CN101080223B - 辛二酰苯胺异羟肟酸制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了具有特定溶解特征的药物组合物或结晶组合物，所述组合物包含辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分。本发明还提供了制备所述结晶组合物或药物组合物的方法。本发明还提供了具有特定粒径分布的组合物。

Description

辛二酰苯胺异羟肟酸制剂及其制备方法

发明领域

本发明提供了具有特定溶解特征的药物组合物或结晶组合物，所述组合物包含辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamicacid)或其可药用盐作为活性组分.本发明提供了制备所述结晶组合物或药物组合物的方法。本发明还提供了具有特定粒径分布的组合物。

发明背景

在本申请中，通过括号内的阿拉伯数字来引用多个不同出版物作为参考.对于这些出版物的完整引用可参考说明书结尾处。

癌症是其中细胞群体在不同程度上已经变得对于通常支配增殖和分化的控制机制没有反应.多年来，对于癌症的化疗，主要有两种基本策略：a)通过干扰性激素的产生或外周作用来阻断激素依赖性肿瘤细胞增殖；和b)通过将其暴露于细胞毒性物质来直接杀死癌细胞，所述细胞毒性物质损伤肿瘤和正常细胞群体.

还通过诱导肿瘤细胞的终端分化来尝试进行癌症治疗(1)。据报道，在细胞培养模型中，已经通过将细胞暴露于各种刺激来进行分化，这些刺激包括：环AMP和视黄酸(2，3)、阿柔比星和其它蒽环类药物(4)。

尽管在肿瘤学领域已经取得了很多进展，但是大部分实体瘤在晚期仍然是不能治愈的.细胞毒害治疗在很多情况下使用，然而，对于患者，其经常引起高的发病率，而没有显著的临床益处。人们正在开发能够治疗和控制晚期恶性肿瘤的具有较低毒性和较高特异性的活性剂。

有大量证据表明，致肿瘤转化不必须破坏癌细胞进行分化的潜力(1，5，6)。有很多具有以下特征的肿瘤细胞的实例：这些肿瘤细胞对于正常增殖调节剂没有反应，并且在其分化程序的表达中似乎被阻断，可以被诱导进行分化和停止复制.有多种活性剂，包括一些比较简单的极性化合物(5，7-9)、维生素D和视黄酸衍生物(10-12)、类固醇激素(13)、生长因子(6，14)、蛋白酶(15，16)、肿瘤促进剂(17，18)和DNA或RNA合成抑制剂(4，19-24)可以诱导各种转化的细胞系和初始人肿瘤移植物以表达更多分化的特征。

组蛋白脱乙酰化酶抑制剂例如辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)属于具有诱导肿瘤细胞生长抑制、分化和/或细胞程序死亡的能力的活性剂类别(25).这些化合物靶向肿瘤细胞变为恶性的能力所固有的机制，因为在能够有效抑制动物中肿瘤生长的剂量下，他们似乎不具有毒性(26).有几个证据表明，组蛋白乙酰化和脱乙酰化是实现细胞中转录调控的机制(27).据信这些作用是经由染色质结构的改变，通过改变组蛋白对于核小体中卷曲DNA的亲合力来进行的。在核小体中已经鉴定出了5类组蛋白(称为H1、H2A、H2B、H3和H4)。每个核小体在其核心内含有两个类型的组蛋白，除了对于H1，其单独地存在于核小体结构的外层部分中.据信，当组蛋白是低乙酰化时，则组蛋白对于DNA磷酸骨架具有更大的亲合力.该亲合力引起DNA紧密地结合在组蛋白上，并且使得DNA难以达到转录调控元件和结构。乙酰化状态的调控通过两种酶复合物，组蛋白乙酰转移酶(HAT)和组蛋白脱乙酰酶(HDAC)之间的活性平衡而发生.据信，低乙酰化状态能够抑制所结合的DNA的转录。该低乙酰化状态被包括HDAC酶在内的大多蛋白复合物催化.特别是，已经证实，HDAC催化乙酰基从染色质核心组蛋白上的除去.

已经证实，SAHA(ZOLINZA^TM(vorinostat))可用于治疗癌症，选择性地诱导肿瘤细胞的终端分化，诱导细胞生长抑制和/或诱导细胞程序死亡。据信，SAHA对HDAC的抑制是通过与该酶的催化位点之间的直接相互作用来发生的，这是通过X-射线晶体学研究来证实的(28)。据信，HDAC抑制的结果不具有对于基因组的泛化作用，而是仅影响一小组基因组(29).使用与HDAC抑制剂一起培养的恶性细胞系来进行的DNA微分析所提供的证据表明，有限(1-2％)数量的基因其产物发生了改变。例如，在培养物中被HDAC抑制剂处理的细胞表现出细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21的一致诱导(30)。该蛋白在细胞周期阻抑中起重要作用.据信，HDAC抑制剂通过以下方式提高p21的转录：在p21基因区域传播高乙酰化状态，由此使得基因能够到达转录结构.在区域结合组蛋白的乙酰化中，其表达不被HDAC抑制剂影响的基因不表现出改变(31).

发明概述

本发明提供了具有特定溶解特征的药物组合物，所述组合物包含辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分。在一个实施方案中，与图1所示的参照溶解特征相比，药物组合物的活性组分的体外溶解特征具有至少50-100的相似系数(f2)。本发明还提供了用于口服给药的药物组合物，以及基于其的单位剂型.

本发明还提供了结晶组合物，所述组合物包含辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分，其中与图2所示的参照溶解特征相比，约100mg活性组分的体外溶解特征具有至少50-100的相似系数(f2).

本发明还提供了制备所述药物组合物的方法.本发明还提供了具有特定粒径分布的组合物。

附图概述

图1图1显示了得自参照胶囊批号0683_004A001的SAHA的溶解特征.该胶囊含有约100mg活性组分SAHA和赋形剂.

图2图2显示了在包入胶囊之前参照SAHA API批号1007D(混合SAHA晶体)的溶解特征.该溶解特征是基于约100mg SAHA测定的.

图3图3显示了本发明药物胶囊的胶囊内容物的粒径分布.这些胶囊含有约100mg活性组分SAHA和赋形剂。

图4图4显示了得自包入胶囊之前不同批号的活性组分SAHA的粒径分布(API).

图5图5显示了得自本发明药物胶囊的SAHA的溶解特征。该胶囊含有约100mg活性组分SAHA和赋形剂。

图6图6显示了在包入胶囊之前SAHA API批号(混合SAHA晶体)的溶解特征。该溶解特征是基于约100mg SAHA测定的.

图7图7显示了SAHA的X-射线衍射图.图7A-E：SAHA晶形I-V。

图8图8显示了对于参照样本(目标)、胶囊288和283，通过计算机模型测定的溶解特征(曲线)，以及实验溶解特征(由圆点、三角形和正方形表示)。

图9图9显示了对于不同胶囊密度，在与API283的混合物中，关于API288的分数的f2值。

图10图10显示了包胶囊条件对于胶囊中SAHA溶解的影响，胶囊是由含有30％湿研磨的API288和70％未研磨的API283的混合物制得的.

图11图11显示了破裂速度常数与胶囊内容物的密度之间的关系.

图12图12显示了得自不同批号SAHA胶囊的活性组分(API)的标准化粒径分布。

图13图13显示了Lot C0666001的胶囊内容物的粒径分布。

图14图14显示了Lot C0667001的胶囊内容物的粒径分布.

图15图15显示了在禁食状态和接受高脂肪膳食后给予单次口服剂量，vorinostat的平均血清浓度.

图16图16显示了接受高脂肪膳食后，口服400mg单或多剂量，vorinostat的平均血清浓度。

发明详述

术语“可药用载体”是包括任何以及所有溶剂、分散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等，其与药物的给药相容，并且将保持活性组分在药物组合物中的特定溶解速度.合适的载体描述在最新一版的Remington’s Pharmaceutical Sciences中，这是该领域的标准教科书，其引入本文以供参考.也可以使用脂质体和非水载体例如不挥发油。对于药物活性物质，使用这样的介质和试剂是本领域众所周知的.除了与活性组分不相容的任何常规介质或试剂以外，涉及其在组合物中的应用.还可以将补充性活性化合物掺入到组合物内。

术语“f2”或“F2”是指相似系数，其是通过如公式1所示，逐点比较新的体外溶解特征与参照体外溶解特征来测定的。

$f_2=50\log \left\{{[1+1/n\underset{t=1}{\overset{n}{\mathrm{\Σ}}}{(R_t-T_t)}^2]}^{-0.5}x100\right\}$ (公式1)

R_t是指对于参照物，在每一时间点(t)溶解的化合物的百分比。T_t是指对于测试样本，在每一时间点(t)溶解的化合物的百分比。n是指用于计算的时间点的数目。50或更大的f₂值视为反映了类似的体外溶解特征。

对于本发明的目的，药物组合物的全部活性组分的体外溶解速度或特征是根据实施例14中的步骤和条件从整个药物组合物中测定的。在一个实施方案中，体外溶解速度或特征是使用具有螺旋钻孔器的USP Dissolution Apparatus II(Quality Lab Accessories L.L.C.，Manville，NJ)在900mL2.0％Tween(TCI America，Portland，Oregon)中于37±0.5℃温度下以及以100rpm旋转的桨测定的.整个药物组合物包括全部活性组分，并且如果药物组合物含有胶囊壳、载体、赋形剂、稀释剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂或在下面药物组合物章节中描述的任何另外的物质，则用这些组分进行测定。

对于本发明的目的，“一部分包含约100mg活性组分的单个口服单位剂型”的体外溶解速度或特征是这样测定的：从单个口服单位剂型中取回包含约100mg活性组分的组合物，使用具有螺旋钻孔器的USP Dissolution Apparatus II(Quality Lab Accessories L.L.C.，Manville，NJ)在900 mL 2.0％Tween(TCI America，Portland，Oregon)中于37±0.5℃温度下以及以100rpm旋转的桨进行测定。如果单个口服单位剂型含有胶囊壳、载体、赋形剂、稀释剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂或在下面药物组合物章节中描述的任何另外的物质，则用这些组分进行测定.

“药物组合物的约100mg活性组分”的体外溶解速度或特征是根据实施例15中的步骤和条件测定的。在一个实施方案中，体外溶解速度或特征是使用具有螺旋钻孔器的USP Dissolution Apparatus II(Quality Lab Accessories L.L.C.，Manville，NJ)在900mL2.0％Tween(TCI America，Portland，Oregon)中于37±0.5℃温度下以及以100rpm旋转的桨测定的。

对于本发明的目的，粒径分布(在每一粒径的％体积)是通过装配有RODOS粉末分散系统的Sympatec激光衍射分析仪(HELOSH1006，Clausthal-Zellerfeld，Germany)测定的。使用0.1巴气压，通过激光束把样本粉化，使用具有5-20％的目标遮蔽的850或1750-μm焦距透镜来收集粒径分布。使用fraunhofer光学模型来去卷积样本散射模式，以产生所得粒径分布。

对于本发明的目的，％体积活性组分是这样测定的：从药物组合物中取回颗粒内容物(即活性组分和赋形剂)，测定颗粒内容物的粒径分布(每一粒径的％体积)，减去不是活性组分的颗粒的粒径分布，将活性组分的％体积标准化。通过将％体积乘以活性组分相对于颗粒内容物的100％/百分比来将％体积活性组分标准化.

当在上下文中用于量时，术语“约”是指所指定量的±10％。

对于本发明的目的，对于取决于校准、样本或仪器操作的X-射线衍射花样，在20的峰可以移动最高达±0.3°(误差)。在一个实施方案中，在X-射线衍射花样中的所有峰都移动最高达+0.3°，或最高达-0.3°。在该误差内的X-射线衍射花样或峰视为相同或基本上类似。具有特定溶解速度的组合物

本发明提供了包含辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分的药物组合物，其中该药物组合物的全部活性组分在体外在10分钟溶解43-63％，在30分钟溶解66-86％，在60分钟溶解77-97％。在一个实施方案中，药物组合物的全部活性组分在体外在15分钟溶解52-72％，在30分钟溶解66-86％，在45分钟溶解73-93％。在另一个实施方案中，药物组合物的全部活性组分在体外在10分钟溶解43-63％，在15分钟溶解52-72％，在20分钟溶解58-78％，在30分钟溶解66-86％，在45分钟溶解73-93％，在60分钟溶解77-97％。在一个实施方案中，药物组合物的全部活性组分在体外在10分钟溶解46-60％，在15分钟溶解55-69％，在20分钟溶解61-75％，在30分钟溶解69-83％，在45分钟溶解76-90％，并且在60分钟溶解80-94％。在一个实施方案中，在15分钟至少45％但是小于或等于75％的全部活性组分溶解，在60分钟至少75％的全部活性组分溶解。

在另一个实施方案中，本发明提供了包含辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分的药物组合物，其中与图1所示的参照溶解特征相比，药物组合物的全部活性组分的体外溶解特征具有至少50-100的相似系数(f2)。在一个实施方案中，f2是56-100。在一个实施方案中，f2是60-100。在一个实施方案中，f2是65-100。在另一个实施方案中，f2是80-100。

在一个实施方案中，活性组分是结晶。在另一个实施方案中，活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸。在一个具体实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸是SAHA晶形I，并且特征在于基本上类似于附图7A所示的X-射线衍射花样。在一个实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸的特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0°2θ的特征峰.

在一个实施方案中，SAHA晶形I的特征在于，其X-射线衍射花样包括在约9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0和43.3°2θ的特征峰。在一个实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸的特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0，43.3°20的特征峰，并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0°20的峰。在一个实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸的特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0°2θ的特征峰，并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0°20的峰。在一个实施方案中，SAHA晶形I的特征还在于，缺乏一个在约<8.7，10.0-10.2，13.4-14.0，15.0-15.2，17.5-19.0，20.1-20.3，21.1-21.3，22.0.-22.22，22.7-23.0，25.0-25.5，26.0-26.2，和27.4-27.6°20的峰。在另一个实施方案中，SAHA晶形I的特征还在于，如通过Perkins Elmer DSC 6 Instrument.5测定的差示扫描量热法(DSC)热分析图具有在约164.4±2.0的一个最大值.在一个实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸具有以下晶胞参数： c＝16.4α＝90°，β＝97.8°，γ＝90°，空间群P2₁/n.

