BR112021014472A2

BR112021014472A2 - Dosagem e administração de anticorpos anti-c5 para tratamento da síndrome urêmica hemolítica atípica (ahus)

Info

Publication number: BR112021014472A2
Application number: BR112021014472-2A
Authority: BR
Inventors: Lori PAYTON; Christian MIx; Rajendra Pradhan; Andrew Damokosh; Eugene Scott SWENSON; Xiang Gao
Original assignee: Alexion Pharmaceuticals, Inc.
Priority date: 2019-01-25
Filing date: 2020-01-24
Publication date: 2021-09-21
Also published as: EP3914617B1; WO2020154626A1; EP3914617A1; KR20210119420A; CA3127797A1; CN117838856A; MX2021008919A; JP2022518507A; CN113614105A; AU2020213121A1; US20220235121A1

Abstract

dosagem e administração de anticorpos anti-c5 para tratamento da síndrome urêmica hemolítica atípica (ahus). são fornecidos métodos para o tratamento clínico da síndrome hemolítica urêmica atípica (ahus) usando um anticorpo anti-c5 ou fragmento de ligação ao antígeno deste.

Description

“DOSAGEM E ADMINISTRAÇÃO DE ANTICORPOS ANTI-C5 PARA TRATAMENTO DA SÍNDROME HEMOLÍTICA URÊMICA ATÍPICA (AHUS)”

FUNDAMENTO DA INVENÇÃO

[001] O sistema complemento atua em conjunto com outros sistemas imunológicos do corpo para se defender contra a intrusão de patógenos celulares e virais. Existem pelo menos 25 proteínas do complemento, que são encontradas como uma complexa coleção de proteínas plasmáticas e cofatores de membrana. As proteínas plasmáticas constituem cerca de 10% das globulinas no soro dos vertebrados. Os componentes do complemento alcançam suas funções de defesa imunológica ao interagir em uma série de eventos de clivagem enzimática e de ligação à membrana intrincados, mas precisos. A cascata do complemento resultante leva à produção de produtos com funções opsônicas, imunorreguladoras e líticas. Um resumo conciso das atividades biológicas associadas à ativação do complemento é fornecido, por exemplo, no The Merck Manual, 16ª Edição.

[002] Embora um sistema complemento funcionando adequadamente forneça uma defesa robusta contra micróbios infectantes, a regulação ou ativação inadequada das vias do complemento tem sido implicada na patogênese de uma variedade de distúrbios, incluindo a síndrome hemolítica urêmica atípica (aHUS). A aHUS é um distúrbio ultra-raro causado pela ativação descontrolada crônica do complemento. A inflamação e o dano celular resultantes levam às manifestações clínicas devastadoras dessas doenças.

[003] A síndrome hemolítico-urêmica (HUS) é caracterizada por trombocitopenia, anemia hemolítica microangiopática e insuficiência renal aguda. A HUS é classificada como sendo de um dos dois tipos: associada a diarreia (D+ HUS; também conhecido HUS de E. coli produtora de toxina shiga (STEC) ou HUS típica) e HUS não diarreica ou atípica (aHUS). D+ HUS é a forma mais comum, responsável por mais de 90% dos casos e é causada por uma doença anterior com uma bactéria produtora de toxina semelhante à shiga, por exemplo, E. coli O157:H7.

[004] A aHUS pode ser genética, adquirida ou idiopática. As formas hereditárias de aHUS podem ser associadas a mutações em uma série de componentes do complemento humano, incluindo, por exemplo, fator de complemento H (CFH), proteína cofator de membrana (MCP), fator de complemento I (CFI), proteína de ligação de C4b (C4BP), fator de complemento B (CFB) e componente do complemento 3 (C3). Ver, por exemplo, Caprioli et al. (2006) Blood 108:1267-1279. Certas mutações no gene que codifica o CD55, embora ainda não implicadas na aHUS, estão associadas à gravidade da aHUS. Ver, por exemplo, Esparza-Gordillo et al. (2005) Hum Mol Genet 14:703-712.

[005] A aHUS é rara e tem uma taxa de mortalidade de até 25%. Muitos pacientes com esta doença apresentam insuficiência renal ou neurológica permanente, por exemplo, pelo menos 50% dos pacientes com aHUS progridem para insuficiência renal em estágio terminal (ESRF). Ver, por exemplo, Kavanagh et al. (2006) British Medical Bulletin 77 e 78:5-22. Até recentemente, as opções de tratamento para pacientes com aHUS eram limitadas e frequentemente envolviam infusão de plasma ou troca de plasma. Em alguns casos, os pacientes com aHUS são submetidos a nefrectomia uni ou bilateral ou transplante renal (ver Artz et al. (2003) Transplantation 76:821-826). No entanto, a recorrência da doença em pacientes tratados é comum.

[006] Pacientes com aHUS correm risco de morbidade substancial e mortalidade. Consequentemente, é um objetivo da presente invenção fornecer métodos melhorados para o tratamento de pacientes com aHUS.

SUMÁRIO

[007] São fornecidas neste documento composições e métodos para o tratamento de aHUS em um paciente humano (por exemplo, um paciente adulto que tem 18 anos ou mais), compreendendo a administração ao paciente de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, em que o anticorpo anti-C5, ou seu fragmento de ligação ao antígeno, é administrado (ou é para administração) de acordo com um regime de dosagem clínica particular (isto é, em uma quantidade de dose particular e de acordo com um cronograma de dosagem específico).

[008] Qualquer anticorpo anti-C5 adequado, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, pode ser usado nos métodos descritos neste documento. Um exemplo de anticorpo anti-C5 é ravulizumabe (também conhecido como ULTOMIRIS®, ALXN1210 e anticorpo BNJ441) que compreende as cadeias pesadas e leves com as sequências mostradas nas SEQ ID NOs: 14 e 11, respectivamente, ou fragmentos de ligação ao antígeno e variantes dos mesmos. Em outras modalidades, o anticorpo compreende as regiões determinantes de complementaridade da cadeia pesada e leve (CDRs) ou regiões variáveis (VRs) de ravulizumabe. Por conseguinte, em uma modalidade, o anticorpo compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável da cadeia pesada (VH) de ravulizumabe tendo a sequência mostrada em SEQ ID NO: 12 e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia leve (VL) de ravulizumabe tendo a sequência mostrada em SEQ ID NO: 8. Em outra modalidade, o anticorpo compreende sequências de cadeia pesada de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme estabelecido nas SEQ ID NOs: 19, 18 e 3, respectivamente, e sequências de cadeia leve de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme estabelecido nas SEQ ID NOs: 4, 5 e 6, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo compreende regiões VH e VL possuindo as sequências de aminoácidos indicadas nas SEQ ID NO: 12 e SEQ ID NO: 8, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo compreende uma região constante da cadeia pesada conforme estabelecido em SEQ ID NO: 13.

[009] Em outra modalidade, o anticorpo compreende uma região constante Fc humana variante que se liga ao receptor Fc neonatal humano (FcRn), em que a região constante Fc CH3 humana variante compreende substituições de Met-429-Leu e Asn- 435-Ser em resíduos correspondentes a metionina 428 e asparagina 434 de uma região constante Fc de IgG humana nativa, cada uma na numeração EU.

[010] Em outra modalidade, o anticorpo compreende sequências de cadeia pesada de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme estabelecido nas SEQ ID NOs: 19, 18 e 3, respectivamente, e sequências de cadeia leve de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme estabelecido nas SEQ ID NOs: 4, 5 e 6, respectivamente, e uma região constante Fc humana variante que se liga ao receptor Fc neonatal humano (FcRn), em que a região constante Fc CH3 humana variante compreende substituições Met-429-Leu e Asn- 435-Ser nos resíduos correspondentes a metionina 428 e asparagina 434 de uma região constante Fc de IgG humana nativa, cada uma na numeração EU.

[011] Em outra modalidade, o anticorpo se liga a C5 humano a pH 7,4 e 25°C com uma constante de dissociação de afinidade (KD) que está na faixa de 0,1 nM a 1 nM. Em outra modalidade, o anticorpo se liga a C5 humano a pH 6,0 e 25°C com um KD ≥ 10 nM. Em ainda outra modalidade, o [(KD do anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo para C5 humano a pH 6,0 e a 25°C)/(KD do anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo para C5 humano a pH 7,4 e 25°C)] do anticorpo é maior que 25.

[012] Outro exemplo de anticorpo anti-C5 é o anticorpo 7086 descrito nas Patentes Nº U.S. 8.241.628 e 8.883.158. Em uma modalidade, o anticorpo compreende os CDRs da cadeia pesada e leve ou regiões variáveis do anticorpo 7086 (ver Patentes Nº U.S. 8.241.628 e 8.883.158). Em outra modalidade, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada com as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 21, 22 e 23, respectivamente, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 24, 25 e 26, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreende a região VH do anticorpo 7086 com a sequência indicada em SEQ ID NO: 27 e a região VL do anticorpo 7086 com a sequência indicada em SEQ ID NO:

28.

[013] Outro exemplo de anticorpo anti-C5 é o anticorpo 8110 descrito nas Patentes U.S. Nº 8.241.628 e 8.883.158. Em uma modalidade, o anticorpo compreende as CDRs da cadeia pesada e leve ou regiões variáveis do anticorpo 8110. Em outra modalidade, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada com as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 29, 30 e 31, respectivamente, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 32, 33 e 34, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo compreende a região VH do anticorpo 8110 com a sequência indicada em SEQ ID NO: 35 e a região VL do anticorpo 8110 com a sequência indicada em SEQ ID NO: 36.

[014] Outro exemplo de anticorpo anti-C5 é o anticorpo 305LO5 descrito em US2016/0176954A1. Em uma modalidade, o anticorpo compreende as CDRs da cadeia pesada e leve ou regiões variáveis do anticorpo 305LO5. Em outra modalidade, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada com as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 37, 38 e 39, respectivamente, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 40, 41 e 42, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo compreende a região VH do anticorpo 305LO5 com a sequência indicada em SEQ ID NO: 43 e a região VL do anticorpo 305LO5 com a sequência indicada em SEQ ID NO: 44.

[015] Outro exemplo de anticorpo anti-C5 é o anticorpo SKY59 descrito em Fukuzawa T., et al., Rep. 2017 Apr 24;7(1):1080). Em uma modalidade, o anticorpo compreende as CDRs da cadeia pesada e leve ou regiões variáveis do anticorpo SKY59. Em outra modalidade, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreende uma cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 45 e uma cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 46.

[016] Outro exemplo de anticorpo anti-C5 é o anticorpo REGN3918 (também conhecido como H4H12166PP) descrito em US20170355757. Em uma modalidade, o anticorpo compreende uma região variável da cadeia pesada compreendendo a SEQ ID NO: 47 e uma região variável da cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 48. Em outra modalidade, o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 49 e uma cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 50.

[017] Em outra modalidade, o anticorpo compete pela ligação com e/ou se liga ao mesmo epítopo em C5 que os anticorpos mencionados acima (por exemplo, eculizumabe, ravulizumabe, anticorpo 7086, anticorpo 8110, anticorpo 305LO5, anticorpo SKY59 ou anticorpo REGN3918). Em outra modalidade, o anticorpo tem pelo menos cerca de 90% de identidade de sequência de aminoácidos da região variável com os anticorpos mencionados acima (por exemplo, pelo menos cerca de 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ou 99% de identidade da região variável).

[018] Em uma modalidade, a dose do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é baseada no peso do paciente. Por exemplo, em uma modalidade, 2400 mg ou 3000 mg do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, são administrados a um paciente com peso ≥ 40 a <60 kg. Em outra modalidade, 2700 mg ou 3300 mg do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, são administrados a um paciente com peso ≥ 60 a <100 kg. Em outra modalidade, 3000 mg ou 3600 mg do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, são administrados a um paciente com peso ≥ 100 kg. Em certas modalidades, os regimes de dosagem são ajustados para fornecer a resposta ideal desejada (por exemplo, uma resposta eficaz).

[019] Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado por um ou mais ciclos de administração. Em uma modalidade, o ciclo de administração é de 26 semanas. Em uma modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado uma vez no Dia 1 do ciclo de administração, uma vez no Dia 15 do ciclo de administração e a cada oito semanas a partir de então. Em uma modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado a cada oito semanas após o ciclo de administração por um período de extensão de até dois anos (por exemplo, a uma dose de 3000 mg, 3300 mg ou 3600 mg).

[020] Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado por um ou mais ciclos de administração. Em uma modalidade, o ciclo de administração é de 26 semanas. Em outra modalidade, o tratamento compreende pelo menos 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ou 11 ciclos. Em outra modalidade, o tratamento continua por toda a vida do paciente humano.

[021] Em outra modalidade, um método de tratamento de um paciente humano com aHUS é fornecido, o método compreendendo a administração ao paciente (por exemplo, durante um ciclo de administração) de uma quantidade eficaz de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo sequências de cadeia pesada de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme estabelecido nas SEQ ID NOs: 19, 18 e 3, respectivamente, e sequências de cadeia leve de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme estabelecido em SEQ ID NOs: 4, 5 e 6, respectivamente, em que o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de: 2.400 mg para um paciente com peso ≥ 40 a <60 kg, 2700 mg para um paciente com peso ≥ 60 a <100 kg ou 3000 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3000 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 3300 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3600 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg.

[022] Em outra modalidade, um método de tratamento de um paciente humano com aHUS é fornecido, o método compreendendo a administração ao paciente (por exemplo, durante um ciclo de administração) de uma quantidade eficaz de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo sequências de cadeia pesada de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme estabelecido nas SEQ ID NOs: 19, 18 e 3, respectivamente, sequências de cadeia leve de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme estabelecido nas SEQ ID NOs: 4, 5 e 6, respectivamente, e uma região constante Fc humana variante que se liga ao receptor Fc neonatal humano (FcRn), em que a região constante Fc CH3 humana variante compreende substituições Met-429-Leu e Asn-435-Ser em resíduos correspondentes a metionina 428 e asparagina 434 de uma região constante Fc de IgG humana nativa, cada uma em numeração EU, em que o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de: 2.400 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 2700 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3000 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas em diante a uma dose de 3000 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 3300 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3600 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg.

[023] Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado a um paciente com peso ≥ 40 a <60 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 2400 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas em diante a uma dose de 3000 mg.

[024] Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado a um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 2700 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas em diante a uma dose de 3300 mg.

[025] Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado a um paciente com peso ≥ 100 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 3000 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas em diante a uma dose de 3600 mg.

[026] Em algumas modalidades, o paciente não foi tratado anteriormente com um inibidor do complemento (por exemplo, o paciente é um paciente não exposto ao inibidor de complemento).

[027] Em outras modalidades, o paciente foi tratado anteriormente com um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, e é trocado para outro anticorpo anti-C5 durante o curso do tratamento. Por exemplo, em certas modalidades, diferentes anticorpos anti-C5 são administrados durante o curso do tratamento. Em uma modalidade, diferentes anticorpos anti-C5 são administrados durante períodos separados de tratamento e de extensão. Por exemplo, em uma modalidade, o paciente é tratado com eculizumabe durante um período de tratamento (por exemplo, por 26 semanas), seguido por tratamento com outro anticorpo anti-C5 (por exemplo, ravulizumabe, anticorpo 7086, anticorpo 8110, anticorpo 305LO5, anticorpo SKY59 ou anticorpo REGN3918), por exemplo, durante um período de extensão. Em outra modalidade, o eculizumabe é administrado ao paciente em uma dose de 600 mg nos Dias 1, 8, 15 e 22 do ciclo de administração durante uma fase de indução, seguido por uma dose de manutenção de 900 mg de eculizumabe no Dia 19 do ciclo de administração e a cada duas semanas daí em diante (por exemplo, por um total de 26 semanas), seguido por tratamento com ravulizumabe por um período de extensão de até dois anos. Em outra modalidade, o paciente é tratado com ravulizumabe (por exemplo, por 26 semanas), seguido por tratamento com outro anticorpo anti-C5 (por exemplo, eculizumabe, anticorpo 7086, anticorpo 8110, anticorpo 305LO5, anticorpo SKY59 ou anticorpo REGN3918) durante, por exemplo, um período de extensão.

[028] Anticorpos anti-C5 alternativos exemplificativos incluem, mas não estão limitados a, (i) ravulizumabe, (ii), um anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo domínios CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NOs: 21, 22, e 23, respectivamente, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve compreendendo SEQ ID NOs: 24, 25 e 26, respectivamente, (iii) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 27 e uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 28, (iv) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo domínios CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NOs: 29, 30 e 31, respectivamente, e domínios CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia leve compreendendo SEQ ID NOs: 32, 33 e 34, respectivamente, (v) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 35 e uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 36, (vi) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo domínios CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NOs: 37, 38 e 39, respectivamente, e domínios CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia leve compreendendo SEQ ID NOs: 40, 41 e 42, respectivamente, (vii) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo uma região variável da cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 43 e uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 44, (viii) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo uma cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 45 e uma cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 46, (ix) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 47 e uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 48, e (x) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo uma cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 49 e uma cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 50.

[029] Em algumas modalidades, o paciente foi tratado anteriormente por pelo menos 1 mês, pelo menos 2 meses, pelo menos 3 meses, pelo menos 4 meses, pelo menos 5 meses, pelo menos 6 meses, pelo menos 7 meses, pelo menos 8 meses, pelo menos 9 meses, pelo menos 10 meses, pelo menos 11 meses, pelo menos 12 meses, pelo menos 18 meses, ou pelo menos 24 meses com um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, (por exemplo, eculizumabe) antes mudar para outro anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo (por exemplo, ravulizumabe). Em uma modalidade particular, o paciente foi tratado anteriormente por pelo menos 6 meses com eculizumabe.

[030] Em outra modalidade, em que um paciente (por exemplo, paciente com aHUS) é tratado com um primeiro anticorpo anti-C5 e, em seguida, trocado para tratamento com um segundo anticorpo anti-C5 diferente, especialmente quando o segundo anticorpo anti-C5 diferente se liga a um epítopo diferente em C5 que o primeiro anticorpo anti-C5, os cronogramas de administração levam em consideração a meia-vida do primeiro anticorpo anti-C5. Por exemplo, para garantir que o primeiro anticorpo anti-C5 seja depurado (por exemplo, "lavado") do paciente antes que o segundo (diferente) anticorpo anti-C5 seja administrado (por exemplo, para evitar problemas associados à agregação, formação de imunocomplexo, etc.), a meia-vida do primeiro anticorpo anti-C5 é levada em consideração. Em uma modalidade, o segundo anticorpo anti-C5 (diferente) não é administrado até uma duração de tempo correspondente a 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, 7 ou 7,5 vezes a meia-vida do primeiro anticorpo anti-C5 tenha se passado após a administração final do primeiro anticorpo anti-C5.

[031] Em outra modalidade, o paciente foi tratado anteriormente com eculizumabe e, em seguida, é trocado para o tratamento com um segundo (diferente) anticorpo anti-C5 (por exemplo, ravulizumabe, anticorpo 7086, anticorpo 8110, anticorpo 305LO5, anticorpo SKY59 ou anticorpo REGN3918). Em uma modalidade em que eculizumabe é o primeiro anticorpo administrado, o segundo anticorpo anti- C5 (diferente) não é administrado, por exemplo, até pelo menos 36, 45, 54, 63, 72, 81, 90, 99, 108, 117, ou 126 dias após a administração final de eculizumabe.

[032] Em outra modalidade, o paciente foi tratado anteriormente com ravulizumabe e, em seguida, é trocado para o tratamento com um anticorpo anti-C5 diferente (por exemplo, eculizumabe, anticorpo 7086, anticorpo 8110, anticorpo 305LO5, anticorpo SKY59 ou anticorpo REGN3918). Em uma modalidade em que ravulizumabe é o primeiro anticorpo administrado, o segundo (diferente) anticorpo anti-C5 não é administrado, por exemplo, até pelo menos 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 375 ou 400 dias se passaram após a administração final de ravulizumabe.

[033] Adicionalmente, ou alternativamente, técnicas são usadas para depurar ou aumentar a depuração do primeiro anticorpo anti-C5 antes de mudar para o tratamento com um segundo (diferente) anticorpo anti-C5. Técnicas exemplificativas incluem, mas não estão limitadas a, plasmaférese ou transfusões de sangue. Em outra modalidade, um anticorpo contra o primeiro anticorpo anti-C5 (por exemplo, um anticorpo anti-eculizumabe, um anticorpo anti-ravulizumabe, um anticorpo anti-7086, um anticorpo anti-8110, um anticorpo anti-305LO5, um anti-SKY59 ou um anticorpo anti-REGN3918) é administrado para depurar ou aumentar a depuração do primeiro anticorpo anti-C5 antes que um segundo (diferente) anticorpo anti-C5 ser administrado.

[034] Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo (por exemplo, ravulizumabe), é administrado a um paciente, em que o tratamento (por exemplo, ciclo de administração) começa pelo menos cerca de duas semanas, pelo menos cerca de três semanas, em pelo menos cerca de quatro semanas, pelo menos cerca de seis semanas, pelo menos cerca de sete semanas, ou pelo menos cerca de oito semanas após a última dose de eculizumabe do paciente.

Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo (por exemplo, ravulizumabe), é administrado a um paciente, em que o tratamento (por exemplo, ciclo de administração) começa pelo menos duas semanas após a última dose de eculizumabe do paciente.

[035] Em algumas modalidades, os pacientes tratados de acordo com os métodos descritos neste documento foram vacinados contra infecções meningocócicas dentro de 3 anos antes ou no momento do início do tratamento. Em uma modalidade, os pacientes que receberam tratamento menos de 2 semanas após receberem uma vacina meningocócica também são tratados com antibióticos profiláticos apropriados até 2 semanas após a vacinação. Em outra modalidade, os pacientes tratados de acordo com os métodos descritos neste documento são vacinados contra os sorotipos meningocócicos A, C, Y, W135 e/ou B.

[036] Em outro aspecto, os regimes de tratamento descritos são suficientes para manter concentrações séricas mínimas particulares do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Por exemplo, em uma modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 240, 245, 250, 255, 260, 265, 270, 280, 290, 300, 305, 310, 315, 320, 325, 330, 335, 340, 345, 350, 355, 360, 365, 370, 375, 380, 385, 390, 395 ou 400 µg/ml ou mais durante o tratamento. Em uma modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de 100 µg/ml ou superior. Em outra modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti- C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de 150 µg/ml ou superior. Em outra modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de 200 µg/ml ou superior. Em outra modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de 250 µg/ml ou superior. Em outra modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de 300 µg/ml ou superior. Em outra modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, entre 100 µg/ml e 200 µg/ml. Em outra modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de cerca de 175 µg/ml.

[037] Em outra modalidade, para obter uma resposta eficaz, o anticorpo anti- C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e com uma frequência para manter pelo menos 50 μg, 55μg, 60 μg, 65 μg, 70 μg, 75 μg, 80 μg, 85 μg, 90 μg, 95 μg, 100 μg, 105 μg, 110 μg, 115 μg, 120 μg, 125 μg, 130 μg, 135 μg, 140 μg, 145 μg, 150 μg, 155 μg, 160 μg¸ 165 μg, 170 μg¸ 175 μg, 180 μg, 185 μg, 190 μg¸ 195 μg, 200 μg, 205 μg, 210 μg, 215 μg, 220 μg, 225 μg, 230 μg, 235 μg, 240 μg, 245 μg, 250 μg, 255 μg ou 260 μg de anticorpo por mililitro de sangue do paciente. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e frequência para manter entre 50 μg e 250 μg de anticorpo por mililitro de sangue do paciente. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e frequência para manter entre 100 μg e 200 μg de anticorpo por mililitro de sangue do paciente. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e com uma frequência para manter cerca de 175 μg de anticorpo por mililitro do sangue do paciente.

[038] Em outra modalidade, para obter uma resposta eficaz, o anticorpo anti- C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e com uma frequência para manter uma concentração mínima de C5 livre. Por exemplo, em uma modalidade, o anticorpo anti-C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e com uma frequência para manter uma concentração de C5 livre de 0,2 µg/mL, 0,3 µg/mL, 0,4 µg/mL, 0,5 µg/mL ou abaixo. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e com uma frequência para manter uma concentração de C5 livre de 0,309 a 0,5 µg/mL ou abaixo. Em outra modalidade, o tratamento descrito neste documento reduz a concentração de C5 livre em mais de 99% ao longo do período de tratamento. Em outra modalidade, o tratamento reduz a concentração de C5 livre em mais de 99,5% ao longo do período de tratamento.

[039] Os anticorpos anti-C5, ou fragmentos de ligação ao antígeno dos mesmos, podem ser administrados a um paciente por qualquer meio adequado. Em uma modalidade, os anticorpos são formulados para administração intravenosa.

[040] A eficácia dos métodos de tratamento fornecidos neste documento pode ser avaliada usando qualquer meio adequado. Em uma modalidade, para um paciente com aHUS, o tratamento produz pelo menos um efeito terapêutico selecionado do grupo que consiste em uma redução ou cessação da hipertensão grave, proteinúria, uremia, letargia/fadiga, irritabilidade, trombocitopenia, anemia hemolítica microangiopática e comprometimento da função renal (por exemplo, insuficiência renal aguda).

[041] Em outras modalidades, o tratamento resulta na inibição terminal do complemento.

[042] Em outras modalidades, o tratamento produz uma mudança em direção aos níveis normais de um biomarcador hematológico relacionado à hemólise selecionado do grupo que consiste em hemoglobina livre, haptoglobina, contagem de reticulócitos, clone de glóbulos vermelhos HPN (RBC) e dímero D.

[043] Em outra modalidade, o tratamento produz um aumento na estabilização da hemoglobina a partir da avaliação inicial pré-tratamento do paciente. Em outra modalidade, o tratamento resulta em um aumento de ≥ 20 g/L na hemoglobina. Em outra modalidade, o tratamento resulta em evitar uma diminuição de ≥ 2 g/dL no nível de hemoglobina da avaliação inicial na ausência de transfusão da avaliação inicial até o Dia 183.

[044] Em outras modalidades, o tratamento resulta em normalização das 9 plaquetas (≥150 x 10 /L). Em outras modalidades, o tratamento resulta em 9 normalização das plaquetas (≥150 x 10 /L) por pelo menos 28 dias (por exemplo, pelo menos 28 dias, 1 mês, 2 meses, 3 meses, 4 meses, 5 meses, 6 meses, 7 meses, 8 meses, 9 meses, 10 meses, 11 meses, 1 ano ou dois anos).

[045] Em outras modalidades, o tratamento resulta na normalização de LDH (≤246 U/L). Em outras modalidades, o tratamento resulta na normalização de LDH (≤246 U/L) por pelo menos 28 dias (por exemplo, pelo menos 28 dias, 1 mês, 2 meses, 3 meses, 4 meses, 5 meses, 6 meses, 7 meses, 8 meses, 9 meses, 10 meses, 11 meses, 1 ano ou dois anos).

[046] Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma melhora de ≥25% da avaliação inicial na creatinina sérica. Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma melhora de ≥25% da avaliação inicial na creatinina sérica por pelo menos 28 dias (por exemplo, pelo menos 28 dias, 1 mês, 2 meses, 3 meses, 4 meses, 5 meses, 6 meses, 7 meses, 8 meses, 9 meses, 10 meses, 11 meses, 1 ano ou dois anos).

[047] Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma resposta TMA 9 completa (ou seja, normalização das plaquetas (≥150 x 10 /L), normalização LDH (≤246 U/L) e uma melhora ≥25% da avaliação inicial na creatinina sérica). Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma resposta TMA completa por pelo menos 28 dias (por exemplo, pelo menos 28 dias, 1 mês, 2 meses, 3 meses, 4 meses, 5 meses, 6 meses, 7 meses, 8 meses, 9 meses, 10 meses, 11 meses, 1 ano ou dois anos).

[048] Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma Resposta de TMA 9 completa modificada (ou seja, normalização de plaquetas (≥150 x10 /L), normalização de LDH (≤246 U/L) e o paciente está fora de diálise se estivesse em diálise na avaliação inicial ou uma melhora ≥25% da avaliação inicial na creatinina sérica para um paciente que estava sem diálise na avaliação inicial). Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma Resposta de TMA completa modificada por pelo menos 28 dias (por exemplo, pelo menos 28 dias, 1 mês, 2 meses, 3 meses, 4 meses, 5 meses, 6 meses, 7 meses, 8 meses, 9 meses, 10 meses, 11 meses, 1 ano ou dois anos).

