BR112017004934B1 - Composição farmacêutica para a prevenção ou tratamento de inflamação hepática, e uso de um conjugado de agonista duplo do receptor de glp-1/glucagon de ação prolongada - Google Patents

Abstract

USO DE UM AGONISTA DUAL RECEPTOR GLP-1/GLUCAGON PARA O TRATAMENTO DE DOENÇA DE FÍGADO GORDUROSO NÃO ALCOÓLICO. A presente invenção refere-se a uma composição farmacêutica para a prevenção ou tratamento de doença de fígado gorduroso não alcoólico incluindo um agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa, e um processo para prevenção ou tratamento de doença de fígado gorduroso não alcoólico incluindo administração da composição. A composição da presente invenção não tem o efeito colateral de ganho de peso ou reduz o efeito colateral de ganho de peso, que é um efeito colateral de agentes terapêuticos convencionais para doença de fígado gorduroso não alcoólico, e reduz a quantidade de administração de um agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa, assim aperfeiçoando grandemente conveniência de paciente. Em adição, o agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa da presente invenção aperfeiçoa sustentabilidade e estabilidade in vivo.

Description

Campo Técnico

[0001] A presente invenção refere-se a uma composição farma cêutica para a prevenção ou tratamento de doença de fígado gorduroso não alcoólico, incluindo um agonista dual receptor glucagon / peptí- deo-1 semelhante a glucagon (GLP-1) de longa atuação, e um processo para prevenção ou tratamento de doença de fígado gorduroso não alcoólico incluindo a administração de composição.

Antecedentes da Invenção

[0002] Doença de fígado gorduroso não alcoólico (NAFLD) é um tipo de uma doença, mostrando organização histológica similar àquela de doença de fígado alcoólica, embora não esteja associada com consumo de álcool, e é um tipo de síndrome metabólica associada com fígado gorduroso não alcoólico (NAFL), esteato hepatite não alcoólico (NASH), cirrose de fígado, e carcinomas hepatocelulares. A ocorrência de doenças de fígado gorduroso não alcoólico aumenta com um aumento em população com obesidade e diabetes. Na Coréia, a incidência anual atingiu aproximadamente 16%.

[0003] Doença de fígado gorduroso não alcoólico é conhecida por ser causada por várias etiologias tal como resistência à insulina, lipo- toxidez e respostas inflamatórias. Entre elas, a etiologia mais comum é resistência à insulina.

[0004] Muito esforço tem sido feito para aperfeiçoar a resistência à insulina para prevenir / tratar doença de fígado gorduroso não alcoólico. Por exemplo, presentemente experimentos clínicos para tiazoli- dinodinonas (TZD) ou metformina, um tipo de sensibilizador de insuli- na, têm sido ativamente conduzidos (ver, Hepatology (2003) 38: 100817, J Clin Invest (2001) 108: 1167-74).

[0005] Entretanto, no caso de tratamento com as drogas baseadas em TZD, existem desvantagens de um grande ganho de peso e lento fluxo de fluido, e assim o uso de tal tratamento é conhecido ser impossível para pacientes com doença de coração. Em adição às drogas baseadas em TZD, testes clínicos usando agonistas de receptor GLP-1 como Victoza ou Byetta para doença de fígado gorduroso não alcoólico têm sido ativamente conduzidos. Entretanto, nestes casos, a meia via in vivo é extremamente curta, e assim repetidas administrações têm de ser feitas uma ou pelo menos duas vezes por dia, como outros hormônios polipeptídeos. Por isso, há uma desvantagem devido a inconveniência para pacientes. Tais administrações frequentes causam grande dor e desconforto para pacientes. Ou seja, uso simples de agentes terapêuticos genéricos para diabetes como um agente terapêutico para doença de fígado gorduroso não alcoólico, através de mecanismo de aperfeiçoamento de resistência a insulina tem desvantagens tais como vários efeitos colaterais ou inconveniência de paciente. Devido a estes fatores, quando um fármaco conhecido ser efetivo no tratamento de di-abetes, tal como um fármaco para aperfeiçoamento de resistência a insulina, é diretamente usado como um agente terapêutico para doença de fígado gorduroso não alcoólico, vários fatores que podem resultar em problemas tais como efeitos colaterais são conhecidos na técnica. Portanto, se um fármaco conhecido ser eficaz no tratamento de diabetes, tal como um fármaco para aperfeiçoamento de resistência a insulina, pode definitivamente ser usado como um agente terapêutico para doença de fígado gorduroso não alcoólico, é controverso. Assim, ainda permanece uma necessidade de desenvolvimento de drogas capazes de tratar doença de fígado gorduroso não alcoólico enquanto assegurando conveniência de paciente sem efeitos colaterais.

Divulgação da Invenção Problema Técnico

[0006] Os presentes inventores fizeram muitos esforços para de senvolver um fármaco para a prevenção ou tratamento de doença de fígado gorduroso não alcoólico, que maximiza aquiescência de paciente enquanto aumentando a meia vida sem efeitos colaterais tal como ganho de peso de corpo. Como um resultado, os inventores descobriram que a meia vida in vivo de um agonista dual receptor glucagon / GLP-1 de longa atuação ligado ao fragmento Fc é grandemente aperfeiçoada e também tem um resultado efetivo de perda de peso, e ainda triglicerídeo de fígado e colesterol no sangue são diminuídos. A presente invenção foi completada nas bases de tal descoberta.

Solução Para Problema

[0007] Um objetivo da presente invenção é prover uma composi ção farmacêutica para a prevenção ou tratamento de doença de fígado gorduroso não alcoólico incluindo um agonista dual receptor glucagon / peptídeo-1 semelhante a glucagon (GLP-1).

[0008] Um outro objeto da presente invenção é prover um proces so para prevenção ou tratamento de doença de fígado gorduroso não alcoólico incluindo administração de composição a um sujeito suspeito de, ou tendo, a doença de fígado não alcoólico.

Efeitos Vantajosos da Invenção

[0009] O agonista dual receptor GLP-1/ glucagon de longa atuação de acordo com a presente invenção pode ampliar as escolhas de pacientes através de expansão de categoria de drogas que até agora foram aplicáveis para a doença de fígado gorduroso não alcoólico, e aumentar conveniência de paciente através de aumento significante de meia vida em sangue. Ainda, a presente invenção provê uma nova alternativa que pode ser aplicada sem perigo para pacientes com outras doenças que não doença de fígado gorduroso não alcoólico através de redução de efeitos colaterais como ganho de peso.

