BRPI0908952B1

BRPI0908952B1 - A thickening composition, its kit, its use, food product, raw material or intermediate material for production of food product and method for increasing its viscosity

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Publication number: BRPI0908952B1
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Publication date: 2017-08-15

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “COMPOSIÇÃO ESPESSANTE, SEU KIT, SEU USO, PRODUTO ALIMENTÍCIO, MATÉRIA-PRIMA OU MATERIAL INTERMEDIÁRIO PARA A PRODUÇÃO DE PRODUTO ALIMENTÍCIO E MÉTODO PARA AUMENTAR SUA VISCOSIDADE”. A presente invenção refere-se ao uso de alternan como espes-sante, em particular para produtos alimentícios, uma composição de espes-sante contendo alternan e pelo menos um outro espessante, um produto alimentício contendo a composição de espessante, e um método de aumento da viscosidade de produto alimentícios.Patent Descriptive Report for "THICKNESS COMPOSITION, ITS KIT, ITS USE, FOOD PRODUCT, RAW MATERIAL OR INTERMEDIATE MATERIAL FOR THE PRODUCTION OF FOOD PRODUCT AND METHOD TO INCREASE YOUR VISCOSITY". The present invention relates to the use of alternan as thickener, in particular for food products, a thickener composition containing alternan and at least one other thickener, a food product containing the thickener composition, and a method of increasing viscosity of food products.

Espessantes usuais para produtos alimentícios, que são conhecidos há muito tempo são amido, derivados de amido, amido modificado, pectinas, ácido algínico, alginatos, farinha de guar, tragacanto, goma arábica, gelatina, farinha de semente de alfarroba, galactomanana, xantana, car-ragena, goma karaya, goma tara, goma de tamarindo, goma gelana, mana-na, maltodextrina etc. Há uma literatura extensa nesta matéria, vide por exemplo Belitz, Grosch, Handbuch der Lebensmittelchemie [Manual de química de alimentos], 4- edição, 1992, Springer Verlag, Berlin-Heidelberg-New York; R. L. Whistler, J. N. BeMiller, Carbohydrate Chemistry for Food Scien-tists [Química de carboidratos para cientistas de alimentos], 1997, Eagan Press, St. Paul, USA; A. Nussinovitch, Hydrocolloid Applications [Aplicações de Hidrocoloides], 1997, Blackie Academic & Professional, London.Common thickeners for food products which have long been known are starch, starch derivatives, modified starch, pectins, alginic acid, alginates, guar flour, tragacanth, gum arabic, gelatin, locust bean flour, galactomannan, xanthan, car ragena, karaya gum, tara gum, tamarind gum, gelana gum, manna, maltodextrin etc. There is extensive literature on this subject, see for example Belitz, Grosch, Handbuch der Lebensmittelchemie [Food Chemistry Handbook], 4th edition, 1992, Springer Verlag, Berlin-Heidelberg-New York; R. L. Whistler, J. N. BeMiller, Carbohydrate Chemistry for Food Scien-tists, 1997, Eagan Press, St. Paul, USA; A. Nussinovitch, Hydrocolloid Applications, 1997, Blackie Academic & Professional, London.

Composições sinérgicas de espessantes para tintas de impressão e formulações cosméticas etc. são descritas em US 4 540 510. US 4 540 510 descreve uma composição contendo um polímero de acrilamida -ácido metilpropanossulfônico com um peso molecular acima de cerca de um milhão e um polímero solúvel em água, que é selecionado entre goma galactomanana, éteres hidroxialquílicos de goma galactomanana, éteres de hidro-xialquilcelulose, polímeros de óxido de polialquileno e suas misturas, os polímeros estando presentes na mistura em proporções tais que um efeito espessante sinérgico é obtido em líquidos. O pedido de Patente US20060141127 descreve um sistema espessante para bebidas, especialmente para sucos. O sistema espessante é constituído de dois componentes, um espessante e um auxiliar de espessa-mento, que apresentam um efeito sinérgico. O efeito sinérgico torna possível reduzir o montante de espessante usado. O espessante é selecionado entre farinhas, gomas, amidos alimentícios modificados e misturas dos mesmos, e o auxiliar é selecionado entre saborizante cítrico, óleo cítrico, casca de limão e suas misturas. O objetivo da presente invenção foi encontrar outro espessante eficaz ou uma composição altamente eficaz de espessante, adequada para uso em produtos alimentícios. Este objetivo é obtido com o ensinamento técnico de acordo com as reivindicações de patente anexas. A presente invenção refere-se ao uso de alteman como espessante.Synergistic thickener compositions for printing inks and cosmetic formulations etc. US 4,540,510. US 4,540,510 describes a composition containing an acrylamide-methylpropanesulfonic acid polymer having a molecular weight above about one million and a water-soluble polymer which is selected from galactomannan gum, hydroxyalkyl ethers of galactomannan gum, hydroxyalkylcellulose ethers, polyalkylene oxide polymers and mixtures thereof, the polymers being present in the mixture in such proportions that a synergistic thickening effect is obtained in liquids. US20060141127 describes a beverage thickening system, especially for juices. The thickener system consists of two components, a thickener and a thickening aid, which have a synergistic effect. The synergistic effect makes it possible to reduce the amount of thickener used. The thickener is selected from flour, gums, modified food starches and mixtures thereof, and the auxiliary is selected from citrus flavoring, citrus oil, lemon peel and mixtures thereof. The object of the present invention was to find another effective thickener or a highly effective thickener composition suitable for use in food products. This object is obtained from the technical teaching according to the attached patent claims. The present invention relates to the use of alteman as thickener.

Alternan é, de acordo com a presente invenção, um polissacarí-deo que é constituído de unidades de glicose. As unidades de glicose são ligadas umas às outras via ligações a-1,3- e a-1,6-glicosídicas e estes dois tipos de ligação podem ocorrer alternadamente. Alternan pode conter ramificações (Seymour etal., Carbohydrate Research 74, (1979), 41-62). Alternan e métodos de produção de alteman são conhecidos da arte anterior e são descritos, por exemplo, em Jeanes et al. (1954) J. Am. Chem. Soc., 76: 5041-5052, Misaki etal. (1980) Carbohydr. Res., 84: 273-285, Cote e Robyt (1982), Carbohydr. Res., 101: 57-74, Cote (1992), Carbohydrate Polymers 19, 249-252, WO 00/47727, US 5,702,942, US20060127328, PCT/EP2008/051760. O alternan usado na presente invenção possui preferivelmente um peso molecular médio em peso Mw na faixa de cerca de 10 OOOOOOg/mol a cerca de 60 000 000 g/mol (determinado com GPC MALLS), ainda mais preferivelmente de cerca de 12 000 000 g/mol a cerca de 50 000 000 g/mol.Alternan is, according to the present invention, a polysaccharide consisting of glucose units. Glucose units are linked to each other via α-1,3- and α-1,6-glycosidic linkages and these two types of linkage may occur alternately. Alternan may contain branches (Seymour etal., Carbohydrate Research 74, (1979), 41-62). Alternan and alteman production methods are known in the prior art and are described, for example, in Jeanes et al. (1954) J. Am. Chem. Soc. 76: 5041-5052, Misaki etal. (1980) Carbohydr. Res., 84: 273-285, Cote and Robyt (1982), Carbohydr. Res., 101: 57-74, Cote (1992), Carbohydrate Polymers 19, 249-252, WO 00/47727, US 5,702,942, US20060127328, PCT / EP2008 / 051760. The alternan used in the present invention preferably has a weight average molecular weight Mw in the range of about 10,000,000 g / mol to about 60,000,000 g / mol (determined with GPC MALLS), even more preferably about 12,000,000 g. / mol to about 50,000,000 g / mol.

Em uma modalidade o alteman usado é produzido com o auxílio de alternan sucrase de Leuconostoc mesenteroides, como descrito no pedido de patente WO 00/47727, e preferivelmente tem um peso molecular médio peso Mw na faixa de cerca de 33 000 000 g/mol a cerca de 60 000 000 g/mol (determinado com GPC MALLS (gel- permeation chroma-tography with multi-angle laser light scattering - cromatografia de permeação com gel com espalhamento de laser em multiângulos), ainda mais preferivelmente cerca de 33 000 000 g/mol a cerca de 50 000 000 g/mol.In one embodiment the alteman used is produced with the aid of Leuconostoc mesenteroides alternan sucrase as described in patent application WO 00/47727, and preferably has an average molecular weight Mw in the range of about 33,000,000 g / mol to about 60,000,000 g / mol (determined with GPC MALLS (multi-angle laser light scattering gel-permeation), even more preferably about 33,000,000 g / mol to about 50,000,000 g / mol.

