BR112019013552A2 - METHOD FOR SUPPRESSING DUST IN SUSPENSION OF PARTICULATED WASTE MATERIAL, BIOLOGICAL COMPOSITION AND USE OF BIOLOGICAL COMPOSITION - Google Patents

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Abstract

a presente invenção refere-se a um método para eliminar a poeira suspensa proveniente de rejeitos de partículas gerados por erosão eólica, consistindo de uma composição biológica, aplicando a composição biológica e estabilizando o material particulado. a invenção também se refere à composição biológica resultante e à aplicação dos resíduos de partículas.the present invention relates to a method for removing suspended dust from particulate tailings generated by wind erosion, consisting of a biological composition, applying the biological composition and stabilizing the particulate material. the invention also relates to the resulting biological composition and the application of particulate residues.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “MÉTODO PARA SUPRIMIR O PÓ EM SUSPENSÃO DO MATERIAL PARTICULADO DE RESÍDUOS, COMPOSIÇÃO BIOLÓGICA E USO DA COMPOSIÇÃO BIOLÓGICA”Invention Patent Descriptive Report for “METHOD FOR SUPPRESSING DUST IN SUSPENSION OF PARTICULATED WASTE MATERIAL, BIOLOGICAL COMPOSITION AND USE OF BIOLOGICAL COMPOSITION”

CAMPO DE APLICAÇÃO [001] A invenção a ser apresentada, em termos gerais, divulga um método para suprimir o pó em suspensão proveniente de material particulado, especialmente de rejeitos minerais, e composições biológicas, que compreendem mesclas de cianobactérias e microalgas obtidas de depósitos com os números KCTC13158BP e KCTC13159BP.FIELD OF APPLICATION [001] The invention to be presented, in general terms, discloses a method for suppressing suspended dust from particulate material, especially mineral waste, and biological compositions, which comprise mixtures of cyanobacteria and microalgae obtained from deposits with the numbers KCTC13158BP and KCTC13159BP.

ANTECENTES DA INVENÇÃO [002] É conhecido no estado da arte que as atividades industriais, de transporte, e fontes naturais como a erosão eólica provocam a emissão de material particulado desde a superfície de depósitos de mineração; o que constitui um problema meioambiental, pois este material particulado pode portar elementos tóxicos e perigosos, como é o caso dos rejeitos da mineração. Estes substratos correspondem a uma suspensão fina de sólidos em líquido, constituídos fundamentalmente pelo mesmo material presente na jazida mineral, à qual se extraiu a fração com mineral valioso. Estes rejeitos estão conformados principalmente por partículas de tamanho menor ou igual a 10 microns, com um alto e variado conteúdo mineralógico. Ao ser dispersas pelo vento, estas partículas afetam o meio ambiente, provocando um alto impacto ambiental.BACKGROUND OF THE INVENTION [002] It is known in the state of the art that industrial activities, transportation, and natural sources such as wind erosion cause the emission of particulate material from the surface of mining deposits; which constitutes an environmental problem, as this particulate material can carry toxic and dangerous elements, as is the case of mining waste. These substrates correspond to a fine suspension of solids in liquid, essentially constituted by the same material present in the mineral deposit, from which the fraction was extracted with valuable mineral. These tailings are mainly formed by particles of size less than or equal to 10 microns, with a high and varied mineralogical content. When dispersed by the wind, these particles affect the environment, causing a high environmental impact.

[003] No estado da arte encontramos diferentes estratégias para controlar o material particulado de diferente origem, que de uma ou outra maneira empregam elementos de origem biológica, no entanto, requerem de múltiplas aplicações, portanto não conseguem proporcionar soluções definitivas, aumentando os custos de manutenção.[003] In the state of the art we find different strategies to control particulate material of different origin, which in one way or another employ elements of biological origin, however, require multiple applications, therefore they are unable to provide definitive solutions, increasing the costs of maintenance.

[004] Por exemplo, o documento US 2013/0196419 descreve uma composição para diminuir o material particulado suspenso no ar ou em um líquido que compreende[004] For example, US 2013/0196419 describes a composition for reducing particulate matter suspended in air or in a liquid comprising

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2/14 uma fonte de exopolissacarídeos selecionados de variedades de microrganismos produtoras de lodo, um microrganismo com atividade ureolítica e um meio de cultivo, onde os microrganismos produtores de lodo são selecionados de microalgas e o microrganismo com atividade ureolítica é um cultivo de Bacillus pasteurii. A solicitação CL 0241-2012, do mesmo solicitante, descreve um método para diminuir o material particulado em suspensão no ar ou água que consiste em aglomerar o material particulado suspenso no ar ou água com exopolissacarídeos (EPS) de carga negativa, onde o microrganismo que produz o EPS de carga negativa é uma bactéria ou uma microalga.2/14 a source of exopolysaccharides selected from varieties of microorganisms producing sludge, a microorganism with ureolytic activity and a culture medium, where the microorganisms producing sludge are selected from microalgae and the microorganism with ureolytic activity is a cultivation of Bacillus pasteurii. Request CL 0241-2012, from the same applicant, describes a method to decrease particulate matter suspended in air or water that consists of agglomerating particulate matter suspended in air or water with negative charge exopolysaccharides (EPS), where the microorganism that produces the negatively charged EPS is a bacterium or a microalgae.

[005] Com relação às cianobactérias, existem documentos que descrevem a capacidade ou a relação destas com a remoção de contaminantes, tanto metálicos como orgânicos.[005] With regard to cyanobacteria, there are documents that describe their capacity or their relationship with the removal of contaminants, both metallic and organic.

[006] O documento registrado “Exopolysaccharide-producing cyanobacteria in heavy metal removal from water: molecular basis and practical applicability of the biosorption process”, redatado por R. Philippis, G. Cólica, e E. Micheletti,descreve que os microrganismos, especificamente os exopolissacarídeos (EPS) da superfície celular de cianobactérias, são capazes de remover metais desde ambientes contaminados por meio de diversos mecanismos, tais como processos mediados metabolicamente ou pela absorção de metais em macromoléculas com carga iônica da superfície celular. Nesta mesma linha, o documento “Characterization and Optimization of Bioflocculant Exopolysaccharide Production by Cyanobacteria Nostoc sp. BTA97 and Anabaena sp. BTA990 in Culture Conditions redatado por O. Tiwari e cols., descreve experiencias onde demonstrou-se a produção de exopolissacarídeos (EPS) de 40 variedades de cianobactérias como biofloculantes para absorver ou remover contaminantes orgânicos, e como alternativa de diversas aplicações biotecnológicas no meio ambiente. Como no documento anterior, a publicação científica titulada “Production of exopolysaccharides by the cyanobacterium Anabaena sp. BTA992 and application as bioflocculants”, redatada por R. Khangembam, O.[006] The registered document “Exopolysaccharide-producing cyanobacteria in heavy metal removal from water: molecular basis and practical applicability of the biosorption process”, written by R. Philippis, G. Cólica, and E. Micheletti, describes that microorganisms, specifically the exopolysaccharides (EPS) of the cyanobacterial cell surface, are capable of removing metals from contaminated environments through various mechanisms, such as metabolically mediated processes or by the absorption of metals in macromolecules with ionic charge on the cell surface. Along the same lines, the document “Characterization and Optimization of Bioflocculant Exopolysaccharide Production by Cyanobacteria Nostoc sp. BTA97 and Anabaena sp. BTA990 in Culture Conditions, written by O. Tiwari et al., Describes experiments in which the production of exopolysaccharides (EPS) from 40 varieties of cyanobacteria has been demonstrated as biofloculants to absorb or remove organic contaminants, and as an alternative to several biotechnological applications in the environment . As in the previous document, the scientific publication entitled “Production of exopolysaccharides by the cyanobacterium Anabaena sp. BTA992 and application as bioflocculants ”, written by R. Khangembam, O.

