CH674150A5

CH674150A5 -

Info

Publication number: CH674150A5
Application number: CH3610/87A
Authority: CH
Inventors: Valery Mikhailovich Korshunov; Nikolai Nikolaevich Volodin; Ljudmila Ivanovna Kafarskaya; Natalya Petrovna Ivanova; Boris Vladimirovich Pinegin
Original assignee: 2 Oi Mo G Med I Im N I Pirogov
Priority date: 1987-10-30
Filing date: 1987-09-18
Publication date: 1990-05-15
Also published as: FR2622452A1; FR2622452B1

Description

BESCHREIBUNG DESCRIPTION

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Gebiet der Medizin, insbesondere auf ein Arzneimittel zur Prophylaxe und Behandlung der Vaginaldysbakteriosen. Das vorgeschlagene Arzneimittel findet Verwendung in der Geburtshilfe zur Normalisierung der Vaginalmikrobiozenose zwecks Prophylaxe der postnatalen Infektionskomplikationen sowie zur Vorbeugimg der ante- und intranatalen Infizierung der Frucht durch bedingt pathogene Mikroorganismen, die sich im Genitaltrakt der Mutter befinden, und in der Gynäkologie zur Behandlung der unspezifischen Vaginitis, Vulvovaginitis, die durch die Störung der Mikroflora des Genitaltraktes begleitet werden. The present invention relates to a field of medicine, in particular to a medicament for the prophylaxis and treatment of vaginal dysbacteriosis. The proposed medicinal product is used in obstetrics to normalize vaginal microbiocenosis for the prophylaxis of postnatal infection complications and to prevent ante- and intranatal infection of the fruit by conditionally pathogenic microorganisms that are located in the mother's genital tract and in gynecology for the treatment of unspecific vaginitis , Vulvovaginitis, which are accompanied by the disruption of the microflora of the genital tract.

Dem Zustand der Mikroflora des Genitaltraktes einer Frau wird eine ausserordentlich wichtige Rolle beigemessen, weil die Bildung der Mikroflora des Neugeborenen in den ersten Tagen nach der Geburt in vielem von der Mikrobioze-nose des Zervikalkanals, der Vagina abhängt, und erst im weiteren auch von der Umgebung bedingt wird. Durch eine Reihe von Untersuchungen wurde die Abhängigkeit zwischen der Häufigkeit der eitrig-entzündlichen Erkrankungen bei Wöchnerinnen in postnataler Periode und dem Zustand der Mikroflora der Geburtswege festgestellt. The condition of the microflora of a woman's genital tract is assigned an extremely important role, because the formation of the microflora of the newborn in the first days after birth depends to a great extent on the microbiosence of the cervical canal, the vagina, and only then on that Environment. A number of studies have shown the relationship between the frequency of purulent-inflammatory diseases in women who have recently given birth and the condition of the microflora of the birth paths.

Noch mehr, in der Entwicklung einer Reihe von unspezifischen Erkrankungen der Geschlechtssphäre spielt die führende Rolle die endogene Flora des Genitaltraktes. Even more so, in the development of a number of nonspecific diseases of the sex sphere, the leading role is played by the endogenous flora of the genital tract.

Zur Zeit ist ein Arzneimittel zur Prophylaxe und Behandlung der Vaginaldysbakteriosen bekannt, das aus der Bakterienkultur Lactobacillus acidophilus Doederleini, Östriol und einem Füllstoff besteht. Das Arzneimittel wird in Form von Vaginalsuppositorien angewendet (US, A 3 639 566). Da im Arzneimittel der Stamm verwendet wird, der aus der Vagina einer gesunden Frau isoliert wurde und nach dem Merkmal der Adhäsion gegen menschliche Vaginalepitheliozyten und -erythrozyten nicht selektioniert wurde, ist das genannte Präparat nicht imstande, ein anhaltendes beständiges Einleben der Laktobakterien in der Vagina zu sichern, indem dieser zur Herabsetzung des therapeutischen Effekts und zu wiederholten Störungen der Vaginalmikrobiozenose führt. A drug for the prophylaxis and treatment of vaginal dysbacteriosis is currently known, which consists of the bacterial culture Lactobacillus acidophilus Doederleini, estriol and a filler. The drug is used in the form of vaginal suppositories (US, A 3 639 566). Since the strain used in the medicinal product was isolated from the vagina of a healthy woman and was not selected based on the characteristic of adhesion to human vaginal epitheliocytes and erythrocytes, the preparation mentioned is unable to ensure a permanent and constant introduction of the lactobacteria into the vagina secure by this leads to the reduction of the therapeutic effect and repeated disturbances of the vaginal microbiozenosis.

Ausserdem begrenzt die Einführung von Östriol ins Arzneimittel dessen Anwendung bei Schwangeren. In addition, the introduction of estriol into the drug limits its use in pregnant women.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, durch Ausnutzung von neuen Stämmen ein Arzneimittel zur Prophylaxe und Behandlung der Vaginaldysbakteriosen zu entwickeln, das einen deutlichen und anhaltenden therapeuti-s sehen Effekt bewirkt, ein breites Wirkungsspektrum besitzt und eine multiple Resistenz gegen Antibiotika aufweist. The invention has for its object to develop a drug for the prophylaxis and treatment of vaginal dysbacteriosis by utilizing new strains, which has a clear and lasting therapeutic effect, has a broad spectrum of activity and has multiple resistance to antibiotics.

