Verfahren zur Gewinnung von reinem Frimnlasaponin. In der Wurzel von Primulaarten ist ein Saponin in beträchtlicher Menge enthalten, das den Charakter einer Säure besitzt und das an sich in Wasser unlöslich ist, aber mit wässerigen Alkalilösungen gut definierbare und lösliche Alkalisalze bildet. Diese Eigen schaft wurde zur Isolation des Saponins aus der Droge ausgenützt. Ausserdem kann das Saponin aus der Droge auch mit verdünntem Alkohol extrahiert werden.
In der österreichischen Patentschrift Nr. 101486 ist ein Verfahren zur Gewinnung eines sauren, kristallisierten Saponins aus den Wurzeln der Primulaarten. beschrieben, das im Ausziehen der Primulawurzel mit ,vässerigen Alkalilösungen besteht. Aus den so gewonnenen Auszügen wird das rohe Saponin durch Säuren ausgefällt und abfil- triert, worauf es in heissem verdünntem Alko hol gelöst,
die Lösung mit Aktdvköhle ent färbt und aus dem Filtrat das gereinigte Saponin nach Abdestillieren der Hauptmenge des Alkohols durch allmählichen Zusatz von Wasser neuerdings gefällt. und schliesslich aus einem geeigneten Lösungsmittel, wie Äthylalkohol oder Methylalkohol, umkristal lisiert wird.
Anstatt mit- wässerigen Alkalilösungen kann die Droge auch mit verdünntem Alkohol ausgezogen werden und aus den so gewonne nen Auszügen das rohe Saponin in bekannter Weise gefällt, filtriert und neuerlich in ver dünntem Alkohol gelöst werden, worauf es in der oben angegebenen Weise gereinigt wird. Um aus dem_Saponin anorganische Ver- unreinigungen, wie Magnesium oder Kalzium salze, zu -entfernen,
wird dass Saponin im beliebigen Stadium seiner Gewinnung der Elektrodialyse in wässerig-alkalischer Lösung unterworfen.
Diese Art der Saponin-Gewinnung ist keineswegs befriedigend, da mit dem .Saponin eine grosse Menge von Schleim- und Ballast stoffen in Lösung geht, deren Abtrennung vom Saponin erhebliche Schwierigkeiten be reitet. Ausserdem werden bei der Extraktion mit Ätzalkali- oder Alkalicarbonatlösungen verhältnismässig dunkle, schwer filtrierbare Auszüge erhalten.
Ferner beeinflussen auch die zur Ausfällung des. rohen Saponins ange wandten starken Säuren die Reinheit schäd lich, so da.ss in dieser Weise nur ein dunkles und schwer zu entfärbendes Rohsaponin gewonnen wird. Die Ausbeute an reinem Saponin ist dann verhältnismässig gering.
Es wurde daher nach einer weiteren österreichischen Patentschrift Nr. 132570 ein neues Verfahren zum Ausziehen der.Droge vorgeschlagen, und zwar mit schwach alka lischen Mitteln in der Wärme, wie insbeson dere mit sekundärem Natniumphosphat oder verdünntem Ammoniak, vorzugsweise in Gegenwart. von Alkohol. Das rohe Saponin wird aus der alkalischen Extraktlösung mit. organischen Säuren, wie z. B. Essigsäure, oder mit schwachen anorganischen .Säuren, wie z. B.
Phosphorsäure, ausgefällt, in verdünn tem Alkohol gelöst und mittels Bleicherden gerenigt. Die Ausbeute an so erhaltenem reinem Saponin ist etwa. die doppelte gegen über dem erstgenannten Verfahren.
Schliesslich können nach der deutschen Pa- tentschriftNr.496446,reine und haltbare:Salze des sauren Primulasaponins mit Ammoniak oder mit schwachen organischen Basen und ferner auch Ester mit verschiedenen Alko holen gewonnen werden. So z. B. kann ein saponinha-ltiger Auszug mit Ammoniak gesät tigt und das so erhaltene Ammonsalz durch Umkristallisieren gereinigt werden.
