BR112019019145A2 - proteínas de ligação a carboidrato sequestrante de glicopolímeros - Google Patents

Abstract

a invenção se refere a polímeros compreendendo ligandos e frações de carboidrato, respectivamente, que ligan a proteínas de ligação a carboidrato (cbps), assim como a estes ligandos de carboidrato e a seu uso em diagnose e terapia de doenças que são associadas a citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediada por cbp. em particular, a invenção se refere a polímeros compreendendo uma multiplicidade dos referidos ligandos e frações de carboidrato, respetivamente, imitando carboidratos que são ligados por cbps que pertencem ao grupo de (i) exotoxinas bacterianas, (ii) aglutininas e (iii) imunoglobulinas de formação de depósito de complexo imune. mais ainda, a invenção se refere ao uso desses polímeros e ligandos e frações de carboidrato, respectivamente, em diagnóstico, assim como para o tratamento de doenças que são associadas à citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediada por cbp. em uma modalidade, o polímero é polilisina.

Description

PROTEÍNAS DE LIGAÇÃO A CARBOIDRATO SEQUESTRANTE DE GLICOPOLÍMEROS

Campo de invenção [001] A invenção se refere a ligantes e frações de carboidratos. respectivamente, que ligam a proteínas de ligação a carboidrato (CBPs), polímeros compreendendo estes ligantes de carboidratos e ao seu uso no diagnóstico e na terapia de doenças que estão associadas à citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediados por CBP.

Fundamentos da invenção [002] Proteínas de ligação a carboidrato (CBPs) são caracterizadas por ligação seletiva de estruturas específicas de carboidratos. As CBPs são onipresentes, assim, podem ser encontradas em humanos, animais, micróbios, plantas e fungos, onde elas promovem interações de superfície (por exemplo, interações célula-célula, matriz-célula, célula-macromolécula, macromoléculamacromolécula). As CBPs geralmente promovem funções de adesão, mas também podem estar envolvidas em funções de sinalização. Por meio de seus domínios de reconhecimento de carboidrato (CRDs), elas decifram o glicocódigo que é composto pela ampla diversidade de carboidratos que cobre células (glicocálice), um número substancial de macromoléculas (glicosilação) ou que estão presentes na matriz extracelular. Uma característica comum de interações binárias CBP-carboidrato é a baixa afinidade de ligação, geralmente na faixa micromolar e meias-vidas dissociativas curtas, geralmente na faixa de segundos. A baixa afinidade e as meias-vidas dissociativas curtas dos complexos binários CBP-carboidrato é muitas vezes superada pela interação multivalente. Carboidratos e CBPs desempenham papéis críticos em condições fisiológicas, mas também em condições patológicas. (Holgersson et al., Immunol Cell Biol. 2005, 83, 694-708; B. Ernst e J. Magnani, 2009, 8, 661-677)

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2/157 [003] Três tipos de CBPs particularmente relevantes para a doença são (i) exotoxinas bacterianas, (ii) aglutininas e (iii) imunoglobulinas formadoras de depósitos de complexo imune.

(i) Exotoxinas bacterianas [004] Infecções severas são causadas por bactérias que secretam CBPs que funcionam como exotoxinas bacterianas. As CBPs interagem com os carboidratos de superfície de célula hospedeira e, desse modo, promovem fixação de toxina. O evento de fixação é geralmente seguido por um mecanismo que leva à citotoxicidade e elevada virulência em células hospedeiras. Exemplos dessas exotoxinas bacterianas com propriedades de ligação a carboidrato são toxina Shiga (Shigella dysenteriae e outras cepas Shigella), toxina tipo Shiga/vero toxina (Escherichia coli), toxina cholera (Vibrio cholerae), enterotoxina lábil a calor (Escherichia coli enterotoxigênica/ toxina A (Clostridium difficile), toxina botulínica (Clostridium botulinum), toxina tetânica (Clostridium tetani) e toxina pertussis secretada por Bordetella pertussis. Todas essas toxinas pertencem ao grupo de toxinas AB, isto é, toxinas ABs heterohexaméricas (toxina Shiga, toxina tipo Shiga/vero toxina, toxina cholera, enterotoxina lábil a calor, toxina pertussis), além disso as toxinas AB binárias (toxina tetânica, toxina botulínica, toxina A). A subunidade A é responsável por uma função enzimática que leva a danos ou destruição de células hospedeiras, ao passo que a subunidade B é responsável por ligação de receptor de carboidrato na superfície da célula hospedeira e subsequente internalização de toxina na célula hospedeira (J. W. Wilson, Postgrad Med J. 2002, 78, 216-224; J.D. Esko. N. Sharon, Microbial Lectins: Hemagglutinins, Adhesins, and Toxins. In: A. Varki, R. D. Cummings, J. D. Esko, et al., editors. Essentials of Glycobiology. 2^a edição. Cold Spring Harbor (NY): Cold Spring Harbor Laboratory Press; 2009. Capítulo 34. Disponível de: https:^W:.ncbLninL.njh_;.goy/books/NBK19077).

[005] As estruturas de carboidratos ligadas pelas diferentes subunidades de exotoxina B são, por exemplo, o gangliosídeo GM1 (toxina cholera e enterotoxina

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3/157 lábil a calor), o glicolípido Gb3 (toxina Shiga), os gangliosídeos GT1b e GQ1b (toxina botulínica) e o gangliosídeo GT1b (toxina tetânica) (J.D. Esko, N. Sharon, Microbial Lectins: Hemagglutinins, Adhesins, and Toxins. In: A. Varki, R. D. Cummings, J. D. Esko, et al., editors. Essentials of Glycobiology. 2^a edição. Cold Spring Harbor (NY): Cold Spring Harbor Laboratory Press; 2009. Capítulo 34. Disponível de: https://w^jiob[.nh;n.njh.goy/bookg/NBKI 907/). A subunidade B da toxina pertussis reconhece Neu5Ac(a2-6)Gal(31-4)GlcNAc e Neu5Ac(a23)Gal(31-4)GlcNAc contendo oligossacarídeos (S. H. Millen etal., Biochemistry, 2010. 49(28). 5954-5967), ao passo que a toxina A de Chlostridium difficile reconhece o trissacarídeo B linear Gal(a1-3)Gal(31-4)GlcNAc. mas também o Gal(a1-43)GlcNAc estruturalmente relacionado que contém antígenos de Lewis, por exemplo, antígenos de Lewis X e Y (C.-Y. Yeh et al., Infect Immun, 2008, 76(3), 1170-1178).

(ii) Aglutininas [006] As aglutininas são imunoglobulinas que ligam antígenos de carboidratos em glóbulos vermelhos e, desse modo, causam aglutinação de glóbulos vermelhos em pacientes. Essa aglutinação pode ser de etiologia autoimune ou a causa de um transplante/transfusão incompatível. Os carboidratos mais relevantes ligados por aglutininas são parte do sistema ABH, o sistema I e o P. As aglutininas causam distúrbios diferentes, tal como doença de aglutinina fria (CAD) que está associada à aglutinina do sistema anti-l ou hemoglobinúria fria paroxística (PCH) que está associada à aglutinina do sistema anti-P (S. Berentsen and T. Sundic, Transfus Med Hemother, 2015, 42(5): 303-310). Complicações de incompatibilidade em transplantes ou transfusões estão frequentemente relacionadas à incompatibilidade no sistema de antígeno de carboidrato ABH e são mediadas por agluttininas anti-A e anti-B (Holgersson et al., Immunol Cell Biol. 2005, 83, 694-708). As aglutininas dirigidas contra o antígeno de carboidrato Tn (ou sialil-Tn) estão associadas a um distúrbio chamado síndrome da poliaglutinação de Tn, um distúrbio caracterizado pela aglutinação de eritrócitos pelas imunoglobulinas que ligam o antígeno de Tn

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4/157 (GalNAc) e sialil-Tn (Neu5Ac(a2-6)GalNAc) em eritrócitos. Este antígeno é exposto na superfície de eritrócito apenas sob condições patológicas e está ligado à atividade prejudicada da T-sintetase (C1GALT1) nesta síndrome (V. K. Crew et aí, BrJ Haematol, 2008, 142(4):657-667.

(iii) Imunoglobulinas formadoras de complexo imune [007] Distúrbios incapacitantes são causados por formação de complexo imune por imunoglobulinas criadas contra antígenos de carboidratos em outras imunoglobulinas. Os complexos imunes formados são depositados em tecidos, tal como rim. onde eles causam inflamação e danos aos tecidos. Nefropatia de IgA (também conhecida como nefrite de IgA ou doença de Berger ou glomerulonefrite sinfaringítica) e vasculite de IgA (também conhecida como Púrpura HSP de Henoch Schõnlein) são exemplos desses distúrbios e são caracterizadas por depósitos de complexo imune de IgA mesangial nos glomérulos. Ambos os distúrbios estão ligados a imunoglobulinas que reconhecem imunoglobulinas de lgA1 mal glicosiladas deficientes de galactose, onde o antígeno de Tn (GalNAc) e antígeno de sialil-Tn (Neu5Ac(a2-6)GalNAc) são expostos sob condições fisiopatológicas. As imunoglobulinas que reconhecem o antígeno de Tn ou sialil Tn são principalmente do isotipo IgG ou IgA. mas também podem ser do isotipo IgM (B. Knoppova et aí, Front Immunol, 2016, 7, 117).

Sumário da invenção [008] A invenção se refere a polímeros compreendendo ligantes e frações de carboidratos, respectivamente, que ligam a proteínas de ligação a carboidrato (CBPs), assim como a estes ligantes de carboidratos e ao seu uso no diagnóstico e na terapia de doenças que estão associadas à citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediado por CBP. Em particular, a invenção se refere a polímeros compreendendo uma multiplicidade dos referidos ligandos e frações de carboidratos, respectivamente, imitando carboidratos que são ligados por CBPs que pertencem ao grupo de (i) exotoxinas bacterianas, (ii) aglutininas e (iii) imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune.

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Além disso, a invenção se refere ao uso destes polímeros e ligandos e frações de carboidrato, respectivamente, em diagnóstico, bem como para o tratamento de doenças que estão associadas com citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediadas por CBP.

[009] Assim, a presente invenção, em particular, fornece um polímero compreendendo uma multiplicidade de um composto, em que o referido composto compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z, e em que a referida fração de carboidrato imita, ou alternativamente e preferencialmente é, um glicoepítopo que é ligado por CBPs com propriedades citotóxicas, aglutinantes ou formadoras de depósito de complexo imune.

[010] Os polímeros, compostos e as composições da presente invenção, portanto, fornecem novos tratamentos de doenças e distúrbios associados e causados por exotoxinas bacterianas, aglutininas e imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune por neutralização in vitro seletiva e sequestro e remoção, respectivamente, destas exotoxinas bacterianas, aglutininas e imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune usando os referidos polímeros, compostos e composições inventivos, em particular usando os referidos, preferivelmente biodegradáveis, polímeros da presente invenção.

[011] Em particular, o bloqueio da adesão das subunidades B de exotoxina aos carboidratos da superfície celular hospedeira com os polímeros, compostos e composições inventivos permite o tratamento de infecções causadas por, por exemplo, Shigella dysenteriae, e, assim, tratamento de shigelose, disenteria bacilar, síndrome de Marlow e síndrome hemolítica-urêmica (HUS), por Escherichia coli (enterotoxigênica) e, assim, tratamento de diarréia dos viajantes, por Vibrio cholerae e, asim, tratamento da cólera, por Clostridium difficile, por Clostridium botulinum e, assim, tratamento debotulinismo por Clostridium tetani e, assim, tratamento de tétano e por Bordetella pertussis e, assim, tratamento de tosse convulsa ou coqueluche.

[012] Assim, em um primeiro aspecto, a presente invenção fornece um polímero compreendendo uma multiplicidade de um composto, em que o referido

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6/157 composto compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z, e em que a referida fração de carboidrato imita um glicoepítopo reconhecido por uma proteína de ligação a carboidrato (CBP), em que a referida CBP é selecionada de uma exotoxina bacteriana, uma aglutinina e uma imunoglobulina formadora de depósito de complexo imune e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P(CH2)q-Y, em que Xé 0 ou N(R^a);

R^a é H, Ci-4-alquil, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

A é Ci-7alquileno, OCi-7alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi4alquileno, OCi-7alquileno-R^b ou R^b-Ci-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

B é NHC(O) ou S;

pé 0 ou 1;

q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, ou 3;

Yé SH, N₃ ou NH₂; e em que o referido ligante Z é ligado covalentemente através de seu grupo -X à extremidade redutora da referida fração de carboidrato; e em que a referida multiplicidade do referido composto é conectada à espinha dorsal do polímero por meio do referido ligante Z e em que a referida conexão é efetuada através do grupo Y do referido ligante Z; e em que o referido composto não é ho?^h

o

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7/157 quando a referida espinha dorsal de polímero é poli-L-lisina.

[013] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero compreendendo uma multiplicidade de um composto, em que o referido composto compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z, e em que a referida fração de carboidrato imita um glicoepítopo reconhecido por uma proteína de ligação a carboidrato (CBP), em que a referida CBP é selecionada de uma exotoxina bacteriana, uma aglutinina e uma imunoglobulina formadora de depósito de complexo imune e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P(CH2)q-Y, em que

Xé O ou N(R^a);

R^a é H, Ci-4-alquil, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

A é Ci-7alquileno, OCi-?alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi4alquileno, OCi-?alquileno-R^b ou R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

B é NHC(O) ou S;

pé 0 ou 1;

q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, ou 3;

Yé SH, N₃ ou NH₂; e em que o referido ligante Z está ligado covalentemente através do seu grupo -X à extremidade redutora da referida fração de carboidrato; e em que a referida multiplicidade do referido composto está conectada à espinha dorsal do polímero por meio do referido ligante Z e em que a referida conexão é efetuada através do grupo Y do referido ligante Z convertendo o referido grupo Y do referido ligante Z em *-S-, uma fração triazolil ou *-NH-, em que a referida fração triazolil N---N

4/ A—* é preferencialmente , em que *-corresponde à ligação à fração (CH2)q

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8/157 do referido ligante Z e em que - corresponde à conexão do referido *-S-, uma fração triazolil ou *-NH- à espinha dorsal do polímero; e em que o referido composto não é

quando a referida espinha dorsal de polímero é poli-L-lisina.

[014] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero compreendendo uma multiplicidade de um composto, em que o referido composto compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z, e em que a referida fração de carboidrato imita um glicoepítopo reconhecido por uma proteína de ligação a carboidrato (CBP), em que a referida CBP é selecionada de uma exotoxina bacteriana, uma aglutinina e uma imunoglobulina formadora de depósito de complexo imune e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P(CH2)q-Y, em que Xé O ou N(R^a);

R^a é H, Ci-4-alquil, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

A é Ci-7alquileno, OCi-?alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi4alquileno, OCi-?alquileno-R^b ou R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

B é NHC(O) ou S;

pé 0 ou 1;

q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, ou 3;

Yé SH, N₃ ou NH₂; e

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9/157 em que o referido ligante Z é ligado covalentemente através de seu grupo -X à extremidade redutora da referida fração de carboidrato; e em que a referida multiplicidade do referido composto é conectada à espinha dorsal do polímero por meio do referido ligante Z e em que a referida conexão é efetuada através do grupo Y do referido ligante Z; e em que o referido composto não é

HO oh

HO ^OH

OH

HO I O

O'

HO

O'

HO

N (CH2)₃

OH

AcHN (CH2)3 ^XSH

O quando a referida espinha dorsal de polímero é poli-L-lisina; e em que o referido composto não é um composto compreendendo uma fração de carboidrato e um ligante Z, em que a referida fração de carboidrato imita um glicoepítopo compreendido por um glicoesfingolipídeo do sistema nervoso, em que o referido ligante Z é -N(R^a)-A-B-CH2-(CH2)q-SH, em que R^a é H, Ci4alquil, Ci-C4-alcóxi, CH2C6H5. CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5; A é Ci-7alquileno, C-i-Cy-alcóxi, Ci-4alquil-(OCH2CH2)_PO-Ci-4alquil ou Ci-C7-alcóxiR^b, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído, e em que p é de 0 a 6, de preferência, p é 1, 2 ou 3, e ainda mais preferivelmente p é 1; B é NHC(O), S ou CH2; q é de 0 a 6, preferencialmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda preferencialmente q é 1 ou 2; e em que o referido ligante Z está ligado covalentemente através do seu grupo -N(R^a) à extremidade redutora da referida fração de carboidrato.

[015] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero compreendendo uma multiplicidade de um composto, em que o referido composto compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z, e em que a referida fração de carboidrato imita um glicoepítopo reconhecido por uma proteína de ligação a carboidrato (CBP), em que a referida CBP é selecionada

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10/157 de uma exotoxina bacteriana, uma aglutinina e uma imunoglobulina formadora de depósito de complexo imune e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P(CH2)q-Y, em que

Xé OouN(R^a);

R^a é H, Ci-4-alquil, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou

OCH2CH2C6H5;

A é Ci-7alquileno, OCi-7alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi4alquileno, OCi-7alquileno-R^b ou R^b-Ci-7alquileno, em que R^b é urn aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

B é NHC(O) ou S;

pé 0 ou 1;

q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, ou 3;

Yé SH, N₃ ou NH₂; e em que o referido ligante Z está ligado covalentemente através do seu grupo -X à extremidade redutora da referida fração de carboidrato; e em que a referida multiplicidade do referido composto está conectada à espinha dorsal do polímero por meio do referido ligante Z e em que a referida conexão é efetuada através do grupo Y do referido ligante Z convertendo o referido grupo Y do referido ligante Z em *-S-, uma fração triazolil ou *-NH-, em que a referida fração triazolil

N----N

4/ \—* é preferencialmente , em que *-corresponde à ligação à fração (CH2)q do referido ligante Z e em que - corresponde à conexão do referido *-S-, uma fração triazolil ou *-NH- à espinha dorsal do polímero; e em que o referido composto não é

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11/157 ho^oh

HO^OH

HO (CH₂)₃

AcHN (CH2)₃ γ ^XSH

O quando a referida espinha dorsal de polímero é poli-L-lisina; e em que o referido composto não é um composto compreendendo uma fração de carboidrato e um ligante Z, em que a referida fração de carboidrato imita um glicoepítopo compreendido por um glicoesfingolipídeo do sistema nervoso, em que o referido ligante Z é -N(R^a)-A-B-CH2-(CH2)q-SH, em que R^a é H, Ci4alquil, Ci-C4-alcóxi, CH2C6H5. CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5; A é Ci-7alquileno, C-i-Cy-alcóxi, Ci-4alquil-(OCH2CH2)_PO-Ci-4alquil ou Ci-C7-alcóxiR^b, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído, e em que p é de 0 a 6, de preferência, p é 1, 2 ou 3, e ainda mais preferivelmente p é 1; B é NHC(O), S ou CH2; q é de 0 a 6, preferencialmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda preferencialmente q é 1 ou 2; e em que o referido ligante Z está ligado covalentemente através do seu grupo -N(R^a) à extremidade redutora da referida fração de carboidrato.

[016] Na presente invenção e, em particular, quando se referindo a todo e qualquer dos aspectos e toda e qualquer das modalidades dos polímeros inventivos, ou seus usos, e quando por meio deste se referindo ao grupo Y do ligante Z sendo SH, N3 ou NH2, será entendido que o referido grupo Y do referido ligante Z dentro dos referidos polímeros está presente como *-S-, uma fração triazolil ou *-NH-, em que a referida fração triazolil é preferencialmente , em que *- corresponde à ligação à fração (CH2)q do referido ligante Z, e em que - corresponde à conexão do referido *-S-, uma fração triazolil ou *-NH- à espinha dorsal do polímero.

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A referida fração triazolil sendo preferencialmente a referida

selecionado de (i)

, ou uma mistura de (i) e (ii) em qualquer razão, mais preferencialmente

e novamente mais preferencialmente

em que *- corresponde à ligação à fração (CH2)q do referido ligante Z, e em que - corresponde à conexão da referida fração triazolil à espinha dorsal do polímero.

[017] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero que compreende uma multiplicidade de um composto, em que o referido composto compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z, e o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) ou fórmula (IV).

em que a fórmula (I) é

em que R¹² é H ou Z;

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13/157 em que, quando R¹¹ é H, então, R¹² é Z; e quando R¹¹ não é H, então, R¹² é H; e, assim, R¹¹ e R¹² não podem er ambos H e R¹¹ e R¹² não podem ser ambos Z;

e em que R¹³ é H ou

HOOH

em que a fórmula (II) é

^RH1 (II), em que R¹¹¹ é Z ou

em que R² é H ou

HO e em que R³ é H ou Me; em que a fórmula (III) é

OH OH em que R¹¹¹¹ é H ou Z ou

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14/157

em que R^IH2 é H ou Z;

em que quando R¹¹¹¹ é H, então, R^IH2 é Z; e quando R¹¹¹¹ não é H, então, R^IH2 é H; e assim, R¹¹¹¹ e R¹² não podem ser ambos H e R¹¹¹¹ e R¹² não podem ser ambos Z;

em que R¹¹¹³ e R¹¹¹⁸ são independentemente H ou

HO

em que quando R¹¹¹¹ não é então, R¹³ é H;

em que R¹¹¹⁴ é H ou

hoOH		HO OH	^o		ho_^h		CO2Na
AcHNJ_	OU	HoX-~	HOj^	OU	AcHN-^J>-7 HO	Ό'

em que quando R¹¹¹⁴ não é H, então, R¹¹¹⁸ é H;

em que R¹¹¹³ é H, então, R¹¹¹⁴ é H em que R¹¹¹⁵ é H ou

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15/157

então, R¹¹¹¹ é Η, Z ou em que quando R¹⁴ ou R¹¹¹⁵ é

e R¹³ e R¹¹¹⁸ são H;

em que R¹¹¹⁶ é H ou Z ou

OU em que R¹¹¹⁷ é H ou Z;

OH em que quando R¹¹¹⁶ é H, então, R¹¹¹⁷ é Z e quando R¹¹¹⁶ não é H, então, R¹¹¹⁷ é H; e assim, R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos H e R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos

Z;

em que R¹¹¹⁹ é H ou Z ou

em que m é 1 a 3;

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16/157 em que quando R^IH9 é são H;

, então, R'³, R'⁴, R^lll5eR¹¹¹⁸

R^lll1° é H ou em que

em que a fórmula (IV) é

OH

RIV1 (iv) em que R^IV1 é

OH

ou

OH

OH

So

Z

OH em que R^IV2 e R^IV4 são independentemente H ou

HO em que R^IV3 é H ou

HOOH HOOH HOOH

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17/157 [018] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero que compreende uma multiplicidade de um composto, em que o referido composto compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z, e o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) ou fórmula (IV).

em que a fórmula (I) é

em que R¹¹ é H ou Z ou

OH OH

em que R¹² é H ou Z;

em que, quando R¹¹ é H, então, R¹² é Z; e quando R¹¹ não é H, então, R¹² é H; e, assim, R¹¹ e R'² não podem ser ambos H e R¹¹ e R¹² não podem ser ambos Z;

e em que R¹³ é H ou

HOOH

em que a fórmula (II) é

^RH1 (II), em que R¹¹¹ é Z ou

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18/157

em que R² é H ou

e em que R³ é H ou Me; em que a fórmula (III) é

em que R¹¹¹¹ é H ou Z ou

em que R^IH2 é H ou Z;

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19/157 em que quando R¹¹¹¹ é H, então, R¹² é Z; e quando R¹¹¹¹ não é H, então, R¹² é H; e assim, R¹¹¹¹ e R¹² não podem ser ambos H e R¹¹¹¹ e R¹² não podem ser ambos

Z;

em que R¹¹¹³ e R¹¹¹⁸ são independentemente H ou

HO

em que quando R¹¹¹¹ não é

OH

então, R^IH3 é H;

em que R^IH4 é H ou hoOH hoOH

em que quando R¹⁴ não é H, então, R¹¹¹⁸ é H;

em que R¹¹¹³ é H, então, R¹¹¹⁴ é H em que R¹¹¹⁵ é H ou

HO

^HO , então, R¹¹¹¹ é Η, Z ou em que quando R¹¹¹⁴ ou R¹¹¹⁵ é

em que R¹¹¹⁶ é H ou Z ou e R¹³ e R¹¹¹⁸ são H;

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20/157

OU em que R^IH7 é H ou Z;

em que quando R^IH6 é H, então, R^IH7 é Z e quando R^IH6 não é H, então, R^IH7 é H; e assim, R¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos H e R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos

Z;

em que R¹¹¹⁹ é H ou Z ou

em que m é 1 a 3;

Rimo

AcHN em que quando R¹⁹ é ^m , então, R¹¹¹³, R¹¹¹⁴, R¹¹¹⁵ e R¹¹¹⁸ são H;

em que R^lll1° é H ou

em que a fórmula (IV) é

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21/157

(iv) em que R^IV1 é

em que R^IV2 e R^IV4 são independentemente H ou

em que quando o referido composto é um composto de fórmula (IV), então, o referido ligante Z não é

-N(R^a)-A-B-CH2-(CH2)q-SH, em que R^a é H, Ci-C4-alquil, Ci-C4-alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5; A é Cwalquileno, C1-C7alcóxi, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rO-Ci-4alquileno ou Ci-C7-alcóxi-R^b, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heeroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferivelmente r é 1, 2 ou 3 e, ainda mais preferivelmenet, r é 1; B é NHC(O), S ou CH2; q é de 0 a 6, preferivelmente q é 1,2, 3 ou 4 e, ainda mais preferivelmente, q é 1 ou 2.

[019] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um composto compreendendo uma fração de carboidrato e um ligante Z, em que a referida

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22/157 fração de carboidrato imita um glicoepítopo reconhecido por uma proteína de ligação a carboidrato (CBP), em que a referida fração de carboidrato imita um glicoepítopo reconhecido por uma proteína de ligação a carboidrato (CBP), em que a referida CBP é selecionada de uma exotoxina bactehana, uma aglutinina e uma imunoglobulina formadora de depósito de complexo imune, e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O ou N(R^a); R^a é H, Ci4alquiI, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5; A é C1yalquileno, OCi-?alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno, OC1?alquileno-R^b ou R^b-Ci-?alquileno em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído, e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1,2 ou 3 e, ainda preferencialmente, r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e, ainda preferencialmente, q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2; e em que o referido ligante Z está ligado covalentemente através do seu grupo -X à extremidade de redução da referida fração de carboidrato.

[020] Além disso, a invenção se refere a polímeros terapeuticamente aceitáveis, preferencialmente biodegradáveis compreendendo uma multiplicidade de substituintes derivados dos compostos inventivos, em que os referidos compostos estão conectados à referida espinha dorsal do polímero por meio do ligante Z e, opcionalmente, por um espaçador, e em que a conexão é efetuada através da fração Y do ligante Z.

[021] Assim, em outro aspecto, a presente invenção fornece um polímero compreendendo uma multiplicidade dos compostos inventivos, em que os referidos compostos são conectados à espinha dorsal do polímero por meio do referido ligante Z e em que a referida conexão é efetuada através do grupo Y do referido ligante Z.

[022] A invenção também se refere a composições farmacêuticas compreendendo os polímeros e compostos inventivos, respectivamente, kits de diagnóstico contendo estes e ao uso destes compostos para o diagnóstico e a

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23/157 terapia de infecções bacterianas, distúrbios de aglutinação e distúrbios associados a depósito de complexo imune.

[023] Assim, em outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica compreendendo o referido polímero inventivo ou compreendendo o referido composto inventivo, preferencialmente o referido composto inventivo da fórmula (I) ou da fórmula (II) ou da fórmula (III) ou da fórmula (IV).

[024] Em outro aspecto, a presente invenção fornece o referido composto inventivo, preferencialmente o referido composto inventivo de fórmula (I) ou fórmula (II), ou de fórmula (III), ou de fórmula (IV), ou o referido polímero inventivo, de preferência, compreendendo o referido composto, ou a referida composição farmacêutica inventiva para uso em um método para tratar (i) uma infecção bacteriana em que preferencialmente a referida infecção bacteriana é causada por exotoxinas bacterianas secretadas por cepas de Shigella, tipicamente e preferencialmente, S. disenteria, Escherichia coli, Vibrio cholerae, Clostridium difficile, Clostridium botulinum, Clostridium tetani, Bordetella pertussis; ii) um distúrbio de aglutinação, em que preferencialmente o referido distúrbio de aglutinação é causado por aglutininas aglutininas anti-A, aglutininas anti-B, aglutininas do sistema anti-l, aglutininas do sistema anti-P, agluttininas anti-Tn, agluttininas anti-sialil-Tn; e (iii) um distúrbio causado por imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune, em que preferencialmente as referidas imunoglobulinas reconhecem glicoepítopos em outras imunoglobulinas ou em que preferencialmente o referido distúrbio causado por imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune é causado por imunoglobulinas que ligam ao antígeno Tn e sialil-Tn em outras imunoglobulinas selecionadas de IgG, IgA, IgM.

[025] Em outro aspecto, a presente invenção fornece o referido composto inventivo, preferencialmente o referido composto inventivo de fórmula (I), ou fórmula (II), ou de fórmula (III), ou de fórmula (IV), ou o referido polímero inventivo, ou a referida composição farmacêutica inventiva para uso em um

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24/157 método de diagnóstico de uma doença associada à citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediada por CBP.

[026] Em outro aspecto, a presente invenção fornece um kit de diagnóstico compreendendo o referido composto inventivo, preferencialmente, o referido composto inventivo da fórmula (I), ou da fórmula (II), ou da fórmula (III), ou da fórmula (IV) ou o referido polímero inventivo.

[027] Em outro aspecto, a presente invenção fornece o uso do referido composto inventivo, preferencialmente o referido composto inventivo de fórmula (I), ou fórmula (II), ou de fórmula (III), ou de fórmula (IV), ou o referido polímero inventivo para o diagnóstico de uma doença associada à citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediada por CBP.

