CH675358A5

CH675358A5 -

Info

Publication number: CH675358A5
Application number: CH1393/88A
Authority: CH
Inventors: Patrick Thomas Prendergast
Original assignee: Colthurst Ltd; Patrick Thomas Prendergast
Priority date: 1987-04-16
Filing date: 1988-04-15
Publication date: 1990-09-28
Also published as: NL194728C; AU608824B2; GB8808864D0; IT8847858A0; KR960014988B1; IL86089A; IL86089A0; GR1002240B; JPS6425722A; GB2204237A; SE8801406D0; AU1467888A; JP2577771B2; GB2204237B; OA08729A; DK208188A; FR2615394B1; IT1227073B; FI881773A0; PH25907A

Description

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Description Description

La présente invention concerne l'utilisation de certains 17-cétostéroïdes, éventuellement avec un im-munomodulateur et/ou un agent antiviral, pour fabriquer un médicament pour le traitement et la prévention des infections rétrovirales. The present invention relates to the use of certain 17-ketosteroids, optionally with an immunomodulator and / or an antiviral agent, to manufacture a medicament for the treatment and prevention of retroviral infections.

Plus particulièrement, l'invention concerne l'utilisation de certains 17-cétostéroïdes dans la prophylaxie et le traitement des infections rétrovirales ou d'une complication ou d'une conséquence de celles-ci, notamment dans- la prophylaxie et le traitement des infections rétrovirales conduisant à une déficience du système immunitaire entraînant le développement d'infections opportunistes et de certains cancers. L'invention concerne notamment l'utilisation des 17-cétostéroïdes dans la prophylaxie et le traitement des infections rétrovirales semblant être responsables du syndrome immunodéficitaire acquis (SIDA) et de la maladie apparentée, le para-SIDA (ARC). Le SIDA et le para-SIDA semblent résulter d'une infection par le virus HIV (HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS), des anticorps contre celui-ci étant présents dans le sérum de presque toutes les personnes pour lesquelles le diagnostic de SIDA ou de para-SIDA a été porté. Le virus LAV (Lymphadenopathy Associated Virus) et le virus HTLV-III (Human T-Iymphotropic Virus Type III), de même que des rétrovirus apparentés, ont été isolés d'un grand nombre de patients atteints de SIDA. Tous ces virus ont en commun des caractéristiques importantes. On considère maintenant qu'HTLV-lll et LAV sont des souches du même virus que l'on a appelé HIV (Human Immunodeficiency Virus). More particularly, the invention relates to the use of certain 17-ketosteroids in the prophylaxis and treatment of retroviral infections or of a complication or a consequence thereof, in particular in the prophylaxis and treatment of retroviral infections leading to a deficiency of the immune system leading to the development of opportunistic infections and certain cancers. The invention relates in particular to the use of 17-ketosteroids in the prophylaxis and treatment of retroviral infections appearing to be responsible for the acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) and the related disease, para-AIDS (ARC). AIDS and para-AIDS appear to result from an infection with the HIV virus (HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS), antibodies against this being present in the serum of almost all the people for whom the diagnosis of AIDS or para-AIDS has been worn. LAV (Lymphadenopathy Associated Virus) and HTLV-III (Human T-Iymphotropic Virus Type III), as well as related retroviruses, have been isolated from a large number of AIDS patients. All of these viruses have important features in common. HTLV-III and LAV are now considered to be strains of the same virus that has been called HIV (Human Immunodeficiency Virus).

Le SIDA est une maladie caractérisée par une perte de l'immunité à médiation cellulaire et le développement d'infections opportunistes fréquentes et finalement mortelles. La définition permettant de porter le diagnostic clinique du SIDA est I '«apparition d'une maladie permettant de prévoir une déficience de l'immunité à médiation cellulaire apparaissant chez un individu ne présentant aucune cause connue de diminution de la résistance à cette maladie» (Lane H.C. et Fauci A.S., Ann. Rev. Immunol. 1985, 3, 477-500). AIDS is a disease characterized by loss of cell-mediated immunity and the development of frequent and ultimately fatal opportunistic infections. The definition allowing the clinical diagnosis of AIDS to be made is "the appearance of a disease which makes it possible to predict a deficiency in cell-mediated immunity appearing in an individual having no known cause of reduced resistance to this disease" ( Lane HC and Fauci AS, Ann. Rev. Immunol. 1985, 3, 477-500).

Le terme HIV tel qu'on l'utilise englobe les rétrovirus HIV-1 ou HIV-2 (Human Immunodeficiency Virus Type 1 et Human Immunodeficiency Virus Type 2) qui ont été découverts en 1983. L'HIV attaque, en en réduisant le nombre, un sous-groupe des globules blancs du sang appelés lymphocytes T. Une molécule appelée CD4 est exprimée sur la surface cellulaire de ces lymphocytes T (ces cellules sont également appelées cellules T4). Ces lymphocytes, qui, pour la plupart, font partie du sousgroupe fonctionnel défini comme auxiliaire/inducteur, constituent la majeure portion des cellules T matures. Un autre sousgroupe majeur des cellules T exprime la molécule CD8 sur la surface cellulaire (ces cellules sont également appelées cellules T8). La plupart de ces cellules font partie du sous-groupe suppres-seur/cytotoxique. Normalement, le rapport T4/T8 est de 1,5 à 2,0. Cependant, chez les patients atteints de SIDA, ce rapport est inversé par suite d'une diminution du nombre absolu des cellules T4, tandis que le nombre normal des cellules T8 est généralement maintenu. The term HIV as used includes the HIV-1 or HIV-2 retroviruses (Human Immunodeficiency Virus Type 1 and Human Immunodeficiency Virus Type 2) which were discovered in 1983. HIV attacks, reducing the number , a subgroup of white blood cells called T cells. A molecule called CD4 is expressed on the cell surface of these T cells (these cells are also called T4 cells). These lymphocytes, which for the most part are part of the functional subgroup defined as auxiliary / inducer, constitute the major portion of mature T cells. Another major subgroup of T cells expresses the CD8 molecule on the cell surface (these cells are also called T8 cells). Most of these cells are part of the suppressor / cytotoxic subgroup. Normally, the T4 / T8 ratio is 1.5 to 2.0. However, in AIDS patients, this ratio is reversed due to a decrease in the absolute number of T4 cells, while the normal number of T8 cells is generally maintained.

Les cellules T4 reconnaissent spécifiquement les antigènes qu'elles rencontrent dans l'organisme et prolifèrent par réaction avec eux et en même temps libèrent diverses protéines appelées lymphognes qui assurent la régulation d'autres cellules du système immunitaire. Sur l'indication des cellules T4, les cellules lymphocytaires B reconnaissent les antigènes et secrètent des anticorps spécifiques pour neutraliser ou éliminer les bactéries ou virus antigéniques lorsqu'ils passent dans les liquides de l'organisme entre les cellules. De façon semblable, sur l'indication des cellules T4, les cellules T cytotoxiques («T8») sont activées pour tuer les cellules infectées par des agents pathogènes intracellulaires. De plus, les cellules T4 modulent les activités des cellules du système immunitaire appelées cellules tueuses naturelles et macrophages qui interviennent dans la réponse à l'infection et peut-être aux affections malignes à leur début. T4 cells specifically recognize the antigens that they meet in the body and proliferate by reaction with them and at the same time release various proteins called lymphocytes which regulate other cells of the immune system. On the indication of T4 cells, the B lymphocyte cells recognize the antigens and secrete specific antibodies to neutralize or eliminate the bacteria or antigenic viruses when they pass into the fluids of the body between the cells. Similarly, on the indication of T4 cells, cytotoxic T cells ("T8") are activated to kill cells infected with intracellular pathogens. In addition, T4 cells modulate the activities of cells of the immune system called natural killer cells and macrophages, which are involved in the response to infection and possibly malignant disease at its onset.

Un phénomène critique précoce dans l'infection à HIV comprend la fixation du virus par l'intermédiaire de la glycoprotéine de son enveloppe à un récepteur sur la surface d'une cellule T4 sensible, la molécule CD4. La molécule CD4 à la surface des cellules T4 semble caractériser les cellules cibles potentielles de l'HIV et agir comme une molécule réceptrice qui fixe le virus et permet l'infection et la réplication virale ultérieure, de même que les conséquences cytopathogènes de l'infection virale. An early critical phenomenon in HIV infection involves the attachment of the virus via the glycoprotein from its envelope to a receptor on the surface of a sensitive T4 cell, the CD4 molecule. The CD4 molecule on the surface of T4 cells seems to characterize potential target cells for HIV and act as a receptor molecule that binds the virus and allows infection and subsequent viral replication, as well as the cytopathogenic consequences of infection. viral.

L'immunodéficience du SIDA établit clairement l'importance des lymphocytes T4. Par suite de la perte de ces cellules, les lymphocytes T restants des patients atteints de SIDA présentent une diminution ou une absence de réponse aux antigènes et assurent une production inférieure à la normale des facteurs immunorégulateurs essentiels. Par suite de fa diminution de leur nombre et de leur capacité fonctionnelle, les cellules T4 sont incapables de jouer leur rôle nécessaire en assurant la direction de la maturation des cellules B et des cellules T cytotoxiques. La capacité des patients atteints de SIDA à élaborer des anticorps par réaction à de nouveaux antigènes est fortement compromise, bien que, paradoxalement, des taux élevés d'anticorps dirigés contre des antigènes précédemment rencontrés, y compris l'HIV, soient souvent présents dans les sérums des patients (Institute of Medicine, National Academy of Science, Confronting AIDS, Washington DC National Academy Press 1986, pages 37-44 et 177-199). The immunodeficiency of AIDS clearly establishes the importance of T4 lymphocytes. As a result of the loss of these cells, the remaining T lymphocytes of AIDS patients show a decrease or lack of response to the antigens and ensure a below normal production of essential immunoregulatory factors. Due to the decrease in their number and their functional capacity, T4 cells are unable to play their necessary role in ensuring the direction of the maturation of B cells and cytotoxic T cells. The ability of AIDS patients to develop antibodies by reaction to new antigens is greatly compromised, although, paradoxically, high levels of antibodies to previously encountered antigens, including HIV, are often present in patient sera (Institute of Medicine, National Academy of Science, Confronting AIDS, Washington DC National Academy Press 1986, pages 37-44 and 177-199).