Breve Descrição de Desenhos

[0010] A Fig. 1 é um gráfico mostrando mudanças em peso de corpo e peso de fígado do agonista dual receptor GLP-1/ glucagon de longa atuação no modelo de camundongo ob/ob de absorção de alimento de alto teor de gordura trans contendo colesterol e frutose, de alto teor de gordura.

[0011] A Fig. 2 é um gráfico mostrando os resultados de medição de colágeno-1a, TNF-alfa, SREBP-1c mRNA do agonista dual receptor glucagon / GLP-1 de longa atuação no modelo de camundongo ob/ob de absorção de alimento de alto teor de gordura trans contendo colesterol e frutose, de alto teor de gordura.

[0012] A Fig. 3 é um gráfico mostrando a redução do teor de trigli- cerídeo de fígado e colesterol no sangue do agonista dual receptor de glucagon/GLP-1 de longa atuação no modelo de camundongo D10 de absorção de alimentação de alto teor de gordura trans.

Melhor Modo Para Modalidade da Invenção

[0013] De modo a alcançar os objetivos, um aspecto da presente invenção provê uma composição farmacêutica para prevenção ou tratamento de doença de fígado gorduroso não alcoólico compreendendo um agonista dual receptor glucagon / peptídeo-1 semelhante a glucagon (GLP-1) de longa atuação.

[0014] O agonista dual receptor GLP-1/ glucagon de longa atua ção pode ser um agonista dual receptor e glucagon / GLP-1 de longa atuação que está em uma forma conjugada, onde um material ou veículo biocompatível capaz de aumentar a duração da atividade do ago- nista dual está ligado ao agonista através de uma ligação covalente ou um ligante.

[0015] No caso de tratamento com fármacos baseados em TZD, que são fármacos para aperfeiçoamento de resposta de insulina que é um mecanismo para aperfeiçoamento de resistência a insulina, e agentes terapêuticos convencionais de doença de fígado gorduroso não alcoólico, existem desvantagens em que não foi possível o tratamento ser aplicado a pacientes com doenças do coração devido a efeitos colaterais tal como grande ganho de peso e diminuição de fluxo de fluido. No caso de fármacos proteínas como hormônio peptídeo, existem desvantagens em que a meia vida in vivo é curta e assim repetida administração é necessária. Os presentes inventores verificaram que o agonista dual receptor GLP-1/ glucagon de longa atuação tanto não tem efeitos colaterais de ganho de peso ou reduz o efeito colateral de ganho de peso em vários modelos animais de doença de fígado não alcoólico e que o agonista dual receptor GLP-1/ glucagon de longa atuação pode tratar doença de fígado gorduroso não alcoólico em uma forma na qual sustentabilidade no sangue é dramaticamente aumentada. Da mesma maneira, a presente invenção foi completada para prover o uso do agonista dual receptor GLP-1/ glucagon de longa atuação para a prevenção ou tratamento de doença de fígado gorduroso não alcoólico.

[0016] A composição da presente invenção é caracterizada tanto por não ter efeito colateral de ganho de peso ou redução de efeito colateral de ganho de peso.

[0017] Além disso, a composição da presente invenção pode pre venir ou tratar doença de fígado gorduroso não alcoólico através de modalidade de pelo menos uma das seguintes funções: (a) redução de expressão ou atividade de colágeno-1a, que é um marcador de fibrose; (b) redução de expressão ou atividade de fator-α de necrose de tumor (TNF-α), que é um marcador pró-inflamatório; (c) redução de expressão ou atividade de proteína-1c de ligação de elemento regulador d esterol (SREBP-1c), que é um marcador de lipogênese; (d) redução de triglicerídeos de fígado; e (e) redução de colesterol no sangue.

[0018] Em uma modalidade da presente invenção, o agonista dual receptor GLP-1/ glucagon de longa atuação da presente invenção foi administrado a vários modelos animais de doença de fígado gorduroso não alcoólico. Como um resultado, foi confirmado que o peso de corpo e peso de fígado foram significantemente diminuídos comparados àqueles de um grupo não tratado (Fig. 1) e que não houve nenhum efeito colateral tal como ganho de peso como no uso de um agente terapêutico convencional. Além disso, foi confirmado que a expressão de colágeno-1a, TNF-α, SREBP-1c diminuiu acentuadamente comparada àquela do grupo não tratado, assim prevenindo fibrose, isto é, fibrose hepática, inibição de inflamação, e inibindo inibição de acumulação de gordura (Fig. 2). Por isso, foi confirmado que o agonista dual receptor GLP-1/ glucagon de longa atuação da presente invenção pode ser usado como um fármaco para a prevenção e tratamento de várias doenças de fígado não alcoólico. Em adição, foi confirmado que triglicerídeos do fígado e colesterol do sangue foram significantemente reduzidos comparados àqueles do grupo não tratado e que eles foram significantemente reduzidos para um nível animal normal (Fig. 3). Por isso, foi confirmado que o agonista dual receptor GLP-1/ glucagon de longa atuação da presente invenção pode ser usado como um excelente fármaco para a prevenção e tratamento de várias doenças de fígado não alcoólico.

[0019] Como aqui usado, o termo “agonista dual receptor GLP-1/ glucagon” pode ser usado intercambiavelmente com um “agonista dual glucagon / GLP-1”. O agonista dual receptor GLP-1/ glucagon inclui todos os peptídeos, ou seus fragmentos, precursores, derivados ou variantes que têm uma atividade dual glucagon / GLP-1, como oxinto- modulina, um agonista dual receptor GLP-1/ glucagon nativo, e também materiais que podem ativar o receptor glucagon e GLP-1 ao mesmo tempo, mas não são limitados aos mesmos. Na presente in- venção, o agonista de receptor GLP-1/ glucagon pode ser um agonista dual - dual de receptor aplicando a técnica de longa duração para superar a meia vida curta, e preferivelmente um agonista dual de receptor de longa atuação que pode ser administrado uma vez por semana, mas não está limitado ao mesmo. Específicos exemplos do agonista dual de receptor de glucagon; GLP-1 de acordo com a presente invenção podem parcialmente incluir, por exemplo, o agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon, um derivado do mesmo, e um seu tipo de longa duração como descrito nas publicações de pedido de patente Coreano Nos. 10-2012-0137271 e 10-2012-0139579, cujos inteiros conteúdos são aqui incorporados por referência.

