BR112020023375A2

BR112020023375A2 - uso de oligossacarídeos de leite humano, e composição nutricional que compreende os mesmos

Info

Publication number: BR112020023375A2
Application number: BR112020023375-7A
Authority: BR
Inventors: Jonas Hauser; Jian Yan
Original assignee: Société des Produits Nestlé S.A.
Priority date: 2018-06-25
Filing date: 2019-05-21
Publication date: 2021-02-09
Also published as: CN112384081B; AU2019296552A1; CN112384081A; WO2020001862A1; MX2020012783A; EP3809878A1; PH12020551822A1; CL2020003135A1; US20210267252A1

Abstract

A presente invenção refere-se a uma composição nutricional compreendendo um oligossacarídeo de leite humano (OLH) que tem um efeito sobre um mamífero para melhorar, acentuar, promover ou modular uma função serotoninérgica no SNC, de preferência em um bebê humano ou uma criança pequena, seja prematuro ou nascido a termo, entre o nascimento e os 7 anos de idade. A composição pode ser uma fórmula para bebês. O OLH pode ser 2FL, diFL e/ou LNT e/ou LNnT ou combinações dos mesmos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "USO DE OLIGOSSACARÍDEOS DE LEITE HUMANO, E COMPOSIÇÃO NUTRICIONAL QUE COMPREENDE OS MESMOS".

ANTECEDENTES

[001] A presente invenção se refere, de modo geral, ao campo da saúde neuronal, da proteção neuronal e do desenvolvimento neuronal. Especificamente, a invenção se refere a uma composição para uso no apoio ao neurodesenvolvimento, em particular na melhoria, acentuação, promoção ou modulação de uma função relacionada a, ou que afete o, neurotransmissor serotonina (5-hidroxitriptamina, ou 5HT) no sistema nervoso central (SNC) e outros benefícios cognitivos relacionados, especialmente em bebês e crianças pequenas, entre o nascimento e 7 os anos de idade, sejam prematuros ou nascidos a termo.

[002] Mais especificamente, a invenção se refere à administração de oligossacarídeo de leite humano (OLH), opcionalmente em combinação com oligossacarídeos prebióticos adicionais, em particular frutooligossacarídeos (FOS), ou oligofrutose (OF) e/ou oligossacarídeos de leite bovino (OLB) para melhorar, acentuar, promover ou modular uma função serotoninérgica no SNC, especificamente uma resposta serotoninérgica hipocampal, mais especificamente uma resposta serotoninérgica hipocampal envolvida no processamento ou desempenho emocional ou cognitivo.

[003] O sistema nervoso central (SNC), e particularmente o cérebro, conduzem as funções cognitivas. O córtex cerebral, que é uma lâmina de tecido neural mais externa ao telencéfalo do cérebro dos mamíferos, desempenha um papel fundamental na atenção, consciência perceptiva, cognição de ordem superior (função executiva) e integração de informações de entrada sensorial.

[004] O desenvolvimento e a maturação do SNC são um fenômeno biológico altamente complexo que envolve vários processos fisiológicos inclusive, por exemplo, crescimento e diferenciação celular neuronal e glial, orientação e ramificação neuronais, e estabelecimento de comunicação interneuronal (sinais nervosos) através do crescimento axonal e sinaptogênese.

[005] A plasticidade neuronal, que é definida como a capacidade do cérebro para continuamente adaptar suas funções e sua organização estrutural a necessidades em constante mudança, é importante na maturação e na função adulta do sistema nervoso. Ela é essencial para o funcionamento correto do cérebro e é necessária para a cognição, o aprendizado e a memória. Alguns dos marcadores neuronais, inclusive proteínas e fatores neurotróficos, como o fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF - "Brain Derived Neurotrophic Factor") necessários, ou ao menos associados, a esses processos fisiológicos, foram identificados na literatura e estudados [Huang, E.J. e Reichardt, L.F. (2001); Neurotrophins: Roles in Neuronal Development and Function, Annu. Rev. Neurosci., 24: 677-736]; [Musumeci, G. e Minichiello, L. (2011); BDNF-TrkB signalling in fear learning: from genetics to neural networks, Rev. Neurosci., 22(3):303-15]; [Xiao, J. et al. (2009); The role of neurotrophins in the regulation of myelin development, Neurosignals, 17: 265-276] e [Von Bohlen e Halbach, O. (2011); Immunohistological markers for proliferative events, gliogenesis, and neurogenesis within the adult hippocampus, Cell Tissue Res., 345(1):1-19].

[006] O SNC se desenvolve com início logo após a concepção, ao longo da gestação e continua a amadurecer até o início da fase adulta. Em particular, a maturação estrutural é, em sua maior parte, pré-natal, enquanto a maturação da rede funcional é, em sua maior parte, pós- natal. Em fetos humanos, o córtex cerebral se desenvolve bastante tarde e ao longo de um período de tempo prolongado.

[007] No útero, há um pico de maturação e crescimento neuronal/cerebral a partir da 30ª semana de gestação em seres humanos.

[008] O desenvolvimento de funções serotoninérgicas, inclusive a capacidade de processamento ou desempenho emocional ou cognitivo, é uma etapa crucial no desenvolvimento das funções cognitivas em mamíferos, particularmente em bebês e crianças pequenas. Embora esse desenvolvimento e aprimoramento das funções serotoninérgicas seja de particular importância durante os primeiros meses/anos de vida (onde a plasticidade neuronal é mais alta), ele também pode afetar indivíduos mais velhos, adolescentes e adultos, ou indivíduos idosos ou doentes.

[009] Os bebês prematuros, por definição, vêm ao mundo com um cérebro ainda primitivo, de fato exibem atividade elétrica muito básica nas regiões sensoriais primárias do córtex cerebral -- aquelas áreas que percebem toque, visão e audição, bem como nas regiões motoras primárias do córtex cerebral. Para esses bebês, a gradual maturação pós-natal do cérebro é essencial para compensar sua baixa maturação cerebral no nascimento, sendo essa maturação compensatória particularmente importante para a parte mais complexa do cérebro, que media muito de sua maturação emocional, social e cognitiva nos primeiros anos de vida [Lubsen, J. et al. (2011); Microstructural and functional connectivity in the developing preterm brain, Seminars in Perinatology, 35, 34-43].

[0010] Os bebês prematuros nascem em um momento que é crucial para o desenvolvimento e maturação estrutural e funcional do cérebro e, assim, eles perdem o desenvolvimento cerebral dentro do útero. Eles estão em risco de condições médicas após o nascimento, incluindo lesões cerebrais hemorrágicas e hipóxico-isquêmicas, bem como problemas do desenvolvimento mais tarde na vida, inclusive déficits cognitivos. O risco parece ser maior quanto mais cedo ocorrer o nascimento quanto menor for o peso do bebê ao nascer. Os déficits cognitivos em termos de QI mais baixo, baixos níveis de atenção e de capacidades de memória de trabalho, bem como problemas nas funções executivas, podem persistir na idade escolar e na adolescência [Talge, N. et al. (2010). Late-Preterm Birth and its Association with Cognitive and Socioemotional Outcomes at 6 Years of Age. Pediatrics, 126, 1124-1131; van Baar, A., et al. (2009). Functioning at school age of moderately preterm children born at 32 to 36 weeks' gestational age. Pediatrics, 124, 251-257; Farooqi, A et al. (2011). Impact at age 11 years of major neonatal morbidities in children born extremely preterm. Pediatrics, 127, e1247- 1257; Nosarti, C. et al. (2010). Neurodevelopmental outcomes of preterm birth. Cambridge: Cambridge University Press].

[0011] De modo mais genérico, a imaturidade do SNC ou a maturação atrasada do SNC, podem ser observadas em bebês como:

[0012] Bebês prematuros, com peso baixo no nascimento (<2.500 g), bebês com peso muito baixo e extremamente baixo no nascimento (<1.500 g), com peso extremamente baixo no nascimento (<1.000 g) e em bebês pequenos para a idade gestacional [Allen, M.C. (2008); Neurodevelopmental outcomes of preterm infants, Curr. Opin Neurol., 21(2): 123-8].

[0013] Bebês prematuros ou que nasceram a termo que tenham sofrido um retardo no crescimento intrauterino (RCIU) que ocorreu após quaisquer eventos adversos durante a gestação (tabagismo da mãe, medicação da mãe, baixa qualidade da placenta, posicionamento anormal da placenta, desnutrição da mãe e do feto, estresse/ansiedade excessivos da mãe, etc.); [Gregory, A. et al. (2008); Intrauterine Growth Restriction Affects the Preterm Infant's Hippocampus, Pediatric Research, 63(4): 438–443].

[0014] Qualquer neonato e bebê pequeno que exiba retardo no crescimento do sistema nervoso após, por exemplo, hipoxemia- isquemia no nascimento, complicações pós-natais, tratamentos pós-

natais com esteróides ou qualquer outro evento adverso (consulte, por exemplo, Barrett, R.D. et al. (2007); Destruction and reconstruction: hypoxia and the developing brain, Birth Defects Res. C. Embryo Today, 81: 163-76).

[0015] Disfunções cognitivas são relatadas nestes bebês, junto com disfunção no seu crescimento e desenvolvimento, indicando que um "alcance" ótimo do processo de neurodesenvolvimento não é obtido. A imaturidade ou maturação atrasada do córtex cerebral pode levar a um atraso e/ou prejuízo da capacidade de aprendizado, da integração de informações, do processamento de entradas sensoriais, perda de, ou desenvolvimento deficiente do raciocínio superior, funções executivas, concentração, atenção, habilidades motoras e linguagem. Isto pode levar a problemas comportamentais, inteligência anormalmente baixa e, dessa forma, desempenho mental anormalmente baixo.

[0016] Observou-se também, de modo geral, que a amamentação de bebês prematuros pode resultar em melhor desenvolvimento neurológico, em comparação à alimentação com fórmula. (Consulte, por exemplo: Rozé et al. The apparent breastfeeding paradox in very preterm infants: relationship between breast feeding, early weight gain and neurodevelopment based on results from two cohorts, EPIPAGE and LIFT. BMJ Open 2012;2:e000834).

[0017] De acordo com os inventores, isso tende a indicar que alguns nutrientes presentes no leite materno humano podem estar faltando nas fórmulas sintéticas convencionais/genéricas, ou sendo fornecidos em uma quantidade abaixo de ótima. Existe uma necessidade por identificar as principais diferenças entre as fórmulas convencionais e o leite materno humano, e adaptar a fórmula sintética de acordo com isso.

[0018] Os distúrbios comportamentais e do neurodesenvolvimento associados ao atraso na maturação do córtex cerebral, em particular as funções serotoninérgicas patológicas, incluem processamento/desempenho emocional ou cognitivo reduzido.

[0019] A função cognitiva pode ser medida, em seres humanos, com testes clínicos que dependem da idade; muitos destes testes sendo conhecidos dos pediatras e especialistas em desenvolvimento infantil. Para bebês e crianças muito pequenas, existem testes de triagem do desenvolvimento e neurodesenvolvimento, como, por exemplo, BSID - Bayley Scales of Infant Development, Brazelton Neonatal Behavioral Assessment Scale, NEPSY - A Developmental NEuroPSYchological Assessment and Griffiths Mental Development Scales. Para crianças em idade pré-escolar e/ou escolar, os testes para as capacidades cognitivas incluem PPVT (Teste de Vocabulário por Imagens Peabody [Peabody Picture Vocabulary Test]), TONI-2 (teste de inteligência não verbal-2 [Test of Nonverbal Intelligence-2]), WPPSI (escalas de inteligência pré-escolar e primária de Wechsler [Wechsler Preschool and Primary Scales of Intelligence]), e CPM (matrizes progressivas coloridas de Raven [Raven's Coloured Progressive Matrices]).

