BR112017002641B1 - Compostos bicíclicos substituídos, uso dos mesmos e composição farmacêutica - Google Patents

Abstract

COMPOSTOS BICÍCLICOS SUBSTITUÍDOS. São descritos compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), e (V): e/ou um sal do mesmo, em que R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2, e X1, X2, X3, R2, R2a, Ra, Rb, e Rc são definidos aqui. São também descritos méto-dos de uso de tais compostos como agonistas seletivos para receptor S1P1 de proteína G, e composições farmacêuticas compreendendo tais compostos. Estes compostos são úteis no tratamento, prevenção, ou retardo da progressão de doenças ou distúrbios em uma variedade de áreas terapêuticas, tais como doenças autoimunes e doença vascular.

Description

DESCRIÇÃO

[001] A presente invenção de modo geral se refere a compostos bicíclicos substituídos úteis como agonistas S1P1. São fornecidos aqui compostos bicíclicos substituídos, composições compreendendo tais compostos, e métodos de seu uso. A invenção também diz respeito a composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto de acordo com a invenção, que são úteis para o tratamento de condições relacionadas com modulação de S1P1, tais como doenças autoimunes e doença vascular.

[002] Esfingosina-1-fosfato (S1P) é um metabólito de lisofosfolipídeo zuiteriônico de esfingosina (Sph), que por sua vez é derivado de clivagem enzimática de ceramidas. Fosforilação enzimática de Sph por duas cinases (SphK1 e SphK2) leva à produção de S1P amplamente de eritrócitos, porém também de uma fonte resistente à radiação, possivelmente o endotélio linfático (Pappu, R. et al. Science 2007, 316, 295-298). Originalmente acreditado operar apenas como uma molécula de sinalização intracelular, S1P foi subsequentemente identificado como um ligante de alta afinidade para cinco membros da classe de gene de diferenciação do endotélio (EDG) de receptores acoplados à proteína G (GPCRs) denominados S1P1 or S1P1, S1P2 or S1P2, S1P3 or S1P3, S1P4 or S1P4, e S1P5 ou S1P5 (anteriormente chamados EDG-1, EDG-5, EDG-3, EDG-6, e EDG-8, respectivamente) (Chun, J. et al. Pharmacological Rev. 2010, 62, 579-587). A interação de S1P com os receptores de S1P desempenha um papel fisiológico fundamental em um grande número de processos incluindo proliferação celular, morfologia celular, invasão de célula de tumor, angiogênese, tumorigênese, redisposição citoesqueletal, desenvolvimento vascular, e tráfico de linfócito (Olivera, A; Rivera, J. Adv Exp Med Biol. 2011, 716, 123-142). Receptores S1P são, portanto, bons alvos para uma ampla variedade de aplicações terapêuticas, tais como inibição do crescimento de tumor, doença vascular, e doenças autoimunes.

[003] Entre os cinco receptores S1P, S1P1 tem uma distribuição difundida. É o membro predominante da famínia expresso em linfócitos e desempenha um importante papel em tráfico de linfócito. Interação de S1P com seu receptor S1P1 é requerida para a saída de células imunes dos órgãos linfoides (tais como timo e linfonodos) nos vasos linfáticos. Sub-regulação do receptor S1P1 (que pode ser realizada por tratamento com agonistas de S1P1 por meio de internalização de receptor) interrompe a migração de linfócito e direciona-se para vários tecidos. Isto resulta em sequestro dos linfócicos em órgãos linfáticos, desse modo, reduzindo o número de linfócitos circulantes que são capazes de migração para tecidos afetados. O desenvolvimento de um agente de modulação do receptor S1P1 que suprime a migração de linfócito para sítios alvos associados com processos inflamatórios autoimunes e aberrantes pode ser eficaz em diversos estados de doença autoimune e inflamatória.

[004] Os seguintes pedidos descreveram compostos como agonistas S1P1: WO 03/061567 (Publicação de Patente dos Estados Unidos No. 2005/0070506), WO 03/062248 (Patente dos Estados UnidosNo. 7.351.725), WO 03/062252 (Patente dos Estados UnidosNo. 7.479.504), WO 03/073986 (Patente dos Estados UnidosNo. 7.309.721), WO 03/105771, WO 05/058848, WO 05/000833, WO 05/082089 (Publicação de Patente dos Estados Unidos No. 2007/0203100), WO 06/047195, WO 06/100633, WO 06/115188, WO 06/131336, WO 2007/024922, WO 07/109330, WO 07/116866, WO 08/023783 (Publicação de Patente dos Estados Unidos No. 2008/0200535), WO 08/029370, WO 08/074820, WO 08/079382, WO 08/114157, WO 09/043889, WO 09/057079, e Patente dos Estados Unidos No. 6.069.143. Veja também Hale et al., J. Med. Chem., 47:6662 (2004).

[005] Neste contexto ainda permanece uma necessidade de compostos úteis como agonistas de S1P1 e ainda tendo seletividade sobre S1P3.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[006] A presente invenção fornece compostos bicíclicos substituídos, que são úteis como moduladores de atividade de S1P1, incluindo sais dos mesmos.

[007] A presente invenção também fornece composições farmacêuticas compreendendo um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; e um veículo farmaceuticamente aceitável.

[008] A presente invenção também fornece um método de tratamento de uma doença ou distúrbio associado com a atividade de receptor S1P1 acoplado à proteína G, o método compreendendo administrar a um paciente mamífero um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[009] A presente invenção também fornece processos e intermediários para preparar os compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou sais dos mesmos.

[010] A presente invenção também fornece um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso em terapia.

[011] A presente invenção também fornece o uso dos compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, para a fabricação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de condições relacionadas com o receptor S1P1, tais como doenças autoimunes e vasculares.

[012] Os compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e composições compreendendo os compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) podem ser usados em tratamento, prevenção, ou cura de várias condições relacionadas com S1P1. Composições farmacêuticas compreendendo estes compostos são úteis no tratamento, prevenção, ou retardo na progressão de doenças ou distúrbios em uma variedade de áreas terapêuticas, tais como doenças autoimunes e vasculares.

[013] Estes e outros aspectos da invenção serão mencionados em forma expandida à medida em que a descrição continua.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[014] O primeiro aspecto da presente invenção fornece pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V): ou um sal do mesmo, em que: R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; X1 é CH2 ou O; X2 é CH2 ou O; X3 é CH2 ou O, contanto que X2 seja O, apenas se ambos X1 e X3 forem cada um CH2; R2 é R2a ou R2b; = representa ou uma ligação simples a R2a ou uma ligação dupla a R2b; R2a é -(CH2)3-6CH3, -(CH2)1-4CH=CRxRx, -(CH2)1-4CH=CRx(CH2CH3), - CH=CH(CH2)1-3C(Rx)3, -CH=CH(CH2)1-3OCH3, -(CH2)1-3CH= CHCH =CRxRx, -CH=CH(CH2)1-3CH=CRxRx, -CH=CHRz, -(CH2)1-3Rz, -(CH2)1- 3O(CH2)0-3Rz, -(CH2)1-3S(CH2)0-3Rz, -CH2S(O)Rz, -CH2S(O)2Rz, -O(CH2)1- 2Rz, -O(CH2)1-2O(CH2)0-2Rz, -OC(O)Rz, -(CH2)1-4O(CH2)0-9C(Rx)3, -(CH2)1- 4O(CH2)0-9CF3, -(CH2)1-4CRxRxO(CH2)0-4C(Rx)3, -(CH2)1-3O(CH2)1- 4CH=CRx(CH2)0-3CH3, -(CH2)1-3O(CH2)1-4CH=CRxRx, -(CH2)1-3O(CH2)1- 4C(OH)RxRx, -(CH2)1-3O(CH2)1-4O(CH2)0-3CH3, -(CH2)1-3S(CH2)0-4C(Rx)3, -(CH2)0-3O(CH2)1-4S(CH2)0-3C(Rx)3, -(CH2)1-3S(CH2)1-4Si(CH3)3, -(CH2)1- 3S(O)(CH2)0-4C(Rx)3, -(CH2)1-3S(O)2(CH2)0-4C(Rx)3, -(CH2)1-5NRxRx, - O(CH2)1-7C(Rx)3, -O(CH2)1-4O(CH2)0-4C(Rx)3, -O(CH2)1-4CH=CRx(CH2)0- 3CH3, -O(CH2)1-4O(CH2)0-3C(Rx)3, -O(CH2)1-4O(CH2)1-3CH=CRxRx, - O(CH2)1-4O(CH2)1-3C ^ CRx, -C(O)(CH2)o-4C(Rx)3, -OC(O)(CH2)o-4C(Rx)3, -OC(O)CRxRx(CH2)0-4C(Rx)3, -OC(O)NRx(CH2)0-5C(Rx)3, - NRxC(O)NRx(CH2)0-5C(Rx)3, -C(CH3)=N-O(CH2)0-5C(Rx)3, -C(CH3)=N-O(CH2)1-2(fenila), -C(CH3)=N-O(CH2)1-2(fluorofenila), -C(CH3)=N-O(CH2)1-2(metoxifenila), fenila, ou piridinila; R2b é (i) um anel espiral de 6 membros tendo um átomo de oxigênio e substituído por zero ou 1 substituinte selecionado de -(CH2)3CH3; ou (ii) =N-O-(CH2)3CH3, =N-O-CH2CH(CH3)2, =N-OCH2CH2(fenila), ou =N-O- CH2CH2CH2(fenila); Ra é H ou -OH; cada Rb é independentemente H ou -CH3; cada Rc é independentemente H, Cl, I, ou -CH3; cada Rx é independentemente H ou -CH3; e Rz é fenila, imidazolila, pirazolila, piridinila, pirimidinila, pirazinila, quinolinila, tiofenila, tiazolila, oxetanila, C3-6 cicloalquila, adamantanila, ou tetra-hidropiranila, cada um substituído por zero a 4 substituintes independentemente selecionados de F, Cl, I, C1-4 alquila, -O(C1-3 alquila), -CF3, -OCF3, -(CH2)1-6OCH3, -CH2NRxRx, -C(O)NRxRx, - C(O)NRx(C1-4 alquila), e -CH2C(O)NRxRx; com a condição de que (i) se o referido composto tiver uma estrutura de Fórmula (I) e R2 for -(CH2)5CH3, então pelo menos um de Rb e Rc não seja H; e (ii) se o referido composto tiver uma estrutura de Fórmula (II) e X1, X2, e X3 forem cada um CH2, então R2a não seja -(CH2)5CH3.

[015] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou um sal do mesmo, em que R1 é - OH, e R2, R2a, X1, X2 X3, Ra, Rb, e Rc são definidos no primeiro aspecto. Os compostos desta modalidade têm estruturas de fórmulas (Ia), (IIa), (IIIa), (IVa), ou (Va):

[016] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou um sal do mesmo, em que R1 é - OP(O)(OH)2, e R2, R2a, X1, X2 X3, Ra, Rb, e Rc são definidos no primeiro aspecto. Os compostos desta modalidade tem estruturas de formulas

[017] Os compostos de fórmulas (Ia), (IIa), (IIIa), (IVa), e (Va) ou mesmos são úteis como pró-fármacos dos compostos correspondentes de fórmulas (Ib), (IIb), (IIIb), (IVb), e (Vb), ou sais dos mesmos. Os compostos de Fórmula (Ia), (IIa), (IIIa), (IVa), e (Va) são ativados in vivo através de fosforilação para fornecer os compostos fosforilados correspondentes. Os compostos fosforilados de Fórmula (Ib), (IIb), (IIIb), (IVb), e (Vb) ou sais dos mesmos são ativos como agonistas seletivos de S1P1.

[018] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V), em que os referidos compostos têm a estrutura de Fórmula (Ic), (IIc), (IIIc), (IVc), ou (Vc):

[019] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V), ou um sal do mesmo, em que R2a é -(CH2)3CH3, -(CH2)5-6CH3, -CH2CH=CHCH2CH3, - CH2CH2CH=CHCH2CH3, -(CH2)3CH=CHCH3, -(CH2)3CH=C(CH3)2, - (CH2)4CH=CH2, -(CH2)4CH=CHCH3, -CH=CH(CH2)3CH3, - CH=CH(CH2)3OCH3, -CH=CHCH2CH2CH(CH3)2, - CH=CHCH2CH2CH2OCH3, -CH2CH=CHCH=CHCH3, - CH=CHCH2CH2CH=CH2, -CH=CH(fenila) em que a referida fenila é substituída por -CH3 ou -OCH3; -CH=CH(tetra-hidropiranila), -(CH2)1-3 (fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 2 substituintes independentemente selecionados de F, I, -CH3, -OCH3, -OCH2CH3, - OCH(CH3)2, e -CH2C(O)N(CH3)2; -(CH2)2(metil imidazolila), -(CH2)2(metil pirazolila), -(CH2)1-2(piridinila) em que a referida piridinila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de -OCH3; -(CH2)2(pirimidinila), - (CH2)2(quinolinila), -(CH2)2-3(tetra-hidropiranila), -CH2O(CH2)3-4CH3, - CH2OCH2CH2CH(CH3)2, -CH2OCH2CH2C(CH3)3, -CH2O(CH2)9CH3, - CH2OCH2CH2CH2CF3, -CH2OCH2CH=CHCH2CH3, - CH2OCH2CH=C(CH3)2, -CH2OCH2CH=CHCH2CH2CH3, - CH2OCH2CH2CH=CH2, -CH2OCH2CH2CH2CH=CH2, - CH2OCH2CH2CH=C(CH3)2, -CH2OCH2CH2CH(OH)CH3, - CH2OCH2CH2CH2CH2OH, -CH2OCH2CH2CH2C(CH3)2(OH), - CH2OCH2CH2OCH3, -CH2OCH2CH2CH2OCH3, - CH2OCH2CH2OCH2CH2CH3, -CH2O(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 3 substituintes independentemente selecionados de F, Cl, -CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -OCH3, -OCF3, -(CH2)1-6OCH3, - C(O)N(CH3)2, -CH2N(CH3)2, -C(O)N(CH2CH3)(CH3), - C(O)N(CH3)(CH2CH2CH2CH3), e -C(O)N(CH3)(CH2CH(CH3)2); - CH2O(metóxi piridinila), -CH2O(tetra-hidropiranila), - CH2O(trifluorometila, metil pirazolila), -CH2OCH2(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de - CH3 e -OCH3; -CH2OCH2(metil pirazolila), -CH2OCH2(tetra- hidropiranila), -CH2OCH2(tiofenila), -CH2OCH2(trifluorometil tiofenila), - CH2OCH2(etil tiofenila), -CH2OCH2(dimetil tiofenila), -CH2CH2OCH2CH3, -CH2CH2OCH2CH(CH3)2, -CH2CH2O(metoxifenila), - CH2CH2OCH2(ciclopropila), -CH2CH2SCH(CH3)2, -(CH2)3OCH2CH3, - (CH2)3OCH(CH3)2, -(CH2)3OCH2CH2CH=CH2, -(CH2)3O(oxetanila), - (CH2)3O(tetrametil cicloexila), -(CH2)3OCH2SCH3, -CH2S(CH2)2-4CH3, - CH2SCH(CH3)2, -CH2SCH2CH(CH3)2, -CH2SCH2C(CH3)3, - CH2SCH2CH2CH(CH3)2, -CH2SCH2CH2C(CH3)3, - CH2SCH2CH2Si(CH3)3, -CH2CH2S(CH2)1-2CH3, -CH2CH2SCH2CH(CH3)2, -CH2S(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 2 substituintes independentemente selecionados de -CH3, -CH(CH3)2, e - OCH3; -CH2S(adamantanila), -CH2S(piridinila), -CH2S(metil piridinila), - CH2SCH2CH2(fenila), -CH2SCH2CH2(pirazinila), - CH2SCH2CH2(piridinila), -CH2S(O)(CH2)3CH3, -CH2S(O)2(CH2)3CH3, - CH2S(O)(fenila), -CH2S(O)2(fenila), -(CH2)4OCH(CH3)2, - (CH2)4CH(CH3)OCH3, -(CH2)4C(CH3)2OCH3, -(CH2)5N(CH3)2, -O(CH2)4- 7CH3, -OCH2CH2O(CH2)2-4CH3, -OCH2CH2OCH2CH(CH3)2, - OCH2CH=CH(CH2)2-3CH3, -OCH2CH2OCH2CH=CH2, - OCH2CH2OCH2CH=CH(CH3), -OCH2CH2OCH2CH=C(CH3)2, - OCH2CH2OCH2CH2C CH, -OCH2CH2O(CH2)2-3CH(CH3)2, - OCH2CH2S(CH2)2CH3, -OCH2(cicloexila), -OCH2(tetra-hidropiranila), - OCH2(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de -CH3, -CH2CH3, -OCH3, -OCF3, e - OCH2CH3; -OCH2CH2O(cicloexila), -OCH2CH2O(metil fenila), - OCH2CH2OCH2(ciclobutila), -OCH2CH2OCH2(fenila), - OCH2CH2OCH2(tiazolila), -OCH2CH2OCH2(tiofenila), -C(O)(CH2)4CH3, - OC(O)(CH2)4CH3, -OC(O)C(CH3)2(CH2)3CH3, -OC(O)(fenila), - OC(O)NH(CH2)3CH3, -OC(O)NH(CH2)5CH3, -OC(O)N(CH3)(CH2)3CH3, - OC(O)N(CH3)(CH2)4CH3, -NHC(O)NH(CH2)3CH3, -C(CH3)=N- O(CH2)3CH3, -C(CH3)=N-OCH2(fenila), -C(CH3)=N-OCH2(fluorofenila), - C(CH3)=N-OCH2(metoxifenila), -C(CH3)=N-OCH2CH2(fenila), - OC(O)NH(CH2)3CH3, -OC(O)NH(CH2)5CH3, -OC(O)N(CH3)(CH2)3-4CH3, -NHC(O)NH(CH2)3CH3, fenila, ou piridinila; e R2b é (i) um anel espiral de 6 membros tendo um átomo de oxigênio e substituído por zero ou 1 substituinte selecionado de -(CH2)3CH3; ou (ii) =N-O-(CH2)3CH3, =N-O-CH2CH(CH3)2, =N-OCH2CH2(fenila), ou =N-O- CH2CH2CH2(fenila); e R1, X1, X2, X3, Ra, Rb, e Rc são definidos no primeiro aspecto. Estão incluídos nesta modalidade compostos de Fórmula (Ic), (IIc), (IIIc), (IVc), ou (Vc).

[020] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal do mesmo, em que: R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; R2 é R2a ou R2b; R2a é -(CH2)3CH3, -(CH2)5CH3, -CH2CH=CHCH2CH3, - CH2CH2CH=CHCH2CH3, -(CH2)3CH=CHCH3, -(CH2)3CH=C(CH3)2, - (CH2)4CH=CH2, -(CH2)4CH=CHCH3, -CH=CH(CH2)3CH3, - CH=CH(CH2)3OCH3, -CH=CHCH2CH2CH(CH3)2, - CH=CHCH2CH2CH2OCH3, -CH2CH=CHCH=CHCH3, - CH=CHCH2CH2CH=CH2, -CH=CH(fenila) em que a referida fenila é substituída por -CH3 or -OCH3; -CH=CH(tetra-hidropiranila), -(CH2)1- 3(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 2 substituintes independentemente selecionados de F, I, -CH3, -OCH3, -OCH2CH3, - OCH(CH3)2, e -CH2C(O)N(CH3)2; -(CH2)2(metil imidazolila), -(CH2)2(metil pirazolila), -(CH2)1-2(piridinila) em que a referida piridinila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de -OCH3; -(CH2)2(pirimidinila), - (CH2)2(quinolinila), -(CH2)2-3(tetra-hidropiranila), -CH2O(CH2)3-4CH3, - CH2OCH2CH2CH(CH3)2, -CH2OCH2CH2C(CH3)3, -CH2O(CH2)9CH3, - CH2OCH2CH2CH2CF3, -CH2OCH2CH=CHCH2CH3, - CH2OCH2CH=C(CH3)2, -CH2OCH2CH=CHCH2CH2CH3, - CH2OCH2CH2OCH2CH2CH3, -CH2O(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 3 substituintes independentemente selecionados de F, Cl, -CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -OCH3, -OCF3, -(CH2)1-6OCH3, - C(O)N(CH3)2, -CH2N(CH3)2, -C(O)N(CH2CH3)(CH3), - C(O)N(CH3)(CH2CH2CH2CH3), e -C(O)N(CH3)(CH2CH(CH3)2); - CH2O(metóxi metóxi piridinila), -CH2O(tetra-hidropiranila), - CH2O(trifluorometila, metil pirazolila), -CH2OCH2(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de - CH3 e -OCH3; -CH2OCH2(metil pirazolila), -CH2OCH2(tetra- hidropiranila), -CH2OCH2(tiofenila), -CH2OCH2(trifluorometil tiofenila), - CH2OCH2(etil tiofenila), -CH2OCH2(dimetil tiofenila), -CH2CH2OCH2CH3, -CH2CH2OCH2CH(CH3)2, -CH2CH2O(metoxifenila), - CH2CH2OCH2(ciclopropil), -CH2CH2SCH(CH3)2, -(CH2)3OCH2CH3, - (CH2)3OCH(CH3)2, -(CH2)3OCH2CH2CH=CH2, -(CH2)3O(oxetanila), - (CH2)3O(tetrametil cicloexila), -(CH2)3OCH2SCH3, -CH2S(CH2)2-4CH3, - CH2SCH(CH3)2, -CH2SCH2CH(CH3)2, -CH2SCH2C(CH3)3, - CH2SCH2CH2CH(CH3)2, -CH2SCH2CH2C(CH3)3, - CH2SCH2CH2Si(CH3)3, -CH2CH2S(CH2)1-2CH3, -CH2CH2SCH2CH(CH3)2, -CH2S(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 2 substituintes independentemente selecionados de -CH3, -CH(CH3)2, e - OCH3; -CH2S(adamantanila), -CH2S(piridinila), -CH2S(metil piridinila), - CH2SCH2CH2(fenila), -CH2SCH2CH2(pirazinila), - CH2SCH2CH2(piridinila), -CH2S(O)(CH2)3CH3, -CH2S(O)2(CH2)3CH3, - CH2S(O)(fenila), -CH2S(O)2(fenila), -(CH2)4OCH(CH3)2, - (CH2)4CH(CH3)OCH3, -(CH2)4C(CH3)2OCH3, -(CH2)5N(CH3)2, -O(CH2)4- 7CH3, -OCH2CH2O(CH2)2-4CH3, -OCH2CH2OCH2CH(CH3)2, - OCH2CH=CH(CH2)2-3CH3, -OCH2CH2OCH2CH=CH2, - OCH2CH2OCH2CH=CH(CH3), -OCH2CH2OCH2CH=C(CH3)2, - OCH2CH2OCH2CH2C CH, -OCH2CH2O(CH2)2-3CH(CH3)2, - OCH2CH2S(CH2)2CH3, -OCH2(cicloexila), -OCH2(tetra-hidropiranila), - OCH2(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de -CH3, -CH2CH3, -OCH3, -OCF3, e - OCH2CH3; -OCH2CH2O(cicloexila), -OCH2CH2O(metil fenila), - OCH2CH2OCH2(ciclobutila), -OCH2CH2OCH2(fenila), - OCH2CH2OCH2(tiazolila), -OCH2CH2OCH2(tiofenila), -OC(O)(CH2)4CH3, -OC(O)C(CH3)2(CH2)3CH3, -OC(O)(fenila), -OC(O)NH(CH2)3CH3, - OC(O)NH(CH2)5CH3, -OC(O)N(CH3)(CH2)3CH3, - OC(O)N(CH3)(CH2)4CH3, -NHC(O)NH(CH2)3CH3, -C(CH3)=N- O(CH2)3CH3, -C(CH3)=N-OCH2(fenila), -C(CH3)=N-OCH2(fluorofenila), - C(CH3)=N-OCH2(metoxifenila), -C(CH3)=N-OCH2CH2(fenila), - OC(O)NH(CH2)3CH3, -OC(O)NH(CH2)5CH3, -OC(O)N(CH3)(CH2)3-4CH3, -NHC(O)NH(CH2)3CH3, fenila, ou piridinila; R2b é: (i) um anel espiral de 6 membros tendo um átomo de oxigênio e substituído por zero ou 1 substituinte selecionado de -(CH2)3CH3; ou (ii) =N-O-(CH2)3CH3, =N-O- CH2CH(CH3)2, =N-OCH2CH2(fenila), ou =N-O-CH2CH2CH2(fenila); Ra é H ou -OH; cada Rb é independentemente H ou -CH3; e cada Rc é independentemente H, Cl, I, ou -CH3; com a condição de que se R2 for -(CH2)6CH3, então pelo menos um de Rb e Rc não sejam H. Estão incluídos nesta modalidade os compostos de Fórmula (Ic). Também estão incluídos nesta modalidade os compostos em que R1 é -OH.

[021] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (II) ou um sal do mesmo, em que X1, X2, X3, e R2a são definidos no primeiro aspecto. Estão incluídos nesta modalidade compostos em que R2a é -(CH2)5-6CH3 ou -CH2O(CH2)3-4CH3. Estão incluídos nesta modalidade os compostos de Fórmula (IIc). Também estão incluídos nesta modalidade os compostos em que R1 é -OH.

[022] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (III), Fórmula (IV), ou Fórmula (V) ou um sal do mesmo, em que R1, R2, R2a e Rb são definidos no primeiro aspecto. Estão incluídos nesta modalidade compostos em que R2 é R2a. Estão incluídos nesta modalidade compostos em que R2 é R2a. Também estão incluídos nesta modalidade os compostos em que R2 é R2a; R2a é -(CH2)3CH3, - (CH2)5CH3, -(CH2)3(fenila), ou -C(O)(CH2)4CH3; e cada Rb é -CH3. Adicionalmente, estão incluídos nesta modalidade compostos de Fórmula (IIIc), (IVc), e (Vc). Também estão incluídos nesta modalidade os compostos em que R1 é -OH.

[023] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal do mesmo, em que R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; R2 é R2a; R2a é -(CH2)3CH3, -(CH2)5CH3, -CH2CH=CHCH2CH3, - CH2CH2CH=CHCH2CH3, -(CH2)3CH=CHCH3, -(CH2)3CH=C(CH3)2, - (CH2)4CH=CH2, -(CH2)4CH=CHCH3, -CH=CH(CH2)3CH3, - CH=CH(CH2)3OCH3, -CH=CHCH2CH2CH(CH3)2, - CH=CHCH2CH2CH2OCH3, -CH2CH=CHCH=CHCH3, - CH=CHCH2CH2CH=CH2, -CH=CH(fenila) em que a referida fenila é substituída por -CH3 ou -OCH3; -CH=CH(tetra-hidropiranila), -(CH2)1- 3(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 2 substituintes independentemente selecionados de F, I, -CH3, -OCH3, -OCH2CH3, - OCH(CH3)2, e -CH2C(O)N(CH3)2; -(CH2)2(metil imidazolila), -(CH2)2(metil pirazolila), -(CH2)1-2(piridinila) em que a referida piridinila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de -OCH3; -(CH2)2(pirimidinila), - (CH2)2(quinolinila), -(CH2)2-3(tetra-hidropiranila), -CH2O(CH2)3-4CH3, - CH2OCH2CH2CH(CH3)2, -CH2OCH2CH2C(CH3)3, -CH2O(CH2)9CH3, - CH2OCH2CH2CH2CF3, -CH2OCH2CH=CHCH2CH3, - CH2OCH2CH=C(CH3)2, -CH2OCH2CH=CHCH2CH2CH3, - CH2OCH2CH2CH=CH2, -CH2OCH2CH2CH2CH=CH2, - CH2OCH2CH2CH=C(CH3)2, -CH2OCH2CH2CH(OH)CH3, - CH2OCH2CH2CH2CH2OH, -CH2OCH2CH2CH2C(CH3)2(OH), - CH2OCH2CH2OCH3, -CH2OCH2CH2CH2OCH3, - CH2OCH2CH2OCH2CH2CH3, -CH2O(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 3 substituintes independentemente selecionados de F, Cl, -CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -OCH3, -OCF3, -(CH2)1-6OCH3, - C(O)N(CH3)2, -CH2N(CH3)2, -C(O)N(CH2CH3)(CH3), - C(O)N(CH3)(CH2CH2CH2CH3), e -C(O)N(CH3)(CH2CH(CH3)2); - CH2O(metóxi piridinila), -CH2O(tetra-hidropiranila), - CH2O(trifluorometila, metil pirazolila), -CH2OCH2(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de - CH3 e -OCH3; -CH2OCH2(metil pirazolila), -CH2OCH2(tetra- hidropiranila), -CH2OCH2(tiofenila), -CH2OCH2(trifluorometil tiofenila), - CH2OCH2(etil tiofenila), -CH2OCH2(dimetil tiofenila), -CH2CH2OCH2CH3, -CH2CH2OCH2CH(CH3)2, -CH2CH2O(metoxifenila), - CH2CH2OCH2(ciclopropila), -CH2CH2SCH(CH3)2, -(CH2)3OCH2CH3, - (CH2)3OCH(CH3)2, -(CH2)3OCH2CH2CH=CH2, -(CH2)3O(oxetanila), - (CH2)3O(tetrametil cicloexila), -(CH2)3OCH2SCH3, -CH2S(CH2)2-4CH3, - CH2SCH(CH3)2, -CH2SCH2CH(CH3)2, -CH2SCH2C(CH3)3, - CH2SCH2CH2CH(CH3)2, -CH2SCH2CH2C(CH3)3, - CH2SCH2CH2Si(CH3)3, -CH2CH2S(CH2)1-2CH3, -CH2CH2SCH2CH(CH3)2, -CH2S(fenila) em que referido fenila é substituído por zero a 2 substituintes independentemente selecionados de -CH3, -CH(CH3)2, e - OCH3; -CH2S(adamantanila), -CH2S(piridinila), -CH2S(metil piridinila), - CH2SCH2CH2(fenila), -CH2SCH2CH2(pirazinila), - CH2SCH2CH2(piridinila), -CH2S(O)(CH2)3CH3, -CH2S(O)2(CH2)3CH3, - CH2S(O)(fenila), -CH2S(O)2(fenila), -(CH2)4OCH(CH3)2, - (CH2)4CH(CH3)OCH3, -(CH2)4C(CH3)2OCH3, -(CH2)5N(CH3)2, -O(CH2)4- 7CH3, -OCH2CH2O(CH2)2-4CH3, -OCH2CH2OCH2CH(CH3)2, - OCH2CH=CH(CH2)2-3CH3, -OCH2CH2OCH2CH=CH2, - OCH2CH2OCH2CH=CH(CH3), -OCH2CH2OCH2CH=C(CH3)2, - OCH2CH2OCH2CH2C CH, -OCH2CH2O(CH2)2-3CH(CH3)2, - OCH2CH2S(CH2)2CH3, -OCH2(cicloexila), -OCH2(tetra-hidropiranila), - OCH2(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de -CH3, -CH2CH3, -OCH3, -OCF3, e - OCH2CH3; -OCH2CH2O(cicloexila), -OCH2CH2O(metil fenila), - OCH2CH2OCH2(ciclobutila), -OCH2CH2OCH2(fenila), - OCH2CH2OCH2(tiazolila), -OCH2CH2OCH2(tiofenila), -OC(O)(CH2)4CH3, -OC(O)C(CH3)2(CH2)3CH3, -OC(O)(fenila), -OC(O)NH(CH2)3CH3, - OC(O)NH(CH2)5CH3, -OC(O)N(CH3)(CH2)3CH3, - OC(O)N(CH3)(CH2)4CH3, -NHC(O)NH(CH2)3CH3, -C(CH3)=N- O(CH2)3CH3, -C(CH3)=N-OCH2(fenila), -C(CH3)=N-OCH2(fluorofenila), - C(CH3)=N-OCH2(metoxifenila), -C(CH3)=N-OCH2CH2(fenila), - OC(O)NH(CH2)3CH3, -OC(O)NH(CH2)5CH3, -OC(O)N(CH3)(CH2)3-4CH3, -NHC(O)NH(CH2)3CH3, fenila, ou piridinila; Ra é H ou -OH; cada Rb é independentemente H ou -CH3; e cada Rc é independentemente H, Cl, I, ou -CH3; com a condição de que se R2 for -(CH2)6CH3, então pelo menos um de Rb e Rc não seja H. Estão incluídos nesta modalidade os compostos de Fórmula (Ic). Também estão incluídos nesta modalidade os compostos em que R1 é -OH.

[024] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal do mesmo, em que R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; R2 é R2b; R2b é: (i) um anel espiral de 6 membros tendo um átomo de oxigênio e substituído por zero ou 1 substituinte selecionado de - (CH2)3CH3; ou (ii) =N-O-(CH2)3CH3, =N-O-CH2CH(CH3)2, =N- OCH2CH2(fenila), ou =N-O-CH2CH2CH2(fenila); Ra é H ou -OH; cada Rb é independentemente H ou -CH3; e cada Rc é independentemente H, Cl, I, ou -CH3. Estão incluídos nesta modalidade os compostos de Fórmula (Ic). Também estão incluídos nesta modalidade compostos em que R1 é -OH.

[025] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal do mesmo, em que R2 é R2a; R2a é -(CH2)3-6CH3, - (CH2)1-4CH=CRxRx, -(CH2)1-4CH=CRx(CH2CH3), -CH=CH(CH2)1-3C(Rx)3, -CH=CH(CH2)1-3OCH3, -(CH2)1-3CH=CHCH=CRxRx, -CH=CH(CH2)1- 3CH=CRxRx, -CH=CHRz, -(CH2)1-3Rz, -(CH2)1-3O(CH2)0-3Rz, -(CH2)1- 3S(CH2)0-3Rz, -CH2S(O)Rz, -CH2S(O)2Rz, -O(CH2)1-2Rz, -O(CH2)1- 2O(CH2)0-2Rz, -OC(O)Rz, -(CH2)1-4O(CH2)0-9C(Rx)3, -(CH2)1-4O(CH2)0- 9CF3, -(CH2)1-4CRxRxO(CH2)0-4C(Rx)3, -(CH2)1-3O(CH2)1-4CH=CRx(CH2)0- 3CH3, -(CH2)1-3O(CH2)1-4CH=CRxRx, -(CH2)1-3O(CH2)1-4C(OH)RxRx, - (CH2)1-3O(CH2)1-4O(CH2)0-3CH3, -(CH2)1-3S(CH2)0-4C(Rx)3, -(CH2)0- 3O(CH2)1-4S(CH2)0-3C(Rx)3, -(CH2)1-3S(CH2)1-4Si(CH3)3, -(CH2)1- 3S(O)(CH2)0-4C(Rx)3, -(CH2)1-3S(O)2(CH2)0-4C(Rx)3, -(CH2)1-5NRxRx, ou - O(CH2)1-7C(Rx)3; e R1, Ra, Rb, e Rc são definidos no primeiro aspecto. Estão incluídos nesta modalidade compostos em que R2a é -(CH2)3CH3, -(CH2)5-6CH3, -CH2CH=CHCH2CH3, -CH2CH2CH=CHCH2CH3, - (CH2)3CH=CHCH3, -(CH2)3CH=C(CH3)2, -(CH2)4CH=CH2, - (CH2)4CH=CHCH3, -CH=CH(CH2)3CH3, -CH=CH(CH2)3OCH3, - CH=CHCH2CH2CH(CH3)2, -CH=CHCH2CH2CH2OCH3, - CH2CH=CHCH=CHCH3, -CH=CHCH2CH2CH=CH2, -CH=CH(fenila) em que a referida fenila é substituída por -CH3 ou -OCH3; -CH=CH(tetra- hidropiranila), -(CH2)1-3(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 2 substituintes independentemente selecionados de F, I, -CH3, - OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, e -CH2C(O)N(CH3)2; -(CH2)2(metil imidazolila), -(CH2)2(metil pirazolila), -(CH2)1-2(piridinila) em que a referida piridinila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de -OCH3; -(CH2)2(pirimidinila), -(CH2)2(quinolinila), -(CH2)2-3(tetra- hidropiranila), -CH2O(CH2)3-4CH3, -CH2OCH2CH2CH(CH3)2, - CH2OCH2CH2C(CH3)3, -CH2O(CH2)9CH3, -CH2OCH2CH2CH2CF3, - CH2OCH2CH=CHCH2CH3, -CH2OCH2CH=C(CH3)2, - CH2OCH2CH=CHCH2CH2CH3, -CH2OCH2CH2CH=CH2, - CH2OCH2CH2CH2CH=CH2, -CH2OCH2CH2CH=C(CH3)2, - CH2OCH2CH2CH(OH)CH3, -CH2OCH2CH2CH2CH2OH, - CH2OCH2CH2CH2C(CH3)2(OH), -CH2OCH2CH2OCH3, - CH2OCH2CH2CH2OCH3, -CH2OCH2CH2OCH2CH2CH3, -CH2O(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 3 substituintes independentemente selecionados de F, Cl, -CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -OCH3, -OCF3, -(CH2)1-6OCH3, -C(O)N(CH3)2, -CH2N(CH3)2, - C(O)N(CH2CH3)(CH3), -C(O)N(CH3)(CH2CH2CH2CH3), e - C(O)N(CH3)(CH2CH(CH3)2); -CH2O(metóxi piridinila), -CH2O(tetra- hidropiranila), -CH2O(trifluorometila, metil pirazolila), -CH2OCH2(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de -CH3 e -OCH3; -CH2OCH2(metil pirazolila), - CH2OCH2(tetra-hidropiranila), -CH2OCH2(tiofenila), - CH2OCH2(trifluorometil tiofenila), -CH2OCH2(etil tiofenila), - CH2OCH2(dimetil tiofenila), -CH2CH2OCH2CH3, - CH2CH2OCH2CH(CH3)2, -CH2CH2O(metoxifenila), - CH2CH2OCH2(ciclopropila), -CH2CH2SCH(CH3)2, -(CH2)3OCH2CH3, - (CH2)3OCH(CH3)2, -(CH2)3OCH2CH2CH=CH2, -(CH2)3O(oxetanila), - (CH2)3O(tetrametil cicloexila), -(CH2)3OCH2SCH3, -CH2S(CH2)2-4CH3, - CH2SCH(CH3)2, -CH2SCH2CH(CH3)2, -CH2SCH2C(CH3)3, - CH2SCH2CH2CH(CH3)2, -CH2SCH2CH2C(CH3)3, - CH2SCH2CH2Si(CH3)3, -CH2CH2S(CH2)1-2CH3, -CH2CH2SCH2CH(CH3)2, -CH2S(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 2 substituintes independentemente selecionados de -CH3, -CH(CH3)2, e - OCH3; -CH2S(adamantanila), -CH2S(piridinila), -CH2S(metil piridinila), - CH2SCH2CH2(fenila), -CH2SCH2CH2(pirazinila), - CH2SCH2CH2(piridinila), -CH2S(O)(CH2)3CH3, -CH2S(O)2(CH2)3CH3, - CH2S(O)(fenila), -CH2S(O)2(fenila), -(CH2)4OCH(CH3)2, - (CH2)4CH(CH3)OCH3, -(CH2)4C(CH3)2OCH3, ou -(CH2)5N(CH3)2.

[026] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal do mesmo, em que -O(CH2)1-4O(CH2)0-4C(Rx)3, - O(CH2)1-4CH=CRx(CH2)0-3CH3, -O(CH2)1-4O(CH2)0-3C(Rx)3, -O(CH2)1- 4O(CH2)i-3CH=CRxRx, or -OíCK-)- zOíCK-)- 3C CR,; e Ri, Ra, Rb, e Rc são definidos no primeiro aspecto. Estão incluídos nesta modalidade compostos em que R2a é -O(CH2)4-7CH3, -OCH2CH2O(CH2)2-4CH3, - OCH2CH2OCH2CH(CH3)2, -OCH2CH=CH(CH2)2-3CH3, - OCH2CH2OCH2CH=CH2, -OCH2CH2OCH2CH=CH(CH3), - OCH2CH2OCH2CH=C(CH3)2, -OCH2CH2OCH2CH2C CH, - OCH2CH2O(CH2)2-3CH(CH3)2, -OCH2CH2S(CH2)2CH3, - OCH2(cicloexila), -OCH2(tetra-hidropiranila), -OCH2(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de - CH3, -CH2CH3, -OCH3, -OCF3, e -OCH2CH3; -OCH2CH2O(cicloexila), - OCH2CH2O(metil fenila), -OCH2CH2OCH2(ciclobutila), - OCH2CH2OCH2(fenila), -OCH2CH2OCH2(tiazolila), ou - OCH2CH2OCH2(tiofenila).

[027] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal do mesmo, -C(O)(CH2)0-4C(Rx)3, -OC(O)(CH2)0- 4C(Rx)3, -OC(O)CRxRx(CH2)0-4C(Rx)3, -OC(O)NRx(CH2)0-5C(Rx)3, - NRxC(O)NRx(CH2)0-5C(Rx)3, -C(CH3)=N-O(CH2)0-5C(Rx)3, -C(CH3)=N- O(CH2)1-2(fenila), -C(CH3)=N-O(CH2)1-2(fluorofenila), -C(CH3)=N- O(CH2)1-2(metoxifenila), fenila, ou piridinila; e R1, Ra, Rb, e Rc são definidos no primeiro aspecto. Estão incluídos nesta modalidade compostos em que R2a é -C(O)(CH2)4CH3, -OC(O)(CH2)4CH3, - OC(O)C(CH3)2(CH2)3CH3, -OC(O)(fenila), -OC(O)NH(CH2)3CH3, - OC(O)NH(CH2)5CH3, -OC(O)N(CH3)(CH2)3CH3, - OC(O)N(CH3)(CH2)4CH3, -NHC(O)NH(CH2)3CH3, -C(CH3)=N- O(CH2)3CH3, -C(CH3)=N-OCH2(fenila), -C(CH3)=N-OCH2(fluorofenila), - C(CH3)=N-OCH2(metoxifenila), -C(CH3)=N-OCH2CH2(fenila), - OC(O)NH(CH2)3CH3, -OC(O)NH(CH2)5CH3, -OC(O)N(CH3)(CH2)3-4CH3, -NHC(O)NH(CH2)3CH3, fenila, ou piridinila.

[028] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal do mesmo, em que R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; R2 é R2b; R2b é um anel espiral de 6 membros tendo um átomo de oxigênio e substituído por zero ou 1 substituinte selecionado de -(CH2)3CH3; Ra é H ou -OH; cada Rb é independentemente H ou -CH3; e cada Rc é independentemente H, Cl, I, ou -CH3. Estão incluídos nesta modalidade compostos de Fórmula (Ic). Também estão incluídos nesta modalidade os compostos em que R1 é -OH. Além disso, estão incluídos nesta modalidade compostos tendo as seguintes estruturas: em que Ry é H ou -(CH2)3CH3.

[029] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal do mesmo, em que R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; R2 é R2b; R2b é =N-O-(CH2)3CH3, =N-O-CH2CH(CH3)2, =N- OCH2CH2(fenila), ou =N-O-CH2CH2CH2(fenila); Ra é H ou -OH; cada Rb é independentemente H ou -CH3; e cada Rc é independentemente H, Cl, I, ou -CH3. Estão incluídos nesta modalidade compostos de Fórmula (Ic). Também estão incluídos nesta modalidade compostos em que R1 é -OH.

[030] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal do mesmo tendo a estrutura: em que: R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; e R2 é -(CH2)5OCH3, - (CH2)3OCH2CH3, -CH2O(metoxifenila), ou -CH2CH2(metoxifenila).

[031] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal do mesmo tendo a estrutura: em que R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; e R2 é -(CH2)5OCH3 ou - (CH2)3OCH2CH3. Estão incluídos nesta modalidade compostos tendo as estruturas:

[032] Uma modalidade fornece pelo menos um composto de Fórmula (I) ou um sal do mesmo tendo a estrutura: em que R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; e R2 é -CH2O(metoxifenila) ou - CH2CH2(metoxifenila). Estão incluídos nesta modalidade compostos tendo as estruturas:

[033] Uma modalidade fornece um composto selecionado de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il)ciclopentil)metanol (672); ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(5- metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il) ciclopentil)metanol (673); ((1R,3R)-1-amino-3-(6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol (674); ((1R,3R)-1-amino-3-((S)-6-(5-metoxipentil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol; ((1R,3R)-1-amino-3- ((R)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil) metanol; ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (678); ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6- (3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (679); ((1R,3R)-1-amino-3-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol; e sais dos mesmos.

[034] Uma modalidade fornece um composto selecionado de fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(5-metoxipentil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila; fosfato de di- hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila; fosfato de di-hidrogênio de fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3R)-1-amino-3-((R)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila; fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3R)-1-amino-3-((S)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il)ciclopentil)metila; fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3- ((R)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila; fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3-etoxipropil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila; e sais dos mesmos.

[035] Uma modalidade fornece um composto selecionado de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il)ciclopentil) metanol (676); ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(3- metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (677); ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il)ciclopentil)metanol (681); ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(2- metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (682); ((1R,3R)-1-amino-3-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il) ciclopentil)metanol (683); ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-((3- metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (684); ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-((3-metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (685); ((1R,3R)-1-amino-3-(6-((3- metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol; ((1R,3R)-1-amino-3-((S)-6-((3-metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol; ((1R,3R)-1-amino-3-((R)-6-((3- metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol; e sais dos mesmos.

[036] Uma modalidade fornece um composto selecionado de fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3R)-1-amino-3-((R)-6-((3- metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila (688); fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(3- metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila; fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3-metoxifenetil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila; fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il)ciclopentil)metila; fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3- ((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila; fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3R)-1-amino-3-((S)-6-(2-metoxifenetil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila (698); fosfato de di- hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-((3-metoxifenoxi)metil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila; fosfato de di- hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-((3-metoxifenoxi)metil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila; fosfato de di- hidrogênio de ((1R,3R)-1-amino-3-((R)-6-((3-metoxifenoxi)metil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila; fosfato de di- hidrogênio de ((1R,3R)-1-amino-3-((S)-6-((3-metoxifenoxi)metil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila; e sais dos mesmos.

[037] A presente invenção pode ser representada em outras formas específicas sem afastar-se do espiríto ou atributos essenciais da mesma. Esta invenção engloba todas as combinações dos aspectos e/ou modalidades da invenção aqui indicadas. É entendido que todas e quaisquer modalidades da presente invenção podem ser tomadas em conjunto com qualquer outra modalidade ou modalidades para descrever modalidades adicionais. Também é entendido que cada elemento individual das modalidades deve ser combinado com qualquer e todos os outros elementos de qualquer modalidade para descrever uma modalidade adicional.

DEFINIÇÕES

[038] As características e vantagens da invenção podem ser mais facilmente entendidas por aqueles versados na técnica na leitura da seguinte descrição detalhada. Deve-se apreciar que certas características da invenção que são, por razões de clareza, descritas acima e abaixo no contexto de modalidades separadas, podem também ser combinadas para formar uma modalidade simples. Por outro lado, várias características da invenção que são, por razões de brevidade, descritas no contexto de uma modalidade simples, podem também ser combinadas a fim de formar subcombinações das mesmas. Modalidades identificadas aqui como exemplares ou preferidas estão destinadas a serem ilustrativas e não limitantes.

[039] A menos que especificamente estabelecido de outro modo aqui, referências feitas no singular podem também incluir o plural. Por exemplo, "um, uma, uns, umas (a)" e "um, uma, uns, umas (an)" podem se referir a um, ou um ou mais.

[040] Como usado aqui, a frase "compostos e/ou sais dos mesmos" refere-se a pelo menos um composto, pelo menos um sal dos compostos, ou uma combinação dos mesmos. Por exemplo, compostos de Fórmula (I) e/ou sais dos mesmos incluem um composto de Fórmula (I); dois compostos de Fórmula (I); um sal de um composto de Fórmula (I); um composto de Fórmula (I) e um ou mais sais do composto de Fórmula (I); e dois ou mais sais de um composto de Fórmula (I).

[041] A menos que de outro modo indicado, qualquer átomo com valências não satisfeitas é assumido como tendo átomos de hidrogênio suficientes para satisfazer as valências.

[042] As definições mencionadas aqui tem precedência sobre definições mencionadas em qualquer patente, pedido de patente, e/ou publicação de pedido de patente incorporadas aqui por referências.

[043] Listadas abaixo estão definições de vários termos usados para descrever a presente invenção. Estas definições aplicam-se aos termos como eles são usados ao longo de toda a especificação (a menos que eles sejam de outro modo limitados em instâncias específicas) ou individualmente ou como parte de um grupo maior.

[044] Ao longo de toda especificação, grupos e substituintes do mesmo podem ser escolhidos por alguém versado no campo para fornecer quantidades e compostos estáveis.

[045] De acordo com uma convenção usada na técnica, é usado em fórmulas estruturais aqui para descrever a ligação que é o ponto de ligação da fração ou substituinte à estrutura de núcleo ou esqueleto.

[046] O termo "alquila" como usado aqui, refere-se a ambos os grupos de hidrocarboneto alifático saturado de cadeia ramificada e linear contendo, por exemplo, de 1 a 12 átomos de carbono, de 1 a 6 átomos de carbono, e de 1 a 4 átomos de carbono. Exemplos de grupo alquila incluem, mas não estão limitados a, metila (Me), etila (Et), propila (por exemplo, n-propila e i-propila), butila (por exemplo, n-butila, i-butila, sec-butila, e t-butila), e pentila (por exemplo, n-pentila, isopentila, neopentila), n-hexila, 2-metilpentila, 2-etilbutila, 3-metilpentila, e 4- metilpentila. Quando números aparecem em um subíndice após o símbolo "C", o subíndice define com mais especifidade o número de átomos de carbono que um grupo particular pode conter. Por exemplo, "C1-4 alquila" indica grupos aquila de cadeia linear e ramificada com um a quatro átomos de carbono.

[047] Como usado aqui, "alquileno" refere-se a um radical aquila bivalente tendo a Fórmula geral -(CH2)n-, onde n é o número de unidades de metileno. Exemplos não limitantes incluem metileno, dimetileno, trimetileno, tetrametileno, pentametileno, e hexametileno. Por exemplo, "(CH2)1-6" indica grupos alquileno de cadeia linear com um a seis átomos de carbono. Além disso, por exemplo, "(CH2)0-4" indica uma ligação e grupos alquileno de cadeia linear com um a quatro átomos de carbono.

[048] O termo "cicloalquila," como usado aqui, refere-se a um grupo derivado de uma molécula de hidrocarboneto monocíclico ou policíclico não aromático por remoção de um átomo de hidrogênio de um átomo de carbono de anel saturado. Exemplos representativos de grupos cicloalquila incluem, mas estão limitados a, ciclopropila, ciclopentila, e cicloexila. Quando números aparecem em um subíndice após o símbolo "C", o subíndice indica com mais especificidade o número de átomos de carbono que um grupo cicloalquila particular podem conter. Por exemplo, "C3-6 cicloalquila" indica grupos cicloalquila com três a seis átomos de carbono.

[049] A frase "farmaceuticamente aceitável" é usada aqui para se referir àqueles compostos, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que se incluem no escopo de diagnóstico médico seguro, adequado para uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação, comensurado com uma relação a benefício/risco razoável.

[050] Os compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), e (V) podem formar sais que também se incluem no escopo da invenção. A menos que de outro modo indicado, referência a um composto inventivo entende-se incluir referência a um ou mais sais dos mesmos. O termo "sal(s)" indica sais acídicos e/ou básicos formados com ácidos e bases inorgânicos e/ou orgânica. Além disso, o termo "sal(s) pode incluir zwitterions (sais internos), por exemplo, quando um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) contém ambas as porções básicas, tais como uma amina ou uma piridina ou anel de imidazol, e uma porção acídica, tais como um ácido carboxílico. Sais farmaceuticamente aceitáveis (por exemplo, não tóxicos, fisiologicamente aceitáveis) são preferidos, tais como, por exemplo, sais de metal e amina aceitáveis no qual o cátion não contribui significantemente para a toxicidade ou atividade biológica do sal. Contudo, outros sais podem ser úteis, por exemplo, em etapas de isolação ou purificação que podem ser aplicados durante a preparação, e assim, são contemplados no escopo da invenção. Sais dos compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) podem ser formados, por exemplo, reagindo um composto das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) com uma quantidade de ácido ou base, tais como uma quantidade equivalente, em um meio tal como um em que o sal precipita-se ou em um meio aquoso seguido por liofilização.

