CN101031568A - 作为蛋白激酶抑制剂的化合物和组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一类新的化合物、包含这类化合物的药物组合物和使用这类化合物来治疗或预防与激酶活性异常或失控有关的疾病或紊乱、特别是涉及Abl、Bcr－abl、Bmx、c－RAF、CSK、Fes、FGFR3、Flt3、GSK3β、IR、JNK1α1、JNK2α2、Lck、MKK4、MKK6、p70S6K、PDGFRα、Rsk1、SAPK2α、SAPK2β、Syk和TrkB激酶异常激活的疾病或紊乱的方法。

Description

作为蛋白激酶抑制剂的化合物和组合物

                   相关申请的交叉参考

本申请要求美国临时专利申请No.60/582,467(2004年6月23日提交)和美国临时专利申请No.60/588,563(2004年7月15日提交)的优先权。这些申请的全部内容引入本文作为参考并用于所有目的。

                        发明背景

发明领域

本发明提供了一类新的化合物、包含这类化合物的药物组合物和使用这类化合物来治疗或预防与激酶活性异常或失控有关的疾病或紊乱、特别是涉及Abl、Bcr-abl、Bmx、c-RAF、CSK、Fes、FGFR3、Flt3、GSK3β、IR、JNK1α1、JNK2α2、Lck、MKK4、MKK6、p70S6K、PDGFRα、Rsk1、SAPK2α、SAPK2β、Syk和TrkB激酶异常激活的疾病或紊乱的方法。

背景

蛋白激酶代表一大家族蛋白质，其在调节广泛多样的细胞过程和维持对细胞功能的控制方面起关键作用。这些激酶非限定性的部分列表包括：受体酪氨酸激酶，例如血小板衍生生长因子受体激酶(PDGF-R)、神经生长因子受体、trkB和成纤维细胞生长因子受体FGFR3；非受体酪氨酸激酶，例如Abl和融合激酶BCR-Abl、Lck、Csk、Fes、Bmx和c-src；以及丝氨酸/苏氨酸激酶，例如c-RAF、sgk、MAP激酶(例如MKK4、MKK6等)和SAPK2α与SAPK2β。在许多疾病状态中已经观察到异常的激酶活性，包括良性和恶性增殖性紊乱以及免疫和神经系统不恰当的激活引致的疾病。

本发明的新化合物抑制一种或多种蛋白激酶的活性，因此被期望可用于治疗与激酶相关的疾病。

发明概述

在一方面，本发明提供了式I化合物及其N-氧化物衍生物、前药衍生物、被保护的衍生物、单一异构体及异构体混合物，以及这类化合物的可药用的盐和溶剂化物(例如水合物)，

其中：

Y选自C、P(O)和S(O)；

R₁选自氢、C_1-6烷基、C_6-10芳基-C_0-4烷基、C_5-10杂芳基-C_0-4烷基、C_3-10环烷基-C_0-4烷基和C_3-10杂环烷基-C_0-4烷基；

R₂选自氢和C_1-6烷基；或者

R₁和R₂与R₁和R₂所连接的氮原子一起形成C_3-10杂环烷基或C_5-10杂芳基；

其中R₁的任意烷基可任选被一至三个独立地选自卤代基、C_1-6烷氧基和-XNR₇R₈的基团取代；其中X是价键或C_1-6亚烷基；R₇和R₈独立地选自氢和C_1-6烷基；

其中R₁或者R₁与R₂的组合的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基任选被一至三个选自卤代基、羟基、C_1-6烷基、-XOXNR₇R₈和-XR₁₀的基团取代；其中X是价键或C_1-6亚烷基；R₇和R₈独立地选自氢和C_1-6烷基；R₁₀选自C_6-10芳基、C_5-10杂芳基、C_3-10环烷基和C_3-10杂环烷基；其中R₁₀的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基任选被1至3个选自卤代基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代-C_1-6烷基、卤代-C_1-6烷氧基和-XNR₇R₈的基团取代；其中X是价键或C_1-6亚烷基；R₇和R₈独立地选自氢和C_1-6烷基；

R₃和R₄独立地选自氢和C_1-6烷基；

R₅选自C_1-6烷基、C_2-6链烯基、C_1-6烷氧基、卤代-C_1-4烷基和卤代-C_1-4烷氧基；

R₆选自C_6-10芳基、C_5-10杂芳基、C_3-10环烷基和C_3-10杂环烷基；其中R₆的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基任选被一至三个独立地选自卤代基、氨基、硝基、氰基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代-C_1-6烷基、卤代-C_1-6烷氧基、-XNR₇R₇、-XNR₇XNR₇R₇、-XNR₇C(O)R₇、-XC(O)OR₇、-XNR₇S(O)₂R₇、-XNR₇S(O)R₇、-XNR₇SR₇和-XR₁₁的基团取代；其中X和R₇如上所定义，R₁₁选自C_5-10杂芳基-C_0-4烷基和C_3-10杂环烷基-C_0-4烷基；其中R₁₁的任意杂芳基或杂环烷基任选被选自C_1-6烷基、卤代-C_1-6烷基和-C(O)OR₇的基团取代。

第二方面，本发明提供了含有式I化合物或其N-氧化物衍生物、单一异构体及异构体混合物或者它们的可药用盐以及一种或多种适宜赋形剂的药物组合物。

在第三方面，本发明提供了治疗动物的其中抑制激酶活性、特别是抑制Abl、Bcr-abl、Bmx、c-RAF、CSK、Fes、FGFR3、Flt3、GSK3β、IR、JNK1α1、JNK2α2、Lck、MKK4、MKK6、p70S6K、PDGFRα、Rsk1、SAPK2α、SAPK2β、Syk和/或TrkB的活性可以预防、抑制或改善疾病的病理学和/或症候学的疾病的方法，该方法包括给予动物治疗有效量的式I化合物或其N-氧化物衍生物、单一异构体及异构体混合物或者它们的可药用盐。

在第四方面，本发明提供了式I化合物在制备药物中的用途，所述的药物用于在动物中治疗其中激酶的活性、特别是Abl、Bcr-abl、Bmx、c-RAF、CSK、Fes、FGFR3、Flt3、GSK3β、IR、JNK1α1、JNK2α2、Lck、MKK4、MKK6、p70S6K、PDGFRα、Rsk1、SAPK2α、SAPK2β、Syk和/或TrkB的活性促成该疾病的病理学和/或症候学的疾病。

在第五方面，本发明提供了制备式I化合物及其N-氧化物衍生物、前药衍生物、被保护的衍生物、单一异构体及异构体混合物以及它们的可药用盐的方法。

                           发明详述

定义

“烷基”作为基团和作为其它基团(例如卤素取代的烷基和烷氧基)的结构元件，可以是直链的或支链的。C_1-4烷氧基包括甲氧基、乙氧基等。卤素取代的烷基包括三氟甲基、五氟乙基等。

“芳基”表示含有六至十个环碳原子的单环或稠合双环芳香环系。例如，芳基可以是苯基或萘基，优选苯基。“亚芳基”表示衍生自芳基的二价基团。

“杂芳基”被定义为其中一个或多个环成员为杂原子的芳基。例如杂芳基包括吡啶基、吲哚基、吲唑基、喹喔啉基、喹啉基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并噻喃基、苯并[1，3]二氧杂环戊烯、咪唑基、苯并咪唑基、嘧啶基、呋喃基、唑基、异唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、噻吩基等。

“环烷基”表示含有指定数目环原子的饱和或部分不饱和的单环、稠合双环或桥连多环系。例如，C_3-10环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。

“杂环烷基”表示如本申请所定义的环烷基，条件是一个或多个指定的环碳被选自-O-、-N＝、-NR-、-C(O)-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-的部分代替，其中R是氢、C_1-4烷基或氮保护基。例如，被用于本申请来描述本发明化合物的C_3-8杂环烷基包括吗啉代基、吡咯烷基、吡咯烷-2-酮、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基(piperidinylone)、1，4-二氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基等。

