CH645120A5

CH645120A5 - PROCESS FOR THE PREPARATION OF VINDESIN SULFATE.

Info

Publication number: CH645120A5
Application number: CH904479A
Authority: CH
Inventors: Stanislaw Rolski
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1978-10-10
Filing date: 1979-10-08
Publication date: 1984-09-14
Also published as: BE879213A; PL218756A1; PL117678B1; EG14140A; FI70223C; DK422979A; GR72394B; FI70223B; GB2031893A; BG34763A3; CH649301A5; YU241179A; RO77380A; IL58390A0; DK146823C; FR2438659B1; IL58390A; AT370422B; DE2964913D1; EP0009996A1

Description

Cette invention fournit un procédé de préparation de sulfate de vindésine qui donne un produit ayant une bonne stabi-55 lité de conversation et facile à manipuler. This invention provides a process for the preparation of vindesin sulfate which provides a product having good talkability and easy to handle.

Cette invention fournit un procédé de préparation de sulfate de vindésine, qui comprend les étapes consistant à dissoudre de la vindésine-base essentiellement pure dans de l'acétonitrile ou de l'acétone, à une concentration d'environ 1 %, 60 puis à y ajouter une quantité équimoléculaire d'acide sulfurique aqueux, de préférence IN, par rapport à la vindésine-base, en agitant à une vitesse telle qu'elle minimise la formation de disulfate de vindésine, de façon à obtenir un produit qui est du monosulfate de vindésine pratiquement pur. 65 La vitesse d'addition et le degré de mélange deviennent déterminants au fur et à mesure que la neutralisation de la vin-désine-base touche à sa fin. This invention provides a process for the preparation of vindesin sulfate, which comprises the steps of dissolving essentially pure vindesin base in acetonitrile or acetone, at a concentration of about 1%, 60 and thereafter add an equimolecular amount of aqueous sulfuric acid, preferably IN, relative to the vindesin base, stirring at a speed such that it minimizes the formation of vindesin disulfate, so as to obtain a product which is monosulfate of practically pure vindesine. 65 The speed of addition and the degree of mixing become decisive as the neutralization of wine-desin-base comes to an end.

On effectue le procédé de l'invention de préférence en The process of the invention is preferably carried out by

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deux étapes. Premièrement, on ajoute lentement (goutte à goutte en agitant) un équivalent d'acide sulfurique aqueux (de préférence IN) par rapport à la vindésine-base à une solution de vindésine à 1% dans de l'acétonitrile. Une fois cette addition terminée, on agite la suspension résultante pendant environ une demi-heure, après quoi on effectue une addition lente, avec agitation, de l'équivalent restant d'acide sulfurique aqueux. Puis on poursuit l'agitation pendant une demi-heure supplémentaire, après quoi on sépare par filtration le sulfate de vindésine qui a précipité. On lave le gâteau de filtration avec le même solvant organique que celui utilisé pour dissoudre la vindésine-base initialement, puis on le sèche à poids constant. Le rendement en sulfate à partir de la base est de 94-96%. two step. Firstly, an equivalent of aqueous sulfuric acid (preferably IN) relative to the vindesin base is added slowly (dropwise with stirring) to a solution of 1% vindesin in acetonitrile. Once this addition is complete, the resulting suspension is stirred for about half an hour, after which a slow addition, with stirring, of the remaining equivalent of aqueous sulfuric acid is carried out. Then the stirring is continued for an additional half hour, after which the precipitated vindesine sulfate is filtered off. The filter cake is washed with the same organic solvent as that used to dissolve the vindesine-base initially, then it is dried to constant weight. The sulphate yield from the base is 94-96%.

Plus particulièrement, on ajoute l'acide sulfurique aqueux IN à la solution à 1 % de vindésine dans l'acétonitrile, à une vitesse telle que la vitesse d'addition de l'acide sulfurique à la solution de vindésine, associée au degré d'agitation ou au degré de mélange, permet d'éviter la formation de disulfate de vindésine. On a trouvé qu'une vitesse d'environ 1 ml par minute était satisfaisante, en particulier vers la fin du processus de neutralisation. On utilise commodément une burette pour l'addition. More particularly, aqueous IN sulfuric acid is added to the 1% solution of vindesine in acetonitrile, at a rate such as the rate of addition of sulfuric acid to the vindesine solution, associated with the degree of agitation or to the degree of mixing, prevents the formation of vindesin disulfate. It has been found that a speed of about 1 ml per minute is satisfactory, especially towards the end of the neutralization process. A burette is conveniently used for addition.

