CN101444483B - 一种含化疗增效剂的抗实体肿瘤缓释剂 - Google Patents

Abstract

一种含化疗药物及其增效剂的抗实体肿瘤缓释剂为缓释注射剂，由缓释微球和溶媒组成。其中缓释微球包括抗癌有效成分和缓释辅料，抗癌有效成分为化疗增效剂和选自抗肿瘤抗生素和/或抗代谢类药物的抗癌药物的组合，溶媒为含助悬剂的特殊溶媒；化疗增效剂选自雷帕霉素；缓释辅料选自聚乳酸共聚物、单甲基聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸、乙醇酸共聚物、脂肪酸与癸二酸共聚物等；助悬剂的黏度为80cp-3000cp(20℃-30℃时)，选自羧甲基纤维素等；缓释微球还可制成缓释植入剂，肿瘤内或瘤周注射或放置该缓释剂，能于局部释药达约30-50天左右。缓释剂单独应用能有效抑制肿瘤生长，促进药物瘤内扩散，与化疗和/或放疗等非手术疗法联合应用还可显著增强其疗效。

Description

一种含化疗增效剂的抗实体肿瘤缓释剂

(一)技术领域

本发明涉及一种抗实体肿瘤缓释剂，属于药物技术领域。具体而言，本发明提供一种含化疗增效剂的缓释注射剂和缓释植入剂。该抗癌缓释剂中的化疗增效剂可有效地抑制或破坏实体肿瘤间质及肿瘤血管，不仅能抑制肿瘤的新生血管，有效降低肿瘤内的张力、间质压力、间质粘性，进而提高其间质液导率，有利于药物进入实体肿瘤以及在肿瘤内的有效扩散，还可增加肿瘤对化疗药物的敏感性。

(二)背景技术

癌症的治疗主要包括手术、放疗及化疗等方法。其中手术治疗不能清除散在的瘤细胞，因此常复发或导致肿瘤细胞因手术刺激而扩散转移；放疗和传统的化疗不具选择性，难于肿瘤局部形成有效药物浓度或治疗剂量，效果差，毒性大，单纯提高药物或放射剂量又受到全身毒性反应的限制。参见孔等“瘤内放置顺铂加系统卡莫司汀治疗大鼠脑肿瘤”《外科肿瘤杂志》69期76-82页，1998年(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2)：76-82)。

低剂量的抗癌药物治疗不仅能够增加癌细胞的药物耐受性，而且还可促进其浸润性生长”，参见梁等“抗癌药物脉冲筛选后增加了人肺癌细胞的药物耐受性及体外浸润能力并伴有基因表达的改变”《国际癌症杂志》111期484-93页，2004年(Liang Y，et al.，Int JCancer.2004；111(4)：484-93)。

抗肿瘤药物局部放置能够较好地克服以上缺陷，不仅能够明显提高肿瘤局部的药物浓度，而且可以显著降低全身毒性反应。大量体内外试验已显示出对实体肿瘤的治疗效果，参见孔庆忠等“瘤内放置顺铂加系统卡莫司汀治疗大鼠脑肿瘤”《外科肿瘤杂志》69期76-82页，1998年(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2)：76-82)和孔庆忠等“瘤内放置顺铂治愈大鼠原发脑肿瘤”《外科肿瘤杂志》64期268-273页(1997年)(Kong Q et al.，JSurg Oncol.1997 Oct；64：268-273)。还可参见中国专利(ZL00111093.4；ZL96115937.5；申请号001111264，001111272)及美国发明专利(专利号6,376,525B1；5,651,986；5,626,862)。

然而，实体肿瘤由肿瘤细胞和肿瘤间质组成，其中肿瘤间质中的血管不仅为肿瘤细胞的生长提供了支架及必不可少的营养物质，还影响了化疗药物在肿瘤周围及肿瘤组织内的渗透和扩散，参见尼提等“细胞外间质的状况对实体肿瘤内药物运转的影响”《癌症研究》60期2497-503页，2000年(Netti PA，Cancer Res.2000，60(9)：2497-503)。

肿瘤间质中的血管及结缔组织中的纤维蛋白及胶原蛋白等成分与过度增生的肿瘤细胞导致实体肿瘤的间质压力(interstitial pressure)高、间质粘性(interstitialviscosity)大、组织张力系数(tissue tensile modulus)大、间质液导率(hydraulicconductance)低。以上诸因素大大限制了药物进入实体肿瘤以及在肿瘤内的有效扩散，因此构成肿瘤化疗的主要障碍。

不仅如此，肿瘤间质中的血管对常规化疗药物并不敏感，常导致肿瘤细胞对抗癌药物，特别是单药物化疗的耐受性的增强，其结果是治疗失败。

(三)发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种新的药物组合物，含化疗增效剂和抗癌药物。更具体而言，是抗实体肿瘤的缓释剂，主要为缓释植入剂和缓释注射剂。该抗癌缓释剂中的化疗增效剂可有效地抑制或破坏实体肿瘤间质及肿瘤血管，不仅能抑制肿瘤的新生血管，有效降低肿瘤内的张力、间质压力、间质粘性，进而提高其间质液导率，有利于药物进入实体肿瘤以及在肿瘤内的有效扩散，还可增加肿瘤对化疗药物的敏感性。

将化疗增效剂和抗癌药物制成缓释剂(主要为缓释注射剂和缓释植入剂)不仅能够极大地提高肿瘤局部的药物浓度、降低药物在循环系统中的药物浓度、降低药物对正常组织的毒性，还能够极大方便药物注射、减少手术操作的并发症、降低病人的费用。化疗增效剂除能抑制肿瘤生长外，还能增加肿瘤细胞对抗癌药物的敏感性。以上意外发现构成本发明的主要内容。

本发明抗实体肿瘤缓释剂包括抗癌有效成分和药用辅料，抗癌有效成分选自抗肿瘤抗生素和/或抗代谢类药物的抗癌药物和化疗增效剂。化疗增效剂为雷帕霉素，除具有抑制肿瘤细胞生长的作用外，可有效地抑制或破坏肿瘤的血管并能抑制肿瘤的新生血管的形成，进而不仅使肿瘤细胞失去生长所需的支架及营养物质的来源，还可明显促进化疗药物进入肿瘤及在肿瘤周围及肿瘤组织内的渗透和扩散

以上意外发现构成本发明的主要内容。

本发明的复方药物组合物可制成任意制剂形式，如，但不限于，胶囊、缓释剂、颗粒剂、丸剂、片剂、散剂、注射剂、软膏、贴剂、植入剂、缓释剂植入剂、缓释剂注射剂等。其中以缓释剂为优选，以缓释剂植入剂和缓释剂注射剂为最优选。

