制剂的安全有效，必须对其进行精制纯化，制备成有效部位甚至有效成分来应用，因此生物碱有效部位的精制纯化技术就显得十分重要。但由于其他多种成分的并存以及淀粉、树胶、果胶、粘液质、色素等杂质的干扰，生物碱有效部位的精制技术一直是中药现代化的“瓶颈”，严重影响了现代中药制剂对三效(高效、速效、长效)、三小(剂量小、毒性小、副作用小)、五方便(生产、运输、携带、贮存、应用方便)的要求。

虽然在教科书及各种文献中多有提取分离中药总生物碱的方法，但这些方法仅停留于实验室的研究水平，多数是将含有生物碱的溶液过柱后，以氨液或NaOH溶液洗脱，收集洗脱液后再以有机溶剂萃取生物碱；或者将上过样品的树脂以碱液浸泡，然后再用有机溶剂回流提取生物碱。但这些方法具有步骤繁琐，有机溶剂用量大、大设备无法实现和生物碱转移率低等缺点，因而一直处于实验室研究水平，不能在大生产中应用。在中国专利申请CN03123447.X中也涉及了用离子交换树脂从中药白屈菜、血水草、飞龙掌血等药材中提取分离总生物碱的技术，方法为：将经常规方法得到的总生物碱以酸水溶解后，通过阳离子交换树脂吸附，水洗至中性，用氨水-乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，再经过酸碱转化氯仿萃取等步骤，最后制得白屈菜、血水草、飞龙掌血等药材总生物碱。这种方法虽然较其他常规的提取分离方法具有一定的进步，但仍存在严重缺陷：试验中可以发现该方法虽可以提高生物碱的纯度，但转移率仍然不高；碱性条件下游离的生物碱需要在乙醇溶液中才有较好的溶解度，但乙醇溶液的使用，会在洗脱液中带入树脂单体成分如苯乙烯、二乙烯苯等的残留，影响制剂安全；在通过树脂后得到的水液，又经过了两次酸碱转化、一次氯仿萃取，不仅步骤繁琐，而且使用了大量的氯仿，使生产成本大幅提高，并给环境卫生、试验操作以及最后制剂等带来了安全隐患；同时，由于工艺中使用了乙醇，还要求树脂前处理时必须增加乙醇处理步骤，后期还要回收乙醇，增加了工艺步骤，提高了生产成本。故为了适应市场及生产，需要一种安全、低成本、收率高的提取分离方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种安全、低成本、高效率的提取分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法。

该发明目的是通过如下工艺实现的：取白屈菜、血水草或飞龙掌血提取液，调整pH值1至7，滤过，取滤液加于阳离子交换树脂柱上，先以水洗脱除杂，再用0.5％～15％酸液洗脱，收集洗脱液，加碱中和，经脱盐处理，即得白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱。

在上述工艺过程中，将含有总生物碱的提取液调至合适的酸度后，生物碱电离成为阳离子，非碱性物质不被电离，提取液过阳离子交换树脂柱后，电离的生物碱有机离子与树脂柱上的氢离子交换而被牢固地吸附于树脂柱上。这里提取液的pH值不宜过高或过低，如果过高，提取液呈中性或碱性，生物碱不能电离，也就不能完成树脂上的交换过程；如果过低，提取液中的氢离子浓度太高，阻碍了树脂柱上的氢离子解离，同样不能很好地完成树脂交换过程，因而实验中发现调整提取液的pH值为1至7是比较合适的。以水洗脱时，使用的是去离子水，以确保不引入新的离子干扰，洗脱时那些没有被树脂吸附的非碱性物质就很容易被水洗脱下来，从而与被吸附在树脂柱上生物碱有机离子分离了。此后再加较高浓度的酸液进行洗脱，由于此时酸液中的氢离子浓度很高，就会竞争性地与树脂相结合，从而将吸附在树脂柱上的生物碱有机离子交换下来，溶解在酸洗脱液中，流出树脂柱，完成生物碱的富集过程。之后，在洗脱液中加入碱中和掉多余的酸，再经常规脱盐处理，即可得到纯度较高的白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱了。

