BR122018011748B1

BR122018011748B1 - Usos de compostos derivados de purinona

Info

Publication number: BR122018011748B1
Application number: BR122018011748-6A
Authority: BR
Inventors: Shingo Yamamoto; Toshio Yoshizawa
Original assignee: Ono Pharmaceutical Co. Ltd
Priority date: 2010-05-31
Filing date: 2011-05-30
Publication date: 2021-12-07

Abstract

A presente invenção refere-se a compostos representados pela fórmula geral (I) (todos os símbolos na fórmula estão de acordo com as definições na Descrição) que são compostos que, além de terem uma atividade inibitória seletiva para Btk, apresentam uma excelente estabilidade metabólica e podem evitar hepatotoxicidade ou semelhantes, e em consequência podem proporcionar agentes terapêuticos seguros para doenças nas quais participam células B ou mastócitos.

Description

Dividido do BR112012030711-8, depositado em 30.05.2011. CAMPO TÉCNICO

[001] A presente invenção se refere a compostos representados pela fórmula geral (I)

[002] (todos os símbolos na fórmula têm as mesmas definições que as dadas abaixo), isômeros ópticos dos mesmos ou sua mistura, sais dos mesmos, solvatos dos mesmos, N-óxidos dos mesmos, e profármacos dos mesmos (abreviados abaixo como "compostos da presente invenção").

ANTECEDENTES DA TÉCNICA

[003] A tirosina quinase de Bruton (abreviada abaixo como "Btk") pertence á família de quinases Tec, as quais são tirosina quinases não-receptoras, e é seletivamente expressada nas linhagens de células B e de mielócitos. A Btk tem um papel importante na transdução de sinal em células B e é um fator que contribui para a sobrevida, a diferenciação, a proliferação, e a ativação de células B. A sinalização em células B através do receptor antigênico de células B (BCR) induz uma ampla gama de reações biológicas, e transdução de sinal anormal aqui causa ativação anormal de células B e a formação de autoanticorpos patogênicos. Acredita-se que a Btk forme uma ligação nos caminhos de transdução de sinal mediada por BCR nas células B. Deste modo, sabe-se que a agamaglobulinemia ligada ao X (XLA) é causada por um defeito no gene Btk humano que resulta na indução de diferenciação anormal de células B e em um drástico declínio na produção de imunoglobulina (consultar o Documento Não patente 1). Os sintomas desta doença incluem um substancial declínio em células B no sangue periférico e uma suscetibilidade aumentada para infecções bacterianas. Também se sabe que a Btk participa na ativação de mastócitos e nas funções fisiológicas das plaquetas. Devido a isto, compostos que têm uma atividade inibitória de Btk são eficazes para o tratamento de doenças nas quais participam células B ou mastócitos, por exemplo, doenças alérgicas, doenças autoimunes, doenças inflamatórias, doenças tromboembólicas, e cânceres (consultar o Documento Não patente 2).

[004] Os compostos que se seguem são conhecidos como técnica anterior para os compostos da presente invenção.

[005] Compostos representados pela fórmula geral (A) são conhecidos como compostos que têm uma atividade inibitória de Btk

[006] (na fórmula, LaA representa CH2, O, NH, ou S; ArA representa arila substituída ou não substituída ou heteroarila substituída ou não substituída; YA representa qualquer substituinte selecionado entre alquila, heteroalquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila, e heteroarila; ZA representa CO, OCO, NHCO, ou CS; R7-A e R8-A cada um representam de modo independente H, C1-C4 alquila não substituída, C1-C4 alquila substituída, C1-C4 heteroalquila não substituída, C1-C4 heteroalquila substituída, C3-C6 cicloalquila não substituída, C3-C6 cicloalquila substituída, C2-C6 heterocicloalquila não substituída, e C2-C6 heterocicloalquila substituída; ou R7-A e R8-A juntos formam uma ligação; e R6-A representa H, C1-C4 alquila substituída ou não substituída, C1-C4 heteroalquila substituída ou não substituída, C1C6 alcoxialquila, C1-C8 alquilaminoalquila, C3-C6 cicloalquila substituída ou não substituída, ou arila substituída ou não substituída (as definições destes grupos foram extraídas)) (consultar os Documentos de Patente 1, 2, e 3).

[007] Por outro lado, por exemplo, compostos representados pela fórmula geral (B)

[008] (na fórmula, Q1B e Q2B são selecionados de modo independente entre CX1B, CX2B, e nitrogênio; Q3B representa N ou CH; X1B e X2B são selecionados de modo independente entre o grupo consistindo em hidrogênio, (C1-C6) alquila, ciano, halogeneto, e assim por diante; R1B é selecionado entre o grupo consistindo em hidrogênio e (C1-C6) alquila; yB representa 0 ou um número inteiro de 1 a 3; R2B e R3B são selecionados de modo independente entre hidrogênio e (C1C6) alquila; R4B é selecionado entre o grupo consistindo em alquila, heterociclila, arila, heteroarila, e assim por diante; e R5B é selecionado entre o grupo consistindo em alquila, heterociclila, e heterociclila substituída (as definições destes grupos foram extraídas)) (consultar o Documento de Patente 4) são conhecidos como compostos que têm um esqueleto de purinona.

[009] Compostos representados pela fórmula geral (C) também são conhecidos

[0010] (na fórmula, XC é selecionado entre o grupo consistindo em nitrogênio e CR8C; R8C é selecionado entre o grupo consistindo em hidrogênio, halogeneto, alquila substituída ou não substituída, e assim por diante; Q1C é selecionado entre o grupo consistindo em O, S, e assim por diante; ZC é selecionado entre o grupo consistindo em oxigênio, enxofre, e NY5C; Y5C é selecionado entre o grupo consistindo em hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, e assim por diante; Q2C, Q3C, e Q4C são selecionados de modo independente entre o grupo consistindo em hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída, e assim por diante; R2C é selecionado entre o grupo consistindo em hidrogênio e alquila substituída ou não substituída; e nC representa 0, 1, 2, 3, ou 4 (as definições destes grupos foram extraídas)) (consultar o Documento de Patente 5).

[0011] Compostos tendo um esqueleto de purinona também são revelados como fórmula 20 (consultar o parágrafo número (0028) no Documento de Patente 6).

[0012] Compostos representados pela fórmula geral (D) também são conhecidos

[0013] (na fórmula, R1D representa um grupo selecionado entre hidrogênio, alquila substituída ou não substituída

[0014] e assim por diante; R2D representa alquila substituída ou não substituída, alquenila substituída ou não substituída, ou alquinila substituída ou não substituída; YD representa um grupo selecionado entre O, C-NO2, e S; ZD representa um grupo selecionado entre

[0015] e assim por diante; aqui, AD, DD, ED, e MD, cada um, representam de modo independente CR12D, N, e N-óxido; R12D representa um grupo selecionado entre hidrogênio, halogeneto, amino, hidróxi, e ciano; XD representa um grupo selecionado entre O, C-NO2, e S; R6D representa um grupo selecionado entre cicloalquila substituída ou não substituída, heteroalquila substituída ou não substituída, e arila substituída ou não substituído; a indicação aD representada pela linha tracejada representa uma ligação única ou uma ligação dupla; e nD representa um número inteiro selecionado entre 0, 1, e 2) (consultar o Documento de Patente 7).

[0016] Os compostos da presente invenção são compostos que, além de terem uma atividade inibitória seletiva para Btk, apresentam uma excelente estabilidade metabólica e podem evitar uma atividade inibitória de CYP e reações adversas tais como, por exemplo, hepatotoxicidade; no entanto, não já nenhuma declaração ou sugestão com relação a estes aspectos característicos em qualquer um dos documentos da técnica anterior.

[0017] Documento de Patente 1: Tradução de pedido PCT Japonesa No. 2010-504324

[0018] Documento de Patente 2: WO 2008/121742

[0019] Documento de Patente 3: WO 2010/009342

[0020] Documento de Patente 4: WO 2008/060301

[0021] Documento de Patente 5: WO 2007/142755

[0022] Documento de Patente 6: Japanese Translation of PCT Application No. 2003-509427

[0023] Documento de Patente 7: WO 2003/037890

[0024] Documento Não patente 1: Nature, Volume 361, pp. 226 233, 1993

[0025] Documento Não patente 2: Anticancer Agents in Medicinal Chemistry, Volume 7, Number 6, pp. 624-632, 2007

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

[0026] De modo a proporcionar um agente terapêutico muito seguro para doenças nas quais participam células B e/ou mastócitos, um objetivo da presente invenção é desenvolver um composto que, além de ter uma atividade inibitória seletiva para Btk, apresenta uma excelente estabilidade metabólica e pode evitar hepatotoxicidade ou semelhantes.

[0027] De modo a realizar o objetivo acima, os presents inventores realizaram intensivas investigações direcionadas para descobrir compostos tendo uma atividade inibitória seletiva para Btk e consequentemente descobriram os compostos da presente invenção. Além disso, também se descobriu que estes compostos são compostos que apresentam uma excelente atividade metabólica e podem evitar hepatotoxicidade ou semelhantes, e a presente invenção foi realizada consequentemente.

[0028] Isto é, a presente invenção se refere a

[0029] [1] um composto representado pela fórmula geral (I)

[0030] (na fórmula, L representa (1) -O-, (2) -S-, (3) -SO-, (4) -SO2-(5) -NH-, (6) -C(O)-, (7) -CH2-O-, (8) -O-CH2-, (9) -CH2-, ou

[0031] (10) -CH(OH)-;

[0032] R1 representa (1) um átomo de halogeneto, (2) um grupo C1-4 alquila, (3) um grupo C1-4 alcóxi, (4) um grupo C1-4 haloalquila, ou (5) um grupo C1-4 haloalcóxi;

[0033] anel 1 representa um grupo cíclico de 4 a 7 membros, o qual pode ser substituído por a partir de um até cinco substituintes cada um selecionado de modo independente entre o grupo consistindo em (1) átomos de halogeneto, (2) grupos C1-4 alquila, (3) grupos C1-4 alcóxi, (4) nitrila, (5) grupos C1-4 haloalquila, e (6) grupos C1-4 haloalcóxi, em que quando dois ou mais substituintes estão presentes no anel 1, estes substituintes podem formar um grupo cíclico de 4 a 7 membros junto com os átomos no anel 1 aos quais estes substituintes são ligados;

[0034] anel 2 representa um heterociclo saturado de 4 a 7 membros, o qual pode ser substituído por a partir de um até três -K-R2;

[0035] K representa (1) uma ligação, (2) um C1-4 alquileno, (3) -C(O)-, (4) -C(O)-CH2-, (5) -CH2-C(O)-, (6) -C(O)O-, ou (7) -SO2- (em que a ligação à esquerda é ligada ao anel 2);

[0036] R2 representa (1) um grupo C1-4 alquila, (2) um grupo C2-4 alquenila, ou (3) um grupo C2-4 alquinila, cada um dos quais pode ser substituído por a partir de um até cinco substituintes cada um selecionado de modo independente entre o grupo consistindo em (1) NR3R4, (2) átomos de halogeneto, (3) CONR5R6, (4) CO2R7, e (5) OR8;

[0037] R3 e R4 cada um representam de modo independente (1) um átomo de hidrogênio, ou (2) um grupo C1-4 alquila a qual pode ser substituída por OR9 ou CONR10R11;

[0038] R3 e R4 podem, junto com o átomo de nitrogênio ao qual eles são ligados, formar um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros, o qual pode ser substituído por um grupo oxo ou por um grupo hidroxila;

[0039] R5 e R6 cada um representam de modo independente (1) um átomo de hidrogênio, (2) um grupo C1-4 alquila, ou (3) um grupo fenila;

[0040] R7 representa (1) um átomo de hidrogênio ou (2) um grupo C1-4 alquila;

[0041] R8 representa (1) um átomo de hidrogênio, (2) um grupo C1 4 alquila, (3) um grupo fenila, ou (4) um grupo benzotriazolila;

[0042] R9 representa (1) um átomo de hidrogênio ou (2) um grupo C1-4 alquila;

[0043] R10 e R11 cada um representam de modo independente (1) um átomo de hidrogênio ou (2) um grupo C1-4 alquila;

[0044] n representa um número inteiro de 0 a 4;

[0045] m representa um número inteiro de 0 a 2; e

[0046] quando n é dois ou mais, os R1's podem ser os mesmos que cada outro ou podem diferir um do outro),

[0047] um isômero óptico do mesmo ou sua mistura, um sal do mesmo, um solvato do mesmo, um N-óxido do mesmo, ou um profármaco do mesmo;

[0048] [2] o composto de acordo com [1] acima, em que R2 é um grupo C2-4 alquenil ou um grupo C2-4 alquinila, cada um dos quais pode ser substituído por a partir de um até cinco substituintes cada um selecionado de modo independente entre o grupo consistindo em (1) NR3R4, (2) átomos de halogeneto, (3) CONR5R6, (4) CO2R7, e (5) OR8;

[0049] [3] o composto de acordo com [1] acima, em que anel 1 é um anel benzeno, ciclo-hexano, ou piridina, cada um dos quais pode ser substituído por a partir de um até cinco substituintes cada um selecionado de modo independente entre o grupo consistindo em (1) átomos de halogeneto, (2) grupos C1-4 alquila, (3) grupos C1-4 alcóxi, (4) nitrila, e (5) CF3;

[0050] [4] o composto de acordo com [1] acima, em que anel 2 é um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros, o qual pode ser substituído por a partir de um até três -K-R2;

[0051] [5] o composto de acordo com [4] acima, em que o heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros é um anel azetidina, pirrolidina, ou piperidina;

[0052] [6] o composto de acordo com [1] acima, representado pela fórmula geral (I-1)

[0053] (na fórmula, anel 1-1 representa um anel benzeno, ciclo-hexano, ou piridina, cada um dos quais pode ser substituído por a partir de um até cinco substituintes cada um selecionado de modo independente entre o grupo consistindo em (1) átomos de halogeneto, (2) grupos C1-4 alquila, (3) grupos C1-4 alcóxi, (4) nitrila, e (5) CF3, e anel 2-1 representa um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros, o qual pode ser substituído por a partir de um até três -K-R2, em que os outros símbolos têm as mesmas definições que as acima);

[0054] [7] o composto de acordo com [6] acima, em que R2 é um grupo C2-4 alquenil ou um grupo C2-4 alquinila, cada um dos quais pode ser substituído por a partir de um até cinco substituintes cada um selecionado de modo independente entre o grupo consistindo em (1) NR3R4, (2) átomos de halogeneto, (3) CONR5R6, (4) CO2R7, e (5) OR8;

[0055] [8] o composto de acordo com [1] acima, o qual é (1) 9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8- ona, (2) 6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, (3) 9-[(1-acriloil-4-piperidinil)metil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H- purin-8-ona, (4) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(4- fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, (5) 6-amino-9-{(3S)-1-[(2E)-4- (dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro- 8H-purin-8-ona, (6) 6-amino-7-[4-(3-clorofenóxi)fenil]-9-{(3R)-1-[(2E)-4- (dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, (7) 6-amino-9-[1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H- purin-8-ona, ou (8) 6-amino-9-{1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3- pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, ou um isômero óptico do mesmo ou sua mistura;

[0056] [9] uma composição farmacêutica compreendendo um composto representado pela fórmula geral (I) de acordo com [1] acima, um isômero óptico do mesmo ou sua mistura, um sal do mesmo, um solvato do mesmo, um N-óxido do mesmo, ou um profármaco do mesmo;

[0057] [10] a composição farmacêutica de acordo com [9] acima, que é um inibidor de Btk;

[0058] [11] a composição farmacêutica de acordo com [9] acima, que é um agente profilático e/ou um agente terapêutico para uma doença relacionada com Btk;

[0059] [12] a composição farmacêutica de acordo com [11] acima, em que a doença relacionada com Btk é uma doença alérgica, uma doença autoimune, uma doença inflamatória, uma doença tromboembólica, ou um câncer;

[0060] [13] a composição farmacêutica de acordo com [12] acima, em que o câncer é um linfoma não-Hodgkin;

[0061] [14] a composição farmacêutica de acordo com [9] acima, o qual é um inibidor da ativação de células B;

[0062] [15] um método para prevenir e/ou tratar uma doença relacionada com Btk, compreendendo a administração a um mamífero de uma quantidade eficaz de um composto representado pela fórmula geral (I) de acordo com [1] acima, um isômero óptico do mesmo ou sua mistura, um sal do mesmo, um solvato do mesmo, um N-óxido do mesmo, ou um profármaco do mesmo;

[0063] [16] um composto representado pela fórmula geral (I) de acordo com [1] acima, um isômero óptico do mesmo ou sua mistura, um sal do mesmo, um solvato do mesmo, um N-óxido do mesmo, ou um profármaco do mesmo, para prevenir e/ou tratar uma doença relacionada com Btk; e

[0064] [17] uso de um composto representado pela fórmula geral (I) de acordo com [1] acima, um isômero óptico do mesmo ou sua mistura, um sal do mesmo, um solvato do mesmo, um N-óxido do mesmo, ou um profármaco do mesmo, para produzir um agente para prevenir e/ou tratar uma doença relacionada com Btk.

[0065] Os compostos da presente invenção, além de terem uma atividade inibitória seletiva para Btk, apresentam uma excelente estabilidade metabólica e podem evitar hepatotoxicidade ou semelhantes, e em consequência são úteis como agentes terapêuticos muito seguros para doenças nas quais participam células B e/ou mastócitos, tais como linfoma não-Hodgkin.

MELHOR MODO PARA REALIZAR A INVENÇÃO

[0066] A presente invenção é descrita em detalhes abaixo.

[0067] Na presente invenção, "tendo uma atividade inibitória seletiva para Btk" denota tendo uma atividade inibitória seletiva para Btk com respeito a tirosina quinases não-Btk e particularmente proteína tirosina quinase linfócito-específica (Lck), proteína tirosina quinase fyn (Fyn), e oncogene homólogo isoforma A relacionado com o sarcoma viral de Yamaguchi v-yes-1 (LynA). Esta propriedade torna possível evitar reações adversas imprevisíveis causadas pela inibição de outras tirosina quinases. Por exemplo, o aparecimento de anormalidades retinais é conhecido em camundongos deficientes de Lck (Oncogene, Volume 16, pp. 2351-2356, 1998), o que aumenta a possibilidade de que reações adversas venham a ser causadas no olho no evento de uma inibição de Lck.

[0068] Na presente invenção, o átomo de halogeneto denota flúor, cloro, bromo, e iodo.

[0069] Na presente invenção, o grupo C1-4 alquila denota grupos C1-4 alquila de cadeia reta e de cadeia ramificada, por exemplo, metila, etila, propila, isopropila, butila, sec-butila, e terc-butila.

[0070] Na presente invenção, o grupo C1-4 alquileno denota metilene, etileno, propileno, butileno, e seus isômeros.

[0071] Na presente invenção, o grupo C1-4 alcóxi denota grupos C1 4 alcóxi de cadeia reta e de cadeia ramificada, por exemplo, metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, butóxi, isobutilóxi, e terc-butóxi.

[0072] Na presente invenção, o grupo C2-4 alquenil denota grupos C2-4 alquenil de cadeia reta e de cadeia ramificada, por exemplo, etenila, 1-propenila, 2-propenila, 1-butenila, 2-butenila, 3-butenila, e 1,3-butadienila.

[0073] Na presente invenção, o grupo C2-4 alquinil denota grupos C2-4 alquinil de cadeia reta e de cadeia ramificada, por exemplo, etinila, 1-propinila, 2-propinila, 1-butinila, 2-butinila, 3-butinila, e 1,3- butadiinila.

[0074] Na presente invenção, o grupo C1-4 haloalquil denota um grupo proporcionado por substituição de um ou dois ou mais átomos de halogeneto em um grupo C1-4 alquila, e podem ser exemplificados por um grupo fluorometila, um grupo clorometila, um grupo bromometila, um grupo iodometila, um grupo difluorometila, um grupo trifluorometila, um grupo 1-fluoroetila, um grupo 2-fluoroetila, um grupo 2-cloroetila, um grupo pentafluoroetila, um grupo 1-fluoropropila, um grupo 2-chloropropila, um grupo 3-fluoropropila, um grupo 3- cloropropila, um grupo 4,4,4-trifluorobutila, e um grupo 4-bromobutila.

