BR122023002208A2 - Composições farmacêuticas compreendendo derivados de triazina tendo efeito inibidor de propagação de vírus, inibidores e usos - Google Patents

Abstract

composições farmacêuticas compreendendo derivados de triazina tendo efeito inibidor de propagação de vírus, inibidores e usos. a presente invenção refere-se a um composto que apresenta um efeito inibidor de protease 3cl do coronavírus e seus sais farmaceuticamente aceitáveis e uma composição farmacêutica contendo o mesmo. ainda são fornecidos cristais que são úteis como uma substância farmacológica, e uma composição farmacêutica compreendendo os mesmos. o composto representado pela fórmula (i) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Description

CAMPO TÉCNICO

[001] A presente invenção refere-se a um composto que apresenta atividade inibidora de protease 3CL do coronavírus e uma composição farmacêutica compreendendo um composto que apresenta atividade inibidora de protease 3CL do coronavírus. Além disso, a presente invenção refere-se a um cristal e um cocristal de um composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, apresentando atividade inibidora de protease 3CL e uma composição farmacêutica compreen-dendo o mesmo.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[002] Os coronavírus, que pertencem à ordem Nidovirales, família Coronaviridae e subfamília Coronavirinae, são vírus de RNA de fita simples de senso positivo que possuem um tamanho de genoma de cerca de 30 kilobases e são os maiores entre os vírus de RNA conhecidos. Os coronavírus são classificados em quatro gêneros, a saber, o gênero Alphacoronavirus, Betacoronavirus, Gammacoronavirus e Del-tacoronavirus, e um total de sete tipos de coronavírus, incluindo dois tipos no gênero Alphacoronavirus (HCoV-229E e HCoV-NL63) e cinco tipos no gênero Betacoronavirus (HCoV-HKU1, HCoV-OC43, SARS- CoV, MERS-CoV e SARS-CoV-2), são conhecidos como coronavírus que infectam seres humanos. Entre estes, quatro tipos (HCoV-229E, HCoV-NL63, HCoV-HKU1 e HCoV-OC43) são patógenos do resfriado comum, enquanto os outros três tipos são coronavírus da síndrome respiratória aguda grave (SARS) (SARS-CoV), coronavírus da síndro- me respiratória do Oriente Médio (MERS) (MERS-CoV) e um novo co- ronavírus (SARS-CoV-2), todos os quais provocando pneumonia grave.

[003] As novas infecções por coronavírus (COVID-19) que ocorreram em Wuhan, China, em dezembro de 2019, se espalharam rapidamente para a comunidade internacional, e a pandemia foi anunciada pela OMS em 11 de março de 2020. O número de pessoas infectadas confirmadas em 28 de janeiro, 2022, foi superior a 360 milhões, e o número de óbitos atingiu mais de 5,63 milhões (Documento Não Patente 1). Contaminação por gotículas, contaminação por contato e contaminação por aerossol foram relatadas como principais vias de infecção do SARS-CoV-2, e foi confirmado que o SARS-CoV-2 continua a flutuar no ar juntamente com aerossóis e mantém a infectividade durante cerca de 3 horas (Documento Não Patente 2). O período de incubação é de cerca de 2 a 14 dias, e sintomas semelhantes ao resfriado tais como febre (87,9%), tosse seca (67,7%), mal-estar (38,1%) e catarro (33,4%) são típicos (Documento Não Patente 3). Em casos graves, ocorre a insuficiência respiratória devido à síndrome do desconfortorespiratório agudo, lesão pulmonar aguda, pneumonia intersticial e semelhantes. Além disso, a falência de múltiplos órgãos tais como insuficiência renal e insuficiência hepática, também foi relatada.

[004] No Japão, como resultado do reposicionamento de fárma- cos existentes, o remdesivir, que é um fármaco antiviral, a dexameta- sona, que é um fármaco anti-inflamatório e o baricitinib, que é um fár- maco antirreumático, foram aprovados como agentes terapêuticos contra a COVID-19, e em janeiro de 2022, o tocilizumab, que é um anticorpo anti-receptor de IL-6, recebeu aprovação adicional. Além disso, em julho de 2021, o ronapreve (casirivimab/imdevimab), que é uma terapia de coquetel de anticorpos, foi aprovado como aprovação especial de caso, em setembro de 2021, o sotrovimab foi aprovado como aprovação especial de caso e, em dezembro de 2021, o molnupiravir foi aprovado como aprovação especial de caso. Não foram obtidas evidências suficientes sobre a eficácia e a segurança desses fárma- cos. Nesse sentido, é imprescindível a criação de agentes terapêuticos contra a COVID-19.

[005] Após a infecção das células, os coronavírus sintetizam du-aspoliproteínas. Nestas duas poliproteínas, proteínas estruturais para a produção de novas partículas virais, complexos de replicação que produzem genomas virais e duas proteases são incluídas. As proteases desempenham um papel indispensável para clivar as poliproteínas sintetizadas pelos vírus e fazer com que cada uma das proteínas fun-cione. Entre essas duas proteases, a protease 3CL (protease principal) sustenta a maior parte da clivagem das poliproteínas (Documento Não Patente 4).

[006] Em relação aos agentes terapêuticos da COVID-19 que direcionam as proteases 3CL, foi publicado no ClinicalTrials.gov que os ensaios de Fase 1b para Lufotrelvir (PF-07304814), que é um pró- fármaco de PF-00835231, foram concluídos pela Pfizer Inc (NCT04535167). Além disso, em março de 2021, a Pfizer Inc. anunciou que os ensaios da Fase 1 para o PF-07321332, um agente terapêutico contra infecções pelo novo coronavírus, serão iniciados. As fórmulas estruturais de PF-00835231, Lufotrelvir e PF-07321332 são mostradas abaixo, e esses agentes são diferentes do composto da presente invenção na estrutura química (Documentos Sem Patente 5, 12 e 13 e Documentos Patenteados 6 e 7). PF-00835231: Fórmula Química 1

[007] Além disso, em julho de 2021, foi publicado no ClinicalTri- als.gov que serão iniciados os ensaios de Fase 2/3 para uma combinação de PF-07321332 e ritonavir que direcionam pacientes com COVID-19 com fatores de alto risco (NCT04960202). Além do mais, em novembro de 2021, foi relatado no website da Pfizer que o PAXLOVID (TM) (PF-07321332; ritonavir) reduziu o risco de hospitalização ou morte em 89% em pacientes adultos de alto risco em comparação com placebo (Documento Não Patente 14). Além disso, em dezembro de 2021, o PAXLOVID (TM) foi aprovado para uso emergencial nos Estados Unidos e, em 10 de fevereiro de 2022, o Paxlovid®PACK foi aprovado como aprovação especial de caso no Japão.

[008] Os compostos tendo atividade inibidora de protease 3CL são descritos nos Documentos Sem Patentes 5 a 8; no entanto, os compostos relacionados com a presente invenção nem são descritos nem sugeridos em nenhum dos documentos.

[009] Derivados de triazina e derivados de uracila tendo atividade antagonista do receptor P2X3 e/ou P2X2/3 foram descritos nos Docu-mentos de Patente 1 a 4 e 8 a 12; no entanto, a atividade inibidora de protease 3CL e o efeito antiviral não são nem descritos nem sugeridos em nenhum dos documentos.

[0010] Derivados de triazina tendo efeitos antitumorais foram descritos nos Documentos Sem Patentes 9 a 11; no entanto, a atividade inibidora de protease 3CL do coronavírus e os efeitos antivirais não são descritos em nenhum dos documentos, e os compostos relacionados com a presente invenção não são nem descritos nem sugeridos em nenhum dos documentos.

[0011] Os derivados de triazina tendo efeitos reguladores do receptor de galanina foram descritos no Documento de Patente 5; no entanto, a atividade inibidora de protease 3CL do coronavírus e os efeitos antivirais não são descritos no documento e os compostos relacionados com a presente invenção não são nem descritos nem sugeridos nos documentos.

REFERÊNCIAS DA TÉCNICA ANTERIOR Documento de Patente

[0012] Documento de Patente 1 - Publicação Internacional WO 2012/020749A

[0013] Documento de Patente 2 - Publicação Internacional WO 2013/089212A

[0014] Documento de Patente 3 - Publicação Internacional WO 2010/092966A

[0015] Documento de Patente 4 - Publicação Internacional WO 2014/200078A

[0016] Documento de Patente 5 - Publicação Internacional WO 2012/009258A

[0017] Documento de Patente 6 - Publicação Internacional WO 2021/205298A

[0018] Documento de Patente 7 - Publicação Internacional WO 2021/250648A

[0019] Documento de Patente 8 - Publicação do Pedido de Patente da China CN 113620888A

[0020] Documento de Patente 9 - Publicação do Pedido de Patente da China CN 113666914A

[0021] Documento de Patente 10 - Publicação do Pedido de Patente da China CN 113735838A

[0022] Documento de Patente 11 - Publicação do Pedido de Patente da China CN 113773300A

[0023] Documento de Patente 12 - Publicação de Pedido de Patente da China CN 113801097A

Documento Não Patente

[0024] Documento Não Patente 1 - “COVID-19 Dashboard by the Center for Systems Science and Engineering at Johns Hopkins University”, [online], Johns Hopkins University, [recuperado em 28 de janeiro de 2022], Internet <URL: https://coronavirus.jhu.edu/map.html>.

[0025] Documento Não Patente 2 - The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE (2020), Vol. 382, pp. 1564-1567.

[0026] Documento Não Patente 3 - “Report of the WHO-China Joint Mission on Coronavirus Disease 2019 (COVID-19)”, [online], February 28, 2020, WHO, [recuperado em 08 de fevereiro de 2021], Internet <URL: https://www.who.int/docs/default-source/coronaviruse/who- china-joint-mission-on-covid-19-final-reportpdf>

[0027] Documento Não Patente 4 - Science (2003), Vol. 300, pp. 1763-1767.

[0028] Documento Não Patente 5 - “A comparative analysis of SARS-CoV-2 antivirals characterizes 3CLpro inhibitor PF-00835231 as a potential new treatment for COVID-19”, Journal of Virology, April 26, 2021, [recuperado em 15 de fevereiro de 2022], Internet <URL: https://journals.asm.org/doi/10.1128/JVI.01819-20><doi: 10.1128/JVI.01819-20>.

[0029] Documento Não Patente 6 - Cell Research (2020), Vol. 30, pp. 678-692.

[0030] Documento Não Patente 7 - Science (2020), Vol. 368, pp. 409-412.

[0031] Documento Não Patente 8 - ACS Central Science (2021), Vol. 7, No. 3, pp. 467-475.

[0032] Documento Não Patente 9 - Cancer Treatment Reviews (1984), Vol. 11, Supplement 1, pp. 99-110.

[0033] Documento Não Patente 10 - Contributions to Oncology (1984), Vol. 18, pp. 221-234.

[0034] Documento Não Patente 11 - Arzneimittel-Forschung (1984), Vol. 11, No. 6, pp. 663-668.

[0035] Documento Não Patente 12 - 261st Am Chem Soc (ACS) Natl Meet • 2021-04-05 / 2021-04-16 • Virtual, N/A • Abst 243

[0036] Documento Não Patente 13 - Science (2021), Vol. 374, pp. 1586-1593.

[0037] Documento Não Patente 14 - "Pfizer’s Novel COVID-19 Oral Antiviral Treatment Candidate Reduced Risk Of Hospitalization Or Death By 89% In Interim Analysis Of Phase 2/3 EPIC-HR Study", [online], November 5, 2021, Pfizer Press Release, [recuperado em 15 de fevereiro de 2022], Internet <URL: https://www.pfizer.com/news/press-release/press-release- detail/pfizers-novel-covid-19-oral-antiviral-treatment-candidate>

SUMÁRIO DA INVENÇÃO Problemas a serem Resolvidos pela Invenção

[0038] Um objetivo da presente invenção é fornecer um composto tendo atividade inibidora de protease 3CL do coronavírus. De prefe-rência, a presente invenção fornece um composto tendo uma atividade antiviral, particularmente uma atividade inibidora da replicação do co- ronavírus, e um medicamento compreendendo o composto. Além disso, outro objetivo da presente invenção é fornecer uma forma cristalina e um cocristal de um composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, apresentando atividade inibidora de protease 3CL e um medicamento contendo o mesmo. Meios para Resolver o Problema

[0039] A presente invenção refere-se ao seguinte.