“卤素”(或卤代基)优选代表氯或氟，但还可以是溴或碘。

“治疗”涉及减轻或缓解疾病和/或其伴随症状的方法。

“激酶名单”是包括如下激酶的列表：Abl(人)、Abl(T315I)、JAK2、JAK3、ALK、JNK1α1、ALK4、KDR、Aurora-A、Lck、Blk、MAPK1、Bmx、MAPKAP-K2、BRK、MEK1、CaMKII(大鼠)、Met、CDK1/细胞周期蛋白B、p70S6K、CHK2、PAK2、CK1、PDGFRα、CK2、PDK1、c-kit、Pim-2、c-RAF、PKA(h)、CSK、PKBα、cSrc、PKCα、DYRK2、Plk3、EGFR、ROCK-I、Fes、Ron、FGFR3、Ros、Flt3、SAPK2α、Fms、SGK、Fyn、SIK、GSK3β、Syk、IGF-1R、Tie-2、IKKβ、TrKB、IR、WNK3、IRAK4、ZAP-70、ITK、AMPK(大鼠)、LIMK1、Rsk2、Axl、LKB1、SAPK2β、BrSK2、Lyn(h)、SAPK3、BTK、MAPKAP-K3、SAPK4、CaMKIV、MARK1、Snk、CDK2/细胞周期蛋白A、MINK、SRPK1、CDK3/细胞周期蛋白E、MKK4(m)、TAK1、CDK5/p25、MKK6(h)、TBK1、CDK6/细胞周期蛋白D3、MLCK、TrkA、CDK7/细胞周期蛋白H/MAT1、MRCKβ、TSSK1、CHK1、MSK1、Yes、CK1d、MST2、ZIPK、c-Kit(D816V)、MuSK、DAPK2、NEK2、DDR2、NEK6、DMPK、PAK4、DRAK1、PAR-1Bα、EphA1、PDGFRβ、EphA2、Pim-1、EphA5、PKBβ、EphB2、PKCβI、EphB4、PKCδ、FGFR1、PKCη、FGFR2、PKCθ、FGFR4、PKD2、Fgr、PKG1β、Flt1、PRK2、Hck、PYK2、HIPK2、Ret、IKKα、RIPK2、IRR、ROCK-II(人)、JNK2α2、Rse、JNK3、Rsk1(h)、PI3Kγ、PI3Kδ和PI3-Kβ。根据该激酶名单(野生型和/或其突变体)筛选出本发明化合物，其抑制至少一种所述名单成员的活性。

“BCR-Abl突变体形式”表示野生型序列的单一或多个氨基酸改变。BCR-ABL的突变通过破坏蛋白质与抑制剂(例如Gleevec等)之间的关键接触点而发挥作用，更经常地通过诱导从无活性状态向活性状态、也就是BCR-ABL与Gleevec不能结合的构型的转变而发挥作用。根据临床样品的分析，贝发现与抗性表型有关的突变的总数已经随时间的推移缓慢但不可抗拒地增加。突变似乎聚集在四个主要的区域。一组突变(G250E、Q252R、Y253F/H、E255K/V)包括构成ATP的磷酸-结合袢(也称为P-袢)的氨基酸。第二组(V289A、F311L、T315I、F317L)可在Gleevec结合位点处发现，经由氢键或范德华力直接与抑制剂相互作用。第三组突变(M351T、E355G)聚集在催化结构域附近。第四组突变(H396R/P)位于活化袢中，它的构型是控制激酶活化/失活的分子开关。在CML和ALL患者中检测到的与Gleevec有关的BCR-ABL点突变包括：M224V、L248V、G250E、G250R、Q252R、Q252H、Y253H、Y253F、E255K、E255V、D276G、T277A、V289A、F311L、T315I、T315N、F317L、M343T、M315T、E355G、F359V、F359A、V379I、F382L、L387M、L387F、H396P、H396R、A397P、S417Y、E459K和F486S(amino acid positions，indicated by the single letter code，are those for the GenBank sequence，accession number AAB60394，andcorrespond to ABL type 1a；Martinelli等人，Haematologica/TheHematology Journal，2005年4月；90-4)。除非本发明另有规定，Bcr-Abl表示酶的野生型和突变体形式。

“治疗”涉及减轻或缓解疾病和/或其伴随症状的方法。

优选实施方案的描述

融合蛋白BCR-Abl是融合Abl原-致癌基因与Bcr基因的相互易位的结果。BCR-Abl然后能够通过促有丝分裂活性的增加转化B-细胞。这种增加导致对细胞凋亡的敏感性减少，以及改变CML祖细胞的粘连和归巢。本发明提供了治疗激酶相关性疾病、特别是Abl、Bcr-abl、Bmx、c-RAF、CSK、Fes、FGFR3、Flt3、GSK3β、IR、JNK1α1、JNK2α2、Lck、MKK4、MKK6、p70S6K、PDGFRα、Rsk1、SAPK2α、SAPK2β、Syk和TrkB激酶相关性疾病的化合物、组合物和方法。例如，通过抑制Bcr-Abl的野生型和突变体形式，可以治疗白血病和其它涉及BCR-Abl的增殖性紊乱。

在一种实施方案中，关于式I化合物，Y是C；R₁选自氢、C_1-6烷基、C_6-10芳基-C_0-4烷基、C_5-10杂芳基-C_0-4烷基、C_3-10环烷基-C_0-4烷基和C_3-10杂环烷基-C_0-4烷基；R₂选自氢和C_1-6烷基；或者R₁和R₂与R₁和R₂所连接的氮原子一起形成C_3-10杂环烷基；其中R₁的任意烷基可任选被一至三个独立地选自C_1-6烷氧基和-XNR₇R₈的基团取代；其中X是价键或C_1-6亚烷基；R₇和R₈独立地选自氢和C_1-6烷基；其中R₁或者R₁与R₂的组合的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基任选被一至三个选自羟基、C_1-6烷基、-XOXNR₇R₈和-XR₁₀的基团取代；其中X是价键或C_1-6亚烷基；R₇和R₈独立地选自氢和C_1-6烷基；R₁₀选自C_6-10芳基和C_3-10杂环烷基；其中R₁₀的任意芳基或杂环烷基任选被1至3个选自卤代基、C_1-6烷基和-XNR₇R₈的基团取代；其中X是价键或C_1-6亚烷基；R₇和R₈独立地选自氢和C_1-6烷基。

在另一种实施方案中，R₃、R₄和R₅独立地选自氢和C_1-6烷基；R₆是C_6-10芳基，任选被1至3个独立地选自卤代-C_1-6烷基和-XR₁₁的基团取代；其中X如上所定义，R₁₁选自C_5-10杂芳基-C_0-4烷基和C_3-10杂环烷基-C_0-4烷基；其中R₁₁的任意杂芳基或杂环烷基任选被C_1-6烷基取代。

在另一种实施方案中，R₁选自氢、甲基、乙基、6-甲基-吡啶-3-基、3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基、吡啶-3-基、3-甲基-异噻唑-5-基、甲氧基-乙基、异丙基、甲基-苯基、吗啉代基-乙基、环丙基、二乙基-氨基-乙基、吡咯烷基-乙基、吡啶基-甲基、4-羟基-环己基、苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基、4-吗啉代基-苯基、3-二甲氨基-苯基、4-(2-吗啉-4-基-乙基)-苯基和二乙基-氨基-乙氧基；R₂选自氢、甲基和乙基；或者R₁和R₂与R₁和R₂所连接的氮原子一起形成4-乙基-哌嗪基或4-(3-氨基-苯基)-哌嗪-1-基。

在进一步的实施方案中，R₃是甲基，R₄是甲基，R₅是氢，R₆是苯基，任选被1至2个选自三氟甲基、吗啉代基、甲基-咪唑基、甲基-哌嗪基-甲基、乙基-哌嗪基和甲基-哌嗪基的基团取代。

优选的化合物选自：N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-吗啉-4-基-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-(6-甲基-吡啶-3-基氨基)-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-[8-甲基-2-[4-(吗啉-4-基)苯基氨基]-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基]-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-二甲氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-(3-{2-[(2-甲氧基-乙基)-甲基-氨基]-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基}-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-异丙基氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-(8-甲基-7-氧代-2-对甲苯基氨基-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{4-甲基-3-[8-甲基-2-(2-吗啉-4-基-乙基氨基)-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(4-乙基-哌嗪-1-基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-环丙基氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{4-甲基-3-[8-甲基-7-氧代-2-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨基)-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-(4-甲基-3-{8-甲基-7-氧代-2-[(吡啶-4-基甲基)-氨基]-7，8-二氢-蝶啶-6-基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-二乙基氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(4-羟基-环己基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-(3-{2-[4-(3-氨基-苯基)-哌嗪-1-基]-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基}-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(3-二甲氨基-苯基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-(4-甲基-3-{8-甲基-2-[4-(2-吗啉-4-基-乙基)-苯基氨基]-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-(3-{2-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯基氨基]-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基}-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；3-(4-甲基-咪唑-1-基)-N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-4-吗啉-4-基-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{4-甲基-3-[2-甲基氨基-8-(2-吗啉-4-基-乙基)-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-(4-甲基-3-{8-甲基-7-氧代-2-[3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基氨基]-7，8-二氢-蝶啶-6-基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{4-甲基-3-[8-甲基-7-氧代-2-(吡啶-3-基氨基)-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{4-甲基-3-[8-甲基-2-(3-甲基-异噻唑-5-基氨基)-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(2，5-二甲基-2H-吡唑-3-基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；3-(4-乙基-哌嗪-1-基)-N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺；4-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(2，6-二甲基-吡啶-3-基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{4-甲基-3-[8-甲基-2-(2-甲基-吡啶-3-基氨基)-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(4，6-二甲基-吡啶-3-基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-4-吗啉-4-基-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-(4-甲基-咪唑-1-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-吗啉-4-基-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-(4-乙基-哌嗪-1-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；和N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-4-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺。

