CN101264311A - 一种天然药物组合物、其制备方法及其在癌症放、化疗中减毒增效的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种天然药物组合物、其制备方法及其在癌症放、化疗中减毒增效的用途，该天然药物组合物由小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱与半夏多糖按4－10∶2－6∶2－5∶1－4的比例组成，该组合物对由癌症放、化疗引起的呕吐等副作用有极好的疗效并能同时起到辅助抑制肿瘤的效果。

Description

一种天然药物组合物、其制备方法及其在癌症放、化疗中减毒增效的用途

技术领域

本发明涉及一种天然药物组合物，更具体地涉及一种由小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱与半夏多糖组成的天然药物组合物，该天然药物组合物的制备方法以及该天然药物组合物用于制备减少癌症放、化疗引起的呕吐副作用并对治疗癌症起增效作用的药物中的用途。

背景技术

癌症目前已成为人类面临的一大杀手，死亡率仅次于心血管疾病，而且呈逐年上升的趋势。我国每年有180万恶性肿瘤患者，其中2/3的病人接受放疗或化疗，虽然有一定的疗效，但放疗和化疗后大部分患者均会出现不同程度的副作用，其中最为常见的副作用是恶心、呕吐等胃肠道反应。频繁的呕吐可导致消化液大量丢失，水、电解质、酸碱平衡紊乱，使病人痛苦不堪，严重影响病人的生存质量，不仅会影响到治疗的疗效，甚至病人会因难以忍受而中断治疗。

目前，临床常用的止吐药主要有组胺(H₂)、乙酰胆碱(M)及多巴胺(DA)受体拮抗药和大麻类药物等，但这些药物对放、化疗后呕吐的疗效差，而且毒副作用强，因此应用上受到较大限制。新型止吐药，如NK₁受体拮抗剂和5-HT₃受体拮抗类药物，虽然对于放、化疗后呕吐止吐效果好，但价格昂贵，使用范围窄，而且毒副反应大，临床多需联合用药，且未见抗癌增效的作用，因此期待着天然抗癌减毒增效药物的研制。

中医药对于癌症放、化疗减副增效的研究，令人注目。目前尚无对抗癌放、化疗具有减轻呕吐副作用及增效作用的中成药。因此，研发一种高效低毒、价格低廉，易于推广的可用于减少癌症放、化疗呕吐副作用并起增效作用的天然中药成为临床实践亟待解决的问题。

小半夏汤来源于东汉张仲景的《金匮要略》一书中，是中医历代止呕方剂的基本方。该方由生姜和半夏两味药材组成，组方简单，成本非常低，方中生姜因其显著的止呕作用，中医谓之“呕家圣药”，方中半夏也是历代医家用来止呕的常用药物，但小半夏汤药物配比自古以来就存在争议，对多受体靶点作用机制也尚未阐明。目前公认的引起呕吐行为与6种受体靶点有关，临床现有的西药都是通过单一靶点起作用，而组合物是通过多靶点起作用的。本申请人经过大量各配方比例的研究和实验以及临床实践，最后获得了本发明的最佳药物比例组合物，是与多受体靶点比例相契合的创新性的组合物，并证明其对由癌症放、化疗引起的呕吐等副作用有极好的疗效并能同时起到辅助抑制肿瘤的效果，由此完成了本发明。

发明内容

本发明一个目的在于提供一种天然药物组合物，该组合物低毒高效，疗效确切、便于应用及推广，既可抗肿瘤，又能对抗放、化疗后呕吐等副作用。

本发明第二个目的在于提供上述天然药物组合物的制备方法。

本发明第三个目的在于提供上述天然药物组合物在制备减少癌症放、化疗副作用并对治疗癌症起减毒增效作用的药物中的用途。

本发明提供的一种天然药物组合物，由小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱与半夏多糖以重量计按4-10∶2-6∶2-5∶1-4的比例组成。

上述天然药物组合物的比例，其中小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱与半夏多糖的用量比例可以是10∶6∶5∶4。

其中，小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱以及半夏多糖可通过本领域技术人员公知的常规方法进行提取获得，姜辣素甚至可以商业购得，采用常规方法获得的这些成分或者采用商业购得的成分组成的本发明的天然药物组合物均能获得相同的疗效。以下列出的方法仅仅是本申请人认为更为优选的方法，并不意在对该天然药物组合物中各成分的提取方法做出特别的限制。

