CN100360140C

CN100360140C - 小牛血清去蛋白胶囊及其制备方法

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Publication number: CN100360140C
Application number: CNB2005100830408A
Authority: CN
Inventors: 王洪新; 于洪儒
Original assignee: AOHONG PHARMACEUTICAL Co Ltd JINZHOU
Current assignee: AOHONG PHARMACEUTICAL Co Ltd JINZHOU
Priority date: 2005-07-12
Filing date: 2005-07-12
Publication date: 2008-01-09
Anticipated expiration: 2025-07-12
Also published as: CN1895274A

Abstract

本发明公开了小牛血去蛋白胶囊及其制备方法。本发明所提供的小牛血去蛋白胶囊，由胶囊内容物和胶囊壳组成；所述胶囊内容物由下述原料制成：小牛血去蛋白提取物30-50重量份，淀粉49-70重量份，抑菌剂0.1-1重量份；所述小牛血去蛋白提取物来源于固形物的质量百分含量为2%-7%的小牛血去蛋白提取液；所述胶囊壳为肠溶胶囊壳。本发明的小牛血去蛋白胶囊既弥补水针应用不方便的缺陷，又克服了口服片剂不稳定的不足，可用于治疗脑部血液循环和营养障碍性疾病(缺血性损害、颅脑外伤)所引起的神经功能缺损；可治疗末稍动脉、静脉循环障碍及其引起的动脉血管病，腿部溃疡；还可治疗皮肤烧伤、烫伤、糜烂，放射所致的皮肤、粘膜损伤；愈合伤口(创伤、褥疮)。

Description

小牛血清去蛋白胶囊及其制备方法

技术领域

本发明涉及小牛血去蛋白提取物的一种新剂型及其制备方法，特别涉及小牛血去蛋白胶囊及其制备方法。

背景技术

小牛血去蛋白类产品能促进细胞对葡萄糖和氧的摄取与利用。在低血氧以及能量需求增加等情况下，该产品可以促进能量代谢，增加供氧量。可治疗脑部血液循环和营养障碍性疾病(缺血性损害、颅脑外伤)所引起的神经功能缺损；可治疗末稍动脉、静脉循环障碍及其引起的动脉血管病，腿部溃疡；还可治疗皮肤烧伤、烫伤、糜烂，放射所致的皮肤、粘膜损伤；愈合伤口(创伤、褥疮)。

目前小牛血去蛋白类产品主要有水针、片剂、膏剂，没有胶囊，水针需要注射，使用不方便，膏剂只能作局部治疗，不能全身给药，片剂能口服，比较方便，但片剂的崩解速度和生物利用度远低于胶囊，并且肠溶片的稳定性也不如肠溶胶囊。

发明内容

本发明的目的是提供小牛血去蛋白提取物的一种新剂型，小牛血去蛋白胶囊。

本发明所提供的小牛血去蛋白胶囊，由胶囊内容物和胶囊壳组成；所述胶囊内容物由下述原料制成：小牛血去蛋白提取物(固形物)30-50重量份，淀粉49-70重量份，抑菌剂0.1-1重量份；所述小牛血去蛋白提取物来源于固形物的质量百分含量为2％-7％的小牛血去蛋白提取液；所述胶囊壳为肠溶胶囊壳。

小牛血去蛋白胶囊可为硬胶囊也可为软胶囊。

所述小牛血蛋白提取物的组成为质量百分含量为60％的K⁺、Na⁺和Ca²⁺，和质量百分含量为40％的核苷酸、氨基酸、小分子肽和酮酸。所述小牛血去蛋白提取物可按照专利号为ZL 96120777.9，发明名称为“一种提取小牛血去蛋白提取物的方法”中描述的方法制备。

所述小牛血去蛋白提取物由小牛血去蛋白提取液在40-50℃真空干燥20-24小时得到。

所述小牛血去蛋白提取液可按照专利号为ZL 96120777.9，发明名称为“一种提取小牛血去蛋白提取物的方法”中描述的方法制备：采1-6个月龄幼牛静脉血，分离出血清，用乙醇去蛋白，减压去除乙醇，在余下液体中加入复合蛋白酶水解，离心分离留上清，所述上清用5000道尔顿中空纤维柱超滤截留，收集得到的滤液即为小牛血去蛋白提取液；乙醇的用量为两倍于血清体积的质量百分含量为96％乙醇；其中所述的减压去除乙醇为利用真空旋转蒸发仪，37℃，1个大气压减压除乙醇；其中所述的加入复合蛋白酶水解为加入复合蛋白酶水解2 4小时；其中所述的加入复合蛋白酶水解后离心分离为在10000rpm、4℃，离心30分钟，留上清。