[0040] (1) Um composto representado pela Fórmula (I): Fórmula Química 4 R7 é um átomo de hidrogênio, ou alquila substituída ou não substituída; R1 é heterociclila aromática substituída ou não substituída, heterociclila não aromática substituída ou não substituída, carbamoíla substituída ou não substituída ou amino substituído ou não substituído; R2 é carbociclila aromática substituída ou não substituída (contanto que para-fluorofenila para-clorofenila e para-metilfenila se-jam excluídas), carbociclila não aromática substituída ou não substituída, heterociclila aromática substituída ou não substituída, heterociclila não aromática substituída ou não substituída ou alquila substituída ou não substituída; R3é carbociclila aromática substituída ou não substituída, carbociclila não aromática substituída ou não substituída, heterociclila aromática substituída ou não substituída ou heterociclila não aromática substituída ou não substituída; -X- é -NR6-, -CR6R6'-, -O-, -S- ou uma ligação simples; R6 e R6'são cada um independentemente um átomo de hi-drogênio ou alquila substituída ou não substituída; m é 0, 1 ou 2; R5aé cada um independentemente um átomo de hidrogênio, ou alquila substituída ou não substituída; R5bé cada um independentemente um átomo de hidrogênio, ou alquila substituída ou não substituída; n é 0, 1 ou 2; R4aé cada um independentemente um átomo de hidrogênio, ou alquila substituída ou não substituída; R4bé cada um independentemente um átomo de hidrogênio, ou alquila substituída ou não substituída; contanto que os seguintes compostos sejam excluídos: Fórmula Química 5 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0041] (AA1) Um composto representado pela Fórmula: Fórmula Química 6 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0042] (AA1') Um composto representado pela Fórmula: Fórmula Química 7 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0043] (AA2) Uma composição farmacêutica compreendendo o composto de acordo com os itens acima (AA1) ou (AA1'), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0044] (AA3) Um inibidor de protease 3CL do coronavírus compre endendo o composto de acordo com os itens acima (AA1) ou (AA1'), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0045] (AA4) Um inibidor de replicação do coronavírus compreen dendo o composto de acordo com os itens acima (AA1) ou (AA1'), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0046] (AA5) O inibidor de replicação do coronavírus de acordo com o item acima (AA4), em que o coronavírus é um alfa coronavírus e/ou beta coronavírus.

[0047] (AA6) O inibidor de replicação de coronavírus de acordo com o item acima (AA4), em que o coronavírus é SARS-CoV-2.

[0048] (AA7) Um método para tratar e/ou prevenir uma doença as sociada a proteases 3CL do coronavírus, caracterizado pelo fato de que a administração do composto de acordo com os itens acima (AA1) ou (AA1'), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0049] (AA8) O composto de acordo com os itens acima (AA1) ou (AA1'), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento e/ou prevenção de uma doença associada com as proteases 3CL do coronavírus.

[0050] (1B) Um complexo que compreende um composto repre sentado pela Fórmula (I-B): Fórmula Química 8 e ácido fumárico.

[0051] O complexo de acordo com o item acima (1B), em que o composto representado pela Fórmula (I-B): Fórmula Química 9 e ácido fumárico estão presentes em uma razão molar de 1:1.

[0052] (3B) Um cocristal de ácido fumárico de acordo com o item acima (1B) ou (2B).

[0053] (4B) A Forma I de cocristal de ácido fumárico de acordo com o item acima (3B), que apresenta um padrão de difração de raios X em pó com picos em ângulos de difração (2θ): 9,5 ± 0,2°, 10,9 ± 0,2°, 18,6 ± 0,2°, 23,5 ± 0,2° e 24,6 ± 0,2°.

[0054] (5B) A Forma I de cocristal de ácido fumárico de acordo com o item acima (3B), que apresenta um padrão de difração de raios X em pó com picos em ângulos de difração (2θ): 7,8 ± 0,2°, 9,5 ± 0,2°, 10,1 ± 0,2°, 10,9 ± 0,2°, 13,8 ± 0,2°, 14,7 ± 0,2°, 18,6 ± 0,2°, 22,6 ± 0,2°, 23,5 ± 0,2° e 24,6 ± 0,2°.

[0055] (6B') A Forma I de cocristal de ácido fumárico de acordo com o item acima (3B), que apresenta um espectro Raman tendo picos espectrais Raman em 676,3 cm-1± 2 cm-1, 748,0 cm-1± 2 cm-1, 1029,3 cm-1± 2 cm-1, 1374,4 cm-1± 2 cm-1, 1515,5 cm-1± 2 cm-1, 1665,7 cm-1± 2 cm-1, 1715,7 cm-1± 2 cm-1e 1739,1 cm-1± 2 cm-1.

[0056] (6B) Uma composição farmacêutica que compreende o co- cristal de acordo com qualquer um dos itens acima (3B) a (5B) e (6B').

[0057] (7B) A Forma I de cocristal de ácido fumárico de acordo com o item acima (3B), cujos dados cristalográficos quando medidos em 298 K são caracterizados pelos seguintes dados cristalográficos: Grupo espacial:

[0058] (8B) A Forma I de cocristal de ácido fumárico de acordo com o item acima (3B), cujos dados cristalográficos quando medidos em 298 K estão substancialmente de acordo com os seguintes dados cristalográficos: Grupo espacial: P-1

[0059] (9B) A Forma I de cocristal de ácido fumárico de acordo com o item acima (3B), caracterizada pelo fato de que o espectro (espectros) e/ou uma curva selecionada a partir dos seguintes (a) a (c): (a) um espectro de difração de raios X em pó substancialmente correspondente à Figura 1; (b) um espectro Raman substancialmente correspondente à Figura 3; (c) uma curva de calorimetria diferencial de varredura subs-tancialmente correspondente à Figura 4.

[0060] (10B) Uma composição farmacêutica compreendendo o co- cristal de acordo com qualquer um dos itens acima (7B) a (9B).

Efeito da Invenção

[0061] O composto da presente invenção possui atividade inibido- ra contra proteases 3CL do coronavírus e é útil como agente terapêutico (tratamento) e/ou agente profilático (prevenção) para infecções por coronavírus.

[0062] Além disso, uma composição farmacêutica compreendendo um cocristal de ácido fumárico do Composto (I-0115) é altamente útil como um agente terapêutico com relação às infecções pelo novo co- ronavírus (COVID-19).

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0063] A Fig. 1 mostra um padrão de difração de raios X em pó de uma Forma I do cocristal de ácido fumárico (Forma I) do composto representado pela Fórmula (I-B). O eixo das abcissas representa 2θ (°), e o eixo das ordenadas representa a intensidade (Contagem).

[0064] A Fig. 2 mostra uma estrutura molecular em uma unidade assimétrica da Forma I do cocristal de ácido fumárico (Forma I) do composto representado pela Fórmula (I-B).

[0065] A Fig. 3 mostra o espectro Raman da Forma I do cocristal de ácido fumárico (Forma I) do composto representado pela Fórmula (I-B). O eixo das abcissas representa o deslocamento Raman (cm-1), e o eixo das ordenadas representa a intensidade máxima.

[0066] A Fig. 4 mostra os resultados de uma análise DSC da Forma I do cocristal de ácido fumárico (Forma I) do composto representado pela Fórmula (I-B). O eixo das abcissas representa a temperatura (°C), e o eixo das ordenadas representa o fluxo de calor normalizado (W/g).

[0067] A Fig. 5 mostra um padrão de difração de raios X em pó de uma forma cristalina do sal de potássio Forma I (Forma I) do composto representado pela Fórmula (I-B). O eixo das abcissas representa 2θ (°), e o eixo das ordenadas representa a intensidade (Contagem).

[0068] A Fig. 6 mostra o espectro Raman da forma cristalina do sal de potássio Forma I (Forma I) do composto representado pela Fórmula (I-B). O eixo das abcissas representa o deslocamento Raman (cm-1), e o eixo das ordenadas representa a intensidade máxima.

[0069] A Fig. 7 mostra um padrão de difração de raios X em pó de uma Forma I de cocristal de ácido succínico (Forma I) do composto representado pela Fórmula (I-B). O eixo das abcissas representa 2θ (°), e o eixo das ordenadas representa a intensidade (Contagem).

[0070] A Fig. 8 mostra o espectro Raman da Forma I de cocristal de ácido succínico (Forma I) do composto representado pela Fórmula (I-B). O eixo das abcissas representa o deslocamento Raman (cm-1), e o eixo das ordenadas representa a intensidade máxima.

[0071] A Fig. 9 mostra um padrão de difração de raios X em pó de uma forma cristalina do anidrido Forma I (Forma I) do composto representado pela Fórmula (I-B). O eixo das abcissas representa 2θ (°), e o eixo das ordenadas representa a intensidade (Contagem).

[0072] A Fig. 10 mostra o espectro Raman da forma cristalina do anidrido Forma I (Forma I) do composto representado pela Fórmula (IB). O eixo das abcissas representa o deslocamento Raman (cm-1), e o eixo das ordenadas representa a intensidade máxima.

[0073] A Fig. 11 mostra um padrão de difração de raios X em pó de uma forma cristalina do sal de sódio Forma I (Forma I) do composto representado pela Fórmula (I-B). O eixo das abcissas representa 2θ (°), e o eixo das ordenadas representa a intensidade (Contagem).

[0074] A Fig. 12 mostra o espectro Raman da forma cristalina do sal de sódio Forma I (Forma I) do composto representado pela Fórmula (I-B). O eixo das abcissas representa o deslocamento Raman (cm-1), e o eixo das ordenadas representa a intensidade máxima.

[0075] A Fig. 13 mostra os resultados de uma análise TG/DTA de uma forma cristalina do sal de sódio Forma I (Forma I) do composto representado pela Fórmula (I-B). O eixo das ordenadas representa o fluxo de calor (μV) ou a mudança de peso (%), e o eixo das abcissas representa a temperatura (°C). Cel no diagrama significa grau Celsius (°C).

MODO PARA REALIZAR A INVENÇÃO

[0076] A seguir, o significado de cada termo usado no presente relatório descritivo será descrito. Salvo indicação em contrário, cada termo é usado no mesmo sentido, isoladamente ou em combinação com outros termos.

[0077] O termo “consiste em” significa ter apenas os elementos constituintes.

[0078] O termo “compreende” significa que os elementos não se limitam aos elementos constituintes, e os elementos que não são descritos não são excluídos.

[0079] Em seguida, a presente invenção será descrita enquanto mostra as modalidades exemplares. Ao longo do presente relatório descritivo, deve ficar entendido que, salvo indicação em contrário, uma expressão de uma forma singular também inclui o conceito de uma forma plural da mesma. Portanto, deve ficar entendido que, salvo indicação em contrário, um artigo para uma forma singular (por exemplo, no caso do inglês, “a”, “an”, “the” ou similar) também inclui o conceito de uma forma plural da mesma.

[0080] Além disso, deve ficar entendido que, salvo indicação em contrário, os termos usados no presente relatório descritivo são usados nos significados normalmente usados na técnica descrita acima. Consequentemente, a menos que definido de outra forma, todas as terminologias e termos científicos e técnicos usados no presente relatório descritivo possuem os mesmos significados comumente entendi-dos por aqueles tendo habilidade prática na técnica à qual a presente invenção pertence. Em caso de contradição, é dada prioridade ao presente relatório descritivo (incluindo as definições).

[0081] "Halogênio" inclui um átomo de flúor, um átomo de cloro, um átomo de bromo e um átomo de iodo. Particularmente, um átomo de flúor e um átomo de cloro são preferíveis.

[0082] "Alquila" inclui grupos de hidrocarbonetos lineares ou ramificados, cada um tendo de 1 a 15 átomos de carbono, de preferência de 1 a 10 átomos de carbono, mais preferivelmente de 1 a 6 átomos de carbono e ainda mais preferivelmente de 1 a 4 átomos de carbono. Exemplos incluem metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, sec-butila, terc-butila, n-pentila, isopentila, neopentila, n-hexila, isoexi- la, n-heptila, isoeptila, n-octila, isooctila, n-nonila e n-decila.

[0083] As modalidades preferidas de "alquila" incluem metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, sec-butila, terc-butil e n-pentila. As modalidades mais preferidas incluem metila, etila, n-propila, isopro- pila e terc-butila.

[0084] "Carbociclila aromática"significa um grupo de hidrocarbo- neto aromático cíclico tendo um único anel ou dois ou mais anéis. Exemplos incluem fenila, naftila, antrila e fenantrila. Exemplos de car- bociclila aromática de 6 membros incluem fenila.

[0085] "Heterociclila aromática"significa uma ciclila aromática tendo um único anel ou dois ou mais anéis, que possui um ou mais hete- roátomos idênticos ou diferentes opcionalmente selecionados de O, S e N no(s) anel(is).

[0086] Uma heterociclila aromática tendo dois ou mais anéis também inclui uma heterociclila aromática tendo um único anel ou dois ou mais anéis, ao qual um anel na "carbociclila aromática" é fundido e a ligação de ligante pode ser transportada por qualquer um dos anéis.

[0087] A heterociclila aromática tendo um único anel é preferivelmente um anel de 5 a 8 membros, e mais preferivelmente um anel de 5 membros ou 6 membros. Exemplos de heterociclila aromática de 5 membros incluem pirrolila, imidazolila, pirazolila, triazolila, tetrazolila, furila, tienila, isoxazolila, oxazolila, oxadiazolila, isotiazolila, tiazolila e tiadiazolila.

