CN100558236C - 白前提取物及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种白前提取物及其制备方法。本发明的白前提取物是按照下述方法制备的：用酸乙醇(其中盐酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L)浸提白前，得到的浸提液用氯仿进行萃取，收集氯仿层，得到白前提取物。本发明方法制备的白前提取物对鳞翅目害虫具有较高的非选择性拒食活性。利用本发明的白前提取物制备的杀虫剂具有绿色环保、低毒无害等优点，符合可持续发展的目标。为充分利用我国现有的药源植物资源开发出一种或多种植物性杀虫或抗菌剂提供切实可行的关键技术，为扩大我国植物性杀虫或抗菌剂的应用范围，提高植物性杀虫或抗菌剂的杀灭效果提供新的技术支持。
Description
技术领域
本发明涉及自前提取物及其制备方法与应用。
背景技术
植物性杀虫、杀菌和除草剂的研究和利用，一直受到世界各国的重视。目前，植物性杀虫剂的研究相对较多，比较成功的有除虫菊素、印楝素等。人工种植的印楝树已经遍及世界各地，印楝素类杀虫剂的产值已经超过数亿美元，印楝树被认为是解决全球化学农药污染的希望之树。另外，除虫菊等药源植物也已经在发达国家的有机生产中广泛应用，其人工种植技术、活性成分提取技术等均在深入研究之中。目前，各国科学家均在寻找有效的植物资源，以期开发出更高效的植物源杀虫杀菌除草剂。
白前为萝摩科多年生草本植物，约200种，分布于非洲等地区，我国有50余种，包括老瓜头Cynanchum komarovii Al.Iljinski、柳叶白前Cynanchumstauntonii(Decne.)Schltr.ex Levl.和芫花叶白前C.glaucescens(Decne.)Hand.-Mazz.等。白前用作中药，可降气清痰止咳。其植物形态如下：直立半灌木，高30～50cm；茎圆柱形，稍有细棱；叶对生，长椭圆形，长3～5cm，宽4～14mm，基部楔形，尖端渐尖，背面叶脉稍隆起；聚伞花序腋生，有花3～8；花萼5深裂；花冠紫红色，辐射状，内面被长柔毛，裂片狭三角形；副花冠裂片椭圆形，5深裂；雄蕊5，与雌蕊合生成蕊柱，花药2室；柱头微凸，包于花药的薄膜内；骨突果单生。
发明内容
本发明的目的是提供一种白前提取物及其制备方法。
本发明所提供的白前提取物按照下述方法制备：用酸乙醇浸提白前，得到的浸提液用氯仿进行萃取，收集氯仿层，得到白前提取物；
所述酸乙醇是由无机酸和乙醇组成的溶液；
所述无机酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L；
所述无机酸具体可为盐酸或硫酸。
所述浸提中，所述白前和酸乙醇的配比为1g白前∶5-20ml酸乙醇，优选为1g白前∶5-8ml酸乙醇或1g白前∶15-20ml酸乙醇，尤其优选为1g白前∶15ml酸乙醇；
上述方法中，所述浸提时间为12-96小时，优选为48-96小时，尤其优选为72小时；
上述方法中，所述浸提次数为1-5次，优选为4次。
上述方法中，为了提高提取效果，所述白前在浸提前最好进行粉碎，得到颗粒的粒径为6-40目，优选为16目。
上述方法中，所述白前和酸乙醇的配比为1g白前∶15ml酸乙醇，所述浸提时间为72小时，所述浸提次数为4次，所述白前颗粒的粒径为16目。
上述方法中，所述白前可为植株的地上部分或地下部分，还可为整个植株；所述白前可为老瓜头Cynanchum komarovii Al.Iljinski.。
上述方法中的浸提温度可为25-35℃，萃取温度可为25-35℃。
所述方法中还包括纯化的步骤。
所述纯化步骤为重复如下方法1-2次：将所述白前提取物溶于0.5-0.6mol/L盐酸水溶液中，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，除去氯仿。
实验证明，本发明方法制备的白前粗提取物0.25mg/ml对小菜蛾3龄幼虫的非选择性拒食率为98.27％，对斜纹夜蛾的非选择性拒食率为95.88％。
本发明的另一个目的是提供一种杀虫剂。
本发明所提供的杀虫剂，它的活性成分为上述白前提取物。
用本发明方法制备的白前提取物对鳞翅目害虫，如斜纹夜蛾有很好的杀虫效果。