Actuellement, le SIDA et le para-SIDA sont principalement observés dans certains groupes à risques élevés, tels que les homosexuels, les drogués par injection intraveineuse et les personnes ayant reçu des transfusions multiples ou des produits dérivés du sang, tels que le facteur VIII. Les donneurs de sang font actuellement l'objet d'un dépistage systématique des anticorps anti-HIV et par conséquent, Currently, AIDS and para-AIDS are mainly seen in certain high-risk groups, such as homosexuals, intravenous drug users and people who have received multiple transfusions or blood products, such as factor VIII. Blood donors are currently screened for anti-HIV antibodies and therefore

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dans l'avenir, la propagation de l'HIV par les transfusions sanguines et les produits dérivés du sang ne devrait pas, espérons-le, contribuer à la transmission du SIDA. Le SIDA s'observe également de plus en plus dans la population hétérosexuelle. In the future, the spread of HIV through blood transfusions and blood products is not expected to contribute to the transmission of AIDS. AIDS is also seen more and more in the heterosexual population.

Il est de plus en plus établi que l'infection des macrophages/monocytes est un facteur capital de la persistance et de la progression de l'infection par l'HIV, de l'amorce des lésions cérébrales observées dans le SIDA et dans le déclenchement de l'effondrement du système immunitaire, qui se manifeste finalement par une chute profonde des lymphocytes T4. Crowe et coll. ont démontré, en utilisant l'anticorps anti-HIV p24 que les monocytes/macrophages peuvent être infectés par l'HIV. Ils ont démontré que jusqu'à 70% des cellules des donneurs individuels peuvent être infectées (AIDS Research and Human Re-troviruses, Vol. 3, No.2, 1987, page 135). Nicholson et coll. ont proposé un effet induit par l'HTLV-lll/LAV sur la fonction des monocytes plutôt que (ou en plus de) une déficience intrinsèque des cellules T survivantes pour expliquer les anomalies observées des déterminations relatives aux cellules T qui sont dépendantes des monocytes telles que la synthèse d'Ig induite par le mythogène pokeweed et les réactions prolifératives aux antigènes solubles. Ces déterminations relatives aux cellules T ont été précédemment indiquées comme anormales, même lorsque la détermination porte sur des sous-groupes des cellules T (The Journal of Immunology, Vol. 137, No. 1,1986, page 323). It is increasingly established that infection of macrophages / monocytes is a key factor in the persistence and progression of HIV infection, the onset of brain damage observed in AIDS and in the initiation immune system collapse, which ultimately manifests as a deep drop in T4 cells. Crowe et al. have demonstrated, using the anti-HIV antibody p24, that monocytes / macrophages can be infected with HIV. They have shown that up to 70% of cells from individual donors can be infected (AIDS Research and Human Re-troviruses, Vol. 3, No.2, 1987, page 135). Nicholson et al. proposed an effect induced by HTLV-III / LAV on the function of monocytes rather than (or in addition to) an intrinsic deficiency of surviving T cells to explain the observed anomalies of the determinations relating to T cells which are dependent on monocytes such as Ig synthesis induced by the mythogenic pokeweed and proliferative reactions to soluble antigens. These T cell determinations have previously been reported to be abnormal, even when the determination relates to T cell subgroups (The Journal of Immunology, Vol. 137, No. 1.1986, page 323).

Comme il est bien établi que le premier phénomène qui apparaît lorsqu'une matière étrangère (par exemple un virus) pénètre dans l'organisme est sa fixation par des phagocytes mononucléaires, il est concevable que ces cellules représentent une cible principale de l'HIV. Gartner et coll. ont montré que la production de virus par des macrophages infectés par HTLV III/LAV est importante et prolongée, ce qui indique que ces cellules peuvent jouer un rôle dans la dissémination et la persistance du virus. Ils ont démontré que la réplication d'HTLV-lll/LAV dans les macrophages est intense dans les cas qu'ils ont évalués (Science, Vol. 233,1986, page 215). As it is well established that the first phenomenon that appears when a foreign material (for example a virus) enters the body is its fixation by mononuclear phagocytes, it is conceivable that these cells represent a main target of HIV. Gartner et al. have shown that the production of virus by macrophages infected with HTLV III / LAV is significant and prolonged, which indicates that these cells can play a role in the dissemination and persistence of the virus. They demonstrated that the replication of HTLV-III / LAV in macrophages is intense in the cases which they evaluated (Science, Vol. 233,1986, page 215).

Salahuddin et coll. ont observé, qu'in vitro, les macrophages pulmonaires peuvent être infectés par HTLV-III et semblent être moins sensibles aux effets cytopathogènes de ce rétrovirus, ce qui suggère que les macrophages tissulaires peuvent être considérés comme des réservoirs potentiels d'HTLV-lll in vivo (Blood, Vol. 68, No. 1,1986, page 281). Salahuddin et al. observed that, in vitro, pulmonary macrophages can be infected with HTLV-III and seem to be less sensitive to the cytopathogenic effects of this retrovirus, which suggests that tissue macrophages can be considered as potential reservoirs of HTLV-lll in vivo (Blood, Vol. 68, No. 1.1986, page 281).

Ho D.D. et coll. ont observé que les monocytes/ macrophages dérivant du sang normal sont sensibles à l'infection in vitro par l'HTLV-lll (Human T Lymphotropic Virus III), l'agent étiologique du SIDA. De plus, l'HTLV-lll a été récupéré à partir de monocytes/macrophages de patients infectés par ce virus. On a donc émis l'hypothèse que les monocytes/macrophages infectés par HTLV-III peuvent servir de véhicule pour la dissémination du virus aux organes cibles et de réservoir de la persistance virale, comme cela a été observé pour d'autres virus lents, tels que le virus du visna ou le virus de l'arthrite-encéphalite caprine (J. Clin. Invest., Vol. 77,1986, page 1712). Ho D.D. et al. observed that monocytes / macrophages derived from normal blood are susceptible to infection in vitro by HTLV-III (Human T Lymphotropic Virus III), the etiological agent of AIDS. In addition, HTLV-III was recovered from monocytes / macrophages from patients infected with this virus. It has therefore been hypothesized that the monocytes / macrophages infected with HTLV-III can serve as a vehicle for the dissemination of the virus to the target organs and as a reservoir of viral persistence, as has been observed for other slow viruses, such as the visna virus or the caprine arthritis-encephalitis virus (J. Clin. Invest., Vol. 77,1986, page 1712).

Bien qu'un agent antiviral susceptible de tuer tous les HIV infectieux ou d'inhiber complètement leur réplication (et possédant simultanément un profil de toxicité acceptable) soit très souhaitable, la situation actuelle est qu'on ne dispose pas d'un tel agent. Although an antiviral agent capable of killing all infectious HIV or of completely inhibiting their replication (and simultaneously having an acceptable toxicity profile) is very desirable, the current situation is that such an agent is not available.

Grâce à la meilleure compréhension du rôle que les macrophages peuvent jouer dans la pathogenèse du SIDA, il est évident qu'une stratégie antivirale efficace nécessite une approche permettant de traiter les macrophages infectés et d'inhiber l'infection de ces cellules. Actuellement, les seuls agents antiviraux approuvés par la F.D.A. pour le traitement du SIDA sont l'azidothymidine (AZT) et l'iséthionate de Pentamidine (PENTAM 300). Comme démontré ci-après, l'AZT est totalement inefficace pour inhiber l'infection des macrophages ou moduler la production d'HIV par les macrophages infectés. L'administration d'AZT pendant des périodes prolongées s'est révélée provoquer des effets secondaires indésirables, tels qu'une anémie nécessitant une transfusion sanguine, une leucopénie et une neutropénie. With a better understanding of the role that macrophages can play in the pathogenesis of AIDS, it is obvious that an effective antiviral strategy requires an approach to treat infected macrophages and to inhibit infection of these cells. Currently, the only antiviral agents approved by the F.D.A. for the treatment of AIDS are azidothymidine (AZT) and pentamidine isethionate (PENTAM 300). As demonstrated below, AZT is completely ineffective in inhibiting infection of macrophages or modulating the production of HIV by infected macrophages. Administration of AZT for prolonged periods has been shown to cause undesirable side effects, such as anemia requiring blood transfusion, leukopenia and neutropenia.

La grande majorité des composés antiviraux sont des nucléosides, y compris par exemple l'AZT. The vast majority of antiviral compounds are nucleosides, including for example AZT.

Beaucoup des 17-cétostéroïdes agissent comme des hormones et comprennent les hormones sexuelles ou leurs précurseurs et les hormones qui règlent le métabolisme. La déhydroépiandrostérone (DHEA) est un de ces 17-cétostéroïdes qui est un précurseur des androgènes et des oestrogènes et a de plus des effets métaboliques importants. Ces effets résultent de son activité inhibitrice d'enzymes telles que la glucose-6-phosphate déshydrogénase et la NADH oxydase. De plus, la DHEA a un effet inhibiteur sur l'activité mitotique et sur la perméabilité des membranes (Jiri Sonka, Acta Universitatis Ca-rolinae Medica Monographia LXXI - 1976). L'effet de la DHEA sur des enzymes, telles que la glucose-6-phosphate déshydrogénase et la NADH oxydase, provoque principalement une inhibition de la voie des pentoses et une inhibition du système du cytochrome, qui toutes deux limitent l'apport des constituants et de l'énergie nécessaires aux processus de biosynthèse, en particulier pour la croissance et la régénération des tissus. Une des conditions principales de la croissance est un apport approprié d'énergie (ATP) et de constituants pour la synthèse des acides nucléiques. La DHEA commande ces deux processus en tant qu'inhibiteur de la NADH oxydase et de la glucose-6-phosphate déshydrogénase. La DHEA s'est révélée inhiber certains troubles métaboliques et la cirrhose du foie et réduire la douleur des cardiopathies ischémiques, en particulier de l'angine de poitrine, par limitation de la respiration tissulaire. La DHEA a été utilisée dans le traitement de la ménopause, de l'instabilité émotionnelle, de la dépression et du stress. Many of the 17-ketosteroids act as hormones and include the sex hormones or their precursors and the hormones that regulate metabolism. Dehydroepiandrosterone (DHEA) is one of these 17-ketosteroids which is a precursor of androgens and estrogens and also has significant metabolic effects. These effects result from its inhibitory activity of enzymes such as glucose-6-phosphate dehydrogenase and NADH oxidase. In addition, DHEA has an inhibitory effect on the mitotic activity and on the permeability of the membranes (Jiri Sonka, Acta Universitatis Ca-rolinae Medica Monographia LXXI - 1976). The effect of DHEA on enzymes, such as glucose-6-phosphate dehydrogenase and NADH oxidase, mainly causes inhibition of the pentose pathway and inhibition of the cytochrome system, both of which limit the intake of constituents and energy needed for biosynthesis processes, especially for tissue growth and regeneration. One of the main conditions for growth is an adequate supply of energy (ATP) and constituents for the synthesis of nucleic acids. DHEA controls these two processes as an inhibitor of NADH oxidase and glucose-6-phosphate dehydrogenase. DHEA has been shown to inhibit certain metabolic disorders and liver cirrhosis and reduce the pain of ischemic heart disease, particularly angina, by limiting tissue respiration. DHEA has been used to treat menopause, emotional instability, depression and stress.