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3/143/14

Tiwari e M. Kalita, descreve o efeito dos exopolissacarídeos (EPS) de 10 variedades de cianobactérias durante seu cultivo fotoautotrófico. Os resultados demonstraram que cianobactérias selecionadas de Anabaena sp., podem ser um bom candidato para a produção comercial de EPS, e podem ser utilizadas em aplicações como alternativa aos floculantes sintéticos.Tiwari and M. Kalita, describes the effect of exopolysaccharides (EPS) from 10 varieties of cyanobacteria during their photoautotrophic cultivation. The results demonstrated that selected cyanobacteria from Anabaena sp., Can be a good candidate for commercial EPS production, and can be used in applications as an alternative to synthetic flocculants.

[007] Todos os documentos citados utilizam exopolissacarídeos como biofloculantes e são aplicados para a remoção de metais pesados em líquidos contaminados, mas nenhum deles representa uma solução ao problema técnico de suprimir o pó em suspensão provocado pela erosão eólica, proveniente de material particulado de rejeitos minerais. Diante dessa problemática, a invenção apresentada proporciona a aplicação de uma inovadora composição biológica que compreende mesclas de cianobactérias e microalgas. Esta invenção tem a vantagem de estabilizar o pó em suspensão proveniente do material particulado de rejeitos minerais, o que minimiza a infiltração de água e a erosão causadas pelo vento em rejeitos minerais. DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO [008] Esta invenção se refere a um método para suprimir o pó em suspensão proveniente de material particulado de rejeitos minerais causado pela erosão eólica. Tal método consiste em obter composições biológicas em um meio de cultivo líquido adequado; aplicar um volume determinado da composição biológica ao rejeito mineral ou substrato a tratar; e estabilizar o material particulado.[007] All documents cited use exopolysaccharides as biofloculants and are applied for the removal of heavy metals in contaminated liquids, but none of them represents a solution to the technical problem of suppressing suspended dust caused by wind erosion, originating from particulate waste material minerals. In view of this problem, the presented invention provides the application of an innovative biological composition that includes mixtures of cyanobacteria and microalgae. This invention has the advantage of stabilizing suspended dust from particulate material from mineral tailings, which minimizes water infiltration and wind erosion in mineral tailings. DESCRIPTION OF THE INVENTION [008] This invention relates to a method for suppressing suspended dust from particulate material from mineral tailings caused by wind erosion. Such a method consists of obtaining biological compositions in a suitable liquid culture medium; applying a determined volume of the biological composition to the mineral waste or substrate to be treated; and stabilize the particulate material.

[009] Além disso, reivindicam-se composições biológicas que compreendem mesclas de microrganismos, obtidas dos depósitos KCTC13158BP e KCTC13159BP, suspendidas em um meio de cultivo adequado.[009] In addition, biological compositions are claimed that comprise mixtures of microorganisms, obtained from the KCTC13158BP and KCTC13159BP deposits, suspended in a suitable culture medium.

DESCRIÇÃO DAS FIGURASDESCRIPTION OF THE FIGURES

- A Figura 1 mostra um registro fotográfico do desempenho típico das provetas sem tratamento, durante a realização dos ensaios em túnel de vento em diferentes tempos: 0 minutos (Fig. 1a), 5 minutos (Fig. 1b) e 20 minutos (Fig. 1c).- Figure 1 shows a photographic record of the typical performance of the untreated test tubes during the wind tunnel tests at different times: 0 minutes (Fig. 1a), 5 minutes (Fig. 1b) and 20 minutes (Fig. 1c).

- A Figura 2 mostra um registro fotográfico do desempenho típico das- Figure 2 shows a photographic record of the typical performance of

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4/14 provetas com tratamento Ph1, durante a realização dos ensaios em túnel de vento em diferentes tempos: 0 minutos (Fig. 2a), 10 minutos (Fig. 2b), 20 minutos (Fig. 2c), 60 minutos (Fig. 2d), 120 minutos (Fig. 2e) e 180 minutos (Fig. 2f).4/14 test tubes with Ph1 treatment, during wind tunnel tests at different times: 0 minutes (Fig. 2a), 10 minutes (Fig. 2b), 20 minutes (Fig. 2c), 60 minutes (Fig. 2d), 120 minutes (Fig. 2e) and 180 minutes (Fig. 2f).

- A Figura 3 mostra um registro fotográfico do desempenho típico das provetas tratadas com a mescla 1 de cianobactérias, durante a realização dos ensaios em túnel de vento em diferentes tempos: 0 minutos (Fig. 3a), 10 minutos (Fig. 3b), 20 minutos (Fig. 3c), 60 minutos (Fig. 3d), 180 minutos (Fig. 3e) e 360 minutos (Fig. 3f).- Figure 3 shows a photographic record of the typical performance of the beakers treated with the mixture 1 of cyanobacteria, during the tests in a wind tunnel at different times: 0 minutes (Fig. 3a), 10 minutes (Fig. 3b), 20 minutes (Fig. 3c), 60 minutes (Fig. 3d), 180 minutes (Fig. 3e) and 360 minutes (Fig. 3f).

- A Figura 4 mostra os pesos (Fig. 4A) e porcentagens de perda de rejeitos minerais (Fig. 4B) por efeito eólico, registrados nos ensaios de túnel de vento para as mostras de rejeitos minerais sem tratamento. As barras pretas indicam o peso seco inicial; as barras brancas indicam o peso seco final.- Figure 4 shows the weights (Fig. 4A) and percentages of loss of mineral tailings (Fig. 4B) due to the wind effect, recorded in the wind tunnel tests for samples of untreated mineral tailings. The black bars indicate the initial dry weight; the white bars indicate the final dry weight.

- A Figura 5 mostra os pesos (Fig. 5A) e porcentagens de perda de rejeito mineral (Fig. 5B) por efeito eólico, registrados nos ensaios de túnel de vento para as amostras de rejeito mineral com tratamento Ph1. As barras pretas indicam o peso seco inicial; as barras brancas indicam o peso seco final.- Figure 5 shows the weights (Fig. 5A) and percentages of loss of mineral tailings (Fig. 5B) due to the wind effect, recorded in the wind tunnel tests for samples of mineral tailings with Ph1 treatment. The black bars indicate the initial dry weight; the white bars indicate the final dry weight.

- A Figura 6 mostra os pesos (Fig. 6A) e porcentagens de perda de rejeito mineral (Fig. 6B) por efeito eólico, registrados nos ensaios de túnel de vento para as amostras de rejeito mineral tratadas com a mescla 1 de cianobactérias. As barras pretas indicam o peso seco inicial; as barras brancas indicam o peso seco final.- Figure 6 shows the weights (Fig. 6A) and percentages of loss of mineral waste (Fig. 6B) due to the wind effect, recorded in the wind tunnel tests for samples of mineral waste treated with mixture 1 of cyanobacteria. The black bars indicate the initial dry weight; the white bars indicate the final dry weight.