本发明根据白前属植物的生物学特性，从植株不同部位、材料粒径、浸提溶剂、浸提时间、浸提次数、分离技术等工艺条件进行了深入研究，摸索出其生物碱提取制备的工艺。本发明制备的白前提取物对鳞翅目害虫具有较高的非选择性拒食活性。利用本发明的白前提取物制备的杀虫剂具有绿色环保、低毒无害等优点，符合可持续发展的目标。本发明为充分利用我国现有的药源植物资源开发出一种或多种植物性杀虫或抗菌剂提供切实可行的关键技术，为扩大我国植物性杀虫或抗菌剂的应用范围，提高植物性杀虫或抗菌剂的杀灭效果提供新的技术支持，为此类中草药植物的综合开发利用提供新的技术手段。
附图说明
图1为材料粒径对白前精制提取物的影响
图2为浸提物固液比对白前精制提取物的影响
图3为浸提时间对白前精制提取物的影响
图4为浸提次数对白前精制提取物的影响
具体实施方式
实施例1、白前提取物的制备
该实施例中所用的白前为老瓜头(Cynanchum komarovii Al.Iljinski)，用成熟后采收的植株进行下述实验。其中，植株的地上部分包括茎、叶、果实，植株的地下部分由根组成。
一、选择浸提溶剂、分离方法、植株部位
1、浸提溶剂对白前精制提取物的影响
用2L工业酒精(乙醇的体积百分浓度96％)、2L酸乙醇(其中盐酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L)、2L酸水(0.15mol/L盐酸水溶液)、2L无水乙醇四种浸提溶剂，分别浸提0.2kg白前全株6目干粉72小时，浸提4次，将4次的浸提液混合，得到浸膏。将浸膏溶于0.5-0.6mol/L盐酸水溶液中，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，除去氯仿，得到的即为白前粗制提取物，实验设三次重复。
采用试管检测法测定浸膏中白前粗制提取物和精制提取物的含量。称取干净的三角瓶的重量，把含有白前提取物的氯仿萃取液置于瓶中旋干以除去氯仿，再称其总重，两者相减就是粗制提取物的重量。粗制提取物的产率＝(粗制提取物的质量/白前干粉的质量)×100％。将上述粗制提取物溶于0.5-0.6mol/L盐酸水溶液中，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，除去氯仿，得到的即为白前精制提取物。
用四种浸提溶剂分别对0.2kg白前全株6目干粉进行浸提，结果表明，用工业酒精提取，可得到70.74g浸膏，该70.74g浸膏经过进一步提取得到0.284g粗制提取物，粗制提取物提取率为0.142％，再经过精制可以得到0.078g精制提取物；用酸水提取，可得到95.31g浸膏，浸膏经过进一步提取得到0.330g粗制提取物，再经过精制可以得到0.116g精制提取物；用无水乙醇提取，可得到13.73g浸膏，浸膏经过进一步提取得到0.036g粗制提取物，再经过精制可以得到0.012g精制提取物；用酸乙醇提取，可得到105.75g浸膏，浸膏经过进一步提取得到0.303g粗制提取物，再经过精制可以得到0.110g精制提取物。表明用酸水做浸提溶剂时，虽然粗、精制提取物的得率比较高，但是浸泡和提取过程麻烦，所以不采用。用酸乙醇做浸提溶剂时，其浸膏、粗、精制提取物的得率都比较高，粗制提取物提取率为0.152％，精制提取物的提取率为0.055％，而且工艺流程简单，所以采用酸乙醇作为浸提溶剂较好。
按照下述方法测定不同浸提溶剂提取的白前精制提取物对斜纹夜蛾拒食率的影响。采用传统的叶碟法，将0.25mg用不同浸提溶剂提取的精制提取物用100ml无水乙醇溶解成0.0025mg/ml的溶液，然后选取洁净的甘蓝叶片，用打孔器打出叶碟，将叶碟在上述用乙醇溶解的精制提取物中浸1s后取出，放在洁净的台面上自然晾干，然后将叶碟置于垫有保湿滤纸的9cm培养皿中；另设只浸泡无水乙醇的甘蓝叶片为对照，每皿4片叶，放入三龄的斜纹夜蛾1头。24h、48h后用叶面积测定仪分别测定剩余叶面积，据此计算取食叶面积和拒食率。选择性拒食率＝(对照组取食叶面积-处理组取食叶面积)÷(处理组取食叶面积+对照组取食叶面积)。实验设3次重复。结果如表1所示，表1中的数据为三次重复的平均值±标准差。
表1不同浸提溶剂提取的白前提取物对斜纹夜蛾拒食率的影响
结果表明，用酸乙醇做浸提溶剂时，白前精制提取物对斜纹夜蛾拒食率的影响较大，所以采用酸乙醇作为浸提溶剂较好。
2、分离技术对白前精制提取物含量的影响
