CN101347410A

CN101347410A - 一种含十八基二甲基-4-哌啶磷酸盐的抗癌缓释注射剂

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Publication number: CN101347410A
Application number: CNA2008103022011A
Authority: CN
Inventors: 侯洪春; 刘慧敏
Original assignee: JINAN JIFU MEDICINE SCIENCE AND TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: JINAN JIFU MEDICINE SCIENCE AND TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2008-06-19
Filing date: 2008-06-19
Publication date: 2009-01-21

Abstract

一种含perifosine的抗癌缓释注射剂，由抗癌有效量的perifosine和两亲性嵌段共聚物水凝胶组成，perifosine部分或全部包裹在缓释微球中，在缓释剂注射剂中单独以缓释微球或微球和微粉的形式存在。两亲性嵌段共聚物选自PLGA－聚乙二醇－PLGA，缓释凝胶具有温度敏感的凝胶化特性，在低于体温的环境中为可流动性液体，在热血动物体内可自动转变成不流动的且可生物降解吸收的水不溶性凝胶，从而将药物在肿瘤局部缓慢释放，缓释微球有利于药物平稳缓慢释放，双重缓释有利于控制进入休眠期的肿瘤细胞，而在缓释凝胶中以微粉形式存在的药物有利于释放相对较快，有利于控制增值较快的细胞。该剂可与放疗粒子和化疗药物等合用。

Description

一种含十八基二甲基-4-哌啶磷酸盐的抗癌缓释注射剂

(一)技术领域

本发明涉及一种抗癌缓释注射剂，属于药物技术领域。具体而言，该发明涉及一种能将十八基二甲基-4-哌啶磷酸盐(perifosine)稳定释放于实体肿瘤局部的缓释凝胶制剂，主要为含缓释微球的缓双重释凝胶注射剂，该缓释凝胶制剂在室温下为水溶液，在热血动物体内可变为半固态或固态凝胶，缓释凝胶和缓释微球可将perifosine在肿瘤局部缓慢释放数月

(二)背景技术

作为新的抗癌药物，磷酸肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase，简称PI3K)抑制剂对多种肿瘤细胞的生长具有明显的抑制作用，然而，体内静脉应用对实体肿瘤的治疗效果并不确定，其根本问题在于传统化疗不能在肿瘤部位实现有效药物浓度并维持足够的作用时间。由于化疗的效果不仅取决于药物的敏感性，药物在肿瘤部位的作用时间和药物浓度更为重要，而常规化疗不仅不能实现以上目标，而低剂量的不适当的化疗不仅可诱发肿瘤细胞耐药性的产生，还并能刺激肿瘤的扩散及转移。

局部化疗可使药物在肿瘤部位的作用时间延长、药物浓度提高，从而实现常规化疗不能实现的目标，并能减少因低剂量化疗而诱发肿瘤细胞耐药性产生或刺激肿瘤扩散及转移的机会。

然而，目前可生物降解的缓控释制剂多用固态聚合物如聚乙醇酸、聚乳酸或其共聚物等作为缓释载体。由于此类高分子载体的疏水性能，这些聚合物在缓释药物制备过程中需要有机溶剂，如二氯甲烷，氯仿，乙酸或二甲基甲酰胺等。为去除有毒的有机溶剂，必须广泛干燥。因此，在大多数情况下，最终缓释制剂多为固体形状(例如，微球，片状或棒状)，需要较复杂的植入过程，且易造成组织创伤甚至肿瘤细胞种植或播散。另外，有机溶剂或高热过程常导致许多抗癌有效成份降解变性。

固体植入剂也不能有效覆盖肿瘤切除后的不规则瘤腔，因此对术后残留肿瘤细胞不能有效清除，不能有效控制术后复发。

因此，研究开发新的易于操作、环保、有效且适用广泛的缓释制剂便成为目前亟待解决的问题。

(三)发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种含抗癌药物的缓释剂，具体而言，是一种含抗癌药物的缓释植入剂。

缓释植入剂局部化疗可使药物在肿瘤部位的作用时间延长、药物浓度提高，从而实现常规化疗不能实现的目标，并能减少因低剂量化疗而诱发肿瘤细胞耐药性产生或刺激肿瘤扩散及转移的机会。

本发明针对现有技术的不足，还提供一种含抗癌药物的缓释注射剂。缓释注射剂可为缓释微球，也可为缓释凝胶注射剂。

该缓释凝胶制剂在室温下为水溶液，在热血动物体内可变为半固态或固态凝胶；流动性好不仅能使缓释剂有效覆盖肿瘤切除后的不规则瘤腔从而对术后残留肿瘤细胞有效清除，对术后止血及预防瘤细胞扩散也有较好的预防效果。抗癌药物从凝胶和微球中释放，双重控制不仅能延长药物释放时间还可维持较高的药物浓度，并能增加药物的敏感性，特别是对休眠期细胞；该抗癌药物缓释剂不仅具有好的释药特性，而且环保、刺激性小，应用方便，效果明显。

本发明发现当疏水性聚酯与亲水性聚乙二醇所形成的两亲性共聚物水溶液与一定量的抗癌药物混合后可形成具有缓释功能的注射用水凝胶，该水凝胶在5℃-25℃条件下为透明液态，在30℃-37℃左右可变为不流动的半固态或固态水凝胶。但此凝胶化温度受多种因素影响，其中主要是水凝胶中药物种类、药物含量、两亲性共聚物的分子量、两亲性共聚物中疏水性聚酯与亲水性聚乙二醇的重量比、聚乙二醇的分子量、聚酯中单体的重量比。

本发明还发现，含抗癌药物的水凝胶可将其中的抗癌药物缓慢释放，其释放的周期可为数日到数月，将抗癌药物包裹于缓释微球中，会使药物释放时间进一步延缓。而药物的释放主要还取决于所用两亲性共聚物的分子量、聚酯及聚乙二醇的分子量及其嵌段构型、两亲性共聚物中疏水性聚酯与亲水性聚乙二醇的重量比、抗癌药物的种类及含量。

经过大量实验研究发现，本发明缓释凝胶注射剂由以下成分组成：

A：抗癌药物 0.01-40％

B：两亲性共聚物 5％-40％

C：溶媒 60％-90％

D：调节剂 0-10％

以上为重量百分比

其中，抗癌药物选自十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸盐(Octadecyl-(1，1-dimethyl-4-piperidylio)phosphate，perifosine，D-21266)。

抗癌药物在缓释剂中的重量百分比从0.01％-40％，以0.1％-30％为优选，以1％-20％为最最优选。

抗癌药物在缓释剂注射剂中以缓释微球或微球和微粉的形式存在，即抗癌有效量的抗癌药物部分或全部包裹在缓释微球中，包裹在微球中的部分药物释放慢，有利于控制进入休眠期的肿瘤细胞，在缓释凝胶中以微粉形式存在的药物有利于释放相对较快，有利于控制增值较快的细胞，二者联合有利于药物平稳缓慢释放，作用于各期肿瘤细胞。