[049] Em outras modalidades, o tratamento produz uma redução na necessidade de transfusões de sangue. Em outra modalidade, o tratamento produz um aumento superior a 70% na prevenção de transfusões. Em outra modalidade, o tratamento resulta em evitar a transfusão da avaliação inicial ao Dia 183.

[050] Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma eliminação da hemólise de escape durante o período de tratamento. Em outra modalidade, o tratamento resulta em uma redução da hemólise de escape em comparação com a quantidade da avaliação inicial pré-tratamento da hemólise de escape.

[051] Em outras modalidades, o tratamento produz uma redução nos principais eventos vasculares adversos (MAVEs).

[052] Em outras modalidades, o tratamento produz uma alteração na qualidade de vida a partir da avaliação inicial, conforme avaliado por meio da Functional Assessment of Chronic Illness Therapy (FACIT)-Fatigue Scale (Escala de Fadiga) versão 4 e pelo European Organisation for Research and Treatment of Cancer, Quality of Life Questionnaire-Core 30 Scale (Questionário de Qualidade de Vida). Em uma modalidade, o tratamento produz uma mudança na qualidade de vida a partir da avaliação inicial, conforme avaliado por meio da Escala de Fadiga FACIT por um ou mais (por exemplo, 1, 2 ou 3) pontos. Em outra modalidade, o tratamento produz uma mudança na qualidade de vida a partir da avaliação inicial conforme avaliado por meio da Escala de Fadiga FACIT em 3 pontos, 150 dias ou mais (por exemplo, 150 dias, 151 dias, 152 dias, 153 dias, 154 dias, 155 dias, 156 dias, 157 dias, 158 dias, 159 dias, 160 dias, 161 dias, 162 dias, 163 dias, 164 dias, 165 dias,

166 dias, 167 dias, 168 dias, 169 dias, 170 dias, 171 dias, 172 dias, 173 dias, 174 dias, 175 dias, 176 dias, 177 dias, 178 dias, 179 dias, 180 dias, 181 dias, 182 dias 183 dias, 184 dias, 185 dias, 186 dias, 187 dias, 188 dias, 189 dias, 190 dias, 191 dias, 192 dias, 193 dias, 194 dias, 195 dias, 196 dias, 197 dias, 198 dias, 199 dias, 200 dias, 205 dias, 210 dias, 215 dias, 220 dias ou 225 dias) após o início do tratamento.

[053] O estágio da doença renal crônica (CKD) é classificado com base no Estágio da doença renal crônica da National Kidney Foundation. Os estágios de CKD e os valores da taxa de filtração glomerular estimada (eGFR) correspondentes são os seguintes: Estágio 1: eGFR >= 90 (normal), Estágio 2: eGFR 60-89, Estágio 3A: eGFR 45-59, Estágio 3B: eGFR 30 -44, Estágio 4: eGFR 15-29 e Estágio 5: eGFR <15 (incluindo diálise: Estágio final). O estágio 1 é considerado a melhor categoria. O estágio 5 é considerado a pior categoria. Uma melhora na eGFR (por exemplo, > 15) corresponde a uma melhora no estágio de CKD (por exemplo, um estágio de CKD inferior). Consequentemente, em outras modalidades, a doença renal crônica (CKD) do paciente melhora em um ou mais estágios após o início do tratamento. Por exemplo, a CKD do paciente melhora em um, dois, três, quatro ou cinco estágios). Em outra modalidade, a CKD do paciente melhora em um ou mais estágios 150 dias ou mais (por exemplo, 150 dias, 151 dias, 152 dias, 153 dias, 154 dias, 155 dias, 156 dias, 157 dias, 158 dias, 159 dias, 160 dias, 161 dias, 162 dias, 163 dias, 164 dias, 165 dias, 166 dias, 167 dias, 168 dias, 169 dias, 170 dias, 171 dias, 172 dias, 173 dias, 174 dias, 175 dias, 176 dias, 177 dias, 178 dias, 179 dias, 180 dias, 181 dias, 182 dias 183 dias, 184 dias, 185 dias, 186 dias, 187 dias, 188 dias, 189 dias, 190 dias, 191 dias, 192 dias, 193 dias, 194 dias, 195 dias, 196 dias, 197 dias, 198 dias, 199 dias, 200 dias, 205 dias, 210 dias, 215 dias, 220 dias ou 225 dias) após o início do tratamento.

[054] Em outras modalidades, o tratamento resulta em um aumento no eGFR em comparação com a avaliação inicial. Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma mudança em direção a níveis normais de eGFR (por exemplo, ≥ 90). Em outras modalidades, o tratamento resulta em um aumento na eGFR em comparação com a avaliação inicial e a CKD do paciente melhora em um ou mais estágios. Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma mudança em direção aos níveis normais de eGFR (por exemplo, ≥ 90) em comparação com a avaliação inicial e a CKD do paciente melhora em um ou mais estágios.

[055] Em outras modalidades, o tratamento resulta em um valor de compensação de tempo EQ-5D-3L definido para os Estados Unidos (US TTO) de> 0,94.

[056] Em outro aspecto, um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é fornecido, compreendendo os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável da cadeia pesada tendo a sequência indicada em SEQ ID NO: 12 e domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável da cadeia leve tendo a sequência indicada em SEQ ID NO: 8, para administração a um paciente com aHUS: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de: 2.400 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 2700 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3000 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3000 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 3300 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3600 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg.

[057] Em uma modalidade, o anticorpo é determinado como seguro, tolerável e suficientemente não imunogênico após múltiplas doses IV para uso em pacientes com aHUS.

[058] São fornecidos ainda kits que incluem uma composição farmacêutica contendo um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, como o anticorpo ravulizumabe e um carreador farmaceuticamente aceitável, em uma quantidade terapeuticamente eficaz adaptada para uso nos métodos descritos neste documento. Em uma modalidade, o kit compreende: (a) uma dose de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo , compreendendo os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável da cadeia pesada com a sequência indicada em SEQ ID NO: 12 e domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável da cadeia leve tendo a sequência apresentada em SEQ ID NO: 8; e (b) instruções para uso do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, nos métodos descritos neste documento.

[059] Em uma modalidade, 2.400 mg ou 3000 mg do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, são administrados a um paciente com peso ≥ 40 a <60 kg. Em outra modalidade, 2700 mg ou 3300 mg do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, são administrados a um paciente com peso ≥ 60 a <100 kg. Em outra modalidade, 3000 mg ou 3600 mg do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, são administrados a um paciente com peso ≥ 100 kg.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[060] A Figura 1 representa o projeto de estudo para ALXN1210-aHUS-311.

[061] A Figura 2 resume os endpoints primários, secundários e de segurança para ALXN1210-aHUS-311.

[062] A Figura 3 resume os critérios de inclusão e exclusão para ALXN1210- aHUS-311.

[063] A Figura 4 mostra a disposição do paciente para ALXN1210-aHUS-311.

[064] A Figura 5 estabelece os dados para um exemplo de derivação com uma resposta TMA completa confirmada.

[065] A Figura 6 é um diagrama de Venn que mostra os principais dados de eficácia relacionados à resposta TMA completa primária durante o período de avaliação primário.

[066] A Figura 7 é um gráfico que representa o tempo para completar a resposta TMA.

[067] A Figura 8 é um gráfico que representa a concentração sérica média (μg/mL) versus tempo (escala linear). A dosagem baseada no peso resultou em exposições máximas, no estado estacionário e no vale, conforme previsto, sem achados farmacocinéticos inesperados.

[068] A Figura 9 é uma série de gráficos de barras que representam os principais dados de eficácia relacionados à Resposta TMA Completa primária durante o período de avaliação primária e durante o corte de dados. Os intervalos de confiança de 95% são representados pelas linhas na parte superior de cada barra.

[069] A Figura 10 mostra a resposta TMA completa geral e por subgrupos durante o período de avaliação inicial de 26 semanas.

[070] A Figura 11 representa os principais resultados de eficácia para o status da resposta TMA completa ao longo do tempo (círculo aberto), incluindo normalização da contagem de plaquetas (triângulo aberto), normalização hematológica (+), melhora de 25% na creatinina sérica da avaliação inicial (quadrado aberto) e normalização de LDH (X).

[071] A Figura 12 mostra a alteração média da eGFR (mL/min/1,73 m2) da avaliação inicial e intervalo de confiança de 95% ao longo do tempo.

[072] A Figura 13 mostra a mudança de estágio da doença renal crônica (CKD) da avaliação inicial até o Dia 183.

[073] A Figura 14 mostra a mudança média em plaquetas observada e baseada no modelo (109/L) da avaliação inicial e intervalo de confiança de 95% ao longo do tempo.

[074] A Figura 15 mostra as médias de plaquetas observadas (109/L) e o intervalo de confiança de 95% ao longo do tempo.

[075] A Figura 16 mostra a mudança média observada e baseada no modelo no LDH (U/L) da avaliação inicial e intervalo de confiança de 95% ao longo do tempo.

[076] A Figura 17 mostra o LDH médio observado (U/L) e o intervalo de confiança de 95% ao longo do tempo.

[077] A Figura 18 mostra a mudança média observada e baseada no modelo na hemoglobina (HGB) (g/L) da avaliação inicial e intervalo de confiança de 95% ao longo do tempo.

[078] A Figura 19 mostra o HGB médio observado (g/L) e o intervalo de confiança de 95% ao longo do tempo.

[079] A Figura 20 mostra a alteração média da fadiga FACIT da avaliação inicial e o intervalo de confiança de 95% ao longo do tempo. A pontuação FACIT varia de 0 a 52, com uma pontuação mais alta indicando menos fadiga.

[080] A Figura 21 mostra a alteração média do EQ-5D-3L da avaliação inicial e o intervalo de confiança de 95% ao longo do tempo.

[081] A Figura 22 representa as concentrações de complemento C5 livre de soro (μg/L) ao longo do tempo desde a avaliação inicial até o dia 183.

[082] A Figura 23 compara a população do estudo e os resultados entre o estudo ALXN1210-aHUS-311 e o estudo de adultos com eculizumabe (C10-004).

DESCRIÇÃO DETALHADA I. Anticorpos Anti-C5

[083] Os anticorpos anti-C5 descritos neste documento ligam-se ao componente C5 do complemento (por exemplo, C5 humano) e inibem a clivagem de C5 em fragmentos C5a e C5b. Conforme descrito acima, tais anticorpos também têm, por exemplo, propriedades farmacocinéticas melhoradas em relação a outros anticorpos anti-C5 (por exemplo, eculizumabe) usados para fins terapêuticos.

[084] O termo "anticorpo" descreve polipeptídeos que compreendem pelo menos um local de ligação ao antígeno derivado de anticorpo (por exemplo, região

VH/VL ou Fv, ou CDR). Os anticorpos incluem formas conhecidas de anticorpos. Por exemplo, o anticorpo pode ser um anticorpo humano, um anticorpo humanizado, um anticorpo biespecífico ou um anticorpo quimérico. O anticorpo também pode ser um Fab, Fab'2, ScFv, SMIP, Affibody, nanocorpo ou um anticorpo de domínio. O anticorpo também pode ser de qualquer um dos seguintes isotipos: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgAsec, IgD e IgE. O anticorpo pode ser um anticorpo de ocorrência natural ou pode ser um anticorpo que foi alterado por uma técnica de manipulação de proteínas (por exemplo, por mutação, deleção, substituição, conjugação a uma fração não-anticorpo). Por exemplo, um anticorpo pode incluir um ou mais aminoácidos variantes (em comparação com um anticorpo de ocorrência natural) que altera uma propriedade (por exemplo, uma propriedade funcional) do anticorpo. Por exemplo, numerosas dessas alterações são conhecidas na técnica que afetam, por exemplo, meia-vida, função efetora e/ou respostas imunes ao anticorpo em um paciente. O termo anticorpo também inclui construtos polipeptídicos artificiais ou manipulados que compreendem pelo menos um local de ligação a antígeno derivado de anticorpo.

[085] Os anticorpos anti-C5 (ou domínios VH/VL derivados dos mesmos) adequados para uso na invenção podem ser gerados usando métodos bem conhecidos na técnica. Alternativamente, podem ser usados anticorpos anti-C5 reconhecidos na técnica. Os anticorpos que competem com qualquer um destes anticorpos reconhecidos na técnica para a ligação a C5 também podem ser usados.

[086] Eculizumabe (também conhecido como SOLIRIS®) é um anticorpo anti- C5 compreendendo os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia pesada com as sequências indicadas em SEQ ID NOs: 1, 2 e 3, respectivamente, e domínios CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia leve tendo as sequências indicadas em SEQ ID NOs: 4, 5 e 6, respectivamente. Eculizumabe compreende uma região variável de cadeia pesada com a sequência de aminoácidos indicada em SEQ ID NO: 7 e uma região variável de cadeia leve tendo a sequência de aminoácidos indicada em SEQ ID NO: 8. As regiões variáveis de eculizumabe são descritas em PCT/US1995/005688 e Patente U.S. Nº 6.355.245, cujos ensinamentos são incorporados neste documento por referência. Eculizumabe compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos indicada em SEQ ID NO: 10 e uma cadeia leve possuindo a sequência de aminoácidos indicada em SEQ ID NO: 11. As cadeias pesadas e leves completas de eculizumabe são descritas em PCT/US2007/006606, cujos ensinamentos são aqui incorporados por referência.

[087] Um exemplo de anticorpo anti-C5 é ravulizumabe compreendendo cadeias pesadas e leves com as sequências mostradas em SEQ ID NOs: 14 e 11, respectivamente, ou fragmentos de ligação ao antígeno e variantes dos mesmos. Ravulizumabe (também conhecido como ULTOMIRIS®, BNJ441 e ALXN1210) é descrito em PCT/US2015/019225 e Patente U.S. Nº 9.079.949, cujos ensinamentos são aqui incorporados por referência. Os termos ravulizumabe, BNJ441 e ALXN1210 podem ser usados indistintamente ao longo deste documento, mas todos se referem ao mesmo anticorpo. Ravulizumabe liga-se seletivamente à proteína C5 do complemento humano, inibindo sua clivagem em C5a e C5b durante a ativação do complemento. Esta inibição evita a liberação do mediador pró-inflamatório C5a e a formação do complexo citolítico formador de poros de ataque à membrana (MAC) C5b-9, enquanto preserva os componentes proximais ou precoces da ativação do complemento (por exemplo, C3 e C3b) essenciais para a opsonização de microrganismos e depuração de complexos imunes.

[088] Em outras modalidades, o anticorpo compreende os CDRs de cadeia pesada e leve ou regiões variáveis de ravulizumabe. Por exemplo, em uma modalidade, o anticorpo compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região VH do ravulizumabe tendo a sequência indicada em SEQ ID NO: 12 e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região VL do ravulizumabe tendo a sequência indicada em

SEQ ID NO: 8. Em outra modalidade, o anticorpo compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada com as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 19, 18 e 3, respectivamente, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve com as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 4, 5 e 6, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo compreende regiões VH e VL possuindo as sequências de aminoácidos indicadas nas SEQ ID NO: 12 e SEQ ID NO: 8, respectivamente.

[089] Outro exemplo de anticorpo anti-C5 é o anticorpo BNJ421 compreendendo cadeias pesadas e leves com as sequências mostradas nas SEQ ID NOs: 20 e 11, respectivamente, ou fragmentos de ligação ao antígeno e variantes do mesmo. BNJ421 (também conhecido como ALXN1211) é descrito em PCT/US2015/019225 e Patente US N.º 9.079.949, cujos ensinamentos são aqui incorporados por referência.

[090] Em outras modalidades, o anticorpo compreende as CDRs de cadeia pesada e leve ou regiões variáveis de BNJ421. Por conseguinte, em uma modalidade, o anticorpo compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região VH de BNJ421 tendo a sequência indicada em SEQ ID NO: 12 e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região VL de BNJ421 tendo a sequência apresentada em SEQ ID NO: 8. Em outra modalidade, o anticorpo compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada com as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 19, 18 e 3, respectivamente, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve com as sequências indicadas em SEQ ID NOs: 4, 5 e 6, respectivamente.

[091] Os limites exatos dos CDRs foram definidos de forma diferente de acordo com métodos diferentes. Em algumas modalidades, as posições dos CDRs ou regiões estruturais dentro de um domínio variável de cadeia leve ou pesada podem ser conforme definido por Kabat et al. [(1991) "Sequences of Proteins of Immunological Interest." NIH Publication No. 91-3242, U.S. Department of Health and Human Services, Bethesda, MD]. Nesses casos, os CDRs podem ser referidos como

“Kabat CDRs” (por exemplo, “Kabat LCDR2” ou “Kabat HCDR1”). Em algumas modalidades, as posições dos CDRs de uma região variável de cadeia leve ou pesada podem ser definidas por Chothia et al. (1989) Nature 342:877-883. Consequentemente, essas regiões podem ser referidas como “Chothia CDRs” (por exemplo, “Chothia LCDR2” ou “Chothia HCDR3”). Em algumas modalidades, as posições dos CDRs das regiões variáveis da cadeia leve e pesada podem ser definidas por uma definição combinada de Kabat-Chothia. Em tais modalidades, essas regiões podem ser referidas como "CDRs combinados Kabat-Chothia". Thomas et al. [(1996) Mol Immunol 33 (17/18): 1389-1401] exemplifica a identificação de limites de CDR de acordo com as definições de Kabat e Chothia.

[092] Em outra modalidade, o anticorpo compreende regiões VH e VL possuindo as sequências de aminoácidos indicadas nas SEQ ID NO: 12 e SEQ ID NO: 8, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo compreende uma região constante da cadeia pesada conforme estabelecido em SEQ ID NO: 13. Em outra modalidade, o anticorpo compreende um polipeptídeo de cadeia pesada conforme estabelecido na SEQ ID NO: 14 e um polipeptídeo de cadeia leve conforme estabelecido na SEQ ID NO: 11. Em outra modalidade, o anticorpo compreende uma região constante Fc humana variante que se liga ao receptor Fc neonatal humano (FcRn), em que a região constante Fc CH3 humana variante compreende substituições de Met-429-Leu e Asn-435-Ser em resíduos correspondentes a metionina 428 e asparagina 434 de uma região constante Fc de IgG humana nativa, cada uma na numeração EU.

[093] Em outra modalidade, o anticorpo compreende sequências de cadeia pesada de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme estabelecido nas SEQ ID NOs: 19, 18 e 3, respectivamente, e sequências de cadeia leve de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme estabelecido nas SEQ ID NOs: 4, 5 e 6, respectivamente, e uma região constante Fc humana variante que se liga ao receptor Fc neonatal humano (FcRn), em que a região constante Fc CH3 humana variante compreende substituições Met-429-Leu e Asn- 435-Ser nos resíduos correspondentes a metionina 428 e asparagina 434 de uma região constante Fc de IgG humana nativa, cada uma na numeração EU.

[094] Em outras modalidades, um anticorpo anti-C5 descrito neste documento compreende um CDR1 de cadeia pesada compreendendo ou consistindo na seguinte sequência de aminoácidos: GHIFSNYWIQ (SEQ ID NO: 19). Em outra modalidade, um anticorpo anti-C5 descrito neste documento compreende um CDR2 de cadeia pesada compreendendo ou consistindo na seguinte sequência de aminoácidos: EILPGSGHTEYTENFKD (SEQ ID NO:18).

[095] Em outra modalidade, o anticorpo se liga a C5 humano a pH 7,4 e 25°C com uma constante de dissociação de afinidade (KD) que está na faixa de 0,1 nM a 1 nM. Em outra modalidade, o anticorpo se liga a C5 humano a pH 6,0 e 25°C com um KD ≥ 10 nM. Em ainda outra modalidade, o [(KD do anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo para C5 humano a pH 6,0 e a 25°C)/(KD do anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo para C5 humano a pH 7,4 e25°C)] do anticorpo é maior que 25.

[096] Outro exemplo de anticorpo anti-C5 é o anticorpo 7086 descrito nas Patentes Nº U.S. 8.241.628 e 8.883.158. Em uma modalidade, o anticorpo compreende os CDRs da cadeia pesada e leve ou regiões variáveis do anticorpo 7086 (ver Patentes U.S. Nº 8.241.628 e 8.883.158). Em outra modalidade, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada com as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 21, 22 e 23, respectivamente, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 24, 25 e 26, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreende a região VH do anticorpo 7086 com a sequência indicada em SEQ ID NO: 27 e a região VL do anticorpo 7086 com a sequência indicada em SEQ ID NO:

28.

[097] Outro exemplo de anticorpo anti-C5 é o anticorpo 8110 descrito nas Patentes U.S. Nº 8.241.628 e 8.883.158. Em uma modalidade, o anticorpo compreende as CDRs da cadeia pesada e leve ou regiões variáveis do anticorpo 8110. Em outra modalidade, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada com as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 29, 30 e 31, respectivamente, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 32, 33 e 34, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo compreende a região VH do anticorpo 8110 com a sequência indicada em SEQ ID NO: 35 e a região VL do anticorpo 8110 com a sequência indicada em SEQ ID NO: 36.

[098] Outro exemplo de anticorpo anti-C5 é o anticorpo 305LO5 descrito em US2016/0176954A1. Em uma modalidade, o anticorpo compreende as CDRs da cadeia pesada e leve ou regiões variáveis do anticorpo 305LO5. Em outra modalidade, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia pesada com as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 37, 38 e 39, respectivamente, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve tendo as sequências indicadas nas SEQ ID NOs: 40, 41 e 42, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo compreende a região VH do anticorpo 305LO5 com a sequência indicada em SEQ ID NO: 43 e a região VL do anticorpo 305LO5 com a sequência indicada em SEQ ID NO: 44.

[099] Outro exemplo de anticorpo anti-C5 é o anticorpo SKY59 descrito em Fukuzawa T., et al., Rep. 2017 Apr 24;7(1):1080). Em uma modalidade, o anticorpo compreende as CDRs da cadeia pesada e leve ou regiões variáveis do anticorpo SKY59. Em outra modalidade, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreende uma cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 45 e uma cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 46.

[0100] Outro exemplo de anticorpo anti-C5 é o anticorpo REGN3918 (também conhecido como H4H12166PP) descrito em US20170355757. Em uma modalidade, o anticorpo compreende uma região variável da cadeia pesada compreendendo a SEQ ID NO: 47 e uma região variável da cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 48. Em outra modalidade, o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 49 e uma cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 50.

[0101] Em outra modalidade, o anticorpo compete pela ligação com e/ou se liga ao mesmo epítopo em C5 que os anticorpos mencionados acima (por exemplo, eculizumabe, ravulizumabe, anticorpo 7086, anticorpo 8110, anticorpo 305LO5, anticorpo SKY59 ou anticorpo REGN3918). Em outra modalidade, o anticorpo tem pelo menos cerca de 90% de identidade de sequência de aminoácidos da região variável com os anticorpos mencionados acima (por exemplo, pelo menos cerca de 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ou 99% de identidade da região variável).

[0102] Um anticorpo anti-C5 descrito neste documento pode, em algumas modalidades, compreender uma região constante Fc humana variante que se liga ao receptor Fc neonatal humano (FcRn) com maior afinidade do que aquela da região constante Fc humana nativa a partir da qual a região constante Fc humana variante foi derivada. Por exemplo, a região constante Fc pode compreender uma ou mais (por exemplo, duas, três, quatro, cinco, seis, sete ou oito ou mais) substituições de aminoácidos em relação à região constante Fc humana nativa da qual a região constante Fc humana variante foi derivada. As substituições podem aumentar a afinidade de ligação de um anticorpo IgG contendo a região constante Fc variante para FcRn em pH 6,0, enquanto mantém a dependência do pH da interação. Métodos para testar se uma ou mais substituições na região constante Fc de um anticorpo aumentam a afinidade da região constante Fc para FcRn em pH 6,0 (enquanto mantém a dependência do pH da interação) são conhecidos na técnica e exemplificados nos exemplos funcionais. Ver, por exemplo, PCT/US2015/019225 e Patente U.S. N.º 9.079.949, as divulgações de cada uma das quais são incorporadas neste documento por referência em sua totalidade.

[0103] As substituições que aumentam a afinidade de ligação de uma região constante Fc de anticorpo para FcRn são conhecidas na técnica e incluem, por exemplo, (1) a substituição tripla M252Y/S254T/T256E descrita por Dall'Acqua et al. (2006) J Biol Chem 281: 23514-23524; (2) as substituições M428L ou T250Q/M428L descritas em Hinton et al. (2004) J Biol Chem 279: 6213-6216 e Hinton et al. (2006) J Immunol 176: 346-356; e (3) as substituições N434A ou T307/E380A/N434A descritas em Petkova et al. (2006) Int Immunol 18 (12): 1759-69. Os pares de substituição adicionais: P257I/Q311I, P257I/N434H e D376V/N434H são descritos em, por exemplo, Datta-Mannan et al. (2007) J Biol Chem 282 (3):1709-1717, cuja divulgação é incorporada neste documento por referência em sua totalidade.

[0104] Em algumas modalidades, a região constante variante tem uma substituição no resíduo de aminoácido 255 da UE por valina. Em algumas modalidades, a região constante variante tem uma substituição no resíduo de aminoácido 309 da UE por asparagina. Em algumas modalidades, a região constante variante tem uma substituição no resíduo de aminoácido 312 da UE por isoleucina. Em algumas modalidades, a região constante variante tem uma substituição no resíduo de aminoácido 386 da UE.

[0105] Em algumas modalidades, a região constante Fc variante compreende não mais do que 30 (por exemplo, não mais do que 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, nove, oito, sete, seis, cinco, quatro, três ou duas) substituições, inserções ou deleções de aminoácidos em relação à região constante nativa da qual foi derivada. Em algumas modalidades, a região constante Fc variante compreende uma ou mais substituições de aminoácidos selecionadas do grupo que consiste em: M252Y, S254T, T256E, N434S, M428L, V259I, T250I e

V308F. Em algumas modalidades, a região constante Fc humana variante compreende uma metionina na posição 428 e uma asparagina na posição 434, cada uma na numeração EU. Em algumas modalidades, a região constante Fc variante compreende uma substituição dupla 428L/434S conforme descrito, por exemplo, na Patente U.S. N.º 8.088.376.

[0106] Em algumas modalidades, a localização precisa dessas mutações pode ser deslocada da posição da região constante Fc humana nativa devido à manipulação de anticorpo. Por exemplo, a substituição dupla 428L/434S quando usada em um Fc quimérico IgG2/4 pode corresponder a 429L e 435S como nas variantes M429L e N435S encontradas em BNJ441 (ravulizumabe) e descrito na Patente U.S. Número 9.079.949, cuja divulgação é incorporada neste documento por referência em sua totalidade.

[0107] Em algumas modalidades, a região constante variante compreende uma substituição na posição de aminoácido 237, 238, 239, 248, 250, 252, 254, 255, 256, 257, 258, 265, 270, 286, 289, 297, 298, 303, 305, 307, 308, 309, 311, 312, 314, 315, 317, 325, 332, 334, 360, 376, 380, 382, 384, 385, 386, 387, 389, 424, 428, 433, 434, ou 436 (numeração EU) em relação à região constante Fc humana nativa. Em algumas modalidades, a substituição é selecionada a partir do grupo que consiste em: metionina por glicina na posição 237; alanina por prolina na posição 238; lisina por serina na posição 239; isoleucina por lisina na posição 248; alanina, fenilalanina, isoleucina, metionina, glutamina, serina, valina, triptofano ou tirosina por treonina na posição 250; fenilalanina, triptofano ou tirosina por metionina na posição 252; treonina por serina na posição 254; ácido glutâmico por arginina na posição 255; ácido aspártico, ácido glutâmico ou glutamina por treonina na posição 256; alanina, glicina, isoleucina, leucina, metionina, asparagina, serina, treonina ou valina por prolina na posição 257; histidina por ácido glutâmico na posição 258; alanina por ácido aspártico na posição 265; fenilalanina por ácido aspártico na posição 270; alanina ou ácido glutâmico por asparagina na posição 286; histidina por treonina na posição 289; alanina por asparagina na posição 297; glicina por serina na posição 298; alanina por valina na posição 303; alanina por valina na posição 305; alanina, ácido aspártico, fenilalanina, glicina, histidina, isoleucina, lisina, leucina, metionina, asparagina, prolina, glutamina, arginina, serina, valina, triptofano ou tirosina por treonina na posição 307; alanina, fenilalanina, isoleucina, leucina, metionina, prolina, glutamina ou treonina por valina na posição 308; alanina, ácido aspártico, ácido glutâmico, prolina ou arginina por leucina ou valina na posição 309; alanina, histidina ou isoleucina por glutamina na posição 311; alanina ou histidina para ácido aspártico na posição 312; lisina ou arginina por leucina na posição 314; alanina ou histidina por asparagina na posição 315; alanina por lisina na posição 317; glicina por asparagina na posição 325; valina por isoleucina na posição 332; leucina por lisina na posição 334; histidina por lisina na posição 360; alanina por ácido aspártico na posição 376; alanina por ácido glutâmico na posição 380; alanina por ácido glutâmico na posição 382; alanina por asparagina ou serina na posição 384; ácido aspártico ou histidina por glicina na posição 385; prolina por glutamina na posição 386; ácido glutâmico por prolina na posição 387; alanina ou serina por asparagina na posição 389; alanina por serina na posição 424; alanina, ácido aspártico, fenilalanina, glicina, histidina, isoleucina, lisina, leucina, asparagina, prolina, glutamina, serina, treonina, valina, triptofano ou tirosina por metionina na posição 428; lisina por histidina na posição 433; alanina, fenilalanina, histidina, serina, triptofano ou tirosina por asparagina na posição 434; e histidina por tirosina ou fenilalanina na posição 436, todos na numeração EU.

