CN101418333A - 一种用于诊断污水除磷系统中聚磷菌构成的检测方法 - Google Patents

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CN101418333A CNA2008101625391A CN200810162539A CN101418333A CN 101418333 A CN101418333 A CN 101418333A CN A2008101625391 A CNA2008101625391 A CN A2008101625391A CN 200810162539 A CN200810162539 A CN 200810162539A CN 101418333 A CN101418333 A CN 101418333A
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蒋轶锋
陈建孟
陈浚
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Abstract

本发明提供了一种用于诊断污水处理系统中除磷菌(Poly-PAccumulating Organisms,PAO)构成的检测方法。该方法包括NO2 抑制性检验试验与吸磷量测定试验两个操作阶段:在第一个阶段,通过考察不同NO2 初始浓度对试验污泥反硝化吸磷的影响,确定污泥所能承受的最高NO2 浓度;在第二阶段,使污泥分别在O2、NO3 和NO2 三种不同电子受体条件下进行好氧或缺氧吸磷反应,获得吸磷量MO、MON和MONn。在此基础上,根据计算公式及其适用范围,掌握污泥中好氧除磷菌(a-PAO)、反硝化除磷菌(d-PAO)、兼性除磷菌(f-PAO)、专性好氧除磷菌(oa-PAO)、专性缺氧除磷菌(od-PAO)等各类PAO的数量比例,以利于及时诊断并改善除磷系统的运行效能。

Description

一种用于诊断污水除磷系统中聚磷菌构成的检测方法
(一)技术领域
本发明涉及一种用于诊断污水处理系统中聚磷菌(Poly-PAccumulating Organisms,PAO)构成的检测方法,属于环境工程水污染控制技术领域。
(二)背景技术
作为污水的绿色处理与回用技术,生物除磷脱氮工艺因其经济高效和碳、氮、磷同时去除的优点而在世界范围内得到广泛应用。除磷系统通过A/O或A/A环境的交替,可实现PAO在污泥中的诱导富集及其对PO4 3-的超量吸收去除目的。但实际上,聚糖菌的竞争干扰、NOx -对PAO厌氧释磷的抑制及过度曝气等原因均会导致污水厂的运行溃败。
由此,加强对除磷系统中PAO功能菌种类和数量的监测意义重大。虽然,应用传统微生物分离培养方法和新兴分子微生物学技术对PAO进行研究有助于除磷理论及工艺的革新,但聚磷和反硝化概念源于环境工程学角度,且现有细菌分类系统中缺少相应微生物的定义与鉴别方法,造成目前基于培养基细菌鉴定的研究方法与结果互不相符,且存在耗时和误差大等弊端。另外,PAO种群呈现生物多样性的特点,除磷系统中优势菌群结构与进水水质和工艺形式密切相关,PCR(Polymerase ChainReaction)、DGGE(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis)、FISH(Fluorescence In Situ Hybridization)等核酸监测技术虽然方法先进,但其研究结果之间往往缺乏可比性及可供工程借鉴和应用的实效性。
