CN101402933A - 用多菌种混合发酵生产土壤修复菌剂及制备方法 - Google Patents
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Abstract
用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂及制备方法，选用固氮菌、解磷菌、硅酸盐细菌、生防菌、酵母菌、木霉菌、青霉菌、乳酸菌和光合菌的原菌种加水混合制成原菌液，将原菌液按4％的比例接入种子罐制成种子液，再将种子液按10％的比例接入生产罐，制得土壤修复菌剂，方法：将固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌加水混合，接入三角瓶中，温度控制37℃，振荡培养24小时；将生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水混合，在摇床上培养48～72小时，好氧发酵16小时；将乳酸菌与水混合，接入克氏瓶中，在37℃的恒温中培养24小时；将光合菌与水混合，接入克氏瓶，在60－80瓦的白炽灯下培养3～5天。优点是：能促进土壤微生物的繁殖，实行良性循环，改良土壤，生产工艺简单，成本低。
Description
技术领域
本发明涉及微生物液体深层发酵技术，具体的说是采用多菌种混合发酵生产土壤修复型菌剂及制备方法。
背景技术
我国是一个农业大国，长期的石化农业造成了土壤板结、农药、化肥污染，特别是土壤中生物肥力下降明显，要想恢复地力最好的方法是向土壤中增施有机质，特别是增施土壤中有益菌，尤其是功能性菌群，如固氮、解磷、解钾菌等。液体菌剂具有菌夜活性高、易于施用等特点，是改良土壤、提高土壤生物肥力最有效的改良剂之一。但以往的液体菌剂多是单菌的复合，复合后的菌种比例不易控制。
发明内容
本发明的目的是通过选用土壤中的功能性菌，进行混合发酵，使功能菌在混合发酵中更稳定的发挥其功能，并在混合发酵中生产大量的磷酸酶、蛋白酶、多肽氨基等类物质，促进了肥料的利用率，同时促进了植物根的生长，使其吸收更多的养分，由于根部发育良好，生长的植物通过根反馈给土壤大量的养料，又促进了土壤微生物的繁殖，这种良性循环，促进了土壤改良，达到了修复土壤的目的。
本发明所采用的技术方案是：用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂，选用固氮菌、解磷菌、硅酸盐细菌、生防菌、酵母菌、木霉菌、青霉菌、乳酸菌和光合菌为原菌种，将原菌种分组混合后加水制成原菌液，再将原菌液按4％的比例接入种子罐制成种子液，再将种子液按10％的比例接入生产罐，制得土壤修复菌剂，所述的各原菌种分组混合与水的加入比例是：
第一组：固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌加水混合，固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌与水的加入比例是：固氮菌10～15％、解磷菌10～15％、硅酸盐细菌10～15％、余量为水；
第二组：生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水混合，生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水的加入比例是：生防菌20～30％、酵母菌10～15％、木霉菌10～15％、青霉菌10～15％、余量为水；
第三组：乳酸菌与水混合，乳酸菌与水的加入比例是：乳酸菌10～15％、余量为水；
第四组：光合菌与水混合，光合菌与水的加入比例是：光合菌10～15％、余量为水。
本发明，所述种子罐的培养基为：红糖5～8％、玉米蛋白2～5％、磷酸二氢钾0.2％、氯化钠0.15％、轻质碳酸钙0.6％，余量为水，并将初始PH值调至7.0。
本发明，所述生产罐的培养基为：蜂蜜8～12％、玉米蛋白2～5％、磷酸二氢钾0.2％、氯化钠0.15％、轻质碳酸钙0.6％，余量为水，并将初始PH值调至7.0。
本发明，用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂的制备方法是：
(1)、将上述所述的第一组，从斜面接入三角瓶中，温度控制37℃，振荡培养24小时，制成原菌液；