微球制备方法的制备有多种方法，如，但不限于，复乳法、O/W法、O/O法、相分离法、喷雾干燥法、低温喷雾提取法等。

1、复乳法(W/O/W法)：准确称取缓释辅料(PLGA等)或添加适量油相表面活性剂，溶于适量的有机溶剂中形成聚合物溶液。在高速搅拌或超声震荡下注入一定浓度的药物水溶液，均匀分散，形成W/O的初乳液，将此溶液在高速搅拌下或超声震荡下注入到外水相中，乳化数分钟(1～30min)，形成W/O/W乳液，在温和搅拌数小时(1～10hr)，挥发有机溶剂，固化微球。将微球悬浮液离心或过滤收集，并用二次蒸馏水洗涤数次后于37℃真空干燥或冷冻干燥后，粉末分装后在4℃冰箱内保存。

其中，表面活性剂可为，但不限于，司盘20；有机溶剂选自，如，但不限于，二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈等的一种或混合液；外水相可以是药物的饱和溶液，也可以添加0.1～10％PVA等乳化剂、1～10％氯化钠等盐类、0.001～2％吐温等表面活性剂改善成球性质。也可以加入助溶剂、明胶溶液等稳定剂提高药物包封率。

2、O/W法

准确称取缓释辅料(PLGA等)或添加适量油相表面活性剂，溶于适量的有机溶剂中形成聚合物溶液。对于不溶性药物可以用粉碎等方法将药物颗粒制备成细粉(微米级)，或者将药物投入上述聚合物溶液中，用超高速剪切机(1000～30000rpm)制备成均匀的混悬液。对于可溶性药物可以直接将药物投入上述聚合物溶液中溶解，搅拌或超声震荡形成均匀溶液

将上述混悬液或溶液在高速搅拌下或超声震荡下注入到外水相(可以是药物的饱和溶液，也可以添加PVA等乳化剂、氯化钠等盐类、吐温等表面活性剂改善成球性质)中，乳化数分钟(1～30min)，形成O/W乳液，在温和搅拌数小时(1～10hr)，挥发有机溶剂，固化微球。将微球悬浮液离心或过滤收集，并用二次蒸馏水洗涤数次后于37℃真空干燥或冷冻干燥后，粉末分装后在4℃冰箱内保存。

3、O/O法一：

将上述混悬液或溶液在高速搅拌下或超声震荡下注入到二氯甲烷饱和的二甲基硅油中，高速搅拌下或超声震荡数分钟(1～30min)后，投入到足够量的石油醚中，高速搅拌数分钟(1～30min)，固化微球后将微球悬浮液离心或过滤收集，洗涤数次除去外油相后，于37℃真空干燥或冷冻干燥后，粉末分装后在4℃冰箱内保存。

4、O/O法二：

将上述混悬液或溶液在高速搅拌下或超声震荡下注入到液体石蜡等惰性油相中，常温或加热搅拌或超声震荡数小时(1～30hr)，挥发有机溶剂，固化微球后，将微球悬浮液离心或过滤收集，洗涤数次除去外油相后，于37℃真空干燥或冷冻干燥，粉末分装后在4℃冰箱内保存。

5、相分离法：

在高速搅拌下或超声震荡下将足够量(1～10倍)的石油醚等有机溶剂缓慢加入到上述混悬液或溶液中，继续搅拌或超声震荡数十分钟(30～120min)，挥发有机溶剂，固化微球后，将微球悬浮液离心或过滤收集，洗涤数次除去外油相后，于37℃真空干燥或冷冻干燥，粉末分装后在4℃冰箱内保存。

6、喷雾干燥法：

准确称取缓释辅料(PLGA等)或添加适量油相表面活性剂，溶于适量的有机溶剂中形成聚合物溶液。对于不溶性药物可以用粉碎等方法将药物颗粒制备成细粉(微米级)，或者将药物投入上述聚合物溶液中，用超高速剪切机(1000～30000rpm)制备成均匀的混悬液。对于可溶性药物可以直接将药物投入上述聚合物溶液中溶解，搅拌或超声震荡形成均匀溶液。

将上述混悬液或溶液在搅拌下或超声震荡下用泵入喷雾干燥机中进行喷雾干燥。喷雾条件：进口温度50℃-70℃，出口温度约40℃。收集干燥后的微球粉末分装后在4℃冰箱内保存。

7、低温喷雾提取法：

将上述混悬液或溶液在搅拌下或超声震荡下用泵入喷雾干燥机中，通过喷雾的方法形成小液滴，在液氮中冷冻，用一低温有机共溶剂(例如乙醇)抽提溶解聚合物的有机溶剂而得到微球。收集干燥后的微球粉末分装后在4℃冰箱内保存。

缓释凝胶注射剂优选的一种方式是缓释凝胶含抗癌药物的缓释微球，缓释凝胶注射剂优选的另一种方式是缓释凝胶含抗癌药物和含抗癌药物的缓释微球，抗癌药物微粉与缓释微球中抗癌药物的重量比是任意的，可为19-1∶1-19，以9-1∶1-9为优选，5-1∶1-5为最优选。

微球的缓释辅料还可为，但不限于，聚乳酸、乳酸和乙醇酸的共聚物、聚苯丙生以及其组合物，另外还可加入释放调节剂，选自甘露醇、山梨醇、木糖醇、低聚糖、甲壳素、钾盐、钠盐、透明质酸、胶原蛋白、软骨素、明胶及白蛋白中的一种或其组合。

聚乳酸的分子量峰值为500-5000、5000-10000、10000-25000、25000-35000或30000-50000；乳酸和乙醇酸共聚物的分子量峰值为1000-10000、10000-25000、25000-40000或40000-60000；聚乳醇和聚乙醇酸的重量百分比为90∶10、70-80∶20-30、60-40∶40-60、75∶25、25∶75或50∶50；聚苯丙生中CPP∶SA的重量比为50-10∶90-50。

缓释凝胶注射剂的制备有多种方法，本发明缓释注射剂可用下列方法和步骤制备：

(1)先用溶媒配制两亲性共聚物水溶液(B+C)，然后加入一定量的抗癌药物(A)，溶解混匀后成为抗癌缓释凝胶注射剂。在-10℃或以下储存备用。应用前复溶、体内注射；此种方法较适合易于水解变性的药物。与抗癌药物的混合可在生产车间完成，也可将其单独分装运输储存，在临床应用前完成。在生产车间完成有利于医护人员操作。所制成的抗癌缓释凝胶注射剂在-10℃或以下可储存1-2年。若在临床应用前进行抗癌药物与可注射性水凝胶的混合，最好在注射前1到3天完成并储存在低温最好冷冻状态，使用前升温复溶后使用。