Die Aufgabe wird dadurch gelöst, dass das erfindungsge-mässe Arzneimittel zur Prophylaxe und Behandlung der Va-ginaldysbakteriose, das eine Bakterienkultur vorsieht, erfin-io dungsgemäss als Bakterienkultur ein Gemisch aus dem Stamm Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3324 und dem Stagim Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3325 in einem Verhältnis von 1 : 1 enthält. Die Stämme wurden durch die natürliche Auswahl nach dem Merkmal der Adhäsion gegen 15 menschliche Vaginalepitheliozyten und -erythrozyten aus dem aus der Vagina einer gesunden erwachsenen Frau isolierten Ausgangsstamm Lactobacillus acidophilus selektioniert und sind im Zentralmuseum für Industriemikroorganismen des Allunions-Forschungsinstituts für Genetik und 20 Selektion der Industriemikroorganismen am 29.03.85 VSESOJUZNYNAUCHNO-ISSLEDOVATELSKY INSTITUT GENETIK ISELEKTSIIPROMYSHLEN-NYKH MICROORGANIZMOV (VNIIGENETIKA) USSR, Moscow, Dorozhny proezd, I hinterlegt. 25 Der therapeutische Effekt des erfindungsgemässen Arzneimittels ist durch den Gehalt im Arzneimittel von hochad-häsiven und antagonistisch aktiven Laktobakterienstämmen bedingt, die bei der Einführung in die natürlich existierende Biozenose eine bedeutende Aktivität im Kampf für die eko-30 logische Nische gegen andere Mikroorganismen an den Tag legen. Die multiple Resistenz gegen Antibiotika gestattet, das erfindungsgemässe Arzneimittel neben Antibiotikatherapie anzuwenden. Es ist möglich, das erfindungsgemässe Arzneimittel auch bei spezifischen Entzündungsprozessen in 35 Kombination mit spezifischer Arzneimitteltherapie anzuwenden. The object is achieved in that the medicament according to the invention for the prophylaxis and treatment of vaginal dysbacteriosis, which provides for a bacterial culture, according to the invention as a bacterial culture, a mixture of the strain Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3324 and the Stagim Lactobacillus acidophilus ZMPM B Contains -3325 in a ratio of 1: 1. The strains were selected by natural selection according to the characteristic of adhesion to 15 human vaginal epitheliocytes and erythrocytes from the starting strain Lactobacillus acidophilus isolated from the vagina of a healthy adult woman and are in the Central Museum for Industrial Microorganisms of the Allunions Research Institute for Genetics and 20 Selection of Industrial Chemistry on 29.03.85 VSESOJUZNYNAUCHNO-ISSLEDOVATELSKY INSTITUT GENETIK ISELEKTSIIPROMYSHLEN-NYKH MICROORGANIZMOV (VNIIGENETIKA) USSR, Moscow, Dorozhny proezd, I deposited. 25 The therapeutic effect of the medicament according to the invention is due to the content in the medicament of highly adhesive and antagonistically active lactobacterial strains which, when introduced into the naturally existing biozenosis, show a significant activity in the fight for the ecological niche against other microorganisms lay. The multiple resistance to antibiotics allows the medicament according to the invention to be used in addition to antibiotic therapy. It is possible to use the medicament according to the invention also in specific inflammatory processes in combination with specific medicament therapy.

Das erfindungsgemässe Arzneimittel kann zur Korrektion der dysbiotischen Störungen der Vaginalmikroflora, zur Prophylaxe und Behandlung der eitrig-entzündlichen Er-40 krankungen der Geschlechtssphäre bei Schwangeren mit der möglichen Entwicklung der Infektionspathologie sowie zwecks Prophylaxe der eitrig-entzündlichen Erkrankungen bei Neugeborenen beim genannten Krankengut der Schwangeren angewendet werden. The medicament according to the invention can be used for the correction of the dysbiotic disorders of the vaginal microflora, for the prophylaxis and treatment of the purulent-inflammatory diseases of the sex sphere in pregnant women with the possible development of the pathology of infection as well as for the prophylaxis of the purulent-inflammatory diseases in newborns in the case of the mentioned patient population of the pregnant woman will.

45 Das erfindungsgemässe Arzneimittel wird auch zur Behandlung der gynäkologischen Erkrankungen der Infek-tionsätiologie empfohlen. Das erfindungsgemässe Arzneimittel wird intravaginal in einer beliebigen geeigneten galeni-schen Form, beispielsweise in Form von Pulver, Kapseln, 50 Suppositorien eingeführt. 45 The medicament according to the invention is also recommended for the treatment of gynecological diseases of the infection etiology. The medicament according to the invention is introduced intravaginally in any suitable galenic form, for example in the form of powder, capsules, 50 suppositories.

Das erfindungsgemässe Arzneimittel enthält vorzugsweise das Gemisch der genannten Stämme in einer Menge von 0,5—1 • 109 Mikrobenzellen. The medicament according to the invention preferably contains the mixture of the strains mentioned in an amount of 0.5-1109 microbial cells.

Das erfindungsgemässe Arzneimittel stellt eine fein-55 poröse Masse von weisslich-grauer Farbe dar. Beim Auflösen im destillierten Wasser wird eine homogene Suspension von gelblich-brauner Schattierung gebildet. The medicament according to the invention represents a fine-porous mass of whitish-gray color. When dissolved in distilled water, a homogeneous suspension of a yellowish-brown shade is formed.

