BR112020016534A2 - Método para aumentar a quantidade da carne e/ou de melhorar a qualidade da carne em um animal de abate domesticado e uso de ribosídeo de nicotinamida - Google Patents

Método para aumentar a quantidade da carne e/ou de melhorar a qualidade da carne em um animal de abate domesticado e uso de ribosídeo de nicotinamida Download PDF

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Stephanie Rene Kruger
Chad Bennett Paulk
Haley Kay Wecker
Kara Dunmire
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Abstract

a presente invenção revela métodos para aumentar a quantidade de carne e/ou melhorar a qualidade da carne de animais domésticos usando tratamentos de ribosídeo de nicotinamida. o ribosídeo de nicotinamida pode estar na forma de um sal de cloreto misturado ou dissolvido em um veículo biologicamente aceitável. os tratamentos podem ser fornecidos como uma injeção in ovo ou administrados oralmente ao animal vivo de carne domesticada. os métodos aqui descritos aumentam vantajosamente o tamanho e o peso dos animais de carne domesticados, reduzem a incidência de fadiga durante o transporte e diminuem a descoloração da carne ao longo do tempo.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "MÉTODO PARA AUMENTAR A QUANTIDADE DA CARNE E/OU
DE MELHORAR A QUALIDADE DA CARNE EM UM ANIMAL DE ABATE DOMESTICADO E USO DE RIBOSÍDEO DE NICOTINAMIDA". REFERÊNCIA REMISSIVA A PEDIDOS DE PATENTE RELACIONADOS
[0001] O presente Pedido de Patente reivindica o benefício do Pe- dido de Patente Provisório Nº US 62/611.087, depositado em 28 de de- zembro de 2017, intitulado TRATAMENTOS COM RIBOSÍDEO DE NICOTINAMIDA DE ANIMAIS DE ABATE DOMESTICADOS, que é aqui incorporado a título de referência.
DECLARAÇÃO A RESPEITO DA PESQUISA OU DESENVOLVIMENTO PATROCINADOS PELO GOVERNO FEDERAL
[0002] A presente invenção foi elaborada com suporte do governo sob o Contrato Nº NC-1.184 e o Contrato Nº NA/1.006.677, ambos con- cedidos pelo Departamento de Agricultura dos Estados Unidos. O go- verno tem determinados direitos na presente invenção.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO CAMPO DA INVENÇÃO
[0003] A invenção refere-se de maneira geral aos métodos de au- mentar a quantidade de carne e/ou de melhorar a qualidade da carne dos animais de abate domesticados com o uso de tratamentos de ribo- sídeo de nicotinamida.
DESCRIÇÃO DA TÉCNICA ANTERIOR
[0004] O ribosídeo de nicotinamida (NR) é uma forma de piridina- nucleosídeo de vitamina B 3 que funciona como um precursor ao dinu- cleotídeo de adenina de nicotinamida que pode produzir NAD+. Os es- tudos anteriores descobriram que o NR aprimora o metabolismo oxida- tivo e o protege contra a obesidade induzida por uma dieta rica em gorduras. Outros estudos exploraram seus efeitos no metabolismo da energia e na neuroproteção. Outros estudos exploraram o efeito do NAD+ em retardar a perda e o envelhecimento das células-tronco. No entanto, embora os estudos anteriores tenham se concentrado no uso do ribosídeo de nicotinamida para melhorar a saúde, não foi explorado seu uso no aumento da quantidade de carne e/ou na melhora da qualidade da carne em animais de abate domesticados. De modo notável, não foi realizado nenhum estudo que examina o efeito do ribosídeo de nicotinamida na miogênese das galinhas (desenvolvimento do músculo) no útero ou no crescimento dos porcos e na qualidade da carne.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[0005] As modalidades da presente invenção demonstram que uma injeção in ovo de ribosídeo de nicotinamida no desenvolvimento dos embriões de galinhas aumenta o peso corporal e o peso, o comprimento, e a profundidade do músculo Pectoralis major das galinhas, e particularmente dos pintinhos imediatamente depois de chocar. Isto aumenta a eficiência e o peso das aves produzidas para a produção de carne. Outras modalidades da presente invenção demonstram que o consumo de ribosídeo de nicotinamida pelos porcos aumenta o crescimento, melhora a qualidade da carne e aumenta o teor de NAD+ no músculo. Isto aumenta a eficiência do crescimento, prolonga o tempo de venda da carne no mercado e pode ser usado como uma contramedida para atrasar o início da fadiga de transporte.
[0006] De acordo com uma modalidade, é provido no presente documento um método de aumentar a quantidade de carne e/ou de melhorar a qualidade da carne de um animal de abate domesticado. O método compreende prover ao animal de abate domesticado ou ao embrião de um animal de abate domesticado uma quantidade eficaz de ribosídeo de nicotinamida.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[0007] A Figura 1 é uma série de gráficos que mostram os efeitos no peso geral dos pintinhos e no comprimento, no peso e na profundidade do Pectoralis major dos tratamentos com ribosídeo de nicotinamida de acordo com as modalidades da presente invenção.
[0008] A Figura 2 é um gráfico que mostra uma área de seção transversal da fibra do músculo (CSA) durante a miogênese in ovo.
[0009] A Figura 3 é um gráfico que mostra o ganho de peso diário médio de porcos tratados com ribosídeo de nicotinamida de acordo com as modalidades da presente invenção.
[0010] A Figura 4 é um gráfico que mostra a área de olho de lombo de porcos tratados com ribosídeo de nicotinamida de acordo com as modalidades da presente invenção.
[0011] A Figura 5 é um gráfico que mostra a % de metmioglobina com o passar do tempo na superfície da carne de porcos tratados com ribosídeo de nicotinamida de acordo com as modalidades da presente invenção.
[0012] A Figura 6 é um gráfico que mostra a contagem da % de descoloração da superfície com o passar do tempo de uma banca examinadora de carne de porcos tratados com ribosídeo de nicotinamida de acordo com as modalidades da presente invenção.