进一步优选的本发明化合物详述在下文实施例和表I中。

药理学和效用

本发明的化合物调节激酶的活性，因此可用于治疗其中激酶促成该疾病病理学和/或症候学的疾病或紊乱。被本文所述化合物和组合物所抑制的和适于采用本文所述方法来对抗的激酶的实例包括但不限于Abl、BCR-Abl(野生型和突变体形式)、Bmx、c-RAF、CSK、Fes、FGFR3、Flt3、GSK3β、IR、JNK1α1、JNK2α2、Lck、MKK4、MKK6、p70S6K、PDGFRα、Rsk1、SAPK2α、SAPK2β、Syk和TrkB。

Abelson酪氨酸激酶(即Abl，c-Abl)参与细胞周期的调节，参与对基因毒性应激的细胞应答，并通过整联蛋白发信号来参与有关细胞环境的信息传递。大体上，Abl蛋白作为这样一种细胞模块来起复杂作用：该细胞模块整合多种胞外和胞内来源的信号并影响关于细胞周期和凋亡的决定。Abelson酪氨酸激酶包括多种亚型衍生物，例如具有失控的酪氨酸激酶活性的嵌合融合体(癌蛋白)BCR-Abl或v-Abl。BCR-Abl在95％的慢性髓性白血病(CML)和10％的急性淋巴细胞白血病的发病机制中是关键的。STI-571(Gleevec)是致癌的BCR-Abl酪氨酸激酶的抑制剂，用于治疗慢性髓性白血病(CML)。但是，有些处于CML原始细胞危象期的患者由于BCR-Abl激酶的突变而对STI-571有耐受性。迄今为止，已报道了超过22种的突变体，最常见的是G250E、E255V、T315I、F317L和M351T。

本发明的化合物抑制abl激酶、尤其是v-abl激酶。本发明的化合物还抑制野生型BCR-Abl激酶和BCR-Abl激酶的突变体，因此适于治疗BCR-Abl阳性癌症和肿瘤疾病，例如白血病(尤其是慢性髓性白血病和急性淋巴细胞白血病，其中尤其发现有细胞凋亡的作用机制)，它们还表现出对白血病干细胞亚群的作用以及在抽取上述细胞(例如抽取骨髓)后体外纯化这些细胞和清除癌细胞后再移植这些细胞(例如经纯化骨髓细胞的再移植)的可能性。

PDGF(血小板衍生生长因子)是非常常见的生长因子，它在正常生长和病理细胞增殖中均起重要作用，例如致癌作用和在血管平滑肌细胞疾病中可见，例如在动脉粥样硬化和血栓形成中。本发明的化合物能够抑制PDGF受体(PDGFR)的活性，因此适于治疗肿瘤疾病，例如神经胶质瘤、肉瘤、前列腺肿瘤以及结肠、乳房、卵巢的肿瘤。

本发明的化合物不仅可用作肿瘤抑制物(例如在小细胞肺癌中)，而且还可用作治疗非恶性增殖性紊乱(例如动脉粥样硬化、血栓形成、银屑病、硬皮病、纤维变性)、保护干细胞(例如抵抗化疗剂如5-氟尿嘧啶的血毒素作用)和治疗哮喘的药物。本发明的化合物尤其可用于治疗对抑制PDGF受体激酶有响应的疾病。

本发明的化合物在治疗移植引起的紊乱中表现出有用效用，例如在同种异体移植、尤其是组织排斥中，例如尤其是闭塞性细支气管炎(OB)，即同种异体肺移植的慢性排斥。与未患OB的人相比，OB患者的支气管肺泡灌洗液中的PDGF浓度升高。

本发明的化合物还对与血管平滑肌细胞迁移和增殖相关的疾病(其中PDGF和PDGF-R通常也起作用)有效，例如再狭窄和动脉粥样硬化。这类对血管平滑肌细胞增殖和迁移的体外和体内作用及其结果可以通过本发明化合物的施用得到证明，还可通过观察其对于体内血管内膜在机械损伤后的增厚的作用而得到证明。

本发明的化合物还抑制涉及干细胞因子(SCF，还已知是c-kit配体或青灰因子)的细胞过程，例如抑制SCR受体(kit)自磷酸化和SCF刺激的MAPK激酶(促分裂原活化蛋白激酶)的活化。MO7e细胞是人前巨核细胞白血病细胞系，其依赖SCF来增殖。本发明的化合物能抑制SCF受体的自磷酸化。

神经营养蛋白受体的trk家族(trkA、trkB、trkC)促进神经元与非神经元组织的存活、生长和分化。trkB蛋白在小肠与结肠的神经内分泌型细胞、胰腺的α细胞、淋巴结与脾的单核细胞与巨噬细胞以及表皮的颗粒细胞层中有表达(Shibayama和Koizumi，1996)。trkB蛋白的表达与维尔姆斯肿瘤和成神经细胞瘤的不良进展有关。而且，tkrB细胞在癌性前列腺细胞中有表达，但是在正常细胞中没有表达。trk受体下游的信号传导途径牵涉通过Shc、活化Ras、ERK-1与ERK-2基因的MAPK活化级联和PLC-γ传导途径(Sugimoto等人，2001)。

激酶c-Src传递多种受体的致癌信号。例如，EGFR或HER2/neu在肿瘤中的过表达引起c-src的组成型活化，这是恶性细胞所特有的，但是在正常细胞中不存在。另一方面，c-src表达缺陷的小鼠表现骨硬化(osteopetrotic)表型，表明c-src关键性地参与破骨细胞功能，并且可能在相关紊乱中有牵连。

Tec家族激酶Bmx是一种非受体蛋白-酪氨酸激酶，其控制哺乳动物上皮癌细胞的增殖。

成纤维细胞生长因子受体3被证明对骨生长发挥负调节效应，并且抑制软骨细胞增殖。致死性发育不良由成纤维细胞生长因子受体3的不同突变所导致，其中一种突变TDII FGFR3具有组成型酪氨酸激酶活性，该活性激活转录因子Stat1，引起细胞周期抑制剂的表达、生长停止和异常的骨发育(Su等人，Nature，1997，386，288-292)。FGFR3也经常在多发性骨髓瘤型癌症中被表达。

血清与糖皮质激素-调节激酶(SGK)的活性与混乱的离子通道活动、特别是钠和/或钾通道活性相关，本发明化合物能够用于治疗高血压。

Lin等人(1997)J.Clin.Invest.100，8：2072-2078和P.Lin(1998)PNAS95，8829-8834已经指出：在乳腺肿瘤与黑素瘤异种移植模型中，在腺病毒感染期间或者在Tie-2细胞外结构域(Tek)的注射期间，肿瘤生长和血管形成受到抑制，并且肺转移也降低。Tie2抑制剂能够用于不适当地发生新生血管形成的情形(也就是糖尿病性视网膜病、慢性炎症、银屑病、卡波西肉瘤、由黄斑变性引起的慢性新生血管形成、类风湿性关节炎、婴儿血管瘤和癌症)。

Lck在T-细胞信号传导中起作用。缺乏Lck基因的小鼠具有较差的发育胸腺细胞的能力。Lck作为T-细胞信号传导的正性活化剂的功能提示Lck抑制剂可以用于治疗自身免疫疾病，例如类风湿性关节炎。

JNK以及其它MAPK在介导对癌症的细胞应答、凝血酶-诱导的血小板聚集、免疫缺陷紊乱、自身免疫疾病、细胞死亡、变态反应、骨质疏松和心脏疾病中起作用。涉及JNK途径活化的治疗靶包括慢性髓性白血病(CML)、类风湿性关节炎、哮喘、骨关节炎、缺血、癌症和神经变性疾病。作为与肝脏疾病或肝缺血发作有关的JNK活化的重要性的结果，本发明化合物也可以用于治疗各种肝紊乱。JNK在心血管疾病、例如心肌梗塞或充血性心力衰竭中的作用也已经有报道，已经显示JNK介导对各种形式心脏应激反应的肥大性应答。已经证明，JNK级联在T-细胞活化、包括IL-2启动子的活化中起作用。因而，JNK抑制剂在改变病理性免疫应答种可具有治疗价值。JNK活化在各种癌症中的作用也已经被确定，提示了JNK抑制剂在癌症中的潜在应用。例如，组成型活化的JNK与HTLV-1介导的肿瘤发生有关[Oncogene 13：135-42(1996)]。JNK可在卡波西肉瘤(KS)中起作用。其它在KS增殖中有牵连的细胞因子、例如血管内皮生长因子(VEGF)、IL-6和TNFα的其它增殖效应也可以被JNK所介导。另外，p210BCR-ABL转化细胞中c-jun基因的调节与JNK的活性一致，提示了JNK抑制剂在慢性髓性白血病(CML)治疗中的作用[Blood 92：2450-60(1998)]。

