CA2002071A1 - Procede pour la lutte biologique contre la varroatose et dispositifs pour la mise en oeuvre de ce procede - Google Patents

Abstract

"Procédé pour la lutte biologique contre la varroatose et dispositif, pour la mise en oeuvre de ce procédé". INSTITUT NATIONAL DE LA RECHERCHE AGRONOMIQUE (INRA) CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (CNRS) Ce procédé pour la lutte biologique contre Varroa Jacobsoni, acarien ectoparasite spécifique du genre Apis est caractérisé par le fait qu'on introduit, dans le milieu où peut être présent ledit acarien, un produit attractif constitué par un extrait hexanique total de larves d'abeilles; ou par une fraction active d'un tel extrait ; ou par ou moins un ester actif dérivant d'un alcool aliphatique en C1-C6 et d'un acide carboxylique en C10-C24 ; ou par un mélange des palmitates, stéarates, oléates, linoléates et linolénates de méthyle et d'éthyle, ou un mélange actif d'au moins deux de ces esters ; ou du palmitate d'éthyle, du palmitate de méthyle, du linolénate de méthyle, ou leurs mélanges éventuellement avec un autre ester. Pas de figure pour l'abrégé.

Description

~%0~1 La pr~sente inventlon porte sur un procédé de lutte biologique contre la varroatose, parasitose ~rave de l'abellle qui est due à lr~rroR ~c~bs~ni Oud., acarlen ecto-paraslte spéclfique du genre Ap~. Ce procéde de lutte blologlque comporte deux aspects : d'a~ord celul du dia~nostlc de cette parasltose, et, dans le cas où il est présent, le pi~gea~e et la destruction de l'acarien. La présente lnventlon porte é~alement sur des disposltifs de pibgeage pour l.a mlse en oeuvre de ce proc~dé.
La varroatose est apparue en France en l9~2, aprè, s'@tre propagée en Asle et en Europe de l'Ouest. Elle falt ~galement des ravages en Afrique et en Amérique du Sud, et lS elle est pr~sente depuis qu~lques moi5 aux USA~
rr~ ~aco~sonl trouve, dans les colonles de l`abeille domestique Apl 5 mel 7 i fl ca, les condltlons climatlques et trophiques optlmales dont il a besoin pour se développer~ En prélevant L'h~l~o].ymphe des ouvrleres et des males - che2 les adulte~s comme chqz les larves et les nymphes -, 11 prc~vo4ue des troubles lmportants chez ce.s ln~ectes, qul entra~nent ~énéralement le~ur mort précoce. La ~;
colonle d'abellles est donc très affaiblie, et elle ~`
disparaft au bout de 4 ans environ. De plus, les colonles parasitees sont rapidement contamlnées par des infections secondaires, en partl~ulier des ~iroses, qui accélèrent -encore leur extinction~
-~ A titre d'exemple, une enquete réalisée par Ie Syndicat des Producteurs de Mlel de France A la fln d~
` 3Q l'année 1986 A révél~ que, dans la réglon méditerranéenne, toutes les coIonfes ~talent parasltées, et qu'une grande partie d'entre elles était dans une situation critlque~
La disparition, ou meme l'affaiblissement, des colonles a d'importantes cOnséquences négatives, aussi ~ien au plan agronomique qu'au plan ecologique :
~ La disparltisn-des_colonies d'abeilles entralne : ' ~'.

:' ' ' . ': ' ' ' ''.. ',. '' ~ ;':'- ' une diminution de la polllnisatlon de nombreuses plantes cultlvées, l`abellle étant le princlpal lnsecte pollinisateur. Les effets né~ati~s sur certaines productions végétales sont importants en grandes cultures, en production de semences hybride:,, en arboricu].ture et en cultures de petits frults. E~alement, la disparition des colonies d'abeilles entra~ne une molns ~rande rentabilité
des exploltatlons apicoles, par suite des pertes cle colonies, de la dlmlnution des récoltes de miel, et des surcoûts de productlon dus aux traitements chimlques. Du point de vue écologique, les abeilles participent d'une facon générale b l'équilibre écologique en pollinisant de nombreuses plantes sauvages, et leur disparition rlsque de contrarler cet équlllbre~
Les seuls tr~item~nts actuellement e~flcaces contre l~arr~ ~uco~s~lnf sont les traitements chimiques ~
base cle mol~cules ~carlcides~ Cependant, l`utllisatlon de ces produ:Lts presente clifférents inconvénients : d'une part, les ~c~rlens devlennent plus ou moins rapidement réslstants à ce~s mole~cules, et, d'autre p~rt, ils r:Lsquent de ternlr l'image cles produits sains et naturels de la ruche et en particulier du mie~ ~ien qu'aucune trace de r~sidu n'alt Jamais été détectee en France, ll n'est pas possible de pré~u~er de l'avenlr sur ce sujet. De plus~ le mode

