BR112021014553A2

BR112021014553A2 - Aparelho e métodos para limpeza e/ou troca de dispositivos médicos

Info

Publication number: BR112021014553A2
Application number: BR112021014553-2A
Authority: BR
Inventors: Livia Schiavinato Eberlin; Thomas Milner; Jialing ZHANG; Noah Giese; John Lin; Jeffrey R. Kuhn; James SULIBURK; Nitesh Katta
Original assignee: Board Of Regents, The University Of Texas System; Baylor College Of Medicine
Priority date: 2019-01-25
Filing date: 2020-01-23
Publication date: 2021-10-05
Also published as: EP3914891A1; US20220196697A1; WO2020154477A1; WO2020154477A4; EP3914891A4

Abstract

aparelho e métodos para limpeza e/ou troca de dispositivos médicos. métodos e aparelhos são fornecidos para limpeza ou troca de dispositivos médicos. certas modalidades podem incluir um cassete compreendendo uma pluralidade de dispositivos médicos, onde a orientação do cassete pode ser alterada enquanto o cassete é acoplado a um instrumento de processamento.

Description

APARELHO E MÉTODOS PARA LIMPEZA E/OU TROCA DE DISPOSITIVOS MÉDICOS REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS

[0001] Este pedido reivindica a prioridade do Pedido de Patente Provisório dos EUA Nº de Série 62/796.834 depositado em 25 de janeiro de 2019, todo o conteúdo do qual é incorporado a este documento por referência.

[0002] Esta invenção foi feita com o suporte do governo sob Subsídio No. ROO CA190783 concedido pelos National Institutes of Health. O governo tem certos direitos na invenção.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

1. Campo da Invenção

[0003] A presente invenção se refere de modo geral ao campo da medicina, biologia molecular e bioquímica. Mais particularmente, diz respeito a aparelhos e métodos para limpeza e/ou troca de dispositivos cirúrgicos, incluindo, por exemplo, aqueles usados para avaliação de amostras de tecido usando espectrometria de massa.

2. Descrição da Técnica Relacionada

[0004] Atualmente, não existe uma opção automática para resolver a contaminação do sistema de conduíte que acopla os dispositivos durante os procedimentos médicos, incluindo, por exemplo, sondas para aquisição de amostras e espectrômetros de massa ou outros equipamentos de análise. É importante evitar a contaminação cruzada de amostras para garantir a precisão na análise ou diagnóstico de tais amostras.

[0005] Por exemplo, o diagnóstico clínico é comumente realizado por meio da avaliação de amostras de tecido no pré-operatório, intra- operatório e pós-operatório, em vários outros estágios do processo de avaliação e tratamento de um paciente. Em particular, a avaliação do tecido é importante no diagnóstico e tratamento de pacientes com câncer. À avaliação patológica intra-operatória de tecidos excisados, por exemplo, é realizada rotineiramente para diagnóstico e avaliação da margem cirúrgica em uma variedade de cirurgias de câncer.

[0006] Normalmente, as amostras de tecido ressecadas são enviadas para uma sala próxima, geralmente chamada de “sala congelada”, para preparação, coloração e avaliação do tecido. O espécime de tecido é congelada, seccionada, corada e interrogada em microscopia de luz por um patologista especialista que avalia cuidadosamente se as margens cirúrgicas contêm células cancerosas (margem positiva) ou não (margem negativa). Embora a análise intra-operatória de seção congelada seja realizada na prática clínica há décadas, ela apresenta muitos desafios. O congelamento de artefatos ocorre durante o processamento do tecido e interfere na estrutura do tecido e na morfologia celular, complicando, assim, a interpretação patológica, tornando a análise não confiável e subjetiva. Além disso, certas células tumorais são muito difíceis de reconhecer devido ao seu padrão atípico de crescimento e forma.

[0007] As abordagens moleculares podem fornecer avaliações altamente precisas e potencialmente em tempo real de amostras de tecido. Acoplar as abordagens moleculares com técnicas cirúrgicas minimamente invasivas ou técnicas não invasivas pode fornecer uma forma altamente precisa, mas de baixo trauma, de avaliar e diagnosticar tecidos e amostras cirúrgicas. No entanto, até o momento, dispositivos ou metodologias adequados não foram desenvolvidos para fornecer avaliação molecular eficaz de amostras de tecido. Tais dispositivos e metodologias se beneficiariam da capacidade de trocar e/ou limpar de forma eficiente os instrumentos usados para obter amostras durante o procedimento de aquisição de amostra.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0008] Modalidades exemplares da presente divulgação incluem aparelhos e métodos para trocar e/ou limpar instrumentos de maneira eficiente durante procedimentos cirúrgicos. Em uma modalidade específica,

um aparelho compreende um cassete com uma pluralidade de sondas de aquisição de amostra acopladas a um espectômetro de massa. Entende-se que o escopo da presente divulgação inclui outras modalidades com um cassete que compreende outros tipos de dispositivos médicos acoplados a outros tipos de instrumentos. Por exemplo, modalidades da presente divulgação podem ser acopladas a instrumentos médicos realizando espectroscopia utilizando infravermelho, ultravioleta e análise de fluorescência.

[0009] Existem diferentes formas de tratamento do câncer, no entanto, a cirurgia continua a ser a principal opção de tratamento. Ferramentas de diagnóstico para guiar cirurgias são muito importantes. Atualmente, diferentes grupos ou empresas estão inventando várias técnicas para melhorar a eficiência e a precisão do diagnóstico. No entanto, para avaliação de margem, vários sítios de análise seriam necessários e a contaminação cruzada entre cada análise afetará potencialmente a precisão da análise se houver troca de tubulação complicada ou etapas de lavagem necessárias. Portanto, há uma necessidade significativa no ambiente da sala de cirurgia de ter um sistema que possa fornecer um dispositivo pronto para uso de forma eficiente e rápida em um curto período de tempo (por exemplo, alguns segundos).

[0010] Modalidades exemplares da presente divulgação incluem um aparelho e método para troca ou lavagem de dispositivo intra-cirúrgico para eliminar a contaminação cruzada entre análises. Embora as modalidades aqui descritas sejam direcionadas a sistemas de aquisição de amostra, entende-se que o escopo da invenção inclui outros sistemas para a realização de procedimentos médicos. Modalidades exemplares são amplamente aplicáveis a outros dispositivos cirúrgicos propensos a problemas de contaminação que são usados na sala de cirurgia, especialmente aqueles que usam espectrometria de massa para análise.

[0011] Modalidades “exemplares da presente divulgação fornecem várias maneiras de eliminar a contaminação entre cada aquisição e análise de amostra. Por exemplo, certas modalidades podem trocar automaticamente os instrumentos médicos e conduíte associado. Outras modalidades podem fornecer um círculo de lavagem rápido para regenerar o conduíte usado anteriormente. Para o novo método de troca de conduíte, existem cassete(s) de carregamento para fornecer sistemas de conduíte prontos para uso. Para o método de lavagem de conduíte, uma porta de lavagem pode ser acoplada ao sistema de análise para que possa fazer a lavagem online enquanto os outros instrumentos e conduíte estão sendo usados.

[0012] Por conseguinte, modalidades exemplares incluem um aparelho e método para troca automática de dispositivo intra-cirúrgico ou limpeza com o objetivo de eliminar a contaminação cruzada entre cada procedimento, incluindo, por exemplo, uma medição analítica de espectrometria de massa. A contaminação cruzada ou transferência dentro de dispositivos cirúrgicos pode ser prejudicial na sala de cirurgia e retardar o fluxo de trabalho de análise nos procedimentos clínicos atuais. Há uma grande necessidade na sala de cirurgia de um sistema que possa fornecer com eficiência um dispositivo pronto para uso para um operador em poucos segundos.

[0013] As modalidades exemplares, portanto, fornecem duas maneiras diferentes de eliminar a contaminação entre cada procedimento, seja mudando automaticamente para um dispositivo e conduíte completamente novos e/ou incluindo um ciclo de lavagem rápido para limpar ou renovar o dispositivo e conduíte usados anteriormente. Essas duas abordagens não são independentes e podem ser usadas separadamente ou em combinação. Por exemplo, uma etapa de troca pode ser realizada enquanto um dispositivo e conduíte usados anteriormente podem ser submetidos a uma etapa de limpeza.

[0014] Certas — modalidades incluem um aparelho que compreende: um cassete que compreende uma pluralidade de sondas de aquisição de amostra; e um instrumento de processamento de amostra configurado para receber uma amostra, onde: o cassete é acoplado ao instrumento de processamento de amostra; uma primeira sonda de aquisição de amostra está em comunicação de fluido com o instrumento de processamento de amostra quando o cassete está em uma primeira orientação; uma segunda sonda de aquisição de amostra está em comunicação de fluido com o instrumento de processamento de amostra quando o cassete está em uma segunda orientação; e o cassete pode ser movido a partir da primeira orientação para a segunda orientação enquanto O Cassete é acoplado ao instrumento de processamento de amostra.

[0015] Em modalidades particulares, o instrumento de processamento de amostra é um espectrômetro de massa. Em algumas modalidades, o cassete gira a partir da primeira orientação para a segunda orientação. Em modalidades específicas, o cassete se move linearmente a partir da primeira orientação para a segunda orientação. Certas modalidades compreendem adicionalmente uma primeira pluralidade de conduítes, onde: cada sonda de aquisição de amostra está em comunicação de fluido com um conduíte individual da primeira pluralidade de conduítes; e cada conduíte individual da primeira pluralidade de conduítes é configurado para colocar uma única sonda de aquisição de amostra em comunicação de fluido com o instrumento de processamento de amostra quando o cassete é orientado para alinhar o conduíte individual com o instrumento de processamento de amostra. Em modalidades particulares, cada conduíte entre cada sonda de aquisição de amostra e o instrumento de processamento de amostra compreende uma válvula configurada para restringir o fluxo através do conduíte. Algumas modalidades compreendem adicionalmente: uma primeira câmara compreendendo um solvente; e um suprimento de gás. Em modalidades específicas, o suprimento de gás fornece ar, nitrogênio ou dióxido de carbono para a sonda (por exemplo, a partir de um recipiente de gás ou do ar ambiente). Em certas modalidades, o suprimento de gás é um suprimento de gás pressurizado. Em uma outra modalidade, o suprimento de gás é o ar ambiente e o aparelho compreende uma válvula ou conduíte que é aberto para o ar ambiente. Em modalidades particulares, o suprimento de gás pressurizado fornece um gás para a sonda a uma pressão entre 0,1 psig e 5,0 psig, ou mais particularmente entre 0,5 psig e 2,5 psig. Em algumas modalidades, o suprimento de gás pressurizado fornece um gás para a sonda a uma pressão inferior a 100 psig.

[0016] Em modalidades específicas, o solvente compreende água, água estéril, etanol e/ou uma mistura aquosa incluindo de | a 25% de etanol. Algumas modalidades compreendem adicionalmente: uma segunda pluralidade de conduítes em comunicação de fluido com a primeira câmara e a pluralidade de sondas de aquisição de amostra; e uma terceira pluralidade de conduítes em comunicação de fluido com o suprimento de gás (por exemplo, um recipiente de gás ou o ar ambiente) e a pluralidade de sondas de aquisição de amostra. Em certas modalidades, cada sonda de aquisição de amostra na pluralidade de sondas de aquisição de amostra compreende um reservatório, um primeiro conduíte, um segundo conduíte e um terceiro conduíte, onde: o primeiro conduíte está em comunicação de fluido com a primeira câmara; o segundo conduíte está em comunicação de fluido com o suprimento de gás; e o terceiro conduíte está em comunicação de fluido com o instrumento de processamento de amostra. Em modalidades específicas, cada sonda de aquisição de amostra na pluralidade de sondas de aquisição de amostra compreende uma câmara em forma de funil em comunicação de fluido com o reservatório, o primeiro conduíte, o segundo conduíte e o terceiro conduíte. Em certas modalidades, a câmara em forma de funil compreende uma extremidade maior e uma extremidade menor; e a extremidade maior da câmara em forma de funil é proximal ao reservatório. As modalidades particulares compreendem adicionalmente: uma segunda câmara que compreende um fluido de limpeza; e um conduíte em comunicação de fluido com a segunda câmara e a pluralidade de sondas de aquisição de amostra. Em algumas modalidades, a sonda de aquisição de amostra é ou está compreendida na cânula de um instrumento cirúrgico. Em modalidades específicas, o instrumento cirúrgico é um laparoscópio, uma agulha de trocarte, um guia de biópsia ou um cateter de múltiplos lúmenes. Em certas modalidades, o instrumento cirúrgico é operado manualmente. Em modalidades particulares, o instrumento cirúrgico é robótico. Em algumas modalidades, o instrumento cirúrgico compreende uma sonda de rastreamento que pode ser detectada por geração de imagem. Em modalidades específicas, a geração de imagens compreende a geração de imagens visuais, fluorescentes, US, CT, MRI ou OCT.

[0017] Em certas modalidades, cada sonda de aquisição de amostra da pluralidade de sondas de aquisição de amostra compreende uma extremidade distal da sonda e a extremidade distal da sonda compreende um obturador que pode ser fechado para evitar a comunicação de fluido fora da sonda de aquisição de amostra. Em modalidades particulares, o obturador é um balão que pode ser inflado para evitar a comunicação de fluido fora da sonda. Em algumas modalidades, o balão pode ser inflado com um gás ou um líquido. Em modalidades específicas, o obturador é uma porta que pode ser fechada para evitar a comunicação de fluido fora da sonda. Em certas modalidades, o obturador é configurado de modo que possa ser aberto e fechado várias vezes. Em modalidades particulares, o obturador é controlado manualmente. Em algumas modalidades, o obturador é controlado roboticamente. Em certas modalidades, o instrumento de processamento de amostra está em comunicação eletrônica com um computador que pode fornecer análise de amostra. Em modalidades particulares, o computador fornece uma leitura visual ou auditiva da análise da amostra. Em modalidades específicas, cada sonda de aquisição de amostra da pluralidade de sondas de aquisição de amostra compreende um dispositivo de rastreamento ou corante para rastrear uma localização da sonda.

[0018] Certas — modalidades incluem um aparelho que compreende: um cassete que compreende uma pluralidade de dispositivos médicos; e um instrumento de processamento acoplado ao cassete, onde: os dispositivos médicos são configurados para entrar em contato com o tecido; o instrumento de processamento é configurado para receber tecido do cassete; um primeiro dispositivo médico da pluralidade de dispositivos médicos está em comunicação de fluido com o instrumento de processamento quando o cassete está em uma primeira orientação; um segundo dispositivo médico está em comunicação de fluido com o instrumento de processamento quando o cassete está em uma segunda orientação; e o cassete pode ser movido a partir da primeira orientação para a segunda orientação enquanto o cassete é acoplado ao instrumento de processamento. Em modalidades particulares, a pluralidade de dispositivos médicos compreende uma pluralidade de sondas de aquisição de amostra. Em algumas modalidades, o instrumento de processamento é um espectrômetro de massa. Em modalidades específicas, o cassete gira a partir da primeira orientação para a segunda orientação. Em certas modalidades, O cassete se move linearmente a partir da primeira orientação para a segunda orientação. Modalidades particulares, compreendem adicionalmente uma primeira pluralidade de conduítes, onde: cada dispositivo médico está em comunicação de fluido com um conduíte individual da primeira pluralidade de conduítes; e cada conduíte individual da primeira pluralidade de conduítes é configurado para colocar um único dispositivo médico em comunicação de fluido com o instrumento de processamento quando o cassete é orientado para alinhar o conduíte individual com o instrumento de processamento.

[0019] Em certas modalidades, cada conduíte entre cada dispositivo médico e o instrumento de processamento compreende uma válvula configurada para restringir o fluxo através do conduíte. Algumas modalidades compreendem adicionalmente: uma primeira câmara que compreendem um solvente; e um suprimento de gás. As modalidades específicas compreendem adicionalmente: uma segunda pluralidade de conduítes em comunicação de fluido com a primeira câmara e a pluralidade de dispositivos médicos; e uma terceira pluralidade de conduítes em comunicação de fluido com o suprimento de gás e a pluralidade de dispositivos médicos. Certas modalidades compreendem adicionalmente: uma segunda câmara que compreende um fluido de limpeza; e um conduíte em comunicação de fluido com a segunda câmara e a pluralidade de dispositivos médicos.

[0020] Modalidades particulares incluem um método para trocar instrumentos médicos durante um procedimento médico, onde o método compreende: adquirir uma primeira sonda de aquisição de amostra de um cassete que compreende uma pluralidade de sondas de aquisição de amostra, em que a primeira sonda de aquisição de amostra é adquirida a partir do cassete quando o cassete está em uma primeira orientação; obter uma primeira amostra de tecido com a primeira sonda de aquisição de amostra; alterar a orientação do cassete que compreende a pluralidade de sondas de aquisição de amostra de uma primeira orientação para uma segunda orientação; adquirir uma segunda sonda de aquisição de amostra a partir do cassete que compreende uma pluralidade de sondas de aquisição de amostra, onde a segunda sonda de aquisição de amostra é adquirida a partir do cassete quando o cassete está em uma segunda orientação; e obter uma segunda amostra de tecido com a segunda sonda de aquisição de amostra.

[0021] Algumas modalidades compreendem adicionalmente preparar a sonda de aquisição de amostra com solvente antes de obter a primeira amostra de tecido. Em modalidades específicas, alterar a orientação do cassete compreendendo a pluralidade de sondas de aquisição de amostra a partir de uma primeira orientação para uma segunda orientação compreende girar o cassete. Em certas modalidades, alterar a orientação do cassete que compreende a pluralidade de sondas de aquisição de amostra a partir de uma primeira orientação para uma segunda orientação compreende a translação linear do cassete. Em modalidades particulares, obter a primeira amostra de tecido com a primeira sonda de aquisição de amostra compreende: aplicar um primeiro volume fixo de um solvente a um primeiro sítio de tecido através da cânula de um instrumento cirúrgico; e coletar o solvente aplicado para obter uma primeira amostra líquida.

[0022] Em algumas modalidades, obter a segunda amostra de tecido com a segunda sonda de aquisição de amostra compreende: aplicar um segundo volume do solvente a um segundo sítio de tecido através da cânula do instrumento cirúrgico; e coletar o solvente aplicado para obter uma segunda amostra líquida. Em modalidades específicas, o primeiro volume de solvente e o segundo volume de solvente não são aplicados como uma pulverização. Em certas modalidades, o primeiro volume de solvente é aplicado como uma primeira gota e em que o segundo volume de solvente é aplicado como uma segunda gota. Em modalidades particulares, o instrumento cirúrgico é um laparoscópio, uma agulha trocarte ou um guia de biópsia. Em algumas modalidades, o instrumento cirúrgico é operado manualmente. Em modalidades específicas, o instrumento cirúrgico é robótico. Certas modalidades compreendem adicionalmente a aplicação de um corante ao primeiro sítio de tecido e ao segundo sítio de tecido. Modalidades particulares compreendem adicionalmente a geração de imagem do primeiro sítio de tecido e do segundo sítio de tecido. Em algumas modalidades, a geração de imagens compreende a geração de imagens visuais, fluorescentes, US, CT, MRI ou OCT. Em modalidades específicas, o primeiro volume de solvente e o segundo volume de solvente são aplicados usando uma pressão inferior a 100 psig. Em certas modalidades, o volume fixo ou discreto de um solvente é aplicado usando uma pressão inferior a 10 psig. Em modalidades particulares, o volume fixo ou discreto de um solvente é aplicado usando uma bomba mecânica para mover o solvente através de um conduíte de solvente. Em algumas modalidades, coletar o solvente aplicado compreende aplicar uma pressão negativa para puxar a amostra para um conduíte de coleta e/ou aplicar uma pressão de gás para empurrar a amostra para um conduíte de coleta.

