CN100429131C - 设有内部分隔的试剂盒组分容器 - Google Patents

设有内部分隔的试剂盒组分容器 Download PDF

Info

Publication number
CN100429131C
CN100429131C CNB031468438A CN03146843A CN100429131C CN 100429131 C CN100429131 C CN 100429131C CN B031468438 A CNB031468438 A CN B031468438A CN 03146843 A CN03146843 A CN 03146843A CN 100429131 C CN100429131 C CN 100429131C
Authority
CN
China
Prior art keywords
reagent
container
present
cell
pcr
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
CNB031468438A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1597462A (zh
Inventor
程钢
何蕴韶
周新宇
许擎
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Da'an Gene Co ltd
Original Assignee
Daan Gene Co Ltd Zhongshan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Daan Gene Co Ltd Zhongshan University filed Critical Daan Gene Co Ltd Zhongshan University
Priority to CNB031468438A priority Critical patent/CN100429131C/zh
Publication of CN1597462A publication Critical patent/CN1597462A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100429131C publication Critical patent/CN100429131C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Images

Landscapes

  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及设有容纳试剂盒组分的内部分隔的容器。更具体地说，本发明涉及构成聚合酶链反应试剂盒的具有至少两个分隔小室的容器，以及包括一个或多个所说的容器的试剂盒。