Die bisherigen Herstellungsverfahren sind mit zahlreichen Nachteilen behaftet, da sie verhältnismässig kompliziert. sind und zu kei nem vollkommen reinen S'aponin führen, das alsdann nur durch vielfaches Umlösen bezw. Umkristallisieren gereinigt werden muss, was wiederum umständlich, zeitraubend und mit Verlusten verbunden ist.
Die Ausbeuten an Saponin besonders beim erstgenannten Ver fahren sind gering, da nur der schwerlösliche Teil des sämtlichen Saponins isoliert wird, während das leichter lösliche amorphe Sapo. nin mit der@utterlauge verlorengeht.
Es wurde nun gefunden, da.ss die bisheri gen Schwierigkeiten bei der Isolation de: reinen Primulasaponins in einfacher WeisE durch folgende Arbeitsweise behoben werden können: Die Droge wird zunächst mit ver dünntem, beispielsweise 70%igem Alkohol. ausgezogen, der Auszug durch Abdestillieren vom Alkohol befreit, worauf durch Ansäuren das Rohsaponin ausgeschieden und abfiltriert wird.
Die Verwendung von verdünntem Alko hol allein zur Extraktion der feingemahlenen Droge erwies sich als das vorteilhafteste Ver fahren, da die schleim- und stärkeartigen Stoffe mit siedendem Alkohol ausgefällt wer den, so dass der Absud alsdann leicht und schnell filtriert werden kann. Das rohe Sapo- nin enthält amorphe und kristallisierte An teile ausser beträchtlichen Anteilen von mit gerissenen L: nreinigkeiten und weist eine sehr dunkle Farbe auf. Das so gewonnene Roh sapon,in wird hierauf mit Kalkmilch versetzt, -wodurch es leicht als Kalksalz in Lösung geht, während die Verunreinigungen und Farbstoffe ungelöst bleiben.
Die unaufge- lösten Verunreinigungen werden durch Fil tration abgetrennt, worauf aus dem Filtrat durch Ansäuren ein sehr reines Primulasapo- nin gefällt wird, das fast -weiss oder höchstens schwach gelblich ist. Das filtrierte Saponin kann einmal bis zweimal mit Wasser nach gewaschen, abgesaugt und im Vakuum ge trocknet werden.
Das erfindungsgemässe Verfahren weist zahlreiche Vorteile gegenüber den bekannten Verfahren auf. Unter Verwendung von Kalk milch kann aus einem verhältnismässig sehr dunklen Zwischenprodukt in einfacher, schneller und billiger Weise reines, fast -weisses Primulasaponin ohne Verwendung von Entfärbungsmitteln und ohne Umkristalli- sieren aus Alkohol, und zwar mit. sehr guten Ausbeuten, gewonnen ---erden. Atcsf üh.r-ungsbeespiel:
24 kg gepulverte Primulawurzeln werden fünfmal nacheinander mit 70%igem Athyl- alkohol ausgekocht, wobei für den ersten Absud 60 kg und für die weiteren vier Absude je 40 kg Alkohol angewandt werden. Die Extraktlösung wird immer gut abge saugt, und die vereinigten Extrakte werden durch Destillation vom Alkohol befreit und der wässerige Rückstand bei einer milden Temperatur von etwa 50 mit Essigsäure.
solange ein Niederschlag entsteht, angesäuert und das ausgefallene Saponingemenge abfil- triert. Die so gewonnene Saponinpaste wird mit 30 Liter Kalkmilch, 1,5 kg gelösten Kalk enthalten, angerührt, die Mischung mehrere Stunden unter öfterem Durchrühren auf etwa 90 erhitzt und die heisse Lösung fil triert. Der unlösliche Rückstand wird wieder holt dem Auskochen unter Zugabe von je etwa 20 Liter Kalkmilch unterworfen, und zwar solange das Filtrat nach dem Ansäuren und Anwärmen noch eine Saponinfällung ergibt.