用2L酸乙醇(其中盐酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L)浸提0.2kg白前全株6目干粉72小时，浸提4次，将4次的浸提液混合。将浸膏均分为两份，一份在上述浸提液中加入1L的0.5-0.6mol/L盐酸水溶液溶解，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前粗制提取物。将上述粗制提取物溶于0.5-0.6mol/L盐酸水溶液中，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前精制提取物，结果得到0.137g精制提取物。另一份浸提液在高速离心机下以10000r/min的速度离心10分钟收集沉淀，将沉淀用氯仿溶解，过滤后旋干氯仿液，得到0.080g精制提取物。实验设三次重复。
结果表明，萃取得到0.137±0.0024g(平均值±标准差)精制提取物，离心得到0.080±0.0015g(平均值±标准差)精制提取物。表明用萃取和离心两种方法进行提取时，萃取方法得到的白前精制提取物含量远大于离心方法得到的白前精制提取物含量。在萃取和离心后，用生物活性成分显色剂(碘-碘化钾和碘化铋钾)检测剩余液中提取物的含量，结果表明，用萃取方法几乎完全提取了白前的提取物；而用离心方法对白前提取物的提取不完全，还有很多提取物残留。通过调整离心机转速和延长离心时间都不能使之完全提取。
按照步骤1的方法测定萃取和离心得到的精制提取物对斜纹夜蛾的拒食率。实验设三次重复。0.0025mg/ml的精制提取物对斜纹夜蛾的选择性拒食率的影响结果如表2所示。
表2不同分离技术得到的白前精制提取物对斜纹夜蛾拒食率的影响
| 提取方法 | 拒食率(％)X±SE |
| 萃取 | 89.70±8.439 |
| 离心 | 71.01±9.345 |
结果表明，用萃取方法得到的白前精制提取物对斜纹夜蛾拒食率的影响较大，所以采用萃取方法来分离白前精制提取物较好。
3、提取部位对斜纹夜蛾的拒食活性的影响
用0.5L酸乙醇(其中盐酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L)分别浸提0.05kg白前地上和地下部分6目干粉，浸提4次，每次72小时，将4次的浸提混合，在上述浸提液中加入1L的0.5-0.6mol/L盐酸水溶液，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节其pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前粗制提取物。将上述粗制提取物溶于0.5-0.6mol/L盐酸水溶液中，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前精制提取物，实验设三次重复。结果表明0.05kg白前地下部分6目干粉，经酸乙醇浸提后得到20.718g浸膏，进一步提取后得到0.280g粗制提取物，再精制得到0.125g精制提取物；0.05kg白前地上部分6目干粉，经同样方法浸提后得到19.263g浸膏，进一步提取后得到0.120g粗制提取物，再精制得到0.066g精制提取物。
按照步骤1的方法分别测定白前地上部分得到的浸膏和地下部分得到的浸膏中精制提取物对斜纹夜蛾拒食率的影响。实验设三次重复。0.0025mg/ml精制提取物对斜纹夜蛾的选择性拒食率的影响如表3所示。
表3不同部位材料对斜纹夜蛾拒食率的影响
结果表明，白前地下部分材料精制提取物含量高于地上部分，对斜纹夜蛾拒食率的影响较大，因此选择白前地下部分材料作为实验材料。
二、正交实验确定各因素对白前精制提取物含量的影响
1、白前干粉和浸提溶剂的固液比对精制提取物的影响
分别用0.25L、0.4L、0.5L、0.75L和1L的酸乙醇(其中盐酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L)浸提白前地下部分10目干粉0.05kg，浸提24小时，提取一次，在浸膏中加入1L的0.5-0.6mol/L盐酸水溶液，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前粗制提取物。将上述粗制提取物溶于0.5-0.6mol/L盐酸水溶液中，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前精制提取物，精制提取物的质量分别为0.070g、0.071g、0.054g、0.079g和0.067g。实验设三次重复。结果如图2所示，结果表明，不同固液比条件下，白前精制提取物含量有一定波动，采用1g白前∶15ml酸乙醇的配比进行浸提时，精制提取物含量最高，图2中的数值为三次重复的平均值。