在一个具体实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸是SAHA晶形IV，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在约8.8，9.3，11.0，12.4，17.4，19.4，19.9，22.4，22.9，23.83，24.2，24.8，25.8，27.0，27.8，28.4°2θ的特征峰。

在一个实施方案中，本发明提供了单一胶囊，所述胶囊包含约100mg辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分，其中全部活性组分具有特征如下的体外溶解特征：在15分钟至少45％但是小于或等于75％的全部活性组分溶解，在60分钟至少75％的全部活性组分溶解，其中活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0°2θ的特征峰，并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0°2θ的峰。

在另一个实施方案中，本发明提供了单一胶囊，所述胶囊包含约100mg辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分，其中与图1所示的参照溶解特征相比，全部活性组分的体外溶解特征具有至少50-100的相似系数(f2)，其中活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0°2θ的特征峰，并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0°2θ的峰。

在另一个实施方案中，本发明提供了单一胶囊，所述胶囊包含约100mg辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分，其中全部活性组分具有特征如下的体外溶解特征：在10分钟溶解43-63％，在30分钟溶解66-86％，并且在60分钟溶解77-97％，其中活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0°2θ的特征峰，并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0°2θ的峰。

本发明还提供了单一口服单位剂型，所述剂型包含约120mg-约600mg辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分，其中与图1所示的参照溶解特征相比，包含约100mg活性组分的一部分所述单位剂型的体外溶解特征具有至少50-100的相似系数(f2).在一个实施方案中，与图1所示的参照溶解特征相比，体外溶解特征具有至少70-100的相似系数(f2)。在一个实施方案中，活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0°2θ的特征峰，并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0°2θ的峰.

本发明还提供了结晶组合物，所述组合物包含辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分，其中与图2所示的参照溶解特征相比，约100mg活性组分的体外溶解特征具有至少50-100的相似系数(f2).该结晶组合物是药物组合物的前体.当药物组合物呈胶囊形式时，结晶组合物是在包胶囊之前具有或不具有赋形剂的活性组分。在一个实施方案中，活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0°2θ的特征峰，并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0°2θ的峰。

活性组分可以是结晶形式，条件是活性组分表现出特定溶解速度。活性组分还可以是非晶形.还可以将活性组分颗粒微粉化，或者活性组分可以是聚集的，颗粒，粉末，油，油悬浮液或任何其它固体形式.

在上述组合物的特定实施方案中，活性组分是辛二酰苯胺异羟肟酸。

本发明还包括药物组合物，所述组合物包含SAHA与碱的可药用盐，所述碱是无机碱例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化钙或氢氧化铁，和有机碱例如异丙胺、三甲胺、2-乙基氨基乙醇、组氨酸、普鲁卡因等。

本发明还包括含有SAHA的水合物的药物组合物.术语“水合物”包括但不限于半水合物、一水合物、二水合物、三水合物等。具有特定粒径分布的组合物

本发明还提供了药物组合物，所述组合物包含辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分，其中对于从约90-110微米到约120-250微米的粒径，％体积增加，在约120-250微米达到峰值，在该峰值之后减小。在一个实施方案中，与其它粒径的％体积相比，峰值是最高％体积.

在一个实施方案中，粒径在约90-110微米之间的活性组分的％体积为约2.0％-约10％。粒径在约120-250微米之间的活性组分的％体积为约4.0％-约12％.在一个实施方案中，粒径在约90-110微米之间的活性组分的％体积为约3.0％-约9％，并且粒径在约120-250微米之间的活性组分的％体积为约5.0％-约11.5％。

在另一个实施方案中，粒径在约90-110微米之间的颗粒的％体积为约5.5％-约8.0％，并且粒径在约120-250微米之间的颗粒的％体积为约6.5％-约9.0％.在一个实施方案中，粒径在约90-110微米之间的颗粒的％体积为约6.0％-约7.5％，并且粒径在约120-250微米之间的颗粒的％体积为约约7.0％-约8.5％。

在一个实施方案中，粒径小于约105微米的活性组分的％体积为约45-85％，并且粒径大于约105微米的活性组分的％体积为约55-15％。

在一个实施方案中，对于从约20-25微米到约35-40微米的粒径，活性组分的％体积增加，在约35-40微米达到峰值，并且在该峰值之后减小。在一个实施方案中，粒径在约20-25微米的活性组分的％体积为约1.0％-约4％，并且粒径在约35-40微米的活性组分的％体积为约3.0％-约7％.

在一个实施方案中，活性组分是结晶。在另一个实施方案中，活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸。在一个具体实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸是SAHA晶形I，并且其特征在于，其X-射线衍射花样基本上类似于图7A所示衍射花样。在一个实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸的特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0°2θ的特征峰.

在一个实施方案中，SAHA晶形I的特征在于，其X-射线衍射花样包括在约9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0和43.3°2θ的特征峰。在一个实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸的特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0，43.3°2θ的特征峰，并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0°2θ的峰。在一个实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸的特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0°2θ的特征峰，并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0°2θ的峰。在一个实施方案中，SAHA晶形I的特征还在于，缺乏一个在约<8.7，10.0-10.2，13.4-14.0，15.0-15.2，17.5-19.0，20.1-20.3，21.1-21.3，22.0.-22.22，22.7-23.0，25.0-25.5，26.0-26.2，和27.4-27.6°2θ的峰。在另一个实施方案中，SAHA晶形I的特征还在于，如通过Perkins Elmer DSC 6 Instrument.5测定的差示扫描量热法(DSC)热分析图具有在约164.4±2.0的一个最大值.在一个实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸具有以下晶胞参数： c＝16.4α＝90°，β＝97.8°，γ＝90°，空间群P2₁/n。

在一个具体实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸是SAHA晶形IV，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在约8.8，9.3，11.0，12.4，17.4，19.4，19.9，22.4，22.9，23.83，24.2，24.8，25.8，27.0，27.8，28.4°2θ的特征峰。

药物组合物

可以将活性组分掺入到适于口服给药的药物组合物中。可任选将活性组分与可药用载体或赋形剂一起掺入。在一个实施方案中，可药用载体是固体颗粒形式。在本发明中，可以使用通常用作载体或稀释剂的任何惰性赋形剂，例如树胶、淀粉、糖、纤维素材料或其混合物。在一个实施方案中，稀释剂是微晶纤维素.组合物还可以包含崩解剂(例如交联羧甲基纤维素钠)和润滑剂(例如硬脂酸镁)，并且还可以包含一种或多种选自下列的添加剂：粘合剂、缓冲剂、蛋白酶抑制剂、表面活性剂、助溶剂、增塑剂、乳化剂、稳定剂、粘度增加剂、甜味剂、成膜剂或其任何组合。此外，本发明组合物可以呈控释或速释制剂的形式。

在一个实施方案中，本文所述组合物还可以包含微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁.制剂中活性组分和各种赋形剂的百分比可以改变.例如，组合物可以包含约20-90％，约50-80％或约60-70％重量的活性组分。此外，组合物可以包含约10-70％，约20-40％，约25-35％重量的作为载体或稀释剂的微晶纤维素.此外，组合物可以包含约1-30％，约1-10％，约2-5％重量的作为崩解剂的交联羧甲基纤维素钠。此外，组合物可以包含约0.1-5％或约0.5-1.5％重量的作为稀释剂的硬脂酸镁。

在一个实施方案中，药物组合物是约50-80％重量的活性组分；约20-40％重量的微晶纤维素；约1-10％重量的交联羧甲基纤维素钠；和约0.1-5％重量的硬脂酸镁。在另一个实施方案中，药物组合物是约60-70％重量的活性组分；约25-35％重量的微晶纤维素；约2-5％重量的交联羧甲基纤维素钠；和约0.5-1.5％重量的硬脂酸镁.在一个实施方案中，所述药物组合物包含约50-200mg或50-600mg SAHA晶形I。

本发明的一个实施方案是包含在明胶胶囊中的SAHA与微晶纤维素NF(Avicel Ph101)，交联羧甲基纤维素钠NF(AC-Di-Sol)和硬脂酸镁NF的固体制剂.另一个实施方案是包含下列组分的药物组合物：约100mg活性组分、约44.3mg微晶纤维素、4.5mg交联羧甲基纤维素钠、约1.2mg硬脂酸镁.

在一个实施方案中，药物组合物是口服给药，即作为固体或液体形式给药。合适的固体口服制剂包括例如片剂、胶囊、丸剂、粒剂、小丸剂等。合适的固体口服制剂包括例如乳剂、油制剂等。在本发明的一个实施方案中，组合物在胶囊中配制。根据该实施方案，除了活性组分以及惰性载体或稀释剂以外，本发明组合物还包含硬明胶胶囊。

固体载体/稀释剂包括但不限于树胶、淀粉(例如玉米淀粉、预胶化淀粉)、糖(例如乳糖、甘露醇、蔗糖、葡萄糖)、纤维素材料(例如微晶纤维素)、丙烯酸酯(例如聚丙烯酸甲酯)、碳酸钙、氧化镁、滑石粉或其混合物.

对于液体制剂，可药用载体可以是非水溶液、悬浮液、乳液或油。非水溶剂的实例有丙二醇、聚乙二醇、可注射有机酯例如油酸乙酯。油的实例有石油、动物油、植物油或合成油，例如花生油、豆油、矿物油、橄榄油、向日葵油和鱼肝油。悬浮液还可以包括下列组分：不挥发性油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶剂；抗菌剂例如苯甲醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂例如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂例如乙二胺四乙酸(EDTA).

此外，组合物还可以包含粘合剂(例如阿拉伯胶、玉米淀粉、明胶、卡波姆、乙基纤维素、瓜尔胶、羟丙基纤维素、羟甲基纤维素、聚维酮)、崩解剂(例如玉米淀粉、马铃薯淀粉、藻酸、二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、瓜尔胶、羟乙酸淀粉钠、Primogel)、洗涤剂(例如Tween20、Tween80、Pluronic F68、胆汁酸盐)、蛋白酶抑制剂、表面活性剂(例如十二烷基硫酸钠)、渗透促进剂、助溶剂(例如二醇、聚乙二醇)、助流剂(例如胶态二氧化硅)、抗氧化剂(例如抗坏血酸、焦亚硫酸氢钠、丁化羟基苯甲醚)、稳定剂(例如羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素)、粘度增加剂(例如卡波姆、胶态二氧化硅、乙基纤维素、瓜尔胶)、甜味剂(例如蔗糖、天冬甜素、柠檬酸)、矫味剂(例如薄荷油、水杨酸甲酯或橙味矫味剂)、防腐剂(例如Thimerosal、苯甲醇、对羟基苯甲酸酯)、润滑剂(例如硬脂酸、硬脂酸镁、聚乙二醇、十二烷基硫酸钠)、助流剂(例如胶态二氧化硅)、增塑剂(例如邻苯二甲酸二乙酯、柠檬酸三乙酯)、乳化剂(例如卡波姆、羟丙基纤维素、十二烷基硫酸钠)、聚合物包衣(例如poloxamers或poloxamines)、包衣和薄膜形成剂(例如乙基纤维素、丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯)和/或辅助剂.

在一个实施方案中，将活性组分用载体配制，所述载体将保护化合物不被身体快速消除，例如控释制剂，包括植入剂和微包囊递送系统。可以使用生物可降解的、生物相容的聚合物，例如乙烯乙酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。制备这样的制剂的方法对于本领域技术人员来说是显而易见的。这些材料可以从AlzaCorporation and Nova Pharmaceuticals，Inc商购获得。脂质体悬浮液(包括靶向于感染细胞的具有病毒抗原的单克隆抗体的脂质体)也可以用作可药用载体.这些脂质体可以根据本领域技术人员已知的方法，例如U.S.专利4,522,811中，描述的方法制得.

含有活性组分的药物组合物的制备是本领域众所周知的，例如通过混合、制粒或成片加工来制得。经常将活性治疗组分与可药用并且与活性组分相容的赋形剂混合。对于口服给药，将活性剂与用于该目的的常用添加剂例如载体、稳定剂或惰性稀释剂混合.并且通过常规方法转化成用于给药的合适剂型例如如上所述的片剂，包衣片剂，硬或软明胶胶囊，水、醇或油悬浮液等.

在一个实施方案中，将口服组合物配制成易于给药和剂量一致性的单位剂型.本文所用的单位剂型称为物理不连续单位，其适于作为治疗个体的单位剂量；每个单位含有经计算能够产生所需疗效的预定量的活性组分和所需药物载体。关于本发明单位剂型的规格决定于并且直接依赖于活性组分的独特性质和希望达到的疗效，以及这样的活性化合物用于治疗个体的领域所固有的限制。在一些实施方案中，单位剂型含有约600mg、550mg、500mg、450mg、400mg、350mg、300mg、250mg、200mg、150mg、110mg、105mg、100mg、95mg、90mg、85mg、80mg、75mg、70mg、65mg、60mg、55mg、50mg、45mg或40mg活性组分。在一个实施方案中，活性组分的量是约100mg.

药物组合物还可以与关于给药的说明书一起包含在容器、包装或配药器中。在一个实施方案中，药物组合物是单一胶囊，其中活性组分的量是约100mg。在一个实施方案中，药物组合物是两个胶囊，其中每个胶囊含有约50mg的活性组分。

制备具有特定溶解速度的组合物的方法

本发明提供了制备结晶组合物的方法，所述结晶组合物包含辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分，其中与图2所示的参照溶解特征相比，约100mg活性组分的体外溶解特征具有至少50-100的相似系数(f2)，所述方法包括下列步骤：

(a)结晶至少两批所述活性组分；和

(b)混合至少两批结晶活性组分以产生所述结晶组合物.