Die vereinigten Filtrate des Saponinkalk- salzes werden auf 40 bis 50 erwärmt, mit Essigsäure angesäuert, und die Saponinfäl- lung wird zum Absetzen gebracht. Die klare Flüssigkeit wird abgezogen, die Saponinpaste zunächst teilweise abgesaugt und die Paste neuerlich einmal oder zweimal in reinem Wasser verrührt und wiederholt abgesaugt, wobei die anhaftende Essigsäure und das entstandene Kalziumacetat ausgewaschen wird.
Das endgültige Absaugen des Saponins wird weitgehend durchgeführt und das Erzeugnis im Vakuum bei einer milden Tem peratur von etwa 50 getrocknet. Durch Zer reiben bezw. Pulverisieren wird etwa 1,5 kg eines fast weissen Pulvers erhalten, das ein Gemenge von kristallisierten und amorphen Bestandteilen darstellt.
Das Produkt reizt die Schleimhaut und die Atmungsorgane sehr stark und weist einen haemolytischen Index von etwa 33,000 auf, also einen viel höheren als das reine kristallisierte Saponin. Die Saponinausbeute bei diesem Verfahren schwankt zwischen 6 und 7 % der verwen deten Droge.
1 g des so gewonnenen Saponins benötigt zum Auflösen 8,5 cm' n/10 Na0H, was genau mit den Angaben des bekannten Saponin- forschers L. Koffer übereinstimmt (Arch. u. B. Pharm. 1924, S. 318). Durch Trennung des so erhaltenen Saponingemenges mittels Methylalkohol (siehe J. Lindner, N. Figala, J.
Hager, B. 1934, S. 1641) kann das kristal lisierte .Saponin als chemisches Individuum erhalten werden, dessen Eigenschaften voll kommen mit den in der Literatur angegebe nem übereinstimmen. Sein Zersetzungspunkt liegt gegen 230 , und der haemolytische In dex beträgt 25,000 bei Verwendung von Rin derblut.
Process for the production of pure Frimnlasaponin. The roots of Primula species contain a considerable amount of a saponin which has the character of an acid and which is insoluble in water, but which forms well-defined and soluble alkali salts with aqueous alkali solutions. This property was used to isolate the saponin from the drug. The saponin can also be extracted from the drug with diluted alcohol.
In the Austrian patent specification No. 101486 there is a method for obtaining an acidic, crystallized saponin from the roots of the Primula species. described, which consists in extracting the primula root with aqueous alkali solutions. The raw saponin is precipitated by acids from the extracts obtained in this way and filtered off, whereupon it is dissolved in hot, diluted alcohol,
the solution with Aktdvköhle ent colors and the purified saponin is recently precipitated from the filtrate after most of the alcohol has been distilled off by the gradual addition of water. and finally from a suitable solvent such as ethyl alcohol or methyl alcohol, is recrystallized.
Instead of using aqueous alkali solutions, the drug can also be extracted with dilute alcohol and the raw saponin can be precipitated from the extracts obtained in this way, filtered and redissolved in dilute alcohol, whereupon it is purified in the manner indicated above. In order to remove inorganic impurities such as magnesium or calcium salts from the saponin,
that saponin is subjected to electrodialysis in an aqueous-alkaline solution at any stage of its extraction.
This type of saponin production is by no means satisfactory, since with the .Saponin a large amount of mucus and fiber goes into solution, the separation of which from the saponin causes considerable difficulties. In addition, when extracting with caustic alkali or alkali metal carbonate solutions, relatively dark extracts that are difficult to filter are obtained.
Furthermore, the strong acids used to precipitate the raw saponin also have a harmful effect on the purity, so that only a dark and difficult-to-decolorize raw saponin is obtained in this way. The yield of pure saponin is then relatively low.
It was therefore proposed according to another Austrian patent No. 132570 a new method for extracting the drug, with weak alkaline agents in the heat, such as in particular with secondary sodium phosphate or dilute ammonia, preferably in the presence. of alcohol. The raw saponin is made from the alkaline extract solution using. organic acids, such as. B. acetic acid, or with weak inorganic acids, such as. B.
Phosphoric acid, precipitated, dissolved in dilute alcohol and concentrated using bleaching earth. The yield of pure saponin thus obtained is about. the double compared to the former procedure.