- A Figura 7 mostra os pesos (Fig. 6A) e porcentagens de perda de rejeito mineral (Fig. 6B) por efeito eólico, registrados nos ensaios de túnel de vento para as amostras de rejeito mineral tratadas com a mescla 2 de cianobactérias e microalgas. As barras pretas indicam o peso seco inicial; as barras brancas indicam o peso seco final.- Figure 7 shows the weights (Fig. 6A) and percentages of mineral waste loss (Fig. 6B) due to the wind effect, recorded in the wind tunnel tests for the mineral waste samples treated with the mixture 2 of cyanobacteria and microalgae . The black bars indicate the initial dry weight; the white bars indicate the final dry weight.

INVENÇÃO [010] Esta invenção apresentada se refere a um método e a uma composição para suprimir o pó em suspensão proveniente de material particulado de rejeitos minerais, onde o método mencionado compreende as seguintes etapas de:INVENTION [010] This presented invention relates to a method and a composition for suppressing suspended dust from particulate material from mineral waste, where the mentioned method comprises the following steps:

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5/145/14

a. obter composições biológicas em meio de cultivo líquido adequado, composto por mescla de microrganismos, obtidos dos depósitos KCTC13158BP e KCTC13159BP;The. obtain biological compositions in a suitable liquid culture medium, composed of a mixture of microorganisms, obtained from deposits KCTC13158BP and KCTC13159BP;

b. Aplicar mediante irrigação por aspersão uma vez, entre 100 a 200 (cm3) da composição biológica por cada 500 a 1.000 (cm2) de superfície de rejeito mineral u substrato a tratar, com uma taxa risco entre 2 e 2,5 (L/m2);B. Apply by spray irrigation once, between 100 to 200 (cm 3 ) of the biological composition for every 500 to 1,000 (cm 2 ) of mineral waste surface u substrate to be treated, with a risk ratio between 2 and 2.5 (L / m 2 );

c. Estabilizar o material particulado de tal forma que evite a erosão eólica ou a dispersão de dito material particulado desde a superfície do substrato.ç. Stabilize the particulate material in such a way as to avoid wind erosion or the dispersion of said particulate material from the substrate surface.

[011] A obtenção das composições biológicas realizou-se cultivando amostras de crostas de solo em meio líquido estéril adequado. O protocolo completo compreende: [012] incubar os tubos com as amostras aplicando fotoperíodos de 12 h de luz e 12 h escuridão, a uma temperatura de 28°C; plantar e cultivar em meio estéril sólido adequado e incubar aplicando fotoperíodos de 12 h de luz e 12 h escuridão, a uma temperatura de 28°C e obter colônias isoladas; sequenciar as colônias isoladas obtidas; criar cultivos líquidos das colônias isoladas caracterizadas; criopreservar centrifugando 2 mL de cultivo de cada colônia isolada e caracterizada de cianobactérias e microalgas a 4.000 rpm durante 10 minutos; descartar o sobrenadante e ressuspender o precipitado em meio líquido adequado; esfriar a suspensão durante 5 minutos a 3SC, logo depois durante 30 minutos a -20sC e sucessivamente congelar a -86SC; descongelar as amostras criopreservadas realizando uma inoculação a 10% v/v desde o cultivo-mãe em meio nutritivo adequado incubando durante 14 dias a 3.000 lux com ciclo de luz de 14/12 horas e agitação orbital com velocidade constante de 120 rpm. Os meios adequados para os cultivos são selecionados entre os seguintes:[011] The biological compositions were obtained by cultivating samples of soil crusts in an appropriate sterile liquid medium. The complete protocol comprises: [012] incubate the tubes with the samples by applying photoperiods of 12 h of light and 12 h of darkness, at a temperature of 28 ° C; plant and cultivate in a suitable solid sterile medium and incubate by applying photoperiods of 12 h of light and 12 h of darkness, at a temperature of 28 ° C and obtain isolated colonies; sequence the isolated colonies obtained; create liquid crops of the characterized isolated colonies; cryopreserve by centrifuging 2 mL of culture from each isolated colony and characterized by cyanobacteria and microalgae at 4,000 rpm for 10 minutes; discard the supernatant and resuspend the precipitate in an appropriate liquid medium; cool the suspension for 5 minutes to 3 S C, then for 30 minutes to -20 s C and then freeze to -86 S C; thaw the cryopreserved samples by performing a 10% v / v inoculation from the mother culture in an appropriate nutrient medium incubating for 14 days at 3,000 lux with a light cycle of 14/12 hours and orbital shaking with a constant speed of 120 rpm. The appropriate media for crops are selected from the following:

- Cultivo de amostras de crostas de solo: BG11 ou MDM;- Cultivation of soil crust samples: BG11 or MDM;

- Meio estéril sólido: BG11;- Solid sterile medium: BG11;

- Meios para criopreservar as amostras: médio BG11 com dimetilsulfóxido 3% v/v e metanol 5% v/v ou em meio BG11 com glicerol 10% v/v;- Means for cryopreserving the samples: BG11 medium with 3% v / v dimethyl sulfoxide and 5% v / v methanol or in BG11 medium with 10% v / v glycerol;

Petição 870190075705, de 06/08/2019, pág. 9/23Petition 870190075705, of 08/06/2019, p. 9/23

6/146/14

- Meio para descongelar os viais: meio nutritivo contendo N:P:K e elementos vestigiais Ca, Fe, Mg, Mn e S.- Medium to defrost the pathways: nutrient medium containing N: P: K and trace elements Ca, Fe, Mg, Mn and S.

[013] Além disso, nesta invenção se reivindicam composições biológicas que compreendem:[013] In addition, this invention claims biological compositions that comprise:

- mesclas de microrganismos obtidas dos depósitos KCTC13158BP e KCTC13159BP em uma concentração entre 106 a 108 células por mL; e- mixtures of microorganisms obtained from deposits KCTC13158BP and KCTC13159BP in a concentration between 10 6 to 10 8 cells per mL; and

- meio de cultivo.- culture medium.

[014] Os microrganismos da composição biológica podem ser selecionados, mas não se limitam aos gêneros das cianobacterias Leptolyngbya e Trichocoleus. Estas podem ser selecionadas, mas não se limitam às espécies Leptolyngbya badia, Trichocoleus sociatus, Trichocoleus desertorum Leptolyngbya boryana, Leptolyngbya sp. As microalgas podem ser selecionadas, mas não se limitam a espécies do gênero Chlorella. Também é possível aplicar combinações das mencionadas cianobactérias e microalgas.[014] The microorganisms of the biological composition can be selected, but are not limited to the genera of the cyanobacteria Leptolyngbya and Trichocoleus. These can be selected, but are not limited to the species Leptolyngbya badia, Trichocoleus sociatus, Trichocoleus desertorum Leptolyngbya boryana, Leptolyngbya sp. Microalgae can be selected, but are not limited to species of the Chlorella genus. It is also possible to apply combinations of the mentioned cyanobacteria and microalgae.