[0020] Em uma modalidade da presente invenção, o agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de longa atuação pode estar em uma conjugada, onde um material ou um veículo biocompatível está ligado ao agonista através de uma ligação covalente ou um ligante. Em uma outra modalidade, tal tipo de longa atuação pode estar em uma forma, onde um material ou um veículo biocompatível pode ser diretamente ligado ao agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon através de uma ligação covalente através de uma conhecida técnica de recombinação genética. O tipo de longa atuação do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon mencionado pode aperfeiçoar a meia vida ou biodisponibili- dade comparado a uma forma na qual a sequência do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon não é o tipo de longa atuação, mas de outro modo é o mesmo. De acordo com uma modalidade da presente invenção, como um exemplo do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de longa atuação, uma composição na qual a região Fc de imu- noglobulina está ligada ao 30o aminoácido do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon pelo ligante polímero não peptídeo, preferivelmente PEG, pode ser usado, mas não está limitado ao mesmo.

[0021] Como aqui usado, o termo “material biocompatível” ou “veí- culo” se refere a materiais que podem aumentar a duração da atividade do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon quando o material biocompatível e o veículo são ligados covalentemente ou não covalen- temente ao agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon da presente invenção diretamente ou indiretamente para formar um conjugado. Por exemplo, quando formando um conjugado, um material que pode au-mentar a meia vida in vivo do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon pode ser um material ou veículo biocompatível de acordo com a presente invenção. O tipo do material ou veículo biocompatível que pode ser usado para aumentar a meia vida varia, e seus exemplos podem incluir polietileno glicol, ácido graxo, colesterol, albumina e um seu fragmento, uma substância de ligação de albumina, um polímero de unidades de repetição de uma específica sequência de aminoáci- dos, um anticorpo, um fragmento de anticorpo, um material de ligação de receptor neonatal Fc (FcRn), um tecido conjuntivo in vivo, um nu- cleotídeo, fibronectina, transferrina, um sacarídeo, um polímero, , etc. É claro, os carreadores ou materiais biocompatíveis incluem um material biocompatível que estende a meia vida in vivo através de uma ligação covalente ou não covalente.

[0022] Na presente invenção, os processos nos quais o material ou o veículo biocompatível é ligado ao agonista dual de receptor GLP- 1/ glucagon incluem um processo de recombinação genética e uma ligação in vitro usando polímeros ou compostos químicos de baixo peso molecular, mas não são limitados aos mesmos. O material de ligação FcRn pode ser uma região Fc de imunoglobulina. Por exemplo, quando polietileno glicol é usado como o veículo, ali pode ser incluída uma técnica Recode por Ambrx Inc., que pode ligar em posição específica a polietileno glicol. Os processos podem incluir uma técnica de glicopegilação através de Neose company que pode especificamente se ligar à metade glicosilada. Além disso, os processos podem incluir uma técnica de PEG liberável na qual polietileno glicol é removido, mas não é limitada à mesma. Os processos podem incluir técnicas que podem aumentar a biodisponibilidade, usando PEG. Em adição, polímeros tais como polietileno glicol, polipropileno glicol, copolímero de propileno glicol - etileno glicol, poliol polióxi etilado, álcool polivinílico, polissacarídeos, dextrano, poli vinil etil éter, polímero biodegradável, polímero lipídeo, quitinas, ou ácido hialurônico podem ser incluídos.

[0023] Quando albumina é usada como um veículo, os processos podem incluir uma tecnologia na qual albuminas ou fragmentos de albuminas podem ser diretamente ligados covalentemente a peptídeos do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon para aumentar a estabilidade in vivo. Mesmo se albumina não é diretamente ligada, ali pode ser incluída uma técnica na qual os materiais de ligação de albumina, por exemplo, anticorpo de ligação específica de albumina ou um fragmento de anticorpo são ligados aos peptídeos para ligação à albumina, e uma técnica na qual um certo peptídeo / proteína tendo uma afinidade para albumina é ligado aos peptídeos. Em adição, os processos podem incluir uma técnica na qual um ácido graxo, etc., tendo uma afinidade de ligação para albumina é ligado aos peptídeos, mas não limitado aos mesmos. Qualquer técnica ou processo de ligação que possa aumentar a estabilidade in vivo usando albumina pode ser aqui incluído.

[0024] A técnica para ligação ao peptídeo através de uso de anti corpo ou fragmento de anticorpo como um veículo para aumentar a meia vida in vivo também pode ser incluída na presente invenção. O anticorpo ou fragmento de anticorpo tendo um sítio de ligação FcRn pode ser usado, e qualquer fragmento de anticorpo não contendo sítio de ligação FcRn tal como Fab pode ser usado. Técnica de anticorpo - CovX de CovX company usando um anticorpo catalítico pode ser aqui incluída, e a técnica que aumenta a meia vida in vivo usando fragmentos Fc pode ser incluída na presente invenção. Quando usando o fra- gmento Fc, liganteo ligante ligando ao fragmento Fc e o peptídeo e seu processo de ligação podem incluir uma ligação peptídica ou um polietileno glicol ou semelhante, mas não está limitado ao mesmo e qualquer processo de ligação química pode ser aplicável. Em adição, a razão de ligação do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon da presente invenção pode ser 1:1 ou 1:2, mas não é limitada à mesma, e qualquer razão que possa aumentar a meia vida in vivo pode ser incluída sem limitação.

[0025] Ainda, o veículo que é usado para aumentar a meia vida in vivo pode ser um material não peptidila tal como um polissacarídeo ou um ácido graxo.

[0026] O ligante ligando ao veículo que é usado para aumentar a meia vida in vivo pode incluir peptídeos, polietileno glicóis, ácidos gra- xos, açúcares, polímeros, compostos de baixo peso molecular, nucleo- tídeos, e uma combinação dos mesmos. E pode ser qualquer ligação química tal como uma ligação química não covalente, uma ligação química covalente, etc., sem limitação.

[0027] A formulação que pode aumentar a biodisponibilidade ou manter continuamente a atividade pode incluir uma formulação de liberação sustentada através de micropartículas, nanopartículas, e semelhantes usando PLGA, ácido hialurônico, quitosano, etc.

[0028] Além disso, a formulação de diferentes aspectos que pode aumentar a biodisponibilidade ou manter continuamente a atividade pode ser uma formulação tal como implantes, inalantes, formulações transnasais ou emplastros.

[0029] Em uma modalidade exemplar da invenção, exemplos do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon podem incluir o agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon nativo tal como oxintomodulina e seus derivados, a sua formulação de longa atuação, e semelhantes também podem ser incluídos.

[0030] Como aqui usado, o termo “oxintomodulina” significa um pep- tídeo derivado de um precursor de glucagon, pré-glucagon, e inclui uma oxintomodulina nativa, seus precursores, derivados, fragmentos e variantes. Preferivelmente, ele pode ter a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO. 1(HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIA).

[0031] O termo “variante de oxintomodulina” é um peptídeo tendo uma ou mais sequências de aminoácidos diferentes daquelas de oxin- tomodulina nativa, e significa um peptídeo que retém a função de ativação de receptores de glucagon e GLP-1, e ele pode ser preparado através de qualquer uma de substituição, adição, supressão, e modificação ou através de uma combinação dos mesmos em uma parte das sequências de aminoácidos da oxintomodulina nativa.