据信某些异常增殖病症与raf表达有关，因此相信它们对raf表达的抑制有响应。异常高的raf蛋白表达水平还在转化和异常细胞增殖中有牵连。还相信这些异常增殖病症对raf表达的抑制有响应。例如，相信c-raf蛋白的表达在异常细胞增殖中起作用，因为已有报道全部肺癌细胞系有60％表达异乎寻常高的c-raf mRNA和蛋白质水平。异常增殖病症的进一步实例是过度增殖性紊乱，例如癌症、肿瘤、增生、肺纤维化、血管生成、银屑病、动脉粥样硬化和血管平滑肌细胞增殖，例如血管成形术后的狭窄或再狭窄。以raf作为一部分的细胞信号传导途径还在以T-细胞增殖(T-细胞活化和生长)为特征的炎性紊乱中有牵连，例如组织移植物排斥、内毒素性休克和肾小球性肾炎。

应激反应活化蛋白激酶(SAPK)是代表信号转导途径中倒数第二步的蛋白激酶家族，所述途径导致c-jun转录因子的活化和c-jun所调节基因的表达。确切而言，c-jun参与基因的转录，该基因编码参与因遗传毒性损伤受损的DNA的修复的蛋白质。因此，抑制细胞中SAPK活性的物质防止DNA修复，使细胞对诱导DNA损伤或抑制DNA合成并诱导细胞凋亡的物质或抑制细胞增殖的物质敏感。

促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)是保守型信号转导途径的成员，该途径响应于多种细胞外信号而活化转录因子、翻译因子和其它靶分子。MAPK通过在具有序列Thr-X-Tyr的双磷酸化基序上由促分裂原活化蛋白激酶激酶(MKK)进行的磷酸化作用而被活化。在高级真核生物中，MAPK信号传导的生理学作用已经与细胞事件相关系，例如增殖、癌发生、发育和分化。因此，经由这些途径(特别是经由MKK4和MKK6)调节信号转导的能力可开发与MAPK信号传导有关的人类疾病、例如炎性疾病、自身免疫疾病和癌症的治疗与预防性治疗。

Syk是一种酪氨酸激酶，其在肥大细胞脱粒和嗜曙红细胞活化中起关键作用。因此，Syk激酶在各种变应性紊乱、特别是哮喘中有牵连。已经显示，Syk经由N-末端SH2结构域与FcεR1受体的磷酸化γ链结合，其是下游信号传导所必需的。

抑制嗜曙红细胞的细胞凋亡已被提出是哮喘中形成血液与组织嗜曙红细胞增多的关键机理。IL-5和GM-CSF在哮喘中被增量调节，并被提出通过抑制嗜曙红细胞的细胞凋亡导致血液与组织嗜曙红细胞增多。抑制嗜曙红细胞的细胞凋亡已被提出是哮喘中形成血液与组织嗜曙红细胞增多的关键机理。已有报道Syk激酶是通过细胞因子防止嗜曙红细胞的细胞凋亡所需要的(使用反义)[Yousefi，等人，J.Exp.Med.1996，183，1407]。

人核糖体S6蛋白激酶家族由至少8种成员组成(RSK1、RSK2、RSK3、RSK4、MSK1、MSK2、p70S6K和p70S6Kb)。核糖体S6蛋白激酶起重要的pleotropic功能，其中之一是在蛋白质生物合成期间mRNA翻译调节中的关键作用(Eur.J.Biochem 2000 November；267(21)：6321-30，ExpCell Res.1999年11月25日；253(1)：100-9，Mol Cell Endocrinol.1999年5月25日；151(1-2)：65-77)。S6核糖体蛋白被p70S6的磷酸化也已在细胞游动性的调节(Immunol.Cell Biol.2000年8日；78(4)：447-51)和细胞生长(Prog.Nucleic Acid Res.Mol.Biol.，2000；65：101-27)中有牵连，因此可以在肿瘤转移、免疫应答和组织修复以及其它疾病状态中有重要意义。

SAPK′s(也称为″jun N-末端激酶″或″JNK′s″)是代表导致c-jun转录因子活化和受c-jun调节的基因表达的信号转导途径中倒数第二步的蛋白激酶家族。确切而言，c-jun参与基因的转录，该基因编码参与因遗传毒性受损的DNA的修复的蛋白质。抑制细胞中SAPK活性的物质防止DNA修复，使细胞对那些通过诱导DNA损伤发挥作用的癌症治疗模式敏感。

根据前述，本发明还提供了在需要这类治疗的受治疗者中预防或治疗上面所述的任意疾病或紊乱的方法，该方法包括对所述受治疗者给予治疗有效量的式I化合物或其可药用盐(见“给药和药物组合物”)。对于任何一种上述用途，所需剂量根据给药方式、所治疗的具体病症和预期效果而变化。

给药和药物组合物

一般而言，可以采用任何本领域众所周知的常用和可接受的给药方式(单独或与一种或多种治疗药组合)来施用治疗有效量的本发明化合物。治疗有效量可根据疾病的严重性、受治疗者的年龄和相关健康状况、所用化合物的效力和其它因素而有较大改变。一般而言，以约0.03至2.5mg/kg体重的日剂量全身施用可获得满意的结果。大型哺乳动物(例如人类)的指示日剂量范围为约0.5mg至约100mg，方便地以例如一天至多四次的分开剂量或以缓释的形式施用。适于口服给药的单位剂量形式包含约1mg至50mg活性成分。

本发明的化合物可以作为药物组合物通过任何常规的途径来给药，具体而言，经肠内给药，例如口服(如以片剂或胶囊形式)；或胃肠道外给药，例如以注射用溶液或混悬液的形式；局部给药，例如以洗液、凝胶、软膏或乳膏剂的形式，或以经鼻施用或栓剂的形式。包含游离形式或可药用盐形式的本发明化合物与至少一种可药用载体或稀释剂的药物组合物可用常规的方式通过混合、制粒或包衣的方法进行制备。例如，口服组合物可以是片剂或明胶胶囊，包含活性成分与a)稀释剂，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和/或甘氨酸；b)润滑剂，例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁或钙和/或聚乙二醇；对于片剂还包含c)粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果期望的话，还包含d)崩解剂，例如淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐或泡腾混合物；和/或e)吸收剂、着色剂、矫味剂和甜味剂。注射用组合物可以是水性等张溶液或混悬液，栓剂可以由脂肪乳剂或混悬剂来制备。该组合物可以是灭菌的和/或含有佐剂，例如防腐剂、稳定剂、润湿剂或乳化剂、溶解促进剂、调节渗透压的盐和/或缓冲剂。此外，它们还可含有其它有治疗价值的物质。适于透皮应用的制剂包含有效量的本发明化合物和载体。载体包含可吸收的药理学可接受的溶剂以帮助穿过宿主皮肤。例如，透皮装置是包含背衬膜、储库和确保装置在皮肤上的手段的绷带剂形式，其中储库含有化合物，任选含有载体，任选有控速屏障以在延长时间内向宿主皮肤以控制可预定的速率传送化合物。还可以使用基质透皮制剂。适于局部应用、例如用于皮肤和眼的制剂优选是本领域众所周知的水性溶液、软膏、乳膏剂或凝胶。这些制剂可含有助溶剂、稳定剂、张力增强剂、缓冲剂和防腐剂。

本发明的化合物可以以治疗有效量与一种或多种治疗剂组合(药物组合物)施用。例如，与其它免疫调节或抗炎物质组合可产生协同作用，例如当与以下药物组合时可产生协同作用：环孢霉素、雷帕霉素或子囊霉素，或其免疫抑制类似物，例如环孢素A(CsA)、环孢素G、FK-506、雷帕霉素或相当的化合物、皮质类固醇、环磷酰胺、咪唑嘌呤、甲氨蝶呤、布喹那、来氟米特、咪唑立宾、麦考酚酸、麦考酚酸吗乙酯、15-脱氧精胍菌素，免疫抑制抗体、尤其是白细胞受体的单克隆抗体，例如MHC、CD2、CD3、CD4、CD7、CD25、CD28、B7、CD45、CD58或它们的配体，或其它免疫调节化合物，例如CTLA41g。当本发明的化合物与其它疗法组合施用时，共同给药的化合物的剂量当然将根据所共用药物的类型、所用具体药物以及所治疗病症等而变化。

本发明还提供了药物组合，例如药盒，包含a)第一种药物，它是如本文所公开的游离形式或可药用盐形式的本发明化合物，和b)至少一种共用药物。该药盒可以包含其施用说明。

如本文所用的术语“共同施用”或“组合施用”等意欲囊括对单独患者施用所选择的治疗药物，并且意欲包括其中药物不一定以同一施用途径或在同一时间施用的治疗方案。

如本文所用的术语“药物组合”指将多于一种活性成分混合或合并所得的产品，包括活性成分的固定和非固定组合。术语“固定组合”指活性成分，例如式I化合物和共用药物，以单一实体或剂型同时施用于患者。术语“非固定组合”指活性成分，例如式I化合物和共用药物，以单独的实体同时、共同或无特定时间限制地依次施用于患者，其中这种施用为患者体内提供了两种化合物的治疗有效水平。后者还用于组合疗法，例如给予3种或3种以上的活性成分。

