CN101264331B

CN101264331B - 中药杏仁的新用途

Info

Publication number: CN101264331B
Application number: CN2008100330631A
Authority: CN
Inventors: 陈宇光; 李静; 何佳; 沈彦萍
Original assignee: University of Shanghai for Science and Technology
Current assignee: University of Shanghai for Science and Technology
Priority date: 2008-01-24
Filing date: 2008-01-24
Publication date: 2010-06-02
Anticipated expiration: 2028-01-24
Also published as: CN101264331A

Abstract

本发明涉及一种杏仁的新用途，即杏仁作为壳聚糖包覆胰岛素脂质体Ch-Ins-Lipo肠道吸收促进剂的应用以及作为壳聚糖包覆胰岛素脂质体Ch-Ins-Lipo药物缓释剂的应用。杏仁能明显促进该药物的口服肠道吸收，提高其药物的生物利用度，并且能明显延长胰岛素的药效时间，缓释作用明显，药效发挥时间超过三周。

Description

中药杏仁的新用途

技术领域

本发明涉及中药杏仁作为肠道吸收促进剂和药物缓释剂的新用途，特别是杏仁在壳聚糖包覆胰岛素脂质体给药系统肠道吸收促进剂和药物缓释剂的应用。

背景技术

胰岛素是脊椎动物胰脏β细胞分泌的一种多肽激素，是胰岛素依赖型糖尿病人每日必用药物。由于胰岛素口服易被胃肠道的低pH值和酶破坏，且它的小肠黏膜透过率低，故目前只有注射剂用于临床。

作为一种更安全、更方便的给药途径，口服胰岛素的开发始终受到了广泛的关注。为了克服影响胰岛素口服吸收的各种因素，研究者在胰岛素的剂型方面进行了大量的工作。其中最为普遍、最为有效的方法，就是将胰岛素微囊或微粒化处理。由于脂质体在其他很多药物上已有许多成功的经验，并且相关的制备技术也较为成熟，因此脂质体形式始终受到研究者们的广泛关注。但是，研究结果发现，仅仅依靠脂质体的包裹，胰岛素口服给药后吸收效率仍然相当低，降血糖效应不明显。

研究者发现：对提高胰岛素口服给药生物利用度，生物黏附性给药系统具有特殊的吸引力。生物黏附性制剂可以延长药物在吸收部位的停留时间，增加药物在吸收部位上皮组织粘液层中的浓度，并且生物黏附和药物控释的结合更有利于提高药物的生物利用度(Thanou M，Verhoef JC，Junginger HE.Oral drug absorption enhancementby chitosan and its derivatives.Adv Drug Deliv Rev，2001，52：117-126)。因此壳聚糖(CH)作为一种由葡糖胺和N-乙酰葡糖胺所组成的共聚体多糖，并且可以被生物适应、并且能被生物缓慢降解的天然聚合物，被许多研究者用来进行药物微球或微粒的包裹。学者认为其对促进粘膜吸收的机理是促进膜上生物黏附和紧密连接的瞬间展开。并且，使用壳聚糖包覆脂质体，还能减少脂质体的渗漏。

实验证明，使用胰岛素乳酸/羟基乙酸共聚纳米粒的口服给药系统，胰岛素的相对生物利用度可以达到10.3±0.8％，而在同等条件下，使用壳聚糖包覆后可以提高至15.4％(潘妍、徐晖、赵会英等，胰岛素乳酸/羟基乙酸共聚物纳米粒的制备及口服药效学研究，药学学报，2002，37(5)：374-377。潘妍、李英剑、高鹏等，壳聚糖包衣对胰岛素聚酯纳米粒胃肠道吸收的促进作用，药学学报，2003，38(6)：467-470)。正是由于壳聚糖包覆胰岛素口服给药系统能明显提高口服胰岛素的吸收效率，因此在口服胰岛素的开发中受到了广泛关注，并且，该系统在其他类似脂质体药物的开发中也广泛使用，在某些非注射给药途径如鼻腔给药中也开始应用(Zhenghong WU，Qineng Ping，Yi WEI，et al，Hypoglycemic efficacy of chitosan-coated insulin liposomesafter oral administration in mice，Acta Pharmacol Sin，2004，25(7)：966-972)。

发明内容

本发明目的之一在于提供一种杏仁作为壳聚糖包覆胰岛素脂质体Ch-Ins-Lipo肠道吸收促进剂的应用。

本发明的目的之二在于提供一种杏仁作为壳聚糖包覆胰岛素脂质体Ch-Ins-Lipo药物缓释剂的应用。

本发明以Ch-Ins-Lipo作为口服载体，不仅证明杏仁能明显促进该药物的口服肠道吸收，提高其药物的生物利用度，并且能明显延长胰岛素的药效时间，缓释作用明显，药效发挥时间超过三周。

杏仁(semen armeniacae amarum)，为蔷薇科植物杏(Prunus armeniaca L.)的干燥成熟种子。口服剂量2.5-30g杏仁/kg小鼠，对Ch-Ins-Lipo口服给药具有明显的肠道吸收促进作用，尤其是在150u/kg-300u/kg胰岛素剂量范围内，表现了一定的剂量依赖性。