[028] Em outro aspecto, a presente invenção fornece um uso do referido composto inventivo, preferivelmente o referido composto inventivo de fórmula (I), ou fórmula (II), ou de fórmula (III), ou de fórmula (IV), ou o referido polímero inventivo para a fabricação de um medicamento para o tratamento de (i) uma infecção bacteriana em que preferencialmente a referida infecção bacteriana é causada por cepas de Shigella (por exemplo, S. disenteria), Escherichia coli, Vibrio cholerae, Clostridium difficile, Clostridium botulinum, Clostridium tetani, Bordetella pertussis; (ii) um distúrbio de aglutinação, em que preferencialmente o referido distúrbio de aglutinação é causado por aglutininas anti-A, aglutininas anti-B, aglutininas do sistema anti-l, aglutininas do sistema anti-P, agluttininas anti-Tn, agluttininas anti-sialil-Tn; e (iii) um distúrbio causado por imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune, em que preferencialmente o referido distúrbio é neuropatia de IgA, vasculite de IgA.

[029] Em outro aspecto, a presente invenção fornece um método de tratamento de uma doença ou um distúrbio associado à citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediada por CBP, em que o referido método compreende administrar o referido composto inventivo, preferencialmente o referido composto inventivo de fórmula (I), ou fórmula (II), ou de fórmula (III), ou de fórmula (IV), ou do ou o referido polímero inventivo em

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25/157 uma quantidade eficaz contra a referida doença ou o referido distúrbio, a um animal de sangue quente, preferencialmente a um humano, exigindo tal tratamento.

[030] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero de acordo com a presente invenção, um composto de acordo com a presente invenção ou uma composição farmacêutica de acordo com a presente invenção para uso em um método de tratamento de uma doença ou um distúrbio, em que a referida doença ou o referido distúrbio é selecionado de uma infecção bacteriana, um distúrbio de aglutinação ou um distúrbio causado por depósitos de complexo imune e em que preferencialmente a referida doença ou o referido distúrbio é selecionado de shigelose, disenteria bacilar, síndrome de Marlow, síndrome hemolítico-urêmica (HUS), diarréia dos viajantes, cólera, infecção por Clostridium difficile, botulinismo, tétano, coqueluche ou tosse convulsa, transplante/transfusão incompatível com ABH, doença de agluttinina fria, hemoglobinúria fria paroxística, síndrome da polaglutinabilidade de Tn, nefropatia de IgA (também conhecida como nefhte de IgA ou doença de Berger, ou glomerulonefhte sinfahngítica) ou vasculite de IgA (também conhecida como Púrpura de Henoch Schõnlein (HSP).

[031] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero ou uso em um método de tratar uma doença ou um distúrbio, em que a referida doença ou o referido distúrbio é selecionado de uma infecção bacteriana, um distúrbio de aglutinação ou um distúrbio causado por depósitos de complexo imune, preferencialmente uma infecção bacteriana, e em que preferivelmente a referida doença ou o referido distúrbio é selecionado de shigelose, disenteria bacilar, síndrome de Marlow, síndrome hemolítico-urêmica (HUS), diarréia dos viajantes, cólera, infecção por Clostridium difficile, botulinismo, tétano, coqueluche ou tosse convulsa, transplante/transfusão incompatível com ABH, doença de agluttinina fria, hemoglobinúria fria paroxística, síndrome da polaglutinabilidade de Tn, nefropatia de IgA (também conhecida como nefrite de

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26/157

IgA ou doença de Berger, ou glomerulonefrite sinfaringítica) ou vasculite de IgA (também conhecida como Púrpura de Henoch Schõnlein (HSP); e em que o referido polímero compreende uma multiplicidade de um composto, em que o referido composto compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z e em que a referida CBP é selecionada de uma endotoxina bacteriana, uma aglutinina e uma imunoglobulina formadora de dep'soito de complexo imune e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)_q-Y, em que

Xé O ou N(R^a);

R^a é H, Ci-4-alquil, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

Aé Ci-7alquileno, OCi-?alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi4alquileno, OCi-?alquileno-R^b ou R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

B é NHC(O) ou S;

pé 0 ou 1;

q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, 2 ou 3;

Yé SH, N₃ouNH₂;e em que o referido ligante Z é ligado covalentemente através de seu grupo -X à extremidade redutora da referida fração de carboidrato; e em que a referida multiplicidade do referido composto é conectada à espinha dorsal do polímero por meio do referido ligante Z e em que a referida conexão é efetuada através do grupo Y do referido ligante Z.

[032] Em um aspecto adicional e modalidade preferida do polímero inventivo para uso de acordo com a presente invenção, o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) ou fórmula (IV), em que a fórmula (I) é

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27/157 ho?^h (I), em que R¹¹ é H ou Z ou

OH oh z o

HO em que R¹² é H ou Z;

em que, quando R¹¹ é H, então, R¹² é Z; e quando R¹¹ não é H, então, R¹² é H; e, assim, R¹¹ e R¹² não podem er ambos H e R¹¹ e R¹² não podem ser ambos Z;

e em que R¹³ é H ou

HOOH

NHAc em que a fórmula (II) é

AcHN |

RII1 em que R¹¹¹ é Z ou o ,^RI13

ΓΉ Z hn γ o

em que R¹¹² é H ou

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28/157

e em que R³ é H ou Me; em que a fórmula (III) é

em que R¹¹¹¹ é H ou Z ou

em que R^IH2 é H ou Z;

em que quando R¹¹¹¹ é H, então, R^IH2 é Z; e quando R¹¹¹¹ não é H, então, R^IH2 é H; e assim, R¹¹¹¹ e R¹² não podem ser ambos H e R¹¹¹¹ e R¹² não podem ser ambos Z;

em que R¹¹¹³ e R¹¹¹⁸ são independentemente H ou

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29/157

HO

RIHS' em que quando R¹¹¹¹ não é

então, R^IH3 é H;

em que R^IH4 é H ou

em que quando R^IH4 não é H, então, R^IH8 é H;

em que R^IH3 é H, então, R^IH4 é H em que R^IH5 é H ou

HO

em que quando R¹⁴ ou R¹¹¹⁵ é ^HO , então, R¹¹¹¹ é Η, Z ou

em que R¹⁶ é H ou Z ou

em que R¹¹¹⁷ é H ou Z;

Petição 870190118384, de 14/11/2019, pág. 36/168

30/157 em que quando R¹⁶ é H, então, R¹¹¹⁷ é Z e quando R¹¹¹⁶ não é H, então, R¹¹¹⁷ é H; e assim, R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos H e R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos Z;

em que R¹¹¹⁹ é H ou Z ou

em que m é 1 a 3;

Rimo

AcHN em que quando R^IH9 é ^m , então, R^IH3, R^IH4, R^IH5 e R^IH8 são H;

em que R^lll1° é H ou

em que a fórmula (IV) é

em que R^IV1 é (iv)

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31/157

OH OH

em que R^IV2 e R^IV4 são independentemente H ou

HO em que R^IV3 é H ou

HOOH HOOH HOOH

[033] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero que compreende uma multiplicidade de um composto, em que o referido composto compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z, e o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) ou fórmula (IV).

em que a fórmula (I) é

em que R¹² é H ou Z;

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32/157 em que, quando R¹¹ é H, então, R¹² é Z; e quando R¹¹ não é H, então, R¹² é H; e, assim, R¹¹ e R¹² não podem er ambos H e R¹¹ e R¹² não podem ser ambos Z;

e em que R¹³ é H ou

HOOH

em que a fórmula (II) é

^RH1 (II), em que R¹¹¹ é Z

o

em que R² é H ou

HO e em que R³ é H ou Me; em que a fórmula (III) é

em que R¹¹¹¹ é H ou Z ou

OH OH

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33/157

em que R^IH2 é H ou Z;

em que quando R¹¹¹¹ é H, então, R^IH2 é Z; e quando R¹¹¹¹ não é H, então, R^IH2 é H; e assim, R¹¹¹¹ e R¹² não podem ser ambos H e R¹¹¹¹ e R¹² não podem ser ambos Z;

em que R¹¹¹³ e R¹¹¹⁸ são independentemente H ou

HO

em que quando R¹¹¹¹ não é então, R¹³ é H;

em que R¹¹¹⁴ é H ou

HO^OH HOOH

OH

em que quando R¹¹¹⁴ não é H, então, R¹¹¹⁸ é H;

em que R¹¹¹³ é H, então, R¹¹¹⁴ é H em que R¹¹¹⁵ é H ou

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34/157

OH

HO qh COoNa

AcHN

HO

HO

CO?Na

OH OH

AcHN

HO em que quando R¹⁴ , então, R¹¹¹¹ é Η, Z ou

R¹⁵ θ ou

RIII8-

Ri³ _e R¹⁸ são Η;

em que

R¹¹¹⁶ é H ou Z ou

OU

R¹¹¹⁷ é H ou Z;

z OH em que em que quando R¹¹¹⁶ é H, então, R¹¹¹⁷ é Z e quando R¹¹¹⁶ não é H, então, R¹¹¹⁷ é H; e assim, R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos H e R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos Z;

em que R¹¹¹⁹ é H ou Z ou

em que m é 1 a 3;

OU

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35/157 em que quando R^IH9 é são H;

, então, R'³, R'⁴, R^lll5eR¹¹¹⁸

R^lll1° é H ou em que

em que a fórmula (IV) é

OH

RIV1 (iv) em que R^IV1 é

OH

OH

OH ou /

z

OH em que R^IV2 e R^IV4 são independentemente H ou

HO em que R^IV3 é H ou

HOOH HOOH HOOH

[034] Aspectos e modalidades adicionais da presente invenção se tomarão aparentes à medida que esta descrição continuar. Todas as modalidades,

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36/157 modalidades preferidas e modalidades muito preferidas aqui descritas se aplicam a todo e qualquer aspecto da presente invenção aqui descrita, embora nem sempre repetido explicitamente.

Breve Descrição ds Figuras [035] FIG. 1a,b: Ensaio de ligação competitiva com uma agluttinina anti-sangue grupo A (BGA). Os poços revestidos com antígeno de sangue grupo A (BGA) foram coincubados com o polímero de carboidrato 9 (FIG: 1a - concentração mais alta de 0,5 mM) ou polímero de carboidrato 32 (FIG: 1b -1 mM de concentração mais alta) e agluttinina anti-BGA a uma diluição de 1:100. Os polímeros 9 e 32 são polímeros de polilisina (média de 400 unidades de lisina de repetição) com uma porcentagem definida de resíduos de lisina acoplados a antígenos de carboidrato tipo sangeu grupo A. A abreviação geral usada é a seguinte: PL (glicoepítopo)x com x definindo a porcentagem de carregamento de glicoepítopo em %. Neste caso, os polímeros são PL(BGA)68 e PL(BGA)35.

[036] FIG. 2: Ensaio de ligação competitiva com uma agluttinina anti-sangue grupo B (BGB). Os poços revestidos com antígeno de sangue grupo B (BGB) foram coincubados com o polímero de carboidrato 35 (concentração mais alta de 1 mM) e agluttinina anti-BGA a uma diluição de 1:10. O polímero 35 é um polímero de polilisina (média de 400 unidades de de lisina de repetição) com 25% (PL(BGB)2s) de resíduos de lisina acoplados ao antígeno de carboidrato de sangue do grupo B.

[037] FIG. 3a,b: Ensaio de ligação competitiva com a subunidade B da toxina do tipo Shiga 1. Os poços revestidos com Gb3 foram coincubados com os polímeros de carboidratos 5, 6 (FIG: 3a - epítopo Gb3) e 23 (FIG: 3b - mimético do epítopo Gb3) (concentração mais alta de 500 μΜ) e subunidade B da toxina tipo Shiga 1 a uma concentração de 2 pg/ml. Polímeros 5, 6, e 23 são polímeros de polilisina (média de 400 unidades de lisina de repetição) com 25% (PL(Gb3)2s), 40% (PL(Gb3)4o) e 42% (PL(Gb3 mimético)42) de resíduos de lisina acoplados ao Gb3 ou ao epítopo de carboidrato mimético Gb3.

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37/157 [038] FIG. 4: Ensaio de ligação competitiva com a subunidade B da toxina do cólera. Os poços revestidos com gangliosídeo GM1 foram coincubados com o polímero de carboidrato 59 (10 μΜ de concentração mais alta) e conjugado de subunidade B de toxina do cólera-HRP a uma concentração de 0,5 pg/ml. 0 polímero 59 é um polímero de polilisina (média de 400 unidades de lisina de repetição) com 28% (PL(GM1)28) de resíduos de lisina acoplados ao epítopo de carboidrato GM1.

[039] FIG. 5: Ensaio de ligação com IgM anti-Tn. Os poços foram revestidos com o polímero de carbiidrato 38 (50,0 pg/ml de concentração mais alta) e incubados com IgM anti-Tn a uma diluição de 1:700. O polímero 38 é um polímero de polilisina (média de 400 unidades de lisina de repetição) com 25% (PL(Tn)2s) de resíduos de lisina acoplados ao epítopo de Tn.

[040] FIG. 6: Ensaio de viabilidade de célula Vero com toxina tipo Shiga 2. Células Vero que expressam o receptor de Gb3 foram incubadas por 48 h com toxina tipo Shiga 2 sozinha (concentrações de 0,00001 a 100 pg/ml) ou coincubadas com toxina tipo Shiga 2 e os polímeros 5 ou 23 a uma concentração de 30 pg/ml). A viabilidade celular foi medida com o ensaio CellTiter Blue®. Os polímeros 5 e 23 são polímeros de polilisina (média de 400 unidades de lisina de repetição) com 25% (PL(Gb3)2s) e 42% (PL(mimético de Gb3)42) de resíduos de lisina acoplados ao epítopo de carboidrato mimético de Gb3 ou Gb3.

Descrição detalhada da invenção [041 ] A invenção se refere a ligantes e frações de carboidrato, respectivamente, que imitam glicoepítopos reconhecidos por proteínas de ligação a carboidrato (CBPs), em que a referida CBP é selecionada de uma exotoxina bacteriana, uma aglutinina e uma imunoglobulina formadora de depósito de complexo imune e, particularmente, glicoepítopos compreendidos por glicolipídeos, tal como os tipos globo e gânglio; glicoantígenos de glóbulos vermelhos; e o glicoantígeno Tn e sialil-Tn. A invenção se refere ainda ao uso desses ligandos/frações de carboidrato em diagnóstico, bem como para o tratamento de doenças associadas à citotoxicidade, aglutinação ou formação de complexo imune

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38/157 mediada por CBP. A invenção se refere ainda ao uso desses ligandos/frações de carboidrato em diagnóstico, bem como para o tratamento de doenças associadas à citotoxicidade, aglutinação ou formação de complexo imune mediada por CBP. Em particular, a invenção se refere a compostos de fórmula (I), (II), (III), (IV) e a polímeros terapeuticamente aceitáveis compreendendo uma multiplicidade destes compostos, incluindo polímeros com carregamento de compostos de fórmula (I), ou (II), ou (III), ou (IV).

[042] Os compostos da presente invenção e, em particular, os compostos da presente invenção de fórmula (I), (II), (III) ou (IV), reconhecem CBPs com propriedades citotóxicas, aglutinantes ou formadoras de depósito de complexo imune, em particular glicoepítopos compreendidos por glicolipídeos, tal como os tipos globo e gânglio; glicoantígenos de glóbulos vermelhos e os glicoantígenos de Tn e sialil-Tn. Os ligandos de carboidrato contêm ligantes que permitem acoplamento a uma espinha dorsal de polímero para apresentação multivalente. Os glicopolímeros resultantes do acoplamento são superiores no sequestro de CBPs em comparação com os respectivos monômeros de glicano. Os glicopolímeros são agentes de diagnóstico ou terapêuticos adequados para detectar e ligar CBPs, em particular associadas a propriedades citotóxicas, aglutinantes ou formadoras de depósito de complexo imune.

[043] Assim, em um aspecto, a presente invenção fornece um polímero compreendendo uma multiplicidade de um composto, em que o referido composto compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z, e em que a referida fração de carboidrato imita um glicoepítopo reconhecido por uma proteína de ligação a carboidrato (CBP), em que a referida CBP é selecionada de uma exotoxina bacteriana, uma aglutinina e uma imunoglobulina formadora de depósito de complexo imune e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P(CH2)q-Y, em que Xé O ou N(R^a);

R^a é H, Ci-4-alquil, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

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39/157

A é Ci-7alquileno, OCwalquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi4alquileno, OCi-7alquileno-R^b ou R^b-Ci-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

B é NHC(O) ou S;

pé 0 ou 1;

q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, ou 3;

Yé SH, N₃ ou NH₂; e em que o referido ligante Z é ligado covalentemente através de seu grupo -X à extremidade redutora da referida fração de carboidrato; e em que a referida multiplicidade do referido composto é conectada à espinha dorsal do polímero por meio do referido ligante Z e em que a referida conexão é efetuada através do grupo Y do referido ligante Z; e em que o referido composto não é

o quando a referida espinha dorsal de polímero é poli-L-lisina; e em que o referido composto não é um composto compreendendo uma fração de carboidrato e um ligante Z, em que a referida fração de carboidrato imita um glicoepítopo compreendido por um glicoesfingolipídeo do sistema nervoso, em que o referido ligante Z é -N(R^a)-A-B-CH2-(CH2)q-SH, em que R^a é H, Ci4alquil, Ci-C4-alcóxi, CH2C6H5. CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5; A é Cwalquileno, Ci-C7-alcóxi, Ci-4alquil-(OCH2CH2)_PO-Ci-4alquil ou Ci-C7-alcóxiR^b, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído, e em que p é de 0 a 6, de preferência, p é 1, 2 ou 3,

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40/157 e ainda mais preferivelmente p é 1; B é NHC(O), S ou CH2; q é de 0 a 6, preferencialmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda preferencialmente q é 1 ou 2; e em que o referido ligante Z está ligado covalentemente através do seu grupo -N(R^a) à extremidade redutora da referida fração de carboidrato.

[044] Numa modalidade preferida, o referido glicoepítopo reconhecido pelas CBPs é seleccionado de glicolipídeos, tal como os tipos globo e gânglio; glicoantígenos de glóbulos vermelhos; os glicoantígenos de Tn e sialil-Tn. Em outra modalidade preferida, os referidos glicoepítopos reconhecidos pelas CBPs são um globosídeo, em que preferencialmente o referido globosídeo é selecionado de Gb3, Gb4. Em uma modalidade preferida adicional, os referidos glicoepítopos reconhecidos por CBPs são um glicoantígeno de glóbulos vermelhos, em que preferencialmente o referido antígeno é selecionado do antígeno A, antígeno B, antígeno I, antígeno P, antígeno Lewis^a, antígeno Lewis^b, antígeno Lewis^x, antígeno Lewis^y. Em uma modalidade preferida adiciona, os referidos glicoepítopos reconhecidos por CBPs são o antígeno de Tn e o antígeno de sialil-Tn. Em uma modalidade preferida adicional, os referidos glicoepítopos reconhecidos por CBPs são um gangliosídeo, em que preferencialmente o referido gangliosídeo é selecionado deGMIa, GM1b, asialo GM1, GD1a, GD1b, GT1a, GT1b, GQ1b, asialo GM2, GM2, GD2, GM3, GD3.

[045] Em uma modalidade preferida da presente invenção, o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) ou fórmula (IV), em que a fórmula (I) é

em que R¹¹ é H ou Z ou

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41/157

em que R¹² é H ou Z;

em que, quando R¹¹ é H, então, R¹² é Z; e quando R¹¹ não é H, então, R¹² é H; e, assim, R¹¹ e R¹² não podem er ambos H e R¹¹ e R¹² não podem ser ambos Z;

e em que R¹³ é H ou

HOOH

em que a fórmula (II) é

^RH1 (II), em que R¹¹¹ é Z

o

em que R² é H ou

HO e em que R³ é H ou Me; em que a fórmula (III) é

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42/157

em que R¹¹¹¹ é H ou Z ou

OH OH

em que R¹² é H ou Z;

em que quando R¹¹¹¹ é H, então, R¹² é Z; e quando R¹¹¹¹ não é H, então, R¹² é H;

e assim, R¹¹¹¹ e R^IH2 não podem ser ambos H e R¹¹¹¹ e R^IH2 não podem ser ambos

Z;

em que R¹³ e R¹¹¹⁸ são independentemente H ou

HO

em que quando R¹¹¹¹ não é

então, R^IH3 é H;

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43/157 em que R¹⁴ é H ou

HO em que quando R¹¹¹⁴ não é H, então, R¹¹¹⁸ é H;

em que R¹¹¹³ é H, então, R¹¹¹⁴ é H em que R¹¹¹⁵ é H ou

HO

em que quando R¹¹¹⁴ ou R¹¹¹⁵ é ^HO , então, R¹¹¹¹ é Η, Z ou

em que R^IH6 é H ou Z ou

em que R¹⁷ é H ou Z;

em que quando R¹¹¹⁶ é H, então, R¹¹¹⁷ é Z e quando R¹¹¹⁶ não é H, então, R¹¹¹⁷ é H; e assim, R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos H e R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos

Z;

em que R¹¹¹⁹ é H ou Z ou

OU

OH ou

Petição 870190118384, de 14/11/2019, pág. 50/168

44/157

a 3;

em que m é 1

, então, R'³, R'⁴, R'⁵ e R'⁸ são H;

R^lll1° é H ou em que

em que a fórmula (IV) é

OH

RIV1 (iv) em que R^IV1 é

OH

ou

OH

OH

So

Z

OH em que R^IV2 e R^IV4 são independentemente H ou

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45/157 em que hoQH

R^IV3 é H ou ο

ΗΟ

NHAc

HO OH ou

RIV4-O hoQH ο

ο

OH

NHAc * quando o referido composto é um e em que tipicamente e preferivelmente, composto de fórmula (V), então, o referido ligante Z não é -N(R^a)-A-B-CH2(CH2)q—SH, em que R^a é H, Ci-C4-alquil, Ci-C4-alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5,

OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5; A é Ci-7alquileno, C-i-Cy-alcóxi, Cwalquileno(OCH2CH2)rO-Ci-4alquileno ou Ci-C7-alcóxi-R^b, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heeroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferivelmente r é 1, 2 ou 3 e, ainda mais preferivelmenet, r é 1; B é NHC(O), S ou CH2; q é de 0 a 6, preferivelmente q é 1,2, 3 ou 4 e, ainda mais preferivelmente, q é 1 ou 2.

[046] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I), em que a fórmula (I) é

^Rl2 (I), em que R¹¹ é H ou Z ou

OH OH

em que R¹² é H ou Z;

em que, quando R¹¹ é H, então, R¹² é Z; e quando R¹¹ não é H, então, R¹² é H; e, assim, R¹¹ e R¹² não podem er ambos H e R¹¹ e R¹² não podem ser ambos Z;

e em que R¹³ é H ou

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46/157

HOOH

[047] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (II), em que a fórmula (II) é

^RH1 (II), em que R¹¹¹ é Z ou

V o ,R³ NHMe ^ou

O

em que R¹¹² é H ou

HO e em que R¹¹³ é H ou Me;

[048] E uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (III), em que a fórmula (III) é

em que R¹¹¹¹ é H ou Z ou

OH OH

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47/157

em que R^IH2 é H ou Z;

em que quando R¹¹¹¹ é H, então, R^IH2 é Z; e quando R¹¹¹¹ não é H, então, R^IH2 é H; e assim, R¹¹¹¹ e R¹² não podem ser ambos H e R¹¹¹¹ e R¹² não podem ser ambos Z;

em que R¹¹¹³ e R¹¹¹⁸ são independentemente H ou

HO

em que quando R¹¹¹¹ não é então, R¹³ é H;

em que R¹¹¹⁴ é H ou ho°^h hoOH

OH

em que quando R¹¹¹⁴ não é H, então, R¹¹¹⁸ é em que R¹¹¹³ é H, então, R¹¹¹⁴ é H em que R¹¹¹⁵ é H ou

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48/157

OH

HO qh COoNa

AcHN

HO

HO

CO?Na

OH OH

AcHN

HO em que quando R¹⁴ , então, R¹¹¹¹ é Η, Z ou

R¹⁵ θ ou

RIII8-

Ri³ _e R¹⁸ são Η;

em que

R¹¹¹⁶ é H ou Z ou

OU

R¹¹¹⁷ é H ou Z;

z OH em que em que quando R¹¹¹⁶ é H, então, R¹¹¹⁷ é Z e quando R¹¹¹⁶ não é H, então, R¹¹¹⁷ é H; e assim, R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos H e R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos Z;

em que R¹¹¹⁹ é H ou Z ou

em que m é 1 a 3;

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49/157 em que quando R^IH9 é são H;

em que R^lll1° é H ou puno

AcHN então, R'³, R'⁴, R^lll5eR¹¹¹⁸

[049] E uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (III), em que a fórmula (III) é

em que R¹¹¹¹ é H ou Z ou

OH OH

Petição 870190118384, de 14/11/2019, pág. 56/168

50/157 em que R¹² é H ou Z;

em que quando R¹¹¹¹ é H, então, R¹² é Z; e quando R¹¹¹¹ não é H, então, R¹² é H;

e assim, R¹¹¹¹ e R^IH2 não podem ser ambos H e R¹¹¹¹ e R^IH2 não podem ser ambos

Z;

em que R¹³ e R¹¹¹⁸ são independentemente H ou

HO

OH

em que quando R¹¹¹¹ não é

OH

então, R^IH3 é H;

em que R¹⁴ é H ou

em que quando R¹¹¹⁴ não é H, então, R¹¹¹⁸ é H;

em que R¹¹¹³ é H, então, R¹¹¹⁴ é H em que R¹¹¹⁵ é H ou

HO

^HO , então, R¹¹¹¹ é Η, Z ou em que quando R¹¹¹⁴ ou R¹¹¹⁵ é

em que R^IH6 é H ou Z ou e R^IH3 e R^IH8 são H;

Petição 870190118384, de 14/11/2019, pág. 57/168

51/157

OU

R¹⁷ é H ou Z;

z OH em que em que quando R¹¹¹⁶ é H, então, R¹¹¹⁷ é Z e quando R¹¹¹⁶ não é H, então, R¹¹¹⁷ é H; e assim, R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos H e R¹¹¹⁶ e R¹¹¹⁷ não podem ser ambos Z;

em que R¹¹¹⁹ é H ou Z ou

em que m é 1 a 3;

Rimo

AcHN em que quando R¹⁹ é ^m , então, R¹¹¹³, R¹¹¹⁴, R¹¹¹⁵ e R¹¹¹⁸ são H;

em que R^lll1° é H ou

[050]

Em uma modalidade preferida adiciona, o referido composto é um composto de fórmula (IV), em que a fórmula (IV) é

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(iv) em que R^IV1 é

em que R^IV2 e R^IV4 são independentemente H ou

HO em que R^IV3 é H ou

HOOH HOOH HOOH

[051] Em uma modalidade preferida adiciona, o referido composto é um composto de fórmula (IV), em que a fórmula (IV) é

oh (|V) em que R^IV1 é

OH OH

em que R^IV2 é

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53/157

HOOH em que R^IV3 é

HOOH

RIV4-0

Ο ο

OH

NHAc ‘ ou em que R^IV4 é H

CO?Na

ho ^OH

HO··

AcHN

HO

OU

preferida adiciona, o [052] Em uma modalidade composto de fórmula (IV), em que a fórmula (IV) é referido composto é um

OH

RIV1 (iv) em que R^IV1 é

OH

OU

OH

So

OH z OH em que R^IV2 é

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54/157

em que R^IV3 é hoOH hoOH d IV4-0 O — ^K OH NHAc em que R^IV4 é H

HO em que quando R^IV2 é aNeu5Ac, então, R^IH4 é H; e quando R^IV2 é Neu5Ac(a28a)Neu5Ac, então, R^IV4 é aNeu5Ac ou Neu5Ac(a2-8a)Neu5Ac;

[053] Em uma modalidade preferida adicional, a referida exotoxina bacteriana é uma Toxina AB, em que preferencialmente a referida toxina AB é uma toxina AB binária ou uma toxina ABs heterohexamérica. De preferência, a referida toxina AB binária é toxina do tétano, toxina botulínica ou toxina A. Preferivelmente, a referida toxina ABs heterohexamérica é toxina Shiga, toxina tipo Shiga/vero toxina, toxina do cólera, enterotoxina lábil a calor ou toxina pertussis. Em uma modalidade preferida adicional, a referida exotoxina bacteriana é selecionada de toxina do tétano, toxina botulínica, toxina A, toxina Shiga, toxina tipo Shiga/vero toxina, toxina do cólera, enterotoxina lábil a calor ou toxina pertussis, em que ainda de preferência a referida exotoxina bacteriana é toxina Shiga ou toxina tipo Shiga/vero toxina.

[054] Em uma modalidade preferida adicional, a referida aglutinina é uma imunoglobulina aglutinadora de glóbulos vermelhos que liga preferencialmente a

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55/157 glicoepítopos do sistema ABH, e em que preferencialmente a referida imunoglobulina aglutinadora de glóbulos vermelhos reconhece os glicoantígenos do sistema ABH, sistema l/i ou/e o sistema P. Em uma modalidade preferida adicional, a referida aglutinina reconhece os gicoepítopos A, B, Η, I ou P.

[055] Em uma modalidade preferida adicional, a referida imunoglobulina formadora de depósito de complexo imune é uma imunoglobulina que reconhece um ou mais glicoepítopos em outras imunoglobulinas e em que preferencialmente a referida imunoglobulina formadora de depósito de complexo imune é uma imunoglobulina que reconhece um ou mais glicoepítopos em IgG, IgA e IgM.

[056] Numa modalidade preferida, os referidos glicoepítopos reconhecidos por CBPs são selecionados de glicolipídeos, tal como os tipos globo e gânglio; glicoantígenos de glóbulos vermelhos; os glicoantígenos de Tn e sialil-Tn. Em outra modalidade preferida, os referidos glicoepítopos reconhecidos pelas CBPs são um globosídeo, em que preferencialmente o referido globosídeo é selecionado de Gb3, Gb4. Em uma modalidade preferida adicional, os referidos glicoepítopos reconhecidos por CBPs são um glicoantígeno de glóbulos vermelhos, em que preferencialmente o referido antígeno é selecionado do antígeno A, antígeno B, antígeno I, antígeno P, antígeno Lewis^a, antígeno Lewis^b, antígeno Lewis^x, antígeno Lewis^y. Em uma modalidade preferida adiciona, os referidos glicoepítopos reconhecidos por CBPs são o antígeno de Tn e o antígeno de sialil-Tn. Em uma modalidade preferida adicional, os referidos glicoepítopos reconhecidos por CBPs são um gangliosídeo, em que preferencialmente o referido gangliosídeo é selecionado deGMIa, GM1b, asialo GM1, GD1a, GD1b, GT1a, GT1b, GQ1b, asialo GM2, GM2, GD2, GM3, GD3.

