CH634056A5

CH634056A5 - Process for preparing a derivative of streptovaricinone C

Info

Publication number: CH634056A5
Application number: CH1232375A
Authority: CH
Inventors: Kazuya Sasaki; Takanobu Naito; Toshiyuki Satomi; Yoshio Momoki; Toshio Sega
Original assignee: Kaken Chemical Co
Priority date: 1974-11-11
Filing date: 1975-09-23
Publication date: 1983-01-14
Also published as: FR2319344A1; FR2290198A1; FR2319344B1; FR2290198B1; DE2542797A1; CA1056825A; GB1509028A

Description

634056 634056

2 2nd

PATENTANSPRUCH Verfahren zur Herstellung eines Derivats von Strepto-varicinon C der folgenden allgemeinen Formel PATENT CLAIM Process for the preparation of a derivative of strepto-varicinon C of the following general formula

CH, CH,

Bedingungen hydrolysiert werden kann, wobei Streptovarici- • non C der folgenden Formel erhalten wird: Conditions can be hydrolyzed, whereby Streptovarici- • non C of the following formula is obtained:

LyJ*0-eu' LyJ * 0-eu '

qoocHj h°Y^\^ch3 qoocHj h ° Y ^ \ ^ ch3

1 OH an) 1 OH on)

CH* CH *

CH CH

HO HO

10 10th

15 15

" HO ^J^CH3 "HO ^ J ^ CH3

CHj x, CHj x,

COOCH COOCH

HO HO

CHi CHi

(Ii) (Ii)

wobei Z eine Acyl-, Alkoxycarbonyl-, Aryloxycarbonyl-, Al-kylsulfonyl- oder Benzolsulfonyl-Gruppe ist, welche gegebenenfalls durch Halogen, Hydroxy, Cyano, Nitro, Alkyl, Phe-nyl, Alkoxy, Phenoxy, Carbamyl oder Acetylamino substituiert ist, dadurch gekennzeichnet, dass man ein Alkalimetallsalz von Streptovaricinon C in 6-Position mit einem entsprechenden organischen Carbonsäurehalogenid, einem entsprechenden organischen Sulfonsäurehalogenid oder einem Alkyl-halogencarbonat verestert. where Z is an acyl, alkoxycarbonyl, aryloxycarbonyl, alkylsulfonyl or benzenesulfonyl group which is optionally substituted by halogen, hydroxyl, cyano, nitro, alkyl, phenyl, alkoxy, phenoxy, carbamyl or acetylamino characterized in that an alkali metal salt of streptovaricinone C in the 6-position is esterified with a corresponding organic carboxylic acid halide, a corresponding organic sulfonic acid halide or an alkyl halocarbonate.

Es wurden die verschiedensten Untersuchungen unternom-20 men, Antibiotika mit ausgezeichneter antibiotischer Aktivität zu synthetisieren. Various investigations have been undertaken to synthesize antibiotics with excellent antibiotic activity.

Es ist somit Aufgabe der vorliegenden Erfindung, ein Verfahren zur Herstellung neuer Derivate des Streptovaricinon C mit ausgezeichneter antibiotischer Aktivität zu schaf-25 fen. It is therefore an object of the present invention to provide a process for the preparation of new derivatives of streptovaricinone C with excellent antibiotic activity.

Diese Aufgabe wird erfindungsgemäss gelöst durch das im Patentanspruch geschilderte Verfahren zur Herstellung von Derivaten des Streptovaricinons C der Formel According to the invention, this object is achieved by the process for the production of derivatives of streptovaricinone C of the formula described in the patent claim

30 30th

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung eines Derivats von Streptovaricinon C. The invention relates to a method for producing a derivative of streptovaricinone C.