[051] Sais de adição de ácido exemplares incluem acetatos (tais como aqueles formados com ácido acético ou ácido tri-haloacético, por exemplo, ácido trifluoroacético), adipatos, alginatos, ascorbatos, aspartatos, benzoatos, benzenesulfonatos, bisulfatos, boratos, butiratos, citratos, camforatos, camforsulfonatos, ciclopentanopropionatos, digluconatos, dodecilsulfatos, etanossulfonatos, fumaratos, glucoheptanoatos, glicerofosfatos, hemisulfatos, heptanoatos, hexanoatos, cloridratos (formados com ácido hidroclórico), bromidrato (formado com brometo de hidrogênio), iodato, maleatos (formados com ácido maleico), 2- hidroxietanossulfonatos, lactatos, metanossulfonatos (formados com ácido metanossulfônico), 2-naftalenossulfonatos, nicotinatos, nitratos, oxalatos, pectinatos, persulfatos, 3-fenilapropionatos, fosfatos, picratos, pivalatos, propionatos, salicilatos, sucinatos, sulfatos (tais como aqueles formados com ácido súlfurico), sulfonatos (tais como aqueles mencionados aqui), tartratos, tiocianatos, toluenossulfonatos tais como tosilatos, undecanoatos, e similares.

[052] Sais básicos exemplares incluem sais de amônio, sais de metal alcalino tais como sais de sódio, lítio, e potássio; sais de metal alcalino terroso tais como sais de cálcio e magnésio; sais de bário, zinco, e alumínio; sais com bases orgânicas (por exemplo, aminas orgânicas) tais como trialquilaminas tais como trietilamina, procaína, dibenzilamina, N-benzil-β-fenetilamina, 1-efenamina, N,N‘- dibenziletileno-diamina, de-hidroabietilamina, N-etilpiperidina, benzilamina, dicicloexilamina ou aminas e sais farmaceuticamente aceitáveis similares com amino ácidos tais como arginina, lisina e similares. Grupos básicos contendo hidrogênio podem ser quaternizados com agentes tais como haletos de alquila inferiores (por exemplo, cloretos, brometos e iodetos de metila, etila, propila, e butila), sulfatos de dialquila (por exemplo, dimetila, dietila, dibutila, e diamil sulfatos), haletos de cadeia longa (por exemplo, cloretos, brometos e iodetos de decila, laurila, miristila e estearila), haletos de aralquila (por exemplo, brometo de benzila e fenetila), e outros. Sais preferidos incluem sais de monocloridrato, hidrogensulfato, metanossulfonato, fosfato ou nitrato.

[053] Os compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), e (V) podem ser fornecidos como sólidos amorfos ou sólidos cristalinos. Liofilização pode ser usada para fornecer os compostos como um sólido.

[054] Deve também ser entendido que solvatos (por exemplo, hidratos) dos compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), e (V) estão também incluídos no escopo da presente invenção. O termo "solvato" significa uma associação física de um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) com uma ou mais moléculas de solvente, ou orgânico ou inorgânico. Esta associação física inclui ligações de hidrogênio. Em certos casos o solvato será capaz de isolação, por exemplo quando uma ou mais moléculas de solvente estão incorporadas na treliça de cristal do sólido cristalino. "Solvato" engloba ambos as fase de solução e solvatos isoláveis. Solvatos exemplares incluem hidratos, etanolatos, metanolatos, isopropanolatos, solvatos de acetonitrila, e solvatos de acetato de etila. Métodos de solvação são conhecidos na técnica.

[055] Além disso, compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), e (V), subsequentes a sua preparação, podem ser isolados e purificados para obter uma composição contendo uma quantidade em peso igual ou maior que 99% de um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), e (V) ("substancialmente puro"), que é em seguida usado ou formulado como descrito aqui. Tais compostos "substancialmente puro" de fórmulas (I), (II), (III), (IV), e (V) são também contempladas aqui como parte da presente invenção.

[056] "Composto estável" e "estrutura estável" são entendidos indicar um composto que é suficientemente robust para sobreviver à isolação em um grau útil de pureza de uma mistura de reação, e formulação em um agente terapêutico eficaz. A presente invenção está destinada a incluir compostos estáveis.

[057] "Quantidade terapeuticamente eficaz" destina-se a incluir uma quantidade de um composto da presente invenção sozinha ou uma quantidade da combinação de compostos reivindicados ou uma quantidade de um composto de uma presente invenção em combinação com outros ingredientes ativos eficazes para agir como um agonista para S1P1, ou eficaz para tratar ou prevenir estados de doenças autoimunes e/ou inflamatórias, tais como esclerose múltipla e artrite reumatóide.

[058] Como usado aqui, "tratando" ou "tratamento" abrange o tratamento de um estado de doença em um mamífero, particularmente em um humano, e inclui: (a) prevenir o estado de doença de ocorrência em um mamífero, em particular, quando tal mamífero está predisposto ao estado de doença mas ainda não foi diagnosticado como tendo ela; (b) inibir o estado de doença, por exemplo, interromper seu desenvolvimento; e/ou (c) aliviar o estado de doença, por exemplo, causando regressão do estado de doença.

[059] Os compostos da presente invenção destinam-se a incluir todos os isótopos de átomos ocorrendo nos presentes compostos. Isótopos incluem aqueles átomos tendo o mesmo número atômico mas diferentes números de massa. A título de exemplo geral e sem limitação, isótopos de hidrogênio incluem deutério (D) e trítio (T). Isótopos de carbono incluem 13C e 14C. Compostos isotopicamente rotulados da invenção podem geralmente ser preparados por técnicas convencionais conhecidas por aqueles versados na técnica ou por processos análogos àqueles descritos aqui, usando um reagente isotopicamente rotulado apropriado no lugar do reagente não rotulado de outra forma utilizado. Por exemplo, metila (-CH3) também inclui grupos metila deuterados tais como -CD3.

[060] Compostos de acordo com Fórmulas (I), (II), (III), (IV), e (V) e/ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser administrados de qualquer forma adequada para a condição a ser tratada, que pode depender da necessidade de tratamento de sítio específico ou quantidade de composto de Fórmula (I) a ser entregue.

[061] Também abrangida por esta invenção está uma classe de composições farmacêuticas compreendendo um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos; e um ou mais veículos e/ou diluentes e/ou adjuvantes farmaceuticamente aceitáveis não tóxicos (coletivamente referido aqui como materiais "veículo") e, se desejado, outros ingredientes ativos. Os compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), e (V) podem ser administrados por qualquer rota adequada, preferivelmente na forma de uma composição adaptada a tal rota, e em uma dose eficaz para o tratamento pretendido. Os compostos e composições da presente invenção podem, por exemplo, ser administrados oralmente, mucosamente, ou parentalmente incluindo intravascularmente, intravenosamente, intraperitonealmente, subcutaneamente, intramuscularmente, e intrasternalmente em formulações de unidade de dosagem contendo portadores, adjuvantes e veículos farmaceuticamente convencionais. Por exemplo, o veículo farmacêutico pode conter uma mistura de manitol ou lactose e celulose microcristalina. A mistura pode conter componentes adicionais tais como um agente lubrificante, por exemplo, estearato de magnésio e um agente de desintegração tais como crospovidona. A mistura de veículo pode ser carregada em uma cápsula de gelatina ou comprimido como um comprimido. A composição farmacêutica pode ser administrada como uma forma de dosagem oral ou uma infusão, por exemplo.

[062] Para administração oral, a composição farmacêutica pode estar na forma de, por exemplo, um comprimido, cápsula, cápsula líquida, suspensão, ou líquido. A composição farmacêutica é preferivelmente feita na forma de uma unidade de dosagem contendo uma quantidade particular do ingrediente ativo. Por exemplo, a composição farmacêutica pode ser fornecida como um comprimido ou cápsula compreendendo uma quantidade de ingrediente ativo na faixa de cerca de 0,1 a 1000 mg, preferivelmente de cerca de 0,25 a 250 mg, e mais preferivelmente de cerca de 0,5 a 100 mg. Uma dose diária adequada para um humano ou outro mamífero pode variar amplamente dependendo da condição do paciente e outros fatores, mas, pode ser determinada usando métodos de rotina.

[063] Qualquer composição farmacêutica contemplada aqui pode, por exemplo, ser liberada oralmente por meio de quaisquer preparações orais adequadas e aceitáveis. Preparações orais exemplares, incluem, mas não estão limitadas a, por exemplo, comprimidos, trociscos, pastilhas, suspensões aquosas e oleosas, pós ou grânulos dispersíveis, emulsões, cápsulas macias e duras, cápsulas líquidas, xaropes, e elixíres. Composições farmacêuticas destinadas para administração oral podem ser preparadas de acordo com quaisquer métodos conhecidos por aqueles versados na técnica para fabricação de composições farmacêuticas destinadas para administração oral. A fim de fornecer preparações farmaceuticamente palatáveis, uma composição farmacêutica de acordo com a invenção pode conter pelo menos um agente selecionado de agentes adoçantes, agentes aromatizantes, agentes de coloração, demulcentes, antioxidantes, e agentes preservativos.

[064] Um comprimido pode, por exemplo, ser preparado misturando pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou pelo menos um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo com pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável não tóxico adequado para a produção de comprimidos. Excipientes exemplares incluem, mas não estão limitados a, por exemplo, diluentes inertes, tais como, por exemplo, carbonato de cálcio, carbonato de sódio, lactose, fosfato de cálcio, e fosfato de sódio; agentes de granulação e de desintegração, tais como, por exemplo, celulose microcristalina, crosscarmelose de sódio, amido de milho, e ácido algínico; agentes ligantes, tais como, por exemplo, amido, gelatina, polivinil-pirrolidona, e acacia; e agentes lubrificantes, tais como, por exemplo, estearato de magnésio, ácido esteárico, e talco. Além disso, um comprimido pode ou ser não revestido ou revestido por técnicas conhecidas para ou mascara o sabor ruim de um fármaco de sabor desagradável, ou retarder a disintegração e absorção do ingrediente ativo no trato gastrointestinal desse modo mantendo os efeitos do ingrediente ativo por um longo período. Materiais de mascaramento de sabor solúveis em água exemplares, incluem, mas não estão limitados a, hidroxipropil- metilcelulose e hidroxipropil-celulose. Materiais de retardamento de tempo exemplares, incluem, mas não estão limitados a, etil celulose e butirato de acetato de celulose.

[065] Cápsulas de gelatina duras podem, por exemplo, ser preparadas misturando pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou pelo menos um sal do mesmo com pelo menos um diluente sólido inerte, tais como, por exemplo, carbonato de cálcio; fosfato de cálcio; e caulim.

[066] Cápsulas de gelatina macias podem, por exemplo, ser preparadas misturando pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou pelo menos um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo com pelo menos um véiculo solúvel em água, tal como, por exemplo, polietileno glicol; e pelo menos um meio oleoso, tal como, por exemplo, óleo de amendoim, parafina líquida, e óleo de oliva.

[067] Uma suspensão aquosa pode ser preparada, por exemplo, misturando pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou pelo menos um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo com pelo menos um excipiente adequado para a produção de uma suspensão aquosa. Excipientes exemplares adequados para a produção de uma suspensão aquosa incluem, mas não estão limitados a, por exemplo, agentes de suspensão, tal como, por exemplo, carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, hidroxipropilmetil-celulose, alginato de sódio, ácido algínico, polivinil-pirrolidona, goma tragacanto, e goma de acácia; agentes dispersantes ou umectantes, tais como, por exemplo, um fosfatídeo de ocorrência natural, por exemplo, lecitina; produtos de condensação de óxido de alquileno com ácidos graxos, tais como, por exemplo, estearato de polioxietileno; produtos de condensação de óxido de etileno com alcoóis alifáticos de cadeia longa, tais como, por exemplo heptadecaetileno-oxicetanol; produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos graxos e hexitol, tais como, por exemplo, monooleato de sorbitol de polioxietileno; e produtos de condensaão de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos graxos e anidridos de hexitol, tais como, por exemplo, monooleato de sorbitol de polietileno. Uma suspensão aquosa pode também conter pelo menos um preservativo, tal como, por exemplo, p-hidroxibenzoato de n-propila e etila; pelo menos um agente colorante; pelo menos um agente aromatizante; e/ou pelo menos um agente adoçante, incluindo mas não estando limitado a, por exemplo, sucrose, sacarina, e aspartame.

[068] Suspensões oleosas podem, por exemplo, ser preparadas suspendendo pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou pelo menos um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo em ou um óleo vegetal, tal como, por exemplo, óleo de amendoim; azeite; óleo de gergelim; e óleo de coco; ou um óleo mineral, tal como, por exemplo, parafina líquida. Uma suspensão oleosa pode também conter pelo menos um agente espessante, tal como, por exemplo, cera de abelha; parafina dura; e álcool cetílico. A fim de fornecer uma suspensão oleosa palatável, pelo menos um dos agentes adoçantes já descritos aqui acima, e/ou pelo menos um agente aromatizante pode ser adicionado à suspensão oleosa. Uma suspensão oleosa podem também conter pelo menos um preservativo, incluindo, mas não estando limitado a, por exemplo, um antioxidante, tal como, por exemplo, hidroxianisol butilatado, e alfa-tocoferol.

[069] Pós e grânulos dispersíveis podem, por exemplo, ser preparada misturando pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou pelo menos um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo com pelo menos um agente dispersante e/ou umectante; pelo menos um agente de suspensão; e/ou pelo menos um preservativo. Agentes dispersantes adequados, agentes umectantes, e agentes de suspensão são como já descrito acima. Preservativos exemplares incluem, mas não estão limitados a, por exemplo, antioxidantes, por exemplo, ácido ascórbico. Além disso, pós e grânulos dispersíveis podem conter também pelo menos um excipiente, incluindo, mas não estando limitado a, por exemplo, agentes adoçantes; agentes aromatizantes; e agentes colorantes.

[070] Uma emulsão de pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou pelo menos um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo pode, por exemplo, ser preparada como uma emulsão de óleo em água. A fase oleosa das emulsões compreendendo compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) pode ser constituída de ingredientes conhecidos de uma forma conhecida. A fase de óleo pode ser fornecida por, mas não está limitada a, por exemplo, um óleo vegetal, tal como, por exemplo, azeite e óleo de amendoim; um óleo mineral, tal como, por exemplo, parafina líquida; e misturas do mesmo. Ao mesmo tempo em que a fase pode compreender meramente um emulsificante, pode compreender uma mistura de pelo menos um emulsificante com uma gordura ou um óleo ou com ambos uma gordura e um óleo. Agentes emulsificantes adequados incluem, mas não estão limitados a, por exemplo, fosfatídeos de ocorrência natural, por exemplo, lecitina de soja; ésteres ou ésteres parciais derivados de ácidos graxos e anidridos de hexitol, tais como, por exemplo, monooleato de sorbitano; e produtos de condensão de ésteres parciais com óxido de etileno, tais como, por exemplo, monooleato de sorbitano de polioxietileno. Preferencialmente, um emulsificante hidrofílico é incluído junto com um emulsificante lipofílico que age como um estabilizador. É preferido também incluir ambos um óleo e uma gordura. Juntos, o(s) emulsificante(s) com ou sem estabilizadore(s) compões o assim chamado cera emulsificante, e a cera junto com o óleo e a gordura compõe a assim chamada base de unguento emulsificante que forma a fase dispersa oleosa das formulações em creme. Uma emulsão pode também conter um agente adoçante, um agente aromatizante, um preservativo, e/ou um antioxidante. Emulsificantes e estabilizadores de emulsão adequados para uso na formulação da presente invenção incluem Tween 60, Span 80, álcool cetoestearílico, álcool miristílico, monoestearato de glicerila, sulfato de laurila de sódio, diestearato de glicerila sozinhos ou com a cera, ou outros materiais bem conhecidos na técnica.

[071] Os compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou pelo menos um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo podem, por exemplo, também ser entregues intravenosamente, subcutaneamente, e/ou intramuscularmente por meio de qualquer forma injetável adequada e farmaceuticamente aceitável. Formas injetáveis exemplares incluem, mas não estão limitadas a, por exemplo, soluções aquosas estéreis compreendendo veículos e solventes aceitáveis, tais como, por exemplo, água, solução de Ringer, e solução de cloreto de sódio isotônico; microemulsões de óleo em água estéreis; e suspensões aquosas ou oleaginosas.

[072] Formulações para administração parenteral podem estar na forma de soluções ou suspensões de injeção estéreis isotônicas. Estas soluções e suspensões podem ser preparadas de pós ou grânulos estéreis usando um ou mais dos veículos ou diluentes mencionados para uso nas formulações para administração oral ou usando outros agentes dispersantes ou umectantes adequados e agentes de suspensão. Os compostos podem ser dissolvidos em água, polietileno glicol, propileno glicol, etanol, óleo de milho, óleo de semente de algodão, óleo de amendoim, óleo de gerel, álcool benzílico, cloreto de sódio, goma de tragacanto, e/ou vários tampões. Outros adjuvantes e modos de administração são bem e amplamente conhecidos na técnica farmacêutica. O ingrediente ativo pode também ser administrado por injeção como uma composição com veículos adequados incluindo salina, dextrose, ou água, ou com ciclodextrina (por exemplo Captisol), solubilização de cossolvente (por exemplo propileno glicol) ou solubilização micelar (por exemplo Tween 80).

[073] A preparação injetável estéril pode também ser uma solução ou suspensão injetável estéril em um diluente ou solvente parenteralmente aceitável não tóxico, por exemplo, como uma solução em 1,3-butanediol. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser usados estão água, solução de Ringer, e solução de cloreto de sódio isotônica. Além disso, óleos fixados estéreis são convencionalmenteaplicados como um meio solvente ou de suspensão. Para este propósito qualquer óleo fixado suave pode ser aplicado, incluindo mono ou diglicerídeos sintéticos. Além disso, ácidos graxos tais como ácido oleico encontra uso na preparação de injetáveis.

[074] Uma microemulsão de óleo em água injetável estéril pode, por exemplo, ser preparada 1) dissolvendo pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) em uma fase oleosa, tal como, por exemplo, uma mistura de óleo de soja e lecitina; 2) combinando as Fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) contendo fase oleosa com uma mistura de água e glicerol; e 3) processando a combinação para formar a microemulsão.

[075] Uma suspensão aquosa ou oleaginosa estéril pode ser preparada de acordo com métodos já conhecidos na técnica. Por exemplo, uma solução ou suspensão aquosa estéril pode ser preparada com um diluente ou solvente parenteralmente aceitável não tóxico, tal como, por exemplo, 1,3-butano diol; e uma suspensão oleaginosa estéril pode ser preparada com um solvente aceitável não tóxico ou meio de suspensão, tal como, por exemplo, óleos fixados estéreis, por exemplo, mono ou diglicerídeos sintéticos; e ácidos graxos, tais como, por exemplo, ácido oleico.

[076] Portadores, adjuvantes e veículos farmaceuticamente aceitáveis que podem ser usados nas composições farmacêuticas desta invenção incluem, mas não estão limitados a, permutadores de íon, alumina, estereato de alumínio, lecitina, sistemas de liberação de fármaco auto emulsificante (SEDDS) tais como d-alfa-tocoferol polietileneglicol 1000 sucinato, surfactantes usados em formas de dosagem farmacêutica tais como Tweens, óleo de rícino polietoxilado tais como surfactante CREMOPHOR® (BASF), ou outras matrizes de liberação poliméricas similares, proteínas séricas, tais como albumina de soro humano, substâncias tampões tais como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbato de potássio, misturas de glicerídeos parciais de ácidos graxos vegetais saturados, água, sais ou eletrólitos, tais como sulfato de protamina, fosfato de hidrogênio de disódio, fosfato de hidrogênio de potássio, cloreto de sódio, sais de zinco, sílica coloidal, trisilicato de magnésio, polivinil pirrolidona, substâncias baseadas em celulose, polietileno glicol, carboximetilcelulose de sódio, poliacrilatos, ceras, polímeros de bloco de polietileno-polioxipropileno, polietileno glicol e gordura de lã. Ciclodextrinas tais como alfa, beta, e gama ciclodextrina, ou derivados quimicamente modificados tais como hidroxialquilciclodextrinas, incluindo 2 e 3-hidroxipropil-ciclodextrinas, ou outros derivados solubilizados podem também ser vantajosamente usados para melhorar liberação de compostos das fórmulas descritas aqui.

[077] Os compostos ativos farmaceuticamente desta invenção podem ser processados de acordo com métodos convencionais de farmácia para produzir agentes medicinais para administração em pacientes, incluindo humanos e outros mamíferos. As composições farmacêuticas podem ser submetidas à operações farmacêuticas convencionais tais como esterilização e/ou podem conter adjuvantes convencionais, tais como preservativos, estabilizadores, agentes umectantes, emulsificadores, tampões etc. Comprimidos e pílulas podem adicionalmente ser preparada com revestimentos entéricos. Tais composições podem também compreender adjuvantes, tais como agentes umectantes, adoçantes, aromatizantes, e perfumantes.

[078] As quantidades de compostos que são administradas e o regime de dosagem para tratamento de uma condição de doença com os compostos e/ou composições desta invenção depende da variedade de fatores, incluindo a idade, peso, sexo, a condição médica do indivíduo, o tipo de doença, a severidade da doença, a rota e frequência de administração, e o composto particular usado. Assim, o regime de dosagem pode variar amplamente, mas pode ser determinado routineiramente usando métodos padrões. Uma dose diária de cerca de 0.001 a 100 mg/kg de peso corporal, preferivelmente entre cerca de 0.0025 e cerca de 50 mg/kg de peso corporal e mais preferivelmente entre cerca de 0.005 a 10 mg/kg de peso corporal, pode ser apropriada. A dose diária pode ser administrada em uma a quatro doses por dia. Outras escalas de dosagem incluem uma dose por semana e uma dose por um ciclo de dois.

[079] Para fins terapêuticos, os compostos ativos desta invenção são normalmente combinados com um ou mais adjuvantes apropriados para a rota indicada de administração. Se administrado oralmente, os compostos podem ser misturados com lactose, sucrose, pó de amido, ésteres de celulose de ácidos alcanóico, ésteres de alquila de celulose, talco, ácido esteário, estearato de magnésio, óxido de magnésio, sais de sódio e cálcio de ácidos fosfórico e sulfúrico, gelatina, goma de acácia, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, e/ou polivinil álcool, e em seguida comprimidos ou encapsulados para administração conveniente. Tais cápsulas ou comprimidos podem conter uma formulação de liberação controlada como pode ser fornecido em uma dispersão de composto ativo em hidroxipropilmetil celulose.

[080] Composições farmacêuticas desta invenção compreendem pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) e/ou pelo menos um sal farmaceuticamente aceitável das mesmas, e opcionalmente um agente adicional selecionado de qualquer portador, adjuvante e veículo farmaceuticamente aceitável. Composições alternativas desta invenção compreendem um composto das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) descrito aqui, e um portador, adjuvante ou veículo farmaceuticamente aceitável.

UTILIDADE

[081] O sistema imune humano evoluiu para defender o corpo de micro-organismos, viroses, e parasitas que podem causar infecção, doença ou morte. Mecanismos regulatórios complexos garantem que os vários componentes celulares do sistema imune alvejam as substâncias estranhas ou organismos, embora não causando dano permanente ou significante ao indivíduo. Embora os eventos iniciais não sejam bem entendidos neste momento, em estados de doença autoimune o sistema imune direciona sua resposta inflamatória para alvejar órgãos no indivíduo afligido. Diferentes doenças autoimunes são tipicamente caracterizadas pelo órgão alvo predominante ou inicial ou tecidos afetados; tais como a articulação no caso de artrite reumatóide, a glândula tireóide no caso de tireoidite de Hashimoto, o sistema nervoso central no caso de esclerose múltipla, o pâncreas no caso de diabetes tipo I, e o intestino no caso de doença do intestino inflamatória. Desse modo foi observado que agentes terapêuticos que agem sobre o sistema imunme ou determinados tipos celulares do sistema imune (tais como linfócitos B, e linfócitos T, células T) podem ter utilidade em mais de uma doença autoimune.

[082] É bem reconhecido na técnica, incluindo as referências de literatura citadas aqui, que os receptores S1P são bons alvos para uma ampla variedade de aplicações terapêuticas, incluindo doenças autoimunes. Receptores S1P tornam-se bons alvos de fármaco, por que receptores individuais são bons específicos de tecido e resposta. A especificidade de tecido dos receptores S1P é importante, por que o desenvolvimento de um agonista ou antagonista seletivo para um receptor localiza a resposta celular para tecidos contendo o receptor, limitando efeitos colaterais indesejados. A especificidade de resposta dos receptores S1P é também importante por que ela provê o desenvolvimento de agonistas ou antagonistas que iniciam ou suprimem determinadas respostas celulares sem afetar outros processos. Portanto, compostos que agem sobre alguns membros da família de receptor S1P embora tendo diminuída ou nenhuma atividade em outros membros da família são desejáveis e são acreditados fornecer um efeito terapêutico com um perfil de efeito colateral melhorado (isto é, redução ou eliminação de efeitos colaterais indesejados).

[083] Como usado aqui, o termo "agonista" com referência a S1P1 refere-se a um agente que exerce efeitos farmacológicos tais como motilidade diminuída de células T, tráfico diminuído de células T, ou egresso diminuído de células T de tecidos linfoides. (Rosen et al., Trends in Immunology, 28:102 (2007)).

[084] Em virtude de sua atividade de S1P1 como agonistas, os compostos da presente invenção são agentes imunorregulatórios úteis para o tratamento ou prevenção de doenças autoimunes ou inflamatórias crônicas. Os compostos da presente invenção são úteis para suprimir o sistema imune em casos onde a imunossupressão está em ordem, tal como em medula óssea, rejeição de órgão ou transplante, doenças inflamatórias crônicas e autoimunes, incluindo lúpus eritematoso sistêmico, artrite reumatóide, diabetes melito tipo I, doença do intestino inflamatória, cirrose biliar, uveíte, esclerose múltipla, doença de Crohn, colite ulcerativa, penfigoibe bolhoso, sarcoidose, psoríase, miosite autoimune, granulomatose de Wegener, ictiose, oftalmopatia de Graves, e asma.

[085] Mais particularmente, os compostos da presente invenção são úteis para tratamento ou prevenção de uma doença ou distúrbio selecionado do grupo consistindo em: transplante de órgãos ou tecido, doenças do enxerto versus hospedeiro realizado por transplante, síndromes autoimunes incluindo artrite reumatóide, artrite idiopática juvenil, lúpus eritematoso sistêmico, lúpus eritematoso cutâneo (lúpus eritematoso discoide, lúpus eritematoso subagudo) e nefrite por lúpus, tireoidite de Hashimoto, esclerose múltipla, miastenia grave, diabetes tipo I, uveíte, uveíte posterior, encefalomielite alérgica, glomerulonefrite, doenças autoimunes pós-infecciosa incluindo febre reumática e glomerulonefrite pós-infecciosa, doenças da pele inflamatórias e hiperproliferativas, psoríase, artrite psoriática, dermatite atópica, dermatite de contato, dermatite eczematosa, dermatite seborreica, líquen plano, pênfigo, penfigoide bolhoso, epidermólise bolhosa, urticária, angioedemas, vasculite incluindo vasculite associada a ANCA, arterite de célula gigante, Arterite de Takayasu, poliangiite microscópica, vasculite do sistema nervoso central, Síndrome Churg- Strauss, e vasculite reumatoide, eritema, eosinofilia cutânea, acne, alopécia em áreas, ceratoconjuntivite, conjuntivite vernal, uveíte associada com doença de Behcet, ceratite, ceratite herpética, córnea cônica, distrofia epitelial da córnea, leucoma corneal, pênfigo ocular, úlcera de Mooren, esclerite, oftalmopatia de Graves, síndrome Vogt- Koyanagi-Harada, sarcoidose, alergias de pólen, doença das vias aéreas obstrutiva reversível, asma brônquica, asma alérgica, asma intrínsica, asma extrínsica, asma por poeira, asma crônica ou inveterada, asma tardia e hipersensibilidade das vias aéreas, bronquite, úlceras gástricas, dano vascular causado por doenças isquêmicas e trombose, doenças intestinais isquêmicas, doenças do intestino inflamatórias, enterocolite necrozante, lesões intestinais associadas com queimaduras térmicas, doenças celíacas, proctite, gastroenterite eosinofílica, mastocitose, doença de Crohn, colite ulcerativa, enxaqueca, rinite, eczema, nefrite intersticial, síndrome de Goodpasture, síndrome urêmica hemolítica, nefropatia diabética, miosite múltipla, síndrome Guillain-Barre, doença de Meniere, polineurite, neurite múltipla, mononeurite, radiculopatia, hipertireoidismo, doença de Basedow, aplasia de célula vermelha pura, anemia aplástica, anemia hipoplástica, púrpura trombocitopênica idiopática, anemia hemolítica autoimune, agranulocitose, anemia perniciosa, anemia megaloblástica, aneritroplasia, osteoporose, sarcoidose, pulmão fibroide, pneumonia intersticial idiopática, dermatomiosite, leucoderma vulgar, ictiose vulgar, sensibilidade fotoalérgica, linfoma de célula T cutânea, arteriosclerose, aterosclerose, síncrome aortite, poliarterite nodosa, miocardose, escleroderma, granuloma de Wegener, síndrome de Sjogren, adipose, fascite eosinofílica, lesões de gengiva, periodôntio, osso alveolar, substância óssea do dente, glomerulonefrite, alopécia padrão masculino ou alopécia senil prevenindo epilação ou fornecendo germinação de cabelo e/ou promovendo geração de cabelo e crescimento de cabelo, distrofia muscular, pioderma e síndrome de Sezary, doença de Addison, dano de isquemia-reperfusão de órgãos, que ocorre na preservação, transplante ou doença isquêmica, choque de endotoxina, colite pseudomembranosa, colite causada por fármaco ou radiação, insuficiência renal aguda isquêmica, insuficiência renal crônica, toxinose causada por oxigênio ou fármacos no pulmão, câncer pulmonar, enfisema pulmonar, catarata, siderose, retinite pigmentosa, degeneração macular senil, cicatrização vítrea, queimadura alcalina da córnea, eritema multiforme de dermatite, dermatite bolhosa linear de IgA e dermatite de cimento, gingivite, periodontite, septicemia, pancreatite, doenças causadas por poluição ambiental, envelhecimento, carcinogênese, metástase de carcinoma e hipobaropatia, doença causada por liberação de histamina ou leucotrieno-C4, doença de Behcet, hepatite autoimune, cirrose biliar primária, colangite esclerosante, ressecção hepática parcial, necrose hepática aguda, necrose causada por toxina, hepatite viral, choque, ou anoxia, vírus da hepatite B, hepatite não A/não B, cirrose, cirrose alcoólica, insuficiência hepática, insuficiência hepática fulminante, insuficiência hepática de início tardio, "insuficiência hepática aguda-ou-crônica", aumento de efeito quimioterápico, infecção por citomegalovírus, infecção por HCMV, AIDS, câncer, demência senil, trauma, dor neuropática, infecção bacteriana, trombocitopenia, neuropatia IgA, glomerulonefrite mesangioproliferativa, doença relacionada com IgG4, espondilite ancilosante, e policondrite Policondrite recidivante. Artrite idiopática juvenil inclui artrite idiopática juvenil de início em oligoartrite, artrite idiopática juvenil de início na poliartrite, artrite idiopática juvenil de início sistêmico, psoriática de artrite juvenil, e artrite idiopática juvenil relacionada com entesite.

[086] Uma modalidade fornece um método para tratar doenças autoimunes e/ou inflamatórias, compreendendo administrar a um mamífero em necessidade do mesmo pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Outra modalidade fornece os compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, para uso em terapia para o tratamento de doenças autoimunes e/ou inflamatórias. Em outra modalidade, é fornecido o uso dos compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, para a fabricação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de doença autoimune e/ou inflamatória. Uma quantidade terapeuticamente efetiva pode ser empregada nestas modalidades. Preferivelmente, nestas modalidades, as doenças autoimunes e inflamatórias são selecionadas de esclerose múltipla, artrite reumatóide, doença do intestino inflamatória (incluindo doença de Crohn e colite ulcerativa), psoríase, e como um agente para prevenir a rejeição de órgãos transplantados. O método da presente modalidade inclui a administração de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou um sal farmaceuticamente efetivo do mesmo.

[087] Em outra modalidade, um método para tratar doença vascular é fornecido compreendendo administrar a um mamífero em necessidade do mesmo pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Outra modalidade fornece os compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, para uso em terapia para o tratamento de doença vascular. Em outra modalidade, é fornecido o uso dos compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, para a fabricação de um medicamento para o tratamento de doença vascular. Uma quantidade terapeuticamente efetiva pode ser empregada nestas modalidades. Preferivelmente, nestas modalidades, a doença vascular é selecionada de aterosclerose e dano por reperfusão de isquemia.

[088] Em outra modalidade, um método para tratar doença do intestino inflamatória é fornecido compreendendo administrar a um mamífero em necessidade do mesmo pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Outra modalidade fornece os compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, para uso em terapia para o tratamento de doença do intestino inflamatória. Em outra modalidade, é fornecido o uso dos compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, para a fabricação de um medicamento para o tratamento de doença do intestino inflamatória. Uma quantidade terapeuticamente efetiva pode ser empregada nestas modalidades. Preferivelmente, nestas modalidades, a doença do intestino inflamatória é selecionada de doença de Crohn, colite ulcerativa, colite colagenosa, colite linfocítica, colite isquêmica, colite de desvio, doença de Behçet, e colite indeterminada.

[089] Em outra modalidade, um método para tratar lupus é fornecido compreendendo administrar a um mamífero em necessidade do mesmo pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Outra modalidade fornece os compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, para uso em terapia para o tratamento de lúpus. Em outra modalidade, é fornecido o uso dos compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, para a fabricação de um medicamento para o tratamento de lúpus. Uma quantidade terapeuticamente efetiva pode ser empregada nestas modalidades. Lúpus inclui lúpus eritematoso sistêmico, lúpus eritematoso cutâneo, lúpus eritematoso discoide, lúpus eritematoso subagudo e nefrite por lúpus.

[090] Em outra modalidade, um método para tratar esclerose múltipla é fornecido compreendendo administrar a um mamífero em necessidade do mesmo pelo menos um composto de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Outra modalidade fornece os compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, para uso em terapia para o tratamento de esclerose múltipla. Em outra modalidade, é fornecido o uso dos compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, para a fabricação de um medicamento para o tratamento de esclerose múltipla. Uma quantidade terapeuticamente efetiva pode ser empregada nestas modalidades. Preferivelmente, nestas modalidades, esclerose múltipla inclui esclerose múltipla remitente recidivante, esclerose múltipla progressiva primária, esclerose múltipla progressiva secundária, e esclerose múltipla recidivante progressiva.

[091] Os métodos de tratar condições associadas com S1P1 podem compreende a administração de compostos de fórmulas (I), (II), (III), (IV), ou (V) sozinhos ou em combinação entre si e/ou outros agentes terapêuticos adequados úteis no tratamento de tais condições. Consequentemente, "quantidade terapeuticamente efetiva" é também destinada a incluir uma quantidade da combinação de compostos reivindicados que é efetiva para agir como um agonista no receptor S1P1. A combinação de compostos é preferivelmente uma combinação sinérgica. Sinergia, como descrito, por exemplo, por Chou et al., Adv. Enzyme Regul., 22:27-55 (1984), ocorre quando o efeito dos compostos quando administrados em combinação é maior do que o efeito aditivo dos compostos quando administrados sozinhos como um único agente. Em geral, um efeito sinérgico é mais claramente demonstrado em concentrações subideais dos compostos. A sinergia pode ser em termos de menor citotoxicidade, eficácia aumentada, ou algum outro efeito benéfico da combinação comparada com os componentes individuais.

[092] Exemplos de tais outros agentes terapêuticos incluem corticosteroides ou glucocorticoides, tais como dexametasona, metilprednisolona, prednisolona, e prednisona; Inibidores de PDE4, tais como rolipram, cilomilaste, roflumilaste, e oglemilaste; fármacos anti- inflamatórios supressivos de citocina (CSAIDs) e inibidores de p38 cinase, imidazo [1,2-A]quinoxalinas 4-substituídos como descrito na Patente dos Estados Unidos No. 4.200.750; anticorpos ou proteínas de fusão direcionadas a moléculas de superfície celular, tais como CD2, CD3, CD4, CD8, CD20 tais como RITUXAN®, CD25, CD30, CD40, CD69, CD80 (B7.1), CD86 (B7.2), CD90, CTLA, por exemplo, abatacepte (ORENCIA®), belatacepte, ou seus ligantes, incluindo CD154 (GP39, ou CD40L); anticorpos para, proteínas de fusão, ou receptores solúveis de citocinas humanos ou fatores de crescimento, por exemplo, TNF tal como, infliximabe (REMICADE®), etanercepte (Embrel), adalimumabe (HUMIRA®), LT, Il-1 tal como anakinra (KINERET®) (um antagonista de receptor de IL-1), IL-2, IL-4, IL-5, Il-6, tal como CNTO 328 (um anticorpo anti-IL-6 quimérico), Il-7, Il-8, Il-12, Il- 15, Il-16, Il-17, Il-21, Il-23 tal como Ustecinumabe (um anticorpo monoclonal anti-IL-12/23 humano), e interferons tais como interferon beta 1a (AVONEX®, REBIF®), interferon beta 1b (BETASERON®); antagonistas de receptor de integrina, tais como TYSABRI®; agentes poliméricos, tais como acetato de glatiramer (COPAXONE®); sulfasalazina, mesalamina, hidroxicloroquina, fármacos anti- inflamatórios não esteroidais (NSAIDs) tais como salicilatos incluindo aspirina, salsalato, e salicilato de magnésio, e não salicilatos, tais como, ibuprofeno, naproxeno, meloxicam, celecoxibe e rofecoxibe; agentes antivirais, tais como abacavir; agentes antiproliferativos, tais como metotrexato, mercaptopurina, leflunomida, ciclosporina, micofenololato, FK506 (tacrolimus, PROGRAF®); fármacos citotóxicos tais como azatioprina e ciclofosfamida; inibidores de translocação nuclear, tais como deoxispergualina (DSG); produtos contendo ouro, tais como auronofina; peniclamina, e rapamicina (sirolimus ou RAPAMUNE®) ou derivados dos mesmos.

[093] Os outros agentes terapêuticos acima mencionados, quando empregados em combinação com os compostos da presente invenção, podem ser usados, por exemplo, nessas quantidades indicadas pela Physicians’ Desk Reference (PDR) ou como de outro modo determinado por alguém versado na técnica. Nos métodos da presente invenção, tais outros agentes terapêuticos podem ser administrados antes de, simultaneamente com, ou seguindo a administração dos compostos inventivos.

MÉTODOS DE PREPARAÇÃO

[094] Os compostos da presente invenção podem ser preparados de diversas maneiras bem conhecidas por alguém versado na técnica de síntese orgânica. Os compostos da presente invenção podem ser sintetizados usando os métodos descritos abaixo, junto com métodos sintéticos conhecidos na técnica de química orgânica sintética, ou variações da mesma como apreciado por aqueles versados na técnica. Métodos preferidos incluem, porém não estão limitados àqueles descritos abaixo. Todas as referências citadas aqui são pelo presente incorporados em sua íntegra por referência.

[095] Os compostos desta invenção podem ser preparados usando as reações e técnicas descritas nesta seção. As reações são realizadas em lsolventes apropriados para os reagentes e materiais empregados e são adequados para as transformações que estão sendo realizadas. Além disso, na descrição dos métodos sintéticos descritos abaixo, deve ser entendido que todas as condições de reação propostas, incluindo escolha de solvente, atmosfera de reação, temperatura de reação, duração do experimento e elaboração de procedimentos, são escolhidas para serem as condições padrão para essa reação, que deve ser facilmente reconhecida por alguém versado na técnica. É entendido por alguém versado na técnica de síntese orgânica que a funcionalidade presente em várias porções da molécula deve ser compatível com os reagentes e reações propostos. Tais restrições para os substituintes que são compatíveis com as condições de reação serão facilmente evidentes para alguém versado na técnica e métodos alternativos devem então ser usados. Isto algumas vezes requerirá um diagnóstico para modificar a ordem das etapas sintéticas ou para selecionar um esquema de processo particular sobre outro a fim de obter um composto desejado da invenção. Será também reconhecido que outra consideração maior no planejamento de qualquer rotina sintética neste campo é a escolha judiciosa do grupo de proteção usado para a proteção dos grupos funcionais reativos presentes nos compostos descritos nesta invenção. Uma descrição autoritária descrevendo as muitas alternativas para o prático treinado é Greene e Wuts (Protective Groups In Organic Synthesis, Quarta Edição, Wiley e Sons, 2006).

[096] Compostos de fórmula (I) podem ser preparados por referência aos métodos ilustrados nos seguintes esquemas. Como mostrado aqui o produto final é um composto tendo a mesma fórmula estrutural da fórmula (I). Será entendido que qualquer composto de fórmula (I) pode ser produzido pelos esquemas pela seleção adequada de reagentes com substituição apropriada. Solventes, temperaturas, pressões, e outras condições de reação podem facilmente ser selecionados por alguém versado na técnica. Materiais de partida são comercialmente disponíveis ou facilmente preparados por alguém versado na técnica. Constituintes de compostos são como definido aqui ou em outro lugar na especificação. Esquema 1

[097] Como mostrado no Esquema 1, compostos de fórmula I podem ser produzidos, iniciando com compostos bicíclicos 1.1 nos quais um ácido borônico de arila ou heteroarila pode ser acoplado com ciclopentenona em uma reação de adição conjugada (catalisada, por exemplo, com complexos de ródio ou cobre) para dar origem à cetona 1.2. Esta transformação pode ser feita na presença de ligantes quirais (tais como BINAP) para fornecer 1.2 enantioenriquecida. A cetona 1.2 pode também ser preparada por meio de acoplamento catalisado de metal de transição de compostos de halogênio de arila ou heteroarila com ciclopeten-2-enol. A cetona 1.2 pode ser convertida em ou amino- nitrila 1.3 ou hidantoína 1.4, cada dos quais pode ser hidrolisado para fornecer o aminoácido 1.5. Redução direta do ácido de 1.5, ou esterificação inicial e redução subsequente do carbonil éster, leva a compostos de fórmula I. Esquema 2

[098] Alternativamente, I pode ser obtido de 2.3 por meio de redução da olefina e carbonila. 2.3 pode ser preparado por meio do acoplamento mediado por metal de transição de 1.1 e 2.2, com 2.2 vindo do acoplamento de 2.1 e 1,4-diclorobut-2-eno sob condições básicas. Esquema 3

[099] Compostos de fórmula I podem ser preparados de compostos de carbonila 3.1 como mostrado no Esquema 3 por redução em alcoóis 3.2 seguido por alquilação para dar origem éteres 3.5. Alternativamente, condensação de 3.1 com alcoóis dá origem a cetais 3.3 ou enol éteres 3.4, ou dos quais pode ser reagido sob condições de redução (tais como hidrogenação catalisada por paládio) para fornecer éteres 3.5. Conversão de 3.1 em triflato de enol 3.6 pode ser seguida por acoplamento mediado por metal para dar origem a derivados de alquila, arila, ou heteroarila 3.7. Esquema 4

[0100] Triflato de enol 3.6 pode também ser convertido em derivados de carbonil éster 4.1 que pode ser também reduzidos em alcoóis 4.2. Alquilação de 4.2 pode fornecer éteres 4.3, embora a conversão do álcool em um grupo de saída (por exemplo, halogênio ou tosilato) seguida por deslocamento com um nucleófilo, possa levar a 4.3 como derivados de éter, amina ou tioéter. Oxidação de 4.2 seguida por olelfinação leva a 4.5 que pode ser também reduzido em 4.6. Esquema 5

[0101] Preparação de estruturas bicíclicas úteis para a invenção é delineada no esquema 5. Elaboração de 5.1 em ésteres carboxílicos 5.2, hidrólise sob condições acídicas ou básicas para fornecer o ácido 5.3, conversão em cloreto de ácido 5.4, seguida por ciclização catiônica na presença de uma olefina terminal dá origem a cetonas 5.3 que podem ser também modificadas como descrito acima nos esquemas 3 e 4 para, por exemplo, compostos 5.6. 5.1 pode também ser acoplado com olefinas 5.9 sob catálise de paládio para dar origem a 5.10, que pode sofrer redução do alceno e em seguida ciclização sob condições acídicas (tais como PPA ou H2SO4) para fornecer o 5.12 bicíclico. Redução da cetona de 5.12 dá origem a 5.13.

EXEMPLOS

[0102] A invenção é também definida nos seguintes exemplos. Deve ser entendido que os exemplos são dados a título de ilustração apenas. A partir da descrição acima e os exemplos, alguém versado na técnica pode verificar as características essenciais da invenção, e sem afastar-se do espírito e escopo da mesma, pode fazer várias mudanças e modificações para adaptar a invenção a vários usos e condições. Como um resultado, a invenção não é limitada pelos exemplos ilustrativos mencionados aqui abaixo, porém em vez disso é definida pelas reivindicações anexas aqui. Abreviações Ac acetila AcOH ácido acético anhyd. anidro aq. aquoso BH3•DMS sulfeto de borano-dimetila BF3•Et2O eterato de dietila de trifluoreto de boro Bn benzila BOC2O dicarbonato de di-terc-butila Bu butila Boc terc-butoxicarbonila CV Volumes de Coluna DCE dicloroetano DCM diclorometano DEA dietilamina DIEA di-isopropiletilamina DMA N,N-dimetilacetamida DMF dimetilformamida DMPU 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetra-hidro-2(1H)-pirimidinona DMSO dimetilssulfóxido EtOAc acetato de etila Et etila Et3N trietil amina EtOH etanol H ou H2 hidrogênio h, hr ou hrs hora(s) hex ou Hex hexano i iso IPA álcool isopropílico HOAc ácido acético HCl ácido hidroclórico HPLC cromatografia líquida de alta pressão i-PrOH isopropanol KHMDS bis(trimetilsilil) amida de potássio LC cromatografia líquida LCMS espectroscopia de massa de cromatografia líquida LDA di-isopropilamina de lítio LiHMDS bis(trimetilsilil) amida de lítio m-CPBA ácido meta-cloroperoxibenzoico M molar mM milimolar Me metila MeCN acetonitrila MeI iodeto de metila MeOH metanol MHz megahertz min. minuto(s) mins minuto(s) M+1 (M+H)+ MS espectrometria de massa n ou N normal NIS N-Iodossucinimida nm nanômetro nM nanomolar NMO N-metilmorfolina-N-óxido NMP N-metilpirrolidina Pd/C paládio sobre carbono Pd(OAc)2 acetato de paládio Pd(PPh3)4 tetracis(trifenilfosfina)paládio Pd2(dba)3 tris-(dibenzilidenoacetona)dipaládio Ph fenil PPA ácido polifosfórico PPC cloreto de pirofosforila PPh3 trifenilfosfina Pr propila PSI libra por polegada quadrada Ret Time ou Rt tempo de retenção sat. saturado S-BINAP S)-(-)-2,2‘ -bis(difenilfosfino)-1,1‘ -binaftila SFC cromatografia de fluido supercrítico t-BuOH butanol terciário TFA ácido trifluoroacético THF tetra-hidrofurano

Condições de HPLC Analíticas:

[0103] Condição A: Coluna: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 μm ; Fase Móvel A: 5:95 acetonitrila:água com 0,05% TFA; Fase Móvel B: 95:5 acetonitrila:água com 0,05% de TFA; Temperatura: 50 °C; Gradiente: 0 a 100% de B durante 3 minutos, em seguida uma retenção de 0,75 minuto a 100% de B; Fluxo: 1,11 mL/min.

[0104] Condição B: Coluna: 1-Waters C18 2,1 x 30 mm 3,5 um (4min.); Solvente A = 10% de MeOH, 90% de H2O, 0,1% de TFA; Solvente B = 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA.

[0105] Condição C: Coluna: YMC CombiScreen S5 50 x 4,6 mm (4 min; Solvente A = Água 90% / MeOH 10% / H3PO4, 0,2%; Solvente B = MeOH 90% / água a 10% / H3PO4 a 0,2%.

[0106] Condição G: Coluna: Waters Acquity BEH C18 2,1 x 50 mm 1,7 um; Gradiente linear de 0 a 100% de Solvente B durante 3 minutos, em seguida retenção de 0,75 minuto a 100% de B; Taxa de fluxo: 1,11 mL/min; Solvente A: 5:95 acetonitrila:água com acetato de amônio a 10 mM; Solvente B: 95:5 acetonitrila:água com acetato de amônio a 10 mM; Temperatura = 50°C; Produtos detectados a comprimento de onda a 220 nm com modo de ionização positiva.

[0107] Condição H: Coluna: Sunfire C18, (150 x 3,0 mm), 3,5 μm; Gradiente linear de 10 a 100% de Solvente B durante 25 minutos, em seguida retenção de 5 minutos a 100% de B; Taxa de fluxo: 1 mL/min; Tampão: 0,5% de TFA, em água com pH ajustado para 2,5 usando amônia diluída; Solvente A: Tampão: acetonitrila (95:5); Solvente B: Tampão: acetonitrila (5:95); Produtos detectados a 220 nm.

[0108] Condição I: Coluna: Xbridge Phenyl, (150 x 3,0 mm), 3,5 μm; Gradiente linear de 10 a 100% de Solvente B durante 25 minutos, em seguida retenção de 5 minutos a 100% de B; Taxa de fluxo: 1 mL/min; Tampão: 0,5% de TFA, em água com pH ajustado para 2,5 usando amônia diluída; Solvente A: Tampão: acetonitrila (95:5); Solvente B: Tampão: acetonitrila (5:95); Produtos detectados a 220 nm.

[0109] Condição J: Coluna: Chromolith SpeedROD (4,6 x 50 mm); Gradiente linear de 0 a 100% de Solvente B durante 4 minutos, com retenção de 1 minuto a 100% de B; Solvente A: 10% de MeOH, 90% de H2O, 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA; Taxa de fluxo: 4 mL/min; Produtos detectados a 220 nm.

[0110] Condição K: Coluna: YMC ProC18 S5 ODS (50 x 4,6 mm); Gradiente linear de 0 a 100% de Solvente B durante 4 minutos, com retenção de 1 minuto a 100% de B.

[0111] Solvente A: 10% de MeOH - 90% de H2O - 0,2% de H3PO4; Solvente B: 90% de MeOH - 10% de H2O - 0,2% de H3PO4; Taxa de fluxo: 4mL/min; Produtos detectados a 220 nm.

[0112] Condição L: Coluna: Sunfire C18 3,5 um, 3,0 x 150 mm; Gradiente linear de 10 a 100% de Solvente B durante 12 minutos, com retenção de 3 minutos a 100% de B; Solvente A = 0,05% de TFA em H2O:MeCN (95:5); Solvente B = 0,05% de TFA em H2O:MeCN (5:95). Taxa de fluxo: 1 mL/min; Produtos detectados a 220 nm e 256 nm.

[0113] Condição M: Waters Acquity BEH C18 2,1 x 50 mm 1,7 um; Gradiente linear de 0 a 100% de Solvente B durante 1,5 min., 100% de B; Taxa de fluxo: 1 mL/min; Solvente A: 10:90 acetonitrila:água com 0,1% de TFA; Solvente B: 90:10 acetonitrila:água com 0,1% de TFA; Temperatura = 40 °C; Produtos detectados a comprimento de onda a 220 nm com modo de ionização positiva.

[0114] Condição Gemini:Coluna: Phenomenex Gemini C18, 3 um, 4,6x150 mm; Grad. T: 10 min; Taxa de Fluxo: 1.0 mL/min.; Gradiente Solvente: 30 a 100% de B; Onda: 220 nm. (A = 5% de MeCN - 90% de H2O - 0,1% de TFA; B = 95% de MeCN - 5% de H2O - 0,1% de TFA).

