CN101130758A - 微生物强化采油菌种筛选方法及培养条件 - Google Patents

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本发明属于微生物采油方法技术领域,具体涉及一种微生物强化采油菌种筛选方法及培养条件技术领域。本发明所述的微生物强化采油菌种筛选方法,其步骤依次是:分离样品、富集、初筛、复筛,最后得到优良菌株。综上所述,通过初筛、复筛试验,筛选到4株菌,能在以原油、石蜡作碳源的环境中生长。依据华岩山油井深度、矿化度及所要求温度,4株菌与油田环境具有良好的适应性。因此,本实验结果为采油工艺及现场应用施工提供了有益的借鉴。

Description

微生物强化采油菌种筛选方法及培养条件
技术领域
本发明属于微生物采油方法技术领域,具体涉及一种微生物强化采油菌种筛选方法及培养条件技术领域。
背景技术
微生物采油是利用微生物自身的有益活动如降解原油和/或代谢产物如生物表面活性剂、有机酸、醇等来提高原油采收率的采油技术。
目前,石油开采常规工艺技术采出的油量只占原始地质储量的1/3~1/2,而应用微生物提高石油采收率的技术(MEOR)是一项具有良好发展前景的3次强化采油技术.用于微生物采油的菌种,必须适应油层的地层条件,所以,不同条件油层必须采用不同特性的菌种,这是由MEOR的作用机制所决定的.我国现今尚有许多废弃或枯竭井,等待应用微生物强化3次采油技术的再开发.本发明选择了青海石油管理局海西州花土沟华岩山油田油井,历时2年,进行了微生物采油菌种的筛选及培养条件的研究,为在相似条件下油田的开发提供了菌株。
发明内容
本发明的目的是提供一种微生物强化采油菌种筛选方法,利用改种生物菌种可以提高原油产率。
本发明的另外一个目的是提供上述这种采油用菌种的培养条件。
为实现上述目的,本发明采取的技术方案是:
一种微生物强化采油菌种筛选方法,其步骤依次是:分离样品、富集、初筛、复筛,最后得到优良菌株。
其中初筛的具体方法是:分离样品经富集15d后,涂布在用培养基I制成的油皿上,于37℃(油井地层温度37~40℃)培养7d,挑取在平板上生长并使平板上的原油更清澈的单菌落,再涂布到用培养基II制成的蜡皿上,37℃培养1周,挑取产生分解圈的单菌落于斜面上培养,得到7株菌,供复筛用。
其中复筛的具体方法是:根据油田油井具体清蜡增产的要求,将初筛选出的7株菌处理华岩山油田原油,测定处理前后原油的粘度及凝固点变化。
所用的培养基为:蛋白胨0.5~1g、牛肉膏0.5g、、硫酸铵1g、石蜡1g、原油10ml、磷酸氢二钾0.025~0.3g、氯化钠5g、微量元素液100ml、琼脂1.3g、糠浆2ml,其余为水。
上述的微量元素液是按地层水离子浓度及总矿化度配制的微量元素液。
上述菌种的培养条件是:pH值7.0~7.5、温度范围25~45℃、盐浓度7~10%。
综上所述,通过初筛、复筛试验,筛选到4株菌,能在以原油、石蜡作碳源的环境中生长。依据华岩山油井深度、矿化度及所要求温度,4株菌与油田环境具有良好的适应性。因此,本实验结果为采油工艺及现场应用施工提供了有益的借鉴。为了发挥油田微生物的协同作用,应更多的使用混合菌株。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步的说明:
实验方法
分离筛选流程分离样品→富集→初筛→复筛→优良菌株
菌种培养斜面菌种→活化→接种到装有011L液体培养基的0125L三角瓶中,于37℃静置培养20h,供分析测定用。
分析测定用HAAKE粘度计(旋转粘度计RV 100,测量系统为CV 100),测定原油粘度变化.用BY21凝固点测定原油凝固点变化.用722型分光光度计于波长600nm处测菌浓度。
菌株的分离筛选
初筛  分离样品经富集15d后,涂布在用培养基I制成的油皿上,于37℃(油井地层温度37~40℃)培养7d,挑取在平板上生长并使平板上的原油更清澈的单菌落,再涂布到用培养基II制成的蜡皿上,37℃培养1周,挑取产生分解圈的单菌落于斜面上培养,得到7株菌,供复筛用。
复筛  根据油田油井具体清蜡增产的要求,将初筛选出的7株菌处理华岩山油田原油,测定处理前后原油的粘度及凝固点变化.其结果很好.
成份
                                                                    
I             II          III           IV              V
蛋白胨(g)    0.5          1             1               0.5
牛肉膏(g)    0.5          0.5
硫酸铵(g)    1            1             1
石蜡(g)      1
原油(ml)                  10
磷酸氢二钾(g)    0.03     0.03      0.03
磷酸二氢钾(g)    0.025    0.025     0.025
氯化钠(g)        5        5         5        5
微量元素液(m1)   100      100       100      100
琼脂             1.3      1.3       1.3
H2O              100
pH               7.0~7.5
糠浆(ml)         2

Claims (4)

1.一种微生物强化采油菌种筛选方法,其步骤依次是:分离样品、富集、初筛、复筛,最后得到优良菌株。
2.如权利要求1所说的微生物强化采油菌种筛选方法,其特征在于:初筛的具体方法是:分离样品经富集15d后,涂布在用培养基I制成的油皿上,于37℃(油井地层温度37~40℃)培养7d,挑取在平板上生长并使平板上的原油更清澈的单菌落,再涂布到用培养基II制成的蜡皿上,37℃培养1周,挑取产生分解圈的单菌落于斜面上培养,得到7株菌,供复筛用。
3.如权利要求1所说的微生物强化采油菌种筛选方法,其特征在于:复筛的具体方法是:根据油田油井具体清蜡增产的要求,将初筛选出的7株菌处理华岩山油田原油,测定处理前后原油的粘度及凝固点变化。
4.一种微生物强化采油菌种的培养条件,该条件是:所用的培养基为:蛋白胨0.5~1g、牛肉膏0.5g、硫酸铵1g、石蜡1g、原油10ml、磷酸氢二钾0.025~0.3g、氯化钠5g、微量元素液100ml、琼脂1.3g、糠浆2ml,其余为水;pH值7.0~7.5、温度范围25~45℃、盐浓度7~10%。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102439259A (zh) * 2009-03-27 2012-05-02 卢卡技术公司 用于刺激含碳材料矿床中的生物成因气体生成的表面活性剂改良剂
CN107165610A (zh) * 2017-06-06 2017-09-15 陕西博秦生物工程有限公司 利用真菌胞外酶与微生物交替进行的双重强化采油方法

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CN102439259B (zh) * 2009-03-27 2015-06-17 特兰斯沃尔德技术有限公司 用于刺激含碳材料矿床中的生物成因气体生成的表面活性剂改良剂
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