所述淀粉为马铃薯淀粉、玉米淀粉、木薯淀粉、小麦淀粉等；所述玉米淀粉优选为预胶化淀粉。

所述抑菌剂可为羟基苯甲酸乙酯、富马酸二甲酯或低级脂肪酸酯。其中，所述羟基苯甲酸乙酯为对羟基苯甲酸乙酯。

本发明的另一个目的是提供一种制备上述小牛血去蛋白胶囊的方法。

本发明所提供的制备小牛血去蛋白胶囊的方法，是将固形物的质量百分含量为2％-7％的小牛血去蛋白提取液，40-50℃真空干燥20-24小时，再按照小牛血去蛋白提取物(固形物)占30-50重量份的比例，加入49-70重量份的淀粉，40-50℃真空干燥20-24小时，再加入0.1-1重量份的抑菌剂，过40目-80目筛，然后40-50℃真空干燥2小时，装入肠溶胶囊壳，得到小牛血去蛋白胶囊。

所述小牛血去蛋白提取液可按照如下方法制备：采1-6个月龄幼牛静脉血，分离出血清，用乙醇去蛋白，减压去除乙醇，在余下液体中加入复合蛋白酶水解，离心分离留上清，所述上清用5000道尔顿中空纤维柱超滤截留，收集得到的滤液即为小牛血去蛋白提取液；其中所述的用乙醇去蛋白时乙醇的用量为两倍于血清体积的质量百分含量为96％乙醇；其中所述的减压去除乙醇为利用真空旋转蒸发仪，37℃，1个大气压减压除乙醇；其中所述的加入复合蛋白酶水解为加入复合蛋白酶水解24小时；其中所述的加入复合蛋白酶水解后离心分离为在10000rpm、4℃，离心30分钟，留上清。

上述药物的用量一般为每天900-1200mg小牛血去蛋白提取物/50Kg体重，疗程为10至20天。

本发明将小牛血去蛋白提取物制成一种方便服用的口服剂型：肠溶胶囊，既弥补水针应用不方便的缺陷，又克服了口服片剂不稳定的不足，可用于治疗脑部血液循环和营养障碍性疾病(缺血性损害、颅脑外伤)所引起的神经功能缺损；可治疗末稍动脉、静脉循环障碍及其引起的动脉血管病，腿部溃疡；还可治疗皮肤烧伤、烫伤、糜烂，放射所致的皮肤、粘膜损伤；愈合伤口(创伤、褥疮)。动物实验和临床试验都证明其疗效显著。

具体实施方式

下述实施例中的实验方法，如无特别说明，均为常规方法。

下述实施例中的百分含量，如无特别说明，均为质量百分含量。

实施例1、制备1000粒小牛血去蛋白胶囊

胶囊内容物由下述原料组成：小牛血去蛋白提取液(固形物的质量百分含量为4％)2500g，马铃薯淀粉149.75g，对羟基苯甲酸乙酯(尼泊金乙酯)0.25g。

1、制备小牛血去蛋白提取液

2500g小牛血去蛋白提取液(固形物的质量百分含量为4％)按照专利号为ZL96120777.9，发明名称为“一种提取小牛血去蛋白提取物的方法”中描述的方法制备：

无菌条件下采1-6个月龄的东北纯种黄牛的静脉血，无菌条件下，4000rpm，4℃，离心15分钟分离血清，取12L血清，加入24L 96％乙醇，不断搅拌，静置60分钟，使蛋白质变性沉淀，然后经20000rpm 4℃离心30min，弃沉淀，得到30L上清，利用真空旋转蒸发仪，37℃，1个大气压减压除乙醇，在余下液体中加入3.6g复合蛋白酶，在37℃水解24小时，在10000rpm、4℃，离心30分钟，留上清，上清用5000道尔顿中空纤维柱超滤截留，收集得到的滤液即为小牛血去蛋白提取液，得到2500g小牛血去蛋白提取液，其固形物的质量百分含量为4％。