优选地，上述天然药物组合物中生姜姜辣素的制备方法是：

将生姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细粉放入5000ml大磨口瓶中，以6倍量95％的乙醇常温下浸泡72h；后在40℃温度下，在40KHz的超声波频率下超声提取15min；离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩得姜油状混合物；再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到生姜姜辣素。

上述天然药物组合物，其中半夏生物碱的制备方法是：

将半夏自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过40目筛，再将过筛细粉以6倍量95％的乙醇冷浸24h后，加热经玻璃冷凝管回流提取8h，至无生物碱反应，经6层纱布过滤，滤出乙醇液。药渣再加5倍量95％乙醇冷浸24h后，加热经玻璃冷凝管回流提取8h，至无生物碱反应，经6层纱布过滤，滤出乙醇液；过滤，合并滤液。将滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩，回收乙醇至无乙醇味，合并浓缩物；真空干燥箱70℃减压干燥36小时，浓缩物干燥纯化即为半夏生物碱。

上述天然药物组合物，其中半夏多糖的制备方法是：

将经过醇提过的半夏药材，用8倍量的水加热提取两次，每次30min，过滤，合并滤液，浓缩至适量，用95％乙醇调整至含醇量达60％，静置24h后过滤，取上清夜；于旋转蒸发仪中真空浓缩，回收乙醇至无醇味，浓缩至一定浓度，装入透析袋内透析72h后，合并浓缩物干燥纯化即得半夏多糖。

上述天然药物组合物，其中小半夏汤水煎浓缩提取物的制备方法是：

取配伍比例为1∶1-4或按照《金匮要略》中记载的半夏与生姜的配伍的半夏、生姜，加入10倍量蒸馏水，浸泡1h，于加石棉网的电炉上加热煎煮1h，绢布过滤，保存滤液，药渣再加6倍量蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70℃减压干燥36小时得半夏水煎浓缩提取物粉末，即为小半夏汤水煎浓缩提取物。

本发明还提供了该天然药物组合物的优选的制备方法，包括：

(1)生姜姜辣素的制备

将生姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细粉放入5000ml大磨口瓶中，以6倍量95％的乙醇常温下浸泡72h；后在40℃温度下，在40KHz的超声波频率下超声提取15min；离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩得姜油状混合物；再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到生姜姜辣素。

(2)半夏生物碱的制备

将半夏自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过40目筛，再将过筛细粉以6倍量95％的乙醇冷浸24h后，加热经玻璃冷凝管回流提取8h，至无生物碱反应，经6层纱布过滤，滤出乙醇液。药渣再加5倍量95％乙醇冷浸24h后，加热经玻璃冷凝管回流提取8h，至无生物碱反应，经6层纱布过滤，滤出乙醇液；过滤，合并滤液。将滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩，回收乙醇至无乙醇味，合并浓缩物；真空干燥箱70℃减压干燥36小时，浓缩物干燥纯化即得半夏生物碱。

(3)半夏多糖的制备

将经过醇提过的半夏药材，用8倍量的水加热提取两次，每次30min，过滤，合并滤液，浓缩至适量，用95％乙醇调整至含醇量达60％，静置24h后过滤，取上清夜；于旋转蒸发仪中真空浓缩，回收乙醇至无醇味，浓缩至一定浓度，装入透析袋内透析72h后，合并浓缩物干燥纯化即得半夏多糖；

(4)小半夏汤水煎浓缩提取物的制备

取配伍比例为1∶1-4或按照《金匮要略》中记载的半夏与生姜的配伍的半夏、生姜，加入10倍量蒸馏水，浸泡1h，于加石棉网的电炉上加热煎煮1h，绢布过滤，保存滤液，药渣再加6倍量蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70℃减压干燥36小时得半夏水煎浓缩提取物粉末，即为小半夏汤水煎浓缩提取物；

(5)按比例选取小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱与半夏多糖，均匀混合，即制得本发明的天然药物组合物。

上述天然药物组合物的制备方法，还包括：将步骤(5)制得的产品进一步通过常规的制药手段制成含有天然药物组合物100mg或200mg规格的胶囊，或将按湿法制粒工艺制成含有天然药物组合物100mg或200mg规格的片剂。