[0020] Sabe-se que a nutrição desempenha um importante papel na maturação neuronal no cérebro (revisto em Huppi, P.S. (2008); Nutrition for the Brain, Pediatric Research, 63(3): 229-231, e em Cusik e Georgieff (2016); The Role of Nutrition in Brain Development: The Golden Opportunity of the "First 1000 Days", Journal of Pediatrics, 175:16-21).

[0021] As consequências da subnutrição podem ser irreversíveis e podem incluir desenvolvimento cognitivo insatisfatório e baixa memória e educabilidade e, portanto, baixa produtividade econômica futura. (Consulte, por exemplo: Horton, R; (2008) The Lancet, Vol. 371, publicação 9608, página 179; Laus, M.F. et al. (2011); Early postnatal protein-calorie malnutrition and cognition: a review of human and animal studies, Int. J. Environ. Res. Public Health., 8(2): 590-612).

[0022] Embora se saiba que o leite materno fornece o melhor suporte nutricional ao cérebro em desenvolvimento, quando a amamentação não é possível há uma necessidade de fornecer composições nutricionais sintéticas (como fórmula para bebês ou fórmula de transição) que induzam uma melhoria ou promovam o desenvolvimento de funções cognitivas otimizadas.

[0023] Desse modo, as intervenções orais são uma forma adequada de afetar positivamente o desenvolvimento do sistema nervoso, de modo a assegurar o desenvolvimento ótimo da função cognitiva da memória e do desempenho mental em neonatos, bebês, crianças que estão começando a andar, crianças ou adultos jovens ou animais jovens, sejam prematuros ou nascidos a termo.

[0024] No entanto, pouco se sabe e foi provado, até o momento, sobre a capacidade das dietas nutricionais ou composições nutricionais para influenciar o desenvolvimento ou a promoção de funções serotoninérgicas, e especialmente em bebês e crianças pequenas.

[0025] Desse modo, há uma necessidade de promover e apoiar o estabelecimento saudável da função cognitiva em geral, e de melhorar, acentuar, promover ou modular uma função serotoninérgica no SNC, em particular uma resposta serotoninérgica hipocampal envolvida no processamento ou desempenho emocional ou cognitivo.

[0026] Há uma necessidade de evitar, prevenir ou compensar função, processamento ou desempenho emocional ou cognitivo abaixo de ótimo, especialmente em indivíduos que estejam precisando disso, e especialmente mediante a promoção ou a modulação da função serotogênica no SNC.

[0027] Há uma necessidade de promover o desenvolvimento ou de melhorar essas funções em indivíduos jovens, particularmente bebês e crianças pequenas, sejam prematuros ou nascidos a termo, entre o nascimento e os 7 anos de idade.

[0028] Há uma necessidade de fornecer essa intervenção nutricional e/ou intervenção nutricional profilática em uma forma que seja bem aceita pela população-alvo, em particular pelos indivíduos,

nessas populações, que são os mais frágeis ou os mais necessitados. Há a necessidade de não induzir desvantagens, efeitos colaterais ou efeitos negativos em tal população.

[0029] Há uma necessidade de fornecer tais soluções às populações-alvo da maneira mais simples e de baixo custo, de preferência não através do uso de ingredientes reais considerados fármacos ou medicamentos e, de preferência, como parte da dieta. A presente invenção se aplica a todos os mamíferos, inclusive animais e seres humanos e, em particular, a bebês, crianças pequenas ou animais de estimação jovens para os quais a plasticidade cerebral é mais alta.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0030] Os presentes inventores verificaram, surpreendentemente, que a administração de um oligossacarídeo específico, ou de uma mistura de oligossacarídeos específicos compreendendo OLH, sozinho ou em combinação com OF e/ou OLBs, é particularmente eficaz para melhorar, acentuar, promover ou modular uma função serotoninérgica no SNC, especificamente uma resposta serotoninérgica hipocampal, mais especificamente uma resposta serotoninérgica hipocampal relacionada ao processamento ou desempenho emocional ou cognitivo. A administração dos ditos oligossacarídeos pode ser feita como parte de uma intervenção nutricional ou como uma intervenção terapêutica em indivíduos que estejam precisando disso.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0031] Figura 1. É mostrado o efeito, em leitões, de várias dietas (OLH, OLB, OLH+OLB, OF, OF+OLH) sobre a expressão no hipocampo do receptor 4 de 5HT (5HTR4). OLH, OF e OLB são conforme descritos nos exemplos.

[0032] Figura 2. É mostrado o efeito, em leitões, de várias dietas (OLH, OLB, OLH+OLB, OF, OF+OLH) sobre a expressão no hipocampo do membro 4 da família 6 veículo de soluto do transportador de 5HT

(SLC6A4).

DESCRIÇÃO DETALHADA DE MODALIDADES EXEMPLIFICADORAS Definições:

[0033] Como usado aqui, os seguintes termos têm os significados a seguir.

[0034] Como usados aqui, os artigos "um" e "uma" antecedendo um elemento ou componente se destinam a serem não restritivos em relação ao número de instâncias (isto é, ocorrências) do elemento ou componente. Portanto, "um" ou "uma" incluem um ou ao menos um, e a forma de palavra singular do elemento ou componente também inclui o plural, a menos que o número obviamente se destine a ser singular.

[0035] O termo "bebê" significa uma criança de até 12 meses de idade.

[0036] O termo "criança pequena" significa uma criança com idade entre um e sete anos.

[0037] O termo "oligossacarídeo de leite humano" é abreviado OLH e se refere coletivamente àqueles oligossacarídeos que estão presentes no leite humano, enquadrando-se na definição adotada por qualquer versado na técnica. Os OLHs compreendem, mas não se limitam a, oligossacarídeos fucosilados (como 2'-fucosil-lactose, 3'fucosil-lactose, difucosil-lactose, lacto-N-fucopentaose I, lacto-N-fucopentaose II, lacto-N- fucopentaose III, lacto-N-fucopentaose V, lacto-N-fuco-hexaose, lacto-N- difuco-hexaose I, fucosil-lacto-N-hexaose, fucosil-lacto-N-neo-hexaose I, fucosil-lacto-N-neo-hexaose II, difucosil-lacto-N-hexaose I, difucosil- lacto-N-neo-hexaose I, difucosil-lacto-N-neo-hexaose II, fucosil-para- Lacto-N-hexaose e qualquer combinação dos mesmos), oligossacarídeos N-5 acetilados (como lacto-N-tetraose (LNT), N- neotetraose (LNnT) e qualquer combinação dos mesmos) e oligossacarídeos sialilados.

[0038] O termo "oligossacarídeo de leite bovino" (abreviado OLB) se refere àqueles oligossacarídeos que estão presentes no leite bovino,

enquadrando-se na definição adotada por qualquer versado na técnica. A mistura de OLBs usada no contexto da presente invenção pode, por exemplo, ser derivada de soro de leite bovino. Em resumo, um permeado de ultrafiltração de soro de leite bovino incluindo oligossacarídeos como 3' e 6'-sialil-lactose e GOS pode ser desmineralizado por uma combinação de eletrodiálise e troca iônica, conforme descrito na técnica. Os OLHs podem compreender, mas não se limitam a, oligossacarídeos fucosilados (como 2'-fucosil-lactose, 3'fucosil-lactose, difucosil-lactose, lacto-N-fucopentaose I, lacto-N-fucopentaose II, lacto-N-fucopentaose III, lacto-N-fucopentaose V, lacto-N-fuco-hexaose, lacto-N-difuco- hexaose I, fucosil-lacto-N-hexaose, fucosil-lacto-N-neo-hexaose I, fucosil-lacto-N-neo-hexaose II, difucosil-lacto-N-hexaose I, difucosil- lacto-N-neo-hexaose I, difucosil-lacto-N-neo-hexaose II, fucosyl-para- Lacto-N-hexaose e qualquer combinação dos mesmos), oligossacarídeos N-5 acetilados (como lacto-N-tetraose (LNT), N- neotetraose (LNnT) e qualquer combinação dos mesmos) e oligossacarídeos sialilados.

[0039] Como usado aqui, o termo "oligofrutose" (abreviado OF) se refere a um oligômero de frutose (isto é, um oligossacarídeo de frutose) tendo um grau de polimerização de 2 a 10, por exemplo um grau de polimerização de 2 a 8. A OF pode também ser chamada de oligossacarídeo de frutose ou fruto-oligossacarídeo (abreviado FOS) ou fruto-oligossacarídeos de cadeia curta (abreviado scFOS). Na presente divulgação, os termos OF, FOS, scFOS têm o mesmo significado e podem ser usados de forma intercambiável.

[0040] A inulina, que compreende polímeros de cadeias longas, está especificamente excluída da presente definição de OF. A OF é distinguível da inulina por seu grau de polimerização (sendo que a inulina tem cadeias muito mais longas).

[0041] FOS/scFOS/OF está tipicamente disponível comercialmente, por exemplo sob o nome comercial ORAFTI

Oligofructose, junto à Beneo GmbH (Mannheim, Alemanha) (por exemplo, o ingrediente Orafti® P95).

[0042] O termo "oligossacarídeo sialilado" significa um oligossacarídeo tendo um ou mais resíduos de ácido siálico.

[0043] O termo "oligossacarídeo fucosilado" significa um oligossacarídeo tendo um ou mais resíduos de fucose.

[0044] O termo "palmitato de sn-2", para uso na presente invenção, se refere ao ácido palmítico na posição sn-2 do triglicerídeo ao qual ele está ligado.

[0045] A "serotonina" ou 5-hidróxi-triptamina (abreviado como "5HT") é comumente conhecida como um neurotransmissor no SNC, bem como por suas implicações no processamento emocional (influenciando o humor) e na cognição. O termo "serotoninérgico" significa "relacionado a ou afetando o neurotransmissor 5HT". Por exemplo, uma sinapse é serotoninérgica se usa 5HT como seu neurotransmissor. Em um outro exemplo, um neurônio serotoninérgico pode produzir 5HT. Em um outro exemplo, uma substância é serotoninérgica se for capaz de induzir efeitos por meio de interações com o sistema de 5HT, como mediante o estímulo ou o bloqueio da neurotransmissão. Em outro exemplo, um serotoninérgico ou um agente serotoninérgico é qualquer produto químico que seja capaz de modificar os efeitos do 5HT no corpo ou no cérebro. As classes de fármacos serotoninérgicos incluem, mas não se limitam a, agonistas de receptor de 5HT, antagonistas de receptor de 5HT e inibidores da recaptação de 5HT (SSRIs - "Selective Serotonin Reuptake Inhibitors").

