CH555889A - Growing separate bacteria colonies from one dip - which is wiped in traces across solid culture medium - Google Patents

Growing separate bacteria colonies from one dip - which is wiped in traces across solid culture medium

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CH555889A
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Bonifas Valentin
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    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/30Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
    • C12M41/36Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of biomass, e.g. colony counters or by turbidity measurements

Abstract

A support member with a coating of a suitable culture medium is heavily seeded over a limited area with bacteria, e.g. by dipping one end in blood, urine or possibly wine or some other edible matter. A guided spreader, e.g. flexible comb, is then used to wipe across the seeded area and then over the unseeded area where it leaves separate traces of decreasing conc. of bacteria. Seeding of culture media with a sick patient's specimen can be effected rapidly at the bedside by a comparatively unskilled attendant. Distinct traces produce separate colonies of bacteria on the culture medium, growing at different concn. rates along the traces. These concn. gradients are achieved automatically without dilution problems.

Description

  

  
 



   La présente invention a pour objet un procédé et un dispositif d'ensemencement de milieux nutritifs solides avec des bactéries en vue de réaliser des gradients de concentration bactérienne sur la surface nutritive, ces gradients ou concentration décroissante de bactéries permettant l'isolement de colonies bactériennes.



   On connaît divers procédés d'ensemencement de milieux nutritifs avec des bactéries.



   L'un de ces procédés consiste à prélever un liquide infecté, puis à tremper dans ce liquide un support recouvert d'un milieu nutritif solide favorisant la prolifération bactérienne. Le film résiduel de liquide infecté, rapidement absorbé dans le milieu solide, est suffisamment constant pour que le nombre des colonies qui se développeront sur le milieu nutritif pendant l'incubation soit proportionnel à la concentration bactérienne dans le liquide infecté. Le support est réintroduit dans son réceptable protecteur qui est lui-meme obturé au moyen d'un couvercle et incubé à une température favorable pendant une durée suffisante. Du nombre des colonies apparues sur le milieu nutritif   aprés    incubation, on déduira le nombre des bactéries présentes par unité de volume du liquide infecté. Lorsque ce nombre est grand, les colonies sont confluentes, donc indistinctes.



   L'un des principaux avantages de ce procédé est qu'il peut   etre    appliqué par du personnel non qualifié au chevet même du malade. Il permet à ce personnel de se rendre compte si le liquide était infecté en observant les colonies sur le milieu nutritif ainsi que de la densité de cette infection en estimant le nombre de ces colonies selon des tables de comparaison.



   Par contre, pour observer des colonies de bactéries, on achemine le support au laboratoire pour l'identification des bactéries ainsi que pour la détermination de leur sensibilité aux antibiotiques. L'identification des bactéries requiert des cultures pures que   l'on    ne peut obtenir qu'à partir de colonies bien séparées isolées.



   L'un des principaux inconvénients de ce procédé réside dans l'absence de séparation des colonies chaque fois que la concentration des bactéries dans le liquide infecté a déterminé un nombre élevé de colonies dans la culture. C'est aussi dans ce cas que l'état du patient exige des résultats rapides qui sont compromis par l'obligation, pour le laboratoire, de refaire une séparation, ce qui exige au moins 24 heures supplémentaires. Cette perte de temps, dans ces cas urgents, peut être lourde de conséquences. Une précaution ordinaire consiste à envoyer d'emblée au laboratoire une partie de l'échantillon de liquide infecté soumis au procédé décrit afin que le laboratoire, procédant selon des méthodes avérées, puisse isoler des cultures pures. Ceci présente toutefois l'inconvénient de supprimer l'avantage gagné par l'application du procédé décrit.

  En outre, certaines bactéries ne supportent pas le séjour dans les liquides infectés après que ce dernier a quitté l'organisme du malade.



   Pour obtenir des-colonies isolées, plusieurs procédés sont connus, mais tous reposent sur la dilution, donc sur un appauvrissement progressif en bactéries.



   L'un de ces procédés consiste à effectuer une dilution en série du liquide infecté et prélever des quantités aliquotes de chaque dilution pour les étaler à la surface de milieux nutritifs solides au moyen d'un organe racleur déplacé dans le sens de la longueur puis dans le sens de la largeur. On trouvera des colonies isolées chaque fois que la quantité aliquote contiendra moins de quelques centaines de bactéries.