[0032] O termo “derivado de oxintomodulina” inclui peptídeos, de rivados de peptídeos ou miméticos de peptídeos que são preparados através de adição, supressão, ou substituição de aminoácidos de oxin- tomodulina de modo a ativar ambos o receptor de GLP-1 e o receptor de glucagon em alto nível, comparado à oxintomodulina nativa. Preferivelmente, o derivado de oxintomodulina tem uma sequência de ami- noácidos de SEQ ID NO. 25 e mais preferivelmente, seus 16o e 20o aminoácidos formam um anel.

[0033] O termo “fragmento de oxintomodulina” significa um frag mento tendo um ou mais aminoácidos adicionados ou suprimidos no terminus-N ou o terminus-C da oxintomodulina nativa, no qual aminoá- cidos não ocorrendo naturalmente (por exemplo, aminoácido tipo-D) podem ser adicionados, e têm uma função de ativação de ambos o receptor de GLP-1 e o receptor de glucagon.

[0034] Cada um dos processos de preparação para as variantes, derivados, e fragmentos de oxintomodulina pode ser usado individualmente ou em combinação. Por exemplo, a presente invenção inclui um peptídeo que tem um ou mais aminoácidos diferentes daqueles de peptídeonativo e desaminação do resíduo de aminoácido terminal-N, e tem uma função de ativação de ambos, o receptor de GLP-1 e o receptor de glucagon.

[0035] O terminal-C das variantes, derivados, e fragmentos de oxintomodulina da presente invenção pode ser amidado.

[0036] O material veículo que pode ser usado na presente inven ção pode ser selecionado do grupo consistindo em um anticorpo, uma região Fc de imunoglobulina, uma albumina, um ácido graxo, um carboidrato, um polímero tendo uma unidade de repetição de um peptí- deo, uma transferrina, e um PEG, e preferivelmente uma região Fc de imunoglobulina. Em uma modalidade exemplar da presente invenção, o agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de longa atuação está ligado a um veículo através do polímero não peptila como um ligante. Em mais uma modalidade exemplar, um veículo ligado a um polímero não peptila é um fragmento Fc de imunoglobulina.

[0037] Na presente invenção, o agonista dual de receptor GLP- 1/ glucagon é uma forma na qual o agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon está ligado a uma região Fc de imunoglobulina, e mostra a sustentabilidade e segurança. Ligação da região Fc de imunoglobu- lina e o agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon pode ser uma fusão em estrutura sem um ligante ou podem ser ligados usando um ligante polímero não peptídeo. Na presente invenção, a Fc de imu- noglobulina pode ser usada intercambiavelmente com fragmentos de imunoglobulina.

[0038] Como aqui usado, o termo “polímero não peptidila” se refe re a um polímero biocompatível incluindo pelo menos duas unidades de repetição ligadas uma à outra através de qualquer ligação covalente excluindo uma ligação peptídica. Na presente invenção, o polímero não peptidila pode ser usado intercambiavelmente com o ligante não peptidila.

[0039] O polímero não peptidila que pode ser usado na presente invenção pode ser selecionado do grupo consistindo em um polímero biodegradável tal como polietileno glicol, polipropileno glicol, coipolí- mero de etileno glicol - propileno glicol, poliol polioxietilado, álcool po- livinílico, polissacarídeo, dextrano, polivinil etil éter, ácido polilático (PLA) ou ácido polilático - glicólico (PLGA), um polímero lipídeo, quiti- na, ácido hialurônico, e uma combinação dos mesmos, e preferivelmente, o polímero biodegradável é polietileno glicol. Em adição, seus derivados conhecidos na técnica e derivados facilmente preparados através de um processo conhecido na técnica podem ser incluídos no escopo da presente invenção.

[0040] O ligante peptídeo que é usado na proteína de fusão obtida através de um processo de fusão em estrutura convencional tem uma desvantagem em que ele é facilmente clivado in vivo por uma protease, e assim um efeito suficiente de aumento de maia vida em soro do fármaco ativo por um veículo não pode ser obtido como esperado. Entretanto, na presente invenção, o polímero tendo resistência à protease pode ser usado para manter a meia vida em soro de um peptí- deo similarmente como o veículo. Por isso, qualquer polímero não peptila pode ser usado sem limitação, tanto quanto seja um polímero tendo a função mencionada, ou seja, um polímero tendo resistência para a protease in vivo. O polímero não peptidila tem um peso molecular na faixa de 1 a 100 kDa, e preferivelmente de 1 a 20 kDa. Ainda, o polímero não peptidila da presente invenção, ligado à região Fc de imunoglobulina, pode ser um polímero ou uma combinação de diferentes tipos de polímeros.

[0041] O polímero não peptidila usado na presente invenção tem um grupo reativo capaz de ligação à região Fc de imunoglobulina e fármaco proteína. O grupo reativo em ambas extremidades dos polí-meros não peptidila preferivelmente selecionadas do grupo consistindo em um grupo aldeído reativo, um propionaldeído, um grupo butiraldeí- do, um grupo maleimida, e um derivado de succinimida. O derivado de succinimida pode ser propionato de succinimidila, hidróxi succinimidila, carbóxi metil succinimidila, ou carbonato de succinimidila. Em particular, quando o polímero não peptidila tem um grupo reativo do grupo aldeído reativo em suas ambas extremidades, ele é efetivo para minimizar reações não específicas e ligam um polipeptídeo fisiologicamen- te ativo e uma imunoglobulina em ambas extremidades do polímero não peptidila. Um produto final produzido através de alquilação redutora através de uma ligação aldeído é muito mais estável do que ligado por uma ligação amida. O grupo reativo aldeído se liga seletivamente a um terminus-N em um baixo pH, e se liga a um resíduo lisina para formar uma ligação covalente em um alto pH, tal como pH 9,0. Os grupos reativos em ambas extremidades do polímero não peptidila podem ser idênticos ou diferentes uns dos outros. Por exemplo, o polímero não peptidila pode possuir um grupo maleimida em uma extremidade, e um grupo aldeído, um grupo propionaldeído, ou um grupo butiraldeí- do na outra extremidade. Quando um polietileno glicol tendo um grupo hidróxi reativo em ambas extremidades é usado como o polímero não peptidila, o grupo hidróxi pode ser ativado para vários grupos reativos através de reações químicas conhecidas, ou um polietileno glicol comercialmente disponível tendo um grupo reativo modificado pode ser usado para preparar o conjugado de agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa da presente invenção.