[057] O escopo da presente invenção compreende frações de carboidratos que imitam glicoepítopos compreendidos pelo antígeno sialil-Tn e pelos gangliosídeos. Os compostos preferidos que mimetizam glicoepítopos compreendidos por gangliosídeos de acordo com a presente invenção são compostos da fórmula (II), (III) e (IV) como aqui definidas, em que pelo menos

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56/157 uma das frações de ácido siálico é substituída por uma fração de substituição, tal como mostrado e definido na fórmula (Ha) ou na fórmula (llb)

AcHN HO

COoNa

OU

CO₂Na _RII4 (Ha) (llb) em que para a referida fração de substituição da fórmula (llb), R⁴ é H, Ci-salquil, Ci-8alquenil, Ci-salquinil, aril, aril substituído, em que preferencialmente a referida substituição do referido aril é por halogênio, Ci-salcóxi, Ci-salquil; heteroaril, heteroaril substituído, em que preferencialmente a referida substituição do referido hetereoaril é por halogênio, Ci-salcóxi, Ci-salquil; arilalquil, arilalquil substituído, em que preferencialmente a referida substituição do referido arilalquil é por halogênio, Ci-salcoxi, Ci-salquil; heteroarilalquil, heteroahlalquil substituído, em que preferencialmente a referida substituição do referido heteroarilalquil é por halogênio, Ci-salcóxi, Ci-salquil; cicloalquil, í-butil, adamantil, triazolil, todos os quais substituídos independentemente por Ci salquil, aril, heteroaril, halogênio.

[058] Em outra modalidade preferida, o referido composto é um composto de qualquer uma das fórmulas 3*, 8*, 22*, 26*, 31*, 34*, 37*, 45*, 47*-58* como representado abaixo.

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57/157

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58/157

HOOH

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59/157

o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que

Xé 0 ou N(R^a);

R^a é H, Ci-4alquil, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

Aé Ci-7alquileno, OCi-7alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi4alquileno, OCi-7alquileno-R^b ou R^b-Ci-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

B é NHC(O) ou S;

pé 0 ou 1;

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60/157 q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, 2 ou 3;

Yé SH, N₃ ou NH₂; e em que o referido ligante Z é ligado covalentemente através de seu grupo -X à extremidade redutora da referida fração de carboidrato; e em que a referida multiplicidade do referido composto é conectada à espinha dorsal do polímero por meio do referido ligante Z e em que a referida conexão é efetuada através do grupo Y do referido ligante Z.

[059] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de 3*, 22* ou 57*. Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de 26*, 37*, 49* ou 58*. Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de 26*, 37*, 56* ou 58*. Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de qualquer uma das fórmulas 8*, 31*, 34*, 37*, 45*, 47*, 50*-56*, 58*. Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de qualquer uma das fórmulas 8*, 31*, 34*, 45*, 47*, 49*-55*. Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de qualquer uma das fórmulas 3*, 8*, 22*, 26*, 31*, 34*, 37* e 48*. Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula 48*.

[060] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula 45*, 49*, 48* ou 56*, em que pelo menos uma das frações de ácido siálico é substituída por uma fração de substituição, como mostrado e definido na fórmula (Ha) ou na fórmula (llb)

em que para a referida fração de substituição da fórmula (llb), R⁴ é H, Ci-salquil, Ci-8alquenil, Ci-ealquinil, aril, aril substituído, em que preferencialmente a referida

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61/157 substituição do referido aril é por halogênio, Ci-salcóxi, Ci-salquil; heteroaril, heteroaril substituído, em que preferencialmente a referida substituição do referido hetereoaril é por halogênio, Ci-salcóxi, Ci-salquil; arilalquil, arilalquil substituído, em que preferencialmente a referida substituição do referido arilalquil é por halogênio, Ci-salcoxi, Ci-salquil; heteroarilalquil, heteroahlalquil substituído, em que preferencialmente a referida substituição do referido heteroarilalquil é por halogênio, Ci-salcóxi, Ci-salquil; cicloalquil, í-butil, adamantil, triazolil, todos os quais substituídos independentemente por Cisalquil, aril, heteroaril, halogênio.

[061] Em uma modalidade preferida do referido ligante Z, X é N(R^a); R^a é H, Ci4alquiI, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5, ou OCH2CH2C6H5; A é C1yalquileno, OCi-?alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rO-Ci-C4-alquileno, OC1?alquileno-R^b ou R^b-Ci-?alquileno, em que R^bé um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2.

[062] Em uma modalidade preferida adicional, o referido X é N(R^a) e o referido R^aé H, CH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, CH(CH₃)2, OCH3, OCH2CH3, OCH2CH2CH3, CH2C6H5, OCH2C6H5; e o referido A é O(CH₂)r, (CH₂)r, CH2CH2(OCH₂CH2)r, (OCH₂CH2)r, O(CH2)rC₆H5, C₆H5(CH2)r.

[063] Em uma modalidade preferida adicional, o referido X é N(R^a), o referido R^a é CH3 ou OCH3; o referido A é O(CH₂)r, (CH₂)r, CH2(OCH₂CH2)rOCH2, (OCH2CH2)rOCH₂CH2Ou O(CH₂)rC6H₅; e o referido B é NHC(O).

[064] Em uma modalidade preferida adicional, o referido X é N(R^a), o referido R^a é CH₃; A é O(CH₂)r, (OCH2CH2)rOCH₂CH2Ou O(CH₂)rC6H₅; e B é NHC(O) ou S. Preferivelmente, quando B é S e A é (CH2)rCH2, então, q é de 1 a 5, preferivelmente 1,2 ou 3.

[065] Em uma modalidade preferida adicional, o referido X é N(R^a), o referido R^a é CH3 ou OCH3; A é O(CH₂)r, (CH₂)r, CH2(OCH₂CH2)rOCH2,

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62/157 (OCH2CH2)rOCH₂CH2 ou O(CH₂)rC6H₅; B é NHC(O) ou S; e q é de 1 a 5, preferivelmente 1,2 ou 3, preferivelmente 2 ou 3.

[066] Em outra modalidade preferida adicional, o referido X é N(R^a); R^a é H, CH₃, CH2CH3, CH2CH2CH3, CH(CH₃)2, OCH3, OCH2CH3, OCH2CH2CH3, CH2C6H5, OCH2C6H5; A ÍS O(CH₂)r, (CH₂)r, CH2CH2(OCH₂CH2)r, (OCH₂CH2)r, O(CH2)rC₆H5, C₆H5(CH2)r; B é NHC(O) ou S; p é de 0 ou 1; q é d 0 a 6, preferivelmente q é de 0 a 4 e ainda preferivelmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2.

[067] Em outra modalidade preferida adicional, o referido X é N(R^a); e o referido R^a é CH3 ou OCH3; A é O(CH₂)r, (CH₂)r, CH2(OCH₂CH2)rOCH2, (OCH2CH2)rOCH₂CH2 ou O(CH₂)rC6H₅; e B é NHC(O) ou S. Preferivelmente, quando B é S, e A é (CH2)r, então, q é de 1 a 5, preferivelmente 1, 2 ou 3.

[068] Em uma modalidade preferida adicional do referido ligante Z o referido X é O; A é Ci-7alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou R^b-Ciyalquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; e em que preferivelmente p é 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2.

[069] Em uma modalidade preferida adicional o referido X é O, A é Ci-?alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 1, q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 1 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 1,2 ou 3.

[070] Em uma modalidade preferida adicional o referido X é O; A é R^b-Ciyalquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1, q é de 0 a 6,

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63/157 preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é O, 2 ou 3; Y é SH, N₃ou NH2.

[071] Em uma modalidade preferida adicional o referido X é O; A é R^b-Ciyalquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 1, q é de 1 a 6, preferencialmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda mais preferencialmente q é 1, 2 ou 3; Yé SH, N₃ou NH2.

[072] Em uma modalidade preferida adicional do referido ligante Z, o referido X é O; A é (CH₂)r, CH2CH2(OCH₂CH2)r, C6H₅(CH2)_r; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferivelmente q é de 0 a 4, e ainda preferivelmente q é 0, 2 ou 3; Yé SH, N₃ou NH2.

[073] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II) ou fórmula (III) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é N(R^a); R^a é H, C-i-4-alquil, Ci-4-alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5; A é Cwalquileno, OC17alquileno Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno, OCi-7alquileno-R^b, ou R^bCi-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N₃ou NH2.

[074] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II) ou fórmula (III) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é N(R^a); R^a é H, C-i-4-alquil, Ci-4-alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5; A é Cwalquileno, OC17alquileno Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno, OCi-7alquileno-R^b, ou R^bCi-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3

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64/157 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, Ns ou NH2. Ainda mais preferivelmente, o referido composto é um composto de fórmula 3*, 22* ou 58*. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 3* ou um composto de fórmula 22*.

[075] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (II) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é N(R^a); R^a é H, C-i-4-alquil, Ci-4-alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5; A é Ci-7alquileno, OCi-?alquileno Ci-4alquileno(OCH2CH2)rOCi-4alquileno, OCi-?alquileno-R^b, ou R^b-Ci-?alquileno, em que R^bé um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26*, 37*, 49*, 58*. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26*, 37*, 56*, 58*. Novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26* ou um composto de fórmula 37*.

[076] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) ou fórmula (IV) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é Ci-?alquileno, C14alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1,2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2.

[077] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) ou fórmula (IV) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é Ci-?alquileno, C14alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril

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65/157 opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1,2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 1; q é de 1 a 6, preferencialmente q é 1,2, 3 ou 4 e ainda mais preferencialmente q é 1,2 ou 3; Y é SH, Ns ou NH2.

[078] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) ou fórmula (IV) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N₃ou NH2.

[079] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) ou fórmula (IV) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 1; q é de 1 a 6, preferencialmente q é 1,2, 3 ou 4 e ainda mais preferencialmente q é 1, 2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2. [080] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (II) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26*, 37*, 49*, 58*. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26*, 37*, 56*, 58*. Novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26* ou um composto de fórmula 37*.

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66/157 [081] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (II) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 1; q é de 1 a 6, preferencialmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda mais preferencialmente q é 1, 2 ou 3; Y é SH, N₃ ou NH2. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26*, 37*, 49*, 58*. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26*, 37*, 56*, 58*. Novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26* ou um composto de fórmula 37*.

[082] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (III) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é Ci-?alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou R^bCi-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N₃ ou NH2. Ainda mais preferivelmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, 31*, 34*, 37*, 45*, 47*, 50*-56*, 58*. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, 31*, 34*, 45*, 47*, 49*-55*. Novamente mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, um composto de fórmula 31* ou um composto de fórmula 34*.

[083] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (III) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é Cwalquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou R^bCi-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 1; q é de 1 a 6, preferencialmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda mais preferencialmente q é 1, 2 ou 3;

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Y é SH, N3 ou NH2. Ainda mais preferivelmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, 31*, 34*, 37*, 45*, 47*, 50*-56*, 58*. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, 31*, 34*, 45*, 47*, 49*-55*. Novamente mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, um composto de fórmula 31* ou um composto de fórmula 34*.

[084] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (III) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2. Ainda mais preferivelmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, 31*, 34*, 37*, 45*, 47*, 50*56*, 58*. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, 31*, 34*, 45*, 47*, 49*-55*. Novamente mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, um composto de fórmula 31* ou um composto de fórmula 34*.

[085] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (III) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 1; q é de 1 a 6, preferencialmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda mais preferencialmente q é 1,2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2. Ainda mais preferivelmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, 31*, 34*, 37*, 45*, 50*-56*, 58*. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, 31*, 34*, 45*, 47*, 49*-55*. Novamente mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, um composto de fórmula 31* ou um composto de fórmula 34*.

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68/157 [086] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (IV) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é Ci-?alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou R^bCi-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N₃ ou NH2. Ainda mais preferivelmente, o referido composto é um composto de fórmula 48*.

[087] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (IV) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é Cwalquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou R^bCi-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 1; q é de 1 a 6, preferencialmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda mais preferencialmente q é 1, 2 ou 3; Y é SH, N₃ ou NH2. Ainda mais preferivelmente, o referido composto é um composto de fórmula 48*.

[088] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (IV) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é R^b-Ci-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, Ns ou NH2. Ainda mais preferivelmente, o referido composto é um composto de fórmula 48*.

[089] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (IV) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é R^b-Ci-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6,

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69/157 preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 1; q é de 1 a 6, preferencialmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda mais preferencialmente q é 1,2 ou 3; Y é SH, Ns ou NH2. Ainda mais preferivelmente, o referido composto é um composto de fórmula 48*.

[090] Em um modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é de uma fórmula selecionada de qualquer uma das fórmulas:

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Η . 1 Η , ,

Υ^οΗ^Νγψ^Η Υ°^°1γτΠ^{5Η 0} (q) ⁰ (r) em que r é de 0 a 6, preferencialmente 1 a 3, em particular 2 ou 3, e q é de 1 a

6, preferencialmente de 1 a 4, em particular 2 ou 3.

[091 ] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (a)

OMe

VⁿH^sM^{sh λ r q} (a) em que r é 1 a 6, preferivelmente 1 a 3, em particular 3, e q é 1 a 6, preferivelmente 1,2 e 3, em particular 2 ou 3.

[092] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (b)

OMe y^N J>ⁿ3 ' ^r (b) em que r é 1 a 6, preferencialmente 1 a 3, em particular 3.

[093] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (c)

OMe i

V^N'M'^NH2 ' ^r (c) em que r é 1 a 6, preferencialmente 1 a 3, em particular 3.

[094] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (d)

Y οί γ?νη₂ ^{Λ r} (d) em que r é 1 a 6, preferencialmente 1 a 3, em particular 2. [095] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula

^N-oH_N

ΓΗ

Y Όΐ γν₃ ^{Λ r} (e) em que r é 1 a 6, preferencialmente 1 a 3, em particular 2.

[096] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (f) i o

SH ¹ (f) em que r é 1 a 6, preferivelmente 1 a 3, em particular

2, e q é 1 a 6, preferivelmente 1,2, 3 e 4, em particular 3.

[097] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (g)

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(g) em que r é 0 a 6, de preferência 1 a 3, em particular

1.

[098] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (h)

OMe i

^r (h) em que r é 0 a 6, preferencialmente 1 a 3, em particular

2.

[099] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (i)

OMe i

^ΖίΧΐν^ΝΗ2 ^r (i) em que r é 0 a 6, preferencialmente 1 a 3, em particular

2.

[0100] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (j)

(j) em que r é 0 a 6, preferencialmente 1 a 3, em particular

1.

[0101] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (k)

(k) em que r é 0 a 6, preferencialmente 1 a 3, em particular

1.

[0102] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (I)

H ^r (I) em que r é 1 a 6, preferencialmente 2 a 4, em particular 3.

[0103] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (m)

H yN^_SH ^r (m) em que r é 1 a 6, preferencialmente 2 a 4, em particular 3.

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72/157 [0104] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (n) ^r (n) em que r é 0 a 6, preferencialmente 1 a 3, em particular 2.

[0105] Em uma modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (o) ^r (o) em que r é 0 a 6, preferencialmente 1 a 3, em particular 2.

[0106] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (p)

° (p) em que r é 0 a 6, preferivelmente 1 a 3, em particular 2, e q é 1 a 6, preferivelmente 1, 2, 3 e 4, em particular 3.

[0107] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido ligante Z é fórmula (q) h _r , ⁰ (q) em que r é 1 a 6, preferivelmente 2 a 4, em particular 3, e q é 1 a 6, preferivelmente 1, 2, 3 e 4, em particular 3.

[0108] Em um modalidade preferida, o referido ligante Z é de uma fórmula selecionada de qualquer uma das fórmulas (a), (d), (I), (m), (n), (o), (p) ou (q),

OMe

(I) (n)

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em que r é 0 a 6, preferivelmente 0 a 3, em particular 2 ou 3, e q é 1 a 6, preferivelmente 1,2, 3 e 4, em particular 2 ou 3.

[0109] Em um modalidade preferida adicional, o referido ligante Z é de uma fórmula selecionada de qualquer uma das fórmulas (a), (p) ou (q),

em que r é 1 a 6, preferivelmente 2 a 4, em particular 2 ou 3, e q é 1 a 6, preferivelmente 1,2, 3 e 4, em particular 2 ou 3.

[0110] Numa outra modalidade preferida, o referido glicoepítopo reconhecido por uma CBP é selecionado de glicolipídeos, tal como os tipos globo e gânglio; glicoantígenos de glóbulos vermelhos; os glicoantígenos de Tn e sialil-Tn. Em outra modalidade preferida, os referidos glicoepítopos reconhecidos pelas CBPs são um globosídeo, em que preferencialmente o referido globosídeo é selecionado de Gb3, Gb4. Em uma modalidade preferida adicional, os referidos glicoepítopos reconhecidos por CBPs são um glicoantígeno de glóbulos vermelhos, em que preferencialmente o referido antígeno é selecionado do antígeno A, antígeno B, antígeno I, antígeno P, antígeno Lewis^a, antígeno Lewis^b, antígeno Lewis^x, antígeno Lewis^y. Em uma modalidade preferida adiciona, os referidos glicoepítopos reconhecidos por CBPs são o antígeno de Tn e o antígeno de sialil-Tn. Em uma modalidade preferida adicional, os referidos

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74/157 glicoepítopos reconhecidos por CBPs são um gangliosídeo, em que preferencialmente o referido gangliosídeo é selecionado deGMIa, GM1b, asialo GM1, GD1a, GD1b, GT1a, GT1b, GQ1b, asialo GM2, GM2, GD2, GM3, GD3.

[0111] Em uma modalidade preferida adicional, a referida imitação de fração de carboidrato, ou alternativamente e preferencialmente sendo, um glicoepítopo reconhecido por uma CBP é uma fração de carboidrato compreendida por um composto de fórmula (I) e o referido glicoepítopo é um glicoepítopo do tipo globo. [0112] Em uma modalidade preferida adicional, a referida imitação de fração de carboidrato, ou alternativamente e preferencialmente sendo, um glicoepítopo reconhecido por uma CBP é uma fração de carboidrato compreendida por um composto de fórmula (II) e o referido glicoepítopo é um antígeno de Tn ou antígeno de sialil-Tan.

[0113] Em uma modalidade preferida adicional, a referida imitação de fração de carboidrato, ou alternativamente e preferencialmente sendo, um glicoepítopo reconhecido por uma CBP é uma fração de carboidrato compreendida por um composto de fórmula (III) e o referido glicoepítopo é um glicoepítopo do sistema de antígeno A, antígeno B, antígeno I, antígeno i, antígeno P e antígeno de Lewis.

[0114] Em uma modalidade preferida adicional, a referida imitação de fração de carboidrato, ou alternativamente e preferencialmente sendo, um glicoepítopo reconhecido por uma CBP é uma fração de carboidrato compreendida por um composto de fórmula (IV) e o referido glicoepítopo é um glicoepítopo do tipo gânglio.

[0115] Em uma muito preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula 3, 8, 22, 26, 31, 34, 37, 45 ou 48:

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SH

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[0116] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula 3. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula 8. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula 22. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula 26. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula 31. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula 34. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula 37. Em uma

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77/157 modalidade muito preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula 45. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula 48.

[0117] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em queXéN(R^a); R^aéH, Ci-4-alquil, Ci-4-alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5; A é Ci-7alquileno, OCi-?alquileno Ci-4alquileno(OCH2CH2)rOCi-4alquileno, OCi-?alquileno-R^b, ou R^b-Ci-?alquileno, em que R^bé um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 3*, 22*, 57*. Novamene, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 3* e 57*. E novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 3.

[0118] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (III) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é N(R^a); R^a é H, C-i-4-alquil, Ci-4-alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5; A é Ci-7alquileno, OCwalquileno Ci-4alquileno(OCH2CH2)rOCi-4alquileno, OCi-7alquileno-R^b, ou R^b-Ci-7alquileno, em que R^bé um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2. Ainda mais preferivelmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, 31 *, 34*, 37*, 45*, 47*, 50*-56*, 58*. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, 31*, 34*, 45*, 47*, 49*-55*. Novamente mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*, 31*, 34*, 50*, 51*, 54*. Novamente mais preferencialmente, o referido composto é um

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78/157 composto de fórmula 8*, 31* ou 34*. Novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8*. Alternativamente ainda mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 31*. Alternativamente ainda mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 34*. E novamente ainda mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8, 31 ou 34. Muito preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 8. Alternativamente, muito preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 31. Alternativamente, muito preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 34.

[0119] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é Ci-?alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou R^b-Ciyalquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, Ns ou NH2. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 3*, 22*, 57*. Novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 22*. E novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 22.

[0120] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é Ci-?alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou R^b-Ciyalquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 1; q é de 1 a 6, preferencialmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda mais preferencialmente q é 1, 2 ou 3; Y é SH, Ns ou NH2. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 3*, 22*, 57*. Novamente, mais preferencialmente, o referido composto

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79/157 é um composto de fórmula 22*. E novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 22.

[0121] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6, preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, Ns ou NH2. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 3*, 22*, 57*. Novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 22*. E novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 22.

[0122] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é R^b-Ci-?alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 1; q é de 1 a 6, preferencialmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda mais preferencialmente q é 1, 2 ou 3; Y é SH, N3 ou NH2. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 3*, 22*, 57*. Novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 22*. E novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 22.

[0123] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (II) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é Ci-?alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou R^bCi-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 0 ou 1; q é de 0 a 6,

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80/157 preferencialmente q é de 0 a 4 e ainda mais preferencialmente q é 0, 2 ou 3; Y é SH, Ns ou NH2. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26*, 37*, 49*, 58*. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26*, 37*, 56*, 58*. Novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26* ou um composto de fórmula 37*. Novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26*. Alternativamente ainda mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 37*. E novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26 ou um composto de fórmula 37. Muito preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26. Alternativamente, muito preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 37.

[0124] Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (II) e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que X é O; A é Ci-?alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou R^bCi-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é de 0 a 6, preferencialmente r é 1, 2 ou 3 e mais preferencialmente r é 1; B é NHC(O) ou S; p é 1; q é de 1 a 6, preferencialmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda mais preferencialmente q é 1, 2 ou 3; Y é SH, Ns ou NH2. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26*, 37*, 49*, 58*. Mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26*, 37*, 56*, 58*. Novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26*. Alternativamente ainda mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 37*. E novamente, mais preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26 ou um composto de fórmula 37. Muito preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 26. Alternativamente, muito preferencialmente, o referido composto é um composto de fórmula 37.

[0125] Além disso, a invenção se refere a polímeros terapeuticamente aceitáveis, tipicamente e preferencialmente biodegradáveis compreendendo uma

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81/157 multiplicidade de substituintes, em que os referidos compostos são conectados à espinha dorsal do polímero por meio do ligante Z e em que a conexão é efetuada através da fração Y do ligante Z. Tipicamente e preferencialmente, o referido polímero inventivo compreende ainda frações espaçadoras para acoplar as referidas frações Y do ligante Z a frações reativas na espinha dorsal do polímero. Tais frações espaçadoras são conhecidas pelos versados na técnica e exemplos preferidos são aqui descritos. Em algumas modalidades, as referidas frações Y do ligante Z estão diretamente ligadas às frações reativas na espinha dorsal do polímero sem um espaçador adicional, no entanto.

[0126]Assim, em outro aspecto, a presente invenção fornece um polímero compreendendo uma multiplicidade dos compostos inventivos, em que os referidos compostos são conectados à espinha dorsal do polímero por meio do referido ligante Z e em que a referida conexão é efetuada através do grupo Y do referido ligante Z e o referido polímero inventivo compreende ainda opcionalmente uma fração espaçadora para acoplar a referida fração Y do ligante Z a uma fração reativa na espinha dorsal do polímero. Exemplos preferidos são descritos aqui.

[0127] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero compreendendo (i) uma multiplicidade de compostos de fórmula (I), (ii) uma multiplicidade de compostos de fórmula (II), (iii) uma multiplicidade de compostos de fórmula (III), (iv) uma multiplicidade de compostos de fórmula (IV) ou (v) uma multiplicidade de compostos de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) e fórmula (IV), em que os referidos compostos estão conectados à espinha dorsal do polímero por meio do referido ligante Z, e em que a referida conexão é efetuada através do grupo Y do referido ligante Z. De preferência, a referida multiplicidade de compostos de qualquer uma da fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III), fórmula (IV) são ou compostos idênticos de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III), fórmula (IV) ou compostos diferentes selecionados independentemente da fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III), fórmula (IV). Tipicamente, o referido polímero inventivo compreende ainda opcionalmente frações espaçadoras para acoplamento das

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82/157 referidas frações Y do ligante Z a frações reativas na espinha dorsal do polímero. Exemplos preferidos são descritos aqui.

[0128] A invenção ainda se refere particularmente a polímeros terapeuticamente aceitáveis compreendendo independentemente uma multiplicidade de qualquer um dos compostos de fórmula (I), (II), (III) e (IV), incluindo polímeros com carregamento de uma multiplicidade de um composto idêntico de fórmula (I), (II), (III) ou (IV) ou uma multiplicidade sendo uma combinação de vários compostos diferentes de fórmula (I) (II), (III) ou (IV). Polímeros preferidos no referido contexto são polímeros com carregamento de um ou vários dos compostos de fórmula (I), (II), (III) ou (IV), em que os referidos compostos de fórmula (I), (II), (III) ou (IV) são preferencialmente selecionados de 3*, 8*, 22*, 26*, 31*, 34*, 37*, 45*, 47*-58*. Em outra modalidade preferida, os polímeros da invenção são polímeros com carregamento de um ou vários compostos idênticos selecionados independentemente de qualquer uma das fórmulas (I), (II), (III) ou (IV), em que os referidos compostos de fórmula (I), (II), (III) ou (IV) são preferencialmente selecionados de 3*, 8*, 22*, 26*, 31*, 34*, 37*, 45*, 47*-58* [0129] O polímero inventivo compreendendo a multiplicidade de compostos idênticos ou diferentes, de preferência idênticos, de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) em que o grupo Y do referido ligante Z conecta os referidos compostos à espinha dorsal do polímero, é preferencialmente um polímero de a-aminoácido e, por meio deste, tipicamente e preferencialmente um polímero de a-aminoácido homomérico ou heteromérico, um polímero ou copolímero de ácido acrílico ou ácido metacrílico, ou um copolímero de N-vinil-2-pirrolidona-álcool vinílico, um polímero de quitosana ou um polímero de polifosfazeno.

[0130] Em uma modalidade preferida adicional, a referida espinha dorsal de polímero é um polímero de α-aminoácido, um polímero ou copolímero de ácido acrílico ou ácido metacrílico, um copolímero de N-vinil-2-pirrolidona-vinil álcool, um polímero de quitosana ou um polímero de polifosfazeno, em que preferivelmente a referida espinha dorsal de polímero é um polímero de aaminoácido e em que ainda preferivelmente o referido α-aminoácido do referido

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83/157 polímero de α-aminoácido é lisina, ornitina, glutamina, asparagina, ácido glutâmico ou ácido aspártico.

[0131] Em uma modalidade preferida adicional, a referida multiplicidade de um composto é uma série de compostos de 10 a 1.000, preferivelmente 20 a 700, ainda preferivelmene, 50 a 300. Em uma modalidade preferida adicional, a referida multiplicidade de um composto é uma série de compostos de 20 a 700. Em uma modalidade preferida adicional, a referida multiplicidade de um composto é uma série de compostos de 50 a 300.

[0132] Numa modalidade preferida, a espinha dorsal do polímero é um polímero de α-aminoácido, um polímero ou copolímero de ácido acrílico ou ácido metacrílico, um copolímero de N-vinil-2-pirrolidona-álcool vinílico, um polímero de quitosana ou um polímero de polifosfazeno.

[0133] Em outra modalidade preferida, a espinha dorsal do polímero é um polímero de a-aminoácido.

[0134] Em uma modalidade preferida adicional, a espinha dorsal do polímero é um polímero de α-aminoácido e o referido α-aminoácido do referido polímero de α-aminoácido é lisina, ornitina, glutamina, asparagina, ácido glutâmico, ácido aspártico ou serina.

[0135] Em uma modalidade muito preferida adicional, a referida espinha dorsal do polímero é um polímero de α-aminoácido, em que o referido α-aminoácido do referido polímero de α-aminoácido é lisina e em que ainda mais preferencialmente a referida polilisina é uma polilisina biodegradável [0136] Em uma modalidade muito preferida, a espinha dorsal do polímero é polilisina, de preferência. poli-L-lisina e em que de preferência o peso molecular da referida poli-lisina é de 1.000 Da a 300.000 Da.

[0137] Em uma modalidade muito preferida, a espinha dorsal do polímero é polilisina, de preferência. poli-L-lisina e em que de preferência o peso molecular da referida poli-lisina é de 30.000 Da a 150.000 Da.

Em outra modalidade muito preferida, a espinha dorsal do polímero é uma poliL-lisina.

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84/157 [0138] Em uma modalidade muito preferida adicional, a espinha dorsal do polímero é uma espinha dorsal de polímero biodegradável. Em novamente uma modalidade muito preferida adicional, a espinha dorsal do polímero é uma polilisina, de preferência uma poli-L-lisina biodegradável.

[0139]m uma modalidade preferida adicional, a porcentagem de carregamento da fração de carboidrato do referido composto na espinha dorsal do polímero está entre 10 e 90%, preferencialmente entre 20 e 70%, e em particular entre 30 e 60%. O último significa que 30 a 60% das cadeias laterais do polímero reativo e, se aplicável, a fração espaçadora, são reagidos com o grupo -Y do referido ligante Z. A porcentagem de carregamento da fração de carboidrato do referido composto na espinha dorsal do polímero é tipicamente e preferencialmente determinada por espectroscopia de NMR e se refere a% mol/mol.

[0140] Exemplos particulares e preferidos adicionais de polímeros da invenção são representados esquematicamente na Tabela 1 e são descritos a seguir.