2~ d'utillsation de ces molécules peut présenter certains inconvén~ents : si leur durée d'actlon est courte <de quelques heures ~ quelques ~ours), les nombreux varroas, qui .~ se trouvent ~ l'intérieur des cellules operculées, ne sont ` pas atteints par les mol~cules et émer~eront quelques jours . ~o plus tard pour se reprodulre à leur tour et prolon~er l'infestation ; d`e telles m~thodes ont donc une efficaclté
limltée. A l'inverse, sl leur durée d'action est lon~ue ~quelques semaines?, les molécules peuvent passer dans la clre ou le miel au bout d'un~certain temps et les contaminer~ De plus, l'utilisation d'acarlcldes pendant de longues périodes n'est pas sans présenter de risques de -;
. . . , ~ . . .

~to~z~

toxicité pour les abeilles elles-m~mes~
On observe que, pour se reproduire, la femelle de Varroa ,l~cobsonl quitte l'abeille adulte et p~nètre dans une cellule contenant une larve d`ouvrière ou de m~le, avec une préf~rence pour les larves de m~les, environ deux ~ours avant l'operculation~ Les Déposants on~alors pu démontrer l'exis-tence de kairomones émlses par les larves d'Apis mellfflcR ligustica qui ont un effet attractif sur l'~rr~a ~aco~sonf dans les conditions de temperature de la colonie~
Les principes actifs de ces ~airomones sont à la base du procédé de lutte biolo~ique qui fait l'ob~et de la présente lnvention et dont la mise au point est devenue urgente compte -tenu du fait que, comme indiqué ci-dessus, cet acarien représente actuellement, au niveau international, le 1~ plus grave dan~er quL menace les colonies cie l'abeille ~pls rrlel 1 f ~`
La présente invention porte donc d'abord sur un procéclé pour la lutte biologlque contre l~arro~ ~facc.~sonf, caracterlse par le fait qu'on :lntroduit, dans le mllieu où
peut ~tre présent ledit acarien, un produit attractif constltu~ par :
- un extrait hexanlque tota:L de larves d'abeilles, notamment des larves de m~les et des larves ~; d'ouvr1ères, en particulier, des lar~es de males ~faux-bourdons), ces larves étan-t notamment des larves d'abeilles Ap~s m~lllff~ ligustlca ; ~-- une fraction active (c'est-à-dire une fraction responsable de l'attraction de l~arr~a ~co~son~) d'un e:~tralt he~anique total de larves d'abeilles, cette frac-tion résultant notamment d' Ull fractionnement sur une colonne~de silice de l'extrait hexanlque total précité ;
- au moins un ester actif dérivant d'un alcool aliphatique en C1-C~, comme le méthanol et l'éthanol, et d~un acide carboxylique en G1o~C24, à chaine droit~
-.~

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2lO10,~07~51.

