CN101402692A - 低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医药降脂材料，具体是指低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐及其制备方法与应用。该制备方法包括溶胀法制得凝胶，加入不饱和脂肪酸，形成活性基团保护基并扭转为圆球状“水包油”纳米微粒，经低分子量糖脂的凝集、干燥、粉碎，制成其外观为淡黄色粉末状，无味无臭，溶于稀酸溶液，平均粘度为120mPa·s，重均分子量为1.56万，脱乙酰度为96％的甲壳多糖不饱和脂肪酸盐。该产品生物活性高，降脂温和有效，无任何毒副作用，可为防治高血脂药物或作为具有减肥降脂功能的食品、保健品、化妆品制备中的添加剂。制备方法简单易行，条件温和，重复性好，质量稳定、可控，原材料易得，价格适中，符合工业化生产的条件和环保要求。

Description

低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及医药降脂材料，具体是指低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐及其制备方法与应用。

背景技术

作为医药材料使用的甲壳多糖，一般要求分子量相对较低，因为只有较小分子量的甲壳多糖才易于溶解和吸收。为此，降解大分子多糖一直是本领域研究人员探索的热点。根据以往实验总结不外是使用各种氧化剂及其组合、酶或载酶及其组合、微波辐射及其化学组合、超声波辐射及其化学组合等，所有这些方法均各有利弊：一、化学氧化降解法随机性最大，反应体系较为复杂，反应温度、时间、PH值等基本参数变化范围很大，诸多因素作用下多糖大分子β(1，4)糖苷键断裂随机性很大而使反应体系复杂难以分离，分子大小参差不齐，不适合要求高的药品、食品或高级化妆品使用的要求；同时，制备的材料生物活性不高，表现在多糖带电活性被小分子化学物质所湮灭。二、生物蛋白酶分解法随机性较化学法小，但也存在盲区，要控制多糖大分子结构在一定分子范围内均整是不可能的，由于多糖大分子旋转扭曲而酶的作用位点又不同，以致多糖大分子断裂形成分子量分布极宽的低分子甚至寡糖的出现。因此以低分子甲壳多糖为底物利用生物酶制备甲壳寡糖倒是适合；同样酶蛋白碎片也会对低分子多糖带电活性产生遮蔽作用，即使固定化酶，酶促反应后氨基酸残基也会使多糖活性电子湮灭。三、物理化学降解法虽然弥补了化学降解和酶法降解的一些不足，但也存在诸多弊端，例如：微波辐射会产生大量接枝反应，而且在无序情况下进行，造成目标产物的不确定性，这被人们认为不可能工业化生产。又如，超声波降解是基于“空化理论”和“自由基理论”的，不同质量的甲壳多糖材料经过“空化”破碎之后多糖分子碎片结构千差万别，不仅分子连接数量产生变化，而且分子结构也发生置换，多糖空间构型发生很大改变。同时“自由基”也将活性电子湮灭。总结各种降解方法所制备的低分子多糖或寡糖均存在对机体细胞免疫和体液免疫的调节能力、对脂肪与蛋白质的吸附能力、与目标细胞膜的结合能力等生物活性都不高的致命缺点。

发明内容

为了解决上述现有技术中存在的不足之处，本发明的首要目的在于提供一种对机体细胞免疫和体液免疫的调节能力、对脂肪与蛋白质的吸附能力、与目标细胞膜的结合能力强的低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐。

本发明的另一目的在于提供上述低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐的制备方法。

本发明的第三个目的在于提供上述低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐在作为防治高血脂药物或作为具有减肥降脂功能的食品、保健品、化妆品制备中的添加剂的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐，其特征在于：其外观为淡黄色粉末状，无味无臭，溶于稀酸溶液，平均粘度(η)为120mPa·s，重均分子量(Mw)为1.56万，脱乙酰度(D.D.)为96％，其化学分子式为：

{[C24H43～47NO7](β1，4糖苷键)[C24H43～47NO7]}n(n＝20～30)