[0042] Em adição, a região Fc de imunoglobulina é vantajosa em termos da preparação, purificação, e rendimento do conjugado, porque não somente o peso molecular é relativamente pequeno comparado à molécula inteira, mas a homogeneidade dos materiais também é grandemente aumentada e o potencial de induzir antigenicidade no sangue é diminuído, porque as sequências de aminoácidos são diferentes em cada anticorpo, e assim a porção Fab mostrando uma alta não homogeneidade é removida.

[0043] Como aqui usado, o termo “região Fc de imunoglobulina” se refere à região 2 constante de cadeia pesada (CH2) e a região 3 de cadeia pesada (CH3) de uma imunoglobulina, excluindo as regiões variáveis das cadeias pesada e leve, a região 1 constante de cadeia pesada (CH1) e região 1 constante de cadeia leve (CL1) da imuno- globulina. Ela ainda pode incluir uma região de articulação da região constante de cadeia pesada. Também, a região Fc de imunoglobulina da presente invenção pode conter uma parte ou toda região Fc incluindo a região constante de cadeia pesada 1 (CH1) e/ou a região constante de cadeia leve 1 (CL1), exceto para as regiões variáveis das cadeias pesadas e leves da imunoglobulina, tanto quanto ela tenha um efeito substancialmente equivalente a ou melhor que a proteína nativa. Além disso, a região Fc de imunoglobulina pode ser um fragmento tendo uma supressão de uma porção relativamente longa da sequência de aminoácidos que corresponde a CH2 e/ou CH3. Ou seja, a região Fc de imunoglobulina da presente invenção pode compreender 1) um domínio CH1, um domínio CH2, um domínio CH3, e um domínio CH4, 2) um domínio CH1 e um domínio CH2, 3) um domínio CH1 e um domínio CH3, 4) um domínio CH2 e um domínio CH3, 5) uma combinação de um ou mais do domínios e uma região de articulação de imunoglobulina (ou uma porção da região de articulação), e 6) um dí- mero de cada domínio das regiões constantes de cadeia pesada e a região constante de cadeia leve.

[0044] Ainda, a região Fc de imunoglobulina da presente invenção inclui uma sequência aminoácidos nativa assim como um seu derivado (mutante) de sequência. Um derivado de sequência de aminoácidos tem uma sequência diferente devido a uma supressão, uma inserção, uma substituição conservativa ou não conservativa, ou uma combina- ção das mesmas de um ou mais resíduos de aminoácidos das se-quências de aminoácidos nativas. Por exemplo, em uma Fc de IgG, resíduos de aminoácidos em posições 214 a 238, 297 a 299, 318 a 322, ou 327 a 331, conhecidos serem importantes em ligação, podem ser usados como um alvo apropriado para modificação.

[0045] Ainda, vários tipos de derivados são possíveis, incluindo um no qual uma região capaz de formar uma ligação dissulfeto é suprimida, certos resíduos de aminoácidos são eliminados na extremidade termi- nal-N de uma Fc nativa, um resíduo metionina é adicionado à extremidade terminal-N de uma Fc nativa, etc. Ainda, para remoção de funções efetoras, um sítio de ligação de complemento, tal como um sítio de ligação Clq, e um sítio de citotoxidez mediada por célula dependente de anticorpo (ADCC) podem ser suprimidos. Técnicas de preparação de tais derivados de sequência da região Fc de imunoglobulina são mostradas nas publicações internacionais Nos. WO 97/34631, WO 96/96/32478, etc. Trocas de aminoácidos em proteínas e peptídeos, que não alteram inteiramente a atividade das moléculas, são conhecidas na técnica (H. Neurath, R. L. Hill, The Proteins, Academic Press, New York, 1979). As mudanças ocorrendo mais comumente são Ala/Ser, Val/Ile, Asp/Glu, Thr/Ser, Ala/Gly, Ala/Thr, Ser/Asn, Ala/Val, Ser/Gly, Thy/Phe, Ala/Pro, Lys/Arg, Asp/Asn, Leu/Ile, Leu/Val, Ala/Glu, e Asp/Gly, em ambas direções. Em adição, a região Fc, se desejado, pode ser modificada por fosforilação, sulfatação, acrilação, glicosilação, metilação, farnesilação, acetilação, amidação, e semelhantes.

[0046] Os derivados de Fc são derivados que têm uma atividade biológica idêntica à região Fc da presente invenção, com aperfeiçoada estabilidade estrutural da região Fc, por exemplo, contra calor, pH ou semelhantes.

[0047] Além disso, estas regiões Fc podem ser obtidas de formas nativas isoladas de humanos e outros animais incluindo vacas, cabras, porcos, camundongos, coelhos, hamsters, ratos, porquinhos da Índia, etc., ou podem ser seus recombinantes ou derivados, obtidos de célula de animal transformado ou microorganismos. Aqui, elas podem ser obtidas de uma forma nativa através de isolamento de imunoglobulina integral a partir de organismos humanos ou animais e então tratando as mesmas com uma protease. Quando papaína é tratada, papaína digere a imunoglobulina nativa em regiões Fab e Fc, e quando pepsina é tratada, a imunoglobulina nativa é cortada em pFc e F(ab)2. Fc ou pFc podem ser isoladas por cromatografia de exclusão de tamanho, etc. Preferivelmente, uma região Fc derivada humana é uma região Fc de imunoglobulina recombinante que é obtida de um microorganismo.

[0048] Em adição, a região Fc de imunoglobulina pode estar na forma de tendo cadeias de açúcar nativas, ou cadeias de açúcar au-mentadas ou diminuídas comparada a uma forma nativa, ou pode estar em uma forma deglicosilada. O aumento, diminuição, ou remoção das cadeias de açúcar de Fc de imunoglobulina pode ser obtido através de processos conhecidos na técnica, tal como um processo químico, um processo enzimático e um processo de engenharia genética usando um microorganismo. A remoção de cadeias de açúcar de uma região Fc resulta em uma acentuada diminuição em atividade ligante da parte C1q e uma diminuição ou perda em citotoxidez mediada por célula dependente de anticorpo ou citotoxidez dependente de complemento, pelo que não induzindo respostas imunes desnecessárias in vivo. Neste sentido, uma região Fc de imunoglobulina em uma forma deglicosilada ou aglicosilada pode ser mais apropriada para o objetivo da presente invenção como um veículo de fármaco.

[0049] Como aqui usado, o termo “deglicosilação” se refere a re- moçao enzimática de metades açúcar de uma região Fc, e o termo “aglicosilação” se refere a uma região Fc que é produzida em um procariota, preferivelmente E. coli, e não é aglicosilada.