Den Wirkstoff des erfindungsgemässen Arzneimittels 6o stellen lebendige Bakterienzellen der hochadhäsiven antagonistisch aktiven Stämme Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3324 und Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3325 dar, die eine hohe adhäsive Wirksamkeit gegen die Vaginalepitheliozyten besitzen. The active ingredient of the medicament 6o according to the invention are living bacterial cells of the highly adhesive, antagonistically active strains Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3324 and Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3325, which have a high adhesive activity against the vaginal epitheliocytes.

65 Die genannten Stämme sind im Zentralmuseum für Industriemikroorganismen des Allunions-Forschungsinstituts für Genetik und Selektion der Industriemikroorganismen hinterlegt worden. 65 The strains mentioned have been deposited in the Central Museum for Industrial Microorganisms of the All-Union Research Institute for Genetics and Selection of Industrial Microorganisms.

Die genannten Stämme wurden aus der Vagina der gesunden Frauen isoliert und im weiteren nach dem Merkmal der hohen Adhäsien gegen menschliche Vaginalepitheliozyten und -erythrozyten selektioniert. The strains mentioned were isolated from the vagina of healthy women and further selected according to the characteristic of high adhesions against human vaginal epitheliocytes and erythrocytes.

Die genannten Stämme stellen unbewegliche grampositive Bakterien dar. Im Abstrich sind sie ordnungslos angelegt, junge Kulturen können mit Methylenblau unregelmässig gefärbt werden, bilden keine Sporen, sind anaerob. The strains mentioned are immobile, gram-positive bacteria. They are arranged properly in the smear, young cultures can be stained irregularly with methylene blue, do not form spores, are anaerobic.

Im flüssigen Medium MRS-1 wächst der Stamm Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3325 aktiv in der ganzen Mediumdicke unter Bildung eines geringen Niederschlags. Der Stamm Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3324 wächst im flüssigen Medium MRS-1 am Boden, indem das Medium klar bleibt. In the liquid medium MRS-1, the strain Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3325 actively grows in the entire medium thickness with the formation of a small amount of precipitation. The Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3324 strain grows in the liquid medium MRS-1 on the bottom by keeping the medium clear.

Am dichten Medium MRS-4 bilden die genannten Stämme Kolonien mit glatten Rändern, unklare, ohne Pigment von 1 bis 2 mm Durchmesser. Sie wachsen auf der Oberfläche des dichten Nährmediums in der C02-Atmosphäre oder bei einem Unterdruck der Atmosphäre von 1 kp/cm2. Die optimale Wachstumstemperatur beträgt 73 + 0,5 °C. On the dense medium MRS-4, the strains mentioned form colonies with smooth edges, unclear, without pigment of 1 to 2 mm in diameter. They grow on the surface of the dense nutrient medium in the C02 atmosphere or at a vacuum of 1 kp / cm2. The optimal growth temperature is 73 + 0.5 ° C.

Die Stämme vergären Saccharose, Maltose, Galaktose, Fruktose, Arabinose, Laktose, Raffinose; vergären Lyxose, Xylose, Mannit, Rhamnose, Dulzit, Citrullin, Rubose, Sorbit nicht. The strains ferment sucrose, maltose, galactose, fructose, arabinose, lactose, raffinose; do not ferment lyxose, xylose, mannitol, rhamnose, dulzite, citrulline, rubose, sorbitol.

Benennung des Minimale Hemmkonzentrationen in Name the minimum inhibitory concentrations in

Arzneimittels Hg/ml Drug Hg / ml

Lactobacillus Lactobacillus acidophilus acidophilus Lactobacillus Lactobacillus acidophilus acidophilus

ZMPM B-3325 ZMPM B-3324 ZMPM B-3325 ZMPM B-3324

Nistatin absol. beständ. Absolut nistatin. persistent

absol. absolutely

beständ. persistent

Nevigramon (Nalidixin- Nevigramon (nalidixin

säure) acid)

50000 50000

Polymyxin Polymyxin

10000 10,000

Gentamyzin Gentamyzin

40 40

Kanamyzin Kanamyzin

1000 1000

Linkomyzin Linkomyzin

25 25th

Levomyzetin Levomycetin

5 5

5-Methyl-3-phenyl-4- 5-methyl-3-phenyl-4-

-isoxyasolylpenizillin -isoxyasolylpenicillin

und 6-/D-(—)-a-amino- and 6- / D - (-) - a-amino-

phenylazetamideo/- phenylazetamideo / -

penizillansäuretrihydrat penicillanic acid trihydrate

in einem Verhältnis von in a ratio of

1: 1 1: 1

0,5 0.5

6-/D-(—)-a-Aminophe- 6- / D - (-) - a-aminophe-

nyl- nyl

azetamido/-penizillan- azetamido / -penizillan-

säuretrihydrat acid trihydrate

0,5 0.5

Die genannten Stämme weisen eine antagonistische Wirksamkeit gegen Shigellen, Salmonellen, Klebsiellen, Staphylokokken und Bakterien der Proteus-Reihe auf. The strains mentioned have an antagonistic activity against Shigella, Salmonella, Klebsiell, Staphylococcus and bacteria of the Proteus series.