Streptovaricine sind bekannte Antibiotika, welche durch Kultivierung des Stammes Streptomyces 101, Species 2494 gewonnen werden. Die Streptovaricine haben die folgende chemische Formel: Streptovaricins are known antibiotics, which are obtained by cultivating the strain Streptomyces 101, Species 2494. The streptovaricins have the following chemical formula:

35 35

O HO O HO

CH CH

40 40

:H3 hc* : H3 hc *

.. _ joch3 COOCH3 ko^\^CH3 H .. _ yoch3 COOCH3 ko ^ \ ^ CH3 H

CH, CH,

CHj OH CHj OH

45 45

CH, CH,

(I) (I)

50 50

OH OH

Die Erfinder haben festgestellt, dass Streptovaricin C der Formel (I) in einem alkalischen Medium unter oxydierenden 55 The inventors have found that streptovaricin C of formula (I) in an alkaline medium under oxidizing 55

60 60

65 65

wobei Z eine Acyl-, Alkoxycarbonyl-, Aryloxycarbonyl-, Al-kylsulfonyl- oder Benzolsulfonyl-Gruppe ist, welche gegebenenfalls durch Halogen, Hydroxy, Cyano, Nitro, Alkyl, Phe-nyl, Alkoxy, Phenoxy, Carbamyl oder Acetylamino substituiert ist, dadurch gekennzeichnet, dass man ein Alkalimetallsalz von Streptovaricinon C in 6-Position mit einem entsprechenden organischen Carbonsäurehalogenid, einem entsprechenden organischen Sulfonsäurehalogenid oder einem Alkyl-halogencarbonat verestert. where Z is an acyl, alkoxycarbonyl, aryloxycarbonyl, alkylsulfonyl or benzenesulfonyl group which is optionally substituted by halogen, hydroxy, cyano, nitro, alkyl, phenyl, alkoxy, phenoxy, carbamyl or acetylamino characterized in that an alkali metal salt of streptovaricinone C in the 6-position is esterified with a corresponding organic carboxylic acid halide, a corresponding organic sulfonic acid halide or an alkyl halocarbonate.

Z kann eine Alkoxycarbonylgruppe mit vorzugsweise 2 bis 7 Kohlenstoffatomen, wie Methoxycarbonyl, Äthoxycarbo-nyl, Isobutoxycarbonyl, n-Butoxycarbonyl; oder eine Aryloxy-carbonylgruppe, wie Phenoxycarbonyl bedeuten. Ferner kann Z eine Acylgruppe bedeuten, z.B. eine Alkanoylgruppe mit vorzugsweise 2-7 Kohlenstoffatomen, wie Acetyl, Propionyl, Butyryl oder eine Halogenalkanoylgruppe wie Bromacetyl oder Chloracetyl oder eine Phenylalkanoylgruppe, wie Phe-nylacetyl oder eine durch eine Gruppe der Formel Y-S substituierte Alkanoylgruppe mit vorzugsweise 2-4 und insbesondere 2 Kohlenstoffatomen, wobei die Gruppe Y eine Alkyl-gruppe mit vorzugsweise 1-4 und speziell 1-7 Kohlenstoffatomen sein kann oder eine Phenylgruppe oder eine Benzyl-gruppe oder eine Gruppe der Formeln Z can be an alkoxycarbonyl group preferably having 2 to 7 carbon atoms, such as methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, isobutoxycarbonyl, n-butoxycarbonyl; or an aryloxy-carbonyl group such as phenoxycarbonyl. Furthermore Z can mean an acyl group, e.g. an alkanoyl group with preferably 2-7 carbon atoms, such as acetyl, propionyl, butyryl or a haloalkanoyl group such as bromoacetyl or chloroacetyl or a phenylalkanoyl group such as phenyl acetyl or an alkanoyl group substituted by a group of the formula YS, preferably having 2-4 and in particular 2 carbon atoms, where the group Y can be an alkyl group with preferably 1-4 and especially 1-7 carbon atoms or a phenyl group or a benzyl group or a group of the formulas