[0013] A Figura 7 é um gráfico que mostra a % de capacidade de redução de metmioglobina de porcos tratados com ribosídeo de nicotinamida de acordo com as modalidades da presente invenção.
[0014] A Figura 8 é um gráfico que mostra a % de distribuição de fibra do músculo da carne de porcos tratados com ribosídeo de nicotinamida de acordo com as modalidades da presente invenção.
[0015] A Figura 9 é um gráfico que mostra a intensidade média SDH da fibra do músculo da carne de porcos tratados com ribosídeo de nicotinamida de acordo com as modalidades da presente invenção.
[0016] A Figura 10 é um gráfico que mostra que a superfície de corte do lombo Objetiva com acumulação de oxi- e metmioglobina de porcos alimentados com 0 ou 30 mg/kg de ribosídeo de nicotinamida (NR) para os 10 dias finais de alimentação.
[0017] A Figura 11 é um gráfico que mostra a contagem de descoloração do corte do lombo de uma banca examinadora de porcos alimentados com 0 ou 30 mg/kg de ribosídeo de nicotinamida (NR) para os 10 dias finais de alimentação.
[0018] A Figura 12 é um gráfico que mostra a taxa de consumo de oxigênio e a capacidade de redução de metmioglobina de porcos alimentados com 0 ou 30 mg/kg de ribosídeo de nicotinamida (NR) para os 10 dias finais de alimentação.
[0019] A Figura 13 é um gráfico que mostra o efeito do ribosídeo de nicotinamida no início da fadiga subjetiva, e
[0020] A Figura 14 é um gráfico que mostra o efeito do ribosídeo de nicotinamida na concentração de dinucleotídeo de adenina de nicotinamida (NAD+) no Semitendinoso.
DESCRIÇÃO DETALHADA DAS MODALIDADES PREFERIDAS
[0021] Em uma ou mais modalidades, é apresentado um método de aumentar a quantidade e/ou de melhorar a qualidade da carne de um animal de abate domesticado. Tal como aqui utilizado, o termo "animal de abate domesticado" refere-se aos animais que são criados em cativeiro para o consumo das pessoas. Os animais de abate domesticados de exemplo incluem aves, porcos, bovinos e similares. Em certas modalidades preferidas, o animal de abate domesticado é uma galinha (por exemplo, um frango de corte) ou um porco. Os métodos de acordo com as modalidades da presente invenção geralmente compreendem o fornecimento, a um animal de abate domesticado ou ao embrião de um animal de abate domesticado, de um uma quantidade eficaz de ribosídeo de nicotinamida. O ribosídeo de nicotinamida (NR) é uma forma de piridina-nucleosídeo de vitamina B3 que funciona como um precursor ao dinucleotídeo de adenina de nicotinamida, que pode produzir NAD+. O ribosídeo de nicotinamida de preferência é fornecido ao animal de abate domesticado como o sal cloreto de ribosídeo de nicotinamida. No entanto, o ribosídeo de nicotinamida também pode ser fornecido de outra forma biologicamente aceitável. Por exemplo, o ribosídeo de nicotinamida também pode ser fornecido como óxido de ribosídeo de nicotinamida, sulfato de ribosídeo de nicotinamida ou ser combinado com aminoácidos complexos.
[0022] Em uma modalidade particular, é apresentado um método de aumentar a quantidade da carne de uma galinha. O método compreende fornecer ao embrião de galinha uma quantidade eficaz de ribosídeo de nicotinamida. O ribosídeo de nicotinamida pode ser fornecido ao embrião da galinha pela injeção do ribosídeo de nicotinamida em um ovo de galinha fertilizado durante o período de incubação. A injeção geralmente é aplicada cerca de 10 dias ou mais depois que o ovo é colocado e de preferência cerca de 10 a cerca de 12 dias depois que o ovo é colocado. A injeção de preferência é aplicada na gema do ovo de galinha fertilizado. A injeção de ribosídeo de nicotinamida na gema pode vantajosamente resultar em uma quantidade aumentada de carne dos pintinhos chocados se comparada com a injeção em outras partes do ovo da galinha, tais como o albume. A injeção geralmente compreende uma quantidade de ribosídeo de nicotinamida dissolvida em um veículo líquido biologicamente aceitável. Por exemplo, o veículo líquido pode ser uma solução salina estéril. A quantidade de ribosídeo de nicotinamida injetada no ovo fertilizado pode ser variada. No entanto, a injeção geralmente compreende cerca de 1 µl a cerca de 1.000 µl, de preferência cerca de 25 µl a cerca de 500 µl, e com mais preferência cerca de 50 µl a cerca de 200 µl de solução, em que a concentração de solução é de cerca de 10 mM a cerca de 1000 mM, de preferência cerca 100 mM a cerca de 500 mM, e com mais preferência cerca de 200 mM a cerca de 300 mM de ribosídeo de nicotinamida. No entanto, em certas modalidades, as doses que fornecem quantidades maiores de ribosídeo de nicotinamida também podem ser usadas. Em certas modalidades, a concentração de ribosídeo de nicotinamida na solução é pelo menos de cerca de 250 mMs, pelo menos cerca de 500 mM, pelo menos cerca de 750 nM ou pelo menos cerca de 1000 Mm. Após a injeção, os ovos de galinha fertilizados geralmente são incubados sob condições naturais (isto é, galinha choca) ou em um ambiente artificial. De qualquer maneira, os ovos de galinha fertilizados são incubados a uma temperatura de cerca de 30°C a cerca de 40°C, e de preferência a cerca de 34°C a cerca de 40°C, e com uma umidade relativa de cerca de 30% a cerca de 50%, e de preferência de cerca de 38% a cerca de 42%. No final, cerca de 3 a cerca de 5 dias de incubação antes de chocar, a umidade pode ser aumentada para cerca de 50% a cerca de 70% e, de preferência, para cerca de 58% a cerca de 62%. Os métodos descritos no presente documento podem vantajosamente resultar em pintinhos que têm seu peso total aumentado, bem como o peso, o comprimento e a profundidade do músculo Pectoralis major aumentados se comparados com os pintinhos que não receberam o tratamento.
