BR112019027701B1

BR112019027701B1 - Mistura antimicrobiana e composição contendo a mesma

Info

Publication number: BR112019027701B1
Application number: BR112019027701-3A
Authority: BR
Inventors: Gael Malet; Sylvie Cupferman
Original assignee: L'oreal
Priority date: 2017-06-30
Filing date: 2018-06-27
Publication date: 2023-08-08

Abstract

A invenção se refere a uma mistura antimicrobiana contendo 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil) butan-2-ona e clorfenesina, e também a uma composi-ção cosmética contendo essa mistura. Uso no cuidado, maquiagem e limpeza de materiais de queratina.

Description

[001] A invenção se refere a uma mistura antibacteriana contendo 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona e clorfenesina, e também a uma composição cosmética contendo essa mistura.

[002] A 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona (composto cetona) é uma substância útil como agente conservante para composições cosméticas, para proteger as composições contra contaminação microbiana, conforme descrito no pedido de patente WO 2011/039445.

[003] No entanto, é desejável poder incorporar o referido composto cetona em concentração reduzida em composições, especialmente composições cosméticas ou dermatológicas, mantendo ao mesmo tempo bom desempenho de conservação antimicrobiana. As combinações do composto cetona com outros compostos que têm eficácia antimicrobiana são assim procuradas para este fim.

[004] Os inventores descobriram, inesperadamente, que a combinação de 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil) butan-2-ona com clorfenesina possibilita a obtenção de uma mistura antimicrobiana com atividade antimicrobiana sinérgica, em particular em bolores, especialmente em Aspergillus niger. Os resultados do Exemplo 1 descrito abaixo mostram a atividade antimicrobiana sinérgica obtida com as medidas de concentração inibitória mínima (CIM) realizadas com várias misturas. A atividade antimicrobiana é considerada sinérgica quando a mistura antimicrobiana permite obter uma percentagem de crescimento de cepa menor ou igual a 25%, ou ainda menor ou igual a 20%.

[005] Mais precisamente, um objeto da invenção é uma mistura antimicrobiana compreendendo ou constituída por (ou consistindo em) 4-(3- etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona e clorfenesina.

[006] Um objeto da invenção é também uma composição, especialmente uma composição cosmética ou dermatológica, compreendendo, em um meio fisiologicamente aceitável, a referida mistura descrita anteriormente.

[007] Um objeto adicional da invenção é um processo para o tratamento cosmético não terapêutico de materiais de queratina, compreendendo a aplicação aos materiais de queratina de uma composição conforme descrito acima. O processo pode ser um processo cosmético para o cuidado, a maquiagem ou a limpeza de materiais de queratina.

[008] A 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona é um composto de fórmula: A clorfenesina corresponde ao composto 3-(4-clorofenoxi)-1,2-pro- panodiol (Número CAS: 104-29-0) de fórmula: Vantajosamente, 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona e clorfene- sina estão presentes na referida mistura em um conteúdo tal que a proporção em peso de 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona/clorfenesina varia de 0,1 a 0,9, preferivelmente de 0,1 a 0,7 e preferivelmente de 0,15 a 0,6.

[009] O composto 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona pode estar presente na composição de acordo com a invenção em uma quantidade que varia de 0,01% a 5% em peso em relação ao peso total da composição, preferi-velmente variando de 0,01% a 3% em peso, variando preferivelmente de 0,01% a 2,5% em peso e mais preferivelmente variando de 0,01% a 2% em peso.

[010] Um objeto da invenção é também uma composição com-preendendo, em um meio fisiologicamente aceitável, a mistura antimicrobiana descrita anteriormente.

[011] O termo "meio fisiologicamente aceitável" significa um meio que é compatível com materiais de queratina humana, tais como a pele, o couro cabeludo, o cabelo e as unhas. O referido meio pode compreender um ou mais ingredientes adicionais diferentes do composto cetona e clorfenesina.

[012] A composição pode compreender, pelo menos, um ingrediente adicional escolhido a partir de água, óleos, polióis contendo de 2 a 10 átomos de carbono, agentes gelificantes, tensoativos, polímeros formadores de película, corantes, fragrâncias, enchimentos, agentes de filtro UV, extratos vegetais, agentes ativos cosméticos e dermatológicos, e sais.

[013] A composição de acordo com a invenção pode compreender uma fase aquosa.