[0050] Enquanto isso, a região Fc de imunoglobulina pode ser de rivada de humanos ou outros animais incluindo vacas, cabras, porcos, camundongos, coelhos, hamsters, ratos, porquinhos da Índia, etc., e preferivelmente de humanos.

[0051] Também, a região Fc de imunoglobulina pode ser uma re gião Fc que é derivada de IgG, IgA, IgD, IgE e IgM, uma combinação das mesmas, ou seus híbridos. Preferivelmente, ela é derivada de IgG ou IgM que são as mais abundantes em sangue humano, e mais preferivelmente de IgG, que é conhecida aperfeiçoar as meias vidas de proteínas de ligação de ligante, mas não está limitada à mesma.

[0052] Como aqui usado, o termo “combinação” se refere àqueles polipeptídeos codificando regiões Fc de imunoglobulina de cadeia simples da mesma origem que são ligados a um polipeptídeo de cadeia simples de uma diferente região para formar um dímero ou multímero. Ou seja, um dímero ou multímero pode ser formado a partir de dois ou mais fragmentos selecionados do grupo consistindo em fragmentos de Fc de IgG, Fc de IgA, Fc de IgM, e fragmentos de Fc de IgE.

[0053] Como aqui usado, o termo “híbrido” se refere a uma se quência correspondendo a pelo menos dois fragmentos Fc de uma origem diferente que está presente em uma região Fc de imunoglobu- lina de cadeia simples. Na presente invenção, vários tipos de híbridos são possíveis. Ou seja, o hibrido consistindo em 1 a 4 domínios selecionados do grupo consistindo em CH1, CH2, CH3, e CH4 de Fc de IgG, Fc de IgM, Fc de IgA, Fc de IgE e Fc de IgD é possível, e pode incluir uma articulação.

[0054] Por outro lado, IgG também pode ser classificada em sub classes IgG1, IgG2, IgG3, e IgG4, e na presente invenção, uma combinação ou hibrização das mesmas é possível. Ela é preferivelmente subclasses IgG2 e IgG4, e mais preferivelmente é uma região Fc de IgG4 que substancialmente não tem uma função efetora tal como uma citotoxidez dependente de complemento (CDC).

[0055] Ou seja, a região Fc de imunoglobulina para o veículo do fármaco da presente invenção pode ser, por exemplo, região Fc agli- cosilada derivada de IgG4, mas não está limitada à mesma. A região Fc derivada de humano é preferida sobre região Fc derivada de não humano que pode causar indesejáveis respostas imunes, por exemplo, que pode atuar como um antígeno no corpo humano para produzir um novo anticorpo.

[0056] O processo para preparação de um agonista dual de recep tor GLP-1/ glucagon de longa atuação da presente invenção não é particularmente limitado. Por exemplo, detalhes do processo de preparação e seus efeitos são descritos, por exemplo, na publicação de pedido de patente Coreano No. 10-2012-0139579.

[0057] Uso de agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atua ção longa tem grandes vantagens daquelas do número de administrações a um paciente crônico que precisa diariamente de administração pode ser dramaticamente reduzido devido a um aumento na meia vida em soro e sustentabilidade in vivo, pelo que aperfeiçoando a qualidade de vida do paciente. Por isso, isto é muito útil no tratamento de doença de fígado gorduroso não alcoólico.

[0058] Como aqui usado, o termo “doença de fígado gorduroso não alcoólico” se refere a casos de fígado gorduroso onde não há história de consumo de álcool ou onde consumo de álcool não está relacionado à ocorrência. O fígado gorduroso se refere a um fenômeno no qual existe anormal acumulação de triglicerídeo em células de fígado, comparado a níveis normais de triglicerídeo. Cerca de 5% de fígado normal consistem em tecido de gordura e os componentes principais da gordura são triglicerídeos, ácidos graxos, fosfolipídeos, colesteróis, e ésteres de colesterol. Entretanto, uma vez ocorra o fígado gorduroso, maior parte dos componentes são substituídos com triglicerídeo. Se a quantidade de triglicerídeos é mais que 5% do peso de fígado, ele é diagnosticado como fígado gorduroso. O fígado gorduroso é causado por um distúrbio de metabolismo de lipídeo ou um defeito no processo de transporte de excessiva gordura nas células de fígado, e é causado principalmente por distúrbios de metabolismo de lipídeo no fígado. Maior parte da gordura acumulada no fígado gorduroso pode ser de triglicerídeos. A doença de fígado gorduroso não alcoólico inclui fígado gorduroso não alcoólico, esteato hepatite não alcoólica, cirrose, câncer de fígado, e semelhantes, mas a doença de fígado gorduroso não alcoólico pode ser prevenida ou tratada com a composição da presente invenção é incluída sem limitação.

[0059] Como aqui usado, o termo “prevenção” se refere a todas as ações através das quais a doença de fígado gorduroso não alcoólico é prevenida ou retardada através de administração da composição da presente invenção. O “tratamento” se refere a todas as ações através das quais os sintomas da doença de fígado gorduroso não alcoólico são aliviados, ou alterados positivamente. O tratamento da doença de fígado gorduroso não alcoólico é aplicável a qualquer mamífero que possa experimentar a doença de fígado gorduroso não alcoólico, e exemplos dos mesmos incluem não somente humanos e primatas, mas também gado tal como vaca, porco, cabra, cavalo, cão, e gato, sem limitação, mas é preferivelmente um humano.

[0060] Como aqui usado, o termo “administração” se refere a in trodução de uma quantidade de uma predeterminada substância a um paciente através de um processo apropriado. A composição da presente invenção pode ser administrada via qualquer uma das rotas comuns, tanto quanto ela seja capaz de atingir o tecido desejado. Por exemplo, ela pode ser administração intraperitoneal, intravenosa, ou intrarretal, mas não é limitada às mesmas. Entretanto, uma vez que peptídeos são digeridos com administração oral, ingredientes ativos de uma composição para administração oral devem ser revestidos ou formulados para proteção contra degradação no estômago. Preferi-velmente a composição pode ser administrada na forma de injeções. Em adição, a formulação de atuação longa pode ser administrada através de qualquer aparelhagem na qual um material ativo possa ser transportado em uma célula alvo.

[0061] A dose e frequência de administração da composição far macêutica da presente invenção são determinadas pelo tipo de ingrediente ativo junto com vários fatores como a doença a ser tratada, rota de administração, idade de paciente, gênero, e peso de corpo, e severidade de doença.

