BRPI0708624A2

BRPI0708624A2 - uso de beta-aminoálcoois para o tratamento de distúrbios inflamatórios e dor

Info

Publication number: BRPI0708624A2
Application number: BRPI0708624-5A
Authority: BR
Inventors: Andrew Douglas Baxter
Original assignee: Sosei R & D Ltd
Priority date: 2006-03-09
Filing date: 2007-03-09
Publication date: 2011-06-07
Also published as: CA2646883A1; US20100016357A1; MX2008011508A; NO20083869L; KR20090021141A; GB0604826D0; IL193943A0; AU2007222209A1; EP1993544A1; WO2007102011A1; CN101426501A

Abstract

USO DE BETA-AMINOALCOOIS PARA O TRATAMENTO DE DISTURBIOS INFLAMATóRIOS E DOR. Compostos que podem ser utilizados para o tratamento ou prevenção de uma condição associada com a proliferação de células T ou que é mediada através de citocinas pró-inflamatórias e que são de fórmula (I): onde pelo menos um de R~ 1~, R ~ 2~ e R~ 3~ não é H e cada um é independentemetne H, alquila, CF~ 3~, CONH~ 2~, CN, halogênio, NH~ 2~, NO~ 2~, NHCHO, NHCOHN~ 2~. NHSO~ 2~alquila, SOMe, SO~ 2~NH~ 2~, Salquila, ou CH~ 2~SO~ 2~alquila; e R~ 4~ é H ou alquila, ou sal dos mesmos.

Description

USO DE BETA-AMINOÁLCOOIS PARA O TRATAMENTO DE DISTÚRBIOSINFLAMATÓRIOS E DOR

Campo da invenção

Esta invenção se refere ao uso de beta-aminoálcoois para o tratamento de distúrbios inflamatóriose dores.

Histórico da Invenção

Eventos inflamatórios imunologicamente induzidossão as causas significativas para muitas doençasinflamatórias crônicas em que a inflamação prolongada causadestruição do tecido e resulta num dano extensivo e emeventual falha do órgão efetivo. A causa dessas doenças édesconhecida, e estas são chamadas de auto-imunes, já queaparentam se originar de sistemas, imunológicos deindivíduos voltados contra eles mesmos. As condiçõesincluem aqueles múltiplos órgãos envolvidos, tais comolúpus eritematoso sistêmico (SLE) e ascleroderma. Outrostipos de doenças auto-imunes podem envolver tecidos ouórgãos específicos tais como o tecido locomotor (artritereumatóide, espondilite anquilosante) , um conjunto deórgãos gastro-intestinais (doença de Crohn e coliteulcerosa), o sistema nervoso central (Alzheimer, esclerosemúltipla, esclerose lateral amiotrófica, doença deParkinson e síndrome de fadiga crônica), células betapancreáticas (diabetes mellitus dependente de insulina), aglândula supra-renal (doença de Addison), o rim (síndromede Goodpasture, nefropatia por IgA, nefrite intersticial),glândulas exócrinas (síndrome de Sjogren e pancreatiteauto-imune) e a pele (psoríase e dermatite atópica).

Adicionalmente, existem doenças inflamatórias crônicas cujaetiologia é mais ou menos conhecida, mas cuja inflamaçãotambém é crônica e contínua. Estas também exibem destruiçãomassiva do tecido/órgão e incluem condições tais comoartrose, doença periodontal, nefropatia diabética, doençapulmonar obstrutiva crônica, arteriosclerose, doença doenxerto contra hospedeiro, doença inflamatória pélvicacrônica, endometriose, hepatite crônica e tubercolese.

Nessas doenças, a destruição do tecido muitas vezesdanifica a função do órgão, resultando em reduçõesprogressivas na qualidade de vida e na falha do órgão.

Essas condições são a principal causa de doenças no mundoem desenvolvimento e são precariamente tratadas porterapias atuais.

Inflamações de estruturas dermatológicas(dermatite) são grupos comuns de condições que incluemqueratose actínica, acne rosácea, acne-vulgaris, dermatitepor contato alérgico, angioedema, dermatite atópica,penfigóide bolhoso, reações a drogas cutâneas, eritemamultiforme, lúpus eritematoso, fotodermatite, psoriase,artrite de psoriase, escleroderma e urticária. Essasdoenças são tratadas usando uma ampla disposição deterapias, das quais muitas têm .,efeitos colateraisextremamente severos. Tratamentos atuais modificadores dadoença (se existir) para condições imunologicamenteinduzidas incluem anticorpos neutralizantes, citotóxicos,corticóides, imunossupressores, anti-histaminicos eantimuscarinicos. Esses tratamentos são freqüentementeassociados com vias inconvenientes de administração eseveros efeitos colaterais, conduzindo a problemas deadaptação. Além disso, certas classes de drogas são apenasefetivas para alguns tipos de doenças inflamatórias, porexemplo, anti-histaminicos para rinite.