[0023] Em outra modalidade em particular, é apresentado um método de aumentar a quantidade de carne e/ou de melhorar a qualidade da carne de um porco. O método compreende o fornecimento a um porco de uma quantidade eficaz de ribosídeo de nicotinamida. O porco pode ser um porco adulto ou um leitão. O ribosídeo de nicotinamida pode ser fornecido ao porco pela administração oral de uma quantidade de ribosídeo de nicotinamida ao porco, embora outros métodos de administração também possam ser usados. O tratamento de administração oral compreende uma quantidade de ribosídeo de nicotinamida misturada com um veículo biologicamente aceitável.
O veículo está de preferência na forma de um líquido ou bebida ou alimento que tenham um sabor agradável ao porco.
Por exemplo, o veículo pode ser um xarope de milho, tal como o xarope Karo® escuro.
Independentemente do veículo, o ribosídeo de nicotinamida geralmente é administrado ao porco em uma dose de cerca de 15 mg a cerca de 30 mg de ribosídeo de nicotinamida por kg de peso corporal do porco.
Nas modalidades particularmente preferidas, o ribosídeo de nicotinamida é administrado ao porco em uma dose de cerca de 30 mg de ribosídeo de nicotinamida por kg de peso corporal do porco.
No entanto, em outras modalidades preferidas, o ribosídeo de nicotinamida é administrado ao porco em uma dose de cerca de 15 mg de ribosídeo de nicotinamida por kg de peso corporal do porco.
Em certas modalidades, o ribosídeo de nicotinamida é administrado ao porco em uma dose de pelo menos cerca de 5 mg, de pelo menos cerca de 10 mg, de pelo menos cerca de 15 mg ou de pelo menos cerca de 30 mg de ribosídeo de nicotinamida por kg de peso corporal do porco.
As doses de tratamento que fornecem quantidades maiores de ribosídeo de nicotinamida do que as listadas acima também podem ser usadas.
A dose pode ser administrada diariamente por pelo menos cerca de 3 dias, de preferência por pelo menos cerca de 5 dias e com mais preferência por pelo menos cerca de 7 dias.
Além das doses de tratamento, de outro modo, o porco pode receber as dietas de aleitamento/crescimento/finalização padrão e água.
Os métodos descritos no presente documento resultam vantajosamente em porcos que têm ganho diário médio melhor (ADG), olhos de lombo maiores, menos acúmulo de metmioglobina de superfície de Longissimus lumborum (LL), menos descoloração de superfície segundo uma banca examinadora do visual da carne, mais capacidade de redução de metmioglobina (MRA) e maior teor de NAD+ do que os porcos que não receberam o tratamento. Além disso, os métodos e os tratamentos descritos no presente documento aumentam os níveis de NAD+ do músculo semitendinoso, fornecendo mais energia para o movimento e, portanto, são úteis como contramedidas nutricionais para reduzir a incidência da fadiga de transporte.
[0024] Outras vantagens das várias modalidades da invenção ficarão evidentes aos elementos versados na técnica quando da avaliação do que é aqui descrito e dos exemplos de trabalho abaixo. Deve ser apreciado que as várias modalidades aqui descritas não são necessariamente mutuamente exclusivas, a menos que aqui seja indicado de outra maneira. Por exemplo, uma característica descrita ou descrita em uma modalidade também pode ser incluída em outras modalidades, mas não necessariamente é incluída. Desse modo, a presente invenção abrange várias combinações e/ou integrações das modalidades específicas aqui descritas.
[0025] Tal como aqui utilizada, a frase "e/ou", quando usada em uma lista de dois ou mais itens, significa que qualquer um dos itens listados pode ser empregado por si mesmo ou qualquer combinação de dois ou mais dos itens listados pode ser empregada. Por exemplo, se uma composição for descrita como contendo ou excluindo os componentes A, B e/ou C, a composição pode conter ou excluir A sozinho; B sozinho; C sozinho; A e B em combinação; A e C em combinação; B e C em combinação; ou A, B e C em combinação.
[0026] A presente descrição também usa escalas numéricas para quantificar certos parâmetros que se referem às várias modalidades da invenção. Deve ser compreendido que quando as escalas numéricas são fornecidas, tais escalas devem ser interpretadas como fornecendo um suporte literal para as limitações de uma reivindicação que só enumera o valor mais baixo da escala, bem como as limitações de uma reivindicação que só enumera o valor superior da escala. Por exemplo,
uma escala numérica descrita de cerca de 10 a cerca de 100 fornece um suporte literal para uma reivindicação que enumera "maior do que cerca de 10" (sem limites superiores) e uma reivindicação que enumera "menor do que cerca de 100" (sem limites inferiores).
EXEMPLOS
[0027] Os exemplos a seguir apresentam os estudos relacionados ao tratamento de animais de abate domesticados com ribosídeo de nicotinamida. Deve ser compreendido, no entanto, que esses exemplos são fornecidos a título de ilustração e não devem ser considerados como uma limitação ao âmbito geral da invenção.
EXEMPLO I OBJETIVO
[0028] O objetivo do presente estudo consiste em examinar os efeitos do ribosídeo de nicotinamida (NR) na miogênese embrionária aviária.
MÉTODOS
[0029] Aos 11 dias de incubação, 60 ovos de frango fertilizados foram atribuídos aleatoriamente ao projeto completamente randomizado com um arranjo fatorial 2 × 2. O fator 1 compreendeu o tratamento com ovos injetados com 100 µl de 0,9% de solução salina estéril (NRNeg) ou 250 Mm de NR em solução salina estéril (NRPos). O fator 2 compreendeu uma injeção local, com o tratamento injetado na gema ou no albume. Os ovos foram incubados a 37 ± 3°C e em uma umidade relativa de 40 ± 2% por 7 dias. A umidade foi aumentada para 60 ± 2% na mesma temperatura para os 3 dias finais de incubação. Vinte e quatro horas após chocar, os pintinhos foram sacrificados pela exposição a CO2 e decapitação. As medições, incluindo o peso do pintinho e o peso, o comprimento e a profundidade do Pectoralis major esquerdo foram tomadas para análise.