在另一个方法中，结晶组合物是通过下列步骤制得的：

(a)研磨或湿研磨结晶活性组分，以产生至少一个第一批结晶活性组分；

(b)将活性组分结晶以产生至少一个第二批结晶活性组分，该第二批结晶活性组分在大小上大于研磨或湿研磨的结晶活性组分；

(c)将至少第一批与至少第二批结晶活性组分混合，以获得所述结晶组合物。

然后可将结晶组合物进一步加工，以制得药物组合物，其中与图1所示的参照溶解特征相比，全部活性组分的体外溶解特征具有至少50-100的相似系数(f2).这可通过给结晶组合物施加压力，例如通过将结晶组合物与或不与赋形剂一起包胶囊来实现.由于在胶囊包装过程中产生的压力，活性组分的颗粒会发生破裂，这会影响粒径分布，从而影响溶解速度.颗粒破裂的量可以受到胶囊密度的影响，而胶囊密度受到填充针和胶囊填充重量的影响。

因此，在另一个实施方案中，本发明提供了制备药物组合物的方法，所述组合物包含辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分，其中与图1所示的参照溶解特征相比，药物组合物的全部活性组分的体外溶解特征具有至少50-100的相似系数(f2)，所述方法包括下列步骤：

(a)将至少两批所述活性组分结晶；

(b)将至少两批结晶活性组分混合；和

(c)从混合的两批活性组分制备所述药物组合物。

在一个实施方案中，结晶活性组分是通过将活性组分或粗制的活性组分从有机溶剂或有机溶剂与水的混合物中结晶而制得的。在一个实施方案中，有机溶剂是甲醇、乙醇、乙腈、异丙醇和乙酸当中的一种或多种。在一个实施方案中，有机溶剂是乙醇.在一个实施方案中，混合物包含约40-99％乙醇。在一个实施方案中，混合物包含约40-99％乙醇和60-1％水.在一个实施方案中，步骤(c)是通过将一部分混合的结晶活性组分包入胶囊来进行的。

在另一个方法中，药物组合物是通过下列步骤制得的：

(a)研磨或湿研磨结晶活性组分，以产生至少一个第一批结晶活性组分；

(b)将活性组分结晶以产生至少一个第二批结晶活性组分，该第二批结晶活性组分在大小上大于研磨或湿研磨的结晶活性组分；

(c)将至少第一批与至少第二批结晶活性组分混合；和

(d)从所述混合的第一批和第二批制备所述组合物。

在一个实施方案中，第一批结晶活性组分具有小于约50μm的平均粒径，第二批结晶活性组分具有小于约130μm的平均粒径.在另一个实施方案中，第一批结晶活性组分具有小于约50μm的平均粒径，第二批结晶活性组分具有约120-160μm的平均粒径。在一个具体实施方案中，95％的第一批结晶活性组分小于约100μm。在一个实施方案中，95％的第二批晶体小于约300μm.在一个实施方案中，步骤(d)是通过将一部分混合的结晶活性组分包入胶囊来进行的.

在一个实施方案中，第一批结晶活性组分具有小于约60μm的平均粒径，并且第二批结晶活性组分具有约100-250μm的平均粒径。在另一个实施方案中，第一批结晶活性组分具有约25-45μm的平均粒径，并且第二批结晶活性组分具有约130-180μm的平均粒径。

在一个实施方案中，结晶活性组分是通过将活性组分或粗制的活性组分从有机溶剂或有机溶剂与水的混合物中结晶而制得的。在一个实施方案中，有机溶剂是甲醇、乙醇、乙腈、异丙醇和乙酸当中的一种或多种.在一个实施方案中，有机溶剂是乙醇.在一个实施方案中，混合物包含约40-99％乙醇。在一个实施方案中，混合物包含约40-99％乙醇和60-1％水.

在另一个实施方案中，在步骤(c)中，将约40-95％的第二批结晶活性组分与约60-5％的第一批研磨的结晶活性组分混合.

在上述方法的一个实施方案中，结晶步骤涉及加入晶种。在上述方法的另一个实施方案中，混合比例是通过计算机模拟程序来确定的，该程序使用包胶囊破裂模型和溶解模型.在一个实施方案中，将混合比例优化以获得其中SAHA的溶解速度特征类似于图1中参照溶解速度特征的组合物。

本发明提供了制备辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物的重结晶活性组分的方法，所述方法包括下列步骤：

(a)将结晶活性组分加到有机溶剂、水或其混合物中以形成浆液；

(b)把浆液加热以建立2-30％未溶解的结晶活性组分；和

(c)将该浆液冷却以获得重结晶的活性组分.

在一个实施方案中，(a)中的结晶活性组分具有小于约60μm的平均粒径.

在另一个实施方案中，结晶活性组分是通过以下步骤制得的：

(i)将结晶活性组分加到有机溶剂、水或其混合物中以形成浆液；和

(ii)将该浆液湿研磨以获得湿研磨的结晶活性组分。

在另一个实施方案中，结晶活性组分是通过将结晶活性组分进行干研磨而制得的。在另一个实施方案中，结晶活性组分是在羟基胺存在下获得的.

在一个实施方案中，在步骤(a)中，使用40-99％乙醇和60-1％水.在另一个实施方案中，在步骤(b)中，把浆液在60-75℃加热1-3小时。在另一个实施方案中，步骤(c)是通过在约15-72小时内从60-75℃冷却至25-5℃来进行的。

在另一个实施方案中，上述方法还包括将约40-95％重结晶的活性组分与约60-5％平均粒径小于约60μm的结晶活性组分混合。

本发明还提供了制备辛二酰苯胺异羟肟酸的结晶活性组分的方法，所述方法包括下列步骤：

(a)将结晶活性组分加到40-99％乙醇与60-1％水的混合物中以形成浆液；

(b)将该浆液加热以建立2-30％未溶解的结晶活性组分；

(c)将该浆液冷却以获得重结晶的活性组分；和

(d)将约40-95％重结晶的活性组分与约60-5％平均粒径小于约60μm的结晶活性组分混合。

本发明还提供了制备辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物的重结晶的活性组分的方法，所述方法包括下列步骤：

(a)将结晶活性组分加到有机溶剂或有机溶剂与水的混合物中以形成浆液；

(b)把该浆液湿研磨，以获得平均粒径小于约50μm的结晶活性组分；

(c)将湿研磨的浆液加热以建立约5-30％晶床；和

(d)把该浆液冷却至25℃以下以获得重结晶的活性组分.

在一个实施方案中，在步骤(a)中，混合物含有乙醇和水，特别是约40-95％乙醇。在一个具体实施方案中，使用约1:1乙醇与水的混合物。在另一个具体实施方案中，使用约9:1乙醇与水的混合物。在一个实施方案中，在湿研磨步骤之后，至少80-95％，或者在另一个实施方案中，95％的结晶活性组分具有小于约100μm的粒径。

在一个实施方案中，步骤c)建立约10-20％晶床。在一个具体实施方案中，步骤c)建立约15％晶床。在一个实施方案中，步骤c)是通过将湿研磨的浆液在60-70℃加热1-3小时来实现的。在另一个实施方案中，步骤c)是通过将湿研磨的浆液在63-66℃加热1-3小时来实现的.在一个具体实施方案中，步骤c)是通过将湿研磨的浆液在64-65℃加热约1-3小时。

在一个实施方案中，步骤(d)是通过在约15-30小时内从60-70℃冷却至25-5℃来进行的。在另一个实施方案中，步骤(d)是通过在约15-30小时内从64-65℃冷却至20-5℃来进行的。冷却过程可涉及以下操作的组合：在规定时间内降低温度，和在规定时间内保持温度。

上述方法还包括以下步骤：将重结晶的活性组分与通过等同于步骤(a)和(b)的步骤获得的湿研磨的结晶活性组分混合.湿研磨的结晶活性组分可以取自一部分步骤b)的湿研磨材料。或者，湿研磨的结晶活性组分可以单独地根据步骤a)和b)制得。因此，湿研磨的结晶活性组分可以在与重结晶的活性组分的结晶条件相比相同或不同的溶剂或混合物中制得。混合比例可以通过计算机模拟软件来确定。在一个实施方案中，混合比例是60-80％重结晶的活性组分与40-20％湿研磨的结晶活性组分。在一个具体实施方案中，混合比例是约70％重结晶的活性组分与约30％湿研磨的结晶活性组分。在另一个具体实施方案中，在步骤(a)中，使用9:1或1:1的乙醇与水的混合物，并且混合比例是70％重结晶的活性组分和30％湿研磨的结晶活性组分。

本发明还提供了制备辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物的重结晶的活性组分的方法，所述方法包括下列步骤：

(a)在第一个容器中，将结晶活性组分加到有机溶剂、水或其混合物中以形成浆液；

(b)将该浆液在第一个容器中加热以溶解基本上所有结晶活性组分；

(c)将步骤(b)的混合物在第一个容器中冷却至使溶液过饱和的温度；

(d)将结晶活性组分的晶种加到步骤(c)的混合物中；

(e)将步骤(d)的混合物在与步骤(c)相同的温度老化；

(f)将步骤(e)的混合物冷却以获得重结晶的活性组分。

在一个实施方案中，步骤(d)包括下列步骤：

(i)将结晶活性组分加到有机溶剂、水或其混合物中以形成晶种浆液；

(ii)将晶种浆液加热和老化以溶解一部分晶种；

(iii)将步骤(ii)的混合物冷却至与步骤(c)相同的温度；

(iv)将步骤(iii)的晶种浆液转移到第一个容器中。

在一个实施方案中，步骤(i)的结晶活性组分具有小于约60μm的平均粒径。在另一个实施方案中，步骤(i)是通过下列步骤制得的：(v)将结晶活性组分加到有机溶剂、水或其混合物中以形成晶种浆液；

(vi)将该浆液湿研磨以获得湿研磨的结晶活性组分.

在另一个实施方案中，步骤(i)是通过下列步骤制得的：

(v)将结晶活性组分干研磨；

(vi)将干研磨的结晶活性组分加到有机溶剂、水或其混合物中以形成晶种浆液.

在另一个实施方案中，在步骤(vi)之后，还包括在步骤(d之前分离、洗涤和干燥湿研磨的结晶活性组分的步骤。

在一个实施方案中，步骤(a)的结晶活性组分是在羟基胺存在下获得的。在另一个实施方案中，在步骤(a)和(i)中，使用40-99％乙醇与60-1％水的混合物。在另一个实施方案中，在步骤(a)和(i)中，使用比例为49:51-51:49的乙醇与水的混合物。

在一个实施方案中，在步骤(b)中，把浆液在15psig的最小压力下加热至60-75℃。在另一个实施方案中，在步骤(b)中，把浆液在15psig的最小压力下加热至67-70℃.

在一个实施方案中，在步骤(c)中，将混合物冷却至60-65℃。在另一个实施方案中，在步骤(c)中，将混合物冷却至61-63℃。

在一个实施方案中，在步骤(ii)中，把晶种浆液加热至62-66℃。在另一个实施方案中，在步骤(ii)中，把晶种浆液加热至64-65℃。

在一个实施方案中，步骤(f)是通过在约15-72小时内从60-70℃冷却至25--5℃来进行的.在另一个实施方案中，步骤(f)是通过在约15-72小时内从60-64℃冷却至0-10℃来进行的.

本发明还提供了制备辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物的重结晶的活性组分的方法，所述方法包括下列步骤：

(a)将结晶活性组分加到有机溶剂或有机溶剂与水的混合物中以形成浆液；

(b)把浆液湿研磨以获得平均粒径小于约50μm的结晶活性组分；

(c)将该湿研磨的浆液加热至60-70℃以产生晶种浆液；

(d)将结晶活性组分加到有机溶剂或有机溶剂与水的混合物中；

(e)将步骤(d)中的材料加热以溶解结晶活性组分；

(f)将步骤(e)中的材料冷却，以获得不具有任何成核作用的过饱和溶液；

(g)将步骤(c)中的晶种浆液转移到该过饱和溶液中；和

(h)将步骤(g)中的材料冷却至25℃以下.

在一个实施方案中，在步骤(a)和(d)中，使用含有乙醇和水，特别是含有约40-95％乙醇的混合物。在一个具体实施方案中，使用约1:1的乙醇与水的混合物.在另一个具体实施方案中，使用约9:1的乙醇与水的混合物.在步骤(a)或(d)中使用的有机溶剂的百分比可以相同或不同.例如，在步骤(a)中，可以使用约40-100％乙醇，而在步骤(d)中，可以使用约1:1或9:1的乙醇与水的混合物。在一个实施方案中，湿研磨步骤之后，至少80-95％或95％的结晶活性组分具有小于约100μm的粒径.

在一个实施方案中，步骤(c)建立约10-20％的晶床.在一个具体实施方案中，步骤(c)建立约15％的晶床.在另一个实施方案中，将湿研磨的浆液加热至63-67℃。在另一个实施方案中，在20-25psig将湿研磨的浆液加热至62-66℃，并且冷却至61-63℃.在另一个实施方案中，将湿研磨的浆液加热以溶解50％的晶种固体。

在一个实施方案中，在步骤(e)中，在65-75℃进行加热。在一个具体实施方案中，在步骤(e)中，在67-70℃进行加热。在一个实施方案中，在步骤(e)中，加热在20-25psig压力下进行。在另一个实施方案中，在步骤(f)中，在60-65℃进行冷却.在另一个实施方案中，在步骤(f)中，在61-63℃进行冷却。

在另一个实施方案中，在步骤(g)之后以及步骤(h)之前，将该混合物在61-63℃老化2小时。在一个实施方案中，在步骤(h)中，冷却是通过在26小时内的3个线性步骤来进行的.