[0023] Em modalidades específicas, o solvente é aplicado através de um conduíte de solvente que é separado do conduíte de coleta. Em certas modalidades, a pressão do gás é aplicada através de um conduíte de gás que é separado do conduíte de solvente e do conduíte de coleta. Em modalidades particulares, a aplicação de uma pressão de gás para empurrar a amostra para o conduíte de coleta compreende a aplicação de uma pressão inferior a 100 psig. Em algumas modalidades, o método não produz danos físicos detectáveis ao tecido. Em modalidades específicas, o método não envolve a aplicação de energia ultrassônica ou vibracional ao tecido. Em certas modalidades, o solvente é estéril. Em algumas modalidades, o solvente é uma formulação farmaceuticamente aceitável. Em modalidades específicas, o solvente é uma solução aquosa. Em certas modalidades, o solvente é água estéril. Em modalidades particulares, o solvente consiste essencialmente em água. Em algumas modalidades, o solvente compreende de cerca de | a 20% de um álcool. Em modalidades específicas, o álcool compreende etanol.

[0024] Em certas modalidades, o primeiro volume de solvente está entre cerca de 0,1 e 100 ul e em que o segundo volume de solvente está entre cerca de 0,1 e 100 ul. Em modalidades particulares, o primeiro volume de solvente está entre cerca de 1 e 50 uL e o segundo volume de solvente está entre cerca de 1 e 50 ul. Em algumas modalidades, a coleta do solvente aplicado é entre 0,1 e 30 segundos após a etapa de aplicação. Em modalidades específicas, a coleta do solvente aplicado é entre 1 e 10 segundos após a etapa de aplicação. Em certas modalidades, o primeiro sítio do tecido é um sítio do tecido interno que está sendo avaliado cirurgicamente e em que o segundo sítio do tecido é um sítio do tecido interno que está sendo avaliado cirurgicamente. Em modalidades particulares, a primeira amostra líquida e a segunda amostra líquida são coletadas com uma sonda. Algumas modalidades compreendem adicionalmente a coleta de uma pluralidade de amostras líquidas a partir de uma pluralidade de sítios de tecido. Em modalidades específicas, a pluralidade de sítios de tecido compreende 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 sítios de tecidos. Em certas modalidades, a pluralidade de sítios de tecido circunda uma seção de tecido que foi ressecada cirurgicamente. Em modalidades particulares, o tecido ressecado é um tumor. Em algumas modalidades, o método é um método intra-operatório ou pós-operatório. Modalidades específicas compreendem adicionalmente submeter a primeira amostra de tecido e a segunda amostra de tecido à análise de espectrometria de massa. Em certas modalidades, a espectrometria de massa compreende MS de ionização de ambiente.

[0025] Em modalidades particulares, a primeira amostra de tecido e a segunda amostra de tecido para análise de espectrometria de massa compreendem a determinação de um primeiro perfil correspondente ao primeiro sítio do tecido e um segundo perfil correspondente ao segundo sítio do tecido. Algumas modalidades compreendem adicionalmente comparar o primeiro perfil e o segundo a um perfil de referência para identificar sítios de tecido que incluem tecido doente. As modalidades específicas compreendem adicionalmente a ressecção de sítios de tecido que são identificados como incluindo tecido doente. Em certas modalidades, a ressecção de sítios de tecido compreende remoção a laser. Modalidades específicas, compreendem adicionalmente comparar o primeiro perfil e o segundo a um perfil de referência para determinar o tipo de tecido no primeiro sítio de tecido e no segundo tipo de tecido. Certas modalidades compreendem adicionalmente a ressecção de tecidos de um tipo identificado. Em modalidades particulares, o tipo de tecido identificado é um tecido canceroso ou um tipo não canceroso de tecido de órgão. Em modalidades específicas, o método é realizado usando um aparelho de acordo com modalidades exemplares divulgadas neste documento.

[0026] Certas modalidades incluem um aparelho para produzir amostras para análise de espectrometria de massa, em que o aparelho compreende: uma câmara que compreende um solvente; um suprimento de gás; um espectrômetro de massa; e uma sonda que compreende um reservatório, um primeiro conduíte, um segundo conduíte, um terceiro conduíte e uma porta de vácuo, onde: o primeiro conduíte está em comunicação de fluido com a câmara; o segundo conduíte está em comunicação de fluido com o suprimento de gás; e o terceiro conduíte está em comunicação de fluido com o espectrômetro de massa. Em modalidades particulares, a porta de vácuo é configurada como um anel indentado que se estende em torno de um perímetro da sonda. Em algumas modalidades, a porta de vácuo é configurada como uma extremidade de um canal que se estende até uma superfície da sonda configurada para entrar em contato com o tecido. Em modalidades específicas, a porta de vácuo é uma de uma pluralidade de portas de vácuo. Em certas modalidades, a pluralidade de portas de vácuo está em comunicação de fluido com um multiplexador de canal pneumático. Em algumas modalidades, a pluralidade de portas de vácuo está em comunicação de fluido com o multiplexador de canal pneumático por meio de uma pluralidade de canais pneumáticos. Em modalidades específicas, o multiplexador de canal pneumático é um anel circunferencial que se estende em torno do dispositivo. Certas modalidades compreendem adicionalmente uma fonte de vácuo em comunicação de fluido com a porta de vácuo. Em modalidades particulares, o suprimento de gás é um suprimento de gás pressurizado.

[0027] Modalidades específicas incluem um aparelho que compreende: uma pluralidade de sondas de aquisição de amostra acopladas a uma pluralidade de conduítes, onde a pluralidade de conduítes compreende conduítes de suprimento de solvente e conduítes de aquisição de amostra; uma ou mais câmaras contendo solvente; uma pluralidade de válvulas configuradas para controlar o fluxo do solvente através dos conduítes de suprimento de solvente; e um instrumento de processamento de amostra configurado para receber uma amostra, onde: cada um da pluralidade de sondas de aquisição de amostra e conduítes de suprimento de solvente pode ser acoplado individualmente a uma ou mais câmaras contendo solvente; e cada um da pluralidade de sondas de aquisição de amostra e conduítes de aquisição de amostra pode ser acoplado individualmente ao instrumento de processamento de amostra. Em certas modalidades, o instrumento de processamento de amostra é um espectrômetro de massa com uma porta de entrada; o aparelho compreende uma bomba em comunicação de fluido com a uma ou mais câmaras contendo solvente; cada conduíte de suprimento de solvente é configurado para ser acoplado à bomba por meio de um mecanismo de trava Luer; e/ou cada conduíte de aquisição de amostra é configurado para ser acoplado diretamente à entrada do espectrômetro de massa por meio de um mecanismo de trava Luer.

[0028] Em modalidades particulares, cada um da pluralidade de conduítes de aquisição de amostra pode ser acoplado individualmente ao instrumento de processamento de amostra por meio de um mecanismo de liberação rápida. Em algumas modalidades, o mecanismo de liberação rápida é uma trava Luer ou um acoplamento de encaixe por fricção. Em modalidades específicas, cada um da pluralidade de conduítes de suprimento de solvente pode ser acoplado individualmente ao suprimento de solvente por um mecanismo de liberação rápida. Em certas modalidades, o mecanismo de liberação rápida é uma trava Luer ou um acoplamento de encaixe por fricção. Em modalidades particulares, cada um da pluralidade de sondas de aquisição de amostra e conduítes de aquisição de amostra pode ser acoplado individualmente ao instrumento de processamento de amostra por meio de um mecanismo de liberação rápida. Em algumas modalidades, cada um da pluralidade de sondas de aquisição de amostra e conduítes de aquisição de amostra pode ser acoplado individualmente ao instrumento de processamento de amostra por meio de um acoplamento de encaixe por fricção. Em modalidades específicas, cada uma da pluralidade de sondas de aquisição de amostra e conduítes de aquisição de amostra pode ser acoplado individualmente ao instrumento de processamento de amostra por meio de um encaixe de trava Luer.

[0029] Certas modalidades incluem um método de obtenção de uma pluralidade de amostras, o método compreendendo: obter um aparelho conforme divulgado neste documento; acoplar um primeiro conduíte de suprimento de solvente a uma primeira sonda de aquisição de amostra e a uma ou mais câmaras contendo solvente; acoplar um primeiro conduíte de aquisição de amostra em comunicação de fluido com a primeira sonda de aquisição de amostra ao instrumento de processamento de amostra; obter uma primeira amostra com a primeira sonda de aquisição de amostra; desacoplar a primeira aquisição de amostra do instrumento de processamento de amostra; analisar a primeira amostra com o equipamento de processamento de amostra; acoplar um segundo conduíte de suprimento de solvente em comunicação de fluido com uma segunda sonda de aquisição de amostra a uma ou mais câmaras contendo solvente; acoplar um segundo conduíte de aquisição de amostra em comunicação de fluido com a segunda sonda de aquisição de amostra ao instrumento de processamento de amostra; obter uma segunda amostra com a segunda sonda de aquisição de amostra; e analisar a segunda amostra com o equipamento de processamento de amostra.

[0030] Modalidades particulares compreendem adicionalmente preparar a primeira sonda de aquisição de amostra com solvente antes de obter a primeira amostra de tecido. Em certas modalidades, o acoplamento do segundo conduíte de aquisição de amostra ao instrumento de processamento de amostra é realizado enquanto o instrumento de processamento de amostra está analisando a primeira amostra. Modalidades particulares compreendem adicionalmente: desacoplar a segunda aquisição de amostra do instrumento de processamento de amostra; acoplar um terceiro conduíte de suprimento de solvente em comunicação de fluido com uma terceira sonda de aquisição de amostra para uma ou mais câmaras contendo solvente; acoplar um terceiro conduíte de aquisição de amostra em comunicação de fluido com a terceira sonda de aquisição de amostra ao instrumento de processamento de amostra; obter uma terceira amostra com a terceira sonda de aquisição de amostra; e analisar a terceira amostra com o equipamento de processamento de amostra. Algumas modalidades compreendem adicionalmente: desacoplar a segunda aquisição de amostra do instrumento de processamento de amostra; acoplar o primeiro conduíte de suprimento de solvente em comunicação de fluido com a primeira sonda de aquisição de amostra a uma ou mais câmaras contendo solvente; acoplar o primeiro conduíte de aquisição de amostra em comunicação de fluido com a primeira sonda de aquisição de amostra ao instrumento de processamento de amostra; obter uma terceira amostra com a primeira sonda de aquisição de amostra; e analisar a terceira amostra com o equipamento de processamento de amostra.

[0031] Modalidades específicas compreendem adicionalmente: desacoplar a segunda aquisição de amostra do instrumento de processamento de amostra; acoplar o terceiro conduíte de suprimento de solvente em comunicação de fluido com a primeira sonda de aquisição de amostra a uma ou mais câmaras contendo solvente; acoplar o terceiro conduíte de aquisição de amostra em comunicação de fluido com a primeira sonda de aquisição de amostra ao instrumento de processamento de amostra; obter uma terceira amostra com a primeira sonda de aquisição de amostra; e analisar a terceira amostra com o equipamento de processamento de amostra.

[0032] Certas modalidades incluem um método para limpar um instrumento médico durante um procedimento médico, onde o método compreende: obter uma primeira amostra de tecido com uma primeira sonda de aquisição de amostra quando a primeira sonda de aquisição de amostra está em uma primeira localização; mover a primeira sonda de aquisição de amostra para um segunda localização; limpar a primeira sonda de aquisição de amostra quando a primeira sonda de aquisição de amostra está na segunda localização; mover a primeira sonda de aquisição de amostra para a primeira localização; e obter uma segunda amostra de tecido com a primeira sonda de aquisição de amostra quando a primeira sonda de aquisição de amostra está na primeira localização. Em modalidades particulares, a primeira sonda de aquisição de amostra está localizada em um cassete e mover a primeira sonda de aquisição de amostra para a segunda localização compreende girar o cassete.

[0033] Em algumas modalidades, lavar a primeira sonda de aquisição de amostra compreende direcionar um fluido de limpeza a partir de uma câmara para a primeira sonda de aquisição de amostra por meio de um conduíte. Em modalidades específicas, obter a primeira amostra de tecido com a primeira sonda de aquisição de amostra compreende: aplicar um primeiro volume fixo de um solvente a um primeiro sítio de tecido através da cânula de um instrumento cirúrgico; e coletar o solvente aplicado para obter a primeira amostra de tecido. Em modalidades particulares, obter a segunda amostra de tecido com a primeira sonda de aquisição de amostra compreende: aplicar um segundo volume fixo do solvente a um segundo sítio de tecido através da cânula do instrumento cirúrgico; e coletar o solvente aplicado para obter a primeira amostra de tecido.

[0034] Em uma primeira modalidade, é fornecido um aparelho e método para obter um perfil de espectrometria de massa compreendendo o uso de uma sonda para aplicar um volume fixo ou discreto de um solvente a um sítio de ensaio (por exemplo, um sítio de tecido); usar a sonda para coletar o solvente aplicado para obter uma amostra líquida; e submeter a amostra líquida à análise de espectrometria de massa. Em outra modalidade, um método é fornecido para avaliar amostras de tecido compreendendo a obtenção de uma pluralidade de amostras líquidas a partir de uma pluralidade de sítios de tecido em um sujeito e submeter a pluralidade de amostras líquidas a espectrometria de massa.

[0035] Ainda uma outra modalidade adicional fornece um aparelho para obter ou produzir amostras (por exemplo, a partir de tecidos) para análise de espectrometria de massa, o aparelho compreendendo: uma câmara que compreende um solvente; um suprimento de gás; um espectrômetro de massa; uma sonda que compreende um reservatório, um primeiro conduíte, um segundo conduíte e um terceiro conduíte, em que: o reservatório está em comunicação de fluido com o primeiro conduíte, o segundo conduíte e o terceiro conduíte; o primeiro conduíte (solvente) está em comunicação de fluido com a câmara; o segundo conduíte (gás) está em comunicação de fluido com o suprimento de gás (por exemplo, recipientes de gás ou o ar ambiente); e o terceiro conduíte (coleção) está em comunicação de fluido com o espectrômetro de massa. Em alguns aspectos, o suprimento de gás pode ser um suprimento de gás pressurizado. Em outros aspectos, o suprimento de gás pode compreender a atmosfera em torno do aparelho. Em alguns aspectos, a sonda é ou está compreendida na cânula de um instrumento cirúrgico. Em outros aspectos, o instrumento cirúrgico pode ser um laparoscópio, agulha de trocarte, guia de biópsia ou cateter de múltiplos lúmenes. Em certos aspectos, o instrumento cirúrgico é operado manualmente. Em outros aspectos, o instrumento cirúrgico é robótico.

[0036] Em ainda outros aspectos, a sonda compreende uma extremidade distal da sonda e a extremidade distal da sonda compreende um obturador que pode ser fechado para evitar a comunicação de fluido fora da sonda. Em alguns aspectos, o obturador é um balão que pode ser inflado para evitar a comunicação de fluido fora da sonda. Em certos aspectos, o balão pode ser inflado com um gás ou um líquido. Em aspectos específicos, o obturador é uma porta que pode ser fechada para evitar a comunicação de fluido fora da sonda. Em outros aspectos, o obturador é configurado de modo que possa ser aberto e fechado várias vezes. O obturador pode ser controlado manualmente ou roboticamente. Em vários aspectos, o primeiro, segundo ou terceiro conduíte tem mais de 1 metro de comprimento. Em aspectos adicionais, o primeiro conduíte está em comunicação de fluido com o terceiro conduíte; e o segundo conduíte está em comunicação de fluido com o terceiro conduíte. Em outros aspectos específicos, o primeiro conduíte é disposto dentro do terceiro conduíte. Em outros aspectos, o segundo conduíte é disposto dentro do terceiro conduiíte.

[0037] Em certos aspectos específicos, o primeiro conduíte e o segundo conduíte são dispostos dentro do terceiro conduíte. Em outros aspectos, o primeiro conduíte compreende uma primeira extremidade distal; o segundo conduíte compreende uma segunda extremidade distal; o terceiro conduíte compreende uma terceira extremidade distal; e a primeira extremidade distal e a segunda extremidade distal estão localizadas dentro do terceiro conduíte. Em alguns aspectos, a terceira extremidade distal está localizada dentro da sonda. Em outro aspecto, a primeira extremidade distal está localizada a uma primeira distância da extremidade distal da sonda; a segunda extremidade distal está localizada a uma segunda distância da extremidade distal da sonda; a terceira extremidade distal está localizada a uma terceira distância da extremidade distal da sonda; a primeira distância é maior que a terceira distância; e a segunda distância é maior que a terceira distância. Em um aspecto adicional, a primeira extremidade distal e a segunda extremidade distal terminam de modo proximal a uma região de coleta de amostra do terceiro conduíte. Em certos aspectos, a região de coleta de amostra está localizada entre a primeira e a segunda extremidades distais e a terceira extremidade distal. Em outros aspectos específicos, a região de coleta de amostra está em comunicação de fluido com o espectrômetro de massa através do terceiro conduíte. Em alguns aspectos adicionais, o aparelho compreende adicionalmente um sistema de controle configurado para controlar; um fluxo de solvente a partir da câmara através do primeiro conduíte para a primeira extremidade distal; um fluxo de gás a partir do suprimento de gás através do segundo conduíte para a segunda extremidade distal; e um fluxo de amostra através do terceiro conduíte para o espectrômetro de massa.

[0038] Em ainda outros aspectos, o aparelho pode compreender adicionalmente um quarto conduíte, em que o primeiro conduíte, o segundo conduíte e o terceiro conduíte estão, cada um, em comunicação de fluido com o quarto conduíte. Em alguns aspectos, o aparelho pode compreender adicionalmente uma primeira válvula configurada para controlar o fluxo entre o primeiro conduíte e o quarto conduíte; e uma segunda válvula configurada para controlar o fluxo entre o segundo conduíte e o quarto conduíte. Em um aspecto adicional, o aparelho pode compreender adicionalmente uma terceira primeira válvula configurada para controlar o fluxo entre o terceiro conduíte e o quarto conduíte. Ainda em aspectos adicionais, o suprimento de gás fornece ar, nitrogênio ou dióxido de carbono para a sonda. Em certos aspectos, o suprimento de gás é um suprimento de gás pressurizado que fornece um gás para a sonda a uma pressão entre 0,1 psig e 5,0 psig. Em outros aspectos, o suprimento de gás pressurizado fornece um gás para a sonda a uma pressão entre 0,5 psig e 2,5 psig. Em aspectos específicos, o suprimento de gás pressurizado fornece um gás para a sonda a uma pressão inferior a 100 psig. Em alguns aspectos, o gás para uso em um aparelho das modalidades pode ser fornecido por um suprimento de gás pressurizado. Em outros aspectos, o gás pode ser bombeado para um aparelho. Da mesma forma, em alguns aspectos, o gás pode ser puxado através de um aparelho pelo uso de um vácuo. Em alguns aspectos, o vácuo é fornecido pela entrada do espectrômetro de massa. Em outros aspectos, um sistema de vácuo adicional é empregado.

[0039] Em alguns aspectos, o solvente compreende água. Em aspectos mais específicos, o solvente compreende água estéril. Em vários aspectos, o solvente compreende etanol. Em certos aspectos específicos, o solvente compreende uma mistura aquosa incluindo de 1 a 25% de etanol.

[0040] Em ainda outros aspectos, a sonda compreende um dispositivo de rastreamento ou corante para rastrear uma localização da sonda. Em aspectos adicionais, o aparelho pode compreender adicionalmente um sistema de controle configurado para controlar: um fluxo de solvente a partir da câmara através do primeiro conduíte; um fluxo de gás a partir do suprimento de gás através do segundo conduíte; e um fluxo de amostra através do terceiro conduíte para o espectrômetro de massa. Em alguns aspectos, o sistema de controle é configurado para: controlar o fluxo de solvente a uma taxa de fluxo entre 200 e 5000 microlitros por minuto por um período de tempo entre 1 e 3 segundos; controlar o fluxo de gás a uma taxa de fluxo entre 0,1 e 15 psig por um período de tempo entre 5 e 50 segundos; e/ou controlar o fluxo de amostra por um período de tempo entre e 50 segundos. Em certos aspectos, o sistema de controle compreende uma programação que inicia o fluxo de solvente.

