BR112021003121A2 - nanopartículas - Google Patents

Abstract

NANOPARTÍCULAS. A presente invenção fornece uma nanopartícula que compreende um homopolímero, ou copolímero, de poli(alquila cianoacrilato), pelo menos um agente ativo e um inibidor aniônico e de radical, em que o inibidor aniônico e de radical é um composto com a seguinte fórmula: em que R1 é H; e R3, R4, R5, R6 e R7 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em -H, -OH, alcóxido C1-C6, alquila C1-C6, haletos, ácido carboxílico, cetona ou aldeído; em que o inibidor aniônico e de radical está presente em uma quantidade de 0,001 a 15% em peso, bem como um processo adequado para a fabricação da nanopartícula.

Description

“NANOPARTÍCULAS” CAMPO TÉCNICO

[001] Esta invenção se refere a nanopartículas de poli(alquila cianoacrilato) e a um processo para a fabricação das ditas nanopartículas.

ANTECEDENTES

[002] O uso de nanoencapsulamento oferece possibilidades empolgantes em muitos mercados, onde materiais/compostos voláteis, sensíveis ou prejudiciais precisam ser protegidos/ocultos/mascarados/separados e entregues/coentregues a um alvo desejado. Isso é de particular importância no campo de rápido desenvolvimento da nanomedicina.

[003] Duas áreas nas quais o uso de nanopartículas começou a demonstrar valor particular são distribuição de fármaco e imageamento molecular. No entanto, além das aplicações medicinais, as nanopartículas também podem ser altamente vantajosas na nanoencapsulação de vários materiais/compostos, tais como compostos de aroma, fragrâncias, sabores, corantes, nutracêuticos, herbicidas e pesticidas.

[004] Nanopartículas para a entrega de agentes terapêuticos têm o potencial de contornar muitos desafios associados às abordagens de entrega tradicionais, incluindo falta de adesão do paciente à terapia prescrita, efeitos colaterais adversos e eficácia clínica pobre devido à falta de entrega direcionada e biodistribuição subótima. Vantagens tecnológicas importantes de nanopartículas para entrega de fármacos incluem a capacidade de entregar fármacos insolúveis em água e instáveis, incorporação de agentes terapêuticos hidrofóbicos e hidrofílicos e a capacidade de utilizar várias vias de administração. Os sistemas de entrega de nanopartículas também podem facilitar a entrega de fármacos direcionadas e aplicações de liberação controlada, aumentando a biodisponibilidade do fármaco no local de ação, reduzindo a frequência de dosagem e o tamanho geral da dosagem,

minimizando assim os efeitos colaterais. Como resultado dessas vantagens potenciais, uma variedade de sistemas nanoparticulados foram investigados para uso como veículos de entrega de fármacos. Estes incluem micelas poliméricas, polímeros, partículas poliméricas, lipossomas, lipoproteínas de baixa densidade, nanopartículas lipídicas sólidas, dendrímeros, complexos hidrofílicos de fármaco-polímero e nanopartículas de cerâmica.

[005] Os agentes de imagem baseados em nanopartículas podem ter aumentado o tempo de circulação e alterado a solubilidade em água, evitando assim a eliminação rápida. Muitos dos sistemas de imagem de partículas usados até agora são projetados exclusivamente para imagens de piscina de sangue e sistema linfático. O uso de sistemas de imagem de direcionamento tem o potencial de aumentar o acúmulo no local alvo, levando a uma maior sensibilidade e, portanto, permitindo a imagem molecular fora da piscina de sangue e do sistema linfático. Prevê-se que nanopartículas direcionadas que contêm agentes terapêuticos e de imagem possam permitir o uso de um único veículo para diagnóstico, tratamento e monitoramento de acompanhamento de uma doença.

[006] Nanopartículas poliméricas têm recebido grande atenção no campo da medicina, em particular aquelas que compreendem polímeros biodegradáveis, como poli(ácido lático), poli(ácido glicólico) e poli(alquila cianoacrilato), no entanto, aqueles desenvolvidos até o momento têm eficácia limitada por causa de altas taxas de depuração e sua propensão a se distribuir por todo o corpo, inclusive no tecido saudável. A entrega controlada de um agente ativo usando nanopartículas permanece, portanto, um desafio e há uma necessidade para o desenvolvimento de composições biocompatíveis capazes de entrega prolongada de agentes ativos que proporcionam tempo de circulação prolongado e estabilidade aumentada em comparação com a administração do agente ativo sozinho.

[007] Nanopartículas de longa circulação, ou seja, aquelas com maior estabilidade no sistema circulatório, foram investigadas a esse respeito e contribuem para abordar essas questões. Esses tipos de nanopartículas têm uma concha hidrofílica ao redor das nanopartículas, conhecida como corona furtiva, que normalmente é fornecida por um polímero hidrofílico e leva a um aumento na meia-vida de circulação sanguínea da nanopartícula, aumentando muito os tempos de circulação. A casca hidrofílica imita a água e atua como uma camada imunoprotetora, tornando as nanopartículas relativamente "invisíveis" ao sistema imunológico, permitindo- lhes evitar a absorção pelas células fagocíticas. Nanopartículas estruturadas furtivamente são bem conhecidas e foram preparadas com uma variedade de núcleos de nanopartículas e com uma variedade de camadas poliméricas, conforme discutido em Nicolas e Couvreur em Rev. Nanomed. Nanobiotechnol., 2009, 1, 111 a 127, Storm et al., Adv Drug Deliv Rev 1995, 17: 31 a 48 e Stolnik, Illum & Davis, Adv Drug Deliv Rev 1995, 16: 195 a 214. O seu uso no encapsulamento de agentes terapêuticos também foi descrito, por exemplo, no documento US 2002/0034474. Um exemplo comercialmente disponível é o Doxil®, que compreende lipossomas peguilados contendo doxorrubicina.

[008] Muitos métodos para preparar nanopartículas são conhecidos, tais como polimerização em emulsão, automontagem e nanoprecipitação. A polimerização em emulsão aniônica é descrita, por exemplo, no documento US 2008/0138418.

[009] Os processos de miniemulsão são conhecidos para a produção de nanopartículas com tamanhos médios tipicamente na faixa de 1 a 1.000 nm, mais tipicamente 50 a 500 nm, conforme divulgado, por exemplo, em Landfester in Macromol. Rapid Comm. 2001, 22, 896 a 936 e Landfester et al em Macromolecules 1999, 32, 5222 a 5228. O método foi descrito pela primeira vez por Ugelstad et al.(1973) Emulsion polymerization: initiation of polymerization in monomer droplets. J Polym Sci Polym Lett Ed 11: 503 a 513. A técnica de miniemulsão para a preparação de nanopartículas poliméricas é uma tecnologia pela qual uma dispersão é preparada, convertendo uma nanoemulsão estável de uma fase dispersa em uma fase contínua em uma dispersão de nanopartículas por reações de polimerização. A tecnologia envolve a mistura de vários componentes na fase dispersa antes que a emulsificação com a fase contínua ocorra, resultando na produção de uma emulsão em que cada gota tem uma composição idêntica de agente ativo e monômeros. Todos os tipos de reações de polimerização podem ser aplicados nesses nanorreatores de gotículas. No caso da presente invenção, as miniemulsões óleo-em-água e a polimerização aniônica na interface da gota, comumente iniciada pela adição de um iniciador à fase contínua, são as modalidades preferidas. As partículas formadas são tipicamente idênticas ou quase idênticas às gotículas a partir das quais são preparadas, em termos de tamanho e distribuição de tamanho, resultando em alta reprodutibilidade do processo.

[0010] As miniemulsões são geralmente estabilizadas por um tensoativo e um coestabilizador, o último frequentemente referido como "hidrófobo". O coestabilizador contribui para a estabilização osmótica da emulsão, aumentando a pressão osmótica, que neutraliza a pressão capilar ou Kelvin devido à tensão superficial das gotículas e reduz o amadurecimento de Ostwald minimizando a difusão do monômero de gotículas pequenas a grandes.

[0011] Na polimerização em emulsão convencional, os ingredientes são compostos de água, um monômero de baixa solubilidade em água, iniciador solúvel em água e um tensoativo. Se a concentração de tensoativo estiver abaixo da concentração crítica de micelas, as partículas são formadas por precipitação e aglomeração de cadeias de polímero em crescimento que se tornam insolúveis na fase contínua. Se a concentração de tensoativo estiver acima da concentração crítica de micelas, os monômeros se difundem nas micelas de tensoativo seguidos de iniciação e polimerização. O processo envolve grandes gotas de monômero (1 a 10 µm) que são o reservatório para o monômero. Por outro lado, as miniemulsões consistem em gotículas de monômero pequenas, estáveis e estreitamente distribuídas em uma fase contínua. O sistema é obtido por alto cisalhamento; por exemplo, por ultrassom ou homogeneizadores de alta pressão. A alta estabilidade das gotículas é garantida pela combinação do componente anfifílico solúvel em água (o tensoativo) e do coestabilizador, que é solúvel no monômero e homogeneamente distribuído na fase de gotícula. Essas pequenas gotículas podem, então, atuar como nanocontêineres nos quais as polimerizações podem ocorrer, seja dentro das gotículas ou na interface das gotículas, resultando na formação de nanopartículas. Na polimerização em emulsão, a encapsulação de ingredientes ativos que devem ser dissolvidos na fase aquosa depende da inclusão durante a formação dos agregados, resultando em quantidades de carga tipicamente na faixa de 1% ou menos (C. Dushkin & G. Yordanov, Nanoscience & Nanotechnology, 11, 186 (2011): "Recent advances in the preparation of drug-loaded poly(alkyl cyanoacrylate) colloidal particles for cancer treatment: nanoprecipitation vs. polymerization)”, enquanto em processos de polimerização em miniemulsão, onde o ingrediente ativo é dissolvido no monômero antes da emulsão ser formada, pode atingir quantidades de 5 a 50% das gotículas, dependendo do material, resultando em quantidades de carga correspondentes de 5 a 50% nas nanopartículas finais. Os processos de emulsão convencionais resultam em nanoesferas, que são sistemas de matriz, onde o fármaco é fisicamente disperso no polímero, enquanto os processos de miniemulsão podem ser combinados com reações de polimerização interfacial resultando em nanocápsulas, que são sistemas vesiculares em que o fármaco é solubilizado em um núcleo líquido, rodeado por uma fina camada de polímero. Deve, portanto, ser apreciado que as emulsões convencionais e os processos de miniemulsão são bastante diferentes e os produtos produzidos a partir delas são estruturalmente distintos.

[0012] Processos de polimerização de miniemulsão para a preparação de nanopartículas de poli(alquila cianoacrilato) são descritos nos documentos US 2008/182776 e US 2010/015165. Os iniciadores de polimerização usados são tensoativos (plurônicos) e aminas primárias ou secundárias, respectivamente, embora, em geral, qualquer composto nucleofílico, contendo por exemplo grupos hidroxila ou amino possa ser usado.

Exemplos de iniciadores incluem hidróxido de sódio, aminoácidos (por exemplo, glicina) e polietilenoglicóis. A iniciação também pode ocorrer por meio da alteração do pH, conforme discutido, por exemplo, no documento US 2009/0297613.

[0013] Um processo vantajoso para preparar nanopartículas de poli(alquila cianoacrilato) também é descrito no documento WO 2014/191502.

[0014] Como discutido acima, a produção de nanopartículas de poli(alquila cianoacrilato) pelo processo de miniemulsão oferece uma série de vantagens. No entanto, os monômeros de cianoacrilato de alquila são muito reativos e polimerizam muito facilmente na presença de iniciadores radicais e/ou aniônicos. Um efeito colateral da reatividade dos monômeros de cianoacrilato de alquila é que eles são vulneráveis à polimerização prematura (seja aniônica ou radicalmente iniciada) causada por características estruturais do ingrediente ativo/agente. As características estruturais incluem, por exemplo, M-NH3 (em que M é um metal, isto é, um complexo de metal-amônia), R-NH2, R1R2-NH, R1R2R3N, R1=NR2, R-OH, R-Cl, R-Br, R-I, R-SH, R1N=NR2, R-NHOH, estruturalmente relacionado H2O e enóis. Esta polimerização prematura limita severamente a gama de ingredientes ativos que podem ser dissolvidos em monômeros ACA antes da polimerização e reduz significativamente o potencial de tais nanopartículas em muitos campos. Para evitar a polimerização prematura de cianoacrilato de alquila durante a polimerização em miniemulsão, é conhecido o acréscimo de um inibidor aniônico ou radical, como ácido metanossulfônico (MSA, inibidor aniônico) e hidroxitolueno butilado (BHT, inibidor de radical). O MSA e outros inibidores de ácido evitam a polimerização do ACA ajustando o pH da gota de polímero e evitando a formação de ânions que desencadeiam a polimerização. Isso é obtido pela neutralização de um ânion (via doação de um próton) a uma molécula neutra, ou formação de um cátion (via doação de um próton), evitando assim o ataque nucleofílico por um par de elétrons solitário (por exemplo, no nitrogênio).