制备本发明化合物的方法

本发明还包括本发明化合物的制备方法。在所述反应中，有必要保护在终产物中期望存在的反应活性官能团，例如羟基、氨基、亚氨基、硫代或羧基，从而避免它们不被期望地参与反应。常规的保护基团可以按照标准惯例来使用，例如参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts的“有机化学中的保护基”(Protective Groups in Organic Chemistry，John Wiley and Sons，1991)。

式I化合物可以通过如下反应流程I来制备：

                       反应流程1

其中Y、R₁、R₂、R₃、R₄、R₅和R₆如发明概述中式I所定义。式I化合物可以如下制备：在适宜的偶联试剂(例如HATU等)和适宜的溶剂(例如THF、DMF等)的存在下，使式2化合物与式3化合物反应。反应在约室温至约80℃的温度范围内进行，历时约20小时至完全。

式I化合物可以如下反应流程2来制备：

                       反应流程2

其中Y、R₁、R₂、R₃、R₄、R₅和R₆如发明概述中式I所定义。式I化合物可以如下制备：通过三种方法，使式4化合物与式5化合物反应。就杂芳基胺或芳基胺而言，反应在适宜的催化剂(例如Pd(II)盐等)和适宜的溶剂(例如1，4-二烷等)的存在下、在约80至约150℃的温度范围内，历时约20小时至完全。烷基胺置换的反应条件包括在适宜的溶剂(例如DMSO、DMF等)中加热式4化合物与5-10当量的胺。就式4与芳基胺的缩合而言，最好在酸(例如TsOH、HOAc、HCl等)的存在下、在适宜的溶剂(例如DMSO、DMF、醇等)中进行。

式I化合物的详细合成实例可以参见下文实施例。

制造本发明化合物的其它方法

本发明化合物的可药用酸加成盐可以通过使化合物的游离碱形式与可药用的无机或有机酸反应来制备。或者，本发明化合物的可药用碱加成盐可以通过使化合物的游离酸形式与可药用的无机或有机碱反应来制备。

或者，本发明化合物的盐形式可以使用起始原料或中间体的盐来制备。

本发明化合物的游离酸或游离碱形式可以分别由相应的碱加成盐或酸加成盐来制备。例如酸加成盐形式的本发明化合物可以通过用适宜的碱(如氢氧化铵溶液、氢氧化钠等)处理转化成相应的游离碱。碱加成盐形式的本发明化合物可以通过用适宜的酸(如盐酸等)处理转化成相应的游离酸。

未氧化形式的本发明化合物可以由本发明化合物的N-氧化物在0℃至80℃下在适宜惰性有机溶剂(如乙腈、乙醇、二烷水溶液等)中通过用还原剂(如硫、二氧化硫、三苯膦、硼氢化锂、硼氢化钠、三氯化磷、三溴化磷等)处理来制备。

本发明化合物的前药衍生物可以通过本领域普通技术人员已知的方法来制备(如，进一步的细节参见Saulnier等人，(1994)，Bioorganic andMedicinal Chemistry Letters，第4卷，第1985页)。例如，适当的前药可以通过使非衍生化的本发明化合物与适宜的氨甲酰化剂(如1，1-酰氧基烷基carbanochloridate、对硝基苯基碳酸酯等)反应来制备。

本发明化合物的受保护衍生物可以通过本领域普通技术人员已知的方法来制备。可用于建立保护基以及除去它们的技术的详细描述可参见T.W.Greene的“Protecting Groups in Organic Chemistry”(第三版，John Wileyand Sons，Inc.，1999)。

在本发明的方法中可以方便地制备或形成本发明化合物的溶剂化物(如水合物)。本发明化合物的水合物可通过采用有机溶剂如二氧芑、四氢呋喃和甲醇在水/有机溶剂混合物中重结晶来方便地制备。

还可如下制备本发明化合物的单一立体异构体：使化合物的外消旋混合物与旋光活性的拆分试剂反应，形成一对非对映异构化合物，分离该非对映异构体并回收旋光纯的对映异构体。当对映异构体的拆分采用本发明化合物的共价非对映异构衍生物进行时，优选可解离的复合物(如非对映异构的盐结晶)。非对映异构体具有不同的物理性质(如熔点、沸点、溶解性、反应活性等)，可以利用这些不同点来容易地加以分离。非对映异构体可以通过色谱法来分离，或优选通过基于溶解性不同的分离/拆分技术来分离。然后通过任何不会导致外消旋化的实用方法回收旋光纯的对映异构体和拆分试剂。可用于从化合物的外消旋混合物中拆分其立体异构体的技术在Jean Jacques、Andre Collet和Samuel H.Wilen的“对映异构体、外消旋物和拆分”(“Enantiomers，Racemates and Resolutions”，John Wiley andSons，Inc.，1981)中有更详细的描述。

总之，式I化合物可以通过包括以下步骤的方法来制备：

(a)反应流程1和2的方法；以及

(b)任选将本发明的化合物转化为可药用盐；

(c)任选将本发明化合物的盐形式转化为非盐形式；

(d)任选将本发明化合物的非氧化形式转化为可药用的N-氧化物；

(e)任选将本发明化合物的N-氧化物形式转化为其非氧化形式。

(f)任选从异构体混合物中拆分出本发明化合物的单一异构体；

(g)任选将非衍生化的本发明化合物转化为可药用的前药衍生物；和

(h)任选将本发明化合物的前药衍生物转化为其非衍生化形式。

关于起始原料的生产没有具体描述，这些化合物是已知的，或者可类似于本领域公知的方法或在下文实施例中公开的方法来制备。

本领域技术人员可以理解：上述转化仅仅是本发明化合物的制备方法的代表性方法，也可类似地使用其它熟知的方法。

实施例

本发明还通过下列阐述本发明的式I化合物的制备的实施例进一步被例证，但不局限于此。

                            实施例1

N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-吗啉

                   -4-基-5-三氟甲基-苯甲酰胺

2-氯-4-(甲基-氨基)-5-硝基嘧啶

将2，4-二氯-5-硝基嘧啶(7.26g，37.4mmol)的THF(100mL)溶液冷却至-78℃。滴加甲胺溶液(8M甲醇溶液，9.35mL，74.8mmol)。使混合物温热至室温，浓缩。使残余物在乙酸乙酯与水之间分配。分离各层，水层用乙酸乙酯萃取。合并有机萃取液，用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，得到标题产物(7.0g)(注：产物含有5％区域异构体4-氯-2-(甲基氨基)-5-硝基嘧啶)。残余物未经进一步纯化用于下一步。

2，4-(二甲氨基)-5-硝基嘧啶

向2-氯-4-(甲基氨基)-5-硝基嘧啶(0.644g，3.42mmol，从上述工艺合成)的乙醇(20mL)溶液中加入2M甲胺的THF(10mL)溶液。于室温搅拌3小时后，真空除去溶剂。将固体用水洗涤，干燥，得到标题化合物(620mg，99％)。

5-氨基-2，4-(二甲氨基)-嘧啶

2，4-(二甲氨基)-5-硝基嘧啶经披钯炭(Pd/C)在1atm H₂下氢化后，制备标题化合物的HCl盐形式，未经任何进一步纯化用于下一反应。

N-乙酰基-3-溴-4-甲基苯胺

在0℃下，向3-溴-4-甲基苯胺(1.27g，6.82mmol)的DCM(20mL)溶液中滴加乙酸酐(0.676mL，7.16mmol)。30分钟后，使混合物在DCM与饱和碳酸钠溶液之间分配。分离各层，水层用DCM萃取。合并有机萃取液，用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，得到标题化合物(1.55g，99％)。残余物未经进一步纯化用于下一步。

2-(5-乙酰基氨基-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯

在-78℃下，向N-乙酰基-3-溴-4-甲基苯胺(1.43g，6.27mmol)的THF(50mL)溶液中滴加2M BuLi的戊烷溶液(7.83mL，15.66mmol)。另外1小时后，加入草酸二乙酯(4.26mL，31.3mmol)。在-78℃下搅拌4小时后，用饱和NH₄Cl溶液淬灭反应混合物。使混合物在乙酸乙酯与水之间分配。分离各层，水层用乙酸乙酯萃取。合并有机萃取液，用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱法纯化(硅胶，用乙酸乙酯∶己烷1/1至2/1洗脱)，得到标题化合物(0.82g，52％)。