[0041] Em aspectos adicionais, o espectrômetro de massa está em comunicação eletrônica com um computador que pode fornecer análise de amostra. Em alguns aspectos, o computador fornece uma leitura visual ou auditiva da análise da amostra. Em outros aspectos, o aparelho pode compreender adicionalmente um recipiente de resíduos em comunicação de fluido com o terceiro conduíte. Em certos aspectos, o aparelho pode compreender adicionalmente uma válvula configurada para divergir um fluido a partir do terceiro conduíte para o recipiente de resíduos. Em outros aspectos, o aparelho pode compreender adicionalmente uma bomba configurada para remover o conteúdo do recipiente de resíduos. Em ainda outros aspectos, o aparelho pode compreender uma bomba em comunicação de fluido com o terceiro conduíte. Em alguns aspectos, a bomba é configurada para aumentar a velocidade do conteúdo dentro do terceiro conduíte. Em vários aspectos, o aparelho pode compreender adicionalmente um elemento de aquecimento acoplado ao terceiro conduíte. Em um aspecto específico, o elemento de aquecimento é um fio de aquecimento.

[0042] Em ainda outros aspectos, o aparelho pode compreender um dispositivo de ionização em comunicação de fluido com o terceiro conduíte. Em certos aspectos, o dispositivo de ionização é um dispositivo de ionização por eletropulverização (ESI). Em outros aspectos, o dispositivo de ionização é um dispositivo de ionização química por pressão atmosférica (APCI). Em alguns aspectos, o dispositivo de ionização deve formar uma pulverização proximal a uma entrada para o espectrômetro de massa. Em vários aspectos, o terceiro conduíte não está diretamente acoplado ao espectrômetro de massa. Em aspectos específicos, o aparelho pode compreender adicionalmente um dispositivo de Venturi em comunicação de fluido com o terceiro conduíte. Em certos aspectos, o aparelho não inclui dispositivo para aplicação de energia ultrassônica ou vibracional.

[0043] Em uma outra modalidade, é fornecido um método para avaliar amostras de tecido a partir de um sujeito que compreende (a) aplicar um volume fixo ou discreto de um solvente a um sítio de tecido no sujeito através da cânula de um instrumento cirúrgico; (b) coletar o solvente aplicado para obter uma amostra líquida; e (c) submeter a amostra a análise de espectrometria de massa. Em alguns aspectos, o volume fixo ou discreto de um solvente não é aplicado como uma pulverização. Em outros aspectos, o volume fixo ou discreto de um solvente é aplicado como uma gota. Em certos aspectos, o instrumento cirúrgico é um laparoscópio, agulha de trocarte ou guia de biópsia. O instrumento cirúrgico pode ser operado manualmente ou robótico.

[0044] Em outros aspectos, as cânulas compreendidas em uma sonda tendo uma extremidade distal da sonda e a extremidade distal da sonda compreendem um obturador que pode ser fechado para evitar que o fluido passe para fora da cânula da sonda.

Em alguns aspectos, o obturador é um balão que pode ser inflado para evitar a comunicação de fluido fora da sonda.

Em aspectos específicos, o balão pode ser inflado com um gás.

Em certos aspectos, o obturador é uma porta que pode ser fechada para evitar a comunicação de fluido fora da sonda.

Por exemplo, o obturador pode ser um diafragma de íris, um fecho mecânico, portão ou tapenade.

Em alguns aspectos, o obturador pode ser controlado manualmente ou pode ser automatizado.

Por exemplo, em alguns aspectos, o obturador pode estar em um temporizador que ativa o obturador após o solvente ter estado em contato com o sítio do tecido por um período de tempo predeterminado (por exemplo, pelo menos cerca de 1, 2 ou 3 segundos). Em ainda outros aspectos, o volume fixo ou discreto de um solvente é aplicado usando uma pressão inferior a 100 psig.

Em outros aspectos, o volume fixo ou discreto de um solvente é aplicado usando uma pressão inferior a 10 psig.

Em alguns aspectos, o volume fixo ou discreto de um solvente é aplicado usando uma bomba mecânica para mover o solvente através de um conduíte de solvente.

Em certos aspectos, coletar o solvente aplicado compreende aplicar uma pressão negativa para puxar a amostra para um conduíte de coleta e/ou aplicar uma pressão de gás para empurrar a amostra para um conduíte de coleta.

Em algumas modalidades, coletar o solvente aplicado compreende aplicar uma pressão negativa para puxar a amostra para um conduíte de coleta e/ou aplicar uma pressão positiva para empurrar a amostra para um conduíte de coleta.

Em certos aspectos específicos, o solvente é aplicado através de um conduíte de solvente que é separado do conduíte de coleta.

Em outros aspectos, a pressão do gás é aplicada através de um conduíte de gás que é separado do conduíte de solvente e do conduíte de coleta.

Em ainda outros aspectos, a aplicação de uma pressão de gás para empurrar a amostra para um conduíte de coleta compreende a aplicação de uma pressão inferior a 100 psig.

[0045] Em ainda outros aspectos, o método não produz dano físico detectável ao tecido. Em alguns aspectos, o método não envolve a aplicação de energia ultrassônica ou vibracional ao tecido. Em certos aspectos, o solvente pode ser estéril. Em aspectos específicos, o solvente pode ser uma formulação farmaceuticamente aceitável, e, adicionalmente, uma solução aquosa, e ainda adicionalmente água estéril. Em outros aspectos específicos, o solvente consiste essencialmente em água. Em outros aspectos, o solvente compreende de cerca de | a 20% de um álcool. Em alguns aspectos, o álcool compreende etanol. Ainda em aspectos adicionais, o volume discreto de solvente está entre cerca de 0,1 e 100 JL. Em certos aspectos, o volume discreto de solvente está entre cerca de 1 e 50 ul. Em outros aspectos, a coleta do solvente aplicado é entre 0,1 e 30 segundos após a etapa de aplicação. Em outro aspecto, a coleta do solvente aplicado é entre 1 e 10 segundos após a etapa de aplicação. Em alguns aspectos, o sítio do tecido em um sítio do tecido interno que está sendo avaliado cirurgicamente.

[0046] Em ainda outros aspectos, o método compreende adicionalmente coletar uma pluralidade de amostras líquidas de uma pluralidade de sítios de tecido. Em certos aspectos, as amostras líquidas são coletadas com uma sonda. Em aspectos específicos, a sonda é lavada entre a coleta das diferentes amostras. Em alguns aspectos, a sonda é descartável e é alterada entre a coleta das diferentes amostras. Em outro aspecto, a sonda compreende uma ponta de coleta e compreende adicionalmente ejetar a ponta de coleta da sonda após as amostras líquidas serem coletadas. Em outros aspectos, a pluralidade de sítios de tecido compreende 2, 3, 4,5,6,7, 8, 9 ou 10 sítios de tecidos. Em um aspecto adicional, a pluralidade de sítios de tecido circunda uma seção de tecido que foi ressecada cirurgicamente. Em alguns aspectos, o tecido ressecado é um tumor. Em outros aspectos, o método é adicionalmente definido como um método intra-operatório ou pós- operatório. Em certos aspectos, a espectrometria de massa compreende MS de ionização de ambiente. Em certos aspectos específicos, submeter a amostra à análise de espectrometria de massa compreende determinar um perfil correspondente ao sítio do tecido. Em um aspecto adicional, o método compreende comparar o perfil a um perfil de referência para identificar sítios de tecido que incluem tecido doente. Ainda um outro aspecto compreende a ressecção de sítios de tecido que são identificados como incluindo tecido doente. Em outro aspecto, o método é realizado usando um aparelho de acordo com as modalidades e aspectos descritos acima.

[0047] Em outros aspectos, o espectrômetro de massa está em comunicação com um computador que fornece uma análise de amostra. Em certos aspectos, os resultados de cada análise de amostra são fornecidos por uma saída visual ou auditiva a partir do computador. Por exemplo, os resultados de cada análise de amostra pelo computador podem ser indicados por uma luz de cor diferente que é iluminada ou por uma frequência diferente de som produzido. Em alguns aspectos, o espectrômetro de massa é um espectrômetro de massa móvel. Em outros aspectos, o espectrômetro de massa pode compreender um suprimento de energia ininterrupto (por exemplo, um suprimento de energia de bateria). Em ainda outros aspectos, o espectrômetro de massa compreende uma entrada que pode ser fechada para manter o vácuo do instrumento. Em ainda outros aspectos, Oo espectrômetro de massa é separado da sonda por um filtro de malha (por exemplo, para bloquear a contaminação).

[0048] Em alguns aspectos, o reservatório é configurado para formar uma gota do solvente. Em certos aspectos, o suprimento de gás pressurizado fornece um gás para a sonda a uma pressão entre 0,1 psig e 5,0 psig. Em outros aspectos, o suprimento de gás pressurizado fornece um gás para a sonda a uma pressão entre 0,5 psig e 2,5 psig. Em vários aspectos, o suprimento de gás pressurizado fornece ar para a sonda. Em outros aspectos, o suprimento de gás pressurizado fornece um gás inerte, como nitrogênio ou dióxido de carbono, para a sonda. Em alguns aspectos,

um suprimento de gás para uso de acordo com as modalidades está à pressão atmosférica. Por exemplo, o conduíte para distribuição de gás pode ser suprido pela atmosfera ao redor do aparelho.

[0049] Em aspectos adicionais, o aparelho compreende adicionalmente uma bomba configurada para transferir o solvente a partir da câmara para o primeiro conduíte. Em outros aspectos, o aparelho pode compreender uma primeira válvula configurada para controlar um fluxo a partir do terceiro conduíte para o espectrômetro de massa. Em alguns aspectos, o terceiro conduíte está sob vácuo quando a primeira válvula está na posição aberta. Em outros aspectos, o aparelho pode compreender uma segunda válvula configurada para controlar um fluxo de gás (por exemplo, gás pressurizado) através do segundo conduíte.

[0050] Em certos aspectos, o solvente pode compreender água e/ou etanol. Em vários aspectos, a sonda é formada a partir de polidimetilsiloxano (PDMS) e/ou politetrafluoroetileno (PTFE). Em alguns aspectos, a sonda é descartável. Em aspectos específicos, a sonda pode incluir uma ponta de coleta que é ejetável (por exemplo, capaz de ser ejetada da sonda). Em outros aspectos, a sonda compreende um dispositivo de rastreamento configurado para rastrear uma localização da sonda. Em alguns aspectos, o reservatório tem um volume entre 1 microlitro e 500 microlitros, entre cerca de 1 microlitro e 100 microlitros ou entre cerca de 2 microlitros e 50 microlitros. Em aspectos adicionais, o reservatório tem um volume entre 5,0 microlitros e 20 microlitros.

[0051] Em ainda outros aspectos, o aparelho pode compreender adicionalmente um sistema de controle configurado para controlar: um fluxo de solvente (por exemplo, fluxo de um volume fixo ou discreto de solvente) a partir da câmara através do primeiro conduíte para o reservatório; um fluxo de gás a partir do suprimento de gás através do segundo conduíte para o reservatório; e um fluxo de amostra a partir do reservatório através do terceiro conduíte para o espectrômetro de massa. Em alguns aspectos, o sistema de controle é configurado para: controlar o fluxo de solvente a uma taxa de fluxo entre 100 e 5000 microlitros por minuto (por exemplo, entre 200 e 400 microlitros por minuto) por um período de tempo entre 1 e 3 segundos; controlar o fluxo de gás a uma taxa de fluxo entre 1 e 10 psig por um período de tempo entre 10 e 15 segundos; e controlar o fluxo da amostra por um período de tempo entre 10 e 15 segundos. Por exemplo, em alguns aspectos, o sistema de controle compreende um gatilho ou botão para iniciar o fluxo de solvente. Em outros aspectos, o sistema de controle compreende um pedal (isto é, que pode ser operado pela ação do pé) para iniciar o fluxo de solvente. Um versado na técnica reconhecerá que os comprimentos do primeiro e/ou segundo conduíte podem ser ajustados para se adequar ao uso particular do sistema. Em ainda outros aspectos, o sistema de controle é configurado para controlar: um fluxo de solvente (por exemplo, taxa de fluxo por um período fixo de tempo) a partir da câmara através do primeiro conduíte para o reservatório. Em outros aspectos, um aparelho das modalidades não inclui um dispositivo para produzir energia ultrassônica ou vibracional (por exemplo, em quantidades suficientes para romper os tecidos).

[0052] Uma outra modalidade forneceu um método para avaliar amostras de tecido a partir de um sujeito, compreendendo aplicar um solvente a um sítio de tecido no sujeito, coletar o solvente aplicado para obter uma amostra líquida e submeter a amostra à análise de espectrometria de massa. Em certos aspectos, o solvente pode ser estéril. Em alguns aspectos, o solvente é uma formulação farmaceuticamente aceitável. Em aspectos específicos, o solvente é uma solução aquosa. Por exemplo, o solvente pode ser água estéril ou consistir essencialmente em água. Em outros aspectos, o solvente pode compreender de cerca de 1% a 5%, 10%, 15%, 20%, 25% ou 30% de um álcool. Em alguns aspectos, o solvente compreende 0,1% a 20% de um álcool, 1% a 10% de um álcool ou 1% a 5%, 1% a 10% de um álcool (por exemplo, etanol). Em alguns casos, o álcool pode ser etanol.

[0053] Em alguns aspectos, aplicar o solvente ao tecido compreende aplicar um volume discreto de solvente ao sítio do tecido. Em algum aspecto, o solvente é aplicado em uma única gota. Em um outro aspecto, o solvente é aplicado em um número discreto de gotas de 1 a 10. Em algumas modalidades, o solvente é aplicado à amostra a partir do reservatório por meio de um canal independente do gás. Em outras modalidades, o solvente é aplicado à amostra sob baixa pressão. Por exemplo, em alguns aspectos, o solvente é aplicado por uma bomba mecânica de modo que o solvente seja aplicado ao sítio do tecido (por exemplo, movido para um reservatório onde está em contato com o sítio do tecido) com força mínima, exercendo assim pressão mínima (e produzindo dano mínimo) em um sítio de tecido. A baixa pressão pode ser inferior a 100 psig, inferior a 90 psig, inferior a 80 psig, inferior a 70 psig, inferior a 60 psig, inferior a 50 psig ou inferior a 25 psig. Em algumas modalidades, a baixa pressão é de cerca de 0,1 psig a cerca de 100 psig, de cerca de 0,5 psig a cerca de 50 psig, de cerca de 0,5 psig a cerca de 25 psig ou de cerca de 0,1 psig a cerca de 10 psig. Em aspectos particulares, o volume discreto de solvente está entre cerca de 0,1 e 100 uL, ou entre cerca de 1 e 50 ul. Em outros aspectos, a coleta do solvente aplicado é entre 0,1 e 30 segundos após a etapa de aplicação. Em um aspecto específico, a coleta do solvente aplicado é entre 1 e 10 segundos após a etapa de aplicação (por exemplo, pelo menos 1, 2,4,5,6,7,8 ou 9 segundos). Em outros aspectos, um método das modalidades não envolve a aplicação de energia ultrassônica ou vibracional a uma amostra ou tecido. Em alguns aspectos, o sítio do tecido em um sítio do tecido interno que está sendo avaliado cirurgicamente.

[0054] Em um aspecto adicional, um método das modalidades compreende aplicar um volume fixo ou discreto de um solvente (por exemplo, usando bomba mecânica) a um sítio de tecido através de um conduíte de solvente. Em alguns aspectos, o volume fixo ou discreto de um solvente é movido através de um conduíte de solvente para um reservatório onde está em contato direto com um sítio de tecido (por exemplo, por 0,5-5,0 segundos). Em outros aspectos, coletar o solvente aplicado compreende aplicar uma pressão negativa para puxar a amostra para um conduíte de coleta e/ou aplicar uma pressão de gás para empurrar a amostra para um conduíte de coleta. Em alguns aspectos específicos, o solvente é aplicado através de um conduíte de solvente que é separado do conduíte de coleta. Em outros aspectos, em que uma pressão de gás é aplicada para empurrar a amostra para o conduíte de coleta, a pressão do gás é aplicada através de um conduíte de gás que é separado do conduíte de solvente e do conduíte de coleta. Em certos aspectos, em que uma pressão de gás é aplicada para empurrar a amostra para o conduíte de coleta, a pressão de gás aplicada é inferior a 100 psig. Por exemplo, a pressão do gás é de preferência inferior a psig, tal como 0,1 a 5 psig. Em ainda outros aspectos, um método das modalidades é definido como não produzindo nenhum dano físico detectável ao tecido sendo avaliado.

[0055] Em ainda outros aspectos, o método pode compreender adicionalmente coletar uma pluralidade de amostras líquidas de uma pluralidade de sítios de tecido. Em alguns casos, o dispositivo (por exemplo, a sonda) usado para coletar as amostras é lavado entre cada coleta de amostra. Em outros aspectos, um dispositivo usado para coletar as amostras inclui uma ponta de coleta descartável (sonda) que pode ser alterada entre cada coleta de amostra. Em aspectos específicos, a ponta de coleta pode ser ejetável (por exemplo, capaz de ser ejetada do dispositivo). Em certos aspectos, a pluralidade de sítios de tecido compreende 2, 3, 4, 5, 6,7,8, 9, 10 ou mais sítios de tecidos in vivo. Em outro aspecto, a pluralidade de sítios de tecido circunda uma seção de tecido que foi ressecada cirurgicamente (por exemplo, ex vivo). Em um aspecto específico, o tecido ressecado é um tumor. Em alguns aspectos, o método pode ser definido como um método intra-operatório.

[0056] Uma outra modalidade fornece um método de identificação de um sítio de tecido amostrado e um método para comunicar a localização do sítio ao operador do dispositivo (sonda). A identificação de um sítio de tecido amostrado permite que o operador acesse as informações moleculares registradas no sítio de tecido amostrado em um período após a amostragem de moléculas coletadas do tecido.

São reconhecidos pelo menos três tipos de abordagens de identificação.

Na primeira abordagem, um material exógeno é anexado ao sítio do tecido amostrado que identifica as informações moleculares amostradas.

Em uma segunda abordagem, o dispositivo (sonda) é equipado com um sensor/emissor de rastreamento que permite gravar a localização da sonda (dispositivo) e a comunicar a um dispositivo de geração de imagens quando a informação molecular é amostrada.

Em uma terceira abordagem, a região do tecido é modificada para que o sítio possa ser facilmente identificado após a coleta das moléculas do tecido.

Na primeira abordagem, os materiais que podem ser fixados ao sítio do tecido amostrado incluem, por exemplo, uma sutura, um grampo cirúrgico, um polímero biocompatível que adere ao tecido ou um chip RFID que é fixado a uma esfera magnética que permite fácil leitura e remoção.

No segundo tipo de abordagem, a sonda pode conter um emissor de RF que faz parte de um sistema de rastreamento cirúrgico de RF, um emissor de ultrassom ou refletor que faz parte de um sistema de geração de imagens intra-operatório US.

Nesta segunda abordagem, quando o operador inicia a coleta de moléculas de tecido, o sistema de rastreamento grava a localização da sonda no sistema de geração de imagens associado (por exemplo, RF, US, CT, MRI) que pode estar em comunicação com o dispositivo.

O operador pode, então, identificar qualguer um dos sítios de tecido amostrados posteriormente, referindo-se à(s) imagemí(ns) gravada(s) que podem indicar a localização dos sítios amostrados para o operador.