Os inibidores conhecidos têm, no entanto, várias desvantagens. Por exemplo, o MSA é um ácido forte que pode decompor compostos lábeis aos ácidos (por exemplo, ingredientes farmacêuticos ativos, ou seja, APIs), enquanto nem o MSA nem o BHT são adequados para uso em um ambiente clínico devido à sua toxicidade. Além disso, os inibidores de radical por si só não são eficientes o suficiente para impedir totalmente a polimerização prematura quando o processo de miniemulsão é usado para nanoencapsular compostos reativos e APIs que podem atuar como iniciadores radicais e/ou aniônicos.

[0015] O objetivo da presente invenção é fornecer nanopartículas de poli(alquila cianoacrilato) adequadas para uso em um ambiente clínico e um processo para a fabricação de tais nanopartículas.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0016] A presente invenção é definida pelas reivindicações da patente em anexo. Outras características opcionais da presente invenção e definição de termos são divulgadas na descrição detalhada abaixo.

[0017] Em um primeiro aspecto, a presente invenção fornece uma nanopartícula compreendendo um homopolímero ou copolímero de poli(alquila cianoacrilato), pelo menos um agente ativo e um inibidor aniônico e de radical, em que o inibidor aniônico e de radical é um composto com a seguinte fórmula:

[0018] em que

[0019] R1 é H; e

[0020] R3, R4, R5, R6 e R7 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em -H, -OH, C1-C6 alcóxido, C1-C6 alquila, haletos, ácido carboxílico, cetona ou aldeído; em que o inibidor aniônico e de radical está presente em uma quantidade de 0,001 a 15% em peso.

[0021] Uma nanopartícula compreendendo um homopolímero ou copolímero de poli(alquila cianoacrilato) também pode ser denominada uma nanopartícula de poli(alquila cianoacrilato).

[0022] Em uma modalidade da nanopartícula, o inibidor aniônico e de radical está presente em uma quantidade de 0,01 a 10% em peso, 0,01 a 5% em peso ou 0,01 a 2% em peso.

[0023] Em uma modalidade da nanopartícula, o agente ativo é um composto com um grupo funcional selecionado do grupo que consiste em M-NH3 (em que M é um metal), R-NH2, R1R2-NH, R1R2R3N, R1=NR2, R-OH, R-Cl, R-Br, R-I, R-SH, R1N=NR2, R-NHOH, estruturalmente relacionado H2O e enóis.

[0024] Em uma modalidade, a nanopartícula é fabricada por um processo de acordo com o segundo aspecto da invenção definido abaixo.

[0025] Em um segundo aspecto, a presente invenção fornece um processo para a preparação de nanopartículas de um poli(alquila cianoacrilato) homopolímero ou copolímero, compreendendo, em uma única etapa, a polimerização aniônica de uma miniemulsão de óleo em água, em que a dita miniemulsão compreende (i) pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila; (ii) pelo menos um tensoativo; (iii) um ou mais agentes ativos; (iv) opcionalmente, um iniciador de polimerização aniônico; e (v) um inibidor aniônico e de radical, em que o inibidor aniônico e de radical é um composto com a seguinte fórmula:

[0026] em que

[0027] R1 é H; e

[0028] R3, R4, R5, R6 e R7 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em -H, -OH, C1-C6 alcóxido, C1-C6 alquila, haletos, ácido carboxílico, cetona ou aldeído.

[0029] Em uma modalidade do processo, o inibidor aniônico e de radical é um único composto capaz de reagir com qualquer um de um nucleófilo e um radical.

[0030] Em uma modalidade do processo, o inibidor aniônico e de radical está presente em uma quantidade de 0,001 a 15% em peso em relação a uma fase de óleo da miniemulsão, ou em uma quantidade de 0,01 a 10% em peso, 0,01 a 5% em peso ou 0,01 a 2% em peso. A fase oleosa compreende os componentes não aquosos da miniemulsão, por exemplo, o pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila.

[0031] Em uma modalidade do processo, o inibidor aniônico e de radical tem uma afinidade maior para radicais e nucleófilos do que o pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila.

[0032] Em uma modalidade do processo, o inibidor aniônico e de radical tem um coeficiente de partição octanol-água (logP) na faixa de 1,0 a 3,0, de preferência na faixa de 1,0 a 2,5 ou ainda mais preferida na faixa de 1,0 a 2,0.

[0033] Em uma modalidade do processo, o inibidor aniônico e de radical é selecionado do grupo que consiste em 4-hidroxi-3,5-

dimetilbenzaldeído, 4-hidroxi-3,5-dimetoxibenzaldeído, vanilina, salicilaldeído e benzaldeído.

[0034] Em uma modalidade do processo, o agente ativo é um agente terapêutico ou um agente de imagem. Em outras modalidades, o agente ativo pode ser selecionado a partir do grupo que compreende compostos de aroma, sabores, fragrâncias, corantes, nutracêuticos, herbicidas e pesticidas.

[0035] Em uma modalidade do processo, o pelo menos um tensoativo é pelo menos um polialquilenoglicol selecionado do grupo que consiste em polietilenoglicóis (PEG) e polipropilenoglicóis (PPG) ou suas misturas.

[0036] Em uma modalidade do processo, o pelo menos um tensoativo inicia a reação de polimerização aniônica.

[0037] Em uma modalidade do processo, o pelo menos um tensoativo na etapa (ii) compreende pelo menos dois polialquilenoglicóis selecionados do grupo que consiste em polietilenoglicóis (PEG) e polipropilenoglicóis (PPG) ou suas misturas.

[0038] Em uma modalidade do processo, o agente ativo compreende um grupo funcional selecionado do grupo que consiste em M-NH3 (em que M é um metal), R-NH2, R1R2-NH, R1R2R3N, R1=NR2, R-OH, R-Cl, R-Br, R-I, R-SH, R1N=NR2, R-NHOH, estruturalmente relacionado H2O e enóis.

[0039] Em uma modalidade do processo, a miniemulsão pode compreender um iniciador de polimerização aniônico, isto é, um iniciador capaz de iniciar a polimerização aniônica do pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila. De preferência, a reação de polimerização aniônica é iniciada pelo ao menos um tensoativo.

[0040] Em uma modalidade do processo, a nanopartícula fabricada é uma nanopartícula de acordo com o primeiro aspecto da invenção.

[0041] Em uma modalidade, o processo não compreende uma etapa de centrifugação.

[0042] Em um terceiro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende uma nanopartícula de acordo com o primeiro aspecto, ou uma nanopartícula obtida pelo processo de acordo com o segundo aspecto, e um ou mais carreadores, diluentes ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[0043] Em um quarto aspecto, a presente invenção fornece uma nanopartícula de acordo com o primeiro aspecto, ou uma nanopartícula obtida pelo processo de acordo com o segundo aspecto, para uso em medicina, de preferência para uso em distribuição de fármacos ou imageamento molecular.

[0044] Em um quinto aspecto, a presente invenção fornece uma nanopartícula de acordo com o primeiro aspecto, ou uma nanopartícula obtida pelo processo de acordo com o segundo aspecto, para uso na agricultura, hidrocultura, aplicações antibacterianas, nutracêuticos, aplicações de alimentos/rações, cosméticos, autocura, aplicações domésticas e cuidados com o corpo.

[0045] O termo "um inibidor aniônico e de radical" está na presente descrição destinado a definir um único composto capaz de inibir a polimerização aniônica indesejada e inicializada por radical indesejada.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0046] A presente invenção fornece nanopartículas de poli(alquila cianoacrilato) e um processo para a preparação de tais nanopartículas a partir de um homopolímero ou copolímero de poli(alquila cianoacrilato), em que o dito processo compreende, em uma única etapa, a formação das ditas nanopartículas por polimerização aniônica de um miniemulsão de óleo em água.

MINIEMULSÃO

[0047] Tal como aqui utilizado, o termo "miniemulsão" significa um tipo específico de emulsão compreendendo gotículas estáveis com tamanhos médios típicos na gama de 50 a 500 nm. O tamanho da partícula é influenciado por uma série de fatores, incluindo a quantidade de tensoativo presente, a viscosidade do sistema como um todo e a taxa de cisalhamento usada para produzir as gotículas. Curvas de distribuição de tamanho de partícula típicas (medidas usando, por exemplo, espalhamento de luz dinâmico) para miniemulsões são de forma gaussiana e são relativamente estreitas. As miniemulsões da presente invenção preferencialmente têm um índice de polidispersidade (PDI) de 0,3 ou menos, mais preferencialmente 0,2 ou menos, tal como cerca de 0,1.

[0048] As miniemulsões são estabilizadas de maneira ideal pela presença de um tensoativo e um coestabilizador, o último frequentemente referido como "hidrófobo". O coestabilizador contribui para a estabilização osmótica da emulsão aumentando a pressão osmótica, que neutraliza a pressão capilar ou Kelvin devido à tensão superficial das gotículas e reduz o amadurecimento de Ostwald. O amadurecimento de Ostwald se refere ao processo pelo qual as moléculas se difundem de gotículas pequenas para grandes através da fase contínua. Este processo perturba a estrutura da emulsão. As miniemulsões podem ser diretas (óleo em água) ou inversas (água em óleo) embora, para os fins da presente invenção, o termo "miniemulsão" possa ser considerado como referindo-se apenas a miniemulsões diretas. Nas miniemulsões da invenção, portanto, a água forma a fase contínua. A fase oleosa contém tipicamente os monômeros usados na polimerização aniônica, o coestabilizador e o agente ativo, se presente.

[0049] Como discutido acima, miniemulsões e polimerização de miniemulsões para a preparação de nanopartículas são conhecidas na técnica.

[0050] A miniemulsão pode ser preparada por qualquer método conhecido na técnica, tal como o descrito no documento US 2009/0297613. Os processos normalmente envolvem a formação das fases de óleo e água, misturando-as e submetendo a mistura a altas forças de cisalhamento, por exemplo, ultrassonicação ou homogeneização, para formar uma emulsão estável de gotículas de óleo contendo o monômero com um estabilizador/tensoativo na superfície e, em seguida, adicionar um iniciador hidrofílico. A polimerização das gotículas de monômero ocorre então por iniciação na interface da gotícula para formar partículas poliméricas que têm o mesmo tamanho que as gotículas antes da polimerização. O iniciador hidrofílico é fixado à superfície das partículas. Alternativamente, a polimerização é iniciada pelo ajuste do pH. Deve ser aparente para o especialista que os processos de polimerização de miniemulsão descritos no contexto da presente invenção são bastante distintos dos processos de polimerização de emulsão em que nanopartículas poliméricas são formadas diretamente a partir de uma solução dos monômeros em um solvente e de processos de emulsão usando pré- polímeros feitos, em que as nanopartículas poliméricas são formadas pela automontagem desses polímeros pré-fabricados.

[0051] As miniemulsões da presente invenção compreendem pelo menos três componentes: monômeros polimerizáveis compreendendo pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila; pelo menos um tensoativo, de preferência um polialquilenoglicol selecionado a partir de polietilenoglicóis (PEGs) e polipropilenoglicóis (PPGs), ou suas misturas, e um inibidor aniônico e de radical. As miniemulsões também podem compreender opcionalmente um ou mais agentes ativos. Em uma modalidade da invenção, pelo menos um dos ditos tensoativos, por exemplo, pelo menos um polialquilenoglicol, inicia a polimerização aniônica dos monômeros polimerizáveis.

[0052] O uso de um inibidor aniônico e de radical conforme descrito abaixo é uma característica chave da presente invenção e fornece vários efeitos vantajosos.

INIBIDORES ANIÔNICOS E DE RADICAL

[0053] O inibidor aniônico e de radical usado na presente invenção compreende preferencialmente 0,001 a 15% em peso em relação a uma fase de óleo da miniemulsão, ou em uma quantidade de 0,01 a 10% em peso, 0,01 a 5% em peso ou 0,01 a 2% em peso.

[0054] Qualquer composto/molécula capaz de inibir a polimerização aniônica e de radical pode ser usado como um inibidor aniônico e de radical, desde que o inibidor seja solúvel em óleo e não tóxico (ou seja, adequado para uso clínico).

[0055] Para impedir a polimerização radical, o composto deve ser capaz de aceitar prontamente um radical, preferencialmente ao monômero e prevenir a propagação do dito radical. Idealmente, o composto deve reagir sacrificialmente e irreversivelmente de tal forma que o radical não seja propagado posteriormente.