ramiflée, saturé ou comprenant une ou plusieurs doubles liaisons cis ou trans, con~uguées ou non, un cycle benzénique ou un héterocycle pouvant être inclus dans la chafne dudit acide ;
: 5 - un prodult constitué par un mélange de :
- palm:Ltate de méthyle, - palmitate d'éthyle, - stéarate de méthyle, - s-tearate d'~thyle, - ol.éate de méthyle, - oleate d'éthyle, - llnoléate de méthyle, - linol~ate d'éthyle, - linolénate de méthyle, .
- lLnolénate d'éthyle ;
ou encore par un mélange actif d'au molns deu~ de ces esters ;
- du palmitate de méthyle, du palmitate d'ethyle, du linolénate de méthyle ou un mélan~e de deux de ces esters ou un mélan~e des troisj ou encore un mélange comportant au moln~ l'un de ces esters avec au moins un autre e~ter ne prbsent~nt pa9 en lul-m~me l'acti~ite attractive.
- un mélan~e d'esters du type de ceux définls ci-dessus, et obtenu par -transestérificatlon à partir d'une huile, comme l'huile d'arachide, l'huile de tournesol.
Conform~mènt à un mode de réalisation préféré de ce procedé, on introduit le prodult attractlf dans le milieu ..
où l'acarlen l~r~ co~son~ peut être present, à une temp~r~ture comprlse entre 30 et 36C.
On peut~ é~alement associer au produit att.ractif au moins un ad~uvant destiné à en au~menter la volatilité, cet ad~uvant étant choisi notamment parmi des esters or~aniques plus volatils que ceux indiq~ués ci-dessus et ne présentant pas l'activité attractive selon l'invention.
L'association avec un tel-ad~u~ant permettra d'appliquer ce .~' ' .

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procédé de lutte blolo~lque au~ températures ln~leures 3 30G, qul peuvent régner, suivan-t les saisons, dans la r~lche, en particuller dans la partie lnférieure de la ruche, qul est la plus commode d'accès pour dlsposer le pl~ge selon l'invention, tel qu'il sera décrit ci-apr~s.
~n peut également moduler la vltesse de volalitisation du produit attractif, en solubllisant celui-ci dans une substance organlque, telle qu`une paraffine, une `-ci.re végét~le, la cire d'abeille ; en le placant sous la forme d'une suspensiorl collo~dale dans l'eau, lmmobilisee ou non par un agent gélifiant ; ou encore en l'incluant dans un support solide, comme la terre d'infusoires. :
Egalement, on peut prévoir d'associer au produit -~
attractif au moins une hormone, telle qu'une hormone juvenile, a:Lnsl qu'au moins un diluant solide lnerte, co~me la terre d'infusoires, l`alumine, la cellulose ou une cellulose ~nodifiée, le polyoxyéthylène, les matières v~gétale3 sèches, les polym~res comme le polyéthylène au le polychlorure de vinyle.
Il est ~alement envisa~eable d'appllquer le produit attrActif par pulv~risation ou vaporisation (a~rosol~
Dans le cas où l`on v:lse à pié~er l'acarien, on peut, ou bien associer au prodult attractif un moyen pour pléger l'~carien par agglutination ; ou bien un pesticide ou un acariclde de contact notamment peu ou pas volatil, ce ~ul détruira l'acarien, ou encore un a~ent stérilisant, ce qui l'empêchera de proliférer~
Dans un mode de réalisation préféré, on applique .:~ 30 le produi-t attractif dans la ruche, à l'entrée de la ruche . ou à l'e~térieur-de la ruche, au sein d'un pie~e, en : emp~chant, si besoin est, au moyen d'une grille protectrice, ; les abeilles de pénétrer dans ledit piège.
: En fonction de la~température de la colonie (qui ~arie en particulier avec 1R saison et la présence de couvain), et en fonction de...l'emplacement dans lequel on ~ .

;. :, ' . , ' : ,- , ~Z~71 place le piè~e ~dans, à l`entrée de ou en dehors de la ruche), on associe avantageusement à ce procéde un traitement thermique, de façon à en au~menter l'efficaclté.
On a en effet constat~ que le palmltate de me-thyle notamment est très actlf à 34C, mals qu'il ne l'est plus à 22C ; or, il se trouve que 34C est la température moyenne du couvain - d'abeilles. Pour cette molécule en partlculier, il est doncintéressant de noter que la température adequate de son efficacLté est légèrement supérieure à son polnt de fusion (2~-30C).
Ainsi, le proceclé de lutte biologique selon l'invent:Lon présente deux aspects complémenta$res :
- d'une part, il peut être utlllsé comme procédé de diagnostlc de la parasitose ~méthode d'avertlssement) :
l'aplculteur sera ainsl lnformé de la presance du - paraslte et de l'importance de l'lnfestation et donc ;~
éventuellement procéder ~ une appllcatlon controlee d'un traitement acarlcide ;
- d'autre part, il pourra être utlllsé comme procédé de lutte proprement dlte, les acarlens étant éll~lnés au moyen de piè~es (les mol~cules actives étant utillsées en leurres chimlques), en ~tant simplement ple~és, par exemple par une ~ubstarlce ~clh~:31ve1 ou tués, par exemple, par un acarlcide de contact.
Ainsi, la présente lnvention concerne également un ~ dispositif pour la mise en oeuvre du proc~d~ tel qu'il vlerit ; d'être d~flnl, ce dlspositlf étant caractér~s~ par le fait qu'il consiste en un piè$e capable d'attirer l'acarien ~arro~ J`aCOOSOQ~ par la présence du prodult attractif tel que défini ci-dessus, é~entuellement associe à au moins un ad~uvant destiné~à en augmenter la volatilité, et~ou à en moduler la vitesse de volatillsatlon, et~ou à au molns un diluant inerte, et~ou à au moins une hormone.
~: Dans un mode de re.alisation partlculler, le piège ~comprend un support po~tant un revêtement adhésif dans ~` lequel est incorporee une-.quantlté de prodult attractif, et, ,~' `
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~20~.