该工艺过程与现有技术相比，工艺流程简单，不使用有机溶剂、无树脂单体成分残留、生物碱转移率高；其重要的贡献还在于，打破了传统理论认为的离子交换能力顺序规律，即：Ca²⁺＞K⁺≈NH₄ ⁺＞Na⁺＞H⁺。正是在这一传统理论的影响下，所有关于白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的离子交换树脂分离法中都是碱液或氨液进行洗脱，或者先用碱液中和树脂柱再用有机溶剂回流提取理论上已经游离的生物碱，而实际应用中的效果非常不理想且不适于大生产。在本发明的技术方案中，虽然氢离子的交换能力是最弱的，但通过提高酸洗脱液中氢离子的浓度，从而抵消了其交换能力弱的缺点，同时在酸性条件下，可以使交换下来的生物碱迅速溶解到酸液中，并被冲出柱子，由此保证了生物碱的洗脱效果。并且，以酸液进行洗脱，在洗脱的同时，也使阳离子交换树脂柱得以再生，从而可以循环使用，减少了碱液洗脱后再生树脂柱的过程，降低了成本。本发明的技术完全突破了现有技术中以碱液洗脱的传统观念和工艺过程，取得了意想不到的效果，极大的提高了白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的得率，使阳离子交换树脂在工业生产中用于精制分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱成为可能。

基于上述工艺过程，发明人又进行了进一步的研究，细化各步骤的参数，筛选出最优方案，具体内容如下：

1、上柱前调整药液的pH值范围优选为2至5，效果更加明显。

2、所用的阳离子交换树脂可以是大孔型或凝胶型强酸型离子交换树脂，在实际使用时可以根据情况处理成氢型、钠型或铵型中的任一种。

3、所用阳离子交换树脂柱的柱径与柱高之比并无一定之规，但考虑生产实际，柱径∶柱高＝1∶5～1∶10时可以取得最好的效果。

4、给树脂柱上样的药液浓度为每m1相当于生药0.1～3g，具体情况可以根据药液的前处理方式决定，如果是采用浸渍、渗漉等方式，得到的药液就会比较稀；而如果是回流提取、煎煮等方式，尤其是经过浓缩处理，药液的浓度就会比较大，但只要是在这个范围内，都能实现上样。同时，上样速度也根据药液的浓度进行适时调整，基本满足在0.5～5倍柱体积/小时即可。

5、上样方式一般选择为从柱上端上样，药液靠自流力而流过整个柱子；发明人发现，如果逆流上样，即将药液从柱子底端上样，通过一定的压力，使药液注满整个柱子，这种上样方式可以发挥柱子的最大交换效率，也避免了从上端上样时由于生物碱交换不完全而发生的提前穿透问题。这一点也是发明人创造性的发现。

6、洗脱所用的酸液优选为盐酸溶液或硫酸溶液，其浓度均优选为3％～6％。

7、洗脱时洗脱液的流速不宜过快或过慢，如果过快，则氢离子与生物碱有机离子的交换不充分，酸液浪费较多；如果过慢，则解离下来的生物碱有机离子可能又重新吸附回树脂柱上，影响洗脱效率。实验发现，洗脱速度保持在2～6倍柱体积/小时为宜。进一步优选，洗脱速度保持在4～6倍柱体积/小时最好。

8、发明人还发现，如果想更高地提高洗脱效率，可以在水洗脱除杂后，不立即进行酸液洗脱，而是先在树脂柱中充满酸液并静置2小时以上，一般不需超过12个小时，再进行洗脱。经过静置后，大量的生物碱有机离子已被氢离子交换下来，或者处于半吸附半解离的状态，此时进行洗脱，生物碱富集效果明显，洗脱效率明显提高。