EXEMPLOS

[0115] Os seguintes exemplos ilustram as modalidades particulares e preferidas da presente invenção e não limitam o escopo da presente invenção. Abreviações e símbolos químicos, bem como, abreviações e símbolos científicos seus significados usuais e habituais, a menos que de outro modo especificado. Abreviações adicionais empregadas nos exemplos e em outro lugar neste pedido são definidas acima. Intermediários comuns são geralmente úteis para a preparação de mais de um exemplo e são identificados sequencialmente (por exemplo, Intermediário 1, Intermediário 2, etc. e são abreviados como Int. 1, Int. 2, etc. Compostos dos exemplos são identificados pelo exemplo e etapa nos quais eles foram preparados (por exemplo, "1-A" denota o Examplo 1, etapa A), ou pelo exemplo apenas onde o composto foi o composto título do exemplo (por exemplo, "1" denota o composto título de Exemplo 1). Em alguns casos preparações alternativas de intermediários ou exemplos são descritas. Frequentemente químicos versados na técnica de síntese podem conceber preparações alternativas que podem ser desejáveis com base em uma ou mais considerações, tais como tempo de reação mais curto, materiais de partida menos caros, facilidade de operação, passíveis de catálise, evitação de reagentes tóxicos, acessibilidade de instrumentação especializada, e número diminuído de etapas lineares, etc. A intenção de descrever preparações alternativas foi também possibilitar a preparação dos exemplos desta invenção. Em alguns casos alguns grupos funcionais nos exemplos e reivindicações delineados podem ser substituídos por substituições biostérica bem conhecida na técnmica, por exemplo, substituição de um grupo de ácido carboxílico com uma porção tetrazol ou fosfato.

[0116] Esses experimentos especificando que eles foram realizados em um forno micro-ondas foram conduzidos em um forno SmithSynthesizer™ fabricado por Personal Chemistry ou um forno micro-ondas Discover™ fabricado por CEM corporation. Os fornos micro-ondas geram uma temperatura que pode ser selelcionada ser entre 60 e 250°C. Os fornos micro-ondas automaticamente monitoram a pressão que ficou entre 0 - 21,09 kg/cm2 (0-300 PSI). Os tempos de retenção de reação e pontos de ajuste de temperatura são reportados. Intermediário 1 1-Amino-3-(4-bromofenil)ciclopentanocarboxilato de (1R,3S)-metila Intermediário 1A: (S)-3-(4-bromofenil)ciclopentanona

[0117] Uma solução de ácido 4-bromofenilborônico (20 g, i00 mmol) em 1,4-dioxano (120 mL) em um frasco de 500 ml foi purgado com nitrogênio durante 5 minutos. S-BINAP (0,992 g, 1,593 mmol) e tetrafluoroborato de bis(norbornadieno)ródio (I) (0,559 g, 1,494 mmol) foram adicionados sequencialmente à solução sob uma pressão positiva de nitrogênio. Após 2 horas de agitação em temperatura ambiente, água (20 mL) foi adicionada seguida por ciclopent-2-enona (8,06 mL, 100 mmol) e Et3N (13,88 mL, 100 mmol). A mistura foi deixada agitar em temperatura ambiente durante 16 horas. Os sólidos escuros resultantes foram removidos por filtração e o filtrado foi vertido em 250 ml de acetato de etila. A solução foi lavada com água duas vezes e a camada orgânica foi concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (dividido em duas bateladas, cada executada sobre uma coluna de sílica de 330 g, 0% - 25% de acetato de etila em hexano) para dar origem a 12,1 gramas de (S)-3-(4- bromofenil) ciclopentanona. Pureza de HPLC foi >98% e análise de HPLC quiral indicou aproximadamente 90% ee. O material foi também purificado sob a SFC quiral usando as seguintes condições: Instrumento: Berger SFC MGIII; Condições de Preparação: Coluna: ChiralPak AD-H 25 X 5 cm, 5 μm; Temperatura de Coluna 40°C; Taxa de fluxo: 200 ml/min; Fase Móvel: CO2/ MeOH = 80/20; Comprimento de onda do detector: 225 nm; Volume de Injeção de Condições Analíticas 1,0 ml; Preparação da Amostra: 12,1 g em 210 mL de MeOH (Conc. 60 mg/ml); Coluna: ChiralPak AD 25 X 0,46 cm, 10 μm; Temperatura de Coluna 40°C; Taxa de fluxo: 2,0 min; Fase Móvel: CO2/ MeOH = 70/30; Comprimento de onda do detector: 220 nm; Volume de Injeção 5 μL.

[0118] O enantiômero desejado (isômero maior) foi isolado e nomeado como "PK2" com base na ordem de eluição. A pureza enantiomérica do isômero isolado foi determinada ser maior do que 99,6% sobre SFC/UV área% a 220 nm. Após concentração, 10,5 gramas do enantiômero desejado foram recuperados. Tempo de retenção por HPLC = 8,19 min (condição G); LC/MS M+1 = 240,08; 1H RMN ((400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,43-7,51 (2 H, m), 7,10-7,19 (2 H, m), 3,32- 3,46 (1 H, m), 2,67 (1 H, dd, J=18,27, 7,48 Hz), 2,39-2,54 (2 H, m), 2,23-2,39 (2 H, m), 1,97 (1 H, ddd, J=12,98, 11,00, 9,02 Hz). Intermediário 1B: (7S)-7-(4-bromofenil)-1,3-diazaespiro[4,4]nonano-2,4- diona

[0119] Um total de 9,8 g de (S)-3-(4-bromofenil)ciclopentanona foi usado, dividido em duas bateladas cada contendo 4,9 g. As duas bateladas foram processadas sob condições idênticas como descrito abaixo.

[0120] A uma mistura de (S)-3-(4-bromofenil)ciclopentanona (4,9 g, 20,49 mmol) e cianeto de potássio (1,935 g, 29,7 mmol) em EtOH (40 mL) e água (20 mL) em uma vaso de pressão de vidro foi adicionado carbonato de amônio (4,92 g, 51,2 mmol). O vaso de reação foi selado e colocado em um banho de óleo aquecido a 80 °C durante 24 horas, resultando na formação de um sólido branco. Após resfriar o vaso de reação com um banho de gelo, o vaso foi aberto e 30 ml de água foram adicionados resultando na formação de sólidos adicionais. Os sólidos foram coletados por filtração, lavados duas vezes com 5 ml de água, em seguida secados sob vácuo elevado. As duas bateladas foram combinadas (total 13,9 g de (7S)-7-(4-bromofenil)-1,3- diazaespiro[4,4]nonano-2,4-diona) e o material foi usado sem nova purificação para as etapas subsequentes. Tempo de retenção por HPLC = 0,82 min (condição G) LC/MS M+1 = 331,1. 1H RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 7,43 (2 H, d, J=7,7 Hz), 7,22 (2 H, dd, J=8,4, 6,2 Hz), 2,31-2,43 (1 H, m), 2,17 (3 H, d, J=9,9 Hz), 1,79-2,06 (3 H, m). Intermediário 1C: ácido (3S)-1-amino-3-(4- bromofenil)ciclopentanocarboxílico

[0121] Ao (7S)-7-(4-bromofenil)-1,3-diazaespiro[4,4]nonano-2,4- diona (13,9 g, 45,0 mmol) em 1,4-dioxano (40 mL) em um frasco de base redonda foi adicionado NaOH aquoso (2 N, 100 mL, 200 mmol). As misturas foram aquecidas para 95 °C e agitadas durante 24 horas. NaOH adicional (25 mL, 50 mmol) foi adicionado e aquecimento foi continuado durante mais dois dias. A solução foi resfriada com um banho de gelo, neutralizada com HCl a 5 N para aproximadamente pH 7 resultando na formação de um precipitado branco. Os sólidos foram coletados por filtração e secados sob vácuo elevado durante 2 dias para fornecer 14 g de ácido (3S)-1-amino-3-(4- bromofenil)ciclopentanocarboxílico como sólido branco. O material foi usado diretamente na etapa subsequente sem nova purificação. Tempo de retenção por HPLC = 0,64 min (condição G) LC/MS M+1 = 284,1 / 286,1. Intermediário 1D: 1-amino-3-(4-bromofenil)ciclopentanocarboxilato de (3S)-metila

[0122] A uma mistura heterogênea de ácido (3S)-1-amino-3-(4- bromofenil)ciclopentanocarboxílico (14 g, 49,3 mmol) em MeOH (250 mL) foi adicionado cloreto de tionila (36,0 mL, 493 mmol) gota a gota durante um período de 20 minutos em temperatura ambiente por meio de um funil adicional (exotérmico). A mistura de reação foi colocada em um banho de óleo fixado a 70°C durante 4 horas. O solvente foi removido sob vácuo, com o resíduo sendo dissolvido em acetato de etila (200 mL) e lavado duas vezes com NaOH a 1 N. A camada orgânica foi em seguida secada sobre Na2SO4 e concentrada para fornecer 10,8 g de 1-amino-3-(4-bromofenil)ciclopentanocarboxilato de (3S)-metila. Tempo de retenção por HPLC = 0,68 min (condição G); LC/MS M+1 = 298/300. Intermediário 1: 1-amino-3-(4-bromofenil)ciclopentanocarboxilato de (1R,3S)-metila

[0123] A mistura de diastereômeros (I-1D, 9,5 g) foi separada por SFC quiral. A atribuição estereoquímica absoluta de Intermediário 1 e seu diastereômero foi anteriormente descrita (Wallace, G. A. et al. J. Org. Chem. 2009, 74, 4886-4889). Detalhes experimentais: Instrumento: Preparativo: Thar SFC350; Analítico: SFC analítico Berger; Condições Preparativas: Coluna: Lux-Cellulose-4 25 X 3 cm, 5 μm; Temperatura de Coluna: 35°C; Taxa de fluxo: 200 ml/min; Fase Móvel: CO2/(MeOH com 0,1% de DEA) = 87/13; Comprimento de onda do detector: 220 nm; Volume de Injeção: 0,6 ml; Preparação da Amostra: 9,5 g em 400 ml de MeOH (Conc, 23,7 mg/ml). Condições Analíticas: Coluna: Lux-Cellulose-4 25 X 0,46 cm, 5 μm; Temperatura de Coluna 35°C; Taxa de fluxo: 3 ml/min; Fase Móvel: CO2/ (MeOH com 0,1% de DEA) = 85/15; Comprimento de onda do detector: 220 nm; Volume de Injeção: 5 μL. Intermediário 1 foi Pico 2: 4,06 g; Tempo de Retenção = 6,64 min sobre as condições de SFC quiral analítica acima. Pureza ótica: 98,2%; LC/MS M+1 = 298/300; Pico 1: 3,96 g; Tempo de Retenção = 5,47 min sobre as condições de SFC quiral analítica acima. Pureza ótica: 99,4%. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,89 (br. s., 2H), 7,51 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,34 (d, J=8,4 Hz, 2H), 3,80 (s, 3H), 2,59 (dd, J=13,6, 7,5 Hz, 2H), 2,30-1,94 (m, 5H). Pico 1: 3,96 g; Tempo de Retenção = 5,47 min sobre as condições de SFC quiral analítica acima. Pureza ótica: 99,4%. Preparação Alternativa: Sal de HCl de Intermediário 1

[0124] Uma solução de ácido (3S)-1-amino-3-(4- bromofenil)ciclopentanocarboxílico (10,2 g, 35,9 mmol) em MeOH (100 mL) foi resfriada em um banho de gelo, seguida por adição de SOCl2 (15,72 mL, 215 mmol) gota a gota. Após a adição ser concluída, a solução foi refluxada durante 3 horas em cujo tempo a reação foi determinada ser completa por EA-HPLC. A solução foi concentrada para remover o metanol para dar origem a um sólido. O sólido foi apreendido em 50 ml de 3% de H2O em EtOAc e bem agitado durante 30 minutos. O sólido branco formado foi coletado por filtração e o sólido branco úmido foi apreendido em 50 ml de 4% de H2O em 1,2-dimetoxietano e aquecido para 50°C durante 3 horas, em seguida agitado em temperatura ambiente durante a noite. O sólido branco resultante foi coletado por filtração e secado para dar origem ao produto cloridrato de 1-amino-3-(4-bromofenil)ciclopentanocarboxilato de (1R,3S)-metila (3,5 g, 10,35 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 6,6 min (condição H) LC/MS M+1 = 298/300. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,95 (br. s, 3H) 7,50-7,53 (m, 2H), 7,35-7,37 (m, 2H), 3,81 (s, 3H) 3,17-3,28 (m, 1H), 2,57 (dd, J=14, 7 Hz, 1H), 2,0 - 2,28 (m, 5H). Intermediário 2 1-amino-3-(4-bromofenil)ciclopentanocarboxilato de (1R,3R)-metila Intermediário 2A: (R)-3-(4-bromofenil)ciclopentanona

[0125] Uma solução de ácido 4-bromofenilborônico (20 g, 100 mmol) em 1,4-dioxano (120 mL) foi purgada com nitrogênio durante 10 min. (R)-BINAP (0,992 g, 1,593 mmol) e tetrafluoroborato de bis(norbornadieno)ródio (I) (0,559 g, 1,494 mmol) foram adicionados sequencialmente, e a suspensão foi sonicada durante 5 min. A mistura foi agitada durante 20 min. Água (20 mL) foi adicionada, e a mistura de reação tornou-se homogênea. Após 10 minutos, ciclopent-2-enona (8,06 mL, 100 mmol) foi adicionado, e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. Análise de HPLC e LCMS indicou que a reação prosseguiu, porém houve mais material de partida do que produto. A mistura de reação foi filtrada através de uma almofada de celita, e a celita foi lavada com acetato de etila (100 mL). O filtrado foi diluído com mais acetato de etila (150 mL), lavado com água (2x), lavado com solução salina, e secado sobre sulfato de sódio anidroso. A mistura de produto foi purificada por cromatografia de sílica gel flash usando uma mistura de acetato de etila e hexano para fornecer (R)-3- (4-bromofenil)ciclopentanona (6,09 g, 25,5 mmol) como um sólido branco. O produto foi 98% puro por HPLC com um tempo de retenção = 2,11 min. (Condição J). LC/MS M+1 = 241. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,57-7,39 (m, 2H), 7,22-7,06 (m, 2H), 3,39 (ddd, J=10,9, 6,8, 4,1 Hz, 1H), 2,67 (dd, J=18,2, 7,4 Hz, 1H), 2,57-2,38 (m, 2H), 2,38-2,21 (m, 2H), 1,99-1,85 (m, 1H).

[0126] HPLC quiral indicou que o composto foi 90-95% enantiomericamente puro.

[0127] O composto (6,03 g) foi também purificado por SFC quiral usando as condições listadas abaixo. O enantiômero desejado foi isolado e nomeado como "PK1" na ordem de eluição. A pureza enantiomérica do isômero isolado foi determinada ser maior do que 99,9% sobre área % de SFC/UV a 220 nm. O enantiômero desejado (5,45 g) foi recuperado após concentração. Detalhes experimentais: Instrumento: Berger SFC MGIII; Condições Preparativas; Coluna: ChiralPak AD-H 25 X 3 cm, 5 μm; Temperatura de Coluna: 40°C; Taxa de fluxo: 180 ml/min; Fase Móvel: CO2/ MeOH = 87/13; Comprimento de onda do detector: 225 nm; Volume de Injeção: 0,5 ml; Preparação da Amostra: 6,03 g em 100 mL de MeOH (Conc. 60 mg/ml). Condições Analíticas: Coluna: ChiralPak AD 25 X 0,46 cm, 10 μm; Temperatura de Coluna: 40°C; Taxa de fluxo: 2,0 min; Fase Móvel: CO2/ MeOH = 70/30; Comprimento de onda do detector: 220 nm; Volume de Injeção: 5 μL. Intermediário 2B: (7R)-7-(4-bromofenil)-1,3-diazaespiro[4,4]nonano- 2,4-diona

[0128] A uma mistura de (R)-3-(4-bromofenil)ciclopentanona (5,4 g, 22,58 mmol) e cianeto de potássio (2,132 g, 32,7 mmol) em EtOH (40 mL) e água (20 mL) em um vaso de pressão de vidro foi adicionado carbonato de amônio (5,42 g, 56,5 mmol). O vaso de reação foi selado e colocado em um banho de óleo aquecido a 80°C durante 20 horas. Uma grande quantidade de sólido de fluxo livre branco formou-se na solução amarela pálida. Análise por LCMS indicou material de partida restante, então a reação foi continuada durante mais 24 horas. Como a conversão foi incompleta, a temperatura do banho de óleo foi elevada para 120°C. O sólido branco dissolveu-se completamente na temperatura mais alta. Após 3 horas, a solução foi resfriada para temperatura ambiente. A solução foi também resfriada em um banho de gelo, água (30 mL) foi adicionada e o sólido branco resultante foi coletado por filtração, lavado com água, secado ao ar, em seguida colocado sob vácuo elevado para dar origem ao composto alvo (6,9 g, 22,32 mmol) que foi usado para subsequente reação sem purificação adicional. Tempo de retenção por HPLC = 0,81 min (condição G); LC/MS M+1 = 309/ 311; 2M+H = 619. Intermediário 2C: ácido (3R)-1-amino-3-(4- bromofenil)ciclopentanocarboxílico

[0129] Uma solução de (7R)-7-(4-bromofenil)-1,3- diazaespiro[4,4]nonano-2,4-diona (6,80 g, 22 mmol) em dioxano (20 mL) e NaOH (aq a 2 N) (120 mL, 240 mmol) foi aquecida em um banho de óleo fixado a 95 °C. A solução amarela pálida clara resultante foi deixada agitar durante o fim de semana. A solução foi resfriada em um banho de gelo e neutralizada para aproximadamente pH 7 com HCl a 6 N resultando na formação de um precipitado. Os sólidos foram coletados e deixados secar a ar durante a noite. O sólido branco foi suspenso em etanol quente (~100 mL) e novamente coletado por filtração e o sólido foi secado ao ar, em seguida colocado sob vácuo elevado. (5,8 g, 20,41 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 0,64 min (condição G); LC/MS M+1 = 284/ 286. 1H RMN (500 MHz, METHANOL- d4) δ 7,52-7,38 (m, 2H), 7,31-7,17 (m, 2H), 3,55-3,40 (m, 1H), 2,68 (dd, J=13,3, 6,7 Hz, 1H de diastereômero simples), 2,58-2,39 (m, 1H), 2,262,15 (m, 1H), 2,10-1,98 (m, 1H), 1,98-1,81 (m, 1H), 1,70 (dd, J=13,2, 11,8 Hz, 1H de diastereômero simples). Intermediário 2D: 1-amino-3-(4-bromofenil)ciclopentanocarboxilato de (3R)-metila

[0130] Em um frasco de base redonda de 500 ml contendo uma barra agitadora, ácido (3R)-1-amino-3-(4- bromofenil)ciclopentanocarboxílico (5,4 g, 19,00 mmol) foi suspenso em metanol (100 mL) para dar origem a uma suspensão branca. Um funil de gotejamento foi carregado com cloreto de tionila (13,87 mL, 190 mmol) e o reagente foi adicionado gota a gota em uma taxa para manter a mistura após atingir a temperatura de refluxo. Após a adição ser concluída, a solução leitosa amarela pálida foi colocada em um banho de óleo fixado a 70°C e um condensador de refluxo resfriado ao ar foi ligado. A solução foi aquecida durante diversas horas e em seguida deixada resfriar para temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi evaporado sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila, lavado com NaOH a 1 N (aq), lavado com água, em seguida secado sobre MgSO4 antes de ser filtrado e concentrado. O sólido amarelo resultante foi suspenso em acetato de etila quente, com sonicação e em seguida filtrado. O sólido foi secado ao ar e colocado sob vácuo e o filtrado foi evaporado para dar origem a Sólido 1: sólido branco, 4,28 g de LCMS mostram >98% de AP. O filtrado foi evaporado para dar origem a um sólido amarelo (1,89 g). O sólido do filtrado foi suspenso em uma quantidade mínima de acetato de etila quente, com sonicação, em seguida resfriado (banho de gelo) e filtrado frio. O sólido foi secado ao ar e colocado sob vácuo para dar origem a Sólido 2: 1,44 g de sólido branco. Sólidos combinados (5,7g). Intermediário 2: 1-amino-3-(4-bromofenil)ciclopentanocarboxilato de (1R,3R)-metila

[0131] Os sólidos combinados de 1-amino-3-(4- bromofenil)ciclopentanocarboxilato de (3R)-metila (4 g) foram separados usando separação de SFC quiral dos diastereômeros. A atribuição estereoquímica absoluta de Intermediário 2 e seu diastereômero foi anteriormente descrita (Wallace, G. A. et al. J. Organic Chem. 2009, 74, 4886-4889). Detalhes experimentais: Instrumento: Preparativo: Thar SFC350; Analítico: MDS analítico Thar. Condições Preparativas: Coluna: ChiralPak AD-H 25 X 5 cm, 5 μm; Temperatura de Coluna: 35 °C; Taxa de fluxo: 300 ml/min; Fase Móvel: CO2/ (MeOH com 0,1% de DEA) = 82/18; Comprimento de onda do detector: 230 nm; Volume de Injeção: 0,4-0,5 ml; Preparação da Amostra: 4 g em 120 ml de MeOH (Conc. 33 mg/ml). Condições Analíticas: Coluna: ChiralPak AD-H 25 X 0,46 cm, 5 μm; Temperatura de Coluna: 35°C; Taxa de fluxo: 3 ml/min; Fase Móvel: CO2/ (MeOH com 0,1% de DEA) = 80/20; Comprimento de onda do detector: 222 nm; Volume de Injeção: 5 μL. Intermediário 2 foi Pico 1: 1,56 g (99,3% de pureza ótica a 222 nm) Tempo de Retenção = 7,18 min sobre SFC quiral analítico. 1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) δ 7,45-7,39 (m, 2H), 7,23-7,17 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,40-3,48 (m, 1H), 2,40 (ddd, J=13,0, 8,9, 3,6 Hz, 1H), 2,28-2,21 (m, 1H), 2,18 (dd, J=13,0, 11,7 Hz, 1H), 2,04 (dd, J=13,0, 7,2 Hz, 1H), 1,88-1,79 (m, 1H), 1,79-1,70 (m, 1H). Pico 2: 1,8 g (97,2% de pureza ótica a 222 nm). Tempo de Retenção = 7,71 min sobre SFC quiral analítico. 1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) δ 7,45-7,38 (m, 2H), 7,267,20 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,28-3,20 (m, 1H), 2,66-2,57 (m, 1H), 2,25 (ddd, J=12,8, 11,0, 7,2 Hz, 1H), 2,10 (dt, J=12,2, 6,8 Hz, 1H), 2,03-1,93 (m, 1H), 1,84 (ddd, J=13,0, 7,8, 2,2 Hz, 1H), 1,65 (dd, J=13,3, 11,1 Hz, 1H). Intermediários 3-I e 3-II cloridrato de 1-amino-3-(4-iodofenil)ciclopentanocarboxilato de (1R,3S)- metila (I-3I) e cloridrato de 1-amino-3-(4- iodofenil)ciclopentanocarboxilato de (1R,3R)-metila (I-3II) Intermediário 3A: 3-(4-iodofenil)ciclopentanona

[0132] A uma solução de ciclopent-2-enona (3,39 g, 0,0407 mol), acetato de sódio (6,659 g, 0,0813 mol) e ácido (4-iodofenil)borônico (10 g, 0,0407 mol) em ácido acético (325 mL) foram adicionados acetato de paládio (II) (0,9728 g, 0,00406 mol) e cloreto de antimônio (III) (0,9279 g, 0,00406 mol) sob uma atmosfera de nitrogênio. Após ser agitado durante 2 horas a 25°C, a precipitação preta foi filtrada e o filtrado foi diluído com solução salina e em seguida extraído duas vezes com diclorometano. A extração orgânica foi agitada com bicarbonato de sódio saturado durante 30 minutos, em seguida lavada com solução salina e secada sobre sulfato de sódio. Remoção do solvente resultou em um óleo amarelo. Outra purificação (coluna flash, eluente de clorofórmio) forneceu 6,5 g de 3-(4-iodofenil)ciclopentanona como um sólido branco. Etapa B: 1-amino-3-(4-iodofenil)ciclopentanocarboxilato de metila

[0133] A uma solução de 3-(4-iodofenil)ciclopentanona (10 g, 0,03496 mol) em amônia metanólica (7 M, 105 mL) foram adicionados cianeto de sódio (3,42 g, 0,06993 mmol) e cloreto de amônio (3,74 g, 0,06993 mmol). A mistura foi deixada agitar em temperatura ambiente durante 72 horas. Bicarbonato de sódio aquoso foi adicionado e a mistura de reação foi extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi evaporada sobre sulfato de sódio na presença de destilação a vácuo e o composto cru obtido foi usado como tal para a subsequente reação. A mistura crua de 1-amino-3-(4-iodofenil)ciclopentanocarbonitrila foi dissolvida em ácido hidroclórico concentrado e refluxada a 70°C durante a noite. A mistura de reação foi destilada e em seguida codestilada com água. Acetona foi adicionada à reação, que foi agitada durante 30 minutos e os sólidos resultantes (7 g) foram filtrados. Os sólidos foram usados diretamente na etapa subsequente. Os sólidos foram dissolvidos em metanol (140 mL) e cloreto de tionila (19,9 g, 0,169184 mol) foi adicionado sob nitrogênio, na presença de resfriamento por banho de água gelada. A mistura de reação foi em seguida deixada agitar a 70°C durante a noite. O metanol foi removido por destilação e bicarbonato de sódio aquoso foi adicionado. A solução foi extraída com acetato de etila. A solução foi secada sobre sulfato de sódio e concentrada para fornecer o produto (4,5 g) como um óleo marrom. Etapa C: Intermediários 3I e 3II

[0134] 1-Amino-3-(4-iodofenil)ciclopentanocarboxilato de metila (aproximadamente 5 g) foi purificado por SFC quiral sob as condições descritas abaixo. Os quatro isômeros foram isolados e nomeados "Pk1", "Pk2", e "Pk3" e "Pk4" na ordem de eluição. A pureza diastereoisomérica de cada isômero isolado foi determinada sobre a SFC/ UV/área% a 220 nm e sumarizada abaixo. O metanol foi evaporado para fornecer os quatro isômeros individuais como óleos marrons avermelhados. Com base nos dados de RMN de próton, Picos 1 e 4 foram enantioméricos e Picos 2 e 3 foram enantioméricos. Configuração absoluta foi estabilizada através de correlação para Intermediário 1A e Intermediário 1B após conversão para produtos comuns. Instrumento: Berger SFC MGIII. Condições Preparativas: Coluna: ChiralPak AD-H 25 X 5 cm, 5 μm; Temperatura de Coluna 35°C; Taxa de fluxo: 135 mL/min; Fase Móvel: CO2/(MeOH +0,5% de DEA) = 65/35; Volume de Injeção 0,7 mL; Comprimento de onda do detector 220 nm. Concentração de amostra (mg/mL) 30 mg/mL. Pureza diastereoisomérica (área %) de cada isomer

[0135] Intermediário 3I (Pk1): Tempo de retenção por HPLC = 10,62 min (condição I); LC/MS M+1 = 346,0. 1H RMN (400 MHz, METANOL- d4) δ 7,71-7,55 (m, J=8,1 Hz, 2H), 7,16-7,02 (m, J=8,1 Hz, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,28-3,10 (m, 1H), 2,61 (dd, J=13,2, 7,9 Hz, 1H), 2,31-2,19 (m, 1H), 2,15-2,05 (m, 1H), 2,03-1,91 (m, 1H), 1,88-1,79 (m, 1H), 1,64 (dd, J=13,1, 11,3 Hz, 1H).

[0136] Intermediário 3II (Pk3): Tempo de retenção por HPLC = 10,64 min (condição I); LC/MS M+1 = 346,0. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,71-7,56 (m, J=8,4 Hz, 2H), 7,18-7,01 (m, J=8,1 Hz, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,49-3,36 (m, 1H), 2,40 (ddd, J=12,7, 8,8, 3,4 Hz, 1H), 2,29-2,13 (m, 2H), 2,10-1,99 (m, 1H), 1,90-1,69 (m, 2H). Intermediário 4 (5R,7S)-7-(4-bromofenil)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona Intermediário 4A: ((1R,3S)-1-amino-3-(4-bromofenil)ciclopentil)metanol

[0137] A uma mistura de 1-amino-3-(4-bromofenil) ciclopentanocarboxilato de (1R,3S)-metila, HCl (15 g, 44,8 mmol) em MeOH (100 mL) a 0°C foi adicionado boro-hidreto de sódio (4 g, 106 mmol) porção a porção. A mistura de reação foi aquecida para temperatura ambiente e boro-hidreto de sódio foi adicionado porção a porção até a reação ser determinada ser completa por análise de HPLC. Água foi adicionada para saciar a reação. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada aquosa foi novamente extraída diversas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secadas com MgSO4, filtradas e concentradas. O produto (11 g) foi recuperado após concentração. Tempo de retenção por HPLC = 0,65 min (condição G); LC/MS M+1 = 272: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,51-7,40 (m, 2H), 7,27 (d, J=8,4 Hz, 2H), 3,32-3,20 (m, 2H), 3,09-2,92 (m, 1H), 2,11 (dd, J=12,9, 8,7 Hz, 1H), 1,98-1,87 (m, 1H), 1,80 (qd, J=11,1, 7,9 Hz, 1H), 1,69-1,58 (m, 1H), 1,48 (ddd, J=12,4, 7,9, 2,2 Hz, 1H), 1,32 (dd, J=12,8, 10,1 Hz, 1H). Intermediário 4:

[0138] A uma mistura de ((1R,3S)-1-amino-3-(4- bromofenil)ciclopentil)metanol (11 g, 40,7 mmol) e piridina (3,29 mL, 40,7 mmol) em dioxano (300 mL) foi adicionado 1,1'-carbonildiimidazol (19,81 g, 122 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 4 horas. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com HCl a 1 M, solução salina e NaHCO3 saturado. A mistura foi novamente extraída diversas vezes. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada para dar origem a 10,5 g de produto desejado como um sólido off-white. Tempo de retenção por HPLC = 0,87 min (condição G). LC/MS M+1 = 297,9; 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,45 (d, J=8,6 Hz, 2H), 7,12 (d, J=8,4 Hz, 2H), 6,42 (br. s., 1H), 4,41-4,21 (m, 2H), 3,17-2,91 (m, 1H), 2,34 (dd, J=13,3, 7,4 Hz, 1H), 2,23-2,11 (m, 2H), 2,01-1,90 (m, 2H), 1,88-1,74 (m, 1H). Intermediário 5 (5R,7R)-7-(4-bromofenil)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona Intermediário 5A: ((1R,3R)-1-amino-3-(4-bromofenil)ciclopentil)metanol

[0139] 1-Amino-3-(4-bromofenil)ciclopentanocarboxilato de (1R,3R)-metila (3,88 g, 13,01 mmol) foi dissolvido em MeOH (65,1 ml) e boro-hidreto de sódio (1,477 g, 39,0 mmol) foi adicionado porção a porção. Mais boro-hidreto de sódio foi adicionado (0,5 equiv a cada 1 h) porção a porção até a reação ser determinada ser completa por análise de HPLC. A reação foi descoberta estar completa após 2 horas. A mistura de reação foi saciada com água e diluída com acetato de etila. A camada aquosa foi novamente extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com NaCl saturado, secadas sobre MgSO4, filtradas e concentradas para dar origem a ((1R,3R)-1-amino-3-(4-bromofenil)ciclopentil)metanol (3,19 g, 11,81 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 0,68 min (cond); LC/MS M+1 = 272: 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,42 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,13 (d, J=8,4 Hz, 2H), 3,49 (s, 2H), 3,32-3,41 (m, 1H), 2,19-2,25 (m, 1H), 1,98-2,07 (m, 1H), 1,90-1,95 (m, 1H), 1,66-1,74 (m, 2H), 1,52-1,60 (m, 1H). Intermediário 5:

[0140] ((1R,3R)-1-amino-3-(4-bromofenil)ciclopentil)metanol (3,19 g, 11,81 mmol) foi dissolvido em THF (59,0 ml). Piridina (0,955 ml, 11,81 mmol) e 1,1’-carbonildiimidazol (5,74 g, 35,4 mmol) foram adicionados porção a porção. A mistura de reação foi agitada durante 4 horas e foi seguida por LCMS. Após conclusão, a mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCl a 1 M. A camada aquosa foi novamente extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com NaCl saturado, secadas sobre MgSO4, filtradas e concentradas para dar origem a (5R,7R)-7-(4-bromofenil)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (2,5 g, 8,44 mmol) após cromatografia flash (coluna de sílica gel de 24 g; eluente: hexano 2 CV seguido por um gradiente para 100% de EtOAc sobre 15 CV) Tempo de retenção por HPLC = 0,91 min (cond); LC/MS M+1 = 298. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,46 (d, J=8,5 Hz, 2H), 7,09 (d, J=8,5 Hz, 2H), 5,72- 5,81 (m, 1H), 4,35 (dd, J=13Hz, 8Hz, 2H), 3,19-3,24 (m, 1H), 2,382,44 (m, 1H), 2,15-2,26 (m, 1H), 2,11-2,14 (m, 1H), 1,99-2,05 (m, 1H), 1,79-1,85 (m, 1H), 1,65-1,72 (m, 1H). Intermediário 6 1-((Difenilmetileno)amino)ciclopent-3-enocarboxilato de metila

[0141] A uma mistura de etil éster de (N,N-difenilmetilleno)glicina (4 g, 14,96 mmol) em THF (3 mL) a 0°C foi adicionado bis(trimetilsilil)amida de lítio (16,46 mL, 16,46 mmol) gota a gota Durante 30 minutos. Após agitar durante 30 minutos, a solução resultante foi em seguida adicionada gota a gota a cis-1,4-dicloro-2-buteno (1,823 mL, 16,46 mmol) em THF (1 mL). Após 1 hora, bis(trimetilsilil)amida de lítio (14,96 mL, 14,96 mmol) foi adicionado a 0°C. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 8 horas antes de ser saciada por solução de NH4Cl aquosa saturada (30 mL) e água (10 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (3 x 20 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados sob pressão reduzida. O material cru foi filtrado através de um tampão curto de sílica e purificado por cromatografia de sílica gel. Tempo de retenção por HPLC = 5,06 min (condição H); LC/MS M+1 = 320. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,23-7,18 (m, 2H), 7,17-7,10 (m, 2H), 3,72-3,56 (m, 2H), 3,24-3,08 (m, 1H), 2,71 (s, 3H), 2,60 (t, J=7,6 Hz, 2H), 2,44 (ddd, J=13,4, 7,1, 1,3 Hz, 1H), 2,18 (t, J=7,6 Hz, 3H), 2,03-1,89 (m, 3H), 1,75 (t, J=12,8 Hz, 1H), 1,69-1,56 (m, 4H), 1,45-1,27 (m, 2H). Intermediário 7 (5R,7S)-7-(6-oxo-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona Intermediário 7A: 2-(4-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il) fenil)acetato de terc-butila

[0142] A uma mistura de (5R,7S)-7-(4-bromofenil)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (1 g, 3,38 mmol) em dioxano (10 mL) em temperatura ambiente foi adicionado bis(trimetilsilil)amida de lítio (3,71 mL, 3,71 mmol). A mistura foi agitada durante 30 minutos, em seguida 1,2,3,4,5-pentafenil-1'-(di-t-butilfosfino)ferroceno (0,121 g, 0,169 mmol), Pd2(dba)3 (0,155 g, 0,169 mmol) e cloreto de (2-(terc-butoxi)-2- oxoetil)zinco (II) (8,10 mL, 4,05 mmol) foram adicionados. A mistura de reação foi aquecida a 80 °C durante 2 horas, em seguida resfriada para temperatura ambiente, diluída com acetato de etila e lavada com HCl a 1 M. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/hexano (0 a 100% de EtOAc durante 20 minutos) para dar origem a 950 mg de 2-(4-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)fenil)acetato de terc-butila. Tempo de retenção por HPLC = 0,93 min (condição G); LC/MS M+1 = 332. Intermediário 7B: ácido 2-(4-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)fenil)acético

[0143] A uma mistura de 2-(4-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)fenil)acetato de terc-butila (1 g, 3,02 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionado TFA (10 mL). Após 2 h, a solução foi concentrada em vácuo e usada como tal para a subsequente etapa sem nova purificação. Tempo de retenção por HPLC = 0,65 min (condição G); LC/MS M+1 = 276. Intermediário 7:

[0144] A uma mistura de ácido 2-(4-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)fenil)acético (800 mg, 2,91 mmol) em DCM (20 mL) foram adicionados cloreto de oxalila (1 ml, 11,42 mmol) e algumas gotas de DMF. Após uma hora, a mistura de reação foi concentrada em vácuo. O resíduo foi novamente dissolvido em DCM (20 mL) em um vaso de pressão de vidro. Cloreto de alumínio granular (1550 mg, 11,62 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi resfriada para -78°C. Etileno foi borbulhado através de uma solução durante 5 minutos e em seguida o vaso de reação foi selado. A mistura de reação foi deixada lentamente aquecer para temperatura ambiente e agitada durante 4 horas. A mistura foi vertida sobre gelo, diluída com diclorometano e lavada com HCl a 1 M. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (80 g) usando um gradiente de MeOH/DCM (0-10% de MeOH sobre 13CV). O produto contendo frações foram coletados e secados em vácuo para dar origem a 770 mg de (5R,7S)-7-(6-oxo- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona. Tempo de retenção por HPLC = 0,74 min (condição G); LC/MS M+1 = 286: 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,20-7,00 (m, 3H), 5,49 (br. s., 1H), 4,45-4,25 (m, 2H), 3,59 (s, 2H), 3,08 (t, J=6,8 Hz, 3H), 2,58 (t, J=6,7 Hz, 2H), 2,38 (dd, J=13,2, 7,3 Hz, 1H), 2,27-2,11 (m, 2H), 2,051,92 (m, 2H), 1,92-1,74 (m, 1H). Intermediário 8 Trifluorometanossulfonato de 6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-3,4-di-hidronaftalen-2-ila

[0145] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-oxo-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (340 mg, 1,192 mmol) e DMPU (0,431 mL, 3,57 mmol) em THF (10 mL) a -78 °C foi adicionado LDA (1,456 mL, 2,62 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 30 minutos, em seguida metanossulfonamida de 1,1,1-trifluoro- N-fenil-N-(trifluorometil)sulfonila (639 mg, 1,787 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida para 0°C. Após 1 hora, a reação foi saciada com água. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl aquoso saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/hexano (0 a 100% de EtOAc durante 20 minutos) para dar origem a 400 mg de trifluorometanossulfonato de 6-((5R,7S)-2-oxo-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-3,4-di-hidronaftalen-2-ila. Tempo de retenção por HPLC = 1,01 min (condição G); LC/MS M+1 = 418. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,17-6,95 (m, 3H), 6,74 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 4,48-4,20 (m, 2H), 3,17-2,95 (m, 3H), 2,81-2,60 (m, 2H), 2,33 (dd, J=13,3, 7,2 Hz, 1H), 2,24-2,08 (m, 2H), 2,05-1,74 (m, 3H). Intermediário 9 Trifluorometanossulfonato de 6-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-3,4-di-hidronaftalen-2-ila

[0146] A uma mistura de (5R,7R)-7-(6-oxo-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (250 mg, 0,876 mmol) e DMPU (317 μl, 2,63 mmol) em THF (10 mL) a -78°C foi adicionado LDA (1071 μl, 1,928 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 30 minutos, em seguida metanossulfonamida de 1,1,1-trifluoro- N-fenil-N-(trifluorometil)sulfonila (470 mg, 1,314 mmol) em THF (4381 μl) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida para 0°C e agitada durante 1 hora. LCMS mostrou a conversão ser completa. A reação foi saciada com água. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (80 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 12 CV). Produto contendo frações foi combinado, concentrado, e secado em vácuo para dar origem a trifluorometanossulfonato de 6-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-3,4-di-hidronaftalen-2-ila (200 mg, 0,479 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 1,12 min (condição G) LC/MS M+1 = 418,3. Intermediário 10 (5R,7R)-7-(6-oxo-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona ntermediário 10A: 2-(4-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7- il)fenil)acetato de terc-butila

[0147] A uma solução de (5R,7R)-7-(4-bromofenil)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (Int. 4, 2,1 g, 7,09 mmol) em THF (25,3 ml) em temperatura ambiente foi adicionado LiHMDS (7,80 ml, 7,80 mmol). A solução foi agitada durante 15 min. Em seguida, Pd2(dba)3 (0,195 g, 0,213 mmol), 1,2,3,4,5-pentafenil-1'-(di-t-butilfosfino)ferroceno (0,151 g, 0,213 mmol), e brometo de (2-(terc-butoxi)-2-oxoetil)zinco (II), tetra- hidrofurano (7,07 g, 21,27 mmol) foram sequencialmente adicionados. A suspensão foi agitada a 24 °C durante 2 h. Análise de LCMS mostrou consumação completa do material de partida. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com HCl a 1 M. A camada orgânica foi secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando hexano: Acetona 100:0 a 0:100 sobre 25 CV. 2-(4-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)fenil)acetato de terc-butila (2,35 g, 7,09 mmol) foi isolado. Tempo de retenção por HPLC = 0,95 min (condição I): LC/MS M+1 = 332: 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,27-7,21 (m, 2H), 7,21-7,15 (m, 2H), 5,11 (br. s., 1H), 4,40-4,26 (m, 2H), 3,53 (s, 2H), 3,22-3,01 (m, 1H), 2,36 (dd, J=13,2, 7,3 Hz, 1H), 2,25-2,10 (m, 2H), 2,04-1,92 (m, 2H), 1,91-1,76 (m, 1H), 1,47 (s, 9H). Intermediário 10:

[0148] O líquido marrom 2-(4-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)fenil)acetato de terc-butila (2,35 g, 7,09 mmol) foi dissolvido em DCM (60 mL) seguido pela adição de ácido trifluoroacético (20 mL, 260 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora em cujo tempo o solvente foi removido sob pressão reduzida. O material resultante foi diluído em DCM (60 mL), purificado por extração de ácido/base e colocado sob vácuo durante 1 hora. A goma marrom resultante ácido 2-(4-((5R,7R)- 2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)fenil)acético (1,952 g, 7,09 mmol) foi dissolvida em DCM (60 mL) seguida pela adição de cloreto de oxalila (1,862 mL, 21,27 mmol), e DMF (0,027 mL, 0,355 mmol). A solução resultante foi agitada até a evolução de gás cessar (cerca de 30 min) em temperatura ambiente. LCMS de uma alíquota saciado com MeOH mostrou consumo completo do ácido (RT = 0,65 min, Condição I) e o aparecimento do metil éster presumido devido ao saciamento com metanol (RT = 0,77 min, condição I) como o único produto. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o produto foi colocado sob vácuo. A goma marrom foi transferida para um tubo selado com DCM (60 mL) (não completamente dissolvido, uma suspensão marrom foi obtida). A mistura de reação foi resfriada para -78°C seguida pela adição de cloreto de alumínio granular (2,84 g, 21,27 mmol). Etileno foi borbulhado através da solução durante 7 min e o tubo foi selado. Um precipitado formou-se e a mistura de reação foi agitada a -78°C durante 15 min e em seguida deixada atingir temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 2 h em temperatura ambiente e em seguida despressurizada. Análise de LCMS mostrou desaparecimento de material de partida e aparecimento do produto de tetralona. A mistura de reação foi vertida sobre gelo, diluída com DCM e agitada até o gelo derreter. A camada orgânica foi lavada com solução salina, secada e concentrada sob pressão reduzida. Purificação sobre sílica gel forneceu (5R,7R)-7-(6-oxo-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (1,05 g, 3,68 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 0,74 min (condição I); LC/MS M+1 = 286; 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,23-7,11 (m, 3H), 5,68 (br. s., 1H), 4,45-4,30 (m, 2H), 3,59 (s, 2H), 3,31-3,18 (m, 1H), 3,08 (t, J=6,8 Hz, 2H), 2,58 (t, J=6,7 Hz, 2H), 2,42-2,39 (m, 1H), 2,32-2,15 (m, 2H), 2,09-1,99 (m, 1H), 1,91- 1,83 (m, 1H), 1,82-1,72 (m, 1H). Intermediário 12 6-Bromo-2-hexil-3,4-di-hidroisoquinolin-1(2H)-ona ,

[0149] A uma solução turva agitada de 6-bromo-3,4-di-hidro-2H- isoquinolin-1-ona (0,6 g, 2,65 mmol) e 1-iodo-hexano (0,783 mL, 5,31 mmol) em tetra-hidrofurano anidroso (30 mL) foi adicionada dispersão de óleo mineral a 60% de hidreto de sódio (0,212 g, 5,31 mmol) porção a porção durante 20 min. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente sob nitrogênio durante 1 h e 65°C durante 3 h. Mais hidreto de sódio (0,25 g) e 1-iodo-hexano (1 mL) foram adicionados. A mistura foi agitada a 65°C durante 1 h. Após DMF anidroso (3 mL) ser adicionado em temperatura ambiente, a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2,5 dias. A reação foi saciada com solução de cloreto de amônio aquosa saturada (6 mL) e água (3 mL). Hexanos (20 mL) foram adicionados. A solução orgânica foi separada e lavada com água (10 mL). As soluções aquosas combinadas foram extraídas com acetato de etila (3 x 5 mL). As soluções orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio anidroso e concentradas. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 24 g, eluição gradiente de 0 a 50% de acetato de etila em hexanos) forneceu 6-bromo-2-hexil-3,4-di-hidroisoquinolin-1(2H)-ona (667 mg, 2,150 mmol) como um sólido amarelado. LC/MS M+1 = 310, 312. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,94 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,46 (dd, J=8,3, 1,9 Hz, 1H), 7,36-7,30 (m, 1H), 3,60-3,46 (m, 4H), 2,96 (t, J=6,6 Hz, 2H), 1,68-1,57 (m, 2H), 1,32 (br. s., 6H), 0,93-0,83 (m, 3H). Intermediário 13 6-Bromo-2-(pentiloxi)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno Etapa A: 6-bromo-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-ol

[0150] A uma mistura agitada de 6-bromo-3,4-di-hidronaftalen- 2(1H)-ona (2,00 g, 8,89 mmol) em etanol (15 mL) e diclorometano (5 mL) foi adicionado boro-hidreto de sódio (0,336 g, 8,89 mmol) porção a porção em temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A reação foi saciada com acetona (2 mL). Após ser agitada em temperatura ambiente durante 1 h, a mistura foi concentrada. O resíduo foi dividido entre solução de cloreto de amônio aquosa saturada (5 mL), água (3 mL), e acetato de etila (10 mL). A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (3 x 3 mL). As soluções de acetato de etila combinadas foram secadas (sulfato de sódio anidroso) e concentradas sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 40 g, eluição gradiente de 5 a 100% de acetato de etila em hexanos) forneceu 6-bromo-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-ol (1,55 g, 6,83 mmol) como um líquido. LC/MS [M- H2O]+1 = 209, 211. Separação por SFC quiral (AD-H (5 x 25 cm), 15% de MeOH em CO2, 300 ml/min, 220 nm, 35°C) forneceu PK1 (560 mg) e PK2 (580 mg) como líquidos amarelos. Ambos os isômeros foram convertidos para seus amil éteres como mostrado abaixo. Etapa B: Intermediário 13

[0151] A uma mistura agitada de 6-bromo-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-ol (0,58 g, 2,55 mmol) (PK2) em tetra-hidrofurano anidroso (20 mL) foi adicionado dispersão de óleo mineral a 60% de hidreto de sódio (0,511 g, 12,77 mmol) porção a porção. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 15 minutos antes de iodeto de n-amila (1,340 mL, 10,22 mmol) ser adicionado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente sob nitrogênio durante dois dias. Mais dispersão de óleo mineral a 60% de hidreto de sódio (0,511 g, 12,77 mmol), iodeto de n-amila (1,340 mL, 10,22 mmol), e tetra-hidrofurano anidroso (20 mL) foram adicionados e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante dois dias. Solução de cloreto de amônio aquosa saturada (9 mL) foi adicionada lentamente. A mistura foi concentrada. O resíduo aquoso foi extraído com acetato de etila (4 x 5 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados (sulfato de sódio anidroso) e concentrados sob pressão reduzida para fornecer um líquido. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 120 g, eluição gradiente de 0 a 5% de acetato de etila em hexanos) forneceu 6-bromo-2-(pentiloxi)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno (0,61 g, 2,052 mmol) como um líquido amarelo. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,24 -7,18 (m, 2H), 6,93 (d, J=7,9 Hz, 1H), 3,753,66 (m, 1H), 3,57-3,45 (m, 2H), 3,04-2,85 (m, 2H), 2,79-2,66 (m, 2H), 2,08-1,98 (m, 1H), 1,85-1,74 (m, 1H), 1,64-1,55 (m, 2H), 1,39-1,25 (m, 4H), 0,95-0,85 (m, 3H). Intermediário 14 6-bromo-2-hexilcroman Etapa A: 6-bromo-2-hexilcroman-4-ona

[0152] A uma mistura agitada de 5’-bromo-2’-hidroxiacetofenona (3,2 g, 14,88 mmol) e n-heptaldeído (2,199 mL, 16,37 mmol) em metanol (50 mL) foi adicionado pirrolidina (2,484 mL, 29,8 mmol) em temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura foi agitada a 70°C durante 2 horas e em temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi evaporado. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 330 g; eluição gradiente de 0 a 10% de acetato de etila em hexanos) forneceu 6-bromo-2-hexilcroman-4-ona (3,58 g, 11,50 mmol) como um líquido. Etapa B: Intermediário 14

[0153] A uma mistura agitada de 6-bromo-2-hexilcroman-4-ona (1,8 g, 5,78 mmol) em etanol (10 mL) foi adicionado boro-hidreto de sódio (0,109 g, 2,89 mmol). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente sob nitrogênio durante 2 horas antes de ser concentrada. O resíduo foi misturado com solução de cloreto de amônio aquosa saturada (5 mL), água (3 mL), e acetato de etila (6 mL). A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (3 x 3 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados sobre Na2SO4 e concentrados sob pressão reduzida para fornecer um líquido.

[0154] O líquido foi misturado com trietilsilano (4,62 mL, 28,9 mmol). Ácido trifluoroacético (2,228 mL, 28,9 mmol) foi adicionado gota a gota em temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura foi agitada vigorosamente em temperatura ambiente durante 2 horas antes de água (10 mL) ser adicionada. A camada aquosa foi separada e extraída com uma mistura de acetato de etila e hexanos (1:1; 3 x 3 mL). As soluções orgânicas combinadas foram lavadas com água e em seguida com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada até ficarem básicas, secadas (Na2SO4), e concentradas sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia flash usando ISCO (coluna de sílica gel de 40 g, 0% a 30% de acetato de etila em hexanos durante 15 min) forneceu 6- bromo-2-hexilcroman (1,4 g, 4,71 mmol) como um líquido amarelo. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,18-7,11 (m, 2H), 6,67 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,95 (dddd, J=9,8, 7,3, 5,1, 2,2 Hz, 1H), 2,85-2,66 (m, 2H), 1,97 (dddd, J=13,6, 5,9, 3,5, 2,3 Hz, 1H), 1,79-1,21 (m, 11H), 0,93-0,85 (m, 3H). Separação por SFC quiral (Chiralcel OJ-H 3 x 250 cm, 5 um; CO2/IPA = 95/5; 180 mL/min; 220 nm) do líquido forneceu Isômero 1 (0,37 g) e Isômero 2 (0,4 g) como líquidos amarelos. INTERMEDIÁRIO 15 6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftaleno-2-carboxilato de metila Intermediário 15A: 4-oxo-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila

[0155] A uma mistura de carbonato de potássio (523 mg, 3,78 mmol), (5R,7S)-7-(4-bromofenil)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (800 mg, 2,70 mmol), ácido itacônico (457 mg, 3,51 mmol), e acetonitrila (8 mL) foi adicionada água (2,4 mL). A mistura foi agitada até a evolução de dióxido de carbono paralisar e em seguida borbulhada com nitrogênio durante 3 min. Após acetato de paládio (II) (30,3 mg, 0,135 mmol) e tri-o-tolilfosfina (82 mg, 0,270 mmol) serem adicionados, a mistura foi borbulhada com nitrogênio durante mais 3 min. A mistura foi agitada a 80°C durante 20 h e em seguida concentrada. O resíduo foi misturado com água (40 mL), basificado com carbonato de potássio e filtrado. O filtrado foi lavado com dietil éter (2 x 15), em seguida acidificado para pH aproximadamente 2 com ácido hidroclórico aquoso a 6 N. O sólido foi separado e a solução aquosa foi extraída com uma mistura de THF/EtOAc (3:1) (4 x 10 mL). O sólido e os extratos foram combinados e concentrados. LC/MS [M- H2O]+1 = 328.