一种低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐的制备方法，其特征在于该制备方法包括溶胀法制备甲壳多糖凝胶，其具体步骤及其工艺条件如下：

一、甲壳多糖凝胶的制备

将脱乙酰度70～90％、平均分子量为10～70万、细度在50～80目之间的甲壳多糖分散于酸性体系中，其中按重量百分比计，水为92～96％，冰乙酸、乳酸或盐酸为1.5～2.5％，在温度50～60℃、搅拌速度100～150r/min下溶解2～3小时，撤消温度，在室温下搅拌12～16小时，制得浓度为30～50mg/ml、粘度为1.1～2.5万mPa·s的甲壳多糖凝胶；

二、保护基反应及其自组装纳米粒的形成

在搅拌速度100～150r/min的甲壳多糖凝胶液中，加入按重量百分比计0.65～0.95％的不饱和脂肪酸，搅拌1～2小时至反应物粘度为0.6～0.8万mPa·s的呈淡黄色乳浊状液，当不饱和脂肪酸切断糖苷键后羧基与活性氨基静电吸附形成活性基团保护基并扭转为圆球状“水包油”纳米微粒，粒径在500～1000纳米之间；

三、低分子量糖脂的凝集

在上述反应体系中加入碱溶液，调整反应体系PH值至6.8～7.2之间，其中碱溶液是指按占反应体系重量百分比计2～4％的碳酸钠或碳酸氢钠溶解于按反应体系体积百分比计20～30％的水调配而成；然后再加入按反应体系体积百分比计2～5％的浓度95％乙醇或1～3％的丙酮，搅拌反应至少30分钟，再用普通滤纸过滤沥干；

四、产品的成形

在60～80℃干燥装置中将过滤物干燥12～24小时，干燥后用100～150目高速粉碎机粉碎，形成其外观为淡黄色粉末状，无味无臭，溶于稀酸溶液，平均粘度(η)为120mPa·s，重均分子量(Mw)为1.56万，脱乙酰度(D.D.)为96％，其化学分子式为：

{[C24H43～47NO7](β1，4糖苷键)[C24H43～47NO7]}n(n＝20～30)的低分于量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐产品。

所述制备方法中采用的不饱和脂肪酸是：油酸或亚油酸或亚麻酸。

所述低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐是任何一种药剂学上所说的剂型。

所述剂型是指散剂或片剂或胶囊剂。

该产品作为防治高血脂药物或作为具有减肥降脂功能的食品、保健品、化妆品制备中的添加剂。

所述低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐胶囊作为治疗高血脂药物，口服使用，每天2～3次，每次0.25～0.5克，两个月为一疗程。

所述低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐作为食品、保健品添加剂，添加量为2～6克/公斤。

所述低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐作为化妆品添加剂，膏剂添加量为10～20克/公斤，粉膜剂或面膜添加量为20～30克/公斤。

本发明技术路线和原理如下：基于现有技术中存在的不足之处，针对生产技术问题，本发明采取尽可能简单的、反应条件温和的方法，将甲壳多糖溶胀为凝胶状，在搅拌情况下加入不饱和脂肪酸，由于脂肪酸是脂溶性物质，当油脂与多糖自组装形成纳米微粒时不饱和脂肪酸在表面张力和凡德华力的双重作用下依一定分子范围将溶胀的多糖长链切断，溶胶状态的甲壳多糖便形成“水包油”微粒，粒径约500～1000纳米之间，同时脂肪酸的羧端质子分离形成带负电荷离子并与多糖带正电荷的氨基通过静电引力连结形成盐类物质，从而保护了活性氨基上的活性电子。另外，不脱除保护基的目的是当低分子多糖物质进入体内时由脂多糖活性中心充当“信使”与细胞膜的活性通道传递识别信息，让水溶性多糖进入细胞里面发挥更大的生理作用。