Na terceira abordagem, o tecido é modificado.

Nesta terceira abordagem, uma fonte de laser em comunicação com a sonda pode ser usada para remover ou coagular um padrão no tecido que identifica o sítio da amostra. Qualquer uma dessas três abordagens pode ser combinada. Por exemplo, as abordagens 1, 2 e 3 podem ser combinadas em que um material exógeno é anexado ao sítio do tecido após a colheita de moléculas de tecido e um laser padroniza o tecido exógeno enquanto um sensor RF grava a localização do sítio de colheita e se comunica com o dispositivo de geração de imagens.

[0057] Em ainda outros aspectos, a espectrometria de massa compreende MS de ionização de ambiente. Conforme divulgado neste documento, uma sonda em contato com um sítio de tecido pode estar em comunicação de fluido com o MS por meio de um conduíte. Em alguns aspectos, o conduíte entre a sonda e o sítio do tecido está a menos de cerca de 10m, 8m, 6m ou 4m de MS. Em outros aspectos, o conduíte tem cerca de 0,5, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5, 3,0 e 4,0 m de comprimento. Em vários aspectos, submeter a amostra à análise de espectrometria de massa pode compreender determinar um perfil correspondente ao sítio do tecido. Em outro aspecto, o método pode compreender adicionalmente comparar o perfil com um perfil de referência para identificar sítios de tecido que incluem tecido doente. Em outros aspectos, o método também compreende a ressecção de sítios de tecido que são identificados para incluir tecido doente. Em alguns aspectos, o método é realizado usando um aparelho de acordo com qualquer uma das modalidades e aspectos descritos acima.

[0058] Em uma outra modalidade, a invenção fornece um método ex vivo para avaliar amostras de tecido compreendendo obter uma pluralidade de amostras líquidas de uma pluralidade de sítios de tecido em um sujeito, submeter a pluralidade de amostras líquidas à espectrometria de massa para obter uma pluralidade de perfis correspondentes aos sítios do tecido e comparar a pluralidade de perfis com perfis de referência para identificar os sítios do tecido que incluem tecido doente. Em certos aspectos, as amostras líquidas são compreendidas em um solvente. Em outros aspectos, os tecidos doentes compreendem células cancerosas.

[0059] Em alguns aspectos das modalidades, os sítios de tecido doente para avaliação por métodos e dispositivos das modalidades compreendem (ou suspeita-se que compreendam) células cancerosas.

As células cancerosas que podem ser avaliadas de acordo com as modalidades incluem, mas não estão limitadas a células ou tecidos tumorais a partir de uma tireoide, paratireoide, linfonodo, bexiga, sangue, osso, medula óssea, cérebro, mama, cólon, esôfago, gastrointestino, gengiva, cabeça, rim, fígado, pulmão, nasofaringe, pescoço, ovário, pâncreas, próstata, pele, estômago, testículo, língua ou útero (ou tecidos ao redor de tais tumores). Em alguns aspectos, o câncer pode ser uma neoplasia maligna; carcinoma; carcinoma indiferenciado; carcinoma de células gigantes e fusiformes; carcinoma de células pequenas; carcinoma papilar; carcinoma de células escamosas; carcinoma linfoepitelial; carcinoma basocelular; pilomatrix-carcinoma; carcinoma de células transicionais; carcinoma de células de transição papilar; —adenocarcinoma; gastrinoma maligno; colangiocarcinoma; carcinoma hepatocelular; carcinoma hepatocelular e colangiocarcinoma combinados; adenocarcinoma trabecular; carcinoma adenoide cístico; adenocarcinoma em pólipo adenomatoso; adenocarcinoma, polipose coli familiar; carcinoma sólido; tumor carcinoide maligno; adenocarcinoma bronquíoloalveolar; adenocarcinoma papilar; carcinoma cromófobo; carcinoma acidófilo; adenocarcinoma oxifílico; carcinoma basófilo; adenocarcinoma de células claras; carcinoma de células granulares; adenocarcinoma folicular; adenocarcinoma papilar e folicular; carcinoma esclerosante não encapsulado; carcinoma cortical adrenal; carcinoma endometroide; carcinoma de apêndice da pele; adenocarcinoma apócrino; adenocarcinoma “sebáceo; adenocarcinoma ceruminoso; carcinoma mucoepidermóide; cistadenocarcinoma; cistadenocarcinoma papilar; cistadenocarcinoma “seroso papilar; cistadenocarcinoma mucinoso; adenocarcinoma mucinoso; carcinoma de células em anel de sinete; carcinoma ductal infilttante; carcinoma medular; carcinoma lobular;

carcinoma inflamatório; doença de Paget mamária; carcinoma de células acinares; carcinoma adenoescamoso; adenocarcinoma com metaplasia escamosa; timoma maligno; tumor do estroma ovariano maligno; tecoma maligno; tumor de células da granulosa maligno; androblastoma maligno; carcinoma de células de Sertoli; tumor de células de Leydig, maligno; tumor de células lipídicas maligno; paraganglioma maligno; paraganglioma extra- mamário maligno; feocromocitoma; glomangiossarcoma; melanoma maligno; melanoma amelanótico; melanoma expansivo superficial; melanoma maligno em nevo gigante pigmentado; melanoma de células epitelioides; nevo azul maligno; sarcoma; fibrossarcoma; histiocitoma fibroso “maligno; mixossarcoma; lipossarcoma; leiomiossarcoma; rabdomiossarcoma; rabdomiossarcoma embrionário; rabdomiossarcoma alveolar; sarcoma do estroma; tumor misto, maligno; tumor misto mulleriano; nefroblastoma; hepatoblastoma; carcinossarcoma; mesênquimoma maligno; tumor de Brenner, maligno; tumor filoides maligno; sarcoma sinovial; mesotelioma maligno; disgerminoma; carcinoma embrionário; teratoma maligno; struma ovarii, maligno; coriocarcinoma; mesonefroma maligno; hemangiossarcoma; hemangioendotelioma maligno; sarcoma de Kaposi; hemangiopericitoma maligno; linfangiossarcoma; osteossarcoma; osteossarcoma justacortical; condrossarcoma; condroblastoma maligno; condrossarcoma mesenquimal; tumor de células gigantes do osso; sarcoma de Ewing; tumor odontogênico maligno; —odontosarcoma — ameloblástico; ameloblastoima — maligno; fibrossarcoma ameloblástico; pinealoma maligno; cordoma; glioma maligno; ependimoma; astrocitoma; astrocitoma protoplasmático; astrocitoma fibrilar; astroblastoma; glioblastoma; oligodendroglioma; oligodendroblastoma; neuroectodérmico primitivo; sarcoma cerebelar; ganglioneuroblastoma; neuroblastoma; retinoblastoma; tumor neurogênico olfatório; meningioma maligno; neurofibrossarcoma; neurilemoma maligno; tumor de células granulares maligno; linfoma maligno; doença de Hodgkin; hodgkin's; ou paragranuloma.

Em outros aspectos, o câncer é um câncer de tireoide,

câncer cerebral (por exemplo, um glioma), um câncer de próstata, um câncer de mama (por exemplo, um câncer de mama triplo negativo), um câncer pancreático (por exemplo, um adenocarcinoma ductal do pâncreas), leucemia mieloide aguda (AML), melanoma, câncer de células renais ou um câncer que metastatizou para um nódulo linfático.

[0060] Tal como aqui utilizado, "amostra" ou "amostras líquidas" podem referir-se a extratos a partir de tecidos ou outros espécimes biológicos (por exemplo, extratos compreendendo proteínas e metabólitos) obtidos ao colocar tecido ou espécime biológico em contato com um solvente de acordo com as modalidades. Em alguns aspectos, uma amostra pode ser um extrato de um espécime não biológico, como a superfície de um objeto (por exemplo, uma amostra forense).

[0061] Como usado neste documento, "essencialmente livre", nos termos de um componente especificado, é usado neste documento para significar que nenhum dos componentes especificados foi propositadamente formulado em uma composição e/ou só está presente apenas como um contaminante ou em quantidades vestigiais. A quantidade total do componente especificado que resulta de qualquer contaminação não intencional de uma composição está, portanto, bem abaixo de 0,01%. O mais preferencial é uma composição em que nenhuma quantidade do componente especificado pode ser detectada com métodos analíticos padrões.

[0062] Conforme usado neste documento no relatório descritivo e nas reivindicações, "um" ou "uma" pode significar um ou mais. Conforme usado neste documento, no relatório descritivo e nas reivindicações, quando as palavras "um" ou "uma" são usadas em conjunto com a palavra "compreendendo", elas podem significar um ou mais de um. Conforme usado neste documento, no relatório descritivo e na reivindicação, "um(a) outro(a)" ou "outro(a)" pode significar pelo menos um segundo ou mais.

[0063] Conforme usado neste documento no relatório descritivo e nas reivindicações, os termos "conduíte" e "tubo" são usados indistintamente e se referem a uma estrutura que pode ser usada para direcionar o fluxo de um gás ou líquido.

[0064] Conforme usado neste documento no relatório descritivo e nas reivindicações, o termo "cerca de" é usado para indicar que um valor inclui a variação inerente de erro para o dispositivo, o método sendo empregado para determinar o valor ou a variação que existe entre os indivíduos do estudo.

[0065] Outros objetos, características e vantagens da presente invenção se tornarão aparentes a partir da seguinte descrição detalhada. Deve ser entendido, entretanto, que a descrição detalhada e os exemplos específicos, ao indicar certas modalidades da invenção, são dados a título de ilustração, apenas, uma vez que várias alterações e modificações dentro do espírito e do escopo da invenção se tornarão aparentes para aqueles versados na técnica a partir desta descrição detalhada.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0066] Os desenhos a seguir formam parte do presente relatório descritivo e estão incluídos para adicionalmente demonstrar certos aspectos da presente invenção. A invenção pode ser melhor entendida por referência a um ou mais destes desenhos em combinação com a descrição detalhada de modalidades específicas apresentadas neste documento.

[0067] FIG. 1: Esquema representativo de uma vista frontal de um aparelho para troca de dispositivos médicos.

[0068] FIG. 2: Esquema representativo de uma vista lateral de um aparelho para a troca de dispositivos médicos

[0069] FIG. 3: Esquema representativo de uma vista frontal de um aparelho para a troca de dispositivos médicos em uma primeira posição.

[0070] FIG. 4: Esquema representativo de uma vista frontal de um aparelho para a troca de dispositivos médicos em uma segunda posição.

[0071] FIG. 5A: Esquema representativo de uma vista superior de um aparelho para a troca de dispositivos médicos.

[0072] FIG. 5B: Esquema representativo de uma vista superior de uma modalidade de um aparelho para a troca de dispositivos médicos.

[0073] FIG. 5C: Esquema representativo de uma vista superior de uma segunda modalidade de um aparelho para a troca de dispositivos médicos.

[0074] FIG. 5D: Representação fotográfica de uma vista superior de uma modalidade de um aparelho para troca de dispositivos médicos durante o uso.

[0075] FIG. 5E: Representação fotográfica de uma vista superior da modalidade da FIG. 5D.

[0076] FIG. 6: Esquema representativo de uma sonda de espectroscopia de massa para cirurgia minimamente invasiva.

[0077] FIG. 7: Tubulação multi-lúmen para uso com a sonda de espectroscopia de massa para cirurgia minimamente invasiva.

[0078] FIG. 8: Uma cânula e agulha de trocarte para alojar e inserir a sonda de espectrometria de massa para cirurgia minimamente invasiva.

[0079] FIG. 9: Esquema representativo de uma sonda de espectrometria de massa para cirurgia minimamente invasiva. Esta modalidade inclui um obturador para obstruir a sonda.

[0080] FIG. 10: Espectros de massa da seção de tecido de cérebros de camundongos a partir da sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva usando o espectrômetro de massa Q Exactive Orbitrap. Foi utilizada tubulação PTFE de 1,5 metros com diâmetro interno de 2 mm e diâmetro externo de 4 mm.

[0081] FIG. 11: Espectros de massa da seção de tecido de cérebros de camundongos a partir da sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva usando o espectrômetro de massa Q Exactive Orbitrap. Foi utilizada tubulação PTFE de 3,5 metros com diâmetro interno de 2 mm e diâmetro externo de 4 mm.

[0082] FIG. 12: Espectros de massa da seção de tecido de cérebros de camundongos a partir da sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva usando o espectrômetro de massa Q Exactive Orbitrap. Foi utilizada tubulação PTFE de 4,5 metros com diâmetro interno de 2 mm e diâmetro externo de 4 mm.

[0083] FIG. 13: Espectros de massa da seção de tecido de cérebros de camundongos a partir da sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva usando o espectrômetro de massa Q Exactive Orbitrap.

[0084] FIG. 14: Esquema representativo de uma sonda de espectrometria de massa para cirurgia minimamente invasiva. Representado no canto inferior esquerdo está a ponta da sonda multicanal.

[0085] FIG. 15: Cirurgia laparoscópica simulada mostrada a partir de uma câmera ótica laparoscópica em um útero simulado. Mostrado à direita estão fórceps segurando a sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva.

[0086] FIG. 16: Espectros de massa gerados a partir de uma seção de cérebro de camundongo de 16 um usando tubulação de 4,5 metros de comprimento em comparação com o fundo de água.

[0087] FIG. 17: Espectros de massa gerados com a sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva usando o espectrômetro de massa Q Exactive Orbitrap e conduítes de 1,5-4,0 mm de diâmetro.

[0088] FIG. 18: Representação da mecânica de um obturador de balão para uso com a sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva.

[0089] FIG.19: Espectro de massa da seção de tecido pulmonar humano a partir da sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva usando o espectrômetro de massa Q Exactive Orbitrap.

[0090] FIG. 20: Diagrama da câmara de lavagem para sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva.

[0091] FIG. 21: Esquema representativo de um dispositivo sem um aplicador pneumático que pode fornecer uma pressão de vácuo a uma superfície em contato com o dispositivo.

[0092] FIG. 22: Esquema representativo de um dispositivo com um aplicador pneumático que pode fornecer uma pressão de vácuo a uma superfície em contato com o dispositivo.

[0093] FIG. 23: Vista final de um dispositivo com as portas de vácuo que inclui um anel indentado adicional que se estende ao redor do perímetro do dispositivo e fornece pressão de vácuo à superfície em contato com o dispositivo.

DESCRIÇÃO DE MODALIDADES ILUSTRATIVAS |. As presentes modalidades

[0094] Em certos aspectos, o pedido em questão fornece aparelhos e métodos para trocar e/ou limpar dispositivos médicos usando procedimentos cirúrgicos. Em modalidades particulares, um cartucho contém dispositivos médicos que podem ser trocados alterando a orientação do cartucho.

[0095] Uma visão geral inicial e discussão serão apresentadas em relação a características e princípios operacionais de um aparelho que compreende um cassete com sondas de aquisição de amostra. Seguindo a visão geral do aparelho, uma discussão de características específicas de sondas de aquisição de amostra exemplares será apresentada.

[0096] Com referência inicialmente à FIG. 1, uma vista esquemática frontal é mostrada de um aparelho 100 compreendendo um cassete 110 compreendendo adicionalmente uma pluralidade de sondas de aquisição de amostra 120. Nesta modalidade, o cassete 110 é configurado para girar no sentido horário. A FIG. 2 ilustra uma vista esquemática lateral de uma configuração alternativa do aparelho 100 que se move linearmente em vez de girar. Entende-se que a presente divulgação inclui ambas as modalidades e os princípios de operação de cada modalidade são equivalentes. Consequentemente, aspectos de componentes giratórios podem ser igualmente aplicados a componentes de translação linear e vice- versa.

[0097] O cassete 110 é acoplado a um instrumento de processamento de amostra 130 por meio de um mecanismo de acoplamento

140. O aparelho 100 é configurado de modo que uma das sondas de aquisição de amostra 120 esteja em comunicação de fluido com um instrumento de processamento de amostra 130, enquanto as sondas de aquisição de amostra restantes 120 permanecem prontas para uso. Durante Oo uso, o aparelho 100 permite que o pessoal médico alterne de forma rápida e eficiente entre as sondas de aquisição de amostra 120. A capacidade de mudar para uma sonda diferente para cada aquisição de amostra pode reduzir a contaminação cruzada entre diferentes amostras adquiridas e entregues ao instrumento de análise 130. Em modalidades particulares, o instrumento de processamento de amostra 130 pode ser um espectrômetro de massa, enquanto em outras modalidades o instrumento de processamento de amostra 130 pode ser qualquer instrumento adequado para processar uma amostra, incluindo, por exemplo, analisar ou armazenar a amostra.

[0098] O mecanismo de acoplamento 140 acopla um conduíte de aquisição de amostra 180 ao instrumento de processamento de amostra 130 para permitir que uma amostra adquirida por uma sonda de aquisição de amostra 120 seja processada. O mecanismo de acoplamento 140 é configurado para acoplar um conduíte individual 180 por meio de qualquer maneira adequada que permita o desacoplamento e o acoplamento de conduítes de aquisição de amostra 180 quando a orientação do cassete 110 é alterada. Em uma modalidade, o mecanismo de acoplamento 140 pode incluir uma vedação flexível 145 que engata um conduíte de aquisição de amostra 180 (em comunicação de fluido com uma primeira sonda 120) de modo que o conduíte de aquisição de amostra 180 esteja em comunicação de fluido com o instrumento de processamento de amostra 130 quando o cassete 110 está em uma orientação particular. Conforme a orientação do cassete 110 é alterada, a vedação flexível 145 pode desengatar de modo que o conduíte 180 não esteja mais em comunicação de fluido com o instrumento de processamento de amostra 130. Conforme a orientação do cassete 110 é adicionalmente alterada, um conduíte de aquisição de amostra 180 diferente (em comunicação de fluido com uma segunda sonda 120) é engatado na vedação flexível 145 de modo que o conduíte de aquisição de amostra 180 esteja em comunicação de fluido com o instrumento de processamento de amostra 130. Em certas modalidades, a vedação flexível 145 pode ser elastômero ou outro polímero adequado.

[0099] Com referência agora às FIGS. 3 e 4, outra modalidade de um aparelho 100 inclui a capacidade de lavar uma sonda de aquisição de amostra 120 após o uso. Esta modalidade inclui uma câmara 150 em comunicação de fluido com uma sonda de aquisição de amostra 120 através de um conduíte 155. A câmara 150 compreende um fluido de limpeza que pode ser direcionado para uma sonda de aquisição de amostra 120 através do conduíte 155, a fim de limpar a sonda após ela ter sido usada. O cassete 110 pode então ser girado para fornecer uma sonda de aquisição de amostra limpa 120 para cada procedimento de amostra. Na modalidade mostrada, a sonda de aquisição de amostra 120 na localização 1 no topo da FIG. 3 é originalmente designada como a porta de trabalho em comunicação de fluido com um instrumento de processamento de amostra (por exemplo, espectrômetro de massa). Como resultado, a sonda de aquisição de amostra 120 na localização | pode ser usada para adquirir uma amostra e entregá-la ao instrumento de processamento de amostra. Após a amostra ter sido obtida e entregue ao instrumento de processamento de amostra, o cassete 110 pode então ser girado no sentido horário, como mostrado na FIG. 4.

[00100] Por conseguinte, a sonda de aquisição de amostra 120 na localização 6 está agora na localização da porta de trabalho e pode ser usada para adquirir e entregar uma amostra diferente para o instrumento de processamento de amostra. A sonda de aquisição de amostra 120 na localização 1 está agora em comunicação de fluido com a câmara 150 e pode ser limpa. O fluido de limpeza da câmara 150 pode ser direcionado através da sonda de aquisição de amostra 120 para remover qualquer material que permaneça do procedimento de aquisição de amostra anterior. Isso fornece uma sonda de aquisição de amostra 120 limpa para procedimentos subsequentes usando a sonda de aquisição de amostra 120 na localização 1 conforme o cassete 110 é girado.