2、制备小牛血去蛋白胶囊内容物

2500g固形物的质量百分含量为2％-7％的小牛血去蛋白提取液40℃真空干燥24小时后，向其中加入149.75马铃薯淀粉，继续40℃真空干燥24小时，再加入0.25g尼泊金乙酯，粉碎，混匀，过80目筛，40℃真空干燥2小时，用制粒机制粒，得到小牛血去蛋白胶囊内容物。

3、制备小牛血去蛋白胶囊

按照常规肠溶胶囊制剂的制备方法，将250g胶囊内容物利用JNP-1200型胶囊填充机(购于航天长峰股份有限公司北京弘华制药机械分公司)填充，每粒含250mg胶囊内容物，得到1000粒肠溶胶囊。将已分装的小牛血去蛋白胶囊倒入铝塑包装机中，用铝塑包装成10粒/板。

实施例2、生产1000粒小牛血去蛋白胶囊

胶囊内容物由下述原料组成：小牛血去蛋白提取液(固形物的质量百分含量为4％)3125g，预胶化淀粉122.5g，富马酸二甲酯2.5g。

1、制备小牛血去蛋白提取液

按照专利号为ZL 96120777.9，发明名称为“一种提取小牛血去蛋白提取物的方法”中描述的方法制备：

无菌条件下采1-6个月龄的东北纯种黄牛的静脉血，无菌条件下，4000rpm，4℃，离心15分钟分离血清，取15L血清，加入30L 96％乙醇，不断搅拌，静置60分钟，使蛋白质变性沉淀，然后经20000rpm 4℃离心30min，弃沉淀，得到37.5L上清，利用真空旋转蒸发仪，37℃，1个大气压减压除乙醇，在余下液体中加入4.5g复合蛋白酶，在37℃水解24小时，在10000rpm、4℃，离心30分钟，留上清，上清用5000道尔顿中空纤维柱超滤截留，收集得到的滤液即为小牛血去蛋白提取液，得到3125g小牛血去蛋白提取液，其固形物的质量百分含量为4％。。

2、制备小牛血去蛋白胶囊内容物

3125g固形物的质量百分含量为4％的小牛血去蛋白提取液40℃真空干燥24小时后，向其中加入122.5g预胶化淀粉，继续40℃真空干燥24小时，再加入2.5g富马酸二甲酯，粉碎，混匀，过80目筛，40℃真空干燥2小时，用制粒机制粒，得到小牛血去蛋白胶囊内容物。

3、制备小牛血去蛋白胶囊

按照常规肠溶胶囊制剂的制备方法，将250g胶囊内容物利用JNP-1200型胶囊填充机(购于航天长峰股份有限公司北京弘华制药机械分公司)填充，每粒含250mg胶囊内容物，得到1000粒肠溶胶囊。将已分装的小牛血去蛋白胶囊倒入铝塑包装机，用铝塑包装成10粒/板。

实施例3、动物实验

实验材料

小牛血去蛋白注射液(配方：每支含固形物质含量为4％的小牛血去蛋白提取液5ml，锦州奥鸿药业有限责任公司生产)。

小牛血去蛋白胶囊的制备：小牛血去蛋白胶囊内容物同实施例1。

淀粉肠溶胶囊的制备：将马铃薯淀粉烘干后，用动物用肠溶微胶囊分装。

一、小牛血去蛋白胶囊对小白鼠常压耐氧能力的影响

选择健康的昆明种一级小白鼠100只，体重18-22g(由锦州医学院实验动物中心提供)，雌雄各半，均分成五组，即小牛血去蛋白胶囊三个实验组(I、II、III组)、小牛血去蛋白注射液实验组(IV组)、淀粉胶囊对照组(V组)。I、II、III组即小牛血去蛋白胶囊高、中、低剂量组，每天分别给小牛血去蛋白胶囊(以小牛血去蛋白提取物计)30mg/kg体重、15mg/kg体重、10mg/kg体重，一天一次，给药方式为口服。IV组为小牛血去蛋白注射液尾静脉给药，给药量(按小牛血去蛋白提取物计)及给药时间同小牛血去蛋白胶囊中剂量组，给药方式为尾静脉注射，一天一次。V组为空白对照组，每天给予75mg淀粉/kg体重，一天一次，给药方式为口服。各组小白鼠连续给药11天，于末次给药后30分钟将所有小白鼠放入装有10g碱石灰的250ml广口瓶中，密闭常压缺氧，观察小白鼠存活时间，小白鼠死亡后测定脑组织中葡萄糖和乳酸的含量。常压缺氧小白鼠存活时间测定结果如表1所示：