RESULTADOS
[0030] Houve interações de tratamento × local da injeção para o peso do pintinho e o peso e comprimento do Pectoralis major (P < 0,02). Em todas as medidas, não houve nenhuma diferença entre os pintinhos NRNeg e NRPos quando os tratamentos foram injetados no albume (P > 0,14). No entanto, quando os tratamentos foram injetados na gema, os pintinhos NRPos tenderam a pesar mais (P = 0,07) e seus músculos Pectoralis major pesaram mais e foram mais longos do que os pintinhos NRNeg (P < 0,01). Não houve nenhuma interação de tratamento × local da injeção (P = 0,30) para a profundidade do Pectoralis major. O tratamento afetou (P = 0,03) a profundidade do Pectoralis major, com os pintinhos NRPos tendo músculos mais grossos do que os pintinhos NRNeg. (Figura 1).
CONCLUSÃO
[0031] A injeção de NR em ovos de frango no dia 11 de incubação aumenta o peso do pintinho e melhora o desenvolvimento do Pectoralis major. A injeção de NR na gema do embrião em desenvolvimento tem efeitos positivos maiores no desenvolvimento do pintinho quando comparada à injeção de NR no albume. ANÁLISE IMUNO-HISTOQUÍMICA
[0032] A análise imuno-histoquímica foi realizada para determinar se a suplementação de NR aumentou a área de seção transversal da fibra do músculo (CSA) durante a miogênese in ovo. Não houve nenhum efeito principal no Tratamento × Localização ou no Tratamento e Localização para a fibra do músculo (P > 0,06). Ver Figura 2. Tendo em vista que a fibra do músculo não aumentou devido à suplementação de NR, mas toda a morfometria do músculo sim, acredita-se que o NR aumentou a morfometria do músculo ao aumentar o número de fibras do músculo formadas durante a miogênese. Isto é muito desejado nos animais produtores de carne.
EXEMPLO II OBJETIVO
[0033] O objetivo do presente estudo foi examinar melhor o efeito da concentração de ribosídeo de nicotinamida (NR) na miogênese embrionária aviária.
MATERIAIS E MÉTODOS
[0034] Ovos de frango fertilizados (n = 60; Cobb 500) foram atribuídos aleatoriamente a 1 dentre 4 tratamentos: 0, 250, 500 ou 1000 mM de NR em solução salina estéril. No dia 10 de incubação, 100 μl da solução do tratamento foram injetados na gema dos ovos. Os ovos foram incubados a 37 ± 3°C e em uma umidade relativa de 40 ± 2%. No dia 19 de incubação, os embriões foram sacrificados pela exposição prolongada ao gás CO2 e decapitação. As medições incluíram: peso do embrião; comprimento crânio-caudal; circunferência do peito (CC); e o peso, o comprimento, a largura e a profundidade do Pectoralis major esquerdo (PM) foram coletados.
RESULTADOS
[0035] Não houve nenhum efeito do tratamento no peso do embrião (P = 0,99). Os embriões tratados com 1000 mM de NR tinham medições crânio-caudais mais longas do que todos os outros tratamentos (P < 0,05), que não diferiram um do outro (P > 0,36). Os embriões com tratamentos de 500 e 1000 mM tinham peso e largura de CC e de PM maiores do que os embriões de 0 mM (P < 0,04), mas não diferiram (P > 0,38) um do outro. Os embriões injetados com 250 mM de NR não diferiram em peso e largura de CC e de PM quando comparados a outros tratamentos (P > 0,06). Todos os tratamentos de NR tinham músculos de PM mais longos do que o tratamento com solução salina (P < 0,01), mas não diferiram um do outro (P < 0,41). Os embriões tratados com 1000 e 250 Mm de NR apresentaram músculos de PM mais grossos do que os embriões injetados com solução salina (P <
0,04), mas não diferiram um do outro (P = 0,58). Os embriões injetados com 500 mM de NR não diferiram em espessura de PM comparados a outros tratamentos (P > 0,06). Ver Tabela 1.
CONCLUSÃO
[0036] O aumento da concentração de ribosídeo de nicotinamida injetado in ovo teve uma influência quadrática na miogênese aviária. A injeção de até 500 mM de NR na gema do embrião em desenvolvimento não teve nenhum efeito no peso corporal, mas apresentou medições de PM aumentadas; desse modo, a indicação de NR influenciou a miogênese aviária.
TABELA 1 Efeitos do aumento da suplementação de ribosídeo de nicotinamida na miogênese aviária in ovo Dose de ribosídeo de nicotinamida, Mm Item 0 250 500 1000 SEM Valor-P Morfometria de todo o corpo Peso corporal, g 46,22 46,42 46,25 45,97 1,15 0,99 Comprimento crânio-caudal, 84,01a 83,69a 85,14a 88,20b 1,16 0,02 mm Largura da cabeça, mm 19,51 15,42 15,49 15,69 1,87 0,33 Comprimento da cabeça, mm 18,25 17,70 17,60 17,98 0,28 0,36 Circunferência da cabeça, cm 5,3a 5,3a 5,6b 5,7b 0,1 0,01 Circunferência do peito, cm 5,3a 6,0a,b 6,3b 6,6b 0,3 <0,01 Morfometria do Pectoralis major Peso, g 0,11a 0,13a,b 0,16b 0,15b 0,01 0,03 Comprimento , mm 14,14a 16,73b 17,51b 17,44b 0,69 <0,01 Largura , mm 4,49a 4,90a,b 5,32b 5,61b 0,29 0,03 Espessura máxima, mm 2,23a 2,56b 2,36a,b 2,64b 0,11 0,04 Peso do órgão Coração, g 0,23 0,23 0,23 0,24 0,01 0,88 Fígado, g 0,69 0,74 0,72 0,67 0,04 0,54
EXEMPLO III OBJETIVO
[0037] O objetivo do presente estudo consiste em examinar os efeitos do ribosídeo de nicotinamida (NR) em porcos no ganho diário médio (ADG) do Longissimus lumborum (LL), na área de olho de lombo, no teor de NAD+ e nas características da cor da carne fresca.