Em outra modalidade preferida é usado um alternan com peso molecular médio peso Mw na faixa de 12 000 000 a 30 000 000 g/mol (determinado com GPC MALLS), mais preferivelmente 14 000 000 a 28 000 000 g/mol, ainda mais preferivelmente 16 000 000 a 26 000 000 g/mol, no máximo da preferência 19 000 000 a 23 000 000 g/mol e é produzido com o auxílio de uma alteman sucrase encurtada. As alternan sucrases encurtadas, o método de produção do referido alternan e o alternan são descritos no pedido internacional PCT/EP2008/051760, que se encontra expressamente aqui referido. O termo espessante de acordo com esta invenção significa uma substância de alto peso molecular que absorve líquidos, preferivelmente á-gua, incha, e finalmente é convertida em uma solução viscosa verdadeira ou coloidal.In another preferred embodiment, an alternan with average molecular weight Mw in the range of 12,000,000 to 30,000,000 g / mol (determined with GPC MALLS), more preferably 14,000,000 to 28,000,000 g / mol, even more preferably is used. 16 000 000 to 26 000 000 g / mol, most preferably 19 000 000 to 23 000 000 g / mol and is produced with the aid of a shortened alteman sucrase. The shortened alternan sucrases, the method of producing said alternan and the alternan are described in international application PCT / EP2008 / 051760, which is expressly referred to herein. The term thickener according to this invention means a high molecular weight substance that absorbs liquids, preferably water, swells, and is finally converted into a true or colloidal viscous solution.

Alternan pode ser usado de acordo com a invenção como espessante para aumentar a viscosidade de líquidos ou melhorar as propriedades tixotrópicas dos géis.Alternan can be used according to the invention as a thickener to increase the viscosity of liquids or to improve the thixotropic properties of gels.

Alteman é preferivelmente usado para o espessamento de preparações industriais, cosméticas, farmacêuticas ou dietéticas, por exemplo de tintas, cremes, agentes de limpeza, acabamento têxtil, tintas, dispersões de revestimento, adesivos, papel, produtos alimentícios (dietéticos), intermediários de produtos alimentícios e produtos de partida para produtos alimentícios. O termo produto alimentício de acordo com a presente invenção também inclui bebidas.Alteman is preferably used for thickening industrial, cosmetic, pharmaceutical or dietetic preparations, for example paints, creams, cleaning agents, textile finishing, inks, coating dispersions, adhesives, paper, (dietetic) food products, product intermediates. foodstuffs and starting products for foodstuffs. The term food product according to the present invention also includes beverages.

Uso para o espessamento de produtos alimentícios (dietéticos) é especialmente preferido já que alternan é comestível, mas não é calórico. Produtos alimentícios podem, sem limitação, serem selecionados entre molhos, caldos de carne, sopas, molhos de salada, molhos de imersão (dips), laticínios, como iogurte, iogurte de beber, creme, leite integral, leite desnata- do, leitelho, leite azedo, kefir, soro, musse, gelatina, pudim, pastas, geléia, sorvete, produtos de padaria e massas de pão ou bolo (doughs).Use for thickening (dietary) food products is especially preferred since alternan is edible but not caloric. Food products may, without limitation, be selected from sauces, broths, soups, salad dressings, dips, dairy products such as yogurt, drinking yogurt, cream, whole milk, skimmed milk, buttermilk, sour milk, kefir, whey, mousse, gelatin, pudding, pastes, jam, ice cream, bakery products and doughs.

Alternan pode ser misturado com um produto alimentício (dietéti-co) durante a produção do produto alimentício ou diretamente antes do consumo do produto alimentício. O alternan está preferivelmente na forma de um pó ou pasta, por exemplo, misturado com água.Alternan may be mixed with a food product (dietetic) during the production of the food product or directly before the consumption of the food product. The alternan is preferably in the form of a powder or paste, for example mixed with water.

Alternan é adicionado a um produto alimentício em um montante que provê o desejado grau de espessamento. Montantes usuais são 0,1-10% em peso com base no peso total do produto alimentício, 0,1-5% em peso, 0,1-4% em peso, ou 0,1-3% em peso.Alternan is added to a food product in an amount that provides the desired degree of thickening. Usual amounts are 0.1-10 wt% based on the total weight of the food product, 0.1-5 wt%, 0.1-4 wt%, or 0.1-3 wt%.

Em outro aspecto a invenção refere-se a uma composição de espessante contendo alternan e pelo menos um outro espessante. Foi estabelecido que as referidas composições possuem um efeito de espessamento sinérgico. O termo "espessante" tem o significado já indicado anteriormente.In another aspect the invention relates to an alternan-containing thickener composition and at least one other thickener. It has been established that said compositions have a synergistic thickening effect. The term "thickener" has the meaning already indicated above.

Em uma modalidade preferida o outro espessante, que junto com alternan forma a composição de espessante, é um polissacarídeo. Es-pessantes preferidos são selecionados no grupo que consiste em amido, derivados de amido, amidos modificados, fosfatos de amido, pectinas, pecti-nas modificadas, ácido algínico, alginatos, farinha de guar, tragacanto, goma arábica, gelatina, farinha de semente de alfarroba, galactomanana, xantana, carragena, goma karaya, goma tara, goma de tamarindo, goma gelana, ma-nana, maltodextrinas, celulose, celulose derivatizada, dextrana e misturas de duas ou mais destas substâncias. As substâncias indicadas pertencem à técnica anterior e são descritas em mais detalhes na literatura técnica e dicionários, como Rõmpp Lexikon Chemie, 10- edição, 1997, Thieme Videlag, Stuttgart; Belitz, Grosch, Handbuch der Lebensmittelchemie, 4 - edição, 1992, Springer Videlag, Berlin-Heidelberg-New York; R. L. Whistler, J. N. BeMiller, Carbohydrate Chemistry for Food Scientists, 1997, Eagan Press, St. Paul, USA; A. Nussinovitch, Hydrocolloid Applications, 1997, Blackie A-cademic & Professional, London.In a preferred embodiment the other thickener, which together with alternating forms the thickener composition, is a polysaccharide. Preferred stressors are selected from the group consisting of starch, starch derivatives, modified starches, starch phosphates, pectins, modified pectins, alginic acid, alginates, guar flour, tragacanth, gum arabic, gelatin, seed meal carob, galactomannan, xanthan, carrageenan, karaya gum, tara gum, tamarind gum, gelana gum, manana, maltodextrins, cellulose, derivatized cellulose, dextran and mixtures of two or more of these substances. The indicated substances belong to the prior art and are described in more detail in the technical literature and dictionaries, such as Rõmpp Lexikon Chemie, 10th edition, 1997, Thieme Videlag, Stuttgart; Belitz, Grosch, Handbuch der Lebensmittelchemie, 4th edition, 1992, Springer Videlag, Berlin-Heidelberg-New York; R. L. Whistler, J. N. BeMiller, Carbohydrate Chemistry for Food Scientists, 1997, Eagan Press, St. Paul, USA; A. Nussinovitch, Hydrocolloid Applications, 1997, Blackie A-cademic & Professional, London.