表1 常压缺氧小白鼠存活时间

组别	例数	给药途径	给药剂量(小牛血去蛋白提取物计)mg/kg体重	存活时间(min)
组别	例数	给药途径	给药剂量(小牛血去蛋白提取物计)mg/kg体重	存活时间(min)	IIIIIIIVV	2020202020	口服口服口服静脉注射口服	3015101575(淀粉)	46.63±7.03<sup>a</sup>46.37±8.20<sup>a.</sup>44.44±8.82<sup>a</sup>46.73±6.32<sup>a.b.</sup>35.65±5.61

注：a、P＜0.01同V组比较；b、P＞0.05同II组比较

表1表明所有小牛血去蛋白胶囊组与小牛血去蛋白注射液组小白鼠存活时间均明显长于空白对照组，高、中、低剂量组之间无显著性差异(P＞005)，小牛血去蛋白提取物注射液组与小牛血去蛋白胶囊组无显著性差异(P＞005)。

常压缺氧小白鼠脑乳酸含量测定结果如表2所示：

表2常压缺氧小白鼠脑乳酸含量

组别	例数	给药途径	给药剂量(小牛血去蛋白提取物计)mg/kgB.W	脑乳酸含量(mmol/g.wet.wt)
组别	例数	给药途径	给药剂量(小牛血去蛋白提取物计)mg/kgB.W	脑乳酸含量(mmol/g.wet.wt)	IIIIIIIVV	2020202020	口服口服口服静脉注射口服	3015101575(淀粉)	9.68±0.61<sup>a</sup>10.01±0.56<sup>a.</sup>11.3±0.80<sup>a</sup>9.84±0.41<sup>a.b</sup>12.36±0.85

注：a、P＜0.01同V组比较；b、P＞0.05同II组比较

表2表明所有小牛血去蛋白胶囊组与小牛血去蛋白提取物注射液组小白鼠脑乳酸含量明显低于对照组，小牛血去蛋白胶囊高、中剂量组之间无显著性差异(P＞005)，中剂量组脑乳酸含量明显低于低剂量组，小牛血去蛋白提取物注射液组和小牛血去蛋白胶囊中剂量组无显著性差异(P＞005)。

常压缺氧小白鼠脑葡萄糖含量测定结果如表3所示

表3常压缺氧小白鼠脑葡萄糖含量(

组别	例数	给药途径	给药剂量(小牛血去蛋白提取物计)mg/kgB.W	脑葡萄糖含量(mmol/g.wet.wt)
组别	例数	给药途径	给药剂量(小牛血去蛋白提取物计)mg/kgB.W	脑葡萄糖含量(mmol/g.wet.wt)	IIIIIIIVV	2020202020	口服口服口服静脉注射口服	3015101575(淀粉)	5.65±0.72<sup>a</sup>5.46±0.68<sup>a</sup>4.65±0.60<sup>a</sup>5.66±0.45<sup>a.b</sup>3.74±0.18

注：a、P＜0.01同V组比较；b、P＞0.05同II组比较

表3表明，所有小牛血去蛋白胶囊组与小牛血去蛋白注射液组小白鼠脑葡萄糖含量明显高于对照组，小牛血去蛋白胶囊高、中剂量组之间无显著性差异(p＞005)，中剂量组脑葡萄糖含量明显高于低剂量组，小牛血去蛋白注射液组小白鼠脑葡萄糖含量与小牛血去蛋白胶囊中剂量组无显著性差异(P＞005)。

小牛血去蛋白胶囊是一种小牛血去蛋白提取物的口服制剂，含有多种生理活性物质，该药能加强葡萄糖和氧转运入细胞，增加葡萄糖的利用。本实验结果表明所有常压缺氧实验组小白鼠脑乳酸含量明显低于对照组，证明该胶囊能促进常压缺氧小白鼠脑细胞进行有氧代谢，同时发现，小牛血去蛋白胶囊高、中剂量组之间量效关系不明显，中、低剂量组之间有明显正量效关系，小牛血去蛋白注射液与小牛血去蛋白胶囊疗效相当；常压缺氧小白鼠脑葡萄糖含量测定结果表明，所有实验组小白鼠脑葡萄糖含量均明显高于对照组，因此，证明小牛血去蛋白胶囊和小牛血去蛋白注射液能促进血或其它组织葡萄糖向脑组织转运，同时研究表明，小牛血去蛋白胶囊高、中剂量组之间量效关系不明显，中、低剂量组之间有明显正量效关系，小牛血去蛋白注射液与小牛血去蛋白胶囊疗效相当；常压缺氧小白鼠存活时间研究结果表明，小牛血去蛋白胶囊能延长常压缺氧小白鼠存活时间，小牛血去蛋白胶囊高、中、低剂量组之间量效关系不明显，小牛血去蛋白注射液与小牛血去蛋白胶囊疗效相当。