Les individus présentant une carence génétique en glucose-6-phosphate déshydrogénase possèdent une résistance relative au paludisme à falciparum et présentent un nombre bien plus faible de protozo3 Individuals with genetic glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency have relative resistance to falciparum malaria and have much lower numbers of protozo3

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aires dans leurs érythracytes que les sujets normaux (Motulski A.G. 1975 dans «The Rôle of Natural Sélection in Human Evolution», Ed. Salzano S. Amsterdam, New Holland, p. 271 et Luzzato L. et coll., Science, 164. 839,1969). areas in their erythracytes than normal subjects (Motulski AG 1975 in "The Role of Natural Selection in Human Evolution", Ed. Salzano S. Amsterdam, New Holland, p. 271 and Luzzato L. et al., Science, 164. 839 , 1969).

La DHEA et les composés apparentés sont capables de réduire la capacité de former des colonies des cellules mononucléaires du sang périphérique humain infectées par le virus d'Epstein-Barr (un her-pèsvirus) à des concentrations de 10-100 nM (Carcinogenesis, Vol. 2, pp 883-886,1981). DHEA and related compounds are capable of reducing the ability to form colonies of human peripheral blood mononuclear cells infected with Epstein-Barr virus (a herpesvirus) at concentrations of 10-100 nM (Carcinogenesis, Vol . 2, pp 883-886,1981).

La DHEA inhibe également l'activation ducomplément et est donc utile dans la prophylaxie de l'oedème angioneurotique héréditaire (Hidvegi et coll., Complementi; 201,1984). La DHEA empêche également la formation d'autoanticorps dans le modèle murin du lupus érythémateux disséminé (LED) et beaucoup des caractéristiques du SIDA constitué sont considérées comme semblables à celles du LED (Lucas et coll., J. Clin. Invest., Z5:2091,1985). DHEA also inhibits the activation of the supplement and is therefore useful in the prophylaxis of hereditary angioneurotic edema (Hidvegi et al., Complementi; 201,1984). DHEA also prevents the formation of autoantibodies in the murine model of systemic lupus erythematosus (SLE) and many of the features of established AIDS are considered to be similar to those of SLE (Lucas et al., J. Clin. Invest., Z5: 2091.1985).

L'invention a pour objet l'utilisation d'un composé de formule générale (!) The subject of the invention is the use of a compound of general formula (!)

(I) (I)

dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou de brome et Ri est un atome d'hydrogène, un groupe SO2OM, dans lequel M est un atome d'hydrogène ou de sodium, un groupe sulfatide in which R is a hydrogen or bromine atom and Ri is a hydrogen atom, a SO2OM group, in which M is a hydrogen or sodium atom, a sulfatide group

—S0_0-CH_. CH.CH_ O.CO.R-2 2 | 2 o o.co. r2 —S0_0-CH_. CH.CH_ O.CO.R-2 2 | 2 o o.co. r2

ou un groupe phosphatide or a phosphatide group

O O

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-P-O.CH,.ÇH.CH,.O.CO.R, || ' I * 3 -P-O.CH, .ÇH.CH, .O.CO.R, || 'I * 3

O O.CO.R2 O O.CO.R2

dans lesquels chacun de Rz et R3, qui peuvent être semblables ou différents, est un radical alkyle à chaîne droite ou ramifiée de 1 à 14 atomes de carbone, ou un qroupe glucuronide in which each of Rz and R3, which may be similar or different, is a straight or branched chain alkyl radical of 1 to 14 carbon atoms, or a glucuronide group

COOH COOH

le trait discontinu représente une double liaison facultative et l'atome d'hydrogène de la position 5 est présent en la configuration a ou p, ou le composé comprend un mélange des deux configurations, pour la fabrication d'un médicament utile dans la prophylaxie et le traitement d'une infection rétrovirale ou d'une complication ou conséquence de celle-ci. the broken line represents an optional double bond and the hydrogen atom of position 5 is present in the configuration a or p, or the compound comprises a mixture of the two configurations, for the manufacture of a medicament useful in prophylaxis and the treatment of a retroviral infection or a complication or consequence thereof.

Lorsque Ri est autre qu'un atome d'hydrogène, les composés sont des composés conjugués. When R 1 is other than a hydrogen atom, the compounds are conjugated compounds.

De préférence, dans le composé de formule (I), R et Ri sont chacun un atome d'hydrogène. Un composé particulièrement préféré est la déhydroépiandrostérone, dans laquelle R et Ri sont chacun un hydro4 Preferably, in the compound of formula (I), R and Ri are each a hydrogen atom. A particularly preferred compound is dehydroepiandrosterone, in which R and Ri are each hydro4

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gène et la double liaison est présente. gene and the double bond is present.

Dans un autre mode de réalisation de l'invention, le composé utilisé est la 16<x-bromoépiandrostérone, dans laquelle R est Br, Ri est H et la double liaison est présente. Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, le composé utilisé est l'étiocholanolone, dans laquelle R et Ri sont chacun un atome d'hydrogène et la double liaison est absente. ' In another embodiment of the invention, the compound used is 16 <x-bromoepiandrosterone, in which R is Br, Ri is H and the double bond is present. In yet another embodiment of the invention, the compound used is etiocholanolone, in which R and Ri are each a hydrogen atom and the double bond is absent. ''

D'autres composés préférés sont le sulfate de déhydroépiandrostérone, dans lequel R est H, Ri est SO2.OM, M est comme précédemment défini et la double liaison est présente, et la 5ß-androstane-3ß-ol-17-one. Other preferred compounds are dehydroepiandrosterone sulfate, where R is H, Ri is SO2.OM, M is as previously defined and the double bond is present, and 5ß-androstane-3ß-ol-17-one.

Sinon, le composé est choisi parmi les sulfatides, phosphatides ou glucuronide de déhydroépiandrostérone, où R est H et Ri est un groupe sulfatide, phosphatide ou glucuronide, comme précédemment défini, et la double liaison est présente. Otherwise, the compound is chosen from sulfatides, phosphatides or dehydroepiandrosterone glucuronide, where R is H and Ri is a sulfatide, phosphatide or glucuronide group, as previously defined, and the double bond is present.

Les préparations pharmaceutiques, utiles dans la prophylaxie et le traitement d'une infection rétrovi-rale, ou d'une complication ou d'une conséquence de celie-ci, comprennent une quantité prophylactique ou thérapeutique efficace d'au moins un composé de formule (I) comme principe actif. Pharmaceutical preparations, useful in the prophylaxis and treatment of a retroviral infection, or of a complication or a consequence thereof, comprise an effective prophylactic or therapeutic amount of at least one compound of formula ( I) as an active ingredient.

Les compositions pharmaceutiques peuvent être administrée par voie locale ou générale. On entend par administration générale un mode ou une voie quelconque d'administration qui assure l'apparition de teneurs efficaces en principe actif dans le sang ou en un site éloigné du site d'administration dudit principe actif. The pharmaceutical compositions can be administered by local or general route. The term “general administration” is understood to mean any mode or route of administration which ensures the appearance of effective contents of active principle in the blood or at a site distant from the site of administration of said active principle.

La composition pharmaceutique pour l'administration par voie générale peut être présentée pour l'administration entéraie, parentérale ou locale. En fait, ces trois types de présentation peuvent être utilisés simultanément pour assurer l'administration par voie générale du principe actif. The pharmaceutical composition for general administration can be presented for enteral, parenteral or local administration. In fact, these three types of presentation can be used simultaneously for the general administration of the active ingredient.

Des présentations appropriées à l'administration orale comprennent les capsules de gélatine dures ou molles, les dragées, les pilules, les comprimés, y compris les comprimés enrobés, les élixirs, les suspensions, les sirops ou les inhalations et les formes à libération contrôlée correspondantes. Forms suitable for oral administration include hard or soft gelatin capsules, dragees, pills, tablets, including coated tablets, elixirs, suspensions, syrups or inhalations and corresponding controlled release forms .

Les formes solides d'administration, en plus de celles présentées pour l'administration orale, comprennent les suppositoires. Solid forms of administration, in addition to those presented for oral administration, include suppositories.

Le composé de formule (I) peut également être administré sous forme d'un implant. The compound of formula (I) can also be administered in the form of an implant.

Des présentations appropriées à l'administration locale comprennent les crèmes, les gels, les gelées, les mucilages, les pâtes et les pommades. Les composés peuvent également être présentés pour l'administration transdermique, par exemple sous forme de timbres, afin d'assurer une administration générale. Presentations suitable for local administration include creams, gels, jellies, mucilages, pastes and ointments. The compounds can also be presented for transdermal administration, for example in the form of patches, to provide general administration.

Des solutions injectables appropriées comprennent les solutions injectables par voie intraveineuse, sous-cutanée et intramusculaire. Suitable injectable solutions include intravenous, subcutaneous and intramuscular injectable solutions.

Le composé de formule (I) peut également être administré sous forme d'une solution pour perfusion ou d'une inhalation ou pulvérisation nasales. The compound of formula (I) can also be administered in the form of a solution for infusion or a nasal inhalation or spray.

La composition pharmaceutique est administrée sous forme de doses unitaires comprenant de 1 à 1 000 mg de principe actif. De préférence, chaque dose unitaire comprend de 50 à 500 mg de principe actif. The pharmaceutical composition is administered in the form of unit doses comprising from 1 to 1000 mg of active principle. Preferably, each unit dose comprises from 50 to 500 mg of active principle.

Selon un mode de traitement le composé de formule (I) est administré à raison de 1 à 10 doses unitaires par jour. L'administration du composé de formule (I) est poursuivie pendant une période d'au moins cinq jours et dans certains cas peut être administrée pendant la vie entière du sujet. According to one mode of treatment, the compound of formula (I) is administered in a proportion of 1 to 10 unit doses per day. Administration of the compound of formula (I) is continued for a period of at least five days and in some cases can be administered for the lifetime of the subject.

Les composés répondant à la formule (I) présentés et définis ci-dessus sont particulièrement utiles pour la prophylaxie et le traitement d'une infection provoquée par un HIV ou d'une complication ou conséquence de celle-ci. The compounds corresponding to the formula (I) presented and defined above are particularly useful for the prophylaxis and the treatment of an infection caused by an HIV or of a complication or consequence thereof.

L'invention comprend aussi l'utilisation d'un composé de formule (I) pour la fabrication d'un médicament destiné à l'emploi dans la prophylaxie et le traitement du syndrome immunodéficitaire acquis (SIDA). The invention also includes the use of a compound of formula (I) for the manufacture of a medicament for use in the prophylaxis and treatment of acquired immunodeficiency syndrome (AIDS).