[0156] O resíduo foi misturado com THF (5 mL), acetato de etila (5 mL), metanol (20 mL), e Pd/C a 10 % (400 mg, 0,376 mmol) e hidrogenado sob um balão de hidrogênio durante a noite. O catalisador foi filtrado através de um filtro de membrana e lavado com metanol. O filtrado foi concentrado e liofilizado para fornecer um sólido. LC/MS [M- H2O]+1 = 330.

[0157] O sólido foi misturado com 98% de ácido sulfúrico (15 mL, 281 mmol). A solução clara foi agitada em temperatura ambiente durante 4 h. Metanol (8 mL, 198 mmol) foi adicionado lentamente com resfriamento por banho de água. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora antes de ser vertida sobre gelo (150 g). A mistura foi extraída com acetato de etila (4 x 40 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (20 mL), secados sobre sulfato de sódio anidroso, e concentrados sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 24 g, eluição gradiente de 10 a 100% de acetato de etila em hexanos) forneceu 4-oxo-6-((5R,7S)- 2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2- carboxilato de metila (440 mg, 1,281 mmol). LC/MS M+1 = 344. Intermediário 15:

[0158] Uma mistura de 4-oxo-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila (440 mg, 1,281 mmol), MeOH (15 mL), ácido acético (1,5 mL), e Pd/C a 10 % (200 mg, 0,188 mmol) foi hidrogenada sob um balão de hidrogênio durante um fim de semana. A mistura foi filtrada através de um filtro de membrana. O filtrado foi concentrado para fornecer 6- ((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftaleno-2-carboxilato de metila (337 mg, 1,023 mmol) como um sólido branco. LC/MS M+1 = 330. Intermediários 16-I e 16-II

[0159] (5R,7S)-7-((S)-6-(hidroximetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (I-16-I) e (5R,7S)-7-((R)-6- (hidroximetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (I-16-II)

[0160] Uma mistura de 6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila (337 mg, 1,023 mmol), tetra-hidrofurano anidroso (3 mL), e solução de THF a 2 N de boro-hidreto de lítio (2,56 mL, 5,12 mmol) foi agitado a 70 °C durante 4 h. Solução de cloreto de amônio aquosa saturada foi adicionada lentamente a 0°C para saciar a reação. Água e acetato de etila foram adicionados. A solução aquosa foi extraída com acetato de etila. As soluções de acetato de etila combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio anidroso e concentradas sob pressão reduzida para fornecer (5R,7S)-7-(6-(hidroximetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (300 mg, 0,995 mmol). LC/MS M+1 = 302.

[0161] Separação por SFC quiral (AD-H (,46 x 25 cm), 45% de MeOH em CO2, 3 ml/min, 220 nm, 35°C) forneceu enantiômeros 1 e 2 como sólido brancos. Isômero 1: Intermediário 16-I (5R,7S)-7-((S)-6- (hidroximetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona. Tempo de retenção por HPLC = 2,87 min (condição C); LC/MS M+1 = 330. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ 7,06 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,96 (d, J=7,8 Hz, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,22 (br. s., 1H), 4,38-4,18 (m, 2H), 3,73 (s, 3H), 3,07-2,91 (m, 3H), 2,89-2,79 (m, 2H), 2,78-2,68 (m, 1H), 2,31 (dd, J=13,3, 7,3 Hz, 1H), 2,25-2,16 (m, 1H), 2,16-2,07 (m, 2H), 2,01-1,76 (m, 4H). Isômero 2: Intermediário 16-II (5R,7S)-7-((R)-6-(hidroximetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona; Tempo de retenção por HPLC = 2,88 min (condição C); LC/MS M+1 = 330; 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ 7,06 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,96 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,05 (br. s., 1H), 4,35-4,24 (m, 2H), 3,73 (s, 3H), 3,08-2,92 (m, 3H), 2,90-2,79 (m, 2H), 2,78-2,68 (m, 1H), 2,32 (dd, J=13,3, 7,2 Hz, 1H), 2,25-2,06 (m, 3H), 2,01-1,74 (m, 4H). INTERMEDIÁRIOS 17-I E 17-II 4-Metilbenzenossulfonato de ((S)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)metila (I-17-I) e 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)metila (I-17-II)

[0162] Int-17-II: (5R,7S)-7-((R)-6-(hidroximetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (enantiômero 2; 690 mg, 2,289 mmol) foi dissolvido em piridina seco (5 mL) e cloreto de p-toluenossulfonila (1309 mg, 6,87 mmol) foi adicionado em uma porção. A mistura resultante foi reagida em temperatura ambiente durante 4 h. O solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi dissolvido em cloreto de metileno e metanol. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 40 g, eluição gradiente de 20 a 100% de acetato de etila em hexanos) forneceu 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6- ((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)metila (860 mg, 1,888 mmol) como um sólido branco. LC/MS M+1 = 456.

[0163] Int-17-I foi preparado de acordo com o procedimento geral como Intermediário 17-II usando (5R,7S)-7-((S)-6-(hidroximetil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona para dar origem a 4-metilbenzenossulfonato de ((S)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)metila. Exemplos 1 a 4 (1-amino-3-((R)-2-((pentiloxi)metil)-2,3-di-hidrobenzo[b][1,4]dioxin-6- il)ciclopentil)metanol Preparação 1A: (S)-1-(4-bromo-2-(oxiran-2-ilmetoxi)fenil)etanona

[0164] A uma mistura agitada de 4-bromo-2-hidroxiacetofenona (2,54 g, 11,81 mmol) em DMF anidroso (10 mL) foi adicionado hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo mineral, 0,520 g, 12,99 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 40 min antes de uma solução de (2S)-glicidil-3-nitrobenzenossulfonato (3,37 g, 12,99 mmol) em DMF anidroso (5 mL) ser adicionada gota a gota em temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura foi agitada a 70°C durante 3,5 h. A mistura de reação foi concentrada para remover DMF e o resíduo foi saciado com 10% de ácido cítrico aquoso para pH aproximadamente 3. A mistura foi diluída com água (5 mL) e extraída com acetato de etila (4 x 10 mL). Os extratos combinados foram secados sobre sulfato de sódio anidroso e concentrados. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 80 g, eluição gradiente de 0 a 40% de acetato de etila em hexanos) forneceu (S)-1-(4-bromo-2- (oxiran-2-ilmetoxi)fenil)etanona (2,68 g, 9,89 mmol) como um sólido branco. LC/MS M+23 = 293, 295. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ 7,64 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,19 (dd, J=8,3, 1,7 Hz, 1H), 7,12 (d, J=1,8 Hz, 1H), 4,40 (dd, J=10,9, 2,8 Hz, 1H), 4,00 (dd, J=11,0, 6,2 Hz, 1H), 3,45-3,38 (m, 1H), 3,00-2,93 (m, 1H), 2,78 (dd, J=4,8, 2,6 Hz, 1H), 2,65 (s, 3H). Preparação 1B: Acetato de (S)-4-bromo-2-(oxiran-2-ilmetoxi)fenila

[0165] A uma mistura agitada de (S)-1-(4-bromo-2-(oxiran-2- ilmetoxi)fenil)etanona (0,76 g, 2,80 mmol) em cloreto de metileno (30 mL) foram adicionados bicarbonato de sódio (1,6 g, 19,05 mmol) e m- CPBA (1,257 g, 5,61 mmol). A mistura foi agitada a 40°C durante 5 h e temperatura ambiente durante a noite. O sólido foi filtrado e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila, lavado com uma mistura de bicarbonato de sódio e soluções aquosas de tiossulfato, secado sobre sulfato de sódio anidroso, e concentrado. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 24 g, eluição gradiente de 0 a 40% de acetato de etila em hexanos) forneceu acetato de (S)-4- bromo-2-(oxiran-2-ilmetoxi)fenila (0,72 g, 2,508 mmol) como um líquido incolor. LC/MS M+23 = 309, 311. Preparação 1C: (R)-(6-bromo-2,3-di-hidrobenzo[b][1,4]dioxin-2- il)metanol

[0166] Acetato de (S)-4-bromo-2-(oxiran-2-ilmetoxi)fenila (0,72 g, 2,508 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (15 mL) e solução aquosa a 2 M de hidróxido de sódio (1,442 mL, 2,88 mmol) foi adicionada. A mistura foi vigorosamente agitada em temperatura ambiente durante 2,5 dias. Hexanos (7 mL) foi adicionado. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (3 x 2 mL). As soluções orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio anidroso e concentradas. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 40 g, eluição gradiente de 0 a 40% de acetato de etila em hexanos) forneceu (R)-(6-bromo-2,3-di-hidrobenzo[b][1,4]dioxin-2- il)metanol (0,54 g, 2,203 mmol) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,04 (d, J=2,4 Hz, 1H), 6,96 (dd, J=8,7, 2,3 Hz, 1H), 6,77 (d, J=8,6 Hz, 1H), 4,30 (dd, J=11,3, 2,3 Hz, 1H), 4,27-4,21 (m, 1H), 4,10 (dd, J=11,3, 7,7 Hz, 1H), 3,95-3,80 (m, 2H). Preparação 1D: (R)-6-bromo-2-((pentiloxi)metil)-2,3-di- hidrobenzo[b][1,4]dioxina

[0167] A uma mistura agitada de (R)-(6-bromo-2,3-di- hidrobenzo[b][1,4]dioxin-2-il)metanol (0,38 g, 1,551 mmol) em tetra- hidrofurano anidroso (15 mL) foi adicionado hidreto de sódio (dispersão de óleo mineral a 60%, 0,310 g, 7,75 mmol) porção a porção em temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 15 min antes de iodeto de n-amila (1,017 mL, 7,75 mmol) ser adicionado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 dias. Solução de cloreto de amônio aquosa saturada (4 mL) e hexanos (10 mL) foram adicionados. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x 3 mL). As soluções orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio anidroso e concentradas. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 12 g, eluição gradiente de 0 a 20% de acetato de etila em hexanos) forneceu (R)-6-bromo-2-((pentiloxi)metil)-2,3-di- hidrobenzo [b][1,4]dioxina (0,39 g, 1,237 mmol) como um líquido incolor. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,01 (d, J=2,4 Hz, 1H), 6,92 (dd, J=8,6, 2,2 Hz, 1H), 6,74 (d, J=8,6 Hz, 1H), 4,31-4,23 (m, 2H), 4,073,98 (m, 1H), 3,71-3,63 (m, 1H), 3,58 (dd, J=10,3, 5,9 Hz, 1H), 3,48 (t, J=6,6 Hz, 2H), 1,64-1,51 (m, 2H), 1,37-1,27 (m, 4H), 0,93-0,86 (m, 3H). Preparação 1E: 1-((difenilmetileno)amino)-4-((R)-2-((pentiloxi)metil)- 2,3-di-hidrobenzo[b][1,4]dioxin-6-il)ciclopent-2-enocarboxilato de etila

[0168] Um frasconete de micro-ondas secado em forno com barra agitadora foi carregado com (R)-6-bromo-2-((pentiloxi)metil)-2,3-di- hidrobenzo[b][1,4]dioxina (390 mg, 1,237 mmol), 1- ((difenilmetileno)amino)ciclopent-3-enocarboxilato de etila (593 mg, 1,856 mmol), trifenilfosfina (64,9 mg, 0,247 mmol), acetato de paládio (II) (27,8 mg, 0,124 mmol), acetato de potássio (243 mg, 2,475 mmol), e DMA (3 mL). A mistura foi aspergida com nitrogênio durante 3 minutos. A mistura foi processada em um micro-ondas Personal Chemistry (60 minutos a 140°C). A mistura foi misturada com água (60 mL) e extraída com acetato de etila (5 x 5 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados sobre sulfato de sódio anidroso e concentrados sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 40 g, eluição gradiente de 5 a 100% de acetato de etila em hexanos) forneceu 1-((difenilmetileno)amino)-4-((R)-2- ((pentiloxi)metil)-2,3-di-hidrobenzo[b][1,4]dioxin-6-il)ciclopent-2- enocarboxilato de etila (300 mg, 0,542 mmol) como um líquido pegajoso. LC/MS M+1 = 554.

Exemplo 1

[0169] A uma mistura agitada de 1-((difenilmetileno)amino)-4-((R)- 2-((pentiloxi)metil)-2,3-di-hidrobenzo[b][1,4]dioxin-6-il)ciclopent-2- enocarboxilato de etila (300 mg, 0,542 mmol) e água (0,27 mL) em dietil éter (8 mL) foi adicionado ácido hidroclórico aquoso a 6 N (0,542 mL, 3,25 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min e em seguida basificada com carbonato de potássio sólido e água (1 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (4 x 4 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados sobre sulfato de sódio anidroso e concentrados sob pressão reduzida para fornecer um líquido. O líquido foi dissolvido em EtOH (10 mL). Boro-hidreto de sódio (123 mg, 3,25 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. Em seguida, ácido hidroclórico aquoso a 6 N (2 mL) foi adicionado lentamente para preparar pH aproximadamente 2. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h. A mistura foi basificada para pH aproximadamente 12 com solução de hidróxido de sódio aquosa a 2 N. Após agitar em temperatura ambiente durante 30 min, a mistura foi concentrada. O resíduo aquoso foi extraído com acetato de etila (4 x 4 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados sobre sulfato de sódio anidroso e concentrados sob pressão reduzida para fornecer um sólido.

[0170] O material sólido foi dissolvido em MeOH (10 mL) e ácido acético (1 mL). Em seguida, Pd/C a 10% (100 mg, 0,094 mmol) foi adicionado sob nitrogênio. A mistura foi hidrogenada sob balão de hidrogênio durante a noite. O catalisador foi filtrado e lavado com metanol. O filtrado foi concentrado. O resíduo foi misturado com água (3 mL), basificado com carbonato de potássio sólido, e extraído com acetato de etila (5 x 3 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados sobre sulfato de sódio anidroso e concentrados. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 4 g, eluição gradiente de 0->20% de amônia a 2 M em solução de metanol em EtOAc) forneceu (1-amino-3-((R)-2-((pentiloxi)metil)-2,3-di- hidrobenzo[b][1,4]dioxin-6-il)ciclopentil)metanol (180 mg, 0,515 mmol) como um semissólido. LC/MS M+1 = 350.

[0171] O semissólido foi separado em três frações usando SFC quiral (Célula-4 (25 X 3 cm, 5 μm), CO2/(MeOH + 0,5% de DEA) = 60/40, 130 ml/min, 284 nm, 35°C). Frações 1 e 3 foram individualmente concentradas e purificadas usando HPLC de fase reversa (Phenomenex Luna 5 u 30 x 100 mm (Axia), Solvente A: 10% de MeOH: 90% de H2O: 0,1% de TFA, Solvente B: 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA). Concentração, basificação com carbonato de potássio, e extração com acetato de etila forneceram os correspondentes compostos. Fração 2 foi concentrada e separada usando SFC quiral (Célula-2 -H (3 x 25 cm), 40% de IPA w 0,1% de DEA e 0,1% de água em CO2, 150 ml/min, 220 nm, 50°C) para fornecer Fração 2-A e Fração 2-B como sólidos vítreos. Todos os quatro isômeros têm os mesmos pesos moleculares. LC/MS M+1 = 350.

[0172] Exemplo 1(Fração 1): 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 6,77 (d, J=0,9 Hz, 1H), 6,75-6,73 (m, 2H), 4,30-4,21 (m, 2H), 4,04-3,96 (m, 1H), 3,71-3,57 (m, 2H), 3,53-3,40 (m, 4H), 2,97 (tt, J=11,3, 7,1 Hz, 1H), 2,19 (dd, J=13,1, 7,6 Hz, 1H), 2,04-1,63 (m, 4H), 1,63-1,54 (m, 2H), 1,54-1,43 (m, 1H), 1,40-1,29 (m, 4H), 0,96-0,87 (m, 3H).

[0173] Exemplo 2 (Fração 3): 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 6,77 (d, J=0,9 Hz, 1H), 6,75-6,73 (m, 2H), 4,29-4,21 (m, 2H), 4,03-3,95 (m, 1H), 3,70-3,57 (m, 2H), 3,54-3,40 (m, 4H), 2,97 (tt, J=11,3, 7,1 Hz, 1H), 2,19 (dd, J=12,8, 7,3 Hz, 1H), 2,04-1,63 (m, 4H), 1,63-1,54 (m, 2H), 1,54-1,45 (m, 1H), 1,39-1,30 (m, 4H), 0,95-0,87 (m, 3H).

[0174] Exemplo 3 (Fração 2-A): 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 6,77-6,68 (m, 3H), 4,29-4,20 (m, 2H), 4,03-3,96 (m, 1H), 3,71-3,55 (m, 2H), 3,53-3,44 (m, 4H), 3,26-3,17 (m, 1H), 2,162,05 (m, 1H), 2,03-1,95 (m, 1H), 1,93-1,85 (m, 1H), 1,74-1,53 (m, 4H), 1,41-1,23 (m, 5H), 0,95-0,88 (m, 3H).

[0175] Exemplo 4 (Fração 2-B): 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 6,78-6,68 (m, 3H), 4,29-4,21 (m, 2H), 4,04-3,96 (m, 1H), 3,71-3,57 (m, 2H), 3,56-3,46 (m, 4H), 3,22 (q, J=7,3 Hz, 1H), 2,17-1,87 (m, 3H), 1,751,53 (m, 4H), 1,41-1,23 (m, 5H), 0,97-0,86 (m, 3H).

[0176] Usando os procedimentos gerais para a preparação de Exemplos 1 a 4, os seguintes compostos foram preparados dos correspondentes intermediários de brometo de arila. Os compostos foram analisados usando condição de HPLC C. Tabela 1 Exemplos 28 e 29 ((1R,3S)-1-amino-3-(6-(pentiloxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol Preparação 28A: (5R,7S)-7-(6-(pentiloxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0177] Uma mistura de 1-pentanol (10 mL, 92 mmol), mono-hidrato de ácido p-toluenossulfônico (8,00 mg, 0,042 mmol), e trimetoximetano (0,613 mL, 5,61 mmol) foi agitada a 100°C durante 2 h com uma corrente de nitrogênio lenta para remover subproduto de metanol. O líquido residual foi misturado com (5R,7S)-7-(6-oxo-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (400 mg, 1,402 mmol) e agitado a 100°C sob nitrogênio durante 2,5 h. Em seguida, Pd/C a 10% (400 mg) foi adicionado em temperatura ambiente, seguido por acetato de etila (5 mL). A mistura foi vigorosamente agitada sob balão de hidrogênio durante 4 h. A mistura foi filtrada através de um filtro de membrana e o filtrado foi concentrado. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 12 g, eluição gradiente de 0 a 100% de acetato de etila em hexanos) forneceu (5R,7S)-7-(6-(pentiloxi)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (350 mg, 0,979 mmol) como um sólido pegajoso. LC/MS M+1 = 358. Separação quiral (Lux-Amy-2 (3 x 25 cm), 25% de MeOH, 120 ml/min, 220 nm, 45°C) do sólido forneceu dois isômeros. Cada isômero foi hidrolisado do seguinte modo. Exemplo 28 (Isômero 1)

[0178] Uma mistura de (5R,7S)-7-(6-(pentiloxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (110 mg, 0,308 mmol), mono-hidrato de hidróxido de lítio (155 mg, 3,69 mmol), dioxano (1 mL), e água (1 mL) foi agitada a 90°C sob nitrogênio durante 15 h. A mistura foi resfriada e extraída com acetato de etila (4 x 1 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados sobre sulfato de sódio anidroso e concentrados sob pressão reduzida. Purificação usando HPLC de fase reversa (Phenomenex Luna 5 u 30 x 100 mm (Axia); gradiente durante 8 min de 30 a 100% de Solvente B; Solvente A: 10% de MeOH: 90% de H2O: 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), concentração, basificação com carbonato de potássio, e extração com acetato de etila forneceram ((1R,3S)-1-amino-3-(6-(pentiloxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol (61 mg, 0,173 mmol,) como um sólido branco. LC/MS M+1 = 332. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,03-6,95 (m, 3H), 3,73-3,63 (m, 1H), 3,57-3,42 (m, 4H), 3,09-2,97 (m, 2H), 2,95- 2,85 (m, 1H), 2,82-2,68 (m, 2H), 2,27 (dd, J=13,3, 7,8 Hz, 1H), 2,13-2,01 (m, 2H), 1,97-1,46 (m, 7H), 1,37-1,29 (m, 4H), 0,94-0,87 (m, 3H). Exemplo 29 (Isômero 2) 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,03-6,95 (m, 3H), 3,73-3,64 (m, 1H), 3,57-3,49 (m, 2H), 3,48-3,40 (m, 2H), 3,09-2,96 (m, 2H), 2,952,86 (m, 1H), 2,81-2,69 (m, 2H), 2,25 (dd, J=13,2, 7,9 Hz, 1H), 2,13-2,00 (m, 2H), 1,95-1,83 (m, 1H), 1,82-1,55 (m, 5H), 1,48 (dd, J=13,2, 11,0 Hz, 1H), 1,37-1,29 (m, 4H), 0,93-0,87 (m, 3H). Exemplos 30 e 31 ((1R,3S)-1-amino-3-(6-(heptiloxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol Preparação 30A: (5R,7S)-7-(6-(heptiloxi)-7,8-di-hidronaftalen-2-il)-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0179] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-oxo-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (100 mg, 0,350 mmol) e 1-heptanol (500 μL, 3,54 mmol) em tolueno (2 mL) foi adicionado mono-hidrato de ácido p-toluenossulfônico (5 mg, 0,026 mmol). Peneiras moleculares de 3 angstrom secadas em forno foram adicionadas e a mistura foi aquecida ao refluxo durante a noite. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada, e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc durante 20 minutos) para dar origem a 55 mg de (5R,7S)-7-(6- (heptiloxi)-7,8-di-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona. Tempo de retenção por HPLC = 1,26 min (condição G); LC/MS M+1 = 384. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,00-6,86 (m, 3H), 5,79 (s, 1H), 5,52 (s, 1H), 4,41-4,24 (m, 2H), 3,86 (t, J=6,6 Hz, 2H), 2,94-2,82 (m, 2H), 2,41 (t, J=8,0 Hz, 2H), 2,36-2,25 (m, 1H), 2,20-2,07 (m, 2H), 2,05-1,90 (m, 2H), 1,79-1,70 (m, 2H), 1,51-1,21 (m, 10H), 0,98-0,83 (m, 3H). Preparação 30B: (5R,7S)-7-(6-(pentiloxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0180] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-(heptiloxi)-7,8-di- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (53 mg, 0,138 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionado catalisador de Pearlman (19,41 mg, 0,138 mmol). A mistura de reação foi hidrogenada sob um balão de H2 durante 2 horas. O catalisador foi filtrado, e em seguida concentrado em vácuo. Os isômeros individuais foram separados usando uma coluna CHIRALPAK® AS-H sob condições de SFC (30% de MeOH em CO2).

[0181] Tempo de retenção por HPLC quiral de Isômero 1 (30-B-i, 9 mg) = 8,55 min; LC/MS M+1 = 386. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ 7,10-7,03 (m, 1H), 7,00-6,91 (m, 2H), 5,29 (br. s., 1H), 4,40-4,26 (m, 2H), 3,78-3,67 (m, 1H), 3,55 (qd, J=6,6, 2,4 Hz, 2H), 3,13-2,98 (m, 2H), 2,98-2,88 (m, 1H), 2,84-2,71 (m, 2H), 2,33 (dd, J=13,2, 7,3 Hz, 1H), 2,23-2,04 (m, 3H), 1,96 (dd, J=13,1, 10,9 Hz, 2H), 1,88-1,74 (m, 2H), 1,61 (quin, J=6,9 Hz, 4H), 1,43-1,21 (m, 6H), 0,95-0,85 (m, 3H).

[0182] Tempo de retenção por HPLC quiral de Isômero 2 (30-B-ii, 9 mg) = 9,81 min; LC/MS M+1 = 386. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ 7,09-7,03 (m, 1H), 7,00-6,90 (m, 2H), 5,25 (s, 1H), 4,40-4,24 (m, 2H), 3,80-3,67 (m, 1H), 3,55 (qd, J=6,6, 2,4 Hz, 2H), 3,14-2,99 (m, 2H), 2,98-2,87 (m, 1H), 2,84-2,69 (m, 2H), 2,33 (dd, J=13,2, 7,3 Hz, 1H), 2,22-2,04 (m, 3H), 2,02-1,90 (m, 2H), 1,88-1,74 (m, 2H), 1,60 (q, J=7,0 Hz, 4H), 1,43-1,20 (m, 6H), 0,95-0,85 (m, 3H). A estereoquímica absoluta dos isômeros não foi determinada. Exemplo 30: ((1R,3S)-1-amino-3-(6-(heptiloxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol

[0183] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-(heptiloxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona, Isômero 1 (30B- i, 9 mg, 0,023 mmol) em dioxano (4 mL) foi adicionado NaOH a 1 N. A mistura de reação foi aquecida a 100°C durante a noite, e em seguida resfriada e acidificada com TFA. A mistura foi concentrada em vácuo, em seguida triturada com MeOH, e filtrada. O filtrado foi purificado por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. Frações isoladas com massa correta e secadas por congelamento durante a noite. Recuperados 5 mg de ((1R,3S)-1-amino-3-(6-(heptiloxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (Exemplo 30): Tempo de retenção por HPLC = 9,31 min (condição H); LC/MS M+1 = 360. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,07-6,98 (m, 3H), 3,83-3,73 (m, 1H), 3,71-3,51 (m, 4H), 3,18-3,08 (m, 1H), 3,04 (dd, J=16,6, 5,0 Hz, 1H), 2,96-2,85 (m, 1H), 2,82-2,68 (m, 2H), 2,42 (ddd, J=13,3, 7,1, 1,2 Hz, 1H), 2,17-2,01 (m, 2H), 2,00-1,89 (m, 3H), 1,88-1,77 (m, 1H), 1,73 (t, J=12,8 Hz, 1H), 1,59 (quin, J=6,9 Hz, 2H), 1,45-1,22 (m, 8H), 0,96-0,86 (m, 3H). Exemplo 31: ((1R,3S)-1-amino-3-(6-(heptiloxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol

[0184] A uma mistura de Isômero 2 de (5R,7S)-7-(6-(heptiloxi)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (30- B-ii, 8 mg, 0,021 mmol) em dioxano (4 mL) foi adicionado NaOH a 1 N. A mistura foi aquecida a 100°C durante a noite, e em seguida resfriada e acidificada com TFA. A mistura foi concentrada em vácuo, em seguida triturada com MeOH, e filtrada. O filtrado foi purificado por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. Frações isoladas com massa correta e secadas por congelamento durante a noite. Recuperados 5 mg de ((1R,3S)-1-amino-3-(6-(heptiloxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol (Exemplo 31). Tempo de retenção por HPLC = 9,34 min (condição H); LC/MS M+1 = 360. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,03 (s, 2H), 7,00 (s, 1H), 3,83-3,73 (m, 1H), 3,70-3,61 (m, 2H), 3,61-3,50 (m, 2H), 3,18-3,08 (m, 1H), 3,04 (dd, J=16,4, 4,7 Hz, 1H), 2,97-2,84 (m, 1H), 2,81-2,66 (m, 2H), 2,42 (ddd, J=13,4, 7,1, 1,1 Hz, 1H), 2,19-2,01 (m, 2H), 2,00-1,89 (m, 3H), 1,88-1,77 (m, 1H), 1,73 (t, J=12,8 Hz, 1H), 1,59 (quin, J=6,9 Hz, 2H), 1,44-1,23 (m, 8H), 0,970,87 (m, 3H).

[0185] Os seguintes compostos foram preparados de acordo com os procedimentos gerais de Exemplos 28 e 29. Tabela 2 Exemplo 38 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-((Z)-hex-2-en-1-iloxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol Preparação 38A: 2-(((S)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2- il)oxi)acetaldeído

[0186] Uma solução de dicloreto de oxalila (68,9 mg, 0,543 mmol) em DCM (3 ml) foi agitada sob N2 e resfriada para -78 °C. DMSO (64,2 μl, 0,905 mmol) foi em seguida adicionado gota a gota e agitado durante 1 h na temperatura, uma solução de (5R,7S)-7-((S)-6-(2-hidroxietoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (150 mg, 0,453 mmol) em DCM (3 mL) (diversas gotas de DMSO foram adicionadas para auxiliar a dissolução do composto) foi adicionada gota a gota e a mistura foi agitada durante 30 min. a -78°C. Em seguida, TEA (252 μl, 1,810 mmol) foi adicionado gota a gota e a mistura foi agitada durante 15 min a -78°C e aquecida para temperatura ambiente e agitada durante 15 min. A mistura foi saciada com água (1 mL) a 0 °C, diluída com EtOAc (50 mL), lavada com NH4Cl saturado (2 x 30 mL), secada (Na2SO4) e concentrada sob vácuo para fornecer 2-(((S)-6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2- il)oxi)acetaldeído, (150 mg) como um sólido branco. LC/MS M+1 = 330. Preparação 38B (Isômero 1) (Condição 1): (5R,7S)-7-((S)-6-((Z)-hex-2- en-1-iloxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0187] A uma solução de brometo de butiltrifenilfosfônio (116 mg, 0,364 mmol) em THF (3 mL) a -78°C e sob nitrogênio foi lentamente adicionado n-butil lítio em hexano (239 μl, 0,383 mmol). A solução foi agitada a -78°C durante 15 min, e em seguida agitada a 0°C durante 30 min (cor laranja claro). À solução foi adicionado 2-(((S)-6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2- il)oxi)acetaldeído (60 mg, 0,182 mmol) em THF (3 mL) a -78°C. A mistura de reação foi agitada a -78°C durante 15 min e agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A reação foi saciada com cloreto de amônio aquoso saturado e extraída com acetato de etila. O extrato orgânico foi lavado com NH4Cl saturado (3 x 20 mL), secado sobre sulfato de sódio, filtrado, e concentrado em vácuo para fornecer o produto desejado como sólido branco, (5R,7S)-7-((S)-6-((Z)-hex-2-en-1- iloxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2- ona, LC/MS M+1 = 370. Preparação 38B (Isômero 2) (Condição 2): (5R,7S)-7-((S)-6-((E)-hex-2- en-1-iloxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0188] KHMDS (683 μl, 0,683 mmol) foi adicionado gota a gota a uma solução de 5-(butilsulfonil)-1-fenil-1H-tetrazol (80 mg, 0,301 mmol) e 2-(((S)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4- tetra-hidronaftalen-2-il)oxi)acetaldeído (90 mg, 0,273 mmol) em THF (15 ml) a -78°C. A solução resultante foi agitada na temperatura durante 2 h e aquecida para temperatura ambiente e agitada durante 16 h. Em seguida, água (1 ml) foi adicionada com resfriamento por gelo secoacetona, e a mistura foi aquecida para temperatura ambiente, seguida pela adição de água (10 ml), extraída com EtOAc (30 ml), lavada com NaHCO3 saturado (2 x 15 ml), solução salina (20 ml), secada (Na2SO4) e concentrada sob vácuo para fornecer o produto desejado que foi purificado com cromatografia flash usando coluna ISCO (12 g, EtOAc/Hexano = 0% a 40%), para fornecer (5R,7S)-7-((S)-6-((E)-hex-2- en-1-iloxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona, 15 mg, LC/MS M+1 = 370. Exemplo 38:

[0189] A uma solução de (5R,7S)-7-((S)-6-((Z)-hex-2-en-1-iloxi)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (90 mg, 0,244 mmol) em dioxano (2 mL) foi adicionado hidróxido de lítio (58,3 mg, 2,436 mmol) em água (1 mL) e agitado a 100°C durante 16 h. A mistura de reação foi diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi coletada, secada sobre Na2SO4, concentrada sobre o rotavapor para fornecer o produto cru que foi purificado com HPLC preparativa: coluna Phenomenex Luna C18 5 u 21,2 x 100 mm. Solvente A: 10% de MeOH - 90% de H2O -0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH-10% de H2O-0,1% de TFA. Tempo de gradiente = 15 min. Início B = 0%, Final B 100%. Tempo de paralisação 25 min. para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-((Z)-hex-2-en-1-iloxi)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, LC/MS M+1 = 344. Tempo de retenção por HPLC = 8,20 min. (Condição L), 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,10-6,90 (m, 3H), 5,70-5,60 (m, 2H), 4,2 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,65 (m, 2H), 3,25-2,72 (m, 5H), 2,40 (m, 1H), 2,15 (m, 3H), 2,10-1,72 (m, 6H), 1,44 (m, 3H), 0,92 (t, J=7,5 Hz, 3H).

[0190] Usando o procedimento geral de Exemplo 38, os seguintes compostos foram preparados. Tabela 3 Exemplo 43 ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-((4-etilbenzil)oxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il)ciclopentil)metanol Preparação 43A: (R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7- il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carbaldeído

[0191] Uma solução de cloreto de oxalila (261 μl, 2,99 mmol) em DCM (5 ml) foi agitada sob N2 e resfriada para-78°C. DMSO (424 μl, 5,97 mmol) foi em seguida adicionado gota a gota e agitado durante 1 h na temperatura, uma solução de (5R,7S)-7-((R)-6-(hidroximetil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (Preparação 51C, 600 mg, 1,991 mmol) em DCM (3 ml)/1 ml de DMSO foi adicionada gota a gota e a mistura foi agitada durante 30 min. na mesma temperatura. Em seguida, TEA (1110 μl, 7,96 mmol) foi adicionado gota a gota e a mistura foi agitada durante 15 min e aquecida para temperatura ambiente e agitada durante mais 15 min. A mistura foi saciada com água (1 ml) a 0°C, diluída com EtOAc (50 ml), lavada com NH4Cl saturado (2 x 30 ml), secada (Na2SO4), e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado com cromatografia flash (25 g, EtOAc/Hexano = 0 a 100%, tempo de gradiente = 15 min) para recuperar 500 mg de produto desejado (R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7- il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carbaldeído (500 mg). LC/MS M+1 = 300. Preparação 43B: (5R,7S)-7-((R)-6-((S)-1-hidroxietil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona H N

[0192] A uma mistura agitada de (R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carbaldeído (500 mg, 1,670 mmol) e THF (5 mL) foi adicionada uma solução de brometo de metilmagnésio (2227 μl, 6,68 mmol) (3 M em dietil éter) gota a gota a -78°C. A solução foi gradualmente aquecida para temperatura ambiente e agitada durante a noite sob nitrogênio. A reação foi saciada com água a 0°C. A mistura foi extraída com EtOAc (30 ml), lavada com NH4Cl saturado (2 x 30 ml), solução salina (20 ml), secada (Na2SO4) e purificada com cromatografia flash (25 g, EtOAc/Hexano = 0 a 100%, tempo de gradiente = 12,5 min) para recuperar (5R,7S)-7-((R)-6-((S)-1- hidroxietil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (460 mg). LC/MS M+1 = 316. Preparação 43C: (5R,7S)-7-((R)-6-acetil-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0193] Uma solução de cloreto de oxalila (511 μl, 5,83 mmol) em DCM (5 ml) foi agitada sob N2 e resfriada para -78°C. DMSO (621 μl, 8,75 mmol) foi em seguida adicionado gota a gota e a mistura foi agitada durante 1 h a -78°C. Uma solução de (5R,7S)-7-((R)-6-((S)-1- hidroxietil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (460 mg, 1,458 mmol) em DCM (3 ml) foi adicionada gota a gota e a mistura foi agitada durante 30 min. a -78°C. Em seguida, TEA (1220 μl, 8,75 mmol) foi adicionado gota a gota e a mistura foi agitada durante 15 min e aquecida para temperatura ambiente e agitada durante 15 min. A mistura foi saciada com água (1 ml) a 0°C, diluída com EtOAc (50 ml), que foi lavada com NH4Cl saturado (2 x 30 ml), secada (Na2SO4) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado com cromatografia flash (25 g, EtOAc/hexano = 0 a 100%, tempo de gradiente = 15 min) para recuperar o composto desejado (5R,7S)-7-((R)-6-acetil-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa- 1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (239 mg). LC/MS M+1 = 314. Preparação 43D: acetato de (R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-ila

[0194] A uma solução de (5R,7S)-7-((R)-6-acetil-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (220 mg, 0,702 mmol) em DCM (4 ml) foi adicionado m-CPBA a 77% (315 mg, 1,404 mmol) em porções. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 60 h antes de ela ser lavada com NaOH a 0,2 N aquoso (10 ml). A solução de lavagem foi extraída novamente com DCM (2 x 15 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre Na2SO4 e o solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi purificado com cromatografia flash (12 g, EtOAc/Hexano = 0 a 60 %, tempo de gradiente = 15 min) para recuperar o produto desejado acetato de (R)- 6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-ila (220 mg). LC/MS M+1 = 330. Preparação 43E: (5R,7S)-7-((R)-6-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0195] A uma solução de acetato de (R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-ila (200 mg, 0,607 mmol) em MeOH (2 ml), hidróxido de sódio (1822 μl, 1,822 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h. A mistura foi apreendida em EtOAc (20 ml), lavada com NaHCO3 saturado (10 ml) e solução salina (10 ml), secada (Na2SO4) e concentrada sob vácuo para obter o produto desejado que foi usado para etapa seguinte como foi (5R,7S)-7-((R)-6-hidroxi-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (165 mg). LC/MS M+1 = 288. Preparação 43F: (5R,7S)-7-((R)-6-((4-etilbenzil)oxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0196] O (5R,7S)-7-((R)-6-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (15 mg, 0,052 mmol) foi dissolvido em nitrometano anidroso (1,5 ml) em um tubo de 8 ml seco. Cloreto de ferro (III) anidroso (2 mg, 0,012 mmol), 4-etilbenzaldeído (14,01 mg, 0,104 mmol) e trietilsilano (12,14 mg, 0,104 mmol) foram adicionados e a solução resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. Em seguida, 10 ml de água foram adicionados e a camada aquosa foi extraída com DCM (2 x 15 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução salina e secadas (Na2SO4). A mistura foi filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash gradiente (0 a 60% de EtOAc em hexanos, coluna ISCO de 12 g) que forneceu o produto desejado (5R,7S)-7-((R)-6-((4- etilbenzil)oxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (18 mg). LC/MS M+1 = 406. Exemplo 43:

[0197] (5R,7S)-7-((R)-6-((4-etilbenzil)oxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (20 mg, 0,049 mmol) foi misturado com hidrato de hidróxido de lítio (31,0 mg, 0,740 mmol) em 1,4-dioxano (2 ml) e água (0,5 ml), a mistura foi agitada a 100°C durante a noite sob N2. A solução foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em DCM (40 ml), lavado com água (15 ml) e solução salina (10 ml), secado (Na2SO4) e concentrado. O sólido foi misturado com MeCN (2 ml), o solvente foi removido, e o sólido foi secado sob vácuo durante a noite para fornecer o produto cru que foi purificado com HPLC preparativa. Phenomenex Luna C 18 5 u (21,2 x 150 mm), Solvente A: 10% de MeOH-90% de H2O -0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH-10% de H2O-0,1% de TFA, Início B% = 0, Final %B = 100. Tempo de gradiente 15 min, tempo de paralisação 20 min. para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-((4-etilbenzil)oxi)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (15 mg). LC/MS M+1 = 380. HPLC Rt = 7,61 (condição L). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,35-7,25 (m, 2H), 7,23-7,15 (m, 2H), 7,06-6,94 (m, 3H), 4,66-4,55 (m, 2H), 3,94-3,83 (m, 1H), 3,57-3,41 (m, 2H), 3,12-2,88 (m, 3H), 2,84-2,59 (m, 4H), 2,26-1,66 (m, 7H), 1,59-1,46 (m, 1H), 1,29-1,17 (m, 3H).

[0198] Os exemplos na Tabela 4 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplo 43. Tabela 4 Exemplos 50 e 51 ((1R,3S)-1-amino-3-(6-((benziloxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il) ciclopentil)metanol Preparação 50A: 4-oxo-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan- 7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila

[0199] A uma mistura de carbonato de potássio (523 mg, 3,78 mmol), (5R,7S)-7-(4-bromofenil)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (800 mg, 2,70 mmol), ácido itacônico (457 mg, 3,51 mmol), e acetonitrila (8 mL) foi adicionada água (2,4 mL). A mistura foi agitada até a evolução de dióxido de carbono paralisar e em seguida borbulhada com nitrogênio durante 3 min. Após acetato de paládio (II) (30,3 mg, 0,135 mmol) e tri-o-tolilfosfina (82 mg, 0,270 mmol) serem adicionados, a mistura foi borbulhada com nitrogênio durante mais 3 min. A mistura foi agitada a 80°C durante 20 h e em seguida concentrada. O resíduo foi misturado com água (40 mL), basificado com carbonato de potássio e filtrado. O filtrado foi lavado com dietil éter (2 x 15), acidificado para pH aproximadamente 2 com ácido hidroclórico aquoso a 6 N. O sólido foi separado e a solução aquosa foi extraída com uma mistura de THF/EtOAc (3:1) (4 x 10 mL). O sólido e os extratos foram combinados e concentrados. LC/MS [M- H2O]+1 = 328.

[0200] O resíduo foi misturado com THF (5 mL), acetato de etila (5 mL), metanol (20 mL), e Pd/C a 10 % (400 mg, 0,376 mmol) e hidrogenado sob balão de hidrogênio durante a noite. O catalisador foi filtrado através de um filtro de membrana e lavado com metanol. O filtrado foi concentrado e liofilizado para fornecer um sólido. LC/MS [M- H2O]+1 = 330.

[0201] O sólido foi misturado com 98% de ácido sulfúrico (15 mL, 281 mmol). A solução clara foi agitada em temperatura ambiente durante 4 h. Metanol (8 mL, 198 mmol) foi adicionado lentamente com resfriamento por banho de água. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h antes de ser vertida sobre gelo (150 g). A mistura foi extraída com acetato de etila (4 x 40 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (20 mL), secados sobre sulfato de sódio anidroso, e concentrados sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 24 g, eluição gradiente de 10 a 100% de acetato de etila em hexanos) forneceu 4-oxo-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila (440 mg, 1,281 mmol). LC/MS M+1 = 344. Preparação 50B: 6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)- 1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila

[0202] Uma mistura de 4-oxo-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila (440 mg, 1,281 mmol), MeOH (15 mL), ácido acético (1,5 mL), e Pd/C a 10% (200 mg, 0,188 mmol) foi hidrogenada sob balão de hidrogênio durante um período de dois dias. A mistura foi filtrada através de um filtro de membrana. O filtrado foi concentrado para fornecer 6- ((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftaleno-2-carboxilato de metila (337 mg, 1,023 mmol) como um sólido branco. LC/MS M+1 = 330. Preparações 50C e 51C: (5R,7S)-7-(6-(hidroximetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0203] Uma mistura de 6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila (337 mg, 1,023 mmol), tetra-hidrofurano anidroso (3 mL), e solução de THF a 2 N de boro-hidreto de lítio (2,56 mL, 5,12 mmol) foi agitado a 70°C durante 4 h. Solução de cloreto de amônio aquosa saturada foi adicionada lentamente a 0°C para saciar a reação. Água e acetato de etila foram adicionados. A solução aquosa foi extraída com acetato de etila. As soluções de acetato de etila combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio anidroso e concentradas sob pressão reduzida para fornecer (5R,7S)-7-(6-(hidroximetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (300 mg, 0,995 mmol). LC/MS M+1 = 302. Separação por SFC quiral (AD-H (46 x 25 cm), 45% de MeOH em CO2, 3 ml/min, 220 nm, 35°C) forneceu enantiômeros 50C e 51C como sólidos brancos. Isômero 50C: (5R,7S)-7-((S)-6- (hidroximetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona. Isômero 51C: (5R,7S)-7-((R)-6- (hidroximetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona. Cada enantiômero foi independentemente convertido para derivados como ilustrado abaixo. Preparação 51D: 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)metila

[0204] (5R,7S)-7-((R)-6-(hidroximetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (enantiômero 51C; 690 mg, 2,289 mmol) foi dissolvido em piridina seco (5 mL) e cloreto de p- toluenossulfonila (1309 mg, 6,87 mmol) foi adicionado em uma porção. A mistura resultante foi reagida em temperatura ambiente durante 4 h. O solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi dissolvido em cloreto de metileno e metanol. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 40 g, eluição gradiente de 20 a 100% de acetato de etila em hexanos) forneceu 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2- il)metila (860 mg, 1,888 mmol) como um sólido branco. LC/MS M+1 = 456. Exemplo 51:

[0205] A uma mistura agitada de álcool benzílico (0,031 mL, 0,296 mmol) e solução de THF a 1 N de terc-butóxido de potássio (0,263 mL, 0,263 mmol) foi adicionado 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6- ((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)metila (15 mg, 0,033 mmol). A mistura resultante foi agitada a 70°C sob nitrogênio durante a noite. A mistura foi concentrada. O resíduo foi misturado com água (0,5 mL), mono-hidrato de hidróxido de lítio (28 mg, 0,66 mmol), e dioxano (1 mL). A mistura resultante foi agitada a 100°C sob nitrogênio durante 7 h e temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi extraída com acetato de etila (4 x 1 mL) e os extratos de acetato de etila combinados foram secados e concentrados. O material cru foi purificado por meio de LC/MS preparativa com as seguintes condições: Coluna: Waters XBridge C18, 19 x 150 mm, partículas de 5 μm; Coluna Guard: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 μm; Fase Móvel A: 5:95 de acetonitrila:água com acetato de amônio a 10 mM; Fase Móvel B: 95:5 de acetonitrila:água com acetato de amônio a 10 mM; Gradiente: 15 a 100% de B durante 15 minutos, em seguida uma retenção de 5 minutos a 100% de B; Fluxo: 20 mL/min. Frações contendo o produto desejado foram combinadas e secadas para fornecer ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6- ((benziloxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (8,0 mg, 0,022 mmol) como um sólido. Tempo de retenção por HPLC = 1,66 min (condição A) LC/MS M+1 = 366. 1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) δ 7,38-7,34 (m, 4H), 7,33-7,27 (m, 1H), 7,03-6,96 (m, 3H), 4,56 (s, 2H), 3,56-3,44 (m, 4H), 3,08-2,97 (m, 1H), 2,87 (dd, J=15,9, 4,5 Hz, 1H), 2,83-2,77 (m, 2H), 2,47 (dd, J=16,3, 10,9 Hz, 1H), 2,26 (dd, J=12,9, 7,4 Hz, 1H), 2,16-1,98 (m, 3H), 1,98-1,86 (m, 1H), 1,84-1,69 (m, 2H), 1,611,53 (m, 1H), 1,51-1,40 (m, 1H). Exemplo 50:

[0206] Exemplo 50 foi preparado de Isômero 50C: (5R,7S)-7-((S)-6- (hidroximetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona usando os procedimentos de Etapa D e Etapa E. Tempo de retenção por HPLC = 1,65 min (condição A); LC/MS M+1 = 366. 1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) δ 7,62 (s, 1H), 7,34-7,38 (m, 3H), 7,30 (dq, J=8,8, 4,2 Hz, 1H), 7,04-6,96 (m, 3H), 4,56 (s, 2H), 3,61-3,50 (m, 2H), 3,48 (d, J=6,9 Hz, 2H), 3,10-2,98 (m, 1H), 2,88 (dd, J=16,3, 4,5 Hz, 1H), 2,83-2,76 (m, 2H), 2,47 (dd, J=16,3, 10,4 Hz, 1H), 2,33 (dd, J=13,4, 7,4 Hz, 1H), 2,17-1,99 (m, 3H), 1,99-1,79 (m, 3H), 1,66 (t, J=12,4 Hz, 1H), 1,51-1,39 (m, 1H).

[0207] Os exemplos na Tabela 5 foram preparados de acordo com os procedimentos gerais de Exemplos 50 e 51. Tabela 5

[0208] Os exemplos na Tabela 6 foram preparados de acordo com os procedimentos gerais de Exemplos 50 e 51. Tabela 6

[0209] Os exemplos na Tabela 7 foram preparados de acordo com os procedimentos gerais de Exemplos 30 e 31. Tabela 7

[0210] Os exemplos na Tabela 8 foram preparados de acordo com os procedimentos gerais de Exemplos 50 e 51. Tabela 8 Exemplo 176 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-(isobutiltio)etil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol Preparação 176A: 4-metilbenzenossulfonato de 2-((S)-6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2- il)etila

[0211] (5R,7S)-7-((S)-6-(2-hidroxietil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (130 mg, 0,412 mmol) foi dissolvido em piridina seco (1 mL) e cloreto de p-toluenossulfonila (236 mg, 1,236 mmol) foi adicionado em uma porção. A mistura resultante foi reagida em temperatura ambiente durante 2 h. O solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM e carregado sobre coluna. Purificação por cromatografia flash (0->100% de acetato de etila em DCM) forneceu 4-metilbenzenossulfonato de 2-((S)-6-((5R,7S)-2-oxo-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)etila (169 mg, 0,360 mmol) como um sólido. Tempo de retenção por HPLC = 3,46 min (condição C); LC/MS M+1 = 470. Exemplo 176:

[0212] A uma mistura agitada de isobutilmercaptano (0,021 mL, 0,192 mmol), 4-metilbenzenossulfonato de 2-((S)-6-((5R,7S)-2-oxo-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)etila (30 mg, 0,064 mmol), e dioxano (0,5 mL) foi adicionado NaOH aquoso a 2 N (0,096 mL, 0,192 mmol) a 0°C sob nitrogênio. A mistura resultante foi agitada na mesma temperatura durante 15 min e a 60°C durante 6 h. Em seguida, NaOH aquoso a 2 N (0,639 mL, 1,278 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada a 90°C sob nitrogênio durante a noite. A mistura foi extraída com acetato de etila (4 x 1 mL) e os extratos de acetato de etila combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados. Purificação usando HPLC de fase reversa (Phenomenex Luna 5 μ 30 x 100 mm (Axia); gradiente durante 8 min de 30 a 100% de Solvente B; Solvente A: 10% de MeOH: 90% de H2O: 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), concentração, basificação com NaOH aquoso a 2 N e extração com acetato de etila forneceram ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-(isobutiltio)etil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (22 mg, 0,057 mmol) como um sólido branco. Tempo de retenção por HPLC = 3,39 min (condição C); LC/MS M+1 = 362. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,10-6,87 (m, 3H), 3,57-3,38 (m, 2H), 3,15-2,96 (m, 1H), 2,92-2,75 (m, 3H), 2,682,58 (m, 2H), 2,48-2,37 (m, 3H), 2,29 (dd, J=13,1, 7,5 Hz, 1H), 2,15-2,02 (m, 1H), 2,00-1,37 (m, 10H), 1,02 (d, J=6,6 Hz, 6H).