两亲性共聚物在注射性水凝胶中的含量可为5％到40％，但以10％到30％为优选，15％到28％为最优选。

(2)分别配制两亲性共聚物水溶液和抗癌药物，单独分装储存，注射前将两亲性共聚物水溶液和抗癌药物充分混匀后制成抗癌缓释凝胶注射剂，然后储存在低温或冷冻状态，使用前升温复溶后使用；

(3)先配制抗癌药物制成药物注射液，然后与一定量的两亲性共聚物混合成为抗癌缓释凝胶注射剂。在-10℃或以下储存备用。应用前复溶后体内注射；此种方法较适用于水溶性差但稳定性好的药物。与两亲性共聚物的混合可在生产车间完成，也可将其单独分装运输储存，在临床应用前完成。若在临床应用前进行混合，最好在注射前1到3天完成并储存在低温最好冷冻状态，使用前升温复溶后使用。

(4)分别配制抗癌药物水溶液和两亲性共聚物，单独分装储存，在注射前将抗癌药物水溶液和两亲性共聚物充分混匀后制成抗癌缓释凝胶注射剂，然后储存在低温或冷冻状态，使用前升温复溶后使用；

(5)将一定量的两亲性共聚物与一定量的抗癌药物混合，然后加溶媒制成抗癌缓释注射剂。储存在低温或冷冻状态，使用前升温复溶后使用；凝胶过程可在生产车间完成，也可将两亲性共聚物与抗癌药物可单独或混合后包装、运输、储存，在临床应用前加溶媒。若在临床应用前加溶媒，最好在注射前充分混合并储存在低温最好冷冻状态，使用前升温复溶后使用。

抗癌药物和缓释凝胶的包装及应用取决于生产工艺和临床应用要求。抗癌药物和缓释凝胶可单独或组(混)合包装。组合包装指单独生产并分装后储存在统一个包装盒内，而混合包装指抗癌药物均匀分散于缓释凝胶中。单独或组合包装与混合包装的不同之处是，当单独或组合包装时抗癌药物在体内注射前与缓释凝胶混合，而混合包装则是在生产过程中已将抗癌药物均匀分散于缓释凝胶中，用前只需在室温下升温后直接注射。

或

(6)将一定量的两亲性共聚物与一定量的抗癌药物混合，单独或混合后包装、运输、储存，在临床应用前加溶媒充分混合并储存在低温至冷冻状态，使用前升温复溶后使用。

以上方法中可加入0-15％的调节剂。

上述方法只是用于说明而非局限本发明。其中方法“(1)”为优选。

缓释注射剂的制备方法是任意的，可用若干种方法制备。然而药物的种类与含量以及两亲性共聚物的组成与单体的重量比是决定缓释注射剂的凝胶化温度和药物释放行为的关键因素，须经大量试验和创造性劳动才可获得。缓释凝胶的黏度为10cp-3000cp(5℃-30℃时)，优选100cp-2000cp(5℃-30℃时)，最优选100cp-1000cp(5℃-30℃时)。

适合于本发明的两亲性共聚物由聚酯及聚乙二醇组成，其中，

聚酯及聚乙二醇嵌段构型为：聚酯-聚乙二醇-聚酯或聚乙二醇-聚酯-聚乙二醇，以聚酯-聚乙二醇-聚酯为首选；聚酯可为，但不限于，聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)、外消旋聚乳酸(D，L-PLA)、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物(D，L-PLGA)、端羧基聚乳酸(PLA-COOH)、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA-COOH)中的任意一种或多种的共聚物。上述聚酯的平均分子量可为500-30000，其中以800-20000为优选，1000-10000为最优选。

聚酯及聚乙二醇嵌段共聚物可为，但不限于，聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸(PLA-PEG-PLA)、乙交酯丙交酯共聚物-聚乙二醇-乙交酯丙交酯共聚物(PLGA-PEG-PLGA)、聚乙二醇-聚乳酸-聚乙二醇(PEG-PLA-PEG)、聚乙二醇-乙交酯丙交酯共聚物-聚乙二醇(PEG-PLGA-PEG)，其中以PLGA-PEG-PLGA和PEG-PLGA-PEG为优选，以PLGA-PEG-PLGA为最优选。

适合于本发明的上述聚酯中，以PLA和PLGA为优选，以PLGA为最优选；当选用聚乳酸/乙醇酸共聚物(D，L-PLGA)时，乳酸与羟基乙酸的重量比对控制药物释放起到重要调节作用，二者的重量比可为15-1∶1；其中以9-1∶1为优选，以5-1∶1为最优选。换言之，乳酸(LA)与乙醇酸(GA)的共混比例可为95/5到60/40(重量)，优选为75/25到40/60(重量)，以75/25到50/50(重量)为最优选。共混的方法是任意的。乳酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)的分子量可为，但不限于，300-30,000，但以500-20,000为优选，以1000-10,000为最优选

两亲性共聚物的平均分子量可为500-28000，其中以600-16000为优选，1000-8000为最优选；两亲性共聚物中，聚酯与聚乙二醇的重量比可为9-6∶1-4，以9-7∶1-3为优选，以9-7∶1-2为最优选，换言之，两亲性共聚物中聚乙二醇的重量百分比可为5％-40％，以7％到30％为优选，以10％到25％为最优选，聚酯的重量百分比可为60％-95％，以70％到93％为优选，以75％到90％为最优选；

两亲性共聚物的凝胶化温度，即变为不流动凝胶的温度，可为30℃-37℃，以31℃-36.5℃为优选，以32℃-36℃为最优选。

聚乙二醇的平均分子量可为200-20000，其中以300-10000为优选，500-3000为最优选。

缓释凝胶系统中的溶媒为灭菌后可体内注射的液体，如，但不限于，蒸馏水、注射用水、生理冲液、细胞培养液，体液、组织液或各种盐配制的缓冲液，如，但不限于，磷酸盐缓冲液。溶媒的制备则取决于溶媒的种类，普通溶媒有市售，也可以自制，但必须严格按照有关标准操作。溶媒在缓释注射剂中的重量百分比为60％-90％，以70％-90％为优选，以75％-85％为最优选。

本发明还发现，当缓释凝胶中加入甘露醇、山梨醇等物质时，凝胶化温度和药物释放速度可以发生一定程度的变化，此类可调节药物释放速度或凝胶化温度的物质称为调节剂。缓释凝胶中可加入的调节剂可为，但不限于，各种糖或盐、羧甲基纤维素钠、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物质、吐温20、吐温40、吐温80、木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、壳聚糖、胶原蛋白、明胶、蛋白胶中的一种或其组合。调节剂可为其它药用辅料，如，但不限于，充填剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂、制(或致)孔剂、赋型剂或阻滞剂等。其在缓释凝胶中的重量比可为0.01％-15.0％，因具体需要而定。