L'invention comprend également l'utilisation d'un composé de formule (I) pour la fabrication d'un médicament destiné à l'emploi dans la prophylaxie et le traitement du syndrome immunodéficitaire acquis para-SIDA (ARC). The invention also includes the use of a compound of formula (I) for the manufacture of a medicament for use in the prophylaxis and treatment of acquired immunodeficiency syndrome para-AIDS (ARC).

L'invention comprend aussi l'utilisation d'un composé de formule (I) pour la fabrication d'un médicament contenant en outre un renforçateur ou immunomodulateur du système immunitaire et destiné à l'emploi dans la prophylaxie et le traitement d'une infection rétrovirale ou d'une complication ou conséquence de celle-ci. Le renforçateur ou immunomodulateur est utile pour accroître la production des cellules T par la moelle osseuse. The invention also includes the use of a compound of formula (I) for the manufacture of a medicament further containing a booster or immunomodulator of the immune system and intended for use in the prophylaxis and treatment of an infection retroviral or a complication or consequence thereof. The enhancer or immunomodulator is useful for increasing the production of T cells by the bone marrow.

Les renforçateurs ou immunomodulateurs appropriés du système immunitaire utiles selon l'invention sont choisis parmi l'ABPP (Bropirimine); l'Ampligen (ARN à un défaut d'appariement) mis au point par Du-Pont/HEM Research; l'anticorps anti-a-interféron humain fabriqué par Advance Biotherapy and Concepts; un anticorps anti-SIDA (Nisshon Food); PAS-101 (immunostimulant à base de métal lourd); l'acide ascorbique et ses dérivés; le p-interféron; le Carrosyn (polymannoacétate); le Ciamexon fabriqué par Boehringer Mannheim; le Cyclosporin; la cimétidine; le CL246, 738 fabriqué par American Cyanamid; le facteur de stimulation des colonies (CM-CSF) fabriqué par Sandoz and Genetics Institute; le dinitro-chlorobenzène (DNCB); l'a-interféron; le 7-interféron; un glucane; l'Hyperimmue (y-globuline) fabriqué par Bayer; l'IMREG-1 (dialysat leucocytaire) et l'IMREG-2 fabriqués par IMREG; Plmmuthiol (diéthylthiocarbamate de sodium) fabriqué par l'Institut Mérieux; l'lnterleukin-1 et l'lnterleukin-2 fabriqués par Cetus Corporation, Hoffmann-La Roche et Immunex; l'isoprinosine (inosine pranobex); le Kres- The appropriate boosters or immunomodulators of the immune system useful according to the invention are chosen from ABPP (Bropirimine); Ampligen (RNA with a mismatch) developed by Du-Pont / HEM Research; the anti-human interferon antibody produced by Advance Biotherapy and Concepts; an anti-AIDS antibody (Nisshon Food); PAS-101 (heavy metal immunostimulant); ascorbic acid and its derivatives; p-interferon; Carrosyn (polymannoacetate); Ciamexon manufactured by Boehringer Mannheim; Cyclosporin; cimetidine; CL246,738 manufactured by American Cyanamid; colony stimulating factor (CM-CSF) manufactured by Sandoz and Genetics Institute; dinitro-chlorobenzene (DNCB); a-interferon; 7-interferon; a glucan; Hyperimmue (y-globulin) manufactured by Bayer; IMREG-1 (leukocyte dialysate) and IMREG-2 manufactured by IMREG; Plmmuthiol (sodium diethylthiocarbamate) manufactured by the Institut Mérieux; Interleukin-1 and Interleukin-2 manufactured by Cetus Corporation, Hoffmann-La Roche and Immunex; isoprinosine (inosine pranobex); the Kres-

5 5

10 10

15 15

20 20

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30 30

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40 40

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CH 675 358 A5 CH 675 358 A5

tin fabriqué par Sankyo; le LC-9018 mis au point par Yakuit ; Le Lentinan fabriqué par Ajinomo-to/Yamanouchi; le LF-1695 fabriqué par Fournier, la MET-ENK (méthionine-enképhaline) fabriquée par TNI Pharmaceutical et Sygma Chemicals; le Minophagen C; le MTP-PE (muramyltripeptide) fabriqué par Ciba-Geigy; le Trexan (Naltrexone) fabriqué par DuPont; le Neutropin; Pimmunomodulateur de l'ARN mis au point par Nippon Shingaku; le shosaikoto et le ginseng; le facteur humoral thymique, le TP-5 (Thymopentin) fabriqué par Ortho Pharmaceuticals; la fraction 5 et la fraction 1 de la thymosine; la thy-mostimuline; le TNF (facteur de nécrose tumorale) fabriqué par Genentech et les préparations de vitamines B. tin made by Sankyo; LC-9018 developed by Yakuit; Lentinan made by Ajinomo-to / Yamanouchi; LF-1695 manufactured by Fournier, MET-ENK (methionine-enkephalin) manufactured by TNI Pharmaceutical and Sygma Chemicals; Minophagen C; MTP-PE (muramyltripeptide) manufactured by Ciba-Geigy; Trexan (Naltrexone) manufactured by DuPont; Neutropin; RNA immunomodulator developed by Nippon Shingaku; shosaikoto and ginseng; thymic humoral factor, TP-5 (Thymopentin) manufactured by Ortho Pharmaceuticals; fraction 5 and fraction 1 of thymosin; thy-mostimulin; TNF (tumor necrosis factor) manufactured by Genentech and preparations of B vitamins.

L'invention comprend aussi l'utilisation d'un composé de formule (I), pour la fabrication d'un médicament contenant en outre un agent antiviral. The invention also includes the use of a compound of formula (I), for the manufacture of a medicament further containing an antiviral agent.

Le composé de formule (I) et l'agent antiviral peuvent être combinés en une forme d'administration unique ou être dans des formes d'administration distinctes. Les agents antiviraux appropriés comprennent l'AL-721 (mélange de lipides) fabriqué par Ethigen Corporation and Matrix Research Laboratories; l'ester méthylique de l'amphotéricine B; i'Ampligen (ARN à défaut d'appariement) mis au point par Du-Pont/HEM Research; un anticorps anti-SIDA, (Nisshon Food); l'AS-101 (immunostimulant à base de métal lourd); l'AZT (azidothymidine/Retrovir/Zidovudine) fabriquée par Burroughs Wellcome; le Betaseron (p-interféron) fabriqué par Triton Biosciences (Shell Oil); Phydroxytoluène butylé; le Carrosyn (polymannoacétate); la Castanospermine; le Contracan (dérivé d'acide stéarique); la Crème Pharmatex (contient du chlorure do benzalkonium) fabriquée par Pharmelac; le CS-87 (dérivé non substitué sur la position 5 de la Zidovudine); le Cytovene (ganciclovir) fabriqué par Syntex Corporation; la DDC (didésoxycytidine) fabriquée par Hoffmann-La Roche et d'autres analogues nucléosidiques; le sulfate de dextran; la D-pénicillamine (3-mercapto-D-valine) fabriquée par Carter-Wallis et Degussa Pharmaceutical; le Foscarnet (phosphonoformiate trisodique) fabriqué par Astra AB; l'acide fusidique fabriqué par Leo Lovens; la glycyrrhizine (un constituant de la racine de réglisse); l'HPA-23 (ammonium-21-tungsto-9-antimoniate) fabriqué par Rhône-Poulenc Santé; l'agent antiviral à virus immun humain mis au point par Porton Products International; l'Ornidyl (éflornithine) fabriqué par Merreli Dow; le Nonoxinol; i'iséthionate de Pentamidine (PENTAM 300) fabriqué par Lypho Med; le Peptide T (séquence octapeptidi-que) fabriqué par Peninsula Laboratories; la phénytoïne fabriquée par Park-Davis (Warner-Lambert Company); Le Ribavirin; le Rifabutin (ansamycine) fabriqué par Adria Laboratories; le rsT4 (T4 soluble recombinant) fabriqué par Biogen, Genentech et Smith Kline & French, le Trimetrexate fabriqué par Warner-Lambert Company; le SK-818 (agent antiviral dérivé du germanium) fabriqué par Sanwa Kagaku; la suramine et ses analogues fabriqués par Miles Pharmaceuticals; PUA001 fabriqué par Ueno Fine Chemicals Industry; le Wellferon (a-interféron) fabriqué par Burroughs Wellcome; Le Zovirax (acyclovir) fabriqué par Burroughs Wellcome. The compound of formula (I) and the antiviral agent can be combined in a single administration form or be in separate administration forms. Suitable antiviral agents include AL-721 (lipid blend) manufactured by Ethigen Corporation and Matrix Research Laboratories; amphotericin B methyl ester; i'Ampligen (RNA in the absence of pairing) developed by Du-Pont / HEM Research; an anti-AIDS antibody, (Nisshon Food); AS-101 (heavy metal immunostimulant); AZT (azidothymidine / Retrovir / Zidovudine) manufactured by Burroughs Wellcome; Betaseron (p-interferon) manufactured by Triton Biosciences (Shell Oil); Butylated hydroxytoluene; Carrosyn (polymannoacetate); Castanospermine; Contracan (derived from stearic acid); Pharmatex Cream (contains benzalkonium chloride) manufactured by Pharmelac; CS-87 (unsubstituted derivative at position 5 of Zidovudine); Cytovene (ganciclovir) manufactured by Syntex Corporation; DDC (dideoxycytidine) manufactured by Hoffmann-La Roche and other nucleoside analogs; dextran sulfate; D-penicillamine (3-mercapto-D-valine) manufactured by Carter-Wallis and Degussa Pharmaceutical; Foscarnet (trisodium phosphonoformate) manufactured by Astra AB; fusidic acid made by Leo Lovens; glycyrrhizin (a constituent of licorice root); HPA-23 (ammonium-21-tungsto-9-antimoniate) manufactured by Rhône-Poulenc Santé; the human immune virus antiviral agent developed by Porton Products International; Ornidyl (eflornithine) manufactured by Merreli Dow; Nonoxinol; Pentamidine isethionate (PENTAM 300) manufactured by Lypho Med; Peptide T (octapeptidic sequence) manufactured by Peninsula Laboratories; phenytoin manufactured by Park-Davis (Warner-Lambert Company); Ribavirin; Rifabutin (ansamycin) manufactured by Adria Laboratories; rsT4 (recombinant soluble T4) manufactured by Biogen, Genentech and Smith Kline & French, Trimetrexate manufactured by Warner-Lambert Company; SK-818 (germanium-derived antiviral agent) manufactured by Sanwa Kagaku; suramin and its analogs manufactured by Miles Pharmaceuticals; PUA001 manufactured by Ueno Fine Chemicals Industry; Wellferon (a-interferon) manufactured by Burroughs Wellcome; Zovirax (acyclovir) made by Burroughs Wellcome.