3 3rd

634056 634056

Emulsion oder dgl. Hierzu gibt man das Antibiotikum zu einem pharmazeutisch verträglichen Träger, z.B. zu einem organischen oder einem anorganischen Feststoff oder zu einem flüssigen Träger. Die Dosis der erfindungsgemässen Deri-5 vate des Streptovaricinons C liegt im Bereich von 100 mg bis 3 g pro Tag. Die das Antibiotikum enthaltenden Mittel können andere Stoffe und andere pharmazeutische wirksame Substanzen enthalten. Emulsion or the like. For this purpose, the antibiotic is added to a pharmaceutically acceptable carrier, e.g. to an organic or an inorganic solid or to a liquid carrier. The dose of the derivatives of streptovaricinone C according to the invention is in the range from 100 mg to 3 g per day. The agents containing the antibiotic can contain other substances and other pharmaceutically active substances.

Im folgenden seien typische Derivate des Streptovarici-io non C und deren antibiotische Aktivität angegeben. Typical derivatives of Streptovarici-io non C and their antibiotic activity are given below.

Antimikrobielle Aktivität in vitro: Antimicrobial activity in vitro:

Die antimikrobielle Aktivität wird nach der Standardmethode der Japanese Chemotherapy Society bestimmt. is Eine Lösung von 10 mg des Antibiotikums in 1 ml Äthanol wird mit 9 ml einer 0,01 %igen wässrigen Tween-80-Lösung verdünnt und die Lösung wird fernerhin mit der gleichen Lösung auf 1000; 500; 200; 100.... ng/ml verdünnt. Eine Mischung aus 9 ml einer warmen Hirn-Herz-Infusionsagar-Brühe 20 und aus 1 ml der oben bereiteten Lösung wird in eine Petrischale gegeben und auf Zimmertemperatur abgekühlt. Alle Testorganismen, wie Staphylococcus aureus Rosenbach FDA 209P JC-1 und Bacilus subtilis ATCC6633 werden bei 37°C während 18-20 h in Trypto-Soya-Brühe (Eiken) kultiviert und 25 für die Impfung auf 1:108 eingestellt, ausser Mycobacterium smegmatis ATCC 607, welches bei 37°C während 48 h in einer Hirn-Herz-Infusionsagar-Brühe mit einem Gehalt von 5 % Glycerin kultiviert wird. Die erhaltene Bakterienflüssigkeit wird auf die Agarplatte in der Petri-Schale gestrichen und bei 30 37°C während 18-20 h kultiviert, ausser by Mycobacterium smegmatis 607, bei dem man bei 37°C während 48 h arbeitet. Die Bakterienlösung Mycobakterium tuberculosis H37Rv wird in der homogenisierten Tween-Lösung hergestellt, worauf diese durch Trübungsmessung auf 0,1 mg/ml eingestellt wur-35 de. Eine Mischung von 4,5 ml einer halbflüssigen Kirchner-Agarlösung, 0,5 ml Pferdeserum und 0,5 ml Tween-Lösung wird für die Kultivierung dieses Bakteriums verwendet. Ein Zehntel ml dieser Flüssigkeit wird zur Impfung verwendet und danach wird die Platte während 2 Wochen bei 37°C inkubiert. 40 Die minimale Hemmkonzentration (MIC) ist die niedrigste Konzentration des Antibiotikums, welche ein sichtbares Wachstum nach der Inkubation verhindert. Antimicrobial activity is determined using the standard method of the Japanese Chemotherapy Society. is A solution of 10 mg of the antibiotic in 1 ml of ethanol is diluted with 9 ml of a 0.01% aqueous Tween-80 solution and the solution is further made up to 1000 with the same solution; 500; 200; 100 .... ng / ml diluted. A mixture of 9 ml of warm brain-heart infusion agar broth 20 and 1 ml of the solution prepared above is placed in a petri dish and cooled to room temperature. All test organisms, such as Staphylococcus aureus Rosenbach FDA 209P JC-1 and Bacilus subtilis ATCC6633, are cultured in Trypto-Soya broth (Eiken) at 37 ° C for 18-20 h and adjusted to 1:10 for vaccination, except for Mycobacterium smegmatis ATCC 607, which is cultivated at 37 ° C. for 48 h in a brain-heart infusion agar broth containing 5% glycerol. The bacterial liquid obtained is spread on the agar plate in the Petri dish and cultured at 30 37 ° C for 18-20 h, except by Mycobacterium smegmatis 607, which is carried out at 37 ° C for 48 h. The bacterial solution Mycobacterium tuberculosis H37Rv is prepared in the homogenized Tween solution, after which it was adjusted to 0.1 mg / ml by turbidity measurement. A mixture of 4.5 ml of a semi-liquid Kirchner agar solution, 0.5 ml of horse serum and 0.5 ml of Tween solution is used for the cultivation of this bacterium. A tenth of a ml of this liquid is used for vaccination and then the plate is incubated for 2 weeks at 37 ° C. 40 The minimum inhibitory concentration (MIC) is the lowest concentration of the antibiotic, which prevents visible growth after the incubation.