本发明与现有技术相比，具有如下突出的优点和效果：

1、本发明低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐生物活性特别高，表现在不饱和脂肪酸对活性氨基中活性电子的保护，同时保护基在体内又充当“信使”的角色，使低分子量多糖的生物活性大大提高。又因为引入不饱和脂肪酸既能切断大分子链起到降解高分子多糖的作用，又能保护处于活性显露的多糖活性电子，同时为多糖物质在体内发挥强大生理功效提供强有力的生物保障。

2、采用该方法制备的低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐对治疗高血脂，包括胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白等治疗效果显著，对目前没有特效药物治疗的脂蛋白α都有很好的治疗效果。通过高血脂患者和亚健康(血脂偏高)者共157例临床两个月服用试验，降血脂总有效率达到79.8％，详见应用实施例1。

3、本发明的低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐使用范围极为广泛，降脂方式不拘一格，在食品中作为增稠剂使用；在保健品中作为减肥降脂功能食品；在化妆品中作为吸脂主要成份应用于面膜、膏剂或水剂，无论用于食品、保健品或化妆品都能起到一定的治疗或保健功效，详见应用实施例2、3。

4、本发明低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐无任何毒副作用，人体服用吸收后与血液中乳糜微粒或低密度脂质结合并提供细胞代谢合成应用，多例孕妇临床试验效果良好，降脂温和有效，没有任何毒副作用发生，比药品和药食同源食品安全可靠。与相同主治的药品、相同功能的保健食品、相同功效的化妆品比较，更明显地体现本发明产品可以为人们身心健康提供更有用的临床效果。

综合评价概述如表1：

表1

本发明制备不饱和脂肪酸盐	降脂药品	降脂保健食品	吸脂化妆品
				①、纯天然生成产物②、无任何毒副作用③、孕妇可用④、降脂后不会反弹⑤、不会产生药物间诱发副作用，可与任何药物食物合用⑥、具有广泛性调节作用，能协调免疫系统和内分泌系统关系。	①、化学合成或中草药制剂(成份复杂)②、肝、肾毒性较大③、孕妇禁用④、降脂后反弹⑤、产生药物间诱发副作用，特别是不能与葡萄柚汁合用⑥、不能起协调作用，往往伤及脏器器官。	①、纯天然产物②、无毒副作用③、孕妇慎用④、降脂不明显，即使有作用也必须大剂量必需终生食用，增加使用人群的经济负担。	①、天然产物成分较多②、无毒副作用③、孕妇慎用④、吸脂不明显，须大剂量使用，不经济。⑤、水剂面膜还没有吸脂功能⑥、目前市面还没有直接吸脂面膜。

5、本发明制备方法简单易行，条件温和，特别是降解过程中切割作用位点均匀、充分，避免基团置换或接枝反应的发生；引入的基团保护方法有效，使甲壳多糖活性电子受到保护，且免予脱保护。制备方法重复性很好，产品质量稳定、可控，原材料易得，价格适中，符合工业化生产的基本条件。

6、本发明制备方法符合高科技产业环保要求，没有任何废气、废水、废渣及噪音等污染人居环境的环节和问题。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明作进一步地详细说明，但实施方式并不仅限于此。

以下实施例制备过程中所有原材料都必须是国家批准的食品或药品材料，实验、中试的室温是指20～25℃。

实施例1：

一种低分子量甲壳多糖不饱和亚油酸盐的制备方法具体步骤及其工艺条件如下：

一、甲壳多糖凝胶的制备

将脱乙酰度70％、平均分子量为70万、细度在60目的甲壳多糖25克分散于500毫升水、13毫升冰乙酸的溶解液中，在温度55℃、速度140r/min磁力搅拌下溶解2小时，撤消温度，在室温下搅拌12小时，制得浓度为46.5mg/ml、粘度为2.45万mPa·s的甲壳多糖凝胶；