本发明针对现有技术的不足，提供一种新的含化疗增效剂和抗癌药物的缓释注射剂。

本发明化疗增效剂缓释注射剂，由缓释微球和溶媒组成。具体而言，该抗癌缓释注射剂由以下成分组成：

(A)缓释微球，包括：

抗癌有效成分    0.01-60％

缓释辅料        40-99.99％

助悬剂          0.0-30％

以上为重量百分比

和

(B)溶媒，为普通溶媒或含助悬剂的特殊溶媒。

溶媒，分为普通溶媒和特殊溶媒。

抗癌有效成分为化疗增效剂与抗肿瘤抗生素和/或抗代谢类药物的组合。

化疗增效剂、抗肿瘤抗生素和/或抗代谢类药物制成的药物主要经口服或静脉注射等常规途径给药。本发明的给药方式为局部缓释给药，在显著增强药物的治疗效果的同时明显降低其全身的毒性作用。就具有抗癌活性的化疗增效剂和抗癌药物而言，并非所有缓释辅料均可达到有效释放的缓释效果。药用辅料有数百种以上，具有缓释作用的药用辅料，特别是能将本发明中所选的化疗增效剂在人体或动物体内于一定的时间内缓慢释放的药用辅料必须经过大量创造性的实验才能获得，特定的缓释辅料与可被缓释药物的组合物的选择及其配比需要经过大量的创造性劳动才能确定。释放过慢不足以获得有效药物浓度，因而不能有效杀死肿瘤细胞；若释放过快会造成突释，则容易像常规注射一样引起全身毒性反应。相关数据，特别是动物体内释放特性的数据需要经过体内外大量创造性的实验才能获得，并非经过有限的实验就能确定，具有非显而易见性。

化疗增效剂主要选自雷帕霉素及其衍生物。雷帕霉素还包括它们的盐，如，但不限于，硫酸盐、磷酸盐、盐酸盐、乳糖酸盐、醋酸盐、天冬酸盐、硝酸盐、枸橼酸盐、嘌呤或嘧啶盐、琥珀酸盐及马来酸盐等。

上述雷帕霉素在缓释剂中所占的比例因具体情况而定，可为0.001％-50％，以0.01％-20％为佳，0.1％-10％为最佳。

抗肿瘤抗生素主要选自埃坡霉素(epothilone)、埃坡霉素B、盐酸阿霉素(adriamycin)、三铁阿霉素、表阿霉素(epiadriamycin)、7-O-甲基诺加-4’-表阿霉素(7-o-methylnogallol-4’-epiadriamycin)、二乙氧醋酰阿霉素、丝裂霉素(Mitomycin)、丝裂霉素C(mitomycin C)、丝林霉素、放线菌素D(Dactinomycin)、放线菌素C、环孢菌素A。其中以埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D、更生霉素为优选。以上抗肿瘤抗生素药物还包括其盐，如，但不限于，硫酸盐、磷酸盐、盐酸盐、乳糖酸盐、醋酸盐、天冬酸盐、硝酸盐、枸橼酸盐、嘌呤或嘧啶盐、琥珀酸盐或马来酸盐。

上述抗癌抗生素在缓释注射剂中所占的比例因具体情况而定，可为0.1％-50％，以1％-40％为佳，2％-30％为最佳。

抗代谢类药物可以分别在不同环节阻止DNA的合成，抑制细胞分裂增殖，通过影响细胞周期和DNA合成而发挥作用。

抗代谢类药物选自下列之一或组合：氟脲苷(fluridine)、脱氧氟尿苷(Doxifloridine，氟铁龙)、5-脱氧氟尿苷、丙硫氧嘧啶、氟尿嘧啶(Fluoracil，5-FU)、丁基氟尿嘧啶、双喃氟啶、5-氟嘧啶醇、磺巯嘌呤钠、巯嘌呤(Mercaptopurine，乐疾宁、6-MP)、巯咪嘌呤、6-巯基嘌呤、6-氨基嘌呤盐酸盐、甘氨硫嘌呤、硫鸟嘌呤(thioguanine，6-TG)、甲氨蝶呤(methotrexate，MTX)，氟甲氨蝶呤、二氧甲氨蝶呤、叶酸、10-乙基去氮氨蝶呤(氨基扑发宁)、氟甲氨蝶呤、二氧甲氨蝶呤、5，10-双去氮四氢叶酸、甲满蝶呤、卡莫氟(Carmofur)、替加氟(Tegafur，喃氟啶、FT-207)、优福定(Tegafur-Uracil，UFT)、尿嘧啶替加氟、8-氮鸟嘌呤(8-azaguanine)、尿嘧啶、巯甲脲嘧啶、左亚叶酸钙、亚叶酸钙(Calcium Levofolinate、甲酰四氢叶酸钙)、托泊替康、盐酸拓扑替康、阿糖胞苷(cytosine arabinoside、Cytarabine(Ara-C))、环胞苷(cyclotidine，Cyclocytidine)、环胞苷(cyclotidine，Cyclocytidine)、羟基脲(Hydroxycarbamide，hydroxyurea)、羟基胍。

以上抗代谢药物中以氟脲苷、脱氧氟尿苷、5-脱氧氟尿苷、丙硫氧嘧啶、氟尿嘧啶、丁基氟尿嘧啶、双喃氟啶、5-氟嘧啶醇、磺巯嘌呤钠、巯嘌呤、巯咪嘌呤、6-巯基嘌呤、6-氨基嘌呤盐酸盐、甘氨硫嘌呤、硫鸟嘌呤、甲氨蝶呤，氟甲氨蝶呤、二氧甲氨蝶呤、10-乙基去氮氨蝶呤、二氧甲氨蝶呤、甲满蝶呤、叶酸、5，10-双去氮四氢叶酸、左亚叶酸钙、亚叶酸钙、卡莫氟、替加氟、优福定、尿嘧啶替加氟、8-氮鸟嘌呤、尿嘧啶、巯甲脲嘧啶、托泊替康、盐酸拓扑替康、阿糖胞苷、环胞苷、羟基脲、羟基胍为优选。

上述抗代谢类药物在缓释注射剂中的重量百分比为0.1％-50％，以1％-40％为佳，2％-30％为最佳。

缓释辅料粘度范围IV(dl/g)为0.1～0.8，选自外消旋聚乳酸(D，L-PLA)、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物(D，L-PLGA)、单甲基聚乙二醇/聚乳酸(MPEG-PLA)、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物(MPEG-PLGA)、聚乙二醇/聚乳酸(PLA-PEG-PLA)、聚乙二醇/聚乳酸共聚物(PLGA-PEG-PLGA)、端羧基聚乳酸(PLA-COOH)、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA-COOH)、聚苯丙生、双脂肪酸与癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚体-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富马酸-癸二酸)[P(FA-SA)]、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)、聚对二氧环己酮(PDO)、聚三亚甲基碳酸酯(PTMC)、木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、透明质酸、胶原蛋白、明胶、壳聚糖、泊洛沙姆、蛋白胶之一或其组合；助悬剂选自羧甲基纤维素钠、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物质、土温20、土温40和土温80之一或其组合。

当药物缓释微球中的抗癌有效成分仅为化疗增效剂或抗癌药物时，抗癌缓释注射剂主要用于增加其它途径应用的化疗增效剂或抗癌药物的作用效果，或用于对放疗或其它疗法的增效。当药物缓释微球中的抗癌药物仅为化疗增效剂或抗癌药物时，抗癌缓释注射剂的应用及增效方式为：