[0075] Na presente invenção, o grupo C1-4 haloalcóxi denota um grupo proporcionado por substituição de um ou dois ou mais átomos de halogeneto em um grupo C1-4 alcóxi, e podem ser exemplificados por um grupo trifluorometóxi, um grupo triclorometóxi, um grupo clorometóxi, um grupo bromometóxi, um grupo fluorometóxi, um grupo iodometóxi, um grupo difluorometóxi, um grupo dibromometóxi, um grupo 2-cloroetóxi, um grupo 2,2,2-trifluoroetóxi, um grupo 2,2,2- tricloroetóxi, um grupo 3-bromopropóxi, um grupo 3-chloropropóxi, um grupo 2,3-dicloropropóxi, um grupo 1-fluorobutóxi, um grupo 4- fluorobutóxi, e um grupo 1-clorobutóxi.

[0076] Na presente invenção, o grupo cíclico de 4 a 7 membros denota um anel C4-7 carbocíclico ou um heterociclo de 4 a 7 membros.

[0077] Na presente invenção, o anel C4-7 carbocíclico denota um anel carbocíclico alifático ou aromático monocíclico C4-7. O sistema alifático pode ser parcialmente ou completamente saturado. São exemplos aqui ciclobutano, ciclopentano, ciclo-hexano, ciclo-heptano, ciclopenteno, ciclo-hexeno, ciclo-hepteno, ciclobutadieno,ciclopentadieno, ciclo-hexadieno, ciclo-heptadieno, e benzeno.

[0078] Na presente invenção, o anel C5-6 carbocíclico denota um anel carbocíclico alifático ou aromático monocíclico C5-6. O sistema alifático pode ser parcialmente ou completamente saturado. São exemplos aqui ciclopentano, ciclo-hexano, ciclopenteno, ciclo-hexeno, ciclopentadieno, ciclo-hexadieno, e benzeno.

[0079] Na presente invenção, o heterociclo de 4 a 7 membros denota um heterociclo insaturado de 4 a 7 membros ou um heterociclo saturado de 4 a 7 membros.

[0080] Na presente invenção, o heterociclo insaturado de 4 a 7 membros denota um heterociclo monocíclico insaturado de 4 a 7 membros que contém a partir de um até cinco heteroátomos selecionados entre o átomo de oxigênio, o átomo de nitrogênio, e o átomo de enxofre, e podem ser exemplificados por pirrol, imidazol, triazol, tetrazol, pirazol, piridina, pirazina, pirimidina, piridazina, azepina, diazepina, furano, pirano, oxepina, tiofeno, tiopirano, tiepina, oxazol, isoxazol, tiazol, isotiazol, furazan, oxadiazol, oxazina, oxadiazina, oxazepina, oxadiazepina, tiadiazol, tiazina, tiadiazina, tiazepina, e tiadiazepina.

[0081] Na presente invenção, o heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros denota um heterociclo monocíclico de 4 a 7 membros parcialmente ou completamente saturado que contém de um a cinco heteroátomos cada um selecionado de modo independente entre o átomo de oxigênio, o átomo de nitrogênio, e o átomo de enxofre, e pode ser exemplificado por azetidina, pirrolina, pirrolidina, imidazolina, imidazolidina, triazolina, triazolidina, tetrazolina, tetrazolidina, pirazolina, pirazolidina, di-hidropiridina, tetra-hidropiridina, piperidina, di-hidropirazina, tetra-hidropirazina, piperazina, di- hidropirimidina, tetra-hidropirimidina, peridropirimidina, di-hidropiridazina, tetra-hidropiridazina, peridropiridazina, di-hidroazepina, tetra-hidroazepina, peridroazepina, di-hidrodiazepina, tetra-hidrodiazepina, peridrodiazepina, oxetano, di-hidrofurano, tetra- hidrofurano, di-hidropirano, tetra-hidropirano, di-hidrooxepina, tetra- hidrooxepina, peridrooxepina, tietane, di-hidrotiofeno, tetra- hidrotiofeno, di-hidrotiopirano, tetra-hidrotiopirano, di-hidrotiepina, tetra-hidrotiepina, peridrotiepina, di-hidrooxazol, tetra-hidrooxazol (oxazolidina), di-hidroisoxazol, tetra-hidroisoxazol (isoxazolidina), di- hidrotiazol, tetra-hidrotiazol (tiazolidina), di-hidroisotiazol, tetra- hidroisotiazol (isotiazolidina), di-hidrofurazan, tetra-hidrofurazano, di- hidrooxadiazol, tetra-hidrooxadiazol (oxadiazolidina), di-hidrooxazina, tetra-hidrooxazina, di-hidrooxadiazina, tetra-hidrooxadiazina, di- hidrooxazepina, tetra-hidrooxazepina, peridrooxazepina, di-hidrooxadiazepina, tetra-hidrooxadiazepina, peridrooxadiazepina, di- hidrotiadiazol, tetra-hidrotiadiazol (tiadiazolidina), di-hidrotiazina, tetra- hidrotiazina, di-hidrotiadiazina, tetra-hidrotiadiazina, di-hidrotiazepina, tetra-hidrotiazepina, peridrotiazepina, di-hidrotiadiazepina, tetra- hidrotiadiazepina, peridrotiadiazepina, morfolina, tiomorfolina, oxatiane, dioxolane, dioxana, ditiolane, e ditiane.

[0082] Na presente invenção, o heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros se refere aos heterociclos saturados de 4 a 7 membros que necessariamente contêm no mínimo um átomo de nitrogênio. Exemplos são azetidina, pirrolina, pirrolidina, imidazolina, imidazolidina, triazolina, triazolidina, tetrazolina, tetrazolidina, pirazolina, pirazolidina, di-hidropiridina, tetra-hidropiridina, piperidina, di-hidropirazina, tetra-hidropirazina, piperazina, di-hidropirimidina, tetra-hidropirimidina, peridropirimidina, di-hidropiridazina, tetra- hidropiridazina, peridropiridazina, di-hidroazepina, tetra-hidroazepina, peridroazepina, di-hidrodiazepina, tetra-hidrodiazepina,peridrodiazepina, di-hidrooxazol, tetra-hidrooxazol (oxazolidina), di- hidroisoxazol, tetra-hidroisoxazol (isoxazolidina), di-hidrotiazol, tetra- hidrotiazol (tiazolidina), di-hidroisotiazol, tetra-hidroisotiazol(isotiazolidina), di-hidrofurazan, tetra-hidrofurazan, di-hidrooxadiazol, tetra-hidrooxadiazol (oxadiazolidina), di-hidrooxazina, tetra- hidrooxazina, di-hidrooxadiazina, tetra-hidrooxadiazina, di-hidrooxazepina, tetra-hidrooxazepina, peridrooxazepina, di-hidrooxadiazepina, tetra-hidrooxadiazepina, peridrooxadiazepina, di- hidrotiadiazol, tetra-hidrotiadiazol (tiadiazolidina), di-hidrotiazina, tetra- hidrotiazina, di-hidrotiadiazina, tetra-hidrotiadiazina, di-hidrotiazepina, tetra-hidrotiazepina, peridrotiazepina, di-hidrotiadiazepina, tetra- hidrotiadiazepina, peridrotiadiazepina, morfolina, e tiomorfolina.

[0083] Os heterociclos saturados nitrogenosos de 4 a 6 membros podem ser exemplificados na presente invenção por azetidina, pirrolina, pirrolidina, imidazolina, imidazolidina, triazolina, triazolidina, tetrazolina, tetrazolidina, pirazolina, pirazolidina, di-hidropiridina, tetra- hidropiridina, piperidina, di-hidropirazina, tetra-hidropirazina, piperazina, di-hidropirimidina, tetra-hidropirimidina, peridropirimidina, di-hidropiridazina, tetra-hidropiridazina, peridropiridazina, di- hidrooxazol, tetra-hidrooxazol (oxazolidina), di-hidroisoxazol, tetra- hidroisoxazol (isoxazolidina), di-hidrotiazol, tetra-hidrotiazol (tiazolidina), di-hidroisotiazol, tetra-hidroisotiazol (isotiazolidina), di- hidrofurazan, tetra-hidrofurazan, di-hidrooxadiazol, tetra-hidrooxadiazol (oxadiazolidina), di-hidrooxazina, tetra-hidrooxazina, di-hidrooxadiazina, tetra-hidrooxadiazina, di-hidrotiadiazol, tetra- hidrotiadiazol (tiadiazolidina), di-hidrotiazina, tetra-hidrotiazina, di- hidrotiadiazina, tetra-hidrotiadiazina, morfolina, e tiomorfolina.

[0084] L na presente invenção é preferencialmente -O-, -CH2--O-, - O-CH2-, -NH-, -C(O)-, -CH2-, ou -CH(OH)-.

[0085] R1 na presente invenção é preferencialmente um átomo de halogeneto ou um grupo C1-4 alcóxi.

[0086] O grupo cíclico de 4 a 7 membros para anel 1 na presente invenção é preferencialmente um anel C5-6 carbocíclico ou um heterociclo insaturado de 4 a 7 membros e é mais preferencialmente um anel benzeno, ciclo-hexano, ou piridina.

[0087] O heterociclo saturado de 4 a 7 membros para anel 2 na presente invenção é preferencialmente um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros, é mais preferencialmente um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 6 membros, é ainda mais preferencialmente um anel azetidina, pirrolidina, ou piperidina ring, e de modo particularmente preferencial é um anel azetidina ou pirrolidina.

[0088] K na presente invenção é preferencialmente uma ligação ou -C(O)-.

[0089] R2 na presente invenção é preferencialmente um grupo C2-4 alquenil ou um grupo C2-4 alquinila, cada um dos quais pode ser substituído por a partir de um até cinco substituintes cada um selecionado de modo independente entre o grupo consistindo em (1) NR3R4, (2) átomos de halogeneto, (3) CONR5R6, (4) CO2R7, e (5) OR8.

[0090] m na presente invenção é preferencialmente 0 ou 1 e mais preferencialmente é 0.

[0091] Qualquer combinação dos grupos preferenciais individuais proporcionados como exemplos acima e selecionados entre L, R1, anel 1, anel 2, K, R2, e m tamtém é preferencial na presente invenção.

[0092] Compostos representados pela fórmula geral (I-1)

[0093] (todos os símbolos na fórmula têm as mesmas definições que as acima) são preferenciais na presente invenção entre compostos com fórmula geral (I).

[0094] R1 na fórmula geral (I-1) é preferencialmente um átomo de halogeneto ou um grupo C1-4 alcóxi.

[0095] O anel 1-1 na fórmula geral (I-1) é preferencialmente um anel benzeno.

[0096] O heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros para anel 2-1 na fórmula geral (I-1) é preferencialmente um anel azetidina, pirrolidina, ou piperidina e mais preferencialmente é um anel azetidina ou pirrolidina.

[0097] Com respeito ao substituinte -K-R2- no anel 2-1 na formula geral (I-1), K é preferencialmente uma ligação ou -C(O)- e R2 é preferencialmente um grupo C2-4 alquenila ou um grupo C2-4 alquinila, cada um dos quais pode ser substituído por a partir de um até cinco substituintes cada um selecionado de modo independente entre o grupo consistindo em (1) NR3R4, (2) átomos de halogeneto, (3) CONR5R6, (4) CO2R7, e (5) OR8.

[0098] m na fórmula geral (I-1) é preferencialmente 0 ou 1 e mais preferencialmente é 0.

[0099] Qualquer combinação dos grupos preferenciais individuais proporcionados como exemplos acima tamtém é preferencial para a fórmula geral (I-1).

[Isômeros]

[00100] A presente invenção engloba todos os isômeros, a menos que especificamente indicado de modo diverso. Por exemplo, os grupos alquila incluem tanto grupos alquil de cadeia reta quanto grupos alquila de cadeia ramificada. Além disso, todos os seguintes estão incluídos na presente invenção: isômeros geométricos (configuração E, configuração Z, configuração cis, configuração trans) para ligações duplas, anéis, e anéis condensados; isômeros ópticos devidos, por exemplo, à presença de um átomo de carbono assimétrico (configurações R e S, posições α e β, enantiômeros, diastereômeros); formas oticamente ativas que apresentam rotação óptica (configurações D, L, d, e l); formas polares geradas por separação cromatográfica (formas de alta polaridade, formas de baixa polaridade); compostos de equilíbrio; isômeros rotacionais; misturas dos precedentes em quaisquer proporções; e misturas racêmicas. A presente invenção também enbloba todos os isômeros que surgem devido a tautômeros.

[00101] Além disso, um isômero óptico na presente invenção se refere não somente ao isômero óptico 100% puro, mas também pode incluir outro isômero óptico a menos de 50%.

[00102] Na presente invenção, a menos que especificamente determinado de modo diverso, e conforme é evidente para o indivíduo versado na técnica, o símbolo

[00103] representa ligação em direção ao lado posterior do plano do papel (isto é, a posição a); o símbolo

[00104] representa ligação em direção ao lado frontal do plano do papel (isto é, a posição β); e

[00105] representa a posição a, a posição β, ou sua mistura em qualquer proporção.

[00106] Os compostos representados pela fórmula geral (I) são convertidos nos sais correspondentes por meio de métodos conhecidos. O sal é preferencialmente um sal solúvel em água. Sais adequados podem ser exemplificados pelos sais com metais de álcali (potássio, sódio, e assim por diante), sais com metais terrosos alcalinos (cálcio, magnésio, e assim por diante), o sal de amônio, sais com aminas orgânicas farmaceuticamente aceitáveis (tetrametilamônio, trietilamina, metilamina, dimetilamina, ciclopentilamina, benzilamina, fenetilamina, piperidina,monoetanolamina, dietanolamina, tris(hidroximetil)aminometano, lisina, arginina, N-metil-D-glucamina, e assim por diante), e sais de adição de ácido (sais de ácidos inorgânicos (o cloridrato, o hidrobrometo, o hidroiodeto, o sulfato, o fosfato, o nitrato, e assim por diante) e sais de ácidos orgânicos (o acetato, o trifluoroacetato, o lactato, o tartrato, o oxalato, o fumarato, o maleato, o benzoato, o citrato, o metanossulfonato, o etanossulfonato, o benzenosulfonato, o toluenossulfonato, o isetionato, o glucuronato, o gluconato, e assim por diante)).

[00107] Os compostos representados pela fórmula geral (I) e seus sais também podem ser convertidos em solvatos. Este solvato preferencialmente é solúvel em água e tem uma baixa toxicidade. Solvatos adequados podem ser exemplificados por solvatos com, por exemplo, água ou um álcool solvente (por exemplo, etanol).

[00108] Um profármaco de um composto representado pela fórmula geral (I) denota um composto que é convertido por uma reação in vivo, por exemplo, por uma enzima ou ácido gástrico, no composto representado pela fórmula geral (I). Profármacos dos compostos com fórmula geral (I) podem ser exemplificadas por compostos nos quais - quando o composto representado pela fórmula geral (I) tem um grupo hidroxila - este grupo hidroxila é acilado, alquilado, fosfatado, ou borado (por exemplo, compostos proporcionados pela acetilação, palmitoilação, propanoilação, pivaloilação, succinilação, fumarilação, alanilação, ou dimetilaminometilcarbonilação do grupo hidroxila nos compostos da invenção); outros exemplos são compostos proporcionados pela esterificação ou pela amidação de um grupo carboxila em um composto representado pela fórmula geral (I) (por exemplo, compostos proporcionados pela esterificação de etila, esterificação de isopropila, esterificação de fenila, esterificação de carboximetila, esterificação de dimetilaminometila, esterificação de pivaloiloximetila, esterificação de etoxicarboniloxietila, esterificação de ftalidila, esterificação de (5-metil-2-oxo-1,3-dioxolen-4-il)metila, esterificação de ciclo-hexiloxicarboniletila, ou pela metilamidação de um grupo carboxila em um composto representado pela fórmula geral (I)). Estes compostos podem ser preparados por métodos conhecidos. Além disso, o profármaco de um composto representado pela fórmula geral (I) pode ser um hidrato ou anídrica. O profármaco de um composto representado pela fórmula geral (I) é convertida sob condições fisiológicas no composto representado pela fórmula geral (I), conforme descrito às páginas 163 a 198 de Molecular Design in Volume 7 of Development of Medicines (Hirokawa Shoten Co., 1990). Além disso, os compostos representados pela fórmula geral (I) podem ser etiquetados com um isótopo (por exemplo, 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 35S, 18F, 36Cl, 123I, e 125I).

Métodos para produzir os compostos da presente invenção

[00109] Os compostos da presente invenção podem ser produzidos modificando e combinando convenientemente métodos conhecidos, por exemplo, os métodos descritos em Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, 2nd Edition (Richard C. Larock, John Wiley & Sons Inc., 1999), ou os métodos dados nos exemplos.

[00110] Entre os compostos representados pela fórmula geral (I), compostos nos quais o anel 2 é um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros não substituído, isto é, compostos representados pela fórmula geral (I-A)

[00111] (na fórmula, anel 2a representa um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros não substituído, ao passo que os outros símbolos têm as mesmas definições que as acima), podem ser produzidos usando o esquema de reação 1 que se segue.

[00112] (Nas fórmulas, T1 e T2 cada um representam de modo independente um grupo de proteção para o grupo amino (por exemplo, o grupo benzila (Bn), o grupo 4-metoxibenzila, e o grupo 3,4- dimetoxibenzila); X1 e X2 cada um representam de modo independente um átomo de halogeneto; anel 2-1 representa um anel 2a que tenha sido protegido por um grupo de proteção representado por T3 (por exemplo, o grupo terc-butoxicarbonila (Boc) e o grupo benziloxicarbonila (Cbz)); e os outros símbolos têm as mesmas definições que as acima).

[00113] A reação 1 no esquema de reação 1 é conhecida e é realizada usando um composto com fórmula geral (a) e um derivado de amina protegido, isto é, um composto representado por T1T2-NH (T1 e T2 na fórmula têm as mesmas definições que as acima) e realizando a reação em um solvente orgânico (por exemplo, diclorometano, tetra- hidrofurano, dioxana, dimetilformamida, dimetilacetamida, e 1-metil-2- pirrolidona) na presença de uma base (por exemplo, trietilamina, N,N- di-isopropiletilamina, piridina, 4-dimetilaminopiridina, e N- metilmorfolina) em uma temperatura a partir de -20°C até a temperatura ambiente.

[00114] A reação 2 no esquema de reação 1 é conhecida e é realizada usando um composto com fórmula geral (b) e um composto representado pela fórmula geral (II) e realizando a reação em um solvente orgânico (por exemplo, dioxana, acetonitrila, tetra- hidrofurano, dimetilformamida, dimetilacetamida, e 1-metil-2- pirrolidona) na presença de uma base (por exemplo, trietilamina, N,N- di-isopropiletilamina, piridina, 4-dimetilaminopiridina, e N- metilmorfolina) em uma temperatura a partir de -20°C até 70°C.

[00115] A reação 3 no esquema de reação 1 é conhecida e é realizada usando um composto representado pela fórmula geral (c) e usando um reagente de metal (por exemplo, zinco, ferro, estanho, cloreto de estanho, cloreto de ferro, samário, índio, e boroidreto de sódio - cloreto de níquel) em um solvente miscível em água (por exemplo, etanol, metanol, tetra-hidrofurano, e acetato de etila) na presença ou ausência de um ácido (por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, cloreto de amônio, ácido acético, e formato de amônio) em uma temperatura de 0°C a 150°C.

[00116] A reação 4 no esquema de reação 1 é conhecida e é realizada usando um composto representado pela fórmula geral (d) e usando um reagente (por exemplo, 1,1'-carbonildiimidazol (CDI) e trifosgênio) em um solvente orgânico (por exemplo, tetra-hidrofurano, dimetilformamida, e dimetilacetamida) na presença ou ausência de uma base (por exemplo, trietilamina, N,N-di-isopropiletilamina, piridina, 4-dimetilaminopiridina, e N-metilmorfolina) em a partir de uma temperatura gerada por refriamento com gelo até a temperatura de refluxo.

[00117] As reações de desproteção para os grupos de proteção no esquema de reação 1 são conhecidas e podem ser realizadas por meio dos métodos descritos abaixo. São exemplos aquis (1) reações de desproteção à base de hidrólise alcalina, (2) reações de desproteção sob condições acidíferas, (3) reações de desproteção à base de hidrogenólise, (4) reações de desproteção para o grupo silila, (5) reações de desproteção usando um metal, e (6) reações de desproteção usando um complexo metálico.

[00118] Estes métodos são especificamente descritos abaixo.