   Dans un autre procédé connu effectué au moyen d'une anse platine tenue à la main, on épuise progressivement le contenu de l'anse préalablement chargée de bactéries de la manière suivante:   ranse    chargée est conduite par un mouvement de va-et-vient sur toute une portion de la surface d'un milieu nutritif solide contenu dans une boîte circulaire (boîte de Petri) afin de répartir le contenu de l'anse sur toute cette portion également. L'anse est alors stérilisée à la flamme et refroidie, puis elle est tirée à travers la surface ensemencée jusqu'à une portion vierge où le mouvement de vaet-vient permettra de répartir les bactéries retirées de la première portion sur toute la surface de la deuxième. On recommence cette opération à partir de la deuxième portion vers une troisième, puis vers une quatrième.

  La surface du milieu nutritif a donc été ensemencée de nombres progressivement décroissants de bactéries.



   Enfin, dans un autre procédé connu, on dépose des bactéries sur une portion radiale de la surface d'un milieu nutritif contenu dans une boite de Petri soutenue par une platine. Les bactéries sont alors réparties à partir de la zone inoculée au moyen d'une anse de platine portée par un bras se mouvant horizontalement autour d'un axe à la manière d'un bras de gramophone pendant que la platine entraîne la boite de Petri dans un mouvement rotatif. L'anse décrit donc, sur la surface du milieu nutritif, une trace hélicoïdale et reprend, à chaque tour, une partie des bactéries déposées initialement. La trace est d'une longueur différente à chaque tour. Comme les bactéries s'épuisent tout au long de la trace, leur concentration s'affaiblira jusqu'à un minimum proportionnel à la longueur de la trace. Ceci permettra d'obtenir des colonies isolées sur au moins certaines portions de la trace.



   Les inconvénients des procédés décrits ci-dessus proviennent de ce qu'ils ne peuvent être exécutés, pour les deux premiers cités que par du personnel qualifié et, pour le troisième, qu'à l'aide d'un appareillage coûteux et encombrant. En aucun cas donc, ces procédés ne peuvent normalement être mis en oeuvre au chevet même du malade.



   Le but de la présente invention est de remédier à ces inconvénients et de foumir un dispositif simple et peu coûteux qui permette d'effectuer un ensemencement sous forme de gradients sur un milieu nutritif au chevet même du malade, sans faire appel à du personnel technique qualifié.



   Le procédé selon la présente invention est caractérisé par le fait qu'on dépose des bactéries dont on veut obtenir la culture sous la forme de colonies isolées, sur une portion de la surface du milieu nutritif puis qu'on déplace des organes de transport au travers de la portion de la surface comprenant ces bactéries puis au travers du reste de la surface nutritive pour former des traces présentant une concentration décroissante de bactéries.



   L'invention a également pour objet un dispositif pour la mise en oeuvre du procédé décrit qui est caractérisé par le fait qu'il comprend un support dont une partie de la surface au moins comporte au moins un milieu nutritif, et des organes de transport susceptibles d'entrer en contact avec ce milieu nutritif et dépla   çables    par rapport au support pour balayer au moins une partie de la surface du milieu nutritif.



   Le dessin annexé illustre schématiquement et à titre d'exemple plusieurs formes d'exécution d'un dispositif pour la mise en oeuvre du procédé selon l'invention.



   La fig. 1 est une vue en perspective d'un support comportant un milieu nutritif selon une première forme d'exécution du dispositif.

 

   La fig. 2 est une vue en perspective d'une boîte avec son couvercle qui est destiné à recevoir le support de la fig. 1.



   La fig. 3 est une vue en plan d'un support comportant un milieu nutritif selon une seconde forme d'exécution du dispositif.



   La fig. 4 est une vue de dessous d'un couvercle du dispositif selon la fig. 3.



   La fig. 5 est une vue en élévation et en coupe du dispositif des fig.   3et4.   



   La fig. 6 est une vue en perspective d'une boîte avec son couvercle selon une troisième forme d'exécution.



   La fig. 7 est une vue en plan d'un support destiné à être reçu par la boite de la fig. 6.



   La fig. 8 est une vue en élévation et en coupe d'une boîte avec son couvercle selon une quatrième forme d'exécution.



   La fig. 9 est une vue en plan d'un support placé dans la boîte de la fig. 8.  



   Une première forme d'exécution du dispositif est illustrée par les fig. 1 et 2 et comprend un support 1 de forme rectangulaire qui comporte sur chacune de ses faces un milieu nutritif 2 utilisé en bactériologie. Ces milieux nutritifs 2 favorisent la prolifération des cellules   bactériques.   



   Ce support 1 est destiné à être reçu par un réceptacle ou boîte 3 de forme cylindrique pouvant constituer une enceinte stérile.



   Cette boîte 3 comporte des rainures de guidage 4 du support 1 et est obturable par un couvercle 5.