[0046] Como usado aqui, o termo "função serotoninérgica no sistema nervoso central (SNC)" se refere a qualquer função serotoninérgica exercida por ou em qualquer célula, parte de uma célula, receptor celular, sistema ou circuito de células compreendidos no SNC, incluindo, mas não se limitando a, neurônios e neuróglia, tais como astrócitos, oligodendrócitos, microglia e ependimócitos, por exemplo envolvendo neurotransmissão serotoninérgica, transporte de 5HT ou captação de 5HT. A neurotransmissão serotoninérgica, em particular um desempenho da resposta serotoninérgica hipocampal, é fundamental para o processamento ou desempenho emocional ou cognitivo. Portanto, uma função serotoninérgica específica no SNC compreende funções no processamento ou desempenho emocional ou cognitivo. Múltiplos exemplos de modulação serotoninérgica do processamento ou desempenho emocional ou cognitivo foram demonstrados na técnica. Por exemplo, a modulação serotoninérgica do processamento emocional ou cognitivo pode afetar o humor (estado emocional), o apetite (desejo de ingerir alimentos), e o sono, bem como funções cognitivas, inclusive memória e aprendizado. Adicionalmente, verificou-se que as modulações serotoninérgicas afetam viés de atenção, reconhecimento facial de emoções, memória emocional, atitudes disfuncionais e tomada de decisões, que podem também afetar indivíduos doentes, por exemplos indivíduos deprimidos (Merens et al. Journal of Affective Disorders 103 (2007) 43 – 62). A melhoria, acentuação, promoção ou modulação das funções serotoninérgicas no SNC pode ser avaliada, por exemplo, mediante a medição dos níveis de expressão de genes conhecidos envolvidos no sistema serotoninérgico, como os receptores ou transportadores serotoninérgicos. Por exemplo, a expressão gênica no hipocampo pode ser indicativa de funções serotoninérgicas melhoradas, acentuadas, promovidas ou moduladas.

[0047] O termo "composição nutricional" significa uma composição que nutre um indivíduo. Essa composição nutricional geralmente se destina a ser tomada por via oral ou intravenosa e geralmente inclui uma fonte de lipídio ou gordura e uma fonte de proteína. De preferência a composição nutricional é uma mistura para nutrição completa, que atende a todas ou quase todas as necessidades nutricionais de um indivíduo (por exemplo, uma fórmula para bebês). As composições nutricionais compreendem produtos alimentícios.

[0048] O termo "fórmula para bebês" significa um produto alimentício destinado ao uso nutricional específico por bebês durante os primeiros quatro a seis meses de vida e que satisfaz por si mesmo os requisitos nutricionais dessa categoria de pessoa (Artigo 1.2 da Diretiva 91/321/EEC da Comissão Europeia, de 14 de maio de 1991 sobre fórmulas para bebês e fórmulas de acompanhamento).

[0049] O termo "fórmula de transição" significa um produto alimentício pretendido para uso nutricional específico por bebês com mais de quatro meses de idade e que constitui o elemento líquido principal da dieta progressivamente diversificada dessa categoria de pessoa.

[0050] O termo "fórmula para bebês recém-nascidos" significa um produto alimentício destinado ao uso nutricional específico por bebês durante os primeiros quatro meses de vida.

[0051] A fórmula para bebês, a fórmula de transição e a fórmula inicial para bebês pode estar ou sob a forma de um líquido pronto para consumo ou concentrado, ou sob a forma de um pó seco que pode ser reconstituído para formar uma fórmula mediante a adição de água. Essas fórmulas são bem conhecidas na técnica.

[0052] O termo "alimento para bebês" significa um produto alimentício destinado ao uso nutricional específico por bebês durante os primeiros anos de vida.

[0053] O termo "composição cereal infantil" significa um produto alimentício destinado ao uso nutricional específico por bebês durante os primeiros anos de vida.

[0054] O termo "leite para crescimento" significa uma bebida à base de leite adaptada para as necessidades nutricionais específicas de crianças pequenas.

[0055] O termo "período de desmame" significa o período durante o qual o leite materno é substituído por outro alimento na dieta de um bebê.

[0056] O termo "mistura sintética" significa uma mistura obtida por um meio químico e/ou biológico, que pode ser quimicamente idêntica à mistura de ocorrência natural em leites de mamíferos.

[0057] O termo "prebiótico" significa carboidratos não digeríveis que afetam de modo benéfico o hospedeiro, ao estimular seletivamente a proliferação e/ou a atividade de bactérias saudáveis, como bifidobactérias, no cólon de seres humanos (Gibson GR, Roberfroid MB. Dietary modulation of the human colonic microbiota: introducing the concept of prebiotics. J. Nutr. 1995;125:1401-12).

[0058] O termo "probiótico" significa preparações de células microbianas ou componentes de células microbianas com um efeito benéfico na saúde ou no bem-estar do hospedeiro. (Salminen S, Ouwehand A. Benno Y. et al. "Probiotics: how should they be defined" Trends Food Sci. Technol. 1999:10 107-10).

[0059] Todas as porcentagens são porcentagens em peso, exceto onde especificado em contrário.

[0060] Quando as quantidades de ingredientes são fornecidas sob a forma de peso de ingrediente/peso de composição nutricional em pó há também a intenção de que a invenção compreenda também a quantidade correspondente por litro, considerando um fator de diluição da composição nutricional em pó seca de 130 g/L (ou conforme especificado de outro modo nas instruções de diluição). Oligossacarídeos de Leite Humano:

[0061] Os OLHs são, coletivamente, o terceiro maior constituinte sólido no leite humano, depois da lactose e da gordura. Os OLHs consistem geralmente em lactose na extremidade redutora, com um núcleo de carboidrato que frequentemente contém uma fucose ou um ácido siálico na extremidade não redutora. Há mais de cem oligossacarídeos de leite que foram isolados e caracterizados, porém estes representam apenas uma porção muito pequena do número total restante a ser caracterizado.

[0062] Fórmulas para bebês podem ser desenvolvidas com o uso de ingredientes de OLH, como oligossacarídeos fucosilados, em particular 2FL, lacto-N-tetraose, lacto-N-neotetraose ou oligossacarídeos sialilados, para diferentes propósitos.

[0063] EP0975235B1, de Abbott Laboratories, descreve uma composição nutricional sintética que compreende um ou mais OLHs, sendo que os OLHs na composição são escolhidos dentre um grupo de oito OLHs (3-fucosil-lactose, lacto-N-fucopentaose III, lacto-N- fucopentaose II, difucosil-lactose, 2'-fucosil-lactose, lacto-N- fucopentaose I, lacto-N-neotetraose e lacto-N-fucopentaose V), sendo que a dita composição se destina a casos de bebês, crianças e adultos normais saudáveis, ou de indivíduos que têm necessidades especializadas, como aquelas que acompanham certas condições patológicas. EP0975235B1 declara que, de modo geral, os oligossacarídeos protegem os bebês contra infecções virais e bacterianas dos tratos respiratório, gastrointestinal e urogenital.

[0064] Em uma modalidade, a composição da presente invenção contém um OLH selecionado do grupo que consiste em oligossacarídeos fucosilados como 2'-fucosil-lactose (2FL), oligossacarídeos sialilados e/ou uma N-acetil-lactosamina, como lacto- N-neotetraose (LNnT) ou lacto-N-tetraose (LNT), ou uma combinação dos mesmos. Composições compreendendo 2FL são experimentalmente exemplificadas na presente invenção.

N-acetil-lactosamina

[0065] Em algumas modalidades, a composição da invenção contém ao menos uma N-acetil-lactosamina. Ou seja, a composição de acordo com a invenção contém N-acetil-lactosamina e/ou um oligossacarídeo contendo N-acetil-lactosamina. Os oligossacarídeos adequados contendo N-acetil-lactosamina incluem lacto-N-tetraose (LNT) e lacto-N-neotetraose (LNnT).

[0066] Assim, em uma modalidade preferencial, a N-acetil- lactosamina é, de preferência, selecionada do grupo que compreende lacto-N-tetraose (LNT) e lacto-N-neotetraose (LNnT).

[0067] O LNT e o LNnT podem ser quimicamente sintetizados por transferência enzimática de unidades de sacarídeos de porções de doadores para porções de aceptores usando glicosiltransferases, conforme descrito, por exemplo, na patente US N° 5.288.637 e no documento WO 96/10086. Alternativamente, o LNT e o LNnT podem ser preparados por conversão química de ceto-hexoses (por exemplo, frutose) livres ou ligadas a um oligossacarídeo (por exemplo, lactulose) em N-acetil-hexosamina ou um oligossacarídeo que contém N-acetil- hexosamina, conforme descrito em Wrodnigg, T.M.; Stutz, A.E. (1999) Angew. Chem. Int. Ed. 38:827-828. A N-acetil-lactosamina produzida nesta maneira pode, então, ser transferida para a lactose como a porção aceptora.

[0068] De preferência, a composição de acordo com a invenção contém de 0,1 a 3 g de N-acetil-lactosamina por 100 g de composição com base no peso seco. De preferência, ela contém de 0,1 a 3 g de LNnT por 100 g de composição com base no peso seco.

[0069] Em uma modalidade, a composição nutricional de acordo com a invenção compreende uma N-acetil-lactosamina, de preferência selecionada do grupo que compreende lacto-N- tetraose (LNT) e lacto- N-neotetraose (LNnT). Oligossacarídeos Sialilados

[0070] A composição de acordo com a invenção, em algumas modalidades, pode compreender um ou mais oligossacarídeos sialilados.

[0071] Os oligossacarídeos sialilados podem ser selecionados do grupo que compreende 3'-sialil-lactose e 6'-sialil-lactose. De preferência, tanto 3'-sialil-lactose como 6'-sialil-lactose estão presentes na dita composição. Nesta modalidade, a razão entre 3'-sialil-lactose e 6'-sialil-lactose fica, de preferência, na faixa entre 100:1 e 1:100, com mais preferência entre 10:1 e 1:10 e, com mais preferência ainda, entre 5:1 e 1:2.

[0072] As formas 3'- e 6'- de sialil-lactose podem ser isoladas por tecnologia cromatográfica ou de filtração a partir de uma fonte natural, como leites animais. Alternativamente, elas podem ser produzidas por meios biotecnológicos usando sialiltransferases ou sialidases específicas, neuraminidases, por uma tecnologia de fermentação à base de enzimas (enzimas recombinantes ou naturais), por síntese química ou por uma tecnologia de fermentação microbiana. Neste último caso, os micróbios podem expressar suas enzimas e seus substratos naturais ou podem ser projetados para produzir os respectivos substratos e enzimas. Podem ser usadas culturas microbianas puras ou mistas. A formação de sialil-oligossacarídeos pode ser iniciada por substratos aceptores começando a partir de qualquer grau de polimerização (DP, "Degree of Polymerisation"), de DP = 1 em diante. Alternativamente, as sialil-lactoses podem ser produzidas por síntese química a partir de lactose e ácido N'-acetilneuramínico (ácido siálico). As sialil-lactoses estão também disponíveis, por exemplo, junto à Kyowa Hakko Kogyo, do Japão.

[0073] De preferência, a composição de acordo com a invenção contém de 0,05 g a 10 g, com mais preferência de 0,1 g a 5 g, com mais preferência ainda de 0,1 g a 2 g de um ou mais oligossacarídeos sialilados por 100 g de composição em uma base de peso seco.

[0074] Em uma modalidade, a composição nutricional de acordo com a invenção compreende oligossacarídeo sialilado, de preferência selecionado do grupo que compreende 3'-sialil-lactose e 6'-sialil-lactose. Com mais preferência, a dita composição compreende tanto 3'-sialil- lactose como 6'-sialil-lactose, sendo que a razão entre 3'-sialil-lactose e 6'-sialil-lactose fica, de preferência, na faixa entre 100:1 e 1:100, com mais preferência entre 10:1 e 1:10 e, com mais preferência ainda, entre 5:1 e 1:2. Oligossacarídeo Fucosilado

[0075] A composição de acordo com a invenção pode compreender um ou mais oligossacarídeos fucosilados. De preferência, os oligossacarídeos fucosilados consistem em, ou compreendem, 2'- fucosil-lactose (2-FL).