Claims

1、小牛血去蛋白胶囊，由胶囊内容物和胶囊壳组成；所述胶囊内容物由下述原料制成：小牛血去蛋白提取物30-50重量份，淀粉49-70重量份，抑菌剂0.1-1重量份；所述小牛血去蛋白提取物来源于固形物的质量百分含量为2％-7％的小牛血去蛋白提取液，是将小牛血去蛋白提取液在40-50℃条件下，真空干燥20-24小时得到的；所述胶囊壳为肠溶胶囊壳。

2、根据权利要求1所述的小牛血去蛋白胶囊，其特征在于：所述小牛血蛋白提取物的组成为质量百分含量为60％的K⁺、Na⁺和Ca²⁺，和质量百分含量为40％的核苷酸、氨基酸、小分子肽和酮酸。

3、根据权利要求1或2所述的小牛血去蛋白胶囊，其特征在于：所述小牛血去蛋白提取液是按照如下方法制备的：采1-6个月龄幼牛静脉血，分离出血清，用乙醇去蛋白，减压去除乙醇，在余下液体中加入复合蛋白酶水解，离心分离留上清，所述上清用5000道尔顿中空纤维柱超滤截留，收集得到的滤液即为小牛血去蛋白提取液；其中所述的用乙醇去蛋白时乙醇的用量为两倍于血清体积的质量百分含量为96％乙醇；其中所述的减压去除乙醇为利用真空旋转蒸发仪，37℃，1个大气压减压除乙醇；其中所述的加入复合蛋白酶水解为加入复合蛋白酶水解24小时；其中所述的加入复合蛋白酶水解后离心分离为在10000rpm、4℃，离心30分钟，留上清。

4、根据权利要求1或2所述的小牛血去蛋白胶囊，其特征在于：所述淀粉为马铃薯淀粉、玉米淀粉、木薯淀粉或小麦淀粉。

5、根据权利要求4所述的小牛血去蛋白胶囊，其特征在于：所述玉米淀粉为预胶化的玉米淀粉。

6、根据权利要求1或2所述的小牛血去蛋白胶囊，其特征在于：所述抑菌剂为羟基苯甲酸乙酯、富马酸二甲酯或低级脂肪酸酯。

7、根据权利要求6所述的小牛血去蛋白胶囊，其特征在于：所述羟基苯甲酸乙酯为对羟基苯甲酸乙酯。

8、权利要求7所述的小牛血去蛋白胶囊的制备方法，是将固形物的质量百分含量为2％-7％的小牛血去蛋白提取液，40-50℃真空干燥20-24小时，再按照小牛血去蛋白提取物占30-50重量份的比例，加入49-70重量份的淀粉，40-50℃真空干燥20-24小时，再加入0.1-1重量份的抑菌剂，过40目-80目筛，然后40-50℃真空干燥2小时，装入肠溶胶囊壳，得到小牛血去蛋白胶囊。

9、根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述小牛血去蛋白提取液是按照如下方法制备的：采1-6个月龄幼牛静脉血，分离出血清，用乙醇去蛋白，减压去除乙醇，在余下液体中加入复合蛋白酶水解，离心分离留上清，所述上清用5000道尔顿中空纤维柱超滤截留，收集得到的滤液即为小牛血去蛋白提取液；其中所述的用乙醇去蛋白时乙醇的用量为两倍于血清体积的质量百分含量为96％乙醇；其中所述的减压去除乙醇为利用真空旋转蒸发仪，37℃，1个大气压减压除乙醇；其中所述的加入复合蛋白酶水解为加入复合蛋白酶水解24小时；其中所述的加入复合蛋白酶水解后离心分离为在10000rpm、4℃，离心30分钟，留上清。