CN101190234A - 一种病毒灭活袋装冻干血浆及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及生物制品领域，具体说是涉及一种经病毒灭活的袋装冻干血浆。本发明的袋装冻干血浆与传统的瓶装冻干血浆相比，特点是重量轻，便于携带和运输，且不易碎、耐压，无需低温保存，是一种快速、有效的抗休克药物。特别适用于因突发事件出现的大量伤员的及时救治，发挥扩容、抗休克、稳定血压等作用，避免因大量失血引起的休克和循环衰竭等的发生，为后续治疗争取时间。亦可用于烧伤的抢救，也可用于交通事故、安全生产事故及其它突发伤毁事件引起休克的救治，具有巨大的社会经济价值，应用前景广阔。

Description

一种病毒灭活袋装冻干血浆及其应用

技术领域

本发明涉及生物制品领域，具体说是涉及一种经病毒灭活的袋装冻干血浆。

背景技术

血浆对于失血性休克的扩容、烧伤的抢救以及由于输用库存血或代用品导致的渗血等都是主要的治疗措施。

目前，国内外临床上应用的血浆制品有10余种，血浆分为新鲜血浆和普通血浆两种，新鲜血浆又分为新鲜冰冻血浆(又称FFP)和新鲜液体血浆；普通血浆分为普通冰冻血浆、保存的液体血浆。新鲜冰冻血浆和普通冰冻血浆都是将抗凝全血在4℃条件下离心后分离，再经-30℃冰箱速冻而得，需保存在-20℃冰柜或低温冰箱中，且保存体积较大。新鲜液体血浆是将保存期内的抗凝全血在4℃条件下经离心后分离得到，在4℃保存条件下，24h之内必须输注，保存时间短。

相比之下，无需低温保存设备的冻干血浆保存更容易，但常用的冻干血浆主要是玻璃瓶装冻干血浆，由大量混合血浆制备而成，传播乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和艾滋病毒的风险性较高。另外玻璃瓶易碎，不适于空投和颠簸运输，为防止玻璃瓶破裂，有的玻璃瓶外面套上一个金属罐，但这种包装的冻干血浆分量重，运输携带也不方便。如果选用目前临床输血采用的PVC血袋进行冻干血浆，则存在不易冻干等问题，无法达到生物制品规程的要求。

发明内容

本发明提供了一种经病毒灭活后制备的袋装冻干血浆，其制备方法是将新鲜分离的血浆置于特制的冻干血浆袋(已获得国家实用新型专利授权，专利号：ZL 200520001469.3)中经病毒灭活后冷冻干燥而得。

本发明是通过以下技术方案实现的：

(1)血浆的分离

1)新鲜血浆：将采集时间在6h以内的抗凝全血4℃下离心，分离得到的血浆；

2)新鲜冰冻血浆：将新鲜血浆在-20℃下冻存，冷冻状态一直持续到使用之前，有效期自采血日起1年；

3)普通血浆：来源于保存期内，或过期不满5天的抗凝全血分离得到；

4)普通冷冻血浆：来源于保存期满1年的新鲜冷冻血浆，或普通血浆在-20℃以下冻存，冷冻状态一直持续到使用之前，有效期自采血日起为5年。

(2)血浆病毒灭活：目前用于血浆病毒灭活的方法较多，常用的有有机溶剂/清洁剂法、光化学法、加热法、紫外线(UVA)/光敏剂法等，各种方法对血浆病毒的灭活效果不一，但选择合适的条件，都能达到较好的灭活效果。

1)有机溶剂/清洁剂法(S/D法)：将分离得到的同种血型血浆置于容器中，加入有机溶剂磷酸三丁酯(TNBP)和TritonX-100处理后，植物油萃取TNBP，固相层析法去除TritonX-100，除菌后分装入特制的冻干血浆袋中；

2)光化学法：将分离得到的单袋血浆置于特制的冻干血浆袋中，加入光敏剂亚甲蓝，病毒灭活装置处理后，去除亚甲蓝；

3)加热：分离得到的同种血型血浆置于容器中，加入保护剂后边搅拌边加热，加热处理后用超滤等方法除去保护剂，除菌后分装入特制的冻干血浆袋中；

4)紫外线(UVA)/光敏物法：将分离得到的血浆置于特制的冻干血浆袋中，加入光敏剂补骨脂类化合物S-59，然后用紫外线(UVA)进行照射处理，灭活血浆中的病毒。

(3)血浆预冻

经病毒灭活后的血浆置于特制的冻干血浆袋中，放入-40℃以下的低温冰箱或冰柜中预冻，使其成为固体。

(4)病毒灭活冻干血浆的制备

预冻后的血浆置于冻干机中，剪开蒸发管，在阱底温度-56℃，真空度10Pa以下，经48h真空升华去水制成淡黄色疏松体，从冻干机中取出后迅速封口。

本发明中应用的特制冻干血浆袋是经中华人民共和国国家知识产权局授权的实用新型(专利号：ZL 200520001469.3)，结构简单、重量轻、不易破碎、便于运输。由于该冻干血浆袋在袋身上设置有多根蒸发管，使袋身形成贯通型多通路，可使血浆在干燥时增加水分蒸发渠道，缩短水分蒸发路径和时间，从而达到冻干血浆的目的。