Um efeito de espessamento especialmente bom é obtido com uma composição de espessante contendo alternan e um espessante que é selecionado entre amido, amidos modificados, derivados de amido, e fosfa-tos de amido. Misturas contendo alternan e dois ou mais espessantes selecionados entre amido, amidos modificados, derivados de amido, e fosfatos de amido podem também ser usados. Em uma modalidade especial, as composições acima mencionadas consistem somente em alternan e um ou mais espessantes selecionados entre amido, amidos modificados, derivados de amido e fosfatos de amido. O polissacarídeo amido é um polímero de unidades estruturais básicas quimicamente homogêneas, as moléculas de glicose. Amido é uma mistura de diferentes formas moleculares, que diferem com respeito a seu grau de polimerização, à ocorrência de ramificações das cadeias de glicose e seus comprimentos de cadeia e que podem, além disso, ser modificadas, por exemplo, fosforiladas. Constituintes principais de amido são amilase e amilopectina. Amilose é um polímero essencialmente não ramificado de moléculas de glicose alfa-1,4 glicosidicamente ligadas. Amilopectina é uma mistura complexa de cadeias de glicose diferentemente ramificadas: unidades de glicose são ligadas de um maneira linear com ligações a(1->4) e as ramificações surgem aqui em resultado da ocorrência de ligações alfa-1,6 glico-sídicas adicionais. Em plantas típicas usadas para produção de amido industrial ou como alimentos, como, por exemplo, milho, arroz, trigo ou batatas, o amido sintetizado consiste de cerca de 20% - 25% de amilose e cerca de 70% - 75% de amilopectina. Informação básica a cerca de amido e processos para produção de amido podem, por exemplo, ser encontradas na seguinte literatura: Rõmpp Dictionary of Chemistry [Dicionário de Química], J. Falbe e M. Regitz (Editors), 10a edição, Thieme, Stuttgart, New York (1999); Tegge, G., Hrsg., Stárke und Stãrkederívate [Amido e derivados de amido], 3a edição; Behr's: Hamburg, (2004); Galliard, T., Starch: Properties and Po-tential [Amido: Propriedades e Potencial], Wiley: New York, (1987); Zoebele-in, H., Hrsg., Dictionary of Renewable Resources [Dicionário de Recursos Renováveis], 2a edição, Wiley-VCH: Weinheim, (1997); Klingler, R. W., Grundlagen der Getreidetechnologie [Tecnologia de cereais], Behr's: Hamburg, (1995); p. 128; Loncin, Marcei Grundlagen der Verfahrenstechnik in der Lebensmittelindustrie [Fundamentos da tecnologia de processamento na indústria de alimentos], Frankfurt/Main: Verlag Sauerlãnder 1969; Tscheus-chner, H.D. Grundzüge der Lebensmitteltechnik [Fundamentos da tecnologia de alimentos], Hamburg: Behrs Verlag 2004; Kessler, H.G. Lebensmittel- und Bioverfahrenstechnik [Tecnologia de alimentos e bioprocessamento], Muni-ch: Verlag A. Kessler 1996; Martin, A.M. Bioconversion of waste materiais to industrial products [Bioconversão de materiais residuais em produtos industriais] . London, New York: Blackie Academic & Professional 1998.An especially good thickening effect is obtained with an alternan-containing thickener composition and a thickener that is selected from starch, modified starches, starch derivatives, and starch phosphates. Mixtures containing alternan and two or more thickeners selected from starch, modified starches, starch derivatives, and starch phosphates may also be used. In a special embodiment, the aforementioned compositions consist only of alternan and one or more thickeners selected from starch, modified starches, starch derivatives and starch phosphates. Starch polysaccharide is a polymer of chemically homogeneous basic structural units, glucose molecules. Starch is a mixture of different molecular forms which differ with respect to their degree of polymerization, the occurrence of glucose chain branches and their chain lengths and which may furthermore be modified, for example, by phosphorylating. Main constituents of starch are amylase and amylopectin. Amylose is an essentially unbranched polymer of glycosidically linked alpha-1,4 glucose molecules. Amylopectin is a complex mixture of differently branched glucose chains: glucose units are linearly linked with (1-> 4) bonds and the branches appear here as a result of additional alpha-1,6 glycosidic bonds occurring. . In typical plants used for the production of industrial starch or as food, such as corn, rice, wheat or potatoes, the synthesized starch consists of about 20% - 25% amylose and about 70% - 75% amylopectin. . Basic information about starch and processes for starch production can, for example, be found in the following literature: Rõmpp Dictionary of Chemistry, J. Falbe and M. Regitz (Editors), 10th edition, Thieme, Stuttgart , New York (1999); Tegge, G., Hrsg., Stárke und Stärkederívate [Starch and Starch Derivatives], 3rd edition; Behr's: Hamburg, (2004); Galliard, T., Starch: Properties and Potential, Wiley: New York, (1987); Zoebele-in, H., Hrsg., Dictionary of Renewable Resources, 2nd edition, Wiley-VCH: Weinheim, (1997); Klingler, R.W., Grundlagen der Getreidetechnologie [Cereal Technology], Behr's: Hamburg, (1995); P. 128; Loncin, Marcei Grundlagen der Verfahrenstechnik in der Lebensmittelindustrie [Foundations of processing technology in the food industry], Frankfurt / Main: Verlag Sauerlãnder 1969; Tscheus-chner, H.D. Grundzüge der Lebensmitteltechnik [Fundamentals of Food Technology], Hamburg: Behrs Verlag 2004; Kessler, H.G. Lebensmittel- und Bioverfahrenstechnik [Food Technology and Bioprocessing], Muni-ch: Verlag A. Kessler 1996; Martin, A.M. Bioconversion of waste materials to industrial products. London, New York: Blackie Academic & Professional 1998.

Amido pode ser obtido por métodos conhecidos (vide, por exemplo, a literatura acima mencionada) de fontes usuais, como de batatas, ma-ranta (araruta), mandioca (tapioca), batata doce, trigo, milho, centeio, arroz, cevada, milhete (painço), aveia, sorgo, castanhas, bolotas, ervilhas, feijões, bananas. Amido de inchamento a frio provou ser muito vantajoso. Assim o amido que é usado na composição da presente invenção pode ser amido de batatas, maranta (araruta), cassava (tapioca), batata doce, trigo, milho, centeio, arroz, cevada, milhete, aveia, sorgo, castanhas, bolotas, ervilhas, feijões, ou bananas. Em modalidades especiais, o amido que é usado na composição da presente invenção pode ser um amido ceroso. Amido ceroso de acordo com a presente invenção é um amido contendo menos de 10%, preferivelmente menos de 5%, mais preferivelmente menos de 3%, ainda mais preferivelmente menos de 2% e no máximo da preferência menos de 1% de amilose. Amidos cerosos de batata, arroz e milho são particularmente adequados, sem se limitar a estes.Starch can be obtained by known methods (see, for example, the aforementioned literature) from usual sources such as potatoes, maranta, tapioca, sweet potato, wheat, corn, rye, rice, barley. , millet (millet), oats, sorghum, nuts, acorns, peas, beans, bananas. Cold swelling starch has proven to be very advantageous. Thus the starch that is used in the composition of the present invention may be potato starch, maranta (arrowroot), cassava (tapioca), sweet potato, wheat, corn, rye, rice, barley, millet, oats, sorghum, chestnuts, acorns, peas, beans, or bananas. In special embodiments, the starch that is used in the composition of the present invention may be a waxy starch. Waxy starch according to the present invention is a starch containing less than 10%, preferably less than 5%, more preferably less than 3%, even more preferably less than 2% and most preferably less than 1% amylose. Waxy potato, rice and corn starches are particularly suitable, but not limited to.