Adhäsive Eigenschaften der genannten Stämme Adhesive properties of the mentioned strains

Benennung des Stammes Indexe der Adhäsion Naming the strain indexes of adhesion

Adhäsionsindex Adhäsionsindex gegen Erythro- gegen Vaginal-zyten epitheliozyten Adhesion index Adhesion index against erythrocytes against vaginal cytocytes

Lactobacillus acido- 8,8 19,7 philus ZMPM B-3325 Lactobacillus acido- 8.8 19.7 philus ZMPM B-3325

Lactobacillus acido- 6,0 21,8 philus ZMPM B-3324 Lactobacillus acido- 6.0 21.8 philus ZMPM B-3324

3 674150 3 674150

Unter dem Fachbegriff Adhäsionsindex versteht man die Durchschnittszahl der Bakterien, die an Erythrozyten anhaften (hochadhäsive >4,0). The term adhesion index is the average number of bacteria that adhere to erythrocytes (highly adhesive> 4.0).

Die genannten Stämme sind für Versuchstiere und Men-5 sehen unpathogen. The strains mentioned are non-pathogenic to laboratory animals and men-5.

Das erfindungsgemässe Arzneimittel wurde im Tierversuch und in der Klinik an Volontären und am begrenzten Krankengut der Schwangeren untersucht. The medicinal product according to the invention was examined in animal experiments and in the clinic on volunteers and on the limited number of patients in pregnant women.

Die Untersuchung der Unpathogenität der Laktobakte-w rien Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3324 und ZMPM B-3325 wurde an 50 rasselosen Mäusen von 18 bis 20 g Körpermasse und an 50 Mäusen der Linie CBA von 18 bis 20 g Körpermasse geprüft, denen die genannten Stämme in einer Menge von 0,5 — 1 • 109 Mikrobenzellen pro eine Maus in 15 den Magen durch die Sonde eingeführt wurden. The examination of the non-pathogenicity of the lactobacilli-L lactobacillus acidophilus ZMPM B-3324 and ZMPM B-3325 was tested on 50 breedless mice from 18 to 20 g body weight and on 50 mice of the CBA line from 18 to 20 g body mass, to which the strains mentioned in an amount of 0.5-1 · 109 microbial cells per mouse in 15 the stomach were introduced by the probe.

Die Tiere erhielten Laktobakterien einmal pro Tag innerhalb von 30 Tagen. Während der ganzen Medikationsperiode und während der nachfolgenden 30 Beobachtungstage wurden bei den Tieren keine Nebenreaktionen festgestellt. 20 Die Tiere waren aktiv, nahmen gut zu. 1, 5,10, 30 und 40 Tage nach dem Beginn der Einführung von Laktobakterien brachte man je 3 rasselose Mäuse und je 3 Mäuse der Linie CBA um, sezierte die Bauch- und Brusthöhlen und untersuchte den Zustand der Organe sofort nach dem Sezieren. In 25 keinem Fall wurden deutliche pathologische Veränderungen seitens der inneren Organe der Tiere nachgewiesen. The animals received lactobacteria once a day within 30 days. No side reactions were found in the animals during the entire medication period and during the subsequent 30 days of observation. 20 The animals were active and increased well. 1, 5, 10, 30 and 40 days after the start of the introduction of lactobacteria, 3 rattleless mice and 3 mice of the CBA line were killed, the abdominal and chest cavities were dissected and the condition of the organs was examined immediately after dissection. In no case were significant pathological changes detected on the part of the internal organs of the animals.

Bei der histologischen Untersuchung der frisch eingefrorenen und Paraffinabschnitte von Leber, Milz, Dünn- und Dickdarm, Magen, Lungen, mesenteriellen Lymphknoten 30 wurden keine pathologischen Veränderungen nachgewiesen. In the histological examination of the freshly frozen and paraffin sections of the liver, spleen, small and large intestine, stomach, lungs, mesenteric lymph nodes 30, no pathological changes were detected.

Die Kontrollgruppe der Tiere (50 rasselose Mäuse, 50 Mäuse der Linie CBA von 18 bis 20 g Körpermasse) erhielten zu derselben Zeit statt Laktobakterien physiologische Natriumchloridlösung. Das Umbringen und das Sezieren 35 der Kontrolltiere wurden zu derselben Zeit wie bei den Versuchstieren unternommen. Nachher wurde die Schlussfolgerung gezogen, dass das erfindungsgemässe Arzneimittel für Labortiere unpathogen ist. The control group of animals (50 breedless mice, 50 mice of the CBA line of 18 to 20 g body mass) received physiological sodium chloride solution instead of lactobacteria at the same time. The control animals were killed and dissected at the same time as the experimental animals. Afterwards, it was concluded that the medicinal product according to the invention is not pathogenic for laboratory animals.

Bei der Untersuchung der Untoxizität, Apyrogenität, 40 Unschädlichkeit der Laktobakterien für Menschen wurde festgestellt, dass die Einführung des Bakterienpräparats innerhalb von 7 Tagen (einmal pro Tag, die Einzeldosis betrug 0,5 — 1 ■ 109 Mikrobenzellen) keine Nebenerscheinungen im Laufe von 30 Tagen vom Beginn der Medikation mit dem 45 Laktobakterienpräparat hervorruft. Der Zustand der Volontäre war befriedigend, das Selbstbefinden, der Appetit waren gut. Die Körpertemperatur während der ganzen Beobachtungsperiode war normal und überstieg 36,8 °C nicht. When examining the non-toxicity, apyrogenicity, 40 harmlessness of the lactobacteria for humans it was found that the introduction of the bacterial preparation within 7 days (once a day, the single dose was 0.5 - 1 ■ 109 microbial cells) no side effects within 30 days from the start of medication with the 45 lactobacterial preparation. The condition of the volunteers was satisfactory, the sense of self, the appetite were good. Body temperature was normal throughout the observation period and did not exceed 36.8 ° C.