事实上,除磷系统中PAO种群可根据O2、NO3 -、NO2 -等不同电子受体的供给情况实时作出动态响应,进而形成各类PAO的此消彼长及其与聚糖菌的生态竞争关系。随着d-PAO、f-PAO的发现及BCFS、Dephanox和A2N-SBR等新型反硝化除磷工艺的推广,从工程学的角度掌握PAO对O2、NO3 -和NO2 -不同电子受体的利用特性,以及基于此的各种类PAO的定量方法,有利于快速、有效的监控污泥中PAO结构及除磷系统运行状况。虽然,先前已有一些报道给出了类似的方法,但其对PAO构成及计算方法存在较大局限:(1)仅将PAO粗略的分为a-PAO和d-PAO两类或PO、PON和PONn三类,而忽略了PN和Pn/PNn等od-PAO,对a-PAO、d-PAO、f-PAO、oa-PAO、od-PAO等不同种类PAO区分不够全面和确切;(2)先前用于PO、PON和PONn定量的计算公式实际上只适用于A/O除磷系统,对于A/A反硝化除磷系统由于污泥中PAO种类构成不同而并不适用。
(三)发明内容
本发明目的在于提供一种用于诊断污水除磷系统中聚磷菌构成的检测方法,利用PAO对O2、NO3 -和NO2 -不同电子受体利用能力的差异,掌握除磷系统中a-PAO、d-PAO、f-PAO、oa-PAO和od-PAO等不同功能菌的构成状况,以指导污水厂的运行。
本发明采用的技术方案是:
一种用于诊断污水除磷系统中聚磷菌构成的检测方法,所述方法包括:
(1)取除磷系统厌氧释磷段取的活性污泥进行NO2 -抑制性检验试验,通过考察不同NO2 -初始浓度对活性污泥反硝化吸磷的影响,确定污泥所能承受的最高NO2 -浓度Xmax
(2)分别检测除磷系统吸磷段的活性污泥在DO≥2mg/L的O2电子受体条件、60mgN/L的NO3 -电子受体条件和NO2 -浓度为Xmax的NO2 -电子受体条件下的吸磷量MO、MON和MONn
(3)根据不同电子受体条件下的吸磷量计算活性污泥中不同PAO分类及数量:
对于A/O除磷系统,活性污泥中只以O2为电子受体的聚磷菌数量PO、以O2和NO3 -为电子受体的聚磷菌数量PON及以O2、NO3 -和NO2 -为电子受体的聚磷菌数量PONn,各自占PAO总数P的比例分别为:
P O P ( % ) = M O - a M ON M O × 100 %
P ON P ( % ) = a ( M ON - M ONn ) M O × 100 %
P ONn P ( % ) = a M ONn M O × 100 %
其中a为PAO有氧呼吸产能与无氧呼吸时的比值,通常为2;
对于A/A反硝化除磷系统,活性污泥中兼性聚磷菌f-PAO和专性缺氧聚磷菌od-PAO各自占PAO总数P的数量比例分别为:
P ON + P ONn P ( % ) = M O a M ON × 100 %
P N + P n / P Nn P ( % ) = a M ON - M O a M ON × 100 %
其中PN为只以NO3 -为电子受体的聚磷菌数量、Pn为只以NO2 -为电子受体的聚磷菌数量、PNn为以NO3 -和NO2 -为电子受体的聚磷菌数量;a为PAO有氧呼吸产能与无氧呼吸时的比值,通常为2;
其中具有反硝化NO2 -能力或反硝化NO3 -和O2 -能力的聚磷菌各占PAO总数P的数量比例为:
P ONn + P n / P Nn P ( % ) = M ONn M ON × 100 %
P ON + P N P ( % ) = M ON - M ONn M ON × 100 %
所述的PAO计算公式是基于污泥在O2、NO3 -和NO2 -不同电子受体条件下的吸磷量(MO、MON和MONn)及产能特点(PAO有氧呼吸的产能和吸磷量为无氧呼吸时的a倍,一般a=2)而建立的,具体表达形式与除磷系统采用的工艺有关;对于A/O常规除磷系统,污泥中不存在od-PAO(PN和Pn/PNn),而只有a-PAO(oa-PAO和f-PAO),其中PO、PON和PONn各自占总PAO(P)的数量比例分别为 P O P ( % ) = M O - aM ON M O × 100 % P ON P ( % ) = a ( M ON - M ONn ) M O × 100 % P ONn P ( % ) = a M ONn M O × 100 % ; 对于A/A反硝化除磷系统,污泥中不存在oa-PAO(PO),而只有d-PAO(f-PAO和od-PAO,即PON、PONn、PN和Pn/PNn),且f-PAO和od-PAO的数量比例分别为 