MÉTODOS
[0038] Nove porcos em crescimento foram colocados em bloco de acordo com o peso corpóreo (BW) e colocados em gaiolas de metabolismo. Após um período de 3 dias de aclimatação, os porcos dentro de cada bloco de BW foram atribuídos aleatoriamente a um tratamento (n = 3 porcos/tratamento). Os tratamentos compreenderam porcos suplementados com 0, 15 ou 30 mg/kg de NR BW por 7 dias. Os porcos tinham acesso ad libitum a uma dieta de crescimento padrão e água. Os tratamentos foram administrados diariamente às 8 da manhã pela mistura de NR em 20 mL de xarope escuro Karo® e administrados oralmente em grande quantidade aos porcos. Nos dias 0 e 3 do experimento, as biópsias de músculo do LL foram feitas para a análise de NAD+ usando procedimentos padrão. No dia 7, os porcos foram transportados ao laboratório da Kansas State University Meats e sacrificados com uma pistola penetrante no cérebro, seguido por sangria. Depois dos procedimentos de coleta, 3 g de LL foram coletados para análise de NAD+. Vinte e quatro horas após a coleta, todo o LL não amostrado na coleta foi removido da carcaça e envelhecido por 10 dias. Após esse período, o LL foi cortado em 6 pedaços para a análise de estabilidade de cor no mercado, incluindo a porcentagem de óxi- e de metmioglobina na superfície no dia 6, a avaliação de painel de cor objetiva e subjetiva no dia 6 e a capacidade de redução de metmioglobina (MRA) nos dias 4 e 6.
RESULTADOS
[0039] Os dados indicam uma tendência de que os porcos no tratamento de 30 mg/kg numericamente têm 4,4% de ADG melhor quando comparados aos porcos nos outros dois tratamentos, que não diferiram (Figura 3). O tratamento apresentou uma tendência a afetar (P = 0,06) LEA, com os porcos alimentados a 30 mg/kg que têm 52% e 48% de olhos de lombo maiores do que os porcos alimentados a 0 e 15 mg/kg NR, respectivamente (P < 0,03; Figura 4). Os porcos nos tratamentos a 0 e 15 mg/kg não diferiram (P > 0,15) em LEA.
[0040] Houve um efeito de tratamento (P = 0,04) de acúmulo de metmioglobina de superfície (Figura 5). Durante o estudo de 6 dias inteiros, os pedaços de LL do tratamento de 30 mg/kg tinham 14%
menos (P = 0,02) metmioglobina de superfície do que os pedaços de 0 mg/kg. Quando comparados aos pedaços do tratamento de 0 mg/kg, os pedaços do tratamento de 15 mg/kg apresentaram uma tendência de ter 9% menos (P = 0,06) de acúmulo de metmioglobina de superfície. Os pedaços dos tratamentos de 15 e 30 mg/kg não diferiram (P = 0,21) no acúmulo de metmioglobina de superfície.
[0041] Houve uma interação de Tratamento × Dia (P = 0,03) para as contagens de descoloração do painel visual (Figura 6). Nos dias 1, 4 e 5 da exibição, as contagens de descoloração do tratamento não diferiram uma da outra (P > 0,15). Nos dias 2 e 3 da exibição, os pedaços de 0 mg/kg apresentaram uma tendência de ter mais descoloração de superfície do que os outros dois tratamentos (P < 0,12), que não diferiram (P = 0,83) um do outro. No dia de exibição 6, os pedaços de 0 mg/kg tinham 41 e 39% de contagem de descoloração maiores do que os pedaços de 15 e 30 mg/kg, respectivamente (P < 0,01). As contagens de descoloração para os pedaços de 15 e 30 mg/kg não diferiram (P = 0,82) neste dia. Houve um efeito de tratamento (P = 0,04) para as contagens de descoloração. Durante todo o estudo de 6 dias, os pedaços de LL do tratamento de 30 mg/kg tinham 30% menos (P = 0,04) de descoloração de superfície do que os pedaços de 0 mg/kg. Quando comparados aos pedaços do tratamento de 0 mg/kg, os pedaços do tratamento de 15 mg/kg apresentaram uma tendência de ter 27% menos (P = 0,06) descoloração. Os pedaços dos tratamentos de 15 e 30 mg/kg não diferiram (P > 0,15) na descoloração de superfície.
[0042] Houve um efeito de tratamento (P = 0,05) para MRA (Figura 7). Durante todo o estudo, os pedaços de LL do tratamento de 30 mg/kg tinham 64% mais (P = 0,03) MRA do que os pedaços de 0 mg/kg. Quando comparados aos pedaços do tratamento de 0 mg/kg, os pedaços do tratamento de 15 mg/kg apresentaram uma tendência de ter 42% mais (P = 0,08) MRA. Os pedaços dos tratamentos de 15 e 30 mg/kg não diferiram (P = 0,32) na descoloração de superfície. Os dados de distribuição de fibra do músculo indicam que o LL do tratamento de 30 mg/kg teve numericamente menos fibras do tipo 2B (glicolítica) e mais fibras dos tipos 1 e 2A (oxidativa) do que o LL de 0 mg/kg (Figura 8). O tingimento de desidrogenase de succinato indicou que o LL do tratamento de 30 mg/kg teve numericamente um tingimento mais intenso do que o LL dos outros dois tratamentos nas fibras do tipo 2B (Figura 9).
[0043] Nos dias 3 e 7 de suplementação de NR, houve efeitos de tratamento para o total e o percentual de LL NAD+ mudança (P < 0,05). Nos dias 3 e 7 de suplementação, a suplementação de 15 mg/kg aumentou o NAD+ em um total e a base da percentagem de mudança quando comparado ao tratamento de 0 mg/kg (P = 0,02). O tratamento de 30 mg/kg só apresentou uma tendência de ter (P < 0,14) uma mudança total maior no teor de NAD+ quando comparado ao tratamento de 0 mg/kg. Os resultados dos efeitos de NAD+ dos tratamentos são mostrados na Tabela 2.