   La distance séparant les deux rainures de guidage 4 correspond à la largeur du support 1.



   L'extrémité ouverte de cette boîte 3 est munie de deux peignes amovibles 6 dont les dents 7 ou organes de transport sont en matière flexible telle que par exemple en matière plastique.



   Les deux dents d'extrémité de chaque peigne 6 présentent une largeur supérieure à la largeur des autres dents.



   Ces peignes 6 sont disposés de manière à permettre l'introduction du support 1 dans la boite 3 par ses rainures de guidage 4.



   ta distance séparant l'extrémité des dents 7 d'un peigne 6 à l'extrémité des dents 7 de l'autre peigne est inférieure à l'épaisseur du support 1.



   L'utilisateur d'un tel dispositif, qui pourrait être une infirmière dans un hôpital, prélève sur le malade une substance favorisant la vie des bactéries dans le corps humain, telle que par exemple le sang ou l'urine. Cette infirmière trempe ensuite l'extrémité 8 du support 1 dans cette substance puis agite ce support de manière à évacuer la substance prélevée et ne laisser sur l'extrémité 8 de celui-ci qu'une forte concentration de bactéries 9 destinées à être cultivées.



   Le support 1 peut ensuite, au chevet même du malade, être introduit par son extrémité 8 dans les rainures du guidage 4 de la boîte 1.



   Lors du passage de ce support 1 entre les deux peignes 6, les dents flexibles 7 des deux peignes 6 entrent en contact avec les bactéries 9 et les transportent dans leur déplacement en formant des traces 10 qui présentent un gradient ou concentration décroissante de bactéries. Cest traces 10 s'étendent sur les deux faces du support 1, depuis l'extrémité 8 en direction de son extrémité opposée.



   Chacune de ces traces 10 forme une colonie de bactéries séparée de la colonie adjacente par une portion du milieu nutritif 2
 Grâce à la largeur différente des dents d'extrémité de chaque peigne, la concentration des traces 10 formées par ces dents est différente de la concentration des traces formées par les autres dents du peigne. Ceci permet d'augmenter le choix d'une zone à concentration déterminée de bactéries pour la culture de celles-ci.



   La boite 3 renfermant le support 1 peut ensuite être obturée par le couvercle 5 et être acheminée vers un laboratoire.



   Dans une seconde forme d'exécution illustrée par les fig. 3 à 5, le dispositif comprend un support 11 de forme cylindrique qui constitue un réceptacle d'un milieu nutritif 2 tel que décrit pour la première forme d'exécution.



   Ce support 11 est muni d'éléments 12 prévus pour sa manutention.



   Une proéminence 13 de ce support 11 constitue une partie haute destinée à obturer une ouverture 14 d'un couvercle amovible 15 (fig. 4) monté pivotant sur un axe 16 du support 11. Ce couvercle est déplaçable angulairement sur le support 11, dans le sens des aiguilles d'une montre.



   Le support 11 comprend encore une partie basse 17 qui constitue un réservoir des bactéries destinées à être ensemencées sur le milieu nutritif 2.



   Un peigne 18 est fixé sur une partie 19 de la périphérie de l'ouverture 14 du couvercle 15. Ce peigne 18 s'étend perpendiculairement au plan du couvercle 15, sur une partie au moins de son rayon, et comporte des dents ou organe de transport 20 en matière flexible telle que par exemple en matière plastique.



   La largeur des dents 20 va en augmentant depuis le centre du couvercle 15 jusqu'à sa périphérie (fig. 5).



   En position de repos du dispositif, l'ouverture 14 du couvercle 15 est placée en superposition de la partie basse 17 du support 11, les dents 20 du peigne 18 s'étendant dans cette partie basse 17.



   La longueur des dents 20 est telle que celles-ci sont en contact par leur extrémité libre avec le milieu nutritif 2, lorsque le peigne 18 est déplacé sur ce milieu nutritif.



   Pour ensemencer le milieu nutritif 2 avec des bactéries en vue d'obtenir des cultures de celles-ci, l'utilisateur introduit ces bactéries, au travers de l'ouverture 14 du couvercle 15, dans la partie basse 17.



   L'utilisateur obture ensuite l'ouverture 14 par la partie haute 13 du support 11, en déplaçant angulairement le couvercle 15 dans le sens des aiguilles d'une montre.



   Cette opération constitue simultanément l'opération d'ensemencement du milieu nutritif 2 avec au moins une partie des bactéries contenues dans le réservoir 17.