[0108] Anticorpos anti-C5 adequados para uso nos métodos descritos neste documento, em algumas modalidades, compreendem um polipeptídeo de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos representada em SEQ ID NO: 14 e/ou um polipeptídeo de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos representada em SEQ ID NO: 11. Alternativamente, os anticorpos anti-C5 para uso nos métodos descritos neste documento, em algumas modalidades, compreendem um polipeptídeo de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos representada em SEQ ID NO: 20 e/ou um polipeptídeo de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos representada em SEQ ID NO: 11.

[0109] Em uma modalidade, o anticorpo se liga a C5 em pH 7,4 e 25°C (e, caso contrário, sob condições fisiológicas) com uma constante de dissociação de afinidade (KD) que é pelo menos 0,1 (por exemplo, pelo menos 0,15, 0,175, 0,2, 0,25, 0,275 , 0,3, 0,325, 0,35, 0,375, 0,4, 0,425, 0,45, 0,475, 0,5, 0,525, 0,55, 0,575, 0,6, 0,625, 0,65, 0,675, 0,7, 0,725, 0,75, 0,775, 0,8, 0,825, 0,85, 0,875, 0,9 , 0,925, 0,95 ou 0,975) nM. Em algumas modalidades, o KD do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, não é maior que 1 (por exemplo, não maior que 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3 ou 0,2) nM.

[0110] Em outras modalidades, o [(KD do anticorpo para C5 em pH 6,0 a C)/(KD do anticorpo para C5 em pH 7,4 a 25°C)] é maior que 21 (por exemplo, maior que 22, 23, 24, 25 , 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 350, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4500, 5000, 5500, 6000, 6500, 7000, 7500 ou 8000).

[0111] Métodos para determinar se um anticorpo se liga a um antígeno de proteína e/ou a afinidade de um anticorpo para um antígeno de proteína são conhecidos na técnica. Por exemplo, a ligação de um anticorpo a um antígeno de proteína pode ser detectada e/ou quantificada usando uma variedade de técnicas, tais como, mas não se limitando a, Western blot, dot blot, método de ressonância plasmônica de superfície (SPR) (por exemplo, sistema BIAcore; Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Suécia e Piscataway, N.J.), ou ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA). Ver, por exemplo, Benny K. C. Lo (2004) “Antibody Engineering: Methods and Protocols,” Humana Press (ISBN: 1588290921); Johne et al. (1993) J Immunol

Meth 160:191-198; Jonsson et al. (1993) Ann Biol Clin 51:19-26; and Jonsson et al. (1991) Biotechniques 11:620-627. Além disso, os métodos para medir a afinidade (por exemplo, constantes de dissociação e associação) são apresentados nos exemplos funcionais.

[0112] Conforme usado neste documento, o termo "ka" se refere à constante de taxa para associação de um anticorpo a um antígeno. O termo "kd" se refere à constante de taxa para a dissociação de um anticorpo do complexo anticorpo/antígeno. E o termo "KD" se refere à constante de dissociação de equilíbrio de uma interação anticorpo-antígeno. A constante de dissociação de equilíbrio é deduzida da razão das constantes de taxa cinética, KD = ka/kd. Essas determinações são preferencialmente medidas a 25°C ou 37°C (ver os exemplos funcionais). Por exemplo, a cinética de ligação do anticorpo ao C5 humano pode ser determinada em pH 8,0, 7,4, 7,0, 6,5 e 6,0 via ressonância plasmônica de superfície (SPR) em um instrumento BIAcore 3000 usando um método de captura anti-Fc para imobilizar o anticorpo.

[0113] Em uma modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, bloqueia a geração ou atividade dos fragmentos ativos C5a e/ou C5b de uma proteína C5 (por exemplo, uma proteína C5 humana). Por meio desse efeito de bloqueio, os anticorpos inibem, por exemplo, os efeitos pró-inflamatórios do C5a e a geração do complexo de ataque à membrana C5b-9 (MAC) na superfície de uma célula.

[0114] Os métodos para determinar se um determinado anticorpo descrito neste documento inibe a clivagem de C5 são conhecidos na técnica. A inibição do componente C5 do complemento humano pode reduzir a capacidade de lise celular do complemento nos fluidos corporais de um sujeito. Essas reduções da capacidade de lise celular do complemento presente no(s) fluido(s) corporal(is) podem ser medidas por métodos bem conhecidos na técnica, como, por exemplo, por um ensaio hemolítico convencional, como o ensaio de hemólise descrito por Kabat e Mayer (eds.), "Experimental Immunochemistry, 2nd Edition," 135-240, Springfield, IL, CC Thomas (1961), páginas 135-139, ou uma variação convencional desse ensaio, tal como o método de hemólise de eritrócitos de galinha como descrito, por exemplo, em Hillmen et al. (2004) N Engl J Med 350(6):552. Os métodos para determinar se um composto candidato inibe a clivagem de C5 humano nas formas C5a e C5b são conhecidos na técnica e descritos em Evans et al. (1995) Mol Immunol 32(16):1183-

95. Por exemplo, a concentração e/ou atividade fisiológica de C5a e C5b em um fluido corporal pode ser medida por métodos bem conhecidos na técnica. Para C5b, podem ser usados ensaios hemolíticos ou ensaios para C5b-9 solúvel, conforme discutido neste documento. Outros ensaios conhecidos na técnica também podem ser usados. Usando ensaios destes ou de outros tipos adequados, os agentes candidatos capazes de inibir o componente C5 do complemento humano podem ser rastreados.

[0115] Técnicas imunológicas, tais como, mas não se limitando a, ELISA podem ser usadas para medir a concentração de proteína de C5 e/ou seus produtos divididos para determinar a capacidade de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, para inibir a conversão de C5 em produtos biologicamente ativos. Em algumas modalidades, a geração C5a é medida. Em algumas modalidades, os anticorpos específicos do neoepítopo C5b-9 são usados para detectar a formação do complemento terminal.

[0116] Os ensaios hemolíticos podem ser usados para determinar a atividade inibitória de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, na ativação do complemento. A fim de determinar o efeito de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, na hemólise mediada pela via clássica do complemento em uma solução de teste de soro in vitro, por exemplo, eritrócitos de ovelha revestidos com hemolisina ou eritrócitos de galinha sensibilizados com anticorpo anti-eritrócito de galinha são usados como células-alvo. A porcentagem de lise é normalizada considerando 100% de lise igual à lise que ocorre na ausência do inibidor. Em algumas modalidades, a via clássica do complemento é ativada por um anticorpo IgM humano, por exemplo, conforme utilizado no Wieslab® Classical Pathway Complement Kit (Wieslab® COMPL CP310, Euro-Diagnostica, Sweden). Resumidamente, o soro de teste é incubado com um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, na presença de um anticorpo IgM humano. A quantidade de C5b-9 que é gerada é medida pelo contato da mistura com um anticorpo anti-C5b-9 conjugado com enzima e um substrato fluorogênico e medindo a absorbância no comprimento de onda apropriado. Como controle, o soro de teste é incubado na ausência do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em algumas modalidades, o soro de teste é um soro deficiente em C5 reconstituído com um polipeptídeo C5.

[0117] Para determinar o efeito de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, na hemólise mediada por via alternativa, eritrócitos de coelho ou porquinho da índia não sensibilizados podem ser usados como células alvo. Em algumas modalidades, a solução de teste de soro é um soro deficiente em C5 reconstituído com um polipeptídeo C5. A porcentagem de lise é normalizada considerando 100% de lise igual à lise que ocorre na ausência do inibidor. Em algumas modalidades, a via alternativa do complemento é ativada por moléculas de lipopolissacarídeo, por exemplo, conforme utilizado no Wieslab® Alternative Pathway Complement Kit (Wieslab® COMPL AP330, Euro-Diagnostica, Sweden). Resumidamente, o soro de teste é incubado com um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, na presença de lipopolissacarídeo. A quantidade de C5b-9 que é gerada é medida pelo contato da mistura com um anticorpo anti-C5b- 9 conjugado com enzima e um substrato fluorogênico e medindo a fluorescência no comprimento de onda apropriado. Como controle, o soro de teste é incubado na ausência do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.

[0118] Em algumas modalidades, a atividade de C5, ou sua inibição, é quantificada usando um ensaio CH50eq. O ensaio CH50eq é um método para medir a atividade do complemento clássico total no soro. Este teste é um ensaio lítico, que usa eritrócitos sensibilizados com anticorpos como o ativador da via clássica do complemento e várias diluições do soro de teste para determinar a quantidade necessária para dar 50% de lise (CH50). A porcentagem de hemólise pode ser determinada, por exemplo, usando um espectrofotômetro. O ensaio CH50eq fornece uma medida indireta da formação do complexo terminal do complemento (TCC), uma vez que os próprios TCC são diretamente responsáveis pela hemólise que é medida.

[0119] O ensaio é bem conhecido e comumente praticado por aqueles versados na técnica. Resumidamente, para ativar a via clássica do complemento, amostras de soro não diluídas (por exemplo, amostras de soro humano reconstituídas) são adicionadas aos poços do microensaio contendo os eritrócitos sensibilizados com anticorpos para assim gerar TCC. Em seguida, os soros ativados são diluídos em poços de microensaio, que são revestidos com um reagente de captura (por exemplo, um anticorpo que se liga a um ou mais componentes do TCC). O TCC presente nas amostras ativadas liga-se aos anticorpos monoclonais que revestem a superfície dos poços do microensaio. Os poços são lavados e a cada poço é adicionado um reagente de detecção que é marcado de forma detectável e reconhece o TCC ligado. O marcador detectável pode ser, por exemplo, um marcador fluorescente ou um marcador enzimático. Os resultados do ensaio são expressos em unidades equivalentes de CH50 por mililitro (CH50 U Eq/mL).

[0120] A inibição, por exemplo, no que se refere à atividade do complemento terminal, inclui pelo menos 5 (por exemplo, pelo menos 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, ou 60) % de diminuição na atividade do complemento terminal em, por exemplo, um ensaio hemolítico ou ensaio CH50eq em comparação com o efeito de um anticorpo de controle (ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo) sob condições semelhantes e em uma concentração equimolar. A inibição substancial, tal como aqui utilizada, refere-se à inibição de uma determinada atividade (por exemplo, atividade do complemento terminal) de pelo menos 40 (por exemplo, pelo menos 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, ou 95 ou mais) %. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-C5 descrito neste documento contém uma ou mais substituições de aminoácidos em relação aos CDRs de eculizumabe (ou seja, SEQ ID NOs: 1-6), ainda retém pelo menos 30 (por exemplo, pelo menos 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90 ou 95) % da atividade inibitória do complemento de eculizumabe em um ensaio hemolítico ou ensaio CH50eq.

[0121] Um anticorpo anti-C5 descrito neste documento tem uma meia-vida sérica em humanos que é de pelo menos 20 (por exemplo, pelo menos 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54 ou 55) dias. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 descrito neste documento tem uma meia-vida sérica em humanos que é de pelo menos 40 dias. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 descrito neste documento tem uma meia-vida sérica em humanos que é de aproximadamente 43 dias. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 descrito neste documento tem uma meia-vida sérica em humanos que é entre 39-48 dias. Os métodos para medir a meia-vida sérica de um anticorpo são conhecidos na técnica. Em algumas modalidades, um anticorpo anti- C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, descrito neste documento tem uma meia-vida sérica que é de pelo menos 20 (por exemplo, pelo menos 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 175, 200, 250, 300, 400, 500) % maior do que a meia-vida sérica do eculizumabe, por exemplo, conforme medido em um dos sistemas de modelo de camundongos descritos nos exemplos funcionais (por exemplo, o sistema modelo de camundongo deficiente em C5/NOD/scid ou camundongo transgênico hFcRn).

[0122] Em uma modalidade, o anticorpo compete pela ligação e/ou liga-se ao mesmo epítopo em C5 que os anticorpos descritos neste documento. O termo "liga- se ao mesmo epítopo" com referência a dois ou mais anticorpos significa que os anticorpos se ligam ao mesmo segmento de resíduos de aminoácidos, conforme determinado por um determinado método. As técnicas para determinar se os anticorpos se ligam ao "mesmo epítopo em C5" com os anticorpos descritos neste documento incluem, por exemplo, métodos de mapeamento de epítopos, tais como análises de raios-x de cristais de antígeno: complexos de anticorpos que fornecem resolução atômica do epítopo e espectrometria de massa de troca de hidrogênio/deutério (HDX-MS). Outros métodos monitoram a ligação do anticorpo a fragmentos de antígeno de peptídeo ou variações mutadas do antígeno, onde a perda de ligação devido a uma modificação de um resíduo de aminoácido dentro da sequência de antígeno é frequentemente considerada uma indicação de um componente de epítopo. Além disso, métodos combinatórios computacionais para mapeamento de epítopos também podem ser utilizados. Estes métodos dependem da capacidade do anticorpo de interesse em isolar por afinidade peptídeos curtos específicos de bibliotecas de peptídeos de phage display combinatórios. Espera-se que os anticorpos possuindo as mesmas sequências VH e VL ou as mesmas sequências CDR1, 2 e 3 se liguem ao mesmo epítopo.

[0123] Os anticorpos que “competem com outro anticorpo pela ligação a um alvo” referem-se a anticorpos que inibem (parcialmente ou completamente) a ligação do outro anticorpo ao alvo. Se dois anticorpos competem entre si pela ligação a um alvo, isto é, se e em que extensão um anticorpo inibe a ligação do outro anticorpo a um alvo, pode ser determinado usando experimentos de competição conhecidos. Em certas modalidades, um anticorpo compete com e inibe a ligação de outro anticorpo a um alvo em pelo menos 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% ou 100%. O nível de inibição ou competição pode ser diferente dependendo de qual anticorpo é o “anticorpo bloqueador” (ou seja, o anticorpo frio que é incubado primeiro com o alvo). Os anticorpos concorrentes ligam-se ao mesmo epítopo, um epítopo sobreposto ou a epítopos adjacentes (por exemplo, como evidenciado por impedimento estérico).

[0124] Os anticorpos anti-C5, ou fragmentos de ligação ao antígeno dos mesmos descritos neste documento, usados nos métodos descritos neste documento, podem ser gerados usando uma variedade de técnicas reconhecidas na técnica. Os anticorpos monoclonais podem ser obtidos por várias técnicas familiares aos especialistas na técnica. Resumidamente, as células do baço de um animal imunizado com um antígeno desejado são imortalizadas, comumente por fusão com uma célula de mieloma (ver, Kohler & Milstein, Eur. J. Immunol. 6: 511-519 (1976)). Métodos alternativos de imortalização incluem transformação com vírus de Epstein Barr, oncogenes ou retrovírus, ou outros métodos bem conhecidos na técnica. Colônias decorrentes de células imortalizadas únicas são classificadas quanto à produção de anticorpos com a especificidade e afinidade desejadas para o antígeno, e o rendimento dos anticorpos monoclonais produzidos por tais células pode ser aumentado por várias técnicas, incluindo injeção na cavidade peritoneal de um hospedeiro vertebrado. Alternativamente, pode-se isolar sequências de DNA que codificam um anticorpo monoclonal ou um fragmento de ligação do mesmo rastreando uma biblioteca de DNA de células B humanas de acordo com o protocolo geral delineado por Huse, et al., Science 246: 1275-1281 (1989). II. Composições

[0125] Além disso, são fornecidas neste documento composições que compreendem um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em uma modalidade, a composição compreende um anticorpo anti-C5 compreendendo os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 em uma região variável da cadeia pesada tendo a sequência indicada em SEQ ID NO: 12 e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 em uma região variável da cadeia leve tendo a sequência indicada em SEQ

ID NO: 8. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 compreende cadeias pesadas e leves com as sequências mostradas em SEQ ID NOs: 14 e 11, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 compreende cadeias pesadas e leves com as sequências mostradas em SEQ ID NOs: 20 e 11, respectivamente.

[0126] As composições podem ser formuladas como uma solução farmacêutica, por exemplo, para administração a um sujeito para o tratamento ou prevenção de um distúrbio associado ao complemento, como aHUS. As composições farmacêuticas incluirão geralmente um carreador farmaceuticamente aceitável. Conforme utilizado neste documento, um "carreador farmaceuticamente aceitável" refere-se a e inclui todos e quaisquer solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos, agentes de retardamento de absorção e isotônico e semelhantes que são fisiologicamente compatíveis. As composições podem incluir um sal farmaceuticamente aceitável, por exemplo, um sal de adição de ácido ou um sal de adição de base, açúcares, carboidratos, polióis e/ou modificadores de tonicidade.

[0127] As composições podem ser formuladas de acordo com métodos padrão. A formulação farmacêutica é uma técnica bem estabelecida e é adicionalmente descrita em, por exemplo, Gennaro (2000) “Remington: The Science and Practice of Pharmacy,” 20th Edition, Lippincott, Williams & Wilkins (ISBN: 0683306472); Ansel et al. (1999) “Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems,” 7th Edition, Lippincott Williams & Wilkins Publishers (ISBN: 0683305727); and Kibbe (2000) “Handbook of Pharmaceutical Excipients American Pharmaceutical Association,” 3rd Edition (ISBN: 091733096X). Em algumas modalidades, uma composição pode ser formulada, por exemplo, como uma solução tamponada em uma concentração adequada e adequada para armazenamento a 2-8°C (por exemplo, 4°C). Em algumas modalidades, uma composição pode ser formulada para armazenamento a uma temperatura abaixo de 0°C (por exemplo, -20°C ou -80°C). Em algumas modalidades, a composição pode ser formulada para armazenamento por até 2 anos (por exemplo, um mês, dois meses, três meses, quatro meses, cinco meses, seis meses, sete meses, oito meses, nove meses, 10 meses, 11 meses, 1 ano, 1 ano e meio ou 2 anos) a 2-8°C (por exemplo, 4°C). Assim, em algumas modalidades, as composições descritas neste documento são estáveis em armazenamento por pelo menos 1 ano a 2-8°C (por exemplo, 4°C).

[0128] As composições farmacêuticas podem assumir uma variedade de formas. Estas formas incluem, por exemplo, formas de dosagem líquidas, semissólidas e sólidas, tais como soluções líquidas (por exemplo, soluções injetáveis e infusíveis), dispersões ou suspensões, comprimidos, pílulas, pós, lipossomas e supositórios. A forma preferencial depende, em parte, do modo de administração e da aplicação terapêutica pretendidas. Por exemplo, as composições contendo uma composição destinada à distribuição sistêmica ou local podem estar na forma de soluções injetáveis ou infusíveis. Consequentemente, as composições podem ser formuladas para administração por um modo parenteral (por exemplo, injeção intravenosa, subcutânea, intraperitoneal ou intramuscular). Conforme utilizado neste documento, "administração parenteral", "administrado parenteralmente" e outras frases gramaticalmente equivalentes, referem-se a modos de administração que não sejam administração enteral e tópica, geralmente por injeção, e incluem, sem limitação, injeção e infusão intravenosa, intranasal, intraocular, pulmonar, intramuscular, intra-arterial, intratecal, intracapsular, intra-orbital, intracardíaca, intradérmica, intrapulmonar, intraperitoneal, trans-traqueal, subcutânea, subcuticular, intra-articular, subcapsular, subaracnoidea, intra-espinhal, epidural, intracerebral, intracraniana, intracarotídea e intraesternal.

[0129] Em uma modalidade, a composição compreende ravulizumabe (também conhecido como ULTOMIRIS®, anticorpo BNJ441 ou ALXN1210) para injeção. Em uma modalidade, a injeção é uma solução estéril, límpida a translúcida,

de cor levemente esbranquiçada, sem conservantes, para uso intravenoso. Em outra modalidade, cada frasco de dose única contém 300 mg de ravulizumabe para injeção a uma concentração de 10 mg/mL com um pH de 7,0. Em outra modalidade, ravulizumabe para injeção requer diluição para uma concentração final de 5 mg/mL. Em outra modalidade, cada mL compreende ainda polissorbato 80 (0,2 mg) (origem vegetal), cloreto de sódio (8,77 mg), fosfato de sódio dibásico (1,78 mg), fosfato de sódio monobásico (0,46 mg) e Água para Injeção. III. Métodos de Tratamento

[0130] São fornecidos neste documento métodos para o tratamento de aHUS em um paciente humano, compreendendo a administração ao paciente de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, em que o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado (ou é para administração) de acordo com um determinado regime de dosagem clínica (ou seja, em uma determinada quantidade de dose e de acordo com um determinado cronograma de dosagem).

[0131] Tal como utilizado neste documento, os termos "indução" e "fase de indução" são usados indistintamente e referem-se à primeira fase de tratamento no ensaio clínico.

[0132] Tal como utilizado neste documento, os termos "manutenção" e "fase de manutenção" são usados indistintamente e referem-se à segunda fase de tratamento no ensaio clínico. Em certas modalidades, o tratamento é continuado enquanto o benefício clínico for observado ou até ocorrer toxicidade incontrolável ou progressão da doença.

[0133] Conforme usado neste documento, o termo "sujeito" ou "paciente" é um paciente humano (por exemplo, um paciente com condição associada ao complemento). Em uma modalidade, a condição associada ao complemento é a síndrome hemolítica urêmica atípica (aHUS). A patologia e as apresentações clínicas de pacientes com aHUS também são direcionadas pela ativação terminal do complemento. Mais especificamente, a ativação de C5 e a desregulação da ativação do complemento levam a danos endoteliais, consumo de plaquetas e eventos microangiopáticos trombóticos (TMA), caracterizados por trombocitopenia, hemólise intravascular mecânica e lesão renal. É importante ressaltar que aproximadamente 20% dos pacientes também apresentam manifestações extra-renais da doença, incluindo sistema nervoso central, cardíaco, gastrointestinal, extremidades distais e envolvimento grave de órgãos sistêmicos (Loirat, et al., Orphanet. J. Rare Dis. 2011;6:60). Os sintomas de aHUS são bem conhecidos por aqueles versados na técnica de doenças raras ou medicina para doenças renais e incluem, por exemplo, hipertensão grave, proteinúria, uremia, letargia/fadiga, irritabilidade, trombocitopenia, anemia hemolítica microangiopática e comprometimento da função renal (por exemplo, insuficiência renal aguda).

[0134] A aHUS pode ser genética, adquirida ou idiopática. A aHUS pode ser considerada genética quando dois ou mais (por exemplo, três, quatro, cinco ou seis ou mais) membros da mesma família são afetados pela doença com pelo menos seis meses de intervalo e a exposição a um agente desencadeador comum foi excluída, ou quando uma ou mais mutações gênicas associadas a aHUS (por exemplo, uma ou mais mutações em CFH, MCP/CD46, CFB ou CFI) são identificadas em um sujeito. Por exemplo, um sujeito pode ter aHUS associada a CFH, aHUS associada a CFB, aHUS associada a CFI ou aHUS associada a MCP. Até 30% de aHUS genéticas estão associadas a mutações em CFH, 12% a mutações em MCP, 5-10% a mutações em CFI e menos de 2% a mutações em CFB. A aHUS genética pode ser multiplex (ou seja, familiar; dois ou mais membros da família afetados) ou simplex (ou seja, uma única ocorrência em uma família). A aHUS pode ser considerada adquirida quando um fator ambiental subjacente (por exemplo, um medicamento, doença sistêmica ou agentes virais ou bacterianos que não resultam em exotoxinas do tipo Shiga) ou gatilho pode ser identificado. A aHUS pode ser considerada idiopática quando nenhum gatilho (genético ou ambiental) é evidente.

[0135] Os exames laboratoriais podem ser realizados para determinar se um sujeito humano tem trombocitopenia, anemia hemolítica microangiopática ou insuficiência renal aguda. A trombocitopenia pode ser diagnosticada por um profissional médico como um ou mais dos seguintes itens: (i) uma contagem de plaquetas inferior a 150.000/mm3 (por exemplo, inferior a 60.000/mm3); (ii) uma redução no tempo de sobrevivência das plaquetas que é reduzido, refletindo o aumento da ruptura das plaquetas na circulação; e (iii) plaquetas gigantes observadas em esfregaço periférico, o que é consistente com ativação secundária de trombocitopoiese. A anemia hemolítica microangiopática pode ser diagnosticada por um profissional médico como um ou mais dos seguintes: (i) concentrações de hemoglobina menores que 10 mg/dL (por exemplo, menores que 6,5 mg/dL); (ii) aumento das concentrações séricas de lactato desidrogenase (LDH) (> 460 U/L); (iii) hiperbilirrubinemia, reticulocitose, hemoglobina livre circulante e concentrações baixas ou indetectáveis de haptoglobina; e (iv) a detecção de glóbulos vermelhos fragmentados (esquistócitos) com o aspecto típico de células de rebarba ou de capacete no esfregaço periférico juntamente com um teste de Coombs negativo. Ver, por exemplo, Kaplan et al. (1992) “Hemolytic Uremic Syndrome and Thrombotic Thrombocytopenic Purpura,” Informa Health Care (ISBN 0824786637) and Zipfel (2005) “Complement and Kidney Disease,” Springer (ISBN 3764371668). As concentrações sanguíneas de C3 e C4 também podem ser usadas como uma medida de ativação ou desregulação do complemento. Além disso, a condição de um sujeito pode ser ainda caracterizada pela identificação do sujeito como portador de uma ou mais mutações em um gene associado a aHUS, como CFI, CFB, CFH ou MCP (supra). Métodos adequados para detectar uma mutação em um gene incluem, por exemplo, sequenciamento de DNA e técnicas de matriz de ácido nucleico. Ver, por exemplo, Breslin et al. (2006) Clin Am Soc Nephrol 1:88-99 and Goicoechea de Jorge et al. (2007) Proc Natl Acad Sci USA 104:240-245.

[0136] Tal como utilizado neste documento, "tratamento eficaz" refere-se ao tratamento que produz um efeito benéfico, por exemplo, melhoria de pelo menos um sintoma de uma doença ou distúrbio. Um efeito benéfico pode assumir a forma de uma melhoria em relação à avaliação inicial, ou seja, uma melhoria em relação a uma medição ou observação feita antes do início da terapia de acordo com o método. No contexto de aHUS, por exemplo, o tratamento eficaz pode se referir ao alívio de um ou mais sintomas selecionados do grupo que consiste em hipertensão grave, proteinúria, uremia, letargia/fadiga, irritabilidade, trombocitopenia, anemia hemolítica microangiopática e/ou comprometimento da função renal (por exemplo, insuficiência renal aguda)).

[0137] O termo "quantidade eficaz" refere-se a uma quantidade de um agente que fornece o resultado biológico, terapêutico e/ou profilático desejado. Esse resultado pode ser redução, melhoria, paliação, diminuição, retardo e/ou alívio de um ou mais dos sinais, sintomas ou causas de uma doença, ou qualquer outra alteração desejada de um sistema biológico. Em um exemplo, uma "quantidade eficaz" é a quantidade de anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, clinicamente comprovada para aliviar pelo menos um sintoma de aHUS (por exemplo, hipertensão grave, proteinúria, uremia, letargia/fadiga, irritabilidade, trombocitopenia, anemia hemolítica microangiopática e comprometimento da função renal (por exemplo, insuficiência renal aguda)). Uma quantidade eficaz pode ser administrada em uma ou mais administrações.

[0138] Em uma modalidade, a dose do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é baseada no peso do paciente. Por exemplo, em uma modalidade, 2400 mg ou 3000 mg do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, são administrados a um paciente com peso ≥ 40 a <60 kg. Em outra modalidade, 2700 mg ou 3300 mg do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, são administrados a um paciente com peso ≥ 60 a <100 kg. Em outra modalidade, 3000 mg ou 3600 mg do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, são administrados a um paciente com peso ≥ 100 kg. Em certas modalidades, os regimes de dosagem são ajustados para fornecer a resposta ideal desejada (por exemplo, uma resposta eficaz).