二、保护基反应及其自组装纳米粒的形成

在搅拌速度120r/min的甲壳多糖凝胶液中，加入4.9克亚油酸，搅拌1小时至反应物粘度为0.77万mPa·s的呈淡黄色乳浊状液；

三、低分子量糖脂的凝集

在上述反应体系中加入用13.3克碳酸钠溶解于130毫升水的稀溶液调PH值为6.8，然后再加入95％乙醇20毫升，搅拌反应30分钟，用普通滤纸过滤沥干；

四、产品的成形

在80℃远红外干燥装置中将过滤物干燥14小时，干燥后用150目高速粉碎机粉碎，制成低分子量甲壳多糖不饱和亚油酸盐。

将上述方法制备的低分子量甲壳多糖不饱和亚油酸盐1克溶解于100毫升体积百分比为1％的醋酸溶液中，制备3个测试样品，测定平均粘度为120mPa·s。

用高效液相色谱凝胶层析法(HPGPC)测定低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐的分子量，将7个标准T系列葡聚糖(Pharmacia，Uppsala，Sweden产品)和葡萄糖(分析纯)以及3个测试样品溶于0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.0，真空抽滤并脱气)中，制成重量百分比0.2％浓度，16,000r/min离心3分钟，标准T系列葡聚糖和葡萄糖的上清液用于作标准曲线，低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐3个样品的上清液用于测定分子量，每次进样20μl，流速为0.5ml/min，测定温度在23～25℃。检测结果重均分子量(Mw)为1.56万。

实施例2

一种低分子量甲壳多糖不饱和亚麻酸盐的制备方法具体步骤及其工艺条件如下：

一、甲壳多糖凝胶的制备

将脱乙酰度80％、平均分子量为25万、细度在80目的甲壳多糖10克分散于300毫升水、5毫升乳酸的溶解液中，在温度50℃、速度120r/min磁力搅拌下溶解2小时，撤消温度，在室温下搅拌13小时，制得浓度为31.8mg/ml、粘度为1.25万mPa·s的甲壳多糖凝胶；

二、保护基反应及其自组装纳米粒的形成

在搅拌速度110r/min的甲壳多糖凝胶液中，加入2.6克亚麻酸，搅拌1小时至反应物粘度为0.62万mPa·s的呈淡黄色乳浊状液；

三、低分子量糖脂的凝集

在上述反应体系中加入用9.3克碳酸氢钠溶解于65毫升水的稀溶液调PH值达7.0，再加入丙酮6毫升，搅拌30分钟，用普通滤纸过滤沥干；

四、产品的成形

在70℃远红外干燥装置中将过滤物干燥16小时，干燥后用120目高速粉碎机粉碎，制成其外观为淡黄色粉末状，无味无臭，溶于稀酸溶液，平均粘度(η)为120mPa·s，重均分子量(Mw)为1.56万，脱乙酰度(D.D.)为96％，其化学分子式为：

{[C24H43～47NO7](β1，4糖苷键)[C24H43～47NO7]}n(n＝20～30)的低分子量甲壳多糖不饱和亚麻酸盐。

实施例3

一种低分子量甲壳多糖不饱和亚麻酸盐的制备方法具体步骤及其工艺条件如下：

一、甲壳多糖凝胶的制备

将脱乙酰度85％、平均分子量为40万、细度在60目的甲壳多糖50克分散于1300毫升水、22毫升盐酸的溶解液中，在温度58℃、搅拌速度140r/min磁力下溶解2小时，撤消温度，在室温下搅拌16小时，制得浓度为36.4mg/ml、粘度为1.42万mPa·s的甲壳多糖凝胶；

二、保护基反应及其自组装纳米粒的形成

在搅拌速度130/min的甲壳多糖凝胶液中，加入12.6克亚麻酸，搅拌1.5小时至反应物粘度为0.71万mPa·s的呈淡黄色乳浊状液；

三、低分子量糖脂的凝集

在上述反应体系中加入用45.7克碳酸钠溶解于390毫升水的稀溶液调PH值为6.9，然后再加入丙酮30毫升，搅拌反应30分钟，用普通滤纸过滤沥干；

四、产品的成形

在65℃远红外干燥装置中将过滤物干燥19小时，干燥后用130目高速粉碎机粉碎，制成其外观为淡黄色粉末状，无味无臭，溶于稀酸溶液，平均粘度(η)为120mPa·s，重均分子量(Mw)为1.56万，脱乙酰度(D.D.)为96％，其化学分子式为：