[0213] Os exemplos na Tabela 9 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplo 176. Tabela 9 Exemplo 184 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-isobutoxietil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il) ciclopentil)metanol

[0214] A uma mistura agitada de 2-metilpropan-1-ol (0,3 mL, 3,25 mmol) e 4-metilbenzenossulfonato de 2-((S)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)etila (40 mg, 0,085 mmol) foi adicionada solução de THF a 1 N de terc-butóxido de potássio (0,852 mL, 0,852 mmol) a 0°C sob nitrogênio. A mistura resultante ficou a 70 °C durante 6 horas antes de NaOH aquoso a 2 N (0,426 mL, 0,852 mmol) ser adicionado. A mistura foi concentrada para remover THF. Dioxano (0,5 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada a 90°C sob nitrogênio durante a noite. A mistura foi extraída com acetato de etila (4 x 1 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados. Purificação usando HPLC de fase reversa (Phenomenex Luna 5 u 30 x 100 mm (Axia); gradiente durante 8 min de 30 a 100% de Solvente B; Solvente A: 10% de MeOH: 90% de H2O: 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), concentração, basificação com NaOH a 2 N, e extração com acetato de etila forneceram ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-isobutoxietil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (27 mg, 0,076 mmol) como um sólido. Tempo de retenção por HPLC = 3,41 min (condição C); LC/MS M+1 = 346. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,00-6,94 (m, 3H), 3,52 (t, J=6,7 Hz, 2H), 3,45 (br, 2H), 3,18 (d, J=6,8 Hz, 2H), 3,08-2,96 (m, 1H), 2,88-2,75 (m, 3H), 2,41 (dd, J=16,4, 10,5 Hz, 1H), 2,26 (dd, J=13,2, 7,9 Hz, 1H), 2,11-2,00 (m, 1H), 1,99-1,34 (m, 10H), 0,90 (d, J=6,6 Hz, 6H).

[0215] Os exemplos na Tabela 10 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplo 184. Tabela 10 Exemplo 195 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(4-metoxi-2-metilbenzil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol Preparação 195A: (5R,7S)-7-((S)-6-(4-metoxi-2-metilbenzil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0216] A uma solução de 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6- ((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)metila (35 mg, 0,077 mmol) e brometo de cobre (I) (33,1 mg, 0,230 mmol) em THF (3 mL) foi adicionado brometo de (4- metoxi-2-metilfenil)magnésio (4610 μl, 2,305 mmol) a -78°C. A mistura de reação foi agitada a -78°C e deixada aquecer para temperatura ambiente durante 16 h. A mistura de reação foi diluída com NH4Cl saturado e água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi coletada, secada sobre Na2SO4, concentrada sobre o rotavapor para fornecer (5R,7S)-7-((S)-6-(4-metoxi-2-metilbenzil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (20 mg) como um sólido branco. LC/MS M+1 = 406. Exemplo 195:

[0217] A uma solução de (5R,7S)-7-((S)-6-(4-metoxi-2-metilbenzil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (20 mg, 0,049 mmol) em dioxano (3 mL) e água (1 mL) foi adicionado LiOH (11,81 mg, 0,493 mmol). A mistura de reação foi agitada a 100°C durante 16 h para fornecer o produto cru que foi purificado sobre uma HPLC preparativa. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (21,2 x 100 mm); MeOH (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); 0% a 100% de gradiente durante 15 minutos; 20 mL/min. Frações isoladas com massa correta foram coletadas e secadas por congelamento durante a noite. Recuperados 10 mg de ((1R,3S)-1- amino-3-((S)-6-(4-metoxi-2-metilbenzil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol TFA. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,20-6,35 (m, 6H), 3,6 (s, 3H), 3,5 (m, 2H), 3,2-2,6 (m, 5H), 2,4 (m, 1H), 2,3 (s, 3H), 2,2 (m, 1H), 2,2-1,5 (m, 7H). LC/MS M+1 = 380.

[0218] Os exemplos na Tabela 11 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplo 195. Tabela 11 Exemplos 226 e 227 ((1R,3S)-1-amino-3-(2-hexil-2,3-di-hidro-1H-inden-5- il)ciclopentil)metanol Preparação 226A: (5R,7S)-7-(6-fenil-7,8-di-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0219] A uma mistura de trifluorometanossulfonato de 6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-3,4-di-hidronaftalen-2-ila (75 mg, 0,180 mmol), trifenilfosfina (10 mg, 0,038 mmol), e sal de cobalto (III) de acetilacetona (4 mg, 0,011 mmol) em THF (5 mL) foi adicionado brometo de fenilmagnésio (0,539 mL, 0,539 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 3 horas e durante este tempo foi deixada aquecer para temperatura ambiente. A reação foi saciada com água e a mistura foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (24 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 13 CV) para dar origem a 55 mg de (5R,7S)-7-(6-fenil-7,8-di-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona. Tempo de retenção por HPLC = 1,06 min (condição G); LC/MS M+1 = 346. Preparação 226B: (5R,7S)-7-(6-fenil-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0220] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-fenil-7,8-di-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (55 mg, 0,159 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionado catalisador de Pearlman (22,36 mg, 0,159 mmol). A mistura foi hidrogenada sob um balão de H2 durante uma hora. A mistura foi filtrada para remover o catalisador e concentrada para dar origem a 38 mg de (5R,7S)-7-(6-fenil-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona. Os isômeros individuais foram separados usando uma coluna CHIRALPAK® AD-H sob condições de SFC (50% de MeOH em CO2). Isômero 1 (226B, 12 mg), tempo de retenção sobre HPLC quiral, 10,3 min; MS (m+1) = 348. Isômero 2 (227B, 12 mg), tempo de retenção sobre HPLC quiral, 13,3 min.; MS (m+1) = 348. A estereoquímica absoluta dos isômeros não foi determinada. Exemplos 226 e 227:

[0221] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-fenil-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (12 mg, 0,035 mmol, 226B, isômero 1) em dioxano (2 mL) foi adicionado NaOH a 2 N. A mistura de reação foi aquecida a 100°C durante a noite, resfriada, e em seguida acidificada com TFA. Os solventes foram removidos, MeOH (1,8 mL) foi adicionado, e a mistura foi filtrada para remover os sólidos e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. Recuperados 8 mg de ((1R,3S)-1-amino-3-(6-fenil-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (Isômero 1, Exemplo 226). Tempo de retenção por HPLC = 8,22 min (condição H); LC/MS M+1 = 322; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,40-7,25 (m, 4H), 7,25-7,15 (m, 1H), 7,11-6,97 (m, 3H), 3,81-3,55 (m, 2H), 3,24-3,06 (m, 1H), 3,03-2,79 (m, 5H), 2,45 (ddd, J=13,4, 7,1, 1,1 Hz, 1H), 2,23-2,06 (m, 2H), 2,04-1,86 (m, 4H), 1,75 (t, J=12,7 Hz, 1H); MS (m+1) = 322.

[0222] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-fenil-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (12 mg, 0,035 mmol, 227B, isômero 2) em dioxano (2 mL) foi adicionado NaOH a 2 N. A mistura de reação foi aquecida a 100 °C durante a noite, resfriada, e em seguida acidificada com TFA. Os solventes foram removidos, MeOH (1,8 mL) foi adicionado, e a mistura foi filtrada para remover os sólidos e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. Recuperados 4,5 mg de ((1R,3S)-1-amino-3-(6-fenil-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (Exemplo 227, Isômero 2). Tempo de retenção por HPLC = 8,24 min (condição H); LC/MS M+1 = 322; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,36-7,27 (m, 4H), 7,24-7,17 (m, 1H), 7,05 (s, 3H), 3,73-3,58 (m, 2H), 3,21-3,08 (m, 1H), 3,05-2,82 (m, 5H), 2,44 (ddd, J=13,4, 7,1, 1,1 Hz, 1H), 2,21-2,07 (m, 2H), 2,04-1,88 (m, 4H), 1,75 (t, J=12,7 Hz, 1H); MS (m+1) = 322.

[0223] Os exemplos na Tabela 12 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplos 226 e 227. Tabela 12 Exemplos 238 e 239 ((1R,3S)-3-(6-(2-(aliloxi)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-1- aminociclopentil)metanol Preparação 238A: (5R,7S)-7-(3',4'-di-hidro-1'H-espiro[[1,3]dioxolano- 2,2'-naftalen]-6'-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0224] À mistura de (5R,7S)-7-(6-oxo-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (200 mg, 0,701mmol) e etano- 1,2-diol (870 mg, 14,02 mmol) em MeCN (5 ml), ácido p- toluenossulfônico (26,7 mg, 0,140 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 16 h. A mistura foi diluída com EtOAc (50 ml), a camada orgânica foi lavada com NaHCO3 saturado (3 x 20 ml), secada com Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 205 mg de (5R,7S)-7-(3',4'-di-hidro-1'H- espiro[[1,3]dioxolano-2,2'-naftalen]-6'-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan- 2-ona cru. Tempo de retenção por HPLC = 2,58 min (condição B); LC- MS M+1 = 330. Preparação 238B: (5R,7S)-7-(6-(2-hidroxietoxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0225] À mistura de (5R,7S)-7-(3',4'-di-hidro-1'H- espiro[[1,3]dioxolano-2,2'-naftalen]-6'-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan- 2-ona (50 mg, 0,152 mmol) e BF3.OEt2 (192 μl, 1,52 mmol) em THF (5 ml), NaCNBH4 (76 mg, 1,21 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A reação foi saciada com água (1 ml) a 0°C. A mistura foi diluída com EtOAc (40 ml), lavada com NaHCO3 saturado (2 x 20 ml), secada com Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 50 mg de (5R,7S)-7-(6-(2-hidroxietoxi)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona. Tempo de retenção por HPLC = 2,42 min (condição B); LC-MS M+1 = 332. Preparação 238C: 4-metilbenzenossulfonato de 2-((6-((5R,7S)-2-oxo-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)oxi)etila

[0226] À mistura de (5R,7S)-7-(6-(2-hidroxietoxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (300 mg, 0,905 mmol) em piridina seco (5 ml), cloreto de 4-metilbenzeno-1-sulfonila (518 mg, 2,72 mmol) foi adicionado em uma porção a 0 °C. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora, a mistura foi diluída com EtOAc (80 ml), lavada com NaHCO3 saturado (3 x 30 ml), secada com Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado com cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 65% de EtOAc durante 40 minutos) para fornecer 360 mg de 4-metilbenzenossulfonato de 2-((6-((5R,7S)-2-oxo- 3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2- il)oxi)etila. Tempo de retenção por HPLC = 3,33 min (condição B); LC- MS M+1 = 486. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,77 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,40 (d, J=7,9 Hz, 2H), 7,04-6,94 (m, 3H), 4,42-4,26 (m, 2H), 4,17 (t, J=4,5 Hz, 2H), 3,73 (dt, J=9,5, 4,5 Hz, 3H), 3,08-2,81 (m, 3H), 2,742,60 (m, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,34-2,27 (m, 1H), 2,09 (s, 2H), 1,95 (s, 3H), 1,82-1,75 (m, 2H). Preparações 238D e 239D: (5R,7S)-7-(6-(2-(aliloxi)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0227] À mistura de 4-metilbenzenossulfonato de 2-((6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2- il)oxi)etila (80 mg, 0,165 mmol) e prop-2-en-1-ol (28,7 mg, 0,494 mmol) em 2 ml de THF, KOtBu (92 mg, 0,824 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas, em seguida a 65°C durante 1,5 horas. A mistura foi saciada com água (1 ml) a 0°C, diluída com EtOAc (40 ml), lavada com NaHCO3 saturado (2 x 20 ml), secada com Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 60 mg de (5R,7S)-7-(6-(2-(aliloxi)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)- 3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona. Os isômeros individuais foram separados usando uma Chiral OD-H 25 X 3 cm ID, 5 um sob condições de SFC (20% de MeOH em CO2). Preparação 238D: Isômero 1 (10 mg), tempo de retenção por HPLC = 3,20 min (condição B); MS (m+1) = 372; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,05-6,94 (m, 3H), 6,00-5,82 (m, 1H), 5,33-5,08 (m, 2H), 4,43-4,26 (m, 2H), 4,03 (dt, J=5,6, 1,4 Hz, 2H), 3,89-3,58 (m, 5H), 3,12-2,85 (m, 3H), 2,83-2,69 (m, 2H), 2,29 (dd, J=13,0, 7,0 Hz, 1H), 2,18-2,02 (m, 3H), 2,01-1,74 (m, 4H).

[0228] Preparação 239D: Isômero 2 (8 mg), tempo de retenção por HPLC = 3,19 min (condição B); MS (m+1) = 372. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,11-6,94 (m, 3H), 6,01-5,84 (m, 1H), 5,35-5,11 (m, 2H), 4,47-4,25 (m, 2H), 4,03 (dt, J=5,6, 1,4 Hz, 2H), 3,88-3,56 (m, 5H), 3,13-2,87 (m, 3H), 2,83-2,67 (m, 2H), 2,29 (dd, J=13,0, 7,0 Hz, 1H), 2,17-1,71 (m, 7H). A estereoquímica absoluta dos isômeros não foi determinada. Exemplos 238 e 239:

[0229] A mistura de (5R,7S)-7-(6-(2-(aliloxi)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (Preparação 238D, 10 mg, 0,027 mmol) e LiOH-H2O (13,6 mg, 15 eq) em dioxano (1,5 ml) e água (0,5 ml) foi aquecida a 100°C durante 16 h. Após resfriamento, a mistura foi diluída com DCM (50 ml) e água (20 ml), a camada orgânica foi separada e à camada aquosa foi adicionado NaHCO3 saturado (10 ml) e extraído com DCM (30 ml). A mistura de DCM combinada foi secada com Na2SO4, concentrada sob vácuo e purificada com HPLC preparativa: coluna Phenomenex Luna C18 5 u 21,2 x 100 mm. Solvente A: 10% de MeOH - 90% de H2O -0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH-10% de H2O-0,1% de TFA. Tempo de gradiente = 15 min. Início B = 0%, Final B 100%. Tempo de paralisação 25 min. O pico desejado foi coletado, basificado para aproximadamente pH 8 com NaHCO3 saturado, o solvente foi removido sob pressão reduzida e a camada aquosa foi extraída com DCM (3 x 30 ml), que foi secada com Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida, novamente dissolvida em MeCN (2 ml) e água (1 ml) e liofilizada durante a noite para fornecer Exemplo 238 (6 mg de isômero 1) ((1R,3S)-3-(6-(2- (aliloxi)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-1-aminociclopentil) metanol. Tempo de retenção por HPLC = 8,0 min (condição L); LC-MS M+1 = 346; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,08-6,94 (m, 3H), 5,92 (ddt, J=17,2, 10,7, 5,4 Hz, 1H), 5,34-5,12 (m, 2H), 4,03 (dt, J=5,6, 1,5 Hz, 2H), 3,89-3,58 (m, 7H), 3,21-2,86 (m, 3H), 2,82-2,71 (m, 2H), 2,482,36 (m, 1H), 2,19-2,02 (m, 2H), 2,01-1,81 (m, 4H), 1,72 (t, J=12,7 Hz, 1H).

[0230] Exemplo 239 (5 mg de isômero 2) ((1R,3S)-3-(6-(2- (aliloxi)etoxi)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-1- aminociclopentil)metanol foi preparado similarmente de 8 mg de Preparação 239D de (5R,7S)-7-(6-(2-(aliloxi)etoxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona. Tempo de retenção por HPLC = 7,99 min (condição L); LC-MS M+1 = 346; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,08-6,95 (m, 3H), 6,02-5,82 (m, 1H), 5,335,12 (m, 2H), 4,03 (dt, J=5,5, 1,4 Hz, 2H), 3,88-3,54 (m, 7H), 3,14-2,87 (m, 3H), 2,82-2,66 (m, 2H), 2,33 (dd, J=13,2, 6,4 Hz, 1H), 2,15-2,02 (m, 2H), 1,98-1,80 (m, 4H), 1,65 (t, J=12,5 Hz, 1H).

[0231] Os exemplos na Tabela 13 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplos 238 e 239. Tabela 13 Exemplos 268 e 269 ((1R,3S)-1-amino-3-(6-(4-metoxiphenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il) ciclopentil)metanol

[0232] A uma mistura de trifluorometanossulfonato de 6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-3,4-di-hidronaftalen-2-ila (100 mg, 0,240 mmol), iodeto de cobre (I) (4,56 mg, 0,024 mmol), e cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (16,82 mg, 0,024 mmol) em TEA (3 mL) foi adicionado 1-etinil-4-metoxibenzeno (63,3 mg, 0,479 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 60°C durante 1 hora. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com HCl a 1 M. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (24 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 13 CV) para dar origem a (5R,7S)-7-(6-((4-metoxifenil)etinil)-7,8-di-hidronaftalen-2-il)-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (68 mg, 0,170 mmol). LC/MS M+1 = 402.

[0233] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-((4-metoxifenil)etinil)-7,8-di- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (62 mg, 0,155 mmol) em MeOH (5 mL) foi adicionado catalisador de Pearlman (10,90 mg, 0,078 mmol). O frasco foi carregado com hidrogênio e hidrogenado sob um balão durante 2 horas. O catalisador foi filtrado e a mistura foi concentrada em vácuo para dar origem a 45 mg de (5R,7S)-7-(6-(4- metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona. Dois diastereômeros foram separados sob condições de SFC sobre uma coluna Chiral AS-H 25 X 3 cm ID, 5 μm e eluindo com 60/40 de CO2/MeOH a 85,0 mL/min. Cada isômero foi levado para a etapa seguinte. LC/MS M+1 = 406.

[0234] Exemplo 268: A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-(4- metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (18 mg, 0,044 mmol) em DMSO (1 mL) e MeOH (1 mL) foi adicionado NaOH a 1 N (0,5 mL). A mistura de reação foi aquecida a 90°C durante a noite. A mistura foi acidificada com TFA seguida pela remoção da maior parte do solvente. A mistura foi filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. Frações com massa correta foram isoladas e secadas por congelamento durante a noite para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-(6- (4-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, TFA (14 mg, 0,026 mmol). 1H RMN em CD3OD (400 MHz, METANOL- d4) δ 7,13 (d, J=8,6 Hz, 2H), 7,04-6,96 (m, 3H), 6,84 (d, J=8,8 Hz, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,71-3,55 (m, 2H), 3,19-3,01 (m, 1H), 2,95-2,73 (m, 3H), 2,73-2,63 (m, 2H), 2,42 (dd, J=14,2, 7,8 Hz, 2H), 2,21-2,06 (m, 1H), 2,05-1,85 (m, 4H), 1,80-1,59 (m, 4H), 1,43 (dtd, J=12,8, 10,5, 6,1 Hz, 1H). MS (m+1) = 380. RT de Pico de HPLC = 10,16 min. (Condição L). Pureza = 92%.

[0235] Exemplo 269: A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-(4- metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (17 mg, 0,044 mmol) em DMSO (1 mL) e MeOH (1 mL) foi adicionado NaOH a 1 N (0,5 mL). A mistura foi aquecida a 90°C durante a noite. A mistura foi acidificada com TFA seguida pela remoção da maior parte do solvente. A mistura foi filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. Frações com a massa correta foram isoladas e secadas por congelamento durante a noite para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-(6- (4-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, TFA (14 mg, 0,026 mmol). 1H RMN em CD3OD (400 MHz, METANOL- d4) δ 7,13 (d, J=8,6 Hz, 2H), 7,04-6,96 (m, 3H), 6,84 (d, J=8,8 Hz, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,70-3,55 (m, 2H), 3,19-3,03 (m, 1H), 2,97-2,74 (m, 3H), 2,73-2,62 (m, 2H), 2,42 (dd, J=14,1, 7,7 Hz, 2H), 2,21-2,06 (m, 1H), 2,05-1,87 (m, 4H), 1,81-1,58 (m, 4H), 1,43 (dtd, J=12,7, 10,6, 5,9 Hz, 1H). MS (m+1) = 380. RT de Pico de HPLC = 10,16 min. (Condição L) Pureza = 99%.

[0236] Os exemplos na Tabela 14 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplos 268 e 269. Tabela 14 Exemplo 278 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3-isopropoxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol Preparação 278A: (5R,7S)-7-((R)-6-(but-3-en-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0237] Uma solução de dietil éter (1M) de brometo de alilmagnésio (4,39 mL, 4,39 mmol) foi adicionada a uma mistura agitada de brometo de cobre (I) (63,0 mg, 0,439 mmol), 4-metilbenzenossulfonato de ((R)- 6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)metila (100 mg, 0,220 mmol) e tetra-hidrofurano anidroso (2 mL) a -78°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada a -78°C durante 20 minutos antes da temperatura ser lentamente elevada para temperatura ambiente. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas. Solução de NH4Cl aquosa saturada (3 mL) foi adicionada lentamente para saciar a reação. Acetato de etila (4 mL) e água (1 mL) foram adicionados. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x 3 mL). As soluções orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para fornecer (5R,7S)-7-((R)-6-(but-3-en-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (90 mg, 0,277 mmol). LC/MS M+1 = 326. Preparação 278B: 3-((S)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)propanal

[0238] A uma solução clara de (5R,7S)-7-((R)-6-(but-3-en-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (0,09 g, 0,77 mmol) em THF (1,5 mL) foram sequencialmente adicionados 50% de NMO em água (0,115 mL, 0,553 mmol) e 4% de tetróxido de ósmio em água (0,051 mL, 8,30 μmol) em temperatura ambiente. A solução foi vigorosamente agitada em temperatura ambiente durante a noite. Mais NMO a 50% em água (0,06 mL) foi adicionado. A solução foi vigorosamente agitada em temperatura ambiente durante 1 dia. Periodato de sódio (0,237 g, 1,106 mmol) em H2O (1 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada vigorosamente em temperatura ambiente sob nitrogênio durante 30 min. A mistura foi extraída com acetato de etila (3 x 2 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 4 g, eluição gradiente de 15 a 100% de acetato de etila em hexanos) forneceu 3-((S)-6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2- il)propanal (63 mg, 0,192 mmol) como um sólido. Tempo de retenção por HPLC = 2,92 min (condição C); LC/MS M+1 = 328. Preparação 278C: (5R,7S)-7-((S)-6-(3-isopropoxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0239] A uma mistura agitada de 3-((S)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)propanal (21 mg, 0,064 mmol), isopropoxitrimetilsilano (0,057 mL, 0,321 mmol), e trietilsilano (0,051 mL, 0,321 mmol) em nitrometano (1 mL) foi adicionado cloreto férrico (1,040 mg, 6,41 μmol) a 0°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada a 0°C durante 15 min e em temperatura ambiente durante 30 min antes de ser concentrada. O resíduo foi misturado com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (1 mL) e extraído com acetato de etila (3 x 1 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados sob pressão reduzida para fornecer (5R,7S)-7-((S)-6-(3-isopropoxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (23 mg, 0,062 mmol) como um sólido. LC/MS M+1 = 372. Exemplo 278:

[0240] Uma mistura de (5R,7S)-7-((S)-6-(3-isopropoxipropil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (23 mg, 0,062 mmol), NaOH a 2 N aquoso (0,619 mL, 1,238 mmol), e dioxano (0,5 mL) foi agitada a 90°C sob nitrogênio durante a noite. A mistura foi resfriada e extraída com acetato de etila (4 x 1 mL). As soluções orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida. Purificação usando HPLC de fase reversa (Phenomenex Luna 5 μ 30 x 100 mm (Axia); gradiente durante 8 min de 30 a 100% de Solvente B; Solvente A: 10% de MeOH: 90% de H2O: 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), concentração, basificação com NaOH a 2 N aquoso, e extração com acetato de etila forneceram ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3- isopropoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (21 mg, 0,052 mmol) como um sólido branco. Tempo de retenção por HPLC = 3,04 min (condição C); LC/MS M+1 = 346. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,03-6,93 (m, 3H), 3,55 (dt, J =12,2, 6,1 Hz, 1H), 3,51-3,37 (m, 4H), 3,08-2,93 (m, 1H), 2,89-2,71 (m, 3H), 2,38 (dd, J=16,2, 10,7 Hz, 1H), 2,26 (dd, J=13,0, 7,7 Hz, 1H), 2,04 (br. s., 1H), 1,98-1,60 (m, 7H), 1,56-1,45 (m, 1H), 1,45-1,32 (m, 3H), 1,16 (d, J=6,2 Hz, 6H). Exemplo 279 ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(3-(oxetan-3-ilóxi)propil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol Preparação 279A: (5R,7S)-7-((R)-6-(3-hidroxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0241] A uma mistura agitada de 3-((R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)propanal (162 mg, 0,495 mmol) (Exemplo 278 etapa B) em 100% de etanol (8 mL) e diclorometano (2 mL) foi adicionado NaBH4 (18,72 mg, 0,495 mmol) em temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h. A mistura foi concentrada. A reação foi saciada com solução de NH4Cl aquosa saturada (1 mL) e água (1 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etila (4 mL, 2 x 1 mL). As soluções orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para fornecer (5R,7S)-7-((R)-6-(3- hidroxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4] nonan-2-ona (170 mg, 0,516 mmol) como um sólido branco. Tempo de retenção por HPLC = 3,03 min (condição C); LC/MS M+1 = 330. Preparação 279B: 4-metilbenzenossulfonato de 3-((R)-6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2- il)propila

[0242] O Intermediário acima foi procedimento como Preparação 176A Exemplo 279

[0243] A uma mistura agitada de 4-metilbenzenossulfonato de 3- ((R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)propila (30 mg, 0,062 mmol) e oxetan-3-ol (0,06 mL, 1,016 mmol) foi adicionada solução de THF a 1 N de terc-butóxido de potássio (0,620 mL, 0,620 mmol) a 0°C sob nitrogênio. A mistura resultante ficou em temperatura ambiente durante 5 horas e 60°C durante 1 hora antes de NaOH aquoso a 2 N (0,310 mL, 0,620 mmol) ser adicionado. A mistura foi concentrada para remover THF. Dioxano (0,5 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada a 70 °C sob nitrogênio durante 15 horas e a 100 °C durante 5 horas. A mistura foi resfriada e extraída com acetato de etila (4 x 1 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados. Purificação usando HPLC de fase reversa (Phenomenex Luna 5 μ 30 x 100 mm (Axia); gradiente durante 9 min de 20 a 100% de Solvente B; Solvente A: 10% de MeOH: 90% de H2O: 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), concentração, basificação com NaOH a 2 N, e extração com acetato de etila forneceram ((1R,3S)-1- amino-3-((R)-6-(3-(oxetan-3-ilóxi)propil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol (19 mg, 0,045 mmol) como um sólido. Tempo de retenção por HPLC = 2,78 min (condição C); LC/MS M+1 = 360. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,05-6,87 (m, 3H), 4,81-4,70 (m, 2H), 4,61 (t, J=6,2 Hz, 2H), 4,57-4,48 (m, 1H), 3,37 (t, J=6,6 Hz, 2H), 3,02 (br. s., 1H), 2,90-2,72 (m, 3H), 2,45-2,18 (m, 2H), 2,13-1,61 (m, 10H), 1,56-1,31 (m, 4H).

[0244] Os exemplos na Tabela 15 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplos 278 e 279. Tabela 15 Exemplo 286 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-(piridin-2-il)etil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol Preparação 286A: 6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)- 1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carbaldeído Preparações 286B e 286C: (5R,7S)-7-((S)-6-etinil-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona e (5R,7S)-7-((R)- 6-etinil-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2- ona.

[0245] A uma mistura de 6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carbaldeído (718 mg, 2,4 mmol) e carbonato de potássio (995 mg, 7,20 mmol) em MeOH (3 mL) foi adicionado (1-diazo-2-oxopropil)fosfonato de dimetila (0,540 mL, 3,60 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante uma hora. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (20 a 100% de EtOAc sobre 12 CV) para dar origem a 580 mg de (5R,7S)-7- 6-etinil-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2- ona. A mistura diastereomérica foi separada por SFC usando uma coluna Chiralpak IC, 25 X 3 cm ID, 5 μm e eluindo com 90/10 de CO2/MeOH a 85,0 mL/min. Pico 1 foi isolado para dar origem a (5R,7S)- 7-((S)-6-etinil-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (225 mg, 0,762 mmol). Pico 2 foi isolado para dar origem a (5R,7S)-7-((R)-6-etinil-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (245 mg, 0,829 mmol). A estereoquímica absoluta foi determinada convertendo Preparação 286B para Preparação 677B. Análise de HPLC quiral indica compostos que foram idênticos e 286B foi atribuído como a estereoquímica S no centro de alquinila. À preparação 286C foi em seguida atribuída a configuração R. Exemplo 286:

[0246] Um frasco de base redonda secado ao forno foi carregado com carbonato de césio (66,2 mg, 0,203 mmol) e bis(di-terc-butil(4- dimetilaminofenil)fosfina)dicloropaládio (II) (3 mg, 4,24 μmol) sob nitrogênio. A mistura foi desgaseificada três vezes sob vácuo, seguida pela adição etapa a etapa de 2-bromopiridina (10 μl, 0,105 mmol), (5R,7S)-7-((R)-6-etinil-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (20 mg, 0,068 mmol), e acetonitrila (1 mL). A mistura de reação foi aquecida a 80 °C durante a noite. Solvente foi removido em vácuo e o resíduo foi dissolvido em MeOH (2 mL). O catalisador de Pearlman (5 mg, 0,036 mmol) foi adicionado e a mistura foi hidrogenada sob um balão de H2 durante 1 hora. O catalisador foi removido por filtração. Em seguida, NaOH a 1 N (2 mL) foi adicionado ao filtrado e a mistura foi aquecida a 95°C durante 6 horas. A mistura foi acidificada com TFA, em seguida filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. Frações foram isoladas com a massa correta e secadas por congelamento durante a noite para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-(piridin-2-il)etil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (13 mg, 0,033 mmol). RT de pico de HPLC = 3,66 minutos (Condição L) pureza = 90%. MS (m+1) = 351. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 8,44 (dd, J=5,1, 0,9 Hz, 1H), 7,77 (td, J=7,7, 1,8 Hz, 1H), 7,37 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,26 (ddd, J=7,5, 5,1, 1,1 Hz, 1H), 6,99 (s, 3H), 3,62-3,46 (m, 2H), 3,14-2,98 (m, 1H), 2,93 (t, J=7,8 Hz, 2H), 2,89-2,69 (m, 2H), 2,45 (dd, J=16,3, 9,7 Hz, 1H), 2,31 (dd, J=13,2, 6,4 Hz, 1H), 2,12-1,98 (m, 2H), 1,97-1,87 (m, 3H), 1,87-1,72 (m, 4H), 1,63 (t, J=12,5 Hz, 1H), 1,46 (dtd, J=12,8, 10,4, 5,9 Hz, 1H).

[0247] Os exemplos na Tabela 16 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplo 286. Tabela 16 Exemplo 305 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-(piridin-2-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il) ciclopentil)metanol Preparação 305A: (5R,7S)-7-((R)-6-(((1-fenil-1H-tetrazol-5- il)sulfonil)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0248] A uma mistura de 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6- ((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)metila (1 g, 2,195 mmol) e carbonato de potássio (0,910 g, 6,59 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionado 1-fenil-1H-tetrazol- 5-tiol (0,782 g, 4,39 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 80 °C durante a noite. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 13 CV) para dar origem a (5R,7S)-7-((R)-6-(((1-fenil-1H- tetrazol-5-il)thio)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (0,94 g, 2,036 mmol). LC/MS M+1 = 462. Ao peróxido de hidrogênio (8,32 mL, 81 mmol) a 0 °C foi adicionado tetra-hidrato de molibdato de amônio (0,503 g, 0,407 mmol). A solução resultante foi adicionada a uma mistura de (5R,7S)-7-((R)-6-(((1-fenil- 1H-tetrazol-5-il)tio)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (0,94 g, 2,036 mmol) em THF (30 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada durante a noite em temperatura ambiente. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada para dar origem a (5R,7S)-7-((R)-6-(((1-fenil-1H-tetrazol- 5-il)sulfonil)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (1 g, 2,026 mmol) que foi usado sem nova purificação. LC/MS M+1 = 494. Preparação 305B: (5R,7S)-7-((R)-6-((E)-2-fluoro-5-metoxiestiril)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0249] A uma mistura de 2-fluoro-5-metoxibenzaldeído (30,0 mg, 0,194 mmol) e (5R,7S)-7-((R)-6-(((1-fenil-1H-tetrazol-5-il)sulfonil)metil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (32 mg, 0,065 mmol) em THF foi adicionado KHMDS (0,259 mL, 0,259 mmol). Após agitar em temperatura ambiente durante 1 hora, a reação foi saciada com MeOH. A mistura de reação foi purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. Frações com massa correta foram combinadas e secadas por congelamento durante a noite. Recuperado (5R,7S)-7-((R)-6-((E)-2-fluoro-5-metoxiestiril)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (6 mg, 0,014 mmol). LC/MS M+1 = 422. Exemplo 305:

[0250] A uma mistura de (5R,7S)-7-((R)-6-((E)-2-fluoro-5- metoxiestiril)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (6 mg, 0,014 mmol) em MeOH (2 mL) foi adicionado catalisador de Pearlman (0,5 mg, 3,56 μmol). A mistura foi hidrogenada sob um balão de hidrogênio durante 1 hora. O catalisador foi removido por filtração. Em seguida, NaOH a 1 N (2 mL) foi adicionado e a mistura foi aquecida ao refluxo durante a noite. A mistura foi resfriada e acidificada com TFA, em seguida purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações foram isoladas com a massa correta e secadas por congelamento durante a noite para dar origem a (1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-fluoro-5-metoxifenetil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, TFA (4 mg, 7,66 μmol). 1H RMN em CD3OD (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,03-6,98 (m, 3H), 6,95 (t, J=9,2 Hz, 1H), 6,80 (dd, J=6,2, 3,1 Hz, 1H), 6,73 (dt, J=8,8, 3,5 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,71-3,56 (m, 2H), 3,17-3,04 (m, 1H), 2,90 (dd, J=16,6, 4,3 Hz, 1H), 2,85-2,68 (m, 4H), 2,52-2,35 (m, 2H), 2,20-2,08 (m, 1H), 2,071,88 (m, 4H), 1,82-1,59 (m, 4H), 1,44 (dtd, J=12,8, 10,4, 6,1 Hz, 1H). MS (m+1) = 398. RT de pico de HPLC = 8,01 min. (Condição L) Pureza = 98%.

[0251] Os exemplos na Tabela 17 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplo 305. Tabela 17 Exemplo 314 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(5-metoxi-5-metilhexil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol

[0252] A uma mistura de (5R,7S)-7-((S)-6-(5-metilhex-4-en-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (20 mg, 0,054 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionado acetato mercúrico (26,0 mg, 0,082 mmol). Após 1 hora, LCMS mostrou conversão quase completa para novo pico que tinha a massa de produto desejado como o aduto de Hg. Uma solução de boro-hidreto de sódio (10,29 mg, 0,272 mmol) em hidróxido de sódio (0,5 mL, 0,500 mmol) foi adicionada à mistura de reação para remover Hg. A mistura foi filtrada para remover os sólidos. Em seguida, mais NaOH a 1 N foi adicionado ao filtrado e a mistura foi aquecida para 95°C durante a noite. A mistura foi resfriada e acidificada com TFA, em seguida purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações isoladas com massa correta e secadas por congelamento durante a noite para dar origem a ((1R,3S)- 1-amino-3-((S)-6-(5-metoxi-5-metilhexil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol, TFA (10 mg, 0,019 mmol). RT de pico de HPLC = 7,62 min (Condição L) MS (m+1) = 374. 1H RMN (400 MHz, METANOL- d4) δ 7,03-6,96 (m, 3H), 3,72-3,55 (m, 2H), 3,20 (s, 3H), 3,15-3,04 (m, 1H), 2,89-2,73 (m, 3H), 2,48-2,31 (m, 2H), 2,19-2,05 (m, 1H), 2,03-1,88 (m, 4H), 1,81-1,62 (m, 2H), 1,59-1,49 (m, 2H), 1,48-1,29 (m, 7H), 1,17 (s, 6H). Exemplo 315 ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(4-isopropoxibutil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol

[0253] A uma mistura agitada de 4-((R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)butanal (27 mg, 0,079 mmol), isoproxitrimetilsilano (0,070 mL, 0,395 mmol), e trietilsilano (0,063 mL, 0,395 mmol) em nitrometano (1 mL) foi adicionado cloreto férrico (1,283 mg, 7,91 μmol) a 0°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada a 0°C durante 15 min e em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura foi concentrada. O resíduo foi misturado com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (1 mL) e extraído com acetato de etila (3 x 1 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados sob pressão reduzida. O produto cru foi dissolvido em MeOH/DMSO (1:1) e tratado com NaOH a 1 N a 95 °C durante a noite. LCMS mostra hidrólise completa. A mistura foi acidificada com TFA, em seguida filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações com a massa correta foram isoladas e secadas por congelamento durante a noite para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(4-isopropoxibutil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, TFA (25 mg, 0,048 mmol). MS (m+1) = 360. RT de pico de HPLC = 7,48 min (Condição L). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,03-6,95 (m, 3H), 3,74-3,56 (m, 3H), 3,48 (t, J=6,4 Hz, 2H), 3,18-3,03 (m, 1H), 2,93-2,71 (m, 3H), 2,49-2,31 (m, 2H), 2,20-2,05 (m, 1H), 2,03-1,87 (m, 4H), 1,73 (t, J=12,8 Hz, 2H), 1,58 (q, J=6,5 Hz, 2H), 1,54-1,45 (m, 2H), 1,45-1,30 (m, 3H), 1,17 (d, J=6,2 Hz, 6H). Exemplo 316 ((1R,3S)-1-amino-3-((6S)-6-(5-metoxiexil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il) ciclopentil)metanol

[0254] A uma mistura de (5R,7S)-7-((S)-6-(hex-5-en-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (38 mg, 0,107 mmol) em MeOH (1 mL) foi adicionado acetato mercúrico (34,3 mg, 0,107 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 2 h, em seguida checada por LCMS. LCMS mostrou massa de produto desejada mais Hg. Uma solução de boro-hidreto de sódio (20,33 mg, 0,537 mmol) em hidróxido de sódio a 1 M (1,075 mL, 1,075 mmol) foi adicionada. A mistura foi agitada durante uma hora. A mistura foi filtrada para remover os sólidos. O filtrado foi em seguida aquecido em NaOH a 1 N/MeOH a 95°C durante a noite, resfriado e acidificado com TFA, e em seguida purificado por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações com a massa correta foram isoladas e secadas por congelamento durante a noite para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3- ((6S)-6-(5-metoxiexil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol, TFA (18 mg, 0,037 mmol). RT de pico de HPLC = 7,69/ min (Condição L) MS (m+1) = 360. 1H RMN (400 MHz, METANOL- d4) δ 7,03-6,96 (m, 3H), 3,72-3,56 (m, 2H), 3,39-3,35 (m, 1H), 3,34 (s, 3H), 3,18-3,03 (m, 1H), 2,91-2,74 (m, 3H), 2,49-2,30 (m, 2H), 2,18-2,05 (m, 1H), 2,03-1,87 (m, 4H), 1,80-1,64 (m, 2H), 1,56 (d, J=3,7 Hz, 1H), 1,50-1,27 (m, 8H), 1,15 (d, J=6,2 Hz, 3H). Exemplos 317 a 322 (1-amino-3-(6-hexil-5,6,7,8-tetra-hidroquinolin-2-il)ciclopentil)metanol Preparação 317A: 8-hexilideno-1,4-dioxaespiro[4,5]decano

[0255] A uma mistura de sal de iodeto de hexiltrifenilfosfônio (25,6 g, 54 mmol) em THF (100 mL) foi adicionado LiHMDS (60 mL, 60,0 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 15 minutos, em seguida 1,4-dioxaespiro[4,5]decan-8-ona (8,43 g, 54,0 mmol) em THF (100 mL) foi adicionado gota a gota. A mistura de reação foi agitada durante a noite. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada, e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (120 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (100% de Hexanos sobre 4 CV, em seguida 0-30% de EtOAc sobre 6 CV). As frações isoladas com produto desejado, concentradas e secadas em vácuo. Recuperados 3,5 g de 8-hexilideno-1,4-dioxaespiro[4,5]decano. Preparação 317B: 4-hexilcicloexanona

[0256] A uma mistura de 8-hexilideno-1,4-dioxaespiro[4,5]decano (3,5 g, 15,60 mmol) em MeOH (30 mL) foi adicionado catalisador de Pearlman (0,219 g, 1,560 mmol). A mistura de reação foi hidrogenada a 3,51 kg/cm2 (50 psi) durante 2 horas. A mistura foi filtrada e concentrada. O resíduo foi dissolvido em acetona e tratado com HCl a 1 N (20 ml de cada). Após agitar durante 1 hora, a mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada para dar origem a 4- hexilcicloexanona (2,8 g, 15,36 mmol). Preparação 317C: 6-hexil-5,6,7,8-tetra-hidroquinolin-2-ol

[0257] A uma mistura de 4-hexilcicloexanona (2,8 g, 15,36 mmol), pirrolidina (1,397 mL, 16,89 mmol), e mono-hidrato de ácido p- toluenossulfônico (0,088 g, 0,461 mmol) em tolueno (100 mL) foram adicionadas peneiras moleculares. A mistura de reação foi aquecida a 100°C durante a noite. A mistura foi filtrada e o solvente foi removido. Este material foi dissolvido em MeOH (30 mL) em um vaso de pressão de aço inoxidável. O vaso foi resfriado para -78°C e amônia foi borbulhada durante 10 minutos. Propriolato de metila (3,87 mL, 46,1 mmol) foi adicionado e o vaso foi selado e aquecido a 100°C durante 4 horas. A mistura de reação foi resfriada em um banho de gelo e em seguida ventilada e aberta. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com água. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (80 g) usando um gradiente de MeOH/DCM:DCM a 20% (0- 50% 20% de MeOH/DCM sobre 15 CV). O produto contendo frações foi combinado, concentrado e secado em vácuo para dar origem a 6-hexil- 5,6,7,8-tetra-hidroquinolin-2-ol (2,5 g, 10,71 mmol). Preparação 317D: 2-bromo-6-hexil-5,6,7,8-tetra-hidroquinolina (Isômeros 1 e 2)

[0258] A uma mistura de 6-hexil-5,6,7,8-tetra-hidroquinolin-2-ol (580 mg, 2,486 mmol) e tribrometo de fósforo (4,97 mL, 4,97 mmol) em tolueno (5 mL) foi adicionado oxibrometo de fósforo (713 mg, 2,486 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 100°C durante 3 dias. A mistura foi resfriada para 0°C e em seguida vertida sobre gelo. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaHCO3 saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 50% de EtOAc sobre 12 CV). O produto contendo frações foi combinado, concentrado e secado em vácuo para dar origem a 2-bromo-6-hexil-5,6,7,8-tetra- hidroquinolina (300 mg, 1,013 mmol). Preparações 317E1 e 317E2: 3-(6-hexil-5,6,7,8-tetra-hidroquinolin-2- il)ciclopent-2-enona (Isômeros 1 e 2)

[0259] A uma mistura de 2-bromo-6-hexil-5,6,7,8-tetra- hidroquinolina (885 mg, 2,99 mmol) em THF (5 mL) foi adicionado n- BuLi (2,80 mL, 4,48 mmol) gota a gota. A mistura de reação foi agitada durante 30 minutos. Em seguida, 3-etoxiciclopent-2-enona (1,774 mL, 14,94 mmol) e cloreto de lantânio (1465 mg, 5,97 mmol) foram adicionados. A mistura de reação foi deixada aquecer para 0°C. Após 3 horas, a reação foi saciada com água. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada, e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (80 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 30% de EtOAc sobre 20 CV). O produto contendo frações foi combinado, concentrado e secado em vácuo para dar origem a 440 mg de 3-(6-hexil-5,6,7,8-tetra-hidroquinolin-2-il)ciclopent-2- enona. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,57-7,42 (m, 2H), 6,85 (s, 1H), 3,18 (dd, J=5,0, 2,5 Hz, 3H), 3,07-2,86 (m, 2H), 2,62 (dt, J=5,0, 2,4 Hz, 2H), 2,49 (dd, J=16,9, 10,3 Hz, 1H), 2,16-2,02 (m, 1H), 1,80 (br. s., 1H), 1,54 (dtd, J=13,2, 11,0, 5,5 Hz, 1H), 1,42 (br. s., 4H), 1,33 (br. s., 6H), 1,00-0,82 (m, 3H). Os isômeros foram separados por SFC usando uma coluna Chiralpak AD-H, 25 X 3 cm ID, 5 μm e eluindo com 70/30 de CO2/MeOH a 85,0 mL/min. Recuperadas duas frações que foram concentradas e secadas em vácuo. Isômero 1: Recuperado 3-(6-hexil-5,6,7,8-tetra-hidroquinolin-2-il)ciclopent-2-enona (210 mg, 0,706 mmol). Isômero 2: Recuperado 3-(6-hexil-5,6,7,8-tetra- hidroquinolin-2-il)ciclopent-2-enona (210 mg, 0,706 mmol). Preparação 317F1 e 317F2:

[0260] A uma mistura de 3-(6-hexil-5,6,7,8-tetra-hidroquinolin-2- il)ciclopent-2-enona (210 mg, 0,706 mmol) (Isômero 1; Preparação 317E1) em MeOH (10 mL) e ácido acético (1 mL) foi adicionado catalisador de Pearlman (50 mg, 0,356 mmol). A mistura de reação foi hidrogenada sob um balão de H2. Após 3 horas, a mistura de reação foi filtrada e concentrada em vácuo. Os isômeros foram separados por SFC usando uma coluna Chiralpak IA-H, 25 X 2,1 cm ID, 5 μm e eluindo com 95/5 de CO2 / MeOH-ACN 1-1 a 50,0 mL/min. Recuperadas duas frações que foram concentradas e secadas em vácuo. Isômero 1A; recuperados 45 mg; RMN foi consistente com produto desejado 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,37-7,25 (m, 1H), 6,94 (d, J=7,7 Hz, 1H), 3,61-3,43 (m, 1H), 3,04-2,76 (m, 3H), 2,74-2,53 (m, 2H), 2,52-2,21 (m, 4H), 2,21-2,08 (m, 1H), 2,08-1,95 (m, 1H), 1,87-1,60 (m, 2H), 1,581,44 (m, 1H), 1,44-1,21 (m, 9H), 1,01-0,81 (m, 3H). Isômero 1B; recuperados 33 mg; RMN foi consistente com produto desejado. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,31 (d, J=7,7 Hz, 1H), 6,94 (d, J=7,9 Hz, 1H), 3,60-3,44 (m, 1H), 3,03-2,75 (m, 3H), 2,71-2,54 (m, 2H), 2,54-2,34 (m, 3H), 2,34-2,22 (m, 1H), 2,22-2,09 (m, 1H), 2,09-1,98 (m, 1H), 1,85-1,66 (m, 2H), 1,60-1,44 (m, 1H), 1,44-1,23 (m, 9H), 0,97-0,86 (m, 3H). Preparação 317G1 e 317G2: 1-amino-3-(6-hexil-5,6,7,8-tetra- hidroquinolin-2-il)ciclopentanocarboxilato de metila (Isômeros 1 e 2)

[0261] A uma mistura de 3-(6-hexil-5,6,7,8-tetra-hidroquinolin-2- il)ciclopentanona (45 mg, 0,150 mmol), cloreto de amônio (40,2 mg, 0,751 mmol), e cianeto de sódio (36,8 mg, 0,751 mmol) em DCM (5 mL) foi adicionada amônia em MeOH (0,429 mL, 3,01 mmol). A mistura de reação foi selada e agitada durante 3 dias. A reação foi incompleta como indicado por análise de LCMS. Mais cianeto de sódio (36,8 mg, 0,751 mmol) e cloreto de amônio (40,2 mg, 0,751 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada durante mais um dia. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi diluída com diclorometano e lavada com água. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O produto cru foi dissolvido em dioxano (1 mL), em seguida ácido acético (1 mL) e HCl concentrado (1 mL) foram adicionados. A mistura de reação foi aquecida a 100°C durante a noite. A mistura de reação foi concentrada até a secura, em seguida o material cru foi dissolvido em MeOH. HCl (g) foi borbulhado durante 5 minutos. A mistura foi aquecida a 70°C durante 1 hora. LCMS mostrou conversão para o metil éster desejado. A mistura foi concentrada em vácuo e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações isoladas com massa correta e secadas por congelamento durante a noite. Recuperado 1-amino-3-(6-hexil-5,6,7,8-tetra- hidroquinolin-2-il)ciclopentanocarboxilato de metila, TFA (37 mg, 0,078 mmol). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 8,33-8,06 (m, 1H), 7,917,62 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,90-3,79 (m, 1H), 3,28-2,98 (m, 3H), 2,90 (dd, J=13,9, 7,7 Hz, 1H), 2,79-2,40 (m, 4H), 2,38-2,08 (m, 3H), 1,85 (br. s., 1H), 1,69-1,51 (m, 1H), 1,52-1,24 (m, 10H), 1,06-0,83 (m, 3H). Os isômeros foram separados por SFC usando uma coluna Chiralpak OZ- H, 25 X 3 cm ID, 5 μm e eluindo com 65/35 de CO2/MeOH peso/0,1% de DEA a 85,0 mL/min. Duas frações foram recuperadas as quais foram concentradas e secadas em vácuo. Isômero 1: 1-amino-3-(6-hexil- 5,6,7,8-tetra-hidroquinolin-2-il)ciclopentanocarboxilato de metila, TFA (15 mg, 0,032 mmol). Isômero 2: 1-amino-3-(6-hexil-5,6,7,8-tetra- hidroquinolin-2-il)ciclopentanocarboxilato de metila (18 mg, 0,050 mmol). Exemplo 317:

[0262] A uma mistura de 1-amino-3-(6-hexil-5,6,7,8-tetra- hidroquinolin-2-il) ciclopentanocarboxilato de metila, TFA (15 mg, 0,032 mmol) (Isômero 1; Preparação 317G1) em MeOH (3 mL) foi adicionado boro-hidreto de sódio (7,21 mg, 0,190 mmol). Após 2 horas, a reação foi saciada com água. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi triturado em TFA/MeCN, e em seguida filtrado. O filtrado foi purificado por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); 10% a 100% de gradiente durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações isoladas com massa correta e secadas por congelamento durante a noite para dar origem a (1-amino-3-(6-hexil-5,6,7,8-tetra-hidroquinolin-2- il)ciclopentil)metanol, 2 TFA (12,6 mg, 0,021 mmol). 1H RMN em CD3OD foi consistente com produto desejado (400 MHz, METANOL-d4) δ 8,21 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,73 (d, J=8,1 Hz, 1H), 3,80 (ddd, J=10,7, 7,5, 3,3 Hz, 1H), 3,75-3,63 (m, 2H), 3,28-3,01 (m, 3H), 2,56 (dd, J=17,2, 10,6 Hz, 1H), 2,48-2,25 (m, 3H), 2,22-2,08 (m, 2H), 2,07-1,89 (m, 2H), 1,891,77 (m, 1H), 1,59 (dtd, J=13,3, 11,0, 5,8 Hz, 1H), 1,47 (d, J=3,1 Hz, 4H), 1,36 (d, J=3,1 Hz, 6H), 1,00-0,88 (m, 3H); Tempo de retenção por HPLC = 6,81 min (condição L); LC/MS M+1 = 331.