2、浸提时间对精制提取物提取的影响
用0.5L酸乙醇(其中盐酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L)浸提白前地下部分10目干粉0.05kg，浸提时间设置为12h、24h、48h、72h和96h，提取一次，比较不同浸提时间下精制提取物的含量。在上述浸提液中加入1L的0.5-0.6mol/L盐酸水溶液，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前粗制提取物。将上述粗制提取物溶于0.5-0.6mol/L盐酸水溶液中，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前精制提取物，实验设三次重复。结果如图3所示，结果表明，浸提时间对精制提取物含量的影响较大，精制提取物含量随着浸提时间的延长而增大，浸提72小时，精制提取物含量最高。
3、浸提次数对精制提取物的影响
用0.5L酸乙醇(其中盐酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L)浸提白前地下部分10目干粉0.05kg，浸提24h，浸提1次、2次、3次、4次和5次，比较浸提次数不同时精制提取物的含量。在上述浸膏中加入1L的0.5-0.6mol/L盐酸水溶液，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前粗制提取物。将上述粗制提取物溶于0.5-0.6mol/L盐酸水溶液中，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前精制提取物，实验设三次重复。结果如图4所示，结果表明，随着浸提次数的增加，白前浸提液中精制提取物的含量有很大提高，精制提取物含量随浸提次数的增加而增加，但是在浸提第五次以后，得到的精制提取物反而有所下降，推测可能是浸提次数过多，时间过长而破坏了其中的成分，造成精制提取物含量降低。浸提4次时，浸提液中的精制提取物含量达到最高。
4、白前干粉粒径对精制提取物的影响
用0.5L酸乙醇(其中盐酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L)浸提白前地下部分6目、10目、16目、20目和40目干粉各0.05kg，浸提24h，浸提1次，比较白前干粉粒径不同时浸提液中精制提取物含量。在上述浸膏中加入1L的0.5-0.6mol/L盐酸水溶液，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前粗制提取物。将上述粗制提取物溶于0.5-0.6mol/L盐酸水溶液中，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前精制提取物，实验设三次重复。结果如图1所示，结果表明，白前干粉粒径对精制提取物含量的影响受上面几个因素制约，白前干粉粒径不同时，浸提液中精制提取物含量有一定波动，采用16目的白前干粉进行浸提时，浸提液中的精制提取物含量最高。
5、正交实验确定较佳的工艺条件
根据以上单因素试验结果，设计L9(34)正交表，对试验结果进行分析，确定最佳的提取条件。结果如表6、表7和表8所示。其中，A表示白前干粉粒径，B表示固液比，C表示浸提时间，D表示浸提次数。
表6多因素水平正交结果极差分析
表7因素变量表
注：水平列括号中的数据为水平的取值。
表8方差分析表
从以上表中的数据可以看出，因素A、B、C、D对精制提取物的含量均有显著影响，四因素对精制提取物影响的主次顺序为B＞A＞C＞D，最佳提取条件为B1A3C3D2。
实施例2、本发明制备的白前提取物对鳞翅目害虫非选择性拒食活性的影响
1、白前提取物的制备