Dans la mise en oeuvre du présent procédé, le produit principal formé entre la vindésine-base et le premier équivalent d'acide sulfurique est l'hémisulfate (deux moles de vindésine par mole d'acide sulfurique). Le second équivalent d'acide sulfurique, que l'on ajoute à la même vitesse, transforme l'hémisulfate en monosulfate (une mole de vindésine par mole d'acide sulfurique). Si l'addition est trop rapide, en particulier vers la fin du processus de neutralisation ou si l'on utilise un excès d'acide sulfurique, il se forme le disulfate (une mole de vindésine pour deux moles d'acide sulfurique). Si la quantité d'acide sulfurique ajoutée à la vindésine est calculée comme étant deux équivalents par rapport au poids de la vindésine, considérée comme pure à 97 % (alcaloïde pur contenant du -solvant, etc ...), tout acide sulfurique qui est fixé sous forme de disulfate laisse nécessairement un peu de vindésine présente sous forme de l'hémisulfate, car il y a insuffisamment d'acide sulfurique pour former le monosulfate pour la quantité totale de vindésine. L'hémisulfate est moins stable que le monosulfate de vindésine. Par exemple, après un mois à 25 °C, l'hémisulfate de vindésine possède seulement 85,2% de la puissance initiale, tandis que le monosulfate de vindésine en possède 97,4%. Ainsi, le processus d'addition lente selon cette invention évite la formation de disulfate et la présence d'hémisul-fate dans le produit et donne un monosulfate de vindésine de stabilité satisfaisante et qui est facile à manipuler pour les préparations pharmaceutiques. Le monosulfate de vindésine ainsi obtenu présente également des propriétés physiques permettant de l'utiliser comme référence analytique. In the implementation of the present process, the main product formed between vindesin-base and the first equivalent of sulfuric acid is hemisulfate (two moles of vindesine per mole of sulfuric acid). The second equivalent of sulfuric acid, which is added at the same speed, transforms the hemisulfate into monosulfate (one mole of vindesine per mole of sulfuric acid). If the addition is too rapid, especially towards the end of the neutralization process or if an excess of sulfuric acid is used, disulfate is formed (one mole of vindesine for two moles of sulfuric acid). If the quantity of sulfuric acid added to vindesine is calculated as being two equivalents relative to the weight of vindesine, considered to be 97% pure (pure alkaloid containing -solvent, etc.), any sulfuric acid which is fixed in the form of disulfate necessarily leaves a little vindesin present in the form of hemisulfate, since there is insufficient sulfuric acid to form monosulfate for the total amount of vindesine. Hemisulfate is less stable than vindesine monosulfate. For example, after one month at 25 ° C, vindesine hemisulfate has only 85.2% of the initial power, while vindesine monosulfate has 97.4%. Thus, the slow addition process according to this invention avoids the formation of disulfate and the presence of hemisul-fate in the product and gives a vindesine monosulfate of satisfactory stability and which is easy to handle for pharmaceutical preparations. The vindesine monosulfate thus obtained also has physical properties allowing it to be used as an analytical reference.

Une courbe de titrage pour la neutralisation de la vindésine-base par l'acide sulfurique aqueux IN, effectuée comme précédemment, présente un point d'inflexion à pH 6,5 correspondant à la formation de l'hémisulfate de vindésine. L'addition du second équivalent d'acide sulfurique IN fait que le pH apparent de la solution tombe à une valeur comprise entre 4,5 et 5,0. A titration curve for the neutralization of vindesin-base with aqueous sulfuric acid IN, carried out as previously, has an inflection point at pH 6.5 corresponding to the formation of vindesin hemisulfate. The addition of the second equivalent of sulfuric acid IN causes the apparent pH of the solution to fall to between 4.5 and 5.0.

Bien qu'il soit possible de suivre la réaction précédente avec un pH-mètre, le point final s'est révélé être variable (4,5-5,0). Il est préférable que la quantité d'acide sulfurique ajouté soit calculée sur la base de la quantité de vindésine-base présente, déterminée par Chromatographie liquide sous pression élevée, plutôt que de se fier à la détermination du point final. Il est très important, pour la stabilité du monosulfate de vindésine préparé par le procédé de cette invention, d'utiliser de la vindésine-base de pureté élevée. Although it is possible to follow the previous reaction with a pH meter, the end point was found to be variable (4.5-5.0). It is preferable that the amount of sulfuric acid added is calculated based on the amount of vindesin-base present, determined by high pressure liquid chromatography, rather than relying on the determination of the end point. It is very important, for the stability of the vindesine monosulfate prepared by the process of this invention, to use vindesin-base of high purity.