(1)含化疗增效剂的缓释注射剂局部注射，而抗癌药物经其他途径应用；

(2)局部注射含抗癌药物的缓释注射剂，其他途径应用化疗增效剂；

(3)局部注射含化疗增效剂的缓释注射剂与含抗癌药物的缓释注射剂；或

(4)局部注射含化疗增效剂和抗癌药物的缓释注射剂。

局部应用的抗癌缓释注射剂还用于对放疗或其它疗法的增效。其他途径指，但，不限于，动脉、静脉、腹腔、皮下、腔内给药。

抗癌有效成分化疗增效剂和/或抗癌药物在药物缓释微球中的重量百分比为0.1％-50％，以1％-40％为佳，2％-30％为最佳。化疗增效剂与抗癌药物的重量比为1-99∶1到1∶1-19，以1-19∶1到1∶1-19为优选。

本发明抗癌药物组合物中抗癌有效成分为一种或数种化疗增效剂和/或一种或数种抗癌药的组合，抗癌有效成分优选组合如下：

(1)0.01％-20％的雷帕霉素与1-40％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D或更生霉素的组合；或

(2)0.01％-20％的雷帕霉素与1-40％的氟尿嘧啶(5-FU)、巯嘌呤、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤、叶酸、左亚叶酸钙、亚叶酸钙、卡莫氟、替加氟、优福定、尿嘧啶替加氟、托泊替康、阿糖胞苷、环胞苷或羟基脲的组合。

本发明的缓释辅料是可经酶、酸碱或组织液水解或降解的，包括下列之一或其组合：

(1)生物相容性多聚物，包括生物可降解的或生物不可降解的多聚物及其混合物或共聚物；

(2)水溶性低分子化合物；或/和

(3)用于实现针剂和缓释剂等药物剂型的合适的添加剂及赋型剂。

缓释辅料可为各种水溶性或非水溶性高分子多聚物，缓释辅料选自外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、单甲基聚乙二醇/聚乳酸、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚苯丙生、双脂肪酸与癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚体-癸二酸)、聚(富马酸-癸二酸)、聚乳酸、聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物、木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、透明质酸、胶原蛋白、明胶、壳聚糖、泊洛沙姆和蛋白胶之一或其组合。

本发明缓释微球中缓释辅料及其重量百分比最优选如下：

(1)50-99％的PLA或PLGA或PLA与PLGA的共聚物或混合物；

(2)50-99％的聚乙二醇与PLA或PLGA的共聚物；

(3)50-99％的聚苯丙生；

(4)55-99％的双脂肪酸与癸二酸共聚物；

(5)30-60％的聚苯丙生和30-60％的PLA或30-60％的PLGA；

(6)40-95％的木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、透明质酸、胶原蛋白、明胶、壳聚糖、泊洛沙姆或白蛋胶；或

(7)40-95％的外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、单甲基聚乙二醇/聚乳酸、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。

在各种高分子聚合物中，以聚乳酸、癸二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物为首选，混合物和共聚物可选自，但不限于，PLA、PLGA、乙醇酸和羟基羧酸的混合物、葵二酸与芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羟基羧酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和羟基羧酸共聚时的含量分别为重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是聚苯丙生[聚(1，3-二(对羧基苯氧基)丙烷-癸二酸)(p(CPP-SA))、双脂肪酸-癸二酸共聚物(PFAD-SA)]、聚(芥酸二聚体-癸二酸)[P(EAD-SA)]和聚(富马酸-癸二酸)[P(FA-SA)]等。对羧苯氧基丙烷(p-CPP)与癸二酸共聚时的含量分别为重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。

聚乳酸的分子量峰值可为，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000为优选，以5,000-30,000为最优选；聚乙醇酸的分子量可为，但不限于，5000-100,000，但以5,000-50,000为优选，以10,000-30,000为最优选；以上聚羟基酸可单选或多选。当单选时，以聚乳酸(PLA)或羟基羧酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)为优选，共聚物的分子量可为，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000为优选，以30,000-50,000为最优选；当多选时，以高分子多聚物或不同高分子多聚物组成的复合多聚物或共聚物为优选，以含不同分子量聚乳酸或癸二酸的复合多聚物或共聚物为最优选，如，但不限于，分子量为1000到30000的聚乳酸与分子量为20000到50000的聚乳酸混合、分子量为10000到30000的聚乳酸与分子量为30000到80000的PLGA混合、分子量为20000到30000的聚乳酸与癸二酸混合、分子量为30000到80000的PLGA与癸二酸混合。所用聚乳酸以左旋聚乳酸(L-PLA)为优选。左旋聚乳酸(L-PLA)粘度范围IV(dl/g)为0.2～0.8，玻璃化转变温度范围为55～65℃，熔点175～185℃。

除上述缓释辅料外，还可选用其他物质见美国专利(专利号4757128；4857311；4888176；4789724)及《药用辅料大全》(第123页，四川科学技术出版社1993年出版，罗明生和高天惠主编)中已有详细描述。另外，中国专利(申请号96115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美国发明专利(专利号5,651,986)也列举了某些药用辅料，包括充填剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂、制(或致)孔剂、赋型剂或阻滞剂等。

为调节药物释放速度或改变本发明的其它特性，可以改变聚合物的单体成分或分子量、添加或调节药用辅料的组成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各种糖或盐等。其中糖可为，但不限于，木糖醇、低聚糖、(硫酸)软骨素及甲壳素等，其中盐可为，但不限于，钾盐和钠盐等；也可添加其它药用辅料，如但不限于，充填剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂、制(或致)孔剂、赋型剂或阻滞剂等

缓释注射剂中，药物缓释系统可制成微球、亚微球、微乳、纳米球、颗粒或球形小丸，然后与注射溶媒混合后制成注射剂使用。在各种缓释注射剂中以混悬型缓释注射剂为优选，混悬型缓释注射剂是将含抗癌成分的药物缓释系统悬浮于注射液中所得的制剂，所用的缓释辅料为上述缓释辅料中的一种或其组合，所用溶媒为普通溶媒或含助悬剂的特殊溶媒。普通溶媒为，但不限于，蒸馏水、注射用水、生理冲液、无水乙醇或各种盐配制的缓冲液。助悬剂的目的在于有效悬浮含药微球，从而利于注射之用。为方便注射，助悬剂的黏度为100cp-3000cp(20℃-30℃时)，优选1000cp-3000cp(20℃-30℃时)，最优选1500cp-3000cp(20℃-30℃时)。助悬剂选自羧甲基纤维素钠、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物质、土温20、土温40和土温80之一或其组合。

助悬剂在普通溶媒中的含量因其的特性而定，可为0.1-30％因具体情况而定。优选助悬剂的组成为：

A)0.5-5％羧甲基纤维素钠+0.1-0.5％土温80；或

B)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土温80；或

C)0.5-5％羧甲基纤维素钠+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土温80。

溶媒的制备则取决于溶媒的种类，普通溶媒有市售，也可以自制，如蒸馏水、注射用水、生理冲液、无水乙醇或各种盐配制的缓冲液，但必须严格按照有关标准。特殊溶媒需考虑到助悬剂的种类及其组成、溶媒所悬浮的药物、缓释微球(或微囊)的组成、性质及其需要量及注射剂的制备方法，如将羧甲基纤维素钠(1.5％)+甘露醇和/或山梨醇(15％)和/或吐温80(0.1％)溶于生理盐水中得相应的溶媒，黏度在10cp-650cp(20℃-30℃时)。