P ON + P ONn P ( % ) = M O aM ON × 100 % P N + P n / P Nn P ( % ) = a M ON - M O a M ON × 100 % , 其中 P ONn + P n / P Nn P ( % ) = M ONn M ON × 100 % 的d-PAO具有反硝化NO2 -的能力,而剩余 P ON + P N P ( % ) = M ON - M ONn M ON × 100 % 的d-PAO则以NO3 -和O2 -为电子受体。
本发明鉴于PAO多样性及其在生物除磷系统中的重要作用,利用静态试验监测活性污泥在O2、NO3 -和NO2 -不同电子受体条件下的吸磷数量(MO、MON和MONn),结合好氧和缺氧呼吸的产能特点判断系统中不同种类PAO的构成特点。该方法包括NO2 -抑制性检验试验与吸磷量测定试验两个操作阶段:在第一个阶段,通过考察不同NO2 -初始浓度对试验污泥反硝化吸磷的影响,确定污泥所能承受的最高NO2 -浓度;在第二阶段,使污泥分别在O2、NO3 -和NO2 -三种不同电子受体条件下进行好氧或缺氧吸磷反应,获得MO、MON和MONn。在此基础上,根据计算公式及其适用范围,掌握污泥中好氧聚磷菌(aerobic PAO,a-PAO)、反硝化聚磷菌(denitrifying PAO,d-PAO)、兼性聚磷菌(facultative PAOs,f-PAO)、专性好氧聚磷菌(obligatea-PAO,oa-PAO)、专性缺氧聚磷菌(obligate d-PAO,od-PAO)等各类PAO的数量比例,以利于污水厂及时诊断并改善除磷系统的运行效能。
本发明依据其对O2、NO3 -和NO2 -电子受体的利用能力,PAO可分为六类,(1)PO—只以O2为电子受体,(2)PON—以O2和NO3 -为电子受体,(3)PONn—以O2、NO3 -和NO2 -为电子受体,(4)PN—只以NO3 -为电子受体,(5)Pn—只以NO2 -为电子受体,(6)PNn—以NO3 -和NO2 -为电子受体(实际上PNn与Pn重合);其中PO为oa-PAO(属于a-PAO大类),PN和Pn/PNn为od-PAO(属于d-PAO大类),PON和PONn为f-PAO(同时属于a-PAO和d-PAO大类);即PAO=a-PAO∪d-PAO,a-PAO=PO∪PON∪PONn,d-PAO=PON∪PONn∪PN∪Pn/PNn,f-PAO=a-PAO∩d-PAO=PON∪PONn,oa-PAO=a-PAO-f-PAO=PO,od-PAO=d-PAO-f-PAO=PN∪Pn/PNn;由此,污泥在O2、NO3 -和NO2 -电子受体条件下的吸磷量MO、MON和MONn分别由a-PAO、d-PAO和PONn+Pn/PNn贡献。
具体的,所述步骤(1)为:取除磷系统厌氧释磷段的混合液,补充足量NaAc碳源后转至具盖容器内完成充分的厌氧释磷反应,离心得到活性污泥,用不含NaAc组分的去氧微生物营养液稀释使污泥浓度VSS在1000mg/L左右,投加微量NaNO3使液相NO3 -浓度为60mgN/L;等分混合液若干份,通过投放不同数量NaNO2控制其NO2 -浓度处于不同水平,于pH7.0±0.2下进行缺氧吸磷反应,跟踪PO4 3-浓度的变化,确定NO2 -对反硝化吸磷产生抑制作用的最低浓度。
具体的,所述步骤(2)为:于除磷系统好氧或缺氧吸磷段取混合液,离心活性污泥排除液相的NOX -和液相COD后,以去氧微生物营养液稀释使VSS在1000mg/L左右,于厌氧环境下进行厌氧释磷反应,离心活性污泥排除液相剩余的COD,以不含NaAc组分的去氧微生物营养液稀释得到混合液,混合液均分为三份,分别置于DO≥2mg/L的电子受体条件、60mgN/L的NO3 -电子受体条件和NO2 -浓度为Xmax的NO2 -电子受体条件下,于pH7.0±0.2下进行好氧或缺氧吸磷反应,获得各自吸磷量MO、MON和MONn