[0062] A composição farmacêutica da presente invenção ainda po de incluir um veículo, excipiente ou diluente farmaceuticamente aceitável. Como aqui usado, o termo “veículo farmaceuticamente aceitável” se refere a um veículo ou um diluente que não estimula o organismo e inibe atividade biológica ou características de um composto administrado. Para administração oral, o veículo pode incluir um ligante, um lubrificante, um desintegrante, um excipiente, um solubilizante, um agente dis- persante, um estabilizador, um agente de suspensão, um corante, e um agente aromatizante. Para preparações injetáveis, o veículo pode incluir um agente tamponante, um agente preservativo, um analgésico, um solubilizante, um agente isotônico, um estabilizador, etc. Para preparações para administração tópica, o veículo pode incluir uma base, um excipiente, um lubrificante, um agente preservativo, etc.

[0063] A composição da presente invenção pode ser formulada em uma variedade de formas de dosagem em combinação com os carre- adores farmaceuticamente aceitáveis mencionados anteriormente. Por exemplo, para administração oral, a composição farmacêutica pode ser formulada em comprimidos, trociscos, cápsulas, elixires, suspensões, xaropes ou wafers. Para preparações injetáveis, a composição farmacêutica pode ser formulada em uma ampola como uma forma de dosagem simples ou um recipiente de dosagens múltiplas. A composição farmacêutica também pode ser formulada em soluções, suspensões, comprimidos, pílulas, cápsulas e preparações de atuação longa.

[0064] Por outro lado, exemplos do veículo, o excipiente, e o di- luente apropriado para as formulações farmacêuticas incluem lacto-se, dextrose, sucrose, sorbitol, manitol, xilitol, eritritol, maltitol, amido, borracha acácia, alginato, gelatina, fosfato de cálcio, silicato de cálcio, celulose, metil celulose, celulose microcristalina, polivinil pir- rolidona, água, hidróxi benzoato de metila, hidróxi benzoato de pro-pila, talco, estearato de magnésio, e óleos minerais. Em adição, as formulações farmacêuticas ainda podem incluir materiais de enchi-mento, agentes anticoagulantes, lubrificantes, umectantes, aromati- zantes, e antissépticos.

[0065] Em um outro aspecto, a presente invenção provê um pro cesso para prevenção ou tratamento de uma doença de fígado não alcoólica, compreendendo uma etapa de administração de composição compreendendo o agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa a um sujeito, exclusive de humanos, em alto risco de, ou tendo, a doença de fígado não alcoólica.

[0066] A descrição da composição e doença de fígado gorduroso não alcoólico é a mesma como acima.

Modo Para a Invenção

[0067] A seguir, a presente invenção será descrita em mais deta lhes por meio de exemplos. Estes exemplos são somente pretendidos para ilustrarem a presente invenção, e o escopo da presente invenção não é construído como sendo limitado por estes exemplos.

Exemplo 1: Síntese de derivados de oxintomodulina

[0068] Nos exemplos, derivados de oxintomodulina tendo as se guintes sequências de aminoácidos foram sintetizados (Tabela 1). [Tabela 1] Oxintomodulina e derivados de oxintomodulina

[0069] Na Tabela 1, aminoácidos em negrito e sublinhados repre sentam formação de anel, e aminoácidos representados por X significam um aminoácido não nativo, ácido alfa metil glutâmico. Em adição, CA representa 4-imido acetila, e DA representa desamino histidila.

[0070] A seguir, um agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa representativo, isto é, o agonista dual de receptor GLP- 1/ glucagon de atuação longa no qual Fc está ligado ao 30th aminoáci- do do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon através do polímero não peptídica, PEG (polietilenoglicol), foi preparado e utilizado nos Exemplos 2 a 3 abaixo.

Exemplo 2: Confirmação dos efeitos do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa sobre doença de fígado gorduroso não alcoólico no modelo de camundongo ob/ob de absorção de alimentação de alto teor de gordura trans

[0071] De modo a confirmar os efeitos do agonista dual de recep tor GLP-1/ glucagon longa atuação sobre doença de fígado gorduroso não alcoólico, uma dieta de alto teor de gordura trans contendo alto teor de gordura (40% kcal), frutose (22%) e colesterol (2%) (dieta HTF) foi administrada a modelo de camundongo ob/ob por 8 semanas para preparar um modelo animal para doença de fígado gorduroso não alcoólico. Então, o agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa foi administrado subcutaneamente para os camundongos uma vez a cada dois dias (Q2D) com0,7 e 1,4 nmol/kg e a administração foi repetida por 4 semanas. O peso dos animais foi comparado àquele do grupo tratado com veículo durante o teste de 4 semanas. Após completar o teste de 4 semanas, mRNAs de, colágeno-1a que é um marcador de fibrose; TNF-α que é um marcador pró-inflamatório; e SREBP-1c que é um marcador de lipogênese foram confirmados.

[0072] Como um resultado, a medição do peso de corpo e o peso de fígado após a administração por 4 semanas mostrou que, no ago- nista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa, o peso foi significantemente reduzido como comparado àquele de grupo tratado com veículo (Fig. 1). Tais resultados sugerem que o agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa da presente invenção pode suprimir o ganho de peso que ocorre no modelo animal para doença de fígado gorduroso não alcoólico e que ele pode reduzir os efeitos colaterais de fármacos convencionais para aperfeiçoamento de resistência a insulina.

[0073] Ainda, para comparação de mRNA de colágeno-1a, TNF-α, SREBP-1c mostrou que no grupo tratado com agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa, estes mRNA foram significan- temente reduzidos (Fig. 2). Tais resultados sugerem que o agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa da presente invenção reduz fibrose, pró-inflamação e semelhantes no modelo animal para a doença de fígado gorduroso não alcoólico e inibe produção de gordura, assim sendo efetivo para a prevenção e tratamento de doença de fígado gorduroso não alcoólico. Exemplo 3: Confirmação dos efeitos do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa sobre doença de fígado gorduroso não alcoólico em modelo de camundongo DI0 de absorção de alimentação de alto teor de gordura trans

[0074] De modo a confirmar os efeitos do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa sobre a doença de fígado gorduroso não alcoólico, uma dieta de alto teor de gordura trans de 60% foi administrada para modelo de camundongo normal (C57BL/6) por 12 semanas para preparar um modelo animal para doença de fígado gorduroso não alcoólico. Então, 3 nmol/kg do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa foram administrados subcutaneamente para os camundongos uma vez por semana (QW) e a administração foi repetida por 4 semanas. Após término do teste de 4 semanas, triglicerí- deo hepático (TG hepático) e colesterol em soro foram medidos.

[0075] Como um resultado, a medição dos triglicerídeos hepáticos e colesterol de soro após administração por 4 semanas mostrou que, no caso de administração do agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa, eles foram significantemente reduzidos como comparados àqueles do grupo tratado com veículo e também que eles foram significantemente reduzidos para o nível de um animal normal que sofreu uma dieta de ração (Fig. 3).