本发明还包括该天然药物组合物在制备减少癌症放、化疗副作用并起增效作用的药物中的用途，以及在制备减少癌症放、化疗引起的呕吐反应并起增效作用的药物中的用途。

本发明天然药物组合物的服用方法：治疗癌症放、化疗后呕吐可用胶囊制剂或片剂，每人每天600mg，分三次饭后服用。

本发明天然药物组合物在抗呕吐及抑制肿瘤方面的有益效果如下：

1.本发明天然药物组合物具有良好的抗呕吐作用，现已完成临床前在水貂呕吐模型的药理学研究。采用了我们首创的水貂呕吐模型，观察该天然药物组合物对顺铂导致水貂呕吐模型在一定时期内的对抗作用。研究表明：该天然药物组合物对于顺铂所致水貂的呕吐反应有明显的对抗作用，其作用优于单独应用生姜姜辣素、半夏生物碱及小半夏汤水煎浓缩提取物。同时，在降低致呕率方面，其作用与化学药品西药恩丹西酮相媲美。

2.本发明天然药物组合物具有抑制肿瘤的作用，现已完成临床前在小鼠肿瘤模型上的药理学研究。采用了小鼠肿瘤模型，观察该天然药物组合物对小鼠体内肿瘤的抑制作用。研究表明：该天然药物组合物对于小鼠体内肿瘤有明显的抑制作用。

3.另外证明了本发明天然药物组合物能增强化疗药物对于肿瘤的抑制作用，现已完成临床前在小鼠肿瘤模型上的药理学研究。采用了小鼠肿瘤模型，观察该天然药物组合物与环磷酰胺联合对小鼠体内肿瘤的抑制作用。研究表明：该天然药物组合物能够明显增强环磷酰胺对于小鼠体内肿瘤的抑制作用。

4.同时完成了在小鼠的急性毒理研究。研究表明：该天然药物组合物对进食及行为活动等无影响，脏器及病理学观察也未见异常。这说明该天然药物组合物毒性很小。

5.本申请人独创地将小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱与半夏多糖进行组合，并通过大量实验确定这些成分之间的用量配比，使该组合物发挥了很好的协同作用，获得意外的效果。本申请人上述的单一成分的抗癌减毒增效的作用也已经研究并发表相关论文。在上述的基础上发现组方混合物的作用比单一的成分抗癌减毒增效的作用强，这也正说明了组方混合物的作用是多靶点的。经过我们反复试验研究，令本申请人惊讶的是本发明的天然药物组合物各成分之间的比例在4-10∶2-6∶2-5∶1-4时产生了出乎意料的协同作用，增效明显，对副作用起到非常好的效果，尤其在各成分的用量比例是10∶6∶5∶4时尤其明显，这是本申请人是在之前发表的论文的基础上通过继续努力付出大量劳动获得的，本领域普通技术人员仅仅通过论文公开的内容是无法简单获得这种配比范围以及最佳用量比例的。

6、该天然药物组合物中小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱与半夏多糖各组分均可通过常规手段获得，其中一些成分例如姜辣素还可通过商业购得，这样的组合物本身具有获得方便、成本较低的效果。这也是发明人通过大量创造性劳动方获得的兼具极佳疗效和较高工业实用性的产品。

具体实施方式

下面通过实施例和试验例进一步阐述本发明天然药物组合物的制备，以及其在抗呕吐和抑制肿瘤中应用的有益效果。

实施方案：

第一步：各种提取物的制备

(1)生姜姜辣素的制备

将生姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细粉放入5000ml大磨口瓶中，以6倍量95％的乙醇常温下浸泡72h。后在40℃温度下，在40KHz的超声波频率下超声提取15min。离心得到上清液，残渣弃去。将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩得姜油状混合物。再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到生姜姜辣素。

(2)半夏生物碱的制备

将半夏自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过40目筛，再将过筛细粉以6倍量95％的乙醇冷浸24h后，加热经玻璃冷凝管回流提取8h，至无生物碱反应，经6层纱布过滤，滤出乙醇液。药渣再加5倍量95％乙醇冷浸24h后，加热经玻璃冷凝管回流提取8h，至无生物碱反应，经6层纱布过滤，滤出乙醇液。过滤，合并滤液。将滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩，回收乙醇至无乙醇味，合并浓缩物。真空干燥箱70℃减压干燥36小时，浓缩物干燥纯化备用。