[0088] A heterociclila aromática tendo dois anéis é de preferência um anel de 8 a 10 membros, e mais preferivelmente um anel de 9 membros ou 10 membros. Exemplos incluem indolila, isoindolila, in- dazolila, indolizinila, quinolinila, isoquinolinila, cinolinila, ftalazinila, qui- nazolinila, naftiridinila, quinoxalinila, purinila, pteridinila, benzimidazoli- la, benzisoxazolila, benzoxazolila, benzoxadiazolila, benzisotiazolila, benzotiazolila, benzotiadiazolila, benzofurila, isobenzofurila, benzotie- nila, benzotriazolila, imidazopiridila, triazolopiridila, imidazotiazolila, pi- razinopiridazinila, oxazolopiridila e tiazolopiridila. Exemplos de hetero- ciclila aromática de 9 membros incluem indolila, isoindolila, indazolila, indolizinila, purinila, benzimidazolila, benzisoxazolila, benzoxazolila, benzoxadiazolila, benzisotiazolila, benzotiazolila, benzotiadiazolila, benzotriazolila, benzofuranila, imidazopiridila, triazolopiridila, oxa- zolopiridila e tiazolopiridila.

[0089] Exemplos dos substituintes da "heterociclila aromática substituída ou não substituída"em R1incluem: halogênio; ciano; hidróxi; alquila substituída (Exemplos dos substituintes incluem ha- logênio, hidróxi, carbamoíla, carbociclila aromática, carbociclila não aromática); alquila não substituída; alquilóxi não substituído; alquiloxicarbonila não substituída; carbociclila aromática não substituída. Pode ser substituída por um ou mais grupos selecionados destes.

[0090] Exemplos dos substituintes da "carbociclila aromática substituída ou não substituída"em R2incluem: halogênio; ciano; alquila substituída (Exemplos dos substituintes incluem ha- logênio); alquila não substituída; alquilóxi substituído (Exemplos dos substituintes incluem halogênio, carbociclila aromática); alquilóxi não substituído. Pode ser substituído por um ou mais grupos selecionados destes.

[0091] Exemplos dos substituintes da "heterociclila aromática substituída ou não substituída"em R3incluem: halogênio; hidróxi; alquila substituída (os exemplos dos substituintes incluem halogênio, hidróxi, alquilóxi, haloalquilóxi, alquilamino, alquilcarbonila- mino, alquilcarbamoíla, alquilsulfonila, carbociclila não aromática, hete- rociclila não aromática); alquila não substituída. Pode ser substituída por um ou mais grupos selecionados destes.

[0092] Os compostos representados pela Fórmula (I) não se limitam a isômeros específicos, mas incluem todos os isômeros possíveis (por exemplo, isômero ceto-enol, isômeros de imina-enamina, diaste- reoisômeros, isômeros ópticos, isômeros rotacionais, etc.), racematos ou suas misturas. Por exemplo, o composto na Fórmula (I), em que Y é N e X é NH inclui os seguintes tautômeros.

Fórmula Química 10

[0093] Por exemplo, o Composto (I-0115) inclui os seguintes tautômeros.

Fórmula Química 11

[0094] Um ou mais átomos de hidrogênio, carbono e/ou outro(s) dos compostos representados pela Fórmula (I) podem ser substituídos por isótopos de hidrogênio, carbono e/ou outro(s) átomo(s), respectivamente. Exemplos de tais isótopos incluem hidrogênio, carbono, nitrogênio, oxigênio, fósforo, enxofre, flúor, iodo e cloro, como nos casos de 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F, 123I e 36Cl, respectivamente. Os compostos representados pela Fórmula (I) também incluem compostos substituídos com tais isótopos. Os compostos substituídos com os isótopos também são úteis como produtos farmacêuticos e incluem todas as formas radiomarcadas dos compostos representados pela Fórmula (I). Além disso, um "método de radiomarca- ção"para produzir as "formas radiomarcadas"também está incluído na presente invenção e as "formas radiomarcadas"são úteis como ferramentas para estudos de farmacocinética metabólica, estudos sobre ensaio de ligação e/ou diagnósticos.

[0095] Além disso, a forma cristalina da presente invenção também pode ser uma forma deuterada. A forma cristalina da presente invenção também pode ser marcada com radioisótopos (por exemplo, 3H, 14C, 35S e 125I).

[0096] As formas radiomarcadas dos compostos representados pela Fórmula (I) podem ser preparadas por métodos bem conhecidos na técnica pertinente. Por exemplo, um composto marcado com trítio representado pela Fórmula (I) pode ser preparado pela introdução de trítio em um composto específico representado pela Fórmula (I), através de uma reação de desalogenação catalítica usando trítio. Este método inclui fazer com que os precursores obtidos através da substituição apropriada dos compostos representados pela Fórmula (I) por ha- logênio, reajam com o trítio gasoso na presença de um catalisador apropriado, por exemplo, Pd/C e na presença ou ausência de uma base. Em relação a outros métodos apropriados para a preparação de compostos marcados com trítio, “Isotopes in the Physical and Biome-dical Sciences, Vol. 1, Labeled Compounds (Part A), Chapter 6 (1987)” podem ser consultados. Um composto marcado com 14C pode ser preparado usando uma matéria-prima tendo carbono 14C.

[0097] Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos representados pela Fórmula (I) incluem sais de compostos representados pela Fórmula (I) com metais alcalinos (por exemplo, lítio, sódio e potássio), metais alcalinos terrosos (por exemplo, cálcio e bário),magnésio, metais de transição (por exemplo, zinco e ferro), amô- nia, bases orgânicas (por exemplo, trimetilamina, trietilamina, dicicloe- xilamina, etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, meglumina, eti- lenodiamina, piridina, picolina e quinolina) e aminoácidos, ou sais com ácidos inorgânicos (por exemplo, ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido carbônico, ácido bromídrico, ácido fosfórico e ácido iodí- drico) e ácidos orgânicos (por exemplo, ácido fórmico, ácido acético, ácido propiônico, ácido trifluoroacético, ácido cítrico, ácido lático, ácido tartárico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido mandélico, ácido glutárico, ácido málico, ácido benzóico, ácido ftálico, ácido ascórbico, ácido benzenossulfônico, ácido p- toluenossulfônico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico e ácido trifluoroacético). Estes sais podem ser formados de acordo com métodos que são realizados convencionalmente.

[0098] Os compostos representados pela Fórmula (I) da presente invenção ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem formar solvatos (por exemplo, hidratos), cocristais e/ou polimorfos cristalinos, e a presente invenção também inclui esses vários solvatos, cocristais e polimorfos cristalinos. Os "solvatos" podem ter os compostos representados pela Fórmula (I) coordenados com qualquer número de mo-léculas de solvente (por exemplo, moléculas de água). Além disso, polimorfos cristalinos podem ser formados pela recristalização dos compostos representados pela Fórmula (I) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0099] "Cristal", como usado no presente relatório descritivo, significa um sólido no qual os átomos, íons, moléculas e semelhantes constituintesestão dispostos tridimensionalmente com regularidade e se distingue de um sólido amorfo que não possui uma tal estrutura interna regular. O cristal da presente invenção pode ser um cristal simples, um cristal duplo, um policristal ou semelhante.

[00100] Além disso, o "cristal" pode incluir "polimorfos cristalinos" que possuem a mesma composição, mas arranjos diferentes no cristal, e cristais incluindo esses polimorfos cristalinos são referidos como "formas cristalinas".

[00101] Além disso, os compostos representados pela Fórmula (I) podem ser convertidos em seus sais farmaceuticamente aceitáveis ou em solvatos farmaceuticamente aceitáveis desses compostos e sais. O cristal da presente invenção pode ser qualquer um destes sais, hi- dratos, solvatos e polimorfos cristalinos, e mesmo misturas de dois ou mais destinam-se a serem incluídas no escopo da invenção.

[00102] A forma cristalina e a cristalinidade podem ser medidas por inúmeras tecnologias, incluindo, por exemplo, medição de difração de raios X em pó, espectroscopia Raman, espectrometria de absorção no infravermelho, medição de absorção e dessorção de água, calorimetria diferencial de varredura e características de dissolução.

[00103] "Cocristal" como usado no presente relatório descritivo significa que, por exemplo, um composto representado pela Fórmula (I-B) e uma contramolécula estão regularmente dispostos na mesma rede cristalina e podem incluir qualquer número de contramoléculas. Além disso, o cocristal implica que uma interação intermolecular entre um composto e uma contramolécula envolve interação química não covalente e não iônica, tal como ligação de hidrogênio e força de van der Waals. Um cocristal é diferenciado de um sal do ponto de vista de que o composto é essencialmente não carregado ou neutro. O cocristal se distingue do hidrato ou solvato a partir do ponto de vista de que a con- tramolécula não é água nem solvente.

[00104] Um complexo compreendendo o composto representado pela Fórmula (I-B) da presente invenção inclui, em um sentido amplo, um sal, um cocristal e um composto clatrato, ou um solvato do mesmo.

[00105] O "solvato" como usado no presente relatório descritivo significa que, por exemplo, em relação aos compostos representados pela Fórmula (I) e Fórmula (I-B), os compostos e qualquer número de moléculas de solvente são dispostos com regularidade.

[00106] Exemplos das moléculas de solvente incluem acetonitrila, clorobenzeno, clorofórmio, ciclo-hexano, 1,2-dicloroeteno, diclorome- tano, 1,2-dimetoxietano, N,N-dimetilacetamida, N,N-dimetilformamida, 1,4-dioxano, 2-etoxietanol, etileno glicol, formamida, hexano, metanol, 2-metoxietanol, metil butil cetona, metilcicloexano, N-metilpirrolidona, nitrometano, piridina, sulfolano, tetralina, tolueno, 1,1,2-tricloroeteno, xileno, ácido acético, anisol, 1-butanol, 2-butanol, acetato de n-butila, éter t-butil metílico, cumeno, dimetilsulfóxido, acetato de etila, éter die- tílico, formiato de etila, ácido fórmico, heptano, acetato de isobutila, acetato de isopropila, acetato de metila, 3-metil-1-butanol, metil etil ce- tona, metil isobutil cetona, 2-metil-1-propanol, pentano, 1-pentanol, 1- propanol, 2-propanol, acetato de propila, tetra-hidrofurano, água (isto é, hidrato), etanol, acetona, 1,1-dietoxipropano, 1,1-dimetoximetano, 2,2-dimetoxipropano, isooctano, éter isopropílico, metil isopropil ceto- na, metiltetra-hidrofurano, éter de petróleo, ácido tricloroacético e ácidotrifluoroacético; de preferência ácido acético, anisol, 1-butanol, 2- butanol, acetato de n-butila, éter t-butil metílico, cumeno, dimetilsulfó- xido, acetato de etila, éter dietílico, formiato de etila, ácido fórmico, heptano, acetato de isobutila, acetato de isopropila, acetato de metila, 3-metil-1-butanol, metil etil cetona, metil isobutil cetona, 2-metil-1- propanol, pentano, 1-pentanol, 1-propanol, 2-propanol, acetato de pro- pila, tetra-hidrofurano, água (isto é, hidrato), etanol, acetona, 1,1- dietoxipropano, 1,1-dimetoximetano, 2,2-dimetoxipropano, isooctano, éter isopropílico, metil isopropil cetona, metiltetra-hidrofurano, éter de petróleo, ácido tricloroacético e ácido trifluoroacético; e mais preferivelmenteágua (isto é, hidrato), etanol, acetona, 1,1-dietoxipropano, 1,1-dimetoximetano, 2,2-dimetoxipropano, isooctano, éter isopropílico, metil isopropil cetona, metiltetra-hidrofurano, éter de petróleo, ácido tricloroacético, e ácido trifluoroacético.

[00107] Além disso, os compostos representados pela Fórmula (I), ou sais, cocristais e complexos farmaceuticamente aceitáveis dos compostos absorvem umidade ao serem deixados em repouso na atmosfera e podem ter água de adsorção ligada a eles ou podem formar hidratos.

[00108] Os compostos representados pela Fórmula (I) da presente invenção ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem formar pró-fármacos, e a presente invenção também inclui esses vários pró- fármacos. Um pró-fármaco é um derivado de um composto da presente invenção tendo um grupo que pode ser degradado química ou me- tabolicamente, e é um composto que se torna um composto farmaceu- ticamente ativo da presente invenção in vivo como resultado de solvó- lise ou sob condições fisiológicas. Os pró-fármacos incluem compostos que são submetidos à oxidação enzimática, redução, hidrólise e semelhantes sob condições fisiológicas no corpo vivo e são convertidos nos compostos representados pela Fórmula (I); compostos que são hidroli- sados por ácido gástrico ou semelhantes e são convertidos nos compostos representados pela Fórmula (I); e similares. Os métodos para selecionar e produzir um derivado de pró-fármaco apropriado são descritos, por exemplo, em “Design of Prodrugs, Elsevier, Amsterdam, 1985”. Um pró-fármaco pode ter atividade per se.

Difração de raios X em pó (XRPD)

[00109] A difração de raios X em pó (XRPD) é um dos métodos de análise mais sensíveis para medir a forma cristalina e a cristalinidade de um sólido. Quando os raios X são irradiados em um cristal, os raios são refletidos nos planos da rede cristalina, interferem uns com os outros e mostram linhas de difração bem ordenadas correspondentes ao período da estrutura. Por outro lado, em um sólido amorfo, um fenômeno de difração não ocorre porque um sólido amorfo geralmente não possui um período repetitivo bem ordenado na estrutura, e um padrão XRPD amplo não caracterizado (também chamado de padrão halo) é apresentado.