TABELLE 1 TABLE 1

6-O-substituierte Streptovaricinone C der Formel III 6-O-substituted streptovaricinones C of the formula III

Nr. No.

Z-Gruppe Z group

Schmelz-punkt (°C) Melting point (° C)

St. aureus 209P St. aureus 209P

antibiotische Aktivität [xg/ml Bacillus Myco, subtilis smeg. antibiotic activity [xg / ml Bacillus Myco, subtilis smeg.

607 607

Myco, tuberc. H37Rv Myco, tuberc. H37Rv

Vergleich comparison

H- H-

284-285 284-285

50 50

> 100 > 100

1 1

CH3CO- CH3CO-

169-171 169-171

20 20th

— -

5 5

2 2nd

CH3CHpO - CH3CHpO -

160-162 160-162

10 10th

— -

20 20th

3 3rd

CH3CH2CH2CO- CH3CH2CH2CO-

156-157 156-157

20 20th

— -

5 5

4 4th

CH3(CH2)3CQ- CH3 (CH2) 3CQ-

153-156 153-156

2 2nd

— -

5 5

CO- ; OC> CO-; OC>

Ferner kann es sich bei der Acylgruppeum eine hetero-cyclische Acylgruppe handeln, wie um eine Thienylcarbonyl-gruppe. Ferner kann Z eine Alkylsulfonylgruppe mit vorzugsweise 1-4 Kohlenstoffatomen sein, wie Methansulfonyl oder eine unsubstituierte oder substituierte Benzolsulfonylgruppe, ■wie p-Toluolsulfonyl, o-Toluolsulfonyl oder p-Acetylamino--benzolsulfonyl. Furthermore, the acyl group can be a heterocyclic acyl group, such as a thienylcarbonyl group. Furthermore, Z can be an alkylsulfonyl group with preferably 1-4 carbon atoms, such as methanesulfonyl or an unsubstituted or substituted benzenesulfonyl group, such as p-toluenesulfonyl, o-toluenesulfonyl or p-acetylamino-benzenesulfonyl.