Na presente invenção, o termo "amido modificado" deve ser entendido como significando um amido cujas características foram alteradas após isolamento de células vegetais com o auxílio de métodos químicos, enzimáticos, térmicos. Amidos podem ser modificados para, entre outros, aumentar sua estabilidade contra calor excessivo, ácido e congelamento; para alterar sua textura; ou aumentar ou diminuir o tempo de gelatinização. Em uma modalidade da presente invenção, o amido modificado é amido que sofreu tratamento térmico e/ou tratamento com ácido. Em outra modalidade, o amido modificado é um amido reticulado. Em ainda outra modalidade, o amido modificado é um polímero de enxerto de amido. Em ainda outras modalidades, o amido modificado é um amido oxidado, amido modificado por alcalino, amido branqueado, amido tratado com enzima, amido acetilado, amido oxidado acetilado, ou amido pré-gelatinizado. Em outra modalidade, o amido modificado é um éster de amido, em particular um éster de amido, em que os grupos éster foram introduzidos no amido usando ácidos orgânicos. Com particular preferência estes são fosfato, nitrato, sulfato, xantato, acetato ou citrato de amido. Exemplos particulares de amidos modificados são dex-trinas (como N° E 1400), amidos tratados com ácido (como N° E 1401), amidos modificados com alcalino (como N° E 1402), amidos branqueados (como N° E 1403), amidos oxidados (como N° E 1404), amidos tratados com enzima (como N° E 1405), fosfatos de monoamido (como N° E 1410), fosfatos de diamido (como N° E 1412), fosfatos de diamido fosfatados (como N° E 1413), fosfatos de diamido acetilados (como N° E 1414), amidos acetila-dos (como N° E 1420), amidos acetilados (como N° E 1421), adipatos de diamido acetilados (como N° E 1422), glicerois de diamido acetilados (como N° E 1423), glicerois de diamido (como N° E 1430), hidroxipropil amidos (como N° E 1440), glicerois de hidroxipropil diamido (como N° E 1441), fosfatos de hidroxipropil diamido (como N° E 1442), octenil succinatos de amido e sódio (amidos emulsificantes, como N° E 1450), amidos oxidados acetilados (como N° E 1451). Métodos para fabricação de amidos modificados são conhecidos pelos versados na técnica e são adequadamente descritos na literatura geral. Uma vista geral da fabricação de amidos modificados e derivados pode ser encontrada, por exemplo, em Orthoefer (em Com, Chemistry and Technology [Milho, Química e Tecnologia], 1987, eds. Watson und Ramstad, Capítulo 16, 479-499); Modified Starch [Amido modificado], Ridgwell Press, 2002 Na presente invenção, o termo "derivado de amido" deve ser entendido como significando amidos cuja razão amilase/amilopectina é alterada, que são parcialmente hidrolisados ou que são quimicamente modificados. Modificação química pode ser, por exemplo, feita reagindo amido com reagentes mono-, bi-, ou polifuncionais ou agentes oxidantes. Essas reações se baseiam, principalmente, na conversão de grupos hidroxila dos poligluca-nos por eterificação (por exemplo, hidroxialquilamidos), esterificação, oxida-ção e/ou copolimerização por enxerto. Derivados de amido são adicionalmente definidos e descritos na seguinte literatura, que é incorporada por referência: Rõmpp Dictionary of Chemistry, Keyword "starch derivatives" ("derivados de amido"), J. Falbe e M. Regitz (Editors), 10a edição, Thieme, Stutt-gart, New York (1999); Houben-Weyl 14/2, 900; Schriftenr. Fonds Chem. Ind. 1986, H.25, 5. Os termos "derivado de amido" e "amido modificado" podem, em alguns casos, abranger substâncias idênticas. Entretanto, ambos os termos são termos comuns na literatura-padrão.In the present invention, the term "modified starch" is to be understood to mean a starch whose characteristics have been altered after isolation of plant cells with the aid of chemical, enzymatic, thermal methods. Starches can be modified to, among others, increase their stability against excessive heat, acid and freezing; to change its texture; or increase or decrease the gelatinization time. In one embodiment of the present invention, the modified starch is heat treated and / or acid treated starch. In another embodiment, the modified starch is a cross-linked starch. In yet another embodiment, the modified starch is a starch graft polymer. In still other embodiments, the modified starch is an oxidized starch, alkaline modified starch, bleached starch, enzyme treated starch, acetylated starch, acetylated oxidized starch, or pregelatinized starch. In another embodiment, the modified starch is a starch ester, in particular a starch ester, wherein the ester groups have been introduced into the starch using organic acids. With particular preference these are phosphate, nitrate, sulfate, xanthate, acetate or starch citrate. Particular examples of modified starches are dextrins (such as No. E 1400), acid-treated starches (such as No. E 1401), alkaline modified starches (such as No. E 1402), bleached starches (such as No. E 1403) , oxidized starches (such as N ° E 1404), enzyme treated starches (such as N ° E 1405), monoamide phosphates (such as N ° E 1410), diamide phosphates (such as N ° E 1412), phosphate diamide phosphates ( as N ° E 1413), acetylated diamide phosphates (as N ° E 1414), acetylated starches (as N ° E 1420), acetylated starches (as N ° E 1421), acetylated diamide adipates (as N ° E 1422), acetylated diamide glycerides (such as No. E 1423), diamido glycerols (such as No. E 1430), hydroxypropyl starches (such as No. E 1440), hydroxypropyl diamide glycerols (such as No. E 1441), hydroxypropyl diamide (such as No. E 1442), sodium starch octenyl succinates (emulsifying starches such as No. E 1450), acetylated oxidized starches (such as No. E 1451). Methods for making modified starches are known to those skilled in the art and are suitably described in the general literature. An overview of the manufacture of modified starches and derivatives can be found, for example, in Orthoefer (in Com, Chemistry and Technology, 1987, eds. Watson und Ramstad, Chapter 16, 479-499); Modified Starch, Ridgwell Press, 2002 In the present invention, the term "starch derivative" is to be understood to mean starches whose amylase / amylopectin ratio is altered, which are partially hydrolyzed or chemically modified. Chemical modification can be, for example, made by reacting starch with mono-, bi-, or polyfunctional reagents or oxidizing agents. These reactions are mainly based on the conversion of hydroxyl groups of the polyglucos by etherification (eg hydroxyalkyl starches), esterification, oxidation and / or graft copolymerization. Starch derivatives are further defined and described in the following literature, which is incorporated by reference: Rmpmp Dictionary of Chemistry, Keyword "starch derivatives", J. Falbe and M. Regitz (Editors), 10th edition, Thieme, Stutt-gart, New York (1999); Houben-Weyl 14/2, 900; Schriftenr. Fonds Chem. Ind. 1986, H.25, 5. The terms "starch derivative" and "modified starch" may, in some cases, encompass identical substances. However, both terms are common terms in standard literature.

Fosfatos de amido e métodos de produção dos mesmos são conhecidos da técnica anterior (por exemplo: Rõmpp Dictionary of Chemistry, J. Falbe e M. Regitz (Editors), 10a edição, Thieme, Stuttgart, New York (1999); Nakano, T.; Salvador, A. S.; Tamochi, J.; Sugimoto, Y.; Ibrahim, H. R.; Toba, Y; Aoe, S.; Kawakami, H.; Aoki, T„ Nahrung/Food, (2003) 47(4), 274-278; Marques, A. P.; Reis, R. L.; Hunt, J. A., Biomaterials, (2002) 23, 1471-1478; Whistler u. BeMiller (Hrsg.), Industrial Gums (3.), S. 592, San Diego: Academic Press 1993). Exemplos particulares de fosfatos de amido são fosfatos de mono amido (como N° E1410), fosfatos de di amido (como N° E1412), fosfatos de amido fosfatados (como N° E1413), fosfato de diamido acetilado (como N° E1414) e fosfato de hidroxipropil di amido (como N° E1442).Starch phosphates and production methods thereof are known from the prior art (eg Römpp Dictionary of Chemistry, J. Falbe and M. Regitz (Editors), 10th edition, Thieme, Stuttgart, New York (1999); Nakano, T Salvador, AS; Tamochi, J.; Sugimoto, Y .; Ibrahim, HR; Toba, Y; Aoe, S.; Kawakami, H.; Aoki, T. Nahrung / Food, (2003) 47 (4), 274-278; Marques, AP; Reis, RL; Hunt, JA, Biomaterials, (2002) 23, 1471-1478; Whistler, U. BeMiller (Hrsg.), Industrial Gums (3.), S. 592, San Diego: Academic Press 1993). Particular examples of starch phosphates are mono starch phosphates (such as No. E1410), starch phosphates (such as No. E1412), phosphate starch phosphates (such as No. E1413), acetylated diamide phosphate (such as No. E1414) and hydroxypropyl diacid phosphate (as No. E1442).

Fosfato de amido pode ser um fosfato de amido na forma de um monoéster na posição C2, C3 ou C6 dos monômeros de glicose polimeriza-dos (Takeda e Hizukuri, 1971, Starch/Stãrke 23, 267-272). A distribuição de fosfato no amido fosfatado sintetizado por plantas é distinguida em geral pelo fato de que aproximadamente 30% a 40% dos radicais fosfato na posição C3 e aproximadamente 60% a 70% dos radicais fosfato na posição C6 das moléculas de glicose são ligadas covalentemente (Blennow et al., 2000, Int. J. of Biological Macromolecules 27, 211-218). Blennow et al. (2000, Carbohydrate Polymers 41,163-174) determinaram um teor de fosfato de amido que é ligado na posição C6 das moléculas de glicose para vários amidos, como, por exemplo, amido de batata (entre 7,8 e 33,5 nmols por mg de amido, dependendo do cultivar), amido de várias espécies Curcuma (entre 1,8 e 63 nmols por mg, dependendo do cultivar), amido de tapioca (2,5 nmols por mg de amido), amido de arroz (1,0 nmol por mg de amido), amido de mun-guba Çmung bean starch") (3,5 nmols por mg de amido) e amido de sorgo (0,9 nmol por mg de amido). O amido que é usado na composição da presente invenção pode em outra modalidade ser um amido resistente, particularmente um dos tipos de amido resistentes conhecidos 1 a 4.Starch phosphate may be a starch phosphate in the form of a C2, C3 or C6 monoester of the polymerized glucose monomers (Takeda and Hizukuri, 1971, Starch / Stärke 23, 267-272). The distribution of phosphate in plant synthesized phosphate starch is generally distinguished by the fact that approximately 30% to 40% of phosphate radicals at the C3 position and approximately 60% to 70% of phosphate radicals at the C6 position of glucose molecules are covalently bonded. (Blennow et al., 2000, Int. J. of Biological Macromolecules 27, 211-218). Blennow et al. (2000, Carbohydrate Polymers 41,163-174) determined a starch phosphate content that is bound at the C6 position of glucose molecules to various starches, such as potato starch (between 7.8 and 33.5 nmols per mg starch, depending on cultivar), starch of various Curcuma species (between 1.8 and 63 nmols per mg, depending on cultivar), tapioca starch (2.5 nmols per mg starch), rice starch (1.0 starch (μmmung bean starch ") (3.5 nmols per mg starch) and sorghum starch (0.9 nmol per mg starch). The starch that is used in the composition of The present invention may in another embodiment be a resistant starch, particularly one of the known resistant starch types 1 to 4.