[00110] As formas cristalinas do composto representado pela Fórmula (I-B) são discerníveis por padrões de difração de raios X em pó e picos de difração característicos. As formas cristalinas do composto representado pela Fórmula (I-B) podem ser distintas de outras formas cristalinas pela presença de picos de difração característicos.

[00111] Os picos de difração característicos usados no presente relatório descritivo são picos selecionados a partir de um padrão de difração observado. Os picos de difração característicos são preferivelmente selecionados ao redor de 10 picos, mais preferivelmente ao redor de 5 picos e ainda mais preferivelmente ao redor de 3 picos, em um padrão de difração.

[00112] Quando se distingue uma pluralidade de cristais, um pico que é identificado no cristal relevante e não é identificado em outros cristais torna-se um pico característico preferível para caracterizar o cristal, em vez da intensidade de um pico. Com tais picos característicos, mesmo um ou dois picos podem caracterizar o cristal. Quando os gráficos obtidos pela medição são comparados e esses picos característicos coincidem, pode-se dizer que os padrões de difração de raios X em pó coincidem substancialmente.

[00113] Geralmente, uma vez que o ângulo de difração (2θ) na di- fração de raios X em pó pode provocar um erro dentro da faixa de ±0,2°, deve-se entender que um valor do ângulo de difração da difra- ção de raios X em pó também inclui valores numéricos dentro da faixa de cerca de ±0,2°. Portanto, não apenas cristais nos quais os ângulos de difração dos picos na difração de raios X em pó coincidem perfeitamente, mas também os cristais nos quais os ângulos de difração dos picos coincidem com um erro de cerca de ± 0,2°, estão incluídos na presente invenção.

[00114] Sabe-se que de uma forma geral, a intensidade de um pico indicado nas seguintes tabelas e desenhos pode flutuar devido a muitos fatores, por exemplo, o efeito da orientação seletiva de cristais em relação a um feixe de raios X, a influência de partículas grossas, a pureza da substância a ser analisada ou a cristalinidade de uma amostra. Além disso, a posição do pico também pode ser alterada com base na flutuação da altura da amostra. Além disso, quando a posição do pico é medida usando diferentes comprimentos de onda, diferentes deslocamentos podem ser obtidos de acordo com a equação de Bragg (nA=2dsinθ); no entanto, outros padrões XRPD que podem ser obtidos usando esses outros comprimentos de onda também estão incluídos no escopo da presente invenção.

Análise da estrutura de cristal simples

[00115] Em um dos métodos de caracterização de um cristal, podem-se obter parâmetros cristalográficos para o cristal relevante, assim como as coordenadas atômicas (valores que indicam a relação espacial posicional de cada átomo) e um modelo estrutural tridimensional. Ver “Guidance on X-ray Structural Analysis”, written by Toshio Sakurai, published by Shokabo Co., Ltd. (1983); X-Ray Structure De-termination: A Practical Guide, written by Stout & Jensen, Macmillan Co, New York (1968); e seus semelhantes. Quando as estruturas cristalinas de um complexo, um sal, um isômero óptico, um tautômero e um isômero geométrico tal como a presente invenção são identificadas, a análise da estrutura de cristal simples é útil.

Espectroscopia Raman

[00116] A espectroscopia Raman mostra as características da oscilação de um sistema molecular ou compósito. Sua origem está na colisão inelástica entre moléculas e fótons, que são partículas de luz incluindo os raios luminosos. A colisão entre moléculas e fótons resulta na troca de energia, o que resulta em uma mudança na energia e, portanto, o comprimento de onda dos fótons muda. Isto é, visto que o espectro Raman é uma linha espectral de comprimentos de onda muito estreitos, que é emitido quando fótons incidem sobre uma molécula de interesse, lasers e similares são usados como fontes de luz. O comprimento de onda de cada linha Raman é indicado pelo deslocamento do número de onda da luz incidente, e esta é a diferença entre a linha Raman e o recíproco do comprimento de onda da luz incidente. A es- pectroscopia Raman é para medir o estado de oscilação das moléculas, e isso é determinado pela estrutura molecular das mesmas.

[00117] Geralmente, uma vez que os picos espectrais Raman (cm-1) podem provocar erros dentro da faixa de ± 2 cm-1, deve-se entender que os valores dos picos espectrais Raman descritos acima também incluem valores numéricos dentro da faixa de cerca de ± 2 cm-1. Portanto,não apenas os cristais cujos picos espectrais Raman nos espectros Raman coincidem perfeitamente, mas também os cristais cujos picos espectrais Raman coincidem com erros de cerca de ± 2 cm-1estão incluídos na presente invenção.

Calorimetria diferencial de varredura (DSC)

[00118] A DSC é um dos métodos de medição importantes para análise térmica e é um método de medição das propriedades térmicas de uma substância como um agregado de átomos e moléculas.

[00119] Uma curva calorimétrica diferencial de varredura é obtida medindo a mudança relacionada à temperatura ou relacionada ao tempo no valor calorífico de um ingrediente farmaceuticamente ativo por DSC e representado graficamente os dados obtidos em relação à temperatura ou ao tempo. A partir da curva calorimétrica diferencial de varredura, podem ser obtidas informações sobre a temperatura inicial no momento da fusão do ingrediente farmaceuticamente ativo, o valor máximo da curva de pico endotérmica associada à fusão e a entalpia.

[00120] Com relação à DSC, sabe-se que a temperatura a ser observada pode depender da taxa de alteração de temperatura, assim como da técnica de preparo da amostra e do mecanismo particular usado. Portanto, o “ponto de fusão” em DSC refere-se à temperatura inicial que provavelmente não será afetada pela técnica de preparação da amostra. A faixa de erro para a temperatura inicial obtida a partir da curva de calorimetria diferencial de varredura é de aproximadamente ± 2 oC. Para o reconhecimento da identidade dos cristais, não apenas o ponto de fusão, mas também o padrão geral, são importantes, podendo haver alguma variação dependendo das condições de medição e do equipamento de medição.

Análise térmica diferencial simultânea e análise termogravimétrica (TG/DTA)

[00121] TG/DTA é um dos métodos de medição importantes para análise térmica e é um método para medir o peso e as propriedades térmicas de uma substância como um agregado de átomos e moléculas.

[00122] TG/DTA é um método para medir as mudanças relacionadas à temperatura ou ao tempo no peso e valor calorífico de um ingrediente farmaceuticamente ativo, e uma curva TG (termogravimétrica) e DTA (térmica diferencial) é obtida representando graficamente os dados obtidos em relação a temperatura ou tempo. A partir da curva TG/DTA, podem ser obtidas informações sobre as variações de peso e poder calorífico em relação à degradação, desidratação, oxidação, redução, sublimação e evaporação de um ingrediente farmaceuticamen- te ativo.

[00123] Com relação à TG/DTA, sabe-se que a temperatura a ser observada e a mudança de peso podem depender da taxa de mudança de temperatura, assim como da técnica de preparação da amostra e do mecanismo particular usado. Portanto, o “ponto de fusão” em TG/DTA refere-se à temperatura inicial que provavelmente não será afetada pela técnica de preparação da amostra. Para o reconhecimento da identidade dos cristais, não apenas o ponto de fusão, mas também o padrão geral, são importantes, podendo haver alguma variação dependendo das condições de medição e do equipamento de medição.

[00124] Uma vez que o composto de acordo com a presente invenção possui atividade inibidora de protease 3CL do coronavírus, o compostoé útil como agente terapêutico e/ou profilático para uma doença associada às proteases 3CL do coronavírus. Quando o termo "agente terapêutico e/ou agente profilático" é usado na presente invenção, isso também inclui um agente de melhora dos sintomas. A doença associadaàs proteases 3CL do coronavírus pode ser infecções virais e, de preferência, infecções por coronavírus.

[00125] De acordo com um aspecto, o coronavírus pode ser um co- ronavírus que infecta seres humanos. O coronavírus que infecta seres humanos pode ser HCoV-229E, HCoV-NL63, HCoV-HKU1, HCoV- OC43, SARS-CoV, MERS-CoV e/ou SARS-CoV-2.

[00126] De acordo com um aspecto, o coronavírus pode ser alfaco- ronavírus e/ou betacoronavírus e, mais preferivelmente, betacoronaví- rus.

[00127] De acordo com um aspecto, o alfacoronavírus pode ser HCoV-229E e HCoV-NL63. O alfacoronavírus pode ser particularmen- te preferível HCoV-229E.

[00128] De acordo com um aspecto, o betacoronavírus pode ser HCoV-HKU1, HCoV-OC43, SARS-CoV, MERS-CoV e/ou SARS-CoV- 2. O betacoronavírus pode ser HCoV-OC43 ou SARS-CoV-2, e particularmentepreferível SARS-CoV-2.

[00129] De acordo com um aspecto, o betacoronavírus pode ser a linhagem A de betacoronavírus (linhagem A de β-coronavirus), linhagem B de betacoronavírus (linhagem B de β-coronavkus) e linhagem C de betacoronavírus (linhagem C de β-coronavírus). O betacoronaví- rus pode ser mais preferivelmente a linhagem A de betacoronavírus (linhagem A de β-coronav^s) e a linhagem B de betacoronavírus (li-nhagem B de β-coronav^s) e particularmente preferível linhagem B de betacoronavírus (linhagem B de β-coronavírus).

[00130] De acordo com um aspecto, o betacoronavírus pode ser um betacoronavírus do subgênero Sarbecovirus.

[00131] Exemplos da linhagem A de betacoronavírus (linhagem A de β-coronav^s) incluem HCoV-HKU1 e HCoV-OC43, e de preferência HCoV-OC43. Exemplos da linhagem B de betacoronavírus (linhagem B de β-coronav^s) incluem SARS-CoV e SARS-CoV-2 e, de preferência, SARS-CoV-2. A linhagem C de betacoronavírus (linhagem C de β-coronav^s) pode ser MERS-CoV.

[00132] De acordo com um aspecto, o coronavírus pode ser HCoV- 229E, HCoV-OC43 e/ou SARS-CoV-2, e particularmente preferível SARS-CoV-2.

[00133] As infecções por coronavírus podem ser infecções provocadas por HCoV-229E, HCoV-NL63, HCoV-OC43, HCoV-HKU1, SARS-CoV, MERS-CoV e/ou SARS-CoV-2. De preferência, as infecções por coronavírus podem ser infecções provocadas por HCoV- 229E, HCoV-OC43 e/ou SARS-CoV-2, e particularmente preferível infecção provocada por SARS-CoV-2.

[00134] As infecções por coronavírus podem ser particularmente preferível novas infecções por coronavírus (COVID-19).

Método para a produção do composto da presente invenção

[00135] Os compostos representados pela Fórmula (I) de acordo com a presente invenção podem ser produzidos, por exemplo, pelo método de síntese geral descrito abaixo. Em relação à extração, purificação e seus semelhantes, os tratamentos realizados em experimentos comuns de química orgânica podem ser realizados.

[00136] Os compostos da presente invenção podem ser produzidos com referência a técnicas conhecidas na especialidade. Por exemplo, os compostos podem ser produzidos com referência às WO2010092966, WO2012020749, WO2013089212, WO2014200078, WO2012020742 e WO2013118855. Método A - Quando Y for N e X for NR6 ou O Fórmula Química 12 em que Alq é C1-C3 alquila; Lg1é um grupo de saída; e símbolos de referência diferentes daqueles possuem os mesmos significados descritos acima.

Primeira etapa

[00137] O composto (a-1), ou cloridrato ou bromato do mesmo é reagido com isocianato (a-2) ou 1-carbamoilimidazol (a-2') em um solvente tal como N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida, N, N'- dimetilimidazolidinona, dimetil sulfóxido ou THF, na presença de uma base tal como DBU, trietilamina, N,N-di-isopropiletilamina ou piridina (de preferência, DBU), em -20 oC a 50 oC, e preferivelmente -10 oC para uma condição sob esfriamento com gelo. Subsequentemente, o Composto (a-3) pode ser produzido pela reação da mistura de reação com um agente carbonilante tal como 1,1'-carbonildi-imidazol, fosgênio ou trifosgênio e uma base tal como DBU, trietilamina, N,N-di- isopropiletilamina ou piridina (de preferência, DBU), em -20 oC a 50 oC, e preferivelmente -10 oC em uma condição sob esfriamento com gelo. Segunda etapa

[00138] O Composto (a-5) pode ser produzido pela reação do Composto (a-3) com o Composto (a-4) em um solvente tal como acetonitri- la, acetona, DMF ou DMSO, na presença de uma base tal como carbonato de potássio, carbonato de sódio ou N,N-di-isopropiletilamina, a 50 oC até uma condição de aquecimento sob refluxo, e de preferência sob uma condição de aquecimento sob refluxo.