Description

设有内部分隔的试剂盒组分容器
所属领域
本发明涉及设有容纳试剂盒组分的内部分隔的容器。更具体地说，本发明涉及构成聚合酶链反应试剂盒的具有至少两个分隔小室的容器，以及包括一个或多个所说的容器的试剂盒。
背景技术
在医学和生物学的研究与实践中，特别在医学检验以及生物材料的分离、提取和纯化中，为了使用或操作以及运输或携带上的方便，常常要使用具有多种不同的包装形式的试剂盒。
一般说来，这些试剂盒都是将用于特定化合物或其组分的分离、提取或纯化，及其检测或定量分析的两种或两种以上试剂以不同组合方式包装在一起。这些试剂可包括直接或间接参与相关化学反应的核心试剂或辅助试剂。其中核心试剂可以是受体和/或配基、抗原和/或抗体、酶和/或底物、生物素和/或抗生物素蛋白(亲和素)、电子(离子)供体和/或接受体，特定靶核酸的探针，或者是某特定化合物的特异性溶解剂或沉淀剂等。辅助试剂则可以是上述基本试剂的溶解剂、稀释剂、缓冲剂、稳定剂或载体、或者是某特定化学反应产物的着色剂或其他显示剂等。
具体地说，在聚合酶链反应(PCR)试剂盒中，虽然上述核心试剂(例如Taq酶、核酸引物或探针)常常要与相关辅助试剂(例如PCR反应缓冲液、脱氧单核苷酸底物等)混合使用，但由于它们的化学性质所决定的，在试剂盒的储存期间必须将基本试剂和其相关辅助试剂(如溶解剂)分装在不同的容器内，而在使用中再临时将它们混合在一起并将所得到的混合物用于进一步的反应。
这样，无疑将增加试剂盒使用和操作上的麻烦，不利于试验的标准化，同时也增加了试剂盒的生产成本。因此，本领域期望提供一种能够以彼此分隔的方式预先装入两种或多种试剂(包括基本试剂和辅助试剂)，并且又在使用时能够很方便地将这些试剂混合在一起的所谓试剂盒组分容器。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种组成聚合酶链反应试剂盒的具有一个以上分隔小室的容器。
根据本发明的特别优选的实施方案，所说的容器具有两个分隔小室。
根据本发明的优选实施方案，其中所说的分隔小室内分别预装有不同但彼此相关的溶液。
根据本发明的一个优选实施方案，所说的容器是具有适当容积的小管或空心圆柱体。
根据本发明的一个优选实施方案，其中分隔小室之间的分隔是由高分子塑料材料或具有较低熔点的石蜡构成的。
本发明的另一个目的是提供一种由一个以上如上限定的容器组合在一起构成的聚合酶链反应试剂盒。
根据本发明的一个优选实施方案，所说的聚合酶链反应试剂盒包括传统的聚合酶链反应和改良的聚合酶链反应试剂盒。所说的改良的聚合酶链反应试剂盒包括但不只限于实时荧光定量聚合酶链反应试剂盒。
试剂盒的出现为医学临床检验和生物学实验室研究提供了极大的方便。然而，随着生物化学和分子生物学基础研究的不断深入，生物体内会有一些可作为生理生化指标的新的生物学活性物质和生物学作用机理被发现，这样，不仅许多新的临床检验和实验室研究方法被建立，而且这些方法所涉及的生化反应和试剂也越来越多。因此，在一些已有的和未来将出现的试剂盒中可能包括更多反应所需的试剂，从而可能进一步增加试剂分装、保存、取样和加样等操作步骤所到来的麻烦。其中一个典型例子就是基于PCR技术的试剂盒。
为了克服上述或其他有关缺陷，本设计人在长期从事PCR试剂盒的研究和生产实践的基础上，成功地生产并制备了一种设有至少一个分隔并可容纳一种以上相关PCR试剂的容器，以及包括一个以上所说的容器的PCR检测试剂盒。
本发明提供了本发明提供了一种设有至少两个能容纳试剂盒的特定组分的分隔小室的容器，以及包括一个或多个这样的容器的试剂盒。根据本实用新型，虽然所说的容器内可以设有两个以上的分隔小室，但从目前的制作技术和实际应用角度说，最好有两个这样的小室。
根据本发明的优选实施方案，其中所说的分隔小室内分别预装有不同但彼此相关的溶液。例如，在基于PCR技术的检测体系中，常常可能包括某种完成定性检测和/或定量分析所必需的第一核心试剂，以及作为基本试剂的缓冲液和/或底物等的辅助试剂。但由于它们彼此的化学性质所决定的，这两种试剂并不能混合预装(例如，如果预先混合可能导致基本试剂的失活或沉淀析出)，只有在使用时才能将两种试剂混合在一起。这种情况下，我们便可以按照本发明教导的原则和方法，在容纳检测试剂的容器内部设置两个分隔的小室，借以分别容纳所说的第一和第二基本试剂，或所说的基本试剂和辅助试剂。