[0056] De forma semelhante, para atuar como um inibidor aniônico, o composto deve ser capaz de atuar como um eletrófilo ao ataque nucleofílico de, mas não limitado a íons hidroxila na água, grupos hidroxila, carbânions, oxigênio, nitrogênio, halogênio e ânions de enxofre. Idealmente, o composto deve reagir irreversivelmente e de tal forma que a propagação posterior do ânion seja impedida. Os inibidores aniônicos e de radical selecionados para uso neste documento são conhecidos por agirem como eletrófilos (por exemplo, na reação aldólica, ref. Yoshikawa et al., Direct Catalytic Asymmetric Aldol Reaction, J. Am. Chem. Soc. 1999, 121, 4168 a 4178), sem atuar como um ácido (por exemplo, um doador de prótons) e, como tal, se comportam mecanicamente de forma diferente dos inibidores de polimerização aniônicos conhecidos, como o MSA e outros ácidos orgânicos. Da mesma forma, os compostos selecionados podem aceitar um inibidor de radical e, embora compartilhem muitas características semelhantes aos antioxidantes/inibidores de radical comuns, não são normalmente aplicados nesta função.

[0057] Em outras palavras, o inibidor aniônico e de radical pode preferencialmente ter uma maior afinidade para radicais e nucleófilos do que o pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila. O especialista pode facilmente determinar se um inibidor aniônico e de radical tem uma afinidade maior para radicais e nucleófilos do que o pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila. Por exemplo, o especialista pode misturar o inibidor aniônico e de radical com o monômero de cianoacrilato de alquila escolhido e adicionar um componente ativo conhecido por polimerizar prontamente o monômero. O componente ativo é um material ou mistura de materiais capaz de iniciar a polimerização aniônica e/ou radical. Se nenhuma polimerização for observada, o inibidor aniônico e de radical tem uma afinidade maior para radicais e nucleófilos do que o monômero de cianoacrilato de alquila.

[0058] Como tal, o composto pode apresentar um grupo funcional, ou combinação de grupos funcionais, que podem reagir com um radical e atuar como um eletrófilo durante uma reação com um ânion (ou seja, um nucleófilo).

[0059] O grupo funcional, ou combinação de grupos funcionais, inclui pelo menos um anel aromático compreendendo um grupo alfa aldeído. Grupos funcionais adicionais podem ser, mas não limitados a, grupos hidroxi aromáticos, aldeídos, cetonas e quinonas, enonas e aminas. O anel aromático pode ser ainda substituído com pelo menos um grupo alquila doador de elétrons ou grupo alcóxi. O grupo alquila ou alcóxi doador de elétrons pode ser vantajosamente estericamente volumoso, desde que a solubilidade no monômero usado no processo de miniemulsão seja suficiente. É também preferido que a molécula seja prontamente solúvel na fase oleosa de um processo de miniemulsão e tenha solubilidade em água limitada.

[0060] Os inibidores aniônicos e de radical para uso na presente invenção têm um coeficiente de partição octanol-água (logP) na faixa de 1,0 a 3,0, preferencialmente na faixa de 1,0 a 2,5, e ainda mais preferido na faixa de 1,0 a 2,0. O logP divulgado garante que os inibidores aniônicos e de radical usados no processo de acordo com a invenção tenham uma distribuição ótima ao longo da miniemulsão, isto é, inibidor suficiente está presente na fase oleosa.

[0061] O logP pode ser determinado por vários métodos,

incluindo frasco de agitação, pH-Metric, HPLC de fase reversa e eletroquímica, ou calculado pelo uso de software apropriado. Os valores de logP divulgados na presente especificação e usados para definir os inibidores aniônicos e de radical da invenção foram calculados pelo modelo de previsão ACD/Labs logP, ver tabela 1 abaixo.

[0062] Os inibidores aniônicos e de radical usados nos experimentos de suporte abaixo são vanilina, 4-hidroxi-3,5-dimetilbenzaldeído, 4-hidroxi-3,5-dimetoxibenzaldeído, salicilaldeído, benzaldeído, vitamina E, vitamina K3 e vitamina K1. As vitaminas, MSA; BHT e BHA são incluídos como exemplos comparativos.

TABELA 1

TENSOATIVO

[0063] As miniemulsões da invenção podem compreender pelo menos um tensoativo. Qualquer tensoativo típico conhecido na técnica pode ser usado, no entanto tensoativos preferidos incluem ácidos graxos de gliceróis, sorbitol e outros álcoois multifuncionais, poloxâmeros, poloxaminas, polissorbatos, éteres de polioxietileno e ésteres de polioxietileno, triglicerídeos etoxilados, fenóis etoxilados e difenóis, polissacarídeos (por exemplo ácido hialurônico e ácido siálico), proteínas, sais metálicos de ácidos graxos, sais metálicos de sulfatos de álcool graxo, lauril sulfato de sódio, sais metálicos de sulfosuccinatos e suas misturas. Os tensoativos particularmente preferidos incluem éteres de polioxietileno e polissorbatos.

[0064] O tensoativo compreende preferencialmente 0,05 a 5% em peso da fase aquosa da miniemulsão, mais preferencialmente 0,1 a 2% em peso.

[0065] Além desses componentes, a miniemulsão pode compreender ainda um coestabilizador na fase de óleo. O coestabilizador é tipicamente altamente insolúvel em água, ou seja, tem uma solubilidade inferior a 5x10-5 mol/l, mais preferencialmente inferior a 5x10-6 mol/l e ainda mais preferencialmente inferior a 5x10-7 mol/l e pode ser qualquer substância que é compatível com o monômero polimerizável (ou monômeros polimerizáveis), como um hidrocarboneto, silano, organossilano, éster de ácido graxo, óleo (por exemplo, óleo vegetal), corante hidrofóbico ou lipídeo. Exemplos de coestabilizantes adequados incluem hexadecano, álcool cetílico, miglyol e azeite. Coestabilizantes particularmente preferidos incluem miglyols e óleos vegetais. Em uma modalidade alternativa, o agente ativo pode desempenhar a função de coestabilizador.

[0066] O coestabilizador compreende preferencialmente 0,5 a 5% em peso da fase oleosa da miniemulsão, mais preferencialmente 1 a 3% em peso.

[0067] Em uma outra modalidade, a miniemulsão usada no processo da presente invenção compreende um reticulador (especialmente um reticulador biodegradável), de preferência na fase oleosa (isto é, a fase descontínua). O reticulador é de preferência um anidrido, um acrilato ou um bis- cianoacrilato, tal como mono- ou polietilenoglicol dimetacrilato, anidrido metacrílico, 1,6-hexanodiol bis-cianoacrilato ou metileno dimetacrilato.

[0068] O teor de fase oleosa das miniemulsões da invenção pode ser de até 50%, mas é tipicamente de até 15 a 25% em peso, de preferência até 15% em peso ou na faixa de 5 a 15% em peso. O especialista compreenderá que o teor de fase oleosa das miniemulsões da presente invenção também pode ser referido como o teor de sólido. Assim, os termos "conteúdo sólido" e "conteúdo de fase oleosa" são intercambiáveis no contexto da presente invenção.

MONÔMEROS POLIMERIZÁVEIS

[0069] Os monômeros polimerizáveis na miniemulsão da presente invenção compreendem pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila. São monômeros biodegradáveis cujo uso na preparação de nanopartículas tem sido amplamente divulgado. O cianoacrilato de alquila pode ser um acrilato monofuncional ou difuncional, isto é, contendo funcionalidades de acrilato simples ou múltiplas. Qualquer monômero de cianoacrilato de alquila de cadeia linear ou ramificada ou um derivado do mesmo pode ser utilizado, no entanto monômeros preferidos são aqueles de cianoacrilatos de C1-C10 alquila, mais preferencialmente cianoacrilatos de C2-C8 alquila. Um único monômero pode ser usado ou misturas de diferentes alquila cianoacrilatos podem ser usadas. Os alquila cianoacrilatos preferidos incluem etil cianoacrilato, butil(n- butil) cianoacrilato, 2-etilbutil cianoacrilato, n-octil cianoacrilato e seus derivados e misturas. O cianoacrilato de butila, o cianoacrilato de 2-etilbutila e o cianoacrilato de n-octila são particularmente preferidos.

[0070] Sem querer ser limitado pela teoria, acredita-se que a natureza dos monômeros influencia a taxa de degradação do polímero. Quanto mais hidrofóbico for o monômero (ou seja, quanto mais longa a cadeia alquílica), mais lenta será a taxa de degradação, provavelmente devido a um nível de água mais baixo em polímeros mais hidrofóbicos. É, portanto, outra modalidade da invenção usar uma mistura de cianoacrilatos de alquila de comprimento de cadeia diferente, por exemplo, um com uma cadeia de alquila curta e um com uma cadeia de alquila longa, como butil cianoacrilato misturado com 2-etilbutila cianoacrilato ou n-octila cianoacrilato.

[0071] Em uma modalidade, um homopolímero de cianoacrilato é usado, isto é, formado a partir de um único monômero.

[0072] Os monômeros de cianoacrilato de alquila estão preferencialmente presentes em uma quantidade de 1 a 100% em peso, mais preferencialmente 75 a 100% em peso, ainda mais preferencialmente 95 a 100% em peso da quantidade total de monômeros.

[0073] Além dos monômeros de cianoacrilato de alquila, outros comonômeros também podem estar presentes nas miniemulsões da invenção. É preferível que esses comonômeros também sejam biocompatíveis ou biodegradáveis. Os comonômeros adequados incluem, mas não estão limitados a acrilatos, ésteres de vinil, éteres de vinil, epóxidos de vinil, siloxanos cíclicos e lactonas. Os ditos comonômeros também podem ser reticulantes, dependendo das propriedades de partícula desejadas.

[0074] Os monômeros polimerizáveis compreendem preferencialmente 25 a 99,5% em peso da fase oleosa da miniemulsão, mais preferencialmente 30 a 70% em peso.

POLIALQUILENOGLICÓIS

[0075] Os tensoativos preferidos para uso na presente invenção são polialquilenoglicóis. As miniemulsões da presente invenção podem compreender pelo menos um polialquilenoglicol selecionado do grupo que consiste em polietilenoglicóis (PEG) e polipropilenoglicóis (PPG) ou suas misturas. Pelo menos um dos polialquilenoglicóis preferencialmente inicia a reação de polimerização aniônica.

[0076] Os polialquilenoglicóis são normalmente adicionados à fase contínua da miniemulsão, ou seja, a fase aquosa. Um dos polialquilenoglicóis pode, em alguns casos, ser covalentemente ligado a uma porção química de direcionamento. É especialmente preferido que os polialquilenoglicóis sejam tão solúveis em água que possa ser preparada uma solução homogênea para adicionar à miniemulsão.

[0077] Pelo termo "polietilenoglicol" (PEG), queremos dizer qualquer polímero contendo principalmente unidades de repetição de óxido de etileno, isto é, unidades -CH2-CH2-O-. Os polietilenoglicóis típicos têm uma massa molecular inferior a 20.000 g/mol, de preferência inferior a 10.000 g/mol. Pelo termo "polipropilenoglicol" (PPG) queremos dizer qualquer polímero contendo principalmente unidades de repetição de óxido de propileno, isto é, unidades -CH2-CH2-CH2-O-.

[0078] Os polialquilenoglicóis podem ter um grupo terminal hidroxi ou amino, ou uma mistura dos mesmos. Os polialquilenoglicóis são solúveis em água. Por solúvel em água queremos dizer que eles devem ter uma solubilidade em água que é alta o suficiente para permitir a formação de uma solução homogênea em água, que pode então ser adicionada à miniemulsão, ou seja, uma solubilidade de mais de 10 g/l em temperatura ambiente e pressão (RTP).

[0079] Exemplos de polialquilenoglicóis adequados incluem polietilenoglicol e homopolímeros de polipropilenoglicol e seus copolímeros. Deve-se notar que o termo "polietilenoglicol" se destina a cobrir polissorbatos (por exemplo, polissorbato 80). Mais importante ainda, os copolímeros podem ser copolímeros em bloco. Exemplos de copolímeros adequados incluem copolímeros de bloco de poli(propilenoglicol)- poli(etilenoglicol), copolímeros de bloco de polialquilamina - polialquilenoglicol, copolímeros de bloco de lipídio - polialquilenoglicol e copolímeros de bloco de polilisina - polialquilenoglicol.

[0080] O comprimento dos blocos de cada polímero pode ser variado de modo a alterar as propriedades do copolímero, com a condição de que o copolímero permaneça solúvel em água. Aumentar o conteúdo de PPG, por exemplo, reduz a solubilidade em água. Em uma modalidade, há de preferência um grupo terminal hidroxila ou amino diretamente ligado ao PPG. De preferência, o grupo final é um grupo terminal amino.

