CN101441172A - 一种用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法，包括如下步骤：A.建立原产地鲍鱼元素基准数据库：以分布在同一海域的人工养殖鲍鱼为产地标准品，通过原子吸收法测定鲍鱼中钾、钠、镁、钙、锌、铁元素的含量作为原产地鲍鱼元素含量数据库中数据；B.鉴别样品：取待鉴别的鲍鱼样品分别与标准品相同的条件检测，得到鉴别样品中的钾、钠、镁、钙、锌、铁元素含量，统计学比较标准品与鉴别样品的元素含量是否存在显著性差异判定它是否属于该产地。由于本发明建立的原产地鲍鱼元素数据库包含了较宽的范围，待鉴定鲍鱼样品与其比对时分析结果不受主观意识的影响，从而提供了一个客观的评定标准，具有方便、快捷、操作简单、准确度高的特点。

Description

一种用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法

技术领域

本发明涉及一种原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法，属于光谱分析技术领域。

背景技术

鲍鱼是一种爬附在浅海低潮线以下岩石上的单壳类软体动物，是珍贵的海产品，肉质细嫩，味道鲜美，被誉为“海味之冠”。由于特定产地的水生环境与鲍鱼的营养成分及含量密切相关。所以知名产地的鲍鱼，其价格也比其它产地的高；目前在我国还没有鉴定鲍鱼产地的检测方法，已有文献对鲍鱼的检测报道主要是检测其中的有害重金属、农药残留、有限营养成分等，还没有以鉴定鲍鱼产地为目的的文献报道，从现有数据无法对鲍鱼的产地进行鉴别。

发明内容

本发明的目的是提供一种用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法，利用统计学分析来鉴别鲍鱼由于生长环境的差异导致其含有特征元素的差异，找出原产地鲍鱼特征因子，以便于深入了解原产地产品特色的形成机理和制定相应的保护措施。

本发明的技术方案是这样实现的：这种用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法，包括如下步骤：

A、建立原产地鲍鱼元素基准数据库：以分布在同一海域的人工养殖鲍鱼为产地标准品，通过原子吸收法测定鲍鱼中钾、钠、镁、钙、锌、铁元素的含量作为原产地鲍鱼元素含量数据库中数据；

B、鉴别样品：

取待鉴别的鲍鱼样品分别与标准品相同的条件检测，得到鉴别样品中的钾、钠、镁、钙、锌、铁元素含量，统计学比较标准品与鉴别样品的元素含量是否存在显著性差异判定它是否属于该产地。

所述的用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法，包括如下步骤：

A、原产地鲍鱼样品处理：

随机抽取分布在同一海域的人工养殖鲍鱼100个为产地标准品，去除外壳，将可食部分用粉碎机粉碎成浆状，精确称取粉碎好的样品1.000-5.000g，置于100毫升烧杯中，进行消化处理，加入去离子水将消化后的样品转移至容量瓶内，定容混均待用；

B、原子吸收光谱测定原产地鲍鱼中各种元素含量：

首先配制钾、钠、镁、钙、锌、铁元素的标准溶液，用火焰原子吸收法测定吸光度绘制标准曲线，再测定原产地鲍鱼样品溶液的吸光度，分别在各自元素的标准曲线上得到对应元素的浓度，计算100个样品对应各元素的含量平均值μ_钾、μ_钠、μ_镁、μ_钙、μ_锌、μ_铁作为原产地鲍鱼元素含量数据库中数据；

C、原子吸收光谱测定待鉴别鲍鱼中各种元素含量：

与步骤A相同方法处理待鉴别鲍鱼样品100个，再测定待鉴别鲍鱼样品溶液的吸光度，分别在各自元素的标准曲线上得到对应元素的浓度，计算100个样品对应各元素的含量平均值D_钾、D_钠、D_镁、D_钙、D_锌、D_铁作为待鉴别鲍鱼元素含量数据；

D、计算待鉴别鲍鱼样品测定值的的标准差：

待鉴别鲍鱼100个样品，每个样品检测六个元素，每个元素要测n次，每个样品每个元素测完n次后计算一次标准差Si，

每个元素测定n次的标准差Si的计算公式如下： $\mathrm{Si}=\sqrt{\frac{\mathrm{\Σ}{(x_i-\stackrel{\‾}{x})}^2}{n-1}}$