Finally, according to the German patent specification 496446, pure and durable salts of acidic primula saponin with ammonia or with weak organic bases and also esters with various alcohols can be obtained. So z. B. a saponin-containing extract can be saturated with ammonia and the ammonium salt obtained in this way can be purified by recrystallization.
The previous manufacturing processes suffer from numerous disadvantages because they are relatively complicated. and do not lead to a completely pure s'aponin, which can then only be dissolved or Recrystallization must be cleaned, which in turn is cumbersome, time-consuming and associated with losses.
The yields of saponin, especially in the first-mentioned process, are low because only the sparingly soluble part of all of the saponin is isolated, while the more easily soluble amorphous saponin. nin is lost with the @ utterlauge.
It has now been found that the previous difficulties in isolating the pure Primulasaponins can be remedied in a simple manner by the following working method: The drug is first diluted with, for example, 70% alcohol. pulled out, the extract freed from alcohol by distilling off, whereupon the raw saponin is excreted by acidification and filtered off.
The use of diluted alcohol alone for the extraction of the finely ground drug turned out to be the most advantageous method, since the mucous and starch-like substances are precipitated with boiling alcohol, so that the decoction can then be filtered easily and quickly. The raw saponin contains amorphous and crystallized fractions, apart from considerable fractions of cracked oil, and is very dark in color. The raw sapon obtained in this way is then mixed with milk of lime, which makes it easy to dissolve as calcium salt, while the impurities and dyes remain undissolved.
The undissolved impurities are separated by filtration, whereupon a very pure primula saponin is precipitated from the filtrate by acidification, which is almost white or at most slightly yellowish. The filtered saponin can be washed once or twice with water, filtered off with suction and dried in vacuo.
The method according to the invention has numerous advantages over the known methods. Using milk of lime, pure, almost white primula saponin can be obtained from a comparatively very dark intermediate product in a simple, quick and inexpensive manner without the use of decolorizing agents and without recrystallization from alcohol, namely with. very good yields, won --- earth. Atcsf üh.r-ungsbeespiel:
24 kg of powdered primula roots are boiled five times in succession with 70% ethyl alcohol, 60 kg of alcohol being used for the first decoction and 40 kg of alcohol for each of the four further decoctions. The extract solution is always sucked off well, and the combined extracts are freed from alcohol by distillation and the aqueous residue at a mild temperature of about 50 with acetic acid.
as long as a precipitate is formed, acidified and the amount of saponin which has precipitated is filtered off. The saponin paste obtained in this way is mixed with 30 liters of milk of lime containing 1.5 kg of dissolved lime, the mixture is heated to around 90 for several hours, stirring frequently, and the hot solution is filtered. The insoluble residue is again subjected to boiling with the addition of about 20 liters of milk of lime, as long as the filtrate still results in saponin precipitation after acidification and warming.
The combined filtrates of the saponin lime salt are heated to 40 to 50, acidified with acetic acid, and the saponin precipitate is caused to settle. The clear liquid is drawn off, the saponin paste is first partially suctioned off and the paste is again stirred once or twice in pure water and repeatedly suctioned off, the adhering acetic acid and the calcium acetate formed being washed out.
The final suction of the saponin is largely carried out and the product is dried in a vacuum at a mild temperature of around 50. By rubbing or Powdering gives about 1.5 kg of an almost white powder, which is a mixture of crystallized and amorphous components.
The product is very irritating to the mucous membrane and the respiratory organs and has a haemolytic index of about 33,000, which is much higher than pure crystallized saponin. The saponin yield in this process varies between 6 and 7% of the drug used.
1 g of the saponin obtained in this way requires 8.5 cm / 10 NaOH to dissolve, which corresponds exactly to the information provided by the well-known saponin researcher L. Koffer (Arch. And B. Pharm. 1924, p. 318). By separating the amount of saponin obtained in this way using methyl alcohol (see J. Lindner, N. Figala, J.
Hager, B. 1934, p. 1641), the crystallized .Saponin can be obtained as a chemical individual, the properties of which are fully consistent with those specified in the literature. Its decomposition point is about 230 and the hemolytic index is 25,000 using cattle blood.