[0076] O oligossacarídeo fucosilado pode ser selecionado do grupo que compreende 2'-fucosil-lactose, 3-fucosil-lactose, difucosil-lactose (DiFL), lacto-N-fucopentaoses (ou seja, lacto-N-fucopentaose I, lacto-N- fucopentaose II, lacto-N-fucopentaose III e lacto-N-fucopentaose V), lacto-N-difuco-hexaose I, fucosil-lacto-N-hexaose, difucosil-lacto-N- hexaose I e difucosil-lacto-N-neo-hexaose II. Um oligossacarídeo fucosilado particularmente preferencial é 2'-fucosil-lactose (2-FL) ou DiFL.

[0077] O oligossacarídeo fucosilado pode ser isolado por tecnologia cromatográfica ou de filtração a partir de uma fonte natural, como leites de animais. Alternativamente, pode ser produzido por meios biotecnológicos usando fucosiltransferases e/ou fucosidases específicas, mediante o uso de tecnologia de fermentação baseada em enzimas (enzimas recombinantes ou naturais) ou de tecnologia de fermentação microbiana. No último caso, os micróbios podem expressar suas enzimas e seus substratos naturais ou podem ser projetados para produzir os respectivos substratos e enzimas. Podem ser usadas culturas microbianas únicas e/ou culturas misturadas. A formação de oligossacarídeos fucosilados pode ser iniciada por substratos aceitadores iniciando a partir de qualquer grau de polimerização (DP), de DP = 1 em diante. Alternativamente, os oligossacarídeos fucosilados podem ser produzidos por síntese química a partir de lactose e fucose livre. Os oligossacarídeos fucosilados também estão disponíveis, por exemplo, junto à Kyowa Hakko Kogyo, do Japão.

[0078] De preferência, a composição de acordo com a invenção contém de 0,1 a 3 g de um ou mais oligossacarídeos fucosilados por 100 g de composição com base no peso seco, com a máxima preferência sendo 2FL.

[0079] Em uma modalidade, a composição nutricional de acordo com a invenção compreende um oligossacarídeo fucosilado, de preferência selecionado do grupo que compreende 2'-fucosil-lactose, 3- fucosil-lactose, difucosil-lactose, lacto-N-fucopentaoses (ou seja, lacto- N-fucopentaose I, lacto-N-fucopentaose II, lacto-N-fucopentaose III e lacto-N-fucopentaose V), lacto-N-difuco-hexaose I, fucosil-lacto-N- hexaose, difucosil-lacto-N-hexaose I e difucosil-lacto-N-neo-hexaose II e, de preferência, o oligossacarídeo fucosilado é 2'-fucosil-lactose (2- FL). Prebióticos Adicionais

[0080] Adicionalmente aos oligossacarídeos essenciais das reivindicações do presente pedido, a composição da invenção pode compreender adicionalmente ao menos um prebiótico, ou um prebiótico adicional, em geral em uma quantidade entre 0,3 e 10%, em peso, da composição.

[0081] Prebióticos são, geralmente, não digestíveis no sentido de que eles não são decompostos e absorvidos no estômago ou intestino delgado e permanecem, portanto, intactos quando passam para o cólon onde eles são seletivamente fermentados pelas bactérias benéficas.

[0082] A composição de acordo com a invenção pode compreender, em algumas modalidades, oligofrutose (OF). Um exemplo de tal OF é o ingrediente comercial ORAFTI®, disponível junto à Beneo GmbH (Mannheim, Alemanha).

[0083] Em algumas modalidades, os prebióticos da composição da invenção compreendem outros fruto-oligosacarídeos (FOS) ou/e galacto-oligosacarídeos (GOS). Pode-se usar uma combinação de prebióticos, como 90% de GOS com 10% de fruto-oligossacarídeos de cadeia curta, como no produto disponível junto à BENEO-Orafti, vendido sob a marca registrada "Orafti® oligofructose" (consulte http://www.beneo-orafti.com/Our-Products/Oligofructose) (anteriormente Raftilose®), ou 10% de inulina, como no produto disponível junto à BENEO-Orafti sob a marca registrada "Orafti® inulin" (consulte http://www.beneo-orafti.com/Our-Products/Inulin) (anteriormente Raftiline®). Uma outra combinação de prebióticos é 70% de fruto-oligossacarídeos de cadeia curta e 30% de inulina, que é um produto disponível junto à BENEO-Oratti sob a marca registrada "Prebio 1".

[0084] Em uma modalidade, a composição nutricional de acordo com a invenção compreende um prebiótico selecionado da lista que inclui oligossacarídeos de leite bovino, inulina, xilo-oligosacarídeos, polidextrose ou qualquer combinação dos mesmos.

[0085] Em uma modalidade, a composição nutricional de acordo com a invenção compreende um oligossacarídeo de leite bovino (OLB). O OLB pode compreender oligossacarídeos sendo um oligossacarídeo N-acetilado, um galacto-oligossacarídeo, um oligossacarídeo sialilado, um oligossacarídeo fucosilado ou uma combinação dos mesmos. Probióticos

[0086] A composição da invenção pode compreender adicionalmente ao menos um probiótico. Exemplos não limitadores de probióticos incluem: Bifidobacterium, Lactobacillus, Lactococcus, Enterococcus, Streptococcus, Kluyveromyces, Saccharoymces, Candida, em particular selecionados do grupo que consiste em Bifidobacterium longum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus lactis, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus salivarius, Lactococcus lactis, Enterococcus faecium, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces boulardii ou misturas dos mesmos, selecionadas, de preferência, do grupo que consiste em Bifidobacterium longum NCC3001 (ATCC BAA-999), Bifidobacterium longum NCC2705 (CNCM I-2618), Bifidobacterium longum NCC490 (CNCM I-2170), Bifidobacterium lactis NCC2818 (CNCM I-3446), Bifidobacterium breve cepa A, Lactobacillus paracasei NCC2461 (CNCM I-2116), Lactobacillus johnsonii NCC533 (CNCM I- 1225), Lactobacillus rhamnosus GG (ATCC53103), Lactobacillus rhamnosus NCC4007 (CGMCC 1.3724), Enterococcus faecium SF 68 (NCC2768, NCIMB10415) e combinações dos mesmos.

[0087] Em uma modalidade, o dito probiótico é uma cepa bacteriana probiótica, de preferência Bifidobacteria e/ou Lactobacilli. Cepas bacterianas probióticas adequadas incluem Lactobacillus rhamnosus ATCC 53103, disponível junto à Valio Oy, da Finlândia, sob a marca registrada LGG; Lactobacillus rhamnosus CGMCC 1.3724; Lactobacillus paracasei CNCM I-2116; Lactobacillus johnsonii CNCM I- 1225; Streptococcus salivarius DSM 13084, vendidas pela BLIS Technologies Limited, da Nova Zelândia, sob a designação KI2; Bifidobacterium lactis CNCM 1-3446, vendido, entre outras coisas, pela empresa Christian Hansen, da Dinamarca, sob a marca registrada Bb 12; Bifidobacterium longum ATCC BAA-999, vendida pela Morinaga Milk

Industry Co. Ltd., do Japão, sob a marca registrada BB536; Bifidobacterium breve, vendida pela Danisco, sob a marca registrada Bb-03; Bifidobacterium breve, vendida pela Morinaga, sob a marca registrada M-16V; Bifidobacterium infantis, vendida pela Procter & GambIe Co., sob a marca registrada Bifantis; e Bifidobacterium breve, vendida pelo Institut Rosell (Lallemand), sob a marca registrada R0070.

[0088] De preferência, a composição de acordo com a invenção contém de 10e3 a 10e12 ufc de cepa bacteriana probiótica, com mais preferência entre 10e7 e 10e12 ufc, por grama de composição em uma base de peso seco.

[0089] Em uma modalidade, a composição nutricional compreende uma cepa bacteriana probiótica selecionada da lista que consiste em Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus casei, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus lactis, Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus bulgari, Lactococcus lactis, Lactococcus diacetylactis, Lactococcus cremoris, Streptococcus salivarius, Streptococcus thermophilus, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, ou Bifidobacterium adolescentis, ou qualquer mistura dos mesmos. População-alvo

[0090] Em uma modalidade, a presente invenção tem como alvo/se destina a pacientes mamíferos. De preferência, os mamíferos são seres humanos, ou animais de estimação como um cão ou gato.

[0091] Em uma modalidade mais preferencial, a presente invenção se destina a mamíferos jovens, como um ser humano jovem, por exemplo, bebês (por exemplo de 0 a 6 meses, ou de 0 a 12 meses) ou crianças pequenas (por exemplo de 1 a 3 anos ou de 1 a 7 anos de idade), ou cães jovens (por exemplo, filhotes) ou gatos jovens. Em uma modalidade ainda mais preferencial, o mamífero é um bebê ou uma criança pequena. Sem se ater à teoria, os mamíferos jovens têm altos níveis de plasticidade cerebral e de desenvolvimento do cérebro (ou da conectividade cerebral), e obtêm o máximo benefício da presente invenção. Contempla-se também que a presente invenção possa ter como alvo janelas específicas de intervenção nutricional (por exemplo, como crianças de 6 meses a 3 anos, de 3 meses a 18 meses), subpopulações tendo necessidades específicas (mamíferos jovens frágeis; mamíferos senis ou semissenis) ou em uma fase de recuperação. Em uma modalidade, a presente invenção é especialmente voltada a indivíduos que estejam precisando evitar, prevenir ou compensar função, processamento ou desempenho emocional ou cognitivo abaixo de ótimo (por exemplo, mamíferos nascidos prematuros ou com crescimento ou desenvolvimento abaixo de ótimo). Em uma modalidade, a presente invenção é especialmente voltada a indivíduos sofrendo de um estado de saúde ou de uma doença relacionada a funções serotoninérgicas, em particular transtornos psiquiátricos ou neurológicos relacionados a uma resposta serotoninérgica hipocampal envolvida no processamento ou desempenho emocional ou cognitivo. Essa doença pode compreender transtornos psiquiátricos ou neurológicos, como transtornos de humor, ansiedade, estresse ou depressão.

[0092] De acordo com uma modalidade preferencial, a composição de acordo com a invenção se destina ao uso em bebês saudáveis e/ou crianças pequenas saudáveis. Em uma modalidade, a invenção é de particular relevância em bebês frágeis, bebês prematuros, e/ou bebês nascidos com um peso abaixo do normal ao nascer, e/ou bebês que sofreram retardo no crescimento intrauterino. O período de uso preferencial é durante os um ou mais períodos de desenvolvimento mais rápido da memória e/ou de desenvolvimento da conectividade cerebral.