Um beta-aminoálcool conhecido é o rimiterol. Osbeta-aminoálcoois são conhecidos por terem atividades anti-hipertensiva, vasodilatadora, simpaticomimética, dilatadorade brónquios ou cardioestimulante por agonismo eantagonismo em adrenoceptores alfa e beta.

Sumário da Invenção

Surpreendentemente, foi descoberto que algunscompostos são inibidores de citocinas e possuempropriedades antiinflamatórias. De acordo com a presenteinvenção, uma condição inflamatória ou de dor, por exemploaquela descrita acima, é tratada pelo uso de um composto defórmula geral (I)

<formula>formula see original document page 4</formula>

onde Ri, R2 e R3 são independentemente H, alquila, CF3,CONH2, CN, halogênio, NH2, NO2, NHCHO, NHCONH2,NHS02alquila, SOMe, SO2NH2, Salquila ou CH2S02alquila, masnão são todos H; e

R4 é H ou alquila;

ou um sal dos mesmos.

Descrição da Invenção

Compostos da fórmula (I) úteis para o uso nainvenção incluem (mas não são limitados a):

(3, 5-dicloro-4-amino-fenil)-piperidin-2-il metanol(3-cloro-fenil)-piperidin-2-il metanol(3,5-dihidróxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(3,4-dihidróxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(2,3-dihidróxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(2,3,4-dihidróxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-amino-fenil)-piperidin-2-il metanol(3,5-dimetilcarbamoiloxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(5,6,7,8-tetrahidro-2-naftil)-piperidin-2-il metanol(2,5-dimetóxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-amino-3-ciano-fenil)-piperidin-2-il metanol(2-cloro-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-hidróxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(3, 4-diacetil-fenil)-piperidin-2-il metanol(3,4-dicloro-fenil)-piperidin-2-il metanol(2,5-dimetóxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-hidróxi-3-metóxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(3-hidróxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-nitro-fenil)-piperidin-2-il metanol(2-hidróxiquinolin-5-il)-piperidin-2-il metanol(4-hidróxi-3-metanosulfonamida-fenil)-piperidin-2-ilmetanol(4-feniImetóxi-3-metanosulfonamida-fenil)-piperidin-2-ilmetanol(3,4-difenilmetóxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-metano-sulfonamida-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-hidróxi-sulfonamida-fenil)-piperidin-2-il metanol(2-cloro-4-hidróxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(2-fIuoro-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-fluoro-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-bromo-fenil) --piperidin-2-il metanol( 4-hidróxi-3-met;ilsulfonil-fenil) -piperidin-2-il metanol(3,5-diterbutiIcarbonilóxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(3, 5-disopropilcarbonilóxi-fenil)-piperidin-2-il metanolfenil-piperidin-2-il metanol(3-cloro-4-amino-5-trifluorometil-fenil)-piperidin-2-ilmetanol(naftaleno-2-il)-piperidin-2-il metanol(3,4,5-trihidróxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-hidróxi-3-hidróximetil-fenil)-piperdin-2-il metanol(4-hidróxi-3-met.óxi-fenil) -piperidin-2-il metanol(2,5-dimetóxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-benzilóxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(3,4-dibenzilóxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-metóxi-fenil)-piperidin-2-il metanol(3-metóxi-fenil)-piperdin-2-il metanol(3-metil-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-metil-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-acetamido-3-cloro-fenil)-piperidin-2-il metanol(4-etóxi-fenil)-piperidin-2-il metanol e(4-nitro-fenil)-piperidin-2-il metanol

É entendido que os compostos para uso na invençãoincluem sais, por exemplo, hidrocloreto, metabólitos e pró-drogas dos mesmos. Os compostos para uso na invenção sãoquirais, e será entendido que esta invenção incluiquaisquer diastereoisômeros e enantiômeros de (I).

Um d.iastereoisômero ou enantiômero escolhido de(I) possui pouca ou nenhuma atividade em adrenoceptores αou β. Essa atividade pode ser determinada pelo uso doensaio in vit.ro apropriado. Particularmente, compostospreferidos incluem eritro-(S)-4-amino-3,5-diclorofenil-(R) -piperidin-2-il-metanol, treo-(S)-4-am.mo-3,5-diclorofenil-(S)-piperidin-2-il-metanol e eritro-(S)-amino-3,5-diclorofenil-2-il metanol.