[00119] (1) A reação de desproteção à base de hidrólise alcalina pode ser realizada, por exemplo, em um solvente orgânico (por exemplo, metanol, tetra-hidrofurano, e dioxana) em a partir de 0°C até 40°C usando um hidróxido de metal de álcali (por exemplo, hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, e hidróxido de lítio), um hidróxido de metal terroso alcalino (por exemplo, hidróxido de bário e hidróxido de cálcio), ou um carbonato (por exemplo, carbonato de sódio e carbonato de potássio), ou uma solução aquosa dos precedentes, ou sua mistura.

[00120] (2) A reação de desproteção sob reações acidíferas pode ser realizada, por exemplo, em a partir de 0°C até 100°C na presença ou ausência de 2,2,2-trifluoroetanol, em um solvente orgânico (por exemplo, diclorometano, clorofórmio, dioxana, acetato de etila, metanol, álcool isopropílico, tetra-hidrofurano, e anisol) e em um ácido orgânico (por exemplo, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido metanossulfônico, e p-tosilato) ou em um ácido inorgânico (por exemplo, ácido clorídrico e ácido sulfúrico) ou sua mistura (por exemplo, brometo de hidrogênio / ácido acético).

[00121] (3) A reação de desproteção à base de hidrogenólise pode ser realizada, por exemplo, em 0°C a 200°C em um solvente (por exemplo, um éter (por exemplo, tetra-hidrofurano, dioxana, dimetoxietano, e éter dietílico), um álcool (por exemplo, metanol e etanol), um solvente de benzeno (por exemplo, benzeno e tolueno), uma cetona (por exemplo, acetona e metil etil cetona), uma nitrila (por exemplo, acetonitrila), uma amida (por exemplo, N,N-dimetilformamida), água, acetato de etila, ácido acético, ou um solvente misto de dois ou mais dos precedentes) na presença de um catalisador (por exemplo, paládio-carbono, negro de paládio, hidróxido de paládio -carbono, óxido de platina, e níquel Raney) em uma atmosfera de hidrogênio em pressão normal ou em pressão elevada ou na presença de formato de amônio.

[00122] (4) A reação de desproteção para o grupo silila pode ser realizada, por exemplo, em 0°C a 40°C em um solvente orgânico miscível em água (por exemplo, tetra-hidrofurano e acetonitrila) usando fluoreto de tetrabutilamônio. Também pode ser realizada, por exemplo, em -10°C a 100°C em um ácido orgânico (por exemplo, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido metanossulfônico, e p- tosilato) ou em um ácido inorgânico (por exemplo, ácido clorídrico e ácido sulfúrico) ou sua mistura (por exemplo, brometo de hidrogênio / ácido acético).

[00123] (5) A reação de desproteção usando um metal pode ser realizada, por exemplo, em 0°C até 40°C em um solvente acidífero (por exemplo, ácido acético, um tampão com um pH de 4,2 a 7,2, ou uma solução mista das soluções precedentes com um solvente orgânico tal como tetra-hidrofurano) na presença de pó de zinco e conforme necessário ao mesmo tempo que aplicando ultrassom.

[00124] (6) A reação de desproteção usando um complexo metálico pode ser realizada, por exemplo, em 0°C até 40°C em um solvente orgânico (por exemplo, diclorometano, N,N-dimetilformamida, tetra- hidrofurano, acetato de etila, acetonitrila, dioxana, e etanol), água, ou suas soluções mistas, usando um complexo metálico (por exemplo, tetrakis(trifenilfosfina)paládio(0), dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio(II), acetato de paládio(II), e cloreto de tris(trifenilfosfina)ródio(I)) na presença de um reagente de captura (por exemplo, hidreto de tributilestanho, trietilsilano, dimedona, morfolina, dietilamina, e pirrolidona), um ácido orgânico (por exemplo, ácido acético, ácido fórmico, e ácido 2-etilhexanóico), e/ou um sal de ácido orgânico (por exemplo, 2-etilhexanoato de sódio e 2-etilhexanoato de potássio) e na presença ou ausência de um reagente do tipo de fosfina (por exemplo, trifenilfosfina).

[00125] Além dos precedentes, a reação de desproteção também pode ser realizada usando os métodos descritos em, por exemplo, T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York, 1999.

[00126] O grupo de proteção para um grupo amino pode ser exemplificado pelo grupo benziloxicarbonila, pelo grupo t- butoxicarbonila, pelo grupo aliloxicarbonil (Alloc), pelo grupo 1-metil-1- (4-bifenil)etoxicarbonila (Bpoc), pelo grupo trifluoroacetila, pelo grupo 9-fluorenilmetoxicarbonila, pelo grupo benzila (Bn), pelo grupo p- metoxibenzila, pelo grupo benziloximetila (BOM), e pelo grupo 2- (trimetilsilil)etoximetila (SEM).

[00127] Além dos precedentes, o grupo de proteção para um grupo amino pode ser qualquer grupo capaz de uma eliminação fácil e seletiva e não é particularmente limitado de modo diverso. Por exemplo, podem ser usados os grupos descritos em T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York, 1999.

[00128] A reação 5 no esquema de reação 1 é conhecida e é realizada usando um composto com fórmula geral (f) e um composto representado pela fórmula geral (III-1) ou fórmula geral (III-2) e realizando a reação em a partir de temperatura ambiente até 120°C em um solvente orgânico (por exemplo, diclorometano e acetonitrila) na presença de uma base (por exemplo, piridina, trietilamina, e N,N-di- isopropiletilamina), um sal de cobre (por exemplo, acetato de cobre(II)), e um agente de secagem (por exemplo, peneira molecular).

[00129] Entre compostos com fórmula geral (I), compostos nos quais anel 2 é um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros que é substituído por no mínimo um -K-R2 em que K representa C(O) e R2 representa um grupo C1-4 alquileno ou um grupo C2-4 alquenileno o qual pode ser substituído por halogeneto, isto é, compostos representados pela fórmula geral (I-B)

[00130] (na fórmula, anel 2b representa um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros substituído por -Kb-R2b; Kb representa - C(O)-; R2b representa um grupo C1-4 alquileno ou um grupo C2-4 alquenileno o qual pode ser substituído por halogeneto; e os outros símbolos têm as mesmas definições que as acima), podem ser produzidos usando um composto com fórmula geral (I-A), o qual pode ser produzido pelo esquema de reação 1, e um composto representado pela fórmula geral (I-B-1)

[00131] (na fórmula, Xb representa um átomo de halogeneto e R2b tem a mesma definição que acima) e realizando uma reação em uma temperatura a partir de 0°C até a temperatura ambiente em um solvente orgânico (por exemplo, diclorometano, clorofórmio, dimetilformamida, dimetilacetamida, éter dietílico, e tetra-hidrofurano) na presença de uma base (por exemplo, trietilamina, piridina, N,N-di- isopropiletilamina, 4-dimetilaminopiridina, e N-metilmorfolina).

[00132] Entre compostos com fórmula geral (I), compostos nos quais anel 2 é um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros substituído por no mínimo um -K-R2 em que K representa C(O) e R2 representa um grupo C1-4 alquileno ou um grupo C2-4 alquenileno o qual pode ser substituído por NR3R4, isto é, compostos com fórmula geral (I-C)

[00133] (na fórmula, anel 2c representa um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros substituído por -Kb-R2c; R2c representa um grupo C1-4 alquileno ou um grupo C2-4 alquenileno o qual pode ser substituído por NR3R4; e os outros símbolos têm as mesmas definições que as acima), podem ser produzidos reagindo um composto representado pela fórmula geral (I-C-2)

[00134] (todos os símbolos na fórmula são definidos como acima) em a partir de temperatura ambiente até 120°C em um solvente orgânico (por exemplo, tetra-hidrofurano, dioxana, acetonitrila, dimetilformamida, dimetilacetamida, e 1-metil-2-pirrolidona) com o composto obtido por reação de um composto representado pela fórmula geral (I-A) com um composto representado pela fórmula geral (I-C-1)

[00135] (na fórmula, Xc-1 e Xc-2 cada um representam de modo independente um átomo de halogeneto e R2c-1 representa um grupo Ci-4 alquileno ou um grupo C2-4 alquenileno) a 0°C ou menos em um solvente orgânico (por exemplo, diclorometano, clorofórmio, dimetilformamida, dimetilacetamida, éter dietílico, e tetra-hidrofurano) na presença de uma base (por exemplo, trietilamina, piridina, N,N-di- isopropiletilamina, 4-dimetilaminopiridina, e N-metilmorfolina).

[00136] Entre compostos com fórmula geral (I), compostos nos quais anel 2 é um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros substituído por no mínimo um -K-R2 em que K representa C(O) e R2 representa um grupo Ci-4 alquileno, um grupo C2-4 alquenileno, ou um grupo C2-4 alquinileno o qual pode ser substituído por CONR5R6, CO2R7, ou OR8, isto é, compostos com fórmula geral (I-D)

[00137] (na fórmula, anel 2d representa um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros substituído por no mínimo um -Kb-R2d; R2d representa um grupo Ci-4 alquileno, um grupo C2-4 alquenileno, ou um grupo C2-4 alquinileno o qual pode ser substituído por CONR5R6, CO2R7, ou OR8; e os outros símbolos têm as mesmas definições que as acima), podem ser produzidos usando um composto representado pela fórmula geral (I-A) e um composto representado pela fórmula geral (I-D-1)

[00138] (R2d na fórmula é definido como acima) e realizando uma reação em a partir de 0°C até a temperatura ambiente usando um agente de condensação (por exemplo, 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (DCC), 1-etil-3-[3-(dimetilamino)propil]carbodiimida (EDC), 1,1'- carbonildiimidazol (CDI), iodeto de 2-cloro-1-metilpiridínio, e anidrido cíclico de ácido 1-propanofosfônico (PPA)) em um solvente orgânico (por exemplo, clorofórmio, diclorometano, dimetilformamida, dimetilacetamida, éter dietílico, e tetra-hidrofurano), ou sem um solvente, na presença ou ausência de uma base (por exemplo, trietilamina, piridina, N,N-di-isopropiletilamina, 4-dimetilaminopiridina, e N-metilmorfolina) e com ou sem o uso de 1-hidroxibenztriazol (HOBt).

[00139] Os compostos usados como materiais de partida em cada uma das reações nesta Descrição, por exemplo, fórmula geral (a), (II), (III-1), (III-2), (I-B-1), (I-C-1), (I-C-2), e (I-D-1), ou são conhecidos ou podem ser prontamente produzidos por métodos conhecidos.

[00140] Para cada uma das reações nesta Descrição, as reações acompanhadas pela aplicação de calor podem ser realizadas usando um banho de água, um banho de óleo, um banho de areia, ou microondas, conforme será evidente para o indivíduo versado na técnica.

[00141] Um reagente de fase sólida, compreendendo o reagente carregado sobre um polímero de alto peso molecular (por exemplo, poliestireno, poliacrilamida, polipropileno, e polietileno glicol), pode ser usado conforme apropriado nas reações nesta Descrição.

[00142] O produto da reação em cada uma das reações desta Descrição pode ser purificado pelos meios de purificação usuais, por exemplo, usando métodos tais como destilação em pressão normal ou sob pressão reduzida, cromatografia líquida de alta performance usando sílica-gel ou silicato de magnésio, cromatografia de camada fina, resinas de permuta de íons, resinas eliminadoras, cromatografia de coluna, lavagem, recristalização, e assim por diante. A purificação pode ser realizada em cada reação ou pode ser realizada depois do completamento de várias reações.

Toxicidade

[00143] Os compostos da presente invenção têm uma toxicidade aceitavelmente baixa, por exemplo, têm quase nenhuma atividade inibitória de CYP e quase nenhuma hepatotoxicidade, e, portanto, podem ser usados com segurança como um ingrediente farmacêutico ativo.

Aplicação a produtos farmacêuticos

[00144] Os compostos da presente invenção têm uma atividade inibitória seletiva para Btk e em consequência são úteis como agentes para prevenir e/ou tratar Doenças relacionadas com Btk, isto é, doenças nas quais participam células B e/ou mastócitos, por exemplo, doenças alérgicas, doenças autoimunes, doenças inflamatórias, doenças tromboembólicas, cânceres, e doenças do enxerto contra hospedeiro. Os compostos da presente invenção também exercem uma ação inibitória seletiva sobre a ativação de células B e em consequência também são eficazes como inibidores da ativação de células B.

[00145] As doenças alérgicas na presente invenção podem ser exemplificadas por alergias, anafilaxia, conjuntivite alérgica, rinite alérgica, e dermatite alérgica.

[00146] As doenças autoimunes na presente invenção podem ser exemplificadas por doença intestinal inflamatória, artrite, lúpus, artrite reumatóide, artrite psoriática, osteoartrite, doença de Still, artrite juvenil, diabetes tipo I, miastenia gravis, tiroidite de Hashimoto, tiroidite de Ord, doença de Basedow, síndrome de Sjogren, esclerose múltipla, síndrome de Guillain-Barré, encefalomielite disseminada aguda, doença de Addison, síndrome de opsoclono e mioclono, espondilite anquilosante, síndrome de anticorpos antifosfolipídeo, anemia aplásica, hepatite autoimune, doença celíaca, síndrome de Goodpasture, púrpura trombocitopênica idiopática, neurite óptica, escleroderma, cirrose biliar primária, doença de Reiter, arterite de Takayasu, arterite temporal, anemia hemolítica autoimune quente, granuloma de Wegener, psoríase, alopecia universal, doença de Behçet, síndrome da fadiga crônica, disautonomia, endometriose, cistite intersticial, miotonia, vulvodinia, e lúpus eritematoso sistêmico.

[00147] As doenças inflamatórias na presente invenção podem ser exemplificadas por asma, apendicite, blefarite, bronquiolite, bronchite, bursite, cervicite, colangite, colecistite, colite, conjuntivite, cistite, dacrioadenite, dermatite, dermatomiosite, encefalite, endocardite, endometrite, enterite, epicondilite, epididimite, fasciite, fibrosite, gastrite, gastroenterite, hepatite, hidradenite supurativa, laringite, mastite, meningite, mielite, miocardite, miosite, nefrite, ooforite, orquite, osteíte, pancreatite, parotite, pericardite, peritonite, faringite, pleurite, flebite, pneumonia, proctite, prostatite, pielonefrite, rinite, salpingite, sinusite, estomatite, sinovite, tendinite, tonsilite, uveíte, vaginite, vasculite, e vulvite.

[00148] As doenças tromboembólicas na presente invenção podem ser exemplificadas por enfarte do miocárdio, angina pectoris, reoclusão depois de angioplastia, restenose depois de angioplastia, reoclusão depois de bypass aorto-coronário, restenose depois de bypass aorto-coronário, derrame, isquemia transitória, distúrbios oclusivos arteriais periféricos, embolismo pulmonar, e trombose venosa profunda.

[00149] Na presente invenção, os cânceres incluem linfomas não- Hodgkin, entre os quais linfomas não-Hodgkin de células B são particularmente adequados, por exemplo, linfoma de Burkitt, linfoma relacionado com a AIDS, linfoma de células B da zona marginal (linfoma de células B da zona marginal nodal, linfoma de células B da zona marginal extranodal, e linfoma de células B da zona marginal esplênica), linfoma difuso de grandes células B, linfoma de efusão primária, granulomatose linfomatóide, linfoma folicular, leucemia linfocítica crônica de células B, leucemia prolinfocítica de células B, leucemia linfoplasmacítica / macroglobulinemia de Waldenstrom, plasmacitoma, linfoma de células do manto, linfoma mediastinal de grandes células B, linfoma intravascular de grandes células B, e leucemia de células cabeludas. Além de linfoma não-Hodgkin, os cânceres na presente invenção incluem tumores endócrinos pancreáticos, por exemplo, insulinoma, gastrinoma, glucagonoma, somatostatinoma, VIPoma, PPoma, e GRFoma.

[00150] Um composto da presente invenção pode ser administrado isoladamente ou pode ser administrado como uma preparação combinada combinado com outro fármaco para o propósito de

[00151] 1) suplementação e/ou reforço do efeito profilático e/ou terapêutico do composto,

[00152] 2) aprimoramento da farmacocinética e absorção e redução da dose do composto, e/ou

[00153] 3) redução das reações adversas do composto.

[00154] A preparação combinada de um composto da presente invenção com outro fármaco pode ser administrada sob a forma de um agente composto no qual ambos os componentes são combinados em uma única formulação ou pode ser administrada como formulações separadas. A administração como formulações separadas inclui administração simultânea e administração em momentos diferentes. No caso de administração em momentos diferentes, o composto da presente invenção pode ser administrado primeiro seguido pela administração do outro fármaco, ou o outro fármaco pode ser administrado primeiro seguido pela administração do composto da presente invenção. O mesmo método de administração pode ser usado para cada um ou podem ser usados diferentes métodos de administração.

[00155] Não há nenhuma limitação em particular das doenças que podem ser submetidas à prevenção e/ou ao tratamento pela preparação combinada supracitada, e esta preparação combinada pode ser usada com qualquer doença com a qual o efeito de prevenção e/ou tratamento do composto da presente invenção é suplementado e/ou reforçado.

[00156] Este outro fármaco para suplementar e/ou reforçar o efeito profilático e/ou terapêutico dos compostos da presente invenção contra doenças alérgicas pode ser exemplificado por antihistamínicos, antagonistas do leucotrieno, fármacos antialérgicos, antagonistas de receptores do tromboxano A2, inibidores da tromboxano sintase, e esteróides.

[00157] O outro fármaco para suplementar e/ou reforçar o efeito profilático e/ou terapêutico dos compostos da presente invenção contra doenças autoimunes pode ser exemplificado por imunossupressores; esteroides; drogas antirreumáticas modificadoras de doenças; inibidores da elastase; agonistas de receptores canabinoides-2; prostaglandinas; inibidores da prostaglandina sintase; inibidores da fosfodiesterase; inibidores da metaloprotease; inibidores de moléculas de adesão; agentes antiproteína citocina tais como agentes anti-TNF-α, agentes anti-IL-1, e agentes anti-IL-6; inibidores da citocina; anti-inflamatórios não esteroides; e anticorpos anti-CD20.

[00158] O outro fármaco para suplementar e/ou reforçar o efeito profilático e/ou terapêutico dos compostos da presente invenção contra doenças inflamatórias podem ser exemplificados por esteroides, inibidores da elastase, agonistas de receptores canabinoides-2, prostaglandinas, inibidores da prostaglandina sintase, fosfodiesterase inibidores, inibidores da metaloprotease, inibidores de moléculas de adesão, antileucotrienos, anti-cholinergic agentes, antagonistas de receptores do tromboxano A2, inibidores da tromboxano sintase, derivados de xantina, expectorantes, antibacterianos, antihistamínicos, agentes antiproteína citocina, inibidores de citocinas, agentes de forskolina, inibidores da liberação de mediadores, e anti-inflamatórios não esteroides.

[00159] O outro fármaco para suplementar e/ou reforçar o efeito profilático e/ou terapêutico dos compostos da presente invenção contra doenças tromboembólicas podem ser exemplificados por agentes trombolíticos, heparina, heparinoides, heparinas de baixo peso molecular, varfarina, inibidores da trombina, inibidores do fator Xa, antagonistas de receptores do ADP, e inibidores da ciclooxigenase.

[00160] O outro fármaco para suplementar e/ou reforçar o efeito profilático e/ou terapêutico dos compostos da presente invenção contra linfomas não-Hodgkin podem ser exemplificados por agentes alquilantes, antimetabólitos, antibióticos anticancerígenos, alcaloides de plantas, hormônios, compostos de platina, anticorpos anti-CD20, e outros agentes anticancerígenos.

[00161] Os antihistamínios podem ser exemplificados por cloridrato de azelastina, ebastina, cloridrato de epinastina, fumarato de emedastina, auranofin, oxatomida, cloridrato de olopatadina, maleato de dexclorfeniramina, fumarato de clemastina, fumarato de cetotifen, cimetidina, dimenidrinato, cloridrato de difenidramina, cloridrato de ciproheptadina, cloridrato de cetirizina, desloratadina, terfenadina, famotidina, cloridrato de fexofenadina, bepotastina, bepotastina besilate, mizolastina, mequitazina, mometasone furoate, ranitidina, cloridrato de ranitidina, loratadina, cloridrato de prometazina, e cloridrato de homoclorciclizina.

[00162] Os antagonistas do leucotrieno podem ser exemplificados por hidrato de pranlukast, montelukast sódio, zafirlukast, ablukast, pobilukast, sulukast, iralukast sódio, verlukast, ritolukast, cinalukast, pirodomast, tomelukast, e doqualast.