[0093] A composição da invenção tem por alvo bebês e/ou crianças pequenas com idade de 7 anos ou menos, de preferência com idade de 3 anos ou menos, com a máxima preferência com idade de 1 ano ou menos. Em uma modalidade, a composição se destina a bebês de 6 meses ou menos. Nas modalidades da invenção, a composição é usada durante os primeiros 6 meses de vida, o primeiro 1 ano de vida, os primeiros 3 anos de vida, os primeiros 7 anos de vida, e/ou durante um período de recuperação após enfermidade ou de baixo desenvolvimento. Composição Nutricional

[0094] A composição nutricional de acordo com a invenção é, de preferência, uma composição nutricional sintética. A composição da invenção pode, por exemplo, ser uma fórmula inicial para bebês, uma fórmula para bebês, um alimento para bebês, uma composição de cereal para bebês, uma fórmula de transição ou um leite de crescimento, e a dita composição é, de preferência, uma fórmula inicial para bebês. A composição de acordo com a invenção pode também destinar-se ao uso antes e/ou durante um período de desmame. Em uma modalidade, a composição nutricional pode ser uma composição nutricional completa ou um suplemento para pessoas em envelhecimento, envelhecidas ou frágeis.

[0095] A composição de acordo com a invenção pode ser uma composição completa que fornece 100% ou uma maior parte das necessidades nutricionais das populações-alvo (por exemplo, em termos de necessidades calóricas; ou em termos de necessidades de vitaminas ou minerais, em termos de necessidades de proteínas, lipídios ou carboidrato). Alternativamente, a composição da invenção pode ser um suplemento a ser consumido em adição a uma dieta regular). Nesse caso, porém, a dosagem e o consumo total da composição é adaptado para fornecer o benefício reivindicado no processamento emocional (por exemplo, proporcionalmente à carga calórica e às necessidades calóricas do indivíduo).

[0096] O uso de uma composição da invenção pode abranger casos onde a composição é um suplemento, de preferência fornecida sob a forma de doses unitárias. Em uma modalidade, a composição é um suplemento para amamentação humana.

[0097] A composição pode estar sob a forma de uma composição em pó, por exemplo destinada a ser diluída com água ou misturada com leite (por exemplo, leite materno humano), ou ingerida sob a forma de um pó. Em uma modalidade, a composição da invenção está sob a forma líquida; ou pronta para o consumo ou para ser diluída em água ou misturada com leite (por exemplo, leite materno humano).

[0098] A composição de acordo com a invenção pode conter, também, uma fonte de proteína, de preferência em uma quantidade abaixo de 2,5 g/100 kcal, ou abaixo de 2,0 g por 100 kcal e, com mais preferência ainda, em uma quantidade abaixo de 1,8 g por 100 kcal. Em uma modalidade, o teor de proteína é abaixo de 1,6 g/100 kcal. Acredita- se que o tipo de proteína não seja de importância essencial para a presente invenção desde que os requisitos mínimos para o conteúdo de aminoácido essencial sejam atendidos e o crescimento satisfatório seja garantido. Dessa forma, podem ser usadas fontes de proteína à base de soro de leite, caseína e misturas dos mesmos, além de fontes de proteína à base de soja. No que se refere a proteínas de soro de leite, a fonte de proteína pode ser à base de soro de leite ácido ou soro de leite doce, ou suas misturas, e pode incluir alfa-lactalbumina e beta- lactoglobulina em quaisquer proporções desejadas.

[0099] A composição de acordo com a presente invenção geralmente contém uma fonte de carboidrato. Isto é particularmente preferencial no caso no qual a composição nutricional da invenção é uma fórmula infantil para lactentes. Nesse caso, qualquer fonte de carboidrato encontrada convencionalmente nas fórmulas para bebês, como lactose, sacarose, maltodextrina, amido e misturas dos mesmos, podem ser usadas, embora uma das fontes preferenciais de carboidrato seja a lactose.

[00100] A composição de acordo com a presente invenção geralmente contém uma fonte de lipídio. Isso é particularmente relevante se a composição nutricional da invenção for uma fórmula para bebês. Nesse caso, a fonte de lipídio pode ser qualquer lipídio ou gordura que seja adequado(a) para uso nas fórmulas para bebês. Fontes de gordura preferenciais incluem palma oleica, óleo de girassol de alto teor oleico e óleo de açafrão de alto teor oleico. Os ácidos graxos essenciais, ácido linoleico e ácido α-linolênico podem também ser adicionados, além de quantidades pequenas de óleos contendo altas quantidades de ácido araquidônico e ácido docosa-hexaenoico preformados, como óleos de peixe ou óleos microbianos. A fonte de gordura tem, de preferência, uma razão entre ácidos graxos n-6 e n-3 de cerca de 5:1 a cerca de 15:1; por exemplo, de cerca de 8:1 a cerca de 10:1.

[00101] A composição da invenção contém também, de preferência, todas as vitaminas e os minerais considerados essenciais na dieta diária e em quantidades significativas em termos nutricionais. As necessidades mínimas de certas vitaminas e minerais foram estabelecidas. Exemplos de minerais, vitaminas e outros micronutrientes opcionalmente presentes na composição da invenção incluem vitamina A, vitamina B1, vitamina B2, vitamina B6, vitamina B12, vitamina E, vitamina K, vitamina C, vitamina D, ácido fólico, inositol, niacina, biotina, ácido pantotênico, colina, cálcio, fósforo, iodo, ferro, magnésio, cobre, zinco, manganês, cloro, potássio, sódio, selênio, cromo, molibdênio, taurina e L-carnitina. Os minerais são normalmente adicionados na forma de sal. A presença e as quantidades de minerais específicos e de outras vitaminas específicas variarão dependendo da população intencionada.

[00102] Se necessário, a composição da invenção pode conter emulsificantes e estabilizadores, como soja, lecitina, ésteres de ácidos cítricos de mono- e di-glicerídeos, e similares.

[00103] A composição da invenção pode também conter outras substâncias que podem ter um efeito benéfico, como lactoferrina, nucleotídeos, nucleosídeos e similares.

[00104] Em uma modalidade, a composição da invenção, especialmente sob a forma de uma fórmula para bebês, compreende de cerca de 1,8 a cerca de 2,2 g de proteína total por 100 kcal, por exemplo de cerca de 1,8 a cerca de 2,1 g, ou de cerca de 1,9 a cerca de 2,1 g proteína por 100 kcal, sendo que opcionalmente de cerca de 0,3 a cerca de 0,4 g/100 kcal de proteína é alfa-lactalbumina. A fórmula para bebês e a fórmula de transição da presente invenção podem estar sob a forma de um líquido pronto para o consumo, ou podem ser um concentrado líquido ou uma fórmula em pó que pode ser reconstituída para formar um líquido pronto para o consumo, mediante a adição de uma quantidade de água que resulte, e a fórmula de transição da presente invenção inclui todos os ingredientes que são exigidos por lei nos EUA ou na UE, incluindo, mas não se limitando a, certos minerais, vitaminas e aminoácidos essenciais. Ela pode também incluir nucleotídeos, como CMP, UMP, AMP, GMP e IMP, luteína, zeaxantina e outros ingredientes conhecidos na técnica.

[00105] Em uma modalidade da invenção, a composição nutricional é um alimento para animais de estimação (por exemplo, para cães ou gatos, ou cães jovens ou gatos jovens). Efeito(s) e Uso da Composição da Invenção

[00106] A presente invenção se refere a melhorar, acentuar, promover ou modular uma função serotoninérgica no SNC de um indivíduo. Isso pode incluir melhorar, acentuar, promover ou modular uma resposta serotoninérgica hipocampal relacionada ao processamento ou desempenho emocional ou cognitivo.

[00107] Sem se ater à teoria, em um aspecto da invenção acredita- se que essa melhoria, acentuação e/ou promoção esteja ligada ao efeito do oligossacarídeo da invenção sobre a microbiota intestinal. Os oligossacarídeos como OLH (por exemplo, 2FL ou LNnT), OLB ou OF são apenas ligeiramente digeridos no intestino delgado, portanto a maior parte fica disponível para fermentação pela microbiota no cólon. De fato, demonstrou-se que OLH (por exemplo 2FL ou LNnT), OLB ou OF promove o crescimento de bifidobactérias intestinais, conforme refletido por um aumento dessa família de bactérias nas fezes de bebês alimentados com fórmulas suplementadas com oligossacarídeos, compreendendo OLH (por exemplo, 2FL ou LNnT), OLB ou OF. Parece que tanto os oligossacarídeos como os probióticos estão ligados a alterações benéficas da expressão do receptor de 5HT no cérebro.

[00108] Em suma, a presente composição nutricional pode ser usada para melhorar, acentuar, promover ou modular uma função serotoninérgica através de seu efeito sobre a microbiota intestinal e o eixo intestino-cérebro, o qual se demonstrou ter influência sobre muitos aspectos do funcionamento cerebral. Poderia também ser contemplado que a melhoria, acentuação, promoção ou modulação de uma função serotoninérgica possa estar relacionada a um aumento de concentração do ácido siálico (Neu5Ac) no cérebro do dito indivíduo, mediada por rotas metabólicas diferenciais influenciadas pela microbiota intestinal. Sem se ater à teoria, em uma modalidade da invenção, o OLH atua de modo sinérgico com um probiótico e a microbiota endógena para melhor influenciar essas rotas metabólicas.

[00109] Em um outro aspecto, um efeito subjacente à invenção pode estar ligado à expressão gênica alterada de genes serotoninérgicos no SNC de um Indivíduo, em particular receptores de 5HT ou transportadores de 5HT. Em uma modalidade, a alteração se refere a níveis de expressão gênica aumentados ou diminuídos no nível do mRNA ou da proteína, em comparação com um controle. Em uma modalidade, a expressão gênica se refere à expressão gênica no hipocampo de um indivíduo.

[00110] Em um outro aspecto, um efeito subjacente à invenção pode estar ligado à acentuação da neuroplasticidade no cérebro do indivíduo, e/ou à acentuação do neurodesenvolvimento, neurogênese, brotamento axonal, mielinização e/ou maturação no cérebro do dito indivíduo (sem se ater à teoria).

[00111] As funções serotoninérgicas, em particular uma resposta serotoninérgica hipocampal relacionada ao processamento ou desempenho emocional ou cognitivo, representa aspectos essenciais da função e do desenvolvimento cerebrais, e são cruciais para o desenvolvimento cognitivo geral do indivíduo. Isso influencia, em particular, o viés de atenção, o reconhecimento facial de emoções, a memória emocional, o humor, atitudes disfuncionais e tomada de decisões.

[00112] Em uma modalidade da presente invenção, a função serotoninérgica é uma resposta serotoninérgica hipocampal relacionada ao processamento ou desempenho emocional ou cognitivo. O processamento ou desempenho emocional ou cognitivo tem importância capital no desenvolvimento social e cognitivo, especialmente de indivíduos jovens.

[00113] Dessa forma, em um aspecto a presente invenção se refere ao (ou é definida pelo) uso de uma composição nutricional que compreende um OLH para melhorar, acentuar, promover ou modular uma função serotoninérgica no SNC, em particular uma resposta serotoninérgica hipocampal relacionada ao processamento ou desempenho emocional ou cognitivo.

[00114] Em um aspecto, a presente invenção se refere ao (ou é definida pelo) uso da composição nutricional aqui descrita que compreende um OLH para evitar, prevenir ou compensar função, processamento ou desempenho emocional ou cognitivo abaixo de ótimo, especialmente em indivíduos que estejam precisando disso, e especialmente mediante a promoção ou a modulação da função serotogênica no SNC.

[00115] Em um aspecto, a presente invenção se refere ao (ou é definida pelo) o uso da composição nutricional aqui descrita, compreendendo um OLH, para melhorar, acentuar ou modular função, processamento ou desempenho emocional ou cognitivo, e especialmente mediante a promoção ou a modulação da função serotogênica no SNC.