[0141] A introdução do espaçador, se presente dentro dos polímeros da presente invenção, é tipicamente e preferencialmente efetuada por uma primeira reação da espinha dorsal do polímero com o referido espaçador que, então, é reagido com a fração Y do ligante Z do composto. Em algumas modalidades, a introdução do espaçador, se presente dentro dos polímeros da presente invenção, é efetuada primeiro por uma reação do referido espaçador com a fração Y do ligante Z do composto que, então, é reagido com a espinha dorsal do polímero.

Tabela 1: Exemplos preferidos de polímeros inventivos

Exemplo	Espinha dorsal de polímero	Composto	Polímero
(A)	Polilisina	HS -i-t.infcsr|+Sugar;	|Poivmsr|--N' ' - S j l.inker i+Suciar 1 1:--------1 H ’........................

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Oiymed-NH-j

He·; -rt.iiiKe

Polymer -N ’ ------------- _H

Polymeri-N N-KinksrH-Sug;

I----------- _H H^!--------(B) (C) (D) (F) (G) (H)

Ácido poligiutâmico

Η·?Ν-ranker t

Ipolymefl-N

-------------j _H

Nf:.·.·,·-·;!-- uinkerpSeg:

;Po:ymer͓COOH ,-------------, 0 H r

Polymarj-C—'41

Polisserina

Poiicisteina

Pciymeri--SH

Ácido poisacrifice ’oiymerl-COOH /V-vinil-2-pirrolidona e álcool vinilico

Quitosana iPoiymeri-NH

Fosfazeno a'

Cl .inker ||sugar

I >> · I

Polymen-C—M .inner j-Linter p-Sugar i [Polymer]--O

S+Linkerl·

M 4-Links H 1 inker H-Siigar

IPolymer|-N ' ^v'~s+Unker '----------- _H i-----------—N=P

HN -rt.inkerHSugar

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Polymer - polímero; Linker - Ligante; Sugar - Açúcar (A) um poli-a-aminoácido em que o aminoácido carrega uma função aminoalquil de cadeia lateral, tal como em tipicamente e preferivelmente polilisina, em particular poli-L-lisina ou poli-D-lisina e o grupo amino está conectado através de uma fração espaçadora ao grupo Y do referido ligante Z. No caso em que Y é SH, uma fração típica e preferida compreende um grupo CH2, tipicamente e de preferência um grupo CH2 terminal, em que o referido grupo CH2 da referida fração espaçadora é conectado ao grupo S do referido ligante Z. Uma porção espaçadora preferida é um grupo acetila. Outra fração espaçadora preferida compreende um grupo succinimida, tipicamente e preferivelmente um grupo succinimida terminal, em que o referido grupo succinimida da referida fração espaçadora é conectado ao grupo S do referido ligante Z. No caso em que Y é NH2. uma fração espaçadora típica e preferida compreende um grupo diamida de ácido esquárico, tipicamente e preferencialmente um grupo diamida do ácido esquárico terminal, em que o referido carbono eletrofílico da referida fração espaçadora está conectado ao grupo NH do referido ligante Z. No caso em que Y é N3, uma fração espaçadora típica e preferida compreende um grupo alquino, tipicamente e preferivelmente um grupo alquino terminal, em que o referido grupo alquino da referida fração espaçadora é conectado ao grupo N3 do referido ligante Z através de cicloadição azida-alquino.

(B) um poli-a-aminoácido (forma d- e l), em que o aminoácido carrega uma função carbonilalquil de cadeia lateral, tal como em tipicamente e preferivelmente ácido poliaspártico, ácido poliglutâmico, poliasparagina ou poliglutamina e o grupo carbonila (que corresponde ao grupo carbóxi original no ácido aspártico e ácido glutâmico, respectivamente) está conectado ao grupo Y do referido ligante Z. No caso em que Y é NH2, o grupo carbonila está conectado ao grupo amina do referido ligante Z tipicamente e preferencialmente como uma am ida. No caso em que Y é N3, uma fração espaçadora típica e preferida compreende um grupo alquino, tipicamente e preferivelmente um grupo alquino

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87/157 terminal, em que o referido grupo alquino da referida fração espaçadora é conectado ao grupo N3 do referido ligante Z através de cicloadição azida-alquino.

(C) um poli-a-aminoácido (forma d- and l), em que o aminoácido carrega uma função hidroxialquil ou hidroxiaril de cadeia lateral, tal como em tipicamente e preferencialmente polisserina, politreonina, politirosina ou poli-hidroxiprolina e o grupo hidróxi está conectado através de uma fração espaçadora ao grupo Y do referido ligante Z. Frações espaçadoras exemplares incluem, mas não estão limitadas a, frações compreendendo um um grupo CH2 termial, em que o referido grupo CH2 terminal da referida fração espaçadora está conectado ao grupo S do referido ligante Z.

(D) um poli-a-aminoácido, em que o aminoácido carrega uma função tiolalquil de cadeia lateral, tal como em tipicamente e preferencialmente policisteína, em que o grupo tiol é conectado através de uma fração espaçadora ao grupo Y terminal do ligante Z. No caso em que Y é NH2, uma fração espaçadora típica e preferida compreende um grupo carbonila terminal, em que o referido grupo carbonila terminal da referida fração espaçadora está conectado ao grupo NH do referido ligante Z;

(E) copolímeros de dois ou mais α-aminoácidos diferentes conectados tipicamente e preferencialmente por meio de uma fração espaçadora, ao grupo Y do referido ligante Z, como descrito em (A)-(D);

(F) ácido poliacrílico, ácido polimetacrílico ou um copolímero de ácido acrílico e metacrílico, em que o grupo carbóxi está conectado ao grupo Y do referido ligante Z. No caso em que Y é NH2, o grupo carbonila está conectado ao grupo amina do referido ligante Z tipicamente e preferencialmente como uma am ida;

(G) um copolímero de A/-vinil-2-pirrolidona e álcool vinílico, em que o grupo hidróxi da parte de álcool vinílico do copolímero é conectado por meio de uma fração espaçadora ao grupo Y do referido ligante Z. No caso em que Y é SH, uma fração espaçadora típica e preferida compreende um grupo CH2 terminal, em que o referido grupo CH2 terminal da referida fração espaçadora está conectado ao S do referido ligante Z. Frações espaçadoras exemplares incluem,

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88/157 mas não estão limitadas a, frações compreendendo um grupo CH2 terminal, em que o referido grupo CH2 terminal da referida fração espaçadora está conectado ao grupo S do referido ligante Z.

(H) quitosana, em que o grupo amino está conectado através de uma fração espaçadora ao grupo Y do referido ligante Z. No caso em que Y é SH, uma fração espaçadora típica e preferida compreende um grupo CH2 terminal, em que o referido grupo CH2 terminal da referida fração espaçadora é conectado ao grupo S do referido ligante Z. Uma porção espaçadora preferida é um grupo acetila. Outra fração espaçadora preferida compreende um grupo succinimida terminal, em que o referido grupo succinimida terminal da referida fração espaçadora é conectado ao grupo S do referido ligante Z. No caso em que Y é NH2, uma fração espaçadora típica e preferida compreende um grupo éster de amida de ácido esquárico terminal, em que o referido grupo éster terminal da referida fração espaçadora está conectado ao grupo NH do referido ligante Z. No caso em que Y é N3, uma fração espaçadora típica e preferida compreende um grupo alquino terminal, em que o referido grupo alquino terminal da referida fração espaçadora é conectado ao grupo N3 do referido ligante Z através de cicloadição azidaalquino.

(I) um polímero de polifosfazeno, em que o fósforo está conectado ao grupo Y do referido ligante Z. No caso em que Y é NH2, o fósforo está conectado ao grupo amina do referido ligante Z.

[0142] Em uma modalidade particular, um polímero (A) compreende a fórmula parcial (V)

em que

R¹ é um substituinte aminoalquil conectado ao referido ligante Z, em que o grupo

Y do referido ligante Z está conectado ao grupo amino terminal de R¹ através de

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89/157 uma fração espaçadora, em que tipicamente e preferencialmente, a referida fração espaçadora é um grupo acetila, um grupo de ácido esquárico, grupo succinimida ou alquino, em que preferencialmente a referida fração espaçadora é um grupo acetila.

R² é substituinte de 2,3-di-hidroxipropil o qual é uma função amino capeada tendo um substituinte de solubilização, e a relação entre as duas entidades entre parênteses com R¹ e R², respectivamente, no polímero indica a relação de carregamento de carboidrato para a função amino capeada.

[0143] Por exemplo, R¹ é de fórmula (Va), (Vb), (Vc), (Vd) ο π m ⁰ (Va), o

°^Z (Vb),

O O (Vc), o N-N (vd), em que Z’ é -X-A-(B)_P-(CH2)q- como uma consequência da reação de um grupo alquino com o referido grupo azida (Y=Ns) do referido ligante Z.

e R² é de fórmula (Ve), (Vf), (Vg) o OH (Ve),

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90/157 °OH °(Vf), ° ⁰(Vg) ^/Hⁿy^,1^,ⁿAA^oh

Ο N-N OH (Vh) em que o está entre 1 e 6, preferencialmente 3 ou 4 e m está entre 1 e 6, preferencialmente entre 1 e 2, em particular 1.

[0144] Quando o for 3, o substituinte R¹ representa uma cadeia lateral de poliornitina e quando o for 4, o substituinte R¹ representa uma cadeia lateral de polilisina conectada ao referido grupo Y do referido ligante Z cujo ligante Z é compreendido pelos compostos inventivos e preferivelmente pelos compostos inventivos de fórmula (I), (II), (III) ou (IV).

[0145] O poli-aminoácido pode ser linear, hiper-ramificado ou dendrítico, como descrito por Z. Kadlecova et al., Biomacromolecules 2012, 13:3127-3137 e K.T. Al-Jamal et al., Journal of Drug Targeting 2006, 14:405-412, para a polilisina, como se segue:

nh₂ nh₂

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h₂n [0146]A polilisina usada para preparar o polímero (A) de fórmula (V) tern preferencialmente urn peso molecular entre 1.000 e 300.000 Da, em particular 30.000 a 150.000 Da e esses polímeros ainda conectados via o grupo Y=SH do ligante Z a compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) e com um resíduo de 2,3-di-hidroxipropiltio-acetilaminoalquil de capeamento são preferidos. Por exemplo, o polímero de polilisina é primeiro funcionalizado por cloroacetilação. A reação do polímero cloroacetilado com o referido ligante Z compreendendo a funcionalidade tiol terminal por substituição nucleofílica dá acesso aos polímeros desejados.

[0147] Em uma modalidade particular, um polímero (B) compreende a fórmula

em que

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R¹ é um substituinte carbonilalquil conectado ao referido ligante Z, em que o grupo Y do referido ligante Z está conectado ao grupo carbonila de R¹. Tipicamente e preferencialmente, o referido Y é NH2 e o grupo carbonila está diretamente conectado ao referido grupo amina do referido ligante Z através da formação de uma ligação am ida.

R² é 2,3-dihidroxipropilaminoacetil-alquil, e a relação entre as duas entidades entre parênteses com R¹ e R², respectivamente, no polímero indica a relação de carregamento de carboidrato para carbonila capeada ou função carbóxi.

[0148] Por exemplo, R¹ é de fórmula (Vi) o ⁰ (Vi), e R² é de fórmula (Vj) o

Ο Η I

OH (_Vj) em que o está entre 1 e 6, de preferência 1 ou 2.

[0149] Quando o for 1, o substituinte R¹ representa uma cadeia lateral de poliasparagina e quando o for 2, o substituinte R¹ representa uma cadeia lateral de poliglutamina conectada ao referido grupo Y preferivelmente ao referido grupo Y=NH2 do referido ligante Z cujo ligante Z é compreendido pelos compostos inventivos e preferivelmente pelos compostos inventivos de fórmula (I), (II), (III) ou (IV), e R² é 2,3-di-hidroxi-carbonilalquil, isto é, uma função amida capeada tendo um substituinte de solubilização.

[0150] O ácido poliaspártico usado para preparar o polímero (B) de fórmula (V) tem preferencialmente um peso molecular entre 1.000 e 300.000 Da, em particular 30.000 a 150.000 Da e esses polímeros ainda conectados via o grupo Y do referido ligante Z a compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) e

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93/157 com um resíduo de 2,3-di-hidroxipropiltioaminoacetil de capeamento são preferidos. Por exemplo, ácido poliaspártico é diretamente acoplado ao referido ligante Z compreendendo a funcionalidade amina terminal por formação de amida dá acesso aos polímeros de poliasparagina desejados.

[0151] Em caso de ácido poliaspártico ou ácido poliglutâmico o polímero pode ser linear, hiper-ram if içado ou dendrítico.

[0152] Em uma modalidade particular, um polímero (C) compreende a fórmula parcial (V) o R²

H N (V), em que

R¹ é um substituinte hidroxialquil ou hidroxiaril conectado ao referido ligante Z, em que o grupo SH do referido ligante Z está conectado ao grupo -CH2 de R¹, R² é 2,3-dihidroxipropiltioacetil-hidroxialquil (ou -hidroxiaril), e a relação entre as duas entidades entre parênteses com R¹ e R², respectivamente, no polímero indica a relação de carregamento de carboidrato para a função hidróxi capeada.

[0153] Por exemplo, no caso de polisserina e análogos, R¹ é de fórmula Vk) e R² é de fórmula (Vm) rs m

Y OH oh (Vm) em que o está entre 1 e 6, preferencialmente 1 ou 2, em particular 1, m está entre 1 e 6, preferencialmente entre 1 e 2, em particular 1.

[0154] Quando o for 1, o substituinte R¹ representa uma cadeia lateral de polisserina conectada ao referido grupo Y, preferencialmente, ao referido grupo

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Y=SH do referido ligante Z, cujo ligante Z é compreendido pelos compostos inventivos e preferivelmente pelos compostos inventivos de fórmula (I) ou (II) ou (III) ou (IV) e R²é 2,3-di-hidroxipropiltio-hidrozialquil, isto é, uma função hidróxi capeada tendo um substituinte de solubilização.

[0155] A polisserina (e outras cadeias laterais de α-aminoácido funcionalizadas com hidróxi) usada para preparar o polímero (C) de fórmula (V) tem preferencialmente um peso molecular entre 1.000 e 300.000 Da, em particular 30.000 a 70.000 Da e esses polímeros ainda conectados via o grupo Y do referido ligante Z a compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) e com um resíduo de 2,3-di-hidroxipropiItio-hidroxialquil de capeamento são preferidos. Por exemplo, polisserina é primeiro funcionalizada por cloroacetilação dos grupos hidroxila. A reação do polímero cloroacetilado com o referido ligante Z compreendendo a funcionalidade tiol terminal por substituição nucleofílica dá acesso aos polímeros desejados.

[0156] Em uma modalidade particular, um polímero (D) compreende a fórmula parcial (V) o R²

H N (V), em que

R¹ é um substituinte de tioalquil-carbonil conectado ao referido ligante Z, em que o grupo Y do referido ligante Z está conectado ao grupo carbonila de R¹, R² é substituinte 2,3-di-hidroxipropil, e a relação entre as duas entidades entre parênteses com R¹ e R², respectivamente, no polímero indica a relação de carregamento de carboidrato para a função tiol capeada.

Por exemplo, R¹ é de fórmula (Vn)

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95/157 ο

6+.--0¾² '° °(Vn), e R² é de fórmula (Vo) ooh '—o

O(Vo) em que o está entre 1 e 6, preferencialmente 1 ou 2, em particular 1 e m está entre 1 e 6, preferencialmente entre 1 e 2.

[0157] Quando o for 1, o substituinte R¹ representa uma cadeia lateral de policisteína conectada ao referido grupo Y, preferencialmente, ao referido grupo Y=NH2 do referido ligante Z, cujo ligante Z é compreendido pelos compostos inventivos e preferivelmente pelos compostos inventivos de fórmula (I), (II), (III) ou (IV) e R² é 2,3-di-hidroxipropiltio-alquil, isto é, uma função tiol capeada tendo um substituinte de solubilização.

[0158] A policisteína usada para preparar o polímero (D) de fórmula (V) tem preferencialmente um peso molecular entre 1.000 e 300.000 Da, em particular 30.000 a 70.000 Da e esses polímeros ainda conectados via o grupo Y do referido ligante Z a compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) e com um resíduo de substituinte de 2,3-di-hidroxipropil de capeamento são preferidos. Por exemplo, um ligante Z e, por este meio, tipicamente e preferencialmente o referido grupo Y=NH2 do referido ligante Z, é primeiro funcionalizado por uma reação de acoplamento de peptídeo com um reticulador de éster ativado por maleimida heterobifuncional. A reação do ligante Z funcionalizado com maleimida com o referido polímero compreendendo a funcionalidade tiol terminal por adição nucleofílica dá acesso aos polímeros desejados.

[0159] Em uma modalidade particular, um polímero (F) compreende a fórmula parcial (VI)

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96/157 (VI), em que

R¹ é o referido ligante Z, em que Y é NH2.

R² é 2,3-di-hidroxipropilamino ou um substituinte amino relacionado e

R³ é hidrogênio ou metil;

e a relação entre as duas entidades entre parênteses com R¹ e R², respectivamente, no polímero indica a relação de carregamento de carboidrato para a função am ida capeada.

Por exemplo, R¹ é Z e R² é de fórmula (Via) ⁱ^N^Z\^/ZXOH oh (via) [0160] O ácido poliacrílico usado para preparar o polímero (F) de fórmula (VI) tem preferencialmente um peso molecular entre 1.000 e 400.000 Da, em particular 30.000 a 160.000 Da e esses polímeros ainda conectados via o grupo NH do referido ligante Z a compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) e com um resíduo de 2,3-di-hidroxipropilamino de capeamento são preferidos. Por exemplo, ácido poli-acrílico é diretamente acoplado ao referido ligante Z compreendendo a funcionalidade amina terminal por formação de amida dá acesso aos polímeros de desejados.

[0161] Em uma modalidade particular, um polímero (G) compreende a fórmula parcial (VII) r¹o r²o em que

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97/157

R¹ é um substituinte hidroxialquil ou hidroxiaril conectado ao referido ligante Z, em que o grupo SH do referido ligante Z está conectado ao grupo -CH2 de R¹, R² é 2,3-dihidroxipropiltioacetil-hidroxialquil (ou -hidroxiaril), e a relação entre as duas entidades entre parênteses com R¹ e R², respectivamente, no polímero indica a relação de carregamento de carboidrato para a função hidróxi capeada.

[0162] Por exemplo, R¹ é de fórmula (Vila) o

N Η z

O ^m (Vila), e R² é de fórmula (Vlllb) o

N Η

OH (VI lb) em que m está entre 1 e 10, de preferência entre 1 e 4.

[0163] O copolímero usado para preparar o polímero (G) de fórmula (VII) tem preferencialmente um peso molecular entre 1.000 e 400.000 Da, em particular 30.000 a 160.000 Da e esses polímeros ainda conectados via o grupo SH do referido ligante Z a compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) e com um resíduo de 2,3-di-hidroxipropiltio-carbonilaminoalquilaminocarbonil de capeamento são preferidos.

[0164] Em uma modalidade particular, um polímero (H) compreende a fórmula

(VIII), em que

R¹ é um substituinte aminoalquil conectado ao referido ligante Z, em que o grupo

Y do referido ligante Z está conectado ao grupo amino terminal de R¹ através de

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98/157 uma fração espaçadora, em que tipicamente e preferencialmente, a referida fração espaçadora é um grupo acetila.

R² é 2,3-di-hidroxipropiltioacetil-acetilamina o qual é uma função amino capeada tendo um substituinte de solubilização, e a relação entre as duas entidades entre parênteses com R¹ e R², respectivamente, no polímero indica a relação de carregamento de carboidrato para a função amino capeada.

[0165] Por exemplo, R¹ é de fórmula (Villa) ^H r i

O (Villa), e R² é de fórmula (Vlllb)

O OH (Vlllb), em que m está entre 1 e 6, de preferência entre 1 e 2, em particular 1.

[0166] A quitosana usada para preparar o polímero (H) de fórmula (VIII) tem preferencialmente um peso molecular entre 1.000 e 300.000 Da, em particular 30.000 a 70.000 Da e esses polímeros conectados via o grupo Y do referido ligante Z a compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) e conectados a um resíduo de 2,3-di-hidroxipropiltio-acetilamina de capeamento são preferidos. Por exemplo, o polímero de quitosana é primeiro funcionalizado por cloroacetilação dos grupos amino. A reação do polímero cloroacetilado com o referido ligante Z compreendendo a funcionalidade tiol terminal por substituição nucleofílica dá acesso aos polímeros desejados.

[0167] Em uma modalidade particular, um polímero (I) compreende a fórmula parcial (IX)

R¹

I -P =

I

R¹ (IX),

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99/157 em que

R¹ é um referido ligante Z. No caso em que Y é NH2, o grupo de fósforo está conectado ao grupo amina do referido ligante Z.

R² é 2,3-di-hidroxipropil-amina, e a relação entre as duas entidades entre parênteses com R¹ e R², respectivamente, no polímero indica a relação de carregamento de carboidrato para a função carbóxi capeada.

[0168] Por exemplo, R¹ é Z, e R² é de fórmula (IXa) ^Ν^/\^/ΧΟΗ

Η I oh (ixa), [0169] O polifosfazeno usado para preparar o polímero (I) de fórmula (IX) tem preferencialmente um peso molecular entre 1.000 e 300.000 Da, em particular 30.000 a 70.000 Da e esses polímeros ainda conectados via o grupo Y do referido ligante Z a compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) e com um resíduo de 2,3-di-hidroxipropilamina de capeamento são preferidos. Por exemplo, o polifosfazeno é primeiro acoplado por substituição ao referido ligante Z compreendendo a funcionalidade amino terminal que dá acesso aos polímeros desejados.

[0170] Do grupo de polímeros (A) - (I), os polímeros preferidos são polímeros de α-aminoácido (forma d- e l) ou combinações (copolímeros) de diferentes aaminoácido (A) - (D). Mais preferidos são polímeros de α-aminoácido consistindo em polilisina, poliornitina, ácido poliaspártico, ácido poliglutâmico, poliglutamina, poliasparagina. Particularmente preferido dentre estes polímeros de aaminoácido é poli-L-lisina.

[0171] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido composto é um polímero de fórmulas 5, 6, 9, 23, 27, 32, 35, 38, 39 ou 59, em que as referidas fórmulas são mostradas na seção experimental e em que para cada um dos referidos polímeros n é independentemente 20 a 1.200, preferencialmente 100 a

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1.100, ainda mais preferencialmente 200 a 500 e em que para cada um dos referidos polímeros x é independentemente 10 a 90, preferencialmente 30 a 60 e ainda preferencialmente 40 a 50.

[0172] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido composto é um polímero de fórmulas 5, 6, 9, 23, 27, 32, 35, 38, 39 ou 59, em que as referidas fórmulas são mostradas na seção experimental e em que para cada um dos referidos polímeros n é independentemente 100 a 1.100, preferencialmente 200 a 500 e em que para cada um dos referidos polímeros x é independentemente 30 a 60 e ainda preferencialmente 40 a 50.

[0173] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 5, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 20 a 1.200, preferencialmente 100 a 1.100, ainda mais preferencialmente 200 a 500 e em que para cada um dos referidos polímeros x é independentemente 10 a 90, preferencialmente 15 a 60 e ainda preferencialmente 20 a 40. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 5, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 200 a 500, preferencialmente 400 e em que para o referido polímero x é independentemente 15 a 60, preferencialmente 20 a 40, ainda preferencialmente 25.

[0174] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 6, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 20 a 1.200, preferencialmente 100 a 1.100, ainda mais preferencialmente 200 a 500 e em que para cada um dos referidos polímeros x é independentemente 10 a 90, preferencialmente 20 a 60 e ainda preferencialmente 30 a 50. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 6, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 200 a 500, preferencialmente 400 e em que

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101/157 para o referido polímero x é independentemente 15 a 60, preferencialmente 20 a 40, ainda preferencialmente 40.

[0175] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 9, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 20 a 1.200, preferencialmente 100 a 1.100, ainda mais preferencialmente 200 a 500 e em que para cada um dos referidos polímeros x é independentemente 10 a 90, preferencialmente 20 a 80 e ainda preferencialmente 30 a 75. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 9, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 200 a 500, preferencialmente 400 e em que para o referido polímero x é independentemente 20 a 80, preferencialmente 30 a 75, ainda preferencialmente 68.

[0176] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 23, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 20 a 1.200, preferencialmente 100 a 1.100, ainda mais preferencialmente 200 a 500 e em que para cada um dos referidos polímeros x é independentemente 10 a 90, preferencialmente 30 a 60 e ainda preferencialmente 40 a 50. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 23, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 200 a 500, preferencialmente 400 e em que para o referido polímero x é independentemente 30 a 60, preferencialmente 40 a 50, ainda preferencialmente 42.

[0177] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 27, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 20 a 1.200, preferencialmente 100 a 1.100, ainda mais preferencialmente 200 a 500 e em que para cada um dos referidos polímeros x é independentemente 10 a 90, preferencialmente 15 a 60 e ainda preferencialmente 20 a 40. Em uma

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102/157 modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 27, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 200 a 500, preferencialmente 400 e em que para o referido polímero x é independentemente 20 a 40, preferencialmente 25. [0178] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 32, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 20 a 1.200, preferencialmente 100 a 1.100, ainda mais preferencialmente 200 a 500 e em que para cada um dos referidos polímeros x é independentemente 10 a 90, preferencialmente 15 a 60 e ainda preferencialmente 20 a 40. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 32, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 200 a 500, preferencialmente 400 e em que para o referido polímero x é independentemente 15 a 60, preferencialmente 20 a 40, ainda preferencialmente 35.

[0179] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 35, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 20 a 1.200, preferencialmente 100 a 1.100, ainda mais preferencialmente 200 a 500 e em que para cada um dos referidos polímeros x é independentemente 10 a 90, preferencialmente 15 a 60 e ainda preferencialmente 20 a 40. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 35, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 200 a 500, preferencialmente 400 e em que para o referido polímero x é independentemente 15 a 60, preferencialmente 20 a 40, ainda preferencialmente 25.

[0180] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 38, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 20 a 1.200, preferencialmente 100 a 1.100, ainda mais preferencialmente 200 a 500 e em

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103/157 que para cada um dos referidos polímeros x é independentemente 10 a 90, preferencialmente 15 a 60 e ainda preferencialmente 20 a 40. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 38, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 200 a 500, preferencialmente 400 e em que para o referido polímero x é independentemente 15 a 60, preferencialmente 20 a 40, ainda preferencialmente 25.

[0181] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 39, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 20 a 1.200, preferencialmente 100 a 1.100, ainda mais preferencialmente 200 a 500 e em que para cada um dos referidos polímeros x é independentemente 10 a 90, preferencialmente 15 a 60 e ainda preferencialmente 20 a 40. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 39, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 200 a 500, preferencialmente 400 e em que para o referido polímero x é independentemente 15 a 60, preferencialmente 20 a 40, ainda preferencialmente 35.

[0182] Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 59, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 20 a 1.200, preferencialmente 100 a 1.100, ainda mais preferencialmente 200 a 500 e em que para cada um dos referidos polímeros x é independentemente 10 a 90, preferencialmente 15 a 60 e ainda preferencialmente 20 a 40. Em uma modalidade muito preferida adicional, o referido polímero é um polímero de fórmula 59, em que a referida fórmula é mostrada na seção experimental e em que para o referido polímero n é de 200 a 500, preferencialmente 400 e em que para o referido polímero x é independentemente 15 a 60, preferencialmente 20 a 40, ainda preferencialmente 28.

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104/157 [0183] Os termos gerais usados aqui e a seguir têm, de preferência, dentro do contexto desta divulgação os seguintes significados, a menos que indicado de outra forma:

[0184] Quando a forma plural é usada para compostos e similares, isto é considerado significar também um único composto, ou semelhante.

[0185] O termo “glicoepítopo”, como usado aqui, se refere à fração de carboidrato que é reconhecida por uma proteína de ligação de carboidrato (CBP). De preferência, o termo “glicoepítopo”, como usado aqui, se refere a uma fração de carboidrato selecionada de glicolipídeos, tal como os tipos globo e gânglio; glicoantígenos de glóbulos vermelhos; os glicoantígenos de Tn e sialil-Tn. Preferivelmente, o termo “glicoepítopo”, como usado aqui, se refere à fração de carboidrato que é reconhecida por uma CBP, em que o referido glicoepítopo é compreendido por compostos de fórmula (I) ou fórmula (II) ou fórmula (III) ou fórmula (IV).

[0186] O termo “extremidade redutora”, como aqui utilizado no contexto do glicoepítopo da presente invenção e dos compostos inventivos específicos, se refere ao monossacarídeo terminal do glicoepítopo com um carbono anomérico livre que não está envolvido em uma ligação glicosídica, em que o referido carbono anomérico livre carrega um grupo hemiacetal.

[0187] O termo “biodegradável”, como aqui utilizado, se refere a biodegradabilidade metabólica, biodegradabilidade mediada por células, biodegradabilidade enzimática, biodegradabilidade hidrolítica da espinha dorsal poliméhca biodegradável do polímero inventivo.

[0188] O termo “Ci-4alquil”, como aqui utilizado, se refere a cadeia linear ou ramificada de 1 a 4 átomos de carbono e inclui butil. tal como n-butil, sec-butil, /so-butil, ferc-butil, propil, tal como n-propil ou /so-propil, etil ou metil. Preferencialmente, o termo “Ci-4alquil” se refere a metil ou etil. n-propil ou /sopropil. Mais preferencialmente, o termo “Ci-4alquil” se refere a metil. Correspondentemente, o termo “Ci-salquil”, conforme aqui utilizado se refere a cadeia linear ou ramificada de 1 a 8 átomos de carbono. O termo “Ci-4alquil

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105/157 (OCH2CH2)pO-Ci-4alquil”, como aqui utilizado, e quando se referindo ao ligante Z definido como -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, e quando se referindo a A dentro do referido ligante Z deve se referir, como evidente da descrição e dos exemplos aqui, a um grupo bivalente “Ci-4alquil-(OCH2CH2)_PO-Ci-4alquil” incluindo grupos tais como -(CH2)n-(OCH2CH2)_PO-(CH2)n- com n igual a 1 a 4.

[0189] O termo “C-i-yalquileno”, como aqui utilizado, se refere a uma cadeia alquil bivalente linear ou ramificada, de preferência a uma cadeia alquil bivalente linear ou ramificada de 1 a 7 átomos de carbono e inclui, por exemplo, -CH2-, -CH2CH2-, -CH(CH₃)-, -CH2-CH2-CH2-, -CH(CH₃)-CH2- ou -CH(CH₂CH₃)-.