[015] Sabe-se que cianobactérias e as microalgas têm a capacidade de crescer em solos de granulometrias, que consideram um intervalo entre 1 a 125 μιτι, formando biocrostas que facilitam a recuperação de solos empobrecidos, pois estas favorecem o crescimento de plantas e vegetais sobre solos de granulometria fina. No entanto, o método e composição biológica descritos nesta invenção, estão dirigidos a estabilizar o pó em suspensão proveniente do material particulado de rejeitos minerais, o que minimiza a infiltração de água e a erosão causadas pelo vento em rejeitos minerais. Não existem antecedentes de que as cianobactérias e microalgas sejam utilizadas com o propósito descrito nesta invenção.[015] It is known that cyanobacteria and microalgae have the ability to grow in soils of particle size, which consider an interval between 1 to 125 μιτι, forming biocrusts that facilitate the recovery of impoverished soils, as these favor the growth of plants and vegetables on fine-grained soils. However, the method and biological composition described in this invention, are aimed at stabilizing the suspended powder from the particulate material of mineral tailings, which minimizes water infiltration and erosion caused by wind in mineral tailings. There is no history of cyanobacteria and microalgae being used for the purpose described in this invention.

EXEMPLOSEXAMPLES

Exemplo Ns 1: obtenção dos cultivos usados nos ensaios de estabilizaçãoExample N s 1: obtaining the crops used in the stabilization tests

1. As amostras iniciais foram obtidas desde o solo da IV Região de Coquimbo, no Chile, localizada na região semiárida do oeste da América do Sul, ao sul do grande deserto do Atacama (29°00’S; 32°10’S). Nos 6 diferentes setores dentro da Quarta1. The initial samples were obtained from the soil of the IV Coquimbo Region, in Chile, located in the semi-arid region of western South America, south of the great Atacama desert (29 ° 00’S; 32 ° 10’S). In the 6 different sectors within the Fourth

Petição 870190075705, de 06/08/2019, pág. 10/23Petition 870190075705, of 08/06/2019, p. 10/23

7/147/14

Região de Coquimbo foram extraídas 34 amostras de solo. Os lugares de amostragem foram escolhidos em base à cor e textura aparentes. Para a extração de amostras, removeu-se com cuidado a primeira camada de solo (1 cm de profundidade aprox.) coletando entre 8 a 15 g de solo, que foi armazenado em tubos Falcon estéreis. Uma vez coletadas todas as amostras estas foram conservadas a 4°C.Coquimbo Region 34 soil samples were extracted. The sampling sites were chosen based on the apparent color and texture. For sample extraction, the first layer of soil (approx. 1 cm deep) was carefully removed, collecting 8 to 15 g of soil, which was stored in sterile Falcon tubes. Once all samples were collected, they were kept at 4 ° C.

2. Paralelamente, para o isolamento dos microrganismos, tomou-se aproximadamente 1 grama de cada amostra do solo e foram acrescentados 10 mL de meio de cultivo estéril (BG11 ou MDM) em tubos Falcon de 15 mL estéreis, ou com quantidades menores respeitando a proporção 1/10, ou seja, por cada grama de solo foram adicionados 10 mL de meio. Posteriormente, agitou-se, em um agitador orbital, por 30 min a 34°C, esperou-se que o material particulado decantasse e retirou-se uma alíquota de 100 pL, a qual foi plantada em ambiente estéril com raspador em meio BG11 sólido cobrindo toda a placa, etiquetou-se cada placa com a informação da amostra, o volume de inóculo e a data. Os tubos com meio líquido com proporção 1 /10 e as placas plantadas foram incubadas em uma câmera de cultivo, a qual dispunha de um fotoperíodo de 12 h luz-12 h escuridão, a uma temperatura de 28°C. Os cultivos líquidos foram deixados na câmera de cultivo até serem observados filamentos verdes escuros ou manchas de cor verde claro. Realizou-se uma análise por microscopia ótica, em um microscópio Zeiss Axiostarplus® a 100X com um aumento do ocular de 10X, para confirmar a presença de microrganismos, e foi transferida uma porção ao meio BG11 líquido estéril. Para o caso das placas em meio sólido com evidente crescimento de colônias pigmentadas, realizou-se uma análise por microscopia ótica e foi plantado em placas de BG11 sólido para a separação de colônias, como também forma inoculadas em meio líquido para a obtenção de biomassa.2. At the same time, for the isolation of microorganisms, approximately 1 gram of each soil sample was taken and 10 ml of sterile culture medium (BG11 or MDM) was added in 15 ml sterile Falcon tubes, or with smaller amounts respecting the 1/10 proportion, that is, for each gram of soil 10 ml of medium were added. Subsequently, it was stirred in an orbital shaker for 30 min at 34 ° C, the particulate material was expected to settle and a 100 pL aliquot was removed, which was planted in a sterile environment with a scraper in solid BG11 medium. covering the entire plate, each plate was labeled with the sample information, the inoculum volume and the date. The tubes with liquid medium with 1/10 ratio and the planted plates were incubated in a culture chamber, which had a photoperiod of 12 h to 12 h darkness, at a temperature of 28 ° C. The liquid cultures were left in the culture chamber until dark green filaments or patches of light green color were observed. An analysis by optical microscopy was performed using a Zeiss Axiostarplus® microscope at 100X with a 10X magnification of the eyepiece to confirm the presence of microorganisms, and a portion was transferred to sterile liquid BG11 medium. For the case of plates in solid medium with evident growth of pigmented colonies, an analysis by optical microscopy was carried out and it was planted in plates of solid BG11 for the separation of colonies, as well as being inoculated in liquid medium to obtain biomass.

3. As amostras foram identificadas mediante obtenção do DNA genômico para o qual foram consideradas 200 pL do cultivo, cuidando para que se obtivessem filamentos na coleta; para o caso dos microrganismos mais compactos foram retirados do meio de cultivo e se obteve uma porção cuidadosamente removida com um bisturi de forma3. The samples were identified by obtaining the genomic DNA for which 200 pL of the culture were considered, taking care to obtain filaments in the collection; in the case of the more compact microorganisms, they were removed from the culture medium and a portion was carefully removed with a scalpel.