9、为了进一步提高洗脱效率，还可以在洗脱用的酸液中加入少量NH₄Cl、NaCl或CaCl₂，加入量不宜过少或过多，如果过少，则起不到作用；如果过多，则因盐浓度过高易盐析而影响生物碱有机离子的溶解度。实验发现，洗脱液中以NH₄ ⁺、Na⁺或Ca²⁺浓度为0.1～1mol/L时为佳，进一步优选，NH₄ ⁺、Na⁺或Ca²⁺的浓度为0.1～0.3mol/L时最好。

10、工艺中所说的脱盐方法可以是透析法除盐、膜滤过除盐以及其他各种药物生物领域常规的除盐方法，目前这些方法都已经比较成熟，并可以管道化生产。

11、该方法中所说的白屈菜、血水草或飞龙掌血提取液可以通过浸渍、渗漉、超声、微波或煎煮中的任一种方式提取制得，并且提取的溶媒可以是水、酸水、乙醇溶液、酸性乙醇溶液中的任一种，但都属于目前中药领域的常规提取方法。区别点在于，如果是用浸渍或渗漉方法制得，可以直接上样；如果是用其他方法提取得到的，还要经过醇沉、过滤或离心除杂等步骤，以保证上样的顺利。

需要说明的是，上述优选的技术参数，可以根据实际情况的需要，与基本工艺进行任意组合，且均能取得良好的效果，解决技术问题，达到本发明的目的。

下面通过对比实验来说明本发明的优点，以白屈菜为例。

一、实验方案：

取白屈菜饮片1500g，加pH＝4的酸水煎煮2次，每次10倍量，煎煮2小时，合并煎煮液，离心，滤液稀释至3000ml并调节pH＝3，均分成三份，分别按以下步骤处理：

①根据现有技术，取上述提取液1000ml，上阳离子交换树脂(001×7，氢型，径高比1∶5)，以去离子水洗至注出液无色，再用氨性乙醇洗脱，洗脱速度为5倍柱体积/小时，至生物碱检查为阴性，收集洗脱液，调节pH值为9.0～9.5，分别以等量氯仿萃取两次，减压回收氯仿至原体积的1/2，再向氯仿液中加入等量酸水，调节pH值2.0～3.0，萃取两次，最后将水液调pH为9.0～9.5，静置过夜，再将生物碱沉淀加入3倍量的乙醇，加热至40～70℃，趁热以盐酸溶液调节pH4.0～5.0，冷却结晶，即得白屈菜总生物碱。

②根据本发明的技术，取上述提取液1000ml，上阳离子交换树脂(001×7，氢型，径高比1∶5)，以去离子水洗至注出液无色，再用3％盐酸溶液洗脱，洗脱速度为5倍柱体积/小时，收集洗脱液(至生物碱检查为阴性)，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得白屈菜总生物碱。

③根据本发明的技术，取上述提取液1000ml，上阳离子交换树脂(001×7，氢型，径高比1∶8)，逆流上样，以去离子水洗至注出液无色，加0.1mol/L的NaCl的3％盐酸溶液至全柱，静置2个小时，再用上述溶液以5倍柱体积/小时的速度洗脱，收集洗脱液(至生物碱检查为阴性)，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得白屈菜总生物碱。

二、结果计算：分别称量三种工艺所得白屈菜总生物碱的重量，并与药材量相除，得总生物碱的收率；以酸碱滴定法对三种方法所得总生物碱进行含量测定，计算总生物碱的纯度。

三、结果对比，见下表：

三种工艺的效果评价表

	工艺1	工艺2	工艺3
				收率	0.8％	1.2％	1.3％
纯度	72％	88％	89％
				成本	步骤多，乙醇、氯仿等有机溶剂用量大，成本高	不用有机溶剂，成本低	不用有机溶剂，且酸洗脱液的用量减少，成本更低
时间	周期长，需2天	周期短，仅需要8小时	周期短，仅需要7小时
				安全性	用气相色谱测得提取物中含有苯乙烯、二乙烯苯	无树脂单体残留物	无树脂单体残留物
复杂程度	需用乙醇预处理树脂柱，洗脱后还要再生树脂柱；洗脱时间长，效率低，洗脱液处理步骤繁琐，成本高	过程简单，只需正常预处理树脂柱，在酸洗脱的同时也再生了树脂柱	过程简单，只需正常预处理树脂柱，在酸洗脱的同时也再生了树脂柱