[0190] O termo “Cwalcoxi”, como usado aqui, se refere a um alcóxi com uma cadeia linear ou ramificada de 1 a 7 átomos de carbono. O termo “Ci-4alcóxi”, como usado aqui, se refere a um alcóxi com uma cadeia linear ou ramificada de 1 a 4 átomos de carbono e inclui metóxi, etóxi, propóxi, /so-propóxi, n-butóxi, secbutóxi e ferc-butóxi. De preferência, o termo “Ci-4alcóxi”, como aqui utilizado, se refere a metóxi, etóxi, propóxi. Mais preferencialmente, o termo “Ci-4alcóxi”, como aqui utilizado, se refere a metóxi. O termo “Cwalcóxi”, tal como aqui utilizado, e quando se referindo ao ligante Z definido como ligante -X-A-(B)_P(CH2)q-Y, e quando se referindo ao referido A dentro do referido ligante Z, deve se referir, como evidente da descrição e dos exemplos aqui, a um grupo C1C7alcóxi incluindo grupos tais como -(CH2)nO- ou -O(CH2)n- com n igual a 1 a 7, tipicamente e muito preferencialmente para grupos tais como -O(CH2)nformando com o referido X = N(R^a) do ligante Z uma ligação preferida N(R^a)O(CH₂)n-.

[0191] O termo “C-i-Cs-alquenil”, como aqui utilizado, se refere a uma cadeia linear ou ramificada contendo uma ou mais, por exemplo, duas ou três, ligações duplas e é preferencialmente Ci-4alquenil, tal como 1- ou 2-butenil, 1 -propenil, alil ou vinil.

[0192] Ligações duplas, em princípio, podem ter configuração E ou Z. Os compostos desta invenção podem, portanto, existir como misturas isoméricas ou

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106/157 isômeros únicos. Se não especificado, ambas as formas isoméricas são pretendidas.

[0193] O termo “Ci-salquinil”, como aqui utilizado, se refere a uma cadeia linear ou ramificada compreendendo uma ou mais, de preferência uma ligação tripla. São preferidos C1-C4- alquinil, tal como propargil ou acetilenil.

[0194] Quaisquer átomos de carbono assimétricos podem estar presentes na configuração (R)-, (S)- ou (R,S)-, preferencialmente na configuração (R)- ou (S). Os compostos podem assim estar presentes como misturas de isômeros ou como isômeros puros, preferencialmente como diastereômeros puros de enantiômeros.

[0195] O termo “aril”, como aqui utilizado, se refere a um grupo aromático de anel fundido mono ou bicíclico com 5 a 10 átomos de carbono carregando opcionalmente substituintes, tal como fenil, 1-naftil ou 2-naftil, ou também um anel fundido bicíclico parcialmente saturado compreendendo um grupo fenila, tal como indanila, indolinila, di-hidro ou tetra-hidronaftila. todos opcionalmente substituídos. Preferencialmente, aril é fenil, indanil, indolinil ou tetra-hidronaftil, em particular fenil.

[0196] O termo “heteroaril”, como usado aqui, se refere a um sistema de anel mono ou bicíclico aromático contendo pelo menos um heteroátomo e, de preferência, até três heteroátomos selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre como membros de anel. Os anéis heteroaril não contêm átomos de oxigênio adjacentes, átomos de enxofre adjacentes ou átomos de oxigênio e enxofre adjacentes dentro do anel. Heteroaril monocíclico se refere preferencialmente a grupos heteroaril de 5 ou 6 membros e heteroaril bicíclico se refere preferencialmente a grupos heteroaril de anel fundido de 9 ou 10 membros. Exemplos de heteroaril incluem pirrolil, tienil, furil, pirazolil, imidazolil, triazolil, tetrazolil, oxazolil, isoxazolil, oxadiazolil, tiazolil, isotiazolil, tiadiazolil, piridil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil e benzo ou derivados fundidos de piridazo desses grupos heteroaril monocíclicos, tal como indolil, benzimidazolil,

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107/157 benzofuril, quinolinil, isoquinolinil, quinazolinil, pirrolopiridina, imidazopiridina ou purinil, todos opcionalmente substituídos.

[0197] Preferencialmente, o termo “heteroaril” se refere a um sistema de anel monocíclico aromático de 5 ou 6 membros contendo pelo menos um heteroátomo e, de preferência, até três heteroátomos selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre como membros de anel. Preferencialmente, heteroaril é piridil, pirimdinil, pirazinil, piridazinil, tienil, pirazolil, imidazolil, tiazolil, oxadiazolil, triazolil, oxazolil, isoxazolil, isotiazolil, pirrolil, indolil, pirrolopiridina ou imidazopiridina; em particular, piridil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, pirazolil, imidazolil, tiazolil, oxadiazolil, triazolil, indolil, pirrolopiridina ou imidazopiridina [0198] O termo “ahl opcionalmente substituído”, como aqui utilizado, se refere a aril substituído por até quatro substituintes, preferencialmente até dois substituintes. Em aril opcionalmente substituído, de preferência em fenil opcionalmente substituído, os substituintes são preferencialmente e independentemente selecionados de Ci-C4-alquil, Ci-C4-alcóxi, amino-Ci-C4alquil, acilamino-Ci-C4-alquil, aril-Ci-C4-alquil hidróxi, carbóxi, C1-C4alcoxicarbonil, aminocarbonil, hidroxilaminocarbonil, tetrazolil, hidroxissulfonil, aminossulfonil, halo ou nitro, em particular Ci-C4-alquil, Ci-C4-alcóxi, amino-C-iC4-alquil, acilamin-Ci-C4-alquil, carbóxi, Ci-C4-alcoxicarbonil, aminocarbonil, hidroxilaminocarbonil, tetrazolil ou aminossulfonil.

[0199] O termo “heteroaril opcionalmente substituído”, como usado aqui, se refere a heteroaril substituído por até três substituintes, preferencialmente até dois substituintes. Em heteroaril opcionalmente substituído, os substituintes são preferencialmente e independentemente selecionados de Ci-4alquil, Ci-4alcóxi, halo-Ci-4alquil, hidróxi, Ci-C4-alcoxicarbonil, aminocarbonil, hidroxilaminocarbonil, tetrazolil, aminossulfonil, halo, anl-Ci-4alquil ou nitro. [0200] Cicloalquil tem de preferência 3 a 7 átomos de carbono de anel e pode estar não substituído ou substituído, por exemplo, por Ci-4alquil ou Ci-4alcóxi. Cicloalquil é, por exemplo, ciclo-hexil, ciclopentil, metilciclopentil ou ciclopropil, em particular ciclopropil.

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108/157 [0201]Acil designa, por exemplo, alquilcarbonil, cicloalquilcarbonil, arilcarbonil, aril-Ci-C4-alquilcarbonil ou heteroarilcarbonil. C1-4 acil é de preferência alquilcarbonil inferior, em particular propionil ou acetil. Ac significa acetil.

[0202] Hidroxialquil é especialmente hidróxi Ci-4alquil, de preferência hidroximetil, 2-hidroxietil ou 2-hidroxi-2-propil.

[0203] Haloalquil é preferencialmente fluoroalquil, especialmente trifluorometil, 3,3,3-trifluoroetil ou pentafluoroetil.

[0204] Halogênio é flúor, cloro, bromo ou iodo.

[0205] Arilalquil inclui aril e alquilm como definidos anteriormente, e é, por exemplo, benzil. 1 -fenetil ou 2-fenetil.

[0206] Heteroarilalquil inclui heteroaril e alquil como definido anteriormente e é, por exemplo, 2-, 3- ou 4-piridilmetil, 1- ou 2-pirrolilmetil, 1 -pirazolilmetil, 1imidazolilmetil, 2-(1 -imidazolil)etil ou 3-(1 -imidazolil)propil.

[0207] Em amino substituído, os substituintes são preferencialmente aqueles mencionados como substituintes aqui anteriormente. Em particular, amino substituído é alquilamino, dialquilamino, arilamino opcionalmente substituído, arilalquilamino opcionalmente substituído, alquilcarbonilamino inferior, benzoilamino, piridilcarbonilamino, alcoxicarbonilamino inferior ou aminocarbonilamino opcionalmente substituído.

[0208] Sais particulares considerados são aqueles que substituem os átomos de hidrogênio de função ácido carboxílico. Cátions adequados são, por exemplo, cátions de sódio, potássio, cálcio, magnésio ou amônio ou também cátions derivados por protonação de aminas primárias, secundárias ou terciárias contendo, por exemplo, grupos Ci-C4-alquil, hidroxi-Ci-C4-alquil ou hidroxi-CiC4-alcoxi-Ci-C4-alquil, por exemplo, 2-hidroxietilamônio, 2-(2hidroxietoxi)etildimetilamônio, dietilamônio, di(2-hidroxietil)amônio, trimetilamônio, trietilamônio, 2-hidroxietildimetilamônio ou di(2hidroxietil)metilamônio, também de aminas cíclicas secundárias e terciárias substituídas de forma correspondente, por exemplo, N-metilpirrolidínio, N

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109/157 metilpiperidínio, N-metilmorfolínio, Ν-2-hidroxietilpirrolidínio, N-2hidroxietilpiperidínio ou Ν-2-hidroxietilmorfolínio e semelhantes.

[0209] Em vista da estreita relação entre os novos compostos na forma livre e aqueles na forma de seus sais, incluindo aqueles sais que podem ser utilizados como intermediários, por exemplo, na purificação ou identificação dos novos compostos, qualquer referência aos compostos livres antes e a seguir será entendida como se referindo também aos sais correspondentes e vice-versa, conforme apropriado e conveniente [0210] Uma espinha dorsal de polímero preferida nos polímeros inventivos compreendendo uma multiplicidade de compostos de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) ou fórmula (IV) é polilisina, em particular poli-L-lisina.

[0211] Preferencialmente, o peso molecular da polilisina é de 1.000 a 300.000 Da. de preferência 10.000 a 200.000 Da. Particularmente preferido é um peso molecular de aproximadamente 30.000 Da, 50.000 Da, 70.000 Da, 125.000 Da ou 200.000 Da. O mais preferido é um peso molecular de aproximadamente 50.000 Da. Tipicamente e preferencialmente, a polilisina utilizada na presente invenção e, em particular, a polilisina utilizada para os exemplos aqui descritos, foi adquirida na forma do seu sal bromidrato. Tipicamente e preferencialmente, as faixas preferidas do peso molecular da polilisina das modalidades preferidas da presente invenção se referem ao peso molecular da polilisina e não seu sal bromidrato.

[0212] Em particular, a invenção se refere a tais polímeros em que o carregamento relativo da espinha dorsal de polímero com a fração de carboidrato do referido composto de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) é de 10 a 90%, significando que 10 a 90% de todas as cadeias laterais de lisina no polímero são conectadas ao referido grupo Y do referido ligante Z, cujo ligante Z é compreendido pelos compostos inventivos e preferencialmente pelos compostos inventivos de fórmula (I) ou (II) ou (III) ou (IV), as funções amino restantes sendo capeadas. De preferência, o carregamento do polímero é de 20 a 70%, mais preferencialmente de 30 a 60%. Polímeros preferidos adicionais no referido

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110/157 contexto são polímeros com carregamento de um ou vários dos compostos de fórmula (I), (II), (III) ou (IV), em que os referidos compostos de fórmula (I), (II), (III) ou (IV), são selecionados de 3*, 8*, 22*, 26*, 31*, 34*, 37*, 45*, 47* a 58* [0213] Os polímeros da presente invenção compreendendo a referida multiplicidade de compostos, cujos compostos compreendem frações de carboidrato e ligantes Z, em que as referidas frações de carboidrato imitam glicoepítopos reconhecidos por CBPs, permitem o acoplamento direto das referidas frações de carboidrato a poli-L-lisina biodegradável e outros polímeros biodegradáveis funcionalizados. Assim, os glicoconjugados/glicopolímeros definidos quimicamente inventivos resultantes com base em espinhas dorsais de polímeros biodegradáveis podem ser utilizados em um contexto clínico, seja terapêutico e diagnóstico, para detectar ou neutralizar ou remover CBPs patogênicas. Mais ainda, a apresentação multivalente das frações de carboidratos que imitam glicoepítopos reconhecidos por CBPs em, preferencialmente, poli-L-lisina, pode aumentar substancialmente sua afinidade de ligação a CBPs.

[0214] Em uma modalidade particularmente preferida, a invenção se refere a polímeros compreendendo uma multiplicidade de compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) em que o polímero é poli-L-lisina e em que o referido polímero compreende ainda o referido ligante Z que conecta os referidos compostos à espinha dorsal do polímero através de uma fração espaçadora. Poli-L-lisina é biodegradável e, portanto, particularmente adequada para aplicação terapêutica.

[0215] Os polímeros, compostos e composições da invenção têm propriedades farmacológicas valiosas. A invenção também se refere a polímeros, compostos e composições como definido anteriormente para uso como medicamentos. Um polímero, composto e uma composição de acordo com a invenção mostra eficácia profilática e terapêutica, especialmente contra doenças associadas à citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediada por CBP.

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111/157 [0216] Um ou múltiplos compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) ou polímeros compreendendo estes, podem ser administrados sozinhos ou em combinação com um ou mais outros agentes terapêuticos, terapia de combinação possível assumindo a forma de combinações fixas, ou a administração de um polímero, compostos ou composição da invenção e um ou mais outros agentes terapêuticos sendo escalonados ou dados independentemente um do outro, ou a administração combinada de combinações fixas e um ou mais outros agentes terapêuticos.

[0217]Agentes terapêuticos para possível combinação são particularmente antibióticos ou agentes/terapias imunossupressoras. Exemplos de antibióticos são penicilinas, cefalosporinas. fluoroquinolonas ou aminoglicosídeos. Exemplos de agentes/terapias imunossupressaras são análogos de purina, como fludarabina e/ou cladribina, plasmaférese, imunoglobulinas intravenosas, mais ainda anticorpos anti-CD20⁺, tal como htuximabe.

[0218] Em outra modalidade particular, a invenção se refere ao uso dos polímeros, compostos e composições da invenção em um ensaio de diagnóstico para doenças associadas à citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediada por CBP. Em particular, a invenção se refere a kits compreendendo os compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV), conforme definido acima, e também polímeros da invenção compreendendo tais compostos como substituintes.

[0219] A presente invenção se refere a um método de diagnóstico de doenças associadas à citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediada por CBP, em que o nível de CBP é determinado em uma amostra de fluido corporal, por exemplo, soro, e um nível alto é indicativo do desenvolvimento e da severidade de uma doença particular.

[0220] Outros fluidos corporais além do soro são úteis para a determinação de CBPs e são, por exemplo, sangue total, fluido cefalorraquidiano ou extratos de tecido sólido.

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112/157 [0221 ] Qualquer método conhecido pode ser usado para a determinação do nível de CBPs em fluidos corporais. Os métodos considerados são, por exemplo, análises ELISA, RIA, EIA, micromathz e glycanarray.

[0222] Um método preferido para a determinação de CBPs, por exemplo, no soro, é um ELISA. Em tal modalidade, as placas de microtitulação são revestidas com compostos da fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV), ou preferencialmente polímeros da invenção compreendendo esses compostos como substituintes. As placas são, então, bloqueadas e a amostra ou uma solução padrão é carregada. Após incubação, uma CBP é aplicada, por exemplo, uma CBP diretamente conjugada com um marcador adequado, por exemplo, com uma enzima para detecção cromogênica. Alternativamente, é adicionado um anticorpo anti-CBP de coelho (ou camundongo) policlonal. Um segundo anticorpo que detecta o tipo particular de CBP, por exemplo, um anticorpo anti-coelho (ou anti-camundongo), conjugado com um marcador adequado, por exemplo, a enzima para detecção cromogênica, é, então, adicionado. Finalmente, a placa é revelada com um substrato para o marcador a fim de detectar e quantificar o marcador, sendo uma medida para a presença e quantidade de CBP. Se o marcador for uma enzima para detecção cromogênica, o substrato é um substrato gerador de cor da enzima conjugada. A reação de cor é, então, detectada em um leitor de microplaca e comparada com padrões.

[0223] Também é possível usar fragmentos de anticorpos. Marcadores adequados são marcadores cromogênicos, isto é, enzimas que podem ser usadas para converter um substrato em um composto colorido ou fluorescente ou luminescente detectável, marcadores espectroscópicos, por exemplo, marcadores fluorescentes ou luminescentes ou marcadores que apresentam uma cor visível, marcadores de afinidade que podem ser revelados por um composto adicional específico para o marcador e permitindo fácil detecção e quantificação ou qualquer outro marcador usado em ELISA padrão.

[0224] Outros métodos preferidos de detecção de CBPs são o radioimunoensaio ou imunoensaio competitivo e detecção de quimioluminescência em robôs

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113/157 analíticos comerciais automatizados. Fluorescência intensificada de micropartículas, metodologias polarizadas de fluorescência ou espectrometria de massa também podem ser usadas. Dispositivos de detecção, por exemplo, micromatrizes, glycanarrays, são componentes úteis como sistemas de leitura para CBPs.

[0225] Em uma modalidade adicional, a invenção se refere a um kit adequado para um ensaio como descrito acima, em particular um ELISA, compreendendo os compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) ou polímeros compreendendo tais compostos como substituintes. Os kits ainda contêm CBPs (ou fragmentos de CBP) carregando um marcador adequado ou CBPs e segundos anticorpos carregando esse marcador adequado e reagentes ou equipamentos para detectar o marcador, por exemplo, reagentes reagindo com enzimas usadas como marcadores e indicando a presença de um tal marcador por uma formação de cor ou fluorescência ou luminescência, equipamento padrão, tal como placas de microtitulação, pipetas e similares, soluções padrão e soluções de lavagem.

[0226] O ELISA também pode ser projetado de maneira que amostras de sangue ou soro de pacientes sejam usadas para o revestimento de placas de microtitulação com a detecção subsequente de CBPs com compostos marcados de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV). ou polímeros marcados compreendendo esses compostos como substituintes. O marcador é diretamente detectável ou indiretamente detectável através de um anticorpo.

[0227] O polímero carregando compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) da invenção tipicamente e preferencialmente liga às CBPs patogênicas. Ele permite um tratamento dirigido para doenças associadas à citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediada por CBP.

[0228] Mais ainda, a invenção se refere a uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) ou um polímero de acordo com a presente invenção carregando os referidos compostos de fórmula (I) e/ou (II) e/ou (III) e/ou (IV) da invenção.

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114/157 [0229] Composições farmacêuticas para administração parenteral, tal como administração subcutânea, intravenosa, intra-hepática ou intramuscular, a animais de sangue quente, especialmente humanos são consideradas. As composições compreendem o(s) ingrediente(s) ativo(s) sozinho(s) ou, de preferência, junto com um transportador farmaceuticamente aceitável. A dosagem do(s) ingrediente(s) ativo(s) depende da idade, do peso e da condição individual do paciente, dos dados farmacocinéticos individuais e do modo de administração.

[0230] Para administração parenteral, é dada preferência ao uso de suspensões ou dispersões do polímero de carboidrato da invenção, especialmente dispersões ou suspensões aquosas isotônicas que, por exemplo, podem ser compostas pouco antes do uso. As composições farmacêuticas podem ser esterilizadas e/ou podem compreender excipientes, por exemplo, conservantes, estabilizadores, agentes umectantes e/ou emulsificantes, solubilizante, agentes de aumento de viscosidade, sais para regular a pressão osmótica e/ou tampões e são preparadas de uma maneira conhecida per se, por exemplo, por meio de processos convencionais de dissolução e liofilização.

[0231]Transportadores adequados para administração enteral, tal como administração nasal, bucal, retal ou oral, são especialmente enchimentos, tal como açúcares, por exemplo, lactose, sacarose, manitol ou sorbitol, preparações de celulose e/ou fosfatos de cálcio, por exemplo, fosfato thcálcico ou fosfato de cálcio hidrogênio e também aglutinantes, tal como amidos, por exemplo, de milho, trigo, arroz ou amido de batata, metilcelulose, hidroxipropil metilcelulose, sódio carboximetilcelulose e/ou polivinilpirrolidona e/ou, se desejado, desintegrantes, tal como os amidos mencionados acima, também amido carboximetil, polivinilpirrolidona reticulada, ácido algínico ou um sal do mesmo, tal como alginato de sódio. Excipientes adicionais são especialmente condicionadores de fluxo e lubrificantes, por exemplo, ácido silícico, talco, ácido esteáhco ou sais do mesmo, tal como estearato de magnésio ou cálcio e/ou polietileno glicol ou derivados do mesmo.

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115/157 [0232] Núcleos de comprimidos podem ser fornecidos com revestimentos adequados, opcionalmente entéricos, através do uso de, entre outros, soluções de açúcar concentradas que podem compreender goma arábica, talco, polivinilpirrolidona, polietileno glicol e/ou dióxido de titânio, ou soluções de revestimento em solventes orgânicos adequados ou misturas de solventes ou, para a preparação de revestimentos entéricos, soluções de preparações de celulose adequadas, tal como ftalato de acetilcelulose ou ftalato de hidroxipropilmetilcelulose. Podem ser adicionados corantes ou pigmentos aos comprimidos ou aos revestimentos dos comprimidos, por exemplo, para fins de identificação ou para indicar doses diferentes de ingrediente(s) ativo(s).

[0233] Composições farmacêuticas para administração oral também incluem cápsulas duras consistindo em gelatina e também cápsulas moles seladas consistindo em gelatina e um plastificante, tal como glicerol ou sorbitol. As cápsulas duras podem conter o ingrediente ativo na forma de grânulos, por exemplo, em mistura com enchimentos, tal como amido de milho, ligantes e/ou glidantes, tal como talco ou estearato de magnésio e, opcionalmente, estabilizadores. Em cápsulas moles, o ingrediente ativo é preferencialmente dissolvido ou suspenso em excipientes líquidos adequados, tal como óleos graxos, óleo de parafina ou polietileno glicóis líquidos ou ésteres de ácidos graxos de etileno ou propileno glicol, aos quais estabilizadores e detergentes, por exemplo, o tipo de éster de ácido graxo de polioxietileno sorbitano, também podem ser adicionados.

[0234] As composições farmacêuticas adequadas para administração retal são, por exemplo, supositóhos que consistem em uma combinação do ingrediente ativo e uma base de supositório. Bases de supositóho adequadas são, por exemplo, thglicerídeos naturais ou sintéticos, hidrocarbonetos de parafina, polietileno glicóis ou alcanóis superiores.

[0235] As composições farmacêuticas mencionadas de acordo com a invenção podem conter comprimidos, grânulos ou outras formas de formulação oralmente aceitáveis dos ingredientes ativos, ou podem conter uma mistura de ingredientes

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116/157 ativos em uma forma de dosagem farmacêutica adequada, como descrito acima. Em particular, as formulações separadas oralmente aceitáveis ou a mistura em uma forma de dosagem farmacêutica adequada podem ser composições farmacêuticas de liberação lenta e liberação controlada.

[0236] As composições farmacêuticas compreendem de aproximadamente 1% a aproximadamente

95% de ingrediente ativo ou mistura de ingredientes ativos, as formas de administração de dose única compreendendo na modalidade preferida de aproximadamente 20% a aproximadamente 90% de ingrediente(s) ativo(s) e formas que não são do tipo de dose única compreendendo na modalidade preferida de aproximadamente 5% a aproximadamente 20% de ingrediente(s) ativo(s).

[0237] A invenção também se refere às composições farmacêuticas mencionadas como medicamentos no tratamento de doenças associadas à citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediada por CBP.

[0238]Assim, em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero de acordo com a presente invenção, um composto de acordo com a presente invenção ou uma composição farmacêutica da acordo com a presente invenção para uso em um método para tratar uma doença ou distúrbio, em que a referida doença ou distúrbio é selecionada de uma infecção bacteriana, um distúrbio de aglutinação ou um distúrbio causado por depósitos de complexo imune, em que preferivelmente a referida infecção bacteriana é causada por Shigella, preferivelmente por S. dysenteriae, Escherichia coli, Vibrio cholerae, Clostridium difficile, Clostridium botulinum, Clostridium tetani, Bordetella pertussis; e em que preferivelmente o referido distúrbio de aglutinação é causado por aglutininas anti-A, aglutininas anti-B, aglutininas de sistema anti-l, aglutininas de sistema anti-P ou aglutininas anti-Tn e anti-sialil-Tn; e em que preferivelmente o referido distúrbio causado por imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune é causado pela ligação de imunoglobulinas ao antígeno Tn e

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117/157 sialil-Tn em outras imunoglobulinas, preferivelmente selecionadas de IgG, IgA, igM.

[0239] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é uma infecção bacteriana, em que preferencialmente a referida infecção bacteriana é causada por Shigella e em que a referida infecção bacteriana é preferencialmente shigelose, disenteria bacilar, síndrome de Marlow ou síndrome hemolítico-urêmica (HUS).

[0240] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é uma infecção bacteriana, em que preferencialmente a referida infecção bacteriana é causada por Escherichia coli e em que a referida infecção bacteriana é preferencialmente diarréia dos viajantes.

[0241] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é uma infecção bacteriana, em que preferencialmente a referida infecção bacteriana é causada por Vibrio cholerae e em que a referida infecção bacteriana é preferencialmente cólera.

[0242] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é uma infecção bacteriana, em que preferencialmente a referida infecção bacteriana é causada por Clostridium difficile e em que a referida infecção bacteriana é preferencialmente infecção por Clostridium difficile.

[0243] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é uma infecção bacteriana, em que preferencialmente a referida infecção bacteriana é causada por Clostridium botulinum e em que a referida infecção bacteriana é preferencialmente botulinismo.

[0244] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é uma infecção bacteriana, em que preferencialmente a referida infecção bacteriana é causada por Clostridium tetanieem que a referida infecção bacteriana é preferencialmente tétano.

[0245] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é uma infecção bacteriana, em que preferencialmente a referida

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118/157 infecção bacteriana é causada por Bordetella pertussis e em que a referida infecção bacteriana é preferencialmente coqueluche ou tosse convulsa.

[0246] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é um distúrbio de aglutinação, em que preferencialmente o referido distúrbio de aglutinação é causado por aglutininas anti-A e em que preferivelmente o referido distúrbio de aglutinação é transplante/transfusão incompatível com ABH.

[0247] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é um distúrbio de aglutinação, em que preferencialmente o referido distúrbio de aglutinação é causado por aglutininas anti-B e em que preferivelmente o referido distúrbio de aglutinação é transplante/transfusão incompatível com ABH.

[0248] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é um distúrbio de aglutinação, em que preferencialmente o referido distúrbio de aglutinação é causado por aglutininas de sistema anti-l e em que preferencialmente o referido distúrbio de aglutinação é doença de aglutininafria. [0249] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é um distúrbio de aglutinação, em que preferencialmente o referido distúrbio de aglutinação é causado por aglutininas de sistema anti-P e em que preferencialmente o referido distúrbio de aglutinação é hemoglobinúha paroxística do frio.

[0250] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é um distúrbio de aglutinação, em que preferencialmente o referido distúrbio de aglutinação é causado por aglutininas anti-Tn ou anti-sialil-Tn e em que preferivelmente o referido distúrbio de aglutinação é síndrome de poliaglutinabilidade de Tn.

[0251] Em uma modalidade preferida adicional, a referida doença ou o referido distúrbio é um distúrbio causado por imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune, em que preferivelmente o referido distúrbio é nefropatia de IgA (também conhecida como nefrite de IgA ou doença de Berger ou glomerulonefhte

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119/157 sinfaringítica) e vasculite de IgA (também conhecida como Púrpura de Henoch Schõnlein (HSP).

[0252] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero de acordo com a presente invenção, um composto de acordo com a presente invenção ou uma composição farmacêutica de acordo com a presente invenção para uso em um método de tratamento de uma doença ou um distúrbio, em que a referida doença ou o referido distúrbio é selecionado de uma infecção bacteriana, um distúrbio de aglutinação ou um distúrbio causado por depósitos de complexo imune e em que preferencialmente a referida doença ou o referido distúrbio é selecionado de shigelose, disenteria bacilar, síndrome de Marlow, síndrome hemolítico-urêmica (HUS), diarréia dos viajantes, cólera, infecção por Clostridium difficile, botulinismo, tétano, coqueluche ou tosse convulsa, transplante/transfusão incompatível com ABH, doença de agluttinina fria, hemoglobinúria fria paroxística, síndrome da polaglutinabilidade de Tn, nefropatia de IgA (também conhecida como nefhte de IgA ou doença de Berger, ou glomerulonefhte sinfaringítica) ou vasculite de IgA (também conhecida como Púrpura de Henoch Schõnlein (HSP).

[0253] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero ou uso em um método de tratar uma doença ou um distúrbio, em que a referida doença ou o referido distúrbio é selecionado de uma infecção bacteriana, um distúrbio de aglutinação ou um distúrbio causado por depósitos de complexo imune, preferencialmente uma infecção bacteriana, e em que preferivelmente a referida doença ou o referido distúrbio é selecionado de shigelose, disenteria bacilar, síndrome de Marlow, síndrome hemolítico-urêmica (HUS), diarréia dos viajantes, cólera, infecção por Clostridium difficile, botulinismo, tétano, coqueluche ou tosse convulsa, transplante/transfusão incompatível com ABH, doença de agluttinina fria, hemoglobinúria fria paroxística, síndrome da polaglutinabilidade de Tn, nefropatia de IgA (também conhecida como nefrite de IgA ou doença de Berger, ou glomerulonefrite sinfaringítica) ou vasculite de IgA (também conhecida como Púrpura de Henoch Schõnlein (HSP); e em que o

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120/157 referido polímero compreende uma multiplicidade de um composto, em que o referido composto compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z e em que a referida CBP é selecionada de uma endotoxina bacteriana, uma aglutinina e uma imunoglobulina formadora de dep'soito de complexo imune e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que

Xé O ou N(R^a);

R^a é H, Ci-4-alquil, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

Aé Ci-7alquileno, OCwalquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi4alquileno, OCi-7alquileno-R^b ou R^b-Ci-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

B é NHC(O) ou S;

pé 0 ou 1;

q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, 2 ou 3;

Yé SH, N₃ ou NH₂; e em que o referido ligante Z é ligado covalentemente através de seu grupo -X à extremidade redutora da referida fração de carboidrato; e em que a referida multiplicidade do referido composto é conectada à espinha dorsal do polímero por meio do referido ligante Z e em que a referida conexão é efetuada através do grupo Y do referido ligante Z.