Os compostos de fórmula (I) de acordo com ainvenção são utilizados para tratar doenças inflamatóriasincluindo, mas não exclusivamente, doenças auto-imunesenvolvendo órgãos múltiplos, tais como o lupus eritematososistêmico (SLE) e a escleroderma, tecidos e órgãosespecíficos tais como o tecido locomotor (artritereumatóide, espondilite anquilosante), o conjunto de órgãosgastro-intestinais (doença de Crohn e colite ulcerosa), osistema nervoso central (Alzheimer, esclerose múltipla,esclerose lateral amiotrófica, doença de Parkinson esíndrome de fadiga crônica), células beta pancreáticas(diabetes mellitus dependente de insulina), a glândulasupra-renal (doença de Addison), o rim (sindrome deGoodpasture, nefropatia por IgA, nefrite intersticial),glândulas exócrinas (sindrome de Sjogren e pancreatiteauto-imune) e a pele (psoriase e dermatite atópica),doenças inflamatórias crônicas, tais como a artrose,doenças periodontais, a nefropatia diabética, doençaspulmonares obstrutivas crônicas, a arteriosclerose, doençasdo enxerto contra hospedeiro, doenças inflamatóriaspélvicas crônicas, a endometriose, a hepatite crônica e atuberculose, IgE (Tipo I) mediada por reações dehipersensibilidade tal como a rinite, a asma, a anafilaxia,a dermatite. Condições de dermatite incluem queratoseactinica, acne rosácea, acne vulgaris, dermatite porcontato alérgico, angioedema, dermatite atópica, penfigóidebolhoso, reações a drogas cutâneas, eritema multiforme,lupus eritematoso, fotodermatite, psoriase, artrite depsoriase, escleroderma e urticária. Condições oftálmicas,tais como retínopatia diabética, degeneração macular,membrana neovascular coroidal, edema macular cistóide,membrana epi-retinal, orifício macular, olho ressecadp,uveíte e conjunt.ivite, também podem ser tratadas.

Esses compostos podem ser utilizados de acordocom a invenção quando ao paciente também são administradosou em combinação com outros agentes terapêuticosselecionados de corticóides (exemplos incluem cortisol,cortisona, hidrocortisona, dihidrocortisona,fludrocortisona, prednisona, prednisolona, deflazacort,flunisolida, beconase, metilprednisolona, triamcinolona,betametasona e dexametasona), de drogas anti-reumáticasmodificadoras da doença (DMARDs) (exemplos incluen,azulfidina, aurothiomalato, bucilamina, clorambucU,ciclofosfamida, leflunomida, metotrexato, mizoribina,penicilamina e sulfasalazina), imunossupressores (exemplosincluem azatioprina, ciclosporina, micofenolato) inibidoresCOX (exemplos incluem aceclofenaco, acemetacina,alcofenaco, alminoprofeno, aloxipirina, amfenaco,aminofenazona, antrafenina, aspirina, azapropazona,benorilato, benoxaprofeno, benzidamina, butibufeno,celecoxiba, clortenoxacina, salicilato de clolina,dexketoprofeno,' diclofenaco, diflunisal, emorfazona,epirizola, etodolaco, feclobuzona, felbinaco, fenclofenaco,flurbiprofeno, glafenina, salicilato de hidróxiletil,ibuprofeno, indometacina, indoprofeno, quetoprofeno,cetorolaco, fenetidina láctica, Ioxoprofenof ácidomefenâmico, metamizola, mofebutazona, mofezolaco,nabumetona, naproxeno, nifenazona, oxametacina, fenacetina,pipebuzona, pranoprofeno, propifenazona, proquazona,rofecoxiba, salicilamida, salsalato, sulindaco, suprofeno,tiaramida, tinoridina, ácido tolfenâmico, zomepiraco)anticorpos neutralizadores (exemplos incluem, etanercepte einfliximabe), antibióticos (exemplos incluem, doxiciclina eminociclina).

Compostos de fórmula (I) exibem uma atividadeanalgésica em modelos animais. A atividade desses compostospode ser determinada pelo uso de ensaio in vivo apropriado.

Essa invenção também se refere ao método detratamento para pacientes (incluindo o homem e/ou animaismamíferos criados para produção de laticínios, de carnes oupara indústrias de pele ou criados para serem animaisdomésticos) sofrendo de dores crônicas, dores agudas oudores neuropáticas; e mais especificamente, um método detratamento envolvendo a administração de analgésicos defórmula (I) como o constituinte ativo.