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8/14 estéril. Para cultivos em meio sólido, foram cortadas seções com um bisturi de forma estéril. Todas as amostras foram colocadas nos tubos de coleta respectivos e de ser necessário, foram nivelados até 200 pl_ com água estéril. Para a extração de DNA genômico utilizou-se o kit FavorPrep, Soil DNA isolation minikit da Favorgen Biotech corp®. O DNA foi quantificado e realizou-se amplificação de fragmentos de DNA para determinar a presença de microrganismos nas amostras. 25 μΙ_ de produtos de PCR da amplificação de cada amostra foram enviados à empresa Macrogen para sequenciá-los. Uma vez obtidos os resultados da sequenciação, processou-se cada sequência com o software Geneious com relação à presença dos primeiros e à qualidade da sequenciação entregados pelos electroferogramas da sequenciação realizada. Logo em seguida, realizou-se um alinhamento de cada sequência com a ferramenta BLASTn dirigido a cada gênero de microrganismo. Posteriormente, analisou-se a lista de resultados significativos obtidos e os resultados da árvore de distância entregados pela mesma ferramenta, identificando o gênero mais provável ao que podería pertencer o microrganismo. Estas análises indicaram que os microrganismos encontrados nas amostras extraídas de crostas de solo correspondiam a cianobactérias, especificamente às de espécies cianobacteriais Leptolyngbya badia, Trichocoleus sociatus, Trichocoleus desertorum Leptolyngbya boryana, Leptolyngbya sp. Além disso, identificou-se a presença do gênero de microalga Chlorella.8/14 sterile. For cultivations in solid medium, sections were cut with a scalpel in a sterile way. All samples were placed in the respective collection tubes and, if necessary, were leveled up to 200 µl with sterile water. For the extraction of genomic DNA, the FavorPrep kit, Soil DNA isolation minikit from Favorgen Biotech corp® was used. The DNA was quantified and DNA fragments were amplified to determine the presence of microorganisms in the samples. 25 μΙ_ of PCR products from the amplification of each sample were sent to Macrogen to sequence them. Once the sequencing results were obtained, each sequence was processed with the Geneious software regarding the presence of the first and the quality of the sequencing delivered by the electropherograms of the sequencing performed. Soon afterwards, each sequence was aligned with the BLASTn tool for each genus of microorganism. Subsequently, the list of significant results obtained and the results from the distance tree delivered by the same tool were analyzed, identifying the most likely genus to which the microorganism could belong. These analyzes indicated that the microorganisms found in the samples extracted from soil scabs corresponded to cyanobacteria, specifically those of cyanobacterial species Leptolyngbya badia, Trichocoleus sociatus, Trichocoleus desertorum Leptolyngbya boryana, Leptolyngbya sp. In addition, the presence of the microalgae genus Chlorella was identified.

4. Para obter os cultivos usados na análise de estabilidade, realizou-se uma inoculação a 10% v/v desde o cultivo criopreservado das espécies de cianobatérias e microalgas isoladas, e as amostras foram submetidas a crescimento durante duas semanas em meio nutritivo contendo uma proporção de N:P:K e elementos vestigiais: Ca, Fe, Mg, Mn e S. As condições de crescimento corresponderam a 3.000 lux proveniente de luz fluorescente (40,5 pmol m-2 s-1), agitação orbital com velocidade constante a 120 rpm, ciclo de luz de 14/12 horas, umidade entre 40% e 60%. Exemplo Ns 2: Criopreservação das amostras4. In order to obtain the cultures used in the stability analysis, a 10% v / v inoculation was performed from the cryopreserved culture of the isolated cyanobacteria and microalgae species, and the samples were grown for two weeks in a nutrient medium containing a proportion of N: P: K and trace elements: Ca, Fe, Mg, Mn and S. The growth conditions corresponded to 3,000 lux from fluorescent light (40.5 pmol m-2 s-1), orbital agitation with speed constant at 120 rpm, light cycle of 14/12 hours, humidity between 40% and 60%. Example N s 2: Cryopreservation of samples

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9/14 ml de cultivo de cada isolado foi centrifugado a 4.000 rpm a temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, descartou-se o sobrenadante e ressuspendeu-se o precipitado em meio de criopreservação. Dois meios de criopreservação foram utilizados para preservar a -86SC:9/14 ml of culture from each isolate was centrifuged at 4,000 rpm at room temperature for 10 minutes. Then, the supernatant was discarded and the precipitate was resuspended in cryopreservation medium. Two cryopreservation media were used to preserve -86 S C:

a) Meio A: BG11 (ATCC Médium 616), dimetilsulfóxido (DMSO em concentração a 3% v/v e metanol em concentração a 5% v/v).a) Medium A: BG11 (ATCC Medium 616), dimethyl sulfoxide (DMSO in concentration at 3% v / v and methanol in concentration at 5% v / v).

b) Meio B: BG11 e glicerol em concentração a 10% v/v.b) Medium B: BG11 and glycerol in 10% v / v concentration.

[016] Uma vez ressuspendida a biomassa de ci ano bactérias e microalgas, esfriou-se a nova suspensão durante 5 minutos a 4°C, 30 minutos a -20°C e finalmente levou-se o cultivo a -86°C.[016] Once the biomass of bacteria and microalgae was resuspended, the new suspension was cooled for 5 minutes at 4 ° C, 30 minutes at -20 ° C and finally the cultivation was brought to -86 ° C.

[017] As amostras obtidas desde crostas do solo têm sido depositadas sob as especificações do tratado de Budapest na autoridade internacional de depósitos “Korean Collection for Type Cultures, com os números KCTC 13158BP e KCTC 13159BP. Tais amostras depositadas contém as espécies cianobacteriais Leptolyngbya badia, Trichocoleus sociatus, Trichocoleus desertorum Leptolyngbya boryana, Leptolyngbya sp. e microalgas do gênero Chlorella.[017] Samples obtained from soil crusts have been deposited under the specifications of the Budapest treaty with the international deposit authority “Korean Collection for Type Cultures, under the numbers KCTC 13158BP and KCTC 13159BP. Such deposited samples contain the cyanobacterial species Leptolyngbya badia, Trichocoleus sociatus, Trichocoleus desertorum Leptolyngbya boryana, Leptolyngbya sp. and microalgae of the Chlorella genus.

Exemplo Ns 3: Avaliação de viabilidade celular das amostras criopreservadas [018] Prévio à avaliação de viabilidade foram descongelados os cultivos mantidos a -86SC, mantendo cada amostra a 4°C, em seguida foram centrifugadas a 4.000 rpm durante 5 minutos a 4°C. Posteriormente, eliminou-se o sobrenadante e inoculou-se toda a biomassa precipitada, sobre meio líquido ou sólido (BG11) a uma concentração de 10% v/v.Example N s 3: Cell viability assessment of cryopreserved samples [018] Prior to the viability assessment, cultures maintained at -86 S C were thawed, keeping each sample at 4 ° C, then centrifuged at 4,000 rpm for 5 minutes at 4 ° C. Subsequently, the supernatant was eliminated and all precipitated biomass was inoculated, in liquid or solid medium (BG11) at a concentration of 10% v / v.

[019] Para avaliar a viabilidade foram inoculados os isolados criopreservados sobre meio de cultivo nutritivo sólido (BG11 com 1% agar) e se mantiveram durante 7 dias a 3.000 lux proveniente de luz fluorescente (40,5 pmol nr2 s_1), ciclo luminoso de 14/12 horas, umidade entre 40% e 60%. Neste caso a viabilidade foi verificada por crescimento em placa.[019] In order to assess viability, cryopreserved isolates were inoculated on solid nutrient culture medium (BG11 with 1% agar) and maintained for 7 days at 3,000 lux from fluorescent light (40.5 pmol nr 2 s _1 ), cycle 14/12 hour light, humidity between 40% and 60%. In this case, viability was verified by plaque growth.

[020] Para avaliar a viabilidade em meio líquido, inoculou-se a biomassa de[020] To assess viability in a liquid medium, biomass of

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10/14 cianobactérias e microalgas criopreservadas sobre meio de cultivo nutritivo (BG11) e se manteve o cultivo durante 30 dias baixo as seguintes condições de crescimento: 3.000 lux proveniente de luz fluorescente (40,5 pmol rrr2 s_1), ciclo luminoso de 14/12 horas, umidade entre 40% e 60%, e agitação orbital a velocidade constante de 120 rpm. Neste caso, a viabilidade é verificada por crescimento, por meio da observação da biomassa crescida após uma e duas semanas.10/14 cyanobacteria and microalgae cryopreserved on nutrient medium (BG11) and cultivation was maintained for 30 days under the following growing conditions: 3,000 lux from fluorescent light (40.5 pmol rrr 2 s _1 ), light cycle of 12/14 hours, humidity between 40% and 60%, and orbital agitation at a constant speed of 120 rpm. In this case, viability is verified by growth, by observing the biomass grown after one and two weeks.