Die Derivate des Streptovaricinons C werden gemäss vorliegender Erfindung durch Veresterung von Streptovaricinon C der Formel (II) hergestellt. Die Veresterung von Streptovaricinon C wird durchgeführt, indem man ein Alkalimetallsalz von Streptovaricinon C mit einem organischen Acylhalo-genid, einem organischen Sulfonylhalogenid oder einem Al-kyl-Halogencarbonat umsetzt. Die Hydroxylgruppe in 6-Posi-tion kann in eine Z'O-Gruppe umgewandelt werden, wobei Z' eine Alkenoylgruppe, eine Benzoylgruppe, eine Benzolsulfonylgruppe, eine Alkylsulfonylgruppe oder eine Alkoxycarbo-nylgruppe bedeutet, welche einen inerten Substituenten tragen können. Als organische Acylhalogenide, organische Sulfonyl-halogenide und Alkylhalogencarbonate kommen insbesondere Fettsäurehalogenide, Benzoesäurehalogenide, Benzolsulfon-säurehalogenid, Alkylsulfonsäurehalogenid, Methylchlorcar-bonat in Frage. Die Umsetzung wird vorzugsweise in einem inerten organischen Lösungsmittel wie Tetrahydrofuran durchgeführt, und zwar unter Rühren bei Zimmertemperatur während 5 min bis 48 h wobei man 1-3 Mole des Halogenids zu 1 Mol des Alkalimetallsalzes des Streptovaricinon C gibt. According to the present invention, the derivatives of streptovaricinone C are prepared by esterifying streptovaricinone C of the formula (II). The esterification of streptovaricinone C is carried out by reacting an alkali metal salt of streptovaricinon C with an organic acyl halide, an organic sulfonyl halide or an alkyl halocarbonate. The hydroxyl group in the 6-position can be converted into a Z'O group, where Z 'represents an alkenoyl group, a benzoyl group, a benzenesulfonyl group, an alkylsulfonyl group or an alkoxycarbonyl group, which can carry an inert substituent. Suitable organic acyl halides, organic sulfonyl halides and alkyl halocarbonates are, in particular, fatty acid halides, benzoic acid halides, benzenesulfonic acid halide, alkylsulfonic acid halide, methyl chlorocarbonate. The reaction is preferably carried out in an inert organic solvent such as tetrahydrofuran, with stirring at room temperature for 5 minutes to 48 hours, adding 1-3 moles of the halide to 1 mole of the alkali metal salt of streptovaricinone C.

Die erfindungsgemäss hergestellten Derivate des Streptovaricinons C haben wertvole pharmakologische Eigenschaften. Insbesondere handelt es sich um Antibiotika mit guter antibiotischer Aktivität gegenüber Gram positiven Bakterien. Streptovaricinon C kann ebenso wie andere Antibiotika, z.B. wie die Streptovaricine, in verschiedenen Formen verabreicht werden, z.B. in Tablettenform, in Form von Dragees, in Form eines Pulvers, einer Salbe, einer Creme, in Form von Kapseln, in Form einer Lösung oder einer Suspension oder in einer The derivatives of streptovaricinone C produced according to the invention have valuable pharmacological properties. In particular, they are antibiotics with good antibiotic activity against Gram-positive bacteria. Streptovaricinon C, like other antibiotics, e.g. how the streptovaricins are administered in various forms, e.g. in tablet form, in the form of coated tablets, in the form of a powder, an ointment, a cream, in the form of capsules, in the form of a solution or a suspension or in a

634056 634056

TABELLE 1 (Fortsetzung) TABLE 1 (continued)

Nr. No.

Z-Gruppa Z-Gruppa

Schmelz- antibiotische Aktivität jig/ml punkt St. Bacillus Myco. Myco. Enamel antibiotic activity jig / ml point St. Bacillus Myco. Myco.

(°C) aureus subtilis smeg. tuberc. (° C) aureus subtilis smeg. tuberc.

209P 607 H37Rv 209P 607 H37Rv

GH3(CH2)/,CO-Br-CH2CO-PhCH2CO — GH3 (CH2) /, CO-Br-CH2CO-PhCH2CO -

CH3(CH2 )3S-CH2CO' CH3 (CH2) 3S-CH2CO '

s—ch2co— s — ch2co—

10 10th

N N

)-s-ch2co- ) -s-ch2co-

11 11

12 12

®-s-ch2co— <§>-ch2s-ch2co- ®-s-ch2co— <§> -ch2s-ch2co-

13 CH3SO2 — 13 CH3SO2 -

®-so2- ®-so2-

Me-(Q)—S02— <^-so2- Me- (Q) —S02— <^ - so2-

14 14

15 15

16 16

17 AcNH 17 AcNH

so so

18 CH3O—CO 18 CH3O-CO

19 19th

CH3CH20-C0" CH3CH20-C0 "