[0081] De preferência, a proporção de unidades de polietilenoglicol para unidades de PPG está na faixa de 1:5 a 5:1, tal como 1:1. Cada bloco pode conter de 2 a 40 unidades monoméricas. É ainda preferido, no entanto, se as unidades de polietilenoglicol estiverem em excesso.

[0082] Os pesos moleculares típicos para os copolímeros em bloco de polialquilenoglicol-PPG da invenção são inferiores a

20.000 g/mol, de preferência inferiores a 10.000 g/mol, tal como 1.000 a 8.000.

[0083] É preferido se um polietilenoglicol for usado, isto é, um em que unidades de polietilenoglicol estão presentes na maioria e é preferido se esse polietilenoglicol compreende ainda um componente hidrofóbico de modo a otimizar propriedades e permitir interação hidrofóbica eficiente com os monômeros no fase de óleo. De preferência, o componente hidrofóbico está ligado covalentemente ao polietilenoglicol, mais preferencialmente entre o grupo terminal amino ou hidroxila e o resto da porção química polietilenoglicol.

[0084] O componente hidrofóbico é tipicamente uma cadeia alquílica, poliéter ou um lipídeo. Um componente hidrofóbico particularmente preferido é o óxido de polipropileno (PPO), formando assim um copolímero de bloco de polietilenoglicol/polipropilenoglicol. Deve ser entendido que PPG é equivalente a PPO.

[0085] Um dentre o pelo menos um polialquilenoglicol (ou polialquilenoglicóis) pode, em alguns casos, ser covalentemente ligado a uma porção química de direcionamento. A porção química de direcionamento pode ser qualquer porção química adequada que tem como alvo, ou faz com que a partícula se torne localizada em locais específicos dentro de um sujeito. A porção química de direcionamento deve conter um grupo funcional que pode reagir com o terminal oposto ao terminal do grupo amino do polialquilenoglicol. Os grupos funcionais adequados são aqueles capazes de formar uma ligação covalente com o polialquilenoglicol, tais como amino, hidroxi, azida, alcino e tio.

A conjugação da porção química de direcionamento ao polialquilenoglicol pode ser realizada por qualquer método rotineiramente usado na técnica, tal como química de "clique", ver por exemplo Kolb et al., "Click Chemistry: Diverse Chemical Function from a Few Good Reactions". Angewandte Chemie Int. Ed. 2001, 40 (11): 2004 a 2021. De preferência, a porção química de direcionamento tem um peso molecular na faixa de 100 a 200.000 Da, mais preferencialmente 200 a 50.000 Da, ainda mais preferencialmente de 300 a 15.000 Da.

[0086] Deve ser apreciado que uma única porção química de direcionamento ou uma mistura de diferentes porções químicas de direcionamento pode ser usada.

[0087] Porções químicas de direcionamento de exemplo são selecionadas do grupo que consiste em um aminoácido, proteína, miniproteína (por exemplo, miniproteína de nó de cisteína), peptídeo, anticorpo, fragmentos de anticorpo, sacarídeo, carboidrato, glicano, citocina, quimiocina, nucleotídeo, lectina, lipídeo, receptor, esteroide, neurotransmissor, marcador de superfície celular, antígeno de câncer, antígeno glicoproteico, aptâmero ou misturas dos mesmos. De preferência, a porção química de direcionamento ou mistura de porções químicas de direcionamento inclui peptídeos lineares e cíclicos ou fragmentos de anticorpo.

[0088] De preferência, a quantidade de polialquilenoglicol (ou polialquilenoglicóis) (no total) é 0,05 a 5% em peso, mais preferencialmente 0,1 a 2% em peso da fase aquosa da miniemulsão. A quantidade de polialquilenoglicol (ou polialquilenoglicóis) (no total) não deve de preferência exceder 15% em peso, mais preferencialmente 10% em peso.

AGENTE ATIVO

[0089] O agente ativo pode ser qualquer agente que tenha uma aplicação medicinal, por exemplo, agentes terapêuticos ou agentes de imagem, bem como qualquer outro composto de interesse para nanoencapsulação, tal como, mas não limitado a, compostos de aroma, sabores, fragrâncias, corantes, nutracêuticos, herbicidas e pesticidas. O agente ativo pode ser solúvel em água ou insolúvel em água, de preferência insolúvel em água. Quando o agente ativo é solúvel em água, ele é tipicamente adicionado como um pó fino em um óleo ou adicionado após ser convertido em uma forma insolúvel em água (por exemplo, por acidificação de uma forma de sal solúvel em água de um API em uma forma neutra insolúvel em água ou por emparelhamento de íon com um contraíon insolúvel em água). Em uma modalidade preferida, o agente ativo compreende 1 a 75% em peso da fase oleosa da miniemulsão, mais preferencialmente 10 a 30% em peso.

[0090] Agentes terapêuticos exemplares, que obviamente não se restringem a presente invenção, incluem agentes quimioterápicos, agentes de diagnóstico, agentes antineoplásicos, agentes profiláticos, agentes nutracêuticos, antibióticos, agentes antivirais, agentes anti- inflamatórios, inibidores de pequena molécula quinase, ácidos nucleicos, proteínas, peptídeos, lipídios, carboidratos, hormônios, metais, cerâmicas, fármacos, vacinas, agentes imunológicos e suas misturas.

[0091] Os agentes terapêuticos preferidos incluem doxorrubicina, gemcitabina, daunorrubicina, procarbazina, docetaxel, paclitaxel, cabazitaxel, 5-fluorouracilo, mitomicina, citarabina, etoposido, metotrexato, vinblastina, vincristina, bleomicina, cloxacilina, oxacilina, daptomicina, irinotecano, mitoxantrona, cloridrato de mitoxantrona, aldesleucina, asparaginase, busulfan, carboplatin, cladribine, camptotecina, dacarbazina, ftorafur, 5'desoxifluorouridina, eniluracil, desoxicitidina, 5-azacitosina, 5- azadeoxicitosina, allopurinol, 2-cloroadinopterina-oxi-platina, trimetrexatina, metil-aminopirinolato, trimetrexatina, picoplatina, tetraplatina, satraplatina, platina-DACH, ormaplatina, epirrubicina, fosfato de etopósido, 9- aminocamptotecina, vindesina, mostarda de L-fenilalanina, 6-mercaptopurina, 6- tioguanina, amsacrina, karenitirmantina, giclovirina, rancadirmantina aciclovirina, aciclovirino, lamivudina, zidovudina, bevacizumabe, trastuzumabe, rituximabe, sirolimo, temsirolimo, everolimo, imatinibe, s orafenibe, capecitabina, osimertinibe, trifluridina, afatinibe, trametinibe, abiraterona, erlotinibe, gefitinibe,

ciclofosfamida, sunitinibe, eribulina, cabozantinibe, idelalisibe, tamoxifeno, bortezomibe, fortinibolibantina, 4 alibinostato, ceritinibe - ((3-(2-aminopirimidin-4- il)piridin-2-il)oxi)fenil) -4-(4-metiltiofen-2-il) ftalazin-1-amina (AMG900), inibidores da proteína quinase D1, inibidores da proteína quinase D2, inibidores da proteína quinase D3, 12-(2-cianoetil)-6,7,12,13-tetrahidro-13-metil-5-oxo-5H-indolo[2,3- a]pirrolo[3,4-c]carbazol (Gö6976), N-[2-(p-Bromocinamilamino)etil]-5- isoquinolinossulfonamida (H89) e combinações dos mesmos.

[0092] Os agentes terapêuticos particularmente preferidos são docetaxel, ciclofosfamida, everolimus, capecitabina, bortezomib, belinostat, cabazitaxel, paclitaxel, 5-fluorouracilo, cloxacilina, oxacilina, daptomicina.

[0093] Outros agentes terapêuticos altamente preferíveis incluem carboplatina, oxaliplatina, picoplatina, tetraplatina, satraplatina, cisplatina, platina-DACH e ormaplatina.

[0094] Os agentes de imagem exemplares incluem metais (por exemplo, cobalto, ferro, ouro), sais de metal (por exemplo, óxido de ferro, sais de gadolínio), corantes infravermelhos próximos, agentes quelantes PET, agentes quelantes SPECT, agentes adequados para MRI ou espectroscopia Raman, corantes fluorescentes e radiofármacos. Os agentes de imageamento preferidos são vermelho do nilo, NR668, lipídio 780, clorina e6 e PP9.

[0095] A presente invenção é particularmente adequada para agentes ativos apresentando grupos funcionais que podem iniciar a polimerização prematura de monômeros de cianoacrilato de alquila na miniemulsão. Esses grupos funcionais incluem M-NH3 (em que M é um metal), R-NH2, R1R2-NH, R1R2R3N, R1=NR2, R-OH, R-Cl, R-Br, R-I, R-SH, R1N=NR2, R- NHOH, estruturalmente relacionado H2O e enóis.

POLIMERIZAÇÃO

[0096] O processo de acordo com a invenção fornece a preparação de nanopartículas de um homopolímero ou copolímero de poli(alquila cianoacrilato), em que o dito processo compreende, em uma única etapa, a polimerização aniônica de uma miniemulsão de óleo em água, em que a dita miniemulsão compreende (i) monômeros polimerizáveis compreendendo pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila; (ii) pelo menos um tensoativo, de preferência pelo menos um polialquilenoglicol selecionado do grupo que consiste em polietilenoglicóis (PEG) e polipropilenoglicóis (PPG), ou suas misturas; (iii) opcionalmente um ou mais agentes ativos; iv) opcionalmente, um iniciador de polimerização aniônico; e v) um inibidor aniônico e de radical.

[0097] A miniemulsão pode ser preparada pela adição do dito pelo menos um tensoativo a uma miniemulsão de óleo em água compreendendo o dito pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila, o dito inibidor aniônico e de radical e opcionalmente o dito um ou mais agentes ativos. Em uma modalidade preferida, esta etapa de adição e as etapas de polimerização aniônica são realizadas consecutivamente, isto é, a etapa de polimerização aniônica é realizada imediatamente (por exemplo, 0 a 10 minutos, tal como 0 a 5 minutos) após a etapa de adição.

[0098] Visto de um aspecto alternativo, os processos da invenção compreendem a preparação de nanopartículas de um homopolímero ou copolímero de poli(alquila cianoacrilato), em que o dito método compreende a adição de pelo menos um tensoativo, de preferência pelo menos um polialquilenoglicol selecionado do grupo que consiste em polietileno glicóis (PEG) e polipropilenoglicóis (PPG), ou suas misturas, em uma miniemulsão de óleo em água, em que a dita miniemulsão compreende (i) monômeros polimerizáveis que compreendem pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila; (ii) opcionalmente um ou mais agentes ativos;

iv) um inibidor aniônico e de radical; e polimerizar a mistura resultante por polimerização aniônica.

[0099] De preferência, o pelo menos um tensoativo inicia a reação de polimerização aniônica. No entanto, um iniciador de polimerização aniônico adicional, ou mudança de pH, pode, alternativamente, ser adicionado à miniemulsão.

[00100] A miniemulsão é tipicamente preparada pela adição de uma fase oleosa contendo o monômero (ou monômeros), o inibidor aniônico e de radical, o coestabilizador e, opcionalmente, um agente ativo a uma solução aquosa contendo o pelo menos um tensoativo e sujeitando-a a altas forças de cisalhamento, por exemplo, por ultrassom, para formar gotas de óleo contendo o monômero (ou monômeros) na água. As gotículas formadas nesta fase são uma miniemulsão. A presença do inibidor aniônico e de radical impede uma polimerização prematura do monômero causada por, por exemplo, um agente ativo reativo. De preferência, pelo menos um polialquilenoglicol está presente na solução aquosa atuando como o tensoativo.

[00101] De preferência, a reação de polimerização é realizada a pH baixo, por exemplo, pH 1 a 7. É preferível que a reação de polimerização seja realizada a temperaturas abaixo de 50 °C, por exemplo, 4 a 30 °C. A mistura resultante é uma dispersão.

[00102] De preferência, o pelo menos um tensoativo, de preferência pelo menos um polialquilenoglicol, inicia um processo de polimerização aniônica. Quando o iniciador de polialquilenoglicol tem um grupo terminal amino ou hidróxido, a iniciação é preferencialmente alcançada através de ataque nucleofílico na ligação dupla do monômero resultando em uma reação de polimerização aniônica ou zwitteriônica.

[00103] Esses processos são bem conhecidos na técnica e, portanto, os mecanismos envolvidos serão bem conhecidos do especialista.