[00163] Os fármacos antialérgicos podem ser exemplificados por anlexanox, cloridrato de azelastina, israpafant, ibudilast, imitrodast sódio, ebastina, cloridrato de epinastina, fumarato de emedastina, oxatomida, cloridrato de ozagrel, cloridrato de olopatadina, ácido cromoglícico, cromoglicato de sódio, fumarato de cetotifen, seratrodast, cloridrato de cetirizina, tosilato de suplatast, tazanolast, terfenadina, hidrato de cálcio de domitroban, tranilast, nedocromila, fexofenadina, cloridrato de fexofenadina, pemirolast potássio, mequitazina, ramatroban, repirinast, e loratadina.

[00164] Os antagonistas de receptores do tromboxano A2 podem ser exemplificados por seratrodast, hidrato de cálcio de domitroban, e ramatroban.

[00165] Os inibidores da tromboxano sintase podem ser exemplificados por imitrodast sódio e cloridrato de ozagrel.

[00166] Os esteroides podem ser exemplificados por ancinonida, succinato de sódio de hidrocortisona, succinato de sódio de prednisolona, succinato de sódio de metilprednisolona, ciclesonida, difluprednato, propionato de betametasona, dexametasona, deflazacort, triancinolona, triancinolona acetonida, halcinonida, palmitato de dexametasona, hidrocortisona, pivalato de flumetasona, butil acetato de prednisolona, budesonida, sulfato de prasterona, furoato de mometasona, fluocinonida, fluocinolona acetonida, fludroxicortida, flunisolida, prednisolona, propionato de alclometasona, propionato de clobetasol, propionato de dexametasona, propionato de deprodona, propionato de fluticasona, propionato de beclometasona, betametasona, metilprednisolona, suleptanato de metilprednisolona, succinato de sódio de metilprednisolona, fosfato de sódio de dexametasona, fosfato de sódio de hidrocortisona, fosfato de sódio de prednisolona, valerato de diflucortolona, valerato de dexametasona, valerato de betametasona, valerato acetato de prednisolona, acetato de cortisona, acetato de diflorasona, acetato de dexametasona, acetato de triancinolona, acetato de parametason, acetato de halopredona, acetato de fludrocortisona, acetato de prednisolona, acetato de metilprednisolona, butirato de clobetasona, butirato de hidrocortisona, butirato propionato de hidrocortisona, e butirato propionato de betametasona.

[00167] Os imunossupressores podem ser exemplificados por azatioprina, ascomicina, everolimo, salazosulfapiridina, ciclosporina, ciclofosfamida, sirolimo, tacrolimo, bucilamina, metotrexato, e leflunomida.

[00168] Os fármacos antirreumáticos modificadoras de doenças podem ser exemplificadas por D-penicilamina, actarit, auranofin, salazosulfapiridina, hidroxicloroquina, bucilamina, metotrexato, leflunomida, lobenzarit sódio, aurotioglucose, e aurotiomalato de sódio.

[00169] Os inibidores da elastase podem ser exemplificados por ONO-5046, ONO-6818, MR-889, PBI-1101, EPI-HNE-4, R-665, ZD- 0892, ZD-8321, GW-311616, DMP-777, L-659286, L-680833, L-683845, e AE-3763.

[00170] As prostaglandinas (abreviadas abaixo como "PG") podem ser exemplificadas por fármacos PGE1 (exemplos: alprostadil alfadex, alprostadil), fármacos PGI2 (exemplo: beraprost sódio), agonistas de receptores de PG, e antagonistas de receptores de PG. Os receptores de PG podem ser exemplificados por receptores de PGE (EP1, EP2, EP3, e EP4), receptores de PGD (DP, CRTH2), receptores de PGF (FP), receptores de PGI2 (IP), e receptores de TX (TP).

[00171] Os inibidores da prostaglandina sintase podem ser exemplificados por salazossulfapiridina, mesalazina, olsalazina, ácido 4-aminosalicílico, JTE-522, auranofin, carprofen, difeniramida, flunoxaprofeno, flurbiprofeno, indometacina, cetoprofeno, lornoxicam, loxoprofeno, meloxicam, oxaprozina, parsalmida, piproxeno, piroxicam, cinamato de piroxicam, zaltoprofeno, e pranoprofeno.

[00172] Os inibidores da fosfodiesterase podem ser exemplificados por rolipram, cilomilast, Bayl9-8004, NIK-616, roflumilast (BY-217),cipanfilina (BRL-61063), atizoram (CP-80633), ONO-6126, SCH-351591, YM-976, V-11294A, PD-168787, D-4396, e IC-485.

[00173] Os inibidores das moléculas de adesão podem ser exemplificados por antagonista da a4 integrina.

[00174] Os agentes anti-TNF-a podem ser exemplificados por anticorpos anti-TNF-α, receptor de TNF-a solúvel, anticorpos antirreceptores de TNF-a, e proteína de ligação de TNF-a solúvel e particularmente por infliximab e etanercept.

[00175] Os agentes anti-IL-1 podem ser exemplificados por anticorpos anti-IL-1, receptor de IL-1 solúvel, anticorpos anti-IL-1Ra e/ou anticorpos antir receptores de IL-1 e particularmente por anakinra.

[00176] Os agentes anti-IL-6 podem ser exemplificados por anticorpos anti-IL-6, receptor de IL-6 solúvel, e anticorpos antirreceptores de IL-6 e particularmente por tocilizumab.

[00177] Os inibidores de citocinas podem ser exemplificados por tosilato de suplatast, T-614, SR-31747, e sonatimod.

[00178] Os agentes anticolinérgicos podem ser exemplificados por trihexifenidila, cloridrato de trihexifenidila, biperiden, e cloridrato de biperiden.

[00179] Os derivados de xantina podem ser exemplificados por aminofilina, teofilina, doxofilina, sipanfilina, e diprofilina.

[00180] Os expectorantes podem ser exemplificados por espírito de amônia feniculada, bicarbonato de sódio, cloridrato de bromexina, carbocisteína, cloridrato de ambroxol, cloridrato de metilcisteína, acetilcisteína, cloridrato de L-cisteína de etila, e tiloxapol.

[00181] Os antibacterianos podem ser exemplificados por cefuroxima de sódio, triidrato de meropenem, sulfato de netilmicina, sulfato de sisomicina, ceftibuten, PA-1806, IB-367, tobramicina, PA- 1420, doxorrubicina, sulfato de astromicina, e cloridrato de cefetamet pivoxila.

[00182] Os inibidores da liberação de mediadores podem ser exemplificados por tranilast, cromoglicato de sódio, amlexanox, repirinast, ibudilast, dazanolast, e pemirolast potássio.

[00183] Os agentes trombolíticos podem ser exemplificados por alteplase, uroquinase, tisoquinase, nasaruplase, nateplase, t-PA, pamiteplase, monteplase, prouroquinase, e estreptoquinase.

[00184] Os heparinoides podem ser exemplificados por fondaparinux.

[00185] As heparinas de baixo peso molecular podem ser exemplificadas por danaparóide sódica, enoxaparina (sódica), nadroparina cálcica, bemiparina (sódica), reviparina (sódica), e tinzaparina (sódica).

[00186] Os inibidores da trombina podem ser exemplificados por argatroban, ximelagatran, melagatran, dabigatran, bivalirudina, lepirudina, hirudina, e desirudina.

[00187] Os antagonistas de receptores do ADP podem ser exemplificados por cloridrato de ticlopidina e sulfato de clopidogrel.

[00188] Os inibidores da ciclooxigenase podem ser exemplificados por aspirina.

[00189] Os agentes alquilantes podem ser exemplificados por mostarda de nitrogênio N-óxido cloridrato, ciclofosfamida, ifosfamida, melfalan, tiotepa, carboquone, bussulfan, cloridrato de nimustina, dacarbazina, e ranimustina.

[00190] Os antimetabólitos podem ser exemplificados por metotrexato, mercaptopurina, 6-mercaptopurina ribosídeo,fluorouracila, tegafur, tegafur uracila, carmofur, doxifluridina, citarabina, enocitabina, tegafur gimestat otastat potássio, cloridrato de gencitabina, ocfosfato de citarabina, cloridrato de procarbazina, e hidroxicarbamida.

[00191] Os antibióticos anticancerígenos podem ser exemplificados por actinomicina D, mitomicina C, cloridrato de daunorubicina, cloridrato de doxorubicina, cloridrato de aclarubicina, neocarzinostatin, cloridrato de pirarubicina, epirubicina (cloridrato), cloridrato de idarubicina, cromomicina A3, bleomicina (cloridrato), sulfato de peplomicina, terarubicina, e zinostatina estimalâmer.

[00192] Os alcaloides de plantas podem ser exemplificados por sulfato de vinblastina, sulfato de vincristina, sulfato de vindesina, cloridrato de irinotecan, etoposídeo, flutamida, tartarato de vinorelbina, hidrato de docetaxel, e paclitaxel.

[00193] Os hormônios podem ser exemplificados por fosfato sódio de estramustina, mepitiostane, epitiostanol, acetato de goserelina, fosfestrol (fosfato de dietilestilbestrol), citrato de tamoxifeno, citrato de toremifeno, hidrato de cloridrato de fadrozol, acetato de medroxiprogesterona, bicalutamida, acetato de leuprorelina, anastrozol, e exemestane.

[00194] Os compostos de platina podem ser exemplificados por carboplatina, cisplatina, e nedaplatina.

[00195] Os anticorpos anti-CD-20 podem ser exemplificados por rituximab, ibritumomab, e ocrelizumab.

[00196] Os outros agentes anticancerígenos podem ser exemplificados por L-asparaginase, acetato de octreotida, porfímero sódio, e acetato de mitoxantrona.

[00197] A preparação combinada compreendendo uma combinação com um composto da presente invenção não somente inclui as preparações combinadas descobertas até o momento, mas também inclui preparações combinadas que podem ser descobertas no futuro.

[00198] Os compostos da presente invenção geralmente são administrados sistemicamente ou localmente como um componente farmaceuticamente eficaz em uma forma oral ou parenteral. As formulações orais podem ser exemplificadas por líquidos para administração oral (por exemplo, elixires, xaropes, formulações à base de água farmaceuticamente aceitáveis, suspensões, e emulsões) e sólidos para administração oral (por exemplo, comprimidos (incluindo comprimidos sublinguais e comprimidos desintegrantes por via oral), pílulas, cápsulas (incluindo cápsulas duras, cápsulas moles, cápsulas de gelatina, e microcápsulas), pós, grânulos, e pastilhas). As formulações parenterais podem ser exemplificadas por soluções (por exemplo, injetáveis (por exemplo, injetáveis subcutâneas, injetáveis intravenosas, injetáveis intramusculares, injetáveis intraperitoneais, e formulações para gotejamento), gotas oculares (por exemplo, gotas oculares aquosas (por exemplo, gotas oculares aquosas, suspensões de gotas oculares aquosas, gotas oculares viscosas, e gotas oculares solubilizadas) e gotas oculares não aquosas (por exemplo, gotas oculares não aquosas e suspensões de gotas oculares não aquosas)), produtos tópicos (por exemplo, pomadas (por exemplo, pomadas oftálmicas)), e gotas oculares). Estas formulações podem ser formulações de liberação controlada tais como formulações de liberação rápida, formulações de liberação gradual, e assim por diante. Estas formulações podem ser produzidas por métodos conhecidos, por exemplo, pelos métodos descritos na Japanese Pharmacopoeia (Farmacopéia Japonesa).

[00199] Os líquidos para administração oral dentro do âmbito de formulações orais podem ser produzidos, por exemplo, por dissolução, suspensão, ou emulsificação do componente eficaz em um diluente comumente usado (por exemplo, água purificada, etanol, ou uma mistura dos mesmos). Estas formulações líquidas também podem conter, por exemplo, um agente umectante, agente de suspensão, agente emulsificante, adoçante, flavorizante, fragrância, preservante, tampão, e assim por diante.

[00200] Os sólidos para administração oral dentro do âmbito de formulações orais podem ser preparados misturando o componente eficaz com, por exemplo, um veículo (por exemplo, lactose, manitol, glicose, celulose microcristalina, e amido), um ligante (por exemplo, hidroxipropil celulose, polivinilpirrolidona, e metassilicato aluminato de magnésio), um desintegrante (por exemplo, glicolato de cálcio de celulose), um lubrificante (por exemplo, estearato de magnésio), um estabilizamte, um adjuvante de dissolução (por exemplo, ácido glutâmico e ácido aspártico), e assim por diante, e formulando de acordo com métodos de rotina. Conforme necessário, o revestimento pode ser realizado com um agente de revestimento (por exemplo, açúcar, gelatina, hidroxipropil celulose, e hidroxipropil metil celulose ftalato) e podem ser aplicadas duas ou mais camadas.

[00201] Dentro do âmbito das formulações parenterais, pode ser produzido um tópico usando um método conhecido ou uma formulação em uso comum. Por exemplo, uma pomada pode ser preparada incorporando ou fundindo o componente eficaz em uma base. A base da pomada é selecionada entre bases para pomada conhecidas ou uma base para pomada em uso comum. Por exemplo, pode ser usada uma única seleção entre as seguintes ou uma mistura de duas ou mais seleções entre as seguintes: ácidos graxos superiores e ésteres de ácido graxos superiores (por exemplo, ácido adípico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido oléico, ésteres de adipato, ésteres de miristato, ésteres de palmitato, ésteres de estearato, e ésteres de oleato), ceras (por exemplo, cera de abelha, espermacete, e ceresina), tensoativos (por exemplo, ésteres de fosfato de éteres de alquila de polioxietileno), alcoóis superiores (por exemplo, cetanol, álcool estearílico, e álcool cetoestearílico), óleos de silicone (por exemplo, dimetilpolissiloxano), hidrocarbonetos (por exemplo, petrolato hidrofílico, petrolato branco, lanolina purificada, e parafina líquida), glicóis (por exemplo, etileno glicol, dietileno glicol, propileno glicol, polietileno glicol, e macrogol), óleos de plantas (por exemplo, óleo de rícino, azeite de oliva, óleo de gergelim, e óleo de terebintina), óleos de animais (por exemplo, óleo de mink, óleo de gema de ovo, esqualano, e esqualeno), água, promotores de absorção, e anti- irritantes. Um umectante, preservante, estabilizante, antioxidante, fragrância, e assim por diante também podem ser incorporados.

[00202] Injetáveis dentro do âmbito de formulações parenterais englobam soluções, suspensões, e emulsões bem como injetáveis sólidos usados por dissolução ou suspensão em um solvente na ocasião do uso. Por exemplo, um injetável pode ser usado no qual o componente eficaz é dissolvido, suspendido, ou emulsificado em um solvente. Por exemplo, água destilada para injeção, solução salina fisiológica, um óleo vegetal, propileno glicol, polietileno glicol, um álcool tal como etanol, ou uma combinação dos precedentes podem ser usados para o solvente. O injetável também pode conter um estabilizante, um adjuvante de dissolução (por exemplo, ácido glutâmico, ácido aspártico, e Polysorbate 80 (marca comercial registrada)), um agente de suspensão, um agente emulsificante, um agente calmante, um tampão, um preservante, e assim por diante. O injetável pode ser esterilizado na etapa final ou pode ser fabricado usando processamento asséptico. O injetável também pode ser fabricado como uma forma sólida estérila, por exemplo, um produto seco por congelamento, e pode ser usado depois de dissolução em água destilada para injeção ou em outro solvente, o qual ou é estéril ou é esterilizado antes da aplicação.

[00203] A dose quando um composto da presente invenção é usado como um componente eficaz em um fármaco pode ser selecionada conforme apropriado dependendo, por exemplo, dos sintomas, da idade, do tipo de formulação, e assim por diante. No caso de uma formulação oral, preferencialmente a partir de 1 mg até 100 mg e mais preferencialmente a partir de 5 mg até 30 mg pode ser administrado a partir de uma até várias vezes por dia (por exemplo, uma a três vezes). No caso de gotas oculares, a partir de uma a várias gotas por administração de uma solução oftálmica tendo uma concentração de preferencialmente 0,000001% a 5% (em peso/ volume) e mais preferencialmente 0,00001% a 0,05% (em peso/ volume) pode ser instilada a partir de uma até várias vezes por dia (por exemplo, a partir de uma até oito vezes). No caso de uma pomada oftálmica, uma pomada oftálmica com uma concentração de preferencialmente 0,000001% a 5% (em peso/ peso) e mais preferencialmente 0,00001% a 0,05% (em peso/ peso) pode ser aplicada a partir de uma até várias vezes por dia (por exemplo, uma a quatro vezes).

[00204] Logicamente, conforme observado acima, a dose vai depender de várias condições e em consequência ocorrerão casos nos quais uma quantidade menor do que os níveis de dosagens supracitados será suficiente ou nos quais estas faixas podem ser excedidas.

EXEMPLOS

[00205] A presente invenção é descrita abaixo usando exemplos, porém a presente invenção não está limitada por estes exemplos.

[00206] Os solventes dados entre parênteses para TLC e nas seções sobre separação cromatográfica indicam os solventes de elutriação ou solventes de desenvolvimento usados, e as proporções são proporções em volume.

[00207] A menos que especificamente indicado de modo diverso, os dados de RMN são dados para 1H-RMN.

[00208] O solvente usado na medição é dada entre parênteses na seção de RMN.

[00209] Os nomes dos compostos usados nesta Descrição são geralmente nomes gerados com base nas regras de nomenclatura da União Internacional de Química Pura e Aplicada (IUPAC) ou gerados usando o ACD/Name (marca registrada), um programa de computação da Advanced Chemistry Development, Inc., que realiza a nomeação com base nas regras da IUPAC.

Exemplo 1 N,N-dibenzil-6-cloro-5-nitropirimidina-4-amina

[00210] Dibenzilamina (10,2 g) em uma solução de diclorometano (30 mL) foi acrescentada gota a gota sobre um banho de gelo a uma solução de diclorometano (70 mL) de 4,6-dicloro-5-nitropirimidina (10 g). Isto foi seguido pela adição de trietilamina (14,4 mL) e agitação por 1 hora. Água foi em seguida acrescentada à mistura da reação e a camada orgânica foi em seguida lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio e secada sobre sulfato de sódio anídrico. O solvente foi concentrado sob pressão reduzida para obter o composto do título (19,2 g) tendo o valor de propriedade física indicado abaixo.

[00211] TLC: Rf 0,50 (hexano : acetato de etila = 7 : 1).

Exemplo 2 3-{[6-(dibenzilamino)-5-nitropirimidin-4-il]amino}azetidina-1-carboxilato de terc-butila

[00212] O composto (10,3 g) preparado no Exemplo 1 e 3- aminoazetidina-1-carboxilato de terc-butila (5,0 g) foram dissolvidos em dioxana (58 mL); trietilamina (8,1 mL) foi acrescentada; e em seguida foi realizada agitação por 5 horas a 50°C. A mistura da reação foi retornada até a temperatura ambiente; o solvente foi em seguida destilado; água foi acrescentada; e foi realizada extração com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio e subsequentemente secada sobre sulfato de sódio anídrico e o solvente foi em seguida destilado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica-gel para obter o composto do título (10,8 g) tendo o valor de propriedade física indicado abaixo.

[00213] TLC: Rf 0,40 (hexano : acetato de etila = 4 : 1).

Exemplo 3 3-{[5-amino-6-(dibenzilamino)pirimidin-4-il]amino}azetidina-1- carboxilato de terc-butila

[00214] Uma solução de acetato de etila (360 mL) do composto (17,5 g) preparado no Exemplo 2 foi acrescentada gota a gota a uma mistura de zinco (23,3 g) e uma 3,0 M solução aquosa de cloreto de amônio (11,4 g) sobre um banho de gelo e a temperatura foi imediatamente aumentada até a temperatura ambiente. Depois de agitação por 2 horas, a mistura da reação foi filtrada sobre Celite (nome comercial) e o solvente foi em seguida destilado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica-gel para obter o composto do título (12,4 g) tendo o valor de propriedade física indicado abaixo.

[00215] TLC: Rf 0,69 (hexano : acetato de etila = 1 : 1).