本发明还提供了制备辛二酰苯胺异羟肟酸的重结晶的活性组分的方法，所述方法包括下列步骤：

(a)在第一个容器中，将结晶活性组分加到40-99％乙醇与60-1％水的混合物中以形成浆液；

(b)将第一个容器中的浆液加热以溶解基本上所有结晶活性组分；

(c)将步骤(b)中的混合物在第一个容器中冷却以让溶液过饱和；

(d)将结晶活性组分加到步骤(c)的混合物中；

(e)将步骤(d)的混合物在与步骤(c)相同的温度老化；

(f)将步骤(e)的混合物冷却以获得重结晶的活性组分。

在上述方法的一个具体实施方案中，活性组分是辛二酰苯胺异羟肟酸.在一个实施方案中，结晶活性组分是SAHA晶形I。

用有机溶剂进行结晶

在一个具体实施方案中，让结晶活性组分或重结晶的活性组分从有机溶剂或水与有机溶剂的混合物中结晶.有机溶剂可以是醇例如甲醇、乙醇或异丙醇.在一个实施方案中，有机溶剂是甲醇、乙醇、乙腈、异丙醇和乙酸中的一种或多种。在一个实施方案中，有机溶剂是乙醇。

在另一个实施方案中，有机溶剂与水的混合物包含约1-99％有机溶剂和约99-1％水.在另一个实施方案中，混合物包含约40-99％乙醇与60％-1％水.在一个实施方案中，混合物包含约15-85％有机溶剂和约1-15％水。在一个具体实施方案中，混合物包含约85％有机溶剂和约15％水。在另一个具体实施方案中，混合物包含1:1的乙醇与水。在另一个实施方案中，混合物包含9:1的乙醇与水。有机溶剂与水的百分比是按体积计。

在一个具体实施方案中，有机溶剂与水的混合物是醇与水的混合物(例如甲醇/水、乙醇/水、异丙醇/水等).然而，对于本领城技术人员来说显而易见的是，本文所述的结晶方法可以在任意合适的溶剂或溶剂混合物中进行，所述溶剂或溶剂混合物可以由有机合成领域技术人员容易地选择.本文所用的这样的合适有机溶剂包括，例如但不限于氯代溶剂、烃类溶剂、醚类溶剂、极性质子溶剂和极性非质子溶剂。合适的卤代溶剂包括但不限于四氯化碳、溴二氯甲烷、二溴氯甲烷、溴仿、氯仿、溴氯甲烷、二溴甲烷、丁基氯、二氯甲烷、四氯乙烯、三氯乙烯、1，1，1-三氯乙烷、1，1，2-三氯乙烷、1，1-二氯乙烷、1，2-二氯乙烷、2-氯丙烷、六氟苯、1，2，4-三氯苯、邻二氯苯、氯苯、氟苯、氟三氯甲烷、氯三氟甲烷、溴三氟甲烷、四氟化碳、二氯氟甲烷、氯二氟甲烷、三氟甲烷、1，2-二氯四氟乙烷和六氟乙烷。合适的烃类溶剂包括但不限于苯、环己烷、戊烷、己烷、甲苯、环庚烷、甲基环己烷、庚烷、乙基苯、间二甲苯、邻二甲苯或对二甲苯、辛烷、茚满、壬烷。合适的醚类溶剂包括但不限于二甲氧基甲烷、四氢呋喃、1，3-二氧杂环己烷、1，4-二氧杂环己烷、呋喃、乙醚、乙二醇二甲醚、乙二醇二乙醚、二甘醇二甲醚、二甘醇二乙醚、三甘醇二异丙基醚、茴香醚或叔丁基甲基醚.

合适的极性质子溶剂包括但不限于甲醇、乙醇、2-硝基乙醇、2-氟乙醇、2，2，2-三氟乙醇、乙二醇、1-丙醇、2-丙醇、2-甲氧基乙醇、1-丁醇、2-丁醇、异丁醇、叔丁醇、2-乙氧基乙醇、二甘醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、新戊醇、叔戊醇、二甘醇一甲醚、二甘醇一乙醚、环己醇、苯甲醇、苯酚和甘油.合适的极性非质子溶剂包括但不限于二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基乙酰胺(DMAC)、1，3-二甲基-3，4，5，6-四氢-2(1H)-嘧啶酮(DMPU)、1，3-二甲基-2-咪唑烷酮(DMI)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、甲酰胺、N-甲基乙酰胺、N-甲基甲酰胺、乙腈(ACN)、二甲亚砜、丙腈、甲酸乙酯、乙酸甲酯、六氯丙酮、丙酮、乙基甲基酮、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸叔丁酯、环丁砜、N，N-二甲基丙酰胺、硝基甲烷、硝基苯、六甲基磷酰胺。

给药方法

在本文描述的所用方法中，药物组合物可以胶囊的形式口服给药。按照本文描述的方法，可以将组合物以一次/日、两次/日或三次/日的单位剂量的给药。

日给药可以连续重复几天至几年.口服治疗可以持续一周至患者的生命期间。在一个实施方案中，连续给药五天，然后对患者进行评估以确定是否需要进一步给药.给药可以是连续的或者断续的，即治疗若干天然后停止一段时间。

可以将本发明药物组合物以25-4000mg/m²的总日剂量口服给，例如约25-1000mg、50-1000mg、100mg、200mg、300mg、400mg、600mg、800mg、1000mg等。在给药时，通常将化合物以最高至400mg的单一剂量给药于患者.对于较高的总剂量(即高于400mg)，将总剂量分成多个剂量，例如，两次/日、三次/日等，或者分布在一天内的均等期间.例如，可以将两个剂量-例如每个剂量500mg-间隔12小时给药以达到一天内的1000mg总剂量.

在一个实施方案中，将SAHA以200mg的总日剂量给药于患者.在另一个实施方案中，将SAHA以400mg的总日剂量给药于患者。在另一个实施方案中，将SAHA以600mg的总日剂量给药于患者.

在一个实施方案中，给药于患者的活性组分的量低于将会在患者中导致毒性的量.在某些实施方案中，给药于患者的活性组分的量低于导致患者血浆中的化合物浓度等于或超过化合物的毒性水平的量.在一个实施方案中，将患者血浆中的活性组分的浓度保持在约10nM-约5000nM之间.在本发明的实施中，给药于患者的活性组分的最佳量将取决于所用的具体化合物和被治疗的癌症类型。

联合治疗

本发明方法还包括最初向个体给药抗癌剂以便使个体中的增生性细胞对抗癌剂产生抗药性，然后给药有效量的任何本发明组合物，有效的选择性地诱导所述细胞的末端分化、细胞生长停止和/或脱噬作用。

抗癌剂可以是众多化疗剂中的一种，例如烷化剂、抗代谢物、激素、抗生素、秋水仙碱、长春花生物碱、L-天冬酰胺酶、甲基苄肼、羟基脲、米托坦、亚硝基脲或咪唑甲酰胺。适宜的剂是促进微管蛋白的去极化的剂.在一个实施方案中，抗癌剂是秋水仙碱或长春花生物碱；长春碱或长春新碱。在其中抗癌剂是长春新碱的实施方案中，细胞优选是被治疗的，以便其在约5mg/ml的浓度对长春新碱具有抗药性。治疗细胞以使其对抗癌剂具有抗药性，可以通过将细胞与剂接触至少3-5天来实现.所得细胞与任何上述化合物的接触是如前文所述进行的。除了上述化疗剂以外，也可以在放疗的同时给药本发明化合物。

烷化剂

烷化剂与亲核残余-例如DNA生产的核苷前体上的化学实体-进行反应。其通过将这些核苷酸烷基化并阻止其装配到DNA中来影响细胞分裂过程.

烷化剂的实例包括，但不限于，二氯乙胺(氮芥，例如丁苯酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺、美法仑、乌拉莫司汀)、环乙亚胺(例如噻替派)、烷基酮磺酸盐(例如百消安)、亚硝基脲(例如卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星)、非典型烷化剂(六甲蜜胺、dacarbazine和丙卡巴肼)、铂化合物(卡铂和施铂锭).这些化合物与磷酸盐、氨基、羟基、巯基、羧基和咪唑基团反应。

在生理条件下，这些药物电离并产生附着在敏感的核酸和蛋白质上的带正电荷的离子，从而导致细胞循环的停止和细胞死亡.由于独立地发挥其细胞周期的特定时期的活性，烷化剂因而是细胞循环phasenonspecific剂。氮芥和烷基酮磺酸盐在G1或M阶段对细胞是最有效的.亚硝基脲、氮芥和环乙亚胺削弱G1和S阶段向M阶段的进行。Chabner and Collins eds.(1990)″Cancer Chemotherapy：Principles and Practice″，Philadelphia：JB Lippincott。

烷化剂对各种增生性疾病具有活性，并且在治疗白血病和淋巴瘤以及实体肿瘤中具有显著活性。临床上，这类药物常规用于治疗急性和慢性白血病；霍奇金病；非霍奇金淋巴瘤；多发性骨髓瘤；原发性脑肿瘤(primary brain tumors)；乳腺癌、卵巢癌、肺癌、膀胱癌、子宫颈癌、头和颈癌和恶性黑素瘤.

所有烷化剂所共有的主要毒性是骨髓抑制。另外，通常发生程度不等的胃肠不利影响，并且各种器官毒性与具体的化合物相关联。Black and Livingston(1990)Drugs39：489-501；and39：652-673。

抗生素

抗生素(例如细胞毒素抗生素)通过直接抑制DNA或RNA合成而其作用，并且作用于整个细胞循环.抗生素的实例包括安慈拉环素(例如阿霉素、柔红霉素、表柔比星、依达比星和anthracenedione)、丝裂霉素C、博莱霉素、放线霉素、plicatomycin。这些抗生素剂通过靶向不同的细胞组分来干扰细胞生长。例如，安慈拉环素通常被认为在转录活性DNA的区域中干扰DNA拓扑异构酶II的作用，其导致DNA链断裂.

博莱霉素通常被认为将离子螯合铁并形成活化的络合物，其然后结合到DNA碱基上，从而导致链断裂和细胞死亡.

抗生素剂被用作治疗各种增生性疾病，包括乳腺癌、肺癌、胃癌和甲状腺癌、淋巴瘤、髓细胞源性白血病、骨髓瘤和肉瘤.在该类型内，安慈拉环素的主要毒性是骨髓抑制，特别是粒细胞减少.粘膜炎通常伴随粒细胞减少，并且其严重性与骨髓抑制的程度相关联。与高剂量给药安慈拉环素相关的还有显著的心脏毒性.

抗代谢剂

抗代谢剂(即抗代谢物)是干扰癌细胞生理和增生所必需的代谢过程的一类药物。快速增生的癌细胞需要连续不断地合成大量的核酸、蛋白质、脂质和其它必需的细胞成分。

许多抗代谢物抑制嘌呤或嘧啶核苷的合成或者抑制DNA复制的酶。有些抗代谢物还干扰核糖核苷和RNA的合成和/或氨基酸代谢以及蛋白质合成.通过干扰必需的细胞成分的合成，抗代谢物能够延迟或阻止癌细胞的生长.抗代谢剂的实例包括，但不限于，氟脲嘧啶(5-FU)、氟脲苷(5-FUdR)、甲胺蝶呤、亚叶酸、羟基脲、硫脲嘌呤(6-TG)、巯基嘌呤(6-MP)、阿糖胞苷、喷司他汀、盐酸氟达拉滨、克拉屈滨(2-CDA)、天门冬酰胺酶和吉西他滨。

抗代谢剂广泛用于治疗若干普通形式的癌症，包括结肠癌、直肠癌、乳腺癌、肝癌、胃癌和胰腺癌、恶性黑素瘤、急性和慢性白血病和毛细胞白血病。抗代谢物治疗的许多不利作用起因于有丝分裂活性组织-例如骨髓或胃肠粘膜-中的细胞增殖的抑制。用这些药剂治疗的患者通常遭受骨髓抑制、口炎、腹泻和脱发。Chen and Grem(1992)Curr.Opin.Oncol.4：1089-1098。

激素剂

激素剂是调节其目标器官的生长和发育的一类药物。大多数激素剂是性甾体及其衍生物和类似物，例如雌激素、孕激素、抗雌激素、雄激素、抗雄激素和孕酮.这些激素剂可以作为下调受体表达和必需的基因转录的性甾体受体的拮抗剂。这样的激素剂的实例是合成雌激素(例如己烯雌酚)、抗雌激素(例如他莫昔芬、托瑞米芬、fluoxymesterol和雷洛昔芬)、抗雄激素(比卡鲁胺、尼鲁米特、氟他胺)、芳香酶抑制剂(例如安鲁米特、阿那曲唑和四唑)、黄体化激素释放激素(LHRH)类似物、酮康唑、醋酸戈舍瑞林、亮丙瑞林、醋酸甲地孕酮和米非司酮.

激素剂用于治疗乳腺癌、前列腺癌、黑素瘤和脑膜瘤。由于激素的主要作用是通过类固醇受体介导的，60％的受体阳性乳腺癌对first-line激素治疗起反应；低于10％的受体阴性肿瘤起反应.与激素剂有关的主要副作用是潮红。常见的表现是骨疼痛的突然增加、皮肤损害周围的红斑和导致血钙过多.

尤其是，孕激素用于治疗子宫内膜癌，因为这些癌发生在处于不受孕激素对立的高水平雌激素的女性中。

抗雄激素用于治疗激素依赖的前列腺癌.其用于降低睾酮的水平，从而抑制肿瘤的生长。

激素治疗乳腺癌包括降低增生的乳腺细胞中的雌激素受体的雌激素依赖活化的水平.抗雌激素通过与雌激素结合并阻止共活化剂的补充来其作用，从而抑制雌激素信号。

LHRH类似物用于治疗前列腺癌以降低睾酮的水平，从而减少肿瘤的生长。

芳香酶抑制剂通过抑制激素合成所需要的酶而其作用。在绝经后的女性中，雌激素的主要来源是通过芳香酶进行的雄甾烯二酮的转化.

得自植物的药剂

得自植物的药剂是从植物得到的或在该药剂的分子结构基础上进行修饰而获得的一类药物。其通过阻止细胞分裂所必不可少的细胞成分的装配来抑制细胞复制。

得自植物的药剂的实例包括长春花生物碱(例如长春新碱、长春碱、长春地辛、长春利定和长春瑞滨)、鬼臼毒素(例如依托泊苷(VP-16)和替尼泊苷(VM-26))、紫杉烷(例如紫杉醇和多西他赛)。这些得自植物的药剂通常作为与微管蛋白结合并抑制有丝分裂的抗有丝分裂剂。鬼臼毒素例如依托泊苷据信通过与拓扑异构酶相互作用来干扰DNA合成，从而导致DNA链断裂.