其中：n为待鉴别鲍鱼某元素测定次数，n＝3，

X_i为一个样品中一个元素三次测定值中的一次，x为三次测定平均值，

每个元素有S₁，S₂…S₁₀₀个标准差，取这100个Si值的平均值S，得到待鉴别鲍鱼的标准差：S_钾、S_钠、S_镁、S_钙、S_锌、S_铁；

E、原产地鲍鱼与待鉴别鲍鱼检测数据的相关性分析：

a、提出假设

D_钠＝μ_钠 D_钾＝μ_钾，D_钙＝μ_钙，D_镁＝μ_镁，D_铁＝μ_铁，D_锌＝μ_锌；

b、给定显著水平α＝0.01；

C、计算有限次测定t分布的t值

其中：

D₀为待鉴别鲍鱼中某个元素在100个样品中的含量平均值，对应步骤C中D_钾、D_钠、D_镁、D_钙、D_锌、D_铁，

μ₀是原产地鲍鱼数据库中某个元素在100个样品中的含量平均值，对应步骤B中的μ_钾、μ_钠、μ_镁、μ_钙、μ_锌、μ_铁，

n为待鉴别鲍鱼某元素测定次数，

S为待鉴别鲍鱼测定n次的标准差：S_钾、S_钠、S_镁、S_钙、S_锌、S铁；

d、根据α和f，(f＝n-1)，查t分布表中t_α(f)：

若t_计>t_α(f)则拒绝a的假设，说明待鉴定鲍鱼样品测定值与原产地鲍鱼数据库值有显著性差异，有99％的把握判定待鉴定鲍鱼样品不是原产地的产品。

所述的用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法，包括步骤A所述的原产地鲍鱼样品消化处理是在烧杯中加入硝酸，加入硝酸量以刚没过样品为准，盖好表面皿，静置10小时后将烧杯置于电加热板上加热消化，温度控制在100-200℃内，保持溶液微沸10分钟后加入过氧化氢5-10毫升，继续消化，如消化不完全，可将烧杯从电热板上取下，冷却后加入高氯酸5毫升继续在电热板上消化，消化至烧杯内溶液近干，冷却，加入去离子水将烧杯内消化后的样品转移至容量瓶内，定容。

所述的用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法，包括步骤B所述用原子吸收光谱测定原产地鲍鱼中钾、钠、镁、钙、锌、铁元素含量的方法是：

a、钠：

将0.2540g氯化钠溶解于水，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液1、2、3、4、5ml置于25ml容量瓶中，再加入2.5ml电离抑制剂，配制成浓度分别为2、4、6、8、10μg/ml的标准工作溶液；

所述的电离抑制剂是称取氯化铯1.267g，溶解于水，稀释至1000ml，配制成浓度为1mg/ml的溶液；

检测波长：589.0nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_钠；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_钠；

b、钾：

将0.1910g氯化钾溶解于水，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液1、2、3、4、5ml置于25ml容量瓶中，再加入2.5ml步骤a的电离抑制剂，配制成浓度分别为2、4、6、8、10μg/ml的标准工作溶液；

检测波长：766.5nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_钾；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_钾；

C、镁

将0.1660g氧化镁溶解于2.5ml盐酸和少量水，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml置于25ml容量瓶中，配制成浓度分别为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μg/ml的标准工作溶液；

检测波长285.2nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_镁；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_镁；

d、钙

将0.2500g碳酸钙溶解于10ml 1:1(v/v)盐酸中，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液2.5、5、7.5、10、12.5ml置于25ml容量瓶中，配制成浓度分别为5、10、15、20、25μg/ml的标准工作溶液；

检测波长：422.7nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_钙；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_钙；

e、锌

将1.2500g氧化锌溶解于100ml水及1ml硫酸中，准确稀释至1000ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液2.5、5、7.5、10、12.5ml置于25ml容量瓶中，配制成浓度分别为5、10、15、20、25μg/ml的标准工作溶液；

检测波长：213.9nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_锌；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_锌；

f、铁

将0.8640g

FeNH₄(SO₄)₃·12H₂O

溶解于2.5ml硫酸及少量水中，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液2.5、5、7.5、10、12.5ml置于25ml容量瓶中，配制成浓度分别为5、10、15、20、25μg/ml的标准工作溶液；

检测波长：248.3nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_铁；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_铁。

本发明利用原子吸收光谱建立原产地鲍鱼元素基准数据库：将待鉴定鲍鱼样品所有元素数据与原产地鲍鱼元素数据库进行统计学处理，判断同种元素之间的相关性，根据是否有显著性差异的统计结果判断样品的产地归属。

由于本发明建立的原产地鲍鱼元素数据库包含了较宽的范围，待鉴定鲍鱼样品与其比对时分析结果不受主观意识的影响，从而提供了一个客观的评定标准，具有方便、快捷、操作简单、准确度高的特点。