6-(5-氨基-2-甲基苯基)-8-甲基-2-甲基氨基-8H-蝶啶-7-酮

在密封的试管中，将2-(5-乙酰基氨基-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(223mg，0.85mol)、5-氨基-2，4-(二甲氨基)-嘧啶(211mg，HCl盐)在乙醇(20mL)中的混合物在100℃下加热。加热1天后，加入5N HCl的异丙醇(5mL)溶液，将混合物在回流下加热6小时，然后真空除去溶剂。然后，用饱和碳酸钠溶液碱化混合物。过滤固体，干燥，得到标题化合物，为绿-黄色粉末120mg。用EtOAc萃取滤液。进一步经柱色谱法纯化(硅胶，用乙酸乙酯∶己烷1∶1至乙酸乙酯洗脱)，得到另一部分标题化合物80mg。

向6-(5-氨基-2-甲基苯基)-8-甲基-2-甲基氨基-8H-蝶啶-7-酮(19.8mg，0.067mmol)、3-(4-吗啉-4-基)-5-三氟甲基苯甲酸(22mg，0.08mmol)与DIEA(46μL，0.26mmol)的DMF(3mL)溶液中加入HATU(30mg，0.08mmol)。于室温搅拌1小时后，真空除去溶剂。将残余物溶于DMSO(1mL)。所得溶液经反相LC-MS纯化，得到标题化合物；¹H NMR 400MHz(DMSO-d₆)δ10.37(s，1H)，8.76(s，0.3H)，8.68(s，0.7H)，8.04(s，0.7H)，7.94(s，0.3H)，7.77(dd，1H，J＝8.3，3.0Hz)，7.75-7.73(m，2H)，7.67(s，1H)，7.39(s，1H)，7.27(d，1H，J＝8.8Hz)，3.77(t，4H，J＝4.4Hz)，3.65(s，3H)，3.30(t，4H，J＝4.4Hz)，2.94(s，3H)，2.19(s，3H)；MS m/z 554.2(M+1).

                           实施例2

N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-(6-甲基-吡啶-3-基氨基)-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺

5-氨基-2-氯-4-(甲基氨基)-嘧啶

将2-氯-4-(甲基氨基)-5-硝基嘧啶(3.76g，20mmol，从上述工艺合成)、氯化锡(II)二水合物(18.0g，80mmol)在乙醇(200mL)中的混合物在80℃下加热。加热2小时后，将反应混合物冷却至室温，浓缩。向残余物加入乙酸乙酯和硅藻土，用饱和碳酸钠溶液碱化至pH 9-10。将混合物通过硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯洗涤。合并有机萃取液，用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进一步经柱色谱法纯化(硅胶，用乙酸乙酯洗脱)，得到标题化合物(1.72g，54％)。

N-[4-甲基-3-(2-氯-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺

在密封的试管中，将2-[5-(3-三氟甲基苯甲酰氨基)-2-甲基苯基]-2-氧代乙酸乙酯(840mg，2.21mmol)、5-氨基-2-氯-4-(甲基氨基)-嘧啶(702mg，4.42mmol)、乙酸(1mL)在异丙醇(15mL)中的混合物在110℃下加热。加热32小时后，真空除去溶剂。然后使残余物在乙酸乙酯与饱和碳酸氢钠溶液之间分配。分离各层，水层用乙酸乙酯萃取。合并有机萃取液，用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱法纯化(硅胶，用EtOAc/己烷梯度洗脱)，得到标题化合物(550mg，52％)。

向Smith小瓶(2-5mL)加入N-[4-甲基-3-(2-氯-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺(31mg，0.065mmol)、5-氨基-2-甲基吡啶(14mg，0.13mmol)、Pd(OAc)₂(1.5mg，0.0065mmol)、Xantphos(5.7mg，0.01mmol)、Cs₂CO₃(43mg，0.13mmol)和1，4-二烷(2mL)。用氩净化后，将小瓶密封，在Smith合成仪中在150℃下照射15分钟。滤出固体，用丙酮洗涤。合并滤液，浓缩，经柱色谱法纯化(硅胶，用乙酸乙酯洗脱)，得到标题化合物；¹H NMR 400MHz(DMSO-d₆)δ10.92(s，1H)，10.58(s，1H)，9.25(s，1H)，9.02(s，1H)，8.58(d，1H)，8.33(s，1H)，8.30(d，1H)，7.98(d，1H)，7.90(d，1H)，7.80(m，3H)，7.33(d，1H)，3.67(s，3H)，2.69(s，3H)，2.24(s，3H)；MS m/z 546.10(M+1).

                            实施例3

N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺

向Smith小瓶(2-5mL)加入N-[4-甲基-3-(2-氯-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺(15mg，0.032mmol)、2M甲胺的THF溶液(160μL，0.32mmol)和DMSO(0.5mL)。用氩净化后，将小瓶密封，在Smith合成仪中在100℃下照射45分钟。所得溶液经反相LC-MS纯化，得到标题化合物；¹H NMR 400MHz(DMSO-d₆)δ10.51(s，1H)，8.68(s，1H)，8.31(s，1H)，8.26(d，J＝8.0Hz，1H)，8.02(bs，1H)，7.96(d，J＝7.2Hz，1H)，7.80-7.76(m，3H)，7.27(d，J＝8.2Hz，1H)，3.56(s，3H)，2.94(s，3H)，2.19(s，3H)；MS m/z 469.3(M+1).

                           实施例4

N-[4-甲基-3-[8-甲基-2-[4-(吗啉-4-基)苯基氨基]-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基]-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺

向Smith小瓶(2-5mL)加入N-[4-甲基-3-(2-氯-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺(12mg，0.025mmol)、4-吗啉-4-基-苯基胺(14mg，0.078mmol)、对-甲苯磺酸一水合物(5mg，0.026mmol)和DMSO(0.5mL)。用氩净化后，将小瓶密封，在Smith合成仪中在100℃下照射1.5小时。所得溶液经反相LC-MS纯化，得到标题化合物；¹H NMR 400MHz(DMSO-d₆)δ10.53(s，1H)，10.16(bs，1H)，8.83(s，1H)，8.32(s，1H)，8.27(d，J＝7.6Hz，1H)，7.96(d，J＝8.0Hz，1H)，7.84-7.81(m，1H)，7.81-7.75(m，2H)，7.75-7.69(m，2H)，7.29(d，J＝8.0Hz，1H)，7.02(d，J＝8.8Hz，2H)，3.76(t，J＝4.8Hz，4H)，3.62(s，3H)，3.12(t，J＝4.8Hz，4H)，2.22(s，3H)；MS m/z 616.4(M+1).

重复上述实施例所述工艺，使用适当的原料，得到下列式I化合物，如表1所述。

                            表1

                          分析

对本发明的化合物进行分析，以测定它们与亲本32D细胞相比选择性抑制表达BCR-Abl的32D细胞(32D-p210)增殖的能力。测试选择性抑制这些BCR-Abl转化细胞增殖的化合物对表达野生型或突变形式的BCR-Abl的Ba/F3细胞的抗增殖能力。此外，对化合物进行分析以测定其抑制FGFR3(在酶与细胞测定法中)、FLT3、PDGFRβ、trkB、c-SRC、BMX、SGK、Tie2、Lck、JNK2α2、MKK4、c-RAF、MKK6、SAPK2α和SAPK2β激酶的能力。

细胞BCR-Abl依赖性增殖的抑制(高流通量法)

所用鼠细胞系是用BCR-Abl cDNA转化的32D造血祖细胞系(32D-p210)。这些细胞维持在补充有50μg/ml青霉素、50μg/ml链霉素和200mM L-谷氨酰胺的RPMI/10％胎牛血清(RPMI/FCS)中。未经转化的32D细胞添加15％WEHI条件培养基作为IL-3来源而类似地维持。

将50μl 32D或32D-p210细胞悬浮液铺在Greiner 384孔微板(黑色)中，密度为5000个细胞/孔。每孔加入50nl测试化合物(1mM，DMSO储备液)(包括作为阳性对照的STI571)。细胞在37℃、5％二氧化碳条件下孵育72小时。每孔加入10μl 60％ Alamar Blue溶液(Tek diagnostics)，细胞另外孵育24小时。使用Acquest^TM系统(Molecular Devices)对荧光强度(激发波长530nm，发射波长580nm)进行定量。

细胞BCR-Abl依赖性增殖的抑制

将32D-p210细胞铺在96孔TC板中，密度为15000个细胞/每孔。每孔加入50μl测试化合物的二倍连续稀释液(Cmax为40μM)(包括作为阳性对照的STI571)。细胞在37℃、5％二氧化碳条件下孵育48小时后，每孔加入15μl MTT(Promega)，细胞另外孵育5小时。采用分光光度法对570nm处的光密度进行定量，IC₅₀值，即50％抑制所需的化合物浓度，由剂量-反应曲线确定。