得自植物的药剂用于治疗很多类型的癌症.例如，长春新碱用于治疗白血病、霍奇金和非霍奇金淋巴瘤、和童年期肿瘤成神经细胞瘤、横纹肌肉瘤和维尔姆斯瘤.长春碱用于抗淋巴瘤、睾丸癌、肾细胞癌、蕈样肉芽肿病和卡波西肉瘤.多西他赛已经显示抗晚期乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)和卵巢癌期望活性.

依托泊苷对宽范围的肿瘤具有活性，其中小细胞肺癌、睾丸癌和NSCLC最敏感。

得自植物的药剂对被治疗的患者会引起显著的副作用。长春花生物碱显示不同范围的临床毒性.长春花生物碱的副作用包括神经毒性、改变了的血小板功能、骨髓抑制和白细胞减少.紫杉醇引起剂量限制的中性细胞减少以及其它造血细胞系的相对贫乏.表鬼臼毒素的主要毒性是血液学的(中性细胞减少和血小板减少).

其它副作用包括暂时性肝酶异常、脱发、过敏反应和外周神经病。

生物药剂

生物药剂是在单独使用或与化疗和/或放疗联合使用时引起癌/肿瘤消退的一类活质分子。生物药剂的实例包括免疫调节蛋白例如细胞因子、抗肿瘤抗原的单克隆抗体、肿瘤抑制基因和癌症疫苗.

细胞因子具有极强的免疫调节活性。某些细胞因子例如白介素-2(IL-2，阿地白介素)和干扰素-α(IFN-α)显示抗肿瘤活性，并且已被核准用于治疗转移的肾细胞癌和转移的恶性黑素瘤的患者。IL-2是其为T-细胞介导的免疫反应的中枢的T-细胞生长因子。IL-2对某些患者的选择性抗肿瘤作用据信是辨别自己和非己的细胞介导的免疫反应的结果。

干扰素-α包括具有重叠活性的23种相关亚型。IFN-α具有抗多种实体和血液恶性肿瘤的证明了的活性，后者显得特别敏感。

干扰素的实例包括，干扰素-α、干扰素-β(成纤维细胞干扰素)和干扰素-γ(成纤维细胞干扰素).其它细胞因子的实例包括红细胞生成素(依泊汀.-α)、粒细胞-CSF(非格司亭)和粒细胞、巨噬细胞-CSF(沙格司亭).除了细胞因子以外的其它免疫调节因子包括杆菌Calmette-Guerin、左旋咪唑和奥曲肽、模拟天然存在的激素促生长素抑制素的效应的长时间作用奥曲肽。

而且，抗癌治疗可以包括通过用在肿瘤接种疫苗方法抗体和试剂中使用的免疫疗法进行的治疗.该治疗中的第一药物种类是抗生素，其单独存在或者携带例如癌细胞的毒素或化学治疗剂/细胞毒害剂。抗肿瘤抗原的单克隆抗体由肿瘤表达的引起抗肿瘤抗原的抗体，优选肿瘤特异性抗体.例如，单克隆抗体(曲妥单抗)是抗人表皮生长因子2(HER2)而产生的，其在某些乳腺肿瘤包括转移的乳腺癌中被过度表达.HER2代表的过度表达在临床中与更具侵略型的疾病和不良预后相关联。用作治疗其肿瘤过度表达HER2蛋白的转移乳腺癌的患者的单一药剂。

抗肿瘤抗原的单克隆抗体的另外的实例是(利妥昔单抗)，其抗淋巴瘤细胞上的CD20，并且选择性地耗尽正常和恶性CD20+pre-B成熟B细胞.

RITUXAN用作治疗患有复发的或难治的低级或滤泡CD20+B细胞非霍奇金淋巴瘤的患者的单一药剂。(gemtuzumabozogamicin)and(alemtuzumab)是可以使用的抗肿瘤抗原的单克隆抗体的其它实例。

肿瘤抑制基因是起抑制细胞生长和分裂循环作用，从而阻止瘤形成发展的基因。肿瘤抑制基因的突变导致细胞忽略抑制信号的网络的一个或多个组元，从而克服细胞循环关卡并导致较高比率的被控制细胞的生长癌。肿瘤抑制剂的实例包括Duc-4、NF-1、NF-2、RB、p53、WT1、BRCA1和BRCA2。

DPC4与前列腺癌有关并参与抑制细胞分裂的细胞质路径。NF-1编码抑制Ras的蛋白-细胞质抑制蛋白。NF-1与神经系统的神经纤维瘤和嗜铬细胞瘤以及骨髓白血病有关。NF-2编码与神经系统的脑膜瘤、施万鞘瘤和室管膜瘤有关的核蛋白。RB编码pRB蛋白-其为细胞循环的主要抑制剂的核蛋白。RB与成视网膜细胞瘤以及骨癌、膀胱癌、小细胞肺癌和乳腺癌。P53编码调节细胞分裂并诱导细胞程序死亡的p53蛋白.在多种癌症中发现了p53的突变和/或失活。WTI与肾的维尔姆斯瘤有关.BRCA1与乳腺癌和卵巢癌有关，而BRCA2与乳腺癌有关.肿瘤抑制基因转移到肿瘤细胞中，并在细胞中发挥其肿瘤抑制功能。

癌症疫苗是诱导身体对肿瘤的特异性免疫反应的一类药剂。研究和开发以及临床试验的大多数癌症疫苗是肿瘤相关的抗原(TAAs).TAAs是存在于肿瘤细胞而在正常细胞上相对缺乏或减少的结构(即蛋白质、酶或碳水化合物)。由于对肿瘤细胞是完全唯一的，所以TAAs为免疫系统识别并导致其毁灭提供了靶子.TAAs的实例包括神经节苷脂(GM2)、前列腺特异性抗原(PSA)、α-胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)(由结肠癌和其它腺癌例如乳腺癌、肺癌、胃癌和胰腺癌产生)、黑素瘤相关抗原(MART-1，gap100，MAGE1，3酪氨酸酶)、乳头瘤病毒E6和E7片段、自体肿瘤细胞和同种肿瘤细胞的全部细胞或部分/溶胞产物.

其它疗法

除了用于治疗癌症的传统细胞毒素和激素疗法以外，最近的发展引入了治疗癌症的另外的疗法。例如，许多类型的基因治疗正在进行临床前和临床试验。

另外，以抑制肿瘤血管形成(血管发生)的方法目前处于开发中。这种概念的目标是通过新建立的肿瘤血管系统来切断肿瘤的营养和氧的供应。

另外，也尝试通过诱导肿瘤细胞的末端分化来治疗癌症。适宜的分化剂包括下列任何一个或多个参考文献中公开的化合物。

a)Polar compounds(Marks et al(1987)；Friend，C.，Scher，W.，Holland，J.W.，and Sato，T.(1971)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)68：378-382；Tanaka，M.，Levy，J.，Terada，M.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.，and Marks，P.A.(1975)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)72：1003-1006；Reuben，R.C.，Wife，R.L.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.，and Marks，P.A.(1976)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)73：862-866)；

b)Derivatives of vitamin D and retinoic acid(Abe，E.，Miyaura，C.，Sakagami，H.，Takeda，M.，Konno，K.，Yamazaki，T.，Yoshika，S.，and Suda，T.(1981)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)78：4990-4994；Schwartz，E.L.，Shoddy，J.R.，Kreutter，D.，Rasmussen，H.，andSartorelli，A.C.(1983)Proc.Am.Assoc.Cancer Res.24：18；Tanenaga，K.，Hozumi，M.，and Sakagami，Y.(1980)CancerRes.40：914-919)；

c)Steroid hormones(Lotem，J.and Sachs，L.(1975)Int.J.Cancer15：731-740)；

d)Growth factors(Sachs，L.(1978)Nature(Lond.)274：535，Metcalf，D.(1985)Science,229：16-22)；

e)Proteases(Scher，W.，Scher，B.M.，and Waxman，S.(1983)Exp.Hematol.11：490-498；Scher，W.，Scher，B.M.，and Waxman，S.(1982)Biochem.& Biophys.Res.Comm.109：348-354)；

f)Tumor promoters(Huberman，E.and Callaham，M.F.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)76：1293-1297；Lottem，J.and Sachs，L.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)76：5158-5162)；and

g)inhibitors of DNA or RNA synthesis(Schwartz，E.L.andSartorelli，A.C.(1982)Cancer Res.42：2651-2655，Terada，M.，Epner，E.，Nudel，U.，Salmon，J.，Fibach，E.，Rifkind，R.A.，and Marks，P.A.(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)75：2795-2799；Morin，M.J.and Sartorelli，A.C.(1984)Cancer Res.44：2807-2812；Schwartz，E.L.，Brown，B.J.，Nierenberg，M.，Marsh，J.C.，andSartorelli，A.C.(1983)Cancer Res.43：2725-2730；Sugano，H.，Furusawa，M.，Kawaguchi，T.，and lkawa，Y.(1973)Bibl.Hematol.39：943-954；Ebert，P.S.，Wars，I.，and Buell，D.N.(1976)CancerRes.36：1809-1813；Hayashi，M.，Okabe，J.，and Hozumi，M.(1979)Gann70：235-238)，

本发明药物组合物的合并和上述任何抗癌剂及其使用，属于本发明的范围之内。

治疗方法

本发明还提供治疗具有以肿瘤细胞的增生为特点的肿瘤的患者的方法，所述方法包括向患者给药有效量的上述任何本发明组合物，有效选的择性地诱导这样的肿瘤细胞的分化并由此抑制其增生。

本发明方法意图用于治疗患有癌症的人类患者。然而，所述方法也很可能有效治疗其它哺乳动物的癌症。癌症包括但不限于由肿瘤细胞的增生导致的任何癌症，例如肺癌、急性淋巴骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、膀胱黑素瘤、肾癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌或结肠直肠癌.

在下面的试验详细部分中，以实施例的方式对本发明进行例证说明.所述部分的给出目的在于理解本发明，而非意图且不能以任何方式理解为限制下面所附之权利要求所给出的本发明的范围。

试验详细部分

实施例1

合成SAHA晶形I

SAHA晶形可以按照下面略述的方法或其任何修改和变化来合成

合成SAHA

步骤1-合成辛酰苯胺酸

在22L烧瓶中放置3,500g(20.09mol)辛二酸，并将该酸加热融化。把温度升至175℃，然后加入2,040g(21.92mol)苯胺。把温度升至190℃，并在该温度保持20分钟。把融化物倒入包含溶解在50L水中的4,017g氢氧化钾的Nalgene槽内.加入融化物，将该混合物搅拌20分钟.将反应以同样的规模重复，并把第二个融化物倒入同样的氢化钠溶液中。把该混合物充分搅拌后，关闭搅拌器，并把该混合物放置。然后将混合物通过硅藻土垫过滤(4,200g)(过滤该产物以除去中性副产物(苯胺攻击辛二酸的两个末端二形成的)。滤液含有该产物的盐，以及未反应的辛二酸的盐。把该混合物放置是因为过滤非常慢，需要几天的时间.)。将滤液用5L浓盐酸酸化；将该混合物搅拌1小时，然后放置过夜。过滤收集该产物，并在漏斗上用去离子水洗涤(4x5L).把湿滤饼放置在具有44L去离子水的72L烧瓶中，将该混合物加热至50℃，并趁热过滤出固体(所需产物含有辛二酸，其中在热水中具有很高的溶解度。热研制几次以除去辛二酸。用NMR[D₆DMSO]检验该产物以监测辛二酸的去除).在50℃用44L水将热研制重复进行。将该产物通过过滤再次进行分离.用Nash泵作为真空源(Nash泵是液体环泵(水)并抽至约29英寸汞柱的真空.使用间歇氢气吹扫来帮助排去水)，将其于65℃在真空箱中干燥一个周末；获得4,182.8g辛酰苯胺酸。

该产物仍然含有少量辛二酸；因此，一次用约300g产物，在65℃分批进行热研制.将每一部分过滤，并用另外的热水(总共约6L)充分洗涤.重复所述操作以纯化全部批次.所述操作从该产物中完全除去了辛二酸。将该固体产物在烧瓶中合并，并用6L甲醇/水(1:2)搅拌，然后通过过滤分离，并在滤器上空气干燥一个周末。将其放置于trays中，并使用Nash泵和氩气流，在真空箱中于65℃干燥45小时。最终产物具有重量3,278.4g(32.7％产率).

步骤2-合成辛酰苯胺酸甲酯

向配备以机械搅拌器和冷凝器的50L烧瓶中，放入3,229g得自上一步骤的辛酰苯胺酸和398.7g Dowex50WX2-400树脂。将该混合物加热至回流，并在回流保持18小时。将该混合物过滤以除去树脂珠，并把滤液放到旋转蒸发器上的残余物中。

把残余物从旋转蒸发器移至配备以机械搅拌器和冷凝器的50L烧瓶中。向该烧瓶中加入6L甲醇，并将该混合物加热以获得溶液。然后加入2L去离子水，并停止加热.把搅拌了的混合物冷却，然后把烧瓶放置在冰浴中，并将混合物冷却。过滤分离出固体产物，并将滤饼用4L冷的的甲醇/水(1:1)洗涤。将该产物在真空箱中用Nash泵于45℃总共干燥64小时，获得2,850.2g(84％产率)辛酰苯胺酸甲酯，CSL Lot#98-794-92-31.

向配备以机械搅拌器、热电偶和通入惰性气体的50L烧瓶中，加入1,451.9g羟胺盐酸盐、19L无水甲醇和3.93L30％甲醇钠在甲醇中的溶液.然后向烧瓶中加入2,748.0g辛酰苯胺酸甲酯，继之加入1.9L30％甲醇钠在甲醇中的溶液。将该混合物搅拌16小时10分钟。把大约一半反应混合物从反应烧瓶(烧瓶1)移至配备以机械搅拌器的50L烧瓶(烧瓶2)中。然后把27L去离子水加到烧瓶1中，并将混合物搅拌10分钟。用pH计测定pH；pH为11.56.通过加入100ml30％甲醇钠在甲醇中的溶液，将混合物的pH调整至12.02；这样获得清澈溶液(此时反应混合物哈腰少量固体.调整pH以获得可以从其中沉淀出产物的清澈溶液)。将烧瓶2中的反应混合物以同样的方法进行稀释；加入27L去离子水，并通过把100ml30％甲醇钠溶液加到混合物中来调整pH，获得pH12.01(清澈溶液).