[0139] Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado por um ou mais ciclos de administração. Em uma modalidade, o ciclo de administração é de 26 semanas. Em uma modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado uma vez no Dia 1 do ciclo de administração, uma vez no Dia 15 do ciclo de administração e a cada oito semanas a partir de então. Em uma modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado a cada oito semanas após o ciclo de administração por um período de extensão de até dois anos (por exemplo, a uma dose de 3000 mg, 3300 mg ou 3600 mg).

[0140] Em outra modalidade, um método de tratamento de um paciente humano com aHUS é fornecido, o método compreendendo a administração ao paciente de uma quantidade eficaz de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo sequências de cadeia pesada de CDR1, CDR2 e CDR3 como indicado em SEQ ID NOs: 19, 18 e 3, respectivamente, e sequências de cadeia leve de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme indicado em SEQ ID NOs: 4, 5 e 6, respectivamente, em que o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado: (a) uma vez no Dia 1 em uma dose de: 2.400 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 2700 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3000 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3000 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 3300 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3600 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg.

[0141] Em outra modalidade, um método de tratamento de um paciente humano com aHUS é fornecido, o método compreendendo a administração ao paciente (por exemplo, durante um ciclo de administração) de uma quantidade eficaz de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo Sequências de cadeia pesada de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme indicado em SEQ ID NOs: 19, 18 e 3, respectivamente, sequências de cadeia leve de CDR1, CDR2 e CDR3 conforme indicado em SEQ ID NOs: 4, 5 e 6, respectivamente, e uma região constante Fc humana variante que se liga ao receptor Fc neonatal humano (FcRn), em que a região constante Fc CH3 humana variante compreende substituições Met-429-Leu e Asn-435-Ser em resíduos correspondentes a metionina 428 e asparagina 434 de uma região constante Fc de IgG humana nativa, cada uma em numeração EU, em que o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado: (a) uma vez no Dia 1 em uma dose de: 2.400 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 2700 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3000 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3000 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 3300 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3600 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg.

[0142] Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado a um paciente com peso ≥ 40 a <60 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 2400 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3000 mg.

[0143] Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado a um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg:

(a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 2700 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3300 mg.

[0144] Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado a um paciente com peso ≥ 100 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 3000 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3600 mg.

[0145] Em algumas modalidades, o paciente não foi tratado anteriormente com um inibidor do complemento (por exemplo, o paciente é um paciente virgem para o tratamento com o inibidor do complemento).

[0146] Em outras modalidades, o paciente foi tratado anteriormente com um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, e é trocado para outro anticorpo anti-C5 durante o curso do tratamento. Por exemplo, em certas modalidades, diferentes anticorpos anti-C5 são administrados durante o curso do tratamento. Em uma modalidade, diferentes anticorpos anti-C5 são administrados durante períodos separados de tratamento e de extensão. Por exemplo, em uma modalidade, o paciente é tratado com eculizumabe durante um período de tratamento (por exemplo, por 26 semanas), seguido por tratamento com outro anticorpo anti-C5 (por exemplo, ravulizumabe, anticorpo 7086, anticorpo 8110, anticorpo 305LO5, anticorpo SKY59 ou anticorpo REGN3918), por exemplo, durante um período de extensão. Em outra modalidade, o eculizumabe é administrado ao paciente em uma dose de 600 mg nos Dias 1, 8, 15 e 22 do ciclo de administração durante uma fase de indução, seguido por uma dose de manutenção de 900 mg de eculizumabe no Dia 19 do ciclo de administração e a cada duas semanas daí em diante (por exemplo, por um total de 26 semanas), seguido por tratamento com ravulizumabe por um período de extensão de até dois anos. Em outra modalidade, o paciente é tratado com ravulizumabe (por exemplo, por 26 semanas), seguido por tratamento com outro anticorpo anti-C5 (por exemplo, eculizumabe, anticorpo 7086, anticorpo 8110,

anticorpo 305LO5, anticorpo SKY59 ou anticorpo REGN3918) durante, por exemplo, um período de extensão.

[0147] Anticorpos anti-C5 alternativos exemplificatvos incluem, mas não estão limitados a, (i) ravulizumabe, (ii), um anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo domínios CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NOs: 21, 22, e 23, respectivamente, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da cadeia leve compreendendo SEQ ID NOs: 24, 25 e 26, respectivamente, (iii) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo uma região variável da cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 27 e uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 28, (iv) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo domínios CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NOs: 29, 30 e 31, respectivamente, e domínios CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia leve compreendendo SEQ ID NOs: 32, 33 e 34, respectivamente, (v) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 35 e um região variável da cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 36, (vi) um anticorpo ou ligação ao antígeno fragmento deste, compreendendo domínios CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NOs: 37, 38 e 39, respectivamente, e domínios CDR1, CDR2 e CDR3 de cadeia leve compreendendo SEQ ID NOs: 40, 41 e 42, respectivamente, (vii) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo uma região variável da cadeia pesada compreendendo a SEQ ID NO: 43 e uma região variável da cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 44, (viii) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo um cadeia pesada compreendendo a SEQ ID NO: 45 e uma cadeia leve compreendendo a SEQ ID NO: 46, (ix) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo uma região variável da cadeia pesada compreendendo a SEQ ID NO:

47 e uma região variável da cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 48, e (x) um anticorpo, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo uma cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 49 e uma cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 50.

[0148] Em algumas modalidades, o paciente foi tratado anteriormente por pelo menos 1 mês, pelo menos 2 meses, pelo menos 3 meses, pelo menos 4 meses, pelo menos 5 meses, pelo menos 6 meses, pelo menos 7 meses, pelo menos 8 meses, pelo menos 9 meses, pelo menos 10 meses, pelo menos 11 meses, pelo menos 12 meses, pelo menos 18 meses, ou pelo menos 24 meses com um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, (por exemplo, eculizumabe) antes mudar para outro anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo (por exemplo, ravulizumabe). Em uma modalidade particular, o paciente foi tratado anteriormente por pelo menos 6 meses com eculizumabe.

[0149] Em outra modalidade, em que um paciente (por exemplo, paciente com aHUS) é tratado com um primeiro anticorpo anti-C5 e, em seguida, trocado para tratamento com um segundo anticorpo anti-C5 diferente, especialmente quando o segundo anticorpo anti-C5 diferente se liga a um epítopo diferente em C5 do que no primeiro anticorpo anti-C5, os cronogramas de administração levam em consideração a meia-vida do primeiro anticorpo anti-C5. Por exemplo, para garantir que o primeiro anticorpo anti-C5 seja depurado (por exemplo, "lavado") do paciente antes que o segundo (diferente) anticorpo anti-C5 seja administrado (por exemplo, para evitar problemas associados à agregação, formação de complexo imune, etc.), a meia-vida do primeiro anticorpo anti-C5 é levada em consideração. Em uma modalidade, o segundo anticorpo anti-C5 (diferente) não é administrado até uma duração de tempo correspondente a 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, 7 ou 7,5 vezes a meia-vida do primeiro anticorpo anti-C5 tenha se passado após a administração final do primeiro anticorpo anti-C5.

[0150] Em outra modalidade, o paciente foi tratado anteriormente com eculizumabe e, em seguida, é trocado para o tratamento com um segundo (diferente) anticorpo anti-C5 (por exemplo, ravulizumabe, anticorpo 7086, anticorpo 8110, anticorpo 305LO5, anticorpo SKY59 ou anticorpo REGN3918). Em uma modalidade em que eculizumabe é o primeiro anticorpo administrado, o segundo anticorpo anti- C5 (diferente) não é administrado, por exemplo, até pelo menos 36, 45, 54, 63, 72, 81, 90, 99, 108, 117, ou 126 dias após a administração final de eculizumabe.

[0151] Em outra modalidade, o paciente foi tratado anteriormente com ravulizumabe e, em seguida, é trocado para o tratamento com um anticorpo anti-C5 diferente (por exemplo, eculizumabe, anticorpo 7086, anticorpo 8110, anticorpo 305LO5, anticorpo SKY59 ou anticorpo REGN3918). Em uma modalidade em que ravulizumabe é o primeiro anticorpo administrado, o segundo (diferente) anticorpo anti-C5 não é administrado, por exemplo, até pelo menos 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 375 ou 400 dias se passaram após a administração final de ravulizumabe.

[0152] Adicionalmente, ou alternativamente, técnicas são usadas para depurar ou aumentar a depuração do primeiro anticorpo anti-C5 antes de mudar para o tratamento com um segundo (diferente) anticorpo anti-C5. Técnicas exemplificativas incluem, mas não estão limitadas a, plasmaférese ou transfusões de sangue. Em outra modalidade, um anticorpo contra o primeiro anticorpo anti-C5 é administrado para depurar ou aumentar a depuração do primeiro anticorpo anti-C5 (por exemplo, um anticorpo anti-eculizumabe, um anticorpo anti-ravulizumabe, um anticorpo anti-7086, um anti -8110 anticorpo, um anticorpo anti-305LO5, um anticorpo anti-SKY59 ou um anticorpo anti-REGN3918) antes de um segundo (diferente) anticorpo anti-C5 ser administrado.

[0153] Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo (por exemplo, ravulizumabe), é administrado a um paciente, em que o ciclo de administração começa pelo menos cerca de duas semanas, pelo menos cerca de três semanas, pelo menos cerca de quatro semanas, pelo menos cerca de seis semanas, pelo menos cerca de sete semanas, ou pelo menos cerca de oito semanas após a última dose de eculizumabe do paciente. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo (por exemplo, ravulizumabe), é administrado a um paciente, em que o tratamento (por exemplo, ciclo de administração) começa pelo menos duas semanas após a última dose de eculizumabe do paciente.

[0154] Em algumas modalidades, os pacientes tratados de acordo com os métodos descritos neste documento foram vacinados contra infecções meningocócicas dentro de 3 anos antes ou no momento do início do tratamento. Em uma modalidade, os pacientes que receberam tratamento menos de 2 semanas após receberem uma vacina meningocócica também são tratados com antibióticos profiláticos apropriados até 2 semanas após a vacinação. Em outra modalidade, os pacientes tratados de acordo com os métodos descritos neste documento são vacinados contra os sorotipos meningocócicos A, C, Y, W135 e/ou B.

[0155] Tal como aqui utilizado, o termo "nível sérico mínimo" refere-se ao nível mais baixo que o agente (por exemplo, o anticorpo anti-C5, ou seu fragmento de ligação ao antígeno) ou medicamento está presente no soro. Em contraste, um "nível sérico de pico" refere-se ao nível mais alto do agente no soro. O "nível sérico médio" refere-se ao nível médio do agente no soro ao longo do tempo.

[0156] Em uma modalidade, os regimes de tratamento descritos são suficientes para manter concentrações séricas mínimas particulares do anticorpo anti- C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Por exemplo, em uma modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti- C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170,

175, 180, 185, 190, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 240, 245, 250, 255, 260, 265, 270, 280, 290, 300, 305, 310, 315, 320, 325, 330, 335, 340, 345, 350, 355, 360, 365, 370, 375, 380, 385, 390, 395 ou 400 µg/ml ou superior. Em uma modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de 100 µg/ml ou superior. Em outra modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti- C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de 150 µg/ml ou superior. Em outra modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de 200 µg/ml ou superior. Em outra modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de 250 µg/ml ou superior. Em outra modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de 300 µg/ml ou superior. Em outra modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, entre 100 µg/ml e 200 µg/ml. Em outra modalidade, o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de cerca de 175 µg/ml.

[0157] Em outra modalidade, para obter uma resposta eficaz, o anticorpo anti- C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e com uma frequência para manter pelo menos 50 μg, 55μg, 60 μg, 65 μg, 70 μg, 75 μg, 80 μg, 85 μg, 90 μg, 95 μg, 100 μg, 105 μg, 110 μg, 115 μg, 120 μg, 125 μg, 130 μg, 135 μg, 140 μg, 145 μg, 150 μg, 155 μg, 160 μg¸ 165 μg, 170 μg¸ 175 μg, 180 μg, 185 μg, 190 μg¸ 195 μg, 200 μg, 205 μg, 210 μg, 215 μg, 220 μg, 225 μg, 230 μg, 235 μg, 240 μg, 245 μg, 250 μg, 255 μg ou 260 μg de anticorpo por mililitro de sangue do paciente. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e frequência para manter entre 50 μg e 250 μg de anticorpo por mililitro de sangue do paciente. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e frequência para manter entre 100 μg e 200 μg de anticorpo por mililitro de sangue do paciente. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e com uma frequência para manter cerca de 175 μg de anticorpo por mililitro do sangue do paciente.

[0158] Em outra modalidade, para obter uma resposta eficaz, o anticorpo anti- C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e com uma frequência para manter uma concentração mínima de C5 livre. Por exemplo, em uma modalidade, o anticorpo anti-C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e com uma frequência para manter uma concentração de C5 livre de 0,2 µg/mL, 0,3 µg/mL, 0,4 µg/mL, 0,5 µg/mL ou embaixo. Em outra modalidade, o anticorpo anti-C5 é administrado ao paciente em uma quantidade e com uma frequência para manter uma concentração de C5 livre de 0,309 a 0,5 µg/mL ou abaixo. Em outra modalidade, o tratamento descrito neste documento reduz a concentração de C5 livre em mais de 99% ao longo do período de tratamento. Em outra modalidade, o tratamento reduz a concentração de C5 livre em mais de 99,5% ao longo do período de tratamento. IV. Resultados

[0159] São fornecidos neste documento métodos para o tratamento de aHUS em um paciente, compreendendo a administração ao paciente de um anticorpo anti- C5 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.

[0160] Os sintomas de aHUS incluem, mas não estão limitados a, hipertensão grave, proteinúria, uremia, letargia/fadiga, irritabilidade, trombocitopenia, anemia hemolítica microangiopática e comprometimento da função renal (por exemplo, insuficiência renal aguda). Os pacientes tratados de acordo com os métodos divulgados neste documento, de preferência, apresentam melhora em pelo menos um sinal de aHUS.

[0161] Em outras modalidades, o tratamento resulta na inibição terminal do complemento.

[0162] Em outras modalidades, o tratamento produz uma mudança em direção aos níveis normais de um biomarcador hematológico relacionado à hemólise selecionado do grupo que consiste em hemoglobina livre, haptoglobina, contagem de reticulócitos, clone de glóbulos vermelhos HPN (RBC) e dímero D.

[0163] Em outra modalidade, o tratamento produz um aumento na estabilização da hemoglobina a partir da avaliação inicial pré-tratamento do paciente. Em outra modalidade, o tratamento resulta em um aumento ≥ 20 g/L na hemoglobina. Em outra modalidade, o tratamento resulta em evitar uma diminuição de ≥ 2 g/dL no nível de hemoglobina da avaliação inicial na ausência de transfusão da avaliação inicial até o Dia 183.

[0164] Em outras modalidades, o tratamento resulta em normalização das 9 plaquetas (≥150 x 10 /L). Em outras modalidades, o tratamento resulta em 9 normalização das plaquetas (≥150 x 10 /L) por pelo menos 28 dias (por exemplo, pelo menos 28 dias, 1 mês, 2 meses, 3 meses, 4 meses, 5 meses, 6 meses, 7 meses, 8 meses, 9 meses, 10 meses, 11 meses, 1 ano ou dois anos).

[0165] Em outras modalidades, o tratamento resulta na normalização de LDH (≤246 U/L). Em outras modalidades, o tratamento resulta na normalização de LDH (≤246 U/L) por pelo menos 28 dias (por exemplo, pelo menos 28 dias, 1 mês, 2 meses, 3 meses, 4 meses, 5 meses, 6 meses, 7 meses, 8 meses, 9 meses, 10 meses, 11 meses, 1 ano ou dois anos).

[0166] Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma melhora de ≥25% da avaliação inicial na creatinina sérica. Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma melhora de ≥25% da avaliação inicial na creatinina sérica por pelo menos 28 dias (por exemplo, pelo menos 28 dias, 1 mês, 2 meses, 3 meses, 4 meses, 5 meses, 6 meses, 7 meses, 8 meses, 9 meses, 10 meses, 11 meses, 1 ano ou dois anos).

[0167] Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma resposta TMA 9 completa (ou seja, normalização das plaquetas (≥150 x 10 /L), normalização LDH (≤246 U/L) e uma melhora ≥25% da avaliação inicial na creatinina sérica). Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma resposta TMA completa por pelo menos 28 dias (por exemplo, pelo menos 28 dias, 1 mês, 2 meses, 3 meses, 4 meses, 5 meses, 6 meses, 7 meses, 8 meses, 9 meses, 10 meses, 11 meses, 1 ano ou dois anos).

[0168] Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma Resposta de 9 TMA completa modificada (ou seja, normalização de plaquetas (≥150 x 10 /L), normalização de LDH (≤246 U/L) e o paciente está fora de diálise se estivesse em diálise na avaliação inicial ou uma melhora ≥25% da avaliação inicial na creatinina sérica para um paciente que estava sem diálise na avaliação inicial). Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma Resposta de TMA completa modificada por pelo menos 28 dias (por exemplo, pelo menos 28 dias, 1 mês, 2 meses, 3 meses, 4 meses, 5 meses, 6 meses, 7 meses, 8 meses, 9 meses, 10 meses, 11 meses, 1 ano ou dois anos).

[0169] Em outras modalidades, o tratamento produz uma redução na necessidade de transfusões de sangue. Em outra modalidade, o tratamento produz um aumento superior a 70% na prevenção de transfusões. Em outra modalidade, o tratamento resulta em evitar a transfusão da avaliação inicial ao Dia 183.

[0170] Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma eliminação da hemólise de escape durante o período de tratamento. Em outra modalidade, o tratamento resulta em uma redução da hemólise de escape em comparação com a quantidade da avaliação inicial pré-tratamento da hemólise de escape.

[0171] Em outras modalidades, o tratamento produz uma redução nos principais eventos vasculares adversos (MAVEs).

[0172] Em outras modalidades, o tratamento produz uma alteração na qualidade de vida a partir da avaliação inicial, conforme avaliado por meio da Functional Assessment of Chronic Illness Therapy (FACIT)-Fatigue Scale (Escala de Fadiga) versão 4 e pelo European Organisation for Research and Treatment of Cancer, Quality of Life Questionnaire-Core 30 Scale (Questionário de Qualidade de Vida). Em uma modalidade, o tratamento produz uma mudança da avaliação inicial na qualidade de vida, conforme avaliado por meio da Escala de Fadiga FACIT por um ou mais (por exemplo, 1, 2 ou 3) pontos. Em outra modalidade, o tratamento produz uma mudança da avaliação inicial na qualidade de vida conforme avaliado por meio da Escala de Fadiga FACIT em 3 pontos, 150 dias ou mais (por exemplo, 150 dias, 151 dias, 152 dias, 153 dias, 154 dias, 155 dias, 156 dias, 157 dias, 158 dias, 159 dias, 160 dias, 161 dias, 162 dias, 163 dias, 164 dias, 165 dias, 166 dias, 167 dias, 168 dias, 169 dias, 170 dias, 171 dias, 172 dias, 173 dias, 174 dias, 175 dias, 176 dias, 177 dias, 178 dias, 179 dias, 180 dias, 181 dias, 182 dias 183 dias, 184 dias, 185 dias, 186 dias, 187 dias, 188 dias, 189 dias, 190 dias, 191 dias, 192 dias, 193 dias, 194 dias, 195 dias, 196 dias, 197 dias, 198 dias, 199 dias, 200 dias, 205 dias, 210 dias, 215 dias, 220 dias ou 225 dias) após o início do tratamento.

[0173] O estágio da doença renal crônica (CKD) é classificado com base no Estágio da doença renal crônica da National Kidney Foundation. Os estágios da CKD e os valores da taxa de filtração glomerular estimada (eGFR) correspondentes são os seguintes: Estágio 1: eGFR >=90 (normal), Estágio 2: eGFR 60-89, Estágio 3A: eGFR 45-59, Estágio 3B: eGFR 30 -44, Estágio 4: eGFR 15-29 e Estágio 5: eGFR <15 (incluindo diálise: Estágio final). O estágio 1 é considerado a melhor categoria. O estágio 5 é considerado a pior categoria. Uma melhora na eGFR (por exemplo,> 15) corresponde a uma melhora no estágio de CKD (por exemplo, um estágio de CKD inferior). Consequentemente, em outras modalidades, a doença renal crônica (CKD) do paciente melhora em um ou mais estágios após o início do tratamento. Por exemplo, a CKD do paciente melhora em um, dois, três, quatro ou cinco estágios). Em outra modalidade, a CKD do paciente melhora em um ou mais estágios 150 dias ou mais (por exemplo, 150 dias, 151 dias, 152 dias, 153 dias, 154 dias, 155 dias, 156 dias, 157 dias, 158 dias, 159 dias, 160 dias, 161 dias, 162 dias, 163 dias, 164 dias, 165 dias, 166 dias, 167 dias, 168 dias, 169 dias, 170 dias, 171 dias, 172 dias, 173 dias, 174 dias, 175 dias, 176 dias, 177 dias, 178 dias, 179 dias, 180 dias, 181 dias, 182 dias 183 dias, 184 dias, 185 dias, 186 dias, 187 dias, 188 dias, 189 dias, 190 dias, 191 dias, 192 dias, 193 dias, 194 dias, 195 dias, 196 dias, 197 dias, 198 dias, 199 dias, 200 dias, 205 dias, 210 dias, 215 dias, 220 dias ou 225 dias) após o início do tratamento.

[0174] Em outras modalidades, o tratamento resulta em um aumento no eGFR em comparação com a avaliação inicial. Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma mudança em direção aos níveis normais de eGFR (por exemplo, ≥ 90). Em outras modalidades, o tratamento resulta em um aumento na eGFR em comparação com a avaliação inicial e a CKD do paciente melhora em um ou mais estágios. Em outras modalidades, o tratamento resulta em uma mudança em direção aos níveis normais de eGFR (por exemplo, ≥ 90) em comparação com a linha de base e a CKD do paciente melhora em um ou mais estágios.

[0175] Em outras modalidades, o tratamento resulta em um valor de compensação de tempo EQ-5D-3L definido para os Estados Unidos (US TTO) de > 0,94. V. Kits e formas de dosagem unitária

[0176] Também são fornecidos neste documento kits que incluem uma composição farmacêutica contendo um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, como ravulizumabe, e um carreador farmaceuticamente aceitável, em uma quantidade terapeuticamente eficaz adaptada para uso nos métodos descritos neste documento. Os kits opcionalmente também podem incluir instruções, por exemplo, compreendendo cronogramas de administração, para permitir que um especialista (por exemplo, um médico, enfermeiro ou paciente) administre a composição nele contida para administrar a composição a um paciente com aHUS. O kit também pode incluir uma seringa.

[0177] Opcionalmente, os kits incluem vários pacotes das composições farmacêuticas de dose única, cada um contendo uma quantidade eficaz do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, para uma única administração de acordo com os métodos fornecidos acima. Instrumentos ou dispositivos necessários para administrar a(s) composição(ões) farmacêutica(s) também podem ser incluídos nos kits. Por exemplo, um kit pode fornecer uma ou mais seringas pré-cheias contendo uma quantidade do anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.

[0178] Em uma modalidade, a presente invenção fornece um kit para o tratamento de aHUS em um paciente humano, o kit compreendendo: (a) uma dose de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreendendo os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável da cadeia pesada com a sequência indicada em SEQ ID NO: 12 e domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável da cadeia leve tendo a sequência apresentada em SEQ ID NO: 8; e (b) instruções para usar o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de acordo com qualquer um dos métodos descritos neste documento.

[0179] Em uma modalidade, o kit compreende uma dose de um anticorpo anti- C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, em que o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado a um paciente com peso ≥ 40 a <60 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 2.400 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3000 mg.

[0180] Em outra modalidade, o kit compreende uma dose de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, em que o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado a um paciente com peso ≥ 60 a <100 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 2700 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3300 mg.

[0181] Em outra modalidade, o kit compreende uma dose de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, em que o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado a um paciente com peso ≥ 100 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 3000 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3600 mg.

[0182] Os exemplos a seguir são meramente ilustrativos e não devem ser interpretados como limitando o escopo desta divulgação de forma alguma, pois muitas variações e equivalentes se tornarão aparentes para aqueles versados na técnica após a leitura da presente divulgação.

[0183] O conteúdo de todas as referências, lançamentos no Genbank, as patentes e pedidos de patente publicados citados ao longo deste pedido são expressamente incorporados ao presente documento por referência.

EXEMPLOS EXEMPLO 1: Estudo de Fase 3, Braço Único, Multicêntrico de ravulizumabe (ALXN1210) em Pacientes Adultos Não Expostos a Inibidor de Complemento com Síndrome Hemolítica Urêmica Atípica (aHUS)

[0184] Um estudo de braço único de ravulizumabe (ALXN1210-aHUS-311) é realizado em pacientes adultos e adolescentes não expostos inibidor de complemento com síndrome hemolítica urêmica atípica (aHUS). A Figura 1 ilustra o projeto do estudo.

[0185] A aHUS é uma microangiopatia trombótica (TMA), mais frequentemente causada por mutações nos genes que codificam proteínas envolvidas na via alternativa do complemento (APC) ou por autoanticorpos contra proteínas reguladoras de APC (Noris, et al., Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 2010; 5:1844–59). Pacientes com SHUa correm o risco de manifestações de doença com risco de morte, resultantes de dano endotelial, incluindo trombocitopenia, hemólise intravascular, insuficiência renal aguda e dano ao tecido extra-renal. É importante ressaltar que aproximadamente 20% dos pacientes apresentam manifestações extra-renais da doença, incluindo sistema nervoso central, cardíaca, GI, extremidade distal e envolvimento de órgão sistêmico grave (Loirat, et al., Orphanet J. Rare Dis. 2011; 6: 60 e Brodsky, Blood. 2015; 126: 2459-65). Antes da disponibilidade de eculizumabe, as taxas de mortalidade entre pacientes com aHUS eram de até 15% durante a fase aguda de progressão da doença (Noris, et al., Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 2010; 5:1844- 59) e Sellier-Leclerc, J. Am. Soc. Nephrol. 2007; 18: 2392-2400). Até 50% dos pacientes progrediram para doença renal em estágio terminal (ESKD), geralmente dentro de um ano do início da doença, e necessitaram de diálise ou transplante renal para manter a vida. A ativação crônica e descontrolada do complemento terminal, especificamente, a ativação do componente 5 do complemento (C5) e a desregulação da atividade do complemento, é central para a patogênese da aHUS e as manifestações devastadoras desta doença. Como resultado, o bloqueio direcionado de C5, com inibição seletiva da geração de C5a e C5b-9, representa um importante mecanismo terapêutico de tratamento.

1. Objetivos

[0186] O objetivo primário do estudo é avaliar a eficácia de ravulizumabe em pacientes adolescentes e adultos com aHUS não expostos a tratamento inibidor do complemento para inibir a TMA mediada pelo complemento que se caracteriza por trombocitopenia, hemólise e comprometimento renal.

[0187] Os objetivos secundários do estudo são (1) caracterizar a segurança e tolerabilidade do ravulizumabe nesta população de pacientes, (2) avaliar a eficácia do ravulizumabe através de medidas adicionais (por exemplo, status de necessidade de diálise, tempo para resposta de TMA completa, status de resposta de TMA completa ao longo do tempo, valor observado e alteração da linha de referência na taxa de filtração glomerular estimada (eGFR), estágio de doença renal crônica (CKD) (conforme avaliado em dias selecionados e classificado como melhorado, estável (sem alteração) ou piorado em comparação com a linha de referência), valor observado e alteração da linha de referência nos parâmetros hematológicos (plaquetas, LDH, hemoglobina), aumento na hemoglobina de ≥ 20 g/L da linha de referência (sustentada por pelo menos 2 medições consecutivas obtidas com pelo menos 4 semanas de intervalo), alteração da linha de referência na qualidade de vida (QoL) (conforme medido pelas dimensões EuroQol 5 nível 3 (EQ-5D-3L; todos os pacientes), (questionários de) Avaliação Funcional da Terapia de Doença Crônica (FACIT)-Fadiga versão 4 (pacientes < 18 anos de idade) e FACIT-Fadiga Pediátrica (pacientes <18 anos de idade), (3) caracterizar a PK/farmacodinâmica (PD) de ravulizumabe por alterações na concentração sérica de ravulizumabe ao longo do tempo e alterações nas concentrações de C5 livre ao longo do tempo, e (4) avaliar a segurança e eficácia a longo prazo do ravulizumabe.