所说的容器可以是使用透明或半透明的聚氯乙烯或聚苯乙烯等高分子聚合物材料制成的。在使用前的存储期间，容器通常是使用制作容器本身或小室间分隔的材料制成的盖或封闭层密封的。
根据容器的大小和形状的不同，所说的小室可以是平行并列的，或者也可是上下叠制的。因此，小室间的分隔可以是水平或垂直的。小室的长径一般为0.1-1.5cm，但优选的是0.3-0.8cm。每个小室的体积一般为0.1-1.5cm3，优选的是0.3-1.2cm3。
构成两小室之间的分隔的材料可以是硬质高分子塑料或者是具有相对较低熔点的石蜡。这些材料应是对容器内的两种试剂或它们的混合物或反应产物没有任何干扰、破坏或通透作用的惰性物质。因此，根据本发明的一个优选实施方案，所说的容器是具有适当容积的小管，并且其中分隔小室之间的分隔体是由具有较低熔点的惰性材料如石蜡构成的；根据本发明的另一个优选实施方案，所说的容器是具有适当容积的空心柱状体，并且其中分隔小室之间的分隔是由硬质高分子塑料构成的。
就本发明的第一种管状模式的容器而言，为了在同一容器内造成两个独立的分隔空间，并分别装入一对必须在使用当时混合的试剂之一，可以首先在管的下部加入辅助试剂，在其上面用液化石蜡铺层并待其凝固后，再加入核心试剂。
就本发明的第二种柱体模式的容器而言，为了容纳一对必须在使用当时混合的试剂，可将辅助试剂和核心试剂分别加入两个分隔室。
使用前，只需加入模板核酸，盖紧管盖并高速瞬时离心，即可使辅助溶液和核心试剂溶液混合，参与随后的PCR反应。因此，本发明的分隔容器作为试剂盒的一个重要组成部分。特别有利于减少容器的数目，简化操作步骤，减少环境污染，适合于试剂盒工业化大批量生产。
附图说明
图1举例显示本发明管状分隔容器的侧视图。
图2举例显示本发明管状分隔容器的俯视图。
图3举例显示本发明圆柱状分隔容器的侧视图。
图4举例显示本发明圆柱状分隔容器的俯视图。
具体实施方式
以下结合附图举例描述本发明容器的结构特征和使用方法。
(1)本发明容器的第一种结构是外观呈子弹头型的并带有光学管盖的0.2ml微量离心管(Ependoff管)(参见图1和图2)。如图1所示，管体5上口边缘有一与管体密切接合的管盖4，其中管体5高21.0mm，管盖高3.0mm，管体最大直径6.3mm。为了制作本发明的容器，首先用移液器缓慢加入包括缓冲液与底物的辅助试剂溶液层2(40μl)。接着在紧挨着液体的上方加入石蜡油层1(30μl)，最后在靠近石蜡油上方的管壁上加入包括Taq酶及DNA引物和探针的核心试剂溶液层3(3μl)。其中核心试剂溶液因体积很小加上液体表面张力作用而形成一滴易于识别的液珠。这样，小管内容物即形成了界限分明的三层：下层为辅助试剂溶液层2、中层为常温下固化的液体石蜡分隔层1，上层则是形成微小液滴的核心试剂溶液层3。如此得到的小管加上管盖4可直接使用或低温保存备用。图2是本发明分隔小管的俯视图，由图中可以看出，顶盖的中心部分7具有很好的透光性，所以很容易观察管内的液体分布和分层情况；管盖上的连接柄8则有利于管盖4与管体5之间的密切结合。使用时，向管内加入模板核酸(5μl)后高速离心，上层溶液和所加入的模板核酸即可穿过石蜡油层进入下层溶液并与之混合，从而在条件适宜情况下开始聚合酶联反应(PCR)。
(2)本发明容器的另一种结构是由聚氯乙稀塑料材料制成的包括基座1，带有中间分隔4的桶状液体容纳部分6，和帽7四部分(参见图3和图4)。其中塑料基座1，桶状液体容纳部分6，及其内的分隔板4是一个完整的塑料注塑件，帽7则可自由取下。基座1是直径6.0mm、高6.0mm的圆柱体，其上为外径4.0mm，内径3.0mm，高度3.5mm的桶状液体容纳部分6。桶状液体容纳部分6内有宽3.0mm，厚度1.0mm的分隔板4，距环上口3mm。分隔板4将桶状液体容纳部分分隔成第一和第二容室。其中第一容室2嵌入基座1.5mm，并容纳包括缓冲液与底物的辅助试剂溶液(16μl)。第二容室3嵌入基座4.0mm，并容纳包括Taq酶及DNA引物和探针的核心试剂溶液(2μl)。上层用石蜡油层5(16μl)封固。加入试剂溶液后盖好帽7，即构成本发明的有两个分隔室的戴帽容器。图4是分隔容器的俯视图，其中8显示盖7的顶部，9显示容器基座1的较大的外径，10显示便于取下管帽的防滑齿。使用时，首先将模板核酸(5μl)加入玻璃毛细管中，去掉帽并将基座翻转180度盖到毛细管上。然后高速离心，第一和第二容室的内容物即可穿过石蜡油进入玻璃毛细管中并与模板混合，然后在适宜的条件下开始聚合酶联反应(PCR)。