[00116] Em um aspecto, a presente invenção se refere ao (ou é definida pelo) uso da composição nutricional aqui descrita, compreendendo um OLH, para melhorar, acentuar ou modular uma função serotoninérgica no SNC, em particular uma resposta serotoninérgica hipocampal relacionada ao processamento ou desempenho emocional ou cognitivo.

[00117] Em uma modalidade, a presente invenção se refere a (ou é definida por) o uso da composição nutricional aqui descrita, sendo que a dita composição é uma fórmula para bebês, uma fórmula de transição, um fortificante para leite materno humano, um leite de crescimento, ou um alimento para animais de estimação.

[00118] Em um outro aspecto, a invenção se refere a (ou é definida por) um OLH para uso na melhoria, acentuação, promoção ou modulação de uma função serotoninérgica no SNC, em particular uma resposta serotoninérgica hipocampal relacionada ao processamento ou desempenho emocional ou cognitivo, em um indivíduo que esteja precisando disso. Em uma modalidade específica, o indivíduo é um mamífero, sendo que o dito mamífero é, de preferência, um ser humano, cão ou gato, e sendo que o dito ser humano é, de preferência, um bebê ou uma criança pequena.

[00119] Em um outro aspecto, a invenção se refere a (ou é definida por) uma composição nutricional que compreende um OLH para uso na melhoria, acentuação, promoção ou modulação de uma função serotoninérgica no SNC, em particular uma resposta serotoninérgica hipocampal relacionada ao processamento ou desempenho emocional ou cognitivo, em um indivíduo que esteja precisando disso. Em uma modalidade específica, o indivíduo é um mamífero, sendo de preferência o dito mamífero um mamífero jovem, um ser humano, um cão ou um gato, com mais preferência um ser humano, cão ou gato jovem, com a máxima preferência um bebê ou uma criança pequena. A composição nutricional pode também compreender um ou mais dentre os ingredientes opcionais aqui descritos.

[00120] Em um outro aspecto, a presente invenção se refere ao (ou é definida pelo) uso de OLH na fabricação de uma composição nutricional para melhorar, acentuar, promover ou modular uma função serotoninérgica no SNC, em particular uma resposta serotoninérgica hipocampal relacionada ao processamento ou desempenho emocional ou cognitivo, em um indivíduo que esteja precisando disso. Em uma modalidade específica, o indivíduo é um mamífero, sendo de preferência o dito mamífero um mamífero jovem, um ser humano, um cão ou um gato, com mais preferência um ser humano, cão ou gato jovem, com a máxima preferência um bebê ou uma criança pequena. Dosagem

[00121] OLH: Em uma modalidade, o OLH está presente em uma quantidade total de 0,1 a 50 g/L, ou 0,3 a 5 g/L ou 0,5 a 1 g/L, ou 0,25 ou 0,5 ou 1 ou 1,5 ou 2 g/L.

[00122] OLB: Em uma modalidade, o OLB está presente em uma quantidade total de 0,1 a 50 g/L, ou 0,3 a 5 g/L ou 0,5 a 1 g/L, ou 0,25 ou 0,5 ou 1 ou 1,5 ou 2 g/L.

[00123] Fruto-oligossacarídeo/FOS/OF: Quando presente, a composição nutricional da presente invenção pode conter de 0,1 a 20 g de oligofrutose (OF) por 100 g de composição, com base no peso seco, por exemplo de 1 a 6 g ou de 3 a 5 g de oligofrutose (OF) por 100 g de composição, com base no peso seco.

[00124] Em uma modalidade da invenção, a composição nutricional compreende uma quantidade de oligossacarídeo de frutose nas seguintes faixas ou quantidades: 0,1 a 20 g/L ou 0,5 a 10 g/L ou 1 a 8 g/L ou 2 a 6 g/L ou 1,5 g/L ou 3 g/L ou 5 g/L de composição nutricional, quando a composição está em uma forma líquida pronta para o consumo, ou 0,1 a 20 g/L ou 0,5 a 10 g/L ou 1 a 8 g/L ou 2 a 6 g/L ou 1,5 g/L ou 3 g/L ou 5 g/L (da forma líquida diluída) quando a composição está sob a forma de pó e se destina a ser recomposta para formar uma forma líquida diluída, ou o mesmo que acima, multiplicado por 2, 5, 10, 20, 50 ou 100, quando a composição nutricional está sob a forma de uma composição concentrada destinada a ser diluída (respectivamente 2, 5, 10, 20, 50 ou 100 vezes) em água ou em leite materno humano, ou destinada a ser usada diretamente sob uma forma concentrada, ou 0,4 g a 15 g/100 g de pó de composição nutricional, ou 0,8 a 10 g/100 g, ou 1 a 6 g/100 g, ou 2 a 5 g/100 g ou 2,1 a 4 g/100 g ou 1,2 g/100 g ou 2,3 g/100 g ou 3,8 g/100 g ou 4 g/100 g ou 6 g/100 g de pó de composição nutricional, quando a composição nutricional está sob a forma de um pó seco.

[00125] Em uma modalidade, o teor de OF pode ser de 0,07 g a 3 g/100 kcal de pó de composição nutricional, ou 0,1 a 2 g/100 kcal, ou 0,4 a 1,5 g/100 kcal, ou 0,45 a 1 g/100 kcal ou 0,45 a 0,75 g/100 kcal ou

0,3 g/100 kcal ou 0,4 g/100 kcal ou 0,5 g/100 kcal ou 0,75 g/100 kcal ou 1 g/100 kcal de pó de composição nutricional, quando a composição nutricional está sob a forma de um pó seco.

[00126] 2FL: A composição nutricional da presente invenção pode conter de 0,02 a 10 g de 2FL por 100 g de composição, com base no peso seco, por exemplo de 0,2 a 0,5 g ou de 0,3 a 5 g de 2FL por 100 g de composição, com base no peso seco.

[00127] Em uma modalidade, a composição nutricional compreende uma quantidade de 2FL nas seguintes faixas ou quantidades: 0,05 a 20 g/L ou 0,1 a 5 g/L ou 0,2 a 3 g/L ou 0,1 a 2 g/L ou 0,25 g/ a 1 g/L ou 0,25 g/L ou 1 g/L de composição nutricional, quando a composição está em uma forma líquida pronta para o consumo, ou 0,05 a 20 g/L ou 0,1 a 5 g/L ou 0,2 a 3 g/L ou 0,1 a 2 g/L ou 0,25 g/L a 1 g/L ou 0,25 g/L ou 1 g/L (da forma líquida diluída) quando a composição está sob a forma de pó e se destina a ser recomposta para formar uma forma líquida diluída, ou o mesmo que acima, multiplicado por 2, 5, 10, 20, 50 ou 100, quando a composição nutricional está sob a forma de uma composição concentrada destinada a ser diluída (respectivamente 2, 5, 10, 20, 50 ou 100 vezes) em água ou em leite materno humano, ou destinada a ser usada diretamente sob uma forma concentrada, ou 0,04 g a 1,5 g/100 g de pó de composição nutricional, ou 0,08 a 1,2 g/100 g, ou 0,1 a 1 g/100 g, ou 0,2 a 0,8 g/100 g ou 0,2 g/100 g ou 0,4 g/100 g ou 0,8 g/100 g ou 1 g/100 g ou 1 g/100 g de pó de composição nutricional, quando a composição nutricional está sob a forma de um pó seco.

[00128] Em uma modalidade, o teor de 2FL pode ser de 0,01 g a 0,3 g/100 kcal de pó de composição nutricional, ou 0,02 a 0,2 g/100 kcal, ou 0,04 a 0,15 g/100 kcal, ou 0,02 g/100 kcal ou 0,04 g/100 kcal ou 0,07 g/100 kcal ou 0,15 g/100 kcal ou 0,3 g/100 kcal de pó de composição nutricional, quando a composição nutricional está sob a forma de um pó seco.

[00129] LNnT: Em uma modalidade, a composição nutricional da presente invenção pode conter de 0,01 a 1 g de LNnT por 100 g de composição, com base no peso seco, por exemplo de 0,1 a 0,25 g ou de 0,15 a 0,5 g de LNnT por 100 g de composição, com base no peso seco.

[00130] Em uma modalidade da invenção, a composição nutricional compreende uma quantidade de LNnT nas seguintes faixas ou quantidades: 0,02 a 10 g/L ou 0,05 a 2,5 g/L ou 0,1 a 1,5 g/L ou 0,05 a 1 g/L ou 0,12 g/L a 0,5 g/L ou 0,12 g/L ou 0,5 g/L ou 1 g/L de composição nutricional, quando a composição está em uma forma líquida pronta para o consumo, ou 0,02 a 10 g/L ou 0,05 a 2,5 g/L ou 0,1 a 1,5 g/L ou 0,05 a 1 g/L ou 0,12 g/L a 0,5 g/L ou 0,12 g/L ou 0,5 g/L ou 1 g/L (da forma líquida diluída) quando a composição está sob a forma de pó e se destina a ser recomposta para formar uma forma líquida diluída, ou o mesmo que acima, multiplicado por 2, 5, 10, 20, 50 ou 100, quando a composição nutricional está sob a forma de uma composição concentrada destinada a ser diluída (respectivamente 2, 5, 10, 20, 50 ou 100 vezes) em água ou em leite materno humano, ou destinada a ser usada diretamente sob uma forma concentrada, ou 0,02 g a 0,75 g/100 g de pó de composição nutricional, ou 0,04 a 0,6 g/100 g, ou 0,05 a 0,5 g/100 g, ou 0,1 a 0,4 g/100 g ou 0,1 g/100 g ou 0,2 g/100 g ou 0,25 g/100 g ou 0,5 g/100 g ou 1 g/100 g ou 3 g/100 g de pó de composição nutricional, quando a composição nutricional está sob a forma de um pó seco.

[00131] Em uma modalidade, o teor de LNnT pode ser de 0,01 g a 0,3 g/100 kcal de pó de composição nutricional, ou 0,02 a 0,2 g/100 kcal, ou 0,04 a 0,15 g/100 kcal, ou 0,02 g/100 kcal ou 0,04 g/100 kcal ou 0,07 g/100 kcal ou 0,15 g/100 kcal ou 0,3 g/100 kcal de pó de composição nutricional, quando a composição nutricional está sob a forma de um pó seco.

[00132] A composição da invenção, em particular quando sob a forma de uma fórmula para bebês, pode conter ao menos cerca de 0,4 g de oligofrutose por 100 kcal. Em algumas modalidades, ela contém de cerca de 0,4 a cerca de 0,9 g, de cerca de 0,4 a cerca de 0,7 g, de cerca de 0,4 a cerca de 0,5 g, de cerca de 0,7 a cerca de 0,8 g, ou de cerca de 0,7 a cerca de 0,9 g, de oligofrutose por 100 kcal. A oligofrutose tem um grau de polimerização de 2 a 10. Em uma modalidade, ao menos 90% da oligofrutose tem um grau de polimerização de 2 a 8.

[00133] Em uma modalidade, a composição nutricional compreende 2FL e LNnT, de preferência em uma quantidade de 1 g/L de 2FL e 0,5 g/L de LNnT, ou 0,5 g/L de 2FL e 0,25 g/L de LNnT, ou de 0,25 g/L a 2 g/L de 2FL e 0,1 a 1 g/L de LNnT. Método para a fabricação da composição nutricional

[00134] A composição nutricional pode ser preparada de qualquer maneira adequada conhecida na técnica. Por exemplo, a fórmula para bebês disponível comercialmente da fórmula de transição pode servir como uma composição base à qual é adicionada a quantidade necessária de oligossacarídeos (por exemplo, de OLH como 2FL, LNnT ou então, OF, OLB), de preferência em uma forma seca. Alternativamente o oligossacarídeo pode ser adicionado sob a forma de um ingrediente seco ou de um ingrediente líquido em uma pré-mistura líquida que servirá como uma base para fabricar a composição nutricional da invenção. A mistura líquida pode, então, ser seca por quaisquer meios convencionais.