On notera que les agents antiviraux précités comprennent certains des agents précédemment mentionnés pour l'utilisation comme immunomodulateur avec un composé de formule (I) selon l'invention. On sait par exemple que l'isoprinosine agit comme un immunomodulateur et également possède des propriétés antivirales. Le terme «agent antiviral» tel qu'on l'emploie ici comprend les agents qui gênent la pénétration des rétrovirus dans une celiule. It will be noted that the above-mentioned antiviral agents include some of the agents previously mentioned for use as an immunomodulator with a compound of formula (I) according to the invention. We know for example that isoprinosine acts as an immunomodulator and also has antiviral properties. The term "antiviral agent" as used herein includes agents that interfere with the penetration of retroviruses into a cell.

L'invention comprend également l'utilisation d'un composé de formule (I) pour la fabrication d'un médicament contenant en outre un immunomodulateur ou un agent antiviral et destiné à la prophylaxie et le traitement des infections opportunistes associées au SIDA. The invention also includes the use of a compound of formula (I) for the manufacture of a medicament further containing an immunomodulator or an antiviral agent and intended for the prophylaxis and treatment of opportunistic infections associated with AIDS.

Comme indiqué ci-après, les composés de formule (I) sont particulièrement appropriés à l'utilisation comme inhibiteur des rétrovirus, en particulier de l'HIV dans les macrophages. As indicated below, the compounds of formula (I) are particularly suitable for use as an inhibitor of retroviruses, in particular of HIV in macrophages.

Dans les dessins annexés: In the accompanying drawings:

La figure 1 est une représentation schématique du pourcentage d'effet cytopathogène en fonction de la concentration du médicament dans la lignée de cellules tumorales VB pour deux composés appelés A et B utilisés selon l'invention; FIG. 1 is a schematic representation of the percentage of cytopathogenic effect as a function of the concentration of the drug in the VB tumor cell line for two compounds called A and B used according to the invention;

La figure 2 est une représentation schématique du pourcentage d'expression de p24 en fonction de la concentration du médicament dans des lymphocytes activés du sang périphérique pour deux composés appelés A et B utilisés selon l'invention; FIG. 2 is a diagrammatic representation of the percentage of expression of p24 as a function of the concentration of the drug in activated lymphocytes of peripheral blood for two compounds called A and B used according to the invention;

La figure 3 est une représentation schématique du pourcentage d'expression de p24 en fonction de la concentration du médicament dans des macrophages humains pour deux composés appelés A et B utilisés selon l'invention; FIG. 3 is a schematic representation of the percentage of expression of p24 as a function of the concentration of the drug in human macrophages for two compounds called A and B used according to the invention;

La figure 4 est une représentation schématique du pourcentage d'expression de p24 en fonction de la concentration du médicament dans des macrophages infectés par HIV pour deux composés appelés A et B utilisés selon l'invention; et FIG. 4 is a schematic representation of the percentage of expression of p24 as a function of the concentration of the drug in macrophages infected with HIV for two compounds called A and B used according to the invention; and

La figure 5 est une représentation schématique du pourcentage d'expression de p24 en fonction de la concentration du médicament pour des macrophages humains présentant une infection chronique pour deux composés appelés A et B utilisés selon l'invention. FIG. 5 is a schematic representation of the percentage of expression of p24 as a function of the concentration of the drug for human macrophages presenting a chronic infection for two compounds called A and B used according to the invention.

L'invention est de plus illustrée par les exemples suivants. The invention is further illustrated by the following examples.

Dans les exemples 1 à 7 suivants, le composé A correspond à la déhydroépiandrostérone et le composé B correspond à la 16a-bromoépiandrostérone. In Examples 1 to 7 below, compound A corresponds to dehydroepiandrosterone and compound B corresponds to 16a-bromoepiandrosterone.

6 6

5 5

10 10

15 15

20 20

25 25

30 30

35 35

40 40

45 45

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65 65

CH 675 358 A5 CH 675 358 A5

Relativement aux exemples 1 à 7, les matières utilisées et les analyses et déterminations effectuées sont comme suit: In relation to Examples 1 to 7, the materials used and the analyzes and determinations carried out are as follows:

1. Source d'HIV: pour analyser les effets antiviraux dans les exemples 1 à 7, on utilise trois souches secondaires d'HIV: la souche HTLV-IIIB d'HIV, actuellement entretenue en culture tissulaire dans la lignée de cellules H9; l'isolât HIV-DV à faibles passages, une souche qui s'est révélée infecter les macrophages humains; et la souche ARV-2 HIV, isolée pour la première fois par le docteur Jay Levy de San Francisco. Ces trois souches virales ont été cultivées au Laboratoire de Culture Tissulaire de ia Division d'Activité du SIDA de l'Hôpital Général de San Francisco, des titres de 10~4 à 10-6 unité infectieuse/ml étant couramment obtenus. 1. Source of HIV: to analyze the antiviral effects in Examples 1 to 7, three secondary strains of HIV are used: the HTLV-IIIB strain of HIV, currently maintained in tissue culture in the H9 cell line; the low-pass HIV-DV isolate, a strain that has been shown to infect human macrophages; and the ARV-2 HIV strain, isolated for the first time by Doctor Jay Levy of San Francisco. These three viral strains were cultivated in the Tissue Culture Laboratory of the AIDS Activity Division of the San Francisco General Hospital, titers of 10 ~ 4 to 10-6 infectious unit / ml being commonly obtained.

2. Sources de cellules: la lignée de cellules VB utilisée dans l'exemple 1 est une lignée de cellules de lymphome T très sensible à l'infection par HIV et qui exprime des taux élevés de molécules de surface cellulaire CD4. Cette lignée cellulaire forme des syncytiums en deux jours après l'infection par toutes les souches d'HIV étudiées à ce jour. La lignée de celiules H9 est constituée de cellules T ALL sensibles à l'infection par pratiquement toutes les souches d'HIV, mais qui cependant ne forment pas de cellules syncytiales. On l'utilise pour l'évaluation quantitative de l'infection en l'absence de formation de syncy-tium, l'infection étant évaluée quantitativement par des déterminations d'immunofluorescence. La lignée des cellules HXB/H9 (exemple 6) consiste en une population de cellules H9 produisant chroniquement la souche HTLV-IIIB d'HIV et qui est utilisée dans les expériences de détermination des effets antiviraux sur des lignées cellulaires à infection chronique. On prépare les macrophages humains à partir de cellules mononucléaires du sang périphérique soit provenant d'une banque de sang sous forme d'une couche leucocytaire, soit sous forme d'une préparation obtenue par leucaphérèse. Crowe et coll., supra. ont mis au point un système de détermination qui permet l'évaluation quantitative de l'infection à HIV et l'inhibition de l'infection par analyse immunocytofluorographique. Pour évaluer quantitativement l'infection à HIV des macrophages, on cultive les macrophages dans des récipients de culture en Téflon (marque de fabrique), les macrophages étant entretenus en culture en suspension in vitro jusqu'à six mois. On effectue ensuite une coloration par immunofluorescence de la surface cellulaire et du cytoplasme pour évaluer quantitativement les antigènes des macrophages par cytométrie en flux. 2. Cell Sources: The VB cell line used in Example 1 is a T lymphoma cell line very sensitive to HIV infection and which expresses high levels of CD4 cell surface molecules. This cell line forms syncytiums in two days after infection with all the strains of HIV studied to date. The H9 cell line consists of T ALL cells sensitive to infection by practically all strains of HIV, but which however do not form syncytial cells. It is used for the quantitative evaluation of the infection in the absence of syncy-tium formation, the infection being evaluated quantitatively by immunofluorescence determinations. The HXB / H9 cell line (Example 6) consists of a population of H9 cells chronically producing the HTLV-IIIB strain of HIV and which is used in the experiments for determining the antiviral effects on cell lines with chronic infection. Human macrophages are prepared from peripheral blood mononuclear cells either from a blood bank in the form of a buffy coat, or in the form of a preparation obtained by leukapheresis. Crowe et al., Supra. have developed a determination system which allows quantitative evaluation of HIV infection and inhibition of infection by immunocytofluorographic analysis. To quantitatively assess the HIV infection of the macrophages, the macrophages are cultured in Teflon culture vessels (trademark), the macrophages being maintained in suspension culture in vitro for up to six months. Immunofluorescence staining of the cell surface and of the cytoplasm is then carried out in order to quantitatively evaluate the antigens of the macrophages by flow cytometry.

3. Cytométrie en flux: on utilise, pour l'analyse des échantillons infectés par HIV, un Ortho Cytofluor-graf ll-S (marque de fabrique) ayant une cellule à écoulement munie d'une protection contre les risques biologiques. On détecte les antigènes HIV p24 en utilisant un anti-p24 monoclonal de souris (DuPont) et on identifie les anticorps de souris en utilisant une IgG de chèvre anti-souris conjuguée à de l'isothiocya-nate de fluorescéine (FITC). 3. Flow cytometry: an Ortho Cytofluor-graf ll-S (trademark) having a flow cell provided with protection against biological risks is used for the analysis of samples infected with HIV. HIV p24 antigens are detected using a mouse monoclonal anti-p24 (DuPont) and mouse antibodies are identified using anti-mouse goat IgG conjugated to fluorescein isothiocya-nate (FITC).

4. Détection de l'antigène HIV p24 soluble: on mesure les antigènes p24 solubles avec un système de détection de l'antigène HIV Abbott. 4. Detection of the soluble HIV p24 antigen: the soluble p24 antigens are measured with an HIV Abbott antigen detection system.