对细胞周期分布的作用

将32D或32D-p210细胞铺在6孔TC板中，每孔5ml培养基、2.5×10⁶个细胞，加入1或10μM测试化合物(包括作为对照的STI571)。继而将细胞在37℃、5％二氧化碳条件下孵育24或48小时。取2ml细胞混悬液用PBS洗涤，在70％乙醇中固定1小时，并用PBS/EDTA/RNase A处理30分钟。加入碘化丙啶(Cf＝10μg/ml)，使用FACScalibur^TM系统(BDBiosciences)以流式细胞法对荧光强度进行定量。本发明的测试化合物证明对32D-p210细胞有凋亡作用，但不诱导32D亲本细胞凋亡。

对细胞BCR-Abl自磷酸化的作用

BCR-Abl自磷酸化使用c-abl特异性捕获抗体和抗磷酸酪氨酸抗体通过捕获ELISA进行定量。将32D-p210细胞铺在96孔TC板中，每孔2×10⁵个细胞、50μl培养基。每孔加入50μl测试化合物的两倍连续稀释液(Cmax为10μM)(包括作为阳性对照的STI571)。细胞在37℃、5％二氧化碳条件下孵育90分钟。继而将细胞用150μl含有蛋白水解酶和磷酸酶抑制剂的溶解缓冲液(50mM Tris-HCl(pH7.4)，150mM NaCl，5mM EDTA，1mMEGTA和1％NP-40)在冰上处理1小时。将50μl细胞溶解物加入预先涂有抗abl特异性抗体并封闭的96孔光学板(optiplate)中。将板在4℃孵育4小时。用TBS-吐温20缓冲液洗涤后，加入50μl碱性磷酸酶结合的抗磷酸酪氨酸抗体，将板进一步在4℃孵育过夜。用TBS-吐温20缓冲液洗涤后，加入90μl发光底物，采用Acquest^TM系统(Molecular Devices)对发光强度进行定量。本发明的抑制表达BCR-Abl细胞的增殖的测试化合物以剂量依赖的方式抑制细胞BCR-Abl自磷酸化。

对表达BCR-Abl突变形式的细胞的增殖的作用

测试本发明化合物对表达野生型或突变形式(使得对STI571耐药或敏感性降低)的BCR-Abl(G250E、E225V、T315I、F317L、M351T)的Ba/F3细胞的抗增殖作用。如上所述(在不含IL3的培养基中)，在10、3.3、1.1和0.37μM浓度测试这些化合物对表达BCR-Abl突变体的细胞和对未转化细胞的抗增殖作用。从如上所述获得的剂量-反应曲线，确定了无毒性化合物对未转化细胞的IC₅₀值。

FGFR3(酶测定法)

利用纯化FGFR3(Upstate)进行激酶活性测定，最终体积为10μL，其中含有0.25μg/mL酶的激酶缓冲溶液(30mM Tris-HCl pH7.5，15mMMgCl₂，4.5mM MnCl₂，15μM Na₃VO₄和50μg/mL BSA)和底物(5μg/mL生物素-poly-EY(Glu，Tyr)(CIS-US，Inc.)和3μM ATP)。制备两种溶液：将5μL第一种溶液(含有在激酶缓冲液中的FGFR3酶)首先分配在384-格式ProxiPlate(Perkin-Elmer)中，然后加入50nL化合物的DMSO溶液，然后向每孔加入5μL第二种溶液，其中含有在激酶缓冲液中的底物(poly-EY)和ATP。将反应物于室温温育1小时，加入10μL HTRF检测混合物终止反应，所述混合物含有30mM Tris-HCl pH7.5、0.5M KF、50mM ETDA、0.2mg/mL BSA、15μg/mL链霉抗生物素-XL665(CIS-US，Inc.)和150ng/mL穴状化合物缀合的抗-磷酸酪氨酸抗体(CIS-US，Inc.)。于室温温育1小时以允许链霉抗生物素-生物素相互作用后，在Analyst GT(Molecular DevicesCorp.)上读取定时荧光信号。通过对每种化合物在12种浓度(从50μM按1∶3稀释至0.28nM)下的抑制百分比进行线性回归分析，计算得IC₅₀值。在本测定法中，本发明化合物的IC₅₀范围为10nM至2μM。

FGFR3(细胞测定法)

测试本发明化合物抑制转化Ba/F3-TEL-FGFR3细胞增殖的能力，这种增殖依赖于FGFR3细胞激酶活性。将Ba/F3-TEL-FGFR3在用作培养基的补充有10％胎牛血清的RPMI 1640中培养至800,000细胞/mL混悬液。将50μL细胞培养基混悬液分配在384-孔格式平板中，密度为5000细胞/孔。将本发明化合物溶解和稀释在二甲基亚砜(DMSO)中。在DMSO中进行十二点1∶3系列稀释，所得浓度梯度通常从10mM至0.05μM。向细胞加入50nL稀释化合物，在细胞培养温育器中温育48小时。向细胞加入最终浓度为10％的AlamarBlue(TREK Diagnostic Systems)，其可用于监测由增殖细胞所产生的还原性环境。在37℃细胞培养温育器中温育另外4小时后，在Analyst GT(Molecular Devices Corp.)上对来自被还原的AlamarBlue的荧光信号(激发波长530nm，发射波长580nm)进行定量。通过对每种化合物在12种浓度下的抑制百分比进行线性回归分析，计算得IC₅₀值。

FLT3和PDGFRβ(细胞测定法)

利用与上述FGFR3细胞活性所述相同的方法，除了分别使用Ba/F3-FLT3-ITD和Ba/F3-Tel-PDGFRβ代替Ba/F3-TEL-FGFR3，测定本发明化合物对FLT3和PDGFRβ细胞活性的作用。

Upstate KinaseProfiler^TM-放射酶滤膜结合分析

评价本发明的化合物抑制激酶名单中单个成员的能力。按这类方案以终浓度为10μM对化合物进行测试，一式两份。注意，激酶缓冲组合物和底物对于“Upstate KinaseProfiler^TM”名单中所包括的不同激酶是不同的。在冰上，将激酶缓冲液(2.5μl，10×，需要时含有MnCl₂)、活性激酶(0.001-0.01单位；2.5μL)、在激酶缓冲液中的特异性或聚(Glu4-Tyr)肽(5-500μM或0.1mg/ml)以及激酶缓冲液(50μM；5μl)在eppendorf管中混合。加入Mg/ATP混合液(10μL；67.5(或33.75)mM MgCl₂，450(或225)μMATP和1μCi/μl [γ-³²P]-ATP(3000Ci/mmol))，反应物在30℃孵育约10分钟。将反应混合物在2cm×2cm P81(磷酸纤维素，用于带正电荷的肽底物)或Whatman 1号(用于聚(Glu4-Tyr)肽底物)的正方形纸上点样。用于分析的正方形纸用0.75％磷酸洗涤4次，每次5分钟，并用丙酮冲洗一次(5分钟)。将正方形纸移入闪烁小瓶中，加入5ml闪烁合剂，用Beckman闪烁计数器对掺入肽底物的³²P(cpm)进行定量。计算每个反应的抑制百分率。

游离形式或可药用盐形式的式I化合物显示出有价值的药理性质，例如在本申请中所描述的体外试验所显示的那样。例如，对于野生型BCR-Abl和G250E、E255V、T315I、F317L与M351T BCR-Abl突变体而言，式I化合物优选的IC₅₀为1×10^-10M至1×10^-5M，优选低于500nM。在10μM的浓度下，对于Abl、Bcr-abl、Bmx、c-RAF、CSK、Fes、FGFR3、Flt3、GSK3β、IR、JNK1α1、JNK2α2、Lck、MKK4、MKK6、p70S6K、PDGFRα、Rsk1、SAPK2α、SAPK2β、Syk和TrkB激酶而言，式I化合物的抑制百分率优选大于50％，优选大于约70％。例如：

a).N-{4-甲基-3-[8-甲基-2-(6-甲基-吡啶-3-基氨基)-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(实施例2)对野生型Bcr-abl、G250E、E255V、T315I、F317L和M351T Bcr-abl而言的IC₅₀分别为＜0.5nM、23nM、13nM、55nM、＜0.5nM和＜0.5nM；

b).N-{4-甲基-3-[8-甲基-2-(6-甲基-吡啶-3-基氨基)-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(实施例2)在10μM的浓度下以括号内所示的百分比抑制下列激酶(例如100％表示完全抑制，0％表示没有抑制)：Bmx(100％)、c-RAF(100％)、CSK(98％)、Fes(100％)、FGFR3(98％)、Flt3(64％)、GSK3β(53％)、IR(60％)、JNK1α1(98％)、JNK2α2(99％)、Lck(98％)、MKK4(92％)、MKK6(97％)、p70S6K(98％)、PDGFRα(76％)、Rsk1(90％)、SAPK2α(95％)、SAPK2β(99％)、Syk(76％)和TrkB(96％)。

应当理解，本文所述的实施例和实施方案仅仅用于解释说明的目的，它们的各种变通或变化方法将提示给本领域技术人员，并且被包括在本申请的宗旨和范围以及所附权利要求的范围内。本文引用的所有出版物、专利和专利申请引入本文作为所有目的的参考。