CONCLUSÃO
[0044] Em conclusão, a suplementação de NR a 30 mg/kg BW diariamente por 7 dias parece aumentar numericamente o ADG se comparada aos porcos de 0 e 15 mg/kg, o que resultou em uma tendência maior para LEA desses porcos. Quando exibida sob condições de varejo, a suplementação de NR a 15 ou 30 mg/kg atrasou o acúmulo de superfície de metmioglobina de superfície quando comparada aos pedaços de 0 mg/kg, que também foram vistos por uma banca examinadora visual. Esta melhora na estabilidade da cor muito provavelmente foi devida a uma melhora na MRA para ambos os tratamentos de NR se comparados ao controle. Esta melhora pode ser explicada parcialmente para os pedaços de 30 mg/kg pelo que parece ser um aumento no número de fibras oxidativas no LL e um aumento no tingimento ASAO (capacidade oxidativa) nas fibras do tipo 2B. Finalmente, a suplementação de NR aumentou o teor de NAD+ no LL de ambos os tratamentos de NR se comparada ao controle. No entanto, o aumento foi maior no tratamento de 15 mg/kg. Hipoteticamente, isso pode ter ocorrido devido aos porcos de 30 mg/kg que utilizaram mais NAD+ para o crescimento. TABELA 2. Tabela 2. Efeito de 7 dias de suplementação de ribosídeo de nicotinamida no teor de NAD+ do Longissimus lumborum dos porcos Dia 0 Dia 7 Item 0 15 30 0 15 30 0 15 30 SEM NAD+, tecido 8,66 7,70 8,60 7,75 9,80 9,31 9,08 10,42 9,53 0,77 pMol/g Dia 3 NAD+ mudança Total, -- -- -- -0,91a,x 2,10b 0,71a,b,y -- -- -- 0,66 tecido pMol/g Mudança -- -- -- -11,45a 28,55b,x 6,43a,b,y -- -- -- 8,48 percentual Dia 7 NAD+ mudança Total, tecido -- -- -- -- -- -- 0,42a,x 2,72b 0,93a,b,y 0,44 pMol/g Mudança -- -- -- -- -- -- 5,68a 35,29b,x 10,92a,b,y 5,68 percentual a,b Significa que a falta de um sobrescrito comum dentro de uma linha é diferente (P < 0,05). x,y Significa que a falta de um sobrescrito comum dentro de uma linha tende a ser diferente (P < 0,15).
EXEMPLO IV OBJETIVO
[0045] O objetivo do presente estudo foi examinar o efeito da suplementação oral de ribosídeo de nicotinamida (NR) no desempenho dos porcos, nas características da carcaça e na estabilidade de cor do corte de lombo.
MATERIAIS E MÉTODOS
[0046] Sete dias antes do início do experimento, 10 cachaços castrados de terminação (BW inicial de 111,9 ± 1,6 kg) foram alojados em gaiolas individuais localizadas na instalação East Finisher da Kansas State University Swine Teaching and Research Center (Manhattan, KS). Cada gaiola tinha 7,4 m2 com um assoalho de pavimento ripado, com um bebedor de bocal e um alimentador seco individual que permitiram o acesso ad libitum a alimento e água. Aos cachaços castrados foram atribuídos aleatoriamente 1 a 2 tratamentos de NR, 0 ou 30 mg/kg diariamente de NR misturado em xarope de Karo® e administrado por gavagem oral. Aos cachaços castrados foram administrados seu tratamento atribuído por 10 dias, e depois disso eles foram colhidos sob inspeção do USDA. Vinte e quatro horas após a colheita, as medições da carcaça foram feitas por pessoal treinado, as carcaças produziram 5 cortes por atacado principais e o lombo inteiro sem ossos foi embalado a vácuo e armazenado por 10 dias. O lombo foi cortado em 3 pedaços, com o pedaço 1 sendo usado para a análise da capacidade de redução de metmioglobina (MRA) no dia 0, o pedaço 2 sendo usado para as análises da taxa de consumo de oxigênio (OCR) para MRA no dia 4 e o pedaço 3 para a avaliação da cor objetiva/subjetiva no dia 8 e as análises de MRA e de OCR.
RESULTADOS
[0047] Não houve nenhum efeito de tratamento para qualquer uma das medidas de desempenho (P > 0,257; Tabela 3). Isto muito provavelmente foi devido ao baixo número de cachaços castrados usados no estudo piloto. Numericamente, a suplementação de NR aumentou o ganho diário médio em 8% quando suplementado por 10 dias.
TABELA 3 Tabela 3. Efeitos do ribosídeo de nicotinamida no desempenho do crescimento dos porcos de terminação1 Controle Ribosídeo de SEM Valor-P nicotinamida Peso corporal, kg d0 111,7 112,0 1,6 0,311 d7 116,6 117,0 1,8 0,855 d 17 129,8 131,3 2,2 0,633 d 0 a 17 Ganho diário médio, kg 1,1 1,1 0,1 0,582 Consumo de alimento diário 3,6 3,8 0,2 0,531 médio, kg Razão alimento-ganho 3,44 3,42 0,19 0,929 4 Ganho diário médio, kg d0a7 0,7 0,7 0,1 0,972 d 7 a 17 1,32 1,43 0,06 0,257 1Um total de 10 cachaços castrados (DNA Genetics; Columbus, NE) foram alojados individualmente em gaiolas (n = 5). Aos porcos foram atribuídos tratamentos no d 7 e eles receberam gavagem oral de NR de 0 ou 30 mg/kg a cada dia do d 7 ao 17.