[00101] Após a sonda de aquisição de amostra 120 na localização 1 ser limpa, o cassete 110 pode então ser girado conforme necessário para adquirir várias amostras. Quando a sonda de aquisição de amostra 120 na localização 1 é retornada ao local da porta de trabalho superior, a sonda será limpa de contaminação potencial que poderia afetar aquisições de amostra subsequentes com a sonda.

[00102] Com referência agora à FIG. 5A, uma vista esquemática é mostrada do aparelho 100, incluindo uma pluralidade de conduítes entre as sondas de aquisição de amostra 120 e o instrumento de processamento de amostra 130 e componentes adicionais. Nesta modalidade, o aparelho 100 não inclui um cassete de rotação ou translação de sondas de aquisição de amostra. Em vez disso, existem duas sondas de aquisição de amostra 120. Uma sonda de aquisição de amostra 120 é usada para aquisição e análise de amostra enquanto a outra sonda é substituída por uma sonda limpa. Nesta modalidade, o aparelho 100 inclui uma ou mais câmaras 160 compreendendo um solvente, incluindo, por exemplo, água ou outro fluido (distribuído por meio de um conduíte de suprimento de solvente 165) adequado para uso na aquisição de amostra. Além disso, o aparelho 100 compreende um suprimento de gás 170 e um conduíte 175. Durante o uso, o solvente da câmara 160 e o gás a partir do suprimento de gás 170 podem ser direcionados através de uma sonda de aquisição de amostra 120 para auxiliar na aquisição de uma amostra a partir de um sítio de amostra.

[00103] Nesta modalidade, o aparelho 100 compreende uma primeira pluralidade de conduítes de aquisição de amostra 180 e cada sonda de aquisição de amostra 120 é acoplada a um conduíte da primeira pluralidade de conduítes 180. Além disso, cada conduíte da primeira pluralidade de conduítes de aquisição de amostra 180 é configurado para colocar o instrumento de processamento de amostra 130 em comunicação de fluido com uma sonda de aquisição de amostra específica 120 que está sendo usada atualmente para aquisição e análise de amostra. Depois que uma amostra é adquirida e direcionada para o instrumento de processamento 130 com uma primeira sonda de aquisição de amostra 120, o conduíte de aquisição de amostra 180 pode ser desacoplado do instrumento de processamento 130. O conduíte de aquisição de amostra 180 para a segunda sonda de aquisição de amostra 120 pode, então, ser acoplado ao instrumento de processamento 130 e uma segunda amostra pode ser adquirida com a segunda sonda de aquisição de amostra 120. Em certas modalidades, o conduíte de aquisição de amostra 180 e o instrumento de processamento 130 podem ser acoplados via mecanismo de acoplamento

141. Em modalidades particulares, o mecanismo de acoplamento 141 é um mecanismo de acoplamento de liberação rápida. Conforme usado neste documento, um mecanismo de acoplamento de liberação rápida é definido como um mecanismo que permite o acoplamento e desacoplamento de componentes sem o uso de ferramentas externas. Por conseguinte, em modalidades exemplares, o conduíte de aquisição de amostra 180 e o instrumento de processamento 130 podem ser acoplados e desacoplados por meio do mecanismo de acoplamento 141 de uma maneira eficiente (por exemplo, menos de cinco segundos), sem a necessidade de usar ferramentas externas para realizar o processo de acoplamento e acoplamento. Em modalidades específicas, o mecanismo de acoplamento

141 pode compreender um encaixe por fricção para acoplar e vedar o conduíte de aquisição de amostra 180 ao instrumento de processamento

130. Em outras modalidades, o mecanismo de acoplamento 141 pode compreender uma trava Luer para acoplar e vedar o conduíte 180 ao instrumento de processamento 130.

[00104] Enquanto a segunda sonda de aquisição de amostra 120 é usada para adquirir uma amostra, uma terceira sonda de aquisição de amostra 120 (por exemplo, uma nova sonda ou uma sonda que foi previamente limpa) com o conduíte de aquisição de amostra 180 pode ser preparada para uso. Após a segunda amostra ser adquirida, o conduíte de aquisição de amostra 180 para a segunda sonda é removido do instrumento de processamento 130 e um conduíte de aquisição de amostra 180 acoplado a uma terceira sonda de aquisição de amostra 120 pode ser acoplado ao instrumento de processamento 130. Uma terceira amostra pode então ser obtida enquanto uma quarta sonda 120 e o conduíte de aquisição de amostra 180 são preparados para uso. O processo pode então ser repetido para permitir que uma sonda de aquisição de amostra diferente 120 seja usada para cada amostra. Este procedimento permite que o processo de aquisição de amostra prossiga com eficiência porque uma sonda de aquisição de amostra limpa e não contaminada 120 e o conduíte de aquisição de amostra 180 estão prontos para uso após cada amostra ser adquirida.

[00105] O aparelho 100 compreende adicionalmente válvulas solenoides (não rotuladas na FIG. 5A para fins de clareza) para restringir ou permitir o fluxo de fluidos através dos vários conduítes. As válvulas solenoides podem ser controladas para permitir que o solvente (por exemplo, água) flua através do conduíte quando o aparelho 100 está sendo usado para adquirir e analisar uma amostra. Quando o instrumento de processamento 130 está em modo de espera, as válvulas solenoides podem ser posicionadas para restringir o fluxo de solvente e permitir que o ar flua para o instrumento de processamento 130. Um sistema de controle pode ser utilizado para controlar a operação das válvulas solenoides e o fluxo de fluido através dos conduítes.

[00106] Com referência agora à FIG. 5B, é mostrada uma vista esquemática do aparelho 100 no qual bombas de seringa 161 com encaixes de trava Luer 162 são usados para acoplar aos conduítes e fornecer fluxo de solvente. A FIG. 5C mostra uma modalidade semelhante à da FIG. 5B, mas as bombas de seringa 161 utilizam um encaixe de agulha 163 para acoplar aos conduítes e fornecer fluxo de solvente. As FIGS. 5D e 5E fornecem fotografias de um aparelho 100 semelhante à FIG. C durante o uso. À modalidade mostrada nas FIGS. 5D e 5E incorporam um encaixe de agulha que fornece fluxo de fluido a partir da seringa ativada pela bomba de seringa. As válvulas solenoides controlam o fluxo de fluido durante a aquisição de amostra, conforme descrito anteriormente.

[00107] O aparelho e métodos mostrados e descritos acima em relação às FIGS. 1-5 permitem trocar e/ou limpar de modo eficiente instrumentos durante procedimentos cirúrgicos, incluindo aquisição de amostra e procedimentos de avaliação. Embora as modalidades específicas mostradas e descritas sejam direcionadas a procedimentos de aquisição e avaliação de amostra, entende-se que o escopo da invenção não se limita a tais procedimentos. As modalidades da presente divulgação incluem outros procedimentos cirúrgicos que incluem várias etapas nas quais os tecidos biológicos (ou outra matéria) contatam dispositivos médicos e existe a chance de contaminação cruzada entre as etapas do procedimento.

[00108] Embora a presente divulgação não se limite a modalidades que incorporam sondas e procedimentos de amostra de tecido, uma discussão mais detalhada de tais modalidades é fornecida na discussão a seguir. Em certos aspectos, o pedido em questão fornece métodos e dispositivos para avaliação molecular minimamente invasiva de amostras, como amostras de tecido. Em aspectos particulares, os métodos podem ser usados para avaliar vários sítios de tecido durante uma operação (ou biópsia)

do tecido. Essa característica permite a identificação precisa de tecidos doentes (por exemplo, sítios de tecido que retêm células cancerosas) em "tempo real", permitindo que os cirurgiões abordem com mais precisão apenas o tecido doente em relação aos tecidos normais circundantes. Em aspectos particulares, os métodos divulgados neste documento podem envolver a entrega de um volume fixo ou discreto de solvente a um sítio de tecido, seguido pela coleta de uma amostra líquida do sítio e análise da amostra líquida por espectrometria de massa. É importante ressaltar que, em vez de ser aplicado em uma pulverização de alta pressão, o solvente é aplicado como gotas discretas e em baixa pressão. Esses métodos permitem a coleta precisa de amostras a partir de um sítio de tecido distinto, evitando danos ao tecido que está sendo avaliado. O perfil de espectrometria de massa resultante a partir de amostras coletadas permite a diferenciação de locais de tecido doente em relação ao normal. O método pode ser repetido em vários sítios de interesse para mapear com muita precisão as alterações moleculares (por exemplo, em um tecido). É importante ressaltar que os perfis das amostras puderam ser diferenciados mesmo sem o uso de uma fonte de ionização. Assim, embora os métodos das modalidades possam ser usados em conjunto com uma fonte de ionização, o uso de tal fonte não é necessário. Essas metodologias podem permitir a avaliação de uma pluralidade de sítios de tecido em um curto intervalo de tempo, permitindo, assim, uma avaliação muito precisa dos limites de tecidos doentes versus tecidos normais.

[00109] Em alguns aspectos, os métodos detalhados neste documento podem ser usados para coletar e analisar amostras de uma ampla gama de fontes. Por exemplo, os métodos podem ser usados para avaliar amostras cirúrgicas, forenses, agrícolas, farmacêuticas e/ou de óleo/petróleo.

[00110] Em alguns aspectos, os materiais (PDMS e PTFE) e o solvente (por exemplo, solventes apenas água) usados nos dispositivos das modalidades são biologicamente compatíveis, de modo que podem ser usados em cirurgia para análise em tempo real. Além disso, como os dispositivos podem ser muito compactos, eles podem ser portáteis e usados em procedimentos cirúrgicos minimamente invasivos ou não cirúrgicos.

[00111] Em alguns aspectos, a presente invenção fornece dispositivos de comprimento estendido e compactação aumentada para distribuição de volumes fixos ou discretos de solventes a tecidos para uso em cirurgias minimamente invasivas. Em alguns aspectos, esses métodos podem ser encapsulados em uma variedade de fatores de forma, como um conduíte, variando de 0,5 mm a 10,0 mm em diâmetro interno (por exemplo, com um diâmetro interno entre cerca de 1,0 e 5,0; 1,0 e 10,0; 2,0 e 8,0; ou 5,0 e 10,0 mm). Em alguns aspectos, o sítio de entrega de um volume fixo ou discreto de solvente, seguido pela coleta de uma amostra líquida, pode ser dentro do corpo, como um local cirúrgico. Em alguns aspectos, dois conduítes menores podem ser inseridos em um terceiro conduíte maior para criar um cateter multi-lúmen. Por exemplo, o cateter multi-lúmen pode ter 2, 3, 4, 5, 6 ou mais espaços luminais com cada um tendo um diâmetro interno de, por exemplo, 0,05 a 5,0 mm; 0,1 a 5,0 mm; 0,25 a 3,0 mm; ou 0,5 mm a 10,0 mm. O cateter multi-lúmen pode ser anexado a um dispositivo de espectrometria de massa para análise de amostras de tecidos dentro do corpo durante a cirurgia, evitando danos desnecessários aos tecidos circundantes.

[00112] Em alguns aspectos, o dispositivo pode ser usado por meio de cânulas ou cateteres em procedimentos cirúrgicos ou endoscópicos minimamente invasivos ou pode ser usado em procedimentos não cirúrgicos por meio de guias de agulha ou guias de biópsia. Em alguns aspectos, a presente invenção pode ser integrada em um sistema cirúrgico robótico permitindo que várias regiões da cavidade do corpo humano sejam rapidamente amostradas e analisadas. Em alguns aspectos, o dispositivo pode ser utilizado para analisar tecidos por meio de um banco de dados de assinaturas moleculares e algoritmos de aprendizado de máquina, permitindo o diagnóstico em tempo real para cada região amostrada. À presente invenção pode ser usada em uma ampla variedade de intervenções oncológicas e outras intervenções cirúrgicas, como a endometriose, para as quais a caracterização e o diagnóstico em tempo real dos tecidos são necessários.

[00113] Em alguns aspectos, a presente divulgação fornece um anexo à sonda, para manipulação fina da sonda durante procedimentos minimamente invasivos ou não invasivos. Por exemplo, o anexo à sonda pode ser uma aleta. Em alguns aspectos, a presente invenção pode compreender adicionalmente um dispositivo para agarrar a sonda, externo à sonda, a fim de manipular a sonda durante os procedimentos laparoscópicos. O dispositivo de agarramento pode ser usado para reter, girar ou mover a sonda, ou pode agarrar a aleta fixada na sonda, a fim de mover ou girar a sonda.

[00114] Em alguns aspectos, a presente invenção mantém um reservatório usando um cateter multi-lúmen com portas recuadas para depositar água e gás nitrogênio durante procedimentos cirúrgicos laparoscópicos. Um cateter multi-lúmen pode ser formado, por exemplo, usando uma extrusão multi-lúmen como é bem conhecido na técnica. Esses cateteres podem ser utilizados em qualquer cânula. As cânulas mais comumente usadas têm diâmetros de 5 mm e 10 mm e são normalmente usadas para cirurgias laparoscópicas.

[00115] Em alguns aspectos, a presente divulgação fornece ferramentas, dispositivos e métodos para manipulação da sonda durante a endoscopia. Por exemplo, a tubulação multi-lúmen pode ser usada com uma fonte de vácuo externa a fim de prender a sonda à superfície do tecido durante a análise.

[00116] Em alguns aspectos, a presente invenção fornece um sistema de obturador que obstrui o orifício do dispositivo cirúrgico minimamente invasivo. Em alguns aspectos, este sistema de obturador pode ser um balão de cateter que é integrado dentro do dispositivo ou adicionado separadamente ao dispositivo. O obturador, ou balão, pode fechar a ponta da sonda, evitando que material biológico indesejado entre no dispositivo, incluindo os lúmens e a tubulação, após a inserção do cateter no paciente. O obturador ou balão pode impedir que fluidos biológicos endógenos entrem no espectrômetro de massa após o início da análise, evitando assim a contaminação dos resultados. Finalmente, o fechamento do obturador ou do balão pode impedir que o excesso de gás nitrogênio e água entrem no corpo. A inclusão de sondas alongadas para cirurgias minimamente invasivas e tecnologias de obstrução para as pontas das sondas pode mitigar a natureza imprevisível e muitas vezes tumultuada do movimento de órgãos internos e sistemas de órgãos durante a cirurgia, o que pode afetar a aquisição de sinal. As tecnologias de balão também podem ser usadas em outra região do dispositivo ou além das válvulas de aperto para controlar os movimentos do solvente e do gás através dos tubos.

[00117] Em alguns aspectos, a presente invenção pode ser usada com manipulação robótica. Em alguns aspectos, as tecnologias da presente invenção podem ser integradas em teatros cirúrgicos modernos por meio de uma porta acessória ou por meio de um braço robótico. Esses dispositivos podem ser integrados em sistemas robóticos, como o sistema cirúrgico robótico Intuitive Surgical da Vinci. Um dispositivo da presente invenção pode ter seu próprio braço dedicado em um sistema robótico, ou ser manuseado por agarradores robóticos incorporando uma “aleta” na sonda. Diâmetros menores e maiores também podem ser usados para serem acoplados a quaisquer cateteres existentes, cânulas e também guias de agulha/biópsia.

[00118] Em alguns aspectos, uma sonda de rastreamento pode ser integrada a este dispositivo a fim de exibir e gravar onde a amostra de tecido foi analisada para melhor auxiliar o cirurgião na localização dos pontos de amostragem tanto no intra-operatório quanto de outra forma. Por exemplo,

durante o ultrassom intra-operatório, um emissor de ultrassom no dispositivo pode ser utilizado para exibir a sonda durante a amostragem. A sonda pode ser integrada a um dispositivo de rastreamento baseado em tecnologia de radiofrequência, como o sistema Biosense Webster Carto. Nesse caso, a sonda pode exibir o dispositivo/localização de amostragem em qualquer uma de uma variedade de modalidades de geração de imagens, como Ultrasom intra-operatório = (US)/Tomografia "Computadorizada (CT)/Geração de Imagens por Ressonância Magnética (MRI)/Tomografia de Coerência Óptica (OCT). Além disso, a geração de imagens fluorescentes e corantes moleculares podem ser usados para rastrear as áreas analisadas e mapeadas para fornecer geração de imagens espaciais bidimensionais ou tridimensionais. Mais simplesmente, a ponta da sonda pode ser revestida com um corante cirúrgico que é então estampado no tecido para rastrear a região analisada. Ainda outra abordagem de rastreamento é integrar um emissor de RF na sonda para que a localização espacial possa ser rastreada.

[00119] Em alguns aspectos, a sonda da presente invenção pode ser usada para auxiliar cirurgiões e profissionais médicos durante intervenções cirúrgicas minimamente invasivas, fornecendo informações moleculares diagnósticas abrangentes e definitivas in vivo e em tempo real, sem necessariamente causar danos ou alterações nos tecidos vivos nativos do paciente. A caneta MasSpec portátil demonstrou a capacidade de fazer isso durante procedimentos cirúrgicos não laparoscópicos/endoscópicos (Pedido de Patente US Nº 15/692.167 incorporado neste documento por referência, em sua totalidade). Da mesma forma que a caneta MasSpec portátil, a presente invenção é adequada para análise ex vivo de tecidos (frescos, congelados, cortes, biópsias) ou outras amostras clínicas que podem ser examinadas por um patologista e podem ser usadas para análise química de qualquer amostra, para o qual a análise direta é desejada em domínios confinados e espacialmente limitados (animais, plantas, explosivos, drogas, etc.). Uma variedade de tipos de tecido também pode ser analisada, incluindo, mas não se limitando a, tecidos de mama, de rim, de nódulo linfático, de tireoide, de ovário, pancreático e cerebral.

[00120] Em alguns aspectos, a sonda da presente invenção pode ser usada em conjunto com instrumentos cirúrgicos para o tratamento de uma doença. Uma variedade de instrumentos cirúrgicos pode ser usada para extirpar ou remover células ou tecidos, incluindo, mas não se limitando a, ferramentas de remoção a laser, ferramentas para cauterização ou eletrocauterização ou ferramentas para a dissecção manual de tecido, como um bisturi.

[00121] Assim, muitas regiões da cavidade do corpo humano podem ser rapidamente amostradas durante a cirurgia e analisadas (por exemplo, usando um banco de dados de assinaturas moleculares e algoritmos de aprendizado de máquina). Portanto, os resultados do diagnóstico podem ser fornecidos em tempo real para cada região amostrada. Dispositivos exemplares para uso nesses métodos são detalhados abaixo.

Il. Características Exemplares de um Dispositivo das Modalidades A. Sistemas de obturador

[00122] Em alguns aspectos, um dispositivo das modalidades compreende adicionalmente um sistema de obturador que pode obstruir o orifício e cria uma separação entre o reservatório e o tecido. Por exemplo, o sistema de obturador pode ser ativado após a gota descansar por 3 segundos e antes que a gota seja transportada para o espectrômetro de massa. Uma razão para isso é garantir que nenhum material biológico alcance o espectrômetro de massa e cause danos ao instrumento. O obturador pode ser um diafragma de íris, um fecho mecânico, portão ou tapenade. Um projeto adicional para o obturador é um mecanismo de balão, que veda o exterior do dispositivo do tecido. O balão pode ser posicionado na extremidade distal do conduíte, por exemplo, perpendicular à caneta ou sonda. Quando ativado, o balão se expande e enche o reservatório na direção do tecido. Isso realiza pelo menos 3 coisas: primeiro, levanta suavemente a ponta da caneta do tecido usando o balão inflado, garantindo que não haja danos ao tecido. Isso é para garantir que a sonda permaneça não destrutiva e biocompatível caso o tecido analisado seja determinado como 'normal'.. Em segundo lugar, ele veda a gota de solvente que está dentro do reservatório e evita o vazamento ou absorvância de lipídios após a janela de amostragem. Em terceiro lugar, ele cria uma vedação na extremidade do conduíte, o que permitirá uma transferência mais eficaz da gota para o espectrômetro de massa.