(2)、将上述所述的第二组，在摇床上培养48～72小时，培养温度控制在31～33℃，转速180r/min，好氧发酵，通气比1∶0.8，好氧发酵时间16小时，制成原菌液；
(3)、将上述所述的第三组，接入克氏瓶中，在37℃的恒温中培养24小时，制成原菌液；
(4)、将上述所述的第四组，接入克氏瓶，在60-80瓦的白炽灯下培养3～5天，制成原菌液；
(5)、将上述(1-4)制成的原菌夜混合，按总量的4％的接种量，接入种子罐与所述种子罐的培养基混合，进行厌氧培养48～60小时，制成种子液；
(6)、将上述(5)所述的种子液，按10％的比例接入生产罐，与所述生产罐的培养基混合发酵，温度控制在31～33℃，转速180r/min，厌氧培养48～60小时，当PH值降至5.0时，即达到发酵终点，制成土壤修复菌剂。
本发明，所述的各种原菌种均从中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)或农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC)引进，确保了各菌种的存活和质量。
本发明的微生物土壤修复菌剂在我国的部分地区进行了试验，使用效果良好，列举如下试用结果：
试用实例1：2007年-2008年，试用于河南省平顶山市叶县邓李乡徐庄村，农作物为：小麦；面积：2亩；试验效果：在减少化肥用量30％的情况下仍可增产16.4％。
试用实例2：2008年，试用于河南省平顶山市滍阳镇西滍村，农作物为：玉米；面积：10亩；试验效果：在减少化肥用量30％的情况下仍可增产9.1％。
试用实例3：2007年-2008年，试用于河南省平顶山市湛南区曹镇，农作物为：水稻；面积：15亩；试验效果：在减少化肥用量30％的情况下仍可增产20％。
本发明的有益效果是：选用土壤中的功能性菌混合发酵，使功能菌在混合发酵中更稳定的发挥其功能，并在混合发酵中生产大量的磷酸酶、蛋白酶、多肽氨基等类物质，促进了肥料的利用率，同时促进了植物根的生长，使其吸收更多的养分，由于根部发育良好，生长的植物通过根反馈给土壤大量的养料，又促进了土壤微生物的繁殖，这种良性循环，促进了土壤改良，达到了修复土壤的作用，生产工艺简单，成本低，便于推广应用。
具体实施方式
用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂，选用固氮菌、解磷菌、硅酸盐细菌、生防菌、酵母菌、木霉菌、青霉菌、乳酸菌和光合菌为原菌种，将原菌种分组混合后加水制成原菌液，再将原菌液按4％的比例接入种子罐制成种子液，再将种子液按10％的比例接入生产罐，制得土壤修复菌剂，所述的各原菌种分组混合与水的加入比例是：
第一组：固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌加水混合，固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌与水的加入比例是：固氮菌10～15％、解磷菌10～15％、硅酸盐细菌10～15％、余量为水；
第二组：生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水混合，生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水的加入比例是：生防菌20～30％、酵母菌10～15％、木霉菌10～15％、青霉菌10～15％、余量为水；
第三组：乳酸菌与水混合，乳酸菌与水的加入比例是：乳酸菌10～15％、余量为水；
第四组：光合菌与水混合，光合菌与水的加入比例是：光合菌10～15％、余量为水。
本发明，所述种子罐的培养基为：红糖5～8％、玉米蛋白2～5％、磷酸二氢钾0.2％、氯化钠0.15％、轻质碳酸钙0.6％，余量为水，并将初始PH值调至7.0。
本发明，所述生产罐的培养基为：蜂蜜8～12％、玉米蛋白2～5％、磷酸二氢钾0.2％、氯化钠0.15％、轻质碳酸钙0.6％，余量为水，并将初始PH值调至7.0。
本发明，用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂的制备方法是：
(1)、将上述所述的第一组，从斜面接入三角瓶中，温度控制37℃，振荡培养24小时，制成原菌液；
(2)、将上述所述的第二组，在摇床上培养48～72小时，培养温度控制在31～33℃，转速180r/min，好氧发酵，通气比1∶0.8，好氧发酵时间16小时，制成原菌液；