Um efeito de espessamento sinérgico especialmente bom é também obtido com uma composição de espessante contendo alternan e celulose, como celulose microcristalina, ou celulose derivatizada. Exemplos de celulose derivatizada são, sem limitação, éteres de celulose, acetato de celulose, propionato de celulose, butirato de celulose, nitrato de celulose, xantogenato de celulose, carbamato de celulose e ésteres de celulose.An especially good synergistic thickening effect is also obtained with a thickener composition containing alternan and cellulose, such as microcrystalline cellulose, or derivatized cellulose. Examples of derivatized cellulose are, without limitation, cellulose ethers, cellulose acetate, cellulose propionate, cellulose butyrate, cellulose nitrate, cellulose xantogenate, cellulose carbamate and cellulose esters.

Em uma modalidade, derivados de celulose são éteres de celulose, especialmente alquiléteres e aralquiléteres, que podem, sem limitação, ser selecionados entre carboximetilcelulose, carboximetilcelulose de sódio, carboximetilcelulose de sódio reticulada, carboximetilcelulose (enzimatica-mente) hidrolisada, carboximetil-hidroxietilcelulose, metilcelulose, etilcelulo-se, etilmetilcelulose, propílcelulose, benzilcelulose, hidroximetilceiulose, hi-droxietilcelulose, hidroxipropilcelulose, metil-hidroxietilcelulose, metil-hidroxipropilcelulose, metil-hidroxibutilcelulose, etil-hidroxietilcelulose, hidro-xipropilmetilcelulose, e cianoetilcelulose. Vide também: Whistler u. BeMiller (Hrsg.), Industrial Gums (3.), S. 475ff., San Diego: Academic Press 1993.In one embodiment, cellulose derivatives are cellulose ethers, especially alkylethers and aralkylethers, which may, without limitation, be selected from carboxymethylcellulose, sodium carboxymethylcellulose, cross-linked sodium carboxymethylcellulose, (enzymatically) hydrolyzed carboxymethylhydroxyethylcellulose, methylcellulose ethylcellulose, ethylmethylcellulose, propylcellulose, benzylcellulose, hydroxymethylcellulose, hydroxyethylcellulose, hydroxypropylcellulose, methylhydroxyethylcellulose, methylhydroxypropylcellulose, methylhydroxybutylcellulose, ethylhydroxyethylcellulose, hydroxypropylcellulose, See also: Whistler u. BeMiller (Hrsg.), Industrial Gums (3.), S. 475ff., San Diego: Academic Press 1993.

Um efeito de espessamento sinérgico especialmente bom é adicionalmente obtido com alginatos e carragena.An especially good synergistic thickening effect is additionally obtained with alginates and carrageenan.

Ainda outras modalidades benéficas da invenção são misturas contendo alternan e outro espessante que é selecionado entre amido, amidos modificados, fosfatos de amido, derivados de amido, celulose, celulose derivatizada, alginato, carragena, e a mistura de duas ou mais destas substâncias.Still other beneficial embodiments of the invention are mixtures containing alternan and another thickener which is selected from starch, modified starches, starch phosphates, starch derivatives, cellulose, derivatized cellulose, alginate, carrageenan, and the mixture of two or more of these substances.

Na composição de espessante de acordo com a invenção o al-ternan e o outro espessante estão preferivelmente em uma razão em peso de 10:1 a 1:10, mais preferivelmente de 8:1 a 1:8, ainda mais preferivelmente 5:1-1:5, com especial preferência 2,5:1-1:2,5 e no máximo da preferência 1,5:1-1:1,5. A composição de espessante pode se apresentar em uma grande variedade de formas, por exemplo como grânulos ou pó, e o pó é o mais preferido.In the thickener composition according to the invention al-ternan and the other thickener are preferably in a weight ratio of 10: 1 to 1:10, more preferably from 8: 1 to 1: 8, even more preferably 5: 1. -1: 5, especially preferably 2.5: 1-1: 2.5 and most preferably 1.5: 1-1: 1.5. The thickener composition may be in a wide variety of forms, for example as granules or powders, and the powder is most preferred.

Em outra variante da presente invenção, os componentes anteriormente descritos, alteman e outro espessante, são preparados na forma de um kit. Isto significa que os dois componentes estão no momento não misturados, mas são postos juntos em uma unidade de embalagem, por exemplo, em uma unidade de embalagem com dois recipientes separados, com o alternan contido em um recipiente e o outro espessante no outro recipiente. Por meio do kit, a composição de espessante de acordo com a invenção pode ser preparada como requerido na forma de uma mistura dos componentes e pode então ser usada adicionalmente. Os dois componentes do kit estão preferivelmente na forma de pó . O outro espessante no kit pode ser o mesmo já indicado acima para as composições, embora com especial preferência amido, amido modificado, fosfato de amido, derivados de amido, ou uma mistura de duas ou mais destas substâncias. As proporções em peso dos componentes do kit são preferivelmente selecionados como já descrito acima para as composições de espessantes.In another embodiment of the present invention, the above described components, alteman and another thickener, are prepared as a kit. This means that the two components are currently unmixed, but are put together in a packaging unit, for example, in a packaging unit with two separate containers, with the alternan contained in one container and the other thickener in the other container. By means of the kit, the thickener composition according to the invention may be prepared as required as a mixture of the components and may then be used additionally. The two components of the kit are preferably in powder form. The other thickener in the kit may be the same as already indicated above for the compositions, although most preferably starch, modified starch, starch phosphate, starch derivatives, or a mixture of two or more of these substances. The weight ratios of the kit components are preferably selected as already described above for the thickener compositions.

Em outro aspecto a presente invenção refere-se ao uso da composição de espessante previamente descrita ou do kit para o espessamento de produtos alimentícios previamente descrito, produtos de partida para produto alimentícios ou intermediários de produtos alimentícios.In another aspect the present invention relates to the use of the previously described thickener composition or the foodstuff thickening kit described above, foodstuff starters or foodstuff intermediates.

Uso para o espessamento de produtos alimentícios (dietéticos) é uma modalidade da invenção. Produtos alimentícios podem, sem limitação, ser selecionados entre molhos, caldos de carne, sopas, molhos de salada, molhos de imersão (dips), laticínios, como iogurte, iogurte de beber, creme, leite integral, leite desnatado, leitelho, leite azedo, kefir, soro, musse, gelatina, pudim, pastas, geléia, sorvete, produtos de padaria e massas de pão ou bolo (doughs). A composição de espessante previamente descrita ou o kit previamente descrito pode ser misturado em produtos alimentícios (dietéticos) durante a produção do produto alimentício ou diretamente antes do consumo do produto alimentício. A composição é adicionada a um produto alimentício em um montante com o qual o grau desejado de espessamento é obtido. Montantes usuais são 0,1-10% em peso com base no peso total do produto alimentício, 0,1-5% em peso, 0,1-4% em peso, ou 0,1-3% em peso.Use for thickening (dietary) food products is one embodiment of the invention. Food products can, without limitation, be selected from sauces, broths, soups, salad dressings, dips, dairy products such as yogurt, drinking yogurt, cream, whole milk, skimmed milk, buttermilk, sour milk. , kefir, whey, mousse, gelatin, pudding, pastas, jelly, ice cream, bakery products and doughs. The previously described thickener composition or previously described kit may be mixed into (dietary) food products during food product production or directly prior to consumption of the food product. The composition is added to a food product in an amount with which the desired degree of thickening is obtained. Usual amounts are 0.1-10 wt% based on the total weight of the food product, 0.1-5 wt%, 0.1-4 wt%, or 0.1-3 wt%.

Em ainda outro aspecto, a presente invenção refere-se a um produto alimentício, produto de partida para produto alimentício ou intermediário de produto alimentício que contém a composição de espessante como descrito acima. O conteúdo da composição de espessante é preferivelmente a indicada acima. A composição de espessante pode ser misturada em/com um produto alimentício durante a produção do produto alimentício ou diretamente antes do consumo dos produtos alimentícios.In yet another aspect, the present invention relates to a food product, food product starter or food intermediate which contains the thickener composition as described above. The content of the thickener composition is preferably as indicated above. The thickener composition may be mixed into / with a food product during the production of the food product or directly prior to consumption of the food products.