Exemplo 4 3-[6-(dibenzilamino)-8-oxo-7,8-di-hidro-9H-purin-9-il]azetidina-1- carboxilato de terc-butila

[00216] O composto (8,4 g) preparado no Exemplo 3 e 1,1'- carbonildiimidazol (5,9 g) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (120 mL) seguidos por agitação por 15 horas a 60°C. Depois do solvente ter sido destilado da mistura da reação, água foi acrescentada e foi realizada extração com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio e secada sobre sulfato de sódio anídrico e o solvente foi em seguida destilado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica-gel para obter o composto do título (7,8 g) tendo o valor de propriedade física indicado abaixo.

[00217] TLC: Rf 0,28 (hexano : acetato de etila = 2 : 1).

Exemplo 5 3-(6-amino-8-oxo-7,8-di-hidro-9H-purin-9-il)azetidina-1-carboxilato de terc-butila

[00218] O composto (7,8 g) preparado no Exemplo 4 foi dissolvido em metanol (240 mL) e acetato de etila (50 mL); 20% de catalisador de Pearlman (Pd(OH)2/C) (8,0 g, 100 % em peso) foi acrescentado; foi realizada reposição com hidrogênio; e foi realizada agitação por 7,5 horas a 60°C. A mistura da reação foi filtrada sobre Celite (nome comercial) e o solvente foi destilado para obter o composto do título (5,0 g) tendo o valor de propriedade física indicado abaixo.

[00219] TLC: Rf 0,50 (acetato de etila).

Exemplo 6 3-[6-amino-8-oxo-7-(4-fenoxifenil)-7,8-di-hidro-9H-purin-9-il]azetidina- 1-carboxilato de terc-butila

[00220] Ácido p-fenoxifenilbórico (2,1 g), acetato de cobre(II) (1,48 g), peneira molecular de 4A (2,5 g), e piridina (0,82 mL) foram acrescentados em temperatura ambiente a uma suspensão de diclorometano (200 mL) do composto (2,5 g) preparado no Exemplo 5, seguido por agitação por 21 horas. A solução da reação foi filtrada sobre Celite (nome comercial) e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica-gel para obter o composto do título (1,3 g) tendo o valor de propriedade física indicado abaixo.

[00221] TLC: Rf 0,18 (hexano : acetato de etila = 1 : 1).

Exemplo 7 6-amino-9-azetidin-3-il-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona di- cloridrato

[00222] 4 N de ácido clorídrico / dioxana (13 mL) foi acrescentado em temperatura ambiente a uma suspensão em metanol (13 mL) do composto (1,3 g, 2,76 mmol, 1,0 equivalente) preparado no Exemplo 6 e foi realizada agitação por 1 hora. O solvente foi em seguida destilado para obter o composto do título (1,5 g) tendo o valor de propriedade física indicado abaixo.

[00223] TLC: Rf 0,50 (diclorometano : metanol : amônia aquosa a 28% = 9 : 1 : 0,1). Exemplo 8 9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00224] Trietilamina (1,1 mL) foi acrescentada a uma suspensão em diclorometano (16 mL) do composto (1,5 g) preparado no Exemplo 7 e uma solução de diclorometano (10 mL) de cloreto de acriloíla (0,32 mL) foi em seguida acrescentada gota a gota a -10°C. O solvente foi destilado da mistura da reação seguido pela adição de água e extração com cloreto de metileno. A camada orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e secada sobre sulfato de sódio anídrico e o solvente foi destilado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica-gel para obter o composto do título (0,8 g) tendo os valores de propriedades físicas indicados abaixo.

[00225] TLC: Rf 0,43 (acetato de etila);

[00226] 1H-RMN (CDCls): δ 4,47-4,61, 4,83-4,88, 5,06-5,11, 5,37 5,47, 5,70-5,74, 6,21-6,30, 6,36-6,43, 7,07-7,23, 7,35-7,44, 8,24.

Exemplo 8(1) ao Exemplo 8(22)

[00227] Os compostos exempIares dados abaixo foram obtidos seguindo o mesmo modelo de processo que no Exemplo 1 ^ Exemplo 2 ^ Exemplo 3 ^ Exemplo 4 ^ Exemplo 5 ^ Exemplo 6 ^ Exemplo 7 ^ Exemplo 8, usando 4,6-dicloro-5-nitropirimidina, usando 3-aminoazetidina-1-carboxilato de terc-butila ou o derivado de amina correspondente em seu lugar, usando cloreto de acriloíla ou o cloreto ácido correspondente no seu lugar, e usando ácido p-fenoxifenilbórico ou o ácido bórico correspondente no seu lugar.

Exemplo 8(1) 9-[(3R)-1-acriloil-3-piperidinil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H- purin-8-ona

[00228] TLC: Rf 0,33 (acetato de etila);

[00229] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,64-1,78, 1,90-2,12, 2,55-2,80, 3,103,22, 3,63-3,74, 3,99-4,12, 4,40-4,55, 4,73-4,82, 5,66-5,72, 6,26-6,31, 6,53-6,65, 7,07-7,22, 7,36-7,44, 8,23.

Exemplo 8(2) 9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-[4-(3-clorofenóxi)-3-metoxifenil]-7,9- di-hidro-8H-purin-8-ona

[00230] TLC: Rf 0,25 (acetato de etila);

[00231] 1H-RMN (CDCl3): δ 3,88, 4,47-4,62, 4,83-4,89, 5,07-5,12,5,39-5,48, 5,70-5,74, 6,21-6,30, 6,37-6,43, 6,87-6,91, 6,95-7,00, 7,08- 7,13, 7,24-7,29, 8,27.

Exemplo 8(3) 9-(1-acriloil-4-piperidinil)-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H- purin-8-ona

[00232] TLC: Rf 0,38 (acetato de etila);

[00233] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,88-1,96, 2,59-2,80, 3,15-3,27, 4,134,22, 4,48, 4,58-4,69, 4,85-4,95, 5,69-5,73, 6,27-6,34, 6,59-6,68, 7,077,15, 7,17-7,22, 7,34-7,44, 8,21.

Exemplo 8(4) 9-[(3R)-1-acriloil-3-pirrolidinil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H- purin-8-ona

[00234] TLC: Rf 0,60 (clorofórmio : metanol : amônia aquosa = 80 : 10 : 1);

[00235] 1H-RMN (CDCl3): δ 2,21-2,46, 2,82-3,08, 3,53-3,76, 3,894,36, 4,40-4,59, 5,11-5,32, 5,64-5,77, 6,34-6,58, 7,04-7,24, 7,34-7,49, 8,18-8,26.

Exemplo 8(5) 9-[(3S)-1-acriloil-3-piperidinil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H- purin-8-ona

[00236] TLC: Rf 0,71 (clorofórmio : metanol : amônia aquosa = 80 : 10 : 1);

[00237] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,52-1,80, 1,88-2,17, 2,51-2,84, 3,073,26, 3,59-3,76, 3,94-4,16, 4,38-4,63, 4,66-4,90, 5,61-5,80, 6,21-6,40, 6,48-6,72, 7,03-7,25, 7,33-7,50, 8,23.

Exemplo 8(6) 9-[(3S)-1-acriloil-3-pirrolidinil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H- purin-8-ona

[00238] TLC: Rf 0,50 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00239] 1H-RMN (CDCl3): δ 2,23-2,43, 2,84-3,04, 3,55-3,73, 3,914,08, 4,12-4,19, 4,26-4,32, 4,47-4,49, 5,13-5,27, 5,66-5,73, 6,35-6,54, 7,03-7,28, 7,33-7,43, 8,20-8,22.

Exemplo 8(7) 9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-[4-(3-clorofenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00240] TLC: Rf 0,53 (clorofórmio : metanol : amônia aquosa = 9 : 1 : 0,01);

[00241] 1H-RMN (CDCI3): δ 4,46-4,61, 4,85, 5,08, 5,42, 5,71, 6,24,6,38, 6,96, 7,08, 7,13-7,18, 7,32, 7,42, 8,24.

Exemplo 8(8) 9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-(3-metoxi-4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00242] TLC: Rf 0,18 (acetato de etila);

[00243] 1H-RMN (CDCl3): δ 3,90, 4,45-4,65, 4,80-4,90, 5,05-5,15,5,35-5,45, 5,72, 6,26, 6,39, 6,90-7,40, 8,25.

Exemplo 8(9) 9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-(3-fluoro-4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00244] TLC: Rf 0,27 (acetato de etila);

[00245] 1H-RMN (CDCl3): δ 4,45-4,65, 4,80-4,90, 5,05-5,15, 5,355,45, 5,72, 6,25, 6,40, 7,05-7,42, 8,26.

Exemplo 8(10) 9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-[4-(3,4-diclorofenóxi)-3-metoxifenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00246] TLC: Rf 0,20 (acetato de etila);

[00247] 1H-RMN (CD3OD): δ 3,82, 4,47, 4,59, 4,72, 4,77-4,95, 5,005,09, 5,40-5,53, 5,77, 6,28, 6,41, 6,91, 7,09, 7,28, 7,43, 8,17.

Exemplo 8(11) 9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-[4-(3-fluorofenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00248] TLC: Rf 0,73 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,1);

[00249] 1H-RMN (CDCfe): δ 4,50, 4,59, 4,85, 5,08, 5,42, 5,72, 6,25,6,40, 6,78-6,93, 7,17, 7,33, 7,43, 8,26.

Exemplo 8(12) 9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-[4-(3,5-difluorofenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00250] TLC: Rf 0,78 (acetato de etiIa : metanoI : trietiIamina = 9 : 1 : 0,1);

[00251] 1H-RMN (CDCl3): δ 4,50, 4,59, 4,85, 5,08, 5,42, 5,71, 6,25,6,39, 6,57-6,62, 7,19, 7,45, 8,26.

Exemplo 8(13) 9-(1-acriloil-3-azetidinil)-6-amino-7-(2-fluoro-4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00252] TLC: Rf 0,47 (metanol : acetato de etila = 1 : 19);

[00253] 1H-RMN (CDCl3): δ 4,40-4,60, 4,80-4,90, 5,00-5,10, 5,355,45, 5,72, 6,25, 6,39, 6,80-7,50, 8,24. Exemplo 8(14) 9-[(1-acriloil-4-piperidinil)metil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro- 8H-purin-8-ona

[00254] TLC: Rf 0,50 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00255] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,27-1,44, 1,72-1,86, 2,18-2,37, 2,66,3,04, 3,90, 4,00, 4,51, 4,67, 5,66, 6,24, 6,56, 7,03-7,24, 7,32-7,46, 8,25.

Exemplo 8(15) 6-amino-9-[1-(cloroacetil)-3-azetidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H- purin-8-ona

[00256] TLC: Rf 0,41 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00257] 1H-RMN (CDCI3): δ 3,96-4,05, 4,44-4,53, 4,62-4,72, 4,804,87, 5,08-5,16, 5,38-5,48, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,24.

Exemplo 8(16) 6-amino-9-[(3R)-1-(cloroacetil)-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00258] TLC: Rf 0,49 (acetato de etiIa : metanoI = 19 : 1);

[00259] 1H-RMN (CDCI3): δ 2,20-2,48, 2,78-3,01, 3,50-3,63, 3,643,81, 3,90-4,19, 4,26-4,36, 4,51, 5,14-5,32, 7,02-7,26, 7,27-7,46, 8,21.

Exemplo 8(17) 6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9- di-hidro-8H-purin-8-ona

[00260] TLC: Rf 0,41 (acetato de etiIa : metanoI = 19 : 1);

[00261] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,88, 2,19-2,43, 2,82-3,05, 3,50-3,74,3,88-4,18, 4,20-4,30, 4,48, 5,08-5,16, 6,13, 6,95, 7,05-7,23, 7,34-7,46, 8,22.

Exemplo 8(18) 6-amino-9-{[1-(cloroacetil)-4-piperidinil]metil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00262] TLC: Rf 0,54 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00263] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,14-1,59, 1,70-1,87, 2,19-2,37, 2,65,3,10, 3,81-3,95, 3,91, 4,06, 4,50, 4,51-4,63, 7,05-7,23, 7,34-7,46, 8,25.

Exemplo 8(19) 9-[(1-acriloil-4-metil-4-piperidinil)metil]-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di- hidro-8H-purin-8-ona

[00264] TLC: Rf 0,55 (acetato de etila : metanol = 9 : 1);

[00265] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,15, 1,37-1,85, 3,21-3,50, 3,70-3,99,4,03-4,23, 4,52-4,73, 5,64, 6,24, 6,56, 6,97-7,23, 7,31-7,50, 8,21.

Exemplo 8(20) 6-amino-9-{1-[(2E)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di- hidro-8H-purin-8-ona

[00266] TLC: Rf 0,63 (acetato de etila : metanol = 9 : 1);

[00267] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,89, 4,46, 4,51, 4,79, 5,03, 5,20, 5,39,5,94, 6,93, 7,07-7,10, 7,19, 7,36-7,43, 8,23.

Exemplo 8(21) 9-{[(3R)-1-acriloil-3-pirrolidinil]metil}-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di- hidro-8H-8-ona

[00268] TLC: Rf 0,49 (diclorometano : metanol : amônia aquosa = 9 : 1 : 0,1);

[00269] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,77-1,97, 2,02-2,19, 2,83-3,01, 3,383,62, 3,66-3,83, 3,98-4,11, 4,42-4,54, 5,61-5,70, 6,30-6,45, 7,04-7,23, 7,36-7,43, 8,23.

Exemplo 8(22) 9-{[(2S)-1-acriloil-2-pirrolidinil]metil}-6-amino-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di- hidro-8H-purin-8-ona

[00270] TLC: Rf 0,44 (diclorometano : metanol : amônia aquosa = 9 : 1 : 0,1);

[00271] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,87-2,28, 3,46-3,78, 3,86-3,96, 3,994,10, 4,15-4,23, 4,40, 4,45-4,60, 4,81-4,91, 5,54-5,72, 6,16-6,44, 6,866,97, 7,04-7,22, 7,36-7,45, 8,21-8,26.

Exemplo 9 (3R)-3-{[6-(dibenzilamino)-5-nitropirimidin-4-il]amino}piperidina-1- carboxilato de terc-butila

[00272] O composto do título (1,44 g) tendo o valor de propriedade física dado abaixo foi obtido seguindo o mesmo modelo de processo que no Exemplo 2 usando o composto (1,5 g) produzido no Exemplo 1 e usando (3R)-3-aminopiperidina-1-carboxilato de terc-butila (0,85 g) ao invés do 3-aminoazetidina-1-carboxilato de terc-butila.

[00273] TLC: Rf 0,23 (hexano : acetato de etila = 9 : 1).

Exemplo 10 di-cloridrato de 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-[(3R)-piperidin-3-il]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00274] O composto do título (155 mg) tendo o valor de propriedade física dado abaixo foi obtido seguindo o mesmo modelo de processo que no Exemplo 3 ^ Exemplo 4 ^ Exemplo 5 ^ Exemplo 6 ^ Exemplo 7, usando o composto produzido no Exemplo 9 e usando ácido p-fenoxifenilbórico (154 mg).

[00275] TLC: Rf 0,68 (metanol : diclorometano : amônia aquosa = 80 : 20 : 4). Exemplo 11 6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-piperidinil}-7-(4- fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00276] Trietilamina (1,40 mL) foi acrescentada a uma solução de diclorometano (6 mL) do composto (1,20 g) produzido no Exemplo 10. Cloreto de 4-bromocrotonil (0,5 M de solução de dicloroetaneo 5,04 mL) foi acrescentado sobre um banho de gelo e a mistura da reação foi agitada por 30 minutos sobre um banho de gelo. Depois de concentração, uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio foi acrescentada e foi realizada extração com acetato de etila. A camada orgânica obtida foi lavada com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada, e concentrada. Tetra-hidrofurano (6 mL) e dimetilamina (2,0 M tetra- hidrofurano solução, 6,3 mL) foram acrescentados ao resíduo e foi realizado aquecimento por 2 horas a 50°C. Isto foi seguido por filtração e em seguida concentração. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia de coluna de sílica-gel (hexano : acetato de etila = 1 : 1 ^ acetato de etila ^ acetato de etila : metanol : trietilamina = 18 : 2 : 1) para produzir o composto do título (0,66 g) tendo os valores de propriedades físicas indicados abaixo.

[00277] TLC: Rf 0,40 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 18 : 2 : 1);

[00278] 1H-RMN (CDCfe): δ 1,52-1,77, 1,87-2,00, 2,00-2,12, 2,182,35, 2,53-2,85, 2,93-3,22, 3,57-3,74, 3,97-4,17, 4,36-4,60, 4,66-4,89, 6,35-6,55, 6,76-6,94, 7,03-7,30, 7,32-7,48, 8,21.

Exemplos 11(1) a 11(26)

[00279] Os compostos exemplares dados abaixo foram obtidos seguindo o mesmo modelo de processo que no Exemplo 9 ^ Exemplo 10 ^ Exemplo 11, usando o composto produzido no Exemplo 1, usando (3R)-3-aminopiperidina-1-carboxilato de terc-butila ou o derivado de amina correspondente no seu lugar, usando ácido p- fenoxifenilbórico ou o ácido bórico correspondente no seu lugar, e usando dimetilamina ou o derivado de amina correspondente no seu lugar.

Exemplo 11(1) 6-amino-9-{1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7-(4- fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00280] TLC: Rf 0,21 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

[00281] 1H-RMN (CDCl3): δ 2,27, 3,08-3,10, 4,45-4,60, 4,80-4,86,5,05-5,10, 5,36-5,44, 6,06-6,12, 6,87-6,96, 7,07-7,15, 7,17-7,23, 7,357,44, 8,24.

Exemplo 11(2) 6-amino-9-{1-[(2E)-4-(4-morfolinil)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00282] TLC: Rf 0,48 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

[00283] 1H-RMN (CDCI3): δ 2,48, 3,14-3,16, 3,71-3,73, 4,44-4,59,4,80-4,86, 5,04-5,09, 5,36-5,46, 6,08-6,13, 6,86-6,95, 7,07-7,15, 7,177,22, 7,34-7,42, 8,23. Exemplo 11(3) 6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4- fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00284] TLC: Rf 0,21 (diclorometano : metanol = 17 : 3);

[00285] 1H-RMN (CDCl3): δ 2,20-2,42, 2,84-3,14, 3,52-3,76, 3,904,20, 4,22-4,34, 4,42-4,51, 5,10-5,29, 6,20-6,38, 6,86-7,01, 7,03-7,24, 7,37-7,46, 8,20-8,23.

Exemplo 11(4) 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-{1-[(2E)-4-(1-piperidinil)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00286] TLC: Rf 0,48 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

[00287] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,32-1,47, 1,57-1,64, 2,38-2,44, 3,133,14, 4,44-4,60, 4,80-4,86, 5,04-5,09, 5,35-5,46, 6,05-6,11, 6,89-6,99, 7,07-7,15, 7,17-7,23, 7,35-7,44, 8,24.

Exemplo 11(5) 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-{1-[(2E)-4-(4-tiomorfolinil)-2-butenoil]-3- azetidinil}-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00288] TLC: Rf 0,58 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

[00289] 1H-RMN (CDCI3): δ 2,66-2,75, 3,15-3,17, 4,44-4,59, 4,804,86, 5,04-5,09, 5,36-5,44, 6,05-6,11, 6,85-6,94, 7,07-7,15, 7,17-7,23, 7,35-7,44, 8,24.

Exemplo 11(6) 6-amino-9-{1 -[(2E)-4-(3-oxo-1-piperazinil)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifeniI)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00290] TLC: Rf 0,16 (acetato de etiIa : metanoI : trietiIamina = 9 : 1 : 0,5);

[00291] 1H-RMN (CDCI3): δ 2,67-2,71, 3,19, 3,22-3,24, 3,36-3,40,4,45-4,59, 4,81-4,87, 5,05-5,10, 5,37-5,47, 6,05, 6,10-6,16, 6,84-6,93, 7,07-7,15, 7,17-7,23, 7,36-7,44, 8,24.

Exemplo 11(7) 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-{1-[(2E)-4-(1-pirrolidinil)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00292] TLC: Rf 0,39 (acetato de etiIa : metanoI : trietiIamina = 9 : 1 : 0,5);

[00293] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,79-1,83, 2,50-2,65, 3,28-3,31, 4,444,60, 4,80-4,85, 5,04-5,09, 5,35-5,45, 6,10-6,15, 6,90-6,99, 7,06-7,14, 7,16-7,22, 7,35-7,43, 8,23.