   Ces bactéries sont en effet transportées par les dents 20 du peigne 18 entraîné par le couvercle 15, qui forment des traces ou colonies de bactéries 21 présentant un gradient ou concentration décroissante de bactéries.



   Grâce à la largeur différente des dents 20, les traces 21 présentent des gradients différents. Ceci augmente le choix d'une zone de bactéries présentant une concentration déterminée.



   Dans une troisième forme d'exécution illustrée par les fig. 6 et 7, le dispositif comprend un support 1 tel que décrit dans la première forme d'exécution, qui comporte sur chacune de ses faces deux milieux nutritifs 22, 23 de nature différente.



   Ces milieux nutritifs 22, 23 favorisent la prolifération des cellules   bactèriques    de manière différente.



   Comme pour la première forme d'exécution, ce support 1 est destiné à être reçu par un réceptacle ou boîte 3 qui peut constituer une enceinte stérile et peut, par exemple comme illustré par la fig. 6, être, vue en plan, de forme générale rectangulaire.



   Les deux peignes amovibles 6 fixés sur l'extrémité ouverte de cette boîte 3 comprennent des dents 7 agencées de manière à entrer en contact avec les milieux nutritifs 22, 23 pour former des traces de bactéries 10 de largeur différente et présentant un gradient ou concentration décroissante de bactéries.



   Chacun de ces peignes 6 comprend encore une formation 24 destinée à permettre le passage d'une partie de séparation 25 des milieux nutritifs 22, 23 entre les peignes 6.



   Grâce à la nature différente des milieux nutritifs 22, 23, des cultures comparatives de bactéries peuvent être effectuées en laboratoire.



   Enfin, dans une quatrième forme d'exécution illustrée par les fig. 8 et 9, le dispositif comprend un réceptacle ou boîte 26 obturable par un couvercle 27 coulissant selon une direction unique dans des rainures 28 de la boîte 26.



   Cette boîte 26 comprend un support 29 de forme générale rectangulaire   qlli    comporte une pluralité de milieux nutritifs 30 utilisés en bactériologie qui sont de nature différente. La prolifération des bactéries est ainsi favorisée de manière différente sur chacun de ces milieux 30.

 

   Le support 29 comprend une extrémité 31 inclinée qui forme un réservoir avec la paroi interne de la boite 26. Ce réservoir est destiné à recevoir des bactéries en forte concentration.



   Un peigne 32 est fixé sous l'une des extrémités du couvercle, de telle manière que lors de l'obturation de la boite 26 par ce couvercle 27, ce peigne 32 entre en contact, par l'extrémité de ses dents, avec une portion au moins de l'extrémité inclinée 31 et avec les milieux nutritifs 30.



   Cette obturation constitue simultanément une opération de transport d'une partie des bactéries apposées sur l'extrémité 31 du support 29. Ces bactéries sont en effet déplacées par l'action des  dents du peigne 32, chacune de ces dents correspondant à un milieu nutritif.



   Ces bactéries sont ainsi ensemencées sur les milieux nutritifs 30, sous forme de traces 33 présentant un gradient ou concentration décroissante de bactéries.



   Des cultures comparatives peuvent ainsi être effectuées en laboratoire.



   Le support décrit pour la première forme d'exécution ne comporte qu'un seul milieu nutritif sur chacune de ses faces; dans une variante, il est bien évident qu'il pourrait en comporter une pluralité. Dans ce cas, les peignes portés par la boite 3 devraient être agencés de manière à permettre l'introduction de ce support dans cette boîte.



   Dans   d'autre's    variantes, les supports des autres formes d'exécution décrites pourraient comporter un nombre de milieux nutritifs différent de celui décrit, sur chacune de leur face ou sur une seule de celles-ci. Ainsi le support du dispositif illustré par la fig. 3 pourrait comporter deux, trois ou plusieurs milieux nutritifs alors que les supports illustrés par les fig. 7 et 9 pourraient ne comporter qu'un seul milieu nutritif.

 

   Le procédé décrit n'est pas uniquement applicable à un prélèvement effectué sur un malade, mais peut également être prévu pour les cultures de bactéries contenues dans des liquides tels que par exemple le vin, ou dans des aliments.



   Le procédé selon la présente invention permet une rationalisation poussée dans le domaine de l'ensemencement d'un milieu nutritif avec les bactéries, par le fait que le dispositif pour sa mise en oeuvre est simple, peu encombrant, et permet une utilisation au chevet même d'un malade. 



  
 



   The present invention relates to a method and a device for inoculating solid nutrient media with bacteria in order to achieve gradients of bacterial concentration on the nutrient surface, these gradients or decreasing concentration of bacteria allowing the isolation of bacterial colonies.