本发明发现影响药物和/或缓释微球悬浮和/或注射的关键因素是溶媒的黏度，黏度越大，悬浮效果越好，可注射性越强。这种意外发现构成了本发明的主要指数特征之一。溶媒的黏度取决于助悬剂的黏度，助悬剂的黏度为100cp-3000cp(20℃-30℃时)，优选1000cp-3000cp(20℃-30℃时)，最优选1500cp-3000cp(20℃-30℃时)。按照此条件所制得的溶媒的黏度为10cp-650cp(20℃-30℃时)，优选20cp-650cp(20℃-30℃时)，最优选60cp-650cp(20℃-30℃时)。

注射剂的制备有多种方法，一种是将助悬剂为“0”的缓释微粒(A)直接混于特殊溶媒中，得到相应的缓释微粒注射剂；另一种是将助悬剂不为“0”的缓释微粒(A)混于特殊溶媒或普通溶媒中，得到相应的缓释微粒注射剂；再一种是将缓释微粒(A)混于普通溶媒中，然后加入助悬剂混匀，得到相应的缓释微粒注射剂。除外，还可先将缓释微粒(A)混于特殊溶媒中制得相应的混悬液，然后用真空干燥等办法去除混悬液中的水分，之后再用特殊溶媒或普通溶媒混悬，得到相应的缓释微粒注射剂。以上方法只是用于说明而非限制本发明。值得注意的是，悬浮药物或缓释微球(或微囊)在注射剂中的浓度因具体需要而定，可为，但不限于，10-400mg/ml，但以30-300mg/ml为优选，以50-200mg/ml最优选。注射剂的黏度为50cp-1000cp(20℃-30℃时)，优选100cp-1000cp(20℃-30℃时)，最优选200cp-650cp(20℃-30℃时)。此黏度适用于18-22号注射针头和特制的内径更大的(至3毫米)注射针头。

缓释注射剂的制备方法是任意的，可用若干种方法制备：如，但不限于，混合法、熔融法、溶解法、喷雾干燥法制备微球、溶解法结合冷冻(干燥)粉碎法制成微粉、脂质体包药法及乳化法等。其中以溶解法(即溶剂挥发法)、干燥法、喷雾干燥法和乳化法为优选。微球则可用于制备上述各种缓释注射剂，其方法是任意的。所用微球的粒径范围可在5-400um之间，以10-300um之间为优选，以20-200um之间为最优选。

微球还可用于制备其他缓释注射剂，如凝胶注射剂、嵌段共聚物胶束注射剂。其中，嵌段共聚物胶束由疏水亲水嵌段共聚物在水溶液中形成，具有球形内核外壳结构，疏水嵌段形成内核，亲水嵌段形成外壳。载药胶束注射进入体内达到控制药物释放或靶向治疗的目的。所用药物载体为上述任意一种或其组合。其中优选分子量为1000-15000的聚乙二醇(PEG)作为胶束共聚物的亲水嵌段，优选生物降解聚合物(如PLA、聚丙交酯、聚己内酯及其共聚物(分子量1500-25000))作为胶束共聚物的疏水嵌段。嵌段共聚物胶束的粒径范围可在10-300um之间，以20-200um之间的为优选。凝胶注射剂系将生物降解聚合物(如PLA、PLGA或DL-LA和ε-己内酯共聚物)溶于某些两亲性溶媒，再加入药物与之混溶(或混悬)后形成流动性较好的凝胶，可经瘤周或瘤内注射。一旦注入，两亲性溶媒很快扩散至体液，而体液中的水分则渗入凝胶，使聚合物固化，缓慢释放药物。

缓释微球还可用于制备缓释植入剂，所用的药用辅料可为上述药用辅料中的任何一种或多种物质，但以水溶性高分子聚合物为主选，在各种高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物为首选，混合物和共聚物可选自，但不限于，PLA、PLGA、PLA与PLGA的混合物、葵二酸与芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物、双脂肪酸与癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚体-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富马酸-癸二酸)[P(FA-SA)]。聚乳酸(PLA)与聚乙醇酸的的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和乳酸共聚时的含量分别为重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是对羧苯基丙烷(p-CPP)，对羧苯基丙烷(p-CPP)与葵二酸共聚时的含量分别为重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。

本发明抗癌药物缓释剂的又一种形式是抗癌药物缓释剂为缓释植入剂。抗癌植入剂的有效成分可均匀地包装于整个药用辅料中，也可包装于载体支持物中心或其表面；可通过直接扩散和/或经多聚物降解的方式将有效成分释放。

缓释植入剂的特点在于所用的缓释辅料除高分子聚合物外，还含有上述任意一种或多种其它辅料。添加的药用辅料统称为添加剂。添加剂可根据其功能分为充填剂、致孔剂、赋型剂、分散剂、等渗剂、保存剂、阻滞剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂等。

缓释植入剂的主要成份可制成多种剂型。如，但不限于，胶囊、缓释剂、植入剂、缓释剂植入剂等；呈多种形状，如，但不限于，颗粒剂、丸剂、片剂、散剂、球形、块状、针状、棒状、柱状及膜状。在各种剂型中，以体内缓慢释放植入剂为优选。可为0.1-5mm(粗)×1-10mm(长)的棒状，也可为片状等其它形状。

缓释植入剂的最佳剂型为生物相容性、可降解吸收的缓释剂植入，可因不同临床需要而制成各种形状及各种剂型。其主要成份的包装方法和步骤在美国专利中(US5651986)已有详细描述，包括若干种制备缓释制剂的方法：如，但不限于，(i)把载体支持物粉末与药物混合然后压制成植入剂，即所谓的混合法；(ii)把载体支持物熔化，与待包装的药物相混合，然后固体冷却，即所谓的熔融法；(iii)把载体支持物溶解于溶剂中，把待包装的药物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸发溶剂，干燥，即所谓的溶解法；(iv)喷雾干燥法；及(v)冷冻干燥法等。所用的有机溶剂为公知的，可为，但不限于，无水乙醇、丙酮、氯仿、二氯甲烷。

缓释植入剂的抗癌有效成分为雷帕霉素与上述的抗癌药物的组合，但优选如下，均为重量百分比：

(1)0.01％-20％的雷帕霉素与1-40％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D或更生霉素的组合；或

(2)0.01％-20％的雷帕霉素与1-40％的氟尿嘧啶(5-FU)、巯嘌呤、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤、叶酸、左亚叶酸钙、亚叶酸钙、卡莫氟、替加氟、优福定、尿嘧啶替加氟、托泊替康、阿糖胞苷、环胞苷或羟基脲的组合。