1)用2L酸乙醇(其中盐酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L)浸提0.2kg白前地下部分16目的干粉72小时后，分别收集浸提液和残渣；该浸提液为第一次浸提液，体积1.5-1.6L。
2)将步骤1)收集的残渣再用2L酸乙醇(其中盐酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L)浸提72小时，分别收集浸提液和残渣；该浸提液为第二次浸提液，体积1.6-1.8L L。
3)将步骤2)收集的残渣再用2L酸乙醇(其中盐酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L)浸提72小时，分别收集浸提液和残渣；该浸提液为第三次浸提液，体积1.7-1.8L L。
4)将步骤3)收集的残渣再用2L酸乙醇(其中盐酸的摩尔浓度为12mol/L，乙醇的摩尔浓度为17mol/L)浸提72小时，分别收集浸提液和残渣；该浸提液为第四次浸提液，体积1.8-1.9L。
5)将上述四次浸提液混合后，旋干，加入2.5L的0.5-0.6mol/L盐酸水溶液中，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前粗制提取物。将上述粗制提取物溶于0.5-0.6mol/L盐酸水溶液中，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，旋干以除去氯仿，得到白前精制提取物，实验设三次重复。结果表明，0.2kg白前地下部分16目的干粉共得到0.382±0.0041g(平均值±标准差)粗制提取物。该粗制提取物经精制共得到0.187±0.0038g(平均值±标准差)精制提取物。
2、白前粗制提取物对斜纹夜蛾生物活性的影响
按照如下方法测定步骤1制备的白前粗制提取物对斜纹夜蛾的非选择性拒食活性的影响。采用传统的叶碟法，将步骤1提取的粗制提取物用无水乙醇溶解成如表9所示的不同浓度的溶液，然后选取洁净的甘蓝叶片，用打孔器打出叶碟，将叶碟在上述不同浓度的粗制提取物中浸1sec后取出，放在洁净的台面上自然晾干，然后将叶碟置于垫有保湿滤纸的9cm培养皿中；另设只浸泡无水乙醇的甘蓝叶片为对照。每皿4片叶，放入三龄和五龄的斜纹夜蛾各1头。每个处理重复10次。24h、48h后用叶面积测定仪分别测定剩余叶面积，据此计算取食叶面积和拒食率。非选择性拒食率＝(对照组取食叶面积-处理组取食叶面积)÷对照组取食叶面积。测定结果如表9所示。面积表示活性测定中吃掉的面积。
表9白前提取物对鳞翅目害虫的非选择性拒食活性的影响
表中数据为10次重复的平均值±SE；“拒食率％”列数据后标不同字母者，表示经LSD法于5％水平有显著差异，大写字母表示在1％水平有极限著差异。
结果表明，用步骤1制备的白前粗制提取物对斜纹夜蛾幼虫有较强的非选择性拒食活性，拒食活性随粗制提取物浓度的增加而增加，且对3龄幼虫的拒食活性强于5龄幼虫。浓度为0.5mg/ml的粗制提取物对斜纹夜蛾5龄幼虫的拒食率可以达到95％以上；对3龄幼虫，在浓度为0.25mg/ml时拒食率就在95％以上。浓度为0.05mg/ml时5龄的拒食率仅为42.71％，而3龄的拒食率已经达到79.40％。在低浓度下(0.01mg/ml)3龄和5龄的拒食率差不多，这个浓度对3龄和5龄幼虫的的拒食效果均不明显。
3、白前粗制提取物对小菜蛾生物活性的影响
按照如下方法测定步骤1制备的白前粗制提取物对小菜蛾生物活性的影响。
(1)选择性拒食活性测定
将新鲜平整均一的甘蓝叶片，用打孔器打成叶碟，放入不同浓度的粗制提取物乙醇稀释液中浸泡1s，待叶碟晾干后，放入直径为9cm的培养皿中(内垫滤纸保湿)，每皿摆入处理和对照(无水乙醇)叶片各4片，相对排列。每皿中放入小菜蛾3龄幼虫10头，每个浓度重复3次。24h后用方格纸测定剩下叶面积，计算取食叶面积和拒食率。测定结果如表10所示。
表10白前粗制提取物对小菜蛾的选择性拒食活性的影响
表中数据为3次重复的平均值±SE。
结果表明，用实施例1方法制备的白前提取物中粗制提取物对小菜蛾三龄幼虫有较强的拒食活性，选择性拒食活性随粗制提取物浓度的增加而增加。浓度为0.25mg/ml、0.1mg/ml、0.05mg/ml、0.025mg/ml、0.01mg/ml的粗制提取物，选择性拒食率分别为98.25％、94.81％、85.71％、63.51％、49.80％。