Exemplo 11(8) 6-amino-9-(1-{(2E)-4-[(2-hidroxietil)(metil)amino]-2-butenoil}-3-azetidinil)-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00294] TLC: Rf 0,40 (diclorometano : metanol : amônia aquosa = 9 : 1 : 0,1);

[00295] 1H-RMN (CDCl3): δ 2,29, 2,57-2,61, 3,23-3,26, 3,59-3,63,4,44-4,59, 4,80-4,86, 5,04-5,09, 5,36-5,46, 6,06-6,13, 6,86-6,95, 7,077,15, 7,16-7,26, 7,35-7,42, 8,24.

Exemplo 11(9) 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(1-pirrolidinil)-2-butenoil]-3- pirrolidinil}-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00296] TLC: Rf 0,42 (clorofórmio : metanol = 9 : 1);

[00297] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,74-1,92, 2,15-2,43, 2,54-2,70, 2,823,06, 3,32, 3,49-3,77, 3,91-4,20, 4,23-4,36, 4,51, 5,10-5,28, 6,36, 6,91-7,04, 7,06-7,24, 7,37-7,45, 8,21.

Exemplo 11(10) 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(1-piperidinil)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00298] TLC: Rf 0,39 (clorofórmio : metanol = 9 : 1);

[00299] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,35-1,50, 1,51-1,65, 2,20-2,48, 2,823,06, 3,12, 3,52-3,75, 3,88-4,19, 4,21-4,33, 4,51, 5,09-5,28, 6,27, 6,88-7,04, 7,05-7,23, 7,34-7,44, 8,22.

Exemplo 11(11) 6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(4-morfolinil)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00300] TLC: Rf 0,51 (clorofórmio : metanol = 9 : 1);

[00301] 1H-RMN (CDCl3): δ 2,19-2,54, 2,83-3,05, 3,14, 3,51-3,77,3,89-4,19, 4,21-4,32, 4,57, 5,10-5,28, 6,31, 6,87-6,99, 7,04-7,23, 7,347,46, 8,21.

Exemplo 11(12) 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(4-tiomorfolinil)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00302] TLC: Rf 0,54 (clorofórmio : metanol = 9 : 1);

[00303] 1H-RMN (CDCl3): δ 2,10-2,43, 2,50-2,78, 2,82-3,06, 3,15,3,51-3,74, 3,89-4,19, 4,22-4,33, 4,51, 5,09-5,28, 6,29, 6,86-6,99, 7,047,23, 7,35-7,47, 8,22.

Exemplo 11(13) 6-amino-9-[(3R)-1-{(2E)-4-[etil(metil)amino]-2-butenoil}-3-pirrolidinil]-7- (4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00304] TLC: Rf 0,34 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

[00305] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,05-1,19, 2,20-2,43, 2,35, 2,59, 2,823,08, 3,31, 3,50-3,77, 3,90-4,20, 4,23-4,33, 4,50, 5,10-5,28, 6,38, 6,88-6,99, 7,04-7,23, 7,35-7,46, 8,21. Exemplo 11(14) 6-amino-9-{(3S)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4- fenoxifeniI)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00306] TLC: Rf 0,38 (dicIorometano : metanoI : amônia aquosa = 9 : 1 : 0,1);

[00307] 1H-RMN (CDCI3): δ 2,20-2,42, 2,83-3,14, 3,52-3,74, 3,924,20, 4,24-4,32, 4,42-4,51, 5,13-5,25, 6,20-6,38, 6,87-7,00, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,20-8,23.

Exemplo 11(15) 6-amino-9-{1-[(2E)-4-(dietilamino)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00308] TLC: Rf 0,47 (acetato de etiIa : metanoI : trietiIamina = 9 : 1 : 0,5);

[00309] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,01-1,06, 2,51-2,58, 3,25-3,27, 4,444,59, 4,81-4,86, 5,04-5,09, 5,36-5,46, 6,07-6,13, 6,91-7,00, 7,07-7,15, 7,17-7,23, 7,36-7,44, 8,24.

Exemplo 11(16) 6-amino-9-(1-{(2E)-4-[etil(metil)amino]-2-butenoil}-3-azetidinil)-7-(4- fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00310] TLC: Rf 0,50 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

[00311] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,05-1,09, 2,24, 2,41-2,48, 3,15-3,18,4,44-4,59, 4,80-4,86, 5,04-5,09, 5,36-5,46, 6,05-6,12, 6,89-6,98, 7,077,15, 7,17-7,23, 7,36-7,44, 8,24.

Exemplo 11(17) 2-{[(2E)-4-{3-[6-amino-8-oxo-7-(4-fenoxifenil)-7,8-di-hidro-9H-purin-9- il]-1-azetidinil}-4-oxo-2-buten-1-il](metil)amino}acetamida

[00312] TLC: Rf 0,30 (acetato de etiIa : metanoI : trietiIamina = 9 : 1 : 0,5);

[00313] 1H-RMN (CDCl3): δ 2,35, 3,04, 3,23-3,25, 4,45-4,60, 4,814,87, 5,04-5,09, 5,37-5,47, 5,61, 6,05-6,11, 6,84-6,94, 6,99, 7,07-7,15, 7,17-7,23, 7,35-7,44, 8,24.

Exemplo 11(18) 6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(dietilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00314] TLC: Rf 0,52 (clorofórmio : metanol = 9 : 1);

[00315] 1H-RMN (CDCl3): δ 0,96-1,11, 2,21-2,43, 2,45-2,63, 2,833,05, 3,29, 3,52-3,78, 3,90-4,20, 4,22-4,33, 4,49, 5,10-5,28, 6,33, 6,90-7,04, 7,05-7,23, 7,34-7,47, 8,21.

Exemplo 11(19) 6-amino-9-[(3R)-1-{(2E)-4-[(2-hidroxietil)(metil)amino]-2-butenoil}-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00316] TLC: Rf 0,18 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

[00317] 1H-RMN (CDCl3): δ 2,21-2,62, 2,85-3,08, 3,21-3,28, 3,523,74, 3,92-4,17, 4,25-4,33, 4,61-4,63, 5,13-5,30, 6,24-6,37, 6,87-6,98, 7,07-7,23, 7,35-7,44, 8,19-8,22.

Exemplo 11(20) 6-amino-9-{1-[(2E)-4-(4-hidróxi-1-piperidinil)-2-butenoil]-3-azetidinil}-7- (4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00318] TLC: Rf 0,30 (diclorometano : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,1);

[00319] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,30-1,75, 1,82-1,97, 2,10-2,24, 2,652,82, 3,05-3,20, 3,61-3,78, 4,40-4,60, 4,78-4,86, 5,00-5,11, 5,33-5,46, 6,02-6,12, 6,84-6,98, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,23. Exemplo 11(21) 6-amino-7-[4-(3-clorofenóxi)fenil]-9-{(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2- butenoil]-3-pirrolidinil}-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00320] TLC: Rf 0,28 (clorofórmio : metanol = 9 : 1);

[00321] 1H-RMN (CDCl3): δ 2,17-2,43, 2,25, 2,83-3,05, 3,08, 3,513,76, 3,91-4,20, 4,22-4,33, 4,50, 5,10-5,18, 6,29, 6,88-7,01, 7,09, 7,10-7,20, 7,33, 7,42, 8,23.

Exemplo 11(22) 6-amino-9-[(3S)-1-{(2E)-4-[etil(metil)amino]-2-butenoil}-3-pirrolidinil]-7- (4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00322] TLC: Rf 0,44 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 18 : 2 : 1);

[00323] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,00-1,14, 2,18-2,32, 2,32-2,53, 2,823,06, 3,10-3,23, 3,50-3,77, 3,86-4,09, 4,09-4,35, 4,37-4,58, 5,06-5,32, 6,20-6,41, 6,87-7,03, 7,03-7,25, 7,31-7,50, 8,14-8,30.

Exemplo 11(23) 6-amino-9-{(3S)-1-[(2E)-4-(dietilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00324] TLC: Rf 0,44 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 18 : 2 : 1);

[00325] 1H-RMN (CDCiβ): δ 0,97-1,11, 2,19-2,46, 2,47-2,65, 2,853,05, 3,21-3,35, 3,50-3,76, 3,89-4,09, 4,09-4,33, 4,40-4,55, 5,10-5,28, 6,21-6,43, 6,88-7,05, 7,05-7,24, 7,34-7,48, 8,17-8,27. Exempio 11(24) 6-amino-9-{1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4- fenoxifenii)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00326] TLC: Rf 0,38 (diciorometano : metanoi : amônia aquosa = 9 : 1 : 0,1);

[00327] 1H-RMN (CDCi3): δ 2,20-2,42, 2,83-3,14, 3,52-3,74, 3,924,20, 4,24-4,32, 4,42-4,51, 5,13-5,25, 6,20-6,38, 6,87-7,00, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,20-8,23.

Exemplo 11(25) 6-amino-9-({(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirroiidinii}metii)-7-(4-fenoxifenii)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00328] TLC: Rf 0,28 (ciorofórmio : metanoi = 9 : 1);

[00329] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,75-1,97, 2,00-2,16, 2,20-2,26, 2,833,00, 3,02-3,10, 3,38-3,62, 3,69-3,82, 3,98-4,08, 4,50-4,60, 6,19-6,31, 6,82-6,96, 7,04-7,22, 7,35-7,43, 8,23.

Exemplo 11(26) 6-amino-9-({(2S)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-2-pirrolidinil}metil)-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00330] TLC: Rf 0,30 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

[00331] 1H-RMN (CDCls): δ 1,86-2,27, 2,98-3,02, 3,03-3,17, 3,453,76, 3,88-3,95, 3,98-4,08, 4,15-4,23, 4,39-4,42, 4,47-4,57, 4,80-4,91, 6,09-6,19, 6,66-6,83, 6,94-7,03, 7,04-7,23, 7,35-7,46, 8,20-8,27.

Exemplo 12 dissulfito de dimetilaminoacetaldeído

[00332] Água (1 mL) e ácido cIorídrico concentrado (2,4 mL) foram acrescentados a dimetilaminoacetaldeído dietil acetal (2,00 g) e foi realizado aquecimento por 3 horas a 40°C. Dissulfito de sódio (solução aquosa a 3,0 M, 3,6 mL) e etanol (10 mL) foram acrescentados sobre um banho de gelo e foi realizada agitação por 1 hora e 30 minutos em temperatura ambiente. Filtração foi realizada seguida por concentração. O resíduo resultante foi evaporado até secagem sob pressão reduzida a 60°C para obter o composto do título (1,29 g).

Exemplo 13 (3R)-3-{[6-(dibenzilamino)-5-nitropirimidin-4-il]amino}pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila

[00333] O composto do título (27,0 g) tendo o valor de propriedade física dado abaixo foi obtido seguindo o mesmo modelo de processo que no Exemplo 2, usando o composto (19 g) produzido no Exemplo 1 e usando (3R)-3-aminopirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (10,5 g) ao invés do 3-aminoazetidina-1-carboxilato de terc-butila.

[00334] TLC: Rf 0,29 (hexano : acetato de etila = 4 : 1).

Exemplo 14 di-cloridrato de 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-[(3R)-pirrolidin-3-il]-7,9-di- hidro-8H-purin-8-ona

[00335] O composto do título (945 mg) tendo o valor de propriedade física indicado abaixo foi obtido seguindo o mesmo modelo de processo que no Exemplo 10, usando o composto (9,0 g) produzido no Exemplo 13 e usando ácido p-fenoxifenilbórico (2,1 g).

[00336] TLC: Rf 0,43 (diclorometano : metanol : amônia aquosa = 8 : 1 : 0,1).

Exemplo 15 (2-{[(3R)-3-[6-amino-8-oxo-7-(4-fenoxifenil)-7,8-di-hidro-9H-purin-9- il]pirrolidin-1-il}-2-oxoetil)fosfonato de dietila

[00337] 1,1'-carbonildiimidazol (0,827 g) foi acrescentado a tetra-hidrofurano (5 mL) e foi realizado aquecimento até 40°C. A esta solução foi acrescentado ácido dietilfosfonoacético (1,00 g) dissolvido em tetra- hidrofurano (5 mL). Foi realizada agitação por 30 minutos a 40°C. A solução produzida desta forma (0,28 mL), o composto (50 mg) produzido no Exemplo 14, e trietilamina (0,03 mL) foram acrescentados a tetra- hidrofurano (0,5 mL) e foi realizada agitação por 1 dia em temperatura ambiente. Água foi acrescentada e foi realizada extração com acetato de etila. A camada orgânica obtida foi lavada com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secada sobre sulfato de sódio, em seguida filtrada, e concentrada. O resíduo resultante foi evaporado até secagem sob pressão reduzida para obter o composto do título (53 mg) tendo o valor de propriedade física indicado abaixo.

[00338] TLC: Rf 0,46 (clorofórmio : metanol : amônia aquosa a 28% = 80 : 10 : 1). Exemplo 16 6-amino-9-{(3R)-1-[(2Z)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4- fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00339] O composto (53 mg) preparado no Exemplo 12 foi acrescentado a etanol (0,9 mL) e cloreto de lítio (4,2 mg) foi acrescentado. Hidróxido de potássio (solução aquosa a 45%, 0,056 mL) foi acrescentado sobre um banho de gelo e o composto (25 mg) preparado no Exemplo 15 dissolvido em água (0,25 mL) foi acrescentado. Foi realizada agitação por 30 minutos sobre um banho de gelo. Foi feita outra adição do composto (7,5 mg) preparado no Exemplo 15 dissolvido em água (0,25 mL). Foi realizada agitação por 2 horas sobre um banho de gelo, depois da qual foi realizada agitação por 1 dia em temperatura ambiente. Foi realizada extração com acetato de etila, e a camada orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia de camada fina (diclorometano : metanol : 28% de amônio aquoso = 80 : 10 : 1) para obter o composto do título (7,7 mg) tendo os valores de propriedades físicas indicados abaixo.

[00340] TLC: Rf 0,43 (clorofórmio : metanol : amônia aquosa = 80 : 10 : 1);

[00341] 1H-RMN (CDCls): δ 2,14-2,45, 2,81-3,03, 3,43-3,68, 3,804,06, 4,06-4,28, 4,42-4,62, 5,11-5,29, 5,97-6,24, 7,03-7,25, 8,17-8,28. Exemplo 17 4-({[6-(dibenzilamino)-5-nitropirimidin-4-il]amino}metil)piperidina-1- carboxilato de terc-butila

[00342] O composto do títuIo (68,3 g) tendo o vaIor de propriedade física indicado abaixo foi obtido seguindo o mesmo modelo de processo que no Exemplo 2, usando o composto (45,5 g) produzido no Exemplo 1 e usando 4-(aminometil)piperidina-1-carboxilato de terc- butila (27,5 g) ao invés do 3-aminoazetidina-1-carboxilato de terc- butila.

[00343] TLC: Rf 0,56 (hexano : acetato de etila = 2 : 1).

Exemplo 18 di-cloridrato de 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-(piperidin-4-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00344] O composto do título (1,66 g) tendo o valor de propriedade física indicado abaixo foi obtido seguindo o mesmo modelo de processo que no Exemplo 10, usando o composto produzido no Exemplo 17 e usando ácido p-fenoxifenilbórico (19 g).

[00345] TLC: Rf 0,10 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 18 : 2 : 1). Exemplo 19 6-amino-9-{[1-(2-butinoil)-4-piperidinil]metil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di- hidro-8H-purin-8-ona

[00346] Ácido 2-butinóico (34 mg), cloridrato de 1-etil-3-(3- dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC) (78 mg), 1-hidroxibenzotriazol (HOBt) (62 mg), e trietilamina (114 μL) foram acrescentados a uma solução de dimetilformamida (3 mL) do composto (100 mg) preparado no Exemplo 18, seguida por agitação por 3 horas em temperatura ambiente. Água foi acrescentada à mistura da reação e foi realizada extração com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e foi em seguida secada sobre sulfato de sódio anídrico e o solvente foi destilado. O resíduo foi purificado por cromatografia de camada fina (diclorometano : metanol : amônia aquosa a 28% = 90 : 10 : 1) para obter o composto do título (75 mg) tendo os valores de propriedades físicas indicados abaixo.

[00347] TLC: Rf 0,43 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00348] 1H-RMN (CDCls): δ 1,21-1,45, 1,71-1,83, 1,99, 2,18-2,36,2,59-2,72, 2,99-3,94, 4,34-4,61, 7,05-7,24, 7,36-7,43, 8,24.

Exemplos 19(1) a 19(49)

[00349] Os compostos exempIares dados abaixo foram obtidos seguindo o mesmo modelo de processo que no Exemplo 9 ^ Exemplo 10 ^ Exemplo 19, usando o composto preparado no Exemplo 1, usando (3R)-3-aminopiperidina-1-carboxilato de terc-butila ou o derivado de amina correspondente no seu lugar, e usando ácido p- fenoxifenilbórico ou o ácido bórico correspondente no seu lugar.

Exemplo 19(1) 6-amino-9-[1-(2-butinoil)-3-azetidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H- purin-8-ona

[00350] TLC: Rf 0,38 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00351] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,99, 4,39-4,57, 4,75-4,83, 4,97-5,05,5,32-5,43, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,24. Exemplo 19(2) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di- hidro-8H-purin-8-ona

[00352] TLC: Rf 0,68 (acetato de etila : metanol = 9 : 1);

[00353] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,23-2,39, 2,80-3,01, 3,503,63, 3,67-3,80, 3,86-4,02, 4,03-4,18, 4,23-4,33, 4,42-4,51, 5,11-5,25, 7,04-7,23, 7,34-7,45, 8,20-8,23.

Exemplo 19(3) 6-amino-9-[(3S)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di- hidro-8H-purin-8-ona

[00354] TLC: Rf 0,27 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00355] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,473,62, 3,69-3,80, 3,89-4,00, 4,03-4,18, 4,23-4,34, 4,42-4,51, 5,13-5,25, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,20-8,23.

Exemplo 19(4) 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-[(3R)-1-propioloil-3-pirrolidinil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00356] TLC: Rf 0,51 (acetato de etiIa : metanoI = 19 : 1);

[00357] 1H-RMN (CDCI3): δ 2,25-2,43, 2,82-3,01, 3,05, 3,52-3,66,3,73-3,85, 3,92-4,04, 4,07-4,23, 4,31-4,40, 4,48, 5,17-5,27, 7,06-7,23, 7,34-7,47, 8,23.

Exemplo 19(5) (2E)-4-{3-[6-amino-8-oxo-7-(4-fenoxifenil)-7,8-di-hidro-9H-purin-9-il]-1-azetidinil}-4-oxo-N-fenil-2-butenamida

[00358] TLC: Rf 0,56 (acetato de etiIa : metanoI = 19 : 1);

[00359] 1H-RMN (CDCl3): δ 4,43-4,72, 4,87-4,96, 5,10-5,20, 5,405,52, 6,20, 6,36, 7,04-7,43, 7,72, 8,22, 12,49.

Exemplo 19(6) (2E)-4-{3-[6-amino-8-oxo-7-(4-fenoxifenil)-7,8-di-hidro-9H-purin-9-il]-1-azetidinil}-4-oxo-2-butenamida

[00360] TLC: Rf 0,50 (acetato de etila : metanol : trietilamina = 9 : 1 : 0,5);

[00361] 1H-RMN (DMSO): δ 4,29-4,35, 4,57-4,70, 4,86-4,91, 5,285,37, 5,82, 6,77-6,88, 7,10-7,20, 7,39-7,46, 7,86, 8,14.

Exemplo 19(7) 6-amino-7-(4-fenoxifenil)-9-[(1-propioloil-4-piperidinil)metil]-7,9-di-hidro- 8H-purin-8-ona

[00362] TLC: Rf 0,38 (clorofórmio : metanol = 9 : 1);

[00363] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,26-1,50, 1,74-1,88, 2,19-2,38, 2,69, 3,09, 3,10, 3,91, 4,41, 4,49, 4,56, 7,05-7,23, 7,35-7,44, 8,25.

Exemplo 19(8) (2E)-4-{(3R)-3-[6-amino-8-oxo-7-(4-fenoxifenil)-7,8-di-hidro-9H-purin-9- il]-1-pirrolidinil}-4-oxo-2-butenamida

[00364] TLC: Rf 0,41 (diclorometano : metanol : amônia aquosa = 9 : 1 : 0,1);

[00365] 1H-RMN (CDCI3): δ 2,23-2,47, 2,81-3,02, 3,45-3,82, 3,994,23, 4,35-4,53, 5,16-5,31, 5,50-5,65, 5,84-6,00, 6,97-7,30, 7,34-7,43, 8,19-8,22. Exemplo 19(9) 6-amino-9-[1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H- purin-8-ona

[00366] TLC: Rf 0,27 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00367] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,473,62, 3,69-3,80, 3,89-4,00, 4,03-4,18, 4,23-4,34, 4,42-4,51, 5,13-5,25, 7,05-7,24, 7,35-7,43, 8,20-8,23.