Bei der klinischen Prüfung des Arzneimittels befanden so sich unter Beobachtung 2 Gruppen der Schwangeren mit der erschwerten geburtshilflichen und gynäkologischen Anamnese (drohender Abortus, chirurgische Korrektion der isthmisch-zervikalen Insuffizienz, chronische entzündliche Erkrankungen der Geschlechtssphäre). During the clinical trial of the drug there were 2 groups of pregnant women with a difficult obstetric and gynecological history (impending abortion, surgical correction of the isthmic-cervical insufficiency, chronic inflammatory diseases of the sex sphere).

55 Die Frauen der 1. Gruppe (30 Patientinnen), die bei einer Schwangerschaftsfrist von 24 bis 32 Wochen in die Klinik gelangten, bekamen ausser der gewöhnlichen Behandlung täglich das erfindungsgemässe Arzneimittel am Tampon in einer Dosis von 0,5 —1 • 109 Mikrobenzellen. 55 The women in the 1st group (30 patients) who came to the clinic with a gestation period of 24 to 32 weeks received the medicinal product according to the invention on a tampon in a dose of 0.5-1109 microbial cells in addition to the usual treatment.

60 Die Frauen der 2. Gruppe (20 Patientinnen) erhielten die ihrem Zustand entsprechende Behandlung. Lokal wurde das bekannte Arzneimittel verwendet, das die lyophil getrocknete Kultur Lactobacillus fermentum darstellt, die aus dem Darm der gesunden Menschen erhalten wurde. Die Präpara-65 te wurden einmal pro Tag zu je 5 Dosen innerhalb von 7 Tagen unter bakteriologischer Kontrolle der Mikrobiozenose der Vagina eingeführt. Die bakteriologische Untersuchung hat ergeben, dass 1 bis 2 Tage nach dem Absetzen des erfin- 60 The women in group 2 (20 patients) received the treatment appropriate to their condition. Locally, the well-known drug was used, which is the lyophilized culture Lactobacillus fermentum, which was obtained from the intestines of healthy people. The preparations were introduced once a day with 5 doses each within 7 days under bacteriological control of the microbiozenosis of the vagina. Bacteriological examination has shown that 1 to 2 days after stopping the invented

674 150 674 150

dungsgemässen Arzneimittels in der 1. Gruppe der Schwangeren eine bedeutende Vermehrung der Laktobakterien in der Vaginalabsonderung beobachtet wurde: die Menge der Laktobakterien erhöhte sich auf IO8 bis 109 Mikroben-zellen/g. Im weiteren wurde die Normalisierung der ganzen Vaginalmikroflora festgestellt. According to the drug of the first group of pregnant women, a significant increase in lactobacteria in the vaginal secretion was observed: the amount of lactobacteria increased to IO8 to 109 microbial cells / g. The normalization of the entire vaginal microflora was also determined.

So betrug 10 Tage nach dem Absetzen des erfindungsgemässen Arzneimittels die Staphylokokkenmenge IO3 bis 104 Mikrobenzellen pro 1 g Absonderung, die Menge der Ente-rokokken verminderte sich auf 102 Mikrobenzellen/g. Die Laktobakterien nahmen die führende Stellung unter allen Vertretern der Vaginalflora ein, indem sie 108 Mikrobenzellen/g betrugen. Der günstige eubiotische Zustand blieb den ganzen ersten Monat nach dem Absetzen des erfindungsgemässen Arzneimittels aufrechterhalten. Thus, 10 days after stopping the medicament according to the invention, the amount of staphylococci IO3 was up to 104 microbial cells per 1 g of secretion, the amount of duck rococci was reduced to 102 microbial cells / g. Lactobacteria took the leading position among all representatives of the vaginal flora by being 108 microbial cells / g. The favorable eubiotic state was maintained throughout the first month after the drug according to the invention had been discontinued.

Beim weiteren Schwangerschaftsverlauf bei den Frauen, die zur 1, Gruppe gehörten, wurden keine Komplikationen festgestellt, die Geburt ging zur rechten Zeit vor sich; die Neugeborenen wurden im befriedigenden Zustand aus der Klinik entlassen, die neonatale Periode verlief ohne Infektionskomplikationen. In the further course of pregnancy in the women belonging to the 1st group, no complications were found, the birth took place at the right time; the newborns were discharged from the clinic in a satisfactory condition, the neonatal period was without infection complications.

s Bei den Frauen der 2. Gruppe wurde zu der gleichen Beobachtungszeit die Erhöhung der Zahl der endogenen Laktobakterien nachgewiesen, deren Gesamtniveau überstieg jedoch 107 Mikrobenzellen/g 1 bis 2 Tage nach dem Absetzen des bekannten Präparats nicht und verminderte io sich zum 10. Tag bis 106 Mikrobenzellen/g Absonderung. s In the women of the second group, the increase in the number of endogenous lactobacteria was detected at the same observation time, but their total level did not exceed 107 microbial cells / g 1 to 2 days after discontinuation of the known preparation and decreased until the 10th day to 106 microbial cells / g secretion.