Conseqüentemente, os compostos de fórmula (I)podem ser utilizados, entre outras coisas, para otratamento de condições de dor, tal como a dor aguda e ador crônica (assim como, mas não limitado a, doresassociadas ao câncer, associadas a cirurgias, artrites,cirurgias dentais, a traumas, doença ou danos ao sistemalocomotor, ou doenças viscerais) e dores de enxaquecas.Adicionalmente as condições dolorosas podem serneuropáticas; exemplos de tais condições são neuralgia pós-herpética, neuropatia diabética, neuropatia induzida pordrogas, neuropatia mediada por HIV, causalgia ou distrofiareflexo simpática, fibromialgia, dor miofascial, neuropatiacompressiva, dor do membro fantasma e neuralgia trigeminal.Condições neuropáticas incluem dores centrais relacionadasa pancadas, esclerose múltipla, lesões da medula espinhal,aracnoidite, neoplasia, siringomielia, doença de Parkinsone epilepsia. Será geralmente vantajoso utilizar oscompostos de fórmula (I) em combinação com outras drogasusadas na terapia para dores. Tais outras drogas podem serum opiáceo ou um não opiáceo, tal como o baclofeno.Especialmente para tratamentos de dores neuropáticas, a co-administração com gabapentina é a mais recomendada. Outroscompostos que podem ser utilizados incluem aacetaminofena, uma dorga antiinflamatória não-esteroidai,um analgésico narcótico, um anestésico local, umantagonista NMDA, um agente neuroléptico, umanticonvulsivo, um antiespasmódico, um antidepressivo ou umrelaxante muscular.

Qualquer via adequada de administração pode serutilizada. Por exemplo, qualquer via de distribuição oral,tópica, parenteral, ocular, retal, vaginal, inalação,bucal, sublingual. e intranasal pode ser adequada. A dose doagente ativo dependerá da natureza e do grau da condição,da idade e da condição do paciente e de outros fatoresconhecidos por aqueles versados na técnica. A dose típica éde 0,1, por exemplo 10 a 100, mg dada uma a três vezes pordia.

Compostos para uso na invenção podem serpreparados por um procedimento sintético de múltiplasetapas, como mostrado no esquema a seguir.

<formula>formula see original document page 10</formula>

mistura de diastereoisomeros

A síntese ocorre por redução do grupo de ácidocarboxílico de um anel aromático substituído usando umreagente adequado, seguida por sua oxidaçâo através doaldeído correspondente, que pode depois reagir com metadede uma halopiridina. A saturação desse anel é facilitadapelo processo de hidrogenação utilizando um catalisadoradequado para obter a molécula alvejada como uma misturaracêmica. Como será aparente para um dos comumentesversados na técnica, grupos funcionais presentes nasmoléculas podem ser protegidos e desprotegidos, senecessário.O isolamento dos pares de diastereoisômerosseparados pode ser executado, seja diretamente via umatécnica de purificação, tal como a trituração, sejaindiretamente, por exemplo, por conversão inicial em uméster intermediário que pode, então, ser purificado portrituração/método similar e depois ser hidrolisadonovamente no composto de origem. Cada par dediastereoisômero pode depois ser adicionalmente separado emseu componente isômero puro através do HPLC QUIRAL.

A síntese a seguir ilustra a preparação doscompostos para uso na invenção.

Ácido 3,5-dicloro-4-dibenzilaminobenzóico (2)

O ácido 4-amino-3,5-diclorobenzóico (1) (25,0 g;0,121 mol) foi dissolvido em uma mistura de THF (250 mL) eDMF (50 mL) sob. uma atmosfera de nitrogênio. O brometo debenzila (62,3 g; 0,364 mol) foi adicionado a 0 0C e agitadocom o hidreto de sódio (60% peso/peso em óleo mineral,19,4 g; 0, 485 mol) que foi adicionado em porções por 10minutos. O gás de hidrogênio foi rapidamente desenvolvido efoi descarregado na atmosfera. Após a adição de NaOH estarcompleta, a suspensão foi aquecida em temperatura ambientee agitada continuamente por 16 horas. Após esse tempo, asuspensão foi resfriada a 0 0C e a água (100 mL) foiadicionada. A mistura foi, então, adicinalmente diluída comuma solução aquosa de HCl IM (205 mL). >A camada aquosa foiextraída em acetato de etila, secada (MgSO4), filtrada eparcialmente concentrada a vácuo. O tolueno (100 mL) foiadicionado e a solução tornou-se azeotrópica para dar umsólido amarelo pálido. A trituração com heptanos e depois afiltração sob sucção deu o ácido 3,5-dicloro-4-dibenζilaminobenζóico (2) (41,3 g; 88%).