Exemplo 19(10) (2E)-4-{3-[6-amino-8-oxo-7-(4-fenoxifenil)-7,8-di-hidro-9H-purin-9-il]-1-azetidinil}-4-oxo-2-butenoato de etila

[00368] TLC: Rf 0,35 (acetato de etila);

[00369] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,30-1,35, 4,22-4,30, 4,48-4,68, 4,844,90, 5,12-5,17, 5,40-5,50, 6,86-7,06, 7,07-7,16, 7,18-7,23, 7,35-7,44, 8,24.

Exemplo 19(11) 6-amino-9-{1-[(2E)-4-fenoxi-2-butenoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00370] TLC: Rf 0,55 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00371] 1H-RMN (CDCI3): δ 4,38-4,60, 4,68-4,79, 4,80-4,89, 4,995,11, 5,32-5,46, 6,24-6,34, 6,87-7,43, 8,22.

Exemplo 19(12) 6-amino-9-{1-[(2E)-4-hidróxi-2-butenoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00372] TLC: Rf 0,21 (acetato de etiIa : metanoI = 9 : 1);

[00373] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,82-1,90, 4,35-4,41, 4,43-4,62, 4,794,87, 5,03-5,12, 5,36-5,47, 6,19-6,26, 6,98-7,23, 7,35-7,44, 8,23.

Exemplo 19(13) 6-amino-9-{1-[(2E)-2,4-pentadienoil]-3-azetidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00374] TLC: Rf 0,47 (acetato de etiIa : metanoI = 9 : 1);

[00375] 1H-RMN (CDCl3): δ 4,42-4,67, 4,80-4,90, 5,02-5,13, 5,335,50, 5,61, 6,02, 6,39-6,55, 7,04-7,27, 7,32-7,48, 8,24.

Exemplo 19(14) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(ciclo-hexilóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00376] TLC: Rf 0,44 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00377] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,22-2,46, 1,48-1,70, 1,72-1,88, 1,942,05, 2,22-2,40, 2,80-3,01, 3,51-3,62, 3,68-3,80, 3,87-4,00, 4,02-4,18, 4,22-4,37, 4,42-4,55, 5,11-5,24, 6,98-7,05, 7,29-7,36, 8,19-8,23.

Exemplo 19(15) 6-amino-9-({(3R)-1-[(2E)-4-(dimetilamino)-2-butenoil]-3-pirrolidinil}metil)-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00378] TLC: Rf 0,28 (clorofórmio : metanol = 9 : 1);

[00379] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,75-1,97, 2,00-2,16, 2,20-2,26, 2,833,00, 3,02-3,10, 3,38-3,62, 3,69-3,82, 3,98-4,08, 4,50-4,60, 6,19-6,31,6,82-6,96, 7,04-7,22, 7,35-7,43, 8,23.

Exemplo 19(16) 6-amino-9-{[(2S)-1-(2-butenoil)-2-pirrolidinil]metil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00380] TLC: Rf 0,48 (acetato de etila : metanol = 9 : 1);

[00381] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,75, 3,80-2,27, 3,58-3,73, 3,94-4,04,4,06-4,19, 4,39-4,55, 4,66-4,82, 7,03-7,22, 7,35-7,46, 8,22-8,24.

Exemplo 19(17) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3-clorofenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00382] TLC: Rf 0,45 (diclorometano : metanol : amônia aquosa = 9 : 1 : 0,1);

[00383] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,473,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42-4,51, 5,13-5,25, 6,93-7,00, 7,05-7,09, 7,10-7,20, 7,26-7,35, 7,38-7,44, 8,20-8,24.

Exemplo 19(18) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3-fluorofenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00384] TLC: Rf 0,52 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00385] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,513,62, 3,68-3,80, 3,88-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,40-4,55, 5,13-5,25, 6,77-6,93, 7,12-7,20, 7,28-7,44, 8,20-8,25.

Exemplo 19(19) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3,5-difluorofenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00386] TLC: Rf 0,48 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00387] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,523,63, 3,68-3,80, 3,88-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42-4,54, 5,13-5,25, 6,53-6,66, 7,17-7,27, 7,41-7,48, 8,21-8,26.

Exemplo 19(20) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(3-fluoro-4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00388] TLC: Rf 0,41 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00389] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,00, 3,523,63, 3,68-3,80, 3,88-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,46-4,57, 5,13-5,25, 7,02-7,21, 7,29-7,42, 8,21-8,26.

Exemplo 19(21) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-fluorofenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00390] TLC: Rf 0,26 (acetato de etiIa);

[00391] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,473,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42-4,54, 5,12-5,25, 6,99-7,16, 7,35-7,41, 8,20-8,24.

Exemplo 19(22) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-clorofenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00392] TLC: Rf 0,28 (acetato de etiIa);

[00393] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,02, 3,473,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42-4,54, 5,12-5,25, 7,00-7,06, 7,09-7,17, 7,30-7,43, 8,20-8,24.

Exemplo 19(23) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3-metilfenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00394] TLC: Rf 0,35 (acetato de etila);

[00395] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,473,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42-4,51, 5,13-5,25, 6,84-6,92, 6,99-7,03, 7,07-7,15, 7,24-7,31, 7,36-7,41, 8,20-8,24.

Exemplo 19(24) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-metilfenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00396] TLC: Rf 0,33 (acetato de etila);

[00397] 1H-RMN (CDCls): δ 1,94-2,03, 2,22-2,42, 2,80-3,01, 3,473,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42-4,55, 5,13-5,25, 6,95-7,02, 7,04-7,16, 7,17-7,23, 7,33-7,41, 8,20-8,24.

Exemplo 19(25) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-{4-[3-(trifIuorometiI)fenóxi]feniI}-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00398] TLC: Rf 0,33 (acetato de etiIa);

[00399] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,94-2,03, 2,22-2,42, 2,80-3,01, 3,473,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42-4,55, 5,13-5,25, 7,12-7,20, 7,22-7,28, 7,35-7,38, 7,40-7,57, 8,20-8,24.

Exemplo 19(26) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-metoxifenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00400] TLC: Rf 0,23 (acetato de etiIa);

[00401] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,473,62, 3,69-3,80, 3,83, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,41-4,55, 5,135,25, 6,89-6,97, 7,00-7,08, 7,30-7,38, 8,19-8,23.

Exemplo 19(27) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3-metoxifenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00402] TLC: Rf 0,28 (acetato de etiIa);

[00403] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,473,62, 3,69-3,83, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,41-4,55, 5,13-5,25, 6,62-6,69, 6,71-6,78, 7,10-7,19, 7,24-7,35, 7,36-7,42, 6,89-6,97, 7,007,08, 7,30-7,38, 8,20-8,24.

Exemplo 19(28) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-isopropilfenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00404] TLC: Rf 0,31 (acetato de etiIa);

[00405] 1H-RMN (CDCls): δ 1,20-1,34, 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,813,01, 3,47-3,63, 3,69-3,79, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,46-4,57, 5,13-5,25, 6,98-7,03, 7,06-7,15, 7,21-7,30, 7,33-7,41, 8,20-8,24.

Exemplo 19(29) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3-isopropilfenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00406] TLC: Rf 0,40 (acetato de etiIa);

[00407] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,20-1,28, 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,813,01, 3,47-3,63, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,46-4,57, 5,13-5,25, 6,84-6,90, 6,98, 7,04-7,16, 7,27-7,41, 8,20-8,24.

Exemplo 19(30) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(2-isopropilfenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00408] TLC: Rf 0,37 (acetato de etila);

[00409] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,20-1,27, 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,813,01, 3,16-3,30, 3,47-3,63, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,46-4,56, 5,13-5,25, 6,93-7,00, 7,01-7,08, 7,17-7,24, 7,32-7,41, 8,208,24.

Exemplo 19(31) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(2-metilfenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00410] TLC: Rf 0,64 (acetato de etila);

[00411] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24, 2,24-2,40, 2,81-3,01,3,47-3,63, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,44-4,55, 5,135,25, 6,98-7,05, 7,10-7,18, 7,20-7,40, 8,20-8,24.

Exemplo 19(32) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3-clorofenóxi)-3-metoxifenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00412] TLC: Rf 0,33 (acetato de etila);

[00413] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,82-3,01, 3,47- 3,63, 3,69-3,81, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,48-4,60, 5,14-5,26, 6,85-6,92, 6,95-7,01, 7,05-7,14, 7,22-7,29, 8,23-8,27.

Exemplo 19(33) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3,4-diclorofenóxi)-3-metoxifenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00414] TLC: Rf 0,33 (acetato de etila);

[00415] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,82-3,01, 3,473,63, 3,69-3,81, 3,87, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,48-4,60, 5,145,27, 6,81-6,86, 6,97-7,01, 7,06-7,16, 7,37-7,40, 8,23-8,27.

Exemplo 19(34) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-(3-metoxi-4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00416] TLC: Rf 0,31 (acetato de etila);

[00417] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,82-3,01, 3,473,63, 3,69-3,81, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,48-4,60, 5,14-5,27, 6,90-6,97, 7,00-7,04, 7,05-7,18, 7,32-7,41, 8,23-8,26.

Exemplo 19(35) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3,4-diclorofenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00418] TLC: Rf 0,37 (acetato de etila);

[00419] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,503,63, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,44-4,55, 5,14-5,27, 6,92-6,98, 7,12-7,22, 7,40-7,49, 8,21-8,26.

Exemplo 19(36) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-piperidinil]-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00420] TLC: Rf 0,59 (acetato de etila);

[00421] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,55-1,80, 1,84-2,11, 2,55-2,76, 3,073,21, 3,63-3,74, 4,06-4,17, 4,38-4,59, 4,60-4,74, 7,04-7,23, 7,33-7,44, 8,20-8,24.

Exemplo 19(37) 6-amino-7-[4-(benzilóxi)fenil]-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7,9-di- hidro-8H-purin-8-ona

[00422] TLC: Rf 0,22 (acetato de etila);

[00423] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,503,62, 3,68-3,79, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,40-4,50, 5,08-5,27, 7,07-7,16, 7,32-7,46, 8,18-8,25.

Exemplo 19(38) 6-amino-7-[4-(1,3-benzodioxol-5-ilóxi)fenil]-9-[1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00424] TLC: Rf 0,69 (acetato de etila : metanol : amônia aquosa = 9 : 1 : 0,1);

[00425] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,80-3,01, 3,473,62, 3,69-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,40-4,51, 5,12-5,25, 6,01, 6,53-6,59, 6,60-6,63, 6,79-6,83, 7,04-7,13, 7,32-7,40, 8,20-8,23.

Exemplo 19(39) 6-amino-7-(4-anilinofenil)-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7,9-di- hidro-8H-purin-8-ona

[00426] TLC: Rf 0,66 (acetato de etila : metanol = 9 : 1);

[00427] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,23-2,40, 2,80-3,01, 3,503,62, 3,68-3,80, 3,87-4,00, 4,02-4,19, 4,23-4,34, 4,46-4,60, 5,12-5,25, 6,02, 7,00-7,18, 7,22-7,40, 8,18-8,22.

Exemplo 19(40) 6-amino-7-(4-benzoilfenil)-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00428] TLC: Rf 0,62 (acetato de etila : metanol = 8 : 1);

[00429] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,41, 2,81-3,01, 3,523,63, 3,68-3,81, 3,88-4,01, 4,03-4,20, 4,25-4,36, 4,55-4,65, 5,17-5,29, 7,49-7,68, 7,81-7,86, 7,97-8,03, 8,25-8,29.

Exemplo 19(41) 6-amino-7-(4-benziIfeniI)-9-[(3R)-1-(2-butinoiI)-3-pirroIidiniI]-7,9-di- hidro-8H-purin-8-ona

[00430] TLC: Rf 0,53 (acetato de etila : metanol = 9 : 1);

[00431] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,94-2,02, 2,23-2,39, 2,80-3,00, 3,503,61, 3,67-3,79, 3,87-4,00, 4,02-4,18, 4,23-4,32, 4,44-4,52, 5,12-5,24, 7,18-7,42, 8,19-8,23.

Exemplo 19(42) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoiI)-3-pirroIidiniI]-7-[4-(fenoximetiI)feniI]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00432] TLC: Rf 0,50 (acetato de etiIa : metanoI = 19 : 1);

[00433] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,94-2,03, 2,25-2,40, 2,82-3,01, 3,513,63, 3,69-3,80, 3,88-4,01, 4,05-4,19, 4,25-4,34, 4,45-4,54, 5,11-5,27, 6,95-7,05, 7,28-7,37, 7,43-7,51, 7,60-7,66, 8,22-8,27.

Exemplo 19(43) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoiI)-3-pirroIidiniI]-7-{4-[(6-metiI-2-piridinil)óxi]fenil}-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00434] TLC: Rf 0,48 (acetato de etiIa : metanoI = 19 : 1);

[00435] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,46, 2,81-3,01,3,50-3,62, 3,68-3,80, 3,87-4,01, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,52-4,62, 5,145,27, 6,73-6,78, 6,93-6,98, 7,23-7,32, 7,40-7,46, 7,60-7,67, 8,21-8,25.

Exemplo 19(44) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoiI)-3-pirroIidiniI]-7-[4-(4-fIuoro-3-metiIfenóxi)feniI]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00436] TLC: Rf 0,51 (acetato de etiIa : metanoI = 19 : 1);

[00437] 1H-RMN (CDCI3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,523,63, 3,68-3,80, 3,87-4,01, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42-4,54, 5,14-5,27, 6,84-6,95, 6,99-7,12, 7,34-7,41, 8,20-8,24.

Exemplo 19(45) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoiI)-3-pirroIidiniI]-7-[4-(4-metoxi-3-metiIfenóxi)feniI]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00438] TLC: Rf 0,51 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00439] 1H-RMN (CDCls): δ 1,94-2,03, 2,23, 2,24-2,39, 2,81-3,01,3,52-3,62, 3,68-3,80, 3,85, 3,87-4,01, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,42-4,54, 5,14-5,26, 6,80-6,84, 6,85-6,93, 7,01-7,09, 7,31-7,39, 8,20-8,24.

Exemplo 19(46) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-fluoro-3-metoxifenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00440] TLC: Rf 0,48 (acetato de etiIa : metanoI = 19 : 1);

[00441] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,483,63, 3,68-3,80, 3,87-4,01, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,44-4,56, 5,14-5,26, 6,57-6,63, 6,70-6,78, 7,03-7,14, 7,37-7,43, 8,20-8,24.

Exemplo 19(47) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(3,4-dimetilfenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00442] TLC: Rf 0,53 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00443] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,483,62, 3,68-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,48-4,59, 5,14-5,25, 6,80-6,84, 6,89, 7,04-7,17, 7,32-7,40, 8,20-8,24.

Exemplo 19(48) 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-[4-(4-cloro-3-metilfenóxi)fenil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00444] TLC: Rf 0,64 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00445] 1H-RMN (CDCl3): δ 1,94-2,03, 2,24-2,40, 2,81-3,01, 3,523,64, 3,70-3,80, 3,87-4,00, 4,03-4,19, 4,23-4,34, 4,48-4,59, 5,14-5,25, 6,82-6,88, 6,98, 7,06-7,15, 7,33-7,42, 8,20-8,24.

Exemplo 19(49) 6-amino-9-{(3R)-1-[(2E)-3-cloro-2-butenoil]-3-pirrolidinil}-7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00446] TLC: Rf 0,64 (acetato de etila : metanol = 19 : 1);

[00447] 1H-RMN (CDCl3): δ 2,23-2,31, 2,32-2,40, 2,54-2,60, 2,86- 2,97, 3,47-3,65, 2,81-3,01, 3,52-3,64, 3,84-3,88, 3,93-4,01, 4,08-4,14, 4,20-4,25, 4,40-4,54, 5,15-5,24, 6,20-6,31, 7,07-7,17, 7,18-7,22, 7,357,44, 8,20-8,24. Exemplo 20 6-amino-9-{1-[(2E)-4-(1H-benzotriazol-1-ilóxi)-2-butenoil]-3-azetidinil}- 7-(4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00448] Ácido 4-bromocrotônico (0,44 g), cloridrato de 1-etil-3-(3- dimetilaminopropil)carbodiimida (0,86 g), HOBt (0,68 g), e trietilamina (1,3 mL) foram acrescentados a uma solução de dimetilformamida (22 mL) do composto (1,0 g) preparado no Exemplo 7, seguida por agitação por 1 hora em temperatura ambiente. Água foi acrescentada à mistura da reação e foi realizada extração com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e foi em seguida secada sobre sulfato de sódio anídrico e o solvente foi destilado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica-gel para obter o composto do título (0,43 g) tendo os valores de propriedades físicas indicados abaixo.

[00449] TLC: Rf 0,56 (diclorometano : metanol : amônia aquosa a 28% = 9 : 1 : 0,1);

[00450] 1H-RMN (CDCls): δ 4,43-4,63, 4,79-4,88, 4,99-5,05, 5,225,24, 5,35-5,45, 6,26-6,34, 7,01-7,23, 7,36-7,44, 7,51-7,62, 8,22.

Exemplo 21 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7-{4- [hidróxi(fenil)metil]fenil}-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona

[00451] Uma solução de metanol (1 mL) do composto (30 mg) preparado no Exemplo 19(40) foi resfriada até 0°C; boroidreto de sódio (2,4 mg) foi acrescentado; e foi realizada agitação por 30 minutos. A mistura da reação foi diluída com acetato de etila e foi em seguida lavada com água e uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio seguido por concentração sob pressão reduzida, e o resíduo obtido foi purificado por cromatografia de coluna de sílica-gel (acetato de etila ^ acetato de etila : metanol = 10 : 1) para obter o composto do título (28 mg) tendo os valores de propriedades físicas indicados abaixo.

[00452] TLC: Rf 0,58 (acetato de etila : metanol = 9 : 1);

[00453] 1H-RMN (CDCls): δ 1,94-2,03, 2,23-2,39, 2,57, 2,80-3,00,3,50-3,61, 3,67-3,79, 3,87-4,00, 4,02-4,18, 4,23-4,32, 4,45-4,54, 5,125,24, 5,91, 7,27-7,43, 7,56-7,62, 8,20-8,23.

Exemplos farmacológicos experimentais Exemplo Biológico 1 Medição (testes in vitro) da atividade inibitória de Btk e da seletividade para Btk

[00454] A atividade inibitória enzimática de Btk foi medida, com base no protocolo proporcionado pelo fabricante, usando Btk (Invitrogen Corporation) e o kit de teste de quinase Z'-LYTE™ Kinase Assay Kit-Tyr1 peptide (Invitrogen Corporation), o qual continha os seguintes reagentes: peptídeo Tyr-1, fosfopeptídeo Thy-1, 5x tampão de quinase, ATP, reagente de desenvolvimento B, tampão de desenvolvimento, e reagente de parada.

[00455] 5 μL/cavidade de uma solução do composto de teste diluído com dimetil sulfóxido (DMSO), ou DMSO, e 10 μL/cavidade da solução da mistura de substrato / enzima foram dispensados em uma lâmina de teste de 96 cavidades e foi realizada uma reação por 20 minutos a 30°C. A solução da mistura de substrato / enzima foi preparada por diluição com o tampão de quinase (DL-ditiotreitol (DTT, 2,7 mM), 1,33x tampão de quinase) para proporcionar uma concentração final para o peptídeo Tyr-1 de 4 μM e uma concentração final de Btk de 5 nM. 5 μL/cavidade do trifosfato de adenosina (ATP, concentração final = 36 μM) foi em seguida acrescentado e foi realizada uma reação por 1 hora a 30°C. Depois do completamento da reação, 10 μL de uma solução de desenvolvimento, proporcionada por diluição do reagente de desenvolvimento B até 128x usando o tampão de desenvolvimento, foi acrescentado e foi realizada uma reação por um adicional 1 hora a 30°C. A reação enzimática foi em seguida interrompida por acréscimo de 10 μL da solução de parada. A intensidade de fluorescência a 445 nm e 520 nm em cada cavidade foi medida usando uma leitora de lâminas de fluorescência Fusion Universal Microplate Analyzer (PerkinElmer Inc.). A percentagem de fosforilação foi determinada usando a proporção da emissão a 445 nm (emissão de cumarina) para a emissão a 520 nm (emissão de fluoresceína) de acordo com o protocolo proporcionado com o kit.