Am Ende des Monats wurde wiederum der Mangel an milchsaurer Flora von 104 Mikrobenzellen/g festgestellt. Die postnatale Periode wurde bei 2 Frauen (10%) durch Endometritis verschlechtert, bei ihren Neugeborenen wurde Nais belentzündung beobachtet, es wurden Antibiotika verordnet. Die Ergebnisse der Untersuchungen sind in der Tabelle angeführt. At the end of the month, the lack of lactic acid flora of 104 microbial cells / g was again determined. The postnatal period was worsened by endometritis in 2 women (10%), nebular inflammation was observed in their newborns, and antibiotics were prescribed. The results of the tests are shown in the table.

Tabelle table

Zusammensetzung der Mikroflora der Geburtswege bei den Schwangeren vor und nach der Behandlung mit dem erfindungsgemässen und bekannten Präparat (lg M±m) Composition of the microflora of the birth paths in pregnant women before and after treatment with the inventive and known preparation (lg M ± m)

Vor der Behandlung Before treatment

lfd running

Präparate preparations

Entero- Entero-

Staphylo- Staphylo-

Candida Candida

Entero- Entero-

Lacto Lacto

Bifido- Bifido

Nr. No.

bacteria coccus bacteria coccus

coccus bacillus bacteria coccus bacillus bacteria

1 1

2 2nd

3 3rd

4 4th

5 5

6 6

7 7

8 8th

1. 1.

Das erfindungs The invention

gemässe Präparat appropriate preparation

3,7 ±0,4 3.7 ± 0.4

5,8 ±0,2 5.8 ± 0.2

6,1 ±0,4 6.1 ± 0.4

2,3 ±0,2 2.3 ± 0.2

5,6 ±0,2 5.6 ± 0.2

5,0 ±1,2 5.0 ± 1.2

2. 2nd

das bekannte the known

Präparat preparation

4,5 ±0,4 4.5 ± 0.4

4,3 ±0,2 4.3 ± 0.2

6,7 ±0,4 6.7 ± 0.4

2,6 ±0,2 2.6 ± 0.2

5,2 ±0,5 5.2 ± 0.5

4,7 ±0,2 4.7 ± 0.2

Fortsetzung der Tabelle Continuation of the table

2 Tage nach dem Absetzen des Arzneimittels 2 days after stopping the drug

Entero- Entero-

Staphylo- Staphylo-

Candida Candida

Entero- Entero-

Lacto Lacto

Bifido- Bifido

bacteria coccus bacteria coccus

coccus bacillus bacteria coccus bacillus bacteria

1 1

9 9

10 10th

11 11

12 12

13 13

14 14

1 1

2,3 + 0,5 2.3 + 0.5

4,4+0,3 4.4 + 0.3

4,8 4.8

±1,2 ± 1.2

2,2 + 0,2 2.2 + 0.2

8,9+0,3 8.9 + 0.3

5,7+1,2 5.7 + 1.2

2 2nd

4,8+0,5 4.8 + 0.5

4,1 ±0,3 4.1 ± 0.3

6,8 ±0,4 6.8 ± 0.4

2,1 ±0,2 2.1 ± 0.2

7,1 ±0,8 7.1 ± 0.8

4,1 ±0,2 4.1 ± 0.2

Fortsetzung der Tabelle Continuation of the table

10 Tage nach dem Absetzen des Arzneimittels 10 days after stopping the drug

Entero- Entero-

Staphylo- Staphylo-

Candida Candida

Entero- Entero-

Lacto Lacto

Bifido- Bifido

bacteria coccus bacteria coccus

coccus bacillus bacteria coccus bacillus bacteria

1 1

15 15

16 16

17 17th

18 18th

19 19th

20 20th

1 1

2,8 + 0,5 2.8 + 0.5

4,8+0,3 4.8 + 0.3

5,0+1,0 5.0 + 1.0

2,1+0,2 2.1 + 0.2

8,0 + 0,5 8.0 + 0.5

5,1 + 1,2 5.1 + 1.2

2 2nd

4,1 ±0,5 4.1 ± 0.5

4,9 ±0,3 4.9 ± 0.3

6,1 ±0,4 6.1 ± 0.4

2,3 ±0,2 2.3 ± 0.2

6,3 ±0,5 6.3 ± 0.5

4,0 ±0,2 4.0 ± 0.2

Forsetzung der Tabelle Continuation of the table

1 Monat nach dem Absetzen des Arzneimittels 1 month after stopping the drug

Entero- Entero-

Staphylo- Staphylo-

Candida Candida

Entero- Entero-

Lacto Lacto

Bifido- Bifido

bacteria coccus bacteria coccus

coccus bacillus bacteria coccus bacillus bacteria

1 1

21 21st

22 22

23 23

24 ' 24 '