2. Critérios de avaliação

[0188] Os critérios de avaliação primário, secundário e de segurança para o estudo estão resumidos na Figura 2. O critério de avaliação primário de eficácia é a Resposta de TMA Completa durante o Período de Avaliação inicial de 26 semanas, conforme evidenciado pela normalização dos parâmetros hematológicos (contagem de plaquetas e LDH) e ≥ 25 % de melhora na creatinina sérica da linha de referência e confirmada por 2 medições consecutivas obtidas com pelo menos 4 semanas de intervalo.

[0189] Os critérios de avaliação de eficácia secundários do estudo são os seguintes: A. Status de necessidade de diálise; B. Tempo para Resposta de TMA Completa; C. Status da Resposta de TMA Completa ao longo do tempo; D. Valor observado e alteração da linha de referência na eGFR; E. Estágio de CKD, avaliado pelo Pesquisador em dias alvo selecionados e classificado como melhorado, estável (sem alteração) ou piorado em relação à linha de referência; F. Valor observado e alteração da linha de referência dos parâmetros hematológicos (plaquetas, LDH, hemoglobina); G. Aumento na hemoglobina de ≥ 20 g/L da linha de referência, sustentado por pelo menos 2 medições consecutivas obtidas com pelo menos 4 semanas de intervalo; H. Alteração da linha de referência na QoL, medida pelos questionários EQ- 5D-3L (todos os pacientes), FACIT Fadiga versão 4 (pacientes ≥ 18 anos de idade) e FACIT de Fadiga Pediátrica (pacientes <18 anos).

[0190] Os critérios de avaliação Farmacocinéticos (PK) e Farmacodinâmicos (PD) deste estudo são alterações na concentração sérica de ravulizumabe ao longo do tempo e alterações nas concentrações de C5 livre ao longo do tempo.

[0191] A segurança e tolerabilidade do ravulizumabe são avaliadas por exames físicos, sinais vitais, eletrocardiogramas (ECGs), avaliações laboratoriais e incidência de AEs e SAEs. A proporção de pacientes que desenvolvem anticorpos antidrogas (ADAs) também será avaliada.

[0192] Os biomarcadores exploratórios do efeito PD incluem, mas não se limitam a, alteração da linha de referência nos níveis de marcadores de desregulação do complemento (por exemplo, Fator Ba), inflamação vascular (por exemplo, receptor de fator de necrose tumoral solúvel 1 [sTNFR1]), ativação/dano endotelial (por exemplo, molécula de adesão vascular solúvel 1 [sVCAM1], trombomodulina), coagulação (por exemplo, dímero D) e lesão renal (por exemplo, cistatina C). Avaliações adicionais podem incluir medições de excreção de ravulizumabena urina, hemólise de glóbulos vermelhos de galinha (cRBC), C5 total, autoanticorpos para complementar proteínas (por exemplo, anti-fator H) e atividade APC (por exemplo, teste de Ham modificado, ensaios de deposição de complemento).

[0193] A genética exploratória pode ser realizada para investigar variantes genéticas em genes que sabidamente estão associados com aHUS, bem como para identificar novas variantes genéticas associadas a aHUS, desregulação do complemento, ou metabolismo ou eficácia de ravulizumabe. Os pacientes podem optar por não fornecer uma amostra para genética exploratória e ainda assim participar do estudo.

3. Resumo do Projeto do Estudo

[0194] O estudo ALXN1210-aHUS-311 é um estudo multicêntrico de fase 3, aberto, de braço único, para avaliar a segurança e eficácia de ravulizumabe administrado por infusão intravenosa (IV) a pacientes adolescentes (12 a < 18 anos de idade) e adultos (≥ 18 anos) com aHUS. O estudo está inscrevendo aproximadamente 55 pacientes para receber ravulizumabe. A Figura 1 ilustra o projeto do estudo. Nenhum dos pacientes foi exposto a tratamento com inibidores de complemento e incluem pelo menos 6 e até 10 pacientes adolescentes (12 a <18 anos de idade na Triagem) e pelo menos 10 e até 25 pacientes com transplantes renais anteriores.

[0195] O estudo consiste em um Período de Triagem de até 7 dias, um Período de Avaliação Inicial de 26 semanas e um Período de Extensão de até 2 anos. As dosagens são baseadas no peso corporal do paciente registrado na última consulta de estudo (Tabela 5). Os pacientes recebem uma dose de ataque de ravulizumabe IV

(2.400 mg para pacientes pesando ≥ 40 a <60 kg, 2700 mg para pacientes pesando ≥ 60 a <100 kg, 3000 mg para pacientes pesando ≥ 100 kg) no Dia 1, seguido por doses de manutenção de ravulizumabe IV (3000 mg para pacientes pesando ≥ 40 a <60 kg, 3300 mg para pacientes pesando ≥ 60 a <100 kg, 3600 mg para pacientes pesando ≥ 100 kg) no Dia 15 e uma vez a cada 8 semanas (q8w) daí em diante em um total de 26 semanas de tratamento. Após o Período de Avaliação Inicial, os pacientes entram em um Período de Extensão e recebem ravulizumabe até que o produto seja registrado ou aprovado (de acordo com os regulamentos específicos do país) ou por até 2 anos, o que ocorrer primeiro. O final do ensaio é definido como a última consulta do último paciente.

[0196] Este estudo de braço único, aberto, de Fase 3 avalia a segurança e eficácia do tratamento com ravulizumabe. Embora nenhuma análise de comparação formal esteja planejada para este estudo, os resultados dos pacientes tratados com ravulizumabe são avaliados no contexto dos resultados observados em um grupo de controle histórico de pacientes tratados com eculizumabe. O grupo de controle histórico é composto por pacientes com aHUS que foram tratados com eculizumabe nos estudos prospectivos de registro C08-002A/B, C10-003 e C10-004, para os quais o projeto do estudo e as características de conduta de interesse que podem influenciar o tamanho do efeito foram semelhante às do estudo atual. Além disso, o grupo de controle é restrito a pacientes com ≥ 12 anos de idade e 4 semanas ou menos em PE/PI antes do tratamento com eculizumabe para se alinhar ainda mais com os critérios de elegibilidade para o estudo atual.

[0197] O Cronograma de Avaliações para Triagem e o Período de Avaliação Inicial são mostrados na Tabela 1. O Cronograma de Avaliações para o Período de Extensão é mostrado na Tabela 2. Consultas adicionais (não marcadas) fora das consultas especificadas são permitidas a critério do Pesquisador. Os procedimentos, testes e avaliações são realizados a critério do Pesquisador. Quaisquer testes,

procedimentos ou avaliações realizados nas Consultas Não Marcadas são registrados nos Formulários de Relatório de Caso eletrônico (eCRFs). Análises de laboratório local ou laboratório central são usados para testes de Consulta Não Marcada. No entanto, se forem usados testes de laboratório local, amostras duplicadas são coletadas na Consulta Não Marcada para testes no laboratório central. Tabela 1: Cronograma de Consultas e Avaliações do Estudo: Triagem até o Final do Período de Avaliação Inicial Período Triagem Período de Avaliação Inicial Dia do Estudo –7 a –1 1 8 15 22 29 43 57 71 85 99 113127141155169183v/E

T Janela (dia) N/A 2 3 3 3 3 3 3 3 5 5 5 5 5 5 2 Consentimento X informado Confirmação ou X administração de vacinação meningocócicaa Histórico X médico e informações demográficas ADAMTS13 X Teste de HIV Xb Teste HUS de X pneumonia estreptocócica Teste ST-HUSc X Altura X Peso X X X X X X X X X X X X X X X X X Teste de X X X X X X gravidez d Questionário X X X X X X FACIT- Fadiga/Questio nário FACIT- Fadiga Pediátricae,f Questionário X X X X X X EQ-5D-3L f Questionário de X X X X X X X X X X X X X X X X sintomas de aHUS relatados

Período Triagem Período de Avaliação Inicial Dia do Estudo –7 a –1 1 8 15 22 29 43 57 71 85 99 113127141155169183v/E

T Janela (dia) N/A 2 3 3 3 3 3 3 3 5 5 5 5 5 5 2 pelo pacientef Questionário de X X X X X uso de recursos do pacientef Exame físico X X Exame físico X X X X X X X X X X X X X X X abreviadog Avaliação de X X X X X X X X X X X X X X X X X sinais ou sintomas extra- renais de aHUS Sinais vitaish X X X X X X X X X X X X X X X X X ECG de 12 X X X derivações de segurançai Químicaj Xu X X X X X X X X X X X X X X X X Isoenzimas X X X X X X X X X X X X X X X X X LDH k Hematologia Xu X X X X X X X X X X X X X X X X incluindo hemoglobina livre e coagulaçãol Urinálise eX X X X X X X X X química da urina Amostragem Xm Xm Xm X X X X X Xm Xm Xm Xm Xm Xm PK/PDm m m m m m Amostra de X X X X urina n Atividade X X X X X X X X exploratória de APCo Biomarcadores X X X X X exploratóriosp Amostra X genética exploratóriaq Imunogenicidad X X X X e (ADA)r Revisar o X X X X X X X X X X X X X X X X cartão de segurança

T Janela (dia) N/A 2 3 3 3 3 3 3 3 5 5 5 5 5 5 2 Medicamentos ← Monitorar continuamente → concomitantess Registrar a ← Monitorar continuamente → troca de plasma Eventos ← Monitorar continuamente → Adversos Administração X X X X ALXN1210t Abreviações: ADA = anticorpo antidrogas; ADAMTS13 = uma desintegrina e metaloproteinase com um motivo trombospondina tipo 1, membro 13; aHUS = síndrome hemolítica urêmica atípica APC = via alternativa do complemento; ECG = eletrocardiograma; EQ-5D-3L = dimensões EuroQol5 nível 3; ET = encerramento antecipado; FACIT = avaliação funcional da terapia de doença crônica; HUS = síndrome hemolítica urêmica; LDH = lactato desidrogenase; N/A = não aplicável; PD = farmacodinâmica; PK = farmacocinética; QoL = qualidade de vida; ST-HUS = síndrome hemolítica urêmica relacionada à toxina Shiga. a Todos os pacientes foram vacinados contra infecções meningocócicas nos 3 anos anteriores ou no momento de iniciar a droga em estudo. Os pacientes que iniciam o tratamento com a droga em estudo menos de 2 semanas após receberem uma vacina meningocócica recebem tratamento com antibióticos profiláticos apropriados até 2 semanas após a vacinação. Os pacientes que não foram vacinados antes do início do tratamento com ravulizumabe recebem antibióticos profiláticos antes de e por pelo menos 2 semanas após a vacinação meningocócica. b Triagem de Vírus da Imunodeficiência Humana Tipo 1 e Vírus da Imunodeficiência Humana Tipo 2. c Amostra de fezes para imunoensaio enzimático da toxina Shiga. d Apenas pacientes do sexo feminino com potencial para engravidar. Teste de gravidez de sangue na Triagem e no Dia 183; teste de gravidez de urina em todos os outros momentos exigidos.

Um resultado de teste de urina negativo é necessário antes de administrar a droga em estudo a pacientes do sexo feminino com potencial para engravidar nas possíveis consultas do estudo. e FACIT Fadiga versão 4 é usado para pacientes ≥ 18 anos de idade na Triagem.

FACIT Fadiga Pediátrico é usado para pacientes < 18 anos de idade na Triagem. f Nos dias de dosagem, as avaliações relatadas pelo paciente são realizadas antes da dosagem. g O exame físico abreviado consiste em um exame relevante do sistema corporal com base no julgamento do Pesquisador (ou pessoa designada) e nos sintomas do paciente.

Pelo menos 1 sistema corporal é verificado em um exame abreviado. h As medições dos sinais vitais são feitas após o paciente estar em repouso por pelo menos 5 minutos e incluem BP sistólica e diastólica (milímetros de mercúrio [mmHg]), oximetria de pulso, frequência cardíaca (batimentos/minuto), frequência respiratória (respirações/minuto) e temperatura oral ou timpânica (graus Celsius [°C] ou graus Fahrenheit [°F]). Nos dias de dosagem, os sinais vitais são medidos pré- dose. i O ECG de 12 derivações único é feito na Triagem, pré-dose no Dia 57 e no Dia 183. Os pacientes ficam em decúbito dorsal por aproximadamente 5 a 10 minutos antes da realização do ECG e permanecem em posição de decúbito dorsal, mas acordados durante a realização do ECG. j As medições laboratoriais de segurança clínica são coletadas pré-dose nos dias de dosagem.

A LDH para elegibilidade é determinada a partir da avaliação química.

Os níveis de hormônio folículo estimulante são medidos durante a Triagem apenas para confirmar o estado de pós-menopausa. k A amostra de soro para teste da isoenzima LDH é coletada apenas em locais selecionados em qualquer/todos os momentos antes da dosagem de ravulizumabe , dependendo da disponibilidade do teste de amostra. l Avaliação de segurança, bem como os critérios de avaliação primários e secundários. m Amostras de soro para análises de PK/PD são coletadas pré-dose (dentro de 0,5 horas antes do início da infusão) e ao fim da infusão (EOI) (dentro de 0,5 horas após o EOI) nos Dias 1, 15, 71 e 127; e a qualquer momento nos Dias 29, 43, 57, 85, 99, 113, 141, 155 e 169; e pré-dose no Dia 183 (observe que amostras adicionais para PK/PD são coletadas no Dia 183 como parte do Período de Extensão). As amostras de fim de infusão são retiradas do braço oposto que não passou por infusão do paciente.

Todos os horários de coleta são registrados no eCRF. n Amostras de urina para medição da droga são coletadas e ao fim da infusão (EOI) (dentro de 0,5 horas após o EOI) nos Dias 1, 15 e 71; e a qualquer momento no Dia 29. o A coleta de amostras de soro é feita pré-dose nos dias de dosagem e nos dias sem dosagem a qualquer momento do dia.

Todos os horários de coleta são registrados no eCRF. p A coleta de soro, plasma e urina para análise exploratória de biomarcadores é coletada na Linha de Referência e em momentos após o tratamento logo antes da dose de ravulizumabe . q Uma única coleta de sangue total dos pacientes que consentem com o teste genético pode ser coletada a qualquer momento durante o estudo. r As amostras de soro ADA são coletadas pré-dose nos Dias 1, 71 e 127. A coleta do Dia 183 ocorre antes da primeira dose no Período de Extensão.

Todos os horários de coleta são registrados no eCRF.

Se os resultados do teste forem positivos, o teste é repetido a cada 3 meses até que os resultados sejam negativos ou estabilizem, com base no título medido e nas avaliações de segurança.

s Medicamentos concomitantes devem ser coletados em todas as consultas do estudo e comparados com a lista de medicamentos proibidos. t A dose de ravulizumabe é baseada no peso corporal registrado na última consulta de estudo do paciente. u Análise pelo laboratório local ou pelo laboratório central pode ser usada para determinar a elegibilidade na Triagem.

No entanto, se forem usados testes laboratoriais locais, amostras duplicadas para LDH, contagem de plaquetas, hemoglobina e creatinina sérica são coletadas nesta consulta para teste no laboratório central. v A avaliação do critério de avaliação primário da eficácia é antes da dosagem no Dia 183. A dosagem no Dia 183 é o início do Período de Extensão.

Tabela 2: Cronograma de Consultas e Avaliações do Estudo: Período de Extensão Período Período de Extensão Dia do Estudo 183l 239 295 351 407 463519 575 631 687 743 799855 911/ET/EOS Janela (dia) 2 7 7 7 7 7 7 7 7 7 7 7 7 7 Peso X X X X X X X X X X X X X Teste de gravidez a X X X X X X X X X X X X X Questionário X X X X FACIT- Fadiga/Questionário FACIT-Fadiga Pediátricab,c Questionário EQ- X X X X 5D-3Lc Questionário de X X X X X X X X X X X X X sintomas de aHUS relatados pelo pacientec Questionário de uso X X X X X X X X X X X X X de recursos do pacientec Exame físico X Exame físico X X X X X X X X X X X X abreviadod Avaliação de sinais X X X X X X X X X X X X X ou sintomas extra- renais de aHUS

Período Período de Extensão Dia do Estudo 183l 239 295 351 407 463519 575 631 687 743 799855 911/ET/EOS Janela (dia) 2 7 7 7 7 7 7 7 7 7 7 7 7 7 Sinais vitais e X X X X X X X X X X X X X ECG de 12 X derivações de segurançaf Química X X X X X X X X X X X X X Hematologia e X X X X X X X X X X X X X coagulaçãog Urinálise e química X X X X X X X X X X X X X da urina Amostragem Xh Xh Xh Xh Xh PK/PD h

Biomarcadores X X X X X X X X X X X X X exploratórios i

Imunogenicidade Xj Xj Xj Xj (ADA)j Revisar o cartão de X X X X X X X X X X X X X segurança Medicamentos ← Monitorar continuamente → concomitantes k

Registrar a troca de ← Monitorar continuamente → plasma Eventos Adversos ← Monitorar continuamente → Administração de Xl X X X X X X X X X X X X ALXN1210l

Abreviações: ADA = anticorpo antidrogas; aHUS = síndrome hemolítica urêmica atípica; ECG = eletrocardiograma; EOS = fim do estudo; EQ-5D = EuroQol de cinco dimensões; ET = fim antecipado; FACIT = avaliação funcional da terapia de doença crônica; PD = farmacodinâmica; PK = farmacocinética; QoL = qualidade de vida a Apenas pacientes do sexo feminino com potencial para engravidar.

Teste de gravidez de sangue somente no ET; teste de gravidez de urina em todos os outros momentos exigidos.

Um resultado de teste de urina negativo é necessário antes de administrar ravulizumabe a pacientes do sexo feminino com potencial para engravidar nas consultas do estudo indicadas.

b FACIT Fadiga versão 4 é usado para pacientes ≥ 18 anos de idade na Triagem.

FACIT Fadiga Pediátrico é usado para pacientes < 18 anos de idade na Triagem. c Nos dias de dosagem, as avaliações relatadas pelo paciente são realizadas antes da dosagem. d O exame físico abreviado consiste em um exame relevante do sistema corporal com base no julgamento do Pesquisador e nos sintomas do paciente. e As medições dos sinais vitais são feitas após o paciente estar em repouso por pelo menos 5 minutos e incluem BP sistólica e diastólica (milímetros de mercúrio [mmHg]), oximetria de pulso, frequência cardíaca (batimentos/minuto), frequência respiratória (respirações/minuto) e temperatura oral ou timpânica (graus Celsius [°C] ou graus Fahrenheit [°F]). Nos dias de dosagem, os sinais vitais são medidos pré- dose. f O ECG de 12 derivações único é feito no Dia 911 ou ET.

Os pacientes devem ficar em decúbito dorsal por aproximadamente 5 a 10 minutos antes da realização do ECG e permanecem em posição de decúbito dorsal, mas acordados durante a realização do ECG. g Avaliação de segurança, bem como os critérios de avaliação primários e secundários. h Amostras de soro para análise PK/PD são coletadas pré-dose (dentro de 0,5 horas antes do início da infusão) e EOI (dentro de 0,5 horas após o EOI) nos Dias 351, 575 e 743; EOI (dentro de 0,5 horas após o EOI) no Dia 183; e a qualquer momento no Dia 911 ou ET.

As amostras de fim de infusão são retiradas do braço oposto que não passou por infusão do paciente.

Todos os horários de coleta são registrados no eCRF. i Soro, plasma e urina para análise exploratória de biomarcadores são coletados nos momentos indicados logo antes da dose de ravulizumabe; e a qualquer momento no Dia 911 ou ET. Todos os horários de coleta são registrados no eCRF. j Uma amostra de soro pré-dose é coletada nos Dias 351, 575 e 743. Uma amostra de soro também é coletada a qualquer momento no Dia 911 ou ET. Todos os horários de coleta são registrados no eCRF. Se os resultados do teste forem positivos, o teste é repetido a cada 3 meses até que os resultados sejam negativos ou estabilizem, com base no título medido e nas avaliações de segurança. k Medicamentos concomitantes devem ser coletados em todas as consultas do estudo e comparados com a lista de medicamentos proibidos. l O Período de Extensão começa no início da dosagem do Dia 183. A dose de ravulizumabe é baseada no peso corporal registrado na última consulta de estudo do paciente.

4. População do Estudo

[0198] Um total de aproximadamente 55 pacientes com aHUS documentada são inscritos e designados para tratamento com ravulizumabe em aproximadamente 200 centros de investigação em todo o mundo. O estudo envolve pelo menos 6 e até 10 pacientes adolescentes (12 a <18 anos de idade na triagem) e pelo menos 10 e até 25 pacientes com transplantes renais anteriores.

[0199] Os indivíduos que não atenderem aos critérios de participação neste estudo (falha na triagem) podem ser verificados novamente. Os pacientes podem passar por uma nova triagem no máximo 2 vezes. A aprovação prospectiva de desvios de protocolo para critérios de recrutamento e inscrição, também conhecidos como dispensas ou isenções de protocolo, não é permitida.

[0200] Um resumo dos critérios de inclusão e exclusão é apresentado na Figura 3. Os pacientes são elegíveis para inscrição no estudo se atenderem a todos os critérios a seguir e nenhum dos critérios de exclusão:

[0201] Pacientes do sexo masculino ou feminino ≥ 12 anos de idade e pesando ≥ 40 kg no momento do consentimento.

 Evidência de TMA, incluindo trombocitopenia, evidência de hemólise e disfunção renal, com base nos seguintes achados laboratoriais da Consulta de Triagem: Contagem de plaquetas < 150.000 por microlitro (µL) e LDH ≥ 1,5 × limite superior do normal (ULN) e hemoglobina ≤ limite inferior do normal (LLN) para a idade e sexo, e nível de creatinina sérica ≥ ULN em adultos (≥ 18 anos de idade), ou ≥ 97,5º de porcentagem para a idade na Triagem em adolescentes (12 a < 18 anos de idade) (pacientes que necessitam de diálise para lesão renal aguda também são elegíveis).  Entre os pacientes com transplante renal: histórico conhecido de aHUS antes do transplante renal atual, ou sem histórico conhecido de aHUS e evidência persistente de TMA após a suspensão da dosagem de inibidor de calcineurina ([CNI]; por exemplo, ciclosporina, tacrolimo) ou mamífero alvo de inibidor de rapamicina ([mTORi]; por exemplo, sirolimo, everolimo) por um mínimo de 4 dias e um máximo de 7 dias.  Entre pacientes com início de TMA pós-parto, evidência persistente de TMA por> 3 dias após o dia do parto.  Para reduzir o risco de infecção meningocócica (Neisseria meningitidis), todos os pacientes são vacinados contra infecções meningocócicas 3 anos antes ou no momento de iniciar a droga em estudo.

Os pacientes que recebem a vacina meningocócica menos de 2 semanas antes do início do tratamento com ravulizumabe recebem tratamento com antibióticos profiláticos apropriados até 2 semanas após a vacinação.

Os pacientes que não foram vacinados antes do início do tratamento com ravulizumabe recebem antibióticos profiláticos antes de e por pelo menos 2 semanas após a vacinação meningocócica.  Pacientes com <18 anos de idade devem ter sido vacinados contra Haemophilus influenzae tipo b (Hib) e Streptococcus pneumoniae de acordo com as diretrizes nacionais e locais do cronograma de vacinação.  Pacientes do sexo feminino com potencial para engravidar e pacientes do sexo masculino com parceiras com potencial para engravidar devem seguir as orientações especificadas pelo protocolo para evitar a gravidez durante o tratamento e por 8 meses após a última dose da droga em estudo.  Disposto e capaz de dar consentimento informado por escrito e cumprir o cronograma de consultas do estudo. Para pacientes <18 anos de idade, o responsável legal do paciente deve estar disposto a e ser capaz de dar consentimento informado por escrito e o paciente deve estar disposto a dar assentimento informado por escrito.

[0202] As amostras coletadas na Triagem podem ser testadas em um laboratório local ou central. Se os testes de laboratório locais forem usados para LDH, contagem de plaquetas, hemoglobina e creatinina sérica, amostras em duplicata são coletadas para teste de laboratório central para garantir que as medições de linha de referência e pós-linha de referência para análises sejam obtidas do laboratório central. Embora os resultados do laboratório local possam ser usados para agilizar a avaliação de elegibilidade, a determinação final desses Critérios de Inclusão é baseada nos resultados do laboratório central.

[0203] Os pacientes são excluídos da inscrição no estudo se atenderem a qualquer um dos seguintes critérios: A. Deficiência de desintegrina e metaloproteinase com motivo trombospondina tipo 1, membro 13' (ADAMTS13) conhecida (atividade < 5%). B. Síndrome hemolítica urêmica relacionada à toxina Shiga (ST-HUS). C. Síndrome hemolítica urêmica relacionada a Streptococcal pneumoniae (HUS), conforme evidenciado por um teste de Coombs direto positivo e infecção por Streptococcal pneumoniae (por exemplo, cultura, teste de antígeno). D. Infecção pelo Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV) conhecida. E. Doença meningocócica sistêmica não resolvida. F. Pacientes com diagnóstico confirmado de sepse em curso definido como hemoculturas positivas nos 7 dias anteriores ao início da Triagem e não tratados com antibióticos.

G.

Presença ou suspeita de infecção bacteriana sistêmica ativa e não tratada que, na opinião do Pesquisador, confunde um diagnóstico preciso de aHUS ou impede a capacidade de gerenciar a doença de aHUS.

H.

Gravidez ou lactação.

I.

Transplante de coração, pulmão, intestino delgado ou fígado.

J.

Entre pacientes com transplante renal, qualquer um dos seguintes: a.

Disfunção renal aguda dentro de 4 semanas de transplante consistente com o diagnóstico de rejeição aguda mediada por anticorpos (AMR) de acordo com os critérios de Banff 2013, ou b.

Disfunção renal aguda dentro de 4 semanas após o transplante e um aumento do anticorpo específico do doador (DSA) consistente com um diagnóstico clínico de AMR aguda. c.

Histórico de doença renal policística.

K.

Entre os pacientes ≥ 18 anos de idade apresentando pressão arterial sistólica (PAS) ≥ 170 mmHg, ou pacientes de 12 a < 18 anos de idade que tem um diagnóstico clínico de hipertensão, qualquer um dos seguintes: a.

Evidência persistente de TMA (critério de inclusão número 2) após menos de 4 dias de redução da pressão arterial (BP) para ≤ 140 mmHg. b.

Hipertrofia ventricular esquerda conhecida. c.

Rins pequenos e hiperecoicos na ultrassonografia conhecidos.

L.

HUS relacionada a exposição a drogas identificada.

M.

Receber PE/PI, por 28 dias ou mais, antes do início da Triagem para a TMA atual.

N.

Histórico de malignidade em até 5 anos após a Triagem, com exceção de um câncer de pele não melanoma ou carcinoma in situ do colo do útero que foi tratado sem evidência de recorrência.

O.

Transplante de medula óssea (BMT)/transplante de células tronco hematopoéticas (TCTH) nos últimos 90 dias antes do início da Triagem.

P.

HUS relacionada a deficiência de vitamina B12. Q.

Esclerose sistêmica (escleroderma) conhecida, lúpus eritematoso sistêmico (LES) ou positividade para ou síndrome de anticorpo antifosfolípide.

R.

Diálise crônica (definida como diálise regularmente como terapia de substituição renal para ESKD). S.

Pacientes que receberam imunoglobulina intravenosa crônica (IVIg) dentro de 8 semanas antes do início da Triagem, exceto para condição médica não relacionada (por exemplo, hipogamaglobinemia); ou terapia crônica com rituximabe dentro de 12 semanas antes do início da Triagem.

T.

Pacientes recebendo outras terapias imunossupressoras, como esteroides, mTORi (por exemplo, sirolimo, everolimo), CNI (por exemplo, ciclosporina ou tacrolimus) são excluídos, a menos que: a) parte de um regime anti-rejeição pós- transplante estabelecido, ou b) o paciente tenha confirmação de anticorpos de fator de complemento que requerem terapia imunossupressora, ou c) esteroides estão sendo usados para uma condição diferente de aHUS (por exemplo, asma). U.

Participação em outro estudo de tratamento intervencionista ou uso de qualquer terapia experimental dentro de 30 dias antes do início da droga em estudo no Dia 1 deste estudo ou dentro de 5 meias-vidas desse produto experimental, o que for maior.

V.