le cas éche'~ant, d'un pesticide, d'un acaricide et~ou d'un --agent stérllisant, ou encore un support poreux imprég~né
d`une quantit~ de produit at-trac-tif et, le cas échéant, de pesticide, d'acaricide, et/ou d'a~ent stérilisant. En -~
particulier, on peut utiliser un support allong~ que l'on disposera à plat sur le sol de la ruche, au centre de celle-ci.
Dans un autre mode de réalisation particuller, le piège est constitué par un boitier ouvert renfermant le lV prodult attractif, le cas échéant associé à au molns un adJuvant -tel que défini ci-dessus, et/ou à au molns un pesticide, un acaricide e-t~ou un a~ent stérilisant, l'ouverture dudlt boitier pouvant être fermée par une grllle emp~chant les abeilles de penétrer dans ledit boitier.
Ainsij dans le cas d'une adJonction d'un acaricide de contact ~p~r exemple, en ca5 de tr~ forte lnfe~tation~, il ne seralt plus à craindre que cet acaricide pollue la colonie, puisque, d'une part, les abeilles n'auraient pas de contact avec ce produit (pr~sence de la grille protectrice);
et, d'autre part, l'acaricide ne seralt pas diffusé dans la ruche sous 1A forme d'aerosol comme il l'est dans certaines éthodes actuellement au~orlsées, et n'atteindrait donc ~as les rayons où est s-tockee la récolte.
Les dlspositifs selon l'invention peuvent é~alement etre associ~s à un moyer~ de chauffage, comme une résistance chauffante, de fac~ on à accro~tre l'efficacité du procéde.
Ainsi, le prlncipal avantage du procede selon l'in~ention est d'utiliser des molécules qui sont généralement présentes naturellement dans la colonie - d'abeilles, et qui ne risquent donc pas de polluer les ~...
différents prQduits de la ruche : miel, pollen, gelée royale, propolis, cire. G'est un procédé qui est d' un emploi aisé, et convient aussi bien aux apiculteurs professionnels qu`aux amateurs.
~n décrira mai-ntena~t_l'isolement et l'identlfi-. .

. . , , . . . . , . . ~ - . - -,:
.

2~12~7:1.

cation de~ substances actives de l'invention, puis le comportement d'at-traction de ~rr~ J'ac~bs~n~ par des compo~s extraits de larves d'abeilles.

I - Isolement et identlfica-tion des substances actives .
a) Extraction :
Le~ larves m~les d'abellles Apis mel l ~ f tca llgustlca ont été pr~levées deux jours avant l'operculation `.
de leurs cellules. Trois cents larves ont été extraite.~
dans 50 ml d'hexane, pendant une heure, à la température am~iante (6.équivalents larves (Eql) par ml).