{[C24H43～47NO7](β1，4糖苷键)[C24H43～47NO7]}n(n＝20～30)的低分子量甲壳多糖不饱和亚麻酸盐。

实施例4

一种低分子量甲壳多糖不饱和油酸盐的制备方法具体步骤及其工艺条件如下：

一、甲壳多糖凝胶的制备

将脱乙酰度90％、平均分子量为10万、细度在80目的甲壳多糖2000克分散于50升水、1000毫升冰乙酸的溶解液中，在温度52℃、搅拌速度150r/min磁力下溶解2小时，撤消温度，在室温下搅拌15小时，制得浓度为37.7mg/ml、粘度为1.25万mPa·s的甲壳多糖凝胶；

二、保护基反应及其自组装纳米粒的形成

在搅拌速度140/min的甲壳多糖凝胶液中，加入500克油酸，搅拌1.3小时至反应物粘度为0.66万mPa·s的呈淡黄色乳浊状液；

三、低分子量糖脂的凝集

在上述反应体系中加入用1700克碳酸氢钠溶解于14500毫升水的稀溶液调PH值为7.2，然后再加入95％乙醇2600毫升，搅拌反应30分钟，用普通滤纸过滤沥干；

四、产品的成形

在60℃远红外干燥装置中将过滤物干燥22小时，干燥后用100目高速粉碎机粉碎，制成其外观为淡黄色粉末状，无味无臭，溶于稀酸溶液，平均粘度(η)为120mPa·s，重均分子量(Mw)为1.56万，脱乙酰度(D.D.)为96％，其化学分子式为：

{[C24H43～47NO7](β1，4糖苷键)[C24H43～47NO7]}n(n＝20～30)的低分子量甲壳多糖不饱和油酸盐。

应用实施例1：

采用本发明制备的低分子量甲壳多糖不饱和油酸盐或低分子量甲壳多糖不饱和亚油酸盐或低分子量甲壳多糖不饱和亚麻酸盐制成剂量为0.25克的胶囊剂，提供给高血脂患者服用。高血脂是指人体血液中脂代谢障碍的临床指标，分析项目较多，作为体检通常检查血清总胆固醇(Chol)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)三个指标来判断身体血脂代谢情况。低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐胶囊口服使用，每天2～3次，每次0.25～0.5克。两个月为一疗程。通过157例，年龄最低25岁，最高78岁，男性97例，女性60例临床两个月服用试验，高血脂患者62例，亚健康(血脂偏高)者95例(其中孕妇17例)，血清总胆固醇(Chol)降低118例，占75.2％，甘油三酯(TG)降低136例，占86.6％，低密度脂蛋白(LDL-C)降低122例，占77.7％，降血脂总有效率达到79.8％。

发明人设立食疗对照组、服用洛伐他汀片和本发明低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐胶囊的试验组，测定了疗程前后血清三个指标变化情况，具体概述如表2。

表2

表2表明本发明低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐胶囊的整体疗效与目前临床应用效果好的洛伐他汀片接近，而降甘油三脂的效果优于洛伐他汀片。

应用实施例2：

采用本发明制备的低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐(低分子量甲壳多糖不饱和油酸盐或低分子量甲壳多糖不饱和亚油酸盐或低分子量甲壳多糖不饱和亚麻酸盐)作为食品添加剂的增稠剂使用，添加于肉类制品、米面制品及烘烤食品中，肉类制品添加6克/公斤，其它食品添加2克/公斤。作为食品添加剂应用于肉丸增稠，既减少肉类脂肪物质，又改善肉丸的弹性和口感，人们试食后95％赞扬，5％的人担心成本增加。