[00139] Exemplos do grupo de saída incluem halogênio e - OSO2(CtF2t+1), em que t é um número inteiro de 1 a 4. O halogênio é de preferência cloro, iodo e bromo, e o grupo -OSO2(CtF2t+1) é de preferência um grupo -OTf (éster de ácido trifluorometanossulfônico). Terceira etapa

[00140] Um composto representado pelo Composto (I-a) pode ser produzido pela reação do Composto (a-5) com o Composto (a-6) ou Composto (a-6') em um solvente tal como NMP, DMF, DMA, DMSO, terc-butanol ou 2-metil-2-butanol, na presença ou ausência de um ácido tal como ácido acético, em 60 oC a 150 oC, e de preferência 80 oC a 120 oC.

[00141] Visto que o composto da presente invenção possui atividade inibidora de protease 3CL do coronavírus, o composto é útil como agente terapêutico e/ou profilático para infecções por coronavírus.

[00142] Além disso, o composto da presente invenção tem utilidade como um medicamento e, de preferência, o composto da presente invenção possui qualquer uma ou uma pluralidade das seguintes características excelentes. a) A atividade inibidora contra as enzimas CYP (por exemplo, CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6 e CYP3A4) é fraca. b) Farmacocinética satisfatória tal como alta biodisponibili- dade e depuração adequada é apresentada. c) A estabilidade metabólica é alta. d) A atividade inibidora irreversível não é apresentada contra enzimas CYP (por exemplo, CYP3A4) dentro da faixa de concentração das condições de medição descritas no presente relatório descritivo. e) A mutagenicidade não é apresentada. f) O risco cardiovascular é baixo. g) Alta solubilidade é apresentada. h) A taxa de desvinculação da proteína (valor fu) é alta. i) Alta seletividade de protease 3CL do coronavírus é apre- sentada. j) Alta atividade inibidora de replicação do coronavírus é apresentada. Por exemplo, a alta atividade inibidora da replicação do coronavírus é apresentada quando o soro do sangue humano (HS) ou a albumina do soro humano (HSA) é adicionado.

[00143] Em relação ao inibidor de replicação do coronavírus, por exemplo, um aspecto em que no efeito CPE (SARS-CoV-2) que será descrito abaixo, por exemplo, a EC50 é 10 μM ou menos, de preferência 1 μM ou menos e mais preferivelmente 100 nM ou menos, pode ser mencionado.

[00144] Além disso, um sal, uma forma cristalina, um compósito e um cocristal do composto de acordo com a presente invenção possuem utilidade como medicamentos e, de preferência, possuem qualquer uma ou uma pluralidade das seguintes características excelentes. bb) Farmacocinética satisfatória tal como alta biodisponibili- dade, depuração adequada, alta AUC e alta concentração sanguínea máxima é apresentada. gg) Alta solubilidade, alta estabilidade química e baixas propriedades higroscópicas são apresentadas.

[00145] A composição farmacêutica da presente invenção pode ser administrada por um método oral ou um método parenteral. Exemplos de um método de administração parenteral incluem administração per- cutânea, subcutânea, intravenosa, intra-arterial, intramuscular, intraperitoneal, transmucosa, por inalação, transnasal, por instilação ocular, por instilação no ouvido e intravaginal.

[00146] No caso de administração oral, a composição farmacêutica pode ser preparada em qualquer forma de dosagem que seja comu- mente usada, tal como uma preparação sólida para uso interno (por exemplo, um comprimido, uma preparação em pó, uma preparação granular, uma cápsula, uma pílula ou uma preparação de película), ou uma preparação líquida para uso interno (por exemplo, uma suspensão, uma emulsão, um elixir, um xarope, uma limonada, uma preparação de álcool, uma preparação de água aromática, uma extração, uma decocção ou uma tintura) e administrada. O comprimido pode ser uma drágea, um comprimido revestido por película, um comprimido com revestimento entérico, um comprimido de liberação controlada, uma pastilha, um comprimido sublingual, um comprimido bucal, um comprimidomastigável ou um comprimido de desintegração oral; a preparação em pó e a preparação granular podem ser xaropes secos; e a cápsula pode ser uma cápsula macia, uma microcápsula ou uma cápsula de liberação controlada.

[00147] No caso de administração parenteral, a composição farmacêutica pode ser adequadamente administrada em qualquer forma de dosagem que seja comumente usada, tal como uma preparação injetável, uma infusão ou uma preparação para uso externo (por exemplo, um colírio, uma gota nasal, uma gota para os ouvidos, um aerossol, um inalante, uma loção, um agente impregnante, um linimento, um agente de gargarejo, um enema, uma pomada, um emplastro, uma geleia, um creme, um adesivo, um cataplasma, uma preparação em pó para uso externo ou um supositório). A preparação injetável pode ser uma emulsão do tipo O/A, A/O, O/A/O ou A/O/A ou semelhante.

[00148] Uma composição farmacêutica pode ser obtida através da mistura de uma quantidade eficaz do composto da presente invenção com vários aditivos farmacêuticos apropriados para a forma de dosagem, tal como um excipiente, um aglutinante, um agente desintegrante e um agente lubrificante, conforme necessário. Além disso, a composição farmacêutica pode ser preparada em uma composição farmacêutica para uso em uma criança, um idoso, um paciente com um caso grave ou uma operação cirúrgica, alterando adequadamente a quantidade eficaz do composto da presente invenção, a forma de dosagem e/ou vários aditivos farmacêuticos. Por exemplo, uma composição farmacêutica para uso em uma criança pode ser administrada a um recém-nascido (menos de 4 semanas após o nascimento), um bebê (de 4 semanas após o nascimento a menos de 1 ano), uma criança pré-escolar (de 1 ano a menos de 7 anos), uma criança (de 7 anos a menos de 15 anos) ou um paciente de 15 a 18 anos de idade. Por exemplo, uma composição farmacêutica para um idoso pode ser administrada a um paciente com 65 anos de idade ou mais.

[00149] É desejável definir a quantidade de administração da composição farmacêutica da presente invenção (por exemplo, uma composição farmacêutica compreendendo uma Forma I do cocristal de ácido fumárico de um composto representado pela Fórmula (I-B)), após considerar a idade e o peso corporal do paciente, o tipo e grau da doença, a via de administração e semelhantes; no entanto, no caso de administração oral, a quantidade de administração é geralmente de 0,05 a 200 mg/kg/dia e está preferivelmente na faixa de 0,1 a 100 mg/kg/dia. No caso de administração parenteral, a quantidade de administração pode variar muito dependendo da via de administração; no entanto, a quantidade de administração é geralmente de 0,005 a 200 mg/kg/dia e está preferivelmente na faixa de 0,01 a 100 mg/kg/dia. Isto pode ser administrado uma vez por dia ou várias vezes por dia.

[00150] O composto da presente invenção pode ser usado em combinação com, por exemplo, outro agente terapêutico para novas infecções por coronavírus (COVID-19) (o agente terapêutico inclui um fármaco aprovado e um fármaco que está em desenvolvimento ou a ser desenvolvido no futuro) (doravante, referido como fármaco concomitante), com a finalidade de aumentar a ação do composto, reduzir a quantidade de administração do composto ou semelhante. Neste momento, o tempo de administração para o composto da presente invenção e para o fármaco concomitante não é limitado, e estes podem ser administrados simultaneamente ao alvo de administração ou podem ser administrados com uma diferença de tempo. Além disso, o composto da presente invenção e o fármaco concomitante podem ser administrados como dois ou mais tipos de preparações, cada uma incluindo ingredientes ativos, ou podem ser administrados como uma única preparação incluindo esses ingredientes ativos.

[00151] A quantidade de administração do fármaco concomitante pode ser apropriadamente selecionada com base na dosagem clinicamente usada. Além disso, a relação de mistura do composto da presente invenção e do fármaco concomitante pode ser apropriadamente selecionada de acordo com o alvo de administração, a via de administração, a doença alvo, sintomas, combinação e semelhantes. Por exemplo, quando o alvo de administração for um ser humano, de 0,01 a 100 partes em peso do fármaco concomitante podem ser usadas em relação a 1 parte em peso do composto da presente invenção.

EXEMPLOS

[00152] Daqui em diante, a presente invenção será descrita com maiores detalhes por meio de Exemplos, Exemplos de Referência e Exemplos de Teste; no entanto, a presente invenção não se destina a ser limitada por estes.

[00153] Além disso, as abreviações usadas no presente relatório descritivo denotam os seguintes significados. Boc: terc-butoxicarbonila DBU: 1,8-diazabiciclo[5.4.0]-7-undeceno DMA: N,N-dimetilacetamida DMF: N,N-dimetilformamida DMSO: Dimetilsulfóxido TDT: Ditiotreitol EDC: 1-Etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodi-imida EDT: 1,2-etanoditiol EDTA: Ácido etilenodiaminotetracético FBS: soro fetal bovino HOBT: 1-Hidroxibenzotriazol LHMDS: Bis(trimetilsilil)amida de lítio MEM: Meio Essencial Mínimo de Eagle NMP: N-metilpirrolidona TFA: Ácido trifluoroacético THF: Tetra-hidrofurano mM: mmol/L μM: μmol/L nM: nmol/L

Método para identificar o composto

[00154] A análise de RMN obtida em cada Exemplo foi executada em 400 MHz e a medição foi feita usando DMSO-d6 e CDCl3. Além disso, quando os dados de RMN são mostrados, há ocasiões em que todos os picos medidos não são descritos.

[00155] O termo TR no relatório descritivo indica o tempo de retenção em um LC/MS: cromatografia em fase líquida/análise de massa, e o tempo de retenção foi medido nas seguintes condições.

[00156] Condições de medição 1

[00157] Coluna: ACQUITY UPLC (marca registrada) BEH C18 (1,7 μm i.d. 2,1 x 50 mm) (Waters)

[00158] Vazão: 0,8 ml/min

[00159] Comprimento de onda de detecção UV: 254 nm

[00160] Fase móvel: [A] era uma solução aquosa contendo 0,1% de ácido fórmico, e [B] era uma solução de acetonitrila contendo 0,1% de ácido fórmico.

[00161] Gradiente: Um gradiente linear de 5% a 100% de solvente [B] foi realizado durante 3,5 minutos, e depois 100% de solvente [B] foi mantido durante 0,5 minuto.

[00162] Casualmente, no relatório descritivo, a descrição de MS (m/z) indica um valor observado por análise de massa.

[00163] Medição do padrão de difração de raios X em pó

[00164] A medição de difração de raios X em pó de cristais obtidos em cada Exemplo foi executada de acordo com o método de medição de difração de raios X em pó descrito nos Métodos de Teste Gerais da Farmacopeia Japonesa. As condições de medição são mostradas abaixo.

Mecanismo

[00165] SmartLab fabricado pela Rigaku Corporation

Método de operação

[00166] Método de medição: Método de reflexão

[00167] Comprimento de onda usado: radiação CuKα

[00168] Corrente do tubo: 200 mA

[00169] Tensão do tubo: 45 kV

[00170] Placa de amostra: Alumínio

[00171] Ângulo de incidência dos raios X: 2,5°

[00172] Largura de amostragem: 0,02°

[00173] Detector: HyPix-3000 (modo de detecção bidimensional)

Método de medição e análise para análise da estrutura de cristal simples)

[00174] As condições de medição e o método de análise para análise de estrutura de cristal simples serão descritos abaixo.

Mecanismo

[00175] XtaLAB P200 MM007 fabricado pela Rigaku Corporation Condições de

medição

[00176] Temperatura de medição: 25 oC

[00177] Comprimento de onda usado: radiação CuKα (À = 1,5418Â)

[00178] Software: CrysAlisPro 1.171.39.46e (Rigaku Oxford Difraction, 2018)

Processamento de dados

[00179] Software: CrysAlisPro 1.171.39.46e (Rigaku Oxford Difraction, 2018)

[00180] Os dados foram submetidos à correção de Lorentz e polarização e correção de absorção.

Análise da estrutura cristalina

[00181] A determinação de fase foi executada usando um programa de método direto, ShelXT (Sheldrick, G.M., 2015), e em relação ao refinamento, um método dos mínimos quadrados de matriz completa foi realizado usando ShelXL (Sheldrick, G.M., 2015). Os fatores de temperatura de átomos não hidrogênio foram todos submetidos a refinamento com anisotropia. Os átomos de hidrogênio foram introduzidos computacionalmente usando os parâmetros padrão do ShelXL e foram tratados como átomos de ancoramento. Todos os átomos de hidrogênio foram submetidos a refinamento com parâmetros isotrópicos.

[00182] Para a construção da Fig. 2 e Fig. 4, foi usado PLUTON (Spek, 1991)/ORTEP (Johnson, 1976).

Medição do espectro Raman

[00183] A medição do espectro Raman de cristais obtidos em cada Exemplo foi executada. As condições de medição são mostradas abaixo.

[00184] Instrumento de medição: RAMANTouch Vis2-NIR-SNU (fabricado pela Nanophoton Corporation)

Método de medição:

[00185] Espectrometria Raman a laser microscópica

[00186] Comprimento de onda do laser: 671 nm

[00187] Rede de difração: 600 ranhuras/mm

[00188] Detector: detector CCD

[00189] Lente objetiva: 50 x (NA 0,80)

[00190] Número cumulativo: 3 a 10 vezes

[00191] Tempo de exposição: 1 a 10 segundos

Medição de calorimetria diferencial de varredura (DSC)

[00192] Cerca de 3 mg de uma amostra obtida em cada Exemplo foi pesada em um suporte de alumínio e foi executada a medição de DSC. As condições de medição são mostradas abaixo. Casualmente, na medição feita por calorimetria diferencial de varredura (DSC), pode ocorrer um erro na faixa de ± 2 oC.