b) Chromatographie sur colonne :
8 ml d'extrait hexanique ~8 Eql), ont été
évaporés et chrornatographiés sur une colonne de silice SDS
(70-230 mesh~ longueur 20 cm, dlamètre 0,5 cm~ La colonne de silice a ~té lav~e abondamment avec l'acetate d'éthyle et re.stabilisée par l'he~ne. L'extrait a été élué
successivement a~ec ~ ml d'hex~ne ~fraction F1)r 4 ml de dichlorom~thane (F2), et 4 ml d'ac~tate d'~thyle ~F3~. La fraction actlve F2 (voir paragraphe II) a ~te evaporée sous un courant d'~zote, et repri~e ~an~ 2,7 ml d'hexane. Gette ~olution hexanique e~t analysée en CPG.
~!. 25 c~ Chromatographie en phase ~azeuse :
-~ L'analyse en CPG a été effectuée sur un chromatographe Garlo Erb~ 6000 equlpe d`un inJecteur on :~ column, d'un d~tecteur FI~ et d'un integrateur.
`~- 30 Deux types de colonne capillaires ont é-te utilisées pour l'~analyse de cette fraction active :.
. - 0~1 greffée (longueur : 50 m, diamètre : 0,32 mm, pro$ramme : 50-200C~10~G~mn) 200 à 300C~5C~mn)~,~
.~ gaz vecteur : hydro~ne à 4 x 10 Pa - Carbowax CW20M (-l-on$u~ur : 50 m; diambtre : 0,32 mm.
pro~ramme : 40-260C~3~C~mn~
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.
.

~207~.

gaz vecteur : hydrogène 4 x 10 Pa.

Sur la colonne apolaire OV1, on observe 6 plcs avec des épaulement pour certains pics. Sur la colonne polalre CW 20M, on obtient une bonne résolutlon, et on observe au total 10 pics~

d) Couplage CGtSM :
L unité de couplage CGtSM est composée d un 10 chromatographe Varian 3400 équipé d`un inJecteur Split Splltless et d une colonne CW 20M (longueur : 50 m, diam~tre : 0,32mm), gaz vecteur hélium et d un spectromètre de masse Finlgan Mat lncos 50~ Le chromatogramme résultant est représent~ sur la figure 1 .~ 15 e) Identification :
Tous les lO pics ~a ~ J) qul composent la fraction active F2 ont étS identifiés et quantlfles :
.. a) palmitate da m~thyle ~ ............................ 0,26 ~gtEql : 20 b~ palmitate d ~thyle .......~ ....................... 0,0~ ~gtEql : d~ stéarate de methyle ........................... ~ . 0,08 ~gtEql f~ st~arate d éthyle ~............................... 0,04 ~l$tEql c> oléate de methyle ........~........................ 0,07 ~Eql e~ oléate d ~thyle ~ ...... 0,03 ~g~Eql g~ linoléate de m~thyle ..... ~ 0,05 ~gtEql h~ linoléate d éthyle ~ 0,0~ ~giEql linolénate de méthyle ~ . 0,59 ~Eql ~ ~ llnolénate d ethyle ...... ~ 0,18 ~g~Eql `- ~ Eeurs spectres de masse et leurs temps de : 30 rétention, en CPG sur deux colonnes de polarlté différente :.
sont identiques avec ceux de référence o~tenus commercialement che~ Sigma.
~ ~ ` ' '.' - ` -~', . , . - -: ' , . -.,.'', ;' ,- , ' ., . ,, . : . .

~9X~071.

II Etude du comportement d'attraction de Varroa iacobsonl en présence de cllfféren-tes substances issues de l'lnsecte hote Cette étude a été réalis~e dans un olfactomètre dynamique à quatre choix, qui permet le contrôle rigoureu~
des flux dans les quatre champs odorisés ou non (Vet et al, Physiol. Entomol. 8, pages ~7-106 (19~3) ; ~aiser e-t al, . Insect. Behav. (1~88~ (sous presse~. Dans le protocole choisi, sur les quatre champs de l'olfactomètre, un ou deu~
selon les cas sont odorisés, les autres etant inodores. Le disposit1r était placé dans une encelnte thermostatée .~ 32 _ 1 C ~humidi-té relative : 90 ~ 5'~>, qui est la température correspondant à la préférence thermique de l'acarien (Le Conte et Arnold, Apidologie, 16(2~, pa~es 155-164 (1~
La r~partltion de Varroa fAcobsonl dan~. les différents champs a ~tb analysée selon deux méthode, complémentaires :
: i~ une repré,entatic)n sous la forme de niveau~ de ~ris d'intensit~ croissante, établle gr~ce ~ un progrnmme lnformAtis~ et correspondant à la présence cumulée de IJarroa jaco~so~f pendant toute la dur~e de l'expérience (Bacl~chine et al, 1~88, en pr~paration>~
ii) le nombre moyen de varroa~ pr~sents dans l~s ch~mps odorlsés et dans les champs t~moins a éte calcule en fonctlon du temps passé dans chaque champ.
.` 25 - La fi~ure 2 du dessln annexé represente la dis-tribution spatiale des femelles de Irarroa jaco~sorl~ dans l'olfactomètre.
A : Témoin : les quatre champs sont inodores.
: palmi-tate de méthyle : deux des quatre champs (supérieur gauche et inf~rieur droit~ sont odorisés avec du ` palmitate de méthvle ; les deux autres champs sont inodores.
.
La figure 3 illust~re les réponses olfactives des : 35 femelles de Varl-oa iac~sonf au palmitate de méthyle et à
d`autres composés d`ex~ra-its_de larves mâles d`abeilles.
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- - . . :
' -, ' - ' : ~