144-147 165-168 154-155 132-134 144-147 165-168 154-155 132-134

2-5 10 20 5 2-5 10 20 5

150-153 10 150-153 10

139-142 10 139-142 10

142-144 10 142-144 10

134-136 134-136

167-170 167-170

156-158 156-158

162-165 162-165

165-167 165-167

180-184 180-184

160-163 160-163

152-154 152-154

10 5 5 0.5 10 5 5 0.5

0.5 0.5

10 10th

5 5

TABELLE 1 (Fortsetzung) TABLE 1 (continued)

634056 634056

Nr. Z-Gruppa No. Z-Gruppa

20 (CH3)2CHCH2OCO- 20 (CH3) 2CHCH2OCO-

CH3(CH2)30-C0- CH3 (CH2) 30-C0-

22 <§>-0-C0— 22 <§> -0-C0—

23 (ÇJ CO— 23 (ÇJ CO—

Im folgenden wird die Herstellung typischer Damavicin--C-Derivate anhand von Beispielen erläutert. The production of typical Damavicin-C derivatives is explained below using examples.

Beispiel 1 example 1

Herstellung von 6-O-Acetylstreptovaricinon C Production of 6-O-acetylstreptovaricinon C

Zu einer Suspension von 363 mg Streptovaricinon C in 10 ml Aceton gibt man 10 ml einer 0,05N-Lösung von Natriumhydroxid in Methanol. Die erhaltene Lösung wird unter vermindertem Druck bis zur Trockene abgedampft und das zurückbleibende Natriumsalz des Streptovaricinons C wird in 20 ml trockenem Tetrahydrofuran suspendiert. Zu der Suspension gibt man 90 mg Acetylchlorid und die Reaktionsmischung wird bei Zimmertemperatur während 5 min gerührt und dann in eine kalte 5 %ige Natriumbicarbonatlösung gegossen. Die Mischung wird mit Benzol wiederholt extrahiert und die Extrakte werden vereinigt und mit Wasser gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck bis zur Trockene abgedampft wobei ein rotes Öl zurückbleibt. Das Öl wird an Silikagel mit 5 % Methanol in Chloroform chromatographiert und die entsprechenden Fraktionen werden abgetrennt und vereinigt. Die Fraktionen werden zur Trockene unter vermindertem Druck abgedampft, wobei ein orangegefärbtes Öl erhalten wird. 10 ml of a 0.05N solution of sodium hydroxide in methanol are added to a suspension of 363 mg of streptovaricinone C in 10 ml of acetone. The solution obtained is evaporated to dryness under reduced pressure and the remaining sodium salt of streptovaricinone C is suspended in 20 ml of dry tetrahydrofuran. 90 mg of acetyl chloride are added to the suspension and the reaction mixture is stirred at room temperature for 5 min and then poured into a cold 5% sodium bicarbonate solution. The mixture is repeatedly extracted with benzene and the extracts are combined and washed with water and dried over anhydrous sodium sulfate and then evaporated to dryness under reduced pressure leaving a red oil. The oil is chromatographed on silica gel with 5% methanol in chloroform and the appropriate fractions are separated and combined. The fractions are evaporated to dryness under reduced pressure to give an orange oil.

Dieses wird aus Aceton/n-Hexan umkristallisiert, wobei man 182 mg 6-O-Acetylstreptovaricinon C mit einem Schmelzpunkt von 169-171°C erhält. This is recrystallized from acetone / n-hexane, giving 182 mg of 6-O-acetylstreptovaricinon C with a melting point of 169-171 ° C.

Beispiel 2 Example 2

Herstellung von 6-0-(3',5'-Dinitrobenzoyl)-treptovaricinon C Preparation of 6-0- (3 ', 5'-dinitrobenzoyl) treptovaricinone C