Produtos alimentícios de acordo com a invenção podem, sem limitação, ser selecionados entre molhos, caldos de carne, sopas, molhos de salada, molho para salgadinhos (dips), laticínios, como iogurte, iogurte de beber, creme, leite integral, leite desnatado, leitelho, leite azedo, kefir, soro, musse, gelatina, pudim, pastas, geléia, sorvete, produtos de padaria e massas de pão ou bolo (doughs).Food products according to the invention may, without limitation, be selected from sauces, broths, soups, salad dressings, dips, dairy products such as yogurt, drinking yogurt, cream, whole milk, skimmed milk , buttermilk, sour milk, kefir, whey, mousse, gelatin, pudding, pastas, jelly, ice cream, bakery products and doughs.

Finalmente a invenção também se refere a um método de aumento de viscosidade de produtos alimentícios, produtos de partida para produto alimentício ou intermediários de produtos alimentícios, em que a composição de espessante como descrita acima é misturada em/com o produto alimentício, produto de partida para produto alimentício ou intermediário de produto alimentício.Finally the invention also relates to a method of increasing the viscosity of foodstuffs, foodstuff products or food intermediates, wherein the thickener composition as described above is mixed in / with the foodstuff product for food product or food product intermediate.

Um efeito de espessamento particularmente bom pode ser obtido se o produto alimentício, produto de partida para produto alimentício ou intermediário de produto alimentício sofre um tratamento térmico após adição da composição de espessante de acordo com a invenção. Tratamento térmico significa aquecer o produto alimentício, produto de partida para produto alimentício ou intermediário de produto alimentício a 80-100°C, eoa-quecimento pode ocorrer durante o processo de produção ou após o processo de produção. A duração do aquecimento é variável e depende do produto alimentício particular. Usualmente, entretanto, o aquecimento ocorre por pelo menos 10 segundos. A presente invenção é descrita abaixo com exemplos, mas estes não devem ser considerados como limitando o escopo da invenção.A particularly good thickening effect can be obtained if the foodstuff, foodstuff starting material or foodstuff intermediate undergoes heat treatment after addition of the thickener composition according to the invention. Heat treatment means heating the food product, food starting material or food intermediate to 80-100 ° C, and heating may occur during the production process or after the production process. The duration of heating is variable and depends on the particular food product. Usually, however, warm-up occurs for at least 10 seconds. The present invention is described below with examples, but these should not be considered as limiting the scope of the invention.

Exemplos 1. Produção de alternan Método 1 O plasmídeo pAI-B-AISu Q29 foi transformado em E. coli dH5a. pAI-B-AISu contém a sequência de codificação de alternan sucrase de comprimento completo oriunda de Leuconostoc mesenteroides cepa NRRL B-1355 (conforme WO 00/47727), sem os 39 aminoácidos do peptídeo sinal Nterminal, ligada a um octapeptídeo strep-tag na extremidade Cterminal. O strep-tag é ligado via um ligante dipeptídico à proteína. Expressão da alternan sucrase está sob o controle de transcrição do tetA promotor/operador e repressor. O tetA promotor é fortemente regulado pelo tet-repressor, que é codificado no mesmo plasmídeo e é expresso constitutivamente pelo promotor de β-lactamase. Desta forma, a expressão da alternan sucrase é fortemente suprimida até ocorrer indução química eficiente por tetraciclina ou anidro-tetraciclina, AHT.Examples 1. Production of alternan Method 1 Plasmid pAI-B-AISu Q29 was transformed into E. coli dH5a. pAI-B-AISu contains the full length alternan sucrase coding sequence from Leuconostoc mesenteroides strain NRRL B-1355 (as per WO 00/47727), without the 39 amino acids of the Nterminal signal peptide, linked to a strep-tag octapeptide in Cterminal end. Strep-tag is linked via a dipeptide linker to the protein. Expression of alternan sucrase is under the transcriptional control of tetA promoter / operator and repressor. The tetA promoter is tightly regulated by the tet-repressor, which is encoded on the same plasmid and is constitutively expressed by the β-lactamase promoter. Thus, the expression of alternan sucrase is strongly suppressed until efficient chemical induction by tetracycline or anhydrous tetracycline, AHT occurs.

As células foram precultivadas em meio mineral (Horn et a/., 1996) com 100 pg/ml de ampicilina e 10% meio LB. Meio mineral, sem LB, foi inoculado com esta precultura. As células foram cultivadas a 37°C e induzidas com anidrotetraciclina (AHT) (0,2 mg/L), e cultivadas adicionalmente a 25°C. As células foram coletadas, ressuspensas em [MOPS a 10 mM pH 7,6; CaCI2 a 2,5 mM e 0,05% Triton X-100] e extraídas usando um homoge-neizador de alta pressão. O lisado de células foi centrifugado por 20 minutos a 4°C e 20000 rev/min. O sobrenadante foi filtrado em um filtro de 0,22 μιτι, sendo obtido um extrato de alternan sucrase.Cells were precultivated in mineral medium (Horn et al., 1996) with 100 pg / ml ampicillin and 10% LB medium. Mineral medium without LB was inoculated with this preculture. Cells were cultured at 37 ° C and induced with anhydrotetracycline (AHT) (0.2 mg / L), and further cultured at 25 ° C. The cells were collected, resuspended in [10 mM MOPS pH 7.6; 2.5 mM CaCl 2 and 0.05% Triton X-100] and extracted using a high pressure homogenizer. The cell lysate was centrifuged for 20 minutes at 4 ° C and 20,000 rev / min. The supernatant was filtered through a 0.22 μιτι filter to obtain an alternan sucrase extract.

Alternan foi produzido em uma biotransformação [sic] de 60-litros, que continha 0,13% ácido acético, NaAc a 100 mM pH 5,3, 20% saca-rose, 1 mM DTT e 1600 ml extrato de alternan sucrase filtrado (aproximadamente 3900 unidades). A mistura de reação foi incubada por 60 horas a 37°C. O alternan obtido foi precipitado com 60 litros de etanol técnico por 40 h a 4°C, e então lavado duas vezes com 60 litros de etanol técnico e uma vez com 60 litros de etanol 60 % absoluto. O produto foi seco por liofiliza-ção. O peso molecular médio-peso do alternan era de aproximadamente 37 000 000 g/mol. Método 2 (para exemplo 3) O plasmídeo pAI-B-AISu Q29 (para descrição vide acima) foi transformado em E. coli dH5a. As células foram pré-cultivadas em meio mineral (Hom et ai, 1996) com 100 pg/ml ampicilina e 10% meio LB. Meio mineral, sem LB, foi inoculado com esta pré-cultura. As células foram cultivadas a 37°C e a uma densidade ótica (OD6oo) de 50 foram induzidas com ani-drotetraciclina (AHT) (0,2 mg/L), e cultivadas por mais 22 h até uma OD6oo de 140 a 25°C. As células foram colhidas por centrifugação, ressuspensas em NaAc a 100 mM, pH 5,3 e rompidas com um homogeneizador de alta pressão (2 ciclos, 120MPa (1200 bar)). O lisado de células foi tratado com DNase/RNase (3 mg/l). O extrato resultante foi centrifugado para obter os constituintes celulares não dissolvidos incluindo os corpos de inclusão. O sobrenadante foi descartado, o pélete foi ressuspenso em ureia 8M, NaAc a 50 mM pH 5,3 e incubado por uma hora em gelo, com sacudimento. Constituintes celulares não dissolvidos foram removidos por centrifugação. Para renaturação, o sobrenadante foi diluído 1:18,75 vezes em 0,5 M ureia, CaCI2 a 2,5 mM, NaAc a 100 mM pH 5,3. Os corpos de inclusão renaturados foram congelados imediatamente em nitrogênio líquido e armazenados a -20°C. A atividade foi determinada em um ensaio de atividade (Lopez-Mungia et ai, 1993). Uma unidade de alternan sucrase corresponde à convi-desão de 1 pmol de frutose por minuto a 37°C.Alternan was produced in a 60-liter biotransformation [sic], which contained 0.13% acetic acid, 100 mM NaAc pH 5.3, 20% sac-rose, 1 mM DTT and 1600 ml alternan sucrase filtered extract ( approximately 3900 units). The reaction mixture was incubated for 60 hours at 37 ° C. The obtained alternan was precipitated with 60 liters of technical ethanol for 40 h at 4 ° C, and then washed twice with 60 liters of technical ethanol and once with 60 liters of 60% absolute ethanol. The product was dried by lyophilization. The average molecular weight-weight of alternan was approximately 37,000,000 g / mol. Method 2 (for example 3) Plasmid pAI-B-AISu Q29 (for description see above) was transformed into E. coli dH5a. Cells were precultured in mineral medium (Hom et al, 1996) with 100 pg / ml ampicillin and 10% LB medium. Mineral medium without LB was inoculated with this preculture. Cells were cultured at 37 ° C and at an optical density (OD60) of 50 were induced with anhydrotetracycline (AHT) (0.2 mg / L), and cultured for an additional 22 h to an OD60 of 140 at 25 ° C. Ç. Cells were harvested by centrifugation, resuspended in 100 mM NaAc, pH 5.3 and disrupted with a high pressure homogenizer (2 cycles, 120MPa (1200 bar)). Cell lysate was treated with DNase / RNase (3 mg / l). The resulting extract was centrifuged to obtain undissolved cell constituents including the inclusion bodies. The supernatant was discarded, the pellet resuspended in 8M urea, 50 mM NaAc pH 5.3 and incubated for one hour on ice with shaking. Undissolved cell constituents were removed by centrifugation. For renaturation, the supernatant was diluted 1: 18.75 times in 0.5 M urea, 2.5 mM CaCl 2, 100 mM NaAc pH 5.3. The renatured inclusion bodies were immediately frozen in liquid nitrogen and stored at -20 ° C. Activity was determined in an activity assay (Lopez-Mungia et al, 1993). One unit of alternan sucrase corresponds to the convention of 1 pmol fructose per minute at 37 ° C.