将每个烧瓶中的反应混合物通过加入冰醋酸进行酸化以沉淀出产物.烧瓶1具有最终pH8.98，烧瓶2具有最终pH8.70。用Buchner漏斗和滤布，过滤两个烧瓶的产物.将滤饼用15L去离子水洗涤，把漏斗盖上盖子，并将产物在漏斗上真空部分干燥15.5小时.取出产物并置于5个玻璃盘中。把玻璃盘置于真空箱中，并将产物干燥至恒定重量.第一个干燥期间为，用具有氩气流的Nash泵作为真空源，在60℃干燥22小时。从真空箱中取出玻璃盘并称重.把玻璃盘放回真空箱中，并用没有氩气流的油泵作为真空源，将产物干燥另外4小时10分钟。把材料装进两个4-mill聚乙烯袋中，并放置在塑料外容器中.取样后的最终重量为2633.4g(95.6％)。

步骤4-通过将SAHA粗产物重结晶来制备SAHA晶形I

将SAHA粗产物从甲醇/水中重结晶。向具有机械搅拌器、热电偶、冷凝器和惰性气体入口的50L烧瓶中加入欲结晶的SAHA粗产物(2,525.7g)，然后加入2,625ml去离子水和15,755ml甲醇。将该混合物加热至回流以获得溶液.然后向过反应混合物中加入5,250ml去离子水。关闭加热，让该混合物冷却.当该混合物已足够冷却以能够安全地操纵烧瓶(28℃)时，把烧瓶从加热架上取下来，至于用作冷却浴的浴盆中。向该浴盆中加入冰/水，以把该混合物冷却至-5℃。将该混合物保持在该温度下2小时。通过过滤分离出产物，将滤饼用1.5L冷的甲醇/水(2:1)洗涤。把漏斗盖上，将产物在真空下部分干燥1.75小时.把产物从漏斗中取出，放置在6个玻璃盘上。把玻璃盘放置在真空烘箱中，使用Nash泵作为真空源，并且使用氩气流，将产物在69℃干燥64.75小时。把玻璃盘取出以进行称重，然后放回烘箱中，在60℃再干燥4小时以达到恒定重量.用于第二个干燥期间的真空源是油泵，并且不使用任何氮气流.将产物包装在两个4-mill聚乙烯袋中，并且放置在塑料外容器内。取样后最终的重量是2,540.9g(92.5％)。

在其它实验中，用下列条件将SAHA粗产物结晶。

表1：SAHA结晶条件

 

溶剂	水	搅拌	时间(hr)
				甲醇	-	关闭	2
甲醇	-	打开	72
				乙醇	-	打开	72
异丙醇	-	关闭	72
				乙醇	15％	打开	2
甲醇	15％	关闭	72
				乙醇	15％	关闭	72
乙醇	15％	打开	72
				甲醇	15％	打开	72

所有反应条件都产生SAHA多晶型I.

实施例1A

制备SAHA晶形I

步骤18-苯氨基-8-氧代辛酸；辛酰苯胺酸(化合物3)

将辛二酸(化合物1，174.2g，1.0mol)、苯胺(化合物2，85.8-94.9g)和甲苯(0.1-0.2L)合并，加热至回流，并且回流至少60小时。通过用10％氢氧化钠溶液调节pH至≥11来将该反应在回流状态下中止。将有机层与甲苯(0.11-0.13L)和水(0.3-0.4L)合并，并且分离出水层。将萃取得到的水层与甲苯(0.11-0.13L)合并，分层，然后分离。在60-70℃将水层用甲苯(0.2-0.3L)萃取2次。在20-30℃使用盐酸以及如果需要的话10％氢氧化钠溶液将水层调节至pH为5.8-6.2.将该混合物过滤，用冷水(0.2-0.3L)洗涤，然后用冷异丙醇洗涤.将湿滤饼在最高65℃真空干燥，获得了辛酰苯胺酸。

步骤28-苯氨基-8-氧代辛酸甲酯；辛酰苯胺酸甲酯(化合物4)

将辛酰苯胺酸(化合物3，249.3g，1.0mol)与甲醇(0.4-0.5L)合并，并且加热至45-55℃.使用盐酸将pH调节至≤2，并且将该混合物温度保持在45-55℃直至该反应完全。将该反应用去离子水(0.1-0.2L)处理.将该混合物冷却至25-30℃，加入晶种以诱导结晶，然后冷却至0-10℃。将该混合物过滤，在0-10℃把滤饼用50:50(v/v)甲醇/水溶液(0.28-0.34L)洗涤.将滤饼在最高46℃真空干燥，获得了辛酰苯胺酸甲酯。

步骤3N-羟基-N’-苯基辛二酰胺；vorinostat(化合物5)

将辛酰苯胺酸甲酯(化合物4，263.3g，1.0mole)和2M羟基胺游离碱溶液(0.8-1.0L)合并.将该混合物保持在最高20℃，按照需要用甲醇钠的甲醇溶液把pH调节至≥10.5.将该混合物保持在最高20℃，使用甲醇钠的甲醇溶液把pH调节至≥10.5，将该混合物老化。在老化期间，加入羟基胺游离碱溶液(0.5-0.6L)，将该混合物保持在最高20℃和pH≥10.5直至反应完全。通过将该混合物加到水(0.9-1.1L)中来中止反应，同时把该混合物温度保持在20-35℃，把该混合物的水含量调节至35-45％。使用冰醋酸以及如果需要的话碳酸钠把pH调节至8.8-9.2.将该混合物用5-10小时冷却至0-10℃。将该混合物过滤，并且在0-10℃将滤饼用55:45(v/v)甲醇/水(0.45-0.6L)洗涤。给湿滤饼施加真空条件直至水分含量≤35％。

将vorinostat粗产物(264.32g，1.0mol)湿滤饼与变性乙醇(1308-1599g)和水(167-204g)合并。向浆液中加入羟基胺盐酸盐(>9mEquiv)和甲醇钠的甲醇溶液(>9mEquiv)，把该浆液加热至70-80℃.将该溶液过滤，然后缓慢地冷却至0-10℃。将该混合物过滤，把滤饼用冷的4:1(v/v)变性乙醇/水洗涤.将滤饼在最高45℃真空干燥。

步骤4N-羟基-N’-苯基辛二酰胺-vorinostat-精细(化合物6)

将Vorinostat(化合物5，264.3g，1.0mol)在50:50(v/v)乙醇/水溶液(最少2.8L)中浆化.把vorinostat浆液湿研磨至平均粒径为25-45μm，同时把该混合物温度保持在7-30℃。将最终的浆液过滤，将湿滤饼用0-40℃水(最少0.8L)洗涤。将湿滤饼在最高55℃真空干燥至水分最大含量为0.2％(w/w)，获得了vorinostat-精细药物.

步骤5N-羟基-N’-苯基辛二酰胺-vorinostat-粗糙(化合物7)

将Vorinostat(化合物5，264.3g，1.0mol)在50:50(v/v)乙醇/水溶液(4.9-5.5L)中浆化。在最小15psig压力下，把浆液加热至65-70℃以溶解，然后冷却至60-64℃。把晶种浆液转移到该混合物内，然后保持该混合物温度.将该混合物在61-63℃老化至少2小时.通过控制夹套温度，将该混合物芬三步冷却：(1)以0.35-0.78℃/小时冷却至55℃，(2)以0.83-2.00℃/小时冷却至45℃，和(3)以2.00-4.44℃/小时冷却至-5-25℃。把最终的浆液在-5-25℃老化约1小时，然后过滤。将湿滤饼用水(最少0.8L)洗涤.将湿滤饼在最高55℃真空干燥，获得了vorinostat-精细药物。

通过将vorinostat-精细干滤饼(97.8-116.3g，0.37-0.44mol)与50:50(v/v)乙醇/水溶液(1.0-1.2L)合并.在最小15psig压力下，把晶种浆液加热至62-66℃，老化约0.5小时，然后冷却至60-64℃。

实施例2

湿研磨小颗粒在1:1乙醇/水中的产生

将SAHA多晶型I晶体以50mg/克-150mg/克(晶体/溶剂混合物)的浆液浓度悬浮在1:1(体积比)乙醇/水溶剂混合物中。把该浆液用具有特级叶片的IKA-Works Rotor-Stator高剪切均化器T50型以20-30m/s湿研磨直至SAHA的平均粒径小于50μm，并且95％的粒径小于100μm，同时把温度保持在室温.将该湿研磨的浆液过滤，并且在室温用EtOH/水溶剂混合物洗涤.然后将湿滤饼在40℃干燥。如通过上述Microtrac方法所测定的，湿研磨材料的最终平均粒径小于50μm.

实施例2A

湿研磨小颗粒在1:1乙醇/水中的大批量制备

在20-25℃，将56.4kg SAHA多晶型I晶体加到610kg(10.8kg溶剂每kg SAHA)50％vol/vol200proof punctilious乙醇与水溶液(“50/50EtOH/水”)中.把该浆液(～700L)经由具有超细发生器的IKA Works湿研磨装置直至达到稳态粒径分布.条件是：DR3-6，23m/s转头速度，30-35Lpm，3gen，～70个周转(一个周转是通过一个发生器的一批体积)。

大约研磨时间(小时)＝(70×批量体积(L))/(研磨器的天然设计(Lpm)×发生器的#×60)

将湿滤饼过滤，用水(总共3kg/kg，～170kg)洗涤，并且在40-45℃真空干燥。然后将干滤饼过筛(595μm筛网)，并且作为“精细API”包装。

实施例3

平均粒径为150μm的大晶体在1:1乙醇/水中的生长

将25克SAHA多晶型I晶体和388克1:1乙醇/水溶剂混合物加到具有玻璃搅拌器的500ml夹套树脂锅中。在室温，按照实施例2的步骤，把该浆液研磨至粒径小于50μm。将该湿研磨的浆液加热至65℃以溶解～85％的固体。把加热的浆液在65℃老化1-3小时以建立～15％的晶床。将该浆液在树脂锅中于20psig压力和100-300rpm的搅拌器速度下混合。

然后将该批混合物冷却：在10小时内从65℃冷却至55℃，在10小时内从55℃冷却至45℃，在8小时内从45℃冷却至5℃。将该冷却的混合物在5℃老化1小时以达到小于5mg/g，特别是3mg/g的目标过饱和浓度。把该批浆液过滤，在5℃用1:1EtOH/水溶剂混合物洗涤。将湿的滤饼在40℃真空干燥.按照Microtrac方法，测得干燥的滤饼具有～150μm的最终粒径，95％粒径<300μm.

实施例3A

大晶体在1:1乙醇/水中的生长

将13.4kg vorinostat与134kg1:1(v/v)乙醇和水的溶液合并.将使得浆液湿研磨至95％平均粒径<100μm.再加入20kg1:1溶液，将该批混合物在20psig氮气压力下加热至69-71℃，老化3小时以建立晶床。保持20psig压力，用8小时将该批混合物冷却至64-66℃；用4小时冷却至59-61℃；用4小时冷却至49-51℃；然后用6小时冷却至14-16℃.将该批浆液过滤，将滤饼用总共约80kg水洗涤。将该批产物在最高55℃真空干燥.

实施例4

平均粒径为140μm的大晶体在1:1乙醇/水中的生长

将7.5克SAHA多晶型I晶体和70.7克1:1EtOH/水溶剂混合物加到晶种制备容器(500-ml夹套树脂锅)中.在室温把晶种浆液湿研磨至粒径小于50μm，然后进行上面实施例2的步骤.把晶种浆液加热至63-67℃，并且老化30分钟-2小时.

在一个单独的结晶器(1-升夹套树脂锅)中，加入17.5克SAHA多晶型I晶体和317.3克1:1EtOH/水溶剂混合物加入。首先把结晶器加热至67-70℃以溶解所有固体SAHA晶体，然后冷却至60-65℃以保持稍微过饱和溶液.

将晶种浆液从晶种制备容器中转移到结晶器中。把该浆液在树脂锅中于20psig压力下和类似于实施例3的搅拌器速度下混合。按照实施例3中的冷却方案将该批浆液缓慢地冷却至5℃.把该批浆液过滤，用1:1EtOH/水溶剂混合物在5℃洗涤。将湿滤饼在40℃真空干燥。干燥的滤饼具有约140μm的最终粒径，其中95％粒径<280μm。

实施例4A

大晶体在1:1乙醇/水中的大批量生长

将得自实施例2A的21.7kg“精细API”干滤饼(总重量的28.6％，0.40Equiv.w.r.t基础)和213kg50/50EtOH/水溶液(3.93kg溶剂/kg SAHA基础)加到容器#1-晶种制备罐中。将54.2kg SAHA多晶型I晶体(总重量的71.4％，1.00Equiv，基础)和990kg50/50EtOH/水(18.24kg溶剂/kg SAHA基础)加到容器#2-结晶器中.给该结晶施加压力至20-25psig，将其中的混合物加热至67-70℃，同时保持该压力，以全部溶解结晶SAHA.然后将该混合物冷却至61-63℃，以使溶液过饱和.在结晶器中进行老化操作期间，给晶种制备罐施加压力至20-25psig，把晶种浆液加热至64℃，老化30分钟，同时保持压力，以溶解～1/2晶种固体，然后冷却至61-63℃.