B. Sistemas de cateter

[00123] Em alguns casos, onde uma sonda é incorporada a um dispositivo laparoscópico/endoscópico, um reservatório inclui o uso de um cateter multi-lúmen, por exemplo, com portas recuadas para depositar água e gás nitrogênio. O reservatório também retém a água durante o período de extração. Um cateter multi-lúmen pode ser formado, por exemplo, usando uma extrusão multilúmen como é bem conhecido na técnica. Foi demonstrado que esses cateteres podem ser utilizados em qualquer cânula, mais comumente com diâmetros de 5 mm e 10 mm, para cirurgias laparoscópicas. Essa tecnologia é compatível com a manipulação robótica, como o sistema cirúrgico robótico Intuitive Surgical da Vinci. As sondas laparoscópicas/endoscópicas integram-se facilmente às salas de cirurgia atuais por meio de uma porta acessória ou de um braço robótico. Diâmetros menores e maiores também podem ser usados para serem acoplados a quaisquer cateteres existentes, cânulas e também guias de agulha/biópsia.

C. Sistemas de válvula

[00124] Em outros aspectos, um sistema de sonda das modalidades pode incorporar válvulas adicionais. Por exemplo, válvulas micro-solenoides podem ser localizadas em cada conduíte, por exemplo, na extremidade distal da sonda de amostragem. Eles serão controlados individualmente por um Arduino, microcontrolador ou sinal. Em alguns casos,

a operação de valor é automatizada. Em outros casos, pode ser controlado manualmente. Em alguns aspectos, as válvulas são posicionadas na parede interna do conduíte de solvente vedando os conduítes. Assim, ao usar tais valores, apenas dois ou mesmo um conduíte pode ser usado na operação de amostragem. Por exemplo, um conduiíte de distribuição de solvente e um conduíte de retorno para transferir a gota para o espectrômetro de massa. Micro-solenoides adicionais podem ser implantados para ter mais controle. Por exemplo, três ou quatro micro-solenoides podem estar nas sondas das modalidades.

D. Outras características do sistema cirúrgico

[00125] Em alguns aspectos, os dispositivos médicos requerem a passagem para áreas do corpo que são difíceis de manter o controle manual. Uma solução é usar cateteres endoscópicos, mas geralmente são menos precisos quando comparados aos dispositivos portáteis. Controle adicional pode ser obtido usando ferramentas robóticas que podem funcionar quase tão bem quanto, e às vezes melhor do que médicos equipados com um bisturi tradicional. Uma outra característica das sondas laparoscópicas/endoscópicas das modalidades é uma 'aleta' que pode ser agarrada por fórceps, ferramentas robóticas ou agarradores laparoscópicos. Isso permitirá que a sonda seja usada em uma variedade de modalidades sem sacrificar a resolução ou a sensibilidade. Em alguns aspectos, a própria aleta é uma saliência inclinada gradual a partir do exterior do conduíte se estendendo paralela ao referido conduíte. É texturizado para fornecer tração extra para o mecanismo de agarramento.

[00126] Em outros aspectos, uma sonda de rastreamento pode ser integrada a este dispositivo a fim de exibir e gravar onde a amostra de tecido foi analisada para melhor auxiliar o cirurgião na localização dos pontos de amostragem tanto no intra-operatório quanto de outra forma. Para o ultrassom intra-operatório, um emissor de ultrassom no dispositivo pode ser utilizado para exibir a sonda durante a amostragem. Alternativamente, a sonda pode ser integrada a um dispositivo de rastreamento baseado em tecnologia de radiofrequência, como o sistema Biosense Webster Carto, por exemplo. Com esta abordagem, a sonda exibe o dispositivo/local de amostragem em qualquer modalidade de geração de imagens como Ultrassom (US)/Tomografia Computadorizada (TC)/Geração de Imagens por Ressonância Magnética (MRI)/Tomografia de Coerência Ótica (OCT) intraoperatória.

[00127] Em alguns aspectos adicionais, os sítios de tecido que são avaliados por uma sonda das modalidades podem ser marcados. Por exemplo, um corante que é absorvido por células cancerosas e células normais, que marcará onde a sonda foi colocada. Em alguns aspectos, um corante químico pode ser distribuído usando um conduíte adicional no cateter ou usando um cateter multi-lúmen. Uma entrega alternativa de um corante de rastreamento é dissolvê-lo no solvente que usamos para analisar o tecido. Por exemplo, uma vantagem de usar um corante dentro do solvente é que ele se correlacionará diretamente com o local de onde a amostra de tecido foi retirada, em vez da região periférica. Claro, neste aspecto, o corante químico estaria presente no espectro de massa e teria que ser distinguido das biomoléculas em uma amostra. Em alguns aspectos, pode ser útil tornar o corante visível (por exemplo, na luz branca da sala de operação). Em outros aspectos, o corante pode ser um corante fluorescente. Em ainda um outro aspecto, a ponta da caneta pode ser revestida com um corante cirúrgico, que é então estampado no tecido para rastrear a região analisada. Da mesma forma, como discutido acima, uma abordagem de rastreamento pode ser usada para mapear virtualmente os sítios dos tecidos analisados. Por exemplo, um emissor RF pode ser integrado a uma sonda para que a localização espacial possa ser rastreada. Assim, em alguns aspectos, os corantes (ou rastreamento de sonda) podem ser usados para rastrear áreas analisadas de tecidos. Em alguns aspectos, os tecidos analisados podem ser mapeados para fornecer geração de imagens espaciais bidimensionais e tridimensionais.

[00128] Em outros aspectos, um sistema de sonda pode incluir um filtro. Por exemplo, um filtro pode impedir que o tecido biológico entre nos conduítes. Por exemplo, um sistema de malha de filtro pode ser incorporado dentro do dispositivo para evitar que corpos menores de tecido, agregados de proteínas ou aglomerados de células coaguladas entrem. Essa malha pode ser colocada na abertura e ter contato com o tecido, ou ser posicionada mais acima dentro da sonda, de forma que nenhum contato do tecido ocorra. Em alguns aspectos, tal malha de filtro compreende tamanhos de abertura médios de menos de cerca de 1,0, 0,5, 0,25 ou 0,1 mm. Uma vez que a matéria sólida pode danificar um espectrômetro de massa, tal sistema de filtro pode aumentar a vida útil do instrumento sem afetar negativamente o sinal detectado.

[00129] Em ainda outros aspectos, uma sonda endoscópica/laparoscópica das modalidades é integrada com um microcontrolador, interface de usuário e/ou hardware associado que irá operar com software apropriado.

[00130] Em alguns casos adicionais, uma luz, como um LED, será incorporada para fornecer feedback visual ao usuário, por exemplo, para indicar que a sonda está pronta para amostragem, no processo de fazê-lo, ou precisa ser substituída/reparada. O feedback acústico também pode ser usado, por exemplo, para permitir que o usuário saiba em qual etapa do processo o dispositivo está (por exemplo, uma vez que pistas físicas podem estar indisponíveis por laparoscopia). Um sistema de interface de usuário também pode ser integrado ao dispositivo, como um pedal e botões no alojamento da sonda.

Ill. Metodologias de Ensaio

[00131] Em alguns aspectos, a presente divulgação fornece métodos para determinar a presença de tecido doente (por exemplo, tecido tumoral) ou detectar uma assinatura molecular de um espécime biológico por meio da identificação de padrões específicos de um perfil de espectrometria de massa. As amostras biológicas para análise podem ser de animais, plantas ou qualquer material (vivo ou não) que esteve em contato com moléculas ou organismos biológicos. Uma amostra biológica pode ser amostras in vivo (por exemplo, durante a cirurgia) ou ex vivo.

[00132] Um perfil obtido pelos métodos das modalidades pode corresponder a, por exemplo, proteínas, metabólitos ou lipídios de espécimes biológicos analisados ou locais de tecido. Esses padrões podem ser determinados medindo a presença de íons específicos usando espectrometria de massa. Alguns exemplos não limitativos de métodos de ionização que podem ser acoplados a este dispositivo incluem ionização química, ionização a laser, ionização química por pressão atmosférica, ionização de elétrons, bombardeamento por átomos rápidos, ionização por eletropulverização, ionização térmica. Métodos adicionais de ionização incluem fontes de plasma acopladas indutivamente, fotoionização, descarga cintilante, dessorção por campo, termopulverização, dessorção/ionização em silício, análise direta em tempo real, espectroscopia de massa de íons secundários, ionização por centelha e ionização térmica.

[00133] Em particular, os presentes métodos podem ser aplicados ou acoplados a uma fonte de ionização de ambiente ou método para obter os dados espectrais de massa, como a fonte de ionização de ambiente de extração. As fontes de ionização do ambiente de extração são métodos com, neste caso, processos de extração de líquidos seguidos dinamicamente por ionização. Alguns exemplos não limitativos de fontes de ionização de ambiente de extração incluem ionização por eletropulverização com dessorção assistida por fluxo de ar (AFADESI), análise direta em tempo real (DART), ionização de dessorção por eletropulverização (DESI), ionização de dessorção por troca de carga (DICE), ionização por eletropulverização de dessorção assistida por eletrodos (EADESI), ionização por dessorção a laser por eletropulverização (ELDI), ionização por pulverização eletrostática (ESTASI), ionização por eletropulverização por dessorção a jato (JeDl), ionização por eletropulverização por dessorção assistida por laser (LADESI), ionização por eletropulverização por dessorção por laser (LDESI), ionização por eletropulverização assistida por matriz ionização por eletropulverização de dessorção a laser (MALDESI), ionização por eletropulverização por dessorção por nanopulverização (nano-DESI) ou ionização por eletropulverização por dessorção por modo de transmissão (TM-DESI).

[00134] Tal como acontece com muitos métodos de espectrometria de massa, a eficiência de ionização pode ser otimizada modificando a coleta ou as condições do solvente, como os componentes do solvente, o pH, as taxas de fluxo de gás, a voltagem aplicada e outros aspectos que afetam a ionização da solução de amostra. Em particular, os presentes métodos contemplam o uso de um solvente ou solução que seja compatível com o problema humano. Alguns exemplos não limitativos de solvente que podem ser usados como o solvente de ionização incluem água, etanol, metanol, acetonitrila, dimetilformamida, um ácido ou uma mistura dos mesmos. Em algumas modalidades, o método contempla uma mistura de acetonitrila e dimetilformamida. As quantidades de acetonitrla e dimetilformamida podem ser variadas para melhorar a extração dos analitos a partir da amostra, bem como aumentar a ionização e a volatilidade da amostra. Em algumas modalidades, a composição contém de cerca de 5:1 (v/v) dimetilformamida: acetonitrila a cerca de 1:5 (v/v) dimetilformamida: acetonitrila, tal como 1:1 (v/v) dimetilformamida: acetonitrila. No entanto, na modalidade preferida, o solvente para uso de acordo com as modalidades é um solvente farmaceuticamente aceitável, tal como água estéril ou uma solução aquosa tamponada.

4. Exemplos

[00135] Os seguintes exemplos são incluídos para demonstrar modalidades preferenciais da invenção. Deve ser apreciado por aqueles versados na técnica que as técnicas divulgadas nos exemplos que seguem representam técnicas descobertas pelo inventor para funcionar bem na prática da invenção e, assim, podem ser consideradas por constituir modos preferenciais para a sua prática. Entretanto, aqueles versados na técnica devem, à luz da presente divulgação, apreciar que muitas alterações podem ser feitas nas modalidades específicas que são divulgadas e ainda obter um resultado igual ou similar ou sem desviar do espírito e escopo da invenção.

Exemplo 1 - Sonda minimamente invasiva para projeto de espectrometria de massa

[00136] O sistema desenvolvido consiste em três partes principais: 1) uma bomba de seringa que é programada para fornecer um volume discreto de solvente usando uma taxa de fluxo controlada; 2) sistemas de tubulação integrados a válvulas de aperto bidirecionais para transporte controlado de solvente e gás; 3) uma ponta de sonda que é usada para amostragem direta de tecidos biológicos. Os sistemas de tubulação e a ponta da sonda também são integrados em um dispositivo cirúrgico minimamente invasivo, como uma cânula ou cateter para uso em cirurgias laparoscópicas ou endoscópicas. Várias iterações do sistema foram exploradas e otimizadas com o objetivo final de minimizar o dano ao tecido, maximizar a extração do analito do tecido e maximizar a transmissão do solvente para o espectrômetro de massa. FIG. 6 mostra uma figura esquemática de um exemplo de um aparelho minimamente invasivo para analisar o tecido biológico. A bomba de seringa alimenta solvente e gás na sonda minimamente invasiva por meio de uma tubulação de micro-PTFE. A sonda mantém contato com a amostra, retém solvente durante a interação com o tecido. A ponta foi fabricada com impressão 3D e é feita de polidimetilsiloxano (PDMS) biologicamente compatível. A sonda tem três portas principais: uma para o sistema de tubulação de entrada, uma porta central para entrega de gás e uma terceira para o sistema de tubulação de saída. Todas as portas vêm em junção em um pequeno reservatório onde a gota é retida e exposta à amostra de tecido por um período de tempo controlado, permitindo a extração eficiente de moléculas.

O tamanho do reservatório determina a resolução espacial do dispositivo.

Um volume de solvente de 10 uL é exposto à amostra de tecido.

FIG. 7 mostra os três tubos de conduíte.

Os três tubos utilizados são de politetrafluoretileno (PTFE), também biologicamente compatível.

O tubo da bomba de seringa é usado para fornecer solvente a partir da bomba de seringa para a ponta da sonda, enquanto o outro tubo de micro-PTFE é usado para fornecer um gás inerte (Nº ou CO>) para a ponta da sonda.

O gás tem três finalidades principais: 1) secagem do tecido antes da análise; 2) evitar lacuna de solvente devido ao vácuo do espectrômetro de massa quando o reservatório é fechado pelo contato com a amostra de tecido; 2) auxiliar no transporte de solvente do tecido para o espectrômetro de massa através da tubulação PTFE mais larga.

A tubulação PTFE maior é conectada diretamente à entrada do espectrômetro de massa de modo que a pressão positiva do sistema de vácuo do espectrômetro de massa seja usada para conduzir a gota a partir do reservatório para a entrada do espectrômetro de massa para ionização.

FIG. 14 mostra um esquema da sonda minimamente invasiva que inclui um diagrama da ponta da sonda na parte inferior esquerda da figura, incluindo os três tubos de conduíte e o reservatório na base (rotulado como 4). Em certas modalidades, o tubo de conduíte do meio pode compreender uma câmara em formato de funil (por exemplo, cônica) perto do reservatório, de modo que a extremidade maior da câmara em formato de funil seja proximal ao reservatório e a extremidade menor da câmara cônica seja distal do reservatório.

FIG. 8 mostra dois dos dispositivos possíveis para alojar a sonda minimamente invasiva.

A cânula mostrada tem a tubulação de gás e solvente entrando no topo, bem como a tubulação para o espectrômetro de massa.

A sonda é mostrada emergindo a partir do fundo da cânula.

A sonda também pode ser introduzida na cavidade corporal usando uma agulha de trocarte.

FIG. 15 descreve uma cirurgia uterina laparoscópica simulada e mostra que a sonda minimamente invasiva pode ser controlada por fórceps. Um sistema de obturador que obstrui o orifício da sonda minimamente invasiva pode ser empregado como mostrado na FIG. 9. Uma opção para o obturador é usar um balão de cateter que pode fechar a ponta da sonda, cujo diagrama é mostrado na FIG. 18, evitando que material biológico indesejado entre no dispositivo, incluindo os lúmens e a tubulação, após a inserção do cateter no paciente. O obturador pode impedir que fluidos biológicos endógenos entrem no espectrômetro de massa após o início da análise, evitando assim a contaminação dos resultados. Fechar o obturador também pode impedir que o excesso de gás nitrogênio e água entrem no corpo. O uso de um obturador nas sondas alongadas necessárias para cirurgia minimamente invasiva pode ajudar a mitigar a natureza imprevisível e muitas vezes tumultuada do movimento de órgãos internos e sistemas de órgãos durante a cirurgia, o que pode afetar a aquisição de sinal. A sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva também pode incluir um tubo de vácuo separado do vácuo de amostra acima. O objetivo deste segundo tubo de vácuo é segurar suavemente, ou travar, a ponta da sonda no tecido durante a análise.

[00137] Os eventos de tempo envolvidos na operação do dispositivo são automatizados e precisamente controlados por software que se comunica com um sistema Arduino e duas válvulas de aperto bidirecionais. Todas as válvulas de aperto são fechadas até que o processo seja iniciado quando, abaixo de 300 ulL/min, um pulso é enviado para a bomba para infundir o solvente por dois segundos e parar, gerando um enchimento de gotas de 10 ul no reservatório da sonda minimamente invasiva. Os tubos do espectrômetro de gás e massa são fechados em válvulas de aperto, permitindo que o solvente no reservatório interaja com o tecido por três segundos para extrair as moléculas. As válvulas de aperto que controlam os tubos do espectrômetro de gás e massa são abertas simultaneamente, permitindo que a gota seja transferida para o espectrômetro de massa para ionização e análise molecular. Um pulso é enviado à bomba para infundir o solvente por mais 12 segundos e parar, para conduzir completamente todas as moléculas extraídas para o espectrômetro de massa. Os tubos do espectrômetro de massa e gás são deixados abertos por mais 20 segundos para permitir que todo o solvente no tubo do espectrômetro de massa vá para o espectrômetro de massa. O tempo total de análise é de 37 segundos.

[00138] A sonda pode ser lavada entre as análises em uma variedade de métodos. Geralmente, a ponta da sonda é limpa com água esterilizada. Um design adicional que pode facilitar a etapa de lavagem é um design retrátil que irá lavar o exterior da sonda sem ter que remover o dispositivo do paciente (FIG. 20). O projeto consiste em uma câmara com válvulas localizadas nas aberturas para manter a vedação de água e gás. Um tubo mais longo que contém a ponta da sonda, água e conduítes de gás cortará apenas a válvula superior quando a ponta estiver localizada na câmara de lavagem, mas passará por ambas as válvulas quando a ponta for implantada no ambiente do paciente. Depois que a ponta da sonda, a tubulação ou ambos forem contaminados durante o processo de cirurgia, a sonda será retirada para a câmara de lavagem. Tubos de água podem ser localizados dentro da câmara de lavagem e apontados para cima, fornecendo um forte jato de solvente de limpeza. Duas posições de tubulação de vácuo serão localizadas acima da primeira e da segunda válvula para remover o solvente sujo. O tubo de vácuo colocado acima da primeira válvula é um tubo de emergência para o caso de a água romper a barreira da primeira válvula. Todo o sistema se encaixará perfeitamente dentro de um trocarte e a sonda implantável ficará localizada dentro desse sistema. Os aspiradores localizados dentro da sonda também funcionarão durante este processo de limpeza, que irá enxaguar a tubulação até estar limpa.

Exemplo 2 - Perfis Moleculares e Análise

[00139] O sistema descrito neste documento opera conectando diretamente o tubo de transferência à entrada do espectrômetro de massa para transportar os solventes contendo analitos para o espectrômetro de massa para análise molecular. Essa configuração simplifica muito os detalhes operacionais e elimina o uso de fontes de ionização. Depois que a sonda interage com o tecido, o solvente é então transportado para o espectrômetro de massa e infundido diretamente, sem a necessidade de uma fonte de ionização adicional. Uma vez que o sistema é totalmente automatizado, de modo que cada gota de solvente de 10 ul é entregue separadamente ao injetor, o espectrômetro de massa opera sem qualquer impacto em seu desempenho. Informações moleculares ricas são obtidas dessa maneira, semelhante ao que é observado em outras técnicas de ionização de ambiente de extração com solvente, como ionização de eletropulverização por dessorção. O mecanismo de ionização pode ser semelhante à ionização de entrada. Para métodos de ionização de entrada, a ionização ocorre na região de queda de pressão de entrada entre a atmosfera e o vácuo. Devido à natureza das técnicas cirúrgicas minimamente invasivas, o diâmetro e o comprimento da tubulação são de importância crítica. Uma variedade de comprimentos de tubo foi testada para a entrega de solvente ao espectrômetro de massa, como pode ser visto nas FIGS. 10-

18.