Exemplo Ns 4: Caracterização qeotécnica do material de rejeito mineral [021] Realizaram-se ensaios de laboratório para avaliar a composição geotécnica do material de rejeito mineral, medindo os parâmetros de granulometria por método mecânico (Tabela Ns 1) e granulometria por método do hidrômetro baixo a norma de ASTM (Tabela Ns 2).Example N s 4: Qeotechnical characterization of the mineral waste material [021] Laboratory tests were carried out to evaluate the geotechnical composition of the mineral waste material, measuring the granulometry parameters by mechanical method (Table N s 1) and granulometry by method of the hydrometer under the ASTM standard (Table N s 2).

Tabela Ns 1: Granulometria por método mecânicoTable N s 1: Granulometry by mechanical method

Coador Strainer #4 # 4 #10 # 10 #40 # 40 #100 # 100 #200 # 200 % que passa % that passes 100 100 100 100 91 91 39 39 14 14

Tabela Ns 2: Granulometria por método do hidrômetro (norma ASTM)Table N s 2: Granulometry by the hydrometer method (ASTM standard)

Diâmetro (mm) Diameter (mm) 0,06407 0.06407 0,04686 0.04686 0,03445 0.03445 0,02499 0.02499 0,01325 0.01325 0,00953 0.00953 0,00677 0.00677 0,00340 0.00340 0,00242 0.00242 % que passa % that passes 8,3 8.3 6,9 6.9 5,1 5.1 3,9 3.9 2,7 2.7 2,1 2.1 1,8 1.8 1,3 1.3 0,98 0.98

Além disso, mediram-se os parâmetros de gravidade específica (Tabela Ns 3), densidade máxima compactada (Tabela Ns 4) e densidade aparente solta (Tabela Ns 5) às amostras de rejeito mineral.In addition, the parameters of specific gravity (Table N s 3), maximum compacted density (Table N s 4) and loose bulk (Table N s 5) were measured for the mineral waste samples.

Tabela Ns 3: Gravidade específicaTable N s 3: Specific severity

Amostra Ns Sample N s Gravidade específica (kg*m/N*s2)Specific gravity (kg * m / N * s 2 )

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11/1411/14

1 1 2,72 2.72

Tabela Ns 4: Densidade máxima compactadaTable N s 4: Maximum compacted density

Amostra Ns Sample N s Densidade máx. úmida (t/m3)Max. Density wet (t / m 3 ) Densidade máx. seca (t/m3)Max. Density dry (t / m 3 ) Umidade ótima (%) Optimal humidity (%) 1 1 1,9 1.9 1,7 1.7 15,5 15.5 Tabela Ns 5:Table N s 5: Densidade aparente so ta Apparent density only Amostra Ns Sample N s Densidad solta (t/m3)Loose density (t / m 3 ) 1 1 1,3 1.3

Exemplo Ns 5: Ensaios em túnel de vento [022] Os ensaios em túnel de vento foram realizados baixo a norma chilena de depósitos de rejeitos NCh 3266 - 2012, simulando condições de velocidades e regimes de vento que se registram em lugares de instalação de obras de mineração afetadas por erosão eólica, de tal forma que os resultados repercutem nas condições de terreno.Example N s 5: Wind tunnel tests [022] The wind tunnel tests were carried out under the Chilean tailings deposit standard NCh 3266 - 2012, simulating conditions of speeds and wind regimes that are registered in installation sites of mining works affected by wind erosion, in such a way that the results have repercussions on the ground conditions.

a) Preparação das provetas: a preparação das provetas contemplou o preenchimento dos moldes metálicos com rejeitos à densidade aparente solta. Para isso utilizou-se um funil, que permite a queda livre e constante do rejeito até completar sua capacidade, finalmente nivelando a superfície para deixá-la uniforme. O volume em média das provetas é de 3.804 cm3. Deixa-se repousar a proveta preparada por aproximadamente 12 horas, antes de submetê-la ao ensaio no túnel de vento. As amostras tratadas com o agente mitigador (Ph1) e com os microrganismos foram aplicadas mediante irrigação superficial, portanto para uma superfície de 726 cm2 foram utilizados os volumes e as taxas de irrigação especificadas na tabela Ns 6. A partir das amostrasa) Preparation of the test tubes: the preparation of the test tubes included filling the metal molds with tailings to the loose bulk density. For this, a funnel was used, which allows the free and constant fall of the tailings until it reaches its capacity, finally leveling the surface to make it uniform. The average volume of the test tubes is 3,804 cm 3 . The prepared beaker is allowed to rest for approximately 12 hours, before being subjected to the test in the wind tunnel. The samples treated with the mitigating agent (Ph1) and the microorganisms were applied by means of surface irrigation, therefore for a surface of 726 cm 2 the volumes and rates of irrigation specified in table N s 6 were used. From the samples

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12/14 criopreservadas, prepararam-se 2 mesclas de microrganismos: a mescla 1 contém Leptolyngbya badia, Trichocoleus sociatus, e a mescla 2 contém Trichocoleus desertorum, Leptolyngbya boryana e Chlorella.sp.12/14 cryopreserved, 2 mixtures of microorganisms were prepared: mix 1 contains Leptolyngbya badia, Trichocoleus sociatus, and mix 2 contains Trichocoleus desertorum, Leptolyngbya boryana and Chlorella.sp.

Tabela Ns 6: Taxa de risco e volume aplicado às amostrasTable N s 6: Risk rate and volume applied to samples

Amostra Ne Sample N and Tratamento Treatment Taxa risco (L/m2)Risk rate (L / m 2 ) Volume aplicado (cm3)Applied volume (cm 3 ) 1 1 Ph1 Ph1 2,06 2.06 150 150 2 2 mezcla 1 mezcla 1 2,06 2.06 150 150 3 3 mezcla 2 mezcla 2 2,06 2.06 150 150

b) Instalação da proveta e execução do ensaio: a proveta foi instalada no suporte de plano regulável do túnel de vento; a inclinação para esta série de provas foi entre 9S e 10o com relação à horizontal. Uma vez instalada, a proveta no suporte, iniciou-se o ensaio aplicando vento a uma velocidade de 12 m/s, considerando um tempo de exposição de seis horas contínuas. Para cada ensaio mediu-se o peso e a umidade inicial de cada proveta, e depois de finalizado o ensaio pesou-se o material restante no molde e mediu-se a umidade final. Cada um dos ensaios realizados foi registrado fotograficamente. No caso das provetas sem tratamento, realizou-se uma amostragem a cada 5 minutos. No caso das provetas tratadas, realizaram-se amostras cada 5 minutos até completar 20 minutos, logo depois aos 60 de exposição e, posteriormente, a cada hora até completar as seis horas de ensaio. As figuras 1-3 mostram um registro fotográfico do desempenho típico das provetas sem tratamento (Figura 1), tratamento com o agente mitigador Ph1 (Figura 2), e tratamento com a mescla 1 (Figura 3), em diferentes tempos durante ab) Installation of the beaker and execution of the test: the beaker was installed on the adjustable support of the wind tunnel; the inclination for this series of tests was between 9 S and 10 o in relation to the horizontal. Once the beaker was installed on the support, the test started by applying wind at a speed of 12 m / s, considering an exposure time of six continuous hours. For each test, the initial weight and humidity of each test tube was measured, and after the test was finished, the remaining material in the mold was weighed and the final moisture was measured. Each of the tests performed was photographically recorded. In the case of untreated test tubes, sampling was carried out every 5 minutes. In the case of the treated beakers, samples were taken every 5 minutes until completing 20 minutes, then after 60 hours of exposure and, subsequently, every hour until completing the six hours of testing. Figures 1-3 show a photographic record of the typical performance of beakers without treatment (Figure 1), treatment with the mitigating agent Ph1 (Figure 2), and treatment with mixture 1 (Figure 3), at different times during