应用实施例3：

采用本发明制备的低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐(低分子量甲壳多糖不饱和油酸盐或低分子量甲壳多糖不饱和亚油酸盐或低分子量甲壳多糖不饱和亚麻酸盐)使其吸附皮肤代谢产物和分泌的脂类物质，保护皮肤干爽清洁而富有弹性。膏剂添加量10～20克/公斤，面膜粉添加量20～30克/公斤。无论化妆品制成膏剂、粉膜剂或面膜，90％以上用后感觉脸部绷紧明显，特别适用于脂溢性皮肤。

Claims (9)

1、一种低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐，其特征在于：其外观为淡黄色粉末状，无味无臭，溶于稀酸溶液，平均粘度为120mPa·s，重均分子量为1.56万，脱乙酰度为96％，其化学分子式为：

{[C24H43～47NO7](β1，4糖苷键)[C24H43～47NO7]}n(n＝20～30)。

2、一种低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐的制备方法，其特征在于该制备方法包括溶胀法制备甲壳多糖凝胶，其具体步骤及其工艺条件如下：

一、甲壳多糖凝胶的制备

将脱乙酰度70～90％、平均分子量为10～70万、细度在50～80目之间的甲壳多糖分散于酸性体系中，其中按重量百分比计，水为92～96％，冰乙酸、乳酸或盐酸为1.5～2.5％，在温度50～60℃、搅拌速度100～150r/min下溶解2～3小时，撤消温度，在室温下搅拌12～16小时，制得浓度为30～50mg/ml、粘度为1.1～2.5万mPa·s的甲壳多糖凝胶；

二、保护基反应及其自组装纳米粒的形成

在搅拌速度100～150r/min的甲壳多糖凝胶液中，加入按重量百分比计0.65～0.95％的不饱和脂肪酸，搅拌1～2小时至反应物粘度为0.6～0.8万mPa·s的呈淡黄色乳浊状液，当不饱和脂肪酸切断糖苷键后羧基与活性氨基静电吸附形成活性基团保护基并扭转为圆球状“水包油”纳米微粒，粒径在500～1000纳米之间；

三、低分子量糖脂的凝集

在上述反应体系中加入碱溶液，调整反应体系PH值至6.8～7.2之间，其中碱溶液是指按占反应体系重量百分比计2～4％的碳酸钠或碳酸氢钠溶解于按反应体系体积百分比计20～30％的水调配而成；然后再加入按反应体系体积百分比计2～5％的浓度95％乙醇或1～3％的丙酮，搅拌反应至少30分钟，再用普通滤纸过滤沥干；

四、产品的成形

在60～80℃干燥装置中将过滤物干燥12～24小时，干燥后用100～150目高速粉碎机粉碎，形成其外观为淡黄色粉末状，无味无臭，溶于稀酸溶液，平均粘度为120mPa·s，重均分子量为1.56万，脱乙酰度为96％，其化学分子式为：

{[C24H43～47NO7](β1，4糖苷键)[C24H43～47NO7]}n(n＝20～30)的低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐产品。

3、根据权利要求2所述的一种低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐的制备方法，其特征在于：所述不饱和脂肪酸是指油酸或亚油酸或亚麻酸。

4、根据权利要求2或3所述的一种低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐的制备方法，其特征在于：所述低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐是任何一种药剂学上所说的剂型。

5、根据权利要求4所述的一种低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐的制备方法，其特征在于：所述剂型是指散剂或片剂或胶囊剂。

6、根据权利要求2所述的一种低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐的制备方法制备的低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐的应用，其特征在于：该产品作为防治高血脂药物或作为具有减肥降脂功能的食品、保健品、化妆品制备中的添加剂。

7、根据权利要求6所述的一种低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐的应用，其特征在于：所述低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐胶囊作为治疗高血脂药物，口服使用，每天2～3次，每次0.25～0.5克，两个月为一疗程。

8、根据权利要求6所述的一种低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐的应用，其特征在于：所述低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐作为食品、保健品添加剂，添加量为2～6克/公斤。

9、根据权利要求6所述的一种低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐的应用，其特征在于：所述低分子量甲壳多糖不饱和脂肪酸盐作为化妆品添加剂，膏剂添加量为10～20克/公斤，粉膜剂或面膜添加量为20～30克/公斤。