缓释注射剂的给药途径取决于多种因素，为于原发或转移肿瘤所在部位获得有效浓度，药物可经多种途径给予，如皮下、腔内(如腹腔、胸腔及椎管内)、瘤内、瘤周注射或放置、选择性动脉注射、动脉栓塞、淋巴结内及骨髓内注射。以选择性动脉注射、腔内、瘤内、瘤周注射或放置为优选。

本发明可以用于制备治疗人及动物的各种肿瘤的药物制剂，主要为缓释注射剂或缓释植入剂，所指肿瘤包括起源于大脑、中枢神经系统、肾脏、肝、胆囊、头颈部、口腔、甲状腺、皮肤、黏膜、腺体、血管、骨组织、淋巴结、肺脏、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宫、卵巢、子宫内膜、子宫颈、前列腺、膀胱、结肠、直肠的原发或转移的癌或肉瘤或癌肉瘤。

上述脏器的肿瘤可为不同的病理类型，淋巴结的肿瘤分为何杰金淋巴结瘤和非何杰金氏淋巴瘤，肺癌包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌等，脑肿瘤包括胶质瘤等。然而常见的肿瘤包括脑肿瘤、脑胶质瘤、肾癌、肝癌、胆囊癌、胆管癌、头颈部肿瘤、口腔癌、甲状腺癌、皮肤癌、血管瘤、骨肉瘤、淋巴瘤、肺癌、胸腺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、眼睛的视网膜母细胞瘤、鼻咽癌、卵巢癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、前列腺癌、膀胱癌、结肠癌、直肠癌、睾丸癌等实体肿瘤。除上述原发肿瘤外，其在大脑、中枢神经系统、脊髓、脊柱、肾脏、肾上腺、肝、头颈部、口腔、甲状腺、皮肤、骨组织、淋巴结、肺脏、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宫、卵巢、子宫内膜、子宫颈、前列腺、膀胱、结肠、直肠等处的转移瘤也使本发明的适应症。

缓释注射剂可用于肿瘤切除术后，可有效控制残存瘤细胞，因而可控制术后复发；可用于各种原因不能手术切除的病人；可用于控制转移病灶，如淋巴结等；用于晚期病人；控制晚期并发症；与其抗癌药物或方法联合，如局部注射的抗癌药物与其它途径给药的化疗药物的联合、与放疗或免疫治疗的联合。

抗癌药物的临床应用剂量取决于病人的具体情况，包括年龄、体重、性别、肿瘤类型、肿瘤部位、肿瘤大小及数目、治疗经历。可从0.001到1000mg/kg体重，以0.1-500mg/kg为优选，0.5-300mg/kg为最优选。对于以临床可全身给药的原料药制成的缓释凝胶注射剂，其用药总量可为其静脉用药最大耐受量的数倍以上。

本发明所制的缓释注射剂中还可加入其它药用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼药、抗凝药、止血药等。

(四)具体实施方式

实施例1.

将4、2、1和0.5g两亲性嵌段共聚物(PLGA-PEG-PLGA)分别放入甲、乙、丙、丁四个容器中，然后分别向甲、乙、丙及丁四个容器中加注射用水6、8、9和9.5毫升，制得40％、20％、10％和5％水凝胶。

两亲性嵌段共聚物中聚乙二醇的分子量为800-1200，占两亲性嵌段共聚物重量的20％；乙交酯丙交酯共聚物中，乙交酯与丙交酯的摩尔比为6∶1。

微球的制备用复乳法或O/W法制备，缓释微球中的辅料为聚乳酸/乙醇酸共聚物，其中，乳酸(LA)与乙醇酸(GA)的共混比例可为75/25(W/W)，乳酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)的分子量可为15000-38000，共聚物与perifosine的重量比为9∶1。

实施例2.

测定实施例1中四种水凝胶的凝胶化温度，结果表明40％和20％的水凝胶的凝胶化温度分别为32(40％)和37.5但(20％)，而10％和5％的水凝胶的凝胶化温度12℃-38.5℃下未测出。

实施例3.

两亲性嵌段共聚物中聚乙二醇的分子量为1200-1600，占两亲性嵌段共聚物重量的15％；乙交酯丙交酯共聚物中，乙交酯与丙交酯的摩尔比为5∶1。

微球的制备用复乳法或O/W法制备，缓释微球中的辅料为聚乳酸/乙醇酸共聚物，其中，乳酸(LA)与乙醇酸(GA)的共混比例可为75/25(W/W)，乳酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)的分子量可为20000-35,000，共聚物与perifosine的重量比为6∶4。

实施例4.

测定实施例3中四种水凝胶的凝胶化温度，结果表明40％和20％的水凝胶的凝胶化温度分别为29℃(40％)和36℃(20％)，而10％和5％的水凝胶的凝胶化温度10℃-39℃下未测出。

以上试验结果表明，当凝胶水溶液浓度低于5％-10％时，凝胶化反应不稳定，黏度太低；当凝胶水溶液浓度高于30％-40％时，凝胶化反应受药物影响明显，且黏度太大，不利于注射

实施例5.

将2.5g两亲性嵌段共聚物(两亲性嵌段共聚物PLGA-PEG-PLGA中聚乙二醇的分子量为1500，占两亲性嵌段共聚物重量的15％；乙交酯丙交酯共聚物中，乙交酯与丙交酯的摩尔比为4∶1)放入容器中，然后加生理盐水7.5毫升，制得25％共聚物水凝胶。然后平均分装到5个分别盛有400、200、100、20和2mg perifosine的容器中，制得含20％、10％、5％、1％和0.1％perifosine的抗癌缓释凝胶注射剂。测得其凝胶化温度分别为37、35、34、31和29℃。

实施例6.

将2.5g两亲性嵌段共聚物(两亲性嵌段共聚物PLGA-PEG-PLGA中聚乙二醇的分子量为1600，占两亲性嵌段共聚物重量的15％；乙交酯丙交酯共聚物中，乙交酯与丙交酯的摩尔比为5∶1)放入容器中，然后加生理盐水7.5毫升，制得25％共聚物水凝胶。然后平均分装到5个分别盛有400、200、100、20和2mg perifosine的容器中，制得含20％、10％、5％、1％和0.1％perifosine的抗癌缓释凝胶注射剂。测得其凝胶化温度分别为37.5、36、33、32和30℃。

实施例7.

测定实施例5和6的不同浓度perifosine的小鼠体内(皮下)释药周期，结果发现20％、10％、5％、1％和0.1％perifosine体内释放的平均时间(以血液中可测到时间估计)分别为84、77、62、52和48天；20％、10％、5％、1％和0.1％perifosine的体内释放的平均时间分别为84、76、66、56和46天。

实施例8.