[00104] Em uma forma de realização particularmente preferida, a polimerização aniônica é combinada com a polimerização radical por meio da presença de um iniciador adicional. Este iniciador adicional será tipicamente solúvel em óleo e, portanto, normalmente estará na fase de óleo da miniemulsão, ou seja, dentro da gota de óleo. Quando estes dois tipos de polimerização são combinados, o processo da invenção é modificado de modo a incorporar um aumento de temperatura, que inicia a polimerização radical. Os iniciadores de polimerização de radical típicos incluem peróxidos e compostos azo, tais como azobisdimetil valeronitril e azoisobutironitrila.

[00105] Em uma modalidade, o processo da invenção pode ser modificado para incluir a reticulação dos monômeros de cianoacrilato de alquila e, se presente, comonômeros. Isto pode ser facilitado incorporando um reticulador, de preferência um reticulador radicalmente polimerizável, na miniemulsão, de preferência dentro da fase oleosa. O reticulador será, em geral, hidrolisado em contato com a fase aquosa, controlando assim as taxas de liberação do fármaco e a biodegradabilidade das nanopartículas. Os reticuladores exemplificativos incluem um anidrido, um acrilato ou um bis- cianoacrilato, tal como mono- e polietilenoglicol dimetacrilato, dimetacrilato anidrido, 1,6-hexanodiol bis-cianoacrilato ou metileno dimetacrilato.

[00106] Em uma outra modalidade, os processos da invenção podem incluir uma etapa de aumento da temperatura (por exemplo, 50 a 70 °C) de modo a garantir que todos os monômeros residuais reajam e/ou para iniciar a reticulação.

[00107] Os processos da presente invenção podem compreender uma etapa adicional em que as nanopartículas são isoladas. Isto pode ser realizado por qualquer método conhecido na técnica.

[00108] O uso de inibidores aniônicos e de radical detalhados na presente invenção fornece duas vantagens principais:

[00109] Em primeiro lugar, o uso de inibidores aniônicos e de radicais evita ou limita a polimerização em massa indesejada ou mal programada, permitindo a síntese de nanopartículas com ingredientes ativos que de outra forma não estariam disponíveis para um especialista na técnica. Isso é observado de duas maneiras, em primeiro lugar, evitando a polimerização em massa do monômero ACA quando o ingrediente ativo (ou ingredientes ativos) é dissolvido, permitindo a síntese de nanopartículas. Além disso, o uso de inibidores aniônicos e de radical mantém a estabilidade da fase oleosa até que a miniemulsão seja formada, produzindo nanopartículas com um PDI baixo (idealmente abaixo de 0,200) e tamanho abaixo de 300 nm, sem precipitação excessiva ou formação de micropartículas.

[00110] Em segundo lugar, esta polimerização melhorada pelo uso de inibidores aniônicos e de radical remove a necessidade de qualquer um dos procedimentos de limpeza conhecidos na técnica, necessários para remover produtos de polimerização em massa de subprodutos ou micropartículas. Os procedimentos de limpeza reduzem o rendimento das nanopartículas e, embora esses métodos possam ser aceitáveis em escala de laboratório, seriam proibitivamente caros e complexos durante a fabricação em grande escala. Um procedimento de limpeza comum é exemplificado na divulgação atual por um processo de centrifugação comumente usado para remover grandes partículas de subproduto, enquanto deixa para trás as nanopartículas suspensas na solução. Este método tem uma desvantagem principal, pois reduz a concentração final (ou peso seco) de nanopartículas em solução dos desejados 10 a 20% para <1 a 5%.

[00111] O uso de inibidores aniônicos e de radical no processo de acordo com a presente invenção remove ou minimiza a necessidade de remover precipitados/micropartículas da solução do produto final, por exemplo, por centrifugação.

[00112] Os vantajosos efeitos benéficos dos inibidores aniônicos e de radical usados no processo da invenção são surpreendentes, particularmente porque esses inibidores superam os inibidores aniônicos ou radicais conhecidos.

NANOPARTÍCULAS

[00113] As nanopartículas de acordo com a presente invenção, e conforme produzidas pelos processos da presente invenção, são diferentes em estrutura daquelas produzidas por polimerização em emulsão. Em particular, as nanopartículas feitas por polimerização em emulsão compreendem uma matriz polimérica com qualquer agente ativo fisicamente disperso nessa matriz.

[00114] Por outro lado, nanopartículas feitas por polimerização interfacial em miniemulsão são sistemas tipicamente vesiculares, que contêm o agente ativo no núcleo da nanopartícula, rodeado por uma casca de polímero.

[00115] As nanopartículas fornecidas e produzidas de acordo com a presente invenção podem ser formuladas como uma composição farmacêutica compreendendo as nanopartículas juntamente com um ou mais carreadores, diluentes ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Esses carreadores, diluentes e excipientes são bem conhecidos na técnica. As composições farmacêuticas também podem compreender agentes ativos adicionais. É importante ressaltar que as nanopartículas de acordo com a invenção são livres de inibidores tóxicos, como MSA e BHT, o que as tornaria inadequadas para uso clínico/farmacêutico.

USOS

[00116] As nanopartículas e suas composições podem ser usadas em medicina, em particular em aplicações de entrega de fármacos e de imagem. Além disso, as nanopartículas também podem ser altamente vantajosas na nanoencapsulação de vários materiais/compostos, tais como compostos de aroma, fragrâncias, sabores, corantes, nutracêuticos, herbicidas e pesticidas. Portanto, a presente invenção se refere a nanopartículas de acordo com a presente invenção para uso em medicina e para uso em nanoencapsulação de vários materiais/compostos, tais como compostos de aroma, fragrâncias, sabores, corantes, nutracêuticos, herbicidas e pesticidas.

[00117] As nanopartículas e suas composições podem ser usadas em medicina, em particular em aplicações de entrega de fármacos e de imagem. Portanto, a presente invenção refere-se a nanopartículas de acordo com a presente invenção para uso em medicina. Em uma outra modalidade, a presente invenção se refere às nanopartículas de acordo com a presente invenção para uso no tratamento ou prevenção, ou no diagnóstico de distúrbios e doenças particulares. Exemplos de distúrbios ou doenças que podem ser tratadas ou prevenidas de acordo com a presente invenção incluem infecções, doenças inflamatórias, doenças neurodegenerativas, doenças autoimunes, doenças cardiovasculares e câncer, tais como câncer de pulmão, câncer de mama, câncer de próstata, câncer cerebral, câncer de cabeça e pescoço, câncer de ovário, câncer de pele, câncer testicular, câncer pancreático, câncer colorretal, câncer renal, câncer cervical, câncer gastrointestinal, câncer de bexiga e combinações dos mesmos.

[00118] As nanopartículas ou suas composições são preferencialmente administradas em uma quantidade terapeuticamente eficaz. Uma "quantidade terapeuticamente eficaz" refere-se a uma quantidade das nanopartículas necessárias para tratar ou prevenir a doença ou distúrbio específico. Qualquer via de administração pode ser usada para entregar as nanopartículas ao sujeito. As vias de administração adequadas incluem injeção intramuscular, administração transdérmica, inalação, aplicação tópica, administração oral, administração retal ou vaginal, administração intratumural e administração parenteral (por exemplo, intravenosa, peritoneal, intra-arterial ou subcutânea). A via de administração preferível é a injeção.

[00119] A dosagem exata e frequência de administração depende das nanopartículas particulares, agente ativo e agentes de direcionamento opcionais usados, a condição particular a ser tratada, a gravidade da condição a ser tratada, a idade, peso, sexo, extensão do distúrbio e condição física geral de o paciente em particular, bem como outra medicação que o indivíduo pode estar tomando, como é bem conhecido dos versados na técnica. Além disso, é evidente que a dita quantidade diária eficaz pode ser diminuída ou aumentada dependendo da resposta do sujeito tratado e/ou dependendo da avaliação do médico que prescreve as nanopartículas de acordo com a presente invenção.

PARTE EXPERIMENTAL

[00120] A seguir, são descritos exemplos detalhados de preparação de nanopartículas usando o processo de acordo com a presente invenção.

[00121] Os resultados dos exemplos experimentais estão resumidos na Tabela 2.

[00122] As nanopartículas são caracterizadas por seu tamanho, índice de polidispersidade e potencial zeta, bem como se a centrifugação da solução final de nanopartículas foi necessária para isolar as nanopartículas devido à formação de precipitados/micropartículas indesejados.

[00123] O índice de polidispersidade é definido no contexto da medição do tamanho de partícula por espalhamento de luz dinâmico, conforme fornecido por Malvern Panalytics (ref. https://www.malvernpanalytical.com/en/learn/knowledge- center/whitepapers/WP111214DLSTermsDefined.html) e é o número calculado a partir de um ajuste de 2 parâmetros para os dados de correlação (análise de cumulantes). Os cálculos para isso são definidos nos documentos padrão ISO, ISO 13321:1996 E e ISO 22412:2008. É geralmente aceito que >0,7 dá uma distribuição muito ampla de tamanho e não é adequado para técnicas de DLS, e 0,05 é altamente monodisperso. Para o propósito de nossas partículas, preferencialmente 0,05 a 0,300, mais preferencialmente 0,100 a 0,200.

[00124] O potencial zeta é a medida do potencial elétrico na camada dupla interfacial das partículas suspensas e é frequentemente dado como medida da estabilidade de uma dispersão coloidal (ref. https://www.malvernpanalytical.com/en/assets/TN101104ZetaPotentialIntroducti on-6_tcm50-37008.pdf). Nanopartículas para aplicações biomédicas, com alto potencial zeta, tendem a adsorver proteínas e, portanto, serão direcionadas pelo sistema imunológico, reduzindo o tempo de circulação e a eficácia. Partículas com baixo potencial zeta e estabilização estérica contendo doadores de ligações de hidrogênio (por exemplo, tensoativo contendo PEG) têm um tempo de circulação mais longo. Como tal, um potencial zeta de 20 a -20 é preferido, 10 a -10 é mais preferido e 5 a -5 é o mais preferido.

[00125] Peso seco % de p/p é o conteúdo de material não volátil do lote, após a remoção por centrifugação de quaisquer sólidos que não sejam do tamanho de nanopartículas. O peso seco está comumente na faixa de 1 a 25 % de p/p, preferencialmente 5 a 20 % de p/p e mais preferencialmente 10 a 20 % de p/p. O p/p refere-se ao peso das nanopartículas vs. peso dos voláteis na mistura (geralmente água e HCl).

[00126] Conforme suportado pelos dados experimentais, os inibidores aniônicos e de radical que compreendem um grupo aldeído aromático, ou seja, vanilina, 4-hidroxi-3,5-dimetilbenzaldeído, 4-hidroxi-3,5- dimetoxibenzaldeído, salicilaldeído e benzaldeído, são superiores à vitamina E, vitamina K3 e vitamina K1. Notavelmente, a solução de nanopartículas obtida pelo uso de inibidores aniônicos e de radical compreendendo um grupo aldeído aromático não precisou ser centrifugada, uma vez que nenhuma ou uma quantidade mínima de precipitado/micropartículas foi formada.

[00127] Observa-se que a atividade do inibidor aniônico da vitamina E, vitamina K3 e vitamina K1 é muito mais fraca do que para os inibidores do tipo benzaldeído. Acredita-se que a fraca atividade do inibidor aniônico seja, pelo menos parcialmente, a causa da formação aumentada de precipitados/micropartículas observada para esses inibidores.

EXEMPLOS

[00128] A seguir, uma série de exemplos experimentais são apresentados. Estes incluem modalidades da invenção usando inibidores aniônicos e de radical (ou seja, um único composto capaz de inibir a polimerização aniônica e de radical), bem como exemplos comparativos. Os exemplos comparativos incluem exemplos em que são usados inibidores aniônicos ou radicais conhecidos.

[00129] Uma seleção dos exemplos experimentais é apresentada em mais detalhes abaixo. Os exemplos restantes foram realizados por procedimentos experimentais semelhantes aos divulgados, simplesmente substituindo os reagentes e solventes relevantes pelos listados na tabela 2.

[00130] Os gráficos de tamanho por distribuição de exemplos selecionados, antes e depois da centrifugação, são mostrados na tabela 3. O efeito vantajoso do uso de aldeído aromático tipo inibidores aniônicos e de radical são aparentes quando comparado com exemplos experimentais usando inibidores aniônicos e de radical que não contêm um grupo aldeído aromático (isto é, vitaminas E, K1 e K3).