~ 0~.

Chacun des champs d' Ull olfactomètre dynamique à
quatre cholx étalt traversé par un flux d'air, à la vitesse de 0,9 ~ 0,1 l~h. Selon les cas, un ou deux des champs étaient odorisés, les autres étant inodores. Les larves 5 d'abeilles, ou les différents ex-traits et composés dont l'efficacit~ hiologique étalt à tester, étaient disposés dans une flole en verre connectée à un bras de l'olfactom~tre. Les extraits ~talent déposés sur un papier filtre Whatman (~F/F) de 2 x 2 cm ; les autres fioles 10 recevant un papier filtre témoln des mêmes dimenslons. Les extraits chimiques étaient renouvelés toutes les deux expérimentatlons ; auparavant, l'olfactomètre était nettoyé
à l'alcool et rincé à l'eau distillée~ Le disposltif subissait une rotation de 90 apr~s 7 tests consécutifs, 15 aFin d'~liminer l'interférence d'autres si~naux dans l'orientation des acariens.
Les varroas utilisés ~taient des femelles prélevées dans une colonie d'a~eilles et malntenues d 22C
pendant 7 ~ ~ ~ours sur des ouvrières dans une cag~ette 20 d'élevaga.
56 varroas r~p~rtis ~sn deux sérles ont ~t~
utilis~s pour chaqu~ test. Les acarlens ont ~t~ test~
: indlviduellement p~ndant 6 minutes 15 secondes. Leur ; position était relevée toutes les 5 secondes.
En l'absence de stimulatlon odorante, les varroas se distrlbuen-t au hasard dans l'olfactomètre (figure 2).
Le -temps pass~ dans chacun des quatre champs ne ' diffère pas sl~nificativement des autres ~test de Friedman, x2 = 32,76 ; ~DL = 57) ~fi~ure 3).
En présence de 15 larves mâles vivantes d' Apfs mellifica ligusti~ca ~â~es de 5-6 Jours ), les acari.ens ont - présenté un comportement d'attraction très sl~nificatif (X = 7,02 ; p<0,01) ~Fi~ure 3), d~montrant ainsi que les signaux chimiques sont impli~qués dans la re,-onnaissance des 35 larves par les femelles de ~arro~ jaco~scnl.
Un extrait he~nique_de larves d`abeilles mâles de m~me age que les précédentes, (représentant 1,2 Eql~ s'est . .

, . . - . ,, , . : :
- , ... .