[014] A composição pode compreender água, que pode estar presente em uma quantidade variando de 5% a 90% em peso em relação ao peso total da composição e preferivelmente variando de 35% a 75% em peso.

[015] A composição também pode compreender um poliol que é miscível em água à temperatura ambiente (25 °C), especialmente escolhido a partir de polióis contendo especialmente de 2 a 10 átomos de carbono, preferivelmente contendo de 2 a 6 átomos de carbono, tais como glicerol, propilenoglicol, 1,3-propa- nodiol, butilenoglicol, pentilenoglicol, hexilenoglicol, dipropilenoglicol, dietilenoglicol ou diglicerol. Vantajosamente, a composição de acordo com a invenção compreende 1,3-propanodiol, especialmente em um teor variando de 0,1% a 20% em peso, pre-ferivelmente variando de 0,1% a 10% em peso e preferivelmente variando de 0,5% a 5% em peso, em relação ao peso total da composição.

[016] As composições de acordo com a invenção podem estar na forma de emulsões óleo-em-água (O/A), emulsões água-em-óleo (A/O) ou emulsões múltiplas (tripla: A/O/A ou O/A/O), soluções oleosas, géis oleosos, soluções aquosas, géis aquosos, composições sólidas. Estas composições são preparadas de acordo com os métodos usuais.

[017] As composições de acordo com a invenção podem ser mais ou menos fluídas e podem ter a aparência de um creme branco ou colorido, um un-guento, um leite, uma loção, um soro, uma pasta ou uma espuma. Essas podem ser opcionalmente aplicadas à pele em forma de aerossol. Essas também podem estar na forma sólida, por exemplo na forma de um stick ou de um pó compacto.

[018] A composição de acordo com a invenção pode estar espe-cialmente na forma de: - um produto de maquiagem, especialmente para maquiar a pele do rosto, do corpo, dos lábios ou dos cílios; - um gel ou loção pós-barba; um produto de barbear; - um desodorizante (stick, roll-on ou aerossol); - um creme para depilação; - uma composição de higiene corporal, tal como um gel de banho ou um xampu; - uma composição farmacêutica; - uma composição sólida, tal como um sabão ou uma barra de limpeza; - uma composição de aerossol compreendendo também um propulsor pressurizado; - uma loção para pentear, um creme ou gel para modulação do cabelo, uma composição de tingimento, uma composição de ondulação permanente, uma loção ou um gel para combater a queda de cabelo ou um condicionador de cabelo; - uma composição para cuidar ou limpar a pele.

[019] Um objeto da invenção também é um processo para preparar uma composição, especialmente uma composição cosmética ou dermatológica, compreendendo uma etapa de mistura de 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona, clorfenesina e um ou mais ingredientes adicionais, especialmente ingredientes cosméticos ou dermatológicos, como os descritos anteriormente.

[020] A invenção é ilustrada em maior detalhe no exemplo que se segue. As quantidades dos ingredientes são expressas como percentagens em peso.

EXEMPLO 1: DETERMINAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA SINÉRGICA EM CIM NA CEPA MICROBIANA ASPERGILLUS NIGER

[021] A demonstração de um efeito sinérgico da atividade antimi- crobiana com uma mistura de 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona (referida como substância A) e de clorfenesina (referida como substância B) é realizada calculando o índice de sinergia (ou índice FIC) de acordo com a seguinte fórmula Índice FIC = (CIMa com B/CIMa) + (CIMb com A/CIMb) com: - CIMa com B: concentração mínima do produto A na combinação A + B, que permite obter um efeito inibitório. - CIMb com A: concentração mínima do produto B na combinação A + B, que permite obter o efeito inibitório. - CIMa: concentração inibitória mínima do produto A isolado. - CIMb: concentração inibitória mínima do produto B isolado.

[022] Esta fórmula foi descrita pela primeira vez no artigo por F.C. Kull, P.C. Eisman, H.D. Sylwestrowka e R.L. Mayer, Applied Microbiology 9:538541, 1961.

[023] Para cada composto testado isoladamente, a CIM é considerada a primeira concentração que permite obter uma percentagem de crescimento microbiano menor ou igual a 25%.

[024] No que diz respeito às combinações testadas, CIMa com b e CIMb com a são as respectivas concentrações de A e de B nas combinações que permitem obter uma percentagem de crescimento microbiano menor ou igual a 25%.

INTERPRETAÇÃO DO ÍNDICE FIO :

[025] Quando o valor do índice FIC é menor ou igual a 1, considera-se que a combinação de compostos de teste tem um efeito sinérgico.