Alternan foi produzido em uma biotransformação [sic] de 30-litros, que continha NaAc a 75 mM pH 5,3, 20% sacarose e 5000 ml de corpos de inclusão renaturados (aproximadamente 11950 unidades). A mistura de reação foi incubada por 47 horas a 37°C. O alternan obtido foi precipitado com 30 litros de etanol técnico por 40 h a 4°C, e então lavado duas vezes com 30 litros de etanol técnico e uma vez com 60 litros de etanol 60% absoluto. O produto foi seco por liofilização. O peso molecular médio-peso do alternan era de aproximadamente 40 000 000 g/mol.Alternan was produced in a 30-liter biotransformation containing 75 mM NaAc pH 5.3, 20% sucrose and 5000 ml renatured inclusion bodies (approximately 11950 units). The reaction mixture was incubated for 47 hours at 37 ° C. The obtained alternan was precipitated with 30 liters of technical ethanol for 40 h at 4 ° C, and then washed twice with 30 liters of technical ethanol and once with 60 liters of 60% absolute ethanol. The product was dried by lyophilization. The average molecular weight-weight of alternan was approximately 40,000,000 g / mol.

Referência: Horn U, Strittmatter W, Krebber A, Knupfer U, Kujau M, Wende-roth R, Muller K, Matzku S, Pluckthun A, Riesenberg D. High volumetric yields of functionally dimeric miniantibodies in Escherichia coli, using an optimized expression vedor and high-cell-density fermentation under nonlimited growth condition . Appl Microbiol Biotechnol 1996; (46): 524-532. 2. Espessamento de molho Um sistema de molho simples foi selecionado para teste das propriedades de formação de viscosidade de alternan.Reference: Horn U, Strittmatter W, Krebber A, Knupfer U, Kujau M, Wende-roth R, Muller K, Matzku S, Pluckthun A, Riesenberg D. High volumetric yields of functionally dimeric miniantibodies in Escherichia coli, using an optimized expression vedor and high-cell density fermentation under nonlimited growth condition. Appl Microbiol Biotechnol 1996; (46): 524-532. 2. Soaking Thickness A simple soaking system was selected for testing the alternan viscosity forming properties.

Receita básica Caldo (broth) de galinha 89,85% Amido 2,83% Óleo de soja 3,63% Farinha 2,12% Caldo (bouillon) de galinha 1,21 % Xantana 0,25% Sal 0,10% Alternan, produzido como no exemplo 1, e/ou amido (Resista®, um amido de milho ceroso modificado da Tate & Lyle company) foram usados como espessantes.Basic recipe Chicken broth 89.85% Starch 2.83% Soybean oil 3.63% Flour 2.12% Chicken bouillon 1.21% Xanthan 0.25% Salt 0.10% Alternan , produced as in example 1, and / or starch (Resista®, a modified waxy maize starch from Tate & Lyle company) were used as thickeners.

Cozimento (Cooking): definido como aquecimento da receita com alternan a uma temperatura de 85-87°C e manutenção a esta temperatura por 10 minutos. Se não foi realizada a etapa de cozimento com alternan, o alternan foi misturado no molho após os 10 minutos de tempo de retenção.Cooking: Defined as heating of the alternan recipe at a temperature of 85-87 ° C and maintaining at this temperature for 10 minutes. If the alternan cooking step was not performed, the alternan was mixed in the sauce after 10 minutes of retention time.

Medição de viscosidade: medida com um viscosímetro Brookfield RV. A velocidade foi ajustada a 20 rpm constante. Os eixos foram trocados dependendo do espessamento da amostra. O molho foi levado até temperatura ambiente (21 °C). As viscosidades ficaram na faixa de 20 cP a 80000 cP (cP = centipoise). Método: a) Método sem cozimento 1. Medir a quantidade de caldo (broth) de galinha 2. Pré-misturar a farinha com amido, se presente 3. Adicionar a mistura seca ao caldo de galinha frio, batendo vigorosamente 4. Determinar a viscosidade a frio (escala de 1 a 10, onde 1 indica baixa viscosidade e 10 indica viscosidade muito alta) 5. Adicionar caldo (bouillon) de galinha e sal 6. Adicionar o óleo 7. Aquecer a mistura a uma temperatura de 85-88°C 8. Determinar a viscosidade a quente (escala de 1 a 10, onde 1 indica baixa viscosidade e 10 indica viscosidade muito alta) 9. Tampar a panela e manter a temperatura por 10 min 10. Remover a tampa e bater o molho enquanto ele esfria vagarosamente. O molho ainda está quente (65-71 °C) 11. Adicionar o alternan em estágios até ficar completamente misturado 12. Determinar a viscosidade após adicionar o alternan (escala de 1 a 10, onde 1 indica baixa viscosidade e 10 indica viscosidade muito alta) 13. Colocar o molho acabado em um recipiente de conserva e selar b) Método com cozimento 1. Medir a quantidade de caldo de galinha 2. Pré-misturar a farinha com alternan e, se presente, amido, 3. Adicionar a mistura seca ao caldo de galinha frio, batendo vigorosamente 4. Determinar a viscosidade a frio (escala de 1 a 10, onde 1 indica baixa viscosidade e 10 indica viscosidade muito alta) 5. Adicionar o caldo fino de ("bouillon") de galinha e sal 6. Adicionar o óleo 7. Aquecer a mistura a uma temperatura de 85-88°C 8. Determinar a viscosidade a quente (escala de 1 a 10, onde 1 indica baixa viscosidade e 10 indica viscosidade muito alta) 9. Tampar a panela e manter a temperatura por 10 min 10. Remover a tampa e bater o molho enquanto ele esfria vagarosamente. 11. Colocar o molho acabado em um recipiente de conserva e selar Resultados: Amido e alternan apresentam um efeito significativo sobre a viscosidade. Com altas concentrações de amido e alternan um efeito sinérgico pode ser observado. A 0% de amido um aumento de viscosidade é observado quando a concentração de alternan aumenta de 2% a 6,25% (aproximadamente 10000 cP). Com uma concentração de amido de 2,83% há um aumento de 4 a 5 vezes em viscosidade (aproximadamente 45000 cP) quando a concentração de alternan é aumentada de 2% a 6,25%. Estes resultados são mostrados na figura 1.Viscosity measurement: measured with a Brookfield RV viscometer. The speed was set at a constant 20 rpm. The axes were changed depending on the thickness of the sample. The sauce was brought to room temperature (21 ° C). Viscosities ranged from 20 cP to 80,000 cP (cP = centipoise). Method: a) Uncooked method 1. Measure the amount of chicken broth 2. Premix the flour with starch, if present 3. Add the dry mixture to the cold chicken broth, vigorously beating 4. Determine the viscosity cold (scale 1 to 10, where 1 indicates low viscosity and 10 indicates very high viscosity) 5. Add chicken bouillon and salt 6. Add oil 7. Heat the mixture to a temperature of 85-88 ° C 8. Determine the hot viscosity (scale from 1 to 10, where 1 indicates low viscosity and 10 indicates very high viscosity) 9. Cover the pan and keep the temperature for 10 min. 10. Remove the lid and whisk the sauce while it. cools slowly. The sauce is still hot (65-71 ° C) 11. Add alternan in stages until completely mixed 12. Determine viscosity after adding alternan (scale from 1 to 10, where 1 indicates low viscosity and 10 indicates very high viscosity ) 13. Place the finished sauce in a canning container and seal. B) Cooking method 1. Measure the amount of chicken broth 2. Premix the flour with alternan and, if present, starch, 3. Add the dry mixture to cold chicken broth, beating vigorously 4. Determine cold viscosity (scale 1 to 10, where 1 indicates low viscosity and 10 indicates very high viscosity) 5. Add the thin chicken bouillon broth and salt 6. Add oil 7. Heat the mixture to a temperature of 85-88 ° C 8. Determine the hot viscosity (scale from 1 to 10, where 1 indicates low viscosity and 10 indicates very high viscosity) 9. Cover the pan and keep the temperature for 10 min 10. Remove the lid and whisk the sauce while it cools slowly. 11. Put the finished sauce in a canning container and seal. Results: Starch and alternan have a significant effect on viscosity. With high starch and alternan concentrations a synergistic effect can be observed. At 0% starch a viscosity increase is observed when the alternan concentration increases from 2% to 6.25% (approximately 10,000 cP). At a starch concentration of 2.83% there is a 4-5 fold increase in viscosity (approximately 45000 cP) when the alternan concentration is increased from 2% to 6.25%. These results are shown in figure 1.