o~

r~ve51é ~galement très attractif (X2 - 7,6 ; pC0,0l). Cet extrait a été fractionné sur une colonne de silice en trois parties tvoir paragraphe I?~ Chacune des trois fractions Fl, F2 e-t F3 (représentant l,8 Eql> a éte testée au moyen du test biolo$ique décrit ci-dessus ; seule la fraction F2 s'est avérée attractive (X2 = 7,28 ; p<O,Ol) (figure 3).
L'efficacité biologlque des molécules identifiées à partir des dix composés présents dans cette fractlon a été
testée à raison de l ~g de chaque constltuant par champ l odoris~. Le palmitate de methyle <PM), le palmitate d'éthyle (PE) et le linolénate de methyle (LM) ont proYoqué
séparérnent un comportement d'attraction de ~'arroa j~cob~onl identique à celul de l'extrait total (Figure 3~, alors que les autres composés sont sans effet.
Dans un autre essai, le mélange de deux molécules:
PM et SM (1/1~ a été teste en compétitlon avec le PM seul ;
aucune differL~nce sl~niflcatlve n'app~raIt ~ntr~ les deux champs odorisés <x2 = o,o~, Le SM n'a donc aucun effet synerglque sur l'attractlvlté entrainee par le PM utillsé
~eul.
De plus, l'attractlvlte clu PM est étroltement d~pendant~ de la temp~rature ambiunte. Sl ~ la temp~rature de 32 ~ l'C l'~ttr~ction du PM ~st hautement slsniflcative (figure 3), utlllsée ~ la tempéra-ture de 22C~ aucune : 25 dlfférence significative dans la répartition des varroas entre les champs odorises par le PM et les champs témoins (X2 = 0,42~ n'a pu etre mlse en é~idence (figure 3). La chaleur et les facteurs chimiques ont donc un effet syner$ique sur la manlfestatlon du comportement d'attraction de VarrQ~ ~acobsoni. Le r~le cruclal Joué par la temp~rature dans les relatlons abellle-varroa a déJ~ été
démontré (Le Gonte et Arnold, l986, ~rd Meeting of the E~C~ ~arroa Experts`group,~ Bad Hombur~ ~FA; Le Conte et Arnold, 1987, Apldologle 18tl4>, pages 305 à 320)~

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' ' , ' ~
.~ .

Claims (21)

1 - Procédé pour la lutte biologique contre Varroa jacobsoni, acarien ectoparasite spécifique du genre Apis, caractérisé par le fait qu'on introduit, dans le milieu où
peut être présent ledit acarien, un produit attractif constitué par un extrait hexanique total de larves d'abeilles.

2 - Procédé pour la lutte biologique contre Varroa jacobsoni, acarien ectoparasite spécifique du genre Apis, caractérisé par le fait qu'on introduit, dans le milieu où
peut être présent ledit acarien, un produit attractif constitué par une fraction active d'un extrait hexanique total de larves d'abeilles.

3 - Procédé selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé par le fait qu'on utilise un extrait hexanique total issu de larves de mâles ou de larves d'ouvrières, ou la fraction active dudit extrait.

4 - Procédé selon l'une des revendications 2 et 3, caractérisé par le fait qu'on utilise une fraction active qui résulte d'un fractionnement sur une colonne de silice.

5 - Procédé pour la lutte biologique contre Varroa jacobsoni, acarien ectoparasite spécifique du genre Apis, caractérisé par le fait qu'on introduit , dans le milieu où
peut être présent ledit acarien, un produit attractif constitué par au moins un ester actif dérivant d'un alcool aliphatique en C1-C6 et d'un acide carboxylique en C10-C24, à chaine droite ou ramifiée, saturé ou comprenant une ou plusieurs doubles liaisons cis ou trans, conjuguées ou non, un cycle benzénique ou un hétérocycle pouvant être inclus dans la chaîne dudit acide.

6 - Procédé pour la lutte biologique contre Varroa Jacobsoni, acarien ectoparasite spécifique du genre Apis, caractérisé par le fait qu'on introduit, dans le milieu où
peut être présent ledit acarien, un produit attractif constitué par un mélange de :
- palmitate de méthyle ;
- palmitate d'éthyle ;
- stéarate de méthyle ;
- stéarate d'éthyle ;
- oléate de méthyle ;
- oléate d'éthyle ;
- linoléate de méthyle ;
- linoléate d'éthyle ;
- linolénate de méthyle ; et - linolénate d'éthyle, ou encore un mélange actif d'au moins deux de ces esters.

7 - Procédé pour la lutte biologique contre Varroa jacobsoni, acarien ectoparasite spécifique du genre Apis, caractérisé par le fait qu'on introduit, dans le milieu où
peut être présent ledit acarien, un produit attractif constitué par du palmitate de méthyle, du palmitate d'éthyle, du linolénate de méthyle ou un mélange de deux de ces esters ou un mélange des trois, ou encore un mélange comportant au moins l'un de ces esters avec au moins un autre ester ne présentant pas en lui-même l'activité
attractive.