[0254] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero de acordo com a presente invenção, um composto de acordo com a presente invenção ou uma composição farmacêutica de acordo com a presente invenção para uso em um método de diagnóstico de uma doença ou um distúrbio, em que a referida doença ou o referido distúrbio é selecionado de uma infecção bacteriana, um distúrbio de aglutinação ou um distúrbio causado por imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune e em que preferencialmente a referida doença ou o referido distúrbio é selecionado de

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121/157 shigelose, disenteria bacilar, sindrome de Marlow, síndrome hemolítico-urêmica (HUS), diarréia dos viajantes, cólera, infecção por Clostridium difficile, botulinismo, tétano, coqueluche ou tosse convulsa, transplante/transfusão incompatível com ABH, doença de agluttinina fria, hemoglobinúria fria paroxística, síndrome da polaglutinabilidade de Tn, nefropatia de IgA (também conhecida como nefhte de IgA ou doença de Berger, ou glomerulonefhte sinfaringítica) ou vasculite de IgA (também conhecida como Púrpura de Henoch Schõnlein (HSP).

[0255] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um polímero de acordo com a presente invenção, um composto de acordo com a presente invenção ou uma composição farmacêutica da acordo com a presente invenção para uso em um método para diagnosticar uma doença ou distúrbio, em que a referida doença ou distúrbio é selecionada de uma infecção bacteriana, um distúrbio de aglutinação ou um distúrbio causado por imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune, em que preferivelmente a referida infecção bacteriana é causada por Shigella, Escherichia coli, Vibrio cholerae, Clostridium difficile, Clostridium botulinum, Clostridium tetani, Bordetella pertussis; e em que preferivelmente o referido distúrbio de aglutinação é causado por aglutininas anti-A, aglutininas anti-B, aglutininas de sistema anti-l/i, aglutininas de sistema anti-P ou aglutininas anti-Tn e anti-sialil-Tn; e em que preferivelmente o referido distúrbio causado por depósitos de complexo imune é causado pela ligação de imunoglobulinas ao antígeno Tn e sialil-Tn em outras imunoglobulinas, tipicamente e preferivelmente em IgG, IgA, IgM).

[0256] A presente invenção, assim, se refere ainda a um método de tratamento de tratamento de uma doença associada com citotoxicidade, aglutinação ou formação de depósito de complexo imune mediada por CBP, que compreende administrar um polímero ou uma composição de acordo com a invenção em uma quantidade eficaz contra a referida doença a um animal de sangue quente que exija esse tratamento. As composições farmacêuticas podem ser administradas

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122/157 profilaticamente ou terapeuticamente, preferencialmente em uma quantidade eficaz contra as referidas doenças, a um animal de sangue quente, por exemplo, um humano, requerendo esse tratamento. No caso de um indivíduo tendo um peso corporal de cerca de 70 kg, a dose diária, semanal ou mensal administrada é de aproximadamente 0,01 g a aproximadamente 5 g, preferencialmente de aproximadamente 0,1 g a aproximadamente 1,5 g dos ingredientes ativos em uma composição da presente invenção.

[0257] Os seguintes exemplos servem para ilustrar a invenção sem limitar a invenção em seu escopo.

Exemplos

Métodos Gerais [0258] Os espectros de NMR foram obtidos em um espectrômetro Bruker Avance DMX-500 (500 MHz). A atribuição de espectros de ¹H e ¹³C NMR foi conseguida utilizando métodos 2D (COSY, HSQC e HMBC). Os desvios químicos são expressos em ppm usando HDO residual como referência. Os espectros de IV foram registrados usando um espectrômetro Perkin-Elmer Spectrum One FT-IR. Os espectros de massa de ionização por spray de elétrons (ESI-MS) foram obtidos em uma micromassa Waters ZQ. A análise de HRMS foi realizada usando um Agilent 1100LC equipado com um detector de matriz de fotodiodo e um QTOF I de micromassa equipado com um conversor de tempo digital de 4 GHz. As reações foram monitoradas por ESI-MS e TLC usando placas de vidro revestidas com silica gel 60 F254 (Merck) e visualizadas usando luz UV e/ou carbonizando com mostain (uma solução 0,02 M de sulfato de cého amônio dihidratado e molibdato de amônio tetra-hidratado em H2SO4 10% aq). Cromatografia de coluna foi realizada em silica gel (coluna de silica gel de fase normal Redisep 35/70) ou RP-18 (Merck LiChroprep® RP-18 40/63). Dimetilformamida (DMF) foi adquirida de Acros (99,8%, extra seca, sobre peneiras moleculares). As peneiras moleculares (MS, 4 Â) foram ativadas in vacuo a 400°C por 30 min. imediatamente antes do uso. Cromatografia de exclusão de tamanho foi realizada em gel de poliacrilamida (Biogel P-2 Fine).

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Diálise foi realizada em uma Membrana de Éster de Celulose (CE) Biotech (SpectrumLabs, corte de peso molecular: 100-500 Da). Centrifugações foram realizadas com uma Centrífuga Eppendorf 5804 R. rt = temperatura ambiente. [0259] Nove glicopolímeros foram sintetizados (5, 6, Esquema 1; 9, Esquema 2; 23, Esquema 4; 27, Esquema 5; 32, Esquema 7; 35, Esquema 8; 38, 39, Esquema 9; 59, Esquema 11) para avaliação biológica. Glicoconjugados de polisina 5, 6 carregam o mesmo carboidrato (Gb3), mas diferentes no carregamento do ligante. O glicoconjugado de polilisina 9 carrega o tetrassacarídeo tipo 5 de antígeno do grupo sanguíneo A. O glicoconjugado de polilisina 23 carrega um mimético do trissacarídeo Gb3. O glicoconjugado de polilisina 27 carrega o antígeno de Τη. A síntese do aceitador de galactose 18 é descrita no Esquema 3. A síntese do ligante 2 é descrita no Esquema 6. O glicoconjugado de polilisina 32 carrega o antígeno do trissacarídeo do grupo sanguíneo A. O glicoconjugado de polilisina 35 carrega o antígeno do trissacarídeo do grupo sanguíneo B. Os glicoconjugados de polilisina 38, 39 carregam o antígeno de Tn-Thr. O glicoconjugado de polilisina 59 carrega o antígeno GM1a. A síntese de tiol 45 é descrita no Esquema 10. Todos os reagentes foram trazidos de Sigma Aldrich, Acros, Alfa-Aesar, Elicityl ou Alamanda Polymers. Poli-L-lisina cloroacetilada 4 (400 unidades de repetição de lisina) foi sintetizada de polímero de bromidrato de poli-L-lisina (obtido de Alamanda Polymers, MW = 84 kDa) de acordo com um procedimento publicado (G. Thoma et al., J Am Chem Soc 1999, 121, 5919-5929). Derivados 12 e 19 foram sintetizados de acordo com procedimentos publicados (respectivamente R. Bukowski, et al. Eur J Org Chem, 2001, 2697-2705; Z. Zhang, et al, J Am Chem Soc, 1999, 121, 734-753). Os compostos 30 e 33 foram sintetizados de acordo com o procedimento publicado Geeta Karki, et al. Glycoconj J, 2016, 6378. O composto 36 foi sintetizado de acordo com o procedimento publicado Geert-Jan Boons et al. 2012, US 20120039984 A1. O composto 46 foi sintetizado de acordo com o procedimento publicado Sun, B., et al. Sei. China Chem., 2012, 55, 31-35.

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Esquema 1: Síntese dos polímeros Gb3 5 e 6

[Gb3-N(OMe)(CH2)₃S(CH2)₂SH]

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5: x— 0.25, η = 400

6: χ = 0.40, η = 400 [0260] Reagentes e condições: a) 2, tampão acetato de sódio; b) DL-Ditiotreitiol, NaOH, H2O, 56%; c) i. 4, 1,8-Diazabiciclo(5.4.0)undec-7-eno (DBU), DMF/H2O; ii. tioglicerol, EtsN, 5: 74%, 6: 78%.

A/-(O-Metil-N-[2-(2-etiltio)propiltio]hidroxilamino)-g-D-qalactopiranosil-(1^4)-B-D galactopiranosil-d ^4)-3-D-glucopiranosida (3):

[0261]A uma solução de hemiacetal de 1 (78,0 mg, 155 pmol) em tampão NaOAc/AcOH (2,0 M, pH 4,5, 1,6 mL) foi adicionada oxiamina 2 (140 mg, 773 pmol, 5,0 equiv). A mistura de reação foi agitada por 48 h a 40°C. Após esse tempo, a mistura de reação foi concentrada. O resíduo bruto foi dissolvido em água (2,0 mL). DL-Ditiotreitol (240 mg, 1,57 mmol, 10 equiv) foi adicionado seguido de algumas gotas de uma solução de NaOH aq 1,0 M até o pH atingir 9. A mistura de reação foi agitada à rt sob Ar por 3 h. A purificação por cromatografia de fase reversa (0^100% de MeOH em H2O) deu o composto 3 (58 mg, 86,9 pmol, 56%) como um sólido felpudo branco.

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126/157 ¹H-NMR (500 MHz, D2O): δ 4,88 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 4,44 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,28 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 4,13 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 3,97 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 3,96 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 3,90 (m, 1H), 3,86 (m, 1H), 3,84 (dd, J = 3,1 Hz, 1H), 3,80-3,74 (m, 3H), 3,72 (m, 1H), 3,67 (dd, J= 10,3, 3,1 Hz, 1H), 3,65-3,62 (m, 2H), 3,60-3,54 (m, 6H), 3,51 (dd, J = 6,8, 10,4 Hz, 1H), 3,45 (m, 1H), 3,10 (td, J= 6,8, 13,2 Hz, 1H), 2,92 (m, 1H), 2,76-2,73 (m, 1H), 2,71-2,69 (m, 1H), 2,62 (t, J= 7,3 Hz, 2H), 1,88-1,79 (m, 2H).

MS (ESI⁺): m/z 690,33 (calc, para C₂4H45NOi6S₂Na⁺ [M+Na]⁺ 690,21).

Polímero Gb3 (5):

[0262] Uma solução do polímero 4 (5,3 mg, 26 pmol) em DMF (260 μΙ_) foi adicionada a tiol 3 (3,5 mg, 5,2 pmol, 0,2 equiv). Água (13 μΙ_) e uma solução de DBU (2,3 μΙ_, 16 pmol. 0,6 equiv) em DMF (21 μΙ_) foram sucessivamente adicionadas à mistura de reação. Depois de agitar por 90 min. à rt, foram adicionados tioglicerol (6,7 μΙ_, 78 pmol, 3,0 equiv) e EtsN (10,8 μΙ_, 78 pmol, 3,0 equiv). A mistura de reação foi agitada à rt por outras 16 h. O produto foi precipitado por adição lenta a uma solução de agitação de EtOH/Et2O (1:1, 4 mL). O precipitado foi filtrado, lavado com EtOH e seco. Foi obtida purificação adicional por ultrafiltração (tubos Sartorius Stedim Vivaspin, 6 mL, corte de peso molecular de 10 kDa, 5.000 rpm). A liofilização deu o polímero Gb3 5 (7,86 mg, 74%) como um sólido branco. De acordo com ¹H NMR, o produto continha aproximadamente 25% das cadeias laterais de lisina substituídas pelo epítopo de carboidrato 3.

Polímero Gb3 (6):

[0263] Uma solução do polímero 4 (4,0 mg, 20 pmol) em DMF (195 pL) foi adicionada a tiol 3 (5,2 mg, 7,8 pmol, 0,4 equiv). Água (10 pL) e uma solução de DBU (3,5 pL, 24 pmol. 1,2 equiv) em DMF (32 pL) foram sucessivamente adicionadas à mistura de reação. Depois de agitar por 90 min. à rt, foram adicionados tioglicerol (5,1 pL, 59 pmol, 3,0 equiv) e EtsN (8,2 pL, 59 pmol, 3,0 equiv). A mistura de reação foi agitada à rt por outras 16 h. O produto foi

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127/157 precipitado por adição lenta a uma solução de agitação de EtOH/Et2O (1:1, 4 mL). O precipitado foi filtrado, lavado com EtOH e seco. Foi obtida purificação adicional por ultrafiltração (tubos Sartorius Stedim Vivaspin, 6 mL, corte de peso molecular de 10 kDa, 5.000 rpm). A liofilização deu o polímero Gb3 6 (7,50 mg, 78%) como um sólido branco. De acordo com ¹H NMR, o produto continha aproximadamente 40% das cadeias laterais de lisina substituídas pelo epítopo de carboidrato 3.

Esquema 2: Síntese do polímero de antígeno A (9)

OH

HO

[BGA-N(OMe)(CH₂)₃S(CH₂)₂SH]

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(CH2)₄

(CH 2) 4

ΗΝ^,Ο (H₂C)₂ 'S

BGA (CH2)₃

OMe xn ch₂

CHOH

I

CH₂OH_ (1 -x)n

9: x— 0.68, n = 400 [0264] Reagentes e condições: a) 2, tampão acetato de sódio; b) DL-Ditiotreitiol, NaOH, H2O, 39%; c) i. 4, DBU, DMF/H2O; ii. tioglicerol, Et₃N, 60%.

A/-(O-Metil-N-[2-(2-etiltio)propiltio]hidroxilamino)-a-D-qalactopiranosil-(1^3)-|gL-fucopiranosil-( 1 -^2)1-0-D-qalactopiranosil-( 1 -^4)-0-D-qlucopiranosida (8): [0265]A uma solução do hemiacetal 7 (10,3 mg, 14,9 pmol) em tampão NaOAc/AcOH (2,0 M, pH 4,5, 75 μΙ_) foi adicionada oxiamina 2 (14 mg. 75 pmol, 5,0 equiv). A mistura de reação foi agitada por 40 h a 40°C. Após esse tempo, a mistura de reação foi concentrada. O resíduo bruto foi dissolvido em água (0,3 mL). DL-Ditiotreitol (30 mg, 0,19 mmol, 13 equiv) foi adicionado seguido de algumas gotas de uma solução de NaOH aq 1,0 M até o pH atingir 9. A mistura de reação foi agitada à rt sob Ar por 2 h. A purificação por cromatografia de fase reversa (0^100% de MeOH em H2O) deu o composto 3 (5,0 mg, 5,85 pmol, 39%) como um sólido felpudo branco.

¹H-NMR(500 MHz, D₂O): δ 5,31 (d, J= 4,1 Hz, 1H), 5,14 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,55 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,29 (q, J= 6,6 Hz, 1H), 4,21-4,16 (m, 3H), 4,12 (d, J= 8,7 Hz, 1H), 3,963,91 (m, 3H), 3,89-3,84 (m, 2H), 3,80 (m, 1H), 3,78-3,75 (m, 1H), 3,75-3,69 (m, 5H), 3,68

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129/157 (m, 1H), 3,65 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 3,59 (s, 3H), 3,58 (m, 1H), 3,56 (m, 1H), 3,34 (ddd, J= 9,6, 5,7, 1,5 Hz, 1H), 3,14 (td, J= 12,6, 7,2 Hz, 1H), 2,96 (m, 2H), 2,94 (m, 2H), 2,22 (m, 2H), 2,76-2,62 (m, 2H), 2,00 (s, 3H), 1,86 (dq, J= 14,4, 7,2 Hz, 2H), 1,21 (d, J= 6,6 Hz, 3H).

MS (ESP): m/z 877,46 (calc, para C32H58N₂02oS2Na⁺ [M+Na]⁺ 877,29).

Um polímero de antiqeno (9):

[0266] Uma solução do polímero 4 (1,8 mg, 8,6 pmol) em DMF (86 μΙ_) foi adicionada a tiol 8 (3,4 mg, 4,3 pmol, 0,2 equiv). Água (4,0 μΙ_) e uma solução de DBU (1,3 μΙ_, 9,6 μπηοΙ. 0,6 equiv) em DMF (12 μΙ_) foram sucessivamente adicionadas à mistura de reação. Depois de agitar por 1 h à rt, foram adicionados tioglicerol (2,2 μΙ_, 26 pmol, 3,0 equiv) e EtsN (3,6 μΙ_, 26 pmol, 3,0 equiv). A mistura de reação foi agitada à rt por outras 16 h. O produto foi precipitado por adição lenta a uma solução de agitação de EtOH/Et2O (1:1,2 mL). O precipitado foi filtrado, lavado com EtOH e seco. Foi obtida purificação adicional por ultrafiltração (tubos Sartorius Stedim Vivaspin, 6 mL, corte de peso molecular de 10 kDa, 5.000 rpm). A liofilização deu o polímero de antígeno do grupo sanguíneo A 9 (4,07 mg, 60%) como um sólido branco. De acordo com ¹H NMR, o produto continha aproximadamente 68% das cadeias laterais de lisina substituídas pelo epítopo de carboidrato 8.

Esquema 3: Síntese do aceitador de galactose (18)

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[0267] Reagente e condições: a) CbzCI, NaHCOs, Acetona/hhO, 55%; b) 12,

BFs*Et20, EtsN, DCM, c) NaOMe, MeOH, 73% através de 2 etapas; d) (CH₃)2C(OMe)₂, DMF, 75°C, 75%; e) NaH, BnBr, DMF, 51%; f) 90% Aq AcOH,

60°C, 98%; g) Bu2SnO, BnBr, brometo de tetrabutilamônio (TBAB), Tolueno,

90%.

Benzil 4-hidroxifenetilcarbamato (11) [0268] Uma mistura de tiramina 10 (25,3 g, 185 mmol), acetona (200 mL), H2O (100 mL) e NaHCOs aq sat foi resfriada até 0°C e agitada sob argônio. CbzCI (26,0 mL, 183 mmol) foi adicionado em porções durante 20 min. A reação foi deixada aquecer lentamente até à rt e agitada por 2 d à rt. Após esse tempo, a acetona foi evaporada e um pouco de precipitado amarelo se formou. A mistura foi extraída com DCM (300 mL). A fase de DCM foi lavada subsequentemente com H2SO4 aq 1 M (50 mL) e NaHCOs aq sat (50 mL), secas sobre Na2SO4, filtrada e concentrada in vacuo para dar um sólido esbranquiçado. O sólido foi recristalizado de EtOAc/n-heptano para dar o derivado 11 (27,8 g, 103 mmol, 55%).

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131/157 ¹H NMR (500 MHz, CDCIs): δ 7,33 (m, 5H), 7,02 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,75 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 5,23 (s, 1H), 5,09 (s, 2H), 4,76 (s, 1H), 3,42 (q, J = 6,5 Hz, 2H), 2,74 (t, J = 6,9 Hz, 2H).

4-(2-((Benziloxicarbonil)amino)etil)fenil β-D-qalactopiranosida (14) [0269] Uma mistura de doador 12 (16,6 g, 42,6 mmol), aceitador 11 (10,5 g, 38,7 mmol) e Nets (3,2 mL) em DCM seco (40 mL) foi resfriada até 0°C. BF₃Et2O (8,6 mL, 69,7 mmol) foi adicionado gota a gota. A solução foi aquecida até à rt e agitada por 1 d. Após esse tempo, BF₃Et2O adicional (8,6 mL, 69,7 mmol) foi adicionado gota a gota e a solução foi agitada por mais 12 h até que a conclusão fosse atingida. A mistura de reação foi derramada em uma mistura de água gelada (100 mL) e DCM (200 mL). A fase de DCM foi separada, lavada com NaHCOs aq sat (50 mL), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada in vacuo para dar o intermediário 13 na forma de um óleo. O óleo foi dissolvido em MeOH (300 mL) e tratado com NaOMe (36,1 mmol em 20 mL de MeOH) durante a noite à rt. Água (100 mL) foi adicionada e o pH foi ajustado para ~5 com HCI aq 1 N. A solução foi concentrada até ~ 300 mL e foi adicionada água adicional (100 mL). Então, o MeOH restante foi evaporado e um precipitado formado. O precipitado foi filtrado, lavado com água (200 mL) e seco in vacuo (20 mbar) à rt por 1 h. O sólido foi recristalizado de propan-2-ol/EtOAc/n-heptano para dar álcool 14 (8,95 g, 25,1 mmol, 73%) como agulhas esbranquiçadas.

¹H NMR (500 MHz, CDCI₃/CD₃OD): δ 7,34 (t, J = 7,1 Hz, 5H), 7,10 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,01 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 5,08 (s, 2H), 4,83 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 3,97 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 3,81 (m, 3H), 3,64 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 3,60 (dd, J = 3,3, 9,6 Hz, 1H), 3,37 (m, 2H), 2,76 (t, J = 6,8 Hz, 2H).

MS (ESP): m/z 456,08 (calcd para C22H₂7NNaO₈ ⁺ [M+Na]⁺: 456,16).

4-(2-((Benziloxicarbonil)amino)etil)fenil 3,4-O-isopropilideno-0-Dqalactopiranosida (15) [0270] A uma solução de tetraol 14 (4,90 g, 11,3 mmol) em DMF (20 mL) foram adicionados 2,2-dimetoxipropano (4,20 mL, 34,3 mmol) e P--TSOH H2O (41 mg)

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132/157 sob atmosfera de argônio. Após agitar durante a noite a 75°C foi adicionada água (20 mL) e a mistura foi aquecida até 90°C por 1 h. A mistura de reação foi neutralizada com NEts (0,5 mL), concentrada sob pressão reduzida e coevaporada com xileno (30 ml) para remover DMF e água. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em silica (éter de petróleo/EtOAc + 10% MeOH, gradiente de 20-80%) para produzir acetal 12 (4,01 g, 8,48 mmol, 75%) como um óleo.

¹H NMR (500 MHz, CDCIs): δ 7,31 (m, 5H), 7,10 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,92 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,99 (s, 2H), 4,79 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 1,4, 5,5 Hz, 1H), 4,05 (t, J= 6,6 Hz, 1H), 3,97 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 3,58 (dd, J = 5,3, 11,1 Hz, 1H), 3,53 (dd, J= 7,3, 11,1 Hz, 1H), 3,46 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 3,18 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,65 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,42, 1,27 (2 s, 6H).

4-(2-(Benzil(benziloxicarbonil)amino)etil)fenil 2₁6-di-O-benzil-3₁4-Oisopropilideni-B-p-qalactopiranosida (16) [0271]A uma solução de diol 15 (3,00 g, 6,34 mmol) em DMF (12 mL) foi adicionado NaH (60% em óleo mineral, 1,34 g, 33,4 mmol) a 0°C e a mistura foi agitada à rt por 30 min. Após resfriamento até 0°C, foi adicionado brometo de benzila (3,0 mL, 25,3 mmol) e a reação foi agitada a 0°C até à rt durante a noite. Então, a mistura de reação foi extinta com dietilamina (10 mL), o excesso de dietilamina foi evaporado in vacuo abaixo de 30°C e os restos foram derramados em HCI aq 1 N resfriado (200 mL). A mistura foi extraída com EtOAc (2 x 100 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com NaHCOs aq sat (100 mL), secas sobre Na2SO4, filtradas e, então, concentradas em vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em silica (éter de petróleo/acetona, gradiente de 10-80%) para render deriivado totalmente protegido 16 (2,38 g, 3,20 mmol, 51%) como um óleo.

¹H NMR (500 MHz, CDCI3, mistura de rotâmeros): δ 7,41-6,93 (m, 14H), 5,19 (bs, 1,6 H), 4,88 (m, 3H), 4,61 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,53 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,424,37 (m, 2H), 4,25 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 4,21 (dd, J = 1,8, 5,6 Hz, 1H), 4,04 (m, 1H),

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3,83 (dd, J = 4,9, 10,3 Hz, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,66 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 3,44-3,37 (m, 2H), 2,74 (m, 2H), 1,41, 1,35 (2 s, 6H).

MS (ESI⁺): m/z 766,35 (calcd para C46H₄9NNaO₈ ⁺ [M+Na]⁺: 766,34).

4-(2-(Benzil(benziloxicarbonil)amino)etil)fenil 2,6-di-O-benzil-B-Dqalactopiranosida (17) [0272] Uma solução de acetal 16 (2,24 g, 3,02 mmol) em AcOH aq 90% (20 ml) foi agitada a 70°C durante a noite. Os solventes foram evaporados e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em silica (DCM/MeOH, 1:0 a 9:1) para produzir diol 17 (2,08 g, 2,96 mmol, 98%) como um óleo.

¹H NMR (500 MHz, CDCIs, mistura de rotâmeros): δ 7,21 (m, 24H), 5,18 (bs, 2 H), 5,03 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,93 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,77 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,56 (s, 2H), 4,41 (m, 2H), 4,05 (t, J = 3,0 Hz, 1H), 3,82 (dd, J = 5,2, 9,9 Hz, 1H), 3,77 (m, 3H), 3,67 (dt, 1H, J = 3,8, 9,3 Hz), 3,41 (m, 2H), 2,75 (m, 2H), 2,64 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 2,54 (d, J = 4,3 Hz, 1H).

MS (ESl⁺): m/z 726,37 (calcd para C43H₄5NNaO₈ ⁺ [M+Na]⁺: 726,30).

4-(2-(Benzil(benziloxicarbonil)amino)etil)fenil 2₁3₁6-tri-O-benzil-B-pqalactopiranosida (18) [0273] Bu2SnO (210 mg, 0,85 mmol, 1,2 equiv) foi adicionado a uma solução do diol 17 (500 mg, 0,71 mmol) em Tol anidro (11 mL). A mistura foi agitada por 5 h em refluxo usando um aparelho 'Dean-Stark'. Após resfriar até à rt brometo de tetrabutilamônio seco (TBAB, 115 mg, 0,36 mmol, 0,5 equiv) e brometo de benzila (118 μ L, 0,99 mmol, 1,4 equiv) foram adicionados. A mistura de reação foi agitada por 3 h em refluxo. A temperatura foi abaixada até rt e a reação extinta com MeOH. Após agitar à rt por 20 min., os voláteis foram evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash (Tol/EtOAc 9:1 a 85:15) para dar o aceitador 18 (537 mg, 90%) como um sólido branco.

¹H NMR (500 MHz, CDCI3, mistura de rotâmeros): δ 7,42-7,19 (m, 24H), 5,18 (s, 2H), 4,98 (d, J= 10,9 Hz, 1H), 4,91 (d, J = 7,4Hz, 1H, H-1), 4,82 (d, J= 11,0 Hz, 1H), 4,74 (s, 2H), 4,56 (s, 2H), 4,43, 4,37 (2s, 2H), 4,07 (t, 1H), 3,92 (t, J = 8,6

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Hz, 1 Η), 3,82 (dd, J = 5,6, 9,9 Hz, 1H), 3,75 (dd, J = 6,4, 9,6 Hz, 1H), 3,68 (t, 1H), 3,58 (dd, J = 3,3, 9,3 Hz, 1H), 3,44, 3,37 (2s, 2H), 2,79, 2,70 (2s, 2H).

MS (ESP): m/z 816,28 (calcd para CsoHsiNNaOs* [M+Na]⁺: 816,35).

Esquema 4: Síntese do polímero mimético de Gb3 (23)

[Gb3mim-(CH2)₂NHC(O)(CH₂)3SH]

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d)

23: x= 0.42, n = 400 [0274] Reagentes e condições: a) NIS, TfOH, 4 A MS, THF, 64%; b) H₂, Pd(OH)2/C, THF/H2O, 80%; c) i. γ-tiobutirolactona, EtsN, DMF; ii. DL-ditiotreitol, NaOH, H2O, 49%; d) i. 4, DBU, DMF/H2O, ii. Tioglicerol, EtsN, 40%.

4-(2-(Benzil(benziloxicarbonil)amino)etil)fenil 2,3,4,6-tetra-O-benzil-a-pqalactopiranosil-(1 ^4)-2,3,6-tri-O-benzil-3-D-qalactopiranosida (20) [0275]A uma solução de aceitador 18 (100 mg, 0,13 mmol) e doador 19 (90 mg, 0,14 mmol, 1,1 equiv) em THF anidro (2,6 mL) foi adicionado MS de 4 A previamente ativado e a suspensão foi agitada à rt por 30 min. sob Ar. Após esse tempo, foi adicionado NIS (57 mg, 0,25 mmol, 2,0 equiv) e a mistura de reação foi resfriada até -78°C seguida pela adição de TfOH (1,1 μΙ_, 0,01 mmol, 0,1 equiv). A mistura de reação foi agitada por 1 h a -78°C. A mistura de reação foi neutralizada com EtsN e a suspensão foi filtrada sobre Celite. O filtrado foi diluído com EtOAc, lavado com Na2S20s aq sat e salmoura e seco sobre Na2SO4 anidro. A suspensão foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia flash eluindo com tolueno/EtOAc (1:0 —> 95:5) produziu o dissacarídeo 20 (109 mg, 0,083 mmol, 64%) como um óleo incolor.

Petição 870190118384, de 14/11/2019, pág. 142/168

136/157 ¹H-NMR (500 MHz, CDCb) δ 7,39-7,12 (m, 49H), 5,18 (s, 2H), 5,04 (s, 1H), 4,95 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,92 (d, J= 11,6 Hz, 1H), 4,90 (d, J= 8,2 Hz, 1H), 4,88 (d, J= 12,0 Hz, 1H), 4,84 (d, J= 11,0 Hz), 4,81 (d, J= 12,4 Hz, 1H), 4,77 (s, 2H), 4,67 (d, J= 11,8 Hz, 1H), 4,56 (d, J= 11,6 Hz, 1H), 4,45 (dd, J= 5,0, 9,1 Hz, 1H), 4,42, 4,36 (2s, 2H), 4,20, 4,17 (2d, J= 2,3 Hz, 4H), 4,11 (m, 3H), 4,06 (d, J= 2,7 Hz, 1H), 3,95 (m, 2H), 3,61-3,58 (m, 2H), 3,56 (t, J= 8,8 Hz, 1H), 3,46 (dd, J = 2,6, 10,0 Hz, 1H), 3,43, 3,36 (2s, 2H), 3,27 (dd, J= 4,8, 8,4 Hz, 1H), 2,78, 2,69 (2s, 2H).

MS (ESP): m/z 1338,69 (calcd para Cs^ssNNaOn* [M+Na]⁺: 1338,59).