缓释微球还可用于制备缓释植入剂，所用的缓释辅料可为上述药用辅料中的任何一种或多种物质，在各种高分子聚合物中以水溶性高分子聚合物为主选。

本发明缓释植入剂中缓释辅料及其重量百分比最优选如下：

(1)50-99％的PLA或PLGA或PLA与PLGA的共聚物或混合物；

(2)50-99％的聚乙二醇与PLA或PLGA的共聚物；

(3)50-99％的聚苯丙生；

(4)55-99％的双脂肪酸与癸二酸共聚物；

(5)30-60％的聚苯丙生和30-60％的PLA或30-60％的PLGA；

(6)40-95％的木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、透明质酸、胶原蛋白、明胶、壳聚糖、泊洛沙姆或白蛋胶；或

(7)40-95％的外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、单甲基聚乙二醇/聚乳酸、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。

给药途径取决于多种因素，为于原发或转移肿瘤所在部位获得有效浓度，药物可经多种途径给予，如皮下、腔内(如腹腔、胸腔及椎管内)、瘤内、瘤周注射或放置、选择性动脉注射、淋巴结内及骨髓内注射。以选择性动脉注射、腔内、瘤内、瘤周注射或放置为优选。

缓释植入剂的应用及增效方式同抗癌缓释注射剂，即局部放置的化疗增效剂与其它途径给药的抗癌药物的联合、局部放置的抗癌药物与其它途径给药的化疗增效剂的联合、局部放置的抗癌药物与局部放置的化疗增效剂的联合。其中局部应用的抗癌药物与化疗增效剂可单独或联合生产、包装、销售、使用。包装指药物对辅料而言的载药过程以及含药缓释剂对运输和/或储存而言的内外包装。载药过程包括，但不限于，称量、溶解、混合、干燥、成形、包衣、喷雾、制粒等。

本发明可以用于制备治疗人及动物的各种肿瘤的药物制剂，主要为缓释注射剂或缓释植入剂，所指肿瘤包括起源于大脑、中枢神经系统、肾脏、肝、胆囊、头颈部、口腔、甲状腺、皮肤、黏膜、腺体、血管、骨组织、淋巴结、肺脏、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宫、卵巢、子宫内膜、子宫颈、前列腺、膀胱、结肠、直肠的原发或转移的癌或肉瘤或癌肉瘤。

本发明所制的缓释注射剂或缓释植入剂中还可加入其它药用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼药、抗凝药、止血药等。

通过如下试验和实施例对本发明抗实体肿瘤组合物的技术作进一步的描述：

试验一、化疗增效剂(雷帕霉素)及抗癌药物的体内抑瘤作用。

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个结肠癌肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表1)。第一组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为化疗增效剂，第3到6组分别为阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D。第7到10组分别为化疗增效剂与阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D的联合。除化疗增效剂经瘤内放置外，阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D均为腹腔给药。除化疗增效剂为0.5mg/kg外均为15mg/kg。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表1)。

表1

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm3)	P值
				1(6)	对照	58±12
2(6)	化疗增效剂	44±10	＜0.05
				3(6)	阿霉素	32±8	＜0.05
4(6)	表阿霉素	46±10	＜0.05
				5(6)	丝裂霉素C	44±10	＜0.01
6(6)	放线菌素D	38±6	＜0.01
				7(6)	化疗增效剂+阿霉素	18±4	＜0.001
8(6)	化疗增效剂+表阿霉素	24±6	＜0.001
				9(6)	化疗增效剂+丝裂霉素C	28±4	＜0.001
10(6)	化疗增效剂+放线菌素D	26±4	＜0.001

注：阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D均为抗癌抗生素。结果表明，与对照组相比，化疗增效剂(第2组)及抗癌抗生素(第3到6组)单独应用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)，特别是局部给药。而联合应用(第7到10组)具有明显的增效作用(P＜0.001)。

试验二、化疗增效剂(雷帕霉素)及抗癌药物的体内抑瘤作用。

按照试验一所述之方法测定化疗增效剂及及抗癌药物的体内抑瘤作用，结果表明，埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D或更生霉素等抗癌药物能够明显增强化疗增效剂的抑瘤作用(P＜0.05)。二者单独应用特别是局部给药对胰腺癌均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)，而联合应用具有明显的增效作用(P＜0.001)。

试验三、局部应用抗代谢类抗癌药物和化疗增效剂(雷帕霉素)的抑瘤作用。

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个乳腺癌细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表2)。第一组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为化疗增效剂，第3到6组分别为5-氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤和托泊替康。第7到10组分别为化疗增效剂与5-氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤和托泊替康的联合。所有药物经均为瘤内放置，除化疗增效剂为0.25mg/kg外均，抗代谢类抗癌药物均为5mg/kg。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表2)。

表2

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm3)	P值
				1(6)	对照	58±12
2(6)	化疗增效剂	42±10	＜0.05
				3(6)	5-氟尿嘧啶	42±10	＜0.01
4(6)	6-巯基嘌呤	42±8	＜0.01
				5(6)	甲氨蝶呤	38±8	＜0.01
6(6)	托泊替康	38±8	＜0.01
				7(6)	化疗增效剂+5-氟尿嘧啶	20±4.6	＜0.001
8(6)	化疗增效剂+6-巯基嘌呤	20±4.2	＜0.001
				9(6)	化疗增效剂+甲氨蝶呤	26±4	＜0.001
10(6)	化疗增效剂+托泊替康	24±3	＜0.001

注：5-氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤和托泊替康均为抗代谢类抗癌药物。结果表明，与对照组相比，化疗增效剂(第2组)及抗代谢类抗癌药物(第3到6组)单独应用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)。然而联合应用(第7到10组)具有明显的增效作用(P＜0.001)。

试验四、化疗增效剂(雷帕霉素)及抗代谢类抗癌药物的体内抑瘤作用。

按照试验三的方法检测了化疗增效剂及抗代谢类抗癌药物的体内抑瘤作用。结果表明化疗增效剂及选自氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤，氟甲氨蝶呤、二氧甲氨蝶呤、左亚叶酸钙、亚叶酸钙、卡莫氟、替加氟、优福定、拓扑替康、阿糖胞苷、环胞苷、环胞苷、羟基脲、羟基胍的抗代谢类抗癌药物单独应用对结肠癌均有明显抑瘤作用(P＜0.05)。而联合应用具有明显的增效作用(P＜0.001)。

试验五、化疗增效剂(雷帕霉素)及抗代谢类抗癌药物的体内抑瘤作用。

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个卵巢癌细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表3)。第1组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为化疗增效剂；第3到6组分别为抗代谢抗癌药物。第7到10组分别为化疗增效剂与不同抗代谢抗癌药物的联合。除化疗增效剂经瘤内放置外，卡莫氟、替加氟、优福定和盐酸拓扑替康均为腹腔给药。除化疗增效剂为5mg/kg外均为5mg/kg。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表3)。

表3

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm3)	P值
				1(6)	对照	56±10
2(6)	化疗增效剂	44±5	＜0.05
				3(6)	卡莫氟	44±8	＜0.01
4(6)	替加氟	42±8	＜0.01
				5(6)	优福定	42±9	＜0.01
6(6)	盐酸拓扑替康	42±6	＜0.01
				7(6)	化疗增效剂+卡莫氟	28±3.2	＜0.001
8(6)	化疗增效剂+替加氟	22±3.2	＜0.001
				9(6)	化疗增效剂+优福定	20±3.0	＜0.001
10(6)	化疗增效剂+盐酸拓扑替康	18±3.0	＜0.001