   Various methods are known for inoculating nutrient media with bacteria.



   One of these methods consists in taking an infected liquid, then dipping in this liquid a support covered with a solid nutrient medium that promotes bacterial proliferation. The residual film of infected liquid, rapidly absorbed into the solid medium, is sufficiently constant that the number of colonies that will grow on the nutrient medium during incubation is proportional to the bacterial concentration in the infected liquid. The support is reintroduced into its protective receptacle which is itself closed by means of a cover and incubated at a favorable temperature for a sufficient period of time. From the number of colonies appearing on the nutrient medium after incubation, the number of bacteria present per unit volume of the infected liquid will be deduced. When this number is large, the colonies are confluent, therefore indistinct.



   One of the main advantages of this method is that it can be applied by unqualified personnel at the bedside. It allows these personnel to realize whether the liquid was infected by observing the colonies on the nutrient medium as well as the density of this infection by estimating the number of these colonies according to comparison tables.



   On the other hand, to observe bacterial colonies, the support is sent to the laboratory for the identification of the bacteria as well as for the determination of their sensitivity to antibiotics. The identification of bacteria requires pure cultures which can only be obtained from well separated isolated colonies.



   One of the main drawbacks of this method is that the colonies do not separate whenever the concentration of bacteria in the infected liquid has determined a high number of colonies in the culture. It is also in this case that the patient's condition demands rapid results which are compromised by the obligation for the laboratory to perform another separation, which requires at least 24 additional hours. This loss of time, in these urgent cases, can have serious consequences. An ordinary precaution consists in sending immediately to the laboratory a part of the sample of infected liquid subjected to the described procedure so that the laboratory, proceeding according to proven methods, can isolate pure cultures. However, this has the drawback of eliminating the advantage gained by applying the method described.

  In addition, some bacteria do not tolerate staying in infected fluids after the latter has left the patient's body.



   To obtain isolated colonies, several methods are known, but all are based on dilution, and therefore on a gradual depletion of bacteria.



   One of these methods is to perform a serial dilution of the infected liquid and take aliquots of each dilution to spread them on the surface of solid nutrient media by means of a scraper member moved lengthwise and then in the direction of the width. Single colonies will be found whenever the aliquot contains less than a few hundred bacteria.



   In another known method carried out by means of a hand-held platinum handle, the contents of the handle previously loaded with bacteria are gradually used up as follows: the loaded loop is carried out by a back-and-forth movement on a whole portion of the surface of a solid nutrient medium contained in a circular dish (Petri dish) in order to distribute the contents of the loop over this entire portion equally. The loop is then flame sterilized and cooled, then it is pulled through the seeded surface to a virgin portion where the back and forth motion will distribute the bacteria removed from the first portion over the entire surface of the second. This operation is repeated from the second portion to a third, then to a fourth.

  The surface of the nutrient medium was therefore seeded with progressively decreasing numbers of bacteria.



   Finally, in another known process, bacteria are deposited on a radial portion of the surface of a nutrient medium contained in a Petri dish supported by a plate. The bacteria are then distributed from the inoculated area by means of a stage loop carried by an arm moving horizontally around an axis like a gramophone arm while the stage drives the Petri dish in. a rotary movement. The loop therefore describes a helical trace on the surface of the nutrient medium and takes up, at each turn, some of the bacteria initially deposited. The track is of a different length on each turn. As the bacteria become depleted throughout the trace, their concentration will weaken to a minimum proportional to the length of the trace. This will make it possible to obtain isolated colonies on at least certain portions of the trace.



   The drawbacks of the methods described above arise from the fact that they can only be carried out, for the first two mentioned by qualified personnel and, for the third, only with the aid of expensive and bulky equipment. In any case, therefore, these methods can not normally be implemented at the bedside.



   The object of the present invention is to remedy these drawbacks and to provide a simple and inexpensive device which makes it possible to seed in the form of gradients on a nutrient medium at the patient's own bedside, without calling on qualified technical personnel. .



   The process according to the present invention is characterized by the fact that the bacteria, the culture of which is to be obtained in the form of isolated colonies, are deposited on a portion of the surface of the nutrient medium, then that transport organs are moved through. the portion of the surface comprising these bacteria and then through the rest of the nutrient surface to form traces exhibiting a decreasing concentration of bacteria.



   A subject of the invention is also a device for carrying out the method described, which is characterized in that it comprises a support, at least part of the surface of which comprises at least one nutrient medium, and transport members capable of to come into contact with this nutrient medium and movable relative to the support to sweep at least part of the surface of the nutrient medium.