[0076] Tais resultados sugerem que o agonista dual de receptor GLP-1/ glucagon de atuação longa da presente invenção pode reduzir os triglicerídeos hepáticos e colesterol no soro para níveis de animal normal no modelo animal para a doença de fígado gorduroso não alcoólico, assim sendo efetivo para a prevenção e tratamento de doença de fígado gorduroso não alcoólico.

[0077] A partir da descrição acima, aqueles versados na técnica apreciarão que a invenção pode ser realizada em outras formas específicas sem alteração de espírito técnico ou características essenciais. Neste sentido, as realizações descritas acima devem ser entendidas serem ilustrativas antes que restritivas em qualquer aspecto. O escopo da invenção deve ser construído de modo que o significado e escopo das reivindicações apostas antes que a descrição detalhada e todas as mudanças ou variações derivadas dos conceitos equivalentes caem dentro do escopo da presente invenção.

Claims (28)

1. Composição farmacêutica para a prevenção ou tratamento de inflamação hepática, caracterizada pelo fato de que compreende um conjugado de agonista duplo do receptor do peptídeo 1 semelhante a glucagon (GLP-1)/glucagon ação prolongada, em que o conjugado compreende: um agonista duplo do receptor de GLP-1/glucagon compreendendo a sequência de aminoácidos de qualquer uma das SEQ ID NOs: 2 a 34; uma região Fc de imunoglobulina; e um polímero não peptidila, em que o polímero não peptidila se liga de modo covalente ao agonista duplo do receptor de GLP- 1/glucagon e à região Fc de imunoglobulina.

2. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o agonista duplo do receptor de GLP- 1/glucagon de ação prolongada não tem efeito colateral de ganho de peso ou reduz o efeito colateral de ganho de peso.

3. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica-ção 1, caracterizada pelo fato de que reduz a expressão ou atividade do fator de necrose tumoral-α (TNF-α).

4. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica-ção 1, caracterizada pelo fato de que o agonista duplo do receptor de GLP-1/ glucagon de ação prolongada ativa simultaneamente o receptor de GLP-1 e o receptor de glucagon.

5. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica-ção 1, caracterizada pelo fato de que os aminoácidos nas posições 12 e 16 ou 16 e 20 do agonista duplo do receptor de GLP-1/glucagon de ação prolongada formam um anel.

6. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica-ção 5, caracterizada pelo fato de que o agonista duplo do receptor de GLP-1/glucagon de ação prolongada compreende a sequência de aminoácidos de qualquer uma das SEQ ID NO: 24 a 26.

7. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica-ção 1, caracterizada pelo fato de que o polímero não peptidila compreende polietilenoglicol, polipropilenoglicol, um copolímero de etilenogli- col-propilenoglicol, um poliol polioxietilado, álcool polivinílico, um polis- sacarídeo, éter polivinil etílico, um polímero biodegradável, um polímero lipídico, ácido hialurônico ou uma combinação dos mesmos.

8. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica-ção 7, caracterizada pelo fato de que o polímero não peptidila compreende polietilenoglicol.

9. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica-ção 7, caracterizada pelo fato de que o polissacarídeo compreende dextrano, uma quitina ou uma combinação dos mesmos.

10. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica-ção 1, caracterizada pelo fato de que a região Fc da imunoglobulina é aglicosilada.

11. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica-ção 1, caracterizada pelo fato de que a região Fc de imunoglobulina compreende um domínio CH1, domínio CH2, domínio CH3, domínio CH4 ou uma combinação dos mesmos.

12. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica-ção 11, caracterizada pelo fato de que a região Fc de imunoglobulina compreende ainda uma região de dobradiça.

13. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica-ção 1, caracterizada pelo fato de que a região Fc de imunoglobulina é derivada de IgG, IgA, IgD, IgE ou IgM.

14. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica-ção 13, caracterizada pelo fato de que a região Fc de imunoglobulina é um híbrido de domínios de IgG, IgA, IgD, IgE ou IgM.

15. Uso de um conjugado de agonista duplo do receptor do peptídeo 1 semelhante a glucagon (GLP-1)/glucagon de ação prolongada, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de um medicamento para a prevenção ou o tratamento de inflamação hepática, em que o conjugado compreende: um agonista duplo do receptor de GLP-1/glucagon compreendendo a sequência de aminoácidos de qualquer uma das SEQ ID NOs: 2 a 34; uma região Fc de imunoglobulina; e um polímero não peptidila, em que o polímero não peptidila se liga de modo covalente ao agonista duplo do receptor de GLP- 1/glucagon e à região Fc de imunoglobulina.

16. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que o agonista duplo do receptor de GLP-1/glucagon de ação prolongada não tem efeito colateral de ganho de peso ou reduz o efeito colateral de ganho de peso.

17. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que reduz a expressão ou atividade do fator de necrose tumoral-α (TNF-α).

18. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que o agonista duplo do receptor de GLP-1/ glucagon de ação prolongada ativa simultaneamente o receptor de GLP-1 e o receptor de glucagon.

19. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que os aminoácidos nas posições 12 e 16 ou 16 e 20 do agonista duplo do receptor de GLP-1/glucagon de ação prolongada formam um anel.

20. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que o agonista duplo do receptor de GLP-1/glucagon de ação prolongada compreende a sequência de aminoácidos de qual- quer uma das SEQ ID NO: 24 a 26.

21. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que o polímero não peptidila compreende polietilenoglicol, polipropilenoglicol, um copolímero de etilenoglicol-propilenoglicol, um poliol polioxietilado, álcool polivinílico, um polissacarídeo, éter polivinil etílico, um polímero biodegradável, um polímero lipídico, ácido hialurô- nico ou uma combinação dos mesmos.

22. Uso, de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que o polímero não peptidila compreende polietilenoglicol.

23. Uso, de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que o polissacarídeo compreende dextrano, uma quitina ou uma combinação dos mesmos.

24. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que a região Fc da imunoglobulina é aglicosilada.

25. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que a região Fc de imunoglobulina compreende um domínio CH1, domínio CH2, domínio CH3, domínio CH4 ou uma combinação dos mesmos.

26. Uso, de acordo com a reivindicação 25, caracterizado pelo fato de que a região Fc de imunoglobulina compreende ainda uma região de dobradiça.

27. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que a região Fc de imunoglobulina é derivada de IgG, IgA, IgD, IgE ou IgM.

28. Uso, de acordo com a reivindicação 27, caracterizado pelo fato de que a região Fc de imunoglobulina é um híbrido de domínios de IgG, IgA, IgD, IgE ou IgM.