5. Inhibition de l'infection aiguë: on utilise plusieurs déterminations pour évaluer l'inhibition de l'infection aiguë: elles comprennent: 5. Inhibition of acute infection: several determinations are used to assess the inhibition of acute infection: they include:

a) l'inhibition de la formation d'une cellule géante multinucléée dans les cellules VB à infection aiguë infectées à raison d'un virus par cellule et, deux jours après l'infection en présence ou non de diverses concentrations de médicaments, détermination de la formation des cellules géantes multinucléées. (On élimine le virus libre par lavage après un prétraitement d'incubation d'une heure à la température ambiante). L'anticorps monoclonal anti-Leu3a inhibe complètement la formation des cellules syncytiales et on l'utilise comme témoin positif de l'inhibition de l'infection. On isole également les surnageants et on détermine le taux d'antigène HIV p24. On mesure le virus infectieux dans les cultures traitées à l'aide d'une détermination syncytiale, comme décrit ci-dessus. a) inhibition of the formation of a multinucleated giant cell in acute infected BV cells infected with one virus per cell and, two days after infection in the presence or absence of various concentrations of drugs, determination of the formation of giant multinucleated cells. (The free virus is eliminated by washing after a one hour incubation pretreatment at room temperature). The anti-Leu3a monoclonal antibody completely inhibits the formation of syncytial cells and is used as a positive control for the inhibition of infection. The supernatants are also isolated and the level of HIV p24 antigen is determined. The infectious virus is measured in the treated cultures using syncytial determination, as described above.

b) Bien que la lignée de cellules de lymphome T VB se comporte de façon semblable aux lymphocytes T CD4-positifs du sang périphérique en ce qui concerne les effets cytopathogènes provoqués par l'HIV, les expériences décrites ci-dessus ont été effectuées sur des lymphocytes activés par la Phytohämagglutinine (PHA) pour déterminer si les lymphocytes étaient plus ou moins sensibles aux composés A et B que la lignée de cellules VB. Dans ce système de détermination, au moment où les cellules géantes multinucléées apparaissent dans les cultures de lymphocytes infectés, on analyse les surnageants pour déterminer la présence d'antigènes HIV p24 et on les titre sur des cellules indicatrices de lymphome VB pour déterminer le titre du virus infectieux présent en chaque point. b) Although the VB T-cell line behaves similarly to CD4-positive T cells in peripheral blood with regard to the cytopathogenic effects caused by HIV, the experiments described above were carried out on Phytohämagglutinin (PHA) activated lymphocytes to determine whether the lymphocytes were more or less sensitive to compounds A and B than the VB cell line. In this determination system, at the moment when the multinucleated giant cells appear in the cultures of infected lymphocytes, the supernatants are analyzed to determine the presence of HIV p24 antigens and they are titrated on VB lymphoma indicator cells to determine the titer of the infectious virus present at each point.

c) Pour déterminer si les composés A et B sont efficaces pour inhiber l'infection aiguë des macrophages, on expose des macrophages de culture en Téflon à raison de un virus par cellule à l'HIV-DV en présence ou non de diverses concentrations du médicament (exemples 3 à 5). Normalement, l'expression d'HIV atteint un maximum dans les macrophages humains environ dix jours après l'infection initiale. Donc, après une heure d'infection à la température ambiante suivie d'un lavage et d'une remise en suspension des macrophages à diverses concentrations de médicament, on colore les macrophages pour rechercher la présence de l'antigène p24 au dixième jour. On analyse les surnageants de culture de ces macrophages pour rechercher la présence de p24 soluble et du virus infectieux, comme décrit ci-dessus. c) To determine whether compounds A and B are effective in inhibiting acute infection of macrophages, Teflon culture macrophages are exposed to a virus per cell at HIV-DV in the presence or not of various concentrations of the medication (examples 3 to 5). Normally, HIV expression peaks in human macrophages about ten days after the initial infection. Therefore, after an hour of infection at room temperature followed by washing and resuspension of the macrophages at various concentrations of drug, the macrophages are stained to look for the presence of the p24 antigen on the tenth day. The culture supernatants of these macrophages are analyzed for the presence of soluble p24 and of the infectious virus, as described above.

6. Analyse des cellules à infection chronique: pour déterminer si les composés A et B sont efficaces pour inhiber l'expression d'HIV dans les macrophages et les cellules T à infection chronique, on effectue les expériences suivantes. On soumet la lignée de cellules T4 à infection chronique HXB/H9 à l'action de diverses concentrations du médicament pendant quatre jours in vitro. Au quatrième jour, on analyse les 6. Analysis of cells with chronic infection: to determine whether compounds A and B are effective in inhibiting the expression of HIV in macrophages and T cells with chronic infection, the following experiments are carried out. The T4 cell line with chronic HXB / H9 infection is subjected to the action of various drug concentrations for four days in vitro. On the fourth day, we analyze the

7 7

5 5

10 10

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30 30

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CH 675 358 A5 CH 675 358 A5

cellules HXB pour rechercher la présence de p24 à l'intérieur du cytoplasme et on analyse les surnageants pour rechercher la présence du virus infectieux comme décrit ci-dessus. On effectue ces mêmes expériences sur des macrophages infectés in vitro et qui se sont révélés présenter une infection chronique selon l'analyse cytofluorographique. HXB cells for the presence of p24 inside the cytoplasm and the supernatants are analyzed for the presence of the infectious virus as described above. These same experiments are carried out on macrophages infected in vitro and which have been found to present a chronic infection according to cytofluorographic analysis.

7. Analyse de la toxicité non spécifique pour les cellules cibles avec les composés A et B. On expose des lignées de cellules VB, H9 et HXB à différentes concentrations des composés A et B, de même que des macrophages humains normaux, pendant le temps où Je médicament est au contact de chaque lignée cellulaire, comme décrit dans les déterminations ci-dessus. On dénombre les cellules et on détermine le nombre des cellules vivantes relativement aux cellules mortes par l'exclusion du bleu Trypan. Ces analyses sont nécessaires pour déterminer un index thérapeutique entre les effets toxiques non spécifiques sur les cellules décrites par rapport aux effets antiviraux potentiels efficaces in vitro (exemple 6). 7. Analysis of non-specific toxicity for target cells with compounds A and B. VB, H9 and HXB cell lines are exposed to different concentrations of compounds A and B, as well as normal human macrophages, over time where the drug is in contact with each cell line, as described in the determinations above. The cells are counted and the number of living cells relative to the dead cells is determined by excluding the blue Trypan. These analyzes are necessary to determine a therapeutic index between the non-specific toxic effects on the cells described in relation to the potential antiviral effects which are effective in vitro (Example 6).

Exemple 1 Example 1

Inhibition des effets cytopathogènes liés à HIV dans la lignée de cellules tumorales VB Inhibition of HIV-related cytopathogenic effects in the VB tumor cell line

On étudie les composés A et B pour déterminer l'inhibition de l'effet cytopathogène relatif aux cellules de lymphome T à diverses concentrations médicamenteuses après infection aiguë avec HIV pendant 48 heures. La figure 1 indique le pourcentage d'effet cytopathogène observé dans des cultures exposées à diverses concentrations des composés A et B. On voit que le composé B est plus actif pour inhiber la formation de cellules syncytiales multinucléées provoquée par HIV que le composé A. Compounds A and B are studied to determine the inhibition of the cytopathogenic effect relating to T lymphoma cells at various drug concentrations after acute infection with HIV for 48 hours. FIG. 1 indicates the percentage of cytopathogenic effect observed in cultures exposed to various concentrations of compounds A and B. It can be seen that compound B is more active in inhibiting the formation of multinucleated syncytial cells caused by HIV than compound A.

Les valeurs de l'effet cytopathogène illustrées par la figure 1 sont la moyenne de deux expériences. Deux expériences ultérieures utilisant les composés A et B après dilution dans le diméthylsulfoxyde (DMSO) ont révélé un effet moins net. Il est possible que la diminution de l'effet notée dans les expériences ultérieures soit secondaire à des problèmes de stabilité du médicament. A la concentration molaire de 10-4, le composé B semble extrêmement toxique pour la lignée des cellules de lymphome T VB, une caractéristique que l'on n'observe pas avec les lymphocytes normaux du sang périphérique ou les macrophages exposés à une concentration molaire de 10~4 du composé B comme indiqué ci-après dans les exemples 2 et 3. The values of the cytopathogenic effect illustrated in FIG. 1 are the average of two experiments. Two subsequent experiments using compounds A and B after dilution in dimethyl sulfoxide (DMSO) revealed a less clear effect. It is possible that the decrease in the effect noted in subsequent experiments is secondary to problems of drug stability. At the molar concentration of 10-4, compound B appears to be extremely toxic to the VB T-cell line, a characteristic not seen with normal peripheral blood lymphocytes or macrophages exposed to molar concentration of 10 ~ 4 of compound B as indicated below in Examples 2 and 3.

Exemple 2 Example 2

Inhibition des effets cytopathogènes liés à HIV dans des lymphocytes activés du sano périphérique Inhibition of HIV-related cytopathogenic effects in activated sano-peripheral lymphocytes

Pour déterminer si les effets des composés A et B sur l'infection aiguë des cellules de lymphomes T VB qui apparaissent dans les lymphocytes du sang périphérique, on ajoute de l'HIV à raison d'un virus par cellule à des lymphocytes activés pendant 48 heures avec 2 ng/ml de PHA. Après l'infection initiale d'une heure, on lave les lymphocytes activés et on les remet en suspension pour les cultiver pendant une semaine. Des cellules géantes multinucléées commencent à se former environ 7 jours après l'infection initiale et on recueille alors les surnageants des cultures pour y déterminer la présence des antigènes HIV p24. L'accumulation des antigènes HIV p24 dans le surnageant illustre la production d'HIV par les cellules infectées. On notera sur la figure 2 que la production de l'antigène p24 est modérément inhibée à la concentration molaire de 10~4 des deux composés A et B et est légèrement moins inhibée à la concentration molaire de 10~5. Aucune toxicité notable n'est observée pour l'une ou l'autre des concentrations des médicaments avec les cultures de lymphocytes du sang périphérique. To determine if the effects of compounds A and B on acute infection of VB T-cell cells that appear in peripheral blood lymphocytes, one virus per cell is added to activated lymphocytes for 48 hours with 2 ng / ml of PHA. After the initial one hour infection, the activated lymphocytes are washed and resuspended for cultivation for one week. Multinucleated giant cells begin to form approximately 7 days after the initial infection and the culture supernatants are then collected to determine the presence of the HIV p24 antigens. The accumulation of HIV p24 antigens in the supernatant illustrates the production of HIV by the infected cells. Note in Figure 2 that the production of the p24 antigen is moderately inhibited at the molar concentration of 10 ~ 4 of the two compounds A and B and is slightly less inhibited at the molar concentration of 10 ~ 5. No significant toxicity is observed for any of the drug concentrations with cultures of peripheral blood lymphocytes.