所述去氧微生物营养液组成为:COD-NaAc 200mg/L(表示以COD值计为200mg/L)、N-NH4Cl 10mg/L(表示所添加的NH4Cl以N质量计含量为10mg/L,下述以此类推)、P-KH2PO80mg/L、Mg-MgSO4·7H2O6mg/L、Ca-CaCl2·2H2O 3mg/L、K-KCl 10mg/L、EDTA 2mg/L、Cu-CuSO4·5H2O-0.001mg/L、H3BO0.025mg/L、I-KI 0.025mg/L、Mn-MnCl2·4H2O 0.003mg/L、Zn-ZnSO4·7H2O 0.006mg/L、Co-CoCl2·6H2O0.008mg/L和Fe-FeCl3·6H2O 0.065mg/L,溶剂为水。所述不含NaAc组分的去氧微生物营养液即上述营养液中去除NaAc组分后的成分。
本发明从工程控制角度提出了基于O2、NO3 -和NO2 -不同电子受体利用的PAO的监测方法,克服了利用传统微生物分离培养方法和新兴分子微生物学技术进行分析时操作复杂、耗时及对仪器、试剂要求苛刻和费用高等弊端。可迅速掌握A/O常规除磷系统中PO、PON和PONn,以及A/A反硝化除磷系统中PON、PONn、PN和Pn/PNn等不同PAO的数量比例,并由此调整不同除磷工艺形式中各单元(厌氧区、缺氧区、好氧区、沉淀区)间的污泥混合液和上清液的回流策略,改善PON、PONn等f-PAO在污泥中的优势地位及系统除磷效率。
本发明的有益效果主要体现在:本发明依据其对O2、NO3 -和NO2 -电子受体的利用能力,将PAO分为六类:PO、PON、PONn、PN、Pn和PNn,并据此建立了PAO的检测方法;本发明PAO检测方法具有简单、快速和准确等优点,对于污水厂除磷系统的实时监控和优化运行具有现实意义。
(四)附图说明
图1为SBR除磷系统结构示意图;
图2为NO2 -对污泥缺氧吸磷的抑制,其中SBRo和SBRn分别为A/O常规除磷系统和A/A反硝化除磷系统;
图3为SBRo和SBRn污泥在不同电子受体条件下的吸磷量。
(五)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述,但本发明的保护范围并不仅限于此:
实施例1:
SBRo和SBRn为两个处理模拟生活用水的序批式生物除磷系统(如图1),有效体积20L,分别A/O和A/A(采用NO3 -电子受体,COD/NO3 --N比控制在5.5)交替运行;一个周期包括1.5h厌氧、2.5h好氧或缺氧、2h沉淀/排水/进水;沉淀后排除18L上清液(包括剩余污泥),使HRT为6.7h;SRT通过好氧或缺氧末剩余污泥排放控制在12.5d;系统在18℃~24℃室温下运行,pH用0.5mol/L HCl/NaOH控制在7.0±0.5。原水为NaAc人工配水,COD110mg/L、NH4 +-N 18mg/L(表示以N质量计含量为18mg/L)、PO4 3--P 5mg/L。运行结果表明,虽然两个系统除磷效率相当,但污泥中的PAO种类及其数量显然是有所区别的。
为此,首先进行第一阶段的NO2 -抑制性检验试验,pH通过滴加0.5mol/L NaOH或者HCl溶液严格控制在7.0±0.2范围。于SBRo和SBRn的厌氧反应末期分别取混合液3和4L,由于污泥释磷充分而VSS在1000mg/L附近(分别为1450和950mg/L),混合液直接按要求分别等分成6和8份,然后在不同的电子受体条件下(见表1)于具盖容器(有效体积500mL)内进行充分缺氧吸磷反应,考察NO2 -对吸磷量的影响,如图2所示,SBRo和SBRn污泥所能承受的最高NO2 -浓度分别为6和9mg/L。
表1:NO2 -抑制性检验试验