δΗ (DMS0-d6; 250MHz) 4,31 (4H, s, CH1Ph), 7, 33-7,25 (IOHfm, ArH), 7,81 (2H, s, ArH), COOH faltante.(3,5-dicloro-4-dibenzilaminofenil)metanol (3)

0 ácido 3,5-dicloro-4-dibenzilaminobenzóico (2)(40, 57 g; 0,105 mol) foi dissolvido ém THF (390 mL) depoisfoi resfriado a 0 0C antes da adição gota a gota docomplexo de tetrahidrofurano borano (1M em THF, 210 mL,0,21 mol) por 20 minutos. Após a adição completa, a soluçãofoi aquecida em temperatura ambiente e agitadacontinuamente .por 5 horas ou até ser completada por TLC. 0MeOH (100 mL) foi adicionado lentamente através de um funilde gotejamento e uma vez cessada a liberação do gás, asolução foi concentrada a vácuo para obter um óleo incolQr.

0 óleo cru poderia ser adicionalmente purificado em silicagel (solvente 4:1 heptanos:acetato de etila) ou ser usadocomo cru na reação a seguir (37,3 g).

δΗ (CDCl3; 250MHz) 4,26 (4H, s, CH1Ph)., 4,59 (2H, s, CHgOH),7,19-7,37 (12H, m, ArH), OH faltante.

3,5-dicloro-4-dibenzilaminobenzaldeido (4)

0 (3,5-dicloro-4-benzilaminofenil) metanol (3)cru preparado; acima (37,3 g; 0,105 mol) foi dissolvido emdiclorometano (400 mL) e aquecido em refluxo sobnitrogênio. O dióxido de manganês (MnO2) (23,9 g;0,275 mol) foi adicionado em uma porção e aquecidocontinuamente por 3 horas. Após esse tempo, mais MnO2(23,9 g; 0,275 mol) foi adicionado e a mistura foi aquecidadurante a noite. A análise por TLC mostrou reaçãoincompleta, então, porções adicionais de MnO2 foramacrescentadas· (3 χ 23,0 g) até a reação ser consideradacompleta. A suspensão foi filtrada através de celita(Buchner) sob sucção e depois o resíduo do filtro foilavado com THF (500 mL) até ficar incolor. A soluçãolaranja filtrada foi concentrada à vácuo, depois, umatrituração éir. heptanos frios proveu 3,5-dicloro-4-dibenzilaminobenzaldeído (4) como um sólido amarelo pálidoem dois lotes (26,4 g; 78%).

δΗ (CDCl3; 250MHz) 4,32 (4H, s, CHiPh), 7,24-7,40 (10H, m,ArH), 7,77 (2H, s, ArH), 9,84 (1H, s, CHO).

(3,5-d±cloro-4-dibenzilaminofenil)piridin-2-il metanol (5)

A 2-iodopiridina (13,53 g; 0,066 mol) foidissolvida em anidro de THF (200 mL) sob nitrogênio a 0 0C.

Uma solução de brometo de etilmagnésio (0,79 M em THF,

100 mL, 0,079 mol) foi adicinada gota a gota através de umfunil de gotejamento por 1 hora, depois, a mistura foiaquecida em temperatura ambiente. O 3,5-dicloro-4-dibenzilaminobenzaldeido (4) (26,4 g, 0,071 mol) foiadicionado em THF (118 mL) gota a gota por 15 minutos comum pequeno desprendimento de calor. Após mais 2 horas, areação foi completada por TLC. A reação foi extinta com aadição gota a gota de HCl 2M (100 mL) e extraída em acetatode etila. A camada orgânica foi separada, lavada com NaOH(aq.) 2M, secada (MgSO4) e filtrada. A solução orgânica foievaporada para prover um óleo amarelo que foi purificadopor cromatografia em sílica de gel (4:1 heptanos:EtOAcdepois 1:1 heptanos:EtOAc) para prover um óleo incolor quefoi identificado como sendo o (3,5-dicloro-4-dibenzilamino-fenil)-piridin-2-il metanol (5) (19,56 g; 66%).

Õh (CDCl3; 250MHz·) 4,23 (4H, s, CHgPh) , 5,66 (1H, s, CHOH) ,7,13 (1H, d, ,77,7; PirH), 7,15-7,34 (13H, m, ArH), 7,71

(1H, dd, Jl, 7; 7,7; PirH), 8,59 (1H, d, J4,8, PirH), OHfaltante.