[00135] Por exemplo, ela pode ser preparada por se misturar uma fonte de proteína, uma fonte de carboidrato (diferente da combinação de oligossacarídeos da presente invenção) e uma fonte de gordura em proporções adequadas. Se usados, os emulsificantes podem ser incluídos nesse ponto. As vitaminas e os minerais podem ser adicionados neste ponto, mas em geral são adicionados posteriormente para evitar degradação térmica. Quaisquer vitaminas e emulsificantes lipofílicos, e similares, podem ser dissolvidos na fonte de gordura antes da mistura. Água, de preferência, água que foi submetida à osmose reversa, pode, então, ser misturada para formar uma mistura líquida. A temperatura da água está convenientemente na faixa entre cerca de 50°C e cerca de 80°C para ajudar a dispersar os ingredientes. Liquidificadores comercialmente disponíveis podem ser usados para formar a mistura líquida. O 3'-Sialil-lactose (3'-SL) e o 6'-Sialil-lactose (6'-SL) serão adicionados neste estágio se o produto final precisar ter uma forma líquida. Se o produto final for um pó, o 3'-Sialil-lactose (3'- SL) e o 6'-Sialil-lactose (6'-SL) podem também ser adicionados neste estágio, se desejado. A mistura líquida é, então, homogeneizada, por exemplo, em dois estágios.

[00136] A mistura líquida pode, então, ser termicamente tratada para reduzir as cargas bacterianas, por aquecimento rápido da mistura líquida a uma temperatura na faixa entre cerca de 80°C e cerca e 150°C durante cerca de 5 segundos a cerca de 5 minutos, por exemplo. Isso pode ser realizado por meio de injeção de vapor, autoclave ou trocador de calor, por exemplo, um trocador de calor de placas. Então, a mistura líquida pode ser resfriada até entre cerca de 60°C e cerca de 85°C, por exemplo mediante resfriamento instantâneo. A mistura líquida pode, então, ser novamente homogeneizada, por exemplo, em dois estágios entre cerca de 10 MPa e cerca de 30 MPa no primeiro estágio, e entre cerca de 2 MPa e cerca de 10 MPa no segundo estágio. A mistura homogeneizada pode, então, ser resfriada adicionalmente para a adição de quaisquer componentes sensíveis ao calor, como vitaminas e minerais. O pH e o teor de sólidos da mistura homogeneizada são convenientemente ajustados nesse ponto. A mistura homogeneizada é transferida para um aparelho de secagem adequado, como um secador por atomização ou um secador por congelamento, e convertida em pó. O pó dever ter um teor de umidade menor que cerca 5% em peso.

[00137] Se uma composição líquida for preferencial, a mistura homogeneizada pode ser esterilizada e, então, colocada assepticamente em recipientes adequados, ou ela pode ser primeiro colocada nos recipientes e, então, submetida à retorta. Lipídios Específicos

[00138] A composição da invenção pode compreender lipídios selecionados que têm efeitos específicos.

[00139] Aqueles lipídios podem, em particular, incluir DHA, ARA, ácido linoleico ou esfingomielina, de preferência em uma quantidade adequada para proporcionar benefícios reais de saúde cerebral e dentro dos requisitos regulatórios gerais para o tipo de produtos (por exemplo, as recomendações da OMS quanto a fórmula para bebês; CODEX ou diretivas europeias quanto a fórmula para bebês).

[00140] Em algumas modalidades, a composição da invenção compreende um teor relativamente alto de sn2 palmitato ou esfingomielina. Estes foram ligados a desempenho e desenvolvimento ótimos do cérebro, e podem atuar de modo sinérgico com os compostos essenciais da composição da invenção.

[00141] Embora alimentar um bebê com uma fórmula contendo alta porcentagem de sn-2 palmitato (na ausência de OF) ajude a promover a proliferação de bifidobactérias no cólon, acredita-se que a combinação de alto teor de sn-2 palmitato com oligofrutose forneça uma proliferação significativamente superior de bifidobactérias no cólon de bebês alimentados com fórmula. Uma redução significativa na quantidade de bactérias potencialmente patogênicas pode também ser obtida. Verificou-se que alimentar um bebê com uma fórmula para bebês contendo alto teor de sn-2 palmitato, contendo de cerca de 3 a cerca de 5 g/L, ou de cerca de 0,4 a cerca de 0,7 g/100 kcal, de oligofrutose é mais benéfico que alimentar o bebê com a mesma fórmula sem a oligofrutose. Sem se ater à teoria, esse efeito sinérgico entre OF e sn2 palmitato pode também promover a memória de curto prazo, embora em particular (mas muito provavelmente não apenas) seu efeito sobre o microbioma do indivíduo e a população de bifidobactérias. "Alto teor de Sn2 palmitato" será entendido como ingredientes tendo uma alta porcentagem dos ácidos graxos (de preferência, mais de 33% dos ácidos graxos) como palmitato na posição sn2 dos triglicerídeos. Esses ingredientes estão comercialmente disponíveis sob o nome comercial de BETAPOL® (Loders Croklaan, Wormerveer, Países-Baixos) ou INFAT® (Advanced Lipids AB, Karlshamn, Suécia, joint venture de AAK B.V. (Zaandijk, Países-Baixos) e Enzymotec Inc, Morristown, EUA).

[00142] Estudos clínicos recentes com bebês mostraram que as fórmulas nutricionais contendo ao menos um ácido graxo ômega 6 e ao menos um ácido graxo ômega 3 em uma razão de cerca de 6 a cerca de 1 aumentou a acreção de DHA em eritrócitos e no plasma. Uma razão equilibrada de cerca de 6:1 entre ácido graxo ômega 6 e ácido graxo ômega 3 pode também fornecer benefícios de saúde a longo prazo, inclusive desenvolvimento cerebral e neurológico ótimos. Esse equilíbrio será atingido mediante a formulação da presente invenção com fontes de gordura de óleo vegetal que tenham um teor de ácido graxo ômega 6, por exemplo óleo de soja e óleo de girassol, e um teor de ácido graxo ômega 3, por exemplo colza, canola, linhaça, chia, perila ou nozes. Uma blenda de gorduras exclusiva com 5 diferentes óleos será usada para se obter a blenda de gorduras modificada.

[00143] Os exemplos a seguir são apresentados para ilustrar certas modalidades e características da presente invenção, mas não devem ser interpretados como limitadores do escopo da presente invenção.

Exemplos Exemplo 1: Composição nutricional compreendendo OLH (2FL e/ou LNnT)

[00144] Uma composição nutricional da invenção compreendendo OLH, 2FL e/ou LNnT e OF é dada na Tabela 1, abaixo. Essa composição é fornecida apenas a título de ilustração. A composição da Tabela 1 pode ser uma fórmula para bebês. Alternativamente, ela pode ser adaptada para ser uma fórmula de transição. Tabela 1: Nutrientes por 100 kcal por litro Energia (kcal) 100 670 Proteínas (g) 1,83 12,3 Gorduras (g) 5,3 35,7 Ácido linoleico (g) 0,79 5,3 Ácido α-linoleico (mg) 101 675 Lactose (g) 11,2 74,7 Minerais (g) 0,37 2,5 Na (mg) 23 150 K (mg) 89 590 Cl (mg) 64 430 Ca (mg) 62 410 P (mg) 31 210 Mg (mg) 7 50 Mn (µg) 8 50 Se (µg) 2 13 Vitamina A (µg RE) 105 700 Vitamina D (µg) 1,5 10 Vitamina E (mg TE) 0,8 5,4 Vitamina K1 (µg) 8 54

Nutrientes por 100 kcal por litro Vitamina C (mg) 10 67 Vitamina B1 (mg) 0,07 0,47 Vitamina B2 (mg) 0,15 1,0 Niacina (mg) 1 6,7 Vitamina B6 (mg) 0,075 0,50 Ácido fólico (µg) 9 60 Ácido pantotênico (mg) 0,45 3 Vitamina B12 (µg) 0,3 2 Biotina (µg) 2,2 15 Colina (mg) 10 67 Fe (mg) 1,2 8 l (µg) 15 100 Cu (mg) 0,06 0,4 Zn (mg) 0,75 5 2FL (g) 0,04 ou 0,15 0,25 ou 1 e/ou LNnT (g) 0,01 ou 0,07 0,1 ou 0,5 Oligofrutose (OF) (g) (opcional) 0,45 ou 0,75 3 ou 5 3'-SL (g) (opcional) 0,22 1,46 6'-SL (g) (opcional) 0,05 0,33 Razão 3'-SL:6'-SL (opcional) 4,4:1 4,4:1 OLBs (g) (opcional) 0,4 ou 2 3 ou 15 Exemplo 2: Fórmula para bebês compreendendo OLH (2FL e/ou LNnT), e/ou de OLBs opcionais e/ou oligofrutose (OF)

[00145] Uma composição nutricional da invenção compreendendo OLHs (2FL e/ou LNnT) e opcionalmente OF e/ou OLB é dada na Tabela 2, abaixo. Essa composição é fornecida apenas a título de ilustração. A composição da Tabela 2 é uma fórmula para bebês. Alternativamente, ela pode ser adaptada para ser uma fórmula de transição.

[00146] Um outro exemplo é baseado em fórmulas para bebê NAN e/ou Lactogen disponíveis comercialmente (junto à Nestlé, Suíça) às quais os oligossacarídeos específicos da invenção são adicionados como nas quantidades declaradas abaixo.

Tabela 2 Nutriente por 100 kcal por litro Energia (kcal) 100 670 Proteína (g) 1,83 12,3 Gordura (g) 5,3 35,7 Ácido linoleico (g) 0,79 5,3 Ácido α-linoleico (mg) 101 675 Lactose (g) 11,2 74,7 Prebiótico (70% OF, 30% inulina) (g) 0,64 4,3 (por exemplo Beneo-Orafti® P95 e inulina Beneo-Orafti®) (opcional) 2FL (g) 0,3 2 e/ou LNnT (mg) 30 200 Minerais (g) 0,37 2,5 Na (mg) 23 150 K (mg) 89 590 Cl (mg) 64 430 Ca (mg) 62 410 P (mg) 31 210 Mg (mg) 7 50 Mn (µg) 8 50 Se (µg) 2 13 Vitamina A (µg RE) 105 700 Vitamina D (µg) 1,5 10 Vitamina E (mg TE) 0,8 5,4

Nutriente por 100 kcal por litro Vitamina K1 (µg) 8 54 Vitamina C (mg) 10 67 Vitamina B1 (mg) 0,07 0,47 Vitamina B2 (mg) 0,15 1,0 Niacina (mg) 1 6,7 Vitamina B6 (mg) 0,075 0,50 Ácido fólico (µg) 9 60 Ácido pantotênico (mg) 0,45 3 Vitamina B12 (µg) 0,3 2 Biotina (µg) 2,2 15 Colina (mg) 10 67 Fe (mg) 1,2 8 l (µg) 15 100 Cu (mg) 0,06 0,4 Zn (mg) 0,75 5 3'sialil-lactose (mg) (opcional) 30 200 6'sialil-lactose (mg) (opcional) 6 40 OLBs (g) (opcional) 0,9 6 Dados Experimentais

[00147] Em um estudo com leitões, investigamos o impacto de vários oligossacarídeos compreendendo OLH (por exemplo, 2FL) com ou sem OF e/ou OLBs sobre a expressão gênica no hipocampo. Trinta e seis leitões machos (12 por grupo de tratamento) foram tratados a partir de 48 h após o parto até 33 dias de vida, ou com controle (CON, Purina ProNurse Livestock Milk Replacer), OLH (CON + 1,5 g/L OLH (composto de 1,0 g/L de 2'FL + 0,5 g/L de LNnT), OF [CON + 5 g/L de OF], OF+OLH [CON + 5 g/ L de OF + 1,0 g/L OLH (2'FL)], OLB (6,5 g/L de OLBs) ou OLH+OLB (1,0 g/L de 2'FL + 0,5 g/L de LNnT + 6,5 g/L de OLBs). Todas as dietas continham um espaço de formulação de 8,0 g/L que foi reservado para adição de artigos dietários de teste. Os leitões foram alimentados a uma taxa de 285 mL e 325 mL de dieta reconstituída por kg de peso corporal de DPN (dias pós-nascimento) 2-6 e DPN 7-33, respectivamente. Os leitões foram submetidos a eutanásia no dia 32 ou 33, e tecido hipocampal foi coletado para análise da expressão de mRNA.