(3)半夏多糖的制备

将经过醇提过的半夏药材，用8倍量的水加热提取两次，每次30min，过滤，合并滤液，浓缩至适量，用95％乙醇调整至含醇量达60％，静置24h后过滤，取上清夜。于旋转蒸发仪中真空浓缩，回收乙醇至无醇味，浓缩至一定浓度，装入透析袋(8000-12000)内透析72h后，合并浓缩物干燥纯化备用。

(4)小半夏汤水煎浓缩提取物的制备

取半夏、生姜(配伍比例为1∶1-4)加入10倍量蒸馏水，浸泡1h，于加石棉网的电炉上加热煎煮1h，绢布过滤，保存滤液，药渣再加6倍量蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70℃减压干燥36小时得半夏水煎浓缩提取物粉末备用。

第二步：制剂的制备

(1)本发明天然药物组合物胶囊制剂的制备

分别称取经上述步骤制备的小半夏汤水煎浓缩提取物40mg、生姜姜辣素24mg、半夏生物碱20mg、半夏多糖16mg，同时称取淀粉345mg、硬脂酸5mg，均匀混合，填充胶囊，制成每个纯重为500mg的胶囊剂。

(2)本发明天然药物组合物片剂的制备

分别称取经上述步骤制备的小半夏汤水煎浓缩提取物40mg、生姜姜辣素24mg、半夏生物碱20mg、半夏多糖16mg，同时称取淀粉245mg、乳糖100mg，均匀混合，用湿法制粒、干燥，整粒后与5mg硬脂酸镁混合，压片，制成每片纯重为50Cmg的片剂。

药效及药理学资料：

在下述试验例子中组合物为：小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱与半夏多糖的用量比例是10∶6∶5∶4。申请人还对上述各成分用量比例在4-10∶2-6∶2-5∶1-4之间时的多种配比组合获得的组合物进行与上相同的试验，均发现在这种用量范围内的天然药物组合物能获得很好的协同作用，对癌症放、化疗副作用能起到很好的效果并对癌症的治疗有增效的作用。并且，申请人发现小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱与半夏多糖还可以是以常规手段获得的成分，而不仅仅上述的方法获得的成分，由常规手段制得或商业购得的上述4种成分组成的组合物具有与上述方法制得的组合物相同的效果，其试验资料这里不再列举，本领域技术人员对此应能够认可。以下是优选的实施方式获得的药效及药理学资料：

试验例1：天然药物组合物治疗呕吐作用的药效学研究

1、试验材料：

(1)山东生半夏，由青岛药材站购买并由山东中医药大学石俊英教授鉴定为是天南星科植物半夏的干燥块茎。生姜，购于本地市场，产于山东平都，由本学院技术室主任鉴定为姜科植物姜的块茎。

(2)顺铂(cisplatin)，山东齐鲁制药厂生产，批号：05070122，20mg/支。

(3)盐酸昂丹司琼注射液，齐鲁制药有限公司生产，批号：200503003，2ml：4mg。

(4)健康成年水貂，体重1.3-1.8kg，雄性，由青岛市特种动物饲养中心提供，每只动物均单独置于75cm×50cm×50cm的铁笼内，24h自然光照射，实验前自由进食饮水。

2、试验方法：

将水貂随机分为7组，每组6只，A组为姜辣素组，B组为半夏生物碱组，C组为姜辣素与半夏生物碱配伍组(姜辣素与半夏生物碱的配伍比例为6∶5)，D组为小半夏汤水煎浓缩提取物组，E组为本发明的天然药物组合物组(将小半夏汤水煎浓缩提取物，生姜姜辣酥、半夏生物碱、半夏多糖按10∶6∶5∶4的比例混合)，F组为顺铂阳性对照组，G组为恩丹西酮组。A组先以姜辣素10g·kg^-1(相当于含生药量)ig预处理，30min后予顺铂7.5mg·kg^-1ip；B组给予半夏生物碱10g·kg^-1(相当于含生药量)ig预处理，30min后给予顺铂7.5mg·kg^-1ip；C组先以姜辣素与半夏生物碱配伍药物10g·kg^-1(相当于含生药量)ig预处理，30min后予顺铂7.5mg·kg^-1ip；D组予小半夏汤水煎浓缩提取物10g·kg^-1(相当于含生药量)ig预处理，30min后给予顺铂7.5mg·kg^-1ip；E组给予本发明天然药物组合物10g·kg^-1(相当于含生药量)ig预处理，30min后给予顺铂7.5mg·kg^-1ip；F组给予生理盐水，30min后予顺铂7.5mg·kg^-1ip；G组先以恩丹西酮2mg·kg^-ip预处理，30min后予顺铂7.5mg·kg^-ip。为观察水貂在给药后6h内的呕吐反应，记录其呕吐潜伏期，干呕及呕吐次数。