(2)非选择性拒食活性测定
将新鲜平整均一的甘蓝叶片，用打孔器打成叶碟，放入不同浓度的粗制提取物乙醇稀释液中浸泡1sec，待叶碟晾干后，放入直径为9cm的培养皿中(内垫滤纸保湿)，每皿摆入处理和对照(无水乙醇)叶片各4片，相对排列。每皿中放入小菜蛾3龄幼虫10头，每个浓度重复3次。24h后用方格纸测定剩下叶面积。计算取食叶面积和拒食率。测定结果如表11所示。
表11白前提粗制提取物对小菜蛾的非选择性拒食活性的影响
表中数据为3次重复的平均值±SE。
结果表明，用实施例1方法制备的白前粗制提取物对小菜蛾三龄幼虫有较强的拒食活性，且拒食活性随粗制提取物浓度的增加而增加。浓度为0.25mg/ml、0.1mg/ml、0.05mg/ml、0.025mg/ml、0.01mg/ml的粗制提取物，非选择性拒食率分别为98.27％、93.68％、90.04％、61.29％、56.79％。
Claims (14)
1、一种白前提取物的制备方法，是用酸乙醇浸提白前，得到的浸提液用氯仿进行萃取，收集氯仿层，得到白前提取物；
所述酸乙醇是由盐酸和乙醇组成的溶液；
所述盐酸的摩尔浓度为12mol/L，所述乙醇的摩尔浓度为17mol/L。
2、根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述白前和酸乙醇的配比为1g白前∶5-20ml酸乙醇；
所述浸提时间为12-96小时；
所述浸提次数为1-5次。
3、根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述白前和酸乙醇的配比为1g白前∶5-8ml酸乙醇或1g白前∶15-20ml酸乙醇；
所述浸提时间为48-96小时；
所述浸提次数为4次。
4、根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述白前和酸乙醇的配比为1g白前∶15ml酸乙醇；
所述浸提时间为72小时。
5、根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述白前在浸提前进行粉碎，得到的白前颗粒的粒径为6-40目。
6、根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述得到的白前颗粒的粒径为16目。
7、根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述方法中，所述白前和酸乙醇的配比为1g白前∶15ml酸乙醇，所述浸提时间为72小时，所述浸提次数为4次，所述白前颗粒的粒径为16目。
8、根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述白前为植株的地上部分、地下部分或整个植株；所述白前为老瓜头(Cynanchum komarovii Al.Iljinski.)。
9、根据权利要求1-8中任一所述的制备方法，其特征在于：所述方法中还包括纯化的步骤。
10、根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于：所述纯化步骤为重复如下方法1-2次：将所述白前提取物溶于0.5-0.6mol/L盐酸水溶液中，用氯仿萃取，收集水层，加氨水调节pH值为9-10，再以氯仿萃取，回收氯仿层，除去氯仿。
11、由权利要求1-10中任一所述方法得到的白前提取物。
12、一种杀虫剂，它的活性成分是权利要求11所述的白前提取物。
13、根据权利要求12所述的杀虫剂，其特征在于：所述杀虫剂的杀虫谱为鳞翅目昆虫。
14、根据权利要求13所述的杀虫剂，其特征在于：所述鳞翅目昆虫为斜纹夜蛾或小菜蛾。
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| 四川农业大学硕士学位论文. 蒋春先，1-57，四川农业大学. 2006 |
| 四川农业大学硕士学位论文. 蒋春先，1-57，四川农业大学. 2006 * |
| 大理白前化学成分研究. 刘悦等.中国中药杂志，第32卷第6期. 2007 |
| 大理白前化学成分研究. 刘悦等.中国中药杂志，第32卷第6期. 2007 * |
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