Cozimento tem um efeito sobre a viscosidade e existe interação entre cozimento e concentração de alternan. Quando a concentração de alternan é 2%, cozimento não aumenta a viscosidade significativamente. Quando, entretanto, a concentração de alternan é 6,25%, a diferença de viscosidade entre cozimento e não cozimento chega a cerca de 20000 cP. Estes resultados estão apresentados na figura 2. 3. Espessamento de pudim Três concentrações diferentes de alternan (0, 2,5 e 5,0%) e três concentrações diferentes de amido (0, 2,25 e 4,5%) foram testadas em pu- dim instantâneo e sinergias entre alteman e amido foram avaliadas.Cooking has an effect on viscosity and there is interaction between cooking and alternan concentration. When alternan concentration is 2%, baking does not increase viscosity significantly. When, however, the alternan concentration is 6.25%, the viscosity difference between cooking and non-cooking reaches about 20,000 cP. These results are shown in figure 2. 3. Pudding thickening Three different alternan concentrations (0, 2.5 and 5.0%) and three different starch concentrations (0, 2.25 and 4.5%) were tested. in instantaneous pressure and synergies between alteman and starch were evaluated.

Alternan foi preparado de acordo com o exemplo 1. O amido nos experimentos A-F era Firm Tex®, um amido modificado derivado de milho ceroso de National Starch company, e nos experimentos G, H e I com concentração de 4,5% era Ultrasperse 2000®, um amido modificado derivado de milho ceroso da National Starch.Alternan was prepared according to example 1. The starch in experiments AF was Firm Tex®, a modified waxy maize derived starch from National Starch company, and in experiments G, H and I with 4.5% concentration was Ultrasperse 2000 ®, a modified starch derived from National Starch waxy maize.

Os resultados estão apresentados na tabela seguinte. Alternan e amido têm um efeito de espessamento. Uma interação sinergística entre amido e alternan foi verificada, sendo especialmente aparente com concentração mais alta de amido. 3. Efeito sinérqico com amidos, derivados de celulose, alqinato e carraqena 3.1 Caracterização de material: Amidos: o Amido de milho normal (Sigma) o Amido de milho ceroso (Sigma) o Amido de arroz (12-14% amilose, 0,5 nmol/mg C-6-Fosfato) Derivados de celulose: o Walocel CMC 50000PA (Na-carboximetilcelulose) de DOW Chemical company o Methocel K4M (hidroxipropil metil celulose) de DOW Chemical company o Methocel A4M (metilcelulose) de DOW Chemical company Alginato: Na-Alginato (Sigma) Carragena: lota-Carragena (Sigma) 3.2 Métodos: Rapid Visco Analyser (RVA): Alternan em combinação com um segundo espessante foi testado em uma solução aquosa (25 g peso total) em um Rapid Visco Analyser (Newport Scientific Pty Ltd., Investment Support Group, Warriewod NSW 2102, Austrália). O perfi do teste consiste no seguinte: ___________________i Final do teste 23:00 As viscosidades medidas foram as seguintes: - viscosidade inicial a frio: viscosidade a 5:20 min - viscosidade a quente: pico de viscosidade a 95°C - viscosidade final: viscosidade no fim Analisador de textura (TA): A resistência de gel de amostras de RVA foi medida após esto-cagem em temperatura ambiente (23°C) durante cerca de 20 horas usando um analisador de textura ΤΑ XT2. Os ajustes no analisador de textura foram os seguintes: Princípio de medição: força na direção de pressão Velocidade de avanço: 2 mm/s Velocidade de teste: 0,5 mm/s Valor de disparo Çtríggei1'): 2,0 g Velocidade de reversão: 0,5 mm/s Distância: 7 mm Foram determinados o pico positivo (F1) e o pico negativo (F2) em gramas.The results are presented in the following table. Alternan and starch have a thickening effect. A synergistic interaction between starch and alternan was verified, being especially apparent with higher starch concentration. 3. Synergistic effect with starches, cellulose derivatives, albinate and carraqena 3.1 Material characterization: Starches: o Normal maize starch (Sigma) o Waxy maize starch (Sigma) o Rice starch (12-14% amylose, 0, 5 nmol / mg C-6-Phosphate) Cellulose derivatives: Walocel CMC 50000PA (Na-carboxymethylcellulose) from DOW Chemical company Methocel K4M (hydroxypropyl methyl cellulose) from DOW Chemical company Methocel A4M (methylcellulose) from DOW Chemical company Alginate : Na-Alginate (Sigma) Carrageenan: lota-Carrageenanus (Sigma) 3.2 Methods: Rapid Visco Analyzer (RVA): Alternan in combination with a second thickener was tested in an aqueous solution (25 g total weight) on a Rapid Visco Analyzer ( Newport Scientific Pty Ltd., Investment Support Group, Warriewod NSW 2102, Australia). The test profile consists of the following: ___________________i End of test 23:00 The measured viscosities were as follows: - initial cold viscosity: viscosity at 5:20 min - hot viscosity: viscosity peak at 95 ° C - final viscosity: end viscosity Texture Analyzer (TA): The gel resistance of RVA samples was measured after storage at room temperature (23 ° C) for about 20 hours using a ΤΑ XT2 texture analyzer. The adjustments to the texture analyzer were as follows: Measurement principle: force in the pressure direction Feed rate: 2 mm / s Test speed: 0.5 mm / s Trip value Çtrigge1 '): 2.0 g reversal: 0.5 mm / s Distance: 7 mm Positive peak (F1) and negative peak (F2) were determined in grams.

Viscosidade de alternan em combinação com amido: Viscosidade de aiteman em combinação com outros espessan- toe· REIVINDICAÇÕESAlternan viscosity in combination with starch: Aiteman's viscosity in combination with other thickeners · CLAIMS

Claims

1. Thickener composition, characterized in that it contains alternan as a thickening agent and at least one other thickener, which is selected from starch, modified starches, starch derivatives, starch phosphates, alginates, carrageenan, derivatized cellulose, and mixtures of two or more of these substances, the alternan and the other thickener being in a weight ratio of 10: 1 to 1:10.

Thickener composition according to claim 1, characterized in that it is in powder form.

Kit, characterized in that it contains a thickening agent composition as defined in claim 1 or 2, wherein in the kit alternan and the other thickening agent are present unmixed in a packaging unit, and in the kit alternan and the other thickening agent are in a weight ratio of 10: 1 to 1:10.

Kit according to claim 3, characterized in that the components are adapted to prepare a thickener composition as defined in claim 1 or 2.

Use of a thickener composition as defined in claim 1 or 2, or a kit as defined in claim 3 or 4, characterized in that it is for thickening food products, raw materials or intermediate materials for the production of food products.

Use according to claim 5, characterized in that the food product is selected from sauces, broths, soups, salad dressings, dipping sauces, dairy products such as yogurt, drinking yogurt, cream, milk. whole grain, skimmed milk, buttermilk, sour milk, kefir, whey, mousse, gelatin, pudding, pastes, jam, ice cream, bakery products and bread or cake pastries.

Food product, raw material or intermediate material for the production of food product, characterized in that it contains the thickener composition as defined in claim 1 or 2.

Food product, raw material or intermediate material for the production of food product according to claim 7, characterized in that it is selected from sauces, broths, soups, salad dressings, dipping sauces, dairy products. such as yogurt, drinking yogurt, cream, whole milk, skim milk, buttermilk, sour milk, kefir, whey, mousse, gelatin, pudding, pastas, jam, ice cream, bakery products, and bread or cake pastries.

Method for increasing the viscosity of foodstuffs, raw materials or intermediate materials for the production of foodstuffs, characterized in that a thickener composition as defined in claim 1 or 2 is added to the foodstuff, raw material or intermediate material for the production of food product.

Method according to claim 9, characterized in that the food product, raw material or intermediate material for the production of food product is subjected to heat treatment.