本发明的病毒灭活冻干血浆直接冻存于特制冻干血浆袋中，重量轻，便于携带和运输，耐摔、耐压，避免了空投和颠簸运输造成的玻璃瓶易碎问题，无需低温保存设备，保存容易，且复溶速度快，一旦救治需要，可用灭菌注射用水迅速溶解后立即使用，是一种快速、有效的抗休克药物。病毒灭活袋装冻干血浆特别适用于因突发情况下出现的大量伤员的及时救治，发挥扩容、抗休克、稳定血压等作用，可避免因大量失血引起的休克和循环衰竭等的发生，为后续治疗争取时间。亦可用于烧伤的救治，也可用于交通事故、安全生产事故及其它突发伤毁事件引起休克的救治，具有巨大的社会经济价值，应用前景广阔。

附图说明

图1专用冻干血浆袋及外观呈淡黄色疏松体的病毒灭活袋装冻干血浆

图2复溶后的血浆呈黄色混浊液体，无异物

具体实施方式

实施例1新鲜血浆的分离

新鲜采集的200ml抗凝全血，4℃条件下，3800转离心15min，小心分离得到100ml血浆。

实施例2普通血浆的分离

全血采集后超过6h，保存期内的抗凝全血200ml，4℃条件下，3800转离心15min，小心分离得到105ml血浆。

实施例3血浆病毒灭活

血浆病毒灭活的方法较多，现以亚甲蓝/光化学法为例，说明血浆病毒的灭活方法。在洁净工作台中取0.9％的静脉注射用生理盐水25.7ml，加入10mg/ml的亚甲蓝注射液(江苏济川制药有限公司产品)1ml，混匀得到1mmol/L的亚甲蓝工作液。取分离获得的100ml血浆分装入特制的冻干血浆袋(国家实用新型专利授权，专利号：ZL 200520001469.3)中，加入亚甲蓝工作液100μl使其终浓度为1μmol/L，热合封口后用波长为630nm的光源在光强度不低于40000Lux条件下照射处理30min以灭活血浆中的病毒。

实施例4病毒灭活袋装冻干血浆的制备

将经过病毒灭活的装于特制冻干血浆袋中的100ml血浆放入-40℃以下的低温冰箱或冰柜，预冻4h，待血浆冻成固体状态后取出，放入LGJ-10型冷冻干燥机，剪开封口，在阱底温度-56℃，真空度10Pa以下，冻干48h，得到淡黄色疏松体，取出后快速封口，即为病毒灭活袋装冻干血浆。

实施例5病毒灭活袋装冻干血浆水分含量测定

将冻干的病毒灭活血浆按照《生物制品规程》(1995版)中的费氏测定方法进行水分检测，水分含量在2.2％-2.5％间，符合《生物制品规程》(1995版)冻干血浆水分≤3％的要求。

实施例6病毒灭活袋装冻干血浆的复溶及凝血因子活性检测

将各100ml灭菌注射用水分别加入到室温保存30、60、90及180天的病毒灭活冻干血浆中，迅速溶解得到的溶液为淡黄色混浊液，分别测定复溶血浆中的凝血因子活性(测定方法参见国家《生物制品规程》，2000版)，结果显示(表1)，随室温存放时间的延长，病毒灭活冻干血浆中凝血因子活性有所下降，但其活性均保持在80％以上，符合《生物制品规程》(1995版)中对冻干血浆的要求。

Claims (10)

1.一种病毒灭活袋装冻干血浆，其特征在于所述的病毒灭活袋装冻干血浆是将分离的血浆经病毒灭活后，于专用的冻干血浆袋中进行冻干而得，其制备方法包括以下步骤：

(1)血浆的分离；

(2)对分离出的血浆进行病毒灭活；

(3)经病毒灭活后的血浆置于冻干专用血浆袋中于-40℃以下预冻；

(4)预冻后的血浆置于冷冻干燥机中冻干；

(5)冻干后快速封口。

2.根据权利要求1所述的病毒灭活袋装冻干血浆，其特征在于冻干所用的血浆袋为专用血浆袋，袋身上设置有蒸发管，与袋身形成贯通型多通路，可使血浆在干燥时增加水分蒸发渠道，缩短水分蒸发路径和时间，从而达到冻干血浆的目的。

3.根据权利要求1所述的病毒灭活袋装冻干血浆，其特征在于所用的血浆是新鲜血浆、新鲜冷冻血浆、普通血浆或普通冷冻血浆。

4.根据权利要求1所述的病毒灭活袋装冻干血浆，其特征在于所用的血浆是单袋血浆或同种血型的混合血浆。

5.根据权利要求1所述的病毒灭活袋装冻干血浆，其特征在于对血浆进行病毒灭活时的方法是有机溶剂/清洁剂法、光化学法、加热法或照射法。

6.根据权利要求5所述的病毒灭活方法，其特征在于所述的光化学法所用的光敏剂为亚甲蓝。

7.根据权利要求1所述的病毒灭活袋装冻干血浆，其特征在于冻干条件为阱底温度-56℃，真空度10Pa以下冻干48h。

8.病毒灭活袋装冻干血浆的应用，其特征在于可作为一种抗休克药物用于创伤导致的失血性休克的扩容治疗，交通事故、安全生产事故及其它突发伤毁事件引起休克的院前处置。

9.病毒灭活袋装冻干血浆的应用，其特征在于作为一种药物用于烧伤的治疗。

10.病毒灭活袋装冻干血浆的应用，其特征在于作为一种药物用于由于输用库存血或代用品导致渗血的治疗。

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