[0263] Os Exemplos 318-322 na Tabela 18 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplo 317. Tabela 18 Exemplos 326 a 329 5-(3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)-2-(3-fenilpropil)isoindolin-1-ona Preparação 326A: 6-bromo-2-(pentilóxi)quinolina

[0264] A uma solução de 4-bromo-2-(bromometil)benzoato de metila (2,000 g, 6,49 mmol) e 3-fenil-1-propilamina (1,016 mL, 7,14 mmol) in EtOH (15 mL) foi adicionado carbonato de potássio (1,346 g, 9,74 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 40°C durante 3 h. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O óleo cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel de 80 g usando 30 a 60% de gradiente de EtOAc/hexanos para dar origem a 5-bromo-2-(3-fenilpropil)isoindolin-1-ona (1,43 g, 4,33 mmol) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,777,71 (m, 1H), 7,66-7,59 (m, 2H), 7,35-7,26 (m, 2H), 7,24-7,15 (m, 3H), 4,35 (s, 2H), 3,69 (t, J=7,3 Hz, 2H), 2,79-2,66 (m, 2H), 2,13-1,96 (m, 2H). Exemplos 326 a 329:

[0265] Um frasconete de micro-ondas secado em forno com uma barra agitadora foi carregado com 5-bromo-2-(3-fenilpropil)isoindolin-1- ona (750 mg, 2,271 mmol), 1-((difenilmetileno)amino)ciclopent-3- enocarboxilato de etila (1233 mg, 3,86 mmol), acetato de paládio (II) (102 mg, 0,454 mmol), trifenilfosfina (238 mg, 0,908 mmol), acetato de potássio (446 mg, 4,54 mmol) e DMA (20 mL). A mistura foi aspergida com nitrogênio durante 10 minutos. A solução foi processada sobre uma micro-onda CEM: 60 minutos a 140°C. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (80 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc durante 20 minutos) para dar origem a 825 mg de material. Este resíduo foi dissolvido em éter (20 mL) e tratado com HCl a 6 N durante 30 minutos. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaHCO3 saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. Este resíduo foi dissolvido em etanol (20 mL) e boro-hidreto de sódio (859 mg, 22,71 mmol) foi adicionado porção a porção durante diversas horas até nenhum material de partida restar. A reação foi saciada com HCl a 1 N. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaHCO3 saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. Este resíduo foi dissolvido em MeOH e Pd/C a 10 % foi adicionado. A mistura de reação foi hidrogenada sob um balão de H2 durante 1 hora. A mistura de reação foi filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/ água (0,1% de TFA); 30% a 100% de gradiente durante 10 minutos; 30 mL/min. As frações com massa correta foram isoladas, diluídas com acetato de etila, lavadas com NaHCO3 saturado, e novamente extraídas duas vezes com EtOAc. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada para dar origem a 275 mg de 5-(3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)-2-(3- fenilpropil)isoindolin-1-ona. Os isômeros individuais foram separados usando uma coluna CHIRALPAK® AD-H sob condições de SFC (20% de MeOH com 0,5% de DEA em CO2). Exemplo 326 (33 mg) Tempo de retenção por HPLC = 5,55 min (condição H); LC/MS M+1 = X; 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,78 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,38-7,27 (m, 5H), 7,25-7,16 (m, 3H), 4,34 (s, 2H), 3,68 (t, J=7,3 Hz, 2H), 3,52 (d, J=5,9 Hz, 2H), 2,16-1,87 (m, 8H), 1,83-1,66 (m, 2H), 1,66-1,52 (m, 1H). Exemplo 327 (105 mg) Tempo de retenção por HPLC = 5,61 min (condição H); LC/MS M+1 = X; 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,77 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,40-7,34 (m, 2H), 7,33-7,26 (m, 2H), 7,25-7,16 (m, 3H), 4,34 (s, 2H), 3,68 (t, J=7,3 Hz, 2H), 3,56 (br. s., 2H), 3,20 (t, J=7,5 Hz, 1H), 2,77-2,61 (m, 2H), 2,45-2,31 (m, 1H), 2,21-2,08 (m, 1H), 2,08-1,90 (m, 3H), 1,83 (br. s., 2H), 1,65 (t, J=12,0 Hz, 1H). Exemplo 328 (25 mg) Tempo de retenção por HPLC = 5,47 min (condição H); LC/MS M+1 = X; 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,78 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,38-7,26 (m, 4H), 7,25-7,17 (m, 3H), 4,34 (s, 2H), 3,68 (t, J=7,3 Hz, 2H), 3,52 (d, J=5,9 Hz, 2H), 3,36 (dd, J=10,1, 4,2 Hz, 1H), 2,80-2,63 (m, 2H), 2,14-1,91 (m, 5H), 1,88-1,67 (m, 2H), 1,62 (dd, J=12,7, 5,2 Hz, 1H). Exemplo 329 (100 mg) Tempo de retenção por HPLC = 5,60 min (condição H); LC/MS M+1 = X; 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,77 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,39-7,33 (m, 2H), 7,31-7,25 (m, 2H), 7,23-7,14 (m, 3H), 4,33 (s, 2H), 3,67 (t, J=7,3 Hz, 2H), 3,48 (d, J=8,6 Hz, 2H), 3,19 (t, J=7,6 Hz, 1H), 2,34 (dd, J=12,8, 8,1 Hz, 1H), 2,21-1,88 (m, 6H), 1,871,64 (m, 2H), 1,54 (t, J=11,8 Hz, 1H).

[0266] As estereoquímicas absolutas dos isômeros não foram determinadas. Exemplos 330 a 332 5-(3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)-3,3-dimetil-2-(3- fenilpropil)isoindolin-1-ona Preparação 330A: 5-metoxi-3,3-dimetilisoindolin-1-ona

[0267] A uma mistura de ácido 2-(3-metoxifenil)-2-metilpropanoico (13,01 g, 67 mmol) e Et3N (9,34 mL, 67,0 mmol) em tolueno (200 mL) a 0°C foi adicionado azida de difenilfosforila (14,40 mL, 67,0 mmol). Após 30 min a 0°C, a mistura de reação foi aquecida para temperatura ambiente, em seguida refluxada durante a noite. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaHCO3 saturado e solução salina. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. Este resíduo cru foi dissolvido em DCE (100 mL) e adicionado gota a gota a uma suspensão de cloreto de ferro (III) (23,91 g, 147 mmol) em DCE (300 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 2 horas e deixada aquecer para temperatura ambiente. A mistura de reação foi diluída com solução de ácido tartárico a 1 M e agitada durante 30 minutos. A camada orgânica foi separada, em seguida secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (40 a 100% de EtOAc sobre 11 CV, em seguida mantido a 100% de EtOAc até o produto eluir completamente) para dar origem a 4,9 g de 5-metoxi- 3,3-dimetilisoindolin-1-ona. Tempo de retenção por HPLC = 0,87 min (condição G); LC/MS M+1 = 192; 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ ppm 7,74 (1 H, d, J=7,70 Hz), 7,40 (1 H, br. s.), 6,97 (1 H, d, J=7,48 Hz), 6,87 (1 H, br. s.), 3,90 (3 H, br. s.), 1,55 (6 H, br. s.). Preparação 330B: 5-metoxi-3,3-dimetil-2-(3-fenilpropil)isoindolin-1-ona

[0268] A uma mistura de 5-metoxi-3,3-dimetilisoindolin-1-ona (1,8 g, 9,41 mmol) em DMF (50 mL) foi adicionado hidreto de sódio (0,565 g, 14,12 mmol) porção a porção. Após a adição, a mistura de reação foi aquecida para 80°C durante 1 hora, seguida pela adição de 3- iodopropil)benzeno (3,03 mL, 18,83 mmol). A reação foi incompleta após 2 horas. Mais hidreto de sódio (0,565 g, 14,12 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi aquecida durante a noite. A reação foi ainda incompleta. Mais hidreto de sódio (0,565 g, 14,12 mmol) foi adicionado e o aquecimento foi continuado durante mais 4 horas. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada duas vezes com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 13 CV) para dar origem a 850 mg de 5-metoxi-3,3-dimetil-2-(3- fenilpropil)isoindolin-1-ona. Tempo de retenção por HPLC = 1,00 min (condição G); LC/MS M+1 = 310; 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ 7,75 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,46-7,14 (m, 5H), 6,96 (dd, J=8,4, 2,2 Hz, 1H), 6,86 (d, J=2,0 Hz, 1H), 3,90 (s, 3H), 2,75 (td, J=7,8, 5,4 Hz, 2H), 2,16-2,02 (m, 2H), 2,00-1,86 (m, 2H), 1,60 (s, 3H), 1,46 (s, 3H). MS (m+1) = 310. Preparação 330C: 5 5-hidroxi-3,3-dimetil-2-(3-fenilpropil)isoindolin-1- ona

[0269] A uma mistura de 5-metoxi-3,3-dimetil-2-(3- fenilpropil)isoindolin-1-ona (850 mg, 2,75 mmol) em DCM (Volume: 10 mL) foi adicionado BBr3 em DCM (5,49 mL, 5,49 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 50°C durante 5 horas. A mistura de reação foi diluída com DCM e lavada com NaHCO3 saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. DCM foi adicionado e material sólido precipitado. A mistura foi deixada em um refrigerador durante 1 hora. O sólido foi coletado por filtração e secado para dar origem a 450 mg de 5-hidroxi-3,3-dimetil-2-(3-fenilpropil)isoindolin-1- ona como um sólido castanho. Tempo de retenção por HPLC = 0,87 min (condição G); LC/MS M+1 = 296; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,08 (1 H, s), 7,43 (1 H, d, J=8,14 Hz), 7,13-7,35 (5 H, m), 6,92 (1 H, d, J=1,98 Hz), 6,82 (1 H, dd, J=8,25, 2,09 Hz), 3,36-3,41 (2 H, m), 2,602,73 (2 H, m), 1,80-1,98 (2 H, m), 1,39 (6 H, s). MS (m+1) = 295. Preparação 330D: trifluorometanossulfonato de 3,3-dimetil-1-oxo-2-(3- fenilpropil)isoindolin-5-ila

[0270] A uma mistura de 5-hidroxi-3,3-dimetil-2-(3- fenilpropil)isoindolin-1-ona (440 mg, 1,490 mmol) e piridina (361 μl, 4,47 mmol) em DCM foi adicionado anidrido tríflico (377 μl, 2,234 mmol). A mistura de reação foi agitada durante uma hora. A mistura de reação foi diluída com DCM e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada para dar origem a 600 mg de trifluorometanossulfonato de 3,3-dimetil-1-oxo-2-(3- fenilpropil)isoindolin-5-ila que foi usado imediatamente na etapa seguinte. Tempo de retenção por HPLC = 1,09 min (condição G); LC/MS M+1 = 428. Preparação 330E: 4-(3,3-dimetil-1-oxo-2-(3-fenilpropil)isoindolin-5-il)-1- (difenilmetilenoamino)ciclopent-2-enocarboxilato de etila

[0271] Um frasconete de micro-ondas secado em forno com barra agitadora foi carregado com trifluorometanossulfonato de 3,3-dimetil-1- oxo-2-(3-fenilpropil)isoindolin-5-ila (662 mg, 1,550 mmol), 1- ((difenilmetileno)amino)ciclopent-3-enocarboxilato de etila (330 mg, 1,033 mmol), acetato de paládio (II) (46,4 mg, 0,207 mmol), trifenilfosfina (108 mg, 0,413 mmol), acetato de potássio (203 mg, 2,066 mmol) e DMA (4 mL). A mistura foi aspergida com nitrogênio durante 10 minutos. A solução foi processada sobre uma micro-onda CEM: 60 minutos a 140°C. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (80 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc durante 20 minutos) para dar origem a 330 mg de 4-(3,3-dimetil-1-oxo- 2-(3-fenilpropil)isoindolin-5-il)-1-(difenilmetilenoamino)ciclopent-2- enocarboxilato de etila. Tempo de retenção por HPLC = 1,05 min (condição G); LC/MS M+1 = 597. Exemplos 330 a 332:

[0272] A uma mistura de 4-(3,3-dimetil-1-oxo-2-(3- fenilpropil)isoindolin-5-il)-1-((difenilmetileno)amino)ciclopent-2- enocarboxilato de etila (330 mg, 0,553 mmol) em éter (10 mL) foi adicionado HCl a 6 N (5 mL). A mistura de reação foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaHCO3 saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. Este resíduo foi dissolvido em MeOH (10,00 mL) e boro-hidreto de sódio (105 mg, 2,76 mmol) foi adicionado. Mais boro- hidreto de sódio (105 mg, 2,76 mmol) foi adicionado até LCMS mostrar conversão completa do material de partida. A reação foi saciada com HCl a 1 N, em seguida a mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaHCO3 saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. Este resíduo foi dissolvido em MeOH e Pd/C (58,8 mg, 0,553 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi hidrogenada sob um balão de H2 durante 1 hora, e em seguida filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. Recuperados 100 mg de 5-(3-amino-3- (hidroximetil) ciclopentil)-3,3-dimetil-2-(3-fenilpropil)isoindolin-1-ona. Os isômeros individuais foram separados usando uma coluna CHIRALPAK® AS-H sob condições de SFC (15% de MeOH/IPA (1:1) com 0,5% de DEA em CO2). Exemplo 330: Fração 1 (4 mg, mistura de dois isômeros) Tempo de retenção por HPLC = 6,98 min (condição H); LC/MS M+1 = 393; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,77-7,64 (m, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,47-7,38 (m, 1H), 7,35-7,23 (m, 4H), 7,22-7,14 (m, 1H), 3,81-3,61 (m, 2H), 3,553,45 (m, 3H), 2,74 (t, J=7,8 Hz, 2H), 2,36-2,18 (m, 2H), 2,11-2,00 (m, 3H), 1,99-1,76 (m, 3H), 1,50 (s, 6H). Exemplo 331: Fração 2 (13 mg, homoquiral) Tempo de retenção por HPLC = 7,02 min (condição H); LC/MS M+1 = 393; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,67 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,48-7,39 (m, 1H), 7,34-7,24 (m, 4H), 7,23-7,11 (m, 1H), 3,60-3,42 (m, 4H), 3,24 (ddd, J=11,2, 7,1, 4,0 Hz, 1H), 2,74 (t, J=7,7 Hz, 2H), 2,31 (dd, J=13,0, 7,7 Hz, 1H), 2,18-1,97 (m, 4H), 1,92-1,71 (m, 2H), 1,68-1,56 (m, 1H), 1,49 (s, 6H), MS (m+1) = 393. Exemplo 332: Fração 3 (17 mg, homoquiral) Tempo de retenção por HPLC = 6,99 min (condição H); LC/MS M+1 = 393; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,67 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,43 (dd, J=7,9, 1,1 Hz, 1H), 7,33-7,23 (m, 4H), 7,22-7,15 (m, 1H), 3,57-3,44 (m, 4H), 3,23 (ddd, J=10,9, 7,4, 3,7 Hz, 1H), 2,74 (t, J=7,8 Hz, 2H), 2,31 (dd, J=13,1, 7,8 Hz, 1H), 2,15-1,97 (m, 4H), 1,89-1,69 (m, 2H), 1,67-1,56 (m, 1H), 1,49 (s, 6H), MS (m+1) = 393. A estereoquímica absoluta dos isômeros não foi determinada. Exemplos 333 a 335 1-(6-(3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)- il)hexan-1-ona Preparação 333A: 3-(isoquinolin-6-il)ciclopentanona

[0273] A uma mistura de 6-bromoisoquinolina (2 g, 9,61 mmol), ciclopent-2-enol (2,021 g, 24,03 mmol), e acetato de potássio (2,83 g, 28,8 mmol) em DMF (50 mL) foram adicionados cloreto de tetrabutilamônio (2,67 g, 9,61 mmol) e acetato de paládio (II) (0,216 g, 0,961 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada com nitrogênio e em seguida aquecida a 80°C durante a noite. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (80 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (20 a 100% de EtOAc sobre 10 CV) para dar origem a 750 mg de 3-(isoquinolin-6-il)ciclopentanona. Tempo de retenção por HPLC = 0,52 min (condição H); LC/MS M+1 = 212. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 8,92 (dd, J=4,2, 1,8 Hz, 1H), 8,22-8,08 (m, 2H), 7,74-7,61 (m, 2H), 7,43 (dd, J=8,4, 4,2 Hz, 1H), 3,65 (tt, J=10,7, 6,9 Hz, 1H), 2,80 (dd, J=18,3, 7,7 Hz, 1H), 2,66-2,30 (m, 4H), 2,20-2,02 (m, 1H). Preparação 333B: 7-(isoquinolin-6-il)-1,3-diazaespiro[4,4]nonano-2,4- diona

[0274] A uma mistura de 3-(isoquinolin-6-il)ciclopentanona (820 mg, 3,88 mmol) e cianeto de potássio (379 mg, 5,82 mmol) em EtOH (20 mL) e água (10 mL) em um vaso de pressão foi adicionado cianeto de potássio (379 mg, 5,82 mmol). O vaso foi selado e aquecido a 90°C durante a noite. A mistura de reação foi resfriada e ventilada. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada para dar origem a 890 mg de 7-(isoquinolin-6-il)-1,3-diazaespiro[4,4]nonano- 2,4-diona. Tempo de retenção por HPLC = 0,65 min (condição G); LC/MS M+1 = 393. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,65 (d, J=12,3 Hz, 1H), 8,86 (dd, J=4,2, 1,5 Hz, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,36-8,25 (m, 1H), 7,99 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,84 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,74 (ddd, J=16,5, 8,7, 2,1 Hz, 1H), 7,52 (dd, J=8,4, 4,2 Hz, 1H), 3,65-3,39 (m, 1H), 2,56 (dd, J=13,6, 8,1 Hz, 1H), 2,41-2,08 (m, 3H), 2,03-1,78 (m, 2H). Preparação 333C: 1-amino-3-(isoquinolin-6-il)ciclopentanocarboxilato de metila

[0275] A uma mistura de 7-(isoquinolin-6-il)-1,3- diazaespiro[4,4]nonano-2,4-diona (890 mg, 3,16 mmol) em MeOH (20 mL) foi adicionado NaOH a 2 N. Após aquecimento durante dois dias, a mistura de reação foi concentrada em vácuo e secada. O produto cru foi suspenso em MeOH. HCl (g) foi borbulhado durante 15 minutos, em seguida a mistura de reação foi aquecida a 80°C. O solvente foi parcialmente removido em vácuo, em seguida a mistura foi filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna C18 5 mícron (250 x 30 mm); 10 a 100% de MeCN/água (0,1% de TFA); gradiente de 25 minutos; 30 mL/min. Recuperados 750 mg de 1-amino- 3-(isoquinolin-6-il)ciclopentanocarboxilato de metila. Tempo de retenção por HPLC = 0,43 min (condição G); LC/MS M+1 = 271. Preparação 333D: 1-(terc-butoxicarbonilamino)-3-(isoquinolin-6- il)ciclopentanocarboxilato de metila

[0276] A uma mistura de 1-amino-3-(isoquinolin-6- il)ciclopentanocarboxilato de metila e DIEA (1,022 mL, 5,85 mmol) em acetonitrila (10 mL) foi adicionado (Boc)2O (1,359 mL, 5,85 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (24 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 12 CV). Recuperados 380 mg de 1-(terc-butoxicarbonilamino)-3- (isoquinolin-6-il)ciclopentanocarboxilato de metila. Tempo de retenção por HPLC = 0,72 min (condição G); LC/MS M+1 = 371. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 8,88 (dd, J=4,2, 1,8 Hz, 1H), 8,09 (dd, J=18,3, 8,8 Hz, 2H), 7,73-7,63 (m, 2H), 7,39 (dd, J=8,3, 4,3 Hz, 1H), 5,36-5,02 (m, 1H), 3,81 (d, J=3,1 Hz, 3H), 3,68-3,43 (m, 1H), 2,67-2,25 (m, 3H), 2,21-1,80 (m, 3H), 1,47 (d, J=5,1 Hz, 9H). Preparação 333E: 1-(terc-butoxicarbonilamino)-3-(1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolin-6-il)ciclopentanocarboxilato de metila

[0277] A uma mistura de 1-((terc-butoxicarbonil)amino)-3- (isoquinolin-6-il)ciclopentanocarboxilato de metila (280 mg, 0,756 mmol) em ácido acético (10 mL) foi adicionado óxido de platina (IV) (17,16 mg, 0,076 mmol). A mistura de reação foi hidrogenada sobre um agitador Parr durante 2 horas 2,81 kg/cm2 (40 PSI) de hidrogênio. O catalisador foi removido por filtração e a mistura foi concentrada para fornecer 200 mg de 1-(terc-butoxicarbonilamino)-3-(1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-6- il)ciclopentanocarboxilato de metila. Tempo de retenção por HPLC = 0,70 min (condição G); LC/MS M+1 = 375. Preparação 333F: 1-(terc-butoxicarbonilamino)-3-(2-hexanoil-1,2,3,4- tetra-hidroisoquinolin-6-il)ciclopentanocarboxilato de metila

[0278] A uma mistura de 1-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-(1,2,3,4- tetra-hidroisoquinolin-6-il)ciclopentanocarboxilato de metila (200 mg, 0,534 mmol) e DIEA (200 μl, 1,145 mmol) em DCM (5 mL) foi adicionado cloreto de hexanoíla (74,7 μl, 0,534 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (24 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 13 CV). Recuperados 140 mg de 1-(terc- butoxicarbonilamino)-3-(2-hexanoil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-6- il)ciclopentanocarboxilato de metila. Tempo de retenção por HPLC = 1,12 min (condição G); LC/MS M+1 = 473. Exemplos 333 a 335:

[0279] A uma mistura de 1-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-(2- hexanoil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-6-il)ciclopentanocarboxilato de metila (140 mg, 0,296 mmol) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (2 mL). A mistura de reação foi agitada durante 1 hora. LCMS mostra completa remoção de grupo Boc. A mistura foi concentrada em vácuo, e MeOH (5 mL) foi adicionado, seguido por adição porção a porção de boro- hidreto de sódio (56,0 mg, 1,481 mmol). Após uma hora, mais boro- hidreto de sódio (112,0 mg, 3,5 mmol) foi adicionado. A reação foi saciada com água. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. Condições de HPLC: coluna Phenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 10% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. Recuperados 44 mg de 1-(6-(3-amino-3- (hidroximetil)ciclopentil)-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)hexan-1-ona. Os isômeros individuais foram separados usando uma coluna CHIRALPAK® AS-H sob condições de SFC (15% de MeOH com 0,1% de DEA em CO2). Exemplo 333: Isômero 1 (9 mg, racêmico) Tempo de retenção por HPLC = 6,60 min (condição H); LC/MS M+1 = 393. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,17 (br. s., 3H), 3,77 (t, J=6,5 Hz, 2H), 3,58-3,43 (m, 2H), 3,10 (tt, J=11,3, 7,2 Hz, 1H), 2,73 (t, J=6,5 Hz, 2H), 2,54 (t, J=7,5 Hz, 2H), 2,29 (dd, J=13,1, 7,6 Hz, 1H), 2,03-1,90 (m, 3H), 1,89-1,70 (m, 2H), 1,69-1,53 (m, 3H), 1,42-1,16 (m, 5H), 0,97-0,81 (m, 3H). Exemplo 334: Isômero 2 (10 mg, homoquiral) Tempo de retenção por HPLC = 6,54 min (condição H); LC/MS M+1 = 393. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,13 (br. s., 3H), 3,76 (t, J=6,6 Hz, 2H), 3,62-3,45 (m, 2H), 3,43-3,36 (m, 1H), 2,85 (q, J=7,3 Hz, 1H), 2,72 (t, J=6,4 Hz, 2H), 2,54 (t, J=7,6 Hz, 2H), 2,28-2,01 (m, 2H), 1,98-1,87 (m, 2H), 1,81-1,51 (m, 5H), 1,45-1,10 (m, 6H), 0,89 (br. s., 3H). Exemplo 335: Isômero 3 (8,5 mg, homoquiral) Tempo de retenção por HPLC = 6,54 min (condição H); LC/MS M+1 = 393. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,67 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,43 (dd, J=7,9, 1,1 Hz, 1H), 7,33-7,23 (m, 4H), 7,22-7,15 (m, 1H), 3,57-3,44 (m, 4H), 3,23 (ddd, J=10,9, 7,4, 3,7 Hz, 1H), 2,74 (t, J=7,8 Hz, 2H), 2,31 (dd, J=13,1, 7,8 Hz, 1H), 2,15-1,97 (m, 4H), 1,89-1,69 (m, 2H), 1,67-1,56 (m, 1H), 1,49 (s, 6H), MS (m+1) = 393. A estereoquímica absoluta dos isômeros não foi determinada. Exemplo 336 (((1R,3S)-1-amino-3-((6S)-6-((fenilsulfinil)metil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol

[0280] A uma solução clara agitada de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6- ((feniltio)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (6 mg, 0,016 mmol), DMSO (0,035 mL, 0,490 mmol), e ácido L-10-(-)-canfor sulfônico (18,96 mg, 0,082 mmol) em diclorometano (0,5 mL) e metanol (0,2 mL) resfriado com gelo seco foi adicionado m-CPBA a 77% (3,66 mg, 0,016 mmol). A temperatura foi elevada para 0°C durante 30 min. A mistura foi agitada a 0 °C durante 30 minutos e temperatura ambiente durante 30 min. A mistura foi concentrada e purificada usando HPLC de fase reversa (Waters XBridge C18 19 x 100 mm; gradiente durante 8 min de 20 a 100% de Solvente B; Solvente A: 10% de MeOH: 90% de H2O: 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA). Concentração, basificação com K2CO3, e extração com acetato de etila forneceram ((1R,3S)-1-amino-3-((6S)-6-((fenilsulfinil)metil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (6 mg, 0,015 mmol) como um sólido vítreo. LC/MS M+1 = 384. 1H RMN (500 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,68-7,62 (m, 2H), 7,56-7,47 (m, 3H), 7,03-6,94 (m, 3H), 3,50-3,41 (m, 2H), 3,18-2,90 (m, 3H), 2,87-2,77 (m, 2H), 2,732,52 (m, 2H), 2,47-2,36 (m, 1H), 2,26 (dd, J=13,3, 7,8 Hz, 1H), 2,21-1,97 (m, 2H), 1,96-1,82 (m, 1H), 1,79-1,70 (m, 1H), 1,70-1,58 (m, 2H), 1,49 (dd, J=13,3, 11,1 Hz, 1H). Exemplo 337 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-((fenilsulfonil)metil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol

[0281] A uma mistura agitada de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6- ((feniltio)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (2 mg, 5,44 μmol) e ácido L-10-(-)-canfor sulfônico (6,32 mg, 0,027 mmol) em diclorometano (5 mL) foi adicionado m-CPBA a 77% (3,13 mg, 10,88 μmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 3 h. Purificação usando HPLC de fase reversa (Waters XBridge C18 19 x 100 mm; gradiente durante 8 min de 30 a 100% de Solvente B; Solvente A: 10% de MeOH: 90% de H2O: 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), concentração, basificação com solução de K2CO3 aquosa, e extração com acetato de etila forneceram ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-((fenilsulfonil)metil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (2 mg, 4,76 μmol) como um sólido. LC/MS M+1 = 400. Tempo de retenção por HPLC = 7,04 min (condição L) 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,99-7,93 (m, 2H), 7,77-7,70 (m, 1H), 7,68-7,61 (m, 2H), 7,01-6,87 (m, 3H), 3,53-3,42 (m, 2H), 3,27 (dd, J=6,3, 5,0 Hz, 2H), 3,07-2,88 (m, 2H), 2,80-2,71 (m, 2H), 2,55 (dd, J=16,3, 9,9 Hz, 1H), 2,40-2,14 (m, 2H), 2,09-1,95 (m, 2H), 1,95-1,67 (m, 3H), 1,64-1,49 (m, 2H).

[0282] Os exemplos na Tabela 19 foram preparados de acordo com os procedimentos gerais para Exemplos 336 e 337. Tabela 19 Exemplo 343 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-hexil-3-iodo-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il) ciclopentil)metanol, TFA

[0283] A uma solução de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-hexil-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, TFA (veja PCT/US2014/017534) (10 mg, 0,023 mmol) em TFA (1 mL) foi adicionado NIS (15,22 mg, 0,068 mmol) em temperatura ambiente. Após 1 h, LCMS mostrou consumação completa de material de partida. O solvente foi removido e purificação sobre HPLC prep foi realizada. HPLC: condição = injeção de 2 ml, tempo de gradiente de 5 minutos, início B = 20% a 100%, tempo de paralisação de 15 minutos, Solvente A= 0,1% de TFA em água, Solvente B = 0,1% de TFA em MeCN, coluna = LUNA, comprimento de onda de 220 nm. ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6- hexil-3-iodo-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, TFA (3,5 mg, 5,78 μmol) foi isolado com >95% de pureza. Tempo de retenção por HPLC = 12,3 min (condição L) LC/MS M+1 = 456. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,56 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 3,54-3,41 (m, 2H), 3,01 (tt, J=11,1, 7,2 Hz, 1H), 2,87-2,69 (m, 3H), 2,34 (dd, J=16,2, 10,5 Hz, 1H), 2,20 (dd, J=13,0, 7,5 Hz, 1H), 2,07-1,84 (m, 3H), 1,83-1,60 (m, 3H), 1.60- 1,48 (m, 1H), 1,47-1,25 (m, 11H), 1,00-0,88 (m, 3H).

[0284] Os exemplos na Tabela 20 foram preparados de acordo com o procedimento geral no Exemplo 343. Tabela 20 Exemplo 34 -6 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-hexil-3-metil-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il) ciclopentil)metanol, TFA

[0285] A uma solução de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-hexil-3-iodo- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, TFA (90 mg, 0,158 mmol) (secada com evaporação de tolueno) e acetilacetonato férrico (11,16 mg, 0,032 mmol) em uma mistura de THF (1,5 mL) e N-metil-2- pirrolidinona (3 mL) foi adicionado brometo de metilmagnésio (0,263 mL, 0,790 mmol) em temperatura ambiente. LCMS mostrou produto desejado juntamente com produto de desiodo e SM. A mistura foi injetada através de HPLC. HPLC: condição = injeção de 2 ml, tempo de gradiente de 5 minutos, início B = 20% a 100%, tempo de paralisação de 15 minutos, Solvente A = 0,1% de TFA em água, Solvente B = 0,1% de TFA em MeCN, coluna = LUNA, comprimento de onda de 220. ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-hexil-3-metil-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol, TFA (15 mg, 0,031 mmol) foi isolado com >95% de pureza. Tempo de retenção por HPLC = 11,6 min (condição L) LC/MS M+1 = 344. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,05-6,99 (m, 1H), 7,08 (s, 1H), 3,54-3,41 (m, 2H), 3,01 (tt, J=11,1, 7,2 Hz, 1H), 2,87-2,69 (m, 3H), 2,34 (dd, J=16,2, 10,5 Hz, 1H), 2,26 (s, 3H), 2,20 (dd, J=13,0, 7,5 Hz, 1H), 2,07-1,84 (m, 3H), 1,83-1,60 (m, 3H), 1,60-1,48 (m, 1H), 1,471,25 (m, 11H), 1,00-0,88 (m, 3H). Exemplo 347 Hexanoato de 6-((1S,3R)-3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)-1,2,3,4- tetra-hidronaftalen-2-ila, TFA Preparação 347A: (5R,7S)-7-(6-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)- 3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0286] A uma solução de (5R,7S)-7-(6-oxo-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (200 mg, 0,701 mmol) em MeOH (7009 μl) a 0°C foi adicionado boro-hidreto de sódio (53,0 mg, 1,402 mmol) em uma porção. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 30 minutos e em seguida deixada aquecer para temperatura ambiente. LCMS mostrou conclusão. O solvente foi removido, a suspensão foi diluída com DCM e lavada duas vezes com DCM. A camada orgânica foi secada com Na2SO4 e concentrada para dar origem a (5R,7S)-7-(6-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa- 1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (201 mg, 0,699 mmol). O material foi usado diretamente para outra reação. Tempo de retenção por HPLC = 0,75 min (condição G); LC/MS M+1 = 288. Preparação 347B: 6-((1S,3R)-3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)- 1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-ol

[0287] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-hidroxi-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (200 mg, 0,696 mmol) em dioxano (5 mL) foi adicionado NaOH a 1 N (6,96 mL, 6,96 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 100°C durante 14 h. LCMS mostrou consumação completa de material de partida. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com H2O. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada, e concentrada para dar origem a 6-((1S,3R)-3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-ol (180 mg, 0,689 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 4,9 min (condição L) LC/MS M+1 = 262. 1H RMN (400 MHz, METANOL- d4) δ 7,06-6,95 (m, 3H), 4,10-3,96 (m, 1H), 3,73-3,52 (m, 2H), 3,16-3,07 (m, 1H), 3,02 (dd, J=16,3, 4,6 Hz, 1H), 2,98-2,87 (m, 1H), 2,82 (dd, J=9,5, 5,9 Hz, 1H), 2,68 (dd, J=16,2, 8,0 Hz, 1H), 2,48-2,37 (m, 1H), 2,16-2,08 (m, 1H), 2,08-1,99 (m, 1H), 1,99-1,86 (m, 3H), 1,83-1,67 (m, 2H). Preparação 347C: ((1R,3S)-3-(6-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)- 1-(hidroximetil)ciclopentil)carbamato

[0288] A uma solução de 6-((1S,3R)-3-amino-3- (hidroximetil)ciclopentil)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-ol (182 mg, 0,696 mmol) em DCM (6964 μl) foram adicionados BOC2O (243 μl, 1,045 mmol) e trietilamina (146 μl, 1,045 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite e LCMS mostrou consumação completa de material de partida. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com HCl a 1 N. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada, e concentrada para dar origem a ((1R,3S)-3-(6-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-1- (hidroximetil)ciclopentil)carbamato de terc-butila (250 mg, 0,692 mmol) como um óleo. Tempo de retenção por HPLC = 0,89 min (condição G); LC/MS M+1 = 364. Preparação 347D: 7-(6-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-2,2- dimetil-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonano-1-carboxilato de (5R,7S)-terc- butila

[0289] A uma solução de ((1R,3S)-3-(6-hidroxi-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-1-(hidroximetil)ciclopentil)carbamato de terc-butila (250 mg, 0,692 mmol) em acetona (6916 μl) foi adicionado 2,2- dimetoxipropano (170 μl, 1,383 mmol) seguido por BFβ^OEt2 (175 μl, 1,383 mmol). A reação foi monitorada por LCMS e após 1 hora uma quantidade considerável de produto desejado (RT de 1,14 min) foi formada. A reação foi saciada com 0,5 ml de Et3N para complexo BF3. O solvente foi removido sob pressão reduzida e colocado sob vácuo para dar origem a 7-(6-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-2,2- dimetil-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonano-1-carboxilato de (5R,7S)-terc- butila (278 mg, 0,692 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 1,16 min (condição G); LC/MS M+1 = 402.

[0290] A uma solução de 7-(6-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)-2,2-dimetil-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonano-1-carboxilato de (5R,7S)- terc-butila (0,040 g, 0,1 mmol) em DCM (1,000 ml) foram adicionados piridina (0,024 ml, 0,300 mmol) e cloreto de hexanoíla (0,028 ml, 0,200 mmol) em temperatura ambiente. LCMS mostrou uma rápida conversão para o produto desejado em 1,41 min. Tempo de retenção por HPLC = 1,41 min (condição G); LC/MS M+1 = 500,4. A esta solução foi adicionado TFA (1 mL) e a reação foi seguida por LCMS. LCMS mostrou rápida conversão para o composto desejado. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, dissolvida em MeOH e purificada por HPLC prep : HPLC: condição = injeção de 2 ml, tempo de gradiente de 5 minutos, início B = 20% a 100%, tempo de paralisação de 15 minutos, Solvente A= 0,1% de TFA em água, Solvente B = 0,1% de TFA em MeCN, coluna = LUNA, comprimento de onda de 220. Hexanoato de 6-((1S,3R)-3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-ila, TFA (16 mg, 0,030 mmol) foi isolado como um óleo incolor com pureza >95%. Tempo de retenção por HPLC = 0,89 min (condição G) LC/MS M+1 = 361. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,11-6,92 (m, 3H), 5,24-5,13 (m, 1H), 3,73-3,54 (m, 2H), 3,08 (dd, J=16,6, 4,7 Hz, 2H), 3,01-2,88 (m, 1H), 2,88-2,77 (m, 2H), 2,50-2,38 (m, 1H), 2,36-2,25 (m, 2H), 2,13 (d, J=2,9 Hz, 1H), 2,09-1,87 (m, 4H), 1,74 (t, J=12,8 Hz, 1H), 1,61 (quin, J=7,1 Hz, 3H), 1,43-1,22 (m, 4H), 0,960,83 (m, 3H).

[0291] Os exemplos na Tabela 21 foram preparados de acordo com os procedimentos gerais no Exemplo 347. Tabela 21

[0292] Procedimento de separação para os Exemplos 349 e 350: Condições Cromatográficas Preparativas: Instrumento: Berger SFC MGII; Coluna: Chiral AD-H 25 X 3 cm ID, 5 μm; Taxa de fluxo: 85,0 mL/min; Fase Móvel: 85/15 de CO2/MeOH peso/0,1% de DEA; Comprimento de onda do detector: 220 nm; Amostra Preparativa e Volume de Injeção: 2500 μL de 20 mg dissolvidos em 6 mL de MeOH/ACN. Condições Cromatográficas Analíticas: Instrumento: SFC Berger analítico; Coluna: Chiral AD-H 250 X 4,6 mm ID, 5 μm; Taxa de fluxo: 2,0 mL/min; Fase Móvel: 80/20 de CO2/MeOH peso/0,1% de DEA. Exemplo 354 Butil(metil)carbamato de 6-((1S,3R)-3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)- 1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-ila, TFA Preparação 354A: 7-(6-((butil(metil)carbamoil)oxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-2,2-dimetil-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonano-1- carboxilato de (5R,7S)-terc-butila

[0293] A uma solução de 7-(6-((butilcarbamoil)oxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-2,2-dimetil-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonano-1- carboxilato de (5R,7S)-terc-butila (0,050 g, 0,1 mmol) em THF (2 mL) foi adicionado terc-butóxido de potássio (0,045 g, 0,400 mmol) seguido por MeI (0,025 mL, 0,400 mmol). A mistura de reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente quando LCMS mostrou consumação completa. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada duas vezes com HCl a 1 N, secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O material resultante foi usado diretamente na reação seguinte. Tempo de retenção por HPLC = 1,95 min (condição G); LC/MS M+1 = 515. Exemplo 354:

[0294] A uma solução de 7-(6-((butil(metil)carbamoil)oxi)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-2,2-dimetil-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonano-1- carboxilato de (5R,7S)-terc-butila (51,5 mg, 0,1 mmol) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (1 mL). A solução foi agitada durante 30 minutos em temperatura ambiente quando LCMS mostrou consumação completa. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o óleo resultante foi dissolvido em MeOH. A solução foi injetada sobre a HPLC. Condição = injeção de 2 ml, tempo de gradiente de 5 minutos, início B = 20% a 100%, tempo de paralisação de 15 minutos, Solvente A= 0,1% de TFA em água, Solvente B = 0,1% de TFA em MeCN, coluna = LUNA, comprimento de onda de 220 fornecendo butil(metil)carbamato de 6- ((1S,3R)-3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen- 2-ila, TFA (12 mg, 0,023 mmol) com >95% de pureza. Tempo de retenção por HPLC = 7,31 min (condição L); LC/MS M+1 = 375. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,12-6,97 (m, 3H), 5,15-4,99 (m, 1H), 3,64 (dd, J=13,9, 12,5 Hz, 2H), 3,20-3,01 (m, 4H), 3,01-2,75 (m, 6H), 2,43 (dd, J=12,2, 6,9 Hz, 1H), 2,20-2,09 (m, 1H), 2,09-1,89 (m, 5H), 1,73 (t, J=12,8 Hz, 1H), 1,61-1,47 (m, 1H), 1,47-1,25 (m, 2H), 1,25-1,07 (m, 1H), 0,97 (t, J=7,2 Hz, 1,5H), 0,87-0,72 (m, 1,5H) mistura de 1:1 de rotâmero. Exemplo 355 N-(6-((1S,3R)-3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)hexanamida, TFA Preparação 355A: (5R,7S)-7-(6-amino-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)- 3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0295] A uma solução de (5R,7S)-7-(6-oxo-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (50 mg, 0,175 mmol) em MeOH (1752 μl) foi adicionado acetato de amônio (135 mg, 1,752 mmol) seguido por cianoboro-hidreto de sódio (16,52 mg, 0,263 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. LCMS mostrou consumação completa de material de partida. Em seguida, 4 ml de HCl a 1 N foram adicionados e o solvente foi removido sob pressão reduzida. DCM foi adicionado e a camada orgânica foi lavada duas vezes com HCl a 1 N. A camada aquosa foi basificada com NaOH a 1 N e extraída 3 vezes com EtOAc. As frações orgânicas foram combinadas, secadas e concentradas fornecendo (5R,7S)-7-(6-amino-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (44 mg, 0,154 mmol) como um óleo marrom. O material foi usado diretamente para outra reação. Tempo de retenção por HPLC = 0,55 min (condição G); LC/MS M+1 = 287. Preparação 355B: ((1R,3S)-1-amino-3-(6-amino-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol

[0296] A uma solução de (5R,7S)-7-(6-amino-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (44 mg, 0,154 mmol) em dioxano (1536 μl) em um frasconete foi adicionado NaOH (1536 μl, 1,536 mmol). O frasconete foi selado e aquecido para 100°C durante 1 h. LCMS mostrou completa conversão. Em seguida, 4 mL de NaOH a 1 N foram adicionados e a camada aquosa foi lavada três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas e concentradas fornecendo ((1R,3S)-1-amino-3-(6-amino-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (20 mg, 0,077 mmol) como um óleo. Tempo de retenção por HPLC = 0,42 min (condição G); LC/MS M+1 = 261. Exemplo 355:

[0297] A uma solução de ((1R,3S)-1-amino-3-(6-amino-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (10 mg, 0,038 mmol) em DCM (384 μl) foi adicionado cloreto de hexanoíla (6,44 μl, 0,046 mmol). A mistura de reação foi agitada a 25°C durante 15 minutos e a reação foi saciada com NaOH a 1 N. A camada aquosa foi extraída 3 vezes com EtOAc. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas e concentradas sob pressão reduzida. O óleo resultante foi dissolvido em MeOH. A solução foi injetada sobre uma HPLC prep: condição = injeção de 2 ml, tempo de gradiente de 5 minutos, início B = 20% a 100%, tempo de paralisação de 15 minutos, Solvente A= 0,1% de TFA em água, Solvente B = 0,1% de TFA em MeCN, coluna = LUNA, comprimento de onda de 220 nm. N-(6-((1S,3R)-3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)- 1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)hexanamida, TFA (3,7 mg, 7,44 μmol) foi obtido com >95% de pureza. Tempo de retenção por HPLC = 6,59 min (condição L) LC/MS M+1 = 359. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,10-6,98 (m, 3H), 4,13-4,00 (m, 1H), 3,64 (dd, J=13,6, 11,0 Hz, 2H), 3,20-3,07 (m, 1H), 3,01 (dd, J=16,0, 4,5 Hz, 1H), 2,90 (dd, J=8,0, 5,0 Hz, 2H), 2,65 (dd, J=16,3, 9,7 Hz, 1H), 2,43 (dd, J=13,3, 6,1 Hz, 1H), 2,21 (t, J=7,5 Hz, 2H), 2,17-2,01 (m, 2H), 2,01-1,87 (m, 3H), 1,79-1,57 (m, 4H), 1,44-1,27 (m, 4H), 0,94 (t, J=7,0 Hz, 3H).

[0298] Exemplo 356 na Tabela 22 foi preparado de acordo com o procedimento geral para o Exemplo 355. Tabela 22 Exemplo 357 ((1R,3S)-1-amino-3-(6'-butil-3,3',4,4',5',6'-hexa-hidro-1H- espiro[naftaleno-2,2'-piran]-6-il)ciclopentil)metanol Preparação 357A: (5R,7S)-7-(6'-butil-4'-cloro-3,3',4,4',5',6'-hexa-hidro- 1H-espiro[naftaleno-2,2'-piran]-6-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0299] A uma solução de (5R,7S)-7-(6-oxo-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (200 mg, 0,701 mmol) e oct-1-en-4-ol (180 μl, 1,402 mmol) em CH2CI2 (7009 μl) em temperatura ambiente foi adicionado cloreto de estanho (IV) (841 μl, 0,841 mmol). LCMS mostrou que a reação foi completa em 2 h. A reação foi saciada por NaHCO3 saturado e a camada aquosa foi novamente extraída três vezes com DCM. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas e concentradas sob pressão reduzida. O óleo resultante foi purificado por HPLC prep (condição = injeção de 2 ml, tempo de gradiente de 5 minutos, início B = 20% a 100%, tempo de paralisação de 15 minutos, Solvente A= 0,1% de TFA em água, Solvente B = 0,1% de TFA em MeCN, coluna = LUNA, comprimento de onda de 220) fornecendo (5R,7S)-7-(6'-butil-4'-cloro-3,3',4,4',5',6'-hexa-hidro- 1H-espiro[naftaleno-2,2'-piran]-6-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (149 mg, 0,345 mmol) como um sólido marrom que foi usado diretamente para outra reação. Tempo de retenção por HPLC = 1,18 min (condição G) LC/MS M+1 = 432/434. Preparação 357B: (5R,7S)-7-(6'-butil-3,3',4,4',5',6'-hexa-hidro-1H- espiro[naftaleno-2,2'-piran]-6-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0300] A uma solução de (5R,7S)-7-(6'-butil-4'-cloro-3,3',4,4',5',6'- hexa-hidro-1H-espiro[naftaleno-2,2'-piran]-6-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (300 mg, 0,694 mmol) em i-PrOH (3472 μl) foi adicionado HCl (6945 μl, 41,7 mmol) seguido por zinco (4540 mg, 69,4 mmol). A mistura de reação foi aquecida para 80°C e seguida por LCMS. Conversão de >90% após 3 dias foi medida. A mistura heterogênea foi filtrada através de celita eluindo com EtOAc. O óleo obtido após concentração sob pressão reduzida foi purificado por HPLC prep (condição = injeção de 2 ml, tempo de gradiente de 5 minutos, início B = 20% a 100%, tempo de paralisação de 15 minutos, Solvente A= 0,1% de TFA em água, Solvente B = 0,1% de TFA em MeCN, coluna = LUNA, comprimento de onda de 220) fornecendo (5R,7S)-7-(6'-butil- 3,3',4,4',5',6'-hexa-hidro-1H-espiro[naftaleno-2,2'-piran]-6-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (100 mg, 0,252 mmol) como um sólido branco que foi usado diretamente para outra reação. Tempo de retenção por HPLC = 1,21 min (condição G) LC/MS M+1 = 398,3. Separação de estereoisômero foi em seguida realizada. Aproximadamente 110 mg de amostra foram resolvidos. Quatro isômeros foram coletados. Condições Cromatográficas Preparativas: Instrumento: Berger SFC MGII; Coluna: Chiral OJ-H 25 X 3 cm ID, 5 μm; Taxa de fluxo: 85,0 mL/min; Fase Móvel: 85/15 de CO2/1:1 de MeOH:CAN; Comprimento de onda do detector: 220 nm; Amostra Preparativa e Volume de Injeção: 1000 μL de 1100 mg dissolvidos em 7 mL de MeOH/ACN. Condições Cromatográficas Analíticas: Instrumento: SFC Berger analítico; Coluna: Chiral OJ-H 250 X 4,6 mm ID, 5 μm; Taxa de fluxo: 2,0 mL/min; Fase Móvel: 87/13 de CO2/1:1 de MeOH:CAN. Exemplo 357: ((1R,3S)-1-amino-3-(6'-butil-3,3',4,4',5',6'-hexa-hidro-1H- espiro[naftaleno-2,2'-piran]-6-il)ciclopentil)metanol, TFA (Isômero 1)

[0301] A uma solução de Isômero I de (5R,7S)-7-(6'-butil- 3,3',4,4',5',6'-hexa-hidro-1H-espiro[naftaleno-2,2'-piran]-6-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (17 mg, 0,043 mmol) em dioxano (428 μl) foi adicionado NaOH (428 μl, 0,428 mmol). A mistura de reação foi aquecida para 100°C. LCMS mostrou completa conversão após 2 h. A mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente, diluída com EtOAc e NaOH a 1 N. A camada aquosa foi extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas, e concentradas sob pressão reduzida. O óleo resultante foi diluído em MeOH e injetado sobre HPLC: condição = injeção de 2 ml, tempo de gradiente de 5 minutos, início B = 20% a 100%, tempo de paralisação de 15 minutos, Solvente A= 0,1% de TFA em água, Solvente B = 0,1% de TFA em MeCN, coluna = LUNA, comprimento de onda de 220 fornecendo ((1R,3S)-1-amino-3-(6'-butil-3,3',4,4',5',6'-hexa-hidro-1H- espiro[naftaleno-2,2'-piran]-6-il)ciclopentil)metanol, isômero 1 de TFA (15 mg, 0,031 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 9,09 min (condição L). LC/MS M+1 = 372. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,08-6,93 (m, 3H), 3,72-3,52 (m, 3H), 3,21-3,04 (m, 1H), 2,92-2,75 (m, 1H), 2,75-2,60 (m, 3H), 2,55-2,37 (m, 2H), 2,20-2,03 (m, 1H), 2,02-1,90 (m, 3H), 1,90-1,78 (m, 1H), 1,73 (t, J=12,8 Hz, 2H), 1,68-1,45 (m, 4H), 1,44-1,32 (m, 2H), 1,32-1,09 (m, 5H), 0,85 (t, J=7,0 Hz, 3H).