Eritro-(3,5-dicloro-4-amino-fenil)-piperidina-2-il-metanol(6)

Um hidrogenador Parr 2 L foi carregado com (3,5-dicloro-4-diberiζilamino-feni 1) -piridin-2-il-metanol (5,(19,37 g, 0,043 mol) dissolvido em EtOH (200 mL). A soluçãode HCl em MeOH (1,25 M, 76 mL, 0,095 mol) foi introduzida efinalmente o PtO2 (3,1 g; 0,013 mol) foi adicionado. Asuspensão foi pressurizada com gás de hidrogênio a50 p.s.i. em temperatura ambiente. Uma rápida absorção dehidrogênio foi notada e após uma recarga de gás dehidrogênio, a reação foi completada por 1H-NMR. 0 sistemafoi despressurizado e a suspensão de etanol foi filtradaatravés de celita sob sucção. 0 filtrado foi concentrado avácuo e depois purificado em silica de gel (CH2Cl2 depois95:5:1 CH2Cl2: MeOH: Et3N depois 95:7:1 CH2Cl2: MeOH: Et3N)para prover. (3,5-dicloro-4-amino-fenil)-piperidin-2-ilmetanol como mistura inseparável de diastereoisômeros(10,6 g; 89%) (6). A mistura foi triturada em acetonagelada (25 mL), que causou a cristalização de um sólidobranco. Esse sólido branco foi isolado por filtração eidentificado como eritro-(3,5-dicloro-4-amino-fenil}-piperidin-2-il-metanol puro por 1HNMR (1,65 g; 14%). Asolução filtrada foi concentrada à vácuo e foi visto queesta continha uma mistura de diastereoisômeros (6)(6,73 g).

Eritro δΗ (CDCl3; 250MHz) 1,10-1,47 (4H, m) , 1, 47-1, 68 (2H,m), 2, 00-2, 30 (2H, m), 2, 55-2, 78 (2H, m) , 3,10 (1H, aPP. D,Jll,8), 4,42(2H, s), 4,49 (1H, d, J4, 9; CHOH), 7,19 (2H, s, ArH).

0 par de diastereoisômero eritro foi separado porHPLC QUIRAL preparatório, utilizando uma coluna 260 χ 50 mmCHIRALPAK® AD 20 ym, a fase móvel de 80 n-heptano/20etanol/0,1 dietilamina (v/v/v), uma vazão de 120 mL/min euma detecção de comprimento de onda UV de 300 nm emtemperatura ambiente.

Eritro-(3,5-dicloro-4-amino-fenil) -piperidin-2-il metanol (7)

Esse composto foi obtido como 600 mg do primeiroisômero eluido, isolado como um óleo.Tempo de retenção 6,5 minutosAnálise por HPLC (área % a 230 nm) > 99,5Excesso de enantiômeros (%) > 99,5(Eritro)~(3,5-dicloro-4-amino-fenil)-piperidin-2-il metanol(8)

Esse composto foi obtido como 600 mg do segundoisômero eluido, isolado como um óleo.Tempo de retenção 9,2 minutosAnálise por HPLC (área % a 230 nm) > 99,0Excesso de enantiômeros (%) > 99,0

Ácido treo-2-(3,5-dicloro-4-aminofenil-hidróxiinetil)piperidin-l-carboxílico tert-butil éster

A mistura de diastereoisômeros do (3,5-dicloro-4-aminofenil)piperidin-2-il metanol (6,73 g; 0,024 mol) foidissolvida em diclorometano (44 mL) e depois trietilamina(6,8 mL; 0, 049 mol) foi adicionada. A solução foi esfriadaa 0 0C sob atmosfera de nitrogênio, depois dicarbonato dedi-tert-butila (5,81 g; 0,027 mol) foi adicionado emporções. A mistura resultante foi agitada por 6 horas, atéo TLC mostrar consumo do material inicial. A reação paroucom NaOH aq. IM e extraída em diclorometano (2 χ mL) . Osextratos orgânicos foram secados (MgSO4) , filtrados econcentrados à vácuo em óleo viscoso e incolor obtido, quefoi identificado como sendo uma mistura dediastereoisômeros de ácido 2-[(3,5-dicloro-4-amino-fenil)-hidróxi-metil]-piperidin-l-carboxílico tert-butil éster(9,24 g; 99%). A mistura foi triturada em heptanos gelados(25 mL) e um sólido branco foi cristalizado. O sólidobranco formado foi isolado por filtração e identificadocomo sendo ácido treo-2-[(3,5-dicloro-4-amino-fenil)-hidróxi-metil]-piperidin-l-carboxílico tert-butil ésterpuro por 1H-NMR (2,46 g; 27%).Treo δΗ (CDCl3; 250MHz) 1,30 (9Η, s, C(CH3)3), 1,35-1,80(6Η, m), 2,03 (1Η, d, Jll,5), 2,74 (1Η, app. Τ, J12,3),3, 85-3, 95 (1Η, m) , 4,13-4,25 (1H, m) , 4,41 (2H, s) , 4,79(1H, d, J8,1; CHOH), 7,20 (2H, s, ArH).