3、试验结果：

与对照组比较，各治疗组均能明显减少干呕及呕吐次数(P＜0.05，P＜0.01)。姜辣素与半夏生物碱配伍组、本发明的天然药物组合物组能够有效延长呕吐潜伏期，与恩丹西酮组比较无明显差异。姜辣素与半夏生物碱配伍组，小半夏汤水煎浓缩提取物组，以及本发明的天然药物组合物组能够有效降低致呕率。其中姜辣素与半夏生物碱配伍组，小半夏汤水煎浓缩提取物组致呕率与恩丹西酮组相同；而本发明的天然药物组合物组致呕率低于恩丹西酮组。结果见表1。

表1提取物配伍对顺铂(7.5mg/kg，ip)致呕作用的影响(x±s，n＝6)

注：a相当于含生药量，与对照组比较bP＜0.05，cP＜0.01

试验例2：本发明的天然药物组合物抗肿瘤作用的药效学研究

1、试验材料：

(1)昆明种小鼠，体重20±2g，由河北医科大学实验动物中心提供，合格证号：冀医动字04056。每只动物均单独置于75cm×50cm×50cm的铁网笼内，24h自然光照射，实验前自由进食、饮水。

(2)环磷酰胺，江苏恒瑞医药制药股份有限公司产品。

2、试验方法：

(1)对小鼠S₁₈₀肉瘤生长的抑制实验

采取传代5-7天，生长良好的乳白色腹水，以适量无菌生理盐水稀释成瘤细胞悬液，细胞数为10⁷/ml，每组12只，每鼠右腋窝皮下接种0.2ml(含瘤细胞2x10⁶个)。接种次日随机分组，实验组将本发明的天然药物组合物分为(400，200，100mg·ml^-1)三个剂量组，每鼠灌胃0.5ml；阴性对照组给予0.5ml蒸馏水；阳性对照组给予环磷酰胺20g·kg^-1.d^-1，连续给药10天。常规饲养，饮水，食物不限。停药次日，小鼠全部脱颈椎处死，剥取皮下实体瘤瘤块，称重，按下列公式计算肿瘤抑制率(％)：

肿瘤抑制率＝[对照组平均瘤重(C)-实验组平均瘤重(T)]/对照组平均瘤重(C)

(2)对小鼠肝癌H₂₂生长的抑制实验：

分组、剂量、给药方式、实验时间与S₁₈₀瘤株相同。

(3)对小鼠艾氏腹水瘤(实体瘤)的抑制实验：

分组、剂量、给药方式、实验时间与S₁₈₀瘤株相同。

3、试验结果：

本发明天然药物组合物三个剂量组对S₁₈₀、H₂₂、EAC与阴性对照组比较，均有不同程度抑制作用，尤其以高剂量组对肿瘤的抑制率最高。而且，在对于S₁₈₀、H₂₂小鼠的肿瘤抑制作用中，高剂量天然药物组合物组的肿瘤的抑制作用与阳性药物作用相当。(如表2、3、4)

表2胶囊制剂对S₁₈₀小鼠的肿瘤抑制作用

与阴性对照组比较，^aP＞0.05，^bP＜0.05，^cP＜0.01，x±s，n＝12

表3胶囊制剂对H₂₂小鼠的肿瘤抑制作用

与阴性对照组比较，^aP＞0.05，^bP＜0.05，^cP＜0.01，x±s，n＝12

表4胶囊制剂对EAC小鼠的肿瘤抑制作用

与阴性对照组比较，^aP＞0.05，^bP＜0.05，^cP＜0.01，x±s，n＝12

试验例3：本发明天然药物组合物对于化疗药物抗肿瘤增效作用的药效学研究

1、试验材料：

(1)昆明种小鼠，体重20±2g，由河北医科大学实验动物中心提供，合格证号：冀医动字04056。每只动物均单独置于75cm×50cm×50cm的铁网笼内，24h自然光照射，实验前自由进食、饮水。