   The appended drawing illustrates schematically and by way of example several embodiments of a device for implementing the method according to the invention.



   Fig. 1 is a perspective view of a support comprising a nutrient medium according to a first embodiment of the device.

 

   Fig. 2 is a perspective view of a box with its cover which is intended to receive the support of FIG. 1.



   Fig. 3 is a plan view of a support comprising a nutrient medium according to a second embodiment of the device.



   Fig. 4 is a bottom view of a cover of the device according to FIG. 3.



   Fig. 5 is an elevational view in section of the device of FIGS. 3 and 4.



   Fig. 6 is a perspective view of a box with its cover according to a third embodiment.



   Fig. 7 is a plan view of a support intended to be received by the box of FIG. 6.



   Fig. 8 is an elevational view in section of a box with its cover according to a fourth embodiment.



   Fig. 9 is a plan view of a support placed in the box of FIG. 8.



   A first embodiment of the device is illustrated by FIGS. 1 and 2 and comprises a support 1 of rectangular shape which comprises on each of its faces a nutrient medium 2 used in bacteriology. These nutrient media 2 promote the proliferation of bacterial cells.



   This support 1 is intended to be received by a receptacle or box 3 of cylindrical shape which can constitute a sterile enclosure.



   This box 3 has guide grooves 4 for the support 1 and can be closed off by a cover 5.



   The distance separating the two guide grooves 4 corresponds to the width of the support 1.



   The open end of this box 3 is provided with two removable combs 6 whose teeth 7 or transport members are made of flexible material such as, for example, plastic.



   The two end teeth of each comb 6 have a width greater than the width of the other teeth.



   These combs 6 are arranged so as to allow the introduction of the support 1 into the box 3 by its guide grooves 4.



   your distance between the end of the teeth 7 of a comb 6 at the end of the teeth 7 of the other comb is less than the thickness of the support 1.



   The user of such a device, who could be a nurse in a hospital, takes from the patient a substance which promotes the life of bacteria in the human body, such as for example blood or urine. This nurse then soaks the end 8 of the support 1 in this substance and then shakes this support so as to evacuate the substance taken and only leave on the end 8 of the latter a high concentration of bacteria 9 intended to be cultured.



   The support 1 can then, at the patient's bedside, be introduced by its end 8 into the grooves of the guide 4 of the box 1.



   During the passage of this support 1 between the two combs 6, the flexible teeth 7 of the two combs 6 come into contact with the bacteria 9 and transport them in their movement, forming traces 10 which have a gradient or decreasing concentration of bacteria. These traces 10 extend on both sides of the support 1, from the end 8 towards its opposite end.



   Each of these traces 10 forms a colony of bacteria separated from the adjacent colony by a portion of nutrient medium 2
 Owing to the different width of the end teeth of each comb, the concentration of the traces formed by these teeth is different from the concentration of the traces formed by the other teeth of the comb. This makes it possible to increase the choice of an area with a determined concentration of bacteria for the culture thereof.



   Box 3 containing support 1 can then be closed by cover 5 and be taken to a laboratory.



   In a second embodiment illustrated by FIGS. 3 to 5, the device comprises a support 11 of cylindrical shape which constitutes a receptacle for a nutrient medium 2 as described for the first embodiment.



   This support 11 is provided with elements 12 provided for its handling.



   A prominence 13 of this support 11 constitutes an upper part intended to close an opening 14 of a removable cover 15 (FIG. 4) mounted to pivot on an axis 16 of the support 11. This cover can be moved angularly on the support 11, in the clockwise.



   The support 11 also comprises a lower part 17 which constitutes a reservoir for bacteria intended to be inoculated on the nutrient medium 2.



   A comb 18 is fixed to a part 19 of the periphery of the opening 14 of the cover 15. This comb 18 extends perpendicular to the plane of the cover 15, over at least part of its radius, and comprises teeth or transport 20 in flexible material such as for example plastic.



   The width of the teeth 20 increases from the center of the cover 15 to its periphery (fig. 5).



   In the rest position of the device, the opening 14 of the cover 15 is placed in superposition with the lower part 17 of the support 11, the teeth 20 of the comb 18 extending into this lower part 17.



   The length of the teeth 20 is such that the latter are in contact by their free end with the nutrient medium 2, when the comb 18 is moved over this nutrient medium.



   In order to inoculate the nutrient medium 2 with bacteria in order to obtain cultures thereof, the user introduces these bacteria, through the opening 14 of the cover 15, into the lower part 17.



   The user then closes the opening 14 by the upper part 13 of the support 11, by angularly moving the cover 15 in the direction of clockwise.