[00456] A percentagem de inibição (%) pelo composto de teste foi calculada usando a seguinte equação. [E1] percentagem de inibição (%) da fosforilação =1 - {(AC - AX)/(AC - AB)} x 100

[00457] AX : % de fosforilação quando o composto de teste tinha sido acrescentado

[00458] AB : % de fosforilação na ausência de adição de ATP (em branco)

[00459] AC : % de fosforilação quando somente DMSO tinha sido acrescentado (controle)

[00460] O valor de 50% de inibição (valor de IC50) para o composto de teste foi determinado a partir da curva de inibição com base na % de inibição em cada concentração do composto de teste.

[00461] A atividade inibitória para outras quinases (por exemplo, Lck, Fyn, e LynA (todas da Invitrogen Corporation) foi medida na mesma maneira conforme descrito acima usando a quinase particular ao invés da Btk.

[00462] De acordo com os resultados, os valores da IC50 para os compostos da presente invenção foram, por exemplo, 0,004 μM para o composto do Exemplo 8, 0,014 μM para o composto do Exemplo 11(3), 0,004 μM para o composto do Exemplo 8(14), 0,007 μM para o composto do Exemplo 19(2), e 0,011 μM para o composto do Exemplo 19(40).

[00463] Além disso, a atividade inibitória seletiva para Btk dos compostos da presente invenção para outras quinases, e particularmente para Lck, Fyn, e LynA, foi calculada como a proporção dos valores da IC50 das quinases individuais e é dada na Tabela 1 abaixo.Tabela 1

[00464] Estes resultados mostram que os compostos da presente invenção não somente têm uma atividade inibitória de Btk, mas também têm uma atividade inibitória seletiva para Btk com respeoto a outras quinases.

Exemplo Biológico 2 Medição da ativação de células B ou ativação de células T usando PBMC humanas

[00465] Uma solução a 10 mmol/L do composto de teste em DMSO foi dispensada em uma lâmina de 96 cavidades (Nunc) e uma série de diluição de 5x foi preparada usando DMSO. Uma solução de diluição do composto de teste em concentração de 100x foi preparada por uma diluição adicional de 10x com meio RPMI1640 (continha 10% de HI- FBS, 1% de penicilina). Células mononucleares do sangue periférico humano (PBMC) foram diluídas com o meio para proporcionar uma densidade de 2 x 106 células/mL. 396 μL da suspensão celular foi acrescentado a uma lâmina de 96 cavidades na qual 4 μL da solução de diluição do composto de teste em concentração de 100x ou o solvente (10% de DMSO) já tinham sido introduzidos e foi realizada incubação por 10 minutos a 37°C e 5% de CO2. 10 μL de uma solução de anticorpo anti-IgM (Southern Biotech)/IL-4 (R & D Systems) ou uma suspensão de contas de anticorpo anti-CD3/CD28 (Invitrogen Corporation) foi acrescentada a uma lâmina de 96 cavidades e 90 μL da suspensão celular preparada conforme descrito acima também foi acrescentado (concentrações finais: anticorpo anti-IgM = 1 μg/mL, IL-4 = 3 ng/mL, e contas de anticorpos anti-CD3/CD28 = 2 x 106 contas/mL). 10 μL do meio foi acrescentado às cavidades das amostras não estimuladas ao invés destas substâncias estimulantes, e foi novamente realizado repouso a 37°C e 5% de CO2. Foi realizada incubação por 16 horas no caso da avaliação da ativação de células T e por 22 horas no caso da avaliação da ativação de células B. 100 μL de tampão Cytofix Buffer (BD Biosciences) foi acrescentado; foi realizada contenção por 15 minutos a 37°C; foi realizada centrifugação por 10 minutos a 1500 rpm; e o sobrenadante foi removido. 200 μL de tampão Perm II (BD Biosciences) a -20°C foi acrescentado; foi realizada contenção por 30 minutos sobre gelo foi; foi realizada centrifugação por 10 minutos a 1500 rpm; e o sobrenadante foi removido. 0,5 mL de tampão Stain Buffer (BD Biosciences) foi acrescentado e foi realizada centrifugação por 10 minutos a 1500 rpm. 100 μL de uma solução de anticorpos mista foi acrescentado e foi realizada incubação por 30 minutos sobre gelo no escuro. O anticorpo foi a diluição a 10x com Stain Buffer da mistura a 1 : 1 : 1 de anticorpo anti-CD3 com etiqueta de PerCP (BD Biosciences), anticorpo anti- CD20 com etiqueta de AF488 (BD Biosciences), e anticorpo anti-CD69 com etiqueta de PE (BD Biosciences). 0,4 mL de Stain Buffer foi acrescentado e o sobrenadante foi removido. 0,3 mL de Stain Buffer foi acrescentado e o pélete celular foi suspendido para preparar uma amostra para medição por FACS. A análise FACS usou um software de análise de dados BD FACSCalibur (BD Biosciences) e CELLQuest Version 3.3 (BD Biosciences). Foi medido o sinal positivo para CD69 (intensidade de fluorescência média) das células CD20-positivas CD3- negativas (células B) ou das células CD3-positivas CD20-negativas (células T). Depois de subtrair o valor para a amostra não estimulada, foi determinada a % de inibição com referência ao valor para a amostra de controle estimulada. A % de inibição foi plotada graficamente usando Prism (ver. 5.01J, GraphPad Software) e foi determinado o valor da IC50.

[00466] De acordo com os resultados, os valores da IC50 dos compostos da presente invenção para o sinal positivo para CD69 para células B foi, por exemplo, de 0,021 μM para o composto do Exemplo 8, de 0,032 μM para o composto do Exemplo 11(3), de 0,023 μM para o composto do Exemplo 8(14), e de 0,061 μM para o composto do Exemplo 19(2). Por outro lado, os valores da IC50 dos compostos da presente invenção para o sinal positivo para CD69 para células T foi > 10 μM para todos os compostos precedentes. Por conseguinte, foi demonstrado que os compostos da presente invenção têm uma ação inibitória seletiva sobre a ativação de células B.

Exemplo Biológico 3 Avaliação da estabilidade no microssoma do fígado de rato e humano (1) Preparação da solução do composto de teste

[00467] Uma solução a 0,25 mmol/L foi preparada diluindo o composto de teste (10 mmol/L de solução de DMSO, 5 μL) com uma solução aquosa a 50% de acetonitrila (195 μL).

(2) Preparação da amostra da reação de 0 minuto

[00468] 245 μL de 0,1 mol/L de um tampão de fosfato (pH 7,4) contendo 0,5 mg/mL de microssomas de fígado de rato e humano (XenoTech) e NADPH-Cofator (BD Biosciences) foi acrescentado a um reator que tinha sido pré-aquecido até 37°C; foi realizada pré- incubação por 5 minutos; e a solução do composto de teste previamente indicada (5 μL) foi acrescentada e a reação foi iniciada. 20 μL foi coletado imediatamente depois do início e a reação foi interrompida pela adição a 180 μL de acetonitrila que continha um padrão interno (varfarina). 20 μL desta solução foi agitado com 180 μL de uma solução aquosa a 50% de acetonitrila sobre uma placa de filtro para depleção de proteína seguida por filtração por sucção, e o filtrado foi usado como a amostra padrão.

(3) Preparação da amostra da reação de 15 minutos

[00469] A solução da reação previamente indicada foi incubada por 15 minutos a 37°C, e 20 μL foi em seguida acrescentado a 180 μL de acetonitrila a frio (continha a varfarina de padrão interno) para interromper a reação. 20 μL desta foi agitado com 180 μL de uma solução aquosa a 50% de acetonitrila sobre uma placa de filtro para depleção de proteína seguida por filtração por sucção, e o filtrado foi usado como a amostra-padrão.

(4) Método de avaliação e resultados

[00470] A proporção residual (%) foi calculada injetando 1 μL da solução da amostra em um LC-MS/MS; dividindo a proporção da área de pico para a amostra da reação (área de pico para o composto de teste/ área de pico para o padrão interno) pela proporção da área de pico para a amostra padrão; e multiplicando o valor resultante por 100.

[00471] Os seguintes foram usados como compostos de teste: compostos da presente invenção e 1-{(3R)-3-[4-amino-3-(4- fenoxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il]-1-piperidinil}-2-propen-1- ona (composto comparativo A) e 1-{3-[4-amino-3-(4-fenoxifenil)-1H- pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il]-1-pirrolidinil}-2-propin-1-ona (compost comparativo B), os quais são compostos exemplares descritos no Documento de Patente 1 que têm um esqueleto de pirazolopirimidina. A proporção residual (%) do composto de teste no microssoma do fígado de rato e humano foi conforme mostrado na Tabela 2 abaixo.Tabela 2

[00472] Os resultados mostram que os compostos da presente invenção são muito mais estáveis em microssomas de fígado de rato e humano do que os compostos comparativos.

Exemplo Biológico 4 Medição da atividade inibitória sobre enzimas de metabolização de fármacos (ação inibitória sobre CYP2C8 humana e CYP2C19 humana) Método experimental

[00473] A reação foi realizada em uma lâmina de 96 cavidades. As substâncias de controle positivo (CYP2C8: cetoconazol, CYP2C19: tranilcipromina) foram ajustadas (CYP2C8: 0,6 e 6 mmol/L, CYP2C19: 0,9 e 9 mmol/L) com DMSO até concentrações que foram 300 vezes a concentração final, e foram preparadas soluções (CYP2C8: 8 e 80 μmol/L, CYP2C19: 12 e 120 μmol/L) por diluição de 75x com água purificada que continha 2,7% de acetonitrila. Os compostos de teste foram ajustados para 0,3 e 3 mol/L com DMSO e foram ajustados para 4 e 40 μmol/L por diluição de 75x com água purificada que continha 2,7% de acetonitrila. Uma mistura de reação foi em seguida preparada (os valores numéricos são concentrações finais) pela adição de tampão de fosfato de potássio (pH 7,4), cloreto de magnésio (5 mol/L), substrato (CYP2C8: dibenzilfluoresceína 1 μmol/L, CYP2C19: 3-ciano- 7-etoxicumarina 25 μmol/L), e CYP2C8 de microssoma de fígado expressado por E. coli (Cypex, 10 pmol/L) e CYP2C19 (Cypex, 3 pmol/L). 100 μL desta mistura de reação e 50 μL do composto de teste preparado conforme descrito acima e a solução de controle positivo preparada conforme descrito acima foram dispensados dentro de cada cavidade e foi realizada pré-incubação em 10 minutos para 37°C. A reação foi iniciada pela adição de 50 μL de NADPH solução (concentração final = 1 mmol/L) e foi realizada incubação por 30minutos a 37°C. A intensidade de fluorescência foi medida (CYP2C8: comprimento de onda de excitação = 485 nm, comprimento de onda de fluorescência = 538 nm; CYP2C19: comprimento de onda de excitação = 409 nm, comprimento de onda de fluorescência = 460 nm) imediatamente depois da adição do NADPH e depois de incubação por 30 minutos. A % de inibição foi tomada para ser a % de declínio (% de inibição) na intensidade de fluorescência em comparação com um controle no qual DMSO foi acrescentado ao invés da solução do composto de teste e a reação foi realizada e foi calculada usando a fórmula que se segue.

[00474] inibição (%) = 100 - {(intensidade de fluorescência depois da reação do composto de teste - intensidade de fluorescência antes da reação do composto de teste)/(intensidade de fluorescência depois da reação de controle - intensidade de fluorescência antes da reação de controle) x 100}

[00475] O valor da IC50 foi tomado para ser < 1 μM quando a % de inibição a 1 μmol/L foi de no mínimo 50%; foi tomado para ser > 10 μmol/L quando a % de inibição a 10 μmol/L foi não mais de 50%; e entre os precedentes (não mais de 50% a 1 μmol/L e no mínimo 50% a 10 μmol/L) foi calculado usando a fórmula que se segue IC50 = (50 - b)/a

[00476] em que a e b são a inclinação e a interceptação da linha de regressão linear y = ax + b que passa através dos dois pontos que se seguem: a concentração de 1 μmol/L, % de inibição e a concentração de 10 μmol/L, % de inibição.

[00477] Os valores da IC50 dos compostos comparativos e dos compostos da presente invenção foram medidos usando o método de medição descrito acima.

[00478] Os resultados foram como se segue: para o composto comparativo A e o composto comparativo B, os valores da IC50 para CYP2C8 foram de 4,7 μM e 6,9 μM, respectivamente, e os valores da IC50 para CYP2C19 foram de 5,6 μM e 8,1 μM, respectivamente. Por outro lado, para os compostos da presente invenção, por exemplo, os compostos do Exemplo 8, do Exemplo 11(3), do Exemplo 8(14), e do Exemplo 19(2), todos tiveram valores da IC50 para CYP2C8 e CYP2C19 de > 10 μM. Por conseguinte, foi demonstrado que os compostos da presente invenção têm uma menor ação inibitória de CYP do que os compostos comparativos.

Exemplo Biológico 5 Medição da citotoxicidade e da capacidade para reduzir o potencial de membrana mitocondrial em células de hepatoma humano cultivadas

[00479] Tecido que mantém um equilíbrio aeróbico, por exemplo, os rins e o coração, e tecido que é exposto a concentrações elevadas de fármaco e realiza o metabolismo de fármacos, por exemplo, o fígado, são conhecidos por serem sensíveis a disfunção mitocondrial (Drug Discovery Today, 12 (17-18), 777-785, 2007). A redução ou extinção do potencial de membrana mitocondrial por um fármaco é causada pela inibição direta do sistema de transporte de elétrons, dissociação do transporte de elétrons da ATP sintase, ou pela abertura de um poro de transição de permeabilidade da membrana mitocondrial. Em consequência, a medição do potencial de membrana mitocondrial de células hepáticas pode proporcionar um parâmetro para hepatotoxicidade.

[00480] Células hepáticas humanas foram semeadas em uma lâmina de 96 cavidades revestida com colágeno em uma densidade celular de 30.000 células/cavidade e foi realizada incubação de um dia para o outro em uma incubadora a 37°C em 5% de CO2 e 95% de ar. As células cultivadas foram coradas por 1 hora com iodeto de 5,5',6,6'- tetra-hidro-1,1',3,3'-tetrametil-benzamidazolocarbocianina (JC-1)seguido por tratamento com o composto de teste. O composto de teste foi dissolvido em DMSO e em seguida diluído com o meio de cultura líquido Hepatocyte Culture Medium (HCM) e adicionado às células. As concentrações de tratamento do composto de teste foram 0, 6,25, 12,5, 25, 50, 100, 200, e 400 μmol/L. Depois de exposição ao composto de teste por 24 horas, foi realizada medição com uma leitora de lâminas SpectraMax (Molecular Devices, LLC) em um comprimento de onda de excitação de 485 nm e um comprimento de onda de fluorescência de 538 nm e uma comprimento de onda de excitação de 544 nm e um comprimento de onda de fluorescência de 590 nm. O potencial da membrana foi determinado pela proporção entre o valor de medição de 544 nm/590 nm e o valor de medição de 485 nm/538 nm. Depois disto, a concentração de ATP nas células foi medida usando um kit de teste luminescente Celltiter Glo (Promega Corporation) de modo a avaliar a toxicidade celular do composto de teste. As células foram lisadas pelo tampão de prova proporcionado com o kit de medição e a concentração do ATP liberado pelas células foi medida usando a atividade enzimática de luciferina-luciferase como o índice. A emissão foi medida usando uma leitora de lâminas SpectraMax. A capacidade do composto de teste para reduzir o potencial de membrana mitocondrial e a citotoxicidade do composto de teste foram representadas pela concentração (valor de IC50) que causou um declínio de 50% no potencial de membrana mitocondrial e na concentração de ATP, respectivamente. A capacidade para reduzir o potencial de membrana mitocondrial dos compostos de teste e a citotoxicidade dos compostos de teste são dadas na Tabela 3 abaixo.Tabela 3

[00481] Os resultados mostraram que ambos os valores de IC50 foram menores para todos os compostos da presente invenção do que para os compostos comparativos.

Exemplos de Formulações Exemplo de Formulação 1

[00482] Os componentes indicados abaixo foram misturados por um método de rotina, filtrados através de um filtro de desempoeiramento, enchidos em ampolas de 5 mL, e esterilizados termicamente com um autoclave para obter 10.000 ampolas que continham 20 mg de componente ativo por ampola.

Exemplo de Formulação 2

[00483] Os componentes indicados abaixo foram misturados por um método de rotina e em seguida transformados em comprimidos para obter 10.000 comprimidos que continham 10 mg do componente ativo em cada comprimido.

APLICABILIDADE INDUSTRIAL

[00484] Os compostos da presente invenção são compostos que, além de terem uma atividade inibitória seletiva para Btk, apresentam uma excelente estabilidade metabólica e podem evitar hepatotoxicidade ou semelhantes, e em consequência são úteis como agentes terapêuticos muito seguros para doenças nas quais participam células B ou mastócitos.

Claims

1. Uso de um composto, representado pela fórmula geral (I)

em que na fórmula, L representa (1) -O-, (2) -S-, (3) -SO-, (4) -SO2- (5) -NH-, (6) -C(O)-, (7) -CH2-O-, (8) -O-CH2-, (9) -CH2-, ou (10) -CH(OH)-; R1 representa (1) um átomo de halogênio, (2) um grupo C1-4 alquila, (3) um grupo C1-4 alcóxi, (4) um grupo C1-4 haloalquila, ou (5) um grupo C1-4 haloalcóxi; anel 1 representa um anel benzeno, ciclo-hexano, ou piridina, o qual pode ser substituído por a partir de um até cinco substituintes cada um selecionado de modo independente entre o grupo consistindo em (1) átomos de halogênio, (2) grupos C1-4 alquila, (3) grupos C1-4 alcóxi, (4) nitrila, (5) grupos C1-4 haloalquila, e (6) grupos C1-4 haloalcóxi, em que quando dois ou mais substituintes estão presentes no anel 1, estes substituintes podem formar um grupo cíclico de 4 a 7 membros junto com os átomos no anel 1 aos quais estes substituintes são ligados; anel 2 representa um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 6 membros, o qual é substituído por a partir de um até três -K-R2; K representa -C(O)- (em que a ligação à esquerda é ligada ao anel 2); R2 representa um grupo C2-4 alquenila, ou um grupo C2-4 alquinila, cada um dos quais pode ser substituído por a partir de um até cinco substituintes, cada um selecionado de modo independente entre o grupo consistindo em (1) NR3R4, (2) átomos de halogênio, (3) CONR5R6, (4) CO2R7, e (5) OR8; R3 e R4 cada um representam de modo independente (1) um átomo de hidrogênio, ou (2) um grupo C1-4 alquila o qual pode ser substituído por OR9 ou CONR10R11; R3 e R4 podem, junto com o átomo de nitrogênio ao qual eles são ligados, formar um heterociclo saturado nitrogenoso de 4 a 7 membros, o qual pode ser substituído por um grupo oxo ou um grupo hidroxila; R5 e R6 cada um representam de modo independente (1) um átomo de hidrogênio, (2) um grupo C1-4 alquila, ou (3) um grupo fenila; R7 representa (1) um átomo de hidrogênio ou (2) um grupo C1-4 alquila; R8 representa (1) um átomo de hidrogênio, (2) um grupo C14 alquila, (3) um grupo fenila, ou (4) um grupo benzotriazolila; R9 representa (1) um átomo de hidrogênio ou (2) um grupo C1-4 alquila; R10 e R11 cada um representam de modo independente (1) um átomo de hidrogênio ou (2) um grupo C1-4 alquila; n representa um número inteiro de 0 a 4; m representa um número inteiro de 0 a 2; e quando n é dois ou mais, os R1's podem ser os mesmos que cada outro ou podem diferir um do outro), um isômero óptico do mesmo ou sua mistura, um sal do mesmo, um solvato do mesmo, ou um N-óxido do mesmo, caracterizado pelo fato de que é para produzir uma composição farmacêutica para prevenir e/ou tratar uma doença relacionada com Btk selecionada do grupo consistindo em câncer, lúpus, lúpus eritematoso sistêmico, síndrome de Sjogren, artrite, artrite reumatoide e artrite juvenil.

2. Uso de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é 6-amino-9-[(3R)-1-(2-butinoil)-3-pirrolidinil]-7- (4-fenoxifenil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, ou um sal do mesmo.

3. Uso de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o câncer é um linfoma não-Hodgkin.