(2)环磷酰胺，江苏恒瑞医药制药股份有限公司产品。

2、试验方法：

(1)对小鼠S₁₈₀肉瘤生长的抑制实验

采取传代5-7天，生长良好的乳白色腹水，以适量无菌生理盐水稀释成瘤细胞悬液，细胞数为10⁷/ml，每组12只，每鼠右腋窝皮下接种0.2ml(含瘤细胞2×10⁶个)。接种次日随机分组，联合用药组将本发明天然药物组合物分为(10，5，2.5g·kg^-1)三个剂量组，每鼠灌胃0.5ml，同时给予环磷酰胺10g·kg^-1.d^-1；阴性对照组给予0.5ml蒸馏水；阳性对照组给予环磷酰胺20g·kg^-1.d^-1，连续给药10天。常规饲养，饮水，食物不限。停药次日，小鼠全部脱颈椎处死，剥取皮下实体瘤瘤块，称重，按下列公式计算肿瘤抑制率(％)：

肿瘤抑制率＝[对照组平均瘤重(C)-实验组平均瘤重(T)]/对照组平均瘤重(C)

(2)对小鼠肝癌H₂₂生长的抑制实验：

分组、剂量、给药方式、实验时间与S₁₈₀瘤株相同。

(3)对小鼠艾氏腹水瘤(实体瘤)的抑制实验：

分组、剂量、给药方式、实验时间与S₁₈₀瘤株相同。

3、试验结果：

在降低环磷酰胺用药剂量的情况下，本发明天然药物组合物三个剂量与环磷酰胺联合应用对S₁₈₀、H₂₂、EAC与阴性对照组比较，均有不同程度抑制作用，尤其以高剂量与环磷酰胺联合用药组对肿瘤的抑制率最高。而且，在对于S₁₈₀、H₂₂、EAC小鼠的肿瘤抑制作用中，高剂量天然药物组合物与环磷酰胺联合组对肿瘤的抑制作用显著，与阳性药物作用相当。(如表5、6、7)

表5胶囊制剂对S₁₈₀小鼠的肿瘤抑制作用

与阴性对照组比较，^aP＞0.05，^bP＜0.05，^cP＜0.01，x±s，n＝12

配伍药组高：环磷酰胺10g·kg^-1+组合物10g·kg^-1；配伍药组中：环磷酰胺10g·kg^-1+组合物5g·kg^-1；配伍药组低：环磷酰胺10g·kg^-1+组合物2.5g·kg^-1，下同。

表6胶囊制剂对H₂₂小鼠的肿瘤抑制作用

与阴性对照组比较，^aP＞0.05，^bP＜0.05，^cP＜0.01，x±s，n＝12

表7胶囊制剂对EAC小鼠的肿瘤抑制作用

与阴性对照组比较，^aP＞0.05，^bP＜0.05，^cP＜0.01，x±s，n＝12

试验例4：本发明天然药物组合物的急性毒性试验

1、试验动物：

昆明种小鼠，体重20±2g，由河北医科大学实验动物中心提供，合格证号：冀医动字04056。

2、药物：

本发明的天然药物组合物、西黄耆胶

3、试验方法：

根据国家药品监督管理局一九九九年十一月十二日颁布修订的“中药新药研究技术要求”，对本发明的天然药物组合物进行急性毒性实验。因受药物浓度及体积限制，无法测其LD₅₀，故进行最大给药量实验。取昆明种小鼠30只，雌雄各半，ig，给予胶囊制剂中药物1g·ml^-1，每只0.8ml，即小鼠的最大灌胃体积，用药后观察小鼠活动状态、饮食、粪便、呼吸、体重及死亡情况，连续观察14d。

4、试验结果：

各组小鼠经灌胃给药后生长良好，体重增加，行为正常，均未见死亡及明显毒性反应。将动物处死后，肉眼观察各主要脏器无异常现象。

结果表明，本发明的天然药物组合物最大剂量口服应用，对动物无明显损害，未发现对机体产生的毒性反应，是一种安全可靠的药物。

Claims (10)

1、一种天然药物组合物，其特征在于该组合物由小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱与半夏多糖以重量计按4-10∶2-6∶2-5∶1-4的比例组成。

2、如权利要求1所述的天然药物组合物，其中小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱与半夏多糖的用量比例是10∶6∶5∶4。

3、如权利要求1所述的天然药物组合物，其中生姜姜辣素的制备方法是：

将生姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细粉放入5000ml大磨口瓶中，以6倍量95％的乙醇常温下浸泡72h；后在40℃温度下，在40KHz的超声波频率下超声提取15min；离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩得姜油状混合物；再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到生姜姜辣素。