   This operation simultaneously constitutes the operation of seeding the nutrient medium 2 with at least part of the bacteria contained in the reservoir 17.



   These bacteria are in fact transported by the teeth 20 of the comb 18 driven by the cover 15, which form traces or colonies of bacteria 21 exhibiting a gradient or decreasing concentration of bacteria.



   Thanks to the different width of the teeth 20, the tracks 21 have different gradients. This increases the choice of an area of bacteria with a determined concentration.



   In a third embodiment illustrated by FIGS. 6 and 7, the device comprises a support 1 as described in the first embodiment, which comprises on each of its faces two nutrient media 22, 23 of different nature.



   These nutrient media 22, 23 promote the proliferation of bacterial cells in a different way.



   As for the first embodiment, this support 1 is intended to be received by a receptacle or box 3 which may constitute a sterile enclosure and may, for example as illustrated in FIG. 6, being, in plan view, of generally rectangular shape.



   The two removable combs 6 attached to the open end of this box 3 comprise teeth 7 arranged so as to come into contact with the nutrient media 22, 23 to form traces of bacteria 10 of different width and exhibiting a gradient or decreasing concentration. bacteria.



   Each of these combs 6 further comprises a formation 24 intended to allow the passage of a separation part 25 of the nutrient media 22, 23 between the combs 6.



   Thanks to the different nature of the nutrient media 22, 23, comparative cultures of bacteria can be carried out in the laboratory.



   Finally, in a fourth embodiment illustrated by FIGS. 8 and 9, the device comprises a receptacle or box 26 which can be closed by a cover 27 sliding in a single direction in grooves 28 of the box 26.



   This box 26 comprises a support 29 of generally rectangular shape which comprises a plurality of nutrient media 30 used in bacteriology which are of a different nature. The proliferation of bacteria is thus promoted in a different way on each of these media 30.

 

   The support 29 comprises an inclined end 31 which forms a reservoir with the internal wall of the box 26. This reservoir is intended to receive bacteria in high concentration.



   A comb 32 is fixed under one of the ends of the cover, such that when the box 26 is closed by this cover 27, this comb 32 comes into contact, through the end of its teeth, with a portion at least from the inclined end 31 and with the nutrient media 30.



   This sealing simultaneously constitutes an operation for transporting part of the bacteria affixed to the end 31 of the support 29. These bacteria are in fact displaced by the action of the teeth of the comb 32, each of these teeth corresponding to a nutrient medium.



   These bacteria are thus seeded on the nutrient media 30, in the form of traces 33 exhibiting a gradient or decreasing concentration of bacteria.



   Comparative cultures can thus be carried out in the laboratory.



   The support described for the first embodiment has only one nutrient medium on each of its faces; in one variant, it is quite obvious that it could include a plurality of them. In this case, the combs carried by the box 3 should be arranged so as to allow the introduction of this support in this box.



   In other variants, the supports of the other embodiments described could comprise a number of nutrient media different from that described, on each of their face or on only one of these. Thus the support of the device illustrated by FIG. 3 could include two, three or more nutrient media while the supports illustrated by FIGS. 7 and 9 could have only one nutrient medium.

 

   The method described is not only applicable to a sample taken from a patient, but can also be provided for cultures of bacteria contained in liquids such as for example wine, or in food.



   The method according to the present invention allows a thorough rationalization in the field of the seeding of a nutritive medium with the bacteria, by the fact that the device for its implementation is simple, not cumbersome, and allows a use at the bedside even. of a sick person.

 

Claims (1)