按照方法“(1)”制得的抗癌缓释凝胶注射剂应用较方便，结合实施例1-6制得多种抗癌缓释凝胶注射剂，经测定凝胶化温度和体内释放发现，优选的缓释凝胶注射剂中嵌段共聚物水溶液的浓度及药物在凝胶注射剂重量百分比范围如下：

10％-30％的嵌段共聚物水溶液，含0.005％-30％perifosine；或

10％-30％的嵌段共聚物水溶液，含0.05％-30％perifosine。

上述抗癌缓释凝胶注射剂的凝胶化温度为31℃-37℃，药物以微粉的形式分布于凝胶中，动物体内释放时间为2-8周。当凝胶水溶液浓度低于5％-12％时，凝胶化反应不稳定，黏度太低；当凝胶水溶液浓度高于30％-40％时，凝胶化反应受药物影响明显，且黏度太大，不利于注射。

以上两亲性嵌段共聚物为乙交酯丙交酯共聚物-聚乙二醇-乙交酯丙交酯共聚物，其中聚乙二醇的分子量为1000-1600，占两亲性嵌段共聚物重量的15-25％；乙交酯丙交酯共聚物中，乙交酯与丙交酯的摩尔比为6-9∶1。

实施例9.

按照方法“(1)”制得的抗癌缓释凝胶注射剂应用较方便，结合实施例1-6制得多种缓释凝胶注射剂，经测定凝胶化温度和体内释放发现，优选的缓释凝胶注射剂中嵌段共聚物水溶液的浓度及药物在凝胶注射剂重量百分比范围还包括列之一：

20％-25％的嵌段共聚物水溶液，含0.5％-20％perifosine；或

20％-26％的嵌段共聚物水溶液，含0.5％-10％perifosine。

上述抗癌缓释凝胶注射剂中的药物为缓释微球，凝胶化温度为32℃-38.5℃，动物体内释放时间为3-9周。当凝胶水溶液浓度低于5％-12％时，凝胶化反应不稳定，黏度太低；当凝胶水溶液浓度高于30％-40％时，凝胶化反应受药物影响明显，且黏度太大，不利于注射。

以上两亲性嵌段共聚物为乙交酯丙交酯共聚物-聚乙二醇-乙交酯丙交酯共聚物，其中聚乙二醇的分子量为1000-1600，占两亲性嵌段共聚物重量的20％；乙交酯丙交酯共聚物中，乙交酯与丙交酯的摩尔比为4-9∶1；

缓释微球中的辅料为聚乳酸/乙醇酸共聚物，其中，乳酸(LA)与乙醇酸(GA)的共混比例可为75/25(W/W)，乳酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)的分子量可为15000-38000。

实施例10

按照方法“(1)”制得的抗癌缓释凝胶注射剂应用较方便，结合实施例1-6制得多种抗癌缓释凝胶注射剂，经测定凝胶化温度和体内释放发现，优选的抗癌缓释凝胶注射剂还包括如下含药浓度、成分组成和重量百分比：

(1)1％perifosine，由10mgperifosine、300mg两亲性嵌段共聚物和700ul注射用水配制而成；

(2)5％perifosine，由50mgperifosine、280mg两亲性嵌段共聚物和720ul蒸馏水配制而成；

(3)10％perifosine，由100mgperifosine、250mg两亲性嵌段共聚物和750ul生理盐水配制而成；

(4)2％perifosine，由20mgperifosine、260mg两亲性嵌段共聚物和740ul生理盐水配制而成；

(5)15％perifosine，由150mgperifosine、260mg两亲性嵌段共聚物和740ul磷酸盐缓冲液配制而成；

(6)20％perifosine，由200mgperifosine、250mg两亲性嵌段共聚物、60mg山梨醇、690ul生理盐水配制而成。

(7)25％perifosine，由250mgperifosine、230mg两亲性嵌段共聚物、70mg甘露醇和700ul生理盐水配制而成；

(8)30％perifosine，由300mgperifosine、220mg两亲性嵌段共聚物、20mg甘露醇和760uml磷酸盐缓冲液配制而成；或

上述抗癌缓释凝胶注射剂中的药物为药物微粉和缓释微球，凝胶化温度为31℃-37℃，动物体内释放时间为4-13周。当凝胶水溶液浓度低于5％-12％时，凝胶化反应不稳定，黏度太低；当凝胶水溶液浓度高于30％-40％时，凝胶化反应受药物影响明显，且黏度太大，不利于注射。

以上两亲性嵌段共聚物为乙交酯丙交酯共聚物-聚乙二醇-乙交酯丙交酯共聚物，其中聚乙二醇的分子量为1200-1600，占两亲性嵌段共聚物重量的18％；乙交酯丙交酯共聚物中，乙交酯与丙交酯的摩尔比为3-6∶1。

抗癌缓释凝胶注射剂的治疗效果可通过如下试验和治疗实施例进一步说明：

实施例11

按照方法“(1)”制得的抗癌缓释凝胶注射剂应用较方便，结合实施例1-6制得多种抗癌缓释凝胶注射剂，经测定凝胶化温度和体内释放发现，优选的抗癌缓释凝胶注射剂还包括下列之一：