具体实施方式

实施例

1、样品处理：

随机抽取分布在青岛海域的人工养殖鲍鱼100个为产地标准品，去除外壳，将可食部分用粉碎机粉碎成浆状，精确称取粉碎好的样品1.000-5.000g，置于100毫升烧杯中，进行消化处理，在烧杯中加入硝酸，加入硝酸量以刚没过样品为准，盖好表面皿，静置10小时后将烧杯置于电加热板上加热消化，温度控制在100-200℃内，保持溶液微沸10分钟后加入过氧化氢5-10毫升，继续消化，如消化不完全，可将烧杯从电热板上取下，冷却后加入高氯酸5毫升继续在电热板上消化，消化至烧杯内溶液近干，冷却，加入去离子水将烧杯内消化后的样品转移至25ml容量瓶内，定容混均待用；

取待鉴别鲍鱼100个为检测样品，处理同上；

2、原子吸收光谱测定青岛鲍鱼(产地标准品)和待鉴别鲍鱼中各种元素含量：

根据样品中各种元素含量的多少，可选择火焰原子化或电热原子化方式进行元素含量测定，本发明以火焰原子吸收法(空气-乙炔火焰)为例给出测定方法

a、钠：

将0.2540g氯化钠溶解于水，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液1、2、3、4、5ml置于25ml容量瓶中，再加入2.5ml电离抑制剂，配制成浓度分别为2、4、6、8、10μg/ml的标准工作溶液；

所述的电离抑制剂是称取氯化铯1.267g，溶解于水，稀释至1000ml，配制成浓度为1mg/ml的溶液；

检测波长：589.0nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_钠；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_钠；

b、钾：

将0.1910g氯化钾溶解于水，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液1、2、3、4、5ml置于25ml容量瓶中，再加入2.5ml步骤a的电离抑制剂，配制成浓度分别为2、4、6、8、10μg/ml的标准工作溶液；

检测波长：766.5nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_钾；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_钾；

C、镁

将0.1660g氧化镁溶解于2.5ml盐酸和少量水，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml置于25ml容量瓶中，配制成浓度分别为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μg/ml的标准工作溶液；

检测波长285.2nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_镁；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_镁；

d、钙

将0.2500g碳酸钙溶解于10ml1：1(v/v)盐酸中，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液2.5、5、7.5、10、12.5ml置于25ml容量瓶中，配制成浓度分别为5、10、15、20、25μg/ml的标准工作溶液；

检测波长：422.7nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个

样品测定3次，取平均值μ_钙；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_钙；

e、锌

将1.2500g氧化锌溶解于100ml水及1ml硫酸中，准确稀释至1000ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液2.5、5、7.5、10、12.5ml置于25ml容量瓶中，配制成浓度分别为5、10、15、20、25μg/ml的标准工作溶液；

检测波长：213.9nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_锌；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_锌；

f、铁

将0.8640g

FeNH₄(SO₄)₃·12H₂O」溶解于2.5ml硫酸及少量水中，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液2.5、5、7.5、10、12.5ml置于25ml容量瓶中，配制成浓度分别为5、10、15、20、25μg/ml的标准工作溶液；

检测波长：248.3nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_铁；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_铁。

3、建立青岛鲍鱼中钠、钾、钙、镁、铁、锌六种元素含量的基准数据库值

计算100个青岛鲍鱼样品对应各元素的含量平均值μ_钾、μ_钠、μ_镁、μ_钙、μ_锌、μ_铁作为原产地鲍鱼元素含量数据库中数据，见表1第1行；

4、计算100个待鉴别样品对应各元素的含量平均值D_钾、D_钠、D_镁、D_钙、D_锌、D_铁作为待鉴别鲍鱼元素含量数据，见表1第2行；

5、计算待鉴别鲍鱼样品测定值的的标准差：

待鉴别鲍鱼100个样品，每个样品检测六个元素，每个元素要测n次，每个样品每个元素测完n次后计算一次标准差Si，

每个元素测定n次的标准差Si的计算公式如下： $\mathrm{Si}=\sqrt{\frac{\mathrm{\Σ}{(x_i-\stackrel{\‾}{x})}^2}{n-1}}$

其中：n为待鉴别鲍鱼某元素测定次数，n＝3，

X_i为一个样品中一个元素三次测定值中的一次，x为三次测定平均值，

每个元素有S₁，S₂…S₁₀₀个标准差，取这100个Si值的平均值S，得到待鉴别鲍鱼的标准差：S_钾、S_钠、S_镁、S_钙、S_锌、S_铁见表1第3行；

表1：青岛鲍鱼和待鉴定鲍鱼六种元素含量值(mg/100g可食部)