25 25th

26 26

1 1

2,1+0,5 2.1 + 0.5

4,4+0,3 4.4 + 0.3

4,8 + 1,2 4.8 + 1.2

2,3 + 0,2 2.3 + 0.2

8,1+0,5 8.1 + 0.5

5,2 + 0,5 5.2 + 0.5

2 2nd

4,1 ±0,2 4.1 ± 0.2

5,9 ±0,3 5.9 ± 0.3

6,1 ±0,4 6.1 ± 0.4

2,3 ±0,2 2.3 ± 0.2

5,9 ±0,5 5.9 ± 0.5

4,2 ±0,2 4.2 ± 0.2

Das erfindungsgemässe Arzneimittel wurde auch in der späteren Schwangerschaftsfrist in Form von Tampons den Frauen, die in die Abteilung für Schwangerschaftspathologie wegen der pränatalen Ergiessung des Fruchtwassers oder beim Verdacht an eine hohe Zerreissung der Fruchtblase gelangten, bei einer Schwangerschaftsfrist von 28 bis 35 Wochen verordnet. The medicinal product according to the invention was also prescribed in the form of tampons in the later pregnancy period for women who entered the department for pregnancy pathology because of the prenatal pouring of the amniotic fluid or if a high tearing of the amniotic sac was suspected, with a pregnancy period of 28 to 35 weeks.

Die Schwangerschaft bei den untersuchten Frauen verlief an einem äusserst ungünstigen Hintergrund (Toxikosen in der 2. Schwangerschaftshälfte, chronische entzündliche Erkrankungen der urogenitalen Sphäre, isthmisch-zervikale Insuffizienz). The pregnancy in the women examined was extremely unfavorable (toxicoses in the second half of pregnancy, chronic inflammatory diseases of the urogenital sphere, isthmic-cervical insufficiency).

Die Frauen wurden in 2 Gruppen eingeteilt: 1) diejenigen, die das erfindungsgemässe Arzneimittel innerhalb von 3 Tagen erhielten (14 Patientinnen); 2) diejenigen, die das erfindungsgemässe Arzneimittel innerhalb von 5 bis 7 Tagen erhielten (30 Patientinnen). The women were divided into 2 groups: 1) those who received the medicament according to the invention within 3 days (14 patients); 2) those who received the medicament according to the invention within 5 to 7 days (30 patients).

Allen Frauen wurde vor dem Beginn der Medikation mit dem erfindungsgemässen Arzneimittel bakteriologische Untersuchung durchgeführt, bei welcher in allen Fällen in diesem oder jenem Masse ausgeprägte dysbiotische Störungen der Vaginalmikroflora nachgewiesen wurden: eine signifikante Senkung der Laktobakterienanzahl auf IO3 bis 104 Mikrobenzellen/g und in einigen Fällen auf 102 Mikrobenzellen/g, die Erhöhung der Staphylokkkenanzahl auf 106 bis 107 Mikrobenzellen/g, der Enterobakterienanzahl auf 104 bis 105 Mikrobenzellen/g. Bei der 3-tägigen Anwendung des erfindungsgemässen Arzneimittels bei den Frauen mit der pränatalen Ergiessung des Fruchtwassers wurde die Entwicklung des Infektionsprozesses bei Neugeborenen in 68% der Fälle nachgewiesen (Pneumonie, Enterokolitis, Nabelentzündung). Before the start of medication with the medicament according to the invention, all women were subjected to a bacteriological examination, in which, in all cases, pronounced dysbiotic disorders of the vaginal microflora were detected to a certain extent: a significant reduction in the number of lactobacteria to IO3 to 104 microbial cells / g and in some cases to 102 microbial cells / g, the increase in the number of staphylocci to 106 to 107 microbial cells / g, the number of enterobacteria to 104 to 105 microbial cells / g. When the medicament according to the invention was used for 3 days in women with prenatal irrigation of the amniotic fluid, the development of the infection process in newborns was demonstrated in 68% of the cases (pneumonia, enterocolitis, umbilical inflammation).

In den Fällen, wo das erfindungsgemässe Arzneimittel innerhalb von 5 bis 7 Tagen verwendet wurde, verlief die Periode der Neugeburt günstiger und die Entwicklung des Infektionsprozesses wurde in 24% der Fälle nachgewiesen. In cases where the medicinal product according to the invention was used within 5 to 7 days, the period of rebirth was more favorable and the development of the infection process was detected in 24% of the cases.

Die postnatale Periode in den Fällen, wo das Arzneimittel innerhalb von 5 bis 7 Tagen angewendet wurde, verlief günstiger es wurden keine Infektionskomplikationen beobachtet. Allen Neugeborenen wurde dreimal in der Dynamik die bakteriologische Untersuchung des Darminhalts durchgeführt. Allen Frühgeborenen der gegebenen Gruppe wurden nach Indikationen Antibiotika vom breiten Wirkungsspektrum verordnet, im Zusammenhang damit entstanden bei der Formung der Darmmikroflora Störungen, The postnatal period was more favorable in cases where the drug was used within 5 to 7 days and no infection complications were observed. The bacteriological examination of the contents of the intestine was carried out three times in dynamics for all newborns. Antibiotics with a broad spectrum of effects were prescribed for all premature babies in the given group. In connection with this, disorders occurred in the formation of the intestinal microflora,

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die durch eine spätere Entwicklung der Normoflora begleitet wurden. which were accompanied by a later development of the Normoflora.