Exemple 3 Example 3

Inhibition de la production d'HIV dans les macrophages humains normaux Inhibition of HIV production in normal human macrophages

Pour déterminer si les composés A et B sont susceptibles d'inhiber activement l'infection des macrophages humains normaux, on étudie, avec un spectre de concentrations des médicaments, l'inhibition de l'infection aiguë et l'inhibition de l'expression d'HIV dans des macrophages à infection chronique. La figure 3 indique la présence d'antigènes HIV p24 dans le surnageant des macrophages qui ont été infectés puis lavés et dont on a laissé l'infection se poursuivre pendant une semaine. Après l'infection aiguë (une heure), on incube les cellules dans diverses concentrations des composés A et B et, 7 jours après l'infection initiale, on recueille les surnageants pour déterminer quantitativement l'antigène p24. Dans une gamme très étendue de concentrations des médicaments (concentration molaire de 10-4 à 10-8), on observe une diminution notable d'environ 50% de la production des antigènes HIV p24. Des macrophages traités avec du DMSO (pour la concentration molaire du médicament de 10-4, la concentration finale du DMSO est de 0,05 %) aux concentrations requises pour dissoudre les composés A et B, on n'observe pas d'effets, donc ces effets sont apparemment secondaires aux actions des composés A et B. To determine whether compounds A and B are capable of actively inhibiting infection of normal human macrophages, the inhibition of acute infection and the inhibition of d expression are studied with a spectrum of drug concentrations. HIV in macrophages with chronic infection. FIG. 3 indicates the presence of HIV p24 antigens in the supernatant of macrophages which have been infected and then washed and whose infection has been allowed to continue for one week. After the acute infection (one hour), the cells are incubated in various concentrations of compounds A and B and, 7 days after the initial infection, the supernatants are collected to quantitatively determine the p24 antigen. In a very wide range of drug concentrations (molar concentration from 10-4 to 10-8), there is a significant decrease of about 50% in the production of HIV p24 antigens. Macrophages treated with DMSO (for the molar concentration of the drug of 10-4, the final concentration of DMSO is 0.05%) at the concentrations required to dissolve compounds A and B, no effects are observed, therefore these effects are apparently secondary to the actions of compounds A and B.

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Exemple 4 Example 4

Inhibition de l'antigène HIV o24 dans des macrophages infectés par HIV Inhibition of the HIV o24 antigen in macrophages infected with HIV

On analyse les cellules de l'expérience décrite dans l'exemple 3 et on analyse le cytoplasme pour déterminer la présente d'HIV p24 afin de déterminer directement si la production d'antigène HIV p24 est inhibée dans ces cellules infectées. La figure 4 illustre globalement trois expériences séparées utilisant des macrophages infectés de trois donneurs différents. On voit que la production cytoplasmique d'antigène HIV p24 est notablement inhibée à la concentration molaire de 10-4 par les deux médicaments et que ie composé A est même actif à des dilutions molaires de 10-6 pour inhiber la production d'antigène HIV p24 dans les macrophages infectés. Donc, la diminution d'HIV p24 dans les surnageants infectés semble être associée à une diminution de la production d'antigène HIV p24 dans les macrophages infectés. The cells of the experiment described in Example 3 are analyzed and the cytoplasm is analyzed to determine the presence of HIV p24 in order to directly determine whether the production of HIV p24 antigen is inhibited in these infected cells. FIG. 4 globally illustrates three separate experiments using infected macrophages from three different donors. It can be seen that the cytoplasmic production of HIV p24 antigen is notably inhibited at the molar concentration of 10-4 by the two drugs and that the compound A is even active at molar dilutions of 10-6 to inhibit the production of HIV antigen p24 in infected macrophages. Therefore, the decrease in HIV p24 in infected supernatants appears to be associated with a decrease in the production of HIV p24 antigen in infected macrophages.

Exemple 5 (comparatif) Example 5 (comparative)

On répète les mêmes expériences que celles décrites dans l'exemple 4 avec l'AZT à des concentrations de 0,05 jig/ml à 50 jig/ml sans différence par rapport aux valeurs témoins. L'inhibition de l'antigène HIV p24 semble donc être spécifique, au moins dans cet essai, des composés A et B et ne pas constituer une caractéristique de l'AZT, même à des doses très élevées. The same experiments are repeated as those described in Example 4 with AZT at concentrations of 0.05 µg / ml to 50 µg / ml without difference from the control values. The inhibition of the HIV p24 antigen therefore seems to be specific, at least in this test, of compounds A and B and does not constitute a characteristic of AZT, even at very high doses.

Exemple 6 Example 6

Essai de l'activité antivirale sur la lignée de cellules HXB à infection chronioue par HIV Testing of antiviral activity on the HXB cell line with chronic HIV infection

On soumet, à une détermination des effets antiviraux des composés A et B, la lignée de cellules HXB à infection chronique par HIV et, en dehors de la mort des cellules provoquée par le composé B aux concentrations molaires de 10-4, on n'observe pas d'inhibition spécifique de la production d'HIV ni des effets cytopathogènes dans la lignée de cellules de lymphomes à infection chronique. The HXB cell line with chronic HIV infection is subjected to a determination of the antiviral effects of compounds A and B and, apart from the cell death caused by compound B at molar concentrations of 10-4, no no specific inhibition of HIV production or cytopathogenic effects is observed in the lymphoma cell line with chronic infection.

Exemple 7 Example 7

Essai de l'activité antivirale sur des macrophages à infection chronioue à HIV Antiviral activity test on macrophages with chronic HIV infection

Comme les macrophages peuvent être infectés et produire de l'HIV pendant des périodes prolongées sans perte notable de la viabilité, on étudie des cellules à infection chronique, plus particulièrement une population présentant une positivité de l'antigène HIV entre 30 et 50%, pour étudier l'inhibition de la production cytoplasmique de l'antigène HIV p24. La figure 5 indique les résultats de trois expériences séparées. On notera une certaine inhibition de la production, de l'antigène HIV p24 pour les deux concentrations molaires de 10-4 et 10-5 des composés A et B, qui est cependant un peu inférieure à l'inhibition de l'infection aiguë des macrophages (figure 4). Ces valeurs suggèrent que la présence des composés A et B peut inhiber quelque peu la production d'antigène HIV p24 par des macrophages présentant une infection stable et une production chronique d'antigène. Since macrophages can be infected and produce HIV for prolonged periods without noticeable loss of viability, cells with chronic infection are studied, more particularly a population with an HIV antigen positivity between 30 and 50%, for to study the inhibition of the cytoplasmic production of the HIV p24 antigen. Figure 5 shows the results of three separate experiments. There is a certain inhibition of the production of the HIV p24 antigen for the two molar concentrations of 10-4 and 10-5 of compounds A and B, which is however slightly less than the inhibition of acute infection of macrophages (Figure 4). These values suggest that the presence of compounds A and B may somewhat inhibit the production of HIV p24 antigen by macrophages with stable infection and chronic production of antigen.

Etudes de la toxicité Toxicity studies

Dans toutes les expériences décrites dans les exemples 1 à 7, fa seule toxicité appréciable est fa toxicité du composé B à la concentration molaire de 10~4 relativement aux lignées de cellules tumorales. Aucune toxicité appréciable n'a été observée pour les macrophages normaux exposés à des concentrations molaires de 10~4 à 10-8 des composés A et B, pas plus qu'une toxicité appréciable pour les lymphocytes du sang périphérique exposés aux mêmes concentrations de médicaments. In all of the experiments described in Examples 1 to 7, the only appreciable toxicity is the toxicity of compound B at the molar concentration of 10 −4 relative to the tumor cell lines. No appreciable toxicity was observed for normal macrophages exposed to molar concentrations of 10 ~ 4 to 10-8 of compounds A and B, no more than appreciable toxicity for peripheral blood lymphocytes exposed to the same concentrations of drugs .

Conclusions Conclusions

Les valeurs présentées dans les exemples 1 à 7 ci-dessus sont en accord avec les interprétations suivantes. The values presented in examples 1 to 7 above are in agreement with the following interpretations.

1. Les composés A et B semblent exercer un effet antiviral modéré dans les études d'infections aiguës portant sur les cellules de lymphome T et sur les lymphocytes. Par comparaison avec l'AZT, les composés A et B sont inférieurs par leurs effets antiviraux, car l'AZT assure une protection pratiquement complète des lymphocytes et des cellules de lymphome T contre l'infection aiguë à HIV (comme mesuré à une semaine) dans la gamme de 1 ng d'AZT/ml de milieu de culture. 1. Compounds A and B appear to exert a moderate antiviral effect in studies of acute infections involving T lymphoma cells and lymphocytes. Compared with AZT, compounds A and B are inferior in their antiviral effects, since AZT provides almost complete protection of lymphocytes and T lymphoma cells against acute HIV infection (as measured at one week) in the range of 1 ng AZT / ml of culture medium.

2. Les effets observés des composés A et B sur l'infection à HIV des macrophages sont plus signifi catifs que l'effet antiviral noté sur la lignée de cellules de lymphome T et les lymphocytes du sang péri phérique. Les résultats obtenus dans les exemples 3 à 7 sont certainement significatifs au taux d'inhibition in vitro de l'infection à HIV des macrophages et d'inhibition de la production d'HIV des macro- 2. The effects observed of compounds A and B on the HIV infection of macrophages are more significant than the antiviral effect noted on the T lymphoma cell line and the peripheral blood lymphocytes. The results obtained in Examples 3 to 7 are certainly significant at the rate of inhibition in vitro of HIV infection of macrophages and of inhibition of HIV production of macro-

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phages. Ces résultats sont reproductibles et ont été répétés avec six donneurs séparés de monocytes/macrophages. L'inhibition de l'infection à HIV des macrophages est à ce jour une caractéristique relativement exceptionnelle d'un agent antiviral. Le fait que les composés A et B inhibent l'infection à HIV et l'expression d'HIV dans les macrophages suggère qu'ils se révèlent utiles pour le traitement des sujets infectés par le SIDA. phages. These results are reproducible and were repeated with six separate donors of monocytes / macrophages. The inhibition of HIV infection of macrophages is to date a relatively exceptional characteristic of an antiviral agent. The fact that compounds A and B inhibit HIV infection and the expression of HIV in macrophages suggests that they prove to be useful for the treatment of subjects infected with AIDS.

Exemple 8 Example 8

Utilisation du sulfate de déhvdroépiandrostérone dans le traitement du SIDA Use of dehvdroepiandrosterone sulfate in the treatment of AIDS

Le sulfate de déhydroépiandrostérone a été divisé en doses unitaires de 300 mg et 100 mg et chaque dose unitaire a été introduite dans une capsule molle de gélatine. Dehydroepiandrosterone sulfate was divided into unit doses of 300 mg and 100 mg and each unit dose was introduced into a soft gelatin capsule.

A) On a traité comme suit un patient séropositif pour l'HIV et pour lequel le diagnostic de SIDA avait été porté. Pendant douze jours consécutifs, le patient a été traité par l'administration orale du composé encapsulé. Les onze premiers jours, une dose unitaire de 300 mg a été administrée une fois par jour. Le douzième jour, le patient a reçu une dose unitaire de 100 mg du composé.. A) An HIV-positive patient who had been diagnosed with AIDS was treated as follows. For twelve consecutive days, the patient was treated with oral administration of the encapsulated compound. For the first eleven days, a unit dose of 300 mg was administered once a day. On the twelfth day, the patient received a unit dose of 100 mg of the compound.