Treo-(3,5-dicloro-amino-fenil)-piperidin-2-il-metanol (9)

O ácido treo-2-[(3, 5-dicloro-4-aminofenil)hidróximetil]piperidin-l-carboxilico tert-butiléster (1,50 g; 0,004 mol) foi suspenso em diclorometano(25 mL) a 0 0C sob atmosfera de nitrogênio. O ácidotrifluoroacético (0,68 mL; 0,009 mol) foi adicionado gota agota causando a suspensão a dissolver. Após 3 horas, maisácido trifluoroacético (0,25 mL; 0,0032 mol) foi adicionadoe a solução agitada durante a noite em temperaturaambiente. A reação foi amenizada com NaOH aq. IM e extraídaem diclorometano (2 χ 25 mL). Os extratos orgânicos foramsecados (MgSO4), filtrados e concentrados a vácuo para darum sólido com cor de creme. A trituração com heptanoggelados (10 mL) forneceu um sólido branco, que foiidentificado como sendo treo-(3,5-dicloro-4-amino-fenil)-piperidin-2-il metanol puro por IH-NMR (0,893 g; 79%).Treo δΗ (CDCl3; 250MHz) 1,10-1,80 (7H, m), 1,94 (1H, app. D,J8,3), 2,83 (1H, app. t, Jll, β) , 3,29-3, 47 (1H, m), 3,91(1H, dd, Jl,2; 11, 6), 4, 30-4, 70 (2H, br. S, NH2), 4,83 (1H,d, JlfO; CHOH), 7,19 (2H, s, ArH).

O par de diastereoisômeros treo foi separado porHPLC QUIRAL preparatório, utilizando uma coluna 250 χ 20 mmCHIRALPAK® AS-H 5 um, a fase móvel de 80 C02/20 metanol +1% de dietilamina (v/v), uma vazão de 60 ml/min e umadetecção de comprimento de onda UV de 250 nm a umatemperatura de 30 0C e uma pressão de salda de 150 bar.Treo-(3,5-dicloro-4-amino-fenil)-piperidin-2-il metanol (10)

Esse composto foi obtido como 259 mg do primeiroisômero eluído, isolado como um óleo.

Tempo de retenção 16,8 minutos

Análise por HPLC (área % a 250nm) 97,2Excesso de enantiômeros (%) 99,9

Treo-(3,5-dicloro-4-amino-fenil)-piperidin-2-il metanol (11)

Esse composto foi obtido como 282 mg do segundoisômero eluido, isolado como um óleo.

Tempo de retenção 14,6 minutosAnálise por HPLC (área % a 250nm) 94,7Excesso de enantiômeros (%) 98,8

Os ensaios a seguir ilustram a invenção.

Ensaio Funcional do Agonismo Beta2

Preparações de anéis de traquéia de porquinho-da-india foram suspensas em solução de Kreb contendoindometacina. Após 15 minutos de estabilização, aspreparações for^m repetidas, encolhidas utilizando carbacole simultaneamente tratadas com doses cumulativas crescentesde compostos de. teste (0,1 nM a 0,1 μΜ). 0 agonismo beta2para cada composto de teste foi determinado através de suadose dependenté de inibição da convulsão do músculo datraquéia estimulado por carbacol.

Os compostos (7), (8), (10) e (11) eram fracosagonistas beta2. Os valores IC50 para todos os quatrocompostos foram superiores a 2 μπι, com três dos quatrocompostos tendo: valores superiores a 20 μπι.

Ensaio de LPS em Ratos

Aos ratos Balb C ByJ de sete semanas (24-28 g)foram administrados, seja administração por i.p. (5 mL/kg)ou oral (10 mL/kg), objetos de transporte ou teste. 30minutos depois esses animais foram testados com uma injeçãointraperitonai de 1 mg/kg de LPS. 2 horas depois amostrasde sangue com LPS foram coletadas sob anestesia deisoflurano leve em tubos normais por punção retro-orbital.Amostras puderam coagular em temperatura ambiente e depoisdilatar a 6000 g por 3 minutos a 4 °C. O soro foiarmazenado a -20 0C até o uso. Niveis de soro TNFa e IL-IOforam analisados em duplicata através da técnica ELISA.