注：卡莫氟、替加氟、优福定和盐酸拓扑替康均为抗代谢类抗癌药物。

试验六、化疗增效剂(雷帕霉素)及抗代谢类抗癌药物的体内抑瘤作用。

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个肺癌细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表4)。第1组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为化疗增效剂；第3到6组分别为抗代谢类抗癌药物。第7到10组分别为化疗增效剂与不同抗代谢类抗癌药物的联合。除化疗增效剂经瘤内放置外，卡莫氟、替加氟、8-氮鸟嘌呤和阿糖胞苷均为腹腔给药。除化疗增效剂为4mg/kg外均为16mg/kg。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表4)。

表4

试验组(n)

所受治疗

肿瘤体积(cm3)

P值

1(6)	对照	62±14
				2(6)	化疗增效剂	50±10	＜0.05
3(6)	卡莫氟	46±6.3	＜0.05
				4(6)	替加氟	48±6.0	＜0.05
5(6)	8-氮鸟嘌呤	42±6.4	＜0.05
				6(6)	阿糖胞苷	40±4.8	＜0.05
7(6)	化疗增效剂+卡莫氟	28±2.8	＜0.001
				8(6)	化疗增效剂+替加氟	26±3.6	＜0.001
9(6)	化疗增效剂+8-氮鸟嘌呤	18±2.0	＜0.001
				10(6)	化疗增效剂+阿糖胞苷	14±2.0	＜0.001

注：卡莫氟、替加氟、8-氮鸟嘌呤和阿糖胞苷均为抗代谢类抗癌药物。

试验七、化疗增效剂(雷帕霉素)及抗癌药物的体内抑瘤作用。

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个胃癌肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表5)。第一组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为化疗增效剂，第3到6组分别为阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D。第7到10组分别为化疗增效剂与阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D的联合。除化疗增效剂经瘤内放置外，阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D均为腹腔给药。除化疗增效剂为2.5mg/kg外均为15mg/kg。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表5)。

表5

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm3)	P值
				1(6)	对照	56±12
2(6)	化疗增效剂	46±10	＜0.05
				3(6)	阿霉素	42±8	＜0.05
4(6)	埃坡霉素B	50±10	＜0.05
				5(6)	丝裂霉素C	44±10	＜0.01
6(6)	放线菌素D	38±6	＜0.01

7(6)	化疗增效剂+阿霉素	26±4	＜0.001
				8(6)	化疗增效剂+埃坡霉素B	24±6	＜0.001
9(6)	化疗增效剂+丝裂霉素C	20±4	＜0.001
				10(6)	化疗增效剂+放线菌素D	18±4	＜0.001

注：阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D均为抗癌抗生素。结果表明，与对照组相比，化疗增效剂(第2组)及抗癌抗生素(第3到6组)单独应用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)，特别是局部给药。而联合应用(第7到10组)具有明显的增效作用(P＜0.001)。

试验八、局部应用抗代谢类抗癌药物和化疗增效剂(雷帕霉素)的抑瘤作用。

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个肝癌细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表6)。第一组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为化疗增效剂，第3到6组分别为5-氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤和托泊替康。第7到10组分别为化疗增效剂与5-氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤和托泊替康的联合。所有药物经均为瘤内放置，除化疗增效剂为2.5mg/kg外均，抗代谢类抗癌药物均为17.5mg/kg。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表6)。

表6

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm3)	P值
				1(6)	对照	58±12
2(6)	化疗增效剂	48±10	＜0.05
				3(6)	5-氟尿嘧啶	38±10	＜0.01
4(6)	6-巯基嘌呤	40±8	＜0.01
				5(6)	甲氨蝶呤	38±8	＜0.01
6(6)	托泊替康	36±8	＜0.01
				7(6)	化疗增效剂+5-氟尿嘧啶	22±4.6	＜0.001
8(6)	化疗增效剂+6-巯基嘌呤	20±4.2	＜0.001
				9(6)	化疗增效剂+甲氨蝶呤	16±4	＜0.001
10(6)	化疗增效剂+托泊替康	14±3	＜0.001

注：5-氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤和托泊替康均为抗代谢类抗癌药物。结果表明，与对照组相比，化疗增效剂(第2组)及抗代谢类抗癌药物(第3到6组)单独应用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)。然而联合应用(第7到10组)具有明显的增效作用(P＜0.001)。

类似增效作用还见于其它化疗增效剂与其它抗代谢类抗癌药物的联合，如：氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤，氟甲氨蝶呤、左亚叶酸钙、亚叶酸钙、卡莫氟、替加氟、优福定、托泊替康、盐酸拓扑替康、阿糖胞苷、环胞苷、环胞苷、羟基脲或羟基胍等抗代谢类抗癌药物与吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反应停、雷诺胺、血管抑素、内皮抑素或血管内皮抑素的组合，以及埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D或更生霉素等抗生素类抗癌药物与甲磺酸伊马替尼、司马斯尼、达萨替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、苏尼替尼、特奥斯塔、帕尼托马或马立马司他的组合。所试肿瘤细胞包括脑肿瘤(CNS-1、C6、9L)、胃腺上皮癌(SA)、骨肿瘤(BC)、乳腺癌(BA)、甲状腺乳头状腺癌(PAT)、肝癌、胰腺癌、肾癌及食管癌等。

试验九、不同分子量聚乳酸制成的化疗增效剂缓释植入剂的体内释放比较

以大白鼠为试验对象，分组(3只/组)并于皮下给予含不同分子量(MW)的聚乳酸(PLA)承载的等量化疗增效剂缓释植入剂。然后分别于1、3、7、14、21、28和35天测药物于植入剂内的剩余量，进而得出其体内释放速度(％)。结果表明，分子量为20000的释放为：1天(8％)、3(28％)、7(56％)、14(82％)、21(90)、28(94)和35(98％)。比较不同分子量聚乳酸制成的化疗增效剂(雷帕霉素)缓释植入剂的体内释放发现，随分子量增加而变慢，以第7天为例，与全身给药组相比，肿瘤抑制率随聚乳酸分子量增加而提高，依次为72％(MW：5000)、68％(MW：15000)、56％(MW：25000)、52％(MW：40000)和46(MW：60000)。

试验十、局部应用抗代谢类抗癌药物和化疗增效剂(雷帕霉素)的抑瘤作用。

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个食道癌细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表7)。第一组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为化疗增效剂，第3到6组分别为5-氟尿嘧啶、埃坡霉素B、甲氨蝶呤和托泊替康。第7到10组分别为化疗增效剂与5-氟尿嘧啶、埃坡霉素B、甲氨蝶呤和托泊替康的联合。所有药物经均为瘤内放置，除化疗增效剂为2.5mg/kg外均，抗代谢类抗癌药物均为17.5mg/kg。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表7)。