Claims (10)

1.式I化合物及其可药用的盐、水合物、溶剂化物及异构体，

其中：

Y选自C、P(O)和S(O)；

R₁选自氢、C_1-6烷基、C_6-10芳基-C_0-4烷基、C_5-10杂芳基-C_0-4烷基、C_3-10环烷基-C_0-4烷基和C_3-10杂环烷基-C_0-4烷基；

R₂选自氢和C_1-6烷基；或者

R₁和R₂与R₁和R₂所连接的氮原子一起形成C_3-10杂环烷基或C_5-10杂芳基；

其中R₁的任意烷基可任选被一至三个独立地选自卤代基、C_1-6烷氧基和-XNR₇R₈的基团取代；其中X是价键或C_1-6亚烷基；R₇和R₈独立地选自氢和C_1-6烷基；

其中R₁或者R₁与R₂的组合的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基任选被一至三个选自卤代基、羟基、C_1-6烷基、-XOXNR₇R₈和-XR₁₀的基团取代；其中X是价键或C_1-6亚烷基；R₇和R₈独立地选自氢和C_1-6烷基；R₁₀选自C_6-10芳基、C_5-10杂芳基、C_3-10环烷基和C_3-10杂环烷基；其中R₁₀的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基任选被1至3个选自卤代基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代-C_1-6烷基、卤代-C_1-6烷氧基和-XNR₇R₈的基团取代；其中X是价键或C_1-6亚烷基；R₇和R₈独立地选自氢和C_1-6烷基；

R₃和R₄独立地选自氢和C_1-6烷基；

R₅选自C_1-6烷基、C_2-6链烯基、C_1-6烷氧基、卤代-C_1-4烷基和卤代-C_1-4烷氧基；

R₆选自C_6-10芳基、C_5-10杂芳基、C_3-10环烷基和C_3-10杂环烷基；其中R₆的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基任选被一至三个独立地选自卤代基、氨基、硝基、氰基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代-C_1-6烷基、卤代-C_1-6烷氧基、-XNR₇R₇、-XNR₇XNR₇R₇、-XNR₇C(O)R₇、-XC(O)OR₇、-XNR₇S(O)₂R₇、-XNR₇S(O)R₇、-XNR₇SR₇和-XR₁₁的基团取代；其中X和R₇如上所定义，R₁₁选自C_5-10杂芳基-C_0-4烷基和C_3-10杂环烷基-C_0-4烷基；其中R₁₁的任意杂芳基或杂环烷基任选被选自C_1-6烷基、卤代-C_1-6烷基和-C(O)OR₇的基团取代。

2.权利要求1的化合物，其中：

Y是C；

R₁选自氢、C_1-6烷基、C_6-10芳基-C_0-4烷基、C_5-10杂芳基-C_0-4烷基、C_3-10环烷基-C_0-4烷基和C_3-10杂环烷基-C_0-4烷基；

R₂选自氢和C_1-6烷基；或者

R₁和R₂与R₁和R₂所连接的氮原子一起形成C_3-10杂环烷基；

其中R₁的任意烷基可任选被一至三个独立地选自C_1-6烷氧基和-XNR₇R₈的基团取代；其中X是价键或C_1-6亚烷基；R₇和R₈独立地选自氢和C_1-6烷基；

其中R₁或者R₁与R₂的组合的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基任选被一至三个选自羟基、C_1-6烷基、-XOXNR₇R₈和-XR₁₀的基团取代；其中X是价键或C_1-6亚烷基；R₇和R₈独立地选自氢和C_1-6烷基；R₁₀选自C_6-10芳基和C_3-10杂环烷基；其中R₁₀的任意芳基或杂环烷基任选被1至3个选自卤代基、C_1-6烷基和-XNR₇R₈的基团取代；其中X是价键或C_1-6亚烷基；R₇和R₈独立地选自氢和C_1-6烷基；

R₃、R₄和R₅独立地选自氢和C_1-6烷基；

R₆是C_6-10芳基，任选被1至3个独立地选自卤代-C_1-6烷基和-XR₁₁的基团取代；其中X如上所定义，R₁₁选自C_5-10杂芳基-C_0-4烷基和C_3-10杂环烷基-C_0-4烷基；其中R₁₁的任意杂芳基或杂环烷基任选被C_1-6烷基取代。

3.权利要求2的化合物，其中：R₁选自氢、甲基、乙基、6-甲基-吡啶-3-基、3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基、吡啶-3-基、3-甲基-异噻唑-5-基、甲氧基-乙基、异丙基、甲基-苯基、吗啉代基-乙基、环丙基、二乙基-氨基-乙基、吡咯烷基-乙基、吡啶基-甲基、4-羟基-环己基、苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基、4-吗啉代基-苯基、3-二甲氨基-苯基、4-(2-吗啉-4-基-乙基)-苯基和二乙基-氨基-乙氧基；R₂选自氢、甲基和乙基；或者R₁和R₂与R₁和R₂所连接的氮原子一起形成4-乙基-哌嗪基或4-(3-氨基-苯基)-哌嗪-1-基。

4.权利要求3的化合物，其中R₃是甲基，R₄是甲基，R₅是氢。

5.权利要求4的化合物，其中R₆是苯基，任选被1至2个选自三氟甲基、吗啉代基、甲基-咪唑基、甲基-哌嗪基-甲基、乙基-哌嗪基和甲基-哌嗪基的基团取代。

6.权利要求5的化合物，选自：N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-吗啉-4-基-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-(6-甲基-吡啶-3-基氨基)-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-[8-甲基-2-[4-(吗啉-4-基)苯基氨基]-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基]-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-二甲氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-(3-{2-[(2-甲氧基-乙基)-甲基-氨基]-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基}-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-异丙基氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-(8-甲基-7-氧代-2-对甲苯基氨基-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{4-甲基-3-[8-甲基-2-(2-吗啉-4-基-乙基氨基)-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(4-乙基-哌嗪-1-基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-环丙基氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{4-甲基-3-[8-甲基-7-氧代-2-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨基)-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-(4-甲基-3-{8-甲基-7-氧代-2-[(吡啶-4-基甲基)-氨基]-7，8-二氢-蝶啶-6-基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-二乙基氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(4-羟基-环己基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-(3-{2-[4-(3-氨基-苯基)-哌嗪-1-基]-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基}-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(3-二甲氨基-苯基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-(4-甲基-3-{8-甲基-2-[4-(2-吗啉-4-基-乙基)-苯基氨基]-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-(3-{2-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯基氨基]-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基}-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；3-(4-甲基-咪唑-1-基)-N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-4-吗啉-4-基-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{4-甲基-3-[2-甲基氨基-8-(2-吗啉-4-基-乙基)-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-(4-甲基-3-{8-甲基-7-氧代-2-[3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基氨基]-7，8-二氢-蝶啶-6-基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{4-甲基-3-[8-甲基-7-氧代-2-(吡啶-3-基氨基)-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{4-甲基-3-[8-甲基-2-(3-甲基-异噻唑-5-基氨基)-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(2，5-二甲基-2H-吡唑-3-基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；3-(4-乙基-哌嗪-1-基)-N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺；4-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-N-[4-甲基-3-(8-甲基-2-甲基氨基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(2，6-二甲基-吡啶-3-基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{4-甲基-3-[8-甲基-2-(2-甲基-吡啶-3-基氨基)-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-{3-[2-(4，6-二甲基-吡啶-3-基氨基)-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-4-吗啉-4-基-3-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-(4-甲基-咪唑-1-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-吗啉-4-基-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-(4-乙基-哌嗪-1-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺；N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺；和N-[3-(2-氨基-8-甲基-7-氧代-7，8-二氢-蝶啶-6-基)-4-甲基-苯基]-4-(4-乙基-哌嗪-1-基甲基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺。

7.药物组合物，包含治疗有效量的权利要求1的化合物和可药用的赋形剂。

8.在动物中治疗其中抑制激酶活性可预防、抑制或改善该疾病的病理学和/或症候学的疾病的方法，该方法包括给予所述动物治疗有效量的权利要求1的化合物。

9.权利要求8的方法，其中的激酶选自Abl、Bcr-abl、Bmx、c-RAF、CSK、Fes、FGFR3、Flt3、GSK3β、IR、JNK1α1、JNK2α2、Lck、MKK4、MKK6、p70S6K、PDGFRα、Rsk1、SAPK2α、SAPK2β、Syk和TrkB。

10.权利要求1的化合物在制备药物中的用途，所述的药物用于在动物中治疗其中激酶Abl、Bcr-abl、Bmx、c-RAF、CSK、Fes、FGFR3、Flt3、GSK3β、IR、JNK1α1、JNK2α2、Lck、MKK4、MKK6、p70S6K、PDGFRα、Rsk1、SAPK2α、SAPK2β、Syk和TrkB的活性促成该疾病的病理学和/或症候学的疾病。