[0302] Os exemplos na Tabela 23 foram preparados de acordo com o procedimento geral para o Exemplo 357 Tabela 23 Exemplos 362 a 363 6-((1S,3R)-3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)-2-butil-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-1-ol, TFA Preparação 362A: (5R,7S)-7-(6-butil-5-hidroxi-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0303] A uma solução de (5R,7S)-7-(6-butil-7,8-di-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (0,5 g, 1,536 mmol) em THF (15,36 ml) foi adicionado BH-DMS (0,307 ml, 1,536 mmol) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 1,5 h. LCMS não mostrou nenhum material de partida. À mistura de reação foram adicionados NaOH a 1 N (0,5 mL) e H2O2 (1,569 ml, 15,36 mmol) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 15 minutos. A mistura de reação foi diluída com água, extraída com EtOAc, e em seguida lavada com água (2X). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas sobre Na2SO4, e concentradas sob pressão reduzida. O óleo resultante foi purificado sobre ISCO fornecendo (5R,7S)-7-(6-butil-5-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (0,34 g, 0,990 mmol). 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,45 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,07 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,22-6,08 (m, 1H), 4,41 (d, J=6,6 Hz, 1H), 4,37-4,23 (m, 2H), 3,11-2,92 (m, 2H), 2,84-2,69 (m, 2H), 2,37-2,24 (m, 1H), 2,21-2,02 (m, 3H), 2,02-1,88 (m, 2H), 1,88-1,60 (m, 4H), 1,57-1,51 (m, 1H), 1,50 1,44 (m, 1H), 1,42-1,25 (m, 4H), 1,03-0,86 (m, 3H). Exemplos 362 e 363:

[0304] A uma solução de (5R,7S)-7-(6-butil-5-hidroxi-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (22 mg, 0,064 mmol) em dioxano (320 μl) foi adicionado NaOH (641 μl, 0,641 mmol). A mistura de reação foi aquecida para 90°C e agitada até total conversão ser observada (2 h). A mistura de reação foi resfriada, diluída com água e EtOAc. A camada aquosa foi novamente extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas e concentradas sob pressão reduzida. O óleo resultante foi solubilizado em MeOH e purificado por HPLC: condição = injeção de 2 ml, tempo de gradiente de 5 minutos, início B = 20% a 100%, tempo de paralisação de 15 minutos, Solvente A= 0,1% de TFA em água, Solvente B = 0,1% de TFA em MeCN, coluna = LUNA, comprimento de onda de 220 nm. 6-((1S,3R)-3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)-2-butil-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-1-ol, TFA (9 mg, 0,02 mmol) foi obtido com >95% de pureza. Condições Cromatográficas Preparativas: Instrumento: Berger SFC MGII; Coluna: Chiral OD-H 25 X 3 cm ID, 5 μm; Taxa de fluxo: 85,0 mL/min; Fase Móvel: 75/25 de CO2/MeOH; Comprimento de onda do detector: 220 nm; Preparação da Amostra e Volume de Injeção: 700 μL- 1000 μL de 52 mg dissolvidos em 2 mL de MeOH. Condições Cromatográficas Analíticas: Instrumento: SFC Berger analítico; Coluna: Chiral OD-H 250 X 4,6 mm ID, 5 μm; Taxa de fluxo: 2,0 mL/min; Fase Móvel: 80/20 de CO2/MeOH. Exemplo 362: Isômero 1: Tempo de retenção por HPLC = 0,77 min (condição G); LC/MS M+1 = 318; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,41 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,17-7,07 (m, 1H), 7,01 (s, 1H), 4,34 (d, J=6,8 Hz, 1H), 3,64 (dd, J=15,6, 11,7 Hz, 2H), 3,21-3,06 (m, 1H), 2,77 (t, J=6,3 Hz, 2H), 2,43 (dd, J=13,4, 7,0 Hz, 1H), 2,18-2,04 (m, 2H), 2,03-1,88 (m, 3H), 1,81-1,63 (m, 3H), 1,59-1,44 (m, 2H), 1,44-1,30 (m, 3H), 1,30-1,17 (m, 1H), 1,02-0,90 (m, 3H). Exemplo 363: Isômero 2: Tempo de retenção por HPLC = 0,78 min (condição G); LC/MS M+1 = 318; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,41 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,17-7,07 (m, 1H), 7,01 (s, 1H), 4,34 (d, J=6,8 Hz, 1H), 3,64 (dd, J=15,6, 11,7 Hz, 2H), 3,21-3,06 (m, 1H), 2,77 (t, J=6,3 Hz, 2H), 2,43 (dd, J=13,4, 7,0 Hz, 1H), 2,18-2,04 (m, 2H), 2,03-1,88 (m, 3H), 1,81-1,63 (m, 3H), 1,59-1,44 (m, 2H), 1,44-1,30 (m, 3H), 1,30-1,17 (m, 1H), 1,02-0,90 (m, 3H). Exemplos 364 a 366 (5R,7S)-7-(6-butil-5-oxo-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0305] A uma solução de (5R,7S)-7-(6-butil-5-hidroxi-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (150 mg, 0,437 mmol) em DCM (2184 μl) foi adicionado DMP (370 mg, 0,873 mmol) em temperatura ambiente. LCMS mostrou completa conversão após 1 h. A mistura de reação foi diluída com DCM e extraída com Na2S2O3 a 1 N e NaOH a 1 N fornecendo um composto oleoso após concentração sob pressão reduzida. O óleo resultante foi solubilizado em MeOH e purificado por HPLC: condição = injeção de 2 ml, tempo de gradiente de 5 minutos, início B = 20% a 100%, tempo de paralisação de 15 minutos, Solvente A= 0,1% de TFA em água, Solvente B = 0,1% de TFA em MeCN, coluna = LUNA, comprimento de onda de 220. (5R,7S)-7-(6- butil-5-oxo-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (128 mg, 0,375 mmol) foi obtido com >95% de pureza. Tempo de retenção por HPLC = 1,24 min (condição G); LC/MS M+1 = 342; 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,98 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,16 (dd, J=8,1, 1,5 Hz, 1H), 7,10 (s, 1H), 6,59 (s, 1H), 4,33 (dd, J=13,2, 8,1 Hz, 2H), 3,15-3,02 (m, 1H), 3,02-2,91 (m, 2H), 2,52-2,41 (m, 1H), 2,35 (dd, J=13,2, 7,3 Hz, 1H), 2,31-2,09 (m, 3H), 2,07-1,78 (m, 6H), 1,60-1,45 (m, 1H), 1,45-1,31 (m, 4H), 1,02-0,86 (m, 3H). Condições Cromatográficas Preparativas: Instrumento: Berger SFC MGII; Coluna: Chiral OD-H 25 X 3 cm ID, 5 μm; Taxa de fluxo: 80,0 mL/min; Fase Móvel: 75/25 de CO2/MeOH; Comprimento de onda do detector: 220 nm; Amostra Preparativa e Volume de Injeção: 700 μL- 1000 μL de 52 mg dissolvidos em 2 mL de MeOH. Condições Cromatográficas Analíticas: Instrumento: SFC Berger analítico; Coluna: Chiral OD-H 250 X 4,6 mm ID, 5 μm; Taxa de fluxo: 2,0 mL/min; Fase Móvel: 75/25 de CO2/MeOH. Exemplo 365: Isômero 1: Tempo de retenção por HPLC = 1,24 min (condição G); LC/MS M+1 = 342; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,89 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,35-7,16 (m, 2H), 3,60-3,46 (m, 2H), 3,17 (ddd, J=11,2, 7,0, 3,7 Hz, 1H), 3,10-2,92 (m, 2H), 2,57-2,43 (m, 1H), 2,39-2,18 (m, 2H), 2,17-2,04 (m, 1H), 2,04-1,75 (m, 6H), 1,63 (t, J=12,3 Hz, 1H), 1,58-1,34 (m, 4H), 1,01-0,89 (m, 3H). Exemplo 366: Isômero 2: Tempo de retenção por HPLC = 1,24 min (condição G); LC/MS M+1 = 342; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,89 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,35-7,16 (m, 2H), 3,60-3,46 (m, 2H), 3,17 (ddd, J=11,2, 7,0, 3,7 Hz, 1H), 3,10-2,92 (m, 2H), 2,57-2,43 (m, 1H), 2,39-2,18 (m, 2H), 2,17-2,04 (m, 1H), 2,04-1,75 (m, 6H), 1,63 (t, J=12,3 Hz, 1H), 1,58-1,34 (m, 4H), 1,01-0,89 (m, 3H). Exemplo 367 ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-((E)-hex-1-en-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol Preparação 367A: 5-(pentilsulfonil)-1-fenil-1H-tetrazol

[0306] DEAD (727 μl, 4,59 mmol) foi adicionado gota a gota a uma solução de pentan-1-ol (300 mg, 3,40 mmol), 1-fenil-1H-tetrazol-5-tiol (740 mg, 4,15 mmol) e Ph3P (1089 mg, 4,15 mmol) em THF (20 ml) a 0°C. A mistura foi agitada em uma faixa de temperatura de 0°C a temperatura ambiente durante 16 h. A mistura foi diluída com EtOAc (30 ml), que foi lavada com solução salina (2 x 20 ml), água (20 ml) e solução salina (20 ml), secada (Na2SO4) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado com cromatografia flash usando coluna ISCO (25 g, EtOAc/Hexano = 0 a 50%, tempo de gradiente = 25 min) para obter 5-(pentiltio)-1-fenil-1H-tetrazol (650 mg). LC/MS M+1 = 249. Tetra- hidrato de molibdato de amônio (679 mg, 0,550 mmol) foi adicionado em 30% de H2O2 (4064 μl, 39,8 mmol) a 0°C e a solução resultante foi adicionada gota a gota a uma solução de 5-(pentiltio)-1-fenil-1H-tetrazol (650 mg, 2,62 mmol) em EtOH (20 ml) a 0°C, a mistura foi deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada em temperatura ambiente durante 16 h. Em seguida, 30 ml de solução salina foram adicionados e a mistura foi extraída com EtOAc (80 ml), que foi lavada com solução salina e secada (Na2SO4), concentrada sob vácuo para fornecer o produto desejado que foi usado no estado em que se encontrava. 5- (Pentilsulfonil)-1-fenil-1H-tetrazol (700 mg). LC/MS M+1 = 281. Preparação 367B: (5R,7S)-7-((R)-6-((E)-hex-1-en-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona.

[0307] KHMDS (418 μl, 0,209 mmol) foi adicionado gota a gota a uma solução de 5-(pentilsulfonil)-1-fenil-1H-tetrazol (25,8 mg, 0,092 mmol) e (R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)- 1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carbaldeído (25 mg, 0,084 mmol) em THF (3 ml) a -78°C e a solução resultante foi agitada na temperatura durante 1 h. H2O (1 ml) foi adicionado e a mistura foi aquecida para temperatura ambiente e 30 ml de solução salina foram adicionados e a mistura foi extraída com EtOAc (80 ml), que foi lavada com solução salina e secada (Na2SO4), concentrada sob vácuo para dar origem a (5R,7S)-7-((R)-6- ((E)-hex-1-en-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (5 mg). LC/MS M+1 = 354. Exemplo 367:

[0308] (5R,7S)-7-((R)-6-((E)-hex-1-en-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (5 mg, 0,014 mmol) em 1,4-dioxano (2 ml) foi misturado com água (0,5 ml) e hidrato de hidróxido de lítio (5,94 mg, 0,141 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada a 100°C durante 16 h sob N2. Após resfriamento, a mistura foi filtrada e lavada com MeOH, os solventes combinados foram evaporados e o resíduo foi purificado com HPLC prep: coluna Phenomenex Luna C18 5 u 21,2 x 100 mm. Solvente A: 10% de MeOH - 90% de H2O - 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH-10% de H2O- 0,1% de TFA. Tempo de gradiente = 15 min. Início B = 0%, Final B 100%. Tempo de paralisação 20 min. A fração coletada foi basificada com NaHCO3 saturado, concentrada sob vácuo e a camada aquosa foi extraída com DCM (3 x 20 ml), que foi secado (Na2SO4) e concentrado sob vácuo. O resíduo foi secado por congelamento para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-((E)-hex-1-en-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (3 mg). LC/MS M+1 = 328. HPLC Rt = 8,52 (condição L). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,05-6,88 (m, 3H), 5,59-5,30 (m, 2H), 3,60-3,45 (m, 2H), 3,10-2,98 (m, 1H), 2,892,74 (m, 3H), 2,64-2,18 (m, 3H), 2,11-1,74 (m, 8H), 1,69-1,46 (m, 3H), 1,02-0,85 (m, 5H).

[0309] Os exemplos na Tabela 24 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplo 367. Tabela 24

[0310] As seguintes olefinas foram preparadas de acordo com o método listado na tabela. Tabela 25 Exemplo 381 ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-((E)-hex-3-en-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol Preparação 381A: (5R,7S)-7-((R)-6-(hex-3-en-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0311] Uma mistura de trans-3-hexeno (5,8 mL, 46,7 mmol), (5R,7S)-7-((R)-6-(but-3-en-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (1,5 g, 4,61 mmol) e diclorometano (50 mL) foi borbulhada com nitrogênio durante 3 minutos a -78°C antes de catalisador de Grubbs segunda geração (0,25 g, 0,294 mmol) ser adicionado. O borbulhamento foi continuado durante 2 minutos. A mistura foi em seguida agitada sob nitrogênio a 40°C durante 3,5 h. A mistura foi concentrada. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 24 g, eluição gradiente de 0 a 40% de acetato de etila em DCM) forneceu (5R,7S)-7-((R)-6-(hex-3-en-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (1,2 g, 3,39 mmol) como um sólido. Separação por SFC (20% de MeOH em CO2, coluna ADH; 40 °C; 140 bar BPR) forneceu PK1: (5R,7S)-7-((R)-6-((E)- hex-3-en-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (0,8 g, 2,263 mmol) (Tempo de retenção por HPLC = 4,11 min (condição C); LC/MS M+1 = 354); e PK2: (5R,7S)-7- ((R)-6-((Z)-hex-3-en-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (0,1 g, 0,283 mmol) (Tempo de retenção por HPLC = 4,08 min (condição C); LC/MS M+1 = 354) como sólidos. Exemplo 381:

[0312] Uma mistura de (5R,7S)-7-((R)-6-((E)-hex-3-en-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (0,41 g, 1,160 mmol), dioxano (5 mL), NaOH (0,928 g, 23,20 mmol), e água (7 mL) foi agitada a 90°C sob nitrogênio durante 1,5 dias. A mistura foi extraída com acetato de etila (4 x 4 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados. Purificação usando HPLC de fase reversa (Phenomenex Luna 5 μ 30 x 100 mm (Axia); gradiente durante 6 min de 40 a 100% de Solvente B e retendo @100% de Solvente B durante 6 minutos; Solvente A: 10% de MeOH: 90% de H2O: 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), concentração, basificação com NaOH a 2 N aquoso, e extração com acetato de etila forneram ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-((E)- hex-3-en-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (0,34 g, 1,027 mmol) como um sólido. Tempo de retenção por HPLC = 3,65 min (condição C); LC/MS M+1 = 328. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ 7,05-6,93 (m, 3H), 5,56-5,36 (m, 2H), 3,53-3,40 (m, 2H), 3,09-2,96 (m, 1H), 2,88-2,74 (m, 3H), 2,38 (dd, J=16,4, 10,5 Hz, 1H), 2,28 (dd, J=13,3, 8,0 Hz, 1H), 2,15-1,85 (m, 8H), 1,83-1,62 (m, 2H), 1,52 (dd, J=13,2, 11,0 Hz, 1H), 1,46-1,32 (m, 3H), 0,97 (t, J=7,5 Hz, 3H).

[0313] Os exemplos na Tabela 26 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplo 381. Tabela 26 Exemplos 398 a 400 Óxima de O-fenetila de (E)-6-(3-amino-3-(hidroximetil)ciclopentil)-3,4- di-hidronaftalen-1(2H)-ona Preparação 398A: 1-((difenilmetileno)amino)-4-(5-oxo-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopent-2-enocarboxilato de etila

[0314] Uma mistura foi preparada combinando 6-bromo-3,4-di- hidronaftalen-1(2H)-ona (200 mg, 0,889 mmol), 1- ((difenilmetileno)amino)ciclopent-3-enocarboxilato de etila (426 mg, 1,333 mmol), Et3N (0,248 mL, 1,777 mmol) e dicloreto de 1,1'-bis(di-terc- butilfosfino) ferroceno paládio (29,0 mg, 0,044 mmol) em solução de succinato de metoxipolietileno glicol de DL-tocoferol (2 peso% em H2O) sob nitrogênio em um frasconete de reação. O frasconete foi selado e aquecido para 50°C durante 24 horas. A mistura resultante foi vertida em 200 ml de acetato de etila. A solução foi lavada com água. A camada orgânica foi em seguida concentrada e os materiais crus foram purificados sobre uma coluna de sílica de 24 g (0 a 30% de gradiente de acetato de etila em hexano) para dar origem a 260 mg de composto título. Tempo de Retenção de LC-MS: 1,69. LC-MS M+1 = 464,2. Condições de LC-MS: Coluna: Luna C18 4,6 x 30 mm 3 u A:10:90 de H2O:ACN NH4OAc/B:10:90 de H2O:ACN NH4OAc; 0%-95% de B em 2 min; fluxo de 4 mL/min. Produto detectado a 220 nm de comprimento de onda. Preparação 398B: 1-amino-3-(5-oxo-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il) ciclopentanocarboxilato de etila

[0315] A uma solução de 1-((difenilmetileno)amino)-4-(5-oxo- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopent-2-enocarboxilato de etila (290 mg, 0,626 mmol) em EtOH (3 mL) foram adicionados 1,5 ml de HCl a 4 N. A mistura de reação foi deixada agitar em temperatura ambiente durante 2 horas. LC-MS mostrou conversão completa. A mistura foi vertida em 50 ml de NaHCO3 saturado e extraída com acetato de etila duas vezes. A camada orgânica foi em seguida secada sobre Na2SO4 e concentrada para fornecer 270 mg de materiais crus como óleo amarelo. O material obtido acima foi dissolvido em acetato de etila. À solução foi adicionado Pd/C (107 mg, 0,050 mmol) sob N2. A mistura foi deixada agitar sob H2 durante 1 hora. LC-MS mostrou que a reação foi concluída. O catalisador de Pd foi removido por filtração. O solvente foi removido para fornecer 260 mg de material. O material foi purificado sobre uma coluna de sílica de 40 g (0% a 30% de gradiente de acetato de etila em hexano em 10 minutos) para dar origem a 170 mg de composto título como óleo incolor. Tempo de retenção por HPLC = 2,19 min (Condição K); LC/MS M+1 = 302. Preparação 398C: 1-amino-3-(5-(fenetoxiimino)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentanocarboxilato de (E)-etila

[0316] 1-Amino-3-(5-oxo-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentanocarboxilato de etila (160 mg, 0,531 mmol) foi dissolvido em etanol (4 mL). Piridina (0,129 mL, 1,593 mmol) foi adicionado seguido pela adição de O-fenetilhidroxilamina (124 mg, 0,903 mmol). A mistura foi deixada agitar em temperatura ambiente durante 1 hora. LC- MS não mostrou nenhuma reação. A temperatura foi elevada para 74°C e a mistura foi deixada agitar durante 9 horas. LC-MS mostrou <10% de conversão. A temperatura foi elevada para 85°C e deixada agitar durante 18 horas. LC-MS mostrou 50% de conversão. O aquecimento foi continuado a 85°C durante mais 40 horas. LC-MS mostrou >90% de conversão. A mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente e vertida em 50 ml de NaHCO3 saturado. Ela foi extraída com acetato de etila duas vezes. As camadas orgânicas foram em seguida secadas sobre Na2SO4 e concentradas para fornecer 290 mg de material tendo uma pureza de HPLC de 75%. Tempo de retenção por HPLC = 0,97 min (Condição G); LC/MS M+1 = 421. Exemplos 398 a 400:

[0317] 1-Amino-3-(5-(fenetoxiimino)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentanocarboxilato de (E)-etila (290 mg, 0,690 mmol) foi dissolvido em MeOH (6 mL). A mistura foi resfriada para 0 °C e NaBH4 (117 mg, 3,10 mmol) foi adicionado em porções. A mistura foi deixada agitar durante 3 horas. LC-MS mostrou conversão parcial. A mistura de reação foi deixada agitar em temperatura ambiente durante mais 18 horas. LC-MS mostrou conversão completa. A reação foi saciada com HCl a 3 N (aq.). A mistura foi deixada agitar em temperatura ambiente durante 30 minutos. O material cru foi purificado sobre HPLC de fase reversa para fornecer 155 mg de produto como sólido branco (mistura diastereoisomérica). Tempo de retenção por HPLC = 0,94 min (Condição G); LC/MS M+1 = 379.

[0318] Separação por SFC quiral de isômeros: Aproximadamente 100 mg de amostra foram resolvidos. As frações ("Pico-1", "Pico-2", "Pico-3", e "Pico-4") foram coletadas em MeOH peso/0,1% de DEA. A pureza isomérica de cada fração foi estimada ser maior do que 95% com base nos cromatogramas de SFC preparativa. Detalhes experimentais: Condições Cromatográficas Preparativas: Instrumento: Berger SFC MGII; Coluna: Fenomenex LUX Cellulose 2 25 X 3 cm ID, 5 μm; Taxa de fluxo: 85,0 mL/min; Fase Móvel: 65/35 de CO2/MeOH peso/0,1% de DEA; Comprimento de onda do detector: 280 nm; Amostra Preparativa e Volume de Injeção: 500 μL de 100 mg dissolvidos em 4,5 mL de MeOH. Condições Cromatográficas Analíticas: Instrumento: SFC Berger analítico; Coluna: Fenomenex LUX Cellulose 2 250 X 4,6 mm ID, 5 μm; Taxa de fluxo: 2,0 mL/min; Fase Móvel: 65/35 de CO2/MeOH peso/0,1% de DEA; Três frações foram isoladas em uma taxa de 1:10:10 tendo um pico menor e dois picos maiores. Exemplo 398: fração menor, Tempo de retenção de SFC analítica: 12,58 minutos. Exemplo 399: fração maior 1, Tempo de retenção de SFC analítica: 13,87 min; Tempo de retenção por HPLC =0,88 minutos (Condição G) LC/MS M+1 = 379. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,84 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,31-7,22 (m, 4H), 7,21-7,15 (m, 1H), 7,15-7,06 (m, 2H), 4,34 (t, J=6,8 Hz, 2H), 3,54-3,42 (m, 2H), 3,12-3,04 (m, 1H), 3,01 (t, J=6,8 Hz, 2H), 2,76-2,69 (m, 2H), 2,66 (t, J=6,6 Hz, 2H), 2,23 (dd, J=13,2, 7,7 Hz, 1H), 2,07-1,88 (m, 2H), 1,85-1,66 (m, 4H), 1,60-1,51 (m, 1H). Exemplo 400: Fração maior 2, Tempo de retenção de SFC analítica: 15,56 min; Tempo de retenção por HPLC =0,88 minutos (Condição G) LC/MS M+1 = 379. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,83 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,30-7,22 (m, 4H), 7,20-7,15 (m, 1H), 7,13-7,03 (m, 2H), 4,33 (t, J=6,9 Hz, 2H), 3,53-3,42 (m, 2H), 3,10-3,03 (m, 1H), 3,02-2,97 (m, 2H), 2,71 (t, J=6,1 Hz, 2H), 2,65 (t, J=6,7 Hz, 2H), 2,23 (dd, J=13,2, 7,5 Hz, 1H), 2,05-1,87 (m, 2H), 1,85-1,66 (m, 4H), 1,55 (t, J=12,3 Hz, 1H). Exemplo 401 Óxima de O-(2-metoxibenzila) de (E)-1-((R)-6-((1S,3R)-3-amino-3- (hidroximetil)ciclopentil)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)etanona Preparação 401A: 1-((R)-6-((1S,3R)-3-amino-3- (hidroximetil)ciclopentil)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)etanona

[0319] Uma solução de (5R,7S)-7-((R)-6-acetil-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (200 mg, 0,638 mmol) em DCM (5 ml) e hidrato de hidróxido de lítio (402 mg, 9,57 mmol) foi misturada com THF (4 ml) e água (1 ml) e agitada a 100°C durante a noite. A mistura foi purificada com HPLC preparativa: Fenomenex Luna C 18 5 u (21,2 x 150 mm), Solvente A: 10% de MeOH-90% de H2O-0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH-10% de H2O-0,1% de TFA, Início B% = 0, Final %B = 100. Tempo de gradiente 15 min, tempo de paralisação 22 min. (140 mg), LC/MS M+1 = 288 Exemplo 401:

[0320] A uma mistura de 1-((S)-6-((1S,3R)-3-amino-3- (hidroximetil)ciclopentil)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)etanona (15 mg, 0,052 mmol) e O-(2-metoxibenzil)hidroxilamina (40,0 mg, 0,261 mmol) em EtOH (1,5 ml) foram adicionadas 2 gotas de HCl a 1 N. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. LC-MS indicou a conclusão de conversão. A mistura foi purificada com HPLC preparativa: Fenomenex Luna C 18 5 u (21,2 x 150 mm), Solvente A: 10% de MeOH- 90% de H2O -0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH-10% de H2O- 0,1% de TFA, Início B% = 0, Final %B = 100. Tempo de gradiente 15 min, tempo de paralisação 25 min. (15 mg como sal de TFA). LC/MS M+1 = 423. HPLC: Rt = 7,50 min (condição L). 1H-RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,36-7,19 (m, 2H), 7,10-6,86 (m, 5H), 5,18-5,05 (m, 2H), 3,90-3,79 (m, 3H), 3,72-3,56 (m, 2H), 3,20-3,04 (m, 1H), 2,93-2,75 (m, 4H), 2,64-2,54 (m, 1H), 2,43 (dd, J=13,9, 6,6 Hz, 1H), 2,21-1,83 (m, 8H), 1,80-1,63 (m, 2H).

[0321] Os exemplos na Tabela 27 foram preparados de acordo com o procedimento geral de Exemplo 401. Tabela 27 EXEMPLOS FOSFORILADOS Exemplo 412 Fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-2-((pentiloxi)metil)- 2,3-di-hidrobenzo[b][1,4]dioxin-6-il)ciclopentil)metila

[0322] A uma mistura agitada de ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-2- ((pentiloxi)metil)-2,3-di-hidrobenzo[b][1,4]dioxin-6-il)ciclopentil)metanol (2,6 mg, 7,44 μmol) em acetonitrila anidrosa (1 mL) foi adicionado cloreto de pirofosforila (0,011 mL, 0,082 mmol) a 0°C sob nitrogênio. A solução clara obtida foi agitada na mesma temperatura durante 5 min e em temperatura ambiente durante 2 horas. Mais cloreto de pirofosforila (0,040 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 3 horas antes de água (0,3 mL) ser adicionada. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. Purificação usando HPLC de fase reversa (Fenomenex AXIA 5 u 21,2 x 100 mm; gradiente durante 8 min de 20 a 100% de Solvente B; Solvente A: 0,1% de TFA em água; Solvente B: 0,1% de TFA em acetonitrila), concentração, e liofilização forneceram fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-2-((pentiloxi)metil)-2,3-di- hidrobenzo[b][1,4]dioxin-6-il)ciclopentil)metila (1,5 mg, 3,32 μmol) como um sólido branco. LC/MS M+1 = 430. Tempo de retenção por HPLC = 6,81 min (condição L) 1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) δ 6,84-6,69 (m, 3H), 4,32-4,21 (m, 2H), 4,06-3,97 (m, 1H), 3,96-3,90 (m, 1H), 3,89-3,83 (m, 1H), 3,69-3,65 (m, 1H), 3,64-3,59 (m, 1H), 3,51 (t, J=6,5 Hz, 2H), 3,15-3,06 (m, 1H), 2,47 (dd, J=13,0, 6,7 Hz, 1H), 2,14-2,06 (m, 1H), 2,04-1,83 (m, 3H), 1,67 (t, J=12,8 Hz, 1H), 1,62-1,55 (m, 2H), 1,37-1,32 (m, 4H), 0,95-0,88 (m, 3H).

[0323] Os exemplos de éster de fosfato (R1 é -OP(O)(OH)2) na Tabela 28 foram preparados de acordo com o procedimento geral para o Exemplo 412. Tabela 28 Exemplo 667 Fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((6S)-6- ((fenilsulfinil)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila

[0324] A uma solução clara agitada de fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-((feniltio)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metila (4 mg, 8,94 μmol), DMSO (0,013 mL, 0,179 mmol), e ácido L-10-(-)-canfor sulfônico (10,38 mg, 0,045 mmol) em diclorometano (0,5 mL) e metanol (0,2 mL) resfriada com gelo seco foi adicionado m-CPBA a 77% (2,003 mg, 8,94 μmol). A temperatura foi elevada para 0°C durante 50 minutos. A mistura foi agitada a 0°C durante 30 minutos e temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura foi concentrada. Purificação usando HPLC de fase reversa (Waters XBridge C18 19 x 100 mm; gradiente durante 8 min de 20 a 100% de Solvente B; Solvente A: 10% de MeOH: 90% de H2O: 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), concentração, e liofilização forneceram fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((6S)-6-((fenilsulfinil)metil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila (3,6 mg, 7,38 μmol) como um sólido branco. LC/MS M+1 = 464. Tempo de retenção por HPLC = 6,43 min (Condição L) 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,73-7,67 (m, 2H), 7,63-7,56 (m, 3H), 7,08-6,96 (m, 3H), 3,99-3,87 (m, 2H), 3,18-3,09 (m, 1H), 3,02 (ddd, J=13,0, 7,3, 5,4 Hz, 1H), 2,96-2,79 (m, 3H), 2,73-2,56 (m, 1H), 2,49 (dd, J=13,4, 7,0 Hz, 1H), 2,41-2,11 (m, 3H), 2,07-1,89 (m, 4H), 1,78-1,58 (m, 2H).

[0325] O exemplo na Tabela 29 foi preparado de acordo com o procedimento geral de Exemplo 667. Tabela 29 Exemplo 669 Fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6- ((fenilsulfonil)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila

[0326] A uma solução clara agitada de fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-((feniltio)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metila (4 mg, 8,94 μmol) e ácido L-10-(-)-canfor sulfônico (10,38 mg, 0,045 mmol) em diclorometano (0,5 mL) e metanol (0,2 mL) foi adicionado m-CPBA a 77% (4,01 mg, 0,018 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas antes de ser concentrada. Purificação usando HPLC de fase reversa (Waters XBridge C18 19 x 100 mm; gradiente durante 8 min de 20 a 100% de Solvente B; Solvente A: 10% de MeOH: 90% de H2O: 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH, 10% de H2O, 0,1% de TFA), concentração, e liofilização forneceram fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino- 3-((S)-6-((fenilsulfonil)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metila (3,3 mg, 6,88 μmol) como um sólido branco. LC/MS M+1 = 480. Tempo de retenção por HPLC = 6,98 min (condição L 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,98-7,92 (m, 2H), 7,77-7,72 (m, 1H), 7,68-7,59 (m, 2H), 6,99 (q, J=7,9 Hz, 3H), 3,98-3,84 (m, 2H), 3,25 (dd, J=6,4, 5,1 Hz, 2H), 3,03-2,95 (m, 1H), 2,84-2,76 (m, 2H), 2,60 (dd, J=16,6, 9,6 Hz, 1H), 2,48 (dd, J=13,1, 6,7 Hz, 1H), 2,37 (br. s., 1H), 2,181,87 (m, 6H), 1,76-1,56 (m, 2H). Exemplos 672 e 673 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il)ciclopentil)metanol (672) e ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(5- metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (673) Preparação 672A: 5-metoxipent-1-ino

[0327] A uma mistura de pent-4-in-1-ol (2 mL, 21,49 mmol) em THF (20 mL) foi adicionado hidreto de sódio (1032 mg, 25,8 mmol) porção a porção durante 15 minutos. A mistura de reação foi agitada 30 minutos após a adição e em seguida iodeto de metila (2,69 mL, 43,0 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida a 40°C durante 6 h. Uma alíquota foi removida, concentrada e checada por RMN. A reação foi incompleta. Mais hidreto de sódio (1032 mg, 25,8 mmol) e iodeto de metila (2,69 mL, 43,0 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada durante a noite a 40°C. Uma checagem de alíquota mostrou que reação estava completa. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com H2O. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O produto cru foi destilado a 90 a 100°C para fornecer 5-metoxipent-1-ino (950 mg, 9,68 mmol) como um líquido claro. Preparação 672B: (5R,7S)-7-(6-(5-metoxipent-1-in-1-il)-7,8-di- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0328] A uma mistura de trifluorometanossulfonato de 6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-3,4-di-hidronaftalen-2-ila (1,35 g, 3,23 mmol), iodeto de cobre (I) (0,062 g, 0,323 mmol), e cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (0,227 g, 0,323 mmol) em TEA (3 mL) foi adicionado 5-metoxipent-1-ino (1,587 g, 16,17 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 60°C durante 1 hora. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com HCl a 1 M. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 12 CV). As frações 28-33 foram isoladas, concentradas, e secadas em vácuo para dar origem a (5R,7S)-7-(6-(5-metoxipent-1-in-1-il)-7,8-di-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (1 g, 2,74 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 1,00 min (condição A); LC/MS M+1 = 346; 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,08-6,89 (m, 3H), 6,69 (s, 1H), 5,62 (s, 1H), 4,44- 4,22 (m, 2H), 3,52 (t, J=6,2 Hz, 2H), 3,39 (s, 3H), 3,14-2,97 (m, 1H), 2,83 (t, J=8,1 Hz, 2H), 2,50 (t, J=7,2 Hz, 2H), 2,46-2,39 (m, 2H), 2,33 (dd, J=13,2, 7,3 Hz, 1H), 2,21-2,09 (m, 2H), 2,03-1,92 (m, 2H), 1,85 (quin, J=6,7 Hz, 3H). Preparações 672C e 673C: (5R,7S)-7-((S)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (672C- Isômero 1) e (5R,7S)-7-((R)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (673-Isômero 2)

[0329] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-(5-metoxipent-1-in-1-il)-7,8- di-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (105 mg, 0,287 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionado catalisador de Pearlman (20,17 mg, 0,144 mmol). A mistura de reação foi hidrogenada sob um balão de H2 durante 1 hora. LCMS mostra completa hidrogenação. O catalisador foi removido por filtração. A mistura foi concentrada em vácuo para dar origem a 105 mg de produto desejado. Os isômeros individuais foram separados usando uma Chiral AD-H 25 X 3 cm ID, 5 um sob condições de SFC (30% de MeOH em CO2). Duas frações foram obtidas e concentradas até a secura. Pico 1: recuperado (5R,7S)-7-((S)- 6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (40 mg, 0,108 mmol). Pico 2: recuperado (5R,7S)-7-((R)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa- 1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (38 mg, 0,102 mmol). Exemplo 672:

[0330] A uma mistura de (5R,7S)-7-((S)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (40 mg, 0,108 mmol) em DMSO (0,5 mL) e MeOH (1 mL) foi adicionado NaOH a 1 N (0,5 mL). A mistura de reação foi aquecida a 95°C durante 2 horas. Em seguida, a mistura foi resfriada e em seguida acidificada com TFA. A mistura foi filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Fenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações com massa correta foram isoladas e secadas por congelamento durante a noite. Recuperado ((1R,3S)-1- amino-3-((S)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol, TFA (32 mg, 0,067 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 8,15 min (condição L); LC/MS M+1 = 346; 1H RMN em CD3OD (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,05-6,94 (m, 3H), 3,72-3,56 (m, 2H), 3,42 (t, J=6,5 Hz, 2H), 3,34 (s, 3H), 3,19-3,03 (m, 1H), 2,91-2,70 (m, 3H), 2,50-2,28 (m, 2H), 2,20-2,04 (m, 1H), 2,03-1,86 (m, 4H), 1,79-1,65 (m, 2H), 1,61 (quin, J=7,0 Hz, 2H), 1,53-1,23 (m, 7H). Exemplo 673:

[0331] A uma mistura de (5R,7S)-7-((R)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (40 mg, 0,108 mmol) em DMSO (0,5 mL) e MeOH (1 mL) foi adicionado NaOH a 1 N (0,5 mL). A mistura de reação foi aquecida a 95 °C durante 2 horas. A mistura foi resfriada e em seguida acidificada com TFA. A mistura foi filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Fenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações com massa correta foram isoladas e secadas por congelamento durante a noite. Recuperado ((1R,3S)-1- amino-3-((R)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol, TFA (26 mg, 0,055 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 8,16 min (condição L); LC/MS M+1 = 346; 1H RMN em CD3OD (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,02-6,96 (m, 3H), 3,71-3,56 (m, 2H), 3,42 (t, J=6,6 Hz, 2H), 3,34 (s, 3H), 3,18-3,02 (m, 1H), 2,90-2,71 (m, 3H), 2,49-2,29 (m, 2H), 2,12 (d, J=2,9 Hz, 1H), 2,02-1,87 (m, 4H), 1,79-1,66 (m, 2H), 1,66-1,55 (m, 2H), 1,52-1,32 (m, 7H). Exemplos 674 e 675 ((1R,3R)-1-amino-3-(6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il) ciclopentil)metanol Preparação 674A: (5R,7R)-7-(6-(5-metoxipent-1-in-1-il)-7,8-di- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0332] A uma mistura de trifluorometanossulfonato de 6-((5R,7R)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-3,4-di-hidronaftalen-2-ila (130 mg, 0,311 mmol), iodeto de cobre (I) (5,93 mg, 0,031 mmol), e cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (21,86 mg, 0,031 mmol) em TEA (311 μl) foi adicionado 5-metoxipent-1-ino (153 mg, 1,557 mmol). A mistura foi agitada a 60 °C durante 1 hora. LCMS mostrou completa conversão. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com HCl a 1 M. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 12 CV) fornecendo acesso ao (5R,7R)-7-(6-(5-metoxipent- 1-in-1-il)-7,8-di-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (70 mg, 0,192 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 0,99 min (condição G) LC/MS M+1 = 366,4. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,06-6,98 (m, 2H), 6,94 (d, J=7,7 Hz, 1H), 6,63 (s, 1H), 4,34 (dd, J=12,5, 7,9 Hz, 2H), 3,52 (t, J=6,3 Hz, 2H), 3,36 (s, 3H), 3,29-3,17 (m, 1H), 2,78 (t, J=8,1 Hz, 2H), 2,46 (t, J=7,0 Hz, 2H), 2,40-2,31 (m, 2H), 2,26 (dd, J=13,3, 7,4 Hz, 1H), 2,21-2,10 (m, 2H), 2,03-1,91 (m, 1H), 1,91-1,63 (m, 4H). Preparação 674B: (5R,7R)-7-(6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0333] A uma solução de (5R,7R)-7-(6-(5-metoxipent-1-in-1-il)-7,8- di-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (70 mg, 0,192 mmol) em EtOH (1596 μl) e EtOAc (319 μl) foi adicionado hidróxido de paládio sobre carbono (26,9 mg, 0,038 mmol) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi purgada com H2 e agitada sob H2 durante a noite. LCMS mostrou completa conversão. A suspensão foi filtrada através de celita e concentrada para fornecer (5R,7R)-7-(6-(5- metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (70 mg, 0,188 mmol) como um sólido branco. Tempo de retenção por HPLC = 1,12 min (condição G) LC/MS M+1 = 418,3. Os isômeros individuais foram separados usando uma Chiral OJ-H 25 X 3 cm ID, 5 um sob condições de SFC (30% de MeOH em CO2). Duas frações foram obtidas e concentradas até a secura. Exemplos 674 e 675: ((1R,3R)-1-amino-3-(6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol

[0334] A uma solução de (5R,7R)-7-(6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (21 mg, 0,057 mmol) em dioxano (565 μl) foi adicionado NaOH (565 μl, 0,565 mmol). A temperatura foi elevada para 98°C e LCMS mostrou completa conversão após 2 h. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e a camada aquosa foi novamente extraída com EtOAc. Purificação por HPLC preparativa: HPLC: condição = injeção de 2 ml, tempo de gradiente de 5 minutos, início B = 20% a 100%, tempo de paralisação de 15 minutos, Solvente A = 0,1% de TFA em água, Solvente B = 0,1% de TFA em MeCN, coluna = LUNA, comprimento de onda de 220 nm. O produto foi em seguida de base livre por extração DCM/NaOH a 1 N fornecendo ((1R,3R)-1-amino-3-(6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (10 mg, 0,028 mmol). Isômero 1. Tempo de retenção por HPLC = 8,18 min (condição L); LC/MS M+1 = 346,4. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,04-6,92 (m, 3H), 3,71-3,58 (m, 2H), 3,42 (t, J=6,5 Hz, 2H), 3,39 (s, 3H), 3,31-3,25 (m, 1H), 2,88-2,72 (m, 3H), 2,36 (dd, J=16,4, 10,5 Hz, 1H), 2,26-2,11 (m, 3H), 2,02-1,91 (m, 1H), 1,89-1,73 (m, 3H), 1,73-1,66 (m, 1H), 1,66-1,53 (m, 2H), 1,52-1,32 (m, 7H). Isômero 2: Tempo de retenção por HPLC = 8,17 min (condição L); LC/MS M+1 = 346,4; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,04-6,92 (m, 3H), 3,71-3,58 (m, 2H), 3,42 (t, J=6,5 Hz, 2H), 3,39 (s, 3H), 3,31-3,25 (m, 1H), 2,88-2,72 (m, 3H), 2,36 (dd, J=16,4, 10,5 Hz, 1H), 2,26-2,11 (m, 3H), 2,02-1,91 (m, 1H), 1,89-1,73 (m, 3H), 1,73-1,66 (m, 1H), 1,66-1,53 (m, 2H), 1,52-1,32 (m, 7H). Exemplos 676 e 677 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il)ciclopentil)metanol (676) e ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(3- metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (677) Preparação 676A: (5R,7S)-7-(6-((3-metoxifenil)etinil)-7,8-di- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0335] A uma mistura de trifluorometanossulfonato de 6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-3,4-di-hidronaftalen-2-ila (100 mg, 0,240 mmol), iodeto de cobre (I) (4,56 mg, 0,024 mmol), e cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (16,82 mg, 0,024 mmol) em TEA (3 mL) foi adicionado 1-etinil-3-metoxibenzeno (0,091 mL, 0,719 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 60°C durante 1 hora. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com HCl a 1 M. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (12 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 20 CV). As frações 15-17 foram isoladas, concentradas, e secadas em vácuo para dar origem a (5R,7S)-7-(6-((3-metoxifenil)etinil)-7,8-di-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (68 mg, 0,170 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 1,09 min (condição A) LC/MS M+1 = 400; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,30-7,22 (m, 1H), 7,14-6,97 (m, 5H), 6,92 (ddd, J=8,4, 2,6, 0,9 Hz, 1H), 6,83 (s, 1H), 6,42-6,01 (m, 1H), 4,84 (s, 3H), 4,41-4,25 (m, 2H), 3,33 (dt, J=3,2, 1,6 Hz, 2H), 3,06 (tt, J=11,0, 7,2 Hz, 1H), 2,86 (t, J=8,1 Hz, 2H), 2,49 (td, J=8,1, 1,3 Hz, 2H), 2,30 (dd, J=13,0, 7,3 Hz, 1H), 2,19-2,05 (m, 2H), 2,00-1,74 (m, 3H).

[0336] Preparações 676B e 677B: (5R,7S)-7-((R)-6-(3-metoxifenetil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (677B) e (5R,7S)-7-((S)-6-(3-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa- 1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (677B)

[0337] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-((3-metoxifenil)etinil)-7,8-di- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (68 mg, 0,170 mmol) em MeOH (3 mL) e acetato de etila (1 mL) foi adicionado catalisador de Pearlman (23,90 mg, 0,170 mmol). A mistura de reação foi hidrogenada sob um balão de H2 durante 1 hora. A mistura foi filtrada para remover o catalisador e concentrada em vácuo. Os isômeros individuais foram separados usando uma Chiral AS-H 25 X 3 cm ID, 5 um sob condições de SFC (37% de MeOH em CO2). Duas frações que foram obtidas e concentradas até a secura. Isômero 1: recuperado (5R,7S)-7-(6-(3-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (17 mg, 0,042 mmol). Isômero 2; recuperado (5R,7S)-7-(6-(3-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (16 mg, 0,039 mmol). Exemplo 676:

[0338] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-(3-metoxifenetil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (Isômero 1, 17 mg, 0,042 mmol) em MeOH (1 mL) e DMSO (0,5 mL) foi adicionado NaOH a 1 N (1 mL). A mistura de reação foi aquecida a 90 °C durante a noite, e em seguida resfriada e acidificada com TFA. A mistura foi filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Fenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações com massa correta foram isoladas e secadas por congelamento durante a noite. Recuperado ((1R,3S)-1-amino-3-(6-(3-metoxifenetil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, TFA (14 mg, 0,028 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 8,91 min (condição L) LC/MS M+1 = 380. 1H RMN em CD3OD (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,18 (t, J=7,8 Hz, 1H), 7,05-6,96 (m, 3H), 6,85-6,76 (m, 2H), 6,74 (dd, J=8,3, 1,9 Hz, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,71-3,56 (m, 2H), 3,19-3,02 (m, 1H), 2,89 (dd, J=16,4, 3,6 Hz, 1H), 2,83-2,75 (m, 2H), 2,75-2,68 (m, 2H), 2,50-2,35 (m, 2H), 2,20-2,06 (m, 1H), 2,06-1,87 (m, 4H), 1,82-1,61 (m, 4H), 1,53-1,36 (m, 1H). Exemplo 677:

[0339] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-(3-metoxifenetil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (Isômero 2, 16 mg, 0,042 mmol) em MeOH (1 mL) e DMSO (0,5 mL) foi adicionado NaOH a 1 N (1 mL). A mistura de reação foi aquecida a 90 °C durante a noite, e em seguida resfriada e acidificada com TFA. A mistura foi filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Fenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações com massa correta foram isoladas e secadas por congelamento durante a noite. Recuperado ((1R,3S)-1-amino-3-(6-(3-metoxifenetil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, TFA (14 mg, 0,028 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 8,89 min (condição L) LC/MS M+1 = 380; 1H RMN em CD3OD (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,18 (t, J=7,8 Hz, 1H), 7,04-6,97 (m, 3H), 6,85-6,77 (m, 2H), 6,74 (dd, J=8,3, 1,9 Hz, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,71-3,57 (m, 2H), 3,20-3,02 (m, 1H), 2,89 (dd, J=16,5, 3,3 Hz, 1H), 2,83-2,75 (m, 2H), 2,75-2,69 (m, 2H), 2,50-2,36 (m, 2H), 2,19-2,06 (m, 1H), 2,06-1,88 (m, 4H), 1,81-1,64 (m, 4H), 1,44 (dtd, J=12,8, 10,4, 5,9 Hz, 1H). Exemplos 678 e 679 ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol (678) e ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3-etoxipropil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (679) Preparação 678A: 4-metilbenzenossulfonato de 3-(6-((5R,7S)-2-oxo-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)propila

[0340] A uma mistura de trifluorometanossulfonato de 6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-3,4-di-hidronaftalen-2-ila (330 mg, 0,791 mmol), iodeto de cobre (I) (15,06 mg, 0,079 mmol), e cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (55,5 mg, 0,079 mmol) em TEA (3 mL) foi adicionado benzil propargil éter (0,572 mL, 3,95 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com HCl a 1 M. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 12 CV). As frações 28-31 foram isoladas, concentradas, e secadas em vácuo. O material sólido foi dissolvido em MeOH (10 mL) e catalisador de Pearlman (111 mg, 0,791 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi hidrogenada sob pressão de balão durante 18 horas. A mistura foi filtrada para remover o catalisador e concentrada em vácuo. Os sólidos foram dissolvidos em piridina (5 mL) e em seguida cloreto de p- toluenossulfanonila (452 mg, 2,372 mmol) foi adicionado. Após 2 horas, mais cloreto de p-toluenossulfanonila (452 mg, 2,372 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com H2O. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 20 CV). As frações 20-22 foram concentradas e secadas em vácuo para dar origem a 4-metilbenzenossulfonato de 3-(6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2- il)propila (200 mg, 0,414 mmol). 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ 7,82 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,37 (d, J=7,9 Hz, 2H), 7,05-6,89 (m, 3H), 5,54 (s, 1H), 4,41-4,24 (m, 2H), 4,08 (t, J=6,5 Hz, 2H), 3,11-2,95 (m, 1H), 2,77 (td, J=10,0, 5,4 Hz, 3H), 2,47 (s, 3H), 2,40-2,26 (m, 2H), 2,21-2,08 (m, 2H), 2,03-1,73 (m, 6H), 1,70-1,55 (m, 2H), 1,48-1,32 (m, 2H). Preparações 678B e 679B: (5R,7S)-7-((R)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (678B) e (5R,7S)-7-((R)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa- 1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (679B)

[0341] Ao etanol (0,5 mL, 0,248 mmol) foi adicionado sódio (114 mg, 4,96 mmol). A mistura foi agitada até o metal de sódio ser consumido. Uma solução de 4-metilbenzenossulfonato de 3-(6-((5R,7S)-2-oxo-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)propila (120 mg, 0,248 mmol) em DMF foi adicionada e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 12 horas. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (12 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 21 CV). Recuperados 65 mg de uma mistura de isômeros. Os isômeros individuais foram separados usando uma Chiral AS-H 25 X 3 cm ID, 5 um sob condições de SFC (27% de MeOH em CO2). Duas frações as quais foram obtidas e concentradas até a secura. Isômero 1: Recuperado (5R,7S)-7-((R)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (30 mg, 0,084 mmol). Isômero 2: Recuperado (5R,7S)-7-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (31 mg, 0,087 mmol). Exemplo 678:

[0342] A uma mistura de (5R,7S)-7-((R)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (30 mg, 0,084 mmol) em DMSO (1 mL) e MeOH (1 mL) foi adicionado NaOH a 1 N. A mistura de reação foi aquecida a 95 °C durante a noite. A mistura foi resfriada e acidificada com TFA. A mistura foi filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Fenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações com a massa correta foram isoladas e secadas por congelamento durante a noite. O material foi vertido em NaOH a 1 N (50 mL), agitado durante 1 hora, e extraído com EtOAc. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada, e concentrada para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(3- etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (21 mg, 0,060 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 6,57 min (condição L); LC/MS M+1 =332; 1H RMN em CD3OD (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,106,78 (m, 3H), 3,61-3,40 (m, 6H), 3,02 (tt, J=11,2, 7,0 Hz, 1H), 2,90-2,70 (m, 3H), 2,37 (dd, J=16,3, 10,3 Hz, 1H), 2,23 (dd, J=13,1, 7,6 Hz, 1H), 2,09-1,85 (m, 3H), 1,85-1,64 (m, 5H), 1,61-1,51 (m, 1H), 1,49-1,31 (m, 3H), 1,21 (t, J=7,0 Hz, 3H). Exemplo 679:

[0343] A uma mistura de (5R,7S)-7-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (30 mg, 0,084 mmol) em DMSO (1 mL) e MeOH (1 mL) foi adicionado NaOH a 1 N. A mistura de reação foi aquecida a 95 °C durante a noite. A mistura foi resfriada, acidificada com TFA, filtrada, e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Fenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações com massa correta foram isoladas e secadas por congelamento durante a noite. O material foi vertido em NaOH a 1 N (50 mL), agitado durante 1 hora, e extraído com EtOAc (x). A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada, e concentrada para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3- etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (18 mg, 0,049 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 6,57 min (condição L); LC/MS M+1 = 332; 1H RMN em CD3OD (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,20- 6,76 (m, 3H), 3,59-3,43 (m, 6H), 3,03 (tt, J=11,2, 7,0 Hz, 1H), 2,90-2,67 (m, 3H), 2,36 (dd, J=16,2, 10,5 Hz, 1H), 2,26 (dd, J=12,8, 7,0 Hz, 1H), 2,09-1,88 (m, 3H), 1,88-1,74 (m, 2H), 1,74-1,64 (m, 3H), 1,59 (t, J=12,4 Hz, 1H), 1,50-1,28 (m, 3H), 1,20 (t, J=7,0 Hz, 3H). Exemplo 680 ((1R,3R)-1-amino-3-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metanol Preparação 680A: (5R,7R)-7-((R)-6-(but-3-en-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0344] A uma solução de 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6- ((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)metila (250 mg, 0,549 mmol) e brometo de cobre (I) (157 mg, 1,098 mmol) em THF (5 mL) foi adicionado brometo de alilmagnésio (1100 μl, 10,98 mmol) em temperatura ambiente e agitado em temperatura ambiente durante 16 h. A mistura de reação foi diluída com NH3Cl saturado e água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi coletada, secada sobre Na2SO4, concentrada sobre o rotavapor para fornecer (5R,7S)-7-((S)-6-(4-(dimetilamino)benzil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona, LC/MS M+1 = 326. Preparação 680B: 3-((S)-6-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)propanal.

[0345] A uma solução de (5R,7R)-7-((R)-6-(but-3-en-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (220 mg, 0,676 mmol) em THF (15 mL) foram adicionados NMO (158 mg, 1,352 mmol) e tetróxido de ósmio (6,37 μl, 0,020 mmol) em temperatura ambiente e agitados em temperatura ambiente durante 16 horas. Periodato de sódio (578 mg, 2,70 mmol) em H2O (1 mL) foi adicionado e o precipitado formado. A mistura foi agitada vigorosamente em temperatura ambiente sob nitrogênio durante 30 minutos. A mistura de reação foi diluída com NH4Cl saturado e água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi coletada, secada sobre Na2SO4, concentrada sobre o rotavapor para fornecer 3-((S)-6-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)propanal, LC/MS M+1 = 328. Preparação 680C: (5R,7R)-7-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona.