B) Des essais ont été effectués pendant une période de 26 jours chez deux patients séropositifs pour l'HIV et pour lesquels le diagnostic de SIDA avait été porté selon le protocole de traitement en douze jours exposé au paragraphe précédent, si ce n'est que le traitement n'a commencé qu'au cinquième jour. B) Tests were carried out over a period of 26 days in two HIV-positive patients for whom the diagnosis of AIDS had been made according to the twelve-day treatment protocol set out in the preceding paragraph, except that treatment did not start until the fifth day.

Des échantillons de sang ont été prélevés aux patients à cinq occasions pendant la période de vingt-six jours. Les premières analyses ont été effectuées chez chaque patient le premier jour et elles comprenaient la numération des cellules T1, T4 et T8 et la détermination de la vitesse de sédimentation. Le traitement a commencé le jour 5 et s'est poursuivi jusqu'au jour 17. Du jour 5 au jour 16, chaque patient, comme précédemment exposé, a reçu une seule dose unitaire de 300 mg de sulfate de déhydroépiandrostérone et, le jour 17, 100 mg ont été administrés. Les analyses précitées ont été répétées chez chaque patient les jours 9,17, 24 et 26. La numération des cellules T de chacun des patients X et Y s'est stablilisée par suite du traitement. Blood samples were taken from patients on five occasions during the twenty-six day period. The first analyzes were performed on each patient on the first day and included the T1, T4 and T8 cell counts and the determination of the sedimentation rate. Treatment started on day 5 and continued until day 17. From day 5 to day 16, each patient, as previously exposed, received a single unit dose of 300 mg of dehydroepiandrosterone sulfate and, on day 17 , 100 mg was administered. The above analyzes were repeated in each patient on days 9, 17, 24 and 26. The T cell count of each of patients X and Y became stable as a result of the treatment.

De plus, alors que le sulfate de déhydroépiandrostérone était administré par voie orale aux patients, les lésions au voisinage de leur bouche et d'autres parties de leur corps ont été traitées localement avec une crème contenant du sulfate de déhydroépiandrostérone. On a observé la disparition des lésions. In addition, while dehydroepiandrosterone sulfate was administered orally to patients, lesions near their mouth and other parts of their body were treated locally with a cream containing dehydroepiandrosterone sulfate. The disappearance of the lesions has been observed.

Exemple 9 Example 9

Utilisation de la déhydroépiandrostérone dans le traitement du SIDA Use of dehydroepiandrosterone in the treatment of AIDS

Douze patients, tous connus comme séropositifs pour l'HIV et chez lesquels le diagnostic de SIDA avait été porté, ont été traités par la DHEA pendant une période de six mois. La DHEA a été administrée sous forme de capsules dures de gélatine contenant 100 mg de DHEA à raison de 100 mg à 600 mg par jour. La grande majorité des patients ont reçu 500 mg par jour en doses divisées. Les patients étaient tous des hommes homosexuels ou bisexuels ayant un âge moyen de 34,5 ans et un poids moyen de 69,6 kg. Twelve patients, all known to be HIV positive and diagnosed with AIDS, were treated with DHEA for a period of six months. DHEA was administered as hard gelatin capsules containing 100 mg of DHEA 100 mg to 600 mg daily. The vast majority of patients received 500 mg daily in divided doses. The patients were all gay or bisexual men with an average age of 34.5 years and an average weight of 69.6 kg.

Les manifestations cliniques antérieures et présentes de l'HIV comprenaient: une diarrhée inexpliquée, un sarcome de Kaposi, un zona, une candidiase orale, une lymphadénopathie, une leucoplasie vii-leuse orale, une perte de poids involontaire, des mycoses cutanées et des infections cutanées à staphylocoques. Previous and present clinical manifestations of HIV included: unexplained diarrhea, Kaposi's sarcoma, shingles, oral candidiasis, lymphadenopathy, oral fatty leukoplakia, involuntary weight loss, skin mycosis and infections skin with staphylococci.

Tous les patients étaient en un stade avancé du SIDA au début de l'essai et normalement une aggravation de leur état ou même leur décès était prévu dans la période d'essai de six mois. Cependant, aucune détérioration sérieuse de l'état n'a été observée chez aucun des patients, quatre patients présentant en fait un gain de poids. Le patient 7 a pris 8 kg en cinq mois. All patients were in an advanced stage of AIDS at the start of the trial and normally worsening of their condition or even death was expected within the six month trial period. However, no serious worsening of the condition was observed in any of the patients, with four patients actually experiencing weight gain. Patient 7 gained 8 kg in five months.

Les composés de formule (I), et notamment la déhydroépiandrostérone et ses dérivés précités, sont particulièrement avantageux dans le traitement des patients infectés par l'HIV. Les avantages particuliers de ces composés comprennent l'absence virtuelle de toxicité, la facilité d'administration et l'action exceptionnelle précitée sur le système des macrophages. La déhydroépiandrostérone s'est révélée totalement dépourvue d'effets physiques, biochimiques ou hématologiques chez douze sujets ayant reçu des doses journalières atteignant 600 mg pendant six mois. The compounds of formula (I), and in particular dehydroepiandrosterone and its aforementioned derivatives, are particularly advantageous in the treatment of patients infected with HIV. The particular advantages of these compounds include the virtual absence of toxicity, the ease of administration and the aforementioned exceptional action on the macrophage system. Dehydroepiandrosterone was found to be completely devoid of physical, biochemical or haematological effects in twelve subjects who received daily doses of up to 600 mg for six months.

Par suite de l'action exceptionnelle de la déhydroépiandrostérone sur le système des macrophages, il est possible que son utilisation puisse accroître la survie moyenne des sujets infectés par l'HIV, dont la valeur calculée actuelle est de 8,3 ans à partir du moment de l'infection. Due to the exceptional action of dehydroepiandrosterone on the macrophage system, it is possible that its use may increase the average survival of subjects infected with HIV, whose current calculated value is 8.3 years from the time of the infection.

De plus, les composés de formule (I) peuvent être utilisés en combinaison synergique avec d'autres agents antiviraux, comme indiqué ci-dessus. In addition, the compounds of formula (I) can be used in synergistic combination with other antiviral agents, as indicated above.

Sans pour cela se lier à une quelconque explication théorique de l'invention, il semble que, du fait que la déhydroépiandrostérone inhibe la glucose-6-phosphate déshydrogénase, entraînant une baisse du capital cellulaire de NADHP, les petites modifications de la biosynthèse des protéines dans la cellule qui Without being bound by any theoretical explanation of the invention, it seems that, because dehydroepiandrosterone inhibits glucose-6-phosphate dehydrogenase, leading to a decrease in the cell capital of NADHP, the small changes in protein biosynthesis in the cell which

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en résultent puissent, en raison de la régulation complexe de l'expression du gène de l'HIV, entraîner des modifications notables de la production des protéines virales. As a result, due to the complex regulation of the expression of the HIV gene, they can cause significant changes in the production of viral proteins.

Un exemple d'une telle protéine de régulation virale est l'art/trs qui est présente en très petite quantité dans les cellules infectées, mais qui est responsable de la régulation de l'épissage de l'ARN viral et par conséquent de la production de protéines virales. An example of such a viral regulatory protein is the art / trs which is present in very small quantities in infected cells, but which is responsible for regulating the splicing of viral RNA and therefore the production viral proteins.

Claims

1. Use of a compound of general formula (I):

-S020-CH2. CH.CH2 O.CO.R3

O.CO. R2

or a Phosphatide group

O

-P-0.CH-.CH.CH-.O.CO.R. „2 d 2 3

o o.co.r2

in which each R2 and R3, which are similar or different, is a straight or branched chain alkyl radical of 1 to 14 carbon atoms, or a glucuronide group

CGOH

the broken line represents an optional double bond and the hydrogen atom of position 5 is present in the a or ß configuration or in the form of a mixture of the two configurations, for the manufacture of a medicament useful in prophylaxis and treatment of a retroviral infection or a complication or consequence thereof.

2. Use according to claim 1, characterized in that, in the compound of formula (I), R and Ri are each a hydrogen.

3. Use according to claim 2, characterized in that the compound is dehydroepiandrosterone, the compound in which R and Ri are each hydrogen and a double bond is present.

4. Use according to claim 1, characterized in that the compound is 16ot-bromoepiandro-sterone, the compound in which R is a bromine atom, Ri is a hydrogen atom and the double bond is present.

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5. Use according to claim 1, characterized in that the compound is dehydroepiandrosterone sulfate.

6. Use according to any one of claims 1 to 5, characterized in that the medicament is presented for administration by general route.

7. Use according to any one of claims 1 to 6, for the manufacture of a medicament further containing an immunomodulator.

8. Use according to claim 7, characterized in that the immunomodulator is chosen from Ampligen, an anti-human interferon antibody, an anti-AIDS antibody, ascorbic acid and its derivatives, Bromopirimine, Ciamexon , Cyclosporin, cimetidine, colony stimulating factor, dinitrochlorobenzene, a-interferon, p-interferon, rinterferon, glucan, globulin, Interleukin 1, Interleukin 2, isoprinosine, Krestin, Lentinan, methionine-enkephalin, Mino-phagen C, muramyltripeptide, Naltrexone, Neutropin, polymannoacetate, an RNA immunomodulator, sodium shosaikoto and ginseng, sodium diethylthiocarbamate, the factor thymic humoral, Thymopentin, thymosin fraction 5 and thymosin-a1, thymostimulin, tumor necrosis factor and vitamin B preparations

9. Use according to any one of claims 1 to 6, for the manufacture of a medicament additionally containing an antiviral agent.

10. Use according to claim 9, characterized in that the antiviral agent is chosen from the methyl ester of amphotericin B, ammonium-21-tungsto-9-antimoniate, Ampligen, an anti-AIDS anticoips , ansamycin, azidothymidine or its unsubstituted derivative in position 5, butylated hydroxytoluene, Castanospermine, Cytovene, dideoxyadenosine, dideoxycytidine, dextran sulfate, eflomithine, Foscarnet, acid fusidic, glycyrrhizin, a-interferon, p-interferon, Nonoxi-nol, Pentamidine isethionate, Peptide T, phenytoin, polymannoacetate, Ribavirin, recombinant soluble T4, Trimetrexate, Suramin and its analogs.

11. Use according to any one of claims 1 to 7 and 9 for the manufacture of a medicament intended for use in the prophylaxis and treatment of HIV infections or a complication or consequence thereof.

12. Use according to any one of claims 1 to 7, 9 and 11 for the manufacture of a medicament intended for use in the prophylaxis and treatment of acquired immunodeficiency syndrome (AIDS).

13. Use according to any one of claims 1 to 7, 9 and 11 for the manufacture of a medicament intended for use in the prophylaxis and treatment of acquired immunodeficiency syndrome para-AIDS (ARC).

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