REVENDICATIONS I. Procédé d'ensemencement de milieux nutritifs solides avec des bactéries, caractérisé par le fait qu'on dépose des bactéries, dont on veut obtenir la culture sous la forme de colonies isolées, sur une portion de la surface du milieu nutritif solide, puis qu'on déplace des organes de transport au travers de la portion de la surface comprenant ces bactéries puis au travers du reste de la surface nutritive pour former des traces présentant une concentration décroissante de bactéries. I. Method of inoculating solid nutrient media with bacteria, characterized by the fact that bacteria, the culture of which is to be obtained in the form of isolated colonies, is deposited on a portion of the surface of the solid nutrient medium, then that transport organs are moved through the portion of the surface comprising these bacteria and then through the rest of the nutrient surface to form traces exhibiting a decreasing concentration of bacteria. II. Dispositif pour la mise en oeuvre du procédé selon la revendication I, caractérisé par le fait qu'il comprend un support dont une partie de la surface au moins comporte au moins un milieu nutritif, et des organes de transport susceptibles d'entrer en contact avec ce milieu nutritif et déplaçables par rapport au support pour balayer au moins une partie de la surface du milieu nutritif. II. Device for carrying out the method according to Claim I, characterized in that it comprises a support, at least part of the surface of which comprises at least one nutrient medium, and transport members capable of coming into contact with this nutrient medium and movable relative to the support to sweep at least part of the surface of the nutrient medium. SOUS-REVENDICATIONS 1. Procédé selon la revendication I, caractérisé par le fait que pour déposer les bactéries dont on veut obtenir la culture sous la forme de colonies isolées, on trempe une partie de ce milieu nutritif dans une substance contenant des bactéries. SUB-CLAIMS 1. Method according to claim I, characterized in that in order to deposit the bacteria whose culture is to be obtained in the form of isolated colonies, part of this nutrient medium is soaked in a substance containing bacteria. 2. Procédé selon la revendication I, ou la sous-revendication 1, caractérisé par le fait que pour former sur le milieu nutritif des traces présentant une concentration décroissante de bactéries on introduit ce milieu nutritif, entre les organes de transport, dans un réceptable. 2. Method according to claim I, or sub-claim 1, characterized in that to form on the nutrient medium traces having a decreasing concentration of bacteria this nutrient medium is introduced between the transport organs, in a receptacle. 3. Procédé selon la revendication I, caractérisé par le fait que, pour déplacer les organes de transport, on obture un réceptacle logeant le milieu nutritif en déplaçant un couvercle sur lequel ces organes de transport sont montés amovibles. 3. Method according to claim I, characterized in that, in order to move the transport members, a receptacle housing the nutrient medium is closed by moving a cover on which these transport members are mounted removable. 4. Procédé selon la sous-revendication 2, caractérisé par le fait qu'en laboratoire, avant de retirer le support hors du réceptable, on démonte les organes de transport. 4. Method according to sub-claim 2, characterized in that in the laboratory, before removing the support from the receptacle, the transport members are dismantled. 5. Dispositif selon la revendication II, caractérisé par le fait qu'il comprend encore un réceptacle destiné à recevoir le support. 5. Device according to claim II, characterized in that it further comprises a receptacle intended to receive the support. 6. Dispositif selon la revendication II, caractérisé par le fait qu'il comprend encore un réceptacle comprenant le support. 6. Device according to claim II, characterized in that it further comprises a receptacle comprising the support. 7. Dispositif selon l'une des sous-revendications 5 ou 6, caractérisé par le fait que ce réceptacle comporte un couvercle d'obturation. 7. Device according to one of sub-claims 5 or 6, characterized in that this receptacle comprises a sealing cover. 8. Dispositif selon la sous-revendication 7, caractérisé par le fait que les organes de transport sont montés sur une extrémité ouverte du réceptacle. 8. Device according to sub-claim 7, characterized in that the transport members are mounted on an open end of the receptacle. 9. Dispositif selon la sous-revendication 7, caractérisé par le fait que les organes de transport sont montés sur le couvercle. 9. Device according to sub-claim 7, characterized in that the transport members are mounted on the cover. 10. Dispositif selon l'une des sous-revendications 8 ou 9, caractérisé par le fait que ces organes de transport sont amovibles. 10. Device according to one of sub-claims 8 or 9, characterized in that these transport members are removable. 11. Dispositif selon la revendication II, caractérisé par le fait que les organes de transport sont les dents d'un peigne. 11. Device according to claim II, characterized in that the transport members are the teeth of a comb. 12. Dispositif selon la revendication II, caractérisé par le fait que le support comporte une pluralité de milieux nutritifs de nature différente. 12. Device according to claim II, characterized in that the support comprises a plurality of nutrient media of different nature. 13. Dispositif selon la revendication II, caractérisé par le fait que le support comporte au moins un milieu nutritif sur chacune de ses faces. 13. Device according to claim II, characterized in that the support comprises at least one nutrient medium on each of its faces. 14. Dispositif selon la sous-revendication 7, caractérisé par le fait que le réceptacle muni du couvercle constitue une enceinte stérile. 14. Device according to sub-claim 7, characterized in that the receptacle provided with the cover constitutes a sterile enclosure. 15. Dispositif selon la revendication II, caractérisé par le fait que les organes de transport présentent différentes largeurs. 15. Device according to claim II, characterized in that the transport members have different widths. 16. Dispositif selon la sous-revendication 15, caractérisé par le fait que ces organes de transport sont calibrés en vue de former des traces présentant des concentrations différentes. 16. Device according to sub-claim 15, characterized in that these transport members are calibrated to form traces having different concentrations.
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