[0048] Não houve nenhum efeito de tratamento para as medidas da carcaça e as medidas da fabricação de carcaça, com exceção das tendências para que o NR aumente a contagem de cor (deixando a cor do lombo mais vermelha) e diminua o peso do lombo sem osso (P < 0,08), e o NR diminua (P = 0,03) o peso da parte superior da paleta de porco (Tabela 4). Se forem examinadas as tendências numéricas, parece que o NR aumenta a deposição de gordura em todas as medidas de gordura subcutânea e enrijecimento, mas isso ocorre à custa da deposição no músculo. Isso é visto com a maioria dos pesos de corte de atacado sendo mais baixos e a barriga, que é principalmente gordura, aumentando devido ao tratamento de NR.
TABELA 4 Tabela 4. Efeitos do ribosídeo de nicotinamida nas medidas da carcaça dos porcos de terminação1 Control Ribosídeo de SEM Valor-P e nicotinamida Medidas da carcaça Peso da carcaça, kg 97,5 97,4 2,0 0,98 1a gordura subcutânea da costela, 1,66 1,76 0,07 0,33 cm 10a gordura subcutânea da 0,86 0,95 0,07 0,40 costela, cm Gordura subcutânea da última 0,87 0,91 0,04 0,52 costela, cm Gordura subcutânea da última 0,71 0,83 0,05 0,16 lombar, cm Área de olho de lombo, cm2 7,78 7,30 0,23 0,17 Cor 2,6 3,4 0,3 0,07 Enrijecimento 1,9 2,4 0,2 0,24 Produção de carcaça; kg Parte superior da paleta de porco 3,78 3,22 0,15 0,03 Paleta de Picnic 4,24 4,42 0,15 0,38 Lombo sem osso 11,58 10,39 0,43 0,08 Barriga 7,42 7,93 0,35 0,33 Presunto 10,31 9,63 0,28 0,12 1Um total de 10 cachaços castrados (DNA Genetics; Columbus, NE) foram alojados individualmente em gaiolas (n = 5). Porcos foram atribuídos a tratamentos no d 7 e receberam gavagem oral de NR de 0 ou 30 mg/kg a cada dia do d 7 ao 17. 2NContagem de cor do National Pork Producers Council: 1 = cinza rosado claro a branco; 2 = rosa acinzentado; 3 = rosa avermelhado; 4 = rosa avermelhado escuro; 5 = vermelho arroxeado; 6 = vermelho arroxeado escuro. 3NContagem de enrijecimento do National Pork Producers Council: 1 = nenhum e 10 = abundante.
[0049] Não houve nenhuma interação entre Tratamento × dia para todas as medições de cor objetivas e subjetivas (P > 0,77). O dia de exibição afetou todas as medidas consistentes com a descoloração da carne (P < 0,02), exceto o valor L* (brilho; 0 = preto e 100 = branco),
que não foi afetado (P = 0,14; Tabela 5). A Figura 10 mostra o acúmulo de óxi- e metmioglobina da superfície de corte do lombo objetivo dos porcos alimentados com 0 ou 30 mg/kg de ribosídeo de nicotinamida (NR) para os 10 dias finais de alimentação.
Os pedaços foram exibidos sob exibição em varejo simulada por 8 dias e o percentual de oximioglobina e metmioglobina de superfície foi calculado usando as equações de Krzywicki (1979). As medidas objetivas indicaram que os pedaços de NR tiverem um a* maior (rubor; -60 = verde e 60 = vermelho), oximioglobina de superfície maior e formação de metmioglobina de superfície menor por todo o período de exibição de 8 dias (P < 0,01; Tabela 5 e Figura 10). A Figura 11 mostra contagens da descoloração do corte do lombo de uma banca examinadora treinada de porcos alimentados com 0 ou 30 mg/kg de ribosídeo de nicotinamida (NR) para os 10 dias finais de alimentação.
Os pedaços foram exibidos sob exibições de varejo simuladas por 8 dias e 8 a 10 bancas examinadoras avaliaram a descoloração nas contagens de linha com as seguintes âncoras: descoloração 0 = 0% e descoloração 100 = 100%. Os pedaços indicados pela banca examinadora tinham menos descoloração de todo o período de exibição de 8 dias (P < 0,01; Figura 11). A Figura 12 mostra a taxa de consumo de oxigênio e a capacidade de redução de metmioglobina dos porcos alimentados com 0 ou 30 mg/kg de ribosídeo de nicotinamida (NR) para os 10 dias finais da alimentação.
Os pedaços foram exibidos sob exibição de varejo simulada por 8 dias e o OCR e a MRA foram calculados tal como definido no Meat Color Measurement Guidelines (AMSA, 2012) da American Meat Science Association (AMSA). Embora o tratamento não tenha afetado o OCR e a MRA (P > 0,19), pedaços com NR tinham um OCR e MRA maiores durante o estudo de exibição de 8 dias.
TABELA 5 Tabela 5. Efeitos do ribosídeo de nicotinamida nos cortes de lombo L* e os valores a* 1 Controle Ribosídeo de SEM Tratamento Dia Tratamento × nicotinamida Dia L*2 1,0 0,76 0,14 1,00 0 64,8 64,4 1 65,0 65,2 2 63,5 63,7 3 63,7 63,4 4 62,6 63,1 5 62,6 62,9 6 62,8 62,7 7 62,2 62,8 8 62,5 62,8 a*3 0,4 <0,01 <0,01 1,00 0 19,3 19,7 1 18,4 18,8 2 17,8 18,6 3 16,8 17,8 4 16,3 17,3 5 15,3 16,3 6 14,7 15,6 7 14,3 15,1 8 13,9 14,7 1 Um total de 10 cachaços castrados (DNA Genetics; Columbus, NE) foram alojados individualmente em gaiolas (n = 5). Porcos foram atribuídos a tratamentos no d 7 e receberam gavagem oral de NR de 0 ou 30 mg/kg a cada dia do d 7 ao 17. 20 = preto e 100 = branco. 3-60 = verde e 60 = vermelho.