L'addition d'un excès d'acide sulfurique fait que le pH apparent descend encore lorsque le monosulfate est transformé en disulfate. La présence de disulfate dans le monosulfate donne, par dissolution dans l'eau (10 mg/ml), un pH plus acide que celui qu'une solution de monosulfate de vindésine pur pourrait fournir (pH 4,5). Le disulfate de vindésine en solution dans l'eau à 10 mg/ml a un pH de 2.0. La microanalyse du sulfate solide indique un pourcentage de soufre à 3,76%, quantité calculée pour le monosulfate de vindésine. The addition of an excess of sulfuric acid causes the apparent pH to fall further when the monosulfate is transformed into disulfate. The presence of disulfate in the monosulfate gives, on dissolution in water (10 mg / ml), a more acidic pH than that which a solution of pure vindesine monosulfate could provide (pH 4.5). Vindesin disulfate in solution in water at 10 mg / ml has a pH of 2.0. The solid sulfate microanalysis indicates a percentage of sulfur at 3.76%, an amount calculated for vindesine monosulfate.

Le sulfate de vindésine obtenu par le présent procédé est hydraté et contient de 4 à 5% d'eau (environ deux moles) selon une détermination Karl Fisher. Ainsi, le sulfate de vindésine contient par molécule une mole de vindésine, une mole d'acide sulfurique et deux moles d'eau. Ce produit est une nouvelle substance. The vindesine sulphate obtained by the present process is hydrated and contains from 4 to 5% of water (approximately two moles) according to a Karl Fisher determination. Thus, vindesine sulfate contains per mole one mole of vindesine, one mole of sulfuric acid and two moles of water. This product is a new substance.

Dans la mise en oeuvre du procédé de cette invention, l'acétonitrile a été déterminé comme étant le solvant de choix pour la dissolution de la vindésine en vue de sa neutralisation par l'acide sulfurique aqueux. On peut également utiliser l'acétone, mais on préfère l'acétonitrile car le monosulfate de vindésine préparé dans ce solvant a une meilleure stabilité. L'utilisation d'acide sulfurique IN et d'une solution de vindésine à 1 % dans l'acétonitrile (ou l'acétone) a été précisée car on a trouvé que ces concentration étaient optimales. Comme l'homme de l'art le verra, la modification des concentrations précédentes peut donner du monosulfate de vindésine de propriétés satisfaisantes. De tels modes opératoires font partie du domaine de l'invention. In implementing the process of this invention, acetonitrile was determined to be the solvent of choice for dissolving vindesine for neutralization with aqueous sulfuric acid. Acetone can also be used, but acetonitrile is preferred because the vindesine monosulfate prepared in this solvent has better stability. The use of IN sulfuric acid and a 1% solution of vindesin in acetonitrile (or acetone) was clarified because it was found that these concentrations were optimal. As those skilled in the art will see, the modification of the previous concentrations can give vindesine monosulfate with satisfactory properties. Such procedures are part of the scope of the invention.

L'invention est en outre illustré par l'exemple spécifique suivant: The invention is further illustrated by the following specific example:

Exemple 1 Example 1

On prépare une solution à partir de 32,84 g de vindésine-base et de 3284 ml d'acétonitrile. On y ajoute un équivalent d'acide sulfurique aqueux IN en agitant, à raison d'1 ml/mn (1 g de vindésine-base d'une pureté de 97% demande 1,25 ml d'acide sulfurique aqueux 1,0 N). Après addition du premier équivalent d'acide sulfurique, on agite la suspension résultante à la température ambiante pendant 20 à 30 minutes, après quoi on ajoute le second équivalent d'acide sulfurique aqueux IN à la même vitesse, en agitant. Pendant l'addition du second équivalent d'acide sulfurique, l'hémisulfate formé par addition du premier équivalent se transforme en monosulfate de vindésine. Après addition du second équivalent d'acide sulfurique, on agite la solution résultante pendant 30 minutes supplémentaires à la température ambiante. Puis on filtre le sulfate de vindésine ainsi préparé et on lave le gâteau de filtration avec 100 ml d'acétonitrile. On sèche sous vide le précipité à une température ne dépessant pas 35 °C, jusqu'à poids constant; rendement = 34,8 - 35,6 g (94-96%). A solution is prepared from 32.84 g of vindesin-base and 3284 ml of acetonitrile. An equivalent of aqueous IN sulfuric acid is added thereto with stirring, at a rate of 1 ml / min (1 g of vindesine-base with a purity of 97% requires 1.25 ml of aqueous sulfuric acid 1.0 N ). After adding the first equivalent of sulfuric acid, the resulting suspension is stirred at room temperature for 20 to 30 minutes, after which the second equivalent of aqueous IN sulfuric acid is added at the same speed, with stirring. During the addition of the second equivalent of sulfuric acid, the hemisulfate formed by addition of the first equivalent is transformed into vindesine monosulfate. After adding the second equivalent of sulfuric acid, the resulting solution is stirred for an additional 30 minutes at room temperature. Then the vindesin sulfate thus prepared is filtered and the filter cake is washed with 100 ml of acetonitrile. The precipitate is dried under vacuum at a temperature not exceeding 35 ° C, to constant weight; yield = 34.8 - 35.6 g (94-96%).