在此基础上,进行第二阶段的吸磷量测定试验,pH通过滴加0.5mol/LNaOH/HCl溶液严格控制在7.0±0.2范围。于SBRo和SBRn的好氧或缺氧反应末期分别取混合液3L,在3000r·min-1转速下离心2min,浓缩后污泥用自来水稀释后再次离心以彻底排除液相中的NOx -;用去氧微生物营养液定容污泥至原体积,于具盖容器(有效体积3L)内进行厌氧释磷反应,持续2.0h;采用未含NaAc组分的去氧微生物营养液淘洗污泥,然后体积为3L的混合液被均分成三份并分别置于O2(DO≥2mg/L)、NO3 -(60mgN/L)和NO2 -(为避免NO2 -对吸磷的抑制,根据第一阶段结果,SBRo系列于0、1、2h分三次投加6mg N/L的NO2 -;SBRn系列也分3次投加,每次9mg N/L)三种电子受体条件下进行好氧或缺氧吸磷,反应持续3.5h后,分别获得两个系列的吸磷量MO、MON和MONn,结果如图3所示。
去氧微生物营养液成分包括:COD-NaAc 200mg/L、N-NH4Cl 10mg/L、P-KH2PO4 80mg/L、Mg-MgSO4·7H2O 6mg/L、Ca-CaCl2·2H2O 3mg/L、K-KCl 10mg/L、EDTA 2mg/L、Cu-CuSO4·5H2O 0.001mg/L、H3BO30.025mg/L、I-KI 0.025mg/L、Mn-MnCl2·4H2O 0.003mg/L、Zn-ZnSO4·7H2O0.006mg/L、Co-CoCl2·6H2O 0.008mg/L和Fe-FeCl3·6H2O 0.065mg/L,溶剂为蒸馏水。
根据图3和计算公式对SBRo和SBRn污泥中PAO种类构成及其数量比例进行分析,结果如表2所示,表明尽管两个系统的宏观除磷效率相当,但两者根据所采用的电子受体不同(分别O2和NO3 -)对PO、PON、PONn、PN和Pn/PNn等不同种类PAO进行选择、富集,进而呈现显著不同的PAO构成特点:SBRo中只存在PO、PON和PONn(占总PAO的5%、58%和37%)等oa-PAO(5%)和f-PAO(95%),PN、Pn/PNn等od-PAO由于完全缺氧特性而被淘汰出A/O除磷系统;而SBRn中存在PON、PONn、PN和Pn/PNn等f-PAO(44%)和od-PAO(56%),PO等oa-PAO由于其完全好氧特性而被淘汰出A/A除磷系统;f-PAO由于生态幅较宽而在两个系统中广泛存在,成为生物除磷的主体,而oa-PAO和od-PAO等专性PAO则根据系统所采用的电子受体类型而分别被筛选富集,其与f-PAO共同决定除磷系统的运行效能。由此可见,虽然两个系统除磷效率虽然相当,但污泥中的PAO种类及其数量显然是有所区别的,本发明涉及的PAO检测方法具有简单、快速和准确等优点,对于特定除磷系统中好氧聚磷菌a-PAO、反硝化聚磷菌d-PAO、兼性聚磷菌f-PAO、专性好氧聚磷菌oa-PAO、专性缺氧聚磷菌od-PAO等各类PAO的数量比例具有实时有效的监控作用。
根据活性污泥(VSS在1000mg/L左右)在O2、NO3 -和NO2 -不同电子受体条件下的吸磷数量(MO、MON和MONn),可判断除磷系统运转的优劣程度。对于A/O常规除磷系统,如果MO≥20mg/L,表明PAO生长和除磷功能良好;如果MO≤10mg/L,表明系统除磷功能基本丧失;如果20mg/L≥MO≥10mg/L,表明PAO生长和除磷功能受到GAO增值的干扰,污水厂需及时采取应对措施,以免系统溃败。而对于A/A反硝化除磷系统,如果MON≥25mg/L,表明PAO生长和除磷功能良好;如果MON≤15mg/L,表明系统除磷功能基本丧失;如果25mg/L≥MO≥15mg/L,表明PAO生长和除磷功能受到GAO增值的干扰,污水厂需及时采取应对措施,以免系统溃败。
表2:SBRo和SBRn中基于电子受体利用的PAO分类及定量结果
Figure A200810162539D00141

Claims (4)

1.一种用于诊断污水除磷系统中聚磷菌构成的检测方法,所述方法包括:
(1)取除磷系统厌氧释磷段的活性污泥进行NO2 -抑制性检验试验,通过考察不同NO2 -初始浓度对活性污泥反硝化吸磷的影响,确定污泥所能承受的最高NO2 -浓度Xmax