表7

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm3)	P值
				1(6)	对照	56±12
2(6)	化疗增效剂	48±10	＜0.05
				3(6)	5-氟尿嘧啶	38±10	＜0.01
4(6)	埃坡霉素	40±8	＜0.01
				5(6)	甲氨蝶呤	38±8	＜0.01

6(6)	托泊替康	36±8	＜0.01
				7(6)	化疗增效剂+5-氟尿嘧啶	22±4.6	＜0.001
8(6)	化疗增效剂+埃坡霉素	14±2.2	＜0.001
				9(6)	化疗增效剂+甲氨蝶呤	16±4	＜0.001
10(6)	化疗增效剂+托泊替康	18±4	＜0.001

注：5-氟尿嘧啶、埃坡霉素、甲氨蝶呤和托泊替康均为抗代谢类抗癌药物。结果表明，与对照组相比，化疗增效剂(第2组)及抗代谢类抗癌药物(第3到6组)单独应用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)。然而联合应用(第7到10组)具有明显的增效作用(P＜0.001)。

试验十一、局部应用抗代谢类抗癌药物和雷帕霉素的抑瘤作用。

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个食道癌细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长14天后将其分为以下10组(见表8)。第一组为对照，第2到10组为治疗组，其中，第2组为雷帕霉素，第3到6组分别为5-氟尿嘧啶、埃坡霉素B、甲氨蝶呤和托泊替康。第7到10组分别为化疗增效剂(雷帕霉素)与5-氟尿嘧啶、埃坡霉素B、甲氨蝶呤和托泊替康的联合。所有药物经均为瘤内放置，除化疗增效剂为5mg/kg外均，抗代谢类抗癌药物均为15mg/kg。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表8)。

表8

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm3)	P值
				1(6)	对照	54±10
2(6)	化疗增效剂	46±80	＜0.05
				3(6)	5-氟尿嘧啶	38±10	＜0.01
4(6)	埃坡霉素B	44±8	＜0.01
				5(6)	甲氨蝶呤	34±8	＜0.01
6(6)	托泊替康	34±8	＜0.01
				7(6)	化疗增效剂+5-氟尿嘧啶	22±4.6	＜0.001
8(6)	化疗增效剂+埃坡霉素	14±2.2	＜0.001
				9(6)	化疗增效剂+甲氨蝶呤	20±4	＜0.001

10(6)

化疗增效剂+托泊替康

18±4

＜0.001

注：5-氟尿嘧啶、埃坡毒素B、甲氨蝶呤和托泊替康均为抗代谢类抗癌药物。结果表明，与对照组相比，化疗增效剂(第2组)及抗代谢类抗癌药物(第3到6组)单独应用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)。然而联合应用(第7到10组)具有明显的增效作用(P＜0.001)。

同样的结果还见于用聚乳酸为辅料制成的缓释剂，包括氟尿嘧啶、巯嘌呤、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤、叶酸、亚叶酸钙、卡莫氟、替加氟、优福定、尿嘧啶替加氟、8-氮鸟嘌呤、托泊替康、盐酸拓扑替康、阿糖胞苷、羟基脲或羟基胍等抗代谢类抗癌药物与化疗增效剂的组合，以及埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D或更生霉素等抗生素类抗癌药物与化疗增效剂的组合。

特别注意的是，本发明的缓释剂，特别是缓释注射剂操作简单方便、重复性好。不仅疗效好，毒副作用小。

不同的药物包装与不同的生物降解高分子的释药特性不同。进一步的研究发现，最适宜于本发明药物缓释的缓释辅料为外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、单甲基聚乙二醇/聚乳酸、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚苯丙生、双脂肪酸与癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚体-癸二酸)、聚(富马酸-癸二酸)、聚乳酸、聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物、木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、透明质酸、胶原蛋白、明胶、壳聚糖、泊洛沙姆、白蛋白胶之一或其组合；最适宜的助悬剂为甲基纤维素、羟甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物质、土温20、土温40、土温80之一或其组合。

总之，实验结果表明本发明中的化疗增效剂对所列抗代谢类抗癌药物或抗生素类抗癌药物的增效作用。因此，本发明所述的抗癌复合物的有效成分为化疗增效剂和任意一种(或多种)抗代谢类抗癌药物或抗生素类抗癌药物的联合或单独包装。以上有效成分可制成任意剂型或形状，但以缓慢释放剂型为优选，主要为缓释注射剂或缓释植入剂。

(四)具体实施方式

实施例1.

将90mg分子量峰值为25000-40000的聚乳酸(PLGA，50∶50)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入2mg雷帕霉素和8mg甲氨蝶呤，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的固体组合物立即成形，分装后射线灭菌，得含2％雷帕霉素和8％甲氨蝶呤的抗癌缓释。均为重量百分比。该抗实体肿瘤药物组合物在体外生理盐水中的释药时间为15-25天，在小鼠皮下的释药时间为25-50天。

实施例2.

如实施例1所述，所不同的是聚乳酸的分子量峰值为35000-60000的(PLGA，75∶25)，抗癌有效成分及重量百分比为下列之一：

(1)0.01-5％的雷帕霉素与5-20％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D或更生霉素的组合；或

(2)0.01-5％的雷帕霉素与5-20％的氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤，氟甲氨蝶呤、左亚叶酸钙、亚叶酸钙、卡莫氟、替加氟、优福定、托泊替康、盐酸拓扑替康、阿糖胞苷、环胞苷或羟基脲的组合。

实施例3.

将80mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)为20∶80)共聚物放入容器中，加100ml二氯甲烷，溶解混匀后，加入1mg雷帕霉素和19mg氟尿嘧啶，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含1％雷帕霉素和19％氟尿嘧啶的注射用微球。然后将微球悬浮于含15％甘露醇的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂，黏度为20cp-300cp(20℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为15-25天，在小鼠皮下的释药时间为30-40天左右。

实施例4.

加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例3相同，但所不同的是所含抗癌有效成分及其重量百分比为：5-20％的雷帕霉素与5-25％的氟尿嘧啶的组合；所用的缓释辅料为：聚苯丙生(50∶50)，外消旋聚乳酸(分子量峰值为20000-60000)、PLGA(75∶25或50∶50)、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、单甲基聚乙二醇/聚乳酸、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。缓释注射剂的黏度为200cp-600cp(20℃-30℃时)。

实施例5.

将70mg分子量峰值为20000-60000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入15mg阿霉素和15mg雷帕霉素，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的含药固体组合物冷冻粉碎制成含15％阿霉素和15％雷帕霉素的微粉，然后悬浮于含1.5％羧甲基纤维素钠的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂，黏度为200cp-360cp(20℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为20-25天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。

实施例6

加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例5相同，但所不同的是分子量峰值为10000-20000的聚乳酸，所含抗癌有效成分及其重量百分比为：

(1)5％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C或放线菌素D和10％雷帕霉素的组合；

(2)10％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素或表阿霉素和10％的雷帕霉的组合；

(3)15％的丝裂霉素C或放线菌素D和5％的雷帕霉素的组合；

(4)25％的阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C或放线菌素D和1％的雷帕霉素的组合。

注射剂的黏度为10cp-650cp(20℃-30℃时)。

实施例7.