4-(2-(amino)etil)fenil g-D-qalactopiranosil-(1^4)-B-D-qalactopiranosida (21) [0276] A uma solução de derivado 20 (57 mg, 43 pmol) em THF/AcOH (10:1,5,5 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (37 mg). A mistura de reação foi agitada sob uma atmosfera de H2 por 17 h. Após esse tempo, Pd(OH)2/C adicional (25 mg) foi adicionado à mistura de reação. Após agitação por outras 6 h sob atmosfera de Ar, a suspensão foi filtrada sobre uma membrana de PTFE Acrodisc de 0,45 pm. A membrana foi lavada com 1-2 mL de THF. Pd(OH)2/C adicional (30 mg) foi adicionado ao filtrado e a suspensão foi agitada sobre uma atmosfera de H2 por outras 17 h. Após esse tempo, a mistura de reação foi filtrada sobre uma membrana de PTFE Acrodisc de 0,45 pm e concentrada sob pressão reduzida. A amina bruta 21 (16 mg, 35 pmol, 80%) foi utilizada diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional.

¹H NMR (500 MHz, D2O) δ 7,24 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,08 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 5,095,06 (m, 1H), 4,93 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 4,33 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 4,04 (s, 1H), 3,98 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 3,88-3,84 (m, 3H), 3,82-3,76 (m, 5H), 3,66 (dd, J = 6,4, 1,5 Hz, 2H), 3,19 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,90 (t, J = 7,2 Hz, 2H).

MS (ESP): m/z 462,21 (calcd para C2oH₃₂NOn ⁺ [M+H]⁺: 462,20).

4-(2-(4-mercaptobutanamido)etil)fenil g-D-qalactopiranosil-(1^4)-B-pqalactopiranosida (22):

[0277] A uma suspensão de amina 21 (15 mg, 29 pmol) em DMF anidro (1,0 pL) foram sucessivamente adicionados γ-tiobutirolactona (25 pL, 288 pmol,

Petição 870190118384, de 14/11/2019, pág. 143/168

137/157 equiv) e Et₃N (40 pL, 288 pmol, 10 equiv). A mistura de reação foi agitada por 48 h a 40°C. Após esse tempo, a mistura de reação foi concentrada. O resíduo bruto foi dissolvido em água (0,5 mL). DL-Ditiotreitol (89 mg, 575 pmol, 20 equiv) foi adicionado seguido de algumas gotas de uma solução de NaOH aq 1,0 M até o pH atingir 9. A mistura de reação foi agitada à rt sob Ar por 3 h. Após esse tempo, a mistura de reação foi neutralizada com AcOH aq 20% diluído com água e lavada com EtOAc. A fase aquosa foi concentrada in vacuo. A purificação por cromatografia de fase reversa (0^100% MeOH em H2O) deu o composto 22 (8 mg, 14 pmol, 49%) como um sólido felpudo branco.

¹H NMR (500 MHz, D2O) δ 7,19-7,15 (m, 2H), 7,05-7,01 (m, 2H), 5,04 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,93 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 4,33 (dt, J = 1,0, 6,6 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 1,4 Hz 1H), 3,98 (dd, J = 0,7, 2,5 Hz, 1H), 3,87 (dd, J = 3,2, 10,5 Hz, 1H), 3,85-3,75 (m, 6H), 3,66-3,64 (m, 2H), 3,39 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,72 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,25 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,18 (t, J= 7,2 Hz, 2H), 1,70-1,64 (m, 2H).

MS (ESP): m/z 586,11 (calcd para C24H₃7NNaOi₂S⁺ [M+Na]⁺: 586,19).

Polímero mimético de Gb3 (23):

[0278] Uma solução do polímero 4 (7,5 mg, 37 pmol) em DMF (365 pL) foi adicionada a tiol 22 (8,3 mg, 15 pmol, 0,4 equiv). Água (19 pL) e uma solução de DBU (5,4 pL, 37 pmol. 1,0 equiv) em DMF (10 pL) foram sucessivamente adicionadas à mistura de reação. Depois de agitar por 60 min. à rt, foram adicionados tioglicerol (9,5 pL, 110 pmol, 3,0 equiv) e Et₃N (6,1 pL, 44 pmol, 1,2 equiv). A mistura de reação foi agitada à rt por outras 17 h. O produto foi precipitado por adição lenta a uma solução de agitação de EtOH/Et2O (1:1, 4 mL). O precipitado foi filtrado, lavado com EtOH e seco. Foi obtida purificação adicional por ultrafiltração (tubos Sartorius Stedim Vivaspin, 6 mL, corte de peso molecular de 50 kDa, 5.000 rpm). A liofilização deu o polímero mimético de Gb3 23 (6,7 mg, 40%) como um sólido branco. De acordo com ¹H NMR, o produto continha aproximadamente 42% das cadeias laterais de lisina substituídas pelo epítopo de carboidrato 22.

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Esquema 5: Síntese do polímero de Tn (27)

[Tn-(CH2)₃NHC(O)(CH₂)3SH]

27: x= 0.25, n = 400 [0279] Reagentes e condições: a) H2, Pd(OH)2/C, THF/H2O, quant; c) i.

γ-tiobutirolactona, EtsN, DMF; ii. DL-ditiotreitol, NaOH, H2O, 75%; d) i. 4, DBU,

DMF/H2O, ii. Tioglicerol, EtsN, 38%.

3-Aminopropil 2-acetamido-g-D-qalactopiranosida (25) [0280] A uma solução de derivado 24 (28 mg, 9,2 pmol) em AcOH aq 20% (5,0 mL) foi adicionado Pd(OH)2/C (30 mg). A mistura de reação foi agitada sob uma atmosfera de H2 por 3 h. Após esse tempo, a mistura de reação foi filtrada sobre uma membrana de PTFE Acrodisc de 0,45 pm e concentrada sob pressão reduzida. A amina bruta 21 (isolada como o sal acetato, 26 mg, 9,2 pmol, quant) foi utilizada diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional.

¹H NMR (500 MHz, D2O) δ 4,92 (d, J= 3,8 Hz, 1H), 4,18 (dd, J = 3,8, 11,1 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 3,96-3,93 (m, 1H), 3,93 (dd, J = 3,2, 11,2 Hz, 1H),

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3,85-3,80 (m, 1H), 3,77 (m, 2H), 3,61-3,55 (m, 1H), 3,13 (t, J= 7,6 Hz, 2H), 2,06 (s, 3H), 2,04-1,99 (m, 2H), 1,98 (s, 3H).

MS (ESP): m/z 279,12 (calcd para ΟιιΗ23Ν₂Ο₆ ⁺ [M+Na]⁺: 279,16).

3-(4-mercaptobutanamido)propil 2-acetamido-a-D-qalactopiranosida (26):

[0281] A uma suspensão de amina 25 (25 mg, 74 pmol) em DMF anidro (1,0 μΙ_) foram sucessivamente adicionados γ-tiobutirolactona (63 μΙ_, 739 pmol, 10 equiv) e EtsN (10 μΙ_, 739 pmol, 10 equiv). A mistura de reação foi agitada por 48 h a 40°C. Após esse tempo, a mistura de reação foi concentrada. O resíduo bruto foi dissolvido em água (0,5 mL). DL-Ditiotreitol (225 mg, 1,46 mmol, 20 equiv) foi adicionado seguido de algumas gotas de uma solução de NaOH aq 1,0 M até o pH atingir 9. A mistura de reação foi agitada à rt sob Ar por 3 h. A purificação por cromatografia de fase reversa (0^100% MeOH em H₂O) seguida por cromatografia de exclusão de tamanho P2 deu o composto 26 (21 mg, 55 pmol, 75%) como um sólido felpudo branco.

¹H NMR (500 MHz, MeOD) δ 4,79 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,26 (dd, J = 11,0, 3,6 Hz, 1H), 3,88 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 3,85-3,66 (m, 5H), 3,41 (m, 1H), 3,34-3,27 (m, 2H), 2,52 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,31 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,01 (s, 3H), 1,88 (dq, J = 14,3, 7,2 Hz, 2H), 1,81-1,77 (m, 2H).

MS (ESP): m/z 403,13 (calcd para Ci5H₂8N₂NaO7S⁺ [M+Na]⁺: 403,15).

Polímero de antígeno de Tn (27):

[0282] Uma solução do polímero 4 (7,5 mg, 37 pmol) em DMF (365 μΙ_) foi adicionada a tiol 26 (5,6 mg, 15 pmol, 0,4 equiv). Água (19 μΙ_) e uma solução de DBU (5,5 μΙ_, 37 pmol. 1,0 equiv) em DMF (10 pL) foram sucessivamente adicionadas à mistura de reação. Depois de agitar por 60 min. à rt, foram adicionados tioglicerol (9,5 pL, 110 pmol, 3,0 equiv) e EtsN (6,1 pL, 44 pmol, 1,2 equiv). A mistura de reação foi agitada à rt por outras 17 h. O produto foi precipitado por adição lenta a uma solução de agitação de EtOH/Et₂O (1:1, 2 mL). O precipitado foi filtrado, lavado com EtOH e seco. Foi obtida purificação adicional por ultrafiltração (tubos Sartorius Stedim Vivaspin, 6 mL, corte de peso

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140/157 molecular de 50 kDa, 5.000 rpm). A liofilização deu o polímero de antígeno de Τη 27 (4,8 mg, 38%) como um sólido branco. De acordo com ¹H NMR, o produto continha aproximadamente 25% das cadeias laterais de lisina substituídas pelo epítopo de carboidrato 26.

Esquema 6: Síntese do ligante 2

Reagentes e condições: a) i. 29; ii. MeONhh HCI, AcONa, EtOH; iii. NaBHsCN, AcCI, EtOH, 29%

3-(3-(Metoxiamino)propiltio)propano-1 -tiol (2):

[0283] Acroleína 28 (0,20 mL, 3,0 mmol)foi adicionado em gotas a 1,2-etanoditiol 29 (1,3 mL, 15,0 mmol, 5,0 equiv) e a mistura de reação foi agitada por 3 h a rt. Após esse tempo, a mistura de reação foi diluída com EtOH (5,0 mL) e cloridrato de metoxiamina (300 mg, 3,6 mmol, 1,2 equiv) e NaOAc (492 mg, 6,0 mmol, 2.0 equiv) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada durante a noite a rt. Após esse tempo, NaBHsCN (282 mg, 4,5 mmol, 1,5 equiv) foi adicionado à mistura de reação, seguido por adição gota a gota de HCI etanólico 1,0 M (10 mL, recém-preparado de AcCI e EtOH). Depois de se agitar por 1 h à rt, a reação foi neutralizada por adição de NaHCOs aq sat. A mistura de reação foi diluída com H2O e extraída com DCM (3 x). As fases orgânicas foram agrupadas, lavadas com salmoura e secas sobre Na2SO4 anidro. A suspensão foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia flash eluindo com Tol/Acetona (8:2) produziu o aminoálcool 2 (159 mg, 0,88 mmol, 29%) como um óleo incolor.

¹H-NMR (500 MHz, CDCIs): δ 5,60 (s, 1H), 3,53 (s, 3H), 3,01 (t, 2H), 2,76 (m, 2H), 2,73 (m, 2H), 2,62 (t, 2H), 1,82 (m, 2H), 1,72 (dd, 1H).

Esquema 7: Síntese do polímero de BGA (32)

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(1-x)n xn

32 : x = 0.35, n = 400 [0284] Reagentes e condições: a) γ-tiobutirolactona, Et₃N, MeOH; ii. DLditiotreitol, NaOH, H₂O, 45%; b) i. 4, DBU, DMF, ii. Tioglicerol, Et₃N, 38%.

3-(4-mercaptobutanamido)propil O-(2-acetamido-2-deoxi-a-D-galactopiranosil)(l—>3)- [O-(a-L-fucopiranosil)-(l—»2)]-8-D-qalactopiranosida (31):

[0285] A uma suspensão de amina 30 (20 mg, 0,03 pmol) em MeOH anidro (2,0 μΙ_) foram sucessivamente adicionados γ-tiobutirolactona (35 μΙ_, 0,34 μΓηοΙ, 10 equiv) e EtsN (34 μΙ_, 0,34 μΓηοΙ, 10 equiv). A mistura de reação foi agitada por 24 h a 40°C. Após esse tempo, a mistura de reação foi concentrada. O resíduo bruto foi dissolvido em água (0,5 mL). DL-Ditiotreitol (105 mg, 20 equiv) foi adicionado seguido de algumas gotas de uma solução de NaOH aq 1,0 M até o pH atingir 9. A mistura de reação foi agitada à rt sob Ar por 3 h. A purificação por cromatografia de fase reversa (0^100% MeOH em H2O) seguida por

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142/157 cromatografia de exclusão de tamanho P2 deu o composto 31 (12 mg, 54%) como um sólido felpudo branco.

¹H NMR(500 MHz, D₂O): 5,28 (d, J= 3,7 Hz, 1H), 5,17 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 4,58 (d, J= 7,7 Hz, 1H), 4,39-4,34 (m, 1H), 4,28-4,21 (m, 3H), 4,13-3,73 (m, 7H), 3,723,54 (m, 7H), 3,34-3,21 (m, 2H), 2,59-2,51 (m, 2H), 2,38 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,05 (s, 3H), 2,02-1,92 (m, 2H), 1,24 (d, J = 6,5 Hz, 3H).

MS (ESP): m/z 688,74 (calcd para C₂7H48N₂NaOi6S⁺ [M+Na]⁺: 711,26).

Polímero de antígeno de BGA (32):

[0286] Uma solução de polímero de 4 (2 mg, 9,8 pmol150) em DMF (150 μΙ_) foi adicionada ao tiol 31 (3,4 mg, 4,9 μ mol) dissolvido em 80 μΙ_ de DMF. Uma solução de DBU (1,5 μΙ_, 9,8 μΓηοΙ) em DMF (10 μΙ_) foi sucessivamente adicionada à mistura de reação. Depois de agitar por 60 min. à rt, foram adicionados tioglicerol (2,5 μΙ_, 29,3 pmol) e EtsN (4,1 μΙ_, 29,3 prnol). A mistura de reação foi agitada à rt por outras 17 h. O produto foi precipitado por adição lenta a uma solução de agitação de EtOH/Et2O (1:1, 2 mL). O precipitado foi filtrado, lavado com EtOH e seco. Foi obtida purificação adicional por ultrafiltração (tubos Sartorius Stedim Vivaspin, 6 mL, corte de peso molecular de 50 kDa, 5.000 rpm). A liofilização deu o polímero de antígeno de BGA 32 (4,5 mg, 38%) como um sólido branco. De acordo com ¹H NMR, o produto continha aproximadamente 35% das cadeias laterais de lisina substituídas pelo epítopo de carboidrato 31.

Esquema 8: Síntese do polímero de BGB (35)

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: χ = 0.25, η = 400 [0287] Reagentes e condições: a)

i. γ-tiobutirolactona, Et₃N, MeOH; ii. DLditiotreitol, NaOH, H2O, 84%; b) i. 4, DBU, DMF, ii. Tioglicerol, Et₃N, 38%.

3-(4-mercaptobutanamido)propil

O-(g-D-qalactopiranosil)-(l—»3)[O-(g-Lfucopiranosil)-(l-»2)]-8-D-qalactopiranosida (34):

[0288] A uma suspensão de amina 33 (12 mg, 0,02 pmol) em MeOH anidro (2,0 μΙ_) foram sucessivamente adicionados γ-tiobutirolactona (19 μΙ_, 0,22 nmol, 10 equiv) e EtsN (31 μΙ_, 0,22 μΓηοΙ, 10 equiv). A mistura de reação foi agitada por 24 h a 40°C. Após esse tempo, a mistura de reação foi concentrada. O resíduo bruto foi dissolvido em água (0,5 mL). DL-Ditiotreitol (68 mg, 20 equiv) foi adicionado seguido de algumas gotas de uma solução de NaOH aq 1,0 M até o pH atingir 9. A mistura de reação foi agitada à rt sob Ar por 3 h. A purificação por cromatografia de fase reversa (0^100% MeOH em H2O) seguida por

Petição 870190118384, de 14/11/2019, pág. 150/168

144/157 cromatografia de exclusão de tamanho P2 deu o composto 34 (12 mg, 84,2%) como um sólido felpudo branco.

¹H NMR (500 MHz, D₂O): 5,27 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 5,25 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 4,38-4,36 (m, 1H), 4,23 (m, 2H), 4,02-3,97 (m, 3H), 3,93-3,86 (m, 4H), 3,85-3,78 (m, 6H), 3,76-3,70 (m, 3H), 3,17-3,14 (m, 2H), 2,57-2,51 (m, 2H), 2,38 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,03-1,99 (m, 2H), 1,22 (d, J = 6,5 Hz, 3H).

MS (ESP): m/z 647,69 (calcd para C₂5H45NNaOi₆S⁺ [M+Na]⁺: 670,24).

Polímero de antígeno de BGB (35):

[0289] Uma solução do polímero 4 (3,0 mg, 14,7 pmol) em DMF (150 μΙ_) foi adicionada a tiol 34 (3,8 mg, 5,9 pmol, 0,4 equiv). A uma solução de DBU (2,2 μΙ_, 14.7 μΓΠοΙ. 1,0 equiv) em DMF (10 μΙ_) foram sucessivamente adicionadas à mistura de reação. Depois de agitar por 60 min. à rt, foram adicionados tioglicerol (3,8 μΙ_, 44 μΓηοΙ, 3,0 equiv) e EtsN (6,1 μΙ_, 44 pmol, 3 equiv). A mistura de reação foi agitada à rt por outras 17 h. O produto foi precipitado por adição lenta a uma solução de agitação de EtOH/Et2O (1:1, 2 mL). O precipitado foi filtrado, lavado com EtOH e seco. Foi obtida purificação adicional por ultrafiltração (tubos Sartorius Stedim Vivaspin, 6 mL, corte de peso molecular de 50 kDa, 5.000 rpm). A liofilização deu o polímero de antígeno de BGB 35 (4,5 mg, 41%) como um sólido branco. De acordo com ¹H NMR, o produto continha aproximadamente 25% das cadeias laterais de lisina substituídas pelo epítopo de carboidrato 33. Esquema 9: Síntese do polímero de Tn (38)

Petição 870190118384, de 14/11/2019, pág. 151/168

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38: x = 0.25, η = 400

39: χ = 0.35, η = 400 [0290] Reagentes e condições: a) i. γ-tiobutirolactona, EtsN, MeOH; ii. DL ditiotreitol, NaOH, H2O, 96%; b) i. 4, DBU, DMF, ii. Tioglicerol, EtsN, 66%.

Síntese de tiol de Tn (37):

[0291] A uma suspensão de amina 36 (10 mg, 0,02 pmol) em MeOH anidro (2,0 μΙ_) foram sucessivamente adicionados γ-tiobutirolactona (21 μΙ_, 0,24 pmol, 10 equiv) e EtsN (33 pL, 0,24 pmol, 10 equiv). A mistura de reação foi agitada por 24 h a 40°C. Após esse tempo, a mistura de reação foi concentrada. O resíduo bruto foi dissolvido em água (0,5 mL). DL-Ditiotreitol (73 mg, 20 equiv)

Petição 870190118384, de 14/11/2019, pág. 152/168

146/157 foi adicionado seguido de algumas gotas de uma solução de NaOH aq 1,0 M até o pH atingir 9. A mistura de reação foi agitada à rt sob Ar por 3 h. A purificação por cromatografia de fase reversa (0^100% MeOH em H2O) seguida por cromatografia de exclusão de tamanho P2 deu o composto 37 (11,6 mg, 96%) como um sólido felpudo branco.

¹H NMR (500 MHz, MeOD): 4,92 (d, J= 3,6 Hz, 1H), 4,47-4,40 (m, 2H), 4,12 (dd, J= 11,0, 3,8 Hz, 1H), 4,05 (t, J= 6,1Hz, 1H), 4,01 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 3,92 (dd, J= 11,1, 3,1 Hz, 1H), 3,77 (t, J = 6,8Hz, 2H), 3,43-3,34 (m, 3H), 3,26 (m, 1H), 2,80-2,72 (m, 2H), 2,55-2,49 (m, 1H), 2,40-2,32 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 1,93-1,86 (m, 1H), 1,74-1,67(m, 2H), 1,29 (d, J = 6,3Hz, 3H).

MS (ESP): m/z 538,61 (calcd para C₂oH38N₄NaOioS⁺ [M+Na]⁺: 561,22).

Polímero de antígeno de Tn (38):

[0292] Uma solução do polímero 4 (3,0 mg, 14,7 pmol) em DMF (150 μΙ_) foi adicionada a tiol 37 (2,7 mg, 5,1 pmol, 0,35 equiv). A uma solução de DBU (2,2 pL, 14.7 pmol. 1,0 equiv) em DMF (10 μΙ_) foram sucessivamente adicionadas à mistura de reação. Depois de agitar por 60 min. à rt, foram adicionados tioglicerol (3,8 pL, 44 pmol, 3,0 equiv) e EtsN (6,1 μΙ_, 44 pmol, 3 equiv). A mistura de reação foi agitada à rt por outras 17 h. O produto foi precipitado por adição lenta a uma solução de agitação de EtOH/Et2O (1:1, 2 mL). O precipitado foi filtrado, lavado com EtOH e seco. Foi obtida purificação adicional por ultrafiltração (tubos Sartorius Stedim Vivaspin, 6 mL, corte de peso molecular de 50 kDa, 5.000 rpm). A liofilização deu o polímero de antígeno de Tn 38 (4,0 mg, 66%) como um sólido branco. De acordo com ¹H NMR, o produto continha aproximadamente 25% das cadeias laterais de lisina substituídas pelo epítopo de carboidrato 37.

Polímero de antígeno de Tn (39):

[0293] Uma solução do polímero 4 (3,0 mg, 14,7 pmol) em DMF (150 pL) foi adicionada a tiol 37 (3,8 mg, 7,3 pmol, 0,5 equiv). A uma solução de DBU (2,2 pL, 14.7 pmol. 1,0 equiv) em DMF (10 pL) foram sucessivamente adicionadas à mistura de reação. Depois de agitar por 60 min. à rt, foram adicionados tioglicerol

Petição 870190118384, de 14/11/2019, pág. 153/168

147/157 (3,8 μΙ_, 44 pmol, 3,0 equiv) e EtsN (6,1 pL, 44 pmol, 3 equiv). A mistura de reação foi agitada à rt por outras 17 h. O produto foi precipitado por adição lenta a uma solução de agitação de EtOH/Et2O (1:1, 2 mL). O precipitado foi filtrado, lavado com EtOH e seco. Foi obtida purificação adicional por ultrafiltração (tubos Sartorius Stedim Vivaspin, 6 mL, corte de peso molecular de 50 kDa, 5.000 rpm).

A liofilização deu o polímero de antígeno de Tn 39 (4,0 mg, 65%) como um sólido branco. De acordo com ¹H NMR, o produto continha aproximadamente 35% das cadeias laterais de lisina substituídas pelo epítopo de carboidrato 37.

Esquema 10: Síntese do tios de dissacarídeo (45)

Petição 870190118384, de 14/11/2019, pág. 154/168

148/157 [0294] Reagentes e condições: a) NIS, TfOH; b) NaOH, MeOH; c) Pd(OH)₂, ^f BuOH:H2O; d) i. γ-tiobutirolactona, EtsN, MeOH; ii. DL-ditiotreitol, NaOH, H2O, Síntese do dissacarideo (42):

[0295] Uma solução de Doador 41 (1,06 g, 1,78 mmol) e Aceitador 40 (1,0 g, 1,42 mmol) numa mistura 50% Acetonitrila CH2CI2 foi agitada por 1 h com peneiras moleculares recém-secas (400 mg). N-lodosuccinimida (415 mg, 1,85 mmol) foi adicionada, a suspensão foi agitada por 30 min. e resfriada até -40°C. TfOH (13 μΙ_, 0,14 mmol) foi adicionado, a suspensão foi agitada durante a noite a -40°C, diluída com CH2CI2 (50 ml), filtrada através de uma almofada de Celite e a solução restante foi lavada com Na₂S2O3 diluído sat., NaHCOs e salmoura. A camada orgânica foi seca (Na₂SO4), filtrada, concentrada e o resíduo foi purificado em silica utilizando um gradiente de CH2C2:Acetona:2-Propanol 93:7:0,2 a CH2Cl2:Acetona:2 -Propanol 80:20:0,2. Rendimento 42: 710 mg (42%); R_f: 0,51 (CH₂CI₂:Acetona:2-Propanol 4:1:0,1).

¹H NMR (500 MHz, CDCIs): δ ppm 7,43 - 6,87 (m, 24H, Ar-H), 5,41 (ddd, J = 8,3, 6,0, 2,6 Hz, 1H, Neu5Ac-H8), 5,31 (dd, J = 8,0, 2,0 Hz, 1H, Neu5Ac-H7), 5,25 (d, J= 9,6 Hz, 1H, NH), 5,19 (s, 2H, CO₂CH₂Ar), 5,01 (br, 1H, Gal-H1), 4,90 (d, J = 11,9 Hz, 2H, CH₂Ar), 4,86 (ddd, J= 12,1, 10,0, 5,0 Hz, 1H, Neu5Ac-H4), 4,81 (d, J = 11,8 Hz, 1H, CH₂Ar), 4,56 (d, J = 1,7 Hz, 2H, CH₂Ar), 4,40 (br d, 2H, NCH₂Ar), 4,33 (dd, J = 12,5, 1,9 Hz, 1H, Neu5Ac-H9a), 4,28 (dd, J = 9,5, 2,8 Hz, 1H, GalH5), 4,04 (dd, J= 10,7, 2,1 Hz, 1H, Neu5Ac-H5), 3,95 (dd, J= 12,5, 6,0 Hz, 1H, Neu5Ac-H6), 3,85 - 3,74 (m, 5H, Gal-H2 Gal-H3 Gal-H4 Gal-H6), 3,79 (s, 3H, CO2CH3), 3,47 - 3,34 (m, 2H, Ar-CH₂), 2,76 (d, J = 2,8 Hz, 1H, Gal-4OH), 2,74 (brm, 2H, CH2N), 2,57 (dd, J= 13,0, 4,6 Hz, 1H, Neu-H3e), 2,10 (s, 3H, COCH3), 2,03 (t, J= 12,4 Hz, 1H, Neu-H3a), 2,00 (s, 3H, COCH3), 1,98 (s, 3H, COCH3), 1,95 (s, 3H, COCH3), 1,86 (s, 3H, COCH3); MS (ESl-pos) m/z calcd para C63H72N2O20 (M+Na)+: 1.199,46, encontrado 1.199,45

Síntese de amina de dissacarideo (44):

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149/157 [0296] Dissacarídeo 42 foi dissolvido em MeOH,

NaOH (1M; 10 equiv) foi adicionado e a solução foi agitada por 1 h. H2O adicional foi adicionada até a primeira turbidez aparecer. A solução foi agitada durante a noite, neutralizada até pH 7-8 com Ácido acético (20%). MeOH foi removido sob pressão reduzida até aparecer a primeira precipitação. A suspensão foi purificado em silica RP8 (10 - 90% de Acetonitrila em H2O). A fração de produto foi concentrada e o resíduo foi dissolvido numa mistura 2:1 de t-Butanol - H2O. Ácido acético (20% em H2O; 35 equiv) e Pd(OH)2 em carvão foram adicionados e a suspensão foi hidrogenada por 17 h à pressão ambiente sob agitação vigorosa. A suspensão foi filtrada, concentrada e coevaporada com tolueno. Rendimento de 41% em duas etapas.

¹H NMR (500 MHz, D2O): δ ppm 7,31 (d, J = 8,7 Hz, 2H, Ar-H), 7,15 (d, J = 8,7 Hz, 1H, Ar-H), 5,17 (d, J = 7,9 Hz, 1H, Gal-H1), 4,23 (dd, J= 9,8, 3,2 Hz, 1H, GalH3), 4,05 (d, J = 3,1 Hz, 1H, Gal-H4), 3,92 - 3,84 (m, 5H, Gal-H2 Gal-H5 NeuH5 Neu-H8 Neu-H9a), 3,77 (d, J = 6,1 Hz, 2H, Gal-H6), 3,72 (ddd, J = 11,7, 10,0,

4.7 Hz, 1H, Neu-H4), 3,67 (dd, J = 10,4, 1,7 Hz, 1H, Neu-H6), 3,64 (dd, J = 11,4,

5.8 Hz, 1H, Neu-H9b), 3,61 (dd, J = 8,8, 1,9 Hz, 1H, Neu-H7), 3,27 (t, J = 7,2 Hz, 2H, CH₂-NH3⁺), 2,98 (t, J= 7,2 Hz, 2H, Ar-CH₂), 2,81 (dd, J= 12,4, 4,6 Hz, 1H, Neu-H3e), 2,05 (s, 3H, COCH3), 1,84 (t, J = 12,1 Hz, 1H, Neu-H3a). O tiol 45 pode ser sintetizado usando procedimento similar ao mencionado antes.

Esquema 11: Síntese do polímero de GM1a (59)

HO OH

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150/157

[0297] Reagentes e condições: a) i. γ-tiobutirolactona, EtsN, MeOH; ii. DLditiotreitol, NaOH, H2O, 96%; b) i. 4, DBU, DMF, ii. Tioglicerol, EtsN, 66%.

Síntese do Tiol de GM1a (48) [0298] Amina 46 (20 mg, 18,6 μ mol) foi dissolvida em água (0,300 mL) e NaOH 1M (19 □!, 18,6 pmol, equiv) foi adicionado. Tiobutirolactona (10 equiv.) foi adicionada e MeOH (0,30 ml) foi adicionado até a solução monofásica ser obtida. A reação foi agitada por 3 h. NaOH 1M adicional (3,8 pl, 3,72 pmol, 0,2 equiv) foi adicionado e a reação foi agitada durante a noite. TLC mostra >95% do produto. Foi adicionada uma gota de HAc (20%), MeOH foi removido sob pressão reduzida purificado por coluna RP para obter tiol (18,0 mg, 82%).