Uso prévio de eculizumabe ou outros inibidores do complemento.

W.

Hipersensibilidade a proteínas murinas ou a um dos excipientes.

X.

Qualquer condição médica ou psicológica que, na opinião do Pesquisador, poderia aumentar o risco para o paciente ao participar do estudo ou confundir o resultado do estudo.

Y.

Histórico conhecido ou suspeita de abuso ou dependência de drogas ou álcool no período de 1 ano antes do início da Triagem.

[0204] Os resultados laboratoriais para o Critério de Exclusão número 1 podem não estar disponíveis antes da primeira dose. Resultados posteriores para o Critério de Exclusão número A podem levar à descontinuação e substituição do paciente.

[0205] O paciente tem o direito de se afastar do estudo a qualquer momento. Se um paciente revogar o consentimento, as avaliações especificadas para a consulta de Fim Antecipado (ET) são realizadas. Os pacientes que se afastam do estudo não são substituídos. Um paciente pode ter a droga em estudo interrompida se o Pesquisador ou Patrocinador tiver motivos para acreditar que é do interesse do paciente interromper o tratamento.

[0206] Pacientes com transplante renal prévio que desenvolvem AMR (biópsia renal C4d positiva) e para os quais o rituximabe é considerado a terapia apropriada devem sair do estudo e receber terapia de tratamento padrão. O motivo principal e quaisquer outros motivos para a descontinuação são registrados no eCRF.

[0207] Se um paciente for descontinuado do estudo com um AE em andamento ou um resultado laboratorial não resolvido que esteja significativamente fora do intervalo de referência e seja clinicamente significativo, o Pesquisador tenta fornecer acompanhamento até que uma resolução clínica satisfatória do resultado laboratorial ou evento adverso seja alcançada.

[0208] O Patrocinador ou Autoridade Competente pode encerrar o estudo por justa causa. As condições que justificam o encerramento do estudo incluem, mas não estão limitadas a: (1) descoberta de um risco inesperado, grave ou inaceitável para os pacientes inscritos no estudo, (2) decisão do patrocinador de suspender ou descontinuar o teste, avaliação ou desenvolvimento da droga em estudo, (3) falha do Pesquisador em cumprir com o protocolo aprovado, diretrizes pertinentes e/ou regulamentos e (4) envio de informações sabidamente falsas do Pesquisador ao

Patrocinador e/ou às autoridades regulatórias.

[0209] Se for determinado em qualquer ponto que os dados de Triagem de um paciente não satisfazem um ou mais dos seguintes critérios de inclusão/exclusão (Critério de Inclusão número 2 ou Critério de Exclusão número 1), após receber pelo menos 1 dose do produto em investigação (por exemplo, se for determinado posteriormente por um laboratório central que os dados laboratoriais locais do paciente usados para confirmar os critérios de elegibilidade não atendem mais aos critérios de elegibilidade), o paciente é descontinuado do estudo e pode ser substituído. Os procedimentos de fim precoce são realizados em pacientes que saíram precocemente e todos os AEs são coletados até 60 dias após a última dose da droga em estudo do paciente.

[0210] O final do estudo é definido como a data da última consulta do último paciente no Período de Extensão.

5. Tratamento em Estudo

[0211] Ravulizumabe, um anticorpo monoclonal anti-C5 humanizado composto por duas cadeias pesadas de 448 aminoácidos e duas cadeias leves de 214 aminoácidos, é uma imunoglobulina IgG2/4 kappa que consiste em regiões constantes humanas e regiões determinantes de complementaridade murina enxertadas na framework de regiões variáveis de cadeia leve e pesada humana. Ravulizumabee eculizumabe compartilham mais de 99% da identidade da sequência de aminoácidos primária e têm farmacologia muito semelhante.

[0212] A droga ravulizumabe é fornecida para estudos clínicos como uma solução estéril e sem conservantes de 10 mg/mL em frascos de uso único e projetada para infusão por diluição em solução salina disponível comercialmente (injeção de cloreto de sódio a 0,9%; farmacopeia específica do país) para administração via infusão IV. A Tabela 3 e o IB atual fornecem informações adicionais. Tabela 3: Droga em Estudo

Nome do Produto Ravulizumabe Forma de Dosagem Solução concentrada (10 mg/mL) para infusão Via de Administração Infusão intravenosa Descrição Física Claro a translúcido, leve cor esbranquiçada, praticamente livre de partículas Fabricante Alexion Pharmaceuticals, Inc. ou Organização de Fabricação Contratada

[0213] Ravulizumabe é embalado em frascos de vidro borosilicato Tipo 1 da Farmacopeia dos Estados Unidos (USP)/Farmacopeia da União Europeia (EP) e tampado com uma rolha de borracha butílica com uma vedação de alumínio e uma tampa flip-off. As drogas em estudo são fornecidas em kits. O ravulizumabe é liberado para cada local após o recebimento de todos os documentos essenciais exigidos com base nos regulamentos aplicáveis.

[0214] Após a chegada dos kits da droga em estudo no local do estudo, o farmacêutico (ou pessoa treinada) remove imediatamente os kits da droga em estudo do recipiente térmico de transporte e os armazena em suas embalagens originais em condições refrigeradas de 2°C a 8°C (35 °F a 47 °F) e protegido da luz. Ravulizumabe não é congelado. As drogas do estudo são armazenadas em uma área de armazenamento segura e de acesso limitado, e a temperatura é monitorada diariamente.

[0215] A droga está em temperatura ambiente antes da administração. O material não é aquecido (por exemplo, usando um micro-ondas ou outra fonte de calor) a não ser pela temperatura do ar ambiente.

[0216] O ravulizumabe não é administrado por injeção IV ou de bólus. As infusões da droga em estudo são preparadas usando uma técnica asséptica. A dose necessária de Ravulizumabe para o paciente é adicionalmente diluída em solução salina comercialmente disponível (cloreto de sódio a 0,9%; farmacopeia específica do país) no volume especificado na Tabela 4. A solução de ravulizumabe em diluente é administrada ao paciente usando um conjunto de administração de tubos IV por meio de uma bomba de infusão. É necessário o uso de um filtro em linha para infusão.

Tabela 4: Gráfico de Referência de Dosagem para Preparação da Dose de Ravulizumabe Tipo de Peso Dose ALXN Vol. se Vol. Mín. Máx. Dose corporal (mg) 1210 Soluçã total Duração Taxa de (kg)a Vol. o (mL da infusão infusão (mL) Salina ) em (mL/hora (mL) minutos ) (horas) Carregamen ≥ 40 a <60 2400 240 240 480 114 (1,9) 253 to ≥ 60 a 2700 270 270 540 102 (1,7) 333 <100 ≥ 100 3000 300 300 600 108 (1,8) 333 Manutenção ≥ 40 a <60 3000 300 300 600 138 (2,3) 267 ≥ 60 a 3300 330 330 660 120 (2,0) 333 <100 ≥ 100 3600 360 360 720 132 (2,2) 333 Consulte o Manual da Farmácia para instruções adicionais sobre a preparação da dose. a Peso corporal conforme registrado na última consulta do estudo.

[0217] As doses da droga em estudo são preparadas e distribuídas apenas por um farmacêutico ou um membro da equipe com qualificação médica. A droga em estudo é dispensada apenas a pacientes inscritos que são confirmados como elegíveis para participação neste estudo. Uma vez que a droga em estudo é preparada para um paciente, ela é administrada apenas a esse paciente. Os frascos da droga em estudo são para uso único e qualquer droga restante no frasco não é usada por outro paciente. Qualquer droga restante no tubo de infusão ou saco de perfusão não é usada para outro paciente.

[0218] Todo o material de estudo clínico é armazenado em um local seguro e alocado e distribuído por pessoas devidamente treinadas. Registros detalhados das quantidades do produto em investigação recebido, dispensado e destruído são mantidos. A menos que notificado de outra forma, frascos vazios e frascos com materiais residuais são mantidos para inspeção e responsabilidade pelo monitor do estudo antes de sua destruição ou são manipulados de acordo com os procedimentos operacionais padrão da farmácia local (SOPs) para as drogas do estudo clínico. Para satisfazer os requisitos regulatórios relativos à responsabilidade pela droga, no final do estudo todo o inventário de ravulizumabe restante é recolhido e destruído ou devolvido à Alexion de acordo com os regulamentos aplicáveis.

[0219] Os pacientes recebem ravulizumabe por 26 semanas. Ravulizumabe é administrado como uma infusão IV lenta durante aproximadamente 2 horas. O ravulizumabe não é administrado por injeção IV ou de bólus.

[0220] O regime de dosagem para ravulizumabe durante o Período de Avaliação Inicial é baseado no peso corporal registrado na última consulta de estudo do paciente (Tabela 5). Os pacientes recebem uma dose de ataque de ravulizumabe IV no dia 1, seguida por uma dosagem de manutenção de ravulizumabe IV no dia 15 e q8w (a cada oito semanas) daí em diante. Tabela 5: Regimes de Tratamento de Ataque e Manutenção Peso corporala Dose de Ataque (Dia 1) Dose de Manutenção (Dias 15, 71 e 127) ≥ 40 a <60 kg 2400 mg 3000 mg ≥ 60 a < 100 kg 2700 mg 3300 mg ≥ 100 kg 3000 mg 3600 mg a Peso corporal conforme registrado na última consulta do estudo.

[0221] Após o Período de Avaliação Inicial, todos os pacientes passam para um Período de Extensão de até 2 anos, durante o qual todos os pacientes recebem ravulizumabe q8w (a cada oito semanas). O tempo real de todas as administrações de dose é registrado no eCRF do paciente.

[0222] Este é um estudo aberto. Os pacientes que atendem a todos os critérios de inscrição são designados para o tratamento do estudo com ravulizumabe na Consulta de Linha de Referência (Dia 1). O sistema de resposta de voz ou web interativo (IxRS) é usado para atribuir frascos contendo ravulizumabe a cada paciente.

[0223] A infusão de outros anticorpos monoclonais foi associada a reações à infusão, com início tipicamente durante ou logo após a conclusão da infusão.

[0224] Medicamentos anteriores (incluindo vitaminas e preparações à base de ervas) - incluindo aqueles discutidos nos critérios e procedimentos de exclusão (qualquer intervenção terapêutica, como cirurgia/biópsia ou fisioterapia) que o paciente toma ou faz dentro de 28 dias (ou 3 anos para a documentação da vacinação meningocócica ) antes do início da Triagem até a primeira dose de ravulizumabe — são registrados no eCRF do paciente.

[0225] Para fins analíticos, qualquer diálise no período de 14 dias imediatamente após a primeira dose de ravulizumabe não é considerada uma “nova diálise”.

[0226] Todo o uso de medicamentos e procedimentos realizados durante o estudo são registrados no documento-fonte/prontuário médico e no eCRF do paciente. Este registro inclui todos os medicamentos prescritos, produtos à base de plantas, vitaminas, minerais, medicamentos sem receita e medicamentos atuais. Os medicamentos concomitantes são registrados desde a primeira infusão da droga em estudo até 56 dias após a última dose da droga em estudo do paciente. Quaisquer alterações nos medicamentos concomitantes também são registradas no documento de origem/ prontuário médico e no eCRF do paciente. Qualquer medicamento concomitante considerado necessário para o padrão de cuidado do paciente durante o estudo, ou para o tratamento de qualquer AE, juntamente com os medicamentos permitidos descritos abaixo, são fornecidos a critério do Pesquisador. No entanto, é responsabilidade do Pesquisador garantir que os detalhes sobre todos os medicamentos sejam registrados por completo no documento fonte/prontuário médico e no eCRF do paciente.

[0227] Os pacientes estão proibidos de receber qualquer um dos seguintes medicamentos e procedimentos a qualquer momento após a primeira dose do medicamento do estudo: eculizumabe ou outros inibidores do complemento, uso de qualquer outra droga ou dispositivo experimental como parte de um ensaio clínico,

IVIg (exceto para uma necessidade médica não relacionada, por exemplo, hipogamaglobulinemia), Rituximabe, PE/PI após a primeira dose e nova diálise com o primeiro período de 48 horas após a primeira dose de ravulizumabe, a menos que haja uma necessidade médica urgente avaliada por (1) hipervolemia não responsiva a diuréticos , (2) desequilíbrio eletrolítico refratário ou (3) encefalopatia urêmica de início recente. As exceções devem ser aprovadas antes da administração da diálise de acordo com cada caso pelo Patrocinador.

[0228] Os seguintes medicamentos e procedimentos concomitantes são permitidos sob certas circunstâncias e com as seguintes restrições: uso de outras terapias imunossupressoras (como esteroides, mTORi [por exemplo, sirolimo, everolimo], CNI [por exemplo, ciclosporina ou tacrolimo]) antes da triagem ou durante o estudo não é permitido, a menos que: a) parte de um regime antirrejeição pós- transplante estabelecido, ou b) o paciente tenha confirmação de anticorpos antifator de complemento que requerem terapia imunossupressora, ou c) esteroides usados para uma condição diferente de aHUS (por exemplo, asma).

[0229] Quaisquer pacientes recebendo outros inibidores do complemento (incluindo eculizumabe) ou submetidos a PE/PI após a primeira dose da droga em estudo são retirados do estudo.

[0230] Devido ao seu mecanismo de ação, o uso de ravulizumabe aumenta a suscetibilidade do paciente à infecções. Para reduzir o risco de infecção, todos os pacientes são vacinados contra N. meningitidis, Hib e Streptococcus pneumoniae.

[0231] Os pacientes são vacinados contra N. meningitidis nos 3 anos anteriores da ou no momento de receber a primeira dose de ravulizumabe. Os pacientes que são tratados com a droga em estudo menos de 2 semanas após receberem uma vacina meningocócica recebem tratamento com antibióticos profiláticos apropriados até 2 semanas após a vacinação. As vacinas contra os sorotipos A, C, Y, W135 e B, quando disponíveis, são recomendadas para prevenir sorotipos meningocócicos patogênicos comuns. Os pacientes são vacinados ou revacinados de acordo com as diretrizes nacionais atuais de vacinação ou a prática local para uso de vacinação com inibidores do complemento (por exemplo, eculizumabe).

[0232] É reconhecido que alguns pacientes que não foram vacinados contra N. meningiditis nos 3 anos anteriores ao recebimento da primeira dose de ravulizumabe podem não ser capazes de receber a vacinação no momento da primeira dose. Os pacientes que não foram vacinados antes do início do tratamento com ravulizumabe recebem antibióticos profiláticos antes de e por pelo menos 2 semanas após a vacinação meningocócica.

[0233] A vacinação pode não ser suficiente para prevenir a infecção meningocócica. Deve-se levar em consideração as orientações oficiais e a prática local sobre o uso apropriado de agentes antibacterianos. Todos os doentes são monitorizados para a detecção de sinais precoces de infecção meningocócica, examinados de imediato no caso de suspeita de infecção e, se necessário, tratados com os antibióticos apropriados. Para aumentar a conscientização sobre os riscos e promover a divulgação rápida de quaisquer sinais ou sintomas potenciais de infecção experimentados pelos pacientes durante o curso do estudo, os pacientes recebem um cartão de segurança para carregar consigo o tempo todo. Discussão e explicação adicionais dos riscos, sinais e sintomas potenciais ocorrem em momentos específicos como parte da revisão do cartão de segurança do paciente e ao longo do estudo, conforme descrito no Cronograma de Avaliações (Tabela 1 e Tabela 2).

[0234] Os pacientes são vacinados contra Haemophilus influenzae tipo b (Hib) e Streptococcus pneumoniae de acordo com as diretrizes do cronograma de vacinação nacional e local, antes ou no momento de receber a primeira dose de ravulizumabe. O status de vacinação para N. meningitidis, Hib e S. pnemoniae é registrado no eCRF do paciente.

[0235] Os pacientes recebem administração da droga em estudo em um ambiente controlado sob a supervisão do Pesquisador ou pessoa designada, garantindo assim a conformidade com a administração da droga em estudo. O Pesquisador ou pessoa designada garante que todos os pacientes sejam adequadamente informados sobre o regime de dosagem específico necessário para conformidade com o protocolo do estudo, certifica-se de que o paciente receba a dose apropriada nos momentos designados durante o estudo e que o monitoramento de segurança adequado ocorra durante a infusão.

[0236] Antes de receber a droga em estudo, as pacientes do sexo feminino que se consideram na pós-menopausa devem fornecer evidências de menopausa com base em uma combinação de amenorreia por pelo menos 1 ano e aumento do nível sérico do hormônio folículo estimulante (FSH) (> 30 IU/L) (por exemplo, na ausência de terapia de reposição hormonal, fitoestrógenos na dieta).

[0237] Pacientes do sexo feminino com potencial para engravidar usam um método anticoncepcional altamente eficaz (conforme definido abaixo), começando na Triagem e continuando por pelo menos 8 meses após a última dose da droga em estudo. Métodos anticoncepcionais altamente eficazes* incluem: contracepção hormonal associada à inibição da ovulação, dispositivo intrauterino, sistema de liberação de hormônio intrauterino, oclusão tubária bilateral, parceiro vasectomizado (desde que o parceiro seja o único parceiro sexual da paciente), abstinência sexual (definida como abstenção de relação sexual heterossexual durante todo o período de risco associado ao tratamento com a droga em estudo; a confiabilidade da abstinência sexual deve ser avaliada em relação à duração do estudo clínico e ao estilo de vida preferido e usual do paciente), combinação de preservativo masculino com qualquer um dos tampões , diafragma ou esponja com espermicida (métodos de barreira dupla). Pacientes do sexo masculino com cônjuge/companheira com potencial para engravidar ou cônjuge ou companheira grávida ou amamentando concordam em usar contracepção de barreira dupla (preservativo masculino mais método de barreira apropriado para a companheira) durante o tratamento e por pelo menos 8 meses após a última dose da droga em estudo. A contracepção de barreira dupla é necessária mesmo com avaliação médica documentada do sucesso cirúrgico de uma vasectomia.

[0238] Pacientes do sexo masculino não doam esperma durante o tratamento e por pelo menos 8 meses após a última dose da droga em estudo.

6. Avaliações de Eficácia

[0239] A avaliação de eficácia primária é a Resposta de TMA Completa durante o Período de Avaliação Inicial de 26 semanas. Os critérios para Resposta de TMA Completa são (1) normalização da contagem de plaquetas, (2) normalização de LDH e (3) melhora ≥ 25% na creatinina sérica em relação à linha de referência.

[0240] Os pacientes que atendem a todos os critérios de Resposta de TMA Completa, confirmados por 2 medições consecutivas obtidas com pelo menos 4 semanas de intervalo, são classificados como tendo atendido ao critério de avaliação de eficácia primário.

[0241] As seguintes avaliações de eficácia secundárias são medidas durante o estudo: A. Status de necessidade de diálise B. Tempo para Resposta de TMA Completa C. Status da Resposta de TMA Completa ao longo do tempo D. Valor observado e alteração da linha de referência no eGFR E. Estágio de CKD, avaliado pelo Pesquisador em dias alvo selecionados e classificado como melhorado, estável (sem alteração) ou piorado em relação à linha de referência F. Valor observado e alteração da linha de referência dos parâmetros hematológicos (plaquetas, LDH, hemoglobina) G. Aumento na hemoglobina de ≥ 20 g/L da linha de referência, sustentado por pelo menos 2 medições consecutivas obtidas com pelo menos 4 semanas de intervalo H. Alteração da linha de referência na QoL, medida pelos questionários EQ- 5D-3L (todos os pacientes), FACIT Fadiga Versão 4 (pacientes ≥ 18 anos de idade) e FACIT de Fadiga Pediátrica (pacientes <18 anos).

7. Avaliações de Segurança

[0242] O Pesquisador ou seu representante se reúne com os pacientes para discutir os riscos potenciais de segurança do ravulizumabe e para dar ao Pesquisador a oportunidade de abordar qualquer preocupação de segurança do paciente em relação ao estudo.

[0243] O acúmulo de AEs é monitorado desde o momento em que o consentimento informado é obtido até a conclusão do estudo. Os Pesquisadores acompanham quaisquer AEs até sua conclusão (resolução ou estabilização). Em caso de retirada do paciente do estudo, o monitoramento de AE continua até a última consulta do estudo do último paciente, se possível. A frequência das avaliações clínicas e laboratoriais é realizada de acordo com o Cronograma de Avaliações (Tabelas 1 e 2). Qualquer resultado anormal clinicamente significativo é acompanhado até a resolução ou estabilização.

[0244] É realizada uma revisão dos parâmetros demográficos, incluindo idade, sexo, raça e etnia. Um histórico médico completo é obtido e documentado. Peso e altura são registrados. A altura é medida apenas na Triagem.

[0245] O histórico médico de aHUS do paciente, incluindo o início do primeiro sintoma de aHUS e a data do diagnóstico, é documentado na Consulta de Triagem.

[0246] O histórico médico do paciente, incluindo condições/distúrbios anteriores e concomitantes, é registrado na Consulta de Triagem. O uso de medicamentos (com ou sem prescrição, incluindo vitaminas e/ou suplementos fitoterápicos) nos 28 dias (ou 3 anos para documentação da vacinação meningocócica) antes do início da Triagem, além da vacinação meningocócica, também é registrado.

[0247] Um exame físico inclui as seguintes avaliações: aparência geral; pele; cabeça, ouvido, olho, nariz e garganta; pescoço; linfonodos; peito; coração; cavidade abdominal; membro; sistema nervoso central; e sistema musculoesquelético. Um exame físico abreviado consiste em um exame relevante do sistema corporal com base no julgamento do Pesquisador e nos sintomas do paciente. As medições dos sinais vitais são feitas após o paciente estar em repouso por pelo menos 5 minutos e incluem BP sistólica e diastólica (milímetros de mercúrio [mmHg]), oximetria de pulso, frequência cardíaca (batimentos/minuto), frequência respiratória (respirações/minuto) e temperatura oral ou timpânica (graus Celsius [°C] ou graus Fahrenheit [°F]).

[0248] As amostras para teste de gravidez de sangue, hematologia, química, coagulação e urinálise são coletadas nos momentos especificados no Cronograma de Avaliações (Tabelas 1 e 2). Amostras para avaliações laboratoriais são coletadas antes de cada administração da droga em estudo.

[0249] As amostras coletadas na Triagem podem ser testadas em um laboratório local ou central. Se os testes de laboratório locais forem usados para LDH, contagem de plaquetas, hemoglobina e creatinina sérica, amostras em duplicata são coletadas para teste de laboratório central para garantir que as medições de linha de referência e pós-linha de referência para análises sejam obtidas do laboratório central. No caso de amostras duplicadas de laboratórios locais e centrais, os resultados do laboratório central são usados para análise.

[0250] Antecipa-se que alguns valores laboratoriais podem estar fora da faixa de valores normais devido à doença subjacente. Os Pesquisadores devem usar o julgamento médico ao avaliar a significância clínica desses valores. Significância clínica é definida como qualquer variação nas medições laboratoriais que tenha relevância médica e que resulte em uma mudança no atendimento médico. Se forem observadas alterações laboratoriais clinicamente significativas do valor da linha de referência, as alterações são documentadas como AEs no eCRF de AE. O Pesquisador avalia a relação com o tratamento do estudo para todos os valores fora da faixa clinicamente significativa. O Pesquisador continua a monitorar o paciente por meio de avaliações laboratoriais adicionais até que (1) os valores tenham retornado à faixa normal ou nível da linha de referência, ou (2) no julgamento do Pesquisador, os valores que estão fora da faixa normal não estão relacionados à administração da droga em estudo ou outros procedimentos específicos do protocolo.

[0251] Para mulheres com potencial para engravidar, um teste de gravidez de sangue ou urina (ou seja, beta gonadotrofina coriônica humana [β-hCG]) é realizado de acordo com o Cronograma de Avaliações (Tabelas 1 e 2). As amostras de sangue são analisadas para parâmetros hematológicos.

[0252] As amostras de sangue são analisadas para os parâmetros de química do soro. A bilirrubina indireta é calculada a partir dos valores de bilirrubina total e direta; portanto, os resultados da bilirrubina indireta não estão disponíveis se a bilirrubina direta estiver abaixo do limite de quantificação. O nível sérico de FSH é medido durante a Triagem para pacientes do sexo feminino na pós-menopausa para confirmar seu estado de pós-menopausa.

[0253] As avaliações químicas são realizadas nos momentos especificados nas Tabelas 1 e 2 do Cronograma de Avaliações. A eGFR é calculada para todas as consultas nas quais as químicas do soro são coletadas usando a fórmula de Modificação da Dieta na Doença Renal em pacientes ≥ 18 anos de idade e a fórmula de Schwartz de Modificação Da dieta na Doença Renal em pacientes < 18 anos de idade.

[0254] Amostras de sangue são analisadas para parâmetros de coagulação.

[0255] Amostras de urina são analisadas. Um exame microscópico de amostras de urina é realizado se os resultados da análise macroscópica forem anormais. As amostras de urina também são analisadas para medir proteínas e creatinina, a fim de calcular a razão de proteína total:creatinina na urina.

[0256] Para cada paciente, ECGs digitais de 12 derivações únicos são feitos de acordo com o Cronograma de Avaliações (Tabelas 1 e 2). Os pacientes devem ficar em decúbito dorsal por aproximadamente 5 a 10 minutos antes da realização do ECG e permanecem em posição de decúbito dorsal, mas acordados durante a realização do ECG. O Pesquisador ou pessoa designada responsável por revisar o ECG para avaliar se o ECG está dentro dos limites normais e para determinar a significância clínica dos resultados. Essas avaliações são indicadas no CRF.

[0257] Amostras de sangue são coletadas para testar a presença e título de ADAs para ravulizumabe no soro antes da administração da droga em estudo, conforme indicado no Cronograma de Avaliações (ver Tabelas 1 e 2). Se os resultados do teste forem positivos, o teste é repetido a cada 3 meses até que os resultados sejam negativos ou estabilizem, com base no título medido e nas avaliações de segurança. A caracterização adicional de respostas de anticorpos pode ser conduzida conforme apropriado, incluindo anticorpos de ligação e neutralização, PK/PD, segurança e atividade de ravulizumabe.

[0258] Um AE é qualquer ocorrência médica indesejável em um paciente que recebeu administração de um produto farmacêutico e que não tem necessariamente uma relação causal com esse tratamento. Um AE pode, portanto, ser qualquer sinal desfavorável e não intencional (por exemplo, uma descoberta laboratorial anormal, ), sintoma ou doença temporalmente associada ao uso de um medicamento, considerado ou não como relacionado a este medicamento.

[0259] Situações em que não ocorreu uma ocorrência médica indesejável (por exemplo, hospitalização para cirurgia eletiva se planejada antes do início do estudo, admissões por motivos sociais ou conveniência) e flutuações diárias antecipadas de doenças pré-existentes(s) ou condição(ões) presente(s) ou detectada(s) no início do estudo que não apresentaram piora não são AEs.

[0260] A falta de efeito da droga não é um AE em estudos clínicos, pois o objetivo do estudo clínico é estabelecer o efeito da droga.

[0261] Um erro na medicação (incluindo uso indevido intencional, abuso e overdose do produto) ou uso diferente do que está definido no protocolo não é considerado um AE, a menos que haja uma ocorrência médica indesejável como resultado de um erro na medicação.

[0262] Casos de gravidez que ocorrem durante a exposição materna ou paterna ao produto sob investigação devem ser relatados dentro de 24 horas após o conhecimento do Pesquisador/local. Os dados sobre o resultado fetal e amamentação são coletados para relatórios regulatórios e avaliação de segurança.

[0263] Os eventos adversos são registrados a partir do momento da assinatura do consentimento. Um AE relatado após consentimento informado, mas antes da administração da droga em estudo, é considerado um AE de pré-tratamento.

[0264] Os eventos a seguir são riscos identificados importantes neste estudo: Infecções meningocócicas.

[0265] A gravidade dos AEs é classificada usando os Critérios de Terminologia Comum para Eventos Adversos (CTCAE) versão 4.03 ou superior. Uma escala de classificação (gravidade) é fornecida para cada termo de AE. Cada termo CTCAE é um Termo de Nível Mais Baixo (LLT) de acordo com o Dicionário Médico para Atividades Regulatórias (MedDRA®). Cada LLT é codificado com um termo preferencial do MedDRA. O grau se refere à gravidade do AE. O CTCAE atribui um grau de 1 a 5, com descrições clínicas únicas de gravidade para cada AE (Tabela 6). Tabela 6: Escala de Classificação de Gravidade de Eventos Adversos Grau Descrição Grau 1 Leve; assintomático ou sintomas leves; apenas observações clínicas ou de diagnóstico; intervenção não indicada. Grau 2 Moderado; indicação de intervenção mínima, local ou não invasiva; limitar as atividades instrumentais da vida diária (ADL) apropriadas para a idadea

Grau Descrição Grau 1 Leve; assintomático ou sintomas leves; apenas observações clínicas ou de diagnóstico; intervenção não indicada. Grau 3 Grave ou clinicamente significativo, mas não apresenta risco imediato de morte: hospitalização ou prolongamento da hospitalização é indicado; incapacitante; limita as ADL de autocuidadob Grau 4 Consequências com risco de morte; intervenção urgente indicada. Grau 5 Morte relacionada a AE.