Claims (3)

1、一种组成聚合酶链反应试剂盒的具有两个分隔小室的容器，特征在于两小室之间由密封的固化石蜡分隔。
2、根据权利要求1的容器，其中所说的分隔小室内分别预装有不同但彼此相关的溶液。
3、由权利要求1的容器组合构成的聚合酶链反应试剂盒。
CNB031468438A 2003-09-17 2003-09-17 设有内部分隔的试剂盒组分容器 Expired - Lifetime CN100429131C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB031468438A CN100429131C (zh) 2003-09-17 2003-09-17 设有内部分隔的试剂盒组分容器

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB031468438A CN100429131C (zh) 2003-09-17 2003-09-17 设有内部分隔的试剂盒组分容器

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1597462A CN1597462A (zh) 2005-03-23
CN100429131C true CN100429131C (zh) 2008-10-29

Family

ID=34659689

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB031468438A Expired - Lifetime CN100429131C (zh) 2003-09-17 2003-09-17 设有内部分隔的试剂盒组分容器

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN100429131C (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101787347B (zh) * 2009-12-30 2012-12-26 华东医学生物技术研究所 一种通过温度控制反应进程的反应管
CN108641899A (zh) * 2018-05-24 2018-10-12 金陵科技学院 一种离心管的预分盖

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN87200838U (zh) * 1987-01-22 1988-10-05 董士元 单克隆纤维酶联试剂盒
CN1221797A (zh) * 1997-12-30 1999-07-07 曾真 多聚酶链反应检测试剂盒Taq酶固相载体单人份检测管
CN2367575Y (zh) * 1996-12-16 2000-03-08 蒋承浚 具有多个小室的饮料容器
CN1255545A (zh) * 1998-11-30 2000-06-07 上海晶莹生物技术有限公司 基因表达幽门螺杆菌细胞毒素相关基因a蛋白抗原制备工艺

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN87200838U (zh) * 1987-01-22 1988-10-05 董士元 单克隆纤维酶联试剂盒
CN2367575Y (zh) * 1996-12-16 2000-03-08 蒋承浚 具有多个小室的饮料容器
CN1221797A (zh) * 1997-12-30 1999-07-07 曾真 多聚酶链反应检测试剂盒Taq酶固相载体单人份检测管
CN1255545A (zh) * 1998-11-30 2000-06-07 上海晶莹生物技术有限公司 基因表达幽门螺杆菌细胞毒素相关基因a蛋白抗原制备工艺

Also Published As

Publication number Publication date
CN1597462A (zh) 2005-03-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5462881A (en) Temporary liquid storage cavities in a centrifuge tube
US6818435B2 (en) Microfluidics devices and methods for performing cell based assays
US7354774B2 (en) Self aliquoting sample storage plate
US9804185B2 (en) Application method for automatic micro droplet array screening system with picoliter scale precision
CN1095693C (zh) 存储和发放试剂用的药筒和方法
AU2002249430B2 (en) Reagent delivery system
EP0131934A2 (en) An assay cartridge
EP3148700B1 (en) Single column microplate system and carrier for analysis of biological samples
CN105917240B (zh) 微室板
EP2214027B1 (en) Analyzing method in liquid-feeding chip
CN103003450B (zh) 样本内装微腔板及分析用微腔板的制造方法、分析用微腔板及样本内装微腔板制造装置套件
CN102089664A (zh) 含有试剂的筒、包括该筒的微流控装置、制造该微流控装置的方法以及利用该微流控装置的生物化学分析方法
US20050271560A1 (en) Gas control in a reactor
WO1999052633A1 (en) Test cartridge with a single inlet port
US20020151078A1 (en) Microfluidics devices and methods for high throughput screening
KR20030035621A (ko) 핵산 또는 생물학적 물질을 분리하기 위한 키트의 제조방법과, 그 방법에 의해 제조된 키트와, 그 키트를사용하는 장치
US20160193607A1 (en) Transportable composite liquid cells
EP1015551A1 (en) New reaction vessel and methods for its use
CN100429131C (zh) 设有内部分隔的试剂盒组分容器
US20210170410A1 (en) Devices, systems, and methods for specimen preparation using capillary and centrifugal forces
US7219800B2 (en) Modular array arrangements
CN2864677Y (zh) 设有内部分隔的聚合酶链反应试剂盒组分容器
WO2014072053A1 (en) Microcuvette for biochemical assays
CN101603896B (zh) 分析系统及其分析方法、流路结构
EP1566217A2 (en) Chamber array arrangement

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CP01 Change in the name or title of a patent holder

Address after: 2710, room 80, Hua Lian business building, 510089 martyrs Road, Dongshan District, Guangdong, Guangzhou

Patentee after: Guangzhou Da'an gene Co.,Ltd.

Address before: 2710, room 80, Hua Lian business building, 510089 martyrs Road, Dongshan District, Guangdong, Guangzhou

Patentee before: DAAN GENE CO., LTD. OF SUN YAT-SEN University

CP01 Change in the name or title of a patent holder
DD01 Delivery of document by public notice

Addressee: Chen Jianping

Document name: Notification of conformity

DD01 Delivery of document by public notice
CX01 Expiry of patent term

Granted publication date: 20081029

CX01 Expiry of patent term