[00148] A mistura de OLBs usada nas fórmulas foi derivada de soro de leite bovino. Em resumo, um permeado de ultrafiltração de soro de leite bovino incluindo oligossacarídeos como 3' e 6'-sialil-lactose e GOS foi desmineralizado por uma combinação de eletrodiálise e troca iônica, conforme descrito na técnica. Expressão Gênica no Hipocampo

[00149] Aproximadamente 20 mg de tecido hipocampal foram introduzidos em um tubo Lysing Matrix D (MP Biomedicals, Santa Ana, Califórnia, EUA), colocado em gelo, e foram adicionados 650 µL de tampão de lise (Agencourt RNAdvance Tissue Kit, Beckman Coulter, Indianapolis, Indiana, EUA). Os tubos foram agitados durante 2x1 minuto na velocidade 6 em um equipamento FastPrep®-24 (MP Biomedicals, Santa Ana, Califórnia, EUA), e 400 µL de lisado foram então extraídos com o uso do Agencourt RNAdvance Tissue Kit (Beckman Coulter, Indianapolis, Indiana, EUA) seguindo as recomendações do fabricante. O RNA foi quantificado com o uso de Quant- iT™ RiboGreen™ RNA Assay Kit (Invitrogen, Carlsbad, Califórnia, EUA) em um equipamento Spectramax M2 (Molecular Devices, Sunnyvale, Califórnia, EUA). A avaliação de qualidade do RNA foi concluída com o uso de um Fragment Analyzer 96 com Standard Sensitivity RNA Analysis Kit (15 nt) (Advanced Analytical Technologies, Inc., Ankeny, Iowa, EUA). O número relativo de cópias de mRNA em 93 genes foi quantificado com o uso do sistema NanoString nCounter™ (NanoString Technologies Inc., Seattle, Washington, EUA) de acordo com as instruções do fabricante, usando 100 ng de RNA como a quantidade de partida.

Resultados

[00150] As dietas de OLH, OLB, OLB+OLH e OF+OLH mostraram efeitos diferenciais na expressão gênica em comparação com o grupo CON. Por exemplo, uma dieta compreendendo tanto OLH como OLB leva ao aumento na expressão hipocampal de 5HTR1, conforme mostrado na Tabela 3. Tabela 3. Expressão padronizada de mRNA de genes afetados por tratamento dietário 1 Gene CON OLBs OLH OLBs + OLH 5HTR4 0 0,15 0,12 0,15 SLC6A4 0 -0,32 -0,06 0,36 Abreviações: CON, grupo de controle; OLH, porcos alimentados com oligossacarídeos de leite humano; OLBs, porcos alimentados com oligossacarídeos de leite bovino; OLBs + OLH, porcos alimentados com oligossacarídeos tanto de leite humano como bovino; 5HTR4, receptor 4 de serotonina; SLC6A4, membro 4 da família 6 veículo de soluto do transportador de 5HT. Valores padronizados para expressão de mRNA (média = 0, desvio padrão = 1), centralizados pelo grupo de controle.

[00151] A expressão hipocampal de mRNA de genes importantes adicionais envolvidos no sistema serotoninérgico é mostrada na Figura 1 para o receptor 4 de 5HT (5HTR4), e na Figura 2 para o membro 4 da família 6 veículo de soluto do transportador de 5HT (SLC6A4). A administração de OLH, de preferência em combinação com um prebiótico como OF e/ou OLB, tem a surpreendente capacidade de modular o sistema serotoninérgico no nível de expressão.

[00152] A Figura 1 mostra que a expressão de mRNA do gene para receptor 5HTR4 é significativamente aumentada em comparação com a dieta de controle (CON), quando um OLH também está presente na dieta de teste, seja isoladamente (2'FL+LNnt), seja em combinação com um OF ou OLB.

[00153] A Figura 2 mostra que a expressão de mRNA de SLC6A4 é ou comparável com a dieta de controle (CON), ou mesmo aumentada, quando um OLH também está presente na dieta de teste, seja isoladamente (2'FL+LNnt), seja em combinação com um OF ou OLB.

[00154] Deve-se reconhecer que os um ou mais exemplos na divulgação são exemplos não limitadores, e que a presente divulgação se destina a abranger variações e equivalentes desses exemplos.

[00155] Abaixo estão exemplos não limitadores de reivindicações que podem ser buscadas em um pedido não provisório que reivindique o benefício deste pedido provisório. Entretanto, estas reivindicações se destinam a ser entendidas como sendo apresentadas apenas para propósitos de ilustração e não devem de modo algum limitar o escopo dos um ou mais conceito inventivos descritos ou de outro modo contemplados na presente invenção.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Uso de um oligossacarídeo do leite humano (OLH), caracterizado pelo fato de que é para fabricação de uma composição nutricional para melhorar, acentuar, promover ou modular (a) uma função serotoninérgica no sistema nervoso central (SNC), ou (b) o processamento ou desempenho emocional ou cognitivo, de preferência em um mamífero, de preferência um bebê humano ou uma criança pequena, prematuro ou nascido a termo, entre o nascimento e os 7 anos de idade.

2. Uso de um oligossacarídeo de leite humano (OLH), caracterizado pelo fato de que é para fabricação de uma composição nutricional para evitar, prevenir ou compensar função, processamento ou desempenho emocional ou cognitivo abaixo de ótimo em indivíduos que estejam precisando disso, de preferência mediante a promoção ou modulação da função serotoninérgica no SNC.

3. Uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que a dita função serotoninérgica no SNC compreende processamento ou desempenho emocional ou cognitivo.

4. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o dito OLH é selecionado do grupo que consiste em N-acetil-lactosamina, oligossacarídeos sialilados, oligossacarídeos fucosilados ou uma combinação dos mesmos.

5. Uso, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que o OLH é um oligossacarídeo fucosilado selecionado do grupo que consiste em 2'-fucosil-lactose, 3'fucosil-lactose, difucosil- lactose, lacto-N-fucopentaose I, lacto-N-fucopentaose II, lacto-N- fucopentaose III, lacto-N-fucopentaose V, lacto-N-fuco-hexaose, lacto- N-difuco-hexaose I, fucosil-lacto-N-hexaose, fucosil-lacto-N-neo- hexaose I, fucosil-lacto-N-neo-hexaose II, difucosil-lacto-N-hexaose I, difucosil-lacto-N-neo-hexaose I, difucosil-lacto-N-neo-hexaose II,

fucosil-para-lacto-N-hexaose e qualquer combinação dos mesmos, e em que, de preferência, o oligossacarídeo fucosilado é selecionado dentre 2'-fucosil-lactose (2-FL), diFL e qualquer combinação dos mesmos.

6. Uso, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que o OLH é uma N-acetil-lactosamina selecionada do grupo que consiste em lacto-N-tetraose (LNT) e lacto-N-neotetraose (LNnT).

7. Uso, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que o OLH é um oligossacarídeo sialilado, de preferência selecionado do grupo que consiste em 3'-sialil-lactose e 6'-sialil-lactose e, com mais preferência, em que a dita composição compreende tanto 3'-sialil-lactose como 6'-sialil-lactose, em que a razão entre 3'-sialil- lactose e 6'-sialil-lactose está, de preferência, na faixa entre 100:1 e 1:100, com mais preferência entre 10:1 e 1:10 e, com mais preferência ainda, entre 5:1 e 1:2.

8. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que o OLH está presente em uma quantidade de 0,1 a 50 g/L, ou 0,3 a 5 g/L, ou 0,5 a 1 g/L, ou 0,25 ou 0,5 ou 1 ou 1,5 ou 2 g/L.

9. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que a composição compreende ainda um prebiótico, em que o dito prebiótico é, de preferência, selecionado da lista que consiste em oligossacarídeo de leite bovino (OLB), inulina, xilo- oligossacarídeos, polidextrose, fruto-oligossacarídeos (FOS) ou oligofrutose (OF) ou qualquer combinação dos mesmos.

10. Uso, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que o dito OLB compreende um oligossacarídeo N-acetilado, um galacto-oligossacarídeo, um oligossacarídeo sialilado, um oligossacarídeo fucosilado ou uma combinação dos mesmos.

11. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que a composição compreende ainda um probiótico, em que o probiótico é, de preferência, selecionado da lista que consiste em Bifidobacterium, Lactobacillus, Lactococcus, Enterococcus, Streptococcus, Kluyveromyces, Saccharoymces, Candida, em particular selecionado do grupo que consiste em Bifidobacterium longum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus lactis, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus salivarius, Lactococcus lactis, Enterococcus faecium, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces boulardii ou misturas dos mesmos, de preferência selecionado do grupo que consiste em Bifidobacterium longum NCC3001 (ATCC BAA-999), Bifidobacterium longum NCC2705 (CNCM I-2618), Bifidobacterium longum NCC490 (CNCM I-2170), Bifidobacterium lactis NCC2818 (CNCM I-3446), Bifidobacterium breve cepa A, Lactobacillus paracasei NCC2461 (CNCM I-2116), Lactobacillus johnsonii NCC533 (CNCM I- 1225), Lactobacillus rhamnosus GG (ATCC53103), Lactobacillus rhamnosus NCC4007 (CGMCC 1.3724), Enterococcus faecium SF 68 (NCC2768; NCIMB10415) e combinações dos mesmos.

12. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que o mamífero é um ser humano, animal de estimação, gato ou cachorro, em que, de preferência, o mamífero é um mamífero jovem, com mais preferência um bebê ou uma criança pequena.

13. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que a dita composição é uma fórmula para bebês, fórmula de transição, fortificante de leite humano, leite de crescimento, ou um alimento ou suplemento para animais de estimação.

14. Composição nutricional para melhorar, acentuar, promover ou modular uma função serotoninérgica no SNC em um indivíduo que esteja precisando disso, de preferência em um bebê humano ou uma criança pequena, seja prematuro ou nascido a termo, entre o nascimento e os 7 anos de idade, caracterizada pelo fato de que compreende oligossacarídeo do leite humano (OLH).