Dans l'exemple précédent, la vitesse d'addition de l'acide sulfurique dilué à la solution de vindésine-base ou d'hémisul-fate de vindésine est de 1 ml/mn. Des vitesses inférieures donnent pratiquement les mêmes résultats, on peut utiliser des vitesses d'addition plus rapides pourvu que l'agitation soit suffisante pour permettre d'éviter la formation du disulfate. Ce qui est important n'est pas la vitesse d'addition absolue de l'acide sulfurique aqueux dilué, mais l'addition à une vitesse appropriée associée à une agitation suffisante pour minimiser la formation de disulfate, en particulier vers la fin du processus de neutralisation. In the previous example, the speed of addition of the dilute sulfuric acid to the vindesin base or vindesin hemisulphate solution is 1 ml / min. Lower rates give practically the same results, faster addition rates can be used provided that stirring is sufficient to prevent disulfate formation. What is important is not the absolute rate of addition of the dilute aqueous sulfuric acid, but the addition at an appropriate rate associated with sufficient agitation to minimize the formation of disulfate, particularly towards the end of the process. neutralization.

Le mode opératoire précédent peut être effectué en deux étapes, c'est-à-dire que l'hémisulfate qui est un composé bien caractérisé, peut être isolé, séché puis remis en suspension dans un solvant organique pour l'addition du second équivalent d'acide sulfurique à la suspension. The preceding procedure can be carried out in two stages, that is to say that the hemisulfate which is a well characterized compound, can be isolated, dried and then resuspended in an organic solvent for the addition of the second equivalent of sulfuric acid in the suspension.

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Claims

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1. A process for the preparation of vindesin sulfate, characterized in that it comprises the stages consisting in dissolving practically pure vindesin-base in acetonitrile or acetone, at a concentration of approximately 1%, then in Add to it an equimolecular amount of aqueous sulfuric acid with respect to vindesin base, stirring at such a speed that the formation of vindesin disulfate is minimized, to obtain a product which is practically pure vindesin monosulfate.

2. Method according to claim 1, characterized in that the solvent is acetonitrile.

2

3. Method according to either of claims 1 and 2, characterized in that the aqueous sulfuric acid is added at a speed of 1 ml per minute or at a lower speed.

4 ". Method according to claim 1, characterized in that it comprises the steps consisting in dissolving vindesin-base in acetonitrile or acetone at a concentration of approximately 1%, then in adding an equivalent sulfuric acid

as aqueous with respect to vindesin-base with stirring to form vindesin hemisulphate, then adding a second equivalent of aqueous sulfuric acid with respect to vindesin-base, with stirring, to transform the hemisulphate from 5 vindesine to vindesine monosulfate, at such a speed that the formation of vindesin disulfate is minimized, to obtain a product which is essentially essentially pure vindesine monosulfate in the form of the dihydrate.

5. Vindesin sulphate, in the form of practically pure wine-io desine monosulphate, obtained by the process according to one of claims 1 to 4.

Vindesin is described in Belgian patent n ° 813 168 issued on October 2, 1974, and is here called Carboxamide in C-3 of 4 - deacetyl - VLB. The compound has the following structural formula:

-CHst-CHi

CH3-0 - ** 6

Vindesine can also be called 3-Carboxamide of 4 - deacetyl-3 - decarbomethoxy-VLB or 23-amino -04 - deacetyl-23 - demethoxy-vincaleucoblastine. A vindesine sulfate is also described in a particular way in Belgian patent n ° 813168. _

Vindesin exhibits, in tumor systems transplanted in animals, an activity approaching that of vincristine although it does not have certain potential neurological side effects which accompany the clinical use of vincristine. Vindesine is currently in clinical trials worldwide and has been shown to be useful in early trials for certain leukemias, certain lymphomas and certain lung carcinomas.

Vinblastine and vincristine, two related vinca alkaloids currently sold as agents for destroying cancer cells, are prepared as their sulfates for use by intravenous administration to patients with various tumors. However, it has been found that vindesin sulfate, prepared by simply mixing a solution of vindesin-base in different solvents with two equivalents of dilute sulfuric acid 50 and then evaporating to dryness, is electrostatic (difficult to handle) and that its stability at the conversation was not satisfactory.