将30mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)为20∶80)和40mg分子量峰值为20000-40000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入25mg表阿霉素和5mg雷帕霉素，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含25％表阿霉素与5％雷帕霉素的注射用微球。然后将微球悬浮于含1.5％羧甲基纤维素钠和0.5％吐温80的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂，黏度为120cp-280cp(25℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为18-25天，在小鼠皮下的释药时间为30-35天左右。

实施例8.

加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例7相同，但所不同的是所用辅料为50mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)为40∶60)和30mg分子量峰值为10000-20000的聚乳酸(PLA)，含抗癌有效成分为：0.1-10％的雷帕霉素与1-19％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D或更生霉素的组合；缓释注射剂黏度为440cp-650cp(25℃-30℃时)。

实施例9

将40mg聚苯丙生(50∶50)和40mg分子量峰值为20000-40000的聚乳酸(PLGA，50∶50)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入7.5mg埃坡霉素和12.5mg溶菌酶，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含7.5％埃坡霉素和12.5％雷帕霉素的注射用微球。然后将微球悬浮于含1.5％羧甲基纤维素钠和15％山梨醇和0.2％吐温80的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂，黏度为100cp-160cp(25℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为20-25天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。

实施例10

加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例9相同，但所不同的是所用辅料为30mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)为40∶60)和50mg分子量峰值为20000-40000的聚乳酸(PLGA，75∶25)，所含抗癌有效成分为：1-15％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D或更生霉素与1-5％的雷帕霉素的组合；黏度为560cp-640cp(25℃-30℃时)。

实施例11

将50mg分子量峰值为10000-20000的PLGA(75∶25)和40mg分子量峰值为20000-40000的PLA放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入8mg阿霉素和2mg雷帕霉素，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含8％阿霉素和2％雷帕霉素的注射用微球。然后将微球经压片法制得相应的缓释植入剂。该缓释植入剂在体外生理盐水中的释药时间为15-25天，在小鼠皮下的释药时间为30-40天左右。

实施例12

加工成缓释植入剂的方法步骤与实施例11相同，但所不同的是所用缓释辅料为：60-95％的单甲基聚乙二醇/聚乳酸、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸或聚乙二醇/聚乳酸共聚物，所含抗癌有效成分为：10％阿霉素、埃坡霉素、埃坡霉素B和5-20％雷帕霉素的组合。

实施例13

将70份双脂肪酸与癸二酸共聚物(PFAD-SA)放入容器中，加适量二氯甲烷溶解混匀后，加入10份埃坡霉素和20份雷帕霉素，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含10％埃坡霉素和20％雷帕霉素的注射用微球。然后将微球经压片法制得相应的缓释植入剂。该缓释植入剂在体外生理盐水中的释药时间为15-20天，在小鼠皮下的释药时间为35-50天左右。

实施例14

加工成缓释植入剂的方法步骤与实施例11-13相同，但所不同的是所用辅料为聚(芥酸二聚体-癸二酸)[P(EAD-SA)]或聚(富马酸-癸二酸)[P(FA-SA)]，含抗癌有效成分及重量百分比为：

(1)0.01％-20％的雷帕霉素与1-40％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D或更生霉素的组合；或

(2)0.01％-20％的雷帕霉素与1-40％的氟尿嘧啶(5-FU)、巯嘌呤、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤、叶酸、左亚叶酸钙、亚叶酸钙、卡莫氟、替加氟、优福定、尿嘧啶替加氟、托泊替康、阿糖胞苷、环胞苷或羟基脲的组合。

实施例15

加工成缓释剂的方法步骤与实施例1-14相同，但所不同的是所用的缓释辅料为下列之一或其组合：

a)聚乳酸(PLA)，分子量峰值为10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；

b)聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)，其中，聚乙醇酸和羟基乙酸的比例为50-95∶50-50，分子量峰值为10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；

c)聚乳酸(PLA)与PLGA的混合物或共聚物；

d)聚苯丙生，对羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)为10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；

e)双脂肪酸与癸二酸共聚物(PFAD-SA)；

f)聚(芥酸二聚体-癸二酸)[P(EAD-SA)]；

g)聚(富马酸-癸二酸)[P(FA-SA)]；

h)木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、透明质酸、胶原蛋白、明胶、壳聚糖、泊洛沙姆或白蛋胶；

i)外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、单甲基聚乙二醇/聚乳酸、单甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。

实施例16

加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例1-10相同，但所不同的是所用的助悬剂分别为下列之一或其组合：

a)0.5-3.0％羧甲基纤维素(钠)；

b)5-15％甘露醇；

c)5-15％山梨醇；

d)0.1-1.5％表面活性物质；

e)0.1-0.5％吐温20。

实施例17.

将70份分子量峰值为20000-60000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加适量二氯甲烷，溶解混匀后加入25份氟尿嘧啶和5份雷帕霉素，重新摇匀后真空干燥去除有机溶剂。将干燥后的含药固体组合物冷冻粉碎制成含25％氟尿嘧啶和5％雷帕霉素的微粉，然后悬浮于含1.5％羧甲基纤维素钠的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂，黏度为220cp-340cp(20℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。

实施例18

加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例5相同，但所不同的是所含抗癌有效成分及其重量百分比为：

(1)0.1％-20％的雷帕霉素与1-40％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素C、放线菌素D或更生霉素的组合；或

(2)0.1％-20％的雷帕霉素与1-40％的氟尿嘧啶、巯嘌呤、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤、叶酸、左亚叶酸钙、亚叶酸钙、卡莫氟、替加氟、优福定、尿嘧啶替加氟、托泊替康、阿糖胞苷、环胞苷或羟基脲的组合。

注射剂的黏度为200cp-650cp(20℃-30℃时)。

以上实施例仅用于说明，而并非局限本发明的应用。

本发明所公开和保护的内容见权利要求。

以上结果表明本发明所用的化疗增效剂与其抗癌药物的组合以及由此产生的抗癌增效作用具有普遍意义，是用于各种实体肿瘤。因此，化疗增效剂与其抗癌药物联合时的剂量选择可以根据本发明的有关数据推出。

上述实施例对本发明的技术方法作了进一步的描述。是为了举例说明而不是要限定本发明的范围。实际上，除本文所示和所述之外的本发明的各种改变，对于本领域熟练技术人员来说都可从说明书和图表中显而易见。当然这些改变应在所附的权利要求的范围内。因此，应该认识到前面的说明书着重公开了本发明的某些特定实施方式及对其所做的等同改变或替换都是在所附权利要求书所述的构思和范围内。

Claims (1)

1.一种含化疗药物及其增效剂的抗实体肿瘤缓释剂，其特征在抗实体肿瘤缓释剂为缓释植入剂，由抗癌有效成分和缓释辅料组成：

将50mg分子量峰值为10000-20000的PLGA和40mg分子量峰值为20000-40000的PLA放入容器中，其中，PLGA中聚乳酸和羟基乙酸的重量比为75:25，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入8mg阿霉素和2mg雷帕霉素，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含8%阿霉素和2%雷帕霉素的注射用微球，然后将微球经压片法制得相应的缓释植入剂。