8 - Procédé pour la lutte biologique contre Varroa jacobsoni, acarien ectoparasite spécifique du genre Apis, caractérisé par le fait qu'on introduit, dans le milieu où
peut être présent ledit acarien, un produit attractif constitué par un mélange d'esters obtenus par transestérification à partir d'une huile comme l'huile d'arachide, l'huile de tournesol.

9 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisé par le fait qu'on introduit le produit attractif, dans le milieu où l'acarien Varroa jacobsoni peut être présent, à une température comprise entre 30 et 36°C.

10 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 9, caractérise par le fait qu'on associe au produit attractif au moins un adjuvant destiné à en augmenter la volatilité, comme un ester organique plus volatil que ceux définis à
l'une des revendications 5 à 7.

11 - Procédé selon l'une des revendications 1 à
10, caractérisé par le fait qu'on module la vitesse de volalitisation du produit attractif, en solubilisant celui-ci dans une substance organique, telle qu'une paraffine, une cire végétale, la cire d'abeille ; en le plaçant sous la forme d'une suspension colloïdale dans l'eau, immobilisée ou non pal un agent gélifiant ; ou encore en l'incluant dans un support solide, comme la terre d'infusoires.

12 - Procédé selon l'une des revendications 1 à
10, caractérisé par le fait qu'on associe au produit attractif au moins un diluant solide inerte, comme la terre d'infusoires, l'alumine, la cellulose ou une cellulose modifiée, le polyoxyéthylène, les matières végétales sèches, les polymères comme le polyéthylène ou le polychlorure de vinyle.

13 - Procédé selon l'une des revendications 1 à
12, caractérisé par le fait qu'on associe au produit attractif au moins une hormone, telle qu'une hormone juvénile.

14 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisé par le fait qu'on applique le produit attractif par pulvérisation ou vaporisation.

15 - Procédé selon l'une des revendications 1 à
13, visant à pièger l'acarien Varroa Jacobsoni, caractérisé
par le fait qu'on associe au produit attractif un moyen pour piéger l'acarien par agglutination.

16 - Procédé selon l'une des revendications 1 à
15, visant à piéger et à détruire l'acarien Varroa jacobsoni, ou à l'empêcher de proliférer, caractérisé par le fait qu'on associe au produit attractif un pesticide ou un acaricide de contact, notamment peu ou pas volatil, ou encore un agent stérilisant.

17 - Procédé selon l'une des revendications 1 à

16, caractérisé par le fait qu'on applique le produit attractif dans la ruche, à l'entrée de la ruche ou à
l'extérieur de la ruche, au sein d'un piège, en empêchant, si besoin est, au moyen d'une grille protectrice, les abeilles de pénétrer dans ledit piège.

18 - Dispositif pour la mise en oeuvre du procédé
tel que défini à l'une des revendications 1 à 13 et 15 à 17, caractérisé par le fait qu'il consiste en un piège capable d'attirer l'acarien Varroa jacobsoni par la présence d'un produit attractif tel que défini à l'une des revendications 1 à 8, éventuellement associé à au moins un adjuvant destiné
à en augmenter la volatilité, et/ou à en moduler la vitesse de volatilisation, et/ou à au moins un diluant inerte et/ou à au moins une hormone.

19 - Dispositif selon la revendication 18, caractérisé par le fait que le piège comprend un support portant un revêtement adhésif dans lequel est incorporée une quantité de produit attractif, et, le cas échéant, d'un pesticide, d'un acaricide et/ou d'un agent stérilisant, ou encore un support poreux imprégné d'une quantité de produit attractif et, le cas échéant, d'un pesticide, d'un acaricide, et/ou d'un agent stérilisant.

20 - Dispositif selon la revendication 18, caractérisé par le fait que le piège est constitué par un boîtier ouvert renfermant le produit attractif, le cas échéant associé à au moins un adjuvant tel que défini à la revendication 18, et à au moins un pesticide, un acaricide et/ou un agent stérilisant, l'ouverture dudit boîtier pouvant être fermée par une grille empêchant les abeilles de pénétrer dans ledit boîtier.

21 - Dispositif selon l'une des revendications 18 à 20, caractérisé par le fait qu'il est associé à un moyen de chauffage.