把热晶种浆液迅速从晶种制备罐转移到结晶器(未吹扫)中，同时保持两个容器温度.将结晶器中的氮气压力再次建立在20-25psig，让该批混合物在61-63℃老化2小时。用26小时在3个线性步骤中把该批混合物冷却至5℃：(1)用10小时从62℃冷却至55℃；(2)用6小时从55℃冷却至45℃；和(3)用10小时从45℃冷却至5小时。将该批混合物老化1小时，然后把湿滤饼过滤，用水(总共3kg/kgSAHA，～163kg)洗涤，在40-45℃真空干燥.把得自该重结晶操作的干燥滤饼作为“粗糙API”包装.将粗糙API和精细API以70/30的比例混合。

在结晶器中的SAHA多晶型I可通过将8.7kg SAHA加到72kg9:1(v/v)乙醇与水的溶液中来制得.加入25g羟基胺盐酸盐，然后加入350g1N氢氧化钠水溶液。把使得浆液加热至69.5-71.5℃，老化45分钟以溶解该批混合物和降低O-suberanilic SAHA杂质的水平。用2小时将该批混合物冷却至4℃，在0-10℃老化2小时。将该批混合物过滤，把滤饼用总共约60kg水洗涤。将该批混合物在最高55℃真空干燥，获得了8.0kg of vorinostat.

实施例5

湿研磨小颗粒批次288的产生

将SAHA多晶型I晶体以50mg/克-150mg/克(晶体/溶剂混合物)的浆液浓度悬浮在乙醇水溶液(100％乙醇-50％体积的乙醇水溶液)中。把该浆液用具有特级叶片的IKA-Works Rotor-Stator高剪切均化器T50型以20-35m/s湿研磨直至SAHA的平均粒径小于50μm，并且95％的粒径小于100μm，同时把温度保持在室温.将该湿研磨的浆液过滤，并且在室温用EtOH/水溶剂混合物洗涤。然后将湿滤饼在40℃干燥。如通过上述Microtrac方法所测定的，湿研磨材料的最终平均粒径小于50μm。

实施例6

大晶体批次283的生长

将24克SAHA多晶型I晶体和205ml9:1乙醇/水溶剂混合物加到具有玻璃搅拌器的500ml夹套树脂锅中。在室温，按照实施例1的步骤，把该浆液研磨至粒径小于50μm.将该湿研磨的浆液加热至65℃以溶解～85％的固体。把加热的浆液在65℃老化1-3小时以建立～15％的晶床。将该浆液在100-300rpm.的搅拌器速度下混合.

然后将该混合物在一个热-冷却循环中冷却：在2小时内从65℃冷却至55℃，在55℃保持1小时，用约30分钟从55℃加热至65℃，在65℃老化1小时，在5小时内从65℃冷却至40℃，在4小时内从40℃冷却至30℃，用6小时从30℃冷却至20℃。将该冷却的混合物在20℃老化1小时.把该批浆液过滤，在20℃用9:1EtOH/水溶剂混合物洗涤。将湿的滤饼在40℃真空干燥。按照Microtrac方法，测得干燥的滤饼具有～150μm的最终粒径，95％粒径<300μm。

实施例7

X-射线粉末衍射分析

对根据实施例1-6获得的SAHA晶形I以及通过下表2中所述方法制得的SAHA晶形II-V进行X-射线粉末衍射。

表2：通过X-射线粉末衍射分析的SAHA样本

 

SAHA样本	参考文献	方法
			SAHA晶形I	-	实施例1-6
SAHA晶形II	U.S.5,369,108Columns25-26ProceduresA，C，D	将SAHA溶解在EtOAc/THF(3/1)中。将该溶液过硅胶塞，使用EtOAc/THF(3/1).收集级份并浓缩.固体为粉红色.
			SAHA晶形III	U.S.5,369,108Columns25-26Procedure B	将SAHA溶解在甲醇中，经由硅藻土过滤，在旋转蒸发仪上浓缩至干。把残余物用己烷浆化并过滤.固体为粉红色。
SAHA晶形IV	Mai等人OPPIBriefs(2001)Vol33(4)，391-394	将SAHA从乙腈中重结晶。
			SAHA FormV	Stowell等人J.Med.Chem.(1995)，38(8)，1411-1413	向SAHA(4.0g)在无水甲醇(15mL)内的混合物中加入NaOMe(10.7mL，4.37M，47mmol).该溶液变均匀，但是在约5分钟后形成了固体。将该混合物搅拌15分钟，加入100ml水，然后缓慢地加入冰醋酸(3.77mL，4.0g)。收集固体结晶，用水(2×75mL)洗涤.把固体在高度真空下干燥过夜，获得了3.85g(96％收率)灰白色固体.

X-射线衍射分析：

将样本在Siemens D500 Automated Powder Diffractometer(Instrument ID No.LD-301-4)上分析，其根据Standard OperatingProcedure EQ-27，Rev.12，依据生产商的说明书进行操作的。给衍射仪装配上在50kV，40mA上运转的石墨单色器和Cu(λ＝1.54A)X-射线源.2θ校准是用NBS云母标准(SRM675)进行的。使用下列装置参数分析样本：

测定范围：      4-402θ

步长：          

每步的测定时间：1.2秒

样本制备是根据Standard Operating Procedure MIC-7，Rev.2(Section 3.1.2)，使用零背景样本平板(#1)依据生产商的说明书进行操作的。采用轻研钵和研棒来处理样本以保证均匀性.

图7A-E描绘了SAHA晶形I-V的X-射线衍射图。X-射线衍射图的相应数据如下表3-7所示：

表3：SAHA晶形I

表4：SAHA晶形II

表5：SAHA晶形III

表6：SAHA晶形IV

表7：SAHA晶形V

还使用具有铜Kα照射(波长)的X’PERT Pro Phillips X-射线衍射仪来收集SAHA晶形I的X-射线粉末衍射花样.表3A中总结了显著的20位置以及d-间距。

表3A SAHA晶形I

实施例8

熔点分析

对SAHA晶形I-V进行熔点分析。

表8：熔点

 

SAHA样本	MP(℃)
		SAHA晶形I	159-160
SAHA晶形II	152-155
		SAHA晶形HI	138-144
SAHA晶形IV	158-160.5
		SAHA晶形V	159.5-160.5

实施例9

差示扫描量热法分析

对SAHA晶形I-V进行差示扫描量热法(DSC)分析。

装置：

所用的标准铝DSC样本盘和盖子是Perkin Elmer(Part#0219-0041，或等同物)。

所用的Sample Pan Crimper Accessory是Perkin Elmer StandardAluminum Pan Crimper或其等同物。

所用的差示扫描量热计是Perkin Elmer DSC6或等同物。

所用的微量天平是Perkin Elmer AD-4 Autobalance或等同物。

Software-Pyris或其它合适的热分析软件.

差示扫描量热计条件：

清扫气体    氮气(约20mL/min)

冷却剂      自来水

烘箱温度程序以10.0℃/分钟从50℃加热至所观测到的熔化温度以上至少30℃.

数据解读：

确定峰温度和熔化开始温度.对于任何表明产生一个以上熔化温度的指示，观察峰形状。

多个样本的结果总结在表9中：

表9：差示扫描量热法分析

 

SAHA样本	开始温度(℃)	峰温度(℃)
			SAHA晶形I	161.8162.1162.7161.4161.9161.6152.5160.9161.5161.58	164.8164.5165.0164.7164.1164.3164.9163.7163.5163.93
SAHA晶形II	156.6158.22，161.58(双峰)	160.2160.39，162.4(双峰)
			SAHA晶形III	110.86，145.68(双峰)114.69，144.41(双峰)123.67，148.89(双峰)	120.11，147.58(双峰)122.40，147.00(双峰)127.89，152.22(双峰)
SAHA晶形IV	156.26，161.64(双峰)160.46，164.77(双峰)	160.55，153.66(双峰)162.63，166.55(双峰)
			SAHA晶形V	124.47，162.55(双峰)	128.13，165.14(双峰)

根据进行DSC分析的加热速度，即扫描速度，所用的校准标准、仪器校准、相对湿度和化学纯度，所分析的各个SAHA的吸热线可以改变.对于任何给定的样本，所观测到的吸热线在仪器到仪器之间也可以不同；然而，只要对仪器进行类似校准，其通常在所限度的范围内。

实施例10

开发计算机模拟模型

模型开发程序

在装入胶囊期间，SAHA晶体会由于填充针的压力而发生破裂。SAHA溶解和破裂模型化的第一部分是溶解和破裂模型的开发。将两个模型合并来计算破裂以及随后破裂晶体的溶解，并且对于不同批次，评估和优化模型参数。

开发程序可总结如下。首先，测定装入胶囊之前SAHA晶形I的粒径分布(PSD)和溶解特征。通过将关于多分散粉末和晶体的固有溶解抗性[32，33]和膜抗性[34]合并来开发关于多分散粉末溶解的模型.溶解模型参数包括固有溶解常数和非球形晶体的形状因子。通过把模型溶液与SAHA晶形I的实验溶解特征拟合来评估溶解模型参数.

进行SAHA晶体与赋形剂的胶囊装入.对于每一个实验条件，评估胶囊内容物的密度。测定来自胶囊的SAHA的溶解特征。与装入胶囊之前SAHA晶体的溶解相比，观察到溶解加快。溶解速度的加快证实了在装入胶囊期间晶体的破裂。

开发了在装入胶囊期间SAHA晶体的破裂模型[35，36]。破裂模型参数包括破裂速度常数和破裂速度指数.采用破裂模型来计算装入胶囊期间破裂后的PSD，假定破裂速度常数和破裂速度指数的组合.采用溶解模型来计算具有计算的PSD的破裂晶体的溶解特征.对于胶囊，将计算的SAHA溶解特征与实验SAHA溶解特征进行比较.对于破裂速度常数与指数的不同组合，重复在该段落中的程序，直至找到最佳拟合。对于具有不同PSD的不同批次的SAHA晶体以及对于不同装胶囊条件，也重复该程序。

找到了最佳溶解模型参数，其能够满意地描述具有不同PSD的所有批次的溶解.使用这些参数来预测装胶囊之前和之后SAHA晶体的溶解。找到了最佳破裂速度指数，并且其可以用于所有批次的破裂模型。

对于每一个批次和每一个装胶囊条件，最佳破裂速度常数与在给定装胶囊条件下的胶囊密度有关.如图11所示，对于所有相关装胶囊条件，在增加的胶囊密度与破裂速度常数之间发现了近线性依赖性。

预测程序

破裂和溶解模型开发以及模型参数优化之后，合并的破裂和溶解模型可以用于预测有关新的SAHA批次和装胶囊条件优化的溶解特征。所需要的唯一信息是新批次的PSD。

预测程序可总结如下。首先，测定在装胶囊之前新批次的PSD，并且假定胶囊密度。使用胶囊密度与破裂速度常数之间的相关性来计算破裂速度常数。

将计算的破裂速度常数与最佳破裂速度指数引入到破裂模型中来模拟装胶囊期间的破裂，以及计算装胶囊之前破裂晶体的新PSD。

将新的PSD引入到溶解模型中，并且模拟来自胶囊的SAHA溶解特征。将模拟的溶解特征与目标参照特征进行比较。对于新的胶囊密度，重复该程序直至找到在模拟的特征与目标特征之前的最佳拟合.最佳胶囊密度直接决定最佳装胶囊条件。

实施例11

SAHA晶体的混合

可以使用上述预测程序来确定不同结晶批次的混合比例来获得类似于参照的溶解特征.

大晶体批次283与湿研磨晶体批次288的混合比例的优化

使用数学模型来预测大晶体批次283与湿研磨晶体批次288的最佳混合物。首先，目标是找到在给定条件下(胶囊密度)制得的胶囊的最佳混合物，然后是找到关于不同装胶囊条件的最有利混合物。对于胶囊密度＝0.8，优化的实例如图8所示.对于不同胶囊密度，预测的F2值的依赖性如图9所示.图9表明，预随着胶囊密度的下降，测定的F2检验值增加(胶囊密度的下降引起破裂程度下降).在装胶囊期间湿研磨的晶体表现出小的破裂.由此可见，最有利的混合组合物(在不同条件下制备的胶囊之间具有最小F2差异)含有30％批次288晶体和70％批次283晶体。

对于从含有30％批次288晶体和70％批次283晶体的混合物制得的胶囊，实验溶解曲线如图10所示。

结晶批次的混合

可以使用类似计算机模拟方法来从不同结晶批次混合SAHA晶体。根据不同批次晶体的粒径，可以考虑每一批次的破裂常数。使用上述计算机模拟方法，胶囊批次0683_007A001是通过将21.2％批次1002DRW、18.0％批次1008D、34.4％批次1002E、10.0％批次1004E和16.4％批次1006D混合来产生的。

不借助于计算机模拟，将批次1001E和批次1003E SAHA多晶形I晶体混合，并且以2:1的比例混合以获得胶囊批次6001.004。

实施例12

SAHA晶体的粉末混合

粉末混合

首先将25.0Kg混合的SAHA多晶形I晶体过30目筛网(600μm)。然后所得SAHA、11.1Kg微晶纤维素(Avicel PH-101)和1.13Kg交联羧甲基纤维素钠负载到141.6L V-混合器上，113L Tote混合器或另一尺寸和类型相差不大的混合器.对于V-混合器，将所得材料在约25rpm混合约8分钟至均匀.对于Tote混合器，将所得材料在约12rpm混合约17分钟至均匀度。

粉末混合润滑

将293.0g硬脂酸镁(植物级)经由30目筛网(600μm)过筛，并且与混合的粉末混合物一起负载到V-混合器上.将所得混合物在约25rpm混合约8分钟至均匀。还将293.0g硬脂酸镁(植物级)经由60目筛网(250μm)过筛，并且与混合的粉末混合物一起负载到tote混合器上。将所得混合物在约12rpm混合约17分钟至均匀。

表10总结了胶囊中原料的物理性质。

表10：原料的物理和化学性质

 

原料	物理性质	值
			辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)-研磨的和大的晶体	熔点(DSC)溶解度：在水中在甲醇中在乙醇中2％CIP100水溶液2％SD-20水溶液	161-163℃<0.1mg/ml42mg/ml0.1mg/ml11.3mg/ml0.085mg/ml
微晶纤维素(AvicelPH-101)NF，Ph.Eur.，JP(FMCBioPolymer)	标准平均粒径水分含量堆密度	50μm<5％0.26-0.31g/cc
			交联羧甲基纤维素钠NF，Ph.Eur.，JP(FMC BioPolymer)	堆密度堆积密度粒径分布	0.48g/cc0.67g/cc<2％wt.保留在Mesh No.200(75μm)上<10％wt.保留在Mesh No.325(45μm)上
硬脂酸镁(植物级)NF，Ph.Eur.，JP(Mallinckrodt BakerInc.)	堆密度粒径分布比表面积	0.16g/cc<2％wt.保留在Mesh No.200(75μm)4.2±0.04m2/g

实施例13

SAHA胶囊的装胶囊

装胶囊/重量分类

使用H&K胶囊填充器，抛光的填充针或氮化铬包被的填充针和“3”号胶囊将润滑的粉末混合物装胶囊至所需胶囊重量。使用胶囊磨光器将填充的胶囊抛光，然后使用重量分类器进行适当重量限度范围内的重量分类。表11增加了胶囊填充器设置.