(2)分别检测除磷系统吸磷段的活性污泥在DO≥2mg/L的O2电子受体条件、60mgN/L的NO3 -电子受体条件和NO2 -浓度为Xmax的NO2 -电子受体条件下的吸磷量MO、MON和MONn
(3)根据不同电子受体条件下的吸磷量计算活性污泥中不同PAO分类及数量:
对于厌氧/好氧(A/O)除磷系统,活性污泥中只以O2为电子受体的聚磷菌数量PO、以O2和NO3 -为电子受体的聚磷菌数量PON及以O2、NO3 -和NO2 -为电子受体的聚磷菌数量PONn,各自占PAO总数P的比例分别为:
P O P % = M O - a M ON M O × 100 %
P ON P ( % ) = a ( M ON - M ONn ) M O × 100 %
P ONn P ( % ) = a M ONn M O × 100 %
其中a为PAO有氧呼吸产能与无氧呼吸时的比值;
对于A/A反硝化除磷系统,活性污泥中兼性聚磷菌f-PAO和专性缺氧聚磷菌od-PAO各自占PAO总数P的数量比例分别为:
P ON + P ONn P ( % ) = M O a M ON × 100 %
P N + P n / P Nn P ( % ) = a M ON - M O a M ON × 100 %
其中PN为只以NO3 -为电子受体的聚磷菌数量、Pn为只以NO2 -为电子受体的聚磷菌数量、PNn为以NO3 -和NO2 -为电子受体的聚磷菌数量;a为PAO有氧呼吸产能与无氧呼吸时的比值;
其中具有反硝化NO2 -能力或反硝化NO3 -和O2 -能力的聚磷菌各占PAO总数P的数量比例为:
P ONn + P n / P Nn P ( % ) = M ONn M ON × 100 %
P ON + P N P ( % ) = M ON - M ONn M ON × 100 % .
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述步骤(1)为:取除磷系统厌氧释磷段的混合液,补充足量NaAc碳源后转至具盖容器内完成充分的厌氧释磷反应,离心得到活性污泥,用不含NaAc组分的去氧微生物营养液稀释使污泥浓度VSS为1000mg/L,投加NaNO3使液相NO3 -浓度为60mgN/L;混合液等分为若干份,通过投放不同数量NaNO2控制其NO2 -浓度处于不同水平,于pH7.0±0.2下进行缺氧吸磷反应,跟踪PO4 3-浓度的变化,确定NO2 -对反硝化吸磷产生抑制作用的最低浓度。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述步骤(2)为:于除磷系统好氧或缺氧吸磷段取混合液,离心活性污泥排除液相的NOX -和液相COD后,以去氧微生物营养液稀释使VSS为1000mg/L,于厌氧环境下进行厌氧释磷反应,离心活性污泥排除液相剩余的COD,以不含NaAc组分的去氧微生物营养液稀释得到混合液,混合液均分为三份,分别置于DO≥2mg/L的电子受体条件、60mgN/L的NO3 -电子受体条件和NO2 -浓度为Xmax的NO2 -电子受体条件下,于pH7.0±0.2下进行好氧或缺氧吸磷反应,获得各自吸磷量MO、MON和MONn
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于所述去氧微生物营养液组成为:COD-NaAc 200mg/L、N-NH4Cl 10mg/L、P-KH2PO4 80mg/L、Mg-MgSO4·7H2O 6mg/L、Ca-CaCl2·2H2O 3mg/L、K-KCl 10mg/L、EDTA2mg/L、Cu-CuSO4·5H2O 0.001mg/L、H3BO3 0.025mg/L、I-KI 0.025mg/L、Mn-MnCl2·4H2O 0.003mg/L、Zn-ZnSO4·7H2O 0.006mg/L、Co-CoCl2·6H2O 0.008mg/L和Fe-FeCl3·6H2O 0.065mg/L,溶剂为蒸馏水。
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