4、如权利要求1所述的天然药物组合物，其中半夏生物碱的制备方法是：

将半夏自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过40目筛，再将过筛细粉以6倍量95％的乙醇冷浸24h后，加热经玻璃冷凝管回流提取8h，至无生物碱反应，经6层纱布过滤，滤出乙醇液。药渣再加5倍量95％乙醇冷浸24h后，加热经玻璃冷凝管回流提取8h，至无生物碱反应，经6层纱布过滤，滤出乙醇液；过滤，合并滤液。将滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩，回收乙醇至无乙醇味，合并浓缩物；真空干燥箱70℃减压干燥36小时，浓缩物干燥纯化即得半夏生物碱。

5、如权利要求1所述的天然药物组合物，其中半夏多糖的制备方法是：

将经过醇提过的半夏药材，用8倍量的水加热提取两次，每次30min，过滤，合并滤液，浓缩至适量，用95％乙醇调整至含醇量达60％，静置24h后过滤，取上清夜；于旋转蒸发仪中真空浓缩，回收乙醇至无醇味，浓缩至一定浓度，装入透析袋内透析72h后，合并浓缩物干燥纯化即得半夏多糖。

6、如权利要求1所述的天然药物组合物，其中小半夏汤水煎浓缩提取物的制备方法是：

取配伍比例为1∶1-4或按照《金匮要略》中记载的半夏与生姜的配伍的半夏、生姜，加入10倍量蒸馏水，浸泡1h，于加石棉网的电炉上加热煎煮1h，绢布过滤，保存滤液，药渣再加6倍量蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70℃减压干燥36小时得半夏水煎浓缩提取物粉末，即为小半夏汤水煎浓缩提取物。

7、权利要求1或2的天然药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括：

(1)生姜姜辣素的制备

将生姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细粉放入5000ml大磨口瓶中，以6倍量95％的乙醇常温下浸泡72h；后在40℃温度下，在40KHz的超声波频率下超声提取15min；离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩得姜油状混合物；再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到生姜姜辣素；

(2)半夏生物碱的制备

将半夏自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过40目筛，再将过筛细粉以6倍量95％的乙醇冷浸24h后，加热经玻璃冷凝管回流提取8h，至无生物碱反应，经6层纱布过滤，滤出乙醇液。药渣再加5倍量95％乙醇冷浸24h后，加热经玻璃冷凝管回流提取8h，至无生物碱反应，经6层纱布过滤，滤出乙醇液；过滤，合并滤液。将滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩，回收乙醇至无乙醇味，合并浓缩物；真空干燥箱70℃减压干燥36小时，浓缩物干燥纯化得到半夏生物碱；

(3)半夏多糖的制备

将经过醇提过的半夏药材，用8倍量的水加热提取两次，每次30min，过滤，合并滤液，浓缩至适量，用95％乙醇调整至含醇量达60％，静置24h后过滤，取上清夜；于旋转蒸发仪中真空浓缩，回收乙醇至无醇味，浓缩至一定浓度，装入透析袋内透析72h后，合并浓缩物干燥纯化即得半夏多糖；

(4)小半夏汤水煎浓缩提取物的制备

取配伍比例为1∶1-4或按照《金匮要略》中记载的半夏与生姜的配伍的半夏、生姜，加入10倍量蒸馏水，浸泡1h，于加石棉网的电炉上加热煎煮1h，绢布过滤，保存滤液，药渣再加6倍量蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70℃减压干燥36小时得半夏水煎浓缩提取物粉末，即为小半夏汤水煎浓缩提取物；

(5)按比例选取小半夏汤水煎浓缩提取物、生姜姜辣素、半夏生物碱与半夏多糖，均匀混合，即制得本发明的天然药物组合物。

8、如权利要求7所述的天然药物组合物的制备方法，还包括：将步骤(5)制得的产品进一步通过常规的制药手段制成含有天然药物组合物100mg或200mg规格的胶囊，或将按湿法制粒工艺制成含有天然药物组合物100mg或200mg规格的片剂。

9、如权利要求1-6任一项所述的天然药物组合物在制备减少癌症放、化疗副作用并对治疗癌症起增效作用的药物中的用途。

10、如权利要求1-6任一项所述的天然药物组合物在制备减少癌症放、化疗引起的呕吐反应并对治疗癌症起增效作用的药物中的用途。