(3)、将上述所述的第三组，接入克氏瓶中，在37℃的恒温中培养24小时，制成原菌液；
(4)、将上述所述的第四组，接入克氏瓶，在60-80瓦的白炽灯下培养3～5天，制成原菌液；
(5)、将上述(1-4)制成的原菌夜混合，按总量的4％的接种量，接入种子罐与所述种子罐的培养基混合，进行厌氧培养48～60小时，制成种子液；
(6)、将上述(5)所述的种子液，按10％的比例接入生产罐，与所述生产罐的培养基混合发酵，温度控制在31～33℃，转速180r/min，厌氧培养48～60小时，当PH值降至5.0时，即达到发酵终点，制成土壤修复菌剂。
本发明的微生物土壤修复菌剂在我国的部分地区进行了试验，使用效果良好，列举如下试用结果：
试用实例1：2007年-2008年，试用于河南省平顶山市叶县邓李乡徐庄村，农作物为：小麦；面积：2亩；试验效果：在减少化肥用量30％的情况下仍可增产16.4％。
试用实例2：2008年，试用于河南省平顶山市滍阳镇西滍村，农作物为：玉米；面积：10亩；试验效果：在减少化肥用量30％的情况下仍可增产9.1％。
试用实例3：2007年-2008年，试用于河南省平顶山市湛南区曹镇，农作物为：水稻；面积：15亩；试验效果：在减少化肥用量30％的情况下仍可增产20％。
Claims (4)
1、用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂，其特征是：选用固氮菌、解磷菌、硅酸盐细菌、生防菌、酵母菌、木霉菌、青霉菌、乳酸菌和光合菌为原菌种，将原菌种分组混合后加水制成原菌液，再将原菌液按4％的比例接入种子罐制成种子液，再将种子液按10％的比例接入生产罐，制得土壤修复菌剂，所述的各原菌种分组混合与水的加入比例是：
第一组：固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌加水混合，固氮菌、解磷菌和硅酸盐细菌与水的加入比例是：固氮菌10～15％、解磷菌10～15％、硅酸盐细菌10～15％、余量为水；
第二组：生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水混合，生防菌、酵母菌、木霉菌和青霉菌与水的加入比例是：生防菌20～30％、酵母菌10～15％、木霉菌10～15％、青霉菌10～15％、余量为水；
第三组：乳酸菌与水混合，乳酸菌与水的加入比例是：乳酸菌10～15％、余量为水；
第四组：光合菌与水混合，光合菌与水的加入比例是：光合菌10～15％、余量为水。
2、如权利要求1所述的用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂，其特征是：所述种子罐的培养基为：红糖5～8％、玉米蛋白2～5％、磷酸二氢钾0.2％、氯化钠0.15％、轻质碳酸钙0.6％，余量为水，并将初始PH值调至7.0。
3、如权利要求1所述的用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂，其特征是：所述生产罐的培养基为：蜂蜜8～12％、玉米蛋白2～5％、磷酸二氢钾0.2％、氯化钠0.15％、轻质碳酸钙0.6％，余量为水，并将初始PH值调至7.0。
4、如权利要求1所述的用多菌体混合液发酵生产土壤修复菌剂的制备方法，其特征是：
(1)、将权利要求1所述的第一组，从斜面接入三角瓶中，温度控制37℃，振荡培养24小时，制成原菌液；
(2)、将权利要求1所述的第二组，在摇床上培养48～72小时，培养温度控制在31～33℃，转速180r/min，好氧发酵，通气比1∶0.8，好氧发酵时间16小时，制成原菌液；
(3)、将权利要求1所述的第三组，接入克氏瓶中，在37℃的恒温中培养24小时，制成原菌液；
(4)、将权利要求1所述的第四组，接入克氏瓶，在60-80瓦的白炽灯下培养3～5天，制成原菌液；
(5)、将上述(1-4)制成的原菌夜混合，按总量的4％的接种量，接入种子罐与权利要求2所述种子罐的培养基混合，进行厌氧培养48～60小时，制成种子液；
(6)、将上述(5)所述的种子液，按10％的比例接入生产罐，与权利要求3所述生产罐的培养基混合发酵，温度控制在31～33℃，转速180r/min，厌氧培养48～60小时，当PH值降至5.0时，即达到发酵终点，制成土壤修复菌剂。
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