[00140] FIGS. 10-13 mostram os cromatogramas de íons totais obtidos a partir de seções do cérebro de camundongos durante o período de análise total, usando tubulações de comprimento de 1,5 a 4,5 metros. Perfis moleculares ricos foram observados em todos os casos. Em um comprimento de tubo de 4,5 metros, o perfil molecular é facilmente estabelecido em relação ao sinal de fundo da água (FIG. 16). FIG. 17 mostra cromatogramas de íons totais obtidos usando tamanhos de conduíte de 1,5 mm a 4,0 mm. Novamente, perfis moleculares ricos foram observados com cada tamanho de conduíte. Para demonstrar adicionalmente a utilidade da sonda minimamente invasiva para espectrometria de massa, o tecido pulmonar humano foi analisado (FIG. 19) e gerado um perfil molecular robusto.

[00141] Os perfis moleculares gerados pela sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva também podem ser usados para tipagem de tecidos. Uma série de amostras de tecido foram avaliadas com a sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva e puderam ser identificadas com uma precisão geral de 98,55% (Tabela 1). Tabela 1. Resultados de tipificação de tecidos VERDADEIRO Tireoide Linfa Paratirecide Mama Pulmão Ovário Pâncreas Tireoide 42 o 1 o o o o Linfa o 26 o o o o o Paratireoide o 1 62 o o o o Mama o o o 29 o o o Pulmão o o o o 47 o o Ovário o 1 o 1 o 41 o Pâncreas o o o o o o 24

[00142] O sistema foi capaz de identificar os tecidos linfáticos, mamários e pulmonares com 100% de precisão, de tireoide e paratireoide com entre 97% e 99% de precisão, ovariano com 95,35% de precisão e tecido do pâncreas com 83,33% de precisão. Esses resultados de tipagem de tecido foram gerados a partir de características selecionadas dos perfis de espectrometria de massa mostrados na Tabela 2. Tabela 2. Características selecionadas para tipagem de tecidos. [ Treo Tuna — [Paraireode Mama —[Pumão [Ovário | Pâncreas | -0,34999 raso o flocos] | Laseee Doo] ooo ag] Laa4605 oo ooo ag] Lane Do o] oa og | a4B86 Do focas | >| |aBaa6 Do floor] | oo a o ooo o] Lee o ap o ooo o o) | 20017] o] -ooooss a | | 2o546 o 0260268 Laio o oo L 23917] o] -ooaaBa [a o]

796,52 [e fee o o] [assa] o a oe o o a] [atas o fo o a e a a] [ass] o focar a re a a] [rsss] o fosse a re a a] [azar [ones | a a re a a] [asas [ogissa [o a rel rea

[00143] Semelhante à diferenciação de tipos de tecido, a sonda de espectrometria de massa minimamente invasiva pode ser usada para diferenciar entre tecidos normais e cancerosos. O sistema previu tecidos normais com mais de 89% de precisão e tecidos cancerosos com mais de 91% de precisão, conforme mostrado na Tabela 3. Tabela 3. Resultados de previsão de tecido canceroso Previsto Normal Câncer 3 S 12 129 É Câncer o >

[00144] Esses tecidos foram previstos com base nas características selecionadas mostradas na Tabela 4. Tabela 4. Características Selecionadas usadas para a predição de tecidos Cancerosos. m/z - 0,1200838 0,00000000 o 0,0 o 124,01 - 40,9603959 0,07309089 o 1910468,9 o 146,05 - 25,4909642 0,08721183 o 4249182,8 o 154,06 - 1,7548952 0,27268945 o 1028115,5 o o o 175,02 - 27,1843207 0,21139870 o 6752479,6 o

24,4596324 0,12211639 o 2175467,9 o 60,8607370 0,22046140 o 5731647,5 o o 128,8755917 0,03867785 o 773249,9 o 31,7356346 0,09055005 o 3274645,3 o o 74,5285436 0,01626196 o 3302753,8 o 2,9550154 0,05776215 o 1111366,1 o o 51,7317355 0,04524576 o 1488145,8 o 3,2679671 0,06004618 o 492594,7 o 55,5183712 0,14933261 o 2355024,1 o o 3,7134875 0,17606736 o 7786035,2 o o o 1,6023939 0,28304768 o 6590254,4 o 50,1650411 0,04368856 o 1696500,0 o o o 9,9688497 0,10964367 o 1100627,9 o 2,7064435 0,05334380 o 49840406,6 o o 20,0678254 0,09010271 o 86114572,9 o 115,9821356 0,03578691 o 2801168,1 o o o 744,55 64,7272067 0,02038387 o 905261,7 o

748,52 - 39,0756981 0,04027318 o 1870669,2 o 766,54 - 23,4133796 0,05266494 o 4504433,6 o 773,53 - 60,0910994 0,09127090 o 3784388,4 o o 788,55 - 1,4204710 0,03125159 o 4032842,0 o 822,47 - 19,2490565 0,05601076 o 738427,0 o 823,48 - 66,6013083 0,02864992 o 320932,5 o 861,55 - 135,4621348 0,05829841 o 9614626,2 o o

[00145] Para avaliar o desempenho do sistema, análises consecutivas foram conduzidas na mesma seção de tecido e em diferentes seções de tecido para demonstrar que o sistema é altamente reproduzível em amostras e em diferentes amostras.

Materiais e Métodos.

[00146] Espectrômetro de massa. Foi utilizado o espectrômetro de massa Q Exactive Hybrid Quadrupole-Orbitrap (Thermo Scientific, San Jose, CA). A varredura completa foi realizada na faixa de m/z 500-1800, e os outros parâmetros de espectrometria de massa foram listados a seguir: potência de resolução 140.000, micro varredura 2, tempo máximo de injeção de 300 ms, temperatura capilar de 350 oC e lente S RF nível 100.

[00147] Tecidos biológicos. Cérebros de camundongos de tipo selvagem foram adquiridos na Bioreclamation IVT. 62 amostras de tecido humano congeladas, incluindo mama, tireoide, nódulo linfático, ovário e rim, foram obtidas da Cooperative Human Tissue Network e do Baylor College Tissue Bank. As amostras foram armazenadas em freezer a -800C. As lâminas de tecido foram seccionadas a 16 um usando um criostato CryoStarTM NX50. Amostras de tecido congeladas foram descongeladas em temperatura ambiente antes do uso.

[00148] Análise Estatística. O IBM SPSS Statistics 22.0 (IBM Corporation, Armonk, NY, EUA) foi usado para realizar a análise de componentes principais (PCA) para revelar padrões nos dados. A análise foi realizada diretamente a partir dos dados brutos. Os 10 picos das intensidades relativas superiores na faixa m/z de 700-900 foram usados para PCA. Normalmente, os três primeiros componentes, que abrangem mais de 85% da variância total, são usados nos presentes resultados.

Exemplo 3 - Automação de Sistema para Uso Portátil e Laparoscópico

[00149] Como todos os materiais (PDMS e PTFE) e solventes (apenas água) usados no design da sonda minimamente invasiva são biologicamente compatíveis, o sistema tem um alto potencial para ser usado em cirurgias laparoscópicas e endoscópicas para análise em tempo real. Mais do que isso, devido às pequenas dimensões do dispositivo, ele pode ser integrado a um sistema cirúrgico robótico, como o sistema cirúrgico Da Vinci, por meio de uma porta acessória ou de um de seus braços robóticos. Várias regiões da cavidade do corpo humano podem ser rapidamente amostradas durante a cirurgia com ou sem etapas de lavagem/enxágue entre cada análise e analisadas usando um banco de dados de assinaturas moleculares e algoritmos de aprendizado de máquina. Portanto, os resultados do diagnóstico podem ser fornecidos em tempo real para cada região amostrada. Esse sistema pode ser amplamente usado em uma ampla variedade de intervenções oncológicas e outras intervenções cirúrgicas (como a endometriose) para as quais a caracterização e o diagnóstico dos tecidos em tempo real são necessários.

Exemplo 4 - Sistema com Aplicador Pneumático

[00150] Com referência agora às FIGS. 21-23, uma modalidade é mostrada com um aplicador pneumático que pode fornecer uma pressão de vácuo a uma superfície em contato com o dispositivo. FIG. 21 mostra uma vista lateral e vistas em seção de um dispositivo sem o aplicador pneumático para comparação. A FIG. 22 ilustra a seção e a vista final de um dispositivo com âncora pneumática ou portas de vácuo configuradas para fornecer sucção à superfície em contato com o dispositivo. As portas de vácuo estão em comunicação de fluido com canais pneumáticos e um multiplexador de canal pneumático (mostrado na vista em seção) que fornecem uma pressão de vácuo para as portas por meio de uma fonte de vácuo. Na modalidade mostrada, o multiplexador de canal pneumático é um anel circunferencial que se estende ao redor do dispositivo e em comunicação de fluido com os canais pneumáticos. Na modalidade mostrada na FIG. 22, as portas são formadas pelas extremidades dos canais que se estendem do multiplexador de anel circunferencial até a superfície na extremidade do dispositivo configurado para entrar em contato com o tecido. Em outras modalidades, as portas de vácuo podem compreender características adicionais, como mostrado e discutido abaixo.

[00151] Durante a operação, o dispositivo (por exemplo, uma caneta MasSpec) com aplicação pneumática contém portas de ancoragem que (quando em contato com uma superfície de tecido) aplicam uma pressão de vácuo para ancorar o tecido à ponta da caneta. Quando o dispositivo não está em contato com o tecido, uma pequena pressão do indicador positiva pode ser aplicada com um gás limpo (por exemplo, nitrogênio). As transições entre o vácuo e o fluxo de gás de pressão positiva podem ser iniciadas por um operador humano ou utilizando um sensor de contato de forma autônoma. Um dos objetivos da pequena pressão do indicador positiva é manter os canais de ancoragem pneumáticos abertos quando a caneta não estiver em contato com a superfície do tecido. O fluxo de gás limpo manterá os canais de âncora pneumáticos livres de fluidos ou detritos que possam entrar enquanto a caneta está em contato com uma superfície de tecido. Em certos cenários (por exemplo, uso único), o aplicador pneumático pode ser operado sem a pequena pressão de indicador positiva e utilizar apenas a porta de vácuo.

[00152] A FIG. 23 ilustra uma vista de extremidade de um dispositivo onde as portas de vácuo incluem um anel indentado adicional que se estende ao redor do perímetro do dispositivo e fornece pressão de vácuo para a superfície em contato com o dispositivo. O anel indentado está em comunicação de fluido com a extremidade dos canais que se estendem do multiplexador de anel circunferencial, de modo que uma área maior é criada para as portas de vácuo. Isso pode permitir que uma força de vácuo maior seja gerada quando o dispositivo for aplicado ao tecido.

[00153] As modalidades com aplicação de pressão de vácuo podem ser operadas de várias maneiras diferentes. Por exemplo, em um aspecto, a operação humana com um pedal pode ser usada para iniciar o vácuo. O pedal pode ser configurado para operar em um modo de dois estados, onde uma depressão parcial ativa o vácuo enquanto uma depressão total inicia uma medição de Caneta MasSpec. Em outro aspecto, a operação autônoma com um sensor de contato pode ser usada para iniciar o vácuo e/ou fornecer um pequeno fluxo de pressão positiva. Neste modo de operação, o uso de um sensor de limite detecta a pressão de contato entre o dispositivo e a superfície do tecido. Quando o sensor de pressão de contato muda de abaixo para acima do nível limite, o vácuo é ativado. Quando a pressão de contato cai de acima para abaixo da pressão limite, a pequena pressão positiva é aplicada. Sensores de pressão de contato conhecidos na técnica podem incluir interruptores instantâneos, molas, filmes PVDF, etc. Em certos aspectos, as portas pneumáticas podem ser operadas por uma pressão de vácuo apenas. Em tais exemplos, uma armadilha pode ser empregada para capturar fluidos de tecido e detritos para manter uma pressão de vácuo.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Aparelho, caracterizado pelo fato de que compreende: um cassete compreendendo uma pluralidade de sondas de aquisição de amostra; e um instrumento de processamento de amostra configurado para receber uma amostra, em que: O cassete é acoplado ao instrumento de processamento de amostra; uma primeira sonda de aquisição de amostra está em comunicação de fluido com o instrumento de processamento de amostra quando o cassete está em uma primeira orientação; uma segunda sonda de aquisição de amostra está em comunicação de fluido com o instrumento de processamento de amostra quando o cassete está em uma segunda orientação; e O cassete pode ser movido da primeira orientação para a segunda orientação enquanto o cassete é acoplado ao instrumento de processamento de amostra.

2. Aparelho, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o instrumento de processamento de amostra é um espectrômetro de massa.

3. Aparelho, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o cassete gira a partir da primeira orientação para a segunda orientação.

4. Aparelho, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o cassete se move linearmente a partir da primeira orientação para a segunda orientação.

5. Aparelho, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente uma primeira pluralidade de conduítes, em que: cada sonda de aquisição de amostra está em comunicação de fluido com um conduíte individual da primeira pluralidade de conduítes; e cada conduíte individual da primeira pluralidade de conduítes é configurado para colocar uma única sonda de aquisição de amostra em comunicação de fluido com o instrumento de processamento de amostra quando o cassete é orientado para alinhar o conduíte individual com o instrumento de processamento de amostra.

6. Aparelho, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que cada conduíte entre cada sonda de aquisição de amostra e o instrumento de processamento de amostra compreende uma válvula configurada para restringir o fluxo através do conduíte.

7. Aparelho, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente: uma primeira câmara compreendendo um solvente; e um suprimento de gás.

8. Aparelho, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o suprimento de gás é o ar ambiente e o aparelho compreende uma válvula ou conduíte que é aberto para o ar ambiente.

9. Aparelho, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o suprimento de gás fornece ar, nitrogênio ou dióxido de carbono para a sonda.

10. Aparelho, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o suprimento de gás é um suprimento de gás pressurizado.

11. Aparelho, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o suprimento de gás pressurizado fornece um gás para a sonda a uma pressão entre 0,1 psig e 5,0 psig.

12. Aparelho, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o suprimento de gás pressurizado fornece um gás para a sonda a uma pressão entre 0,5 psig e 2,5 psig.

13. Aparelho, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o suprimento de gás pressurizado fornece um gás para a sonda a uma pressão inferior a 100 psig.

14. Aparelho, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o solvente compreende água.

15. Aparelho, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o solvente compreende água estéril.

16. Aparelho, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o solvente compreende etanol.

17. Aparelho, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o solvente compreende uma mistura aquosa incluindo de 1 a 25% de etanol.

18. Aparelho, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente: uma segunda pluralidade de conduítes em comunicação de fluido com a primeira câmara e a pluralidade de sondas de aquisição de amostra; e uma terceira pluralidade de conduítes em comunicação de fluido com o suprimento de gás e a pluralidade de sondas de aquisição de amostra.

19. Aparelho, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que cada sonda de aquisição de amostra na pluralidade de sondas de aquisição de amostra compreende um reservatório, um primeiro conduiíte, um segundo conduíte e um terceiro conduíte, em que: o primeiro conduíte está em comunicação de fluido com a primeira câmara; o segundo conduíte está em comunicação de fluido com o suprimento de gás; e o terceiro conduíte está em comunicação de fluido com o instrumento de processamento de amostra.

20. Aparelho, de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que cada sonda de aquisição de amostra na pluralidade de sondas de aquisição de amostra compreende uma câmara em forma de funil em comunicação de fluido com o reservatório, o primeiro conduíte, o segundo conduiíte e o terceiro conduíte.

21. Aparelho, de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que: a câmara em forma de funil compreende uma extremidade maior e uma extremidade menor; e a extremidade maior da câmara em forma de funil é proximal ao reservatório.

22. Aparelho, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente: uma segunda câmara que compreende um fluido de limpeza; e um conduíte em comunicação de fluido com a segunda câmara e a pluralidade de sondas de aquisição de amostra.

23. Aparelho, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a sonda de aquisição de amostra é, ou está compreendida na cânula de um instrumento cirúrgico.

24. Aparelho, de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de que o instrumento cirúrgico é um laparoscópio.

25. Aparelho, de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de que o instrumento cirúrgico é uma agulha de trocarte.

26. Aparelho, de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de que o instrumento cirúrgico é um guia de biópsia.

27. Aparelho, de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de que o instrumento cirúrgico é um cateter de múltiplos lúmenes.

28. Aparelho, de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de que o instrumento cirúrgico é operado manualmente.

29. Aparelho, de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de que o instrumento cirúrgico é robótico.

30. Aparelho, de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de que o instrumento cirúrgico compreende uma sonda de rastreamento que pode ser detectada por geração de imagens.

31. Aparelho, de acordo com a reivindicação 30, caracterizado pelo fato de que a geração de imagens compreende a geração de imagens visuais, fluorescentes, US, CT, MRI ou OCT.

32. Aparelho, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada sonda de aquisição de amostra da pluralidade de sondas de aquisição de amostra compreende uma extremidade distal da sonda e a extremidade distal da sonda compreende um obturador que pode ser fechado para evitar a comunicação de fluido fora da sonda de aquisição de amostra.

33. Aparelho, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o obturador é um balão que pode ser inflado para evitar a comunicação de fluido fora da sonda.

34. Aparelho, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o balão pode ser inflado com um gás ou um líquido.

35. Aparelho, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o obturador é uma porta que pode ser fechada para evitar a comunicação de fluido fora da sonda.

36. Aparelho, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o obturador é configurado de modo que possa ser aberto e fechado várias vezes.

37. Aparelho, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o obturador é controlado manualmente.

38. Aparelho, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o obturador é controlado roboticamente.

39. Aparelho, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o instrumento de processamento de amostra está em comunicação eletrônica com um computador que pode fornecer análise de amostra.

40. Aparelho, de acordo com a reivindicação 39, caracterizado pelo fato de que o computador fornece uma leitura visual ou auditiva da análise da amostra.

41. Aparelho, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada sonda de aquisição de amostra da pluralidade de sondas de aquisição de amostra compreende um dispositivo de rastreamento ou corante para rastrear uma localização da sonda.

42. Aparelho, caracterizado pelo fato de que compreende: um cassete que compreende uma pluralidade de dispositivos médicos; e um instrumento de processamento acoplado ao cassete, em que: os dispositivos médicos são configurados para entrar em contato com tecido; o instrumento de processamento é configurado para receber amostras líquidas a partir do cassete; um primeiro dispositivo médico da pluralidade de dispositivos médicos está em comunicação de fluido com o instrumento de processamento quando O cassete está em uma primeira orientação; um segundo dispositivo médico está em comunicação de fluido com o instrumento de processamento quando o cassete está em uma segunda orientação; e O cassete pode ser movido a partir da primeira orientação para a segunda orientação enquanto o cassete é acoplado ao instrumento de processamento.

43. Aparelho, de acordo com a reivindicação 42, caracterizado pelo fato de que a pluralidade de dispositivos médicos compreende uma pluralidade de sondas de aquisição de amostra.

44. Aparelho, de acordo com a reivindicação 42, caracterizado pelo fato de que o instrumento de processamento é um espectrômetro de massa.

45. Aparelho, de acordo com a reivindicação 42, caracterizado pelo fato de que o cassete gira a partir da primeira orientação para a segunda orientação.