Mecanismo:

[00193] TA Instrument Q1000/TA Instrument

[00194] Faixa de temperatura de medição: 0 oC a 295 oC

[00195] Taxa de aumento de temperatura: 10 oC/min

[00196] Atmosfera: N2 50 mL/min

Medição de dados TG/DTA

[00197] Ao redor de 3 mg dos cristais obtidos em cada Exemplo foram pesados e acondicionados em um suporte de alumínio, e a medição foi executada em um sistema aberto. As condições de medição são como se segue.

Condições de medição 1

[00198] Mecanismo: Hitachi High-Technologies TG/DTA STA7200RV

[00199] Faixa de temperatura de medição: temperatura ambiente até 400 oC

[00200] Taxa de aumento de temperatura: 10 oC/min Exemplo 1 Síntese do Composto (I-0115) Fórmula Química 13

Etapa 1 - Síntese do Composto 18

[00201] Composto 4 (926 mg, 4,04 mmol), acetonitrila (7,41 ml), carbonato de potássio (726 mg, 5,25 mmol) e brometo de 2,4,5- trifluorobenzila (1000 mg, 4,44 mmol) foram misturados. A solução de reação foi agitada a 80 oC durante 40 minutos, deixada esfriar e depois diluída com acetato de etila. Após filtração do material insolúvel, o filtrado foi concentrado para fornecer o produto bruto do Composto 18 (1,51 g, 4,04 mmol, rendimento: quant.)

[00202] LC/MS (ESI): m/z = 374, TR = 2,54 min, condição 1 medida por LC/MS

Etapa 2 - Síntese do Composto 19

[00203] Composto 18 (1,51 g, 4,04 mmol) e TFA (3,02 ml) foram misturados. A solução de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 4 horas e deixada repousar durante a noite. O TFA foi extraído por destilação sob pressão reduzida e, em seguida, foi adicionado to- lueno ao resíduo e azeotropado. Foi adicionado éter isopropílico ao resíduo, colocado em suspensão e coletado por filtração para fornecer o Composto 19 (1,22 g, 3,84 mmol, rendimento: 95%)

[00204] LC/MS (ESI): m/z = 318, TR = 1,68 min, condição 1 medida por LC/MS

Etapa 3 - Síntese do Composto 20

[00205] Composto 19 (200 mg, 0,63 mmol), DMF (1,8 ml), Carbonato de Potássio (261 mg, 1,89 mmol) e cloridrato de 3-(clorometil)-1- metil-1H-1,2,4-triazol (159 mg, 0,946 mmol) foram misturados. A solução de reação foi agitada durante 2 horas a 60 oC e foi adicionada uma solução aquosa saturada de cloreto de amônio. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila e a camada orgânica foi lavada com sal-moura. A camada orgânica foi secada por sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. O resíduo foi colocado em suspensão em um solvente misturado de éter isopropílico, hexano, acetato de etila e clorofórmio e coletado por filtração. O resíduo, DMF (1,8 ml), carbonato de potássio (261 mg, 1,89 mmol) e cloridrato de 3-(clorometil)-1-metil-1H-1,2,4- triazol (159 mg, 0,946 mmol) foram misturados. A solução de reação foi agitada a 60 oC durante 6 horas e uma solução aquosa saturada de cloreto de amônio foi adicionada. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila e a camada orgânica foi lavada com salmoura. A camada orgânica foi secada por sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. O resíduo foi colocado em suspensão em um solvente misturado de éter isopropílico, hexano, acetato de etila e clorofórmio e coleta-do por filtração para fornecer o Composto 20 (116 mg, 0,281 mmol, 45% de rendimento)

[00206] LC/MS (ESI): m/z = 413, TR = 1,84 min, condição medida de LC/MS: 1

Etapa 4 - Síntese do Composto (I-0115)

[00207] Composto 20 (115 mg, 0,279 mmol), THF (2,30 ml) e 6- cloro-2-metil-2H-indazol-5-amina (60,8 mg, 0,335 mmol) foram misturados. A mistura de reação foi adicionada gota a gota LHMDS (558 μM, 0,558 mmol) a 0 oC. A mistura de reação foi agitada a 0 oC durante 2,5 horas e agitada na temperatura ambiente durante 40 minutos, depois adicionou-se solução saturada de cloreto de amônio à mistura de reação. A mistura de reação foi extraída com clorofórmio e a camada orgânica foi concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (clorofórmio/metanol) para fornecer o Composto (I-0115) (61,8 mg, 0,116 mmol, Rendimento 42%).

[00208] 1H-RMN (CDCl3) δ: 7,96 (s, 1H), 7,82 (d, J = 2,5Hz, 2H), 7,48 (br s, 1H), 7,45 - 7,37 (m, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,97 - 6,88 (m, 1H), 5,35 (s, 2H), 5,17 (s, 2H), 4,21 (s, 3H), 3,89 (s, 3H).

[00209] LC/MS (ESI): m/z = 532, TR = 1,70 min, método de medição LC/MS 1

[00210] Os seguintes compostos foram sintetizados de acordo com o método de síntese geral acima e o método descrito nos Exemplos. A estrutura e as propriedades físicas (dados LC/MS) são mostradas na tabela abaixo.

[00211] O composto descrito pela estrutura de amino: Fórmula Química 14 na tabela, em que Y é N e X é NH na Fórmula (I), pode ter uma estrutura de imino: Fórmula Química 15 e o composto representado pela estrutura de imino também pode ter a estrutura de amino.

[00212] Isto é, até com o mesmo composto, há casos em que ele apresenta uma estrutura de imino ou uma estrutura de amino, dependendo das condições de cristalização e similares. Mesmo com a formação do seu sal ou complexo, o sal ou o complexo pode ter uma estrutura de amino ou uma estrutura de imino. Mesmo com a mesma contramolécula do sal ou do complexo, eles podem ter uma estrutura de amino ou uma estrutura de imino dependendo das condições de cristalização e semelhantes. Também pode ser a mistura de um composto com uma estrutura de imino, seu sal ou um complexo do mesmo, e um composto tendo uma estrutura de amino, seu sal ou um complexo do mesmo. Tabela 1

Exemplo 2

[00213] Ao Composto (I-0115, 1170 mg) foram adicionados ácido fumárico (278 mg, 1,1 eq) e acetato de etila (5,85 ml). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 45 minutos. Os sólidos resultantes foram recolhidos por filtração e secos para fornecer a Forma I de cocristal de ácido fumárico do composto representado pela Fórmula (I-B) (1369,4 mg, 94,6%).

[00214] Os resultados da análise da estrutura de cristal simples da Forma I do cocristal de ácido fumárico do composto representado pela Fórmula (I-B) são mostrados abaixo.

[00215] R1 (I > 2,00s (I)) foi de 0,0470, e foi confirmado pela diferença final de Fourier que não havia falta de densidade de eletrônica ou má colocação.

[00216] Os dados cristalográficos são mostrados na Tabela 2. Tabela 2

[00217] Em que Volume indica a unidade de volume da rede, Z indica o número da unidade química por célula unitária.

[00218] Além disso, as coordenadas atômicas de átomos não hidrogênio são indicadas nas Tabelas 3 a 4. Aqui, U(eq) significa um fator de temperatura isotrópico equivalente. Tabela 3 Tabela 4

[00219] Em seguida, as coordenadas atômicas do átomo de hidro- gênio são mostradas na Tabela 5. Aqui, U(iso) significa um fator de temperatura isotrópica. Além disso, os números de átomos de hidrogênio na Tabela 5 são atribuídos em relação aos números de átomos não hidrogênio que estão ligados. Tabela 5

[00220] Além disso, o comprimento da ligação interatômica (unida- de: angstrom) é mostrado na Tabela 6. Tabela 6

[00221] Na Forma I de cocristal de ácido fumárico do composto representado pela Fórmula (I-B), uma molécula do composto representado pela Fórmula (I-B) estava presente na unidade assimétrica. A estrutura da Forma I do cocristal de ácido fumárico do composto representado pela Fórmula (I-B) na unidade assimétrica é mostrada na Fig 2.

[00222] Os números de átomos não hidrogênio nas Tabelas 3 a 4 e 6 correspondem aos números mostrados na Fig. 2, respectivamente.

[00223] Conforme mostrado na Tabela 6, o comprimento de ligação de N10-C9 foi de cerca de 1,26 Â e o comprimento de ligação de N16- C9 foi de cerca de 1,37 Â.

[00224] Visto que o comprimento de ligação de N10-C9 (ao redor de 1,26 Â) é menor do que o de N16-C9 (ao redor de 1,37 Â), a Forma I de cocristal de ácido fumárico do composto representado pela Fórmula (I-B) foi identificado como estrutura de imino: Fórmula Química 16

[00225] Além disso, o resultado da difração de raios X em pó da Forma I do cocristal de ácido fumárico do composto representado pela Fórmula (I-B) é mostrado.

[00226] No padrão de difração de raios X em pó, os picos foram observados no ângulo de difração (2θ): 7,8 ± 0,2°, 9,5 ± 0,2°, 10,1 ± 0,2°, 10,9 ± 0,2°, 13,8 ± 0,2°, 14,7 ± 0,2°, 18,6 ± 0,2°, 22,6 ± 0,2°, 23,5 ± 0,2° e 24,6 ± 0,2°.

[00227] No padrão de difração de raios X em pó, os picos do ângulo de difração (2θ): 9,5 ± 0,2°, 10,9 ± 0,2°, 18,6 ± 0,2°, 23,5 ± 0,2° e 24,6 ± 0,2 são particularmente característicos como a Forma I de cocristal de ácido fumárico do composto representado pela Fórmula (I-B).

[00228] O resultado do espectro Raman da Forma I do cocristal de ácido fumárico do composto representado pela Fórmula (I-B) é mostrado na Fig 3.

[00229] Os principais picos do espectro Raman foram observados em 637,3 cm-1± 2 cm-1, 676,3 cm-1± 2 cm-1, 688,8 cm-1± 2 cm-1, 748,0 cm-1± 2 cm-1, 758,1 cm-1± 2 cm-1, 1029,3 cm-1± 2 cm-1, 1114,4 cm-1± 2 cm-1, 1281,3 cm-1± 2 cm-1, 1332,1 cm-1± 2 cm-1, 1374,4 cm-1± 2 cm- 1, 1456,0 cm-1± 2 cm-1, 1515,5 cm-1± 2 cm-1, 1636,0 cm-1± 2 cm-1, 1665,7 cm-1± 2 cm-1, 1715,7 cm-1± 2 cm-1, 1739,1 cm-1± 2 cm-1, 2951,2 cm-1± 2 cm-1, 3068,3 cm-1± 2 cm-1e 3126,2 cm-1± 2 cm-1.

[00230] Em uma modalidade, a Forma I de cocristal de ácido fumá- rico do composto representado pela Fórmula (I-B) possui picos de espectro Raman em 676,3 cm-1± 2 cm-1, 748,0 cm-1± 2 cm-1, 1029,3 cm- 1± 2 cm-1, 1374,4 cm-1± 2 cm-1, 1515,5 cm-1± 2 cm-1, 1665,7 cm-1± 2 cm-1, 1715,7 cm-1± 2 cm-1e 1739,1 cm-1± 2 cm-1.

[00231] Em uma modalidade, a Forma I de cocristal de ácido fumá- rico do composto representado pela Fórmula (I-B) possui um pico de espectro Raman em 676,3 cm-1± 2 cm-1.

[00232] Em uma modalidade, a Forma I de cocristal de ácido fumá- rico do composto representado pela Fórmula (I-B) possui um pico de espectro Raman em 748,0 cm-1± 2 cm-1.

[00233] Em uma modalidade, a Forma I de cocristal de ácido fumá- rico do composto representado pela Fórmula (I-B) possui um pico de espectro Raman em 1029,3 cm-1± 2 cm-1.

[00234] Em uma modalidade, a Forma I de cocristal de ácido fumá- rico do composto representado pela Fórmula (I-B) possui um pico de espectro Raman em 1374,4 cm-1± 2 cm-1.

[00235] Em uma modalidade, a Forma I de cocristal de ácido fumá- rico do composto representado pela Fórmula (I-B) possui um pico de espectro Raman em 1515,5 cm-1± 2 cm-1.

[00236] Em uma modalidade, a Forma I de cocristal de ácido fumá- rico do composto representado pela Fórmula (I-B) possui um pico de espectro Raman em 1665,7 cm-1± 2 cm-1.

[00237] Em uma modalidade, a Forma I de cocristal de ácido fumá- rico do composto representado pela Fórmula (I-B) possui um pico de espectro Raman em 1715,7 cm-1± 2 cm-1.