Todos os compostos (7), (8), (I0) e (11) tiveramefeito sobre produção induzida por LPS de citocina TNFa eIL13 em ratos. Dois compostos efetivamente inibiram todasas citocinas em todas as doses.

Claims

1. Uso de um composto para o tratamento ouprevenção de uma condição inflamatória ou de dor, em que ocomposto é de fórmula (I)<formula>formula see original document page 19</formula>onde, R1, R2 e R3 são independentemente H, alquila, CF3,CONH2, CN, halogênio, NH2, NO2, NHCHO, NHCONH2,NHS02alquila, SOMe, SO2NH2, Salquila ou CH2S02alquila, malnão são todos H; eR4 é H ou alquila;ou um sal dos mesmos.

2. Uso, de acordo com a reivindicação 1, em quea condição é uma doença degenerativa crônica, tal comoartrite reumatóide, artrose ou osteoporose.

3. Uso, de acordo com a reivindicação 1, em quea condição é uma doença desmielinizante crônica, tal como aesclerose múltipla.

4. Uso, de acordo com a reivindicação 1, em quea condição é unia doença respiratória, tal como asma oudoença pulmonar obstrutiva crônica.

5. Uso, de acordo com a reivindicação 1, em quea condição é uma doença intestinal inflamatória, tal comocolite ulcerosa ou doença de Crohn.

6. Uso, de acordo com a reivindicação 1, em quea condição é uma ;condição dermatológica, tal como psoriase,escleroderma ou c}ermatite atópica.

7. Uso, de acordo com a reivindicação 1, em quea condição é uma doença dental, tal como doença periodontalou gengivite.

8. Uso, de acordo com a reivindicação 1, em quea condição é uma nefropatia diabética, uma nefrite lúpica,uma nefropatia por IgA ou uma glomerulonefrite.

9. Uso, de acordo com a reivindicação 1, em quea condição é o lupus eritematoso sistêmico.

10. Uso, de acordo com a reivindicação 1, em quea condição é a doença do enxerto contra hospedeiro.

11. Uso, de acordo com a reivindicação 1, em quea condição é uma condição de dor.

12. Uso, de acordo com a reivindicação 11, emque a condição de dor é uma dor crônica, tal como dor nascostas crônica, dor nociva, dor de cabeça crônica(incluindo enxaqueca e cefaléias em salvas) ou dor deartrite.

13. Uso, de acordo com a reivindicação 11, emque a condição de dor é uma dor aguda, tal como dor pós-operatória, dor pós-traumática ou dor induzida por doençaaguda.

14. Uso, de acordo com a reivindicação 11, emque a condição de dor é uma dor neuropática.

15. Uso, de acordo com a reivindicação 1, em quea condição é uma condição oftálmica.

16. Uso, de acordo com a reivindicação 15, emque a condição oftálmica é a degeneração macularrelacionada à idade.

17. Uso, de acordo com a reivindicação 15, emque a condição oftálmica é a retinopatia diabética.

18. Uso, de acordo com a reivindicação 15, emque a condição oftálmica é uma membrana neovascularcoroidal, um edema macular cistóide, uma membrana epi-retinal ou um orifício macular.

19. Uso, de acordo com a reivindicação 15, emque a condição oftálmica é o olho ressecado.

20. Uso, de acordo com a reivindicação 15, emque a condição oftálmica é a uveíte.

21. Uso, de acordo com qualquer reivindicaçãoprecedente, em que RI, R2 e R3 são independentemente CF3,CONH2, CN, halogênio ou NH2.

22. Uso, de acordo com qualquer reivindicaçãoprecedente, em que o composto é eritro-(S)-4-amino-3,5-diclorofenil-(R)-piperidin-2-il-metanol, treo-(S)-4-amino--3,5-diclorofenil-(S)-piperidin-2-il-metanol ou eritro-(S) --4-amino-3,5-diclorofenil-(R)-piperidin-2-il-metanol.

23. Uso, de acordo com qualquer reivindicaçãoprecedente, em que também é administrado ao paciente outroagente terapêutico selecionado a partir de corticóide,citotóxicos, antibióticos, imunossupressor, drogasantiinflamatórias não-esteroidais, um analgésico narcótico,um anestésico local, um antogonista NMDAf um neuroléptico,um anti-convulsivo, um anti-espasmódico, um anti-depressivoe um relaxante muscular.

24. Uso, de acordo com a reivindicação 23, emque o composto (I) e o outro agente são providos emcombinação.