[026] Os resultados obtidos estão resumidos nas tabelas a seguir.

[027] Utilizou -se a cepa microbiana Aspergillus niger ATCC 6275 e um meio de cultura líquido em caldo Sabouraud de dupla concentração, suplementado com monopalmitato de sorbitano polioxietilenado (20 OE) (Tween 40 de Croda) e foi usado Phytagel© BioReagent (isto é, uma mistura de 5 g de Phytagel + 0,6 g de Tween 40 + 60 g de caldo Sabouraud).

[028] Uma microplaca de 96 poços a uma temperatura de incubação de 32,5 °C é usada.

[029] O tempo de incubação da microplaca é de 24 a 48 horas aerobicamente.

TESTE

[030] Para cada composto: A = composto 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona B = composto clorfenesina

[031] Uma solução de estoque de 10% (peso/volume) foi preparada misturando 1 g do composto em 9 mL de solução de agar aquosa a 1%. Diluições sucessivas foram feitas com a solução de agar a 1%. • Teste dos compostos A e B isolados

[032] 50 μL de cada uma das soluções filhas obtidas contendo o composto A ou B são adicionados aos poços da microplaca. 100 μL de caldo nutritivo liquido Sabouraud inoculado com a cepa de Aspergillus niger e 50 μL de solução de agar aquosa a 1% também são adicionados. • Teste dos compostos A e B como uma mistura

[033] 50 μL de cada uma das soluções filhas obtidas contendo o composto A e 50 μL de cada uma das soluções filhas obtidas contendo o composto B são adicionados aos poços da microplaca. Também são adicionados 100 μL de caldo nutritivo líquido Sabouraud inoculado em dupla concentração com a cepa Aspergillus niger.

CONTROLE DE CRESCIMENTO MICROBIANO

[034] Um controle de crescimento microbiano positivo também foi preparado. O controle de crescimento microbiano positivo corresponde a uma mistura de 100 μL de solução aquosa de ágar a 1% com 100 μL de caldo nutritivo líquido Sabouraud inoculado a uma concentração dupla, com a cepa de Aspergillus niger na ausência de compostos A e B.

CONTROLE DE ABSORVÂNCIA DOS COMPOSTOS A E B ISOLADOS

[035] Um controle de absorvância foi realizado em paralelo apenas nos compostos A e B. Esse controle corresponde a 100 μL de caldo nutritivo líquido Sabouraud estéril de dupla concentração + 100 μL de composto A ou B de concentração dupla.

[036] Nos três casos (controle de absorvância, controle de crescimento e teste), o volume final presente em cada um dos poços da microplaca é de 200 μL.

[037] Nos dois casos (teste e controle), o inóculo representa a con-centração da cepa Aspergillus niger presente no volume final dos poços (200 μL) e está entre 2 e 6x105 ufc/mL de Aspergillus niger.

[038] A concentração inibitória mínima (CIM) de cada composto A e B isoladamente e em combinação foi determinada de uma maneira conhecida por meio de medições de densidade ótica a um comprimento de onda de 620 nm.

[039] Foram obtidos os seguintes resultados:

[040] Os resultados obtidos mostram atividade inibidora sinér- gica para as misturas: i) 0,0625% de A e 0,25% de B, ou seja, razão A/B = 0,25 ii) 0,125% de A e 0,25% de B, ou seja, razão A/B = 0,5

EXEMPLO 2: DETERMINAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DA MISTURA ANTIMICROBIANA

[041] A eficácia antimicrobiana da mistura antimicrobiana de 4- (3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona + clorfenesina (razão de peso respectiva de 0,16) foi avaliada pelo método Teste de Desafio.

PROTOCOLO

[042] O método do teste de desafio consiste na contaminação artificial da amostra com cepas microbianas da coleta (bactérias, leveduras e bolores) e na avaliação do número de microrganismos revivificáveis sete dias após a inoculação.

[043] Para demonstrar o efeito da mistura antimicrobiana, a atividade antimicrobiana de uma formulação cosmética contendo 0,05% de 4-(3- etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona e 0,3% de clorfenesina foi comparada com a mesma fórmula apenas (controle), após inoculação com cerca de 106 ufc (unidades formadoras de colônias)/grama de formulação cosmética.