(1)0.05％perifosine，由1mgperifosine、300mg两亲性嵌段共聚物和700ul注射用水配制而成；

(2)1％perifosine，由10mgperifosine、280mg两亲性嵌段共聚物和720ul蒸馏水配制而成

(3)2％perifosine，由20mgperifosine、250mg两亲性嵌段共聚物和750ul生理盐水配制而成；

(4)4％perifosine，由40mgperifosine、230mg两亲性嵌段共聚物和770ul注射用水配制而成；

(5)10％perifosine，由100mgperifosine、220mg两亲性嵌段共聚物和780ul磷酸盐缓冲液配制而成；

(6)20％perifosine，由200mg perifosine、260mg两亲性嵌段共聚物和740ul生理盐水配制而成；

(7)0.5％perifosine，由5mg perifosine、280mg两亲性嵌段共聚物、200mg甘露醇和700ul注射用水配制而成；

(8)1％perifosine，由10m perifosine、260mg两亲性嵌段共聚物、30mg甘露醇、710ul蒸馏水配制而成；

(9)5％perifosine，由50mg perifosine、230mg两亲性嵌段共聚物、40mg甘露醇和730ul生理盐水配制而成；

(10)10％perifosine，由100mg perifosine、200mg两亲性嵌段共聚物、50mg甘露醇和750ul注射用水配制而成；

(11)8％perifosine，由80mg perifosine、260mg两亲性嵌段共聚物和740ul磷酸盐缓冲液配制而成；

(12)1％perifosine，由10mg perifosine、200mg两亲性嵌段共聚物、20mg山梨醇和780ul生理盐水配制而成；

(13)1.25％perifosine，由12.5mg perifosine、230mg两亲性嵌段共聚物、70mg甘露醇和700ul生理盐水配制而成；

(14)5％perifosine，由50mg perifosine、200mg两亲性嵌段共聚物、10mg甘露醇和790ul注射用水配制而成；

(15)10％perifosine，由100mg perifosine、220mg两亲性嵌段共聚物和780ul磷酸盐缓冲液配制而成；

(16)15％perifosine，由15mg perifosine、200mg两亲性嵌段共聚物、10mg山梨醇和790ul生理盐水配制而成。

(17)20％perifosine，由200mg perifosine、230mg两亲性嵌段共聚物、90mg甘露醇和780ul生理盐水配制而成；

(18)25％perifosine，由250mg perifosine、230mg两亲性嵌段共聚物、20mg甘露醇和750ul注射用水配制而成；

(19)30％perifosine，由300mg perifosine、220mg两亲性嵌段共聚物、20mg甘露醇和760uml磷酸盐缓冲液配制而成；或

(20)35％perifosine，由350mg perifosine、250mg两亲性嵌段共聚物、60mg山梨醇、690ul生理盐水配制而成。

上述抗癌缓释凝胶注射剂中的药物为药物微粉和缓释微球，其凝胶化温度为31℃-37℃，动物体内释放时间为4-16周。当凝胶水溶液浓度低于5％-12％时，凝胶化反应不稳定，黏度太低；当凝胶水溶液浓度高于30％-40％时，凝胶化反应受药物影响明显，且黏度太大，不利于注射。

以上两亲性嵌段共聚物为乙交酯丙交酯共聚物-聚乙二醇-乙交酯丙交酯共聚物，其中聚乙二醇的分子量为1300-1600，占两亲性嵌段共聚物重量的20％；乙交酯丙交酯共聚物中，乙交酯与丙交酯的摩尔比为4-6∶1。

实施例12

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个乳腺癌肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长至1厘米直径后将其分成4组，分别瘤内注射0.1ml实施例5中的含20％、10％、0.1％和0％perifosine的抗癌缓释凝胶注射剂。每天测定肿瘤体积，结果表明，perifosine抗癌缓释凝胶注射剂可显著抑制肿瘤生长，其抑瘤作用呈明显剂量依赖性。30％浓度仍然安全。瘤内注射缓释注射剂操作最方便、容易。

实施例13

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个前列腺肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长至0.5厘米直径后将其分成4组，分别瘤内注射0.5ml实施例5中的含20％、10％、0.1％和0％perifosine的抗癌缓释凝胶注射剂。每天测定肿瘤体积，结果表明，perifosine抗癌缓释凝胶注射剂可显著抑制肿瘤生长，其抑瘤作用呈明显剂量依赖性。20％浓度仍然安全。瘤内注射缓释注射剂的效果好、操作最方便、容易。不仅疗效好，毒副作用也小。

实施例14、含抗癌药物缓释注射剂的体内抑瘤作用

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个卵巢癌肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长20天后将其分为以下7组(见表1)。药物选自实施例10，经瘤内注射。剂量均为0.1ml，相当于5-25mg/只。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表1)。

表1

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm³)	P值
试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm³)	P值	1(5)	对照	54±10
2(5)	5％perifosine	48±8.2	＜0.05	1(5)	对照	54±10
2(5)	5％perifosine	48±8.2	＜0.05	3(5)	10％perifosine	38±6.8	＜0.01
4(5)	15％perifosine	30±5.0	＜0.01	3(5)	10％perifosine	38±6.8	＜0.01
4(5)	15％perifosine	30±5.0	＜0.01	5(5)	20％perifosine	26±6.0	＜0.001
6(5)	25％perifosine	20±4.0	＜0.001	5(5)	20％perifosine	26±6.0	＜0.001
6(5)	25％perifosine	20±4.0	＜0.001	7(5)	30％perifosine	18±3.2	＜0.001

以上结果表明，抗癌药物缓释注射剂在该浓度下对卵巢癌肿瘤肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，且呈量效关系。

实施例15、抗癌药物缓释注射剂的抑瘤作用

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个肝肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长21天后将其分为以下6组(见表2)。缓释注射剂选自实施例10，经瘤内放置。抗癌药物剂量均为0.2ml/只，相当于0.2mg-10mg/只。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果(见表2)。

表2

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm³)	P值
试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm³)	P值	1(5)	对照	50±12
2(5)	1％perifosine	48±9	＜0.05	1(5)	对照	50±12
2(5)	1％perifosine	48±9	＜0.05	3(5)	4％perifosine	36±8.6	＜0.001
4(5)	10％perifosine	28±6.6	＜0.001	3(5)	4％perifosine	36±8.6	＜0.001
4(5)	10％perifosine	28±6.6	＜0.001	5(5)	20％perifosine	24±4.6	＜0.001
6(6)	30％perifosine	16±3.6	＜0.001	5(5)	20％perifosine	24±4.6	＜0.001

以上结果表明，所用抗癌药物缓释注射剂在该浓度时对肝癌肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，且呈剂量依赖性。

实施例16、抗癌药物缓释注射剂的抑瘤作用

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵肺癌肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长21天后将其分为以下6组(见表3)。缓释注射剂选自实施例10，经瘤内放置。抗癌药物剂量均为0.5ml/只，相当于0.5mg-35mg/只。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较治疗效果，按照下式计算肿瘤抑制率：

肿瘤抑制率(％)＝((对照组肿瘤体积-治疗组肿瘤体积)/对照组肿瘤体积)×100(％)。

表3

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm³)	P值
试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm³)	P值	1(5)	对照	54±10
2(5)	1％perifosine	44±8.0	＜0.05	1(5)	对照	54±10
2(5)	1％perifosine	44±8.0	＜0.05	3(5)	4％perifosine	38±6.6	＜0.001
4(5)	10％perifosine	30±4.6	＜0.001	3(5)	4％perifosine	38±6.6	＜0.001
4(5)	10％perifosine	30±4.6	＜0.001	5(5)	20％perifosine	24±4.2	＜0.001
6(6)	30％perifosine	22±3.8	＜0.001	5(5)	20％perifosine	24±4.2	＜0.001

实施例17 抗癌药物缓释注射剂的抑瘤作用

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵食道癌肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长21天后将其分为以下6组(见表4)。缓释注射剂选自实施例11，经瘤内放置。抗癌药物剂量均为0.2ml/只，相当于2mg-20mg/只。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较肿瘤抑制率(见表4)。

表4

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm³)	P值
试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm³)	P值	1(5)	对照	52±10
2(5)	1％perifosine	46±8	＜0.05	1(5)	对照	52±10
2(5)	1％perifosine	46±8	＜0.05	3(5)	4％perifosine	40±6.6	＜0.001
4(5)	10％perifosine	36±5.8	＜0.001	3(5)	4％perifosine	40±6.6	＜0.001
4(5)	10％perifosine	36±5.8	＜0.001	5(5)	20％perifosine	30±4.4	＜0.001

6(6)