6、计算待鉴别鲍鱼样品中六个元素各自t值：

钠：t_计＝|443.07-184.93|3^1/2/0.0013＝343921.9

钾：t_计＝|77.18-204.93|3^1／2/0.0015＝147508.7

钙t_计＝|13.26-10.68|3^1/2/0.0026＝1718.7

镁t_计＝|97.98-86.90|3^1/2/0.0025＝7676.2

铁t_计＝|4.35-2.29|3^1/2/0.0037＝1372.3

锌t_计＝|1.75-0.96|3^1/2/0.0045＝304.06

7、查表：

根据设定自由度f＝n-1＝3-1＝2，置信度：0.99，α＝0.01，查表t_αf＝9.93

8、将待鉴别鲍鱼样品中六个元素的计算值与t_αf＝9.93比较：

六个元素的计算值均远远大于9.93，所以，待鉴定鲍鱼样品中钠、钾、钙、镁、铁、锌含量与青岛鲍鱼数据库中镁的含量值均有显著性差异，即有99％的把握认为待鉴定鲍鱼样品不是青岛鲍鱼。

上述实施例给出的t分布表见《定量化学分析简明教程》第二章

上述实施例给出的化学试剂为硝酸(AR，65-68％)，过氧化氢(AR，30％)，高氯酸(AR，70-72％)，

综上所述，根据不同产地鲍鱼的元素含量特征就可以快速鉴别某一种鲍鱼的不同方面的产地信息，为鉴别鲍鱼产地信息提供了依据。

本发明列举的实施例旨在更进一步地阐明这种用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法的具体操作和应用方向，而不对本发明的范围构成任何限制。

Claims (4)

1、一种用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法，其特征包括如下步骤：

A、建立原产地鲍鱼元素基准数据库：以分布在同一海域的人工养殖鲍鱼为产地标准品，通过原子吸收法测定鲍鱼中钾、钠、镁、钙、锌、铁元素的含量作为原产地鲍鱼元素含量数据库中数据；

B、鉴别样品：

取待鉴别的鲍鱼样品分别与标准品相同的条件检测，得到鉴别样品中的钾、钠、镁、钙、锌、铁元素含量，统计学比较标准品与鉴别样品的元素含量是否存在显著性差异判定它是否属于该产地。

2、根据权利要求1所述的用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法，其特征包括如下步骤：

A、原产地鲍鱼样品处理：

随机抽取分布在同一海域的人工养殖鲍鱼100个为产地标准品，去除外壳，将可食部分用粉碎机粉碎成浆状，精确称取粉碎好的样品1.000-5.000g，置于100毫升烧杯中，进行消化处理，加入去离子水将消化后的样品转移至容量瓶内，定容混均待用；

B、原子吸收光谱测定原产地鲍鱼中各种元素含量：

首先配制钾、钠、镁、钙、锌、铁元素的标准溶液，用火焰原子吸收法测定吸光度绘制标准曲线，再测定原产地鲍鱼样品溶液的吸光度，分别在各自元素的标准曲线上得到对应元素的浓度，计算100个样品对应各元素的含量平均值μ_钾、μ_钠、μ_镁、μ_钙、μ_锌、μ_铁作为原产地鲍鱼元素含量数据库中数据；

C、原子吸收光谱测定待鉴别鲍鱼中各种元素含量：

与步骤A相同方法处理待鉴别鲍鱼样品100个，再测定待鉴别鲍鱼样品溶液的吸光度，分别在各自元素的标准曲线上得到对应元素的浓度，计算100个样品对应各元素的含量平均值D_钾、D_钠、D_镁、D_钙、D_锌、D_铁作为待鉴别鲍鱼元素含量数据；

D、计算待鉴别鲍鱼样品测定值的的标准差：

待鉴别鲍鱼100个样品，每个样品检测六个元素，每个元素要测n次，每个样品每个元素测完n次后计算一次标准差Si，

每个元素测定n次的标准差Si的计算公式如下： $\mathrm{Si}=\sqrt{\frac{\mathrm{\Σ}{(x_i-\stackrel{\‾}{x})}^2}{n-1}}$ 其中：n为待鉴别鲍鱼某元素测定次数，n＝3，