[00238] Em uma modalidade, a Forma I de cocristal de ácido fumá- rico do composto representado pela Fórmula (I-B) possui um pico de espectro Raman em 1739,1 cm-1± 2 cm-1.

[00239] Em uma modalidade, a Forma I de cocristal de ácido fumá- rico do composto representado pela Fórmula (I-B) possui um ou mais picos de espectro Raman selecionados do grupo que consiste em: pico espectral de Raman de 676,3 cm-1± 2 cm-1, pico espectral de Raman de 748,0 cm-1± 2 cm-1, pico espectral de Raman de 1029,3 cm-1± 2 cm-1, pico espectral de Raman de 1374,4 cm-1± 2 cm-1, pico espectral de Raman de 1515,5 cm-1± 2 cm-1, pico espectral de Raman de 1665,7 cm-1± 2 cm-1, pico espectral de Raman de 1715,7 cm-1± 2 cm-1 e pico espectral de Raman de 1739,1 cm-1± 2 cm-1.

[00240] O resultado da análise DSC da Forma I do cocristal de ácidofumárico do composto representado pela Fórmula (I-B) é mostrado na Fig 4. A temperatura inicial (pico endotérmico) foi de cerca de 272 oC.

Exemplo 3

[00241] A 200 mg de Composto (I-0115), foram adicionados 395 μL (1,05 eq) de uma solução aquosa de hidróxido de potássio a 1 mol/L e 2 ml de acetonitrila e o solvente foi evaporado até a secura. Adicionou- se 1 ml de acetato de etila e a mistura foi agitada a 60 oC durante 10 minutos e depois agitada durante a noite a 25 oC. Os sólidos foram coletados por filtração e secos para obter uma forma cristalina do sal de potássio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B). Em relação à forma cristalina do sal de potássio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B), a estrutura molecular (forma ami- no/forma imino) não foi identificada.

[00242] Os resultados da difração de raios X em pó da forma crista- lina do sal de potássio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B) são mostrados na Fig. 5.

[00243] No padrão de difração de raios X em pó, os picos foram observados nos ângulos de difração (2θ): 7,7 ± 0,2°, 8,1 ± 0,2°, 12,6 ± 0,2°, 16,7 ± 0,2°, 18,5 ± 0,2°, 19,4 ± 0,2°, 20,7 ± 0,2°, 22,0 ± 0,2°, 23,7 ± 0,2° e 25,3 ± 0,2°.

[00244] Em relação aos picos de difração de raios X em pó, os picos nos ângulos de difração (2θ): 8,1 ± 0,2°, 16,7 ± 0,2°, 20,7 ± 0,2°, 22,0 ± 0,2°, 25,3 ± 0,2° são particularmente característicos como a forma cristalina do sal de potássio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B).

[00245] Os resultados da espectroscopia Raman do cristal de sal de potássio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B) são mostrados na Fig. 6.

[00246] Os principais picos do espectro Raman foram observados em 638,4 cm-1± 2 cm-1, 676,3 cm-1± 2 cm-1, 724,1 cm-1± 2 cm-1, 749,1 cm-1± 2 cm-1, 876,9 cm-1± 2 cm-1, 1008,7 cm-1± 2 cm-1, 1105,9 cm-1± 2 cm-1, 1294,8 cm-1± 2 cm-1, 1363,1 cm-1± 2 cm-1, 1409,2 cm-1± 2 cm- 1, 1457,0 cm-1± 2 cm-1, 1506,4 cm-1± 2 cm-1, 1526,5 cm-1± 2 cm-1, 1577,4 cm-1± 2 cm-1, 1624,1 cm-1± 2 cm-1, 1688,3 cm-1± 2 cm-1, 2952,0 cm-1± 2 cm-1, 2980,5 cm-1± 2 cm-1, 3073,7 cm-1± 2 cm-1e 3121,6 cm-1± 2 cm-1.

[00247] De acordo com uma modalidade, a forma cristalina do sal de potássio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B) possui picos de espectro Raman em 749,1 cm-1± 2 cm-1, 1008,7 cm-1 ± 2 cm-1, 1363,1 cm-1± 2 cm-1, 1506,4 cm-1± 2 cm-1, 1577,4 cm-1± 2 cm-1e 1624,1 cm-1± 2 cm-1.

Exemplo 4

[00248] Em 190 mg de Composto (I-0115), foram adicionados 46,4 mg (1,1 eq) de ácido succínico e 3,8 ml de acetonitrila e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 1 hora. Os sólidos foram coletados por filtração e secos para obter a Forma I de cocristal de ácido succínico do composto representado pela Fórmula (I-B). Com relação à Forma I de cocristal de ácido succínico do composto representado pela Fórmula (I-B), a estrutura molecular (forma amino/forma imino) não foi identificada.

[00249] Os resultados da difração de raios X em pó da Forma I de cocristal de ácido succínico do composto representado pela Fórmula (I-B) são mostrados na Fig. 7.

[00250] No padrão de difração de raios X em pó, os picos foram observados nos ângulos de difração (2θ): 9,5 ± 0,2°, 10,9 ± 0,2°, 11,3 ± 0,2°, 13,4 ± 0,2°, 14,4 ± 0,2°, 18,7 ± 0,2°, 19,4 ± 0,2°, 22,6 ± 0,2°, 23,4 ± 0,2° e 24,4 ± 0,2°.

[00251] Em relação aos picos de difração de raios X em pó, os picos nos ângulos de difração (2θ): 10,9 ± 0,2°, 18,7 ± 0,2°, 22,6 ± 0,2°, 23,4 ± 0,2° e 24,4 ± 0,2° são particularmente característicos como a Forma I de cocristal de ácido succínico do composto representado pelaFórmula (I-B).

[00252] Os resultados da espectroscopia Raman da Forma I de co- cristal de ácido succínico do composto representado pela Fórmula (IB) são mostrados na Fig. 8.

[00253] Os principais picos do espectro Raman foram observados em 631,6 cm-1± 2 cm-1, 676,4 cm-1± 2 cm-1, 748,1 cm-1± 2 cm-1, 812,3 cm-1± 2 cm-1, 1025,2 cm-1± 2 cm-1, 1114,6 cm-1± 2 cm-1, 1229,2 cm-1 ± 2 cm-1, 1331,3 cm-1± 2 cm-1, 1374,6 cm-1± 2 cm-1, 1515,7 cm-1± 2 cm-1, 1636,3 cm-1± 2 cm-1, 1665,0 cm-1± 2 cm-1, 1712,1 cm-1± 2 cm-1, 1737,5 cm-1± 2 cm-1, 2953,3 cm-1± 2 cm-1, 2982,6 cm-1± 2 cm-1, 3069,5 cm-1± 2 cm-1e 3127,5 cm-1± 2 cm-1.

[00254] De acordo com uma modalidade exemplar, a Forma I de cocristal de ácido succínico do composto representado pela Fórmula (I-B) possui picos de espectro Raman em 676,4 cm-1± 2 cm-1, 748,1 cm-1± 2 cm-1, 1025,2 cm-1± 2 cm-1, 1374,6 cm-1± 2 cm-1, 1515,7 cm-1 ± 2 cm-1e 1665,0 cm-1± 2 cm-1.

Exemplo 5

[00255] 750 μL de acetato de etila foram adicionados a 150 mg de Composto (I-0115) e a mistura foi agitada durante a noite a 60 oC. Os sólidos foram coletados por filtração e secos para obter uma forma cristalina do anidrido Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B). Com relação à forma cristalina do anidrido Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B), a estrutura molecular (forma ami- no/forma imino) não foi identificada.

[00256] Os resultados da difração de raios X em pó da forma cristalina do anidrido Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B) são mostrados na Fig. 9.

[00257] No padrão de difração de raios X em pó, os picos foram observados nos ângulos de difração (2θ): 6,6 ± 0,2°, 9,6 ± 0,2°, 12,2 ± 0,2°, 13,2 ± 0,2°, 16,2 ± 0,2°, 17,5 ± 0,2°, 19,8 ± 0,2°, 23,3 ± 0,2°, 24,5 ± 0,2° e 26,1 ± 0,2°.

[00258] Em relação aos picos de difração de raios X em pó, os picos nos ângulos de difração (2θ): 6,6 ± 0,2°, 9,6 ± 0,2°, 13,2 ± 0,2°, 17,5 ± 0,2° e 19,8 ± 0,2° são particularmente característicos como ani- drido Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B).

[00259] Os resultados da espectroscopia Raman do cristal de ani- drido Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B) são mostrados na Fig. 10.

[00260] Os principais picos do espectro Raman foram observados em 630,4 cm-1± 2 cm-1, 672,8 cm-1± 2 cm-1, 744,6 cm-1± 2 cm-1, 805,4 cm-1± 2 cm-1, 997,8 cm-1± 2 cm-1, 1020,7 cm-1± 2 cm-1, 1297,9 cm-1± 2 cm-1, 1335,2 cm-1± 2 cm-1, 1362,0 cm-1± 2 cm-1, 1461,0 cm-1± 2 cm- 1, 1505,4 cm-1± 2 cm-1, 1527,5 cm-1± 2 cm-1, 1629,1 cm-1± 2 cm-1, 1645,9 cm-1± 2 cm-1, 1755,7 cm-1± 2 cm-1, 2943,3 cm-1± 2 cm-1, 2982,1 cm-1± 2 cm-1, 3060,5 cm-1± 2 cm-1, 3104,7 cm-1± 2 cm-1e 3123,2 cm-1± 2 cm-1.

[00261] De acordo com uma modalidade exemplar, o cristal de ani- drido Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B) possui picos de espectro Raman em 630,4 cm-1± 2 cm-1, 744,6 cm-1± 2 cm-1, 997,8 cm-1± 2 cm-1, 1362,0 cm-1± 2 cm-1, 1461,0 cm-1± 2 cm-1, 1505,4 cm-1± 2 cm-1e 1755,7 cm-1± 2 cm-1.

Exemplo 6

[00262] Em 95 mg de Composto (I-0115), foram adicionados 187 μL (1,05 eq) de uma solução aquosa de hidróxido de sódio a 1 mol/L e 1 ml de acetonitrila e o solvente foi evaporado até a secura. 100 μL de acetonitrila foram adicionados em 5 mg dos sólidos obtidos e a mistura foi agitada durante a noite a 25 oC. Os sólidos foram coletados por filtração e secos para obter um cristal de sal de sódio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B). Em relação ao cristal de sal de sódio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B), a estrutura molecular (forma amino/forma imino) não foi identificada.

[00263] Os resultados da difração de raios X em pó do cristal de sal de sódio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B) são mostrados na Fig. 11.

[00264] No padrão de difração de raios X em pó, os picos foram observados nos ângulos de difração (2θ): 6,6 ± 0,2°, 8,1 ± 0,2°, 10,9 ± 0,2°, 11,6 ± 0,2°, 13,2 ± 0,2°, 16,0 ± 0,2°, 22,1 ± 0,2°, 23,4 ± 0,2°, 26,6 ± 0,2° e 28,9 ± 0,2°.

[00265] Em relação aos picos de difração de raios X em pó, os picos nos ângulos de difração (2θ): 8,1 ± 0,2°, 10,9 ± 0,2°, 13,2 ± 0,2°, 23,4 ± 0,2° e 26,6 ± 0,2° são particularmente característicos como o cristal de sal de sódio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B).

[00266] Os resultados da espectroscopia Raman do cristal de sal de sódio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B) são mostrados na Fig. 12.

[00267] Os principais picos do espectro Raman foram observados em 638,4 cm-1± 2 cm-1, 675,1 cm-1± 2 cm-1, 746,8 cm-1± 2 cm-1, 1013,0 cm-1 ± 2 cm-1, 1106,9 cm-1 ± 2 cm-1, 1126,2 cm-1 ± 2 cm-1, 1299,0 cm-1 ± 2 cm-1, 1367,2 cm-1 ± 2 cm-1, 1407,1 cm-1 ± 2 cm-1, 1457,0 cm-1 ± 2 cm-1, 1504,4 cm-1 ± 2 cm-1, 1526,5 cm-1 ± 2 cm-1, 1581,3 cm-1 ± 2 cm-1, 1629,1 cm-1 ± 2 cm-1, 1711,8 cm-1 ± 2 cm-1, 2959,1 cm-1± 2 cm-1, 3062,0 cm-1± 2 cm-1e 3125,5 cm-1± 2 cm-1.

[00268] De acordo com uma modalidade exemplar, o cristal de sal de sódio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B) possui picos de espectro Raman em 746,8 cm-1± 2 cm-1, 1013,0 cm-1± 2 cm- 1, 1367,2 cm-1± 2 cm-1, 1504,4 cm-1± 2 cm-1, 1526,5 cm-1± 2 cm-1e 1581,3 cm-1± 2 cm-1.

[00269] Os resultados da análise térmica diferencial simultânea e análise termogravimétrica (TG/DTA) do cristal de sal de sódio Forma I do composto representado pela Fórmula (I-B) são mostrados na Fig. 13. Como resultado, uma perda de peso de 8,1% acompanhada por um pico endotérmico foi confirmada de cerca de 72 oC a cerca de 105 oC.