46. Aparelho, de acordo com a reivindicação 42, caracterizado pelo fato de que o cassete se move linearmente a partir da primeira orientação para a segunda orientação.

47. Aparelho, de acordo com a reivindicação 42, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente uma primeira pluralidade de conduítes, em que: cada dispositivo médico está em comunicação de fluido com um conduiíte individual da primeira pluralidade de conduítes; e cada conduíte individual da primeira pluralidade de conduítes é configurado para colocar um único dispositivo médico em comunicação de fluido com o instrumento de processamento quando o cassete é orientado para alinhar o conduíte individual com o instrumento de processamento.

48. Aparelho, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que cada conduíte entre cada dispositivo médico e o instrumento de processamento compreende uma válvula configurada para restringir o fluxo através do conduiíte.

49. Aparelho, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente: uma primeira câmara que compreende um solvente; e um suprimento de gás.

50. Aparelho, de acordo com a reivindicação 49, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente: uma segunda pluralidade de conduítes em comunicação de fluido com a primeira câmara e a pluralidade de dispositivos médicos; e uma terceira pluralidade de conduítes em comunicação de fluido com o suprimento de gás e a pluralidade de dispositivos médicos.

51. Aparelho, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente: uma segunda câmara que compreende um fluido de limpeza; e um conduíte em comunicação de fluido com a segunda câmara e a pluralidade de dispositivos médicos.

52. Método para trocar instrumentos médicos durante um procedimento “médico, o método caracterizado pelo fato de que compreende: adquirir uma primeira sonda de aquisição de amostra a partir de um cassete que compreende uma pluralidade de sondas de aquisição de amostra, em que a primeira sonda de aquisição de amostra é adquirida a partir do cassete quando o cassete está em uma primeira orientação; obter uma primeira amostra líquida com a primeira sonda de aquisição de amostra; alterar a orientação do cassete que compreende a pluralidade de sondas de aquisição de amostra a partir de uma primeira orientação para uma segunda orientação; adquirir uma segunda sonda de aquisição de amostra a partir do cassete que compreende uma pluralidade de sondas de aquisição de amostra, em que a segunda sonda de aquisição de amostra é adquirida a partir do cassete quando o cassete está em uma segunda orientação; e obter uma segunda amostra líquida com a segunda sonda de aquisição de amostra.

53. Método, de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente preparar a sonda de aquisição de amostra com solvente antes de obter a primeira amostra de tecido.

54. Método, de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pelo fato de que mudar a orientação do cassete que compreende a pluralidade de sondas de aquisição de amostra a partir de uma primeira orientação para uma segunda orientação compreende girar o cassete.

55. Método, de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pelo fato de que alterar a orientação do cassete que compreende a pluralidade de sondas de aquisição de amostra a partir de uma primeira orientação para uma segunda orientação compreende a translação linear do cassete.

56. Método, de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pelo fato de que a obtenção da primeira amostra líquida com a primeira sonda de aquisição de amostra compreende: aplicar um primeiro volume fixo de um solvente a um primeiro sítio de tecido através da cânula de um instrumento cirúrgico; e coletar o solvente aplicado para obter a primeira amostra líquida.

57. Método, de acordo com a reivindicação 56, caracterizado pelo fato de que a obtenção da segunda amostra líquida com a segunda sonda de aquisição de amostra compreende: aplicar um segundo volume do solvente a um segundo sítio de tecido através da cânula do instrumento cirúrgico; e coletar o solvente aplicado para obter a segunda amostra líquida.

58. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o primeiro volume de solvente e o segundo volume de solvente não são aplicados como uma pulverização.

59. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o primeiro volume de solvente é aplicado como uma primeira gota e em que o segundo volume de solvente é aplicado como uma segunda gota.

60. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o instrumento cirúrgico é um laparoscópio.

61. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o instrumento cirúrgico é uma agulha de trocarte.

62. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o instrumento cirúrgico é um guia de biópsia.

63. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o instrumento cirúrgico é operado manualmente.

64. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o instrumento cirúrgico é robótico.

65. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a aplicação de um corante ao primeiro sítio do tecido e ao segundo sítio do tecido.

66. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente geração de imagens do primeiro sítio de tecido e do segundo sítio de tecido.

67. Método, de acordo com a reivindicação 66, caracterizado pelo fato de que a geração de imagens compreende geração de imagens visuais, fluorescentes, US, CT, MRI ou OCT.

68. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o primeiro volume de solvente e o segundo volume de solvente são aplicados usando uma pressão inferior a 100 psig.

69. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o volume fixo ou discreto de um solvente é aplicado usando uma pressão inferior a 10 psig.

70. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o volume fixo ou discreto de um solvente é aplicado usando uma bomba mecânica para mover o solvente através de um conduíte de solvente.

71. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que coletar o solvente aplicado compreende aplicar uma pressão negativa para puxar a amostra para um conduíte de coleta e/ou aplicar uma pressão de gás para empurrar a amostra para um conduíte de coleta.

72. Método, de acordo com a reivindicação 71, caracterizado pelo fato de que o solvente é aplicado através de um conduíte de solvente que é separado do conduíte de coleta.

73. Método, de acordo com a reivindicação 72, caracterizado pelo fato de que a pressão de gás é aplicada através de um conduíte de gás que é separado do conduíte de solvente e do conduíte de coleta.

74. Método, de acordo com a reivindicação 71, caracterizado pelo fato de que a aplicação de uma pressão de gás para empurrar a amostra para o conduíte de coleta compreende a aplicação de uma pressão inferior a 100 psig.

75. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o método não produz danos físicos detectáveis ao tecido.

76. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o método não envolve a aplicação de energia ultrassônica ou vibracional ao tecido.

77. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o solvente é estéril.

78. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o solvente é uma formulação farmaceuticamente aceitável.

79. Método, de acordo com a reivindicação 78, caracterizado pelo fato de que o solvente é uma solução aquosa.

80. Método, de acordo com a reivindicação 79, caracterizado pelo fato de que o solvente é água estéril.

81. Método, de acordo com a reivindicação 79, caracterizado pelo fato de que o solvente consiste essencialmente em água.

82. Método, de acordo com a reivindicação 79, caracterizado pelo fato de que o solvente compreende de cerca de 1 a 20% de um álcool.

83. Método, de acordo com a reivindicação 82, caracterizado pelo fato de que o álcool compreende etanol.

84. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o primeiro volume de solvente está entre cerca de 0,1 e 100 uL e em que o segundo volume de solvente está entre cerca de 0,1 e 100 JL.

85. Método, de acordo com a reivindicação 84, caracterizado pelo fato de que o primeiro volume de solvente está entre cerca de 1 e 50 ul e em que o segundo volume de solvente está entre cerca de 1 e 50 uL.

86. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que a coleta do solvente aplicado é entre 0,1 e 30 segundos após a etapa de aplicação.

87. Método, de acordo com a reivindicação 86, caracterizado pelo fato de que a coleta do solvente aplicado ocorre entre 1 e 10 segundos após a etapa de aplicação.

88. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que o primeiro sítio do tecido é um sítio de tecido interno que está sendo avaliado cirurgicamente e em que o segundo sítio de tecido é um sítio de tecido interno que está sendo avaliado cirurgicamente.

89. Método, de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pelo fato de que a primeira amostra líquida e a segunda amostra líquida são coletadas com uma sonda.

90. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente coletar uma pluralidade de amostras líquidas a partir de uma pluralidade de sítios de tecido.

91. Método, de acordo com a reivindicação 90, caracterizado pelo fato de que a pluralidade de sítios de tecido compreende 2, 3, 4, 5, 6,7, 8, 9 ou sítios de tecidos.

92. Método, de acordo com a reivindicação 91, caracterizado pelo fato de que a pluralidade de sítios de tecido circunda uma seção de tecido que foi ressecada cirurgicamente.

93. Método, de acordo com a reivindicação 92, caracterizado pelo fato de que o tecido ressecado é um tumor.

94. Método, de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que é definido adicionalmente como um método intra-operatório ou pós- operatório.

95. Método, de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente submeter a primeira amostra líquida e a segunda amostra líquida à análise de espectrometria de massa.

96. Método, de acordo com a reivindicação 95, caracterizado pelo fato de que a espectrometria de massa compreende espectrometria de massa de ionização ambiente.

97. Método, de acordo com a reivindicação 95, caracterizado pelo fato de que a primeira amostra líquida e a segunda amostra líquida para análise de espectrometria de massa compreendem a determinação de um primeiro perfil correspondente ao primeiro sítio de tecido e um segundo perfil correspondente ao segundo sítio de tecido.

98. Método, de acordo com a reivindicação 97, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a comparação do primeiro perfil e do segundo a um perfil de referência para identificar sítios de tecido que incluem tecido doente.

99. Método, de acordo com a reivindicação 98, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a ressecção de sítios de tecido que são identificados como incluindo tecido doente.

100. Método, de acordo com a reivindicação 99, caracterizado pelo fato de que a ressecção de sítios de tecido compreende remoção a laser.

101. Método, de acordo com a reivindicação 98, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a comparação do primeiro perfil e do segundo a um perfil de referência para determinar tipos de tecido no primeiro sítio de tecido e no segundo sítio de tecido.

102. Método, de acordo com a reivindicação 101, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente a ressecção de tecidos de um tipo identificado.

103. Método, de acordo com a reivindicação 102, caracterizado pelo fato de que o tipo de tecido identificado é um tecido canceroso.

104. Método, de acordo com a reivindicação 102, caracterizado pelo fato de que o tipo de tecido identificado é um tipo de tecido de órgão não Ccanceroso.

105. Método, de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pelo fato de que o método é realizado usando um aparelho conforme qualquer uma das reivindicações de 1 a 51.

106. Aparelho para a produção de amostras para análise de espectrometria de massa, o aparelho caracterizado pelo fato de que compreende: uma câmara que compreende um solvente; um suprimento de gás; um espectrômetro de massa; e uma sonda que compreende um reservatório, um primeiro conduiíte, um segundo conduíte, um terceiro conduíte e uma porta de vácuo, em que: o primeiro conduíte está em comunicação de fluido com a câmara; o segundo conduíte está em comunicação de fluido com o suprimento de gás; e o terceiro conduíte está em comunicação de fluido com o espectrômetro de massa.

107. Aparelho, de acordo com a reivindicação 106, caracterizado pelo fato de que a porta de vácuo é configurada como um anel indentado que se estende em torno de um perímetro da sonda.

108. Aparelho, de acordo com a reivindicação 106, caracterizado pelo fato de que a porta de vácuo é configurada como uma extremidade de um canal que se estende até uma superfície da sonda configurada para entrar em contato com tecido.

109. Aparelho, de acordo com a reivindicação 106, caracterizado pelo fato de que a porta de vácuo é uma dentre uma pluralidade de portas de vácuo.

110. Aparelho, de acordo com a reivindicação 109, caracterizado pelo fato de que a pluralidade de portas de vácuo está em comunicação de fluido com um multiplexador de canal pneumático.

111. Aparelho, de acordo com a reivindicação 110, caracterizado pelo fato de que a pluralidade de portas de vácuo está em comunicação de fluido com o multiplexador de canal pneumático por meio de uma pluralidade de canais pneumáticos.

112. Aparelho, de acordo com a reivindicação 110, caracterizado pelo fato de que o multiplexador de canal pneumático é um anel circunferencial que se estende em torno do dispositivo.

113. Aparelho, de acordo com a reivindicação 106, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente uma fonte de vácuo em comunicação de fluido com a porta de vácuo.

114. Aparelho, de acordo com a reivindicação 106, caracterizado pelo fato de que o suprimento de gás é um suprimento de gás pressurizado.

115. Aparelho, caracterizado pelo fato de que compreende: uma pluralidade de sondas de aquisição de amostra acopladas a uma pluralidade de conduítes, em que a pluralidade de conduítes compreende conduítes de suprimento de solvente e conduítes de aquisição de amostra; uma ou mais câmaras contendo solvente; uma pluralidade de válvulas configuradas para controlar o fluxo do solvente através dos conduítes de suprimento de solvente; e um instrumento de processamento de amostra configurado para receber uma amostra, em que: cada um da pluralidade de sondas de aquisição de amostra e conduítes de suprimento de solvente pode ser acoplado individualmente a uma ou mais câmaras contendo solvente; e cada um da pluralidade de sondas de aquisição de amostra e conduítes de aquisição de amostra pode ser acoplado individualmente ao instrumento de processamento de amostra.

116. Aparelho, de acordo com a reivindicação 115, caracterizado pelo fato de que: o instrumento de processamento de amostra é um espectrômetro de massa com uma porta de entrada; o aparelho compreende uma bomba em comunicação de fluido com uma ou mais câmaras contendo solvente;

cada conduíte de suprimento de solvente é configurado para ser acoplado à bomba por meio de um mecanismo de trava Luer; e/ou cada conduíte de aquisição de amostra é configurado para ser acoplado diretamente à entrada do espectrômetro de massa por meio de um mecanismo de trava Luer.

117. Aparelho, de acordo com a reivindicação 115, caracterizado pelo fato de que cada um da pluralidade de conduítes de aquisição de amostra pode ser acoplado individualmente ao instrumento de processamento de amostra por meio de um mecanismo de liberação rápida.

118. Aparelho, de acordo com a reivindicação 115, caracterizado pelo fato de que o mecanismo de liberação rápida é uma trava Luer ou um acoplamento de encaixe por fricção.

119. Aparelho, de acordo com a reivindicação 117, caracterizado pelo fato de que cada um da pluralidade de conduítes de suprimento de solvente pode ser acoplado individualmente ao suprimento de solvente por um mecanismo de liberação rápida.

120. Aparelho, de acordo com a reivindicação 119, caracterizado pelo fato de que o mecanismo de liberação rápida é uma trava Luer ou um acoplamento de encaixe por fricção.

121. Aparelho, de acordo com a reivindicação 115, caracterizado pelo fato de que cada um da pluralidade de sondas de aquisição de amostra e conduítes de aquisição de amostra pode ser acoplado individualmente ao instrumento de processamento de amostra por meio de um mecanismo de liberação rápida.

122. Aparelho, de acordo com a reivindicação 115, caracterizado pelo fato de que cada um da pluralidade de sondas de aquisição de amostra e conduítes de aquisição de amostra pode ser acoplado individualmente ao instrumento de processamento de amostra por meio de um acoplamento de encaixe por fricção.

123. Aparelho, de acordo com a reivindicação 115, caracterizado pelo fato de que cada um da pluralidade de sondas de aquisição de amostra e conduítes de aquisição de amostra pode ser acoplado individualmente ao instrumento de processamento de amostra por meio de um encaixe de trava Luer.

124. Método para obter uma pluralidade de amostras, o método caracterizado pelo fato de que compreende: obter um aparelho conforme a reivindicação 115; acoplar um primeiro conduíte de suprimento de solvente a uma primeira sonda de aquisição de amostra e a uma ou mais câmaras contendo solvente; acoplar um primeiro conduíte de aquisição de amostra em comunicação de fluido com a primeira sonda de aquisição de amostra ao instrumento de processamento de amostra; obter uma primeira amostra com a primeira sonda de aquisição de amostra; desacoplar a primeira aquisição de amostra do instrumento de processamento de amostra; analisar a primeira amostra com o equipamento de processamento de amostra; acoplar um segundo conduíte de suprimento de solvente em comunicação de fluido com uma segunda sonda de aquisição de amostra às uma ou mais câmaras contendo solvente; acoplar um segundo conduíte de aquisição de amostra em comunicação de fluido com a segunda sonda de aquisição de amostra ao instrumento de processamento de amostra; obter uma segunda amostra com a segunda sonda de aquisição de amostra; e analisar a segunda amostra com o equipamento de processamento de amostra.

125. Método, de acordo com a reivindicação 124, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente preparar a primeira sonda de aquisição de amostra com solvente antes de obter a primeira amostra.

126. Método, de acordo com a reivindicação 124, caracterizado pelo fato de que o acoplamento do segundo conduíte de aquisição de amostra ao instrumento de processamento de amostra é realizado enquanto o instrumento de processamento de amostra está analisando a primeira amostra.

127. Método, de acordo com a reivindicação 124, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente: desacoplar a segunda aquisição de amostra do instrumento de processamento de amostra; acoplar um terceiro conduíte de suprimento de solvente em comunicação de fluido com uma terceira sonda de aquisição de amostra para uma ou mais câmaras contendo solvente; acoplar um terceiro conduíte de aquisição de amostra em comunicação de fluido com a terceira sonda de aquisição de amostra ao instrumento de processamento de amostra; obter uma terceira amostra com a terceira sonda de aquisição de amostra; e analisar a terceira amostra com o equipamento de processamento de amostra.

128. Método, de acordo com a reivindicação 124, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente: desacoplar a segunda aquisição de amostra do instrumento de processamento de amostra; acoplar o primeiro conduíte de suprimento de solvente em comunicação de fluido com a primeira sonda de aquisição de amostra a uma ou mais câmaras contendo solvente;

acoplar o primeiro conduíte de aquisição de amostra em comunicação de fluido com a primeira sonda de aquisição de amostra ao instrumento de processamento de amostra; obter uma terceira amostra com a primeira sonda de aquisição de amostra; e analisar a terceira amostra com o equipamento de processamento de amostra.

129. Método, de acordo com a reivindicação 124, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente: desacoplar a segunda aquisição de amostra do instrumento de processamento de amostra; acoplar um terceiro conduíte de suprimento de solvente em comunicação de fluido com a primeira sonda de aquisição de amostra às uma ou mais câmaras contendo solvente; acoplar um terceiro conduíte de aquisição de amostra em comunicação de fluido com a primeira sonda de aquisição de amostra ao instrumento de processamento de amostra; obter uma terceira amostra com a primeira sonda de aquisição de amostra; e analisar a terceira amostra com o equipamento de processamento de amostra.

130. Método para limpar um instrumento médico durante um procedimento “médico, o método caracterizado pelo fato de que compreende: obter uma primeira amostra líquida com uma primeira sonda de aquisição de amostra quando a primeira sonda de aquisição de amostra está em uma primeira localização; mover a primeira sonda de aquisição de amostra para uma segunda localização;

limpar a primeira sonda de aquisição de amostra quando a primeira sonda de aquisição de amostra está na segunda localização; mover a primeira sonda de aquisição de amostra para a primeira localização; e obter uma segunda amostra líquida com a primeira sonda de aquisição de amostra quando a primeira sonda de aquisição de amostra está na primeira localização.

131. Método, de acordo com a reivindicação 130, caracterizado pelo fato de que: a primeira sonda de aquisição de amostra está localizada em um cassete; e mover a primeira sonda de aquisição de amostra para a segunda localização compreende girar o cassete.

132. Método, de acordo com a reivindicação 130, caracterizado pelo fato de que lavar a primeira sonda de aquisição de amostra compreende direcionar um fluido de limpeza a partir de uma câmara para a primeira sonda de aquisição de amostra por meio de um conduiíte.

133. Método, de acordo com a reivindicação 130, caracterizado pelo fato de que a obtenção da primeira amostra líquida com a primeira sonda de aquisição de amostra compreende: aplicar um primeiro volume fixo de um solvente a um primeiro sítio de tecido através da cânula de um instrumento cirúrgico; e coletar o solvente aplicado para obter a primeira amostra líquida.

134. Método, de acordo com a reivindicação 133, caracterizado pelo fato de que a obtenção da segunda amostra líquida com a primeira sonda de aquisição de amostra compreende: aplicar um segundo volume fixo do solvente a um segundo sítio de tecido através da cânula do instrumento cirúrgico; e coletar o solvente aplicado para obter a primeira amostra líquida.

135. Método, de acordo com a reivindicação 130, caracterizado pelo fato de que o instrumento médico é um aparelho conforme qualquer uma das reivindicações de 1 a 51.