X_i为一个样品中一个元素三次测定值中的一次，x为三次测定平均值，

每个元素有S₁，S₂…S₁₀₀个标准差，取这100个Si值的平均值S，得到待鉴别鲍鱼的标准差：S_钾、S_钠、S_镁、S_钙、S_锌、S_铁；

E、原产地鲍鱼与待鉴别鲍鱼检测数据的相关性分析：

a、提出假设

D_钠＝μ_钠 D_钾＝μ_钾，D_钙＝μ_钙，D_镁＝μ_镁，D_铁＝μ_铁，D_锌＝μ_锌；

b、给定显著水平α＝0.01；

C、计算有限次测定t分布的t值

其中：

D₀为待鉴别鲍鱼中某个元素在100个样品中的含量平均值，对应步骤C中D_钾、D_钠、D_镁、D_钙、D_锌、D_铁，

μ₀是原产地鲍鱼数据库中某个元素在100个样品中的含量平均值，对应步骤B中的μ_钾、μ_钠、μ_镁、μ_钙、μ_锌、μ_铁，

n为待鉴别鲍鱼某元素测定次数，

S为待鉴别鲍鱼测定n次的标准差：S_钾、S_钠、S_镁、S_钙、S_锌、S_铁；d、根据α和f，(f＝n-1)，查t分布表中t_α(f)：

若t_计>t_α(f)则拒绝a的假设，说明待鉴定鲍鱼样品测定值与原产地鲍鱼数据库值有显著性差异，有99％的把握判定待鉴定鲍鱼样品不是原产地的产品。

3、根据权利要求2所述的用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法，其特征包括：步骤A所述的原产地鲍鱼样品消化处理是在烧杯中加入硝酸，加入硝酸量以刚没过样品为准，盖好表面皿，静置10小时后将烧杯置于电加热板上加热消化，温度控制在100-200℃内，保持溶液微沸10分钟后加入过氧化氢5-10毫升，继续消化，如消化不完全，可将烧杯从电热板上取下，冷却后加入高氯酸5毫升继续在电热板上消化，消化至烧杯内溶液近干，冷却，加入去离子水将烧杯内消化后的样品转移至容量瓶内，定容。

4、根据权利要求2所述的用原子吸收光谱鉴别鲍鱼产地的方法，其特征包括：步骤B所述用原子吸收光谱测定原产地鲍鱼中钾、钠、镁、钙、锌、铁元素含量的方法是：

a、钠：

将0.2540g氯化钠溶解于水，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液1、2、3、4、5ml置于25ml容量瓶中，再加入2.5ml电离抑制剂，配制成浓度分别为2、4、6、8、10μg/ml的标准工作溶液；

所述的电离抑制剂是称取氯化铯1.267g，溶解于水，稀释至1000ml，配制成浓度为1mg/ml的溶液；

检测波长：589.0nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_钠；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_钠；

b、钾：

将0.1910g氯化钾溶解于水，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液1、2、3、4、5ml置于25ml容量瓶中，再加入2.5ml步骤a的电离抑制剂，配制成浓度分别为2、4、6、8、10μg/ml的标准工作溶液；

检测波长：766.5nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_钾；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_钾；

C、镁

将0.1660g氧化镁溶解于2.5ml盐酸和少量水，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml置于25ml容量瓶中，配制成浓度分别为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μg/ml的标准工作溶液；

检测波长285.2nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_镁；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_镁；

d、钙

将0.2500g碳酸钙溶解于10ml1:1(V/V)盐酸中，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液2.5、5、7.5、10、12.5ml置于25ml容量瓶中，配制成浓度分别为5、10、15、20、25μg/ml的标准工作溶液；

检测波长：422.7nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_钙；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_钙；

e、锌

将1.2500g氧化锌溶解于100ml水及1ml硫酸中，准确稀释至1000ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液2.5、5、7.5、10、12.5ml置于25ml容量瓶中，配制成浓度分别为5、10、15、20、25μg/ml的标准工作溶液；

检测波长：213.9nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_锌；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_锌；

f、铁

将0.8640gLFeNH₄(SO₄)₃·12H₂O」溶解于2.5ml硫酸及少量水中，准确稀释至100ml，配制成浓度为1mg/ml的标准储备溶液，取1mg/ml的储备液5ml，稀释至100ml，配制成50μg/ml的溶液，分别取50μg/ml的溶液2.5、5、7.5、10、12.5ml置于25ml容量瓶中，配制成浓度分别为5、10、15、20、25μg/ml的标准工作溶液；

检测波长：248.3nm，检测标准工作溶液吸光度，绘制标准工作曲线；

检测原产地鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值μ_铁；

检测待鉴别鲍鱼样品溶液：在标准曲线上得到样品溶液浓度，每个样品测定3次，取平均值D_铁。