[00270] A partir dos resultados de medição descritos acima, espera- se que o cristal de sal de sódio Forma I do composto representado pelaFórmula (I-B) seja um cristal incluindo de 2,5 a 3 equivalentes de água de água.

Exemplos de Testes Biológicos para os compostos da presente invenção serão descritos abaixo.

[00271] É desejável que os compostos representados pela Fórmula (I) de acordo com a presente invenção sejam compostos tendo atividade inibidora de protease 3CL do coronavírus e que inibam as pro- teases 3CL do coronavírus.

[00272] Especificamente, no método de avaliação descrito abaixo, a IC50 é de preferência 50 μM ou menos, mais preferivelmente 1 μM ou menos e ainda mais preferivelmente 100 nM ou menos.

Exemplo de Teste 1: Atividade inibidora do efeito citopático (CPE) em células VeroE6 que expressam TMPRSS2 humano (células Ve- roE6/TMPRSS2) Procedimento operacional . Diluição e dispensação da amostra a ser testada

[00273] A amostra a ser testada é diluída antecipadamente para uma concentração apropriada com DMSO, e uma série de diluições em série de 2 a 5 vezes é preparada e depois dispensada em uma placa de 384 cavidades.

. Diluição e dispensação de células e SARS-CoV-2

[00274] As células VeroE6/TMPRSS2 (JCRB1819, 5 x 103 célu- las/cavidade) e SARS-CoV-2 (100 a 300 TCID50/cavidade) são misturadas em um meio (MEM, 2% FBS, penicilina-estreptomicina), a mistura é dispensada nas cavidades nas quais a amostra a ser testada foi introduzida e, em seguida, as células são cultivadas durante 3 dias em uma incubadora de CO2.

. Dispensação de CellTiter-Glo (marca registrada) 2.0 e medição de sinais de luminescência

[00275] A placa que foi cultivada durante 3 dias é devolvida na temperatura ambiente, subsequentemente CellTiter-Glo (marca registrada) 2.0 é dispensada em cada cavidade e a placa é misturada usando um misturador de placas. A placa é deixada em repouso durante um certo tempo, e depois os sinais de luminescência (Lum) são medidos com uma leitora de placas. Cálculo do valor de cada item de medição . Cálculo de 50% da concentração inibitória de morte celular infectada com SARS-CoV-2 (EC50)

[00276] Quando x significa o valor logarítmico da concentração do composto e y significa % de Eficácia, a curva de inibição é aproximada pela seguinte equação de regressão logística, e o valor de x quando y = 50 (%) for inserido é calculado como EC50. %Eficácia = {(Amostra - controle de vírus) / (controle de célula - controle de vírus)} * 100% controle de células: a média de Lum de cavidades de controle de células controle de vírus: a média de Lum de cavidades de controle de vírus min: valor limite inferior do eixo y, máx: valor limite superior do eixo y, X50: coordenadas x-do ponto de inflexão, Hill: inclinação da curva no ponto médio entre min e máx

[00277] Os compostos da presente invenção foram testados essencialmente como descrito acima. Os resultados são mostrados no que se segue.

[00278] Composto I-0115: 0,328 μM

Exemplo de Referência 1

[00279] Compostos I-0679, I-0683, I-0685 e I-1603 da WO2012/020749A (Documento de Patente 1), Compostos I-575 e I580 da WO2013/089212A (Documento de Patente 2) e Composto I066 da WO2010/099266A (Documento de Patente 3) foram testados essencialmente como descrito no Exemplo de Teste 1. Os resultados são mostrados nas tabelas abaixo. Tabela 7

[00280] Compostos I-0679, I-0683, I-0685 e I-1603 da WO2012/020749A (Documento de Patente 1), Compostos I-575 e I580 da WO2013/089212A (Documento de Patente 2) e Composto I066 da WO2010/099266A (Documento de Patente 3) não apresentaram atividade inibidora de replicação do coronavírus em concentrações de até 50 μM. Exemplo de Teste 2: Teste de atividade inibidora contra proteases 3CL do SARS-CoV-2 Materiais . Protease 3CL do SARS-CoV-2 recombinante comercialmente disponível. Peptídeo de substrato comercialmente disponível

[00281] Dabcyl-Lys-Thr-Ser-Ala-Val-Leu-Gln-Ser-Gly-Phe-Arg-Lys- Met-Glu(Edans)-NH2 (SEQ ID NO: 1)

. Peptídeo de padrão interno

[00282] Dabcyl-Lys-Thr-Ser-Ala-Val-Leu(13C6,15N)-Gln (SEQ ID NO: 2)

[00283] Dabcyl-Lys-Thr-Ser-Ala-Val-Leu(13C6,15N)-Gln pode ser sintetizado com referência aos documentos (Atherton, E.; Sheppard, R. C., “In Solid Phase Peptide Synthesis, A Practical Approach”, IRL Press at Oxford University Pres, 1989.; Bioorg. Med. Chem., Vol. 5, No. 9, 1997, pp. 1883-1891; e semelhantes). Um exemplo será mostrado a seguir.

[00284] H-Lys-Thr-Ser-Ala-Val-Leu(13C6,15N)-Glu(resina)-OαOtBu (a cadeia lateral Lys é protegida por Boc, a cadeia lateral Thr é protegida com um grupo terc-butila, a cadeia lateral de Ser é protegida com um grupo terc-butila, o C-terminal OH de Glu é protegido com um grupo terc-butila e o ácido carboxílico da cadeia lateral de Glu é condensado na resina) é sintetizado pela síntese em fase sólida Fmoc usando uma resina de amida Rink. Em relação à modificação do grupo Dabcyl N-terminal, o ácido 4-dimetilaminoazobenzeno-4'-carboxílico (Dabcyl- OH) é condensado na resina usando EDC/HOBT. A desproteção final e a clivagem da resina são realizadas por tratamento com TFA/EDT = 95 : 5. Em seguida, a purificação é executada por HPLC de fase reversa.

. Cartucho RapidFire C4 tipo A Procedimento operacional . Preparação de tampão de ensaio

[00285] No presente teste, é usado um tampão de ensaio composto de Tris-HCl 20 mM, cloreto de sódio 100 mM, EDTA 1 mM, DTT 10 mM e BSA 0,01%. Para um composto com uma IC50 de 10 nM ou menos, é usado um tampão de ensaio composto de Tris-HCl 20 mM, EDTA 1 mM, DTT 10 mM e BSA 0,01%.

. Diluição e dispensação da amostra a ser testada

[00286] A amostra a ser testada é diluída antecipadamente para uma concentração apropriada com DMSO, e uma série de diluições em série de 2 a 5 vezes é preparada e depois dispensada em uma placa de 384 cavidades.

. Adição de enzima e substrato, e reação enzimática

[00287] A uma placa de composto preparada, são adicionados substrato 8 μM e uma solução enzimática 6 ou 0,6 nM, e a incubação é realizada durante 3 a 5 horas na temperatura ambiente. Depois disso, uma solução de parada de reação (0,067 μM de padrão interno, 0,1% de ácido fórmico e 10% ou 25% de acetonitrila) é adicionada pa-ra interromper a reação enzimática. . Medição do produto de reação

[00288] A placa na qual a reação foi concluída é medida usando RapidFire System 360 e um analisador de massa (Agilent, 6550 iFun- nel Q-TOF), ou RapidFire System 365 e um analisador de massa (Agilent, 6495C Triple Quadrupole). A solução A (isopropanol 75%, aceto- nitrila 15%, formiato de amônio 5 mM) e a solução B (ácido trifluoroa- cético 0,01%, ácido fórmico 0,09%) são usadas como uma fase móvel na medição.

[00289] O produto de reação detectado pelo analisador de massa é calculado usando o RapidFire Integrator ou um programa equivalente capaz de análise e é considerado como valor da área do produto. Além disso, o padrão interno que foi detectado ao mesmo tempo também é calculado e é designado como valor da área do padrão interno.

[00290] Cálculo do valor de cada item de medição . Cálculo de P/IS

[00291] Os valores de área obtidos nos itens anteriores são calculados pela seguinte fórmula, e P/IS é calculado.

[00292] P/IS = Valor da área do produto / Valor da área do padrão interno

. Cálculo de 50% da concentração inibidora da protease 3CL do SARS-CoV-2 (IC50)

[00293] Quando x significa o valor logarítmico da concentração do composto e y significa % de inibição, a curva de inibição é aproximada pela seguinte equação de regressão logística, e o valor de x obtido quando y = 50 (%) for inserido é calculado como IC50. %Inibição = {1-(Amostra - Controle(-)) / Controle(+)- Controle(-))} * 100 Controle(-): a média de P/IS de cavidades de condição inibida por enzima Controle(+): a média de P/IS de cavidades de controle de DMSO min: valor limite inferior do eixo y, máx: valor limite superior do eixo y, X50: coordenadas x do ponto de inflexão, Hill: inclinação da curva no ponto central entre min e máx.

[00294] Os compostos da presente invenção foram testados essencialmente como descrito acima. Os resultados são mostrados a seguir.

[00295] Composto I-0115 : 0,010 μM

[00296] Os exemplos de preparação mostrados abaixo são apenas para fins ilustrativos e não pretendem de forma alguma limitar o escopo da invenção.

[00297] O composto da presente invenção pode ser administrado como uma composição farmacêutica por qualquer via convencional, particularmente por via entérica, por exemplo, por via oral, por exemplo, na forma de um comprimido ou cápsula; por via parenteral, por exemplo, na forma de uma preparação injetável ou uma suspensão; e por via tópica, por exemplo, na forma de uma loção, um gel, uma po- mada ou um creme, ou como uma composição farmacêutica na forma transnasal ou na forma de supositório. Uma composição farmacêutica compreendendo o composto da presente invenção em uma forma livre ou na forma de um sal farmaceuticamente aceitável em conjunto com pelo menos um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável pode ser produzida por um método de mistura, granulação ou revestimento de uma maneira convencional. Por exemplo, a composição oral pode ser um comprimido, uma preparação granular ou uma cápsula, cada uma contendo um excipiente, um agente desintegrante, um aglutinante, um agente lubrificante e semelhantes, assim como um ingrediente ativo e similares. Além disso, a composição para injeção pode ser preparada como uma solução ou suspensão, pode ser esterilizada e pode conter um conservante, um estabilizante, um agente tamponante e semelhantes.

APLICAÇÃO INDUSTRIAL

[00298] O composto de acordo com a presente invenção possui atividade inibidora de protease 3CL do coronavírus e considera-se que o composto seja útil como agente terapêutico e/ou agente profilático para uma doença ou uma condição associada às proteases 3CL do co- ronavírus.

Claims (12)

1. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende o composto representado pela Fórmula: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Inibidor de protease 3CL do coronavírus, caracterizado pelo fato de que compreende o composto, como definido na reivindicação 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Inibidor de replicação do coronavírus, caracterizado pelo fato de que compreende o composto, como definido na reivindicação 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

4. Inibidor de replicação do coronavírus, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que o coronavírus é um al- facoronavírus e/ou um betacoronavírus.

5. Inibidor de replicação do coronavírus, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que o coronavírus é SARS- CoV-2.

6. Uso de um composto, como definido na reivindicação 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que é na preparação de um medicamento e/ou uma composição e/ou um produto para tratamento e/ou prevenção de uma doença associada com a proteases 3CL do coronavírus.

7. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um cocristal que é do composto representado pela Fórmula (I-B): com ácido fumárico.

8. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 7, caracterizada pelo fato de que o composto representado pela Fórmula (I-B): e ácido fumárico estão presentes em uma relação molar de 1:1.

9. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que o cocristal é a Forma I de cocris- tal de ácido fumárico apresentando um padrão de difração de raios X em pó tendo picos em ângulos de difração (2θ): 9,5 ± 0,2°, 10,9 ± 0,2°, 18,6 ± 0,2°, 23,5 ± 0,2° e 24,6 ± 0,2°.

10. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que o cocristal é a Forma I de cocris- tal de ácido fumárico apresentando um padrão de difração de raios X em pó tendo picos em ângulos de difração (2θ): 7,8 ± 0,2°, 9,5 ± 0,2°, 10,1 ± 0,2°, 10,9 ± 0,2°, 13,8 ± 0,2°, 14,7 ± 0,2°, 18,6 ± 0,2°, 22,6 ± 0,2°, 23,5 ± 0,2° e 24,6 ± 0,2°.

11. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que o cocristal é a Forma I de cocris- tal de ácido fumárico apresentando um espectro Raman tendo picos espectrais Raman: 676,3 cm-1± 2 cm-1, 748,0 cm-1± 2 cm-1, 1029,3 cm-1± 2 cm-1, 1374,4 cm-1± 2 cm-1, 1515,5 cm-1± 2 cm-1, 1665,7 cm-1 ± 2 cm-1, 1715,7 cm-1± 2 cm-1e 1739,1 cm-1± 2 cm-1.

12. Uso de um cocristal, como definido em qualquer uma das reivindicações 7 a 11, caracterizado pelo fato de que é na preparação de um medicamento e/ou uma composição e/ou um produto para tratamento e/ou prevenção de uma doença associada com a proteases 3CL do coronavírus.