Zu einer Suspension von 360 mg Streptovaricinon C in 30 ml Methanol gibt man 10 ml einer 0,05N-Lösung von Natriumhydroxid in Methanol und die Mischung wird während 15 min gerührt und dann unter vermindertem Druck zur Trockene abgedampft, wobei man das Natriumsalz erhält. Das Natriumsalz wird in 10 ml trockenem Tetrahydrofuran suspendiert und zu der Suspension gibt man 116 mg 3,5-Di-nitrobenzoylchlorid. Die Mischung wird bei Zimmertemperatur während 30 min gerührt und unter vermindertem Druck bis zur Trockene abgedampft. Der Rückstand wird in Äthyl-acetat aufgenommen und die erhaltene Lösung wird mit Wasser gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrock- 10 ml of a 0.05N solution of sodium hydroxide in methanol are added to a suspension of 360 mg of streptovaricinone C in 30 ml of methanol, and the mixture is stirred for 15 minutes and then evaporated to dryness under reduced pressure to give the sodium salt. The sodium salt is suspended in 10 ml of dry tetrahydrofuran and 116 mg of 3,5-di-nitrobenzoyl chloride are added to the suspension. The mixture is stirred at room temperature for 30 min and evaporated to dryness under reduced pressure. The residue is taken up in ethyl acetate and the solution obtained is washed with water and dried over anhydrous sodium sulfate.

Schmelz- antibiotische Aktivität {ig/ml punkt St. Bacillus Myco. Myco. Enamel antibiotic activity {ig / ml point St. Bacillus Myco. Myco.

(°C) aureus subtilis smeg. tubero. (° C) aureus subtilis smeg. tubero.

209P 607 H37Rv 209P 607 H37Rv

150-152 0.2 — — 5 150-152 0.2 - - 5

138-141 1 — — 1 138-141 1 - - 1

164-165 5 — — 1 164-165 5 - - 1

186-188 5 — — 1 186-188 5 - - 1

net und dann unter vermindertem Druck bis zur Trockene abgedampft. Der Rückstand wird mit Aceton an Sephadex LH-20 chromatographiert und die entsprechenden Fraktionen werden abgetrennt und vereinigt. Die Fraktionen werden unter vermindertem Druck bis zur Trockene abgedampft. Man erhält ein orangerotes Öl, welches aus Chloroform/n-Hexan umkristallisiert wird. Dabei erhält man ein gelbes kristallines Pulver von 6-0-(3',5'-Dinitrobenzoyl)-streptovaricinon C mit einem Schmelzpunkt von 178-182°C. net and then evaporated to dryness under reduced pressure. The residue is chromatographed on Sephadex LH-20 with acetone and the appropriate fractions are separated and combined. The fractions are evaporated to dryness under reduced pressure. An orange-red oil is obtained, which is recrystallized from chloroform / n-hexane. This gives a yellow crystalline powder of 6-0- (3 ', 5'-dinitrobenzoyl) streptovaricinone C with a melting point of 178-182 ° C.

Beispiel 3 Example 3

Herstellung von 6-O-Methansulfonylstreptovaricinon C Preparation of 6-O-methanesulfonylstreptovaricinon C