本发明结果表明，仅服用250u/kg Ch-Ins-Lipo剂量的对照组小鼠，3h的血糖值下降幅度约为4-5mM(吴正红、平其能、魏毅，壳聚糖包覆胰岛素脂质体处方与工艺优化，中国医药工业杂志，2003，34(2)：76-80。徐叔云、卞如濂、陈修，药理实验方法[M]，第二版，北京：人民卫生出版社，1991：1523-1524)。使用中药促进剂杏仁的实验组小鼠，当剂量为150u/kg时，3h血糖值下降幅度即达7-10mM；对于300u/kg剂量组，3h血糖值下降幅度更是达到了15-25mM，并且，维持降血糖效应可长达三周。

附图说明

图1是葡萄糖浓度-吸光度值标准曲线。

图2是Ch-Ins-Lipo透射电镜图。

图3是杏仁对Ch-Ins-Lipo肠道吸收的促进作用(150u/kg剂量组)。

图4是杏仁对Ch-Ins-Lipo肠道吸收的促进作用(300u/kg剂量组)。

图5是杏仁对药效动力学效应的影响。

具体实施方式

1.称取3.6g杏仁(10只小鼠用量)，常规方法煎煮浓缩至约10ml液体，离心取上清。每只小鼠给药约1.0ml。

2.使用氧化酶法^[6]对血糖水平进行测定

测定原理：如下反应方程式所示：

使用仪器：分光光度计(SPECTRONIC 1001 PLUS，MILTON ROY)

葡萄糖氧化酶法的线性范围为50mg/dl～500mg/dl，即3mM～30mM，得到的标准曲线为y＝0.003x+0.179，线性相关度为0.9994，标准曲线参见图1：

3.使用四氧嘧啶腹腔注射法建立糖尿病小鼠模型。选取血糖浓度达20～30mmol/L(mM)水平的糖尿病小鼠为实验用鼠。

4.Ch-Ins-Lipo的制备：使用逆相蒸发法，制备胰岛素脂质体，并用0.2％M_r1000kD壳聚糖进行孵育包覆。制得得溶液呈均匀的乳白色。透射电镜检测(参见图2)：呈均匀的球形，分散均匀，Ch-Ins-Lipo粒径范围为320-350nm，平均粒径335nm(n＝10)。

实施例一：杏仁对Ch-Ins-Lipo肠道吸收的促进作用(150u/kg组)

选取已建模的四氧嘧啶糖尿病小鼠，Ch-Ins-Lipo给药剂量为150u/kg。根据该药物药效动力学曲线，选取1h(开始作用时间)和3h(最大作用时间)眼眶取血，检测小鼠血糖水平，观察服用杏仁(以下简称实验组)后的作用情况。结果参见图3：

以0h(20-30mM)的血糖水平为100％。仅服用150u/kg Ch-Ins-Lipo的对照组小鼠，1h和3h的血糖水平均有下降，分别为93.9％±4.9％、84.8±4％；加服杏仁的实验组则分别为82.9％±6.7％、67.7±6.8％，实验组降幅超过对照组两倍。

实施例二：杏仁对Ch-Ins-Lipo肠道吸收的促进作用(300u/kg组)

选取已建模的四氧嘧啶糖尿病小鼠，Ch-Ins-Lipo给药剂量为300u/kg。根据该药物药效动力学曲线，选取1h和3h眼眶取血，检测小鼠血糖水平，观察试验组的作用情况。结果参见图4：

以0h(20-30mM)的血糖水平为100％。仅服用300u/kg剂量Ch-Ins-Lipo的对照组小鼠，1h和3h的血糖水平明显下降，为85.3％±7.7％、79.7±5.6％，加服杏仁的实验组则分别为47.6％±8.9％、42.2±8.7％，降幅同比仍然超过两倍。

实施例三：杏仁对Ch-Ins-Lipo药物缓释作用的影响

使用中药促进剂杏仁的小鼠(300u/kg组)口服药物1天后，继续正常喂养(给食给水)，每隔3-4天，禁食后眼眶取血，检测其血糖水平，考察中药促进剂杏仁对药效动力学效应的影响情况。结果参见表3和图5：

表3杏仁对药效动力学效应的作用

参见图5，仅服用Ch-Ins-Lipo的对照组小鼠，血糖水平在90％左右可以保持一周，而服用中药促进剂杏仁的实验组小鼠降血糖效果可维持长达3周。血糖水平从药效起始的60％左右逐步缓慢回升，长达20天后仍可达对照组的药效水平。结果提示中药杏仁对Ch-Ins-Lipo药物的缓释具有明显作用，能明显延长胰岛素的药效作用时间。

Claims

1.杏仁作为壳聚糖包覆胰岛素脂质体Ch-Ins-Lipo肠道吸收促进剂在制备糖尿病药物中的应用。

2.杏仁作为壳聚糖包覆胰岛素脂质体Ch-Ins-Lipo药物缓释剂在制备糖尿病药物中的应用。