FORMULAÇÃO COSMÉTICA

[044] Foi preparada uma emulsão de óleo em água para cuidados faciais com a seguinte composição (conteúdo em percentagens em peso): Triestearato de sorbitano (Span 65 V de Croda ) 0,9% Mistura de gliceril mono/diestearato (36/64)/estearato de potássio (Tegin Pellets de Goldschmidt) 3% Estereato de polietilenoglicol (40 unidades de óxido de etileno) 2% 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona 0,05% clorfenesina 0,3% Propano-1,3-diol 3 % Mistura de óleo mineral, cera microcristalina e parafina (Vaseline Blanche Codex 236 de Aiglon) 4% Fração líquida de manteiga de karité (Shea Olein de Olvea) 1% Ciclopentadimetilsiloxano 5% Álcool cetílico 4% Óleo de semente de damasco 0,3% Poli-isobuteno hidrogenado (Parleam de NOF Corporation) 7,2% Miristato de miristilo 2% Ácido esteárico 1,2% Cafeína 0,1% Ácido cítrico 0,2% Glicerol 3% Hidróxido de sódio 0,05% Água qs 100%

[045] Formulação de controle A: Formulação semelhante à anterior contendo 0,05% de 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona e sem clorfenesina (0,3% compensada com água)

[046] Formulação de controle B: Formulação semelhante contendo 0,3% de clorfenesina e sem 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona (0,05% compensado com água) CULTURAS DE MICRORGANISMOS

[047] Foram utilizadas 5 culturas puras de microrganismos ATCC = American Type Culture Collection

[048] As cepas de bactérias gram-negativas (Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa), bactérias gram-positivas (Enterococcus faecalis), le-vedura (Candida albicans) e bolor (Aspergillus niger) são inoculadas no meio de subcultura, respectivamente no dia anterior à inoculação para bactérias e leveduras e 5 dias antes da inoculação para o bolor.

[049] No dia da inoculação: - é preparada uma suspensão em diluente de sal de triptona, res-pectivamente, para as bactérias e a levedura, de modo a obter por espectrofotô- metro uma suspensão com uma densidade ótica entre 35% e 45% da luz transmitida a 544 nm; - para o bolor, os esporos são coletados lavando o ágar com 6 a 7 mL de solução de colheita e a suspensão é recuperada em um tubo ou balão estéril.

[050] Após a homogeneização da suspensão microbiana, 0,2 mL de inóculo são introduzidos em cada frasco de comprimidos (as suspensões são usadas puras: entre 1x108 e 3xio8 ufc por mL) e a suspensão microbiana nos 20 g de produto (= cosmético) é homogeneizada completamente usando uma espátula.

[051] O conteúdo dos microrganismos presentes no produto cor-responde, após homogeneização, a uma concentração de 106 microrganismos por grama de produto, isto é, inoculação a 1% de um inóculo contendo 108 mi-crorganismos por mL.

[052] Após 7 dias de tempo de contato entre os microrganismos e o produto a 22 °C ± 2 °C e no escuro, são realizadas diluições de dez vezes e o número de microrganismos revivificáveis restantes no produto é contado. RESULTADOS <200 UFC: limiar de sensibilidade do método

Claims

1. MISTURA ANTIMICROBIANA, caracterizada por compreender 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona e clorfenesina.

2. MISTURA, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por compreender 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona e clorfenesina em quantidades tais que a razão em peso de 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona/clorfene- sina varia de 0,1 a 0,9, preferivelmente varia de 0,1 a 0,7 e preferivelmente varia de 0,15 a 0,6.

3. MISTURA, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 2, caracterizada por apresentar atividade antimicrobiana em bolores, em particular em Aspergillus niger.

4. COMPOSIÇÃO, caracterizada por compreender, em um meio fi- siologicamente aceitável, uma mistura antimicrobiana, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 3.

5. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 4, caracterizada por compreender pelo menos um ingrediente adicional escolhido a partir de água, óleos, polióis contendo de 2 a 10 átomos de carbono, agentes gelificantes, tensoativos, polímeros formadores de película, corantes, fragrâncias, enchimentos, agentes de filtro UV, extratos vegetais, agentes ativos cosméticos e dermatológicos, e sais.

6. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4 a 5, caracterizada por 4-(3-etoxi-4-hidroxifenil)butan-2-ona estar presente em um conteúdo que varia de 0,01% a 5% em peso em relação ao peso total da composição, preferivelmente variando de 0,01% a 3% em peso, e preferivelmente variando de 0,01% a 2,5% em peso.