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13/14 realização dos ensaios submetidos ao efeito eólico no túnel de vento. Para o ensaio com a mezcla 2, não proporcionamos fotografias.13/14 performance of tests submitted to the wind effect in the wind tunnel. For the test with mezcla 2, we do not provide photographs.

c) Resultados obtidos de ensaios em túnel de vento: realizaram-se ensaios a doze provetas, de acordo com a norma chilena de depósitos de rejeitos minerais, NCh 3266 - 2012, das quais três não foram tratadas, três foram tratadas com Ph1, três foram tratadas com a mescla 1 e mais três foram tratadas com a mescla 2. Os pesos e porcentagens de perda de rejeito mineral por efeito eólico registrados nos ensaios realizados, são apresentados na tabela Ns 7 e nas figuras 4 (Sem tratamento), 5 (Tratamento com Ph1), 6 (Tratamento com a mescla 1) e 7 (Tratamento com a mescla 2). É importante destacar que no caso das provetas não tratadas, a perda de material chegou aos 20 minutos, tal como se observa nas figuras 1 e 4. No caso das provetas tratadas com Ph1, a perda de material registrou-se após três e seis horas de exposição na proveta à ação do vento, como pode-se observar nas figuras 2 ec) Results obtained from wind tunnel tests: tests were carried out on twelve test tubes, according to the Chilean standard of mineral waste deposits, NCh 3266 - 2012, of which three were not treated, three were treated with Ph1, three were treated with mixture 1 and three more were treated with mixture 2. The weights and percentages of loss of mineral waste due to the wind effect recorded in the tests performed, are shown in table N s 7 and in figures 4 (No treatment), 5 (Treatment with Ph1), 6 (Treatment with mixture 1) and 7 (Treatment with mixture 2). It is important to note that in the case of untreated test tubes, the material loss reached 20 minutes, as shown in Figures 1 and 4. In the case of test tubes treated with Ph1, the material loss was registered after three and six hours of exposure in the beaker to the action of the wind, as can be seen in figures 2 and

5. Nas provetas tratadas com a mescla 1, não se registrou perda de material particulado, como pode-se apreciar nas figuras 3 e 6. Este resultado também foi observado ao tratar o material particulado proveniente de rejeito mineral com a mescla 2, como observa-se na figura 7.5. In the beakers treated with mixture 1, there was no loss of particulate material, as can be seen in figures 3 and 6. This result was also observed when treating the particulate material from mineral waste with mixture 2, as observed shown in figure 7.

Tabela Ns 7: ResultadTable N s 7: Result os de pesos e porcen weights and porcen taqens de perda de rejeito mineral mineral waste loss rates Proveta Ne Cylinder N e Ensaio Test Densidade seca (t/m3)Dry density (t / m 3 ) % DSMC P.N. % DSMC P.N. Ensaio em túnel de vento Wind tunnel test Perda de rejeito por efeito eólico Lost of tailing due to wind effect Peso seco Dry weight Peso seco final Dry weight Final Peso seco final Final dry weight inicia starts (gr) (gr) (%) (%) (gr) (gr) (%) (%) (gr) (gr) (%) (%) 1 1 s.t. s.t. 1,37 1.37 81 81 5125 5125 100 100 230 230 4,5 4.5 4895 4895 95,5 95.5

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14/1414/14

2 2 s.t. s.t. 1,34 1.34 80 80 5167 5167 100 100 392 392 7,6 7.6 4775 4775 92,4 92.4 3 3 s.t. s.t. 1,34 1.34 80 80 5110 5110 100 100 344 344 6,7 6.7 4766 4766 93,3 93.3 1 1 Ph1 Ph1 1,31 1.31 78 78 4976 4976 100 100 1 1 0,0 0.0 4975 4975 100,0 100.0 2 2 Ph1 Ph1 1,31 1.31 78 78 5138 5138 100 100 1 1 0,0 0.0 5137 5137 100,0 100.0 3 3 Ph1 Ph1 1,32 1.32 78 78 5118 5118 100 100 6 6 0,1 0.1 5112 5112 99,9 99.9 1 1 mescla 1 mix 1 1,34 1.34 80 80 5130 5130 100 100 5093 5093 99,3 99.3 37 37 0,7 0.7 2 2 mescla 1 mix 1 1,31 1.31 78 78 5107 5107 100 100 5077 5077 99,4 99.4 30 30 0,6 0.6 3 3 mescla 1 mix 1 1,31 1.31 78 78 5086 5086 100 100 5056 5056 99,4 99.4 30 30 0,6 0.6 1 1 mescla 2 mix 2 1,32 1.32 79 79 5054 5054 100 100 4893 4893 96,8 96.8 161 161 3,2 3.2 2 2 mescla 2 mix 2 1,32 1.32 78 78 4899 4899 100 100 4743 4743 96,8 96.8 156 156 3,2 3.2 3 3 mescla 2 mix 2 1,32 1.32 78 78 4976 4976 100 100 4823 4823 96,9 96.9 153 153 3,1 3.1

s.t.: Ensaios sem tratamento [023] Enquanto esta invenção tem sido descrita baixo as modalidades mencionadas anteriormente, podería parecer evidente que outras alternativas, modificações ou variações entregariam os mesmos resultados, no entanto, temos podido estabelecer que as proporções, nas quais se encontram presentes as cianobactérias e as algas são fundamentais para o sucesso da metodologia. Consequentemente, as modalidades da invenção pretendem ser ilustrativas, não limitantes. Várias mudanças podem ser realizadas sem distanciar-se do espírito e alcance da invenção como se define nas seguintes reivindicações.st: Tests without treatment [023] While this invention has been described under the modalities mentioned above, it could seem evident that other alternatives, modifications or variations would deliver the same results, however, we have been able to establish that the proportions, in which they are present cyanobacteria and algae are fundamental to the success of the methodology. Consequently, the embodiments of the invention are intended to be illustrative, not limiting. Various changes can be made without departing from the spirit and scope of the invention as defined in the following claims.

[024] Todas as patentes, solicitações de patentes, artigos científicos e outros documentos públicos, que em conhecimento do solicitante constituem o estado da arte, têm sido adequadamente citados nesta solicitação.[024] All patents, patent applications, scientific articles and other public documents, which in the knowledge of the applicant constitute the state of the art, have been adequately cited in this application.