Abreviações: ADL = atividades da vida diária; AE = evento adverso a ADL Instrumentais refere-se a preparar refeições, comprar mantimentos ou roupas, usar o telefone, administrar dinheiro, etc. b ADL de autocuidado refere-se a tomar banho, vestir-se e despir-se, alimentar-se, usar o banheiro, tomar medicamentos e não ficar acamado.

[0266] Qualquer alteração na gravidade de um AE é documentada com base em diretrizes específicas nas Diretrizes de Preenchimento do eCRF. Gravidade e a seriedade são diferenciadas: gravidade descreve a intensidade de um AE, enquanto o termo seriedade se refere a um AE que atendeu a critérios específicos para um evento adverso grave (SAE).

[0267] Um Pesquisador deve fornecer uma avaliação de causalidade (Não Relacionada, Improvável, Possível, Provável ou Definitiva) para todos os AEs (graves e não graves) com base no julgamento médico do Pesquisador e nos sintomas observados associados ao evento (Tabela 7). Essa avaliação é registrada no eCRF e em quaisquer formulários adicionais, conforme apropriado. Tabela 7: Descrições de Avaliação de Causalidade Avaliação Descrição Não Relacionado/Sem Sugere que não há associação causal entre o produto Relação em investigação e o evento relatado. Relação Improvável Sugere que o quadro clínico é altamente consistente com uma causa diferente do produto em investigação, mas a atribuição não pode ser feita com certeza absoluta e uma relação entre o produto em investigação e o AE não pode ser excluída com total confiança.

Avaliação Descrição Possivelmente Sugere que o tratamento com o produto em Relacionado investigação pode ter causado ou contribuído para o AE (ou seja, o evento segue uma sequência temporal razoável a partir do momento da administração da droga e/ou segue um padrão de resposta conhecido ao produto em investigação, mas também pode ter sido produzido por outros fatores). Provavelmente Sugere que existe uma sequência temporal razoável Relacionado do evento com a administração do produto em investigação e a provável associação causal do evento com o produto em investigação. Isso será baseado na ação farmacológica conhecida do produto em investigação, reações adversas conhecidas ou previamente relatadas ao produto em investigação ou classe de drogas, ou julgamento baseado na experiência clínica do Pesquisador. Definitivamente A relação temporal com o produto em investigação, Relacionado outras condições (doença concomitante, reação medicamentosa concomitante ou progressão/expressão do estado da doença) não parecem explicar o evento, correspondem ao perfil farmacêutico conhecido, melhora mediante descontinuação, reaparecimento mediante nova exposição.

[0268] Um evento adverso grave (SAE) é qualquer ocorrência médica indesejável que:  Resulte em morte  ofereça risco à vida (ou seja, o paciente estava em risco de morte no momento do evento)  Requer internação hospitalar ou prolongamento da hospitalização existente  Resulta em deficiência/incapacidade persistente ou significativa  É uma anomalia congênita/defeito de nascença

[0269] Eventos médicos importantes que podem não resultar em morte, com risco de morte imediato ou exigir hospitalização podem ser considerados um evento adverso grave quando, com base em julgamento médico apropriado, podem comprometer o paciente ou sujeito e podem exigir intervenção para impedir um dos resultados listados acima.

[0270] Suspeitas de reações adversas graves inesperadas (SUSARs) são eventos graves que não estão listados no IB e que o Pesquisador identifica como relacionados ao produto ou procedimento em investigação. O Código de Regulamentos Federais (CFR) 312.32 dos Estados Unidos, Título 21, e a Diretiva de Ensaios Clínicos da União Europeia 2001/20/EC e as orientações detalhadas associadas ou requisitos regulatórios nacionais nos países participantes exigem a notificação de SUSARs.

[0271] Todos os AEs (graves e não graves) são coletados desde a assinatura do ICF até 60 dias após a última dose da droga em estudo para pacientes com ET ou até 56 dias após a última dose da droga em estudo para pacientes que completaram o estudo. Todos os AEs são registrados no eCRF assim que o Pesquisador ou sua equipe tomam conhecimento de sua ocorrência.

[0272] Todos os SAEs são registrados independentemente da avaliação de causalidade do Pesquisador. Não existe prazo para relatar SAEs que se acredita estarem causalmente relacionados à droga em estudo. Os Pesquisadores têm a liberdade de relatar SAEs, independentemente da causalidade, a qualquer momento.

[0273] Para todos os SAEs, o Pesquisador deve fornecer o seguinte: informações de acompanhamento adequadas e solicitadas, causalidade do(s) SAE(s), tratamento/intervenção para o(s) SAE(s), resultado do(s) SAE(s) e registros médicos de apoio e informações laboratoriais/de diagnóstico.

[0274] Os dados de gravidez são coletados durante este estudo para todos os pacientes e cônjuges/companheiras de pacientes do sexo masculino. A exposição durante a gravidez (também conhecida como exposição in utero) pode ser o resultado da exposição materna ou da transmissão da droga via sêmen após a exposição paterna. A gravidez em si não é considerada um AE, a menos que haja suspeita de que o produto em investigação pode ter interferido na eficácia de um medicamento anticoncepcional. No entanto, complicações da gravidez e resultados anormais da gravidez são AEs e podem atender aos critérios para um SAE (por exemplo, gravidez ectópica, aborto espontâneo, morte fetal intrauterina, morte neonatal ou anomalia congênita). Abortos eletivos sem complicações não devem ser relatados como AEs.

8. Avaliações Farmacocinéticas e Farmacodinâmicas

[0275] Amostras de sangue para determinação das concentrações séricas da droga e avaliações PD são coletadas antes e após a administração da droga em estudo nos momentos indicados no Programa de Avaliações (ver Tabelas 1 e 2). A data e hora reais (relógio de 24 horas) de cada amostragem são registradas. O número de momentos de amostragem de PK para qualquer paciente específico não excede o número de momentos planejado atualmente.

[0276] As amostras de sangue para avaliação PK e PD são coletadas do braço oposto ao braço usado para infusão da droga. As avaliações de PK/PD são as seguintes: (1) alterações na concentração sérica de ravulizumabe ao longo do tempo e (2) alterações nas concentrações de C5 livre.

9. Avaliações Exploratórias

[0277] Para análises exploratórias de biomarcadores, estatísticas resumidas são apresentadas para alteração real, alteração de porcentagem em relação à linha de referência.

[0278] A relação entre a concentração de ravulizumabe e os biomarcadores exploratórios ou a correlação entre o benefício clínico e os principais biomarcadores exploratórios pode ser avaliada por exibição gráfica. A análise exploratória e as relações potenciais entre os resultados clínicos, PK/PD, perfil genético e níveis de biomarcadores também podem ser realizadas. A atividade APC e os resultados de autoanticorpos são resumidos se forem avaliados.

[0279] A genética exploratória pode ser realizada para investigar variantes genéticas em genes que sabidamente estão associados com aHUS, bem como para identificar novas variantes genéticas associadas a aHUS, desregulação do complemento, ou metabolismo ou eficácia de ravulizumabe.

[0280] Mutações genéticas de relevância clínica conhecida na aHUS são comunicadas ao paciente ou ao responsável pelo paciente pelo Pesquisador, juntamente com aconselhamento genético apropriado. Variantes genéticas de significância clínica desconhecida não são comunicadas aos pacientes ou ao seu Pesquisador.

[0281] Sinais ou sintomas adicionais de aHUS são avaliados usando o Questionário de Utilização de Recursos do Paciente e o Questionário de Sintomas de aHUS relatados pelo paciente.

[0282] Os componentes dos sinais ou sintomas extra-renais da aHUS, incluindo sinais vitais e laboratórios clínicos, podem ser resumidos descritivamente em momentos da linha de referência e pós-linha de referência e para alterações da linha de referência. Podem ser fornecidas listagens por paciente.

[0283] A análise de sinais, sintomatologia e utilização de recursos pode incluir abordagens padrão para resultados categóricos com ou sem medidas repetidas.

[0284] Se uma avaliação do Dia 1 estiver faltando, a avaliação de Triagem é usada como avaliação de linha de referência.

[0285] Para avaliação da Resposta de TMA Completa durante o Período de Avaliação Inicial de 26 semanas (critério de avaliação primário), os pacientes que perderem uma avaliação de eficácia que faz parte da definição de Resposta de TMA Completa enquanto ainda estão no estudo, têm sua última observação transportada (LOCF). Para pacientes que descontinuaram o estudo antes da Semana 26, seus dados até o momento da descontinuação são usados para avaliar a Resposta de TMA Completa.

[0286] Dados ausentes para instrumentos de QoL são tratados conforme especificado nas instruções de cada instrumento.

[0287] Uma análise provisória está planejada para este estudo no final do

Período de Avaliação Inicial de 26 semanas, após todos os pacientes terem completado ou se retirado do Período de Avaliação Inicial de 26 semanas. Além disso, uma segunda análise para resumir os parâmetros de eficácia, segurança e PK de longo prazo é realizada no final do Período de Extensão de 2 anos. EXEMPLO 2: Dados do Estudo de Fase 3, Braço Único, Multicêntrico de ravulizumabe (ALXN1210) em Pacientes Adultos Não Expostos a Inibidor de Complemento com Síndrome Hemolítica Urêmica Atípica (aHUS)

[0288] A seguir está um resumo dos dados de um estudo de braço único de ravulizumabe (ALXN1210-aHUS-311) em pacientes não expostos a tratamento com inibidor do complemento com síndrome hemolítica urêmica atípica (aHUS), que foi conduzido substancialmente de acordo com o protocolo descrito acima no Exemplo 1. O período de avaliação inicial foi de 26 semanas, seguido por um período de extensão de até 2 anos. O projeto do estudo é mostrado na Figura 1.

[0289] O objetivo do estudo é avaliar a eficácia de ravulizumabe em pacientes adolescentes e adultos sem exposição a tratamento inibidor do complemento com aHUS para inibir a microangiopatia trombótica mediada pelo complemento (TMA), que se caracteriza por trombocitopenia, hemólise e comprometimento renal. O critério de avaliação primário foi a resposta de TMA completa dentro do período de avaliação inicial de 26 semanas. Os critérios de avaliação primário, secundário e de segurança para o estudo estão resumidos na Figura 2. Um resumo dos critérios de inclusão e exclusão é apresentado na Figura 3.

[0290] O requisito de inscrição é de (1) pelo menos 6 adolescentes (diferido para ALXN1210-aHUS-312), (2) pelo menos 10 pacientes com transplante renal anterior (8 inscritos) e (3) pelo menos 30 pacientes que atendem aos critérios laboratoriais da TMA no Dia 1 com base nos resultados do laboratório central (32 inscritos).

[0291] O corte de dados inclui dados do período de avaliação inicial de todos os pacientes, além de quaisquer dados de período de extensão disponíveis até outubro de 2019.

[0292] Cinquenta e oito (58) sujeitos foram inscritos e receberam pelo menos uma dose (incluída no conjunto de segurança), dois sujeitos foram inscritos e substituídos (considerados inelegíveis após a primeira dose e descontinuados como especificado anteriormente no protocolo), cinquenta e seis (56 ) sujeitos estavam no conjunto de análise completo, onze (11) sujeitos descontinuaram o tratamento e nove (9) sujeitos descontinuaram o estudo. Um esquema da disposição do paciente é apresentado na Figura 4. A conformidade com o Tratamento foi de 100%. Os dados demográficos da linha de referência são apresentados na Tabela 8, as características de linha de referência da doença são apresentadas na Tabela 9 e os valores laboratoriais de linha de referência são apresentados na Tabela 10. Tabela 8: Dados demográficos da Linha de Referência Geral Variável Estatísticas (N = 56) Idade no Momento da Primeira Média (SD) 40,1 (19,5-76,6) Infusão (anos) Categoria n (%) 18 a < 30 anos 11 (19,6) 30 a < 40 anos 17 (30,4) 40 a < 50 anos 15 (26,8) 50 a < 60 anos 5 (8,9) > = 60 anos 8 (14,3) Sexo: masculino n (%) 19 (33,9) Etnia, não é Hispânico ou Latino n (%) 41 (73,2) Etnia n (%) Asiática 15 (26,8) Branca 29 (51,8) Desconhecida 8 (14,3) Outros 4 (7,1) Peso no Momento da Primeira Média (SD) 72,9 (17,6) Infusão (kg) Tabela 9: Características de Linha de Referência da Doença

Geral Variável Estatísticas (N = 56) Idade (anos) no Momento dos Média (SD) 41,5 (15,8) Primeiros Sintomas da aHUS

Sinais ou sintomas extra-renais n (%) 52 (92,9) pré-tratamento de aHUS

Transplante de Rim Antes de n (%) 8 (14,3) Entrar no Estudo

Estágio CKD na Linha de n (%) Referência 1 0 (0,0) 2 3 (5,4) 3a 1 (1,8) 3b 2 (3,6) 4 9 (16,1) 5 40 (71,4) ausente 1 (1,8)

Diálise Dentro de 5 dias após a n (%) 29 (51,8) Primeira Dose

Tabela 10: Valores de Linha de Referência do Laboratório

Geral Variável Estatísticas (N = 56) Plaquetas de Linha de Média (SD) 118,5 (86,44) 9 Referência (x 10 /L) Min, Max 18, 473 LDH de Linha de Média (SD) 702,4 (557,96) Referência (U/L) Min, Max 229,5, 3249 Creatinina de Linha de Média (SD) 362,5 (240,26) Referência (umol/L) Min, Max 51, 1027 eGFR de linha de Média (SD) 15,9 (14,8) referência 2) (mL/min/1,73m Min, Max 4, 80 HGB de linha de Média (SD) 86,3 (14,87) referência (g/L)

Min, Max 60,5, 140 Atendeu aos critérios de n (%) 32 (57,1) TMA (laboratório central) no Dia 1 Critérios de TMA: contagem de plaquetas <150 x 109/L, LDH ≥ 1,5 × limite superior do normal (ULN), hemoglobina ≤ limite inferior do normal (LLN) e nível de creatinina sérica ≥ ULN.

[0293] As definições de resposta de TMA são apresentadas na Tabela 11. Uma Resposta foi alcançada quando todos os critérios foram atendidos simultaneamente, e cada critério foi atendido por pelo menos 28 dias. Os valores de plaquetas obtidos a partir do dia de uma transfusão de sangue de plaquetas até 3 dias após a transfusão foram excluídos de todas as análises. Todos os valores de creatinina sérica obtidos enquanto um paciente estava em diálise foram excluídos de todas as análises. Quando um paciente estava em diálise na linha de referência, o primeiro valor de creatinina válido usado como valor de linha de referência foi a primeira avaliação ≥ 6 dias após a diálise. Se um paciente estava em diálise durante todo o período de avaliação inicial de 26 semanas, a creatinina de linha de referência não foi calculada. Tabela 11: Definições de Resposta de TMA Completa Critério de Critério de Critério de LDH Critério de função renal Avaliação de plaquetas Resposta Resposta de Normalização Normalização Melhora ≥ 25% de BL na 9 TMA completa (≥ 150 x 10 /L) (≤ 246 U/L) creatinina sérica (Primário) Resposta de Normalização Normalização Pacientes SEM diálise na TMA completa BL: melhora ≥ 25% em modificada relação a linha de (secundário) referência na creatinina sérica Pacientes EM diálise na BL: Sem diálise

Normalização Normalização Normalização Diminuição da creatinina hematológica ou aumento de menos de e preservação 25% da BL da função renal (Critério de avaliação primário em C10-004, relatado em AJKD)

[0294] Os principais resultados de eficácia são apresentados nas Tabelas 12-

14. A Figura 5 é um exemplo de derivação que mostra os resultados de uma resposta de TMA completa confirmada no Dia 57, incluindo normalização de plaquetas por 112 dias, normalização de LDH por 35 dias e melhora da creatinina ≥ 25% por 70 dias.

[0295] Os critérios para Resposta de TMA Completa foram atendidos quando todos os critérios foram atendidos simultaneamente, e cada critério foi atendido por pelo menos 28 dias. Os componentes da resposta de TMA completa, bem como outros critério de avaliação de eficácia secundários, apresentam uma resposta consistente ao tratamento. Conforme mostrado na Figura 9, 53,6% (30/56) dos pacientes alcançaram uma resposta de TMA completa durante o período de avaliação inicial. 33,9% (19/56) dos pacientes tiveram uma resposta parcial.

[0296] A normalização hematológica inclui a normalização simultânea da contagem de plaquetas e a normalização de LDH. Cada critério foi atendido por pelo menos 28 dias. 73,2% (41/56) dos sujeitos alcançaram a normalização hematológica durante o período de avaliação inicial (ver Tabela 12). 83,9% (47/56) dos sujeitos alcançaram a normalização da contagem de plaquetas durante o período de avaliação inicial (ver Tabela 12, Figura 10, Figura 14 e Figura 15).

[0297] 76,8% (43/56) dos sujeitos alcançaram a normalização de LDH durante o período de avaliação inicial (ver Tabela 12, Figura 10, Figura 16 e Figura 17). Tabela 12: Principais Resultados de Eficácia: Resposta de TMA Completa Primária Durante o Período de Avaliação Primária

Respondente Total n Proporção (95% CI) Resposta de TMA completa 56 30 0,536 (0,396, 0,675) Normalização da Contagem 56 47 0,839 (0,734, 0,944) de Plaquetas Normalização de LDH 56 43 0,768 (0,648, 0,887) Melhora de 25% na 56 33 0,589 (0,452, 0,727) Creatinina Sérica da Linha de Referência Normalização Hematológica 56 41 0,732 (0,607, 0,857)

[0298] Conforme mostrado na Figura 6, havia trinta (30) respondentes de TMA completos. Quarenta (40) dos cinquenta e seis (56) sujeitos (71,4%) alcançaram uma resposta de hemoglobina (HGB) (aumento ≥ 20 g/L). Dos trinta (30) respondentes de TMA completos, quatro (4) não tiveram uma resposta de hemoglobina (HGB). A Figura 10 apresenta a resposta TMA completa geral dividida por subgrupos durante o período de avaliação inicial de 26 semanas.

[0299] A Figura 7 mostra o tempo para resposta de TMA completa. O tempo médio para resposta de TMA completa foi de 86 dias. Os pacientes que não tiveram uma resposta foram censurados na data da última visita ou descontinuação do estudo.

[0300] A Figura 11 mostra o status de TMA completo ao longo do tempo (círculo aberto), incluindo normalização da contagem de plaquetas (triângulo aberto), normalização hematológica (+), melhora de 25% na creatinina sérica da linha de referência (quadrado aberto) e normalização de LDH (X).

[0301] Houve sete (7) não respondentes. Os dados para os não respondentes são apresentados na Tabela 13. Tabela 13: Principais Resultados de Eficácia: Não respondentes (0/3 componentes) durante o Período de Avaliação Primária Dados Frequência (N = 7) Comentários Demográficos

Asiática 5 Masculino 4 CKD na Linha de • 6: Estágio 5 Referência • 1: Estágio 4 Idade (anos) 76, 74, 73, 67, 57, 57, 46 Parte mais antiga da distribuição Transplante Renal 2 Anterior Descontinuações 6 0044-602, 0747-601 • 2 mortes 0573-602, 0738-602 • 2 AEs 044-603 • 1 Decisão do Médico 044-604 • 1 Violação de Protocolo Diálise Linha de 5 Referência Fim de FUP 6 1 permaneceu SEM (044- 604). Tinha PTLS normal no D22, 85 e 99. Redução de LDH, mas não normal, Redução de SCR, mas < 25%. O PV foi devido ao recebimento de plasma fresco.

[0302] Conforme mostrado na Tabela 14, 58,6% (17/29) dos pacientes que estavam EM diálise na linha de referência diminuíram gradualmente no último acompanhamento disponível. Dos 27 pacientes que estavam sem diálise na linha de referência, 21 (78%) permaneceram sem diálise no último acompanhamento. Tabela 14: Principais Resultados de Eficácia: Status de Diálise ao Longo do Tempo Status de Diálise no último FUP Total

EM SEM Status de EM 12 17 29 Diálise na Linha de Referência SEM 6 21 27

Total 18 38 56

[0303] Com relação à farmacocinética/farmacodinâmica, 99,53% de todos os resultados de C5 livre obtidos após a primeira dose durante o período de avaliação inicial foram ≤ 0,5 mg/mL, o limite definido para a inibição do complemento terminal (ver Figura 22). A dosagem baseada no peso resultou em exposições máximas, no estado estacionário e no vale, conforme previsto, sem achados farmacocinéticos inesperados (ver Figura 8).

[0304] Uma visão geral dos principais resultados de segurança é apresentada na Tabela 15. Os pacientes avaliados quanto à segurança incluem todos os pacientes que receberam ≥ 1 dose da droga em estudo (N = 58). Dois desses pacientes foram excluídos da análise de eficácia de acordo com o protocolo devido à inelegibilidade (identificação de STEC-HUS). Tabela 15: Principais Resultados de Segurança: Visão Geral da Segurança Principal Geral (N = 58) Categorias de Eventos Adversos n (%) Eventos Qualquer Evento Adverso (AE) 58 (100,0) 818 Relacionado ao Tratamento 20 (34,5) 58 Não Relacionado ao Tratamento 58 (100,0) 760 Qualquer Evento Adverso Grave (SAE) 30 (51,7) 71 (1) TEAEs fatais 3 (5,2) 3 Mortes, Pré-tratamento 1(1,7) 1 TEAEs que resultam em d/c da droga 3 (5,2) 3 TESAEs resultando em d/c da Droga 3 (5,2) 3 TEAEs resultando no d/c do Estudo 3 (5,2) 3 TESAEs Resultando em d/c do Estudo 3 (5,2) 3 TEAEs durante a Infusão da Droga em Estudo 4 6,9) 6 TESAEs durante a Infusão da Droga 0 (0,0) 0 Infecções meningocócicas 0 (0,0) 0 AEs Relacionados 20 (34,5) 58 SAEs relacionados 2 (3,4) 2

(1) No geral, 4 mortes foram observadas: 1 por AE pré-tratamento (trombose arterial cerebral), 3 por AEs emergentes do tratamento não relacionados, em que 2 foram choque séptico e 1 hemorragia intracraniana)

[0305] Ocorreram quatro mortes: 1 de evento adverso pré-tratamento (trombose arterial cerebral) e 3 de eventos adversos emergentes de tratamento não relacionados (2 choque séptico, 1 hemorragia intracraniana). Um resumo das mortes em pacientes que receberam no mínimo uma dose de ravulizumabe é apresentado na Tabela 16. Tabela 16: Resumo de Mortes de Pacientes que Receberam no Mínimo uma Dose de Ravulizumabe Causa da Idade Tempo de Tratamento Ponto de tempo chave Morte Trombose 77 O paciente recebeu 1 Antes da primeira dose: na da Artéria dose, mas foi excluído UTI para trombose arterial Cerebral da análise de eficácia cerebral e convulsões. devido ao teste de No dia da primeira dose: toxina Shiga positivorecebendo ventilação mecânica. Convulsões e infartos corticais aproximadamente 10 dias depois, o tratamento de suporte foi retirado. Morte: Dia 15 Choque 76 O paciente recebeu 2 Antes da primeira dose: Séptico doses da droga em Choque recente (séptico ou estudo hipovolêmico). ARDs e infecções múltiplas. O paciente estava tomando antibióticos, medicamentos cardiovasculares, insulina, sirolimo, prednisolona e inotrópicos. No dia da primeira dose: recebendo ventilação mecânica. Dia 6: novo choque séptico por Corynebocterium e Candido lusitaniae no cateter (ponta retirada para cultura antes da primeira dose). Morte: Dia 25

Choque 73 Paciente recebeu 1 Antes da primeira dose: AVC Séptico dose isquêmico recente, encefalopatia, insuficiência respiratória e em uso de vários antibióticos para infecção. No dia da primeira dose: recebendo ventilação mecânica, pseudomonas no aspirado pulmonar. Início do Choque Séptico: Dia 2 Morte: Dia 3 Trombose 46 O paciente recebeu 3 Antes da primeira dose: da Artéria doses da droga em hipertensão não controlada; Cerebral estudo CKD Estágio 5, necessidade de diálise no início da droga em estudo; trombocitopenia, anemia e hipercalcemia. Dia 93: o paciente foi internado com perda de consciência. Hemorragia intraventricular direita e hemorragia intracraniana foram identificadas. Após a cirurgia, a hipertensão e a perda de consciência persistiram e os cuidados de suporte foram suspensos. Morte: Dia 107

[0306] Conforme mostrado na Tabela 17, os eventos adversos mais frequentes foram dor de cabeça (N = 21), diarreia (N = 18), vômitos (N = 15), náuseas (N = 13) e hipertensão (N = 13). Conforme mostrado na Tabela 18, o evento adverso grave mais comum foi a pneumonia (N = 3). Três sujeitos descontinuaram o estudo devido a um evento adverso. Não houve casos meningocócicos. Tabela 17: Principais Resultados de Segurança: Visão Geral de Segurança Principal [AEs presentes em pelo menos 4 pacientes] Geral (N = 58) n (%) E

Prazo Preferencial

Qualquer AE 58 (100,0) 818 Diarreia 18 (31,0) 24 Vômito 15 (25,9) 18 Náusea 13 (22,4) 16 Constipação 8 (13,8) 10 Dor abdominal 7 (12,1) 10 Dispepsia 4 (6,9) 4 Dor de cabeça 21 (36,2) 28 Tontura 4 (6,9) 4 Infecção do trato urinário 10 (17,2) 21 Nasofaringite 8 (13,8) 12 Pneumonia 4 (6,9) 5 Pirexia 10 (17,2) 11 Edema periférico 9 (15,5) 13 Fadiga 7 (12,1) 8 Dor 4 (6,9) 5 Tosse 10 (17,2) 10 Dispneia 10 (17,2) 13 Hipocalemia 9 (15,5) 18 Hipercaliemia 4 (6,9) 8 Deficiência de vitamina D 4 (6,9) 4 Alopecia 6 (10,3) 6 Pele seca 6 (10,3) 6 Erupção cutânea 5 (8,6) 5 Hipertensão 13 (22,4) 20 Hipotensão 4 (6,9) 4 Artralgia 10 (17,2) 12 Dor nas costas 6 (10,3) 6 Espasmos musculares 5 (8,6) 5 Dor na extremidade 5 (8,6) 6 Alanina aminotransferase 5 (8,6) 7 aumentada Aumento da aspartato 4 (6,9) 4 aminotransferase Anemia 8 (13,8) 8 Trombocitopenia 4 (6,9) 4 Ansiedade 8 (13,8) 12 Insônia 4 (6,9) 4

Visão turva 4 (6,9) 4 Tabela 18: Principais Resultados de Segurança: Visão Geral de Segurança Principal [SAEs presentes em pelo menos 2 pacientes] Geral (N = 58) Prazo Preferencial n (%) E 71 Qualquer SAE 30 (51,7) Pneumonia 3 (5,2) 3 Choque séptico 2 (3,4) 2 Infecção do trato urinário 2 (3,4) 4 Síndrome hemolítica urêmica 2 (3,4) 2 atípica Hipertensão 3 (5,2) 5 Hipertensão maligna 2 (3,4) 5

[0307] 71,4% (40/56) dos sujeitos obtiveram resposta à hemoglobina (HGB) durante o período de avaliação inicial (ver Tabela 19 e Figura 6). A Figura 18 mostra a alteração média observada e baseada no modelo em HGB da linha de referência e intervalo de confiança de 95% ao longo do tempo. A Figura 19 mostra a HGB média observada e o intervalo de confiança de 95% ao longo do tempo. Tabela 19: Principais Resultados de Eficácia: Resposta de HGB (aumento da linha de referência de HGB ≥ com resultado confirmatório)

N Proporção (95% CI) Respostas da HGB; Semana 26 40 0,714 (0,587, 0,842) Respostas da HGB; Corte de Dados ou EOS 43 0,768 (0,648, 0,887)

[0308] O estágio da doença renal crônica (CKD) é classificado com base no Estágio da doença renal crônica da National Kidney Foundation. Os estágios da CKD e os valores da taxa de filtração glomerular estimada (eGFR) correspondentes são os seguintes: Estágio 1: eGFR >=90 (normal), Estágio 2: eGFR 60-89, Estágio 3A: eGFR 45-59, Estágio 3B: eGFR 30 -44, Estágio 4: eGFR 15-29 e Estágio 5: eGFR <15 (incluindo diálise: Estágio final). O estágio 1 é considerado a melhor categoria. O estágio 5 é considerado a pior categoria. Uma melhora na eGFR (por exemplo, > 15) corresponde a uma melhora no estágio de CKD (por exemplo, um estágio de CKD inferior).