[00131] Os exemplos experimentais incluem os seguintes inibidores aniônicos e de radical (ou seja, inibidores duplos): Vanilina: Vitamina K1: Vitamina K3: Vitamina E:

Salicilaldeído: Benzaldeído: 4-hidroxi-3,5-dimetilbenzaldeído (DMHB): 4-hidroxi-3,5-dimetoxibenzaldeído (HDMB):

[00132] Os exemplos experimentais incluem os seguintes inibidores aniônicos ou radicais da técnica anterior:

Ácido metanossulfônico (MSA) - inibidor aniônico: Hidroxitolueno butilado (BHT) - inibidor de radical: Hidroxianisol butilado (BHA) - inibidor de radical:

[00133] Todos os exemplos foram realizados usando o método de miniemulsão. EXEMPLO 1 (COMPARATIVO): SÍNTESE DE PARTÍCULAS COM UM CORANTE DIR 0,18%, COM UM INIBIDOR DE RADICAL (BHT).

[00134] Solução 1 (fase aquosa): 120 mg de Kolliphor HS 15 (Sigma Aldrich), 0,120 g de Brij L23 (Sigma Aldrich) e 12,0 g de solução de ácido clorídrico 0,1 M (Merck) água foram misturados em um frasco de vidro até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos.

[00135] Solução 2 (fase de monômero): 0,80 g de n-butil cianoacrilato (monômero, Henkel Loctite, Irlanda), 0,010 g de hidroxitolueno butilado (BHT, Fluka) e 0,060 g de solução do corante DiR (Marker Gene Technology) dissolvido em Miglyol 812 (Caeser e Loretz GmBH, de modo que

1,6 mg de DiR foi adicionado à mistura) foram completamente misturados em um frasco de vidro.

[00136] As soluções 1 e 2 foram misturadas por 30 segundos em um frasco de vidro de 20 ml colocado em gelo usando um agitador magnético. A emulsão de óleo em água foi imediatamente sonicada por 3 minutos (intervalos de 6x30 segundos) em gelo (sonificador digital Branson 450 CE, amplitude de 25%). Após a sonicação, a miniemulsão formada foi polimerizada durante a noite à temperatura ambiente na rotação (15 rpm), em seguida, o pH foi ajustado para pH 5.

[00137] O tamanho de partícula e seu potencial zeta foram determinados usando o zetasizer Malvern Nano Series. Opcionalmente, a centrifugação foi usada para isolar as nanopartículas de grandes partículas de subproduto e a solução de nanopartículas reanalisada (ver Tabela 2).

[00138] As nanopartículas obtidas tinham 615 nm (diâmetro médio z) com um índice de polidispersidade de 0,63. O resultado foi suficientemente fraco para que não fosse obtida análise adicional. EXEMPLO 5: SÍNTESE DE PARTÍCULAS COM UM CORANTE DIR 0,10%, COM UM INIBIDOR DUPLO (VANILINA).

[00139] Solução 1 (fase aquosa): 125 mg de Kolliphor HS 15 (Sigma Aldrich), 0,125 g de Brij L23 (Sigma Aldrich) e 11,5 g de solução de ácido clorídrico 0,1 M (Merck) de água foram misturados em um frasco de vidro até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos.

[00140] Solução 2 (fase de monômero): 2,25 g de n-butil cianoacrilato (monômero, Henkel Loctite, Irlanda), 0,240 g de vanilina (Sigma Aldrich) e 0,100 g de solução do corante DiR (Marker Gene Technology) dissolvido em Miglyol 812 (Caeser e Loretz GmBH, de modo que 2,6 mg de DiR foram adicionados à mistura) foram completamente misturados em um frasco de vidro.

[00141] As soluções 1 e 2 foram misturadas por 30 segundos em um frasco de vidro de 20 ml colocado em gelo usando um agitador magnético. A emulsão de óleo em água foi imediatamente sonicada por 3 minutos (intervalos de 6x30 segundos) em gelo (sonificador digital Branson 450 CE, amplitude de 25%). Após a sonicação, a miniemulsão formada foi polimerizada durante a noite à temperatura ambiente na rotação (15 rpm), em seguida, o pH foi ajustado para pH 5.

[00142] O tamanho da partícula e seu potencial zeta foram determinados usando o zetasizer Malvern Nano Series. Opcionalmente, a centrifugação foi usada para isolar as nanopartículas de grandes partículas de subproduto e a solução de nanopartículas reanalisada (ver Tabela 2).

[00143] As nanopartículas obtidas tinham 158 nm (diâmetro médio z) com um índice de polidispersidade de 0,11, potencial zeta de -3,4 mV e concentração de nanopartículas de 15,1% (p/p). EXEMPLO 7 (COMPARATIVO): SÍNTESE DE PARTÍCULAS COM UM CORANTE NR668 0,6%, SEM QUALQUER INIBIDOR (CONTROLE NEGATIVO).

[00144] Solução 1 (fase aquosa): 120 mg de Kolliphor HS 15 (Sigma Aldrich), 0,120 g de Brij L23 (Sigma Aldrich) e 12,0 g de solução de ácido clorídrico 0,1 M (Merck) água foram misturados em um frasco de vidro até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos.

[00145] Solução 2 (fase de monômero): 0,80 g de n-butil cianoacrilato (monômero, Henkel Loctite, Irlanda) e 0,048 g de solução do corante NR668 (vermelho do Nilo modificado, SINTEF) dissolvido em Miglyol 812 (Caeser e Loretz GmBH, de modo que 5,1 mg de NR668 foram adicionados à mistura) foram completamente misturados em um frasco de vidro.

[00146] As soluções 1 e 2 foram misturadas por 30 segundos em um frasco de vidro de 20 ml colocado em gelo usando um agitador magnético. A emulsão de óleo em água foi imediatamente sonicada por 3 minutos (intervalos de 6x30 segundos) em gelo (sonificador digital Branson 450 CE, amplitude de 25%). Após a sonicação, a miniemulsão formada foi polimerizada durante a noite à temperatura ambiente na rotação (15 rpm), em seguida, o pH foi ajustado para pH 5.

[00147] O tamanho da partícula e seu potencial zeta foram determinados usando o zetasizer Malvern Nano Series. Opcionalmente, a centrifugação foi usada para isolar as nanopartículas de grandes partículas de subproduto e a solução de nanopartículas reanalisada (ver Tabela 2).

[00148] O método acima mencionado resultou em polimerização parcial antes que as soluções pudessem ser misturadas. O que restou da solução de monômero líquido foi usado, e as nanopartículas obtidas tinham 148 nm (diâmetro médio z) com um índice de polidispersidade de 0,27, potencial zeta de -3,66 mV e concentração de nanopartículas de 4,1% (p/p). EXEMPLO 10 (COMPARATIVO): SÍNTESE DE PARTÍCULAS COM UM CORANTE NR668 A 0,6%, COM UM INIBIDOR DE RADICAL (BHT).

[00149] Solução 1 (fase aquosa): 120 mg de Kolliphor HS 15 (Sigma Aldrich), 0,120 g de Brij L23 (Sigma Aldrich) e 12,0 g de solução de ácido clorídrico 0,1 M (Merck) água foram misturados em um frasco de vidro até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos.

[00150] Solução 2 (fase de monômero): 0,80 g de n-butil cianoacrilato (monômero, Henkel Loctite, Irlanda), 0,043 g de hidroxitolueno butilado (BHT, Fluka) e 0,050 g de solução do corante NR668 (vermelho de Nilo modificado, SINTEF) dissolvido em Miglyol 812 (Caeser e Loretz GmBH, de modo que 5,3 mg de NR668 foram adicionados à mistura) foram completamente misturados em um frasco de vidro.

[00151] As soluções 1 e 2 foram misturadas por 30 segundos em um frasco de vidro de 20 ml colocado em gelo usando um agitador magnético. A emulsão de óleo em água foi imediatamente sonicada por 3 minutos (intervalos de 6x30 segundos) em gelo (sonificador digital Branson 450 CE, amplitude de 25%). Após a sonicação, a miniemulsão formada foi polimerizada durante a noite à temperatura ambiente na rotação (15 rpm), em seguida, o pH foi ajustado para pH 5.

[00152] O tamanho da partícula e seu potencial zeta foram determinados usando o zetasizer Malvern Nano Series. Opcionalmente, a centrifugação foi usada para isolar as nanopartículas de grandes partículas de subproduto e a solução de nanopartículas reanalisada (ver Tabela 2).

[00153] As nanopartículas obtidas tinham 164,2 nm (diâmetro médio z) com índice de polidispersidade de 0,24, potencial z de -3,90 mV. EXEMPLO 12 (COMPARATIVO): SÍNTESE DE PARTÍCULAS COM UM CORANTE NR668 A 0,2%, COM UM INIBIDOR ANIÔNICO (MSA).

[00154] Solução 1 (fase aquosa): 120 mg de Kolliphor HS 15 (Sigma Aldrich), 0,120 g de Brij L23 (Sigma Aldrich) e 12,0 g de solução de ácido clorídrico 0,1 M (Merck) água foram misturados em um frasco de vidro até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos.

[00155] Solução 2 (fase de monômero): 0,80 g de n-butil cianoacrilato (monômero, Henkel Loctite, Irlanda), 0,002 g de ácido metanossulfônico (Sigma Aldrich) e 0,020 g de solução do corante NR668 (vermelho de Nilo modificado, SINTEF) dissolvido em Miglyol 812 (Caeser e Loretz GmBH, de modo que 2,1 mg de NR668 foram adicionados à mistura) foram completamente misturados em um frasco de vidro.

[00156] As soluções 1 e 2 foram misturadas por 30 segundos em um frasco de vidro de 20 ml colocado em gelo usando um agitador magnético. A emulsão de óleo em água foi imediatamente sonicada por 3 minutos (intervalos de 6x30 segundos) em gelo (sonificador digital Branson 450 CE, amplitude de 25%). Após a sonicação, a miniemulsão formada foi polimerizada durante a noite à temperatura ambiente na rotação (15 rpm), em seguida, o pH foi ajustado para pH 5.

[00157] O tamanho da partícula e seu potencial zeta foram determinados usando o zetasizer Malvern Nano Series. Opcionalmente, a centrifugação foi usada para isolar as nanopartículas de grandes partículas de subproduto e a solução de nanopartículas reanalisada (ver Tabela 2).

[00158] As nanopartículas obtidas apresentavam 201 nm (diâmetro médio z) com índice de polidispersidade de 0,33, potencial z de -4,79 mV e concentração de nanopartículas de 6,0% (p/p). EXEMPLO 13 (COMPARATIVO): SÍNTESE DE PARTÍCULAS COM UM CORANTE NR668 A 0,2%, COM UM INIBIDOR DE RADICAL (BHA).

[00159] As partículas do exemplo 13 foram obtidas usando o mesmo procedimento experimental conforme divulgado para o exemplo 16, usando BHA em vez de vanilina. EXEMPLO 16: SÍNTESE DE PARTÍCULAS COM UM CORANTE NR668 0,2%, USANDO UM INIBIDOR DUPLO (VANILINA).

[00160] Solução 1 (fase aquosa): 120 mg de Kolliphor HS 15 (Sigma Aldrich), 0,120 g de Brij L23 (Sigma Aldrich) e 12,0 g de solução de ácido clorídrico 0,1 M (Merck) água foram misturados em um frasco de vidro até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos.

[00161] Solução 2 (fase de monômero): 0,80 g de n-butil cianoacrilato (BCA, monômero, Henkel Loctite, Irlanda), 0,040 g de vanilina (Sigma Aldrich) e 0,020 g de solução do corante NR668 (vermelho de Nilo modificado, SINTEF) dissolvido em Miglyol 812 (Caeser e Loretz GmBH, de modo que 2,1 mg de NR668 foram adicionados à mistura) foram completamente misturados em um frasco de vidro.

[00162] As soluções 1 e 2 foram misturadas por 30 segundos em um frasco de vidro de 20 ml colocado em gelo usando um agitador magnético. A emulsão de óleo em água foi imediatamente sonicada por 3 minutos (intervalos de 6x30 segundos) em gelo (sonificador digital Branson 450 CE, amplitude de 25%). Após a sonicação, a miniemulsão formada foi polimerizada durante a noite à temperatura ambiente na rotação (15 rpm), em seguida, o pH foi ajustado para pH 5.

[00163] O tamanho da partícula e seu potencial zeta foram determinados usando o zetasizer Malvern Nano Series. Opcionalmente, a centrifugação foi usada para isolar as nanopartículas de grandes partículas de subproduto e a solução de nanopartículas reanalisada (ver Tabela 2).

[00164] As nanopartículas obtidas tinham 112 nm (diâmetro médio z) com índice de polidispersidade de 0,23, potencial zetal de - 3,45 mV e concentração de nanopartículas de 6,6% (p/p). EXEMPLO 20: SÍNTESE DE PARTÍCULAS COM UM CORANTE NR668 0,6%, COM UM INIBIDOR DUPLO (HDMB) USANDO O MÉTODO DE MINIEMULSÃO.