30％perifosine

26±3.8

＜0.001

实施例18、抗癌药物缓释剂的抑瘤作用

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个宫颈癌细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长21天后将其分为以下6组(见表5)。第一组为对照，第2到6组为治疗组，缓释注射剂选自实施例11，经瘤内放置。抗癌药物剂量均为0.2ml/只，相当于2mg-20mg/只。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较肿瘤抑制率(见表5)。

表5

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm³)	P值
试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm³)	P值	1(5)	对照	48±10
2(5)	1％perifosine	42±8.4	＜0.05	1(5)	对照	48±10
2(5)	1％perifosine	42±8.4	＜0.05	3(5)	4％perifosine	36±6.6	＜0.001
4(5)	10％perifosine	32±4.6	＜0.001	3(5)	4％perifosine	36±6.6	＜0.001
4(5)	10％perifosine	32±4.6	＜0.001	5(5)	20％perifosine	22±4.0	＜0.001
6(6)	30％perifosine	18±3.8	＜0.001	5(5)	20％perifosine	22±4.0	＜0.001

实施例19、抗癌药物缓释剂的抑瘤作用

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个胃癌肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长21天后将其分为以下6组(见表6)。第一组为对照，第2到6组为治疗组，缓释注射剂选自实施例11，经瘤内放置。抗癌药物剂量均为0.25ml/只，相当于12.5mg-20mg/只。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较肿瘤抑制率(见表6)。

表6

试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm³)	P值
试验组(n)	所受治疗	肿瘤体积(cm³)	P值	1(5)	对照	44±10
2(5)	1％perifosine	40±8.2	＞0.05	1(5)	对照	44±10
2(5)	1％perifosine	40±8.2	＞0.05	3(5)	4％perifosine	38±6.6	＜0.05
4(5)	10％perifosine	28±6.0	＜0.01	3(5)	4％perifosine	38±6.6	＜0.05
4(5)	10％perifosine	28±6.0	＜0.01	5(5)	20％perifosine	22±5.0	＜0.001

6(6)

30％perifosine

16±4.4

＜0.001

实施例20、抗癌药物剂缓释剂的抑瘤作用

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个直肠癌肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长21天后将其分为以下6组(见表7)。第一组为对照，第2到6组为治疗组，缓释注射剂选自实施例8(微粉)和9(微球)，经瘤内放置。抗癌药物剂量均为0.25ml/只，相当于12.5mg-20mg/只。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较肿瘤抑制率(见表7)。

表7

试验组(n)	所受治疗	肿瘤抑制率(％)	P值
试验组(n)	所受治疗	肿瘤抑制率(％)	P值	1(5)	对照	-
2(5)	2％perifosine(微粉)	38	＜0.05	1(5)	对照	-
2(5)	2％perifosine(微粉)	38	＜0.05	3(5)	2％perifosine(微球)	42	＜0.01
4(5)	5％perifosine(微粉)	52	＜0.05	3(5)	2％perifosine(微球)	42	＜0.01
4(5)	5％perifosine(微粉)	52	＜0.05	5(5)	5％perifosine(微球)	64	＜0.01
6(5)	10％perifosine(微粉)	60	＜0.01	5(5)	5％perifosine(微球)	64	＜0.01
6(5)	10％perifosine(微粉)	60	＜0.01	7(5)	10％perifosine(微球)	72	＜0.01
8(5)	15％perifosine(微粉)	70	＜0.01	7(5)	10％perifosine(微球)	72	＜0.01
8(5)	15％perifosine(微粉)	70	＜0.01	9(5)	15％perifosine(微球)	78	＜0.01
10(5)	20％perifosine(微粉)	78	＜0.01	9(5)	15％perifosine(微球)	78	＜0.01
10(5)	20％perifosine(微粉)	78	＜0.01	11(5)	20％perifosine(微球)	84	＜0.001

以上结果表明，所用抗癌药物缓释凝胶注射剂在该浓度时对多胃癌肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，其中微球较微粉效果更好。

实施例21、抗癌药物缓释剂的抑瘤作用

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个乳腺癌肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长21天后将其分为以下11组(见表8)。第一组为对照，第2到11组为治疗组，缓释注射来自实施例8(微粉)和9(微球)和10(微粉和微球)，经瘤内放置。抗癌药物剂量均为0.25ml/只，相当于12.5mg-20mg/只。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较肿瘤抑制率(见表8)。

表8

试验组(n)

所受治疗

肿瘤抑制率(％)

P值

1(5)	对照	-
1(5)	对照	-		2(5)	5％perifosine(微粉)	46	＜0.05
3(5)	5％perifosine(微球)	54	＜0.05	2(5)	5％perifosine(微粉)	46	＜0.05
3(5)	5％perifosine(微球)	54	＜0.05	4(5)	5％perifosine(微粉和微球)	62	＜0.01
5(5)	10％perifosine(微粉)	56	＜0.05	4(5)	5％perifosine(微粉和微球)	62	＜0.01
5(5)	10％perifosine(微粉)	56	＜0.05	6(5)	10％perifosine(微球)	64	＜0.01
7(5)	10％perifosine(微粉和微球)	72	＜0.001	6(5)	10％perifosine(微球)	64	＜0.01
7(5)	10％perifosine(微粉和微球)	72	＜0.001	8(5)	20％perifosine(微粉)	68	＜0.01
9(5)	20％perifosine(微球)	76	＜0.01	8(5)	20％perifosine(微粉)	68	＜0.01
9(5)	20％perifosine(微球)	76	＜0.01	10(5)	20％perifosine(微粉和微球)	84	＜0.001

以上结果表明，所用抗癌药物缓释凝胶注射剂在该浓度时对肾癌肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用，其中微球较微粉效果较更好，微粉和微球最好。

实施例22、抗癌药物缓释剂的抑瘤作用

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个乳腺癌肿瘤细胞皮下注射于其季肋部，待肿瘤生长21天后将其分为以下11组(见表9)。第一组为对照，第2到11组为治疗组，缓释注射来自实施例8(微粉)和9(微球)和10(微粉和微球)，经瘤内放置。抗癌药物剂量均为0.25ml/只，相当于12.5mg-20mg/只。治疗后第30天测量肿瘤体积大小，比较肿瘤抑制率(见表9)。

表9

试验组(n)	所受治疗	肿瘤抑制率(％)	P值
试验组(n)	所受治疗	肿瘤抑制率(％)	P值	1(5)	对照	-
2(5)	1％perifosine(微粉)	28	＜0.05	1(5)	对照	-
2(5)	1％perifosine(微粉)	28	＜0.05	3(5)	1％perifosine(微球)	32	＜0.05
4(5)	1％perifosine(微粉和微球)	40	＜0.01	3(5)	1％perifosine(微球)	32	＜0.05
4(5)	1％perifosine(微粉和微球)	40	＜0.01	5(5)	5％perifosine(微粉)	42	＜0.05
6(5)	5％perifosine(微球)	48	＜0.01	5(5)	5％perifosine(微粉)	42	＜0.05
6(5)	5％perifosine(微球)	48	＜0.01	7(5)	5％perifosine(微粉和微球)	56	＜0.001
8(5)	15％perifosine(微粉)	66	＜0.01	7(5)	5％perifosine(微粉和微球)	56	＜0.001
8(5)	15％perifosine(微粉)	66	＜0.01	9(5)	15％perifosine(微球)	76	＜0.01
10(5)	15％perifosine(微粉和微球)	84	＜0.001	9(5)	15％perifosine(微球)	76	＜0.01