CONCLUSÃO
[0050] A alimentação com NR nos 10 dias finais antes da colheita melhorou numericamente o ADG e as medidas de gordura da carcaça à custa da deposição no músculo. Os pedaços de lombo dos porcos de NR eram mais vermelhos e tinham melhor estabilidade de cor do que os pedaços de controle. A alimentação com NR no fim do período de terminação pode ser uma maneira útil de aumentar a gordura da carcaça (peso da barriga mais importante) e de aumentar o tempo que a carne de porco pode ser vendida no varejo.
EXEMPLO V OBJETIVO
[0051] Um estudo foi realizado para determinar os efeitos do ribosídeo de nicotinamida (NR) na fadiga dos cachaços castrados de terminação para abate e no teor de dinucleotídeo de adenina de nicotinamida (NAD+) do músculo semitendinosus.
MÉTODOS
[0052] Quatorze dias antes da colheita, a 20 cachaços castrados de terminação para abate (peso corporal inicial de 268 libras) foram atribuídos aleatoriamente 1 dentre 2 tratamentos: 0 ou 30 mg/kg peso corporal de ribosídeo de nicotinamida, ambos administrados oralmente diariamente em 20 ml de xarope de Karo®. Dez dias antes da colheita, os porcos foram contidos através de um laço e os tratamentos foram administrados. No dia 7, os cachaços castrados foram submetidos a um teste de desempenho onde eles caminharam em torno de uma pista a 0,88 m/s até que uma fadiga subjetiva foi alcançada. Três dias depois do teste de desempenho, os cachaços castrados foram colhidos e uma parte do músculo semitendinosus foi coletada dentro de 45 minutos. Essas amostras foram analisadas para o teor de NAD+ através de metodologia de HPLC.
RESULTADOS
[0053] Os dados indicaram que os cachaços castrados suplementados com NR andaram numericamente por mais tempo e por maior distância em 19 e 16%, respectivamente (Figura 13). Houve uma tendência (P = 0,09) para que a suplementação de NR aumentasse a quantidade de NAD+ no músculo semitendinosus em 62% (Figura 14).
DISCUSSÃO
[0054] Nenhum estudo anterior tinha sido realizado para examinar a capacidade do cloreto de ribosídeo de nicotinamida de atrasar o início da fadiga nos porcos. Este estudo demonstrou que a alimentação de 30 mg/kg peso corporal de ribosídeo de nicotinamida para os cachaços castrados de terminação para abate (280 a 300 libras) aumentou numericamente o tempo e a distância segundo os quais os cachaços castrados se moveram quando foram submetidos a um teste de desempenho. O estudo também demonstrou que os cachaços castrados alimentados com 30 mg/kg peso corporal de ribosídeo de nicotinamida apresentaram um teor maior de dinucleotídeo de adenina de nicotinamida do músculo semitendinosus (NAD+). Portanto, esses dados indicam que a suplementação de ribosídeo de nicotinamida aos cachaços castrados de terminação para abate atrasa o início da fadiga, possivelmente por aumentar o teor de NAD+ no músculo, e pode servir como uma contramedida para evitar as perdas de transporte.
CONCLUSÃO
[0055] A alimentação de 30 mg/kg peso corporal de ribosídeo de nicotinamida 7 dias antes do teste de desempenho aumentou o tempo e a distância segundo os quais os cachaços castrados se moveram. O ribosídeo de nicotinamida também aumentou os níveis de NAD+ no músculo semitendinosus, o que poderia fornecer mais energia para o movimento. Este produto pode ter o potencial servir como contramedidas nutritivas para reduzir a incidência da fadiga de transporte.

Claims (13)

REIVINDICAÇÕES
1. Método para aumentar a quantidade da carne e/ou de me- lhorar a qualidade da carne em um animal de abate domesticado, ca- racterizado pelo fato de que compreende o fornecimento ao animal de abate domesticado ou a um embrião do animal de abate domesticado uma quantidade eficaz de ribosídeo de nicotinamida.
2. Uso de ribosídeo de nicotinamida, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de uma composição para aumentar a quantidade de carne e/ou melhorar a qualidade da carne em um animal de abate domesticado ou um embrião de animal de abate domesticado.
3. Método e uso de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ca- racterizado pelo fato de que o ribosídeo de nicotinamida é fornecido como cloreto de ribosídeo de nicotinamida.
4. Método e uso de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ca- racterizado pelo fato de que o animal de abate domesticado é uma ga- linha ou um porco.
5. Método e uso de acordo com a reivindicação 4, caracteri- zado pelo fato de que o animal de abate é uma galinha.
6. Método e uso de acordo com a reivindicação 5, caracteri- zado pelo fato de que o fornecimento compreende injetar uma quanti- dade do ribosídeo de nicotinamida em um ovo de galinha fertilizado.
7. Método e uso de acordo com a reivindicação 5, caracteri- zado pelo fato de que ribosídeo de nicotinamida é injetado no ovo da galinha a uma concentração de pelo menos cerca de 250 mM em cerca de 1 µl a cerca de 1.000 µl da solução.
8. Método e uso de acordo com a reivindicação 6 ou 7, ca- racterizado pelo fato de que o ribosídeo de nicotinamida é injetado em uma gema do ovo da galinha.
9. Método e uso de acordo com a reivindicação 4, caracteri- zado pelo fato de que o animal de abate é um porco.
10. Método e uso de acordo com a reivindicação 9, caracte- rizado pelo fato de que o fornecimento compreende a administração oral de uma quantidade do ribosídeo de nicotinamida ao porco.
11. Método e uso de acordo com a reivindicação 9, caracte- rizado pelo fato de que o ribosídeo de nicotinamida é administrado a uma dose de pelo menos cerca de 15 mg por kg do peso corpóreo.
12. Método e uso de acordo com a reivindicação 9, caracte- rizado pelo fato de que o ribosídeo de nicotinamida é administrado a uma dose de cerca de 15 mg por kg do peso corpóreo a cerca de 30 mg por kg do peso corpóreo.
13. Método e uso de acordo com a reivindicação 12, carac- terizado pelo fato de que o ribosídeo de nicotinamida é administrado a uma dose de cerca de 30 mg por kg do peso corpóreo.
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