Claims (12)

REIVINDICAÇÕES 1. Método para suprimir o pó em suspensão do material particulado de resíduos, caracterizado porque compreende:1. Method for removing suspended dust from particulate waste material, characterized in that it comprises: a. obtenção de composições biológicas em meio de cultura líquido adequado, composto de misturas de microorganismos obtidos dos depósitos KCTC13158BP e KCTC13159BP;The. obtaining biological compositions in a suitable liquid culture medium, composed of mixtures of microorganisms obtained from the KCTC13158BP and KCTC13159BP deposits; b. aplicação de uma vez entre 100 a 200 cm3 uma composição biológica para cada 500 a 1.000 cm2 de superfície de rejeitos ou substrato a ser tratado, com uma taxa de irrigação entre 2 e 2,5 L/m2;B. applying once between 100 to 200 cm 3 a biological composition for each 500 to 1,000 cm 2 of tailings surface or substrate to be treated, with an irrigation rate between 2 and 2.5 L / m 2 ; c. estabilização do material particulado.ç. stabilization of particulate material. 2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a aplicação da composição biológica é realizada por irrigação por aspersão.2. Method according to claim 1, characterized by the fact that the application of the biological composition is carried out by spray irrigation. 3. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que as composições biológicas são obtidas por cultura de amostras de solo crosta em meio líquido estéril adequado; incubar os tubos de amostra que utilizam fotoperíodo de 12 h de luz e 12 horas de escuro, a uma temperatura de 28 °C; cultivar em meio sólido estéril apropriado e incubar a aplicação fotoperíodo de 12 h de luz e 12 horas de escuro, a uma temperatura de 28 °C e obter colônias isoladas; seqüência das colônias isoladas obtidas; criopreservar centrifugando 2 mL de cultura de cada amostra isolada e caracterizando a 4.000 rpm por 10 minutos; descartar o sobrenadante e ressuspender o precipitado em um meio líquido adequado; arrefecer a suspensão durante 5 minutos a 3 °C, em seguida, 3 durante 30 minutos a -20 a 86 °C e congelar; o descongelamento das amostras criopreservadas através da realização de uma inoculação de 10% v/v a partir da cultura mãe em meio nutriente adequado incubação durante 14 dias a 3000 lux com 14/12 horas de ciclo de luz e 3. Method according to claim 1, characterized by the fact that biological compositions are obtained by culturing crusted soil samples in a suitable sterile liquid medium; incubate the sample tubes using a photoperiod of 12 hours of light and 12 hours of darkness, at a temperature of 28 ° C; cultivate in an appropriate sterile solid medium and incubate the photoperiod of 12 h of light and 12 hours of darkness, at a temperature of 28 ° C and obtain isolated colonies; sequence of the isolated colonies obtained; cryopreserve by centrifuging 2 mL of culture from each isolated sample and characterizing at 4,000 rpm for 10 minutes; discard the supernatant and resuspend the precipitate in a suitable liquid medium; cool the suspension for 5 minutes to 3 ° C, then 3 for 30 minutes to -20 to 86 ° C and freeze; thawing of cryopreserved samples by performing a 10% v / v inoculation from the mother culture in an appropriate nutrient medium incubation for 14 days at 3000 lux with 14/12 hour light cycle and Petição 870190060703, de 28/06/2019, pág. 151/156Petition 870190060703, of 06/28/2019, p. 151/156 2/3 com agitação orbital constante a 120 rpm de velocidade; misturar as espécies de cianobactérias e / ou microalgas; Cultive até obter os volumes necessários e a densidade celular de 106 a 108 células por mL.2/3 with constant orbital agitation at 120 rpm speed; mixing cyanobacteria and / or microalgae species; Cultivate until necessary volumes and cell density of 10 6 to 10 8 cells per ml are obtained. 4. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o meio líquido estéril adequado para cultivar as amostras de crosta do solo poder ser selecionado entre meio BG11 ou MDM.Method according to any one of claims 1 to 3, characterized in that the sterile liquid medium suitable for cultivating soil crust samples can be selected from BG11 or MDM medium. 5. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o meio estéril sólido adequado é meio sólido BG11.Method according to any one of claims 1 to 3, characterized in that the suitable solid sterile medium is BG11 solid medium. 6. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o meio adequado para criopreservação ser seleccionado entre meio BG11 com 3% v/v dimetilsulfóxido e 5% v/v metanol ou em meio BG11 com 10% v/v glicerol.Method according to any one of claims 1 to 3, characterized in that the medium suitable for cryopreservation is selected from BG11 medium with 3% v / v dimethyl sulfoxide and 5% v / v methanol or in BG11 medium with 10% v / v glycerol. 7. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por os meios adequados para descongelar os frascos das amostras serem meio nutriente contendo N: P: K e oligoelementos Ca, Fe, Mg, Mn e S.Method according to any one of claims 1 to 3, characterized in that the appropriate means for defrosting the sample bottles are nutrient medium containing N: P: K and trace elements Ca, Fe, Mg, Mn and S. 8. Composição biológica como supressor de poeira proveniente de material particulado de cauda, caracterizado pelo fato de que compreende:8. Biological composition as a dust suppressant from tail particulate material, characterized by the fact that it comprises: - uma mistura de microorganismos obtidos dos depósitos KCTC13158BP e KCTC13159BP, em uma concentração entre 106 a 108 células por mL; e- a mixture of microorganisms obtained from the deposits KCTC13158BP and KCTC13159BP, in a concentration between 10 6 to 10 8 cells per mL; and - meio de cultivo.- culture medium. 9. Composição biológica, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada por os microrganismos serem selecionados a partir de cianobactérias, mais especificamente eles são selecionados a partir das espécies Leptolyngbya badia, 9. Biological composition according to claim 8, characterized in that the microorganisms are selected from cyanobacteria, more specifically they are selected from the species Leptolyngbya badia, Petição 870190060703, de 28/06/2019, pág. 152/156Petition 870190060703, of 06/28/2019, p. 152/156 3/33/3 Trichocoleus sociatus, Trichocoleus desertorum Leptolyngbya boryana, Leptolyngbya sp., ou combinações dos mesmos.Trichocoleus sociatus, Trichocoleus desertorum Leptolyngbya boryana, Leptolyngbya sp., Or combinations thereof. 10. Composição biológica, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que os microrganismos são selecionados a partir de microalgas do gênero Chlorella sp.10. Biological composition, according to claim 8, characterized by the fact that microorganisms are selected from microalgae of the genus Chlorella sp. 11. Composição biológica, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que o meio de cultura é selecionado de meio líquido estéril BG11, MDM, ou meio nutriente contendo N: P: K e oligoelementos Ca, Fe, Mg, Mn e S.11. Biological composition, according to claim 8, characterized by the fact that the culture medium is selected from sterile liquid medium BG11, MDM, or nutrient medium containing N: P: K and trace elements Ca, Fe, Mg, Mn and S. 12. Uso da composição biológica, caracterizada pelo fato de que é usada para suprimir a poeira em suspensão de material particulado dos rejeitos de mineração em geral, produzidos por atividades industriais, transporte e fontes naturais, como erosão eólica.12. Use of biological composition, characterized by the fact that it is used to suppress dust in suspension of particulate material from mining waste in general, produced by industrial activities, transportation and natural sources, such as wind erosion.
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