进一步研究发现，所用抗癌药物缓释凝胶注射剂对直肠结肠癌、卵巢癌、脑肿瘤、膀胱癌等肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用

总之，所用抗癌药物缓释注射剂对多种肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用。其对肿瘤的抑制作用呈明显的量效关系。

上述实施例及以下实施例只是对本发明作进一步说明，并非对其内容和使用作任何限制。

本发明所公开和保护的内容见权利要求。

Claims

1.一种含十八基二甲基-4-哌啶磷酸盐(perifosine)的抗癌缓释注射剂，其特征在于缓释注射剂含以下组成成分：

A：十八基二甲基-4-哌啶磷酸盐 0.01-40％

B：两亲性共聚物 5％-40％

C：溶媒 60％-90％

D：调节剂 0-15％

以上为重量百分比，

其中，perifosine在缓释剂注射剂中以缓释微球或微球和微粉的形式存在，即抗癌药物部分或全部包裹在缓释微球中，包裹在微球中的部分药物释放慢，有利于控制进入休眠期的肿瘤细胞，在缓释凝胶中以微粉形式存在的药物有利于释放相对较快，有利于控制增值较快的细胞，二者联合有利于药物平稳缓慢释放；

溶媒为灭菌后可体内注射的水溶液，选自蒸馏水、注射用水、生理冲液、细胞培养液，体液、组织液、缓冲液、磷酸盐缓冲液。其中，溶媒在两亲性嵌段共聚物与溶媒组成的水凝胶中的百分比为60％-99％；

调节剂选自糖、盐、羧甲基纤维素钠、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物质、吐温20、吐温40、吐温80、木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、壳聚糖、胶原蛋白、明胶、蛋白胶中的一种或其组合。

2.根据权利要求1所述之抗癌缓释注射剂，其特征在于两亲性共聚物为聚酯及聚乙二醇的嵌段结构，选自聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸、乙交酯丙交酯共聚物-聚乙二醇-乙交酯丙交酯共聚物、聚乙二醇-聚乳酸-聚乙二醇或聚乙二醇-乙交酯丙交酯共聚物-聚乙二醇。

3.根据权利要求1或2所述之抗癌缓释注射剂，其特征在于两亲性嵌段共聚物的平均分子量选自500-5000、5000-20000、20000-30000。

4.根据权利要求1或2所述之抗癌缓释注射剂，其特征在于乙交酯丙交酯共聚物中乙交酯与丙交酯的摩尔比选自10-15∶1、5-10∶1、或1-5∶1。

5.根据权利要求1或2所述之抗癌缓释注射剂，其特征在于聚乙二醇的平均分子量可为200-20000。

6.根据权利要求1或5所述之抗癌缓释注射剂，其特征在于所述抗癌缓释注射剂的制备方法选自下列之一：

(1)先用溶媒配制两亲性共聚物水溶液，然后加入一定量的抗癌药物，溶解混匀后成为抗癌缓释凝胶注射剂。在-10C或以下储存备用。应用前复溶、体内注射；

(3)先配制抗癌药物制成药物注射液，然后与一定量的两亲性共聚物混合成为抗癌缓释凝胶注射剂。在-10C或以下储存备用。应用前复溶后体内注射；

(5)将一定量的两亲性共聚物与一定量的抗癌药物混合，然后加溶媒制成抗癌缓释注射剂。储存在低温或冷冻状态，使用前升温复溶后使用；或

7.根据权利要求1所述之抗癌缓释注射剂，其特征在于所述抗癌缓释注射剂含有下列成分之一：

(1)1％ perifosine，由10mgperifosine、300mg两亲性嵌段共聚物和700ul注射用水配制而成；

上述抗癌缓释凝胶注射剂中的药物为药物微粉和缓释微球，凝胶化温度为32℃-38.5℃，动物体内释放时间为4-14周；

8.根据权利要求1所述之抗癌缓释注射剂，其特征在于所述抗癌缓释注射剂含有下列成分之一：

(1)0.05％perifosine，由1mg perifosine、300mg两亲性嵌段共聚物和700ul注射用水配制而成；

(2)1％perifosine，由10mg perifosine、280mg两亲性嵌段共聚物和720ul蒸馏水配制而成；

(3)2％perifosine，由20mg perifosine、250mg两亲性嵌段共聚物和750ul生理盐水配制而成；

(4)4％perifosine，由40mg perifosine、230mg两亲性嵌段共聚物和770ul注射用水配制而成；

(5)10％perifosine，由100mg perifosine、220mg两亲性嵌段共聚物和780ul磷酸盐缓冲液配制而成；

(14)5％perifosine，由50mg perifosine、200两亲性嵌段共聚物、10mg甘露醇和790ul注射用水配制而成；

(16)10％perifosine，由15mg perifosine、200mg两亲性嵌段共聚物、10mg山梨醇和790ul生理盐水配制而成。

上述抗癌缓释凝胶注射剂中的药物为药物微粉和缓释微球，其凝胶化温度为33℃-37℃，动物体内释放时间为4-16周；缓释微球中的辅料为聚乳酸/乙醇酸共聚物，其中，乳酸(LA)与乙醇酸(GA)的共混比例可为75/25(W/W)，乳酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)的分子量可为15000-38000；两亲性嵌段共聚物为乙交酯丙交酯共聚物-聚乙二醇-乙交酯丙交酯共聚物，其中聚乙二醇的分子量为1300-1600，占两亲性嵌段共聚物重量的20％；乙交酯丙交酯共聚物中，乙交酯与丙交酯的摩尔比为4-6∶1。

9.根据权利要求1所述之抗癌缓释凝胶注射剂，其特征在于所述抗癌缓释注射经皮下、腔内、腹腔、胸腔、椎管内、瘤内、瘤周、动脉、淋巴结内及骨髓内注射

10.根据权利要求1所述之抗癌缓释注射剂，其特征在于所述缓释注射剂用于制备治疗起源于大脑、中枢神经系统、肾脏、肝、胆囊、头颈部、口腔、甲状腺、皮肤、黏膜、腺体、血管、骨组织、淋巴结、肺脏、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宫、卵巢、子宫内膜、子宫颈、前列腺、膀胱、结肠、直肠的原发或转移的癌或肉瘤或癌肉瘤的抗癌药物制剂。