[00165] Solução 1 (fase aquosa): 120 mg de Kolliphor HS 15 (Sigma Aldrich), 0,120 g de Brij L23 (Sigma Aldrich) e 12,0 g de solução de ácido clorídrico 0,1 M (Merck) água foram misturados em um frasco de vidro até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos.

[00166] Solução 2 (fase de monômero): 0,80 g de n-butil cianoacrilato (monômero, Henkel Loctite, Irlanda), 0,043 g de 4-hidroxi-3,5- dimetoxi-benzaldeído (HMDB, Sigma Aldrich) e 0,050 g de solução do corante NR668 (vermelho do Nilo modificado, SINTEF) dissolvido em Miglyol 812 (Caeser e Loretz GmBH, de modo que 5,3 mg de NR668 foram adicionados à mistura) foram completamente misturados em um frasco de vidro.

[00167] As soluções 1 e 2 foram misturadas por 30 segundos em um frasco de vidro de 20 ml colocado em gelo usando um agitador magnético. A emulsão de óleo em água foi imediatamente sonicada por 3 minutos (intervalos de 6x30 segundos) em gelo (sonificador digital Branson 450 CE, amplitude de 25%). Após a sonicação, a miniemulsão formada foi polimerizada durante a noite à temperatura ambiente na rotação (15 rpm), em seguida, o pH foi ajustado para pH 5.

[00168] O tamanho da partícula e seu potencial zeta foram determinados usando o zetasizer Malvern Nano Series. Opcionalmente, a centrifugação foi usada para isolar as nanopartículas de grandes partículas de subproduto e a solução de nanopartículas reanalisada (ver Tabela 2).

[00169] As nanopartículas obtidas tinham 154 nm (diâmetro médio z) com índice de polidispersidade de 0,20, potencial zetapotencial de -3,90 mV e concentração de nanopartículas de 6,0% (p/p). COMPARATIVO EXEMPLOS 8, 9, 11, 14 E EXEMPLOS 15, 17, 18 E 19.

[00170] As partículas dos exemplos 8, 9, 11, 14, 15, 17, 18 e 19 foram obtidas usando o mesmo procedimento experimental como divulgado para o exemplo 20 e alterando o tipo de inibidor. EXEMPLO 39: PARTÍCULAS FURTIVAS COM APROXIMADAMENTE 0,15% DE PORÇÕES QUÍMICAS DE DIRECIONAMENTO (DIRECIONAMENTO DE PEG FOLATO).

[00171] Solução 1 (PEG/ligante de direcionamento): 15 mg de DSPE-PEG(2000)-folato e 5,0 g de água destilada foram misturados em um frasco de vidro, pH ajustado para pH 6 com HCl 5M e desgaseificado usando N2 por 15 minutos.

[00172] Solução 2 (fase de monômero): 0,45 g de n-butila cianoacrilato (monômero, Henkel Loctie, Irlanda) e 0,015 g de solução do corante NR668 (vermelho do Nilo modificado, SINTEF) dissolvido em Miglyol 812 (Caeser e Loretz GmBH, de modo que 2,0 mg de NR668 foram adicionados à mistura) foram completamente misturados em um frasco de vidro.

[00173] Solução 3 (estabilizador): 30 mg de Kolliphor HS 15 (Sigma Aldrich), 30 mg de Brij L23 (Sigma Aldrich) e 5,0 g de solução de ácido clorídrico 0,1 M (Merck) água foram misturados em um frasco de vidro até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos.

[00174] As soluções 1, 2 e 3 foram misturadas por 30 segundos em um frasco de vidro de 5 ml colocado em gelo usando um agitador magnético. A emulsão de óleo em água foi imediatamente sonicada por 3 minutos (intervalos de 6x30 segundos) em gelo (sonificador digital Branson 450 CE, amplitude de 25%) e polimerizada durante a noite à temperatura ambiente em rotação (15 rpm). O pH foi ajustado para pH 5 e a solução foi dialisada

(membrana de diálise Spectra/Por MWCO 12-14000) extensivamente contra água destilada à temperatura ambiente para remover o tensoativo e o PEG que não reagiu. O tamanho da partícula e seu potencial zeta foram determinados usando o zetasizer Malvern Nano Series. Opcionalmente, a centrifugação foi usada para isolar as nanopartículas de grandes partículas de subproduto e a solução de nanopartículas reanalisada (ver Tabela 2). O método acima mencionado resultou em nanopartículas direcionadas PEGuiladas de 170 nm (diâmetro médio z) com um índice de polidispersidade de 0,17, potencial zeta de -9 mV e concentração de nanopartículas de 1,80% (p/p). EXEMPLO 41: SÍNTESE DE PARTÍCULAS COM UM CORANTE PP9 A 1,8%, COM UM INIBIDOR DUPLO (VANILINA).

[00175] Solução 1 (fase aquosa): 60 mg de Kolliphor HS 15 (Sigma Aldrich), 60 mg de Brij L23 (Sigma Aldrich) e 6,0 g de solução de ácido clorídrico 0,1 M (Merck) água foram misturados em um frasco de vidro até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos.

[00176] Solução 2 (fase de monômero): 1,01 g de n-octil cianoacrilato (monômero, Henkel Loctite, Irlanda), 0,050 g de vanilina (Sigma Aldrich), 0,020 g de solução do corante PP9 (Protoporfirina IX, Sigma Aldrich) e 0,019 g de Miglyol 812 (Caeser e Loretz GmBH), foram completamente misturados em um frasco de vidro.

[00177] As soluções 1 e 2 foram misturadas por 30 segundos em um frasco de vidro de 20 ml colocado em gelo usando um agitador magnético. A emulsão de óleo em água foi imediatamente sonicada por 3 minutos (intervalos de 6x30 segundos) em gelo (sonificador digital Branson 450 CE, amplitude de 25%). Após sonicação, a miniemulsão formada foi polimerizada durante a noite à temperatura ambiente em rotação (15 rpm), o pH foi ajustado para pH 5 e a amostra dialisada (3 x 1 L, HCl 1 mM). O tamanho da partícula e seu potencial zeta foram determinados usando o zetasizer Malvern Nano Series. Opcionalmente, a centrifugação foi usada para isolar as nanopartículas de grandes partículas de subproduto e a solução de nanopartículas reanalisada (ver

Tabela 2). As nanopartículas obtidas tinham 174 nm (diâmetro médio z) com um índice de polidispersidade de 0,26, potencial zeta de -2,6 mV e concentração de nanopartículas de 6,9% (p/p). EXEMPLO 42: SÍNTESE DE PARTÍCULAS COM UM CORANTE NR668 0,22% E API (18,6% CABAZITAXEL), COM UM INIBIDOR DUPLO (VANILINA).

[00178] Solução 1 (fase aquosa): 50 mg de Kolliphor HS 15 (Sigma Aldrich), 0,100 g de Pluronic F68 e 6,0 g de solução de ácido clorídrico 0,1 M (Merck) água foram misturados em um frasco de vidro até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos.

[00179] Solução 2 (fase de monômero): 0,5 g de etilbutilcianoacrilato (monômero, SINTEF), 0,030 g de vanilina (Sigma Aldrich), 0,125 g de cabazitaxel (Biochempartner, China) e 0,015 g de solução do corante NR668 (vermelho do Nilo modificado, SINTEF) dissolvido em Miglyol 812 (Caeser e Loretz GmBH, de modo que 2,1 mg de NR668 foram adicionados à mistura) foram completamente misturados em um frasco de vidro.

[00180] As soluções 1 e 2 foram misturadas por 30 segundos em um frasco de vidro de 20 ml colocado em gelo usando um agitador magnético. A emulsão de óleo em água foi imediatamente sonicada por 3 minutos (intervalos de 6x30 segundos) em gelo (sonificador digital Branson 450 CE, amplitude de 25%). Após sonicação, a miniemulsão formada foi polimerizada durante a noite à temperatura ambiente em rotação (15 rpm), em seguida, o pH foi ajustado para pH 5 e dialisado extensivamente contra água destilada.

[00181] O tamanho da partícula e seu potencial zeta foram determinados usando o zetasizer Malvern Nano Series. Opcionalmente, a centrifugação foi usada para isolar as nanopartículas de grandes partículas de subproduto e a solução de nanopartículas reanalisada (ver Tabela 2).

[00182] As nanopartículas obtidas tinham 175 nm (diâmetro médio z) com um índice de polidispersidade de 0,22, zetapotencial de -3,10 mV e concentração de nanopartículas de 1,19% (p/p).

EXEMPLO 43: SÍNTESE DE PARTÍCULAS COM 0,24% DE LIPÍDEO 780 E API (23% DE CABAZITAXEL), COM UM INIBIDOR DUPLO (VANILINA).

[00183] Solução 1 (fase aquosa): 30 mg de Kolliphor HS 15 (Sigma Aldrich), 0,130 g de Pluronic F68 e 6 g de solução de ácido clorídrico 0,1 M (Merck) água foram misturados em um frasco de vidro até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos.

[00184] Solução 2 (fase de monômero): 0,450 g de etil butil cianoacrilato (monômero, Henkel Loctite, Irlanda), 0,030 g de vanilina (Sigma Aldrich) e 0,150 g de cabazitaxel (Biochempartner, China), 0,024 g de solução do corante Lipid 780 (Produtos químicos CEA) dissolvidos em Miglyol 812 (Caeser e Loretz GmBH, de modo que 14 mg de Lipid 780 foram adicionados à mistura) foram completamente misturados em um frasco de vidro.

[00185] As soluções 1 e 2 foram misturadas por 30 segundos em um frasco de vidro de 20 ml colocado em gelo usando um agitador magnético. A emulsão de óleo em água foi imediatamente sonicada por 3 minutos (intervalos de 6x30 segundos) em gelo (sonificador digital Branson 450 CE, amplitude de 25%). Após a sonicação, a miniemulsão formada foi polimerizada durante a noite à temperatura ambiente na rotação (15 rpm), em seguida, o pH foi ajustado para pH 5.

[00186] O tamanho da partícula e seu potencial zeta foram determinados usando o zetasizer Malvern Nano Series. Opcionalmente, a centrifugação foi usada para isolar as nanopartículas de grandes partículas de subproduto e a solução de nanopartículas reanalisada (ver Tabela 2).

[00187] As nanopartículas obtidas apresentavam 118 nm (diâmetro médio z) com índice de polidispersidade de 0,18, potencial zeta -2,00 mV e concentração de nanopartículas de 1,05% (p/p). EXEMPLO 44: SÍNTESE DE PARTÍCULAS COM UM API (10% CABAZITAXEL) COM UM INIBIDOR DUPLO (VANILINA).

[00188] Solução 1 (fase aquosa): 150 mg de Kolliphor HS

15 (Sigma Aldrich), 0,150 g de Brij L23 (Sigma Aldrich) e 18,0 g de solução de ácido clorídrico 0,1 M (Merck) de água foram misturados em um frasco de vidro até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos.

[00189] Solução 2 (fase de monômero): 2,25 g de etilbutilcianoacrilato (monômero, Cuantum medical, Espanha), 0,060 g de vanilina (Sigma Aldrich) e 0,270 g de cabazitaxel (Biochempartner, China) foram completamente misturados em um frasco de vidro.

[00190] As soluções 1 e 2 foram misturadas por 30 segundos em um frasco de vidro de 20 ml colocado em gelo usando um agitador magnético. A emulsão de óleo em água foi imediatamente sonicada por 3 minutos (intervalos de 6x30 segundos) em gelo (sonificador digital Branson 450 CE, amplitude de 25%). Após a sonicação, a miniemulsão formada foi polimerizada durante a noite à temperatura ambiente em rotação (15 rpm), então o pH foi ajustado para pH 5 e a solução dialisada contra ácido clorídrico 1 mM (aquoso, Merck).

[00191] O tamanho da partícula e seu potencial zeta foram determinados usando o zetasizer Malvern Nano Series. Opcionalmente, a centrifugação foi usada para isolar as nanopartículas de grandes partículas de subproduto e a solução de nanopartículas reanalisada (ver Tabela 2).