由以上对比结果可见，本发明的技术方案可以解决现有技术中的不足，并可显著地提高产品的质量、降低成本、提高安全性和生产可行性，本发明达到了发明目的。

具体实施方式

实施例1：

取白屈菜饮片1000g，加水煎煮2次，每次10倍量，煎煮2小时，合并煎煮液，离心，调节pH＝3，离心，上清液以4倍柱体积/小时通过阳离子交换树脂(001×7，氢型，径高比1∶8)，水洗至流出液无颜色，再用15％盐酸溶液洗脱，洗脱速度为2倍柱体积/小时，收集洗脱液，至生物碱检查为阴性(流出液滴加10％硅钨酸无沉淀)，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得白屈菜总生物碱。

实施例2：

取飞龙掌血饮片1000g，加pH＝5的酸水渗漉，合并渗漉液加水稀释至10000ml，离心，调节pH＝1，离心，上清液以5倍柱体积/小时通过阳离子交换树脂(Doulex 50，钠型，径高比1∶5)，水洗至流出液无颜色，再用5％盐酸溶液洗脱，洗脱速度为4倍柱体积/小时，洗脱2倍柱体积后浸泡5小时，再用5％盐酸溶液洗脱，收集酸洗脱液，至生物碱检查为阴性(流出液滴加10％硅钨酸无沉淀)，用氢氧化钙中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得飞龙掌血总生物碱。

实施例3：

取血水草饮片5kg，加70％乙醇超声提取两次，每次加5倍量，超声0.5小时，合并提取液，离心，回收乙醇，加水至5000ml，调节pH＝2，离心，上清液以2倍柱体积/小时通过上阳离子交换树脂(001×10，钠型，径高比1∶7)，水洗至流出液无颜色，再用1％盐酸溶液(含1％的氯化钠)洗脱，洗脱速度为5倍柱体积/小时，至生物碱检查为阴性(流出液滴加10％硅钨酸无沉淀)，收集这部分洗脱液，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得血水草总生物碱。

实施例4：

取白屈菜饮片10kg，加水煎煮2次，每次10倍量，煎煮2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.1(60℃)，加乙醇至浓度为70％，静置，上清液回收乙醇，加水至3000ml，调节pH＝4，离心，上清液以3倍柱体积/小时通过上阳离子交换树脂(AmberliteIR--120，氨型，径高比1∶9)，水洗至流出液无颜色，再用10％盐酸溶液洗脱，洗脱速度为6倍柱体积/小时，收集洗脱液，至生物碱检查为阴性(流出液滴加10％硅钨酸无沉淀)，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得白屈菜总生物碱。

实施例5：

取白屈菜饮片10kg，加水煎煮2次，每次10倍量，煎煮2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.1(60℃)，加乙醇至浓度为70％，静置，上清液回收乙醇，加水至5000ml，调节pH＝5，离心，上清液以3倍柱体积/小时通过上阳离子交换树脂(D001×4，氢型，径高比1∶10)，水洗至流出液无颜色，再用3％盐酸溶液洗脱，洗脱速度为3倍柱体积/小时，收集洗脱液，至生物碱检查为阴性(流出液滴加10％硅钨酸无沉淀)，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得白屈菜总生物碱。

实施例6：

取飞龙掌血饮片2000g，加pH＝3的盐酸溶液，微波提取2次，每次加5倍体积微波提取0.5小时，滤过，滤液加水稀释至1600ml，调节pH＝6，离心，上清液以2倍柱体积/小时通过上阳离子交换树脂(Doulex 50，氢型，径高比1∶6)，水洗至流出液无颜色，再用2％盐酸溶液(含0.2mol/L的氯化氨)洗脱，洗脱速度为5倍柱体积/小时，收集洗脱液，至生物碱检查为阴性(流出液滴加10％硅钨酸无沉淀)，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得飞龙掌血总生物碱。