Zu einer Suspension von 372 mg Streptovaricinon C in 10 ml Aceton gibt man 10 ml einer 0,05N-Lösung von Natriumhydroxid in Methanol und die erhaltene Lösung wird unter vermindertem Druck bis zur Trockene abgedampft, wobei man das Natriumsalz des Streptovaricinons C erhält. Das Natriumsalz wird in 20 ml trockenem Tetrahydrofuran suspendiert und zu der Suspension gibt man 138 mg Methansulfonyl-chlorid in 10 ml trockenem Tetrahydrofuran. Die Reaktionsmischung wird bei Zimmertemperatur während 48 h gerührt und dann in eine kalte 5 %ige Natriumbicarbonatlösung gegossen. Die Mischung wird mit Äthylacetat extrahiert und der Extrakt wird mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann bis zur Trockene abgedampft, wobei man ein rotes Öl erhält. Das Öl wird an gel mit 4% Methanol in Chloroform chromatographiert und 55 die entsprechenden Fraktionen werden abgetrennt und vereinigt. Die Fraktionen werden unter vermindertem Druck bis zur Trockene abgedampft, wobei man ein orangegefärbtes Öl erhält, welches aus Äthylacetat/n-Hexan umkristallisiert wird. Man erhält 57 mg gelbe Kristalle des 6-O-Methansulfo-60 nyl-streptovaricinons C mit einem Schmelzpunkt von 167 bis 170°C. 10 ml of a 0.05N solution of sodium hydroxide in methanol are added to a suspension of 372 mg of streptovaricinone C in 10 ml of acetone and the solution obtained is evaporated to dryness under reduced pressure, giving the sodium salt of streptovaricinone C. The sodium salt is suspended in 20 ml of dry tetrahydrofuran and 138 mg of methanesulfonyl chloride in 10 ml of dry tetrahydrofuran are added to the suspension. The reaction mixture is stirred at room temperature for 48 h and then poured into a cold 5% sodium bicarbonate solution. The mixture is extracted with ethyl acetate and the extract is washed with water, dried over anhydrous sodium sulfate and then evaporated to dryness to give a red oil. The oil is chromatographed on gel with 4% methanol in chloroform and the corresponding fractions are separated and combined. The fractions are evaporated to dryness under reduced pressure, giving an orange-colored oil which is recrystallized from ethyl acetate / n-hexane. 57 mg of yellow crystals of 6-O-methanesulfo-60 nyl-streptovaricinone C with a melting point of 167 to 170 ° C. are obtained.

Beispiel 4 Example 4

Herstellung von 6-O-Methoxycarbonylstreptovaricinon C Preparation of 6-O-methoxycarbonylstreptovaricinon C

65 65

Zu einer Suspension von 373 mg Streptovaricinon C in 10 ml Tetrahydrofuran gibt man 10 ml einer 0,05N-Lösung von Natriumhydroxid in Methanol. Die Lösung wird unter 10 ml of a 0.05N solution of sodium hydroxide in methanol are added to a suspension of 373 mg of streptovaricinone C in 10 ml of tetrahydrofuran. The solution is below

35 35

40 40

45 45

634 056 634 056

vermindertem Druck bis zur Trockene abgedampft. Man erhält das Natriumsalz des Streptovaricinons C. Das Salz wird in 8 ml Tetrahydrofuran suspendiert und zu der Suspension gibt man 145 mg Methylchlorcarbonat. Die Reaktionsmischung wird bei Zimmertemperatur während 30 min gerührt und dann in eine kalte 5% ige Natriumbicarbonatlösung gegossen. Die Mischung wird mit Äthylacetat wiederholt extrahiert und die Extrakte werden mit Wasser gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck bis zur Trockene eingedampft, wobei man ein rotes Öl erhält. Das Öl wird an Silikagel mit 7 % Methanol in Chloroform chromatographiert. Die entsprechenden Fraktionen werden abgetrennt und vereinigt. Die Fraktionen wer-s den unter vermindertem Druck zur Trockene abgedampft, wobei man ein Öl erhält. Dieses wird aus Äthylacetat/n-Hexan umkristallisiert, wobei man 263 mg eines gelben kristallinen Pulvers von 6-O-Methoxycarbonylstreptovaricinon C mit einem Schmelzpunkt von 159-163°C erhält. evaporated to dryness under reduced pressure. The sodium salt of streptovaricinone C is obtained. The salt is suspended in 8 ml of tetrahydrofuran and 145 mg of methyl chlorocarbonate are added to the suspension. The reaction mixture is stirred at room temperature for 30 minutes and then poured into a cold 5% sodium bicarbonate solution. The mixture is repeatedly extracted with ethyl acetate and the extracts are washed with water and dried over anhydrous sodium sulfate and then evaporated to dryness under reduced pressure to give a red oil. The oil is chromatographed on silica gel with 7% methanol in chloroform. The corresponding fractions are separated and combined. The fractions are evaporated to dryness under reduced pressure to give an oil. This is recrystallized from ethyl acetate / n-hexane, giving 263 mg of a yellow crystalline powder of 6-O-methoxycarbonylstreptovaricinon C with a melting point of 159-163 ° C.

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