[00192] As nanopartículas obtidas tinham 163 nm (diâmetro médio z) com índice de polidispersidade de 0,14, potencial zeta de - 2,80 mV e concentração de nanopartículas de 10,5% (p/p). Pt. ACA Inibidor Mengde PEG/iniciador Ingredientes Centrifugado? pH PDI Potencial Peso Resultados No. [% av E Aktiv médio zeta seco oljefasen] Estabilizador z 7 pH 7 % de (nm) (mV) p/p BCA BHT 1,15 Kolliphor 0,18% DiR i Não 615 0,64 Falhou HS15 + Brij Miglyol 812 1 L23 BCA BHA 1,15 Kolliphor 0,18% DiR i Não 151 0,44 Falhou HS15 + Brij Miglyol 812 2 L23

BCA BHA 4,8 Kolliphor 0,18% DiR i Não 1.029 0,038 Falhou HS15 + Brij Miglyol 812 3 L23 BCA Vanilina/BHT 8,4/0,2 Kolliphor 0,14% DiR i Sim 398 0,28 0,8 Fraco HS15 + Miglyol Pluronic F68 10,1% 4 Cabazitaxel BCA Vanilina 10 Kolliphor 0,1% DiR i Não requerido 158 0,11 -3,4 15,1 Boa HS15 + Brij Miglyol 5 L23 BCA Vanilina 9 Kolliphor 0,1% DIR i Sim 209 0,10 0,6 Fraco HS15 + Miglyol Pluronic F68 13% Cabazitaxel 6 BCA - - Kolliphor 0,6% NR668 i Sim 148 0,27 -3,66 4,1 OK HS15 + Brij Miglyol 812 7 L23 BCA Vitamina K1 4,8 Kolliphor 0,60% NR-668 Sim 158,8 0,23 -3,38 4,3 OK HS15 + Brij 8 L23 BCA Vitamina K3 4,8 Kolliphor 0,60% NR-668 Sim 178,2 0,32 -4,04 - OK HS15 + Brij 9 L23 BCA BHT 4,8 Kolliphor 0,60% NR-668 Sim 164,2 0,24 -2,35 - OK HS15 + Brij 10 L23 BCA Vitamina E 4,8 Kolliphor 0,60% NR-668 Sim 167,1 0,27 -2,47 - OK HS15 + Brij 11 L23 BCA MSA 0,2 Kolliphor 0,2% NR668 i Não requerido 201 0,33 -4,79 6,0 OK HS15 + Brij Miglyol 812 12 L23 BCA BHA 4,7 Kolliphor 0,2% NR668 i Não requerido 116 0,14 -2,73 6,5 Boa HS15 + Brij Miglyol 812 13 L23 Kolliphor 0,6% NR668 i BCA Vitamina E 4,8 HS15 + Brij Miglyol 812 OK 14 L23 Sim 156 0,21 -2,11 5,1 BCA Salicilaldeído 4,8 Kolliphor 0,6% NR668 i Sim 158 0,42 -2,81 3,8 Fraco HS15 + Brij Miglyol 812 15 L23 BCA Vanilina 4,7 Kolliphor 0,2% NR668 i Não requerido 112 0,17 -3,45 6,6 Boa HS15 + Brij Miglyol 812 16 L23

Kolliphor 0,6% NR668 i BCA Vanilina 4,8 HS15 + Brij Miglyol 812 Boa 17 L23 Não requerido 122 0,174 -5,59 7,0 BCA Benzaldeído 4,8 Kolliphor 0,6% NR668 i Não requerido 156 0,19 -3,01 6,2 Boa HS15 + Brij Miglyol 812 18 L23 BCA DMHB 4,8 Kolliphor 0,60% NR-668 Não requerido 142,5 0,18 -3 6,9 Boa HS15 + Brij 19 L23 BCA HDMB 4,8 Kolliphor 0,60% NR-668 Não requerido 154 0,2 -3,9 6 Boa HS15 + Brij 20 L23 BCA Vanilina 4,6 Kolliphor 14,4% da forma Não requerido 143 0,32 -15,5 8,4 OK HS15 + Brij de ácido de L23 cloxacilina e 2% 21 de miglyol 812 BCA Vanilina 4,6 Kolliphor 14,4% da forma Não requerido 143 0,26 -17,4 8,7 OK HS15 + Brij de ácido oxacilina L23 e 2% de miglyol 22 812 BCA vanilina 4,6 Kolliphor 25% cabazitaxel Não requerido 137 0,16 -2 4,4 Boa HS15 + e 3% miglyol 812 23 Pluronic F68 BCA vanilina 2,3 Kolliphor 10,2% Não requerido 188 0,14 -4,3 10,7 Boa HS15 + Brij cabazitaxel, L23 NR668 e 2,3% 24 miglyol 812 EBCA Vanilina 2 Kolliphor 5% de ispinesina Não requerido 78 0,23 Boa HS15 + Brij e miglyol 812 25 L23 EBCA vanilina 2,3 Kolliphor 10,2% Não requerido 165 0,17 -2 8,7 Boa HS15 + Brij cabazitaxel, L23 NR668 e 2,3% 26 miglyol 812 EBCA vanilina 4,6 Kolliphor 25% cabazitaxel Sim 126 0,16 -2 0,3 Fraco HS15 + e 3% miglyol 812 27 Pluronic F68 EBCA Vanilina 4,6 Kolliphor 14,4% da forma Sim 117 0,33 -23,7 7,3 Fraco HS15 + Brij de ácido de L23 cloxacilina e 2% 28 de miglyol 812 EBCA Vanilina 10 Kolliphor 5% daptomicina Sim 332 0,45 -41,6 3,1 Fraco HS15 + Brij e 2% miglyol 812 29 L23

EBCA Vanilina 10 Kolliphor 15% de Não requerido 142 0,18 -50,6 2,9 Boa HS15 + Brij cloxacilina e 5% L23 de daptomicina e 2% de miglyol 30 812 EBCA Vanilina 5 Kolliphor Forma de ácido Não requerido 197 0,183 -31,7 3,3 Boa HS15 + Brij de oxacilina a 6% L23 e miglyol 812 a 31 2% EBCA vanilina 10 Kolliphor 0,26% NR668 e Sim 226 0,26 -2,8 2,95 Fraco HS15 + 2,6% miglyol 812 32 Pluronic F68 EBCA Vanilina 10 Kolliphor 0,1% DIR e 3,9% Não requerido 193 0,12 -0,7 2,1 Boa HS15 + Brij miglyol 812 33 L23 OCA Vanilina 5 Kolliphor 3% PP9 e miglyol Não requerido 203 0,26 -3,7 7,3 OK HS15 + Brij 812 34 35 OCA Vanilina 5 Kolliphor 3% de cloro e6 e Sim 145 0,22 -7,2 7,0 Fraco HS15 + Brij miglyol 812 35 35 OCA vanilina 2,3 Kolliphor 10,2% Não requerido 150 0,18 -3,8 8,8 Boa HS15 + Brij cabazitaxel, L23 0,22% NR668 e 36 2,3% miglyol 812 OCA Vanilina 5 Kolliphor 2% NR668 e Sim 199 0,24 -2,0 6,1 Boa HS15 + Brij miglyol 812 37 35 OCA vanilina 9 Kolliphor 13% cabazitaxel, Sim 181 0,18 -0,5 1,9 Fraco HS15 + 0,1% DIR e 38 Pluronic F68 miglyol 812 BCA Vanilina 10 Kolliphor 7,7% DSPE- Não requerido 170 0,17 -9 1,8 Boa HS15 + Brij PEG(2000)- 35 folato, 0,3% NR668 e Miglyol 39 812 BCA Vanilina 10 Kolliphor 8,0% DSPE- Sim 178 0,21 -16 1,75 Boa HS15 + Brij PEG(2000)- 35 DBCO, 0,3% NR668 e Miglyol 40 812 OCA Vanilina 5 Kolliphor 2% PP9 e miglyol Sim 174 0,26 -2,6 6,9 OK HS15 + Brij 812 41 35

EBCA vanilina 4,5 Kolliphor 18,6% Sim 175 0,22 -3,1 1,19 OK HS15 + cabazitaxel, Pluronic F68 0,22% NR668 e 42 2,3% miglyol 812 EBCA vanilina 4,6 Kolliphor 23% cabazitaxel, Sim 118 0,18 -2 1,05 OK HS15 + 0,24% Lipídeo Pluronic F68 780 e 3% miglyol 43 812 EBCA vanilina 2,3 Kolliphor 10,2% Não requerido 163 0,14 -2,8 10,5 Boa HS15 + Brij cabazitaxel e 44 L23 2,3% miglyol 812

TABELA 2 No.

Inibidor Distribuição de tamanho por Distribuição de tamanho por intensidade intensidade Antes da centrifugação Após centrifugação Vit.

K1

8 Vit.

K3

9 Vit.

E

11 Vit.

E

14

Vanilina Não requerido 16 Benzaldeído Não requerido 18 DMHB Não requerido 19 HDMB Não requerido 20 Vanilina Não requerido 44 TABELA 3

[00193] Tamanho de partícula por gráficos de distribuição de exemplos selecionados, antes e depois da centrifugação.

Claims (17)

REIVINDICAÇÕES

1. Nanopartícula caracterizada pelo fato de que compreende um homopolímero ou copolímero de poli(alquila cianoacrilato), pelo menos um agente ativo e um inibidor aniônico e de radical, em que o inibidor aniônico e de radical é um composto com a seguinte fórmula: em que R1 é H; e R3, R4, R5, R6 e R7 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em -H, -OH, C1-C6 alcóxido, C1-C6 alquila, haletos, ácido carboxílico, cetona ou aldeído; em que o inibidor aniônico e de radical está presente em uma quantidade de 0,001 a 15% em peso.

2. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o agente ativo é um composto tendo um grupo funcional selecionado do grupo que consiste em M-NH3 (em que M é um metal), R-NH2, R1R2-NH, R1R2R3N, R1=NR2, R-OH, R-Cl, R-Br, R-I, R-SH, R1N=NR2, R- NHOH, H2O estruturalmente associadas e enóis.

3. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada pelo fato de que é fabricada por um processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4 a 14.

4. Processo para a preparação de nanopartículas de um homopolímero ou copolímero de poli(alquila cianoacrilato) caracterizado pelo fato de que compreende, em uma única etapa, a polimerização aniônica de uma miniemulsão de óleo em água, em que a dita miniemulsão compreende (i) pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila; (ii) pelo menos um tensoativo; (iii) um ou mais agentes ativos; (iv) opcionalmente, um iniciador de polimerização aniônico; e (v) um inibidor aniônico e de radical, em que o inibidor aniônico e de radical é um composto com a seguinte fórmula: em que R1 é H; e R3, R4, R5, R6 e R7 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em -H, -OH, C1-C6 alcóxido, C1-C6 alquila, haletos, ácido carboxílico, cetona ou aldeído.

5. Processo, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que o inibidor aniônico e de radical é um único composto capaz de reagir com qualquer um de um nucleófilo e um radical.

6. Processo, de acordo com a reivindicação 4 ou 5, caracterizado pelo fato de que o inibidor aniônico e de radical está presente em uma quantidade de 0,001 a 15% em peso de uma fase oleosa da miniemulsão.

7. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4 a 6, caracterizado pelo fato de que o inibidor aniônico e de radical tem uma afinidade maior para radicais e nucleófilos do que o pelo menos um monômero de cianoacrilato de alquila.

8. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4 a 7, caracterizado pelo fato de que o inibidor aniônico e de radical tem um coeficiente de partição octanol-água (logP) na faixa de 1,0-3,0, de preferência na faixa de 1,0-2,5 ou ainda mais preferida na faixa de 1,0-2,0.

9. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4 a 8, caracterizado pelo fato de que o inibidor aniônico e de radical é selecionado do grupo que consiste em 4-hidroxi-3,5-dimetilbenzaldeído, 4-hidroxi-3,5-dimetoxibenzaldeído, vanilina, salicilaldeído e benzaldeído.

10. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4 a 9, caracterizado pelo fato de que o agente ativo é um agente terapêutico ou um agente de imagem.

11. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4 a 10, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um tensoativo é pelo menos um polialquilenoglicol selecionado do grupo que consiste em polietilenoglicóis (PEG) e polipropilenoglicóis (PPG) ou suas misturas.

12. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4 a 11, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um tensoativo inicia a reação de polimerização aniônica.

13. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4 a 12, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um tensoativo na etapa (ii) compreende pelo menos dois polialquilenoglicóis selecionados do grupo que consiste em polietilenoglicóis (PEG) e polipropilenoglicóis (PPG) ou misturas dos mesmos.

14. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4 a 13, caracterizado pelo fato de que o agente ativo compreende um grupo funcional selecionado do grupo que consiste em M-NH3 (em que M é um metal), R-NH2, R1R2-NH, R1R2R3N, R1=NR2, R-OH, R-Cl, R-Br, RI, R-SH, R1N=NR2, R-NHOH, estruturalmente relacionado H2O e enóis.

15. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende uma nanopartícula, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3, e um ou mais carreadores, diluentes ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

16. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que é para uso em medicina, de preferência para uso em distribuição de fármacos ou imageamento molecular.

17. Uso de uma nanopartícula, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que é em agricultura, hidrocultura, aplicações antibacterianas, nutracêuticos, aplicações em alimentos/rações, cosméticos, autocura, aplicações domésticas e cuidados com o corpo.