Ein günstigerer Verlauf der Periode der Neugeburt bei den Frühgeborenen ist offensichtlich auf die Verminderung 5 der Möglichkeit der Bildung im Darm des Kindes der Kolonien von bedingt pathogener Flora zurückzuführen, als Ergebnis der Normalisierung der Vaginalmikroflora der Mütter beim Vorwiegen der Laktobakterien darin. A more favorable course of the period of new birth in premature babies is obviously due to the reduction in the possibility of formation in the intestine of the child of the colonies of conditionally pathogenic flora, as a result of the normalization of the vaginal microflora of the mother when the lactobacteria predominate therein.

Dadurch besitzt das erfindungsgemässe Arzneimittel eine io höhere Adhäsionsaktivität gegen Vaginalepitheliozyten als bekannte Arzneimittel; ist für den Makroorganismus bei der peroralen und lokalen Anwendung unschädlich; besitzt eine antagonistische Wirksamkeit gegen Staphylokokkus, Proteus, Shigellen, Salmonellen, enteropathogene Escherichia; i5 besitzt eine multiple Resistenz gegen Antibiotika. Die oben angeführten Eigenschaften des erfindungsgemässen Arzneimittels sichern einen ausgeprägten und anhaltenden therapeutischen Effekt, und das Ausbleiben der Kontraindikationen und der Nebenerscheinungen gestattet, dieses in der ge-20 burtshilflichen Praxis zur Korrektion der dysbiotischen Störungen in der Vaginalmikrobiozenose, indem dadurch die Menge der Infektionskomplikationen in der postnatalen Periode herabgesetzt wird, sowie zwecks Prophylaxe der Infektionskomplikationen bei Neugeborenen breit anzuwenden. 25 Das Arzneimittel ist auch in der gynäkologischen Praxis zur Behandlung akuter und chronischer Erkrankungen der Geschlechtssphäre indiziert. As a result, the medicament according to the invention has a higher adhesion activity against vaginal epitheliocytes than known medicaments; is harmless to the macroorganism when used orally and locally; has an antagonistic activity against staphylococcus, proteus, shigella, salmonella, enteropathogenic escherichia; i5 has multiple resistance to antibiotics. The above-mentioned properties of the medicament according to the invention ensure a pronounced and long-lasting therapeutic effect, and the absence of contraindications and side effects allows this to be used in fertility-related practice for the correction of dysbiotic disorders in vaginal microbiocenosis, thereby reducing the number of complications of infection in the postnatal period is reduced, and widely used for the prophylaxis of infection complications in newborns. 25 The medicine is also indicated in gynecological practice for the treatment of acute and chronic diseases of the sex sphere.

Das erfindungsgemässe Arzneimittel wird durch Vermischen von lyophil getrockneten Bakterienkulturen der ge-30 nannten Stämme in einem Verhältnis von 1:1 hergestellt. Das erfindungsgemässe Arzneimittel wird in Flaschen hergestellt, die zu je 5 und 10 Dosen enthalten (der Gehalt einer Dose beträgt 0,5—1 • 109 Mikrobenzellen). The medicament according to the invention is produced by mixing lyophilically dried bacterial cultures of the strains mentioned in a ratio of 1: 1. The medicament according to the invention is produced in bottles which contain 5 and 10 doses each (the content of one can is 0.5-1 · 109 microbial cells).

Das erfindungsgemässe Arzneimittel wird vorzugsweise 35 in Form von Pulver, Kapseln und Suppositorien verwendet. Das erfindungsgemässe Arzneimittel wird intravaginal lmal pro Tag in einer Menge von mindestens 5 Dosen innerhalb von 5 bis 7 Tagen unter bakteriologischer Kontrolle der Vaginalmikrobiozenose eingeführt. Bei Notwendigkeit kann 40 die Behandlungskur wiederholt werden. Dank einer hohen Antibiotikaresistenz der Laktobakterien stört die Anwendung des erfindungsgemässen Arzneimittels in genannten Dosen die Antibiotikatherapie nicht. The medicament according to the invention is preferably used in the form of powder, capsules and suppositories. The medicament according to the invention is introduced intravaginally once a day in an amount of at least 5 doses within 5 to 7 days under bacteriological control of the vaginal microbiocenosis. If necessary, the treatment course can be repeated. Thanks to the high antibiotic resistance of the lactobacteria, the use of the medicament according to the invention in the doses mentioned does not interfere with the antibiotic therapy.

Das Arzneimittel ruft keine Nebenreaktionen hervor, es 45 gibt keine Kontraindikationen. Die Aufbewahrungsfrist beträgt 12 Monate. The drug causes no side reactions, there are 45 no contraindications. The retention period is 12 months.

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Claims

674150 PATENT CLAIMS

1. Medicament for the prophylaxis and treatment of vaginal dysbacteriosis, which provides for a bacterial culture, characterized in that it contains as a bacterial culture a mixture of the strain Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3324 and the strain Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3325 in a ratio of 1: 1 which strains were deposited in the Central Museum for Industrial Microorganisms of the Union Research Institute for Genetics and Selection of Industrial Microorganisms on March 29, 1985.

2. Medicament according to claim 1 in the form of powder, capsules, suppositories, characterized in that it contains the mixture of said strains in an amount of 0.5 - 1 • 109 microbial cells.

3. A method for the selection of the strains Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3324 and Lactobacillus acidophilus ZMPM B-3325 for the medicament according to claim 1 or 2 by the natural selection according to the characteristic of adhesion to human vaginal epitheliocytes and erythrocytes from the vagina of a healthy one adult female isolated parent Lactobacillus acidophilus.