[0309] A Figura 12 mostra a eGFR média da linha de referência e o intervalo de confiança de 95%. A Figura 13 mostra a alteração nas categorias de CKD/eGFR da linha de referência até o Dia 183. Os dados apresentados são n (%). As categorias de eGFR são mostradas em mL/min/1,73 m2. A linha de referência é derivada com base no último eGFR disponível antes de iniciar o tratamento. O triângulo inferior (representado por linhas pretas angulares) representa a melhoria da Linha de Referência até o dia 183, o triângulo superior (representado por pontos) representa a piora e as células brancas representam que não houve mudança.

[0310] Além disso, conforme indicado na Tabela 20 e na Figura 13, trinta e dois (32) de quarenta e sete (47) sujeitos melhoraram na mudança de estágio de CKD desde a linha de referência até o Dia 183 (seis por 5 estágios, sete por 4 estágios, cinco por 3 estágios, quatro por 2 estágios e dez por 1 estágio). Treze (13) de quarenta e sete (47) sujeitos permaneceram os mesmos. Dois (2) de treze (13) pioraram. Tabela 20: Principais Resultados de Segurança: Secundário, Alteração de

CKD (a) Consulta Status Estatística Geral Dia 183 Melhora(b) n/m 32/47 (d) 0,681 (0,529, 0,809) Proporção (95% CI) (c) n/m 2/13 Piora (d) 0,154 (0,019, 0,454) Proporção (95% CI) Permaneceu Igual n/m 13/47

(d) Proporção (95% CI) 0,277 (0,156, 0,426) (a) Comparado ao estágio de CKD na linha de referência. (b) Excluiu aqueles com Estágio 1 na linha de referência, pois eles não poderiam melhorar. (c) Excluiu aqueles com Estágio 5 na linha de referência, pois não podiam piorar. (d) intervalos de confiança de 95% (95% CIs) para a proporção foram baseados em limites de confiança exatos usando o método de Clopper-Pearson.

[0311] A Tabela 21 e a Figura 20 mostram a mudança na fadiga ao longo do tempo. Os dados na Figura 20 são mostrados como média (barras de erro, 95% CI). Foi observada uma melhora rápida na fadiga, ou seja, uma melhora média de 9 pontos no Dia 8. Uma melhora clinicamente significativa na fadiga (≥ 3 pontos) foi observada em 84,1% (37/44) dos pacientes no Dia 183. O aumento médio foi de 20 pontos da Linha de Referência até o Dia 183. Tabela 21: Principais resultados de Segurança: FACIT - Melhora de 3 Pontos da Linha de Referência Geral Consulta Estatística (N = 56) Dia 8 n/m 31/49 Proporção (95% CI) 0,633 (0,483, 0,766) Dia 29 n/m 37/48 Proporção (95% CI) 0,771 (0,627, 0,880) Dia 71 n/m 38/47 Proporção (95% CI) 0,809 (0,667, 0,909) Dia 127 n/m 37/45 Proporção (95% CI) 0,822 (0,679, 0,920) Dia 183 n/m 37/44 Proporção (95% CI) 0,841 (0,699, 0,934)

[0312] A EQ-5D-3L é avaliada usando o índice de pontuação de acordo com o valor de Compensação de Tempo definido para os Estados Unidos (US TTO), bem como a resposta à pergunta da Escala Visual Analógica (VAS). US TTO> 0,94 indica saúde total. A linha de referência é do valor do Dia 1. A Figura 21 mostra a média de EQ-5D-3L e intervalo de confiança de 95%. Com relação à imunogenicidade, foi observado um paciente com resultado positivo emergente do tratamento para anticorpos antidrogas (ADAs), sem anticorpos neutralizantes e sem efeito aparente na farmacocinética/farmacodinâmica (ver Tabela 22). Tabela 22: Principais Resultados de Segurança: Visão Geral da Segurança: Imunogenicidade Anticorpos Antidrogas Geral (N=58) _______________________________________________ _________________________________ Positivo Negativo Consulta m n (%) n (%) Linha de Referência 57 18 (31,6) 39 (68,4) Dia 71 52 2 (3,8) 50 (96,2) Dia 127 49 0 (0,0) 49 (100,0) Dia 183 47 0 (0,0) 47 (100,0) Dia 351 17 0 (0,0) 17 (100,0) Até o Dia 183 54 2 (3,7) 52 (96,3) Acompanhamento 54 2 (3,7) 52 (96,3) Completo

[0313] A Figura 22 representa as concentrações de complemento C5 livre no soro ao longo do tempo (escala semi-log). A linha tracejada horizontal indica concentração de C5 livre no soro de 0,5 µg/mL, com inibição completa do complemento terminal definida como concentração de C5 livre no soro ≤ 0,5 µg/mL. As seguintes amostras de C5 livre no dia 1 foram excluídas por serem consideradas biologicamente não plausíveis. As exclusões foram corroboradas com os dados de PK emparelhados, uma vez que as amostras de PK e C5 livre foram coletadas da mesma retirada de sangue. [N = 2, Amostras de pré-dose do Dia 1/N = 1, Amostra de fim de infusão do Dia 1]. Como evidenciado pela Figura 22, ravulizumabe apresentou inibição do complemento terminal imediata, completa e sustentada ao longo do intervalo de dosagem de 8 semanas.

[0314] Por fim, a população do estudo entre o estudo atual com ravulizumabe (ALXN1210-aHUS-311) e o estudo com eculizumabe em adultos (C10-004) foram semelhantes no Dia 183. No entanto, como mostrado na Figura 23, ravulizumabe resultou em leituras melhoradas em comparação com eculizumabe com relação aos seguintes parâmetros clínicos secundários: a) estabilização da categoria eGFR/doença renal crônica (CKD) e (b) aumento da taxa de filtração glomerular estimada (eGFR). Especificamente, dos pacientes tratados com ravulizumabe no presente estudo, 68% alcançaram uma melhora na categoria da eGFR/ estabilização de CKD de pelo menos um estágio e houve um aumento médio na eGFR de 35 ± 35. Em contraste, dos pacientes tratados com eculizumabe no estudo C10-004, apenas 63% alcançaram uma melhora na categoria eGFR/estabilização de CKD de pelo menos um estágio e houve um aumento médio na eGFR de 29 ± 24. Uma "resposta de TMA completa" no estudo atual é o equivalente a uma "resposta de TMA completa modificada" em C10-004.

[0315] Resumindo, o ravulizumabe forneceu inibição imediata e completa de C5, que foi mantida ao longo do intervalo de dosagem de 8 semanas. Uma resposta de TMA completa foi alcançada em 54% dos pacientes, o que é semelhante aos dados para o eculizumabe (56% no estudo C10-004). Houve uma rápida melhora na contagem de plaquetas. Além disso, a função renal melhorou substancialmente. Especificamente, 58,6% dos pacientes em diálise na linha de referência não precisaram de diálise ao final do estudo. Além disso, nenhuma preocupação inesperada de segurança foi identificada. Assim, os resultados deste estudo apoiam o uso de ravulizumabe em intervalos de dosagem de 8 semanas em pacientes adultos com TMA mediada por complemento.

RESUMO DA SEQUÊNCIA SEQ ID NO:1

GYIFSNYWIQ SEQ ID NO:2

EILPGSGSTEYTENFKD SEQ ID NO:3

YFFGSSPNWYFDV SEQ ID NO:4

GASENIYGALN SEQ ID NO:5

GATNLAD SEQ ID NO:6

QNVLNTPLT SEQ ID NO:7

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYIFSNYWIQWVRQAPGQGLEWM GEILPGSGSTEYTENFKDRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARY

FFGSSPNWYFDVWGQGTLVTVSS SEQ ID NO:8

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCGASENIYGALNWYQQKPGKAPKLLIYGA TNLADGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQNVLNTPLTFGQGTK

VEIK SEQ ID NO:9

ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVH TFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKC CVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPS DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCS

VMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO:10

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYIFSNYWIQWVRQAPGQGLEWM GEILPGSGSTEYTENFKDRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAR YFFGSSPNWYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTY T CNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLT VLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMT KNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTV

DKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO:11

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCGASENIYGALNWYQQKPGKAPKLLIYG ATNLADGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQNVLNTPLTFGQ GTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDN ALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPV

TKSFNRGEC SEQ ID NO:12

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGHIFSNYWIQWVRQAPGQGLEW MGEILPGSGHTEYTENFKDRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYC

ARYFFGSSPNWYFDVWGQGTLVTVSS SEQ ID NO:13

ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGV HTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVER KCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPE VQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKG FYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGN

VFSCSVLHEALHSHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO:14

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGHIFSNYWIQWVRQAPGQGLEWM GEILPGSGHTEYTENFKDRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAR YFFGSSPNWYFDVWGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTY T CNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLT VLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMT KNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTV

DKSRWQEGNVFSCSVLHEALHSHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO:15

ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVH TFPAVLQSSGLYSLSSVVTVTSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKC CVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLYITREPEVTCVVVDVSHEDPEVQF NWYVDGMEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKV SNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYP SDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF

SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO:16

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYIFSNYWIQWVRQAPGQGLEWM GEILPGSGSTEYTENFKDRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAR YFFGSSPNWYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALG CLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVTSSNF GTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKP KDTLYITREPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGMEVHNAKTKPREEQ FNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPRE PQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTP PMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS

PGK SEQ ID NO:17

GASENIYHALN SEQ ID NO:18

EILPGSGHTEYTENFKD SEQ ID NO:19

GHIFSNYWIQ SEQ ID NO:20

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGHIFSNYWIQWVRQAPGQGLEW MGEILPGSGHTEYTENFKDRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYC ARYFFGSSPNWYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALG CLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQ T YTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMIS RTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVL TVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMT KNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTV

DKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO:21

SYAIS SEQ ID NO:22

GIGPFFGTANYAQKFQG SEQ ID NO:23

DTPYFDY SEQ ID NO:24

SGDSIPNYYVY SEQ ID NO:25

DDSNRPS SEQ ID NO:26

QSFDSSLNAEV SEQ ID NO:27

QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISVWRQAPGQGLEWMGGI GPFFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDTPYFD

YWGQGTLVTVSS SEQ ID NO:28

DIELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDSIPNYYVYWYQQKPGQAPVLVIYDDSNRP SGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAEDEADYYCQSFDSSLNAEVFGGGTK

LTVL SEQ ID NO:29

NYIS SEQ ID NO:30

IIDPDDSYTEYSPSFQG SEQ ID NO:31

YEYGGFDI SEQ ID NO:32

SGDNIGNSYVH SEQ ID NO:33

KDNDRPS SEQ ID NO:34

GTYDIESYV SEQ ID NO:35

EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYSFTNYISWVRQMPGKGLEWMGIIDPD DSYTEYSPSFQGQVTI SADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCARYEYGGFDI

WGQGTLVTVSS SEQ ID NO:36

SYELTQPPSVSVAPGQTARISCSGDNIGNSYVHWYQQKPGQAPVLVIYKDNDR

PSGIPERFSGSNSGNT ATLTISGTQAEDEADYYCGTYDIESYVFGGGTKLTV L SEQ ID NO:37

SSYYVA

SEQ ID NO:38

AIYTGSGATYKASWAKG SEQ ID NO:39

DGGYDYPTHAMHY SEQ ID NO:40

QASQNIGSSLA SEQ ID NO:41

GASKTHS SEQ ID NO:42

QSTKVGSSYGNH SEQ ID NO:43

QVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTSHSSYYVAWVRQAPGKGLEWVGA IYTGSGATYKASWAKGRFTISKDTSKNQVVLTMTNMDPVDTATYYCASDGGYD

YPTHAMHYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO:44

DVVMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQNIGSSLAWYQQKPGQAPRLLIYGASK THSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCQSTKVGSSYGNHFGGGTK

VEIK SEQ ID NO:45

QVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTVHSSYYMAWVRQAPGKGLEWVGA IFTGSGAEYKAEWAKGRVTISKDTSKNQVVLTMTNMDPVDTATYYCASDAGYD YPTHAMHYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYF PEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELRRGPKVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTV LHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKN QVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDK

SRWQQGNVFSCSVLHEALHAHYTRKELSLSP SEQ ID NO:46

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGISSSLAWYQQKPGKAPKLLIYGASET ESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQNTKVGSSYGNTFGGGTKV EIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSG NSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFN

RGEC SEQ ID NO:47

QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGDSVSSSYWTWIRQPPGKGLEWIGYIYY SGSSNYNPSLKSRATISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCAREGNVDTTMIF

DYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO:48

AIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPGKAPKLLIYAASSL

QSGVPSRFAGRGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQDFNYPWTFGQGTKVEIK SEQ ID NO:49

QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGDSVSSSYWTWIRQPPGKGLEWIGYIYY SGSSNYNPSLKSRATISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCAREGNVDTTMIF DYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVS WNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTK VDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDV SQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGK EYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKG FYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVF

SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO:50

AIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPGKAPKLLIYAASSL QSGVPSRFAGRGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQDFNYPWTFGQGTKVEIK RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQ ESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGE C

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Método de tratamento de um paciente humano com síndrome hemolítica urêmica atípica (aHUS), sendo o método CARCTERIZADO pelo fato de que compreende administrar ao paciente uma quantidade eficaz de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno deste, compreendendo sequências de cadeia pesada de CDR1, CDR2 e CDR3 indicadas em SEQ ID NOs: 19, 18 e 3, respectivamente, e sequências de cadeia leve de CDR1, CDR2 e CDR3 indicadas em SEQ ID NOs: 4, 5 e 6, respectivamente, em que o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno deste, é administrado: (a) uma vez no Dia 1 em uma dose de: 2400 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 2700 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3000 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3000 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 3300 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3600 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg.

2. Método de tratamento de um paciente humano com síndrome hemolítica urêmica atípica (aHUS), sendo o método CARCTERIZADO pelo fato de que compreende administrar ao paciente uma quantidade eficaz de um anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno deste, compreendendo sequências de cadeia pesada de CDR1, CDR2 e CDR3 indicadas em SEQ ID NOs: 19, 18 e 3, respectivamente, sequências de cadeia leve de CDR1, CDR2 e CDR3 indicadas em SEQ ID NOs: 4, 5 e 6, respectivamente, e uma região constante Fc humana variante que se liga ao receptor Fc neonatal humano (FcRn), em que a região constante Fc CH3 humana variante compreende substituições Met-429-Leu e Asn-435-Ser em resíduos correspondentes a metionina 428 e asparagina 434 de uma região constante Fc de IgG humana nativa, cada uma na numeração EU, em que o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno deste, é administrado: (a) uma vez no Dia 1 em uma dose de: 2400 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 2700 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3000 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3000 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 3300 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3600 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, CARCTERIZADO pelo fato de que o paciente foi tratado anteriormente com eculizumabe.

4. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento começa pelo menos duas semanas após a última dose de eculizumabe do paciente.

5. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o paciente foi tratado com eculizumabe por pelo menos 6 meses antes do Dia 1 do tratamento.

6. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o paciente foi tratado anteriormente com eculizumabe com uma dose de 900 mg a cada 2 semanas.

7. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-C5 compreende uma região variável de cadeia pesada representada na SEQ ID NO: 12 e uma região variável de cadeia leve representada na SEQ ID NO: 8.

8. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-C5 compreende ainda uma região constante de cadeia pesada representada na SEQ ID NO: 13.

9. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo compreende um polipeptídeo de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos representada em SEQ ID NO: 14 e um polipeptídeo de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos representada em SEQ ID NO: 11.

10. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-C5 se liga ao C5 humano em pH 7,4 e 25°C com uma constante de dissociação de afinidade (KD) que varia de 0,1 nM a 1 nM.

11. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-C5 se liga ao C5 humano em pH 6,0 e 25°C com KD ≥ 10 nM.

12. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-C5 é administrado a um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 2400 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3000 mg.

13. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 11, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-C5 é administrado a um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 2700 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3300 mg.

14. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 11, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-C5 é administrado a um paciente com peso ≥ 100 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 3.000 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3600 mg.

15. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5 de 100 µg/ml ou superior durante o tratamento.

16. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento mantém uma concentração sérica mínima do anticorpo anti-C5 de 200 µg/ml ou superior durante o tratamento.

17. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento mantém uma concentração de C5 livre de 0,309 a 0,5 µg/mL ou inferior.

18. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento reduz a concentração de C5 livre em mais de 99% ao longo do período de tratamento.

19. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento reduz a concentração de C5 livre em mais de 99,5% ao longo do período de tratamento.

20. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-C5 é administrado em uma dose de 3000 mg, 3300 mg ou 3600 mg a cada oito semanas após o tratamento por até dois anos.

21. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-C5 é formulado para administração intravenosa.

22. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento tem um total de 26 semanas.

23. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento resulta na inibição do complemento terminal.

24. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento resulta em uma redução da hemólise em comparação com a linha de referência avaliada pelos níveis de lactato desidrogenase (LDH).

25. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento resulta em uma normalização dos níveis de LDH.

26. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento resulta na eliminação da hemólise irruptiva durante o período de tratamento.

27. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento produz uma mudança para os níveis normais de um biomarcador hematológico relacionado à hemólise selecionado do grupo que consiste em hemoglobina livre, haptoglobina, contagem de reticulócitos, clone de glóbulos vermelhos (RBC) de PNH e D-dímero.

28. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento produz pelo menos um efeito terapêutico selecionado do grupo que consiste em uma redução ou cessação da hipertensão grave, proteinúria, uremia, letargia, fadiga, irritabilidade, trombocitopenia, anemia hemolítica microangiopática e comprometimento da função renal em comparação com a linha de referência.

29. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento produz uma mudança para os níveis normais do Fator Ba, receptor do fator de necrose tumoral solúvel 1

[sTNFR1]), molécula de adesão vascular solúvel 1 [sVCAM1], trombomodulina, D- dímero e cistatina C.

30. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento produz um aumento na estabilização da hemoglobina em comparação com a linha de referência.

31. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento produz uma redução na necessidade de transfusões de sangue em comparação com a linha de referência.

32. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento produz uma redução nos principais eventos vasculares adversos (MAVEs).

33. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento produz uma alteração da linha de referência na qualidade de vida, conforme avaliado pela Avaliação Funcional da Terapia de Doença Crônica (FACIT) - Escala de Fadiga, versão 4 e pelo Quality of Life Questionnaire-Core 30 Scale (Questionário de Qualidade de Vida) da Organização Europeia de Pesquisa e Tratamento para Câncer.

34. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento resulta na normalização das plaquetas.

35. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento resulta em uma melhora ≥ 25% a partir da linha de referência na creatinina sérica.

36. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que resulta em uma resposta de TMA completa.

37. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento resulta em uma resposta de TMA completa modificada.

38. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que a doença renal crônica (CKD) do paciente melhora em um ou mais estágios após o início do tratamento.

39. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento resulta em uma mudança para os níveis normais de eGFR.

40. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARCTERIZADO pelo fato de que o tratamento resulta em um valor de compensação de tempo EQ-5D-3L definido para os Estados Unidos (US TTO) de > 0,94.

41. Kit para o tratamento de aHUS em um paciente humano, sendo o kit CARCTERIZADO pelo fato de que compreende: (a) uma dose de um anticorpo anti-C5 compreendendo os domínios de CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia pesada com a sequência indicada em SEQ ID NO: 12, e os domínios de CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia leve com a sequência indicada em SEQ ID NO: 8; e (b) instruções para usar o anticorpo anti-C5 no método de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores.

42. Kit, de acordo com a reivindicação 41, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-C5 é administrado a um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 2400 mg; e (b) no Dia 15.

43. Kit, de acordo com a reivindicação 41, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-C5 é administrado a um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 2700 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3300 mg.

44. Kit, de acordo com a reivindicação 41, CARCTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-C5 é administrado a um paciente com peso ≥ 100 kg: (a) uma vez no Dia 1 a uma dose de 3000 mg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3600 mg.

45. Anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno deste, CARCTERIZADO pelo fato de que compreende os domínios de CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia pesada com a sequência indicada em SEQ ID NO: 12 e os domínios de CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia leve com a sequência indicada em SEQ ID NO: 8, para administração, em que o anticorpo anti-C5, ou fragmento de ligação ao antígeno deste, é administrado: (a) uma vez no Dia 1 em uma dose de: 2400 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 2700 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3000 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg; e (b) no Dia 15 e a cada oito semanas daí em diante a uma dose de 3000 mg para um paciente com peso ≥ 40 a < 60 kg, 3300 mg para um paciente com peso ≥ 60 a < 100 kg ou 3600 mg para um paciente com peso ≥ 100 kg.

PROJETO DO ESTUDO DE BRAÇO ÚNICO

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 128/150 Ataque e manutenção Período de extensão Triagem 26 semanas até 4,5 anos

8 semanas 8 semanas Continuar a dose de 2 semanas 8 semanas manutenção a cada 8 semanas

Dia 1 Dia 15 Dose de Ataque Dose de Manutenção 1/23

Período de avaliação para o critério de avaliação primário Primeira dose do estudo de extensão

Peso corporal do paciente (kg) Fase de ataque (mg) Fase de manutenção (mg)

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 129/150 Resposta de TMA completa* Critério de avaliação Normalização da contagem de plaquetas (≥ 150 x 109/L) e primário Normalização de LDH (≤ 246 U/L) e ≥ 25% de melhora na creatinina sérica da linha de referência

Alteração das variáveis hematológicas Critérios de Alteração nas variáveis renais (diálise, eGFR, categoria de eGFR) avaliação 2/23 secundários Alteração em FACIT-Fadiga PK/PD

Segurança AEs e SAEs

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 130/150 Pacientes foram incluídos se Pacientes foram excluídos se

Fossem adultos (≥ 18 anos) e adolescentes (< 18 anos) pesando ≥ 40 kg Tivessem atividade de ADAMTS13 <5%

Tivessem um diagnóstico de STEC-HUS Tivessem contagem de plaquetas < 150 x 109/L Tivessem um teste de Coombs direto positivon

Tivessem HDL ≥ 1,5 ULN Tivessem infecções não tratadas 3/23

Tivessem uso anterior de eculizumabe ou outro inibidor do complemento Tivessem hemoglobina ≤ LLN Tivessem PE/PI ≥ 28 dias antes do início da triagem*

Tivessem nível de creatinina sérica ≥ ULN Estivessem em diálise crônica

Paciente com TMA e suposto diagnóstico de aHUS foi inscrito e recebeu a primeira dose de ALZN1210

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 131/150 (N = 58)

Descontinuado (de acordo com o Elegibilidade Confirmada protocolo) devido a elegibilidade Tratado com ALXN1210 não confirmada(1) (N = 56) (N = 2) 4/23

Concluiu o Período de Avaliação Inicial de 183 Descontinuado(2) dias e entrou na Extensão (N = 7) (N = 49)

Notas Continuando na Fase de !1) Um dos pacientes positivos para STEC teve um SAE grave após a descontinuação Descontinuado(3) (2) 2 mortes, 3 eventos adversos, 1 violação do protocolo, 1 decisão do médico Extensão (N = 2) (3) 1 decisão do médico, 1 desistência do sujeito, ambos tiveram resposta de TMA (N = 47) completa

Consulta de Resposta de TMA Normalização de Melhora da Creatinina ≥ Normalização de LDH 25% Análise Completa Plaquetas

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 132/150 Dia 8 Não Não Não Não

Dia 15 Não Sim Não Não

Dia 22 Não Sim Sim Não

Dia 29 Não Sim Sim Não 35 Dias Dia 43 Não Sim 112 Dias Sim Não

Dia 57 Sim Sim Sim Sim 5/23

Dia 71 Não Sim Não Sim

Dia 85 Não Sim Não Sim 70 Dias

Dia 99 Não Sim Não Sim

Dia 113 Não Sim Não Sim

Dia 127 Não Sim Não Sim

Sem Resposta (7)

+ censurado

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 134/150 Tempo médio para Resposta cTMA em dias (95% CI) = 86,0 (42,0, -) 7/23

Proporção de Resposta de TMA Completa Consulta (Dias) Nº. de pacientes em risco

Consulta (Dias)

Nº. de pacientes

Concentração Sérica (µg/ml)

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 136/150 9/23

Resposta de TMA Completa Normalização de Contagem de Normalização de LDH 25% de melhora na creatinina Plaquetas sérica da linha de referência

Durante o período de avaliação inicial Corte de dados de vale

Geral (N=56)

Masculino (N=19

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 137/150 Feminino (N=37)

Asiático (N=15) Branco (N=29) Etnia: Desconhecida (N=8) Etnia: Outra (N=4)

Hispânico ou Latino (N=3) Não Hispânico ou Latino (N=41) Etnicidade: Desconhecida (N=12)

América do Norte (N=6) Europa (N=34) Ásia Oriental (N=16) Japão (N=3) 10/23

Restante da Ásia-Pacífico (N=13)

Geral e por Subgrupos Com histórico de transplante renal (N=8) Sem histórico de transplante renal (N=48)

Diálise dentro de 5 dias antes do início do tratamento (N=29) Sem diálise dentro de 5 dias antes do início do tratamento (N=27)

Atende os critérios de TMA no Dia 1* (N=32) Não atende os critérios de TMA no Dia 1* (N=24)

Proporção e 95% CI

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 138/150 Resposta de TMA completa

Proporção (%) Normalização da contagem de plaquetas 11/23

Normalização hematológica 25% de melhora na creatinina sérica da linha de referência Normalização de LDH

Consulta (Dias)

Nº. de pacientes

Valores de contagem de plaquetas observadas ao longo do tempo (média [25% CI]) CI, intervalo de confiança; LDH, lactato desidrogenase; TMA, microangiopatia trombótica.

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 139/150 12/23

Alteração da Linha de Referência (ml/min/1,73 m²) Consulta (Dias) Nº. de pacientes Valores observados Valores baseados em modelo

Categorias de eGFR no Dia 183

Categorias de eGFR na linha de referência (N=47)

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 140/150 13/23

Dados apresentados como n (%). Categorias de eGFR são mostradas em ml/min/1,73 m² Estas células representam melhora da Linha de Referência até o Dia 183,

Estas células representam piora e células brancas representam nenhuma alteração, eGFR, taxa de filtração glomerular estimada

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 141/150 Plaquetas no Sangue (10^9/L) 14/23

Alteração da Linha de Referência Consulta (Dias) Nº. de pacientes Valores observados Valores baseados em modelo

Valores observados Consulta (Dias) Nº. de pacientes

Plaquetas no Sangue (10^9/L)

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 143/150 Lactato Desidrogenase no Soro (U/L) 16/23

Alteração da Linha de Referência Consulta (Dias) Nº. de pacientes

Valores observados Valores baseados em modelo

Valores observados Consulta (Dias) Nº. de pacientes

Lactato Desidrogenase no Soro (U/L)

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 145/150 Hemoglobina no Sangue (g/L) 18/23

Alteração da Linha de Referência Consulta (Dias) Nº. de pacientes

Valores observados Valores baseados em modelo

Valores observados Consulta (Dias) Nº. de pacientes

Hemoglobina no Sangue (g/L)

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 147/150 20/23

Alteração da Linha de Referência Consulta de Análise (Dia) Nº. de pacientes

Valores observados Valores baseados em modelo

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 148/150 21/23

Valores observados Valores baseados em modelo

Entre infusões Fim das infusões Antes das infusões

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 149/150 22/23

C5 livre de complemento (µg/L) Consulta (Dias)

Número de pacientes

Estudo atual:

Droga em estudo Ravulizumabe Eculizumabe

Petição 870210075910, de 18/08/2021, pág. 150/150 Número total de pacientes

Resposta de TMA completa*, n (%) 95% CI

Normalização hematológica, n (%) 23/23

Normalização da contagem de plaquetas , n (%)

Normalização de LDH, n (%)

Aumento da eGFR, unidade de adição médias

Melhora da categoria de eGFR de pelo menos 1 estágio, n (%)