实施例7：

取血水草饮片10kg，加水煎煮2次，每次10倍量，煎煮2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.1(60℃)，加乙醇至浓度为70％，静置，上清液回收乙醇，加水至4000ml，调节pH＝4，离心，上清液以0.5倍柱体积/小时通过上阳离子交换树脂(AmberliteIR--120，氢型，径高比1∶6)，水洗至流出液无颜色，再用0.5％硫酸溶液(含1mol/L的氯化钠)洗脱，洗脱速度为5倍柱体积/小时，收集洗脱液，至生物碱检查为阴性(流出液滴加10％硅钨酸无沉淀)，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得血水草总生物碱。

实施例8：

取白屈菜饮片10kg，加水煎煮2次，每次10倍量，煎煮2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.1(60℃)，加乙醇至浓度为70％，静置，上清液回收乙醇，加水至10000ml，调节pH＝3，离心，上清液以3倍柱体积/小时通过上阳离子交换树脂(001×5，氢型，径高比1∶8)，水洗至流出液无颜色，再用2％盐酸溶液(含0.3mol/L的氯化钙)洗脱，洗脱速度为6倍柱体积/小时，收集洗脱液，至生物碱检查为阴性(流出液滴加10％硅钨酸无沉淀)，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得白屈菜总生物碱。

实施例9：

取血水草饮片1000g，加水煎煮2次，每次10倍量，煎煮2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.1(60℃)，加乙醇至浓度为70％，静置，上清液回收乙醇，加水至1000ml，调节pH＝3，离心，上清液以3倍柱体积/小时通过上阳离子交换树脂(Doulex 50，氢型，径高比1∶8)，水洗至流出液无颜色，再用4％硫酸溶液洗脱，洗脱速度为4倍柱体积/小时，收集洗脱液，至生物碱检查为阴性(流出液滴加10％硅钨酸无沉淀)，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得血水草总生物碱。

Claims (13)

1、一种从中药白屈菜、血水草或飞龙掌血提取液中分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，其特征在于该方法为：取白屈菜、血水草或飞龙掌血提取液，调整pH值1至7，滤过，取滤液加于阳离子交换树脂柱上，先以水洗脱除杂，再用0.5％～15％酸液洗脱，收集洗脱液，加碱中和，经脱盐处理，即得白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱。

2、如权利要求1所述的分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，其特征在于上柱前调整药液的pH值范围为2至5。

3、如权利要求1所述的分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，其特征在于所用阳离子交换树脂可以是大孔型或凝胶型强酸性离子交换树脂。

4、如权利要求3所述的分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，其特征在于所用阳离子交换树脂柱的柱径∶柱高＝1∶5～1∶10。

5、如权利要求1所述的分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，其特征在于该方法中上样药液的浓度为每ml相当于生药0.1～3g，上样速度为0.5～5倍柱体积/小时。

6、如权利要求5所述的分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，其特征在于上样方式优选为逆流上样。

7、如权利要求1所述的分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，其特征在于该方法中洗脱用的酸液是3％～6％的盐酸溶液或3％～6％的硫酸溶液。

8、如权利要求7所述的分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，其特征在于洗脱速度为2～6倍柱体积/小时。

9、如权利要求8所述的分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，其特征在于洗脱速度为4～6倍柱体积/小时。

10、如权利要求1所述的分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，其特征在于在水洗脱除杂后，可以先在树脂柱中充满洗脱用酸液并静置2～12个小时，再进行洗脱。

11、如权利要求7所述的分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，其特征在于洗脱用的酸液中还可以加入0.1～1mol/L的NH₄Cl、NaCl或CaCl₂。

12、如权利要求11所述的分离白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱的方法，其特征在于酸液中盐的浓度优选为0.1～0.3mol/L。

13、权利要求1-12中任何一项所述的方法制备的白屈菜、血水草或飞龙掌血总生物碱。