¹H NMR (500 MHz, D2O): δ ppm 4,82 - 4,78 (m, 1H), 4,56 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 4,55 (d, J= 7,1 Hz, 1H), 4,50 (d, J= 7,9 Hz, 1H), 4,17 (d, J= 14,3 Hz, 3H), 4,06 (dd, J= 10,5, 8,8 Hz, 1H), 4,03-3,57 (m, 28H), 3,53 (dd, J= 17,1, 8,0 Hz, 2H), 3,35 (ddd, J = 24,8, 15,3, 9,0 Hz, 4H), 2,68 (dd, J= 12,5, 4,0 Hz, 1H), 2,56 (t, J

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151/157 = 7,1 Hz, 2H), 2,38 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,05 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,98 - 1,81 (m, 5H).

Síntese do polímero GM1a (59) [0299] Uma solução do polímero 4 (5.0 mg, 24,4 pmol) em DMF (244 μΙ_) foi adicionada a tiol 48 (11,5 mg, 9,8 pmol, 0,4 equiv). Uma solução de DBU (3,6 μΙ_, 24,4 μΓΠοΙ. 1,0 equiv) foi sucessivamente adicionada à mistura de reação. Depois de agitar por 60 min. à rt, foram adicionados tioglicerol (6,3 μΙ_, 73,3 prnol, 3,0 equiv) e EtsN (10,2 μΙ_, 73,3 pmol, 3 equiv). A mistura de reação foi agitada à rt por outras 17 h. O produto foi precipitado por adição lenta a uma solução de agitação de EtOH/Et2O (1:1,5 mL). O precipitado foi filtrado, lavado com EtOH e seco. Foi obtida purificação adicional por ultrafiltração (tubos Sartorius Stedim Vivaspin, 6 mL, corte de peso molecular de 50 kDa, 5.000 rpm). A liofilização deu o polímero GM1a 59 (9,0 mg, 62%) como um sólido branco. De acordo com ¹H NMR, o produto continha aproximadamente 28% das cadeias laterais de lisina substituídas pelo epítopo de carboidrato 48.

Ensaio de Ligação Competitiva com Aqluttininas do Grupo de Sangue A/B e Subunidade B da Toxina Shiqa [0300] Os polímeros de carboidratos sintetizados 9 e 32 (antígeno A), 35 (antígeno B), 5 e 6 (epítopo Gb3) e 23 (mimético do epítopo Gb3) foram testados com ELISA competitivo utilizando placas ativadas por maleimida (Thermo Scientific). As placas de microtitulação de 96 poços foram lavadas três vezes com tampão de lavagem (fosfato de sódio 0,1 M, cloreto de sódio 0,15 M, Tween20 0,05%, pH 7,2), 200 μΙ/poço e, então, incubadas com 100 μΙ/poço de um solução 1 a 50 μg/ml dos respectivos epítopos contendo sulfidrila em tampão de ligação (fosfato de sódio 0,1 M, cloreto de sódio 0,15 M, EDTA 10 mM, pH 7,2) durante a noite a 4°C. Após lavagem três vezes com tampão de lavagem (200 μΙ/poço), as placas foram incubadas com 200 μΙ/poço de uma solução de cisteína a 10 pg/ml recém-preparada por 1 h à temperatura ambiente. Após lavagem três vezes com tampão de lavagem (200 μΙ/poço) as placas foram incubadas com os

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152/157 polímeros de carboidratos sintetizados em diferentes concentrações, 25 pl/poço (concentrado 2x) e a proteína de ligação de carboidrato (CBP) relevante a uma concentração/diluição adequada, 25pl/poço (concentrado 2x) por 1 h à temperatura ambiente. Os poços foram lavados três vezes com tampão de lavagem (200 μΙ/poço) antes que o conjugado anticorpo secundário-peroxidase de rábano fosse adicionado (100 μΙ/poço). A placa é incubada por 1 h em temperatura ambiente. Após lavagem do poços (200 μΙ/poço), uma solução de substrato de tetrametilbenzidina (Thermo Scientific, 34028) foi adicionada (100 μΙ/poço) e a placa foi incubada por mais 5 a 30 minutos a temperatura ambiente protegida da luz. Finalmente, foi adicionada uma solução de parada (ácido sulfúrico 1M) (100 μΙ/poço) e o grau de reação coloriméthca foi determinado por medição de absorção a 450 nm com um leitor de microplaca (Spectramax 190, Molecular Devices, Califórnia, USA). Os valores de ICso dos compostos testados foram calculados usando o software Prism® (GraphPad Prism 5.0, Inc, La Jolla, USA).

Ensaio de ligação competitiva com uma aqlutinina anti-grupo sanguíneo A (BGA) [0301] Os polímeros de carboidratos 9 e 32 (ambos epítopos de BGA) foram testados em um ensaio de ligação competitiva em concentrações de 6,4 nM a 0,5 mM e 0,1 nM e 1 mM, respectivamente, coincubados com aglutinina antiBGA (Sigma Aldrich, SAB4700674, clone HE-193) a uma diluição de 1:100 em tampão de ligação. Conjugado de IgM anticamundongo de cabra HRP (Sigma Aldrich. A8786), diluído 1:10.000 foi usado como anticorpo secundário. A ICso medida foi de 0,6 μΜ e 5,2 nM, respectivamente (Figuras 1a e 1b).

Ensaio de ligação competitiva com uma agluttinina anti-sangue grupo B (BGB). [0302] O polímero de carboidrato 35 (epítopo de BGB) foi testado num ensaio de ligação competitiva em concentrações de 0,1 nM a 1 mM, coincubado com aglutinina anti-BGB (Sigma Aldrich, SAB4700676, clone HEB-29) a uma diluição de 1:10 em tampão de ligação. Conjugado de IgM anticamundongo de cabra HRP (Sigma Aldrich. A8786), diluído 1:10.000 foi usado como anticorpo secundário. A ICso medidda foi de 11,9 μΜ (Figura 2).

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Ensaio de ligação competitiva com a subunidade B da toxina tipo Shiqa 1 [0303] Os polímeros de carboidrato 5, 6 (epítopo Gb3) e 23 (mimético do epítopo Gb3) foram testados em um ensaio de ligação competitiva em concentrações de 1,6 nM a 500 μΜ, coincubados com a subunidade B da toxina tipo Shiga 1 marcada com HIS (Biozol, MBS145496) a uma concentração de 2 pg/ml. O conjugado anti-HIS HRP de camundongo (ThermoFischer Scientific. MA121315-HRP), em uma diluição de 1:10.000, foi usado como anticorpo secundário. Os valores de ICso obtidos foram de 233,3 nM para o polímero 5, 138,0 nM para polímero 6 e 229,0 nM para o polímero 23 (Figuras 3a e 3b). Ensaio de Ligação Competitiva com Subunidade B da Toxina do Cólera [0304] O polímero de carboidrato sintetizado 59 (antígeno GM1) foi testado com ELISA competitivo, utilizando um ELISA anti-GM1 (Bühlmann Laboratories, Schõnenbuch, Suíça). As placas de microtítulo de 96 poços, revestidas com o ganglisídeo GM1, foram lavadas duas vezes com tampão de lavagem (300 μΙ/poço) antes da coincubação do polímero de carboidrato em concentrações de 0,32 nM a 10 μΜ e o conjugado subunidade B da toxina de cólera-HRP (Sigma Aldrich, C3741) a uma concentração de 0,5 pg/ml (volume total de 50 pl/poço). Após uma incubação por 2 h a RT os poços foram lavados três vezes com tampão de lavagem (300 μΙ/poço) antes que uma solução de substrato de tetrametilbenzidina (Thermo Scientific, 34028) fosse adicionada (100 pl/poço) e a placa incubada por mais 5 minutos a 600 rpm a RT protegida da luz. Finalmente, foi adicionada uma solução de parada (ácido sulfúhco 1M) (100 pl/poço) e o grau de reação coloriméthca foi determinado por medição de absorção a 450 nm com um leitor de microplaca (Spectramax 190, Molecular Devices, Califórnia, USA). O valor de ICso foi determinado usando software Prism® (GraphPad Prism 5.0, Inc, La Jolla, USA) e foi de 103,7 nM para o polímero 59 (Figura 4).

Ensaio de Ligação com uma Imunoqlobulina Anti-Tn [0305] O polímero de carboidrato 38 (epítopo de Tn) foi testado em urn ELISA de ligação. Placas Maxisorp (Thermo Scientific, 442404) foram revestidas durante

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154/157 a noite com polímero 38 em concentrações de 0,6 pg/ml a 50,0 pg/ml (50 pl/poço) a 4°C. As placas foram lavadas três vezes com tampão de lavagem (PBS, 0,1% Tween), 200 pl/poço. As placas revestidas foram bloqueadas por 2h a RT com 100 μΙ/poço de BSA a 5% em PBS, Tween a 0,1%. A solução de bloqueio foi descartada e 50 μΙ/poço de um anticorpo anti-Tn IgM de camundongo (reBaGs6, Beth Israel Israel Deaconess Medical Center Glycomics Core) a uma diluição de 1:700. Após incubação por 2 h a RT os poços foram lavados três vezes com tampão de lavagem (200 μΙ/poço). Em seguida, como anticorpo secundário, 100 μΙ/poço de IgM anti-camundongo marcado com HRP (Sigma Aldrich, A8786) foram incubados por 2 h a RT. Os poços foram lavados três vezes com tampão de lavagem (200 μΙ/poço) antes de uma solução de substrato de tetrametilbenzidina (Thermo Scientific, 34028) fosse adicionada (100 μΙ/poço) e a placa foi incubada por mais 30 minutos a 600 rpm a RT protegida da luz. Finalmente, foi adicionada uma solução de parada (ácido sulfúhco 1M) (100 μΙ/poço) e o grau de reação coloriméthca foi determinado por medição de absorção a 450 nm com um leitor de microplaca (Spectramax 190, Molecular Devices, Califórnia, USA). O valor de ECso foi determinado usando software Prism® (GraphPad Prism 5.0, Inc, La Jolla, USA) e foi de 10,0 pg/ml para o polímero 38 (Figura 5).

Ensaio de Viabilidade de Célula com Toxina tipo Shiga 2 [0306] O efeito protetor dos polímeros 5 e 23 no dano citotóxico de células vero (Creative Bioarray, CSC-C8963H) por toxina tipo Shiga 2 (List Biological Laboratories Inc., N° de Prod 164, Lote: 1645A1) foi testado em um ensaio de viabilidade celular. Células Vero, uma linhagem de célula de rim de cercopithecus aethiops (macaco, verde africano) expressando o receptor Gb3, foram mantidas em meio de cultura (MEM Eagle ((Sigma, M4655, RNBF9153), 10% FBS (Gibco, 10500064), 1% (v/v) de solução de aminoácido não essencial (Sigma, M7145, RNBF6784), 1% (v/v) de piruvato de sódio (Sigma, S8636), 1% (v/v) de solução antibiótica antimicótica (Gibco, 15240062)). Para o ensaio de viabilidade, as células vero foram cultivadas durante a noite em meio de cultura

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155/157 isento de soro em placas de 96 poços (5.000 células/poço) a 37°C, 5% de CO2. Então, o meio foi descartado e as células foram incubadas por 48 h a 37°C, 5% de CO2 com 100 μΙ/poço de meio de cultura isento de soro contendo toxina tipo Shiga 2 a concentrações de 0,00001 a 100 pg/ml e os polímeros 5 ou 23 a uma concentração de 30 pg/ml. Após isso, 20 μΙ/poço de reagente de ensaio CelITiter Blue® (Promega, G8080, 258569) foram adicionados e a placa incubada por 4 h a 37°C, 5% de CO2. O sinal fluorescente (células viáveis transformam um eduto não fluorescente num produto fluorescente) foi, então, lido usando um fluorômetro Synergy HT (Ex: 520/25, Em: 590/20). As curvas de sinal foram adequadas e os valores de ECso determinados usando o software Prism® (GraphPad Prism 5.0, Inc, La Jolla, EUA). A ECso (a concentração à qual 50% das células vero permanecem viáveis) de toxina tipo Shiga 2 foi determinada a 6,9 ng/ml. A ECso da toxina tipo Shiga 2 coincubada com polímero 5, com carregamento de 25% de um epítopo de Gb3 natural foi de 464,9 ng/ml e a ECso da toxina tipo Shiga 2 coincubada com polímero 23, com 42% de carregamento de um mimético de epítopo de Gb3 foi de 3.434,0 ng/ml (Figura 6).

[0307] Os polímeros inventivos 5, 6, 23 e 59 são polímeros de carboidratos que imitam os glicoepítopos do glicolipídeo Gb3 e GM1. Os polímeros 5 e 6 exibem o epítopo Gb3 natural, ao passo que o polímero 23 exibe um mimético de Gb3. Gb3 é o receptor natural para toxinas Shiga bacterianas que são um fator patogênico importante em infecções com bactérias produtoras de toxina shiga (Shigella ou E. coli) ou em síndrome hemolítico-urêmica (HUS). O polímero 59 exibe o glicoepítopo GM1 natural que é o receptor para a toxina de cólera bacteriana que é um fator patogênico importante em infecções com Vibrio cholerae. Testes ELISA mostraram que os referidos polímeros podem ser usados para inibir a ligação da subunidade B da toxina tipo Shiga 1 ao receptor Gb3 natural (polímeros 5, 6 e 23; Figura 3a,b) e para inibir a ligação da subunidade B da toxina de cólera ao receptor de GM1 natural (polímero 59; Figura 4) com valores de IC50 na faixa nanomolar. As subunidades B são as que promovem a adesão celular crítica que é um pré-requisito para, então, induzir

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156/157 danos citotóxicos através da subunidade A das toxinas tipoABs. Um ensaio de viabilidade celular com células vero substanciou ainda mais a utilidade dos polímeros 5 e 23 para evitarem danos citotóxicos da toxina tipo Shiga 2 (contendo ambas as subunidades B e A) em direção a células renais vero que expressam altamente o receptor Gb3 natural (Figura 6). O tratamento de células vero com 30 pg/ml desses dois glicopolímeros teve um efeito protetor levando a um aumento na concentração de toxina necessária por um fator de grosseiramente 70 no caso do polímero 5 e por um fator de grosseiramente 500 no caso do polímero 23 para ter o mesmo dano citotóxico nas células vero em comparação com o tratamento de células vero com a toxina sozinha. Os resultados sugerem que esses polímeros podem ser usados em um cenário terapêutico para ligar às subunidades B das referidas toxinas bacterianas e, assim, impedir seu dano citotóxico.

[0308] Os polímeros inventivos 9, 32 e 35 são polímeros de carboidrato que imitam os antígenos A e B que são encontrados, por exemplo, nos glóbulos vermelhos. Os polímeros 9 e 32 ambos exibem um antígeno de carboidrato tipo A, o polímero 35 exibe um antígeno de carboidrato tipo B. Testes ELISA mostraram que os polímeros 9 e 32 podem ser usados para inibir a ligação da aglutinina anti-A ao antígeno de carboidrato A (Figura 1 a. b) e que o polímero 35 pode ser usado para inibir a ligação da aglutinina anti-B ao antígeno de carboidrato B (Figura 2). Os resultados sugerem que esses polímeros podem ser utilizados em um ambiente terapêutico para evitar os danos que as agluttininas podem causar em transplantes incompatíveis com ABO.

[0309] O polímero inventivo 38 é um polímero de carboidrato que imita o antígeno de Tn. As imunoglobulinas contra o antígeno de Tn estão envolvidas na formação de complexo imune em doenças tais como nefropatia de IgA e vasculite de IgA. Um teste ELISA mostrou que o polímero 38 pode ligar a um anticorpo que foi criado contra o antígeno de Tn de maneira dependente da concentração (Figura 5). Os resultados sugerem que esse polímero podería ser usado em um cenário

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157/157 terapêutico para ligar/inibir imunoglobulinas contra o antígeno de Tn e, assim, impedir a formação de complexo imune.

[0310] Os polímeros de carboidratos preparados são baseados em uma espinha dorsal de poli-L-lisina biodegradável e são projetados para uma aplicação terapêutica em pacientes, onde proteínas de ligação a carboidrato patogênicas, ligando os epítopos de carboidratos acima mencionados, poderíam ser neutralizadas seletivamente e removidas por esses polímeros que exibem os mesmos epítopos de carboidratos ou similares.

Claims (24)

1. REIVINDICAÇÕES

   1. Polímero, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende uma multiplicidade de um composto, em que o referido composto compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z e em que a referida fração de carboidrato imita um glicoepítopo reconhecido por uma proteína de ligação a carboidrato (CBP), em que a referida CBP é selecionada de uma exotoxina bacteriana, uma aglutinina e uma imunoglobulina formadora de depósito de complexo imune e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que

   Xé O ou N(R^a);

   R^a é H, Ci-4alquil, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

   Aé Ci-7alquileno, OCwalquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi4alquileno, OCi-7alquileno-R^b ou R^b-Ci-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

   B é NHC(O) ou S;

   pé 0 ou 1;

   q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, 2 ou 3;

   Yé SH, N₃ ou NH₂; e em que o referido ligante Z é ligado covalentemente através de seu grupo -X à extremidade redutora da referida fração de carboidrato; e em que a referida multiplicidade do referido composto é conectada à espinha dorsal do polímero por meio do referido ligante Z e em que a referida conexão é efetuada através do grupo Y do referido ligante Z; e em que o referido composto não é

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2. 2/25

   

   quando a referida espinha dorsal de polímero é poli-L-lisina.

   2. Polímero, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) ou fórmula (IV), em que a fórmula (I) é

   

   em que R¹² é H ou Z;

   em que, quando R¹¹ é H, então, R¹² é Z; e quando R¹¹ não é H, então, R¹² é H;

   e em que R¹³ é H ou

   HO OH

   

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3. 3/25 em que a fórmula (II) é

   

   em que R¹¹² é H ou

   

   HO e em que R¹¹³ é H ou Me;

   em que a fórmula (III) é

   

   em que R¹¹¹¹ é H ou Z ou

   OH OH

   

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4. 4/25

   

   em que R¹¹¹² é H ou Z;

   em que quando R¹¹¹¹ é H, então, R^IH2 é Z; e quando R¹¹¹¹ não é H, então, R^lll2é H;

   em que R¹³ e R¹¹¹⁸ são independentemente H ou

   

   em que quando R¹¹¹¹ não é então, R^IH3 é H;

   em que R¹⁴ é H ou

   

   

   em que quanto R¹¹¹⁴ não é H, então, R¹¹¹⁸ é H;

   em que R¹¹¹³ é H, então, R¹¹¹⁴ é H em que R¹¹¹⁵ é H ou

   

   HO

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5. 5/25 ou

   

   HO em que quando R¹¹¹⁴ ou R¹¹¹⁵ é

   

   em que e R^lll3e , então, R¹¹¹¹ é Η, Z

   R^IH8 são H;

   R^IH6 é H ou Z ou

   

   >r em que R¹⁷ é H ou Z;

   

   z OH em que quando R¹¹¹⁶ é H, então, R¹¹¹⁷ é Z; e quando R¹¹¹⁶ não é H, então,

   R^lll7é H;

   em que R¹¹¹⁹ é H ou Z ou

   

   em que m é 1 a 3;

   

   em que quando R¹⁹ é

   

   então, R¹¹¹³ R¹¹¹⁴,

   RIII5 θ RIII8 _sãQ |_|_; em que R^lll1° é H ou

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6. 6/25

   

   em que a fórmula (IV) é

   

   OH (iv) em que R^IV1 é

   OH

   

   jr

   OH

   So

   

   OH z OH em que R^IV2 e R^IV4 são independentemente H ou

   

   um em que quando o referido composto é então, o referido ligante Z não é composto de fórmula (IV),

   - N(R^a)-A-B-CH2-(CH₂)_q-SH, em que

   R^a é H, Ci-C4-alquil, Ci-C4-alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5,

   OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

   Aé Ci-7alquileno, Ci-C7-alcóxi, Ci-4alquileno-(OCH₂CH₂)rO-Ci4alquileno ou Ci-C7-alcóxi-R^b, em que R^b é um aril opcionalmente substituído

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7. 7/25 ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

   Bé NHC(O), S ou CH2;

   q é 0 a 6, preferivelmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda preferivelmente q é 1 ou 2;

   Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (I). Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (II). Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (III). Em uma modalidade preferida adicional, o referido composto é um composto de fórmula (IV)

   3. Polímero, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido composto é um composto de qualquer uma das fórmulas 3*, 8*, 22*, 26*, 31*, 34*, 37*, 45*, 47*-58*.

   

   Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 15/34
8. 8/25

   

   

   

   

   34*

   Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 16/34
9. 9/25

   HOOH

   

   37* °

   

   HOOH

   

   Z 47*

   

   Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 17/34
10. 10/25

    

    HOOH

    

    

    OH

    

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 18/34
11. 11/25

    

    53*

    HOOH

    

    

    

    

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 19/34
12. 12/25

    

    58* °

    4. Polímero, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)qY, em que

    Xé N(R^a);

    R^a é H, Ci-4alquil, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

    A é Ci-7alquileno, OCwalquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4-alquileno, OCi-7alquileno-R^b ou R^b-Ci-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

    B é NHC(O) ou S;

    pé 0 ou 1;

    q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, 2 ou 3;

    Yé SH, N3OUNH2.

    5. Polímero, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)qY, em que

    Xé O;

    A é Ci-7alquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi-4alquileno ou

    R^b-Ci-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 20/34
13. 13/25

    B é NHC(O) ou S;

    pé 0 ou 1 e em que preferivelmente p é 1;

    q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, 2 ou 3;

    Yé SH, N3OUNH2.

    6. Polímero, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido ligante Z é de uma fórmula selecionada de qualquer uma das fórmulas (a) a (g):

    OMe

    

    

    (b)

    

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 21/34
14. 14/25

    

    

    (P)

    

    

    (r) em que r é 0 a 6, preferivelmente 1 a 3, em particular 1, e q é 0 a 6, preferivelmente 1,2 e 4, em particular 1 ou 2.

    7. Polímero, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido composto é um composto de fórmula 3, 8, 22, 26, 31, 34, 37, 45 ou 48.

    

    SH

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 22/34
15. 15/25

    

    

    

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 23/34
16. 16/25

    

    

    

    8. Polímero, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARACTERIZADO pelo fato de que a referida espinha dorsal de polímero é um polímero de α-aminoácido, um polímero ou copolímero de ácido acrílico ou ácido metacrílico, um copolímero de N-vinil-2-pirrolidona-vinil álcool, um polímero de quitosana ou um polímero de polifosfazeno, em que preferivelmente a referida espinha dorsal de polímero é um polímero de aaminoácido e em que ainda preferivelmente o referido α-aminoácido do referido polímero de α-aminoácido é lisina, ornitina, glutamina, asparagina, ácido glutâmico ou ácido aspártico.

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 24/34
17. 17/25

    9. Polímero, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, CARACTERIZADO pelo fato de que a espinha dorsal de polímero é polilisina e em que, preferivelmente, o peso molecular da espinha dorsal de polímero é de 1.000 Da a 300.000 Da, ainda mais preferivelmente o peso molecular da espinha dorsal de polímero é de 30.000 a 150.000 Da.

    10. Composto, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende uma fração de carboidrato e um ligante Z, em que a referida fração de carboidrato imita um glicoepítopo reconhecido por uma proteína de ligação a carboidrato (CBP), em que a referida fração de carboidrato imita um glicoepítopo reconhecido por uma proteína de ligação a carboidrato (CBP), em que a referida CBP é selecionada de uma exotoxina bacteriana, uma aglutinina e uma imunoglobulina formadora de depósito de complexo imune e em que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y, em que

    Xé O ou N(R^a);

    R^a é H, Ci-4alquil, Ci-4alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

    Aé Ci-7alquileno, OCwalquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi4alquileno, OCi-7alquileno-R^b ou R^b-Ci-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

    B é NHC(O) ou S;

    pé 0 ou 1;

    q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, 2 ou 3;

    Yé SH, N₃ ou NH₂; e em que o referido ligante Z é ligado covalentemente através de seu grupo -X à extremidade redutora da referida fração de carboidrato.

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 25/34
18. 18/25

    11. Composto, de acordo com a reivindicação 10, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido ligante Z é -X-A-(B)_P-(CH2)q-Y e em que quando X é N(R^a); então,

    R^a é H, Ci-4-alquil, Ci-4-alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5, OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

    A é Ci-7alquileno, OCwalquileno, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rOCi4alquileno, OCi-7alquileno-R^b ou R^b-Ci-7alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

    Bé NHC(O) ou S;

    pé 0 ou 1;

    q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, 2 ou 3;

    Yé SH, N3 ou NH2; e em que quando X é O; então

    Aé R^b-Ci-C7-alquileno, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

    Bé NHC(O) ou S;

    pé 0 ou 1, preferivelmente p é 1;

    q é 0 a 6, preferivelmente q é 0 a 4 e ainda mais preferivelmente q é 0, 2 ou 3;

    Yé SH, N3OUNH2.

    12. Composto, de acordo com a reivindicação 10 ou reivindicação 11, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido composto é um composto de fórmula (I), fórmula (II), fórmula (III) ou fórmula (IV), em que a fórmula (I) é

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 26/34
19. 19/25

    

    

    ^Rl2 (D, em que R¹¹ é H ou Z ou

    OH OH

    

    em que R¹² é H ou Z;

    em que, quando R¹¹ é H, então, R¹² é Z; e quando R¹¹ não é H, então, R¹² é H;

    e em que R¹³ é H ou

    HO OH

    

    em que a fórmula (II) é

    

    ^RH1 (II), em que R¹¹¹ é Z ou

    

    em que R² é H ou

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 27/34
20. 20/25

    

    HO e em que R¹¹³ é H ou Me;

    em que a fórmula (III) é

    

    OH OH em que R¹¹¹¹ é H ou Z ou

    

    em que R^IH2 é H ou Z;

    em que quando R¹¹¹¹ é H, então, R^IH2 é Z; e quando R¹¹¹¹ não é H, então, R^lll2é Η;

    em que R¹³ e R¹¹¹⁸ são independentemente H ou

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 28/34
21. 21/25

    HO

    

    em que quando R¹¹¹¹ não é então, R^IH3 é H;

    em que R^IH4 é H ou

    

    

    em que quanto R^IH4 não é H, então, R^IH8 é H;

    em que R^IH3 é H, então, R^IH4 é H em que R^IH5 é H ou

    

    HO

    

    ^HO , então, R¹¹¹¹ é Η, Z em que quando R¹¹¹⁴ ou R¹¹¹⁵ é

    

    ou >—z , R^IH3 e R¹⁸ são ambos H;

    em que R¹¹¹⁶ é H ou Z ou

    

    em que R¹¹¹⁷ é H ou Z;

    

    OH

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 29/34
22. 22/25 em que quando R¹¹¹⁶ é H, então, R¹¹¹⁷ é Z; e quando R¹¹¹⁶ não é H, então, R^lll7é H;

    em que R¹¹¹⁹ é H ou Z ou

    

    em que m é 1 a 3;

    RIII10

    

    AcHN em que quando R¹⁹ é ^m , então, R¹¹¹³, R¹¹¹⁴,

    RIII5 θ _RIIIS _sã0 |_|_; em que R^lll1° é H ou

    

    em que a fórmula (IV) é

    

    em que R^IV1 é (iv)

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 30/34
23. 23/25

    OH

    OH

    

    z em que R^IV2 e R^IV4 são independentemente H ou

    

    em que (preferivelmente) quando o referido composto é um composto de fórmula (IV), então, o referido ligante Z não é

    - N(R^a)-A-B-CH2-(CH₂)_q-SH, em que

    R^a é H, Ci-C4-alquil, Ci-C4-alcóxi, CH2C6H5, CH2CH2C6H5,

    OCH2C6H5 ou OCH2CH2C6H5;

    Aé Ci-7alquileno, Ci-C7-alcóxi, Ci-4alquileno-(OCH2CH2)rO-Ci4alquileno ou Ci-C7-alcóxi-R^b, em que R^b é um aril opcionalmente substituído ou um heteroaril opcionalmente substituído e em que r é 0 a 6, preferivelmente r é 1,2 ou 3 e ainda preferivelmente r é 1;

    Bé NHC(O), S ou CH2;

    q é 0 a 6, preferivelmente q é 1, 2, 3 ou 4 e ainda preferivelmente q é 1 ou 2.

    13. Composição farmacêutica, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende um polímero de qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um composto de qualquer uma das reivindicações 10 a 13.

    Petição 870190091977, de 16/09/2019, pág. 31/34
24. 24/25

    14. Polímero, de qualquer uma das reivindicações 1 a 9, um composto de qualquer uma das reivindicações 10 a 12, ou uma composição farmacêutica da reivindicação 13, CARACTERIZADO pelo fato de que são para uso em um método para tratar uma doença ou distúrbio, em que a referida doença ou distúrbio é selecionada de uma infecção bacteriana, um distúrbio de aglutinação ou um distúrbio causado por imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune, em que preferivelmente a referida infecção bacteriana é causada por Shigella, preferivelmente por S. dysenteriae, Escherichia coli, Vibrio cholerae, Clostridium difficile, Clostridium botulinum, Clostridium tetani, Bordetella pertussis; e em que preferivelmente o referido distúrbio de aglutinação é causado por aglutininas anti-A, aglutininas anti-B, aglutininas anti-sistema I, aglutininas anti-sistema P ou agluttininas anti-Tn e anti-sialil-Tn; e em que preferivelmente o referido distúrbio causado por imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune é causado pela ligação de imunoglobulinas ao antígeno Tn e sialil-Tn em outras imunoglobulinas, preferivelmente selecionadas de IgG, IgA, IgM.

    15. Composto, de qualquer uma das reivindicações 10 a 12, ou um polímero de qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou uma composição farmacêutica da reivindicação 13, CARACTERIZADOS pelo fato de que são para uso em um método de diagnóstico de uma doença ou distúrbio, em que a referida doença ou distúrbio é selecionado de uma infecção bacteriana, um distúrbio de aglutinação ou um distúrbio causado por imunoglobulinas formadoras de depósito de complexo imune, em que preferivelmente a referida doença ou distúrbio é selecionado de shigelose, disenteria bacilar, síndrome de Marlow, síndrome hemolítica-urêmica (HUS), diarréia dos viajantes, cólera, infecção por Clostridium difficile, botulinismo, tétano, coqueluche ou tosse convulsa, transplante/transfusão incompatível com ABH, doença de aglutinina fria, hemoglobinúria paroxística fria, síndrome de poliaglutinabilidade Tn, nefropatia de IgA (também conhecida como nefropatia de IgA ou doença de