表11.胶囊填充器工作设置总结

 

剂量盘	10.0-12.7mm
		填充针/工作台	3or12
填充针类型	抛光的未涂布或氮化铬涂布的
		真空	ON
胶囊填充器速度	150-270caps/min或750-1000caps/min

最终的SAHA胶囊组成如表12所示。使用关于±10％目标胶囊重量的胶囊重量差异的接受限度，将胶囊进行重量分类。典型批次中的胶囊重量差异是±4％目标胶囊重量.

表12：SAHA胶囊组合物

 

组分	单位重量(mg)	重量(％)
			辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)-研磨的	X	Y
辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)-大的	100.0-x	66.67-y
			微晶纤维素(Avicel PH-101)NF，Ph.Eur.，JP	44.33	29.80
交联羧甲基纤维素钠NF，Ph.Eur.，JP	4.500	3.00
			硬脂酸镁(植物级)NF，Ph.Eur.，JP	1.170	0.78
硬明胶胶囊，“3”号Conisnap，白色不透明/白色不透明＊	49.00	N/A
			总共＊＊	150.0	100.00

^＊市售胶囊墨水制剂是Colorcon S-1-17762.不含TSE的明胶胶囊.

^＊＊总重量不包括硬明胶胶囊壳.

实施例14

测定SAHA胶囊的溶解速度

使用USP Dissolution Apparatus II(VK7000，Varian Inc.，Cary，NC)来评估SAHA从硬明胶胶囊中的溶解速度.将每个胶囊置于到螺旋钻孔器(Quality Lab Accessories L.L.C.，Manville，NJ)内，并且在37±0.5℃温度下递送到含有900mL2.0％Tween(TCIAmerica，Portland，Oregon)的容器内。让桨在100rpm旋转，并且以特定时间间隔经由装配有35μm全流动滤器(Varian Inc.，Cary，NC)的自动取样器(VK8000，Varian Inc.，Cary，NC)抽取样本。

然后，通过高效液相色谱法(Agilent 1100 series，AgilentTechnologies Inc.，Wilmington，DE)分析SAHA。色谱分析使用Phenomenex Luna C8(2)(100×4.6mm)5μm粒径柱，1:1甲醇/0.1％三氟乙酸的流动相(Reagent Grade，Fisher)和242nm的检测波长来进行。

赋形剂、胶囊壳和水分表现出小的对于SAHA胶囊内容物的溶解速度的影响。然而，SAHA的粒径分布影响溶解速度.

得自胶囊内容物的SAHA的溶解速度特征如表13、14和图5所示。得自参照胶囊Lot 0683_004A001的SAHA的溶解速度特征如图1所示.得自各胶囊批次的SAHA的F2系数是用胶囊Lot0683_004A001作为参照来计算的。

表13：SAHA胶囊的溶解速度

表14：0683_DFC007A001的溶解速度特征

实施例15

测定SAHA API的溶解速度

使用USP Dissolution Apparatus II(VK7000，Varian Inc.，Cary，NC)评估装入胶囊之前100mg SAHA API的溶解速度.在37±0.5℃温度下将约100mg SAHA递送到含有900mL2.0％Tween(TCIAmerica，Portland，Oregon)的容器中.将桨在100rpm旋转，并且以特定时间间隔经由装配有35μm全流动滤器(Varian Inc.，Cary，NC)的自动取样器(VK8000，Varian Inc.，Cary，NC)抽取样本。

然后，通过高效液相色谱法(Agilent 1100 series，AgilentTechnologies Inc.，Wilmington，DE)分析SAHA.色谱分析使用Phenomenex Luna C8(2)(100×4.6mm)5μm粒径柱，1:1甲醇/0.1％三氟乙酸的流动相(Reagent Grade，Fisher)和242nm的检测波长来进行。

SAHA API批次的溶解速度特征如表15和图6所示。

表15：SAHA API批次的溶解速度

实施例16

粒径分布的测定

混合的SAHA晶体(Active Pharmaceutical Ingredient：API)、润滑的制剂混合物和胶囊内容物的粒径测定是通过装配有RODOS粉末分散系统的Sympatec激光衍射分析仪(HELOS H1006，Clausthal-Zellerfeld，Germany)进行的.

将约150mg样本手工递送到系统中，并且通过使用0.1巴气压的激光束进行粉化。使用850或1750-μm的焦距透镜来收集数据，并且具有5-20％的目标遮蔽.使用fraunhofer光学模型来去卷积样本散射模式，以产生所得粒径分布。

SAHA胶囊内容物的粒径分布如表16和图3所示。在包入胶囊之前，SAHA API批次的粒径分布如表17和图4所示.使用API288(30％湿研磨)和283(70％大晶体)的混合物制得的SAHA胶囊的粒径分布如表18所示.使用湿研磨的晶体和大晶体的混合物制得的胶囊中的SAHA的标准化粒径分布如表19和图12所示。使用30％湿研磨的晶体和70％大晶体制得的Lot C0666001 SAHA胶囊的粒径分布如表20和图13中所示。使用30％湿研磨的晶体和70％大晶体制得的Lot C0667001 SAHA胶囊的粒径分布如表21和图14所示。

表16：SAHA胶囊内容物的粒径分布

表17：SAHA API批次的粒径分布

表18：使用API288(30％湿研磨的)和283(70％大的)的混合物制备的SAHA胶囊的粒径分布

表19：使用湿研磨的晶体与大晶体的不同混合物制得的胶囊中的SAHA的标准化粒径分布

表20：使用30％湿研磨的晶体与70％大晶体制得的Lot C0666001SAHA胶囊的粒径分布

表21：使用30％湿研磨的晶体与70％大晶体制得的Lot C0667001SAHA胶囊的粒径分布

实施例17

患者试验

在晚期癌症患者中进行的该I期试验评估了口服给予400mg q.d.的vorinostat的安全性和忍受性，vorinostat的单剂量和多剂量血清药动学(PK)，以及标准高脂肪膳食对于单剂量vorinostat PK的影响。在第1天(禁食)和第5天(标准高脂肪膳食后)患者接受单剂量400mg vorinostat，对于这两天，在给药后48小时进行PK取样.然后在第7-28天(给药22天)，患者接受400mg vorinostat，每天1次。在第28天，在标准高脂肪膳食之后给予vorinostat，在给药后48小时进行PK取样.有23名患者参加，对于第1天的PK，有23名患者可以进行评估，w对于第5天的PK，有20名患者可以进行评估，对于第28天的PK，有14名患者可以进行评估.vorinostat的表观t_1/2很短.高脂肪膳食使得vorinostat的吸收范围有小的增加，使得vorinostat的吸收速度有适当降低。在大部分受试者中，在禁食状态血清中观测到可检测水平的vorinostat之前，观察到至少15分钟的滞后时间，并且T_max延迟了.给予多剂量的vorinostat之后，血清浓度时间曲线类似于单剂量给药.多剂量给药后的浓度一般低于定量测定的限度，该限度与短的表观终止t_1/2一致。综上所述，对于晚期癌症患者短期给予vorinostat通常得到良好的忍受性.当与高脂肪膳食一起给予时，Vorinostat表现出短的t_1/2，在单剂量与多剂量给药之间类似的血清浓度时间曲线，以及轻微下降的吸收速度.

表22：每天给予单和多剂量Vorinostat 400mg后Vorinostat的PK参数

fe＝在尿液中分泌的未改变的剂量的分数.

^＊每天一次，22天.

几何平均比例.

几何平均值.

进食状态下单剂量/禁食状态下单剂量.

累积比例：AUC_0-24hr进食状态下多剂量/AUC_0-24hr进食状态下单剂量.

线性比例：AUC_0-24hr进食状态下多剂量/AUC_0-∞进食状态下单剂量.

^#中值.

^＊＊进食状态下多剂量/进食状态下单剂量.

调和平均值.

算数平均值(禁食状态下单剂量n＝22，进食状态下单剂量n＝21，进食状态下多剂量n＝12.

虽然本发明已经参照其实施方案显示和描述了本发明，但是本领域技术人员应当理解，可以在不背离本发明所述含义的情况下对形式和细节进行各种改变.本发明的范围通过下列权利要求书来限定。

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Claims (25)

1. 包含粉末形式的辛二酰苯胺异羟肟酸或其可药用盐或水合物作为活性组分的用于口服给药的药物组合物，其中与参照溶解特征相比，100mg活性组分的体外溶解特征具有至少56－100的相似系数（f2），

其中所述参照溶解特征包含的各个时间的平均溶解的SAHA%在10分钟为52.7％、15分钟为61.7％、20分钟为67.7％、30分钟为75.5％、45分钟为82.6％和60分钟为87.0％，

其中所述溶解特征在900 mL 的2.0% Tween中于37±0.5^oC温度下测定，

其中粒径小于105微米的活性组分的总%体积为45-85％，并且粒径大于105微米的活性组分的%体积为55-15％。

2. 权利要求1的药物组合物，其中f2为60－100。

3. 权利要求1的药物组合物，其中f2为70－100。

4. 权利要求1的药物组合物，其中对于活性组分，粒径在90－110微米之间的活性组分的%体积为2.0%－10%，粒径在120－250微米之间的活性组分的%体积为4.0%－12%。

5. 权利要求4的药物组合物，其中粒径在20－25微米的活性组分的%体积为1.0%－4%，并且粒径在35－40微米的活性组分的%体积为3.0%－7%。

6. 权利要求1的药物组合物，所述组合物是单一胶囊，其中活性组分的量是100 mg。

7. 权利要求1的药物组合物，所述组合物是两个胶囊，其中每个胶囊中活性组分的量为50 mg。

8. 权利要求1的药物组合物，其中所述组合物是单位剂型，其中活性组分的量是200 mg。

9. 权利要求1－8任一项的药物组合物，其中所述活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸。

10. 权利要求1－8任一项的药物组合物，其中活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0和28.0o 2θ的特征峰，并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0o 2θ的峰，所述X-射线衍射花样是使用铜X-射线源测定的。

11. 权利要求1－8任一项的药物组合物，其中活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0和28.0o 2θ的特征峰，所述X-射线衍射花样是使用铜X-射线源测定的。

12. 权利要求1－8任一项的药物组合物，其中活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.4，17.5，19.4，20.0，24.0和28.0o 2θ的特征峰，所述X-射线衍射花样是使用铜X-射线源测定的。

13. 权利要求1－8任一项的药物组合物，其中活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.4，17.5，19.4，20.0，24.0和28.0o 2θ的特征峰，并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0o 2θ的峰，所述X-射线衍射花样是使用铜X-射线源测定的。

14. 权利要求1－8任一项的药物组合物，其中活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.0，9.4，17.5，19.4，20.0，24.0，24.4，24.8，25.0，28.0和43.3o 2θ的特征峰，所述X-射线衍射花样是使用铜X-射线源测定的，并且其特征还在于差示扫描量热法（DSC）热分析图具有在164.4±2.0的一个最大值。

15. 权利要求1－8任一项的药物组合物，其中活性组分是辛二酰苯胺异羟肟酸晶形I，所述晶形I具有以下晶胞参数：a= 10.9 ?，b= 7.9 ?，c= 16.4 ?，α= 90°，β= 97.8°，γ=90°，空间群P2₁/n。

16. 权利要求1－8任一项的药物组合物，其中活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样基本上类似于图7A所示衍射花样。

17. 权利要求12的药物组合物，其中所述X-射线衍射花样是用Siemens D500 Automated Powder Diffractometer（Instrument ID No. LD-301-4）测定的。

18. 权利要求1－8任一项的药物组合物，其中活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.1，10.8，12.3，17.2，19.2，19.8，23.7，24.1，25.7，26.8和27.7o 2θ的特征峰，所述X-射线衍射花样是使用铜X-射线源测定的。

19. 权利要求1－8任一项的药物组合物，其中活性组分是结晶辛二酰苯胺异羟肟酸，并且其特征在于，其X-射线衍射花样包括在9.1，17.2，19.2，19.8，23.7和27.7o 2θ的特征峰，所述X-射线衍射花样是使用铜X-射线源测定的。

20. 权利要求19的药物组合物，其中所述X-射线衍射花样是用X’PERT Pro Phillips X-射线衍射仪测定的。

21. 权利要求9的药物组合物，其中所述药物组合物是通过以下步骤获得的：

(a)将60-5%的第一批研磨或湿研磨结晶活性组分与40-95%的第二批结晶活性组分混合，该第二批结晶活性组分在大小上大于研磨或湿研磨的结晶活性组分；和

(b)将一部分混合的结晶活性组分装入胶囊来制得药物组合物。

22. 权利要求21的药物组合物，其中所述第一批研磨或湿研磨结晶活性组分平均粒径小于60 μm，第二批结晶活性组分平均粒径为100－250 μm。

23. 权利要求21的药物组合物，其中所述第一批研磨或湿研磨结晶活性组分平均粒径为25－45 μm，第二批结晶活性组分平均粒径为130－180 μm。

24. 权利要求23的药物组合物，其中将40-20%的第一批结晶辛二酰苯胺异羟肟酸与60-80%的第二批结晶辛二酰苯胺异羟肟酸混合。

25. 权利要求23的药物组合物，其中将30%的第一批结晶辛二酰苯胺异羟肟酸与70%的第二批结晶辛二酰苯胺异羟肟酸混合。