[0346] A uma solução de 3-((S)-6-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)propanal (200 mg, 0,611 mmol), etoxitrimetilsilano (361 mg, 3,05 mmol), trietilsilano (355 mg, 3,05 mmol) em nitrometano (2 mL) foi adicionado cloreto de ferro (III) (9,91 mg, 0,061 mmol) a 0°C, e agitado em temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura foi filtrada e purificada por HPLC preparativa para fornecer (5R,7R)-7-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona, LC/MS M+1 = 358. Exemplo 680:

[0347] A uma solução do (5R,7R)-7-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona cru que foi derivado de etapa anterior em dioxano (3 mL) e água (1 mL) foi adicionado LiOH (15,77 mg, 0,659 mmol), e agitado a 100°C durante 16 h. A mistura de reação foi diluída com água, extraída com EtOAc. A camada orgânica foi coletada, secada sobre Na2SO4, e concentrada sobre o rotavapor para fornecer o produto cru que foi purificado com HPLC preparativa: coluna Fenomenex Luna C18 5 u 21,2 x 100 mm. O solvente A: 10% de MeOH - 90% de H2O -0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH-10% de H2O-0,1% de TFA. Tempo de gradiente = 15 min. Início B = 0%, Final B 100%. Tempo de paralisação de 25 min. ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-((Z)-hex-2-en-1-iloxi)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, LC/MS M+1 = 332. Método de HPLC: L; Tempo de Retenção de HPLC 6,86 (min.). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,00-6,90 (m, 3H), 3,60 - 3,50 (m, 6H), 2,80-2,60 (m, 3H), 2,41 - 1,80 (m, 6H), 1,78-1,30 (m, 9H), 1,24 (t, J=7,0 Hz, 3H). Exemplos 681 e 682 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il)ciclopentil)metanol (681) e ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(2- metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (682) Preparação 681A: (5R,7S)-7-(6-((2-metoxifenil)etinil)-7,8-di- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0348] A uma mistura de trifluorometanossulfonato de 6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-3,4-di-hidronaftalen-2-ila (64 mg, 0,153 mmol), iodeto de cobre (I) (2,92 mg, 0,015 mmol), e cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (10,76 mg, 0,015 mmol) em TEA (3 mL) foi adicionado 1-etinil-2-metoxibenzeno (0,059 mL, 0,460 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 60°C durante 1 hora. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com HCl a 1 M. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (24 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 12 CV). As frações 20-23 foram isoladas, concentradas, e secadas em vácuo para dar origem a (5R,7S)-7-(6-((2-metoxifenil)etinil)-7,8-di-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (45 mg, 0,113 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 1,07 min (condição A) LC/MS M+1 = 400 Preparações 681B e 682B: (5R,7S)-7-(6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0349] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-((2-metoxifenil)etinil)-7,8-di- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (45 mg, 0,113 mmol) em MeOH (5 mL) foi adicionado catalisador de Pearlman (15,82 mg, 0,113 mmol). A mistura de reação foi hidrogenada sob um balão de H2 durante a noite. A mistura foi filtrada para remover o catalisador e em seguida concentrada em vácuo para dar origem a 45 mg de uma mistura de isômeros. Os isômeros individuais foram separados usando uma Chiral OJ-H 25 X 3 cm ID, 5 um sob condições de SFC (35% de MeOH em CO2). Duas frações as quais foram obtidas e concentradas até a secura. Isômero 1: Recuperado (5R,7S)-7-(6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (14 mg, 0,035 mmol). Isômero 2: Recuperado (5R,7S)-7-(6-(2-metoxifenetil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (14 mg, 0,035 mmol). Exemplo 681:

[0350] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (40 mg, 0,108 mmol) em DMSO (0,5 mL) e MeOH (1 mL) foi adicionado NaOH a 1 N (0,5 mL). A mistura de reação foi aquecida a 95 °C durante 4 horas, resfriada, e em seguida acidificada com TFA. A mistura foi filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Fenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações com a massa correta foram isoladas e secadas por congelamento durante a noite para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(2- metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, TFA (26 mg, 0,055 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 8,87 min (condição L); LC/MS M+1 = 380; 1H RMN em CD3OD (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,21-7,10 (m, 2H), 7,05-6,96 (m, 3H), 6,91 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,86 (td, J=7,4, 1,0 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,72-3,54 (m, 2H), 3,203,03 (m, 1H), 2,97-2,69 (m, 5H), 2,48-2,35 (m, 2H), 2,21-1,86 (m, 5H), 1,80-1,57 (m, 4H), 1,52-1,36 (m, 1H). Exemplo 682:

[0351] A uma mistura de (5R,7S)-7-(6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (40 mg, 0,108 mmol) em DMSO (0,5 mL) e MeOH (1 mL) foi adicionado NaOH a 1 N (0,5 mL). A mistura de reação foi aquecida a 95 °C durante 4 horas, resfriada, e em seguida acidificada com TFA. A mistura foi filtrada e purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Fenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações com a massa correta foram isoladas e secadas por congelamento durante a noite para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-(2- metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, TFA (26 mg, 0,055 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 8,97 min (condição L); LC/MS M+1 = 380; MS (m+1) = 380; 1H RMN em CD3OD (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,21-7,10 (m, 2H), 7,04-6,97 (m, 3H), 6,91 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,86 (td, J=7,4, 1,1 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,72-3,54 (m, 2H), 3,19-3,03 (m, 1H), 2,96-2,70 (m, 5H), 2,49-2,35 (m, 2H), 2,201,87 (m, 5H), 1,82-1,57 (m, 4H), 1,43 (dtd, J=12,8, 10,5, 6,1 Hz, 1H). Exemplo 683 ((1R,3R)-1-amino-3-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il)ciclopentil)metanol Preparação 683A: (5R,7R)-7-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0352] O reagente Grignard cloreto de (2-metoxibenzil)magnésio (2195 μl, 0,549 mmol) foi adicionado a uma mistura agitada de 4- metilbenzenossulfonato de ((R)-6-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)metila (50 mg, 0,110 mmol) e brometo de cobre (I) (31,5 mg, 0,220 mmol) em THF (10 ml) a -78°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada a -78°C e foi lentamente elevada para temperatura ambiente e agitada durante 2 dias. A mistura foi aquecida a 60°C durante mais 6 h. A mistura de reação foi resfriada para 0°C. Em seguida, 1 ml de água foi adicionado e a mistura foi misturada com EtOAc (30 ml) e água (20 ml). A fase orgânica foi separada e lavada com NH4Cl saturado (2 x 20 ml) e solução salina (20 ml). A solução orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada. Purificação por cromatografia flash usando ISCO (coluna de sílica gel de 24 g, eluição gradiente de 0 a 60% de EtOAc em hexano) para fornecer (5R,7R)-7-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona. LC/MS M+1 = 406. Preparação 683B: ((1R,3R)-1-amino-3-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol.

[0353] (5R,7R)-7-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona foi misturado com 1,4-dioxano (2 ml), água (0,5 ml) e hidrato de hidróxido de lítio (69,1 mg, 1,646 mmol). A mistura foi agitada a 100°C durante a noite sob N2. A mistura foi resfriada e filtrada, o filtrado foi concentrado sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em DCM (20 ml), lavado com água (5 ml), secado (Na2SO4) e concentrado sob vácuo. O resíduo foi secado por congelamento para dar origem a ((1R,3R)-1-amino-3-((S)-6-(2- metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (25 mg durante duas etapas). LC/MS M+1 = 380. Condição de HPLC: L; Tempo de Retenção de HPLC 7,84 (min.). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,24-7,09 (m, 2H), 7,03-6,80 (m, 5H), 3,83 (s, 3H), 3,59-3,42 (m, 2H), 2,98-2,67 (m, 5H), 2,40 (dd, J=15,4, 10,6 Hz, 1H), 2,26-1,83 (m, 4H), 1,79-1,54 (m, 6H), 1,50-1,25 (m, 2H). Exemplo 684 ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-((3-metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol Preparação 684A: (5R,7S)-7-((R)-6-((3-metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0354] À mistura de 3-metoxifenol (123 mg, 0,988 mmol) em DMF seco (3 ml), terc-butóxido de potássio (790 μl, 0,790 mmol) em t-BuOH (1 M) foi adicionado. Após agitar em temperatura ambiente durante 30 min, 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)metila (90 mg, 0,198 mmol) em DMF (2 ml) foi adicionado e a mistura foi agitada a 65°C durante 4 h. A reação foi saciada com água (5 ml) a 0°C. A mistura foi apreendida em EtOAc (30 ml), lavada com NaHCO3 saturado (3 x 20 ml), secada (Na2SO4) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi submetido à purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 12 g, eluição gradiente de 0 a 70% de acetato de etila em hexanos, tempo de gradiente = 18 min, em 45% EtOAc) para dar origem a (5R,7S)-7-((R)- 6-((3-metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (70 mg). LC/MS M+1 = 408. Exemplo 684:

[0355] (5R,7S)-7-((R)-6-((3-metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (25 mg, 0,061 mmol) em dioxano (2 ml) foi misturado com água (0,5 ml) e foi adicionado hidrato de hidróxido de lítio (25,7 mg, 0,613 mmol), a mistura foi agitada a 100°C durante 16 h sob N2. Após resfriamento, a mistura foi filtrada e lavada com MeOH, os solventes combinados foram evaporados e o resíduo foi purificado com HPLC preparativa: coluna Fenomenex Luna C18 5 u 21,2 x 100 mm. Solvente A: 10% de MeOH - 90% de H2O - 0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH-10% de H2O- 0,1% de TFA. Tempo de gradiente = 15 min. Início B = 0%, Final B 100%. Tempo de paralisação de 20 minutos. A fração coletada foi basificada com NaHCO3 saturado, concentrada sob vácuo e a camada aquosa foi extraída com DCM (3 x 20 ml) que foi secado (Na2SO4) e concentrado sob vácuo para fornecer ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-((3- metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (15 mg) como sólido branco. LC/MS M+1 = 382. Tempo de retenção por HPLC = 7,19 minutos (Condição L) 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,25-7,12 (m, 1H), 7,07-6,96 (m, 3H), 6,59-6,47 (m, 3H), 3,94 (d, J=6,4 Hz, 2H), 3,79 (s, 3H), 3,65-3,48 (m, 2H), 3,15-2,80 (m, 4H), 2,59 (dd, J=16,4, 10,5 Hz, 1H), 2,40-1,79 (m, 7H), 1,70-1,51 (m, 2H). Exemplo 685 ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-((3-metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol

[0356] Exemplo 685 foi preparado de acordo com o procedimento geral para o Exemplo 684 usando (5R,7S)-7-((R)-6-((3- metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona. PM 381,2; MS (M+1) = 382; método L de HPLC, tempo de retenção de HPLC: 8,20 minutos. Exemplos 686 e 687 ((1R,3R)-1-amino-3-(6-((3-metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol Preparação 686A: ácido (E)-2-(4-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)benzilideno)succínico

[0357] A uma mistura de K2CO3 (0,980 g, 7,09 mmol), (5R,7R)-7-(4- bromofenil)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (1,5 g, 5,06 mmol), e ácido itacônico (0,857 g, 6,58 mmol) em acetonitrila (14,98 ml) foi lentamente adicionada água (4,50 ml). A mistura foi agitada até a evolução de CO2 paralisar e em seguida borbulhada com nitrogênio durante 5 minutos. Acetato de paládio (II) (0,057 g, 0,253 mmol) e tri-o- tolilfosfina (0,154 g, 0,506 mmol) foram em seguida adicionados. Nitrogênio foi borbulhado através da mistura de reação durante mais 10 minutos. A mistura de reação foi aquecida a 85 °C durante a noite com um condensador de refluxo. A reação foi concluída de acordo com LCMS. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaOH a 1 N duas vezes. As camadas aquosas foram combinadas e acidificadas com HCl concentrado para pH ficar 1-2. A camada aquosa foi extraída com EtOAC diversas vezes. As camadas orgânicas foram combinadas, secadas com Na2SO4, filtradas, e concentradas sob pressão reduzida para dar origem a ácido (E)-2-(4- ((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)benzilideno)succínico (1,907 g, 5,52 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 0,63 min (condição G) LC/MS M+1 = 346,3. Preparação 686B: ácido 2-(4-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)benzil)succínico

[0358] A uma mistura de ácido (E)-2-(4-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il) benzilideno)succínico (1,75 g, 5,07 mmol) em MeOH (100 mL) foi adicionado catalisador de Pearlman (0,356 g, 0,507 mmol). A mistura de reação foi agitada sob uma atmosfera de H2 durante a noite. LCMS mostrou completa conversão. O catalisador foi removido por filtração através de celita e ácido 2-(4-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)benzil)succínico (2 g, 5,76 mmol) foi obtido após concentração sob pressão reduzida. Tempo de retenção por HPLC = 0,63 min (condição G) LC/MS M+1 = 348,3. Preparação 686C: 4-oxo-6-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila

[0359] Ao ácido sulfúrico (30 mL) foi adicionado ácido 2-(4- ((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)benzil)succínico (1,761 g, 5,07 mmol). A solução foi agitada durante a noite em temperatura ambiente. LCMS mostrou completa conversão. A solução foi resfriada para 0°C, seguida pela adição gota a gota de MeOH (25,4 ml). Após 2 horas, a reação foi concluída como julgado por LCMS. A mistura de reação foi vertida sobre gelo e a camada aquosa foi extraída com EtOAC diversas vezes até a camada aquosa não mostrar nenhum produto desejado como julgado por LCMS. O sólido resultante foi purificado por ISCO usando 100% de hexanos a 100% de EtOAc como eluente fornecendo 4-oxo-6-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila (1,54 g, 4,48 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 0,74 min (condição G) LC/MS M+1 = 344,3. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ 7,89 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,38 (dd, J=7,9, 2,0 Hz, 1H), 7,26 (d, J=7,7 Hz, 1H), 6,48 (br. s., 1H), 4,45-4,32 (m, 3H), 3,79-3,71 (m, 3H), 3,37- 3,16 (m, 4H), 3,05-2,91 (m, 1H), 2,91-2,81 (m, 1H), 2,43 (dd, J=13,6, 7,5 Hz, 1H), 2,35-2,22 (m, 1H), 2,22-2,14 (m, 1H), 2,11-2,00 (m, 1H), 1,94- 1,82 (m, 1H), 1,82-1,70 (m, 1H). Preparação 686D: 6-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)- 1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila

[0360] A uma solução de 4-oxo-6-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila (1,54 g, 4,48 mmol) em EtOH (44,8 ml) foi adicionado Pd(OH)2 (0,630 g, 0,448 mmol). A mistura de reação foi colocada sob uma atmosfera de hidrogênio durante a noite. LCMS mostrou completa conversão. A mistura foi filtrada através de celita para remover o catalisador e a solução foi concentrada sob pressão reduzida para dar origem a 6-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4- tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila (1,45 g, 4,40 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 0,87 min (condição G) LC/MS M+1 = 330,3. Preparação 686E: (5R,7R)-7-(6-(hidroximetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0361] A uma mistura de 6-((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de metila (1,35 g, 4,10 mmol) em THF (100 mL) foi adicionado boro-hidreto de lítio em THF (4,10 ml, 8,20 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 60 °C durante a noite. A mistura foi resfriada e a reação foi saciada com água. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com H2O. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada, e concentrada para dar origem a (5R,7R)-7-(6-(hidroximetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (1 g, 3,32 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 0,74 min (condição G) LC/MS M+1 = 302,1;

[0362] Separação de Isômeros: Instrumento: Berger SFC MGIII; Coluna de Condições de SFC Preparativa: ChiralPak AD-H 3 x 25 cm, 5 um; Temperatura de Coluna 40°C; Taxa de fluxo: 200 ml/min; Fase Móvel: CO2/MEOH = 60/40; Programa de Injeção: Stacked (2,5 min/Ciclo); Conc. do Amostrador (mg/mL): 40 mg/mL; Comprimento de onda do detector: 220 nm. Isômero 1: Tempo de retenção por HPLC = 0,74 min (condição G) LC/MS M+1 = 302,1. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,07 (d, J=7,7 Hz, 1H), 6,99-6,90 (m, 2H), 5,50 (br. s., 1H), 4,35 (q, J=8,5 Hz, 2H), 3,66 (dd, J=6,3, 1,7 Hz, 2H), 3,25-3,09 (m, 1H), 2,95-2,77 (m, 3H), 2,50 (dd, J=16,3, 10,8 Hz, 1H), 2,39 (dd, J=13,6, 7,5 Hz, 1H), 2,27-2,12 (m, 2H), 2,10-1,93 (m, 3H), 1,87 (dd, J=13,6, 11,0 Hz, 1H), 1,81-1,70 (m, 1H), 1,53-1,38 (m, 2H). Isômero 2: Tempo de retenção por HPLC = 0,74 min (condição G) LC/MS M+1 = 302,1. Preparações 686F e 687F: 4-metilbenzenossulfonato de (6-((5R,7R)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2- il)metila

[0363] (5R,7R)-7-(6-(hidroximetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)- 3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (Isômero 1 de Preparação 686E, 410 mg, 1,360 mmol) foi dissolvido em piridina seco (1360 μl) e cloreto de p-toluenossulfonila (519 mg, 2,72 mmol) foi adicionado em uma porção. A mistura resultante foi reagida em temperatura ambiente durante 3 h. O solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM e carregado sobre coluna com DCM abundante (para prevenir cristalização de produto sobre coluna). Purificação por cromatografia flash usando ISCO (coluna de sílica gel de 40 g, 20->100% de acetato de etila em hexanos) forneceu 4-metilbenzenossulfonato de (6- ((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)metila (550 mg, 1,207 mmol). Preparação 686F (Isômero 1): Tempo de retenção por HPLC = 1,00 min (condição G) LC/MS M+1 = 456,1. Preparação 687F (Isômero 2): Tempo de retenção por HPLC = 0,99 min (condição G) LC/MS M+1 = 456,1. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO- d) δ 7,88-7,78 (m, J=8,4 Hz, 2H), 7,43-7,33 (m, J=7,9 Hz, 2H), 7,07-6,98 (m, 1H), 6,94 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,90 (s, 1H), 5,20 (br. s., 1H), 4,41-4,25 (m, 2H), 4,02 (dd, J=6,6, 2,0 Hz, 2H), 3,23-3,07 (m, 1H), 2,92-2,73 (m, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,48-2,28 (m, 2H), 2,28-2,10 (m, 3H), 2,06-1,92 (m, 2H), 1,85 (dd, J=13,6, 11,2 Hz, 1H), 1,78-1,65 (m, 1H), 1,60-1,55 (m, 1H), 1,50-1,36 (m, 1H). Exemplos 686 e 687:

[0364] A uma suspensão de 4-metilbenzenossulfonato de (6- ((5R,7R)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)metila (Preparação 686F, 0,030 g, 0,066 mmol) em dioxano (0,5 mL) foi adicionado 3-metoxifenol (0,108 ml, 0,988 mmol) seguido por terc-butóxido de potássio (0,074 g, 0,659 mmol) em temperatura ambiente. A mistura foi em seguida aquecida a 70°C durante 2 horas quando LCMS mostrou consumação completa de material de partida. A esta solução foi adicionado NaOH (0,5 mL, 0,500 mmol) em temperatura ambiente. A mistura foi aquecida para 100°C durante a noite. LCMS mostrou consumação completa de material de partida. A solução foi injetada sobre uma HPLC prep: condição = injeção de 2 ml, tempo de gradiente de 5 minutos, início B = 20% a 100%, tempo de paralisação de 15 minutos, Solvente A= 0,1% de TFA em água, Solvente B = 0,1% de TFA em MeCN, coluna = LUNA, comprimento de onda de 220 nm. ((1R,3R)-1-amino-3-(6-((3- metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol, TFA (21 mg, 0,040 mmol) foi obtido como um sólido branco com >95% de pureza.

[0365] Exemplo 687 foi preparado de Preparação 687F de acordo com o procedimento geral de Exemplo 686. Exemplo 686 (Isômero 1): Tempo de retenção por HPLC = 8,19 min (condição L) LC/MS M+1 = 382,1; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,22-7,12 (m, 1H), 7,09-7,03 (m, 1H), 7,03-6,97 (m, 2H), 6,59-6,48 (m, 3H), 3,94 (d, J=6,4 Hz, 2H), 3,79 (s, 3H), 3,65 (dd, J=11,9, 6,4 Hz, 2H), 2,96 (dd, J=16,6, 5,0 Hz, 1H), 2,90-2,82 (m, 2H), 2,60 (dd, J=16,3, 10,3 Hz, 1H), 2,33-2,14 (m, 4H), 2,11 (s, 1H), 1,90-1,72 (m, 3H), 1,61 (s, 1H). Exemplo 687 (Isômero 2): Tempo de retenção por HPLC = 8,17 min (condição L) LC/MS M+1 = 382,1; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,22-7,12 (m, 1H), 7,09-7,03 (m, 1H), 7,03-6,97 (m, 2H), 6,59-6,48 (m, 3H), 3,94 (d, J=6,4 Hz, 2H), 3,79 (s, 3H), 3,65 (dd, J=11,9, 6,4 Hz, 2H), 2,96 (dd, J=16,6, 5,0 Hz, 1H), 2,90-2,82 (m, 2H), 2,60 (dd, J=16,3, 10,3 Hz, 1H), 2,33-2,14 (m, 4H), 2,11 (s, 1H), 1,90-1,72 (m, 3H), 1,61 (s, 1H). Exemplos Fosforilados Exemplo 688 Fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-((3- metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metila

[0366] A uma mistura de ((1R,3S)-1-amino-3-((R)-6-((3- metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (1,5 mg, 3,93 μmol) em MeCN (1 ml) foram adicionados piridina (15,90 μl, 0,197 mmol) e cloreto de pirofosforila (14,85 mg, 0,059 mmol) em temperatura ambiente. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. Água (0,5 ml) foi adicionada a 0°C e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 5 minutos. A mistura foi purificada com preparativa (HPLC: coluna Fenomenex Luna C18 5 u 21,2 x 100 mm. Solvente A: 10% de MeOH - 90% de H2O-0,1% de TFA; Solvente B: 90% de MeOH-10% de H2O-0,1% de TFA. Tempo de gradiente = 15 minutos. Início B = 0%, Final B 100%. Tempo de paralisação de 25 min.) para dar origem a 1 mg de fosfato de di-hidrogênio de ((1R,3S)-1-amino- 3-((R)-6-((3-metoxifenoxi)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)ciclopentil)metila, LC/MS M+1 = 462. HPLC Rt = 7,07 minutos. (Condição L). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,17 (t, J=8,4 Hz, 1H), 7,04 (d, J=2,9 Hz, 3H), 6,60-6,46 (m, 3H), 4,04-3,86 (m, 4H), 3,79 (s, 3H), 3,15 (s, 1H), 3,00-2,81 (m, 2H), 2,66-2,48 (m, 2H), 2,33-1,90 (m, 8H), 1,82-1,68 (m, 1H).

[0367] Os seguintes compostos foram preparados de acordo com os procedimentos gerais de Exemplo 688. Preparação Alternativa de Exemplo 672

[0368] A uma mistura agitada de magnésio (1,814 g, 74,6 mmol) e tetra-hidrofurano anidroso (3 mL) foram adicionadas diversas gotas de 1,2-dibromoetano em temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura foi agitada durante 15 minutos antes de uma solução de 1-bromo-4- metoxibutano (9,76 mL, 74,6 mmol) em tetra-hidrofurano anidroso (47 mL) ser adicionada gota a gota para manter a mistura de reação aquecendo, porém não em ebulição. Após a adição, a mistura foi agitada a 60°C sob nitrogênio durante 3 horas. A solução foi separada e adicionada a uma mistura agitada de brometo de cobre (I) (1,071 g, 7,46 mmol), 4-metilbenzenossulfonato de ((S)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa- 1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)metila (1,7 g, 3,73 mmol) e tetra-hidrofurano (10 mL) a -78°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada a -78°C durante 20 minutos antes da temperatura ser lentamente elevada para temperatura ambiente. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura de reação foi resfriada para 0°C e NH4Cl aquoso saturado foi adicionado para saciar a reação. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NH4Cl aquoso saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 20 CV) para dar origem a (5R,7S)-7-((S)-6-(5- metoxipentil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (1,3 g, 3,50 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 1,09 min (condição A); LC/MS M+1 = 372,5.

[0369] A uma mistura de (5R,7S)-7-((S)-6-(5-metoxipentil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (680 mg, 1,830 mmol) em dioxano (20 mL) foi adicionado NaOH a 1 N (10 mL). A mistura de reação foi aquecida a 95°C. Após agitar dois dias, a mistura de reação foi resfriada, diluída com acetato de etila, e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada para dar origem a 450 mg de Exemplo 672 como um sólido branco. Tempo de retenção por HPLC = 7,1 min (condição L); LC/MS M+1 = 346. Preparação Alternativa de Exemplo 677

[0370] A uma mistura de 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6- ((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)metila (440 mg, 0,966 mmol) e brometo de cobre (I) (277 mg, 1,932 mmol) em THF (10 mL) a 0°C foi adicionado cloreto de (3-metoxibenzil)magnésio (35 ml, 8,75 mmol). A mistura foi agitada a 0°C e foi lentamente elevada para temperatura ambiente e agitada durante a noite.

[0371] A mistura de reação foi resfriada para 0°C, 1 ml de água foi adicionado e a mistura foi misturada com EtOAc (80 ml) e água (20 ml). A fase orgânica foi separada e lavada com NH4Cl saturado (3 x 30 ml) e solução salina (20 ml). A solução orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada. Purificação por cromatografia flash usando ISCO (coluna de sílica gel de 40 g, eluição gradiente de 0 a 100% de EtOAc/hexano sobre 13 CV). O produto contendo frações foi isolado. Recuperado (5R,7S)-7-((R)-6-(3-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (370 mg, 0,912 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 1,14 min (condição A); LC/MS M+1 = 406.

[0372] A uma mistura de (5R,7S)-7-((R)-6-(3-metoxifenetil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (370 mg, 0,912 mmol) em dioxano (20 mL) foi adicionado NaOH a 1 N. A mistura de reação foi aquecida a 95°C durante a noite, resfriada, diluída com acetato de etila, e em seguida lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O sólido resultante foi triturado em MeCN e deixado agitar durante a noite. A mistura foi filtrada e o material sólido resultante foi secado em vácuo para dar origem a 255 mg de Exemplo 677. Tempo de retenção por HPLC = 7,73 min (condição L); LC/MS M+1 = 380. Preparação Alternativa 1 de Exemplo 679

[0373] Uma solução de THF a 1,0 M de brometo de alilmagnésio (8,78 mL, 8,78 mmol) foi adicionada a uma mistura agitada de brometo de cobre (I) (126 mg, 0,878 mmol), 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6- ((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)metila (200 mg, 0,439 mmol) e tetra-hidrofurano anidroso (5 mL) a -78°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada a -78°C durante 20 minutos antes da temperatura ser elevada para temperatura ambiente durante 20 minutos. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 5 horas. Solução de NH4Cl aquosa saturada (5 mL) foi adicionada lentamente para saciar a reação. Hexanos (7 mL) e água (1 mL) foram adicionados. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x 3 mL). As soluções orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia flash usando ISCO (coluna de sílica gel de 4 g, eluição gradiente de 0 a 100% de acetato de etila em hexanos) forneceu (5R,7S)-7-((R)-6-(but-3-en-1-il)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (90 mg, 0,277 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 1,14 min (condição A); LC/MS M+1 = 326.

[0374] A uma solução clara de (5R,7S)-7-((R)-6-(but-3-en-1-il)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (560 mg, 1,721 mmol) em THF (30 mL) foram sequencialmente adicionados 50% de NMO (403 mg, 3,44 mmol) e tetróxido de ósmio em t-BuOH (0,647 mL, 0,052 mmol) em temperatura ambiente. A solução foi vigorosamente agitada em temperatura ambiente durante a noite. Periodato de sódio (1472 mg, 6,88 mmol) em H2O (15 mL) foi adicionado. A mistura foi agitada vigorosamente em temperatura ambiente sob nitrogênio durante 30 minutos. A mistura foi extraída com acetato de etila (3 x 2 mL). Os extratos de acetato de etila combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados. Purificação por cromatografia flash usando ISCO (coluna de sílica gel de 40 g, eluição gradiente de 20 a 100% de acetato de etila em hexanos) forneceu 3-((S)-6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2- il)propanal (440 mg, 1,344 mmol). RMN foi consistente com produto desejado. Tempo de retenção por HPLC = 0,91 min (condição A); LC/MS M+1 = 328.

[0375] A uma mistura agitada de 3-((S)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-il)propanal (700 mg, 2,138 mmol), etoxitrimetilsilano (1,670 mL, 10,69 mmol), e trietilsilano (1,707 mL, 10,69 mmol) em nitrometano (5 mL) foi adicionado cloreto férrico (34,7 mg, 0,214 mmol) a 0°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada a 0 °C durante 15 minutos e em temperatura ambiente durante 12 horas. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 12 CV). Recuperado (5R,7S)-7-((S)-6-(3- etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (660 mg, 1,846 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 1,06 min (condição A); LC/MS M+1 = 356.

[0376] A uma mistura de (5R,7S)-7-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (250 mg, 0,699 mmol) em dioxano (10 mL) foi adicionado NaOH a 1 N. A mistura de reação foi aquecida ao refluxo durante 48 horas. A mistura foi resfriada, diluída com acetato de etila, e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada, e concentrada. O material foi purificado em batelada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Fenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 25%-100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações com massa correta foram isoladas, vertidas em NaOH a 1 N, extraídas com EtOAc (2 vezes), e em seguida as camadas de EtOAc combinadas foram lavadas com NaOH a 1 N mais uma vez. A solução foi secada e concentrada em vácuo para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (186 mg, 0,554 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 7,08 min (condição L); LC/MS M+1 = 332. Preparação Alternativa 2 de Exemplo 679 Preparação de (5R,7S)-7-((R)-6-(hidroximetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0377] A uma solução de 6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carboxilato de (R)-metila (40,9 g, 124 mmol) em THF (250 ml) foi adicionada uma suspensão clara de cloreto de cálcio (11,1 g, 100 mmol) em EtOH (250 ml) e a solução resultante foi resfriada para 0°C. Boro-hidreto de sódio (7,7 g, 199 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 0°C durante 2,0 h. Neste momento, a mistura foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada durante 36,5 h. Em seguida, a mistura foi resfriada para 0°C e saciada com tampão de fosfato (KH2PO4 a 1,5 M + H3PO4 para pH 3, 500 mL, lenta adição inicial, evolução de gás). A mistura aquosa foi agitada em temperatura ambiente durante 3,0 h e em seguida misturada com CH2Cl2 (700 mL) em um funil separatório. O pH da camada aquosa foi ajustado para 3 por adição de HCl a 6 M e a mistura bifásica foi agitada. A camada orgânica foi coletada e a fase aquosa foi extraída com CH2Cl2 (2 x 250 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secadas (Na2SO4) e concentradas. O sólido resultante foi triturado com Et2O e a suspensão foi filtrada através de um funil sinterizado. O sólido foi enxaguado com Et2O, secado por sucção, coletado e secado sob vácuo para dar origem a (5R,7S)-7-((R)-6-(hidroximetil)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (37,3 g) como um sólido branco. HPLC analítica (método Gemini): RT = 4,81 min, área%: 100; LC/MS M+1 = 302; 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,04 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,96 (m, 2H), 5,12 (s, 1H), 4,35 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,66 (m, 2H), 3,05 (m, 1H), 2,86 (m, 3H), 2,51 (dd, J= 16,3, 10,7 Hz, 1H), 2,33 (dd, J= 13,3, 7,3 Hz, 1H), 2,15 (m, 2H), 2,00 (m, 4H) 1,84 (m, 1H), 1,52 - 1,36 (m, 2H). Preparação de (R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)- 1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carbaldeído

[0378] Uma solução de CH2Cl2/cloreto de oxalila a 2 M (25,0 ml, 50,0 mmol) foi diluída com CH2Cl2 (100 ml) e resfriada para -78 °C ao mesmo tempo que agitando. DMSO (7,1 ml, 100 mmol) foi lentamente adicionado à solução resultante e a mistura foi agitada a -78 °C durante 30 minutos. Em seguida, uma solução turva de (5R,7S)-7-((R)-6- (hidroximetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (10,0 g, 33,3 mmol) em CH2Cl2 (50 ml) e DMSO (8,0 ml) foi adicionada durante um período de 25 minutos. Após a adição ser concluída, a agitação a -78°C foi continuada durante 30 minutos e após este tempo, trietilamina (14,0 ml, 100 mmol) foi adicionado gota a gota durante um período de 15 minutos. A mistura de reação foi agitada durante 1,5 h a -78°C e durante 30 minutos ao mesmo tempo que aquecendo até 0°C. A reação foi saciada a 0°C com KH2PO4 a 1 M (150 mL). A mistura bifásica foi agitada em um funil separatório. A camada orgânica foi lavada com água (150 mL) e NaCl saturado (150 mL), secada (Na2SO4) e concentrada. Outra secagem sob vácuo forneceu (R)-6-((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)- 1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-carbaldeído (10,6 g, 31,5 mmol) como um sólido incolor. HPLC Analítica (método Gemini): RT = 5,77 min, área%: 89; LC/MS M+1 = 300; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 9,81 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,00 (dd, J = 7,9, 1,6 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,45 (s, 1H), 4,35 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,29 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,11 - 2,79 (m, 5H), 2,73 (m, 1H), 2,33 (dd, J= 13,4, 7,4 Hz, 1H), 2,24 (m, 1H), 2,15 (m, 2H), 2,02 - 1,91 (m, 2H), 1,89 - 1,76 (m, 2H). Preparação de brometo de (2-etoxietil)trifenilfosfônio

[0379] Um frasco de base redonda de 3 gargalos equipado com um agitador mecânico foi carregado com trifenilfosfina (41,7 g, 159 mmol) e tolueno (550 mL). À solução foi adicionado 1-bromo-2-etoxietano (22,11 mL, 176 mmol) sob N2 em temperatura ambiente. A mistura de reação foi aquecida para 95°C durante 18 horas. O sólido foi formado durante a reação. Após 18 horas, a mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente e agitada durante 30 minutos. A suspensão foi filtrada, enxaguada com tolueno (2 x 100 ml) e secada sob vácuo elevado para fornecer brometo de (2-etoxietil)trifenilfosfônio (60,1 g, 145 mmol) como um sólido off-white. LC/MS M+1 = 336. Preparação de (5R,7S)-7-((R)-6-((Z)-3-etoxiprop-1-en-1-il)-5,6,7,8- tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0380] terc-Butóxido de potássio a 1 M (48,6 mL, 48,6 mmol) foi adicionado durante um período de 20 minutos a uma suspensão de brometo de (2-etoxietil)trifenilfosfônio (20,8 g, 50,1 mmol) em THF (205 mL) a -78°C e sob Ar. Após a adição ser concluída, a mistura foi agitada a -78°C durante 30 minutos e em seguida, uma solução de (R)-6- ((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftaleno-2-carbaldeído (10,6 g, 31,5 mmol) em CH2Cl2 (69 ml) foi adicionada gota a gota durante um período de 40 minutos. A mistura foi agitada durante 17,5 h ao mesmo tempo que lentamente aquecendo para 19°C. Após resfriar a mistura de reação para 0°C, KH2PO4 a 1 M (100 mL) foi adicionado. A mistura aquosa resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos e em seguida extraída com EtOAc (300 mL). O extrato orgânico foi lavado com água (100 mL) e NaCl saturado (100 mL), secado (Na2SO4) e concentrado. O cru foi purificado por cromatografia (SiO2 750 g coluna de ouro RediSep, 0 a 40% de acetona/hexanos) para dar origem a (5R,7S)-7-((R)-6-((Z)-3- etoxiprop-1-en-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (8,93 g) como um sólido branco. HPLC Analítica (método Gemini): RT = 8,65 min, área%: 97; LC/MS M+1 = 356; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 7,04 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,97 (m, 2H), 5,59 (m, 2H), 5,10 (s, 1H), 4,35 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 3,52 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,05 (m, 1H), 2,85 (dd, J= 8,3, 4,5 Hz, 2H), 2,83-2,71 (m, 2H), 2,57 (m, 1H), 2,34 (dd, J= 13,4, 7,4 Hz, 1H), 2,21-2,08 (m, 2H), 2,05-1,77 (m, 2H), 1,61 (m, 1H), 1,24 (t, J = 6,9 Hz, 3H). Preparação de (5R,7S)-7-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0381] A uma mistura agitada de (5R,7S)-7-((R)-6-((Z)-3-etoxiprop- 1-en-1-il)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan- 2-ona (10,8 g, 28,9 mmol) em THF (275 ml) foi adicionado óxido de platina (IV) (0,408 g, 1,797 mmol). A suspensão resultante foi agitada sob hidrogênio (1 atm, balão) durante 10,0 h. A suspensão foi filtrada através de celita e a massa filtrante foi enxaguada com CH2Cl2 (200 mL) e MeOH (80 mL). A filtragem e enxagues foram combinados e evaporados para fornecer (5R,7S)-7-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona cru (10,6 g) como um sólido amarronado. HPLC Analítica (método Gemini): RT = 9,29 min, área%: 92.

[0382] O material cru acima foi filtrado através de uma almofada curta de SiO2 (230-400 malhas) eluindo com 4/1 a 7/3 de CH2Cl2/EtOAc para obter 10,0 g de um material que continha um subproduto de hidrogenólise e uma impureza epimérica não resolvida pelas condições de HPLC acima. Este último material foi purificado por SFC para dar origem a (5R,7S)-7-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2- il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (7,3 g) como um sólido off-white. HPLC Analítica (método Gemini): RT = 9,39 min, área%: 99; LC/MS M+1 = 358. Preparação de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol

[0383] A uma mistura agitada do (5R,7S)-7-((S)-6-(3-etoxipropil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (20,5 g, 56,8 mmol) em 2-metiltetra-hidrofurano (60,0 ml) e EtOH (120 ml) foi adicionada uma solução de hidróxido de lítio (6,2 g, 254 mmol) em água (60,0 ml). A mistura foi aquecida para 90°C e agitada nesta temperatura durante 16,0 h. Em seguida, a mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente e filtrada através de um funil sinterizado. O sólido branco restante no funil sinterizado foi triturado e enxaguado com CH2Cl2 (200 mL), em seguida água (150 mL) e finalmente com mais CH2Cl2 (200 mL). A filtragem e enxagues foram combinados e transferidos para um funil separatório. A mistura bifásica foi agitada e as camadas separadas. A camada orgânica foi coletada, secada (Na2SO4) e concentrada para fornecer ((1R,3S)-1-amino-3-((S)- 6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (18,8 g) como uma espuma amarronada: HPLC (método Gemini): RT = 4,74 min, área%: 99; LC/MS M+1 = 332. Preparação de cloridrato de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3-etoxipropil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol

[0384] A uma mistura agitada do ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3- etoxipropil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (17,0 g, 50,8 mmol) em EtOH (115 ml) em temperatura ambiente foi adicionado HCl/EtOH a 1,25 M (50,0 ml, 62,4 mmol). A solução resultante foi agitada durante 2,4 h e tornou-se uma suspensão. O sólido que formouse foi coletado por filtração, enxaguado com dietil éter, em seguida dissolvido em MeOH e filtrado através do funil sinterizado. A solução metanólica foi evaporada e secada sob vácuo para obter 13,9 g de um sólido branco. A solução filtrada e enxagues de éter foram combinados e evaporados em vácuo até a precipitação ser observada. O sólido que formou-se foi isolado como descrito acima para fornecer mais 2,33 g de sólido branco. Os sólidos acima foram combinados para dar origem a cloridrato de ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(3-etoxipropil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (16,2 g) como um sólido branco: HPLC (método Gemini): RT = 4,77 min, área%: 99; LC/MS M+1 = 332; 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,00 (m, 3H), 3,66 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,60 (t, J = 11,6 Hz, 1H), 3,52 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,49 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,11 (m, 1H), 2,90-2,71 (m, 3H), 2,40 (m, 2H), 2,11 (m, 1H), 2,021,86 (m, 4H), 1,77-1,64 (m, 4H), 1,50-1,33 (m, 3H), 1,21 (t, J = 7,1 Hz, 3H). Preparação Alternativa-1 de Exemplo 681

[0385] A uma mistura de bis(di-terc-butil(4- dimetilaminofenil)fosfina)dicloropaládio (II) (23,97 mg, 0,034 mmol), carbonato de césio (331 mg, 1,016 mmol), e (5R,7S)-7-((R)-6-etinil- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (100 mg, 0,339 mmol) em acetonitrila (10 mL) foi adicionado 1-iodo-2- metoxibenzeno (0,132 mL, 1,016 mmol). A mistura de reação foi aspergida com nitrogênio durante 5 minutos, em seguida aquecida a 70°C durante a noite. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (24 g) usando um gradiente de EtOAc/hexano (0 a 100% de EtOAc sobre 20 CV). As frações isoladas 14-15 foram concentradas e secadas em vácuo para dar origem a (5R,7S)-7-((R)-6- ((2-metoxifenil)etinil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (70 mg, 0,174 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 1,07 min (condição A); LC/MS M+1 = 402.

[0386] A uma mistura de (5R,7S)-7-((R)-6-((2-metoxifenil)etinil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (65 mg, 0,162 mmol) em MeOH (5 mL) foi adicionado catalisador de Pearlman (5 mg, 0,036 mmol). A mistura de reação foi hidrogenada sob um balão de H2 durante 1 hora. A mistura foi filtrada para remover o catalisador. Em seguida, NaOH a 1 N (5 mL) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 95°C durante a noite. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com H2O. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. Purificada por HPLC. Condições de HPLC: coluna Fenomenex Luna de 5 mícron C18 (30 x 100 mm); MeCN (0,1% de TFA)/água (0,1% de TFA); gradiente de 20% a 100% durante 15 minutos; 30 mL/min. As frações com massa correta foram combinadas, em seguida lavadas com NaOH a 1 N e extraídas com EtOAc. A camada de EtOAc foi lavada mais duas vezes e em seguida novamente extraída a camada aquosa uma vez. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada, concentrada, e secada por congelamento de MeCN/água para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2- metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (55 mg, 0,138 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 8,26 min (condição L); LC/MS M+1 = 380. Preparação Alternativa-2 de Exemplo 681

[0387] A uma mistura de 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6- ((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)metila (1 g, 2,195 mmol) e carbonato de potássio (0,910 g, 6,59 mmol) em DMF (10) foi adicionado 1-fenil-1H-tetrazol-5- tiol (0,782 g, 4,39 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 80°C durante a noite. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (40 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 13 CV) para dar origem a (5R,7S)-7-((R)-6-(((1-fenil-1H- tetrazol-5-il)tio)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (0,94 g, 2,036 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 1,02 min (condição A); LC/MS M+1 = 462.

[0388] Ao peróxido de hidrogênio (8,32 mL, 81 mmol) a 0°C foi adicionado tetra-hidrato de molibdato de amônio (0,503 g, 0,407 mmol). A solução resultante foi adicionada a uma mistura de (5R,7S)-7-((R)-6- (((1-fenil-1H-tetrazol-5-il)tio)metil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (0,94 g, 2,036 mmol) em THF (15 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada durante a noite. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com NaCl saturado. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada para dar origem a (5R,7S)-7-((R)-6-(((1-fenil-1H-tetrazol-5-il)sulfonil)metil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (1 g, 2,026 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 0,96 min (condição A); LC/MS M+1 = 494.

[0389] A uma mistura de 2-metoxibenzaldeído (497 mg, 3,65 mmol) e (5R,7S)-7-((R)-6-(((1-fenil-1H-tetrazol-5-il)sulfonil)metil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (600 mg, 1,216 mmol) em THF foi adicionado KHMDS (4,86 mL, 4,86 mmol). Após agitar em temperatura ambiente durante 1 hora, a reação foi saciada com MeOH. A mistura foi purificada por HPLC. O material cru foi purificado sobre um cartucho de sílica gel (24 g) usando um gradiente de EtOAc/Hex (0 a 100% de EtOAc sobre 12 CV). As frações isoladas 18-20 foram concentradas e secadas em vácuo para dar origem a (5R,7S)-7-((R)-6-((E)-2-metoxiestiril)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (182 mg, 0,451 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 1,13 min (condição A); LC/MS M+1 = 404.

[0390] A uma mistura de (5R,7S)-7-((R)-6-((E)-2-metoxiestiril)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (182 mg, 0,451 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionado catalisador de Pearlman (5 mg, 0,036 mmol). A mistura de reação foi hidrogenada sob um balão de H2 durante 1 hora. A mistura foi filtrada para remover o catalisador, e NaOH a 1 N (5 mL) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida a 95°C durante a noite. A mistura foi resfriada, diluída com acetato de etila, e lavada com H2O. A camada orgânica foi secada com MgSO4, filtrada e concentrada. O material sólido foi triturado em MeCN e agitado durante a noite. Os sólidos foram coletados por filtração e secados para dar origem a ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-metoxifenetil)- 5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (90 mg, 0,235 mmol). Tempo de retenção por HPLC = 7,93 min (condição L); LC/MS M+1 = 380. Preparação Alternativa-3 de Exemplo 681

[0391] A uma solução de 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-6- ((5R,7S)-2-oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-2-il)metila (700 mg, 1,537 mmol) e complexo de sulfeto de dimetila - brometo de cobre (I) (948 mg, 4,61 mmol) em Et2O (50 mL) foi adicionado cloreto de (2-metoxibenzil)magnésio (58 ml, 14,50 mmol) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 16 h. A mistura de reação foi diluída com NH3Cl saturado e água, e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi coletada, secada sobre Na2SO4, concentrada para fornecer 580 mg de produto desejado, M+H=406. Este material foi dissolvido em dioxano (10 mL) e NaOH a 1 N foi adicionado (10 mL). A mistura foi aquecida a 100°C durante a noite. A mistura foi resfriada, diluída com água, e extraída com EtOAc (2X). A camada orgânica combinada foi lavada com NaCl saturado, em seguida secada sobre MgSO4, e concentrada sobre o rotavapor. O material sólido foi triturado em MeCN (10 mL) e em seguida agitado durante diversas horas. O material sólido foi coletado por filtração e secado em vácuo para fornecer ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)ciclopentil)metanol (350 mg, 0,876 mmol). MS (m+1) = 380; RT de pico de HPLC = 9,06 min (Condição L) Pureza = 97%. Preparação Alternativa-4 de Exemplo 681 Preparação de 5-((2-metoxibenzil)tio)-1-fenil-1H-tetrazol

[0392] Carbonato de sódio (135 g, 1277 mmol) foi adicionado porção a porção a uma solução de 1-(clorometil)-2-metoxibenzeno (200 g, 639 mmol) e 1-fenil-1H-tetrazol-5-tiol (125 g, 702 mmol) em DMF anidroso (639 ml). A mistura de reação foi deixada agitar em temperatura ambiente sob uma atmosfera de nitrogênio durante 2 dias antes de diluir com água (1000 ml) e extrair com acetato de etila (3 x 300 ml). Os orgânicos combinados foram em seguida lavados com água (500 mL), solução salina (500 mL) e em seguida secados (MgSO4). O solvente foi evaporado em vácuo e o cru purificado por cromatografia de coluna usando acetato de etila:hexano como eluente para fornecer 5-((2-metoxibenzil)tio)-1-fenil-1H-tetrazol (167g, 88%) como um sólido branco. Tempo de retenção por HPLC (Sunfire C18 5 um 4,6 x 50 (4 min grad.) Solvente A = 10% de MeOH- 90% de H2O - 0,2% de H3PO4; Solvente B = 90% de MeOH-10% de H2O - 0,2% de H3PO4) = 3,34 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,73-7,48 (m, 5H), 7,37 (dd, J=7,5, 1,8 Hz, 1H), 7,29 (td, J=7,8, 1,8 Hz, 1H), 6,99 (d, J=8,1 Hz, 1H), 6,88 (td, J=7,5, 0,9 Hz, 1H), 4,53 (s, 2H), 3,76 (s, 3H). 5-((2-metoxibenzil)sulfonil)-1-fenil-1H-tetrazol

[0393] A um frasco de base redonda de 3 gargalos de 500 ml foi adicionado peróxido de hidrogênio (0,274 L, 2681 mmol). Os conteúdos do frasco foram resfriados para 0-5°C. Tetra-hidrato de molibdato de amônio (66,3 g, 53,6 mmol) foi adicionado porção a porção durante 10 minutos ao mesmo tempo que mantendo a temperatura abaixo de 5°C. A um frasco de base redonda de 3 gargalos de 5 l separado com um agitador mecânico foi adicionado 5-((2-metoxibenzil)tio)-1-fenil-1H- tetrazol (80 g, 268 mmol) em acetonitrila (2L). A solução de peróxido foi adicionada lentamente ao mesmo tempo que mantendo a temperatura abaixo de 30°C durante a adição. Uma suspensão amarela formou-se. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 18 h. A mistura de reação foi resfriada com um banho de gelo para 5°C e diluída com água (2,7 L) e agitada durante 1 h. A suspensão foi filtrada e lavada com água e secada por sucção a vácuo para fornecer uma mistura de sulfona e sulfóxido (~ 80 g) que foi novamente submetida às condições de oxidação descritas acima para fornecer o produto cru (~80 g) que foi em seguida purificado por cromatografia coluna usando acetato de etila:hexano como eluente para fornecer 5-((2- metoxibenzil)sulfonil)-1-fenil-1H-tetrazol (71 g, 215 mmol) como um sólido cristalino branco. Tempo de retenção por HPLC (BEH C18 2,1 x 50 mm 1,7 um, 2 min grad., nome de solvente A: 100% de H2O peso/0,05% de TFA; nome de solvente B: 100% de ACN peso/0,05% de TFA) 0,91 min. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,62-7,54 (m, 1H), 7,54-7,45 (m, 2H), 7,41 (ddd, J=8,3, 7,5, 1,8 Hz, 1H), 7,37-7,30 (m, 3H), 6,96 (td, J=7,5, 1,0 Hz, 1H), 6,91 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,02 (s, 2H), 3,74 (s, 3H). (5R,7S)-7-((R)-6-((E)-2-metoxiestiril)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0394] LiHMDS (46,8 ml, 70,1 mmol) foi adicionado gota a gota a uma solução de 5-((2-metoxibenzil)sulfonil)-1-fenil-1H-tetrazol (23,17 g, 70,1 mmol) em THF anidroso (84 ml) e DMF (55,9 ml) a -78°C sob uma atmosfera de nitrogênio. A adição levou ~5 min e a temperatura da mistura de reação não elevou-se acima de -60°C. A solução resultante ficou de cor laranja. A mistura de reação foi deixada agitar a -78°C durante 30 minutos antes da adição gota a gota de (R)-6-((5R,7S)-2- oxo-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2- carbaldeído (10 g, 33,4 mmol) em DMF anidroso (39,9 ml) [como 14 mL + 6 mL de lavagem]. A temperatura não elevou-se acima de -70°C durante a adição. A mistura de reação foi deixada aquecer lentamente para temperatura ambiente durante a noite. HPLC indicou produto desejado. A mistura de reação foi resfriada para -78°C antes da reação ser saciada com água (20 mL). A mistura foi deixada aquecer para temperatura ambiente. A mistura de reação foi dividida entre água e acetato de etila, e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2x). Os orgânicos combinados foram em seguida lavados com água, solução salina, e secados (MgSO4). A camada orgânica evaporada foi em seguida purificada por cromatografia de coluna usando acetato de etila:hexano como eluente para fornecer (5R,7S)-7-((R)-6-((E)-2- metoxiestiril)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona (12,1g, 90%) como um sólido branco. Tempo de retenção por HPLC (BEH C18 2,1 x 50 mm 1,7 um, 2 min grad., Nome de Solvente A: 100% de H2O peso/0,05% de TFA; Nome de Solvente B: 100% de ACN peso/0,05% de TFA): 1,27 e 1,28 min, como uma mistura de 1:2 de isômeros de ligação dupla. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ 7,48 (dd, J=7,7, 1,5 Hz, 1H), 7,33-7,18 (m, 5H), 7,13-7,02 (m, 2H), 7,01-6,87 (m, 6H), 6,83 (d, J=16,1 Hz, 1H), 6,56 (d, J=11,7 Hz, 1H), 6,29 (dd, J=16,1, 6,8 Hz, 1H), 5,69 (dd, J=11,7, 9,9 Hz, 1H), 5,15 (br. s., 1H), 4,40-4,25 (m, 3H), 3,87 (d, J=4,0 Hz, 5H), 3,132,78 (m, 7H), 2,76-2,58 (m, 3H), 2,41-2,27 (m, 2H), 2,22-2,05 (m, 4H), 2,04-1,91 (m, 4H), 1,89-1,75 (m, 2H), 1,74-1,60 (m, 2H), 1,57 (s, 4H). (5R,7S)-7-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0395] (5R,7S)-7-((R)-6-((E)-2-metoxiestiril)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (24 g, 59,5 mmol) foi dissolvido em diclorometano (297 ml) e MeOH (297 ml). Gás de nitrogênio foi borbulhado através da solução durante cerca de 10 minutos. Em seguida, Pd/C (6,33 g, 5,95 mmol) foi adicionado em uma porção. Um balão carregado de hidrogênio foi colocado sobre um frasco de reação antes de evacuar o frasco durante ~2 minutos. O hidrogênio foi em seguida introduzido e este processo foi repetido mais 2 vezes. Após agitar em temperatura ambiente durante a noite, HPLC indicou conversão para o produto desejado, porém com significante material de partida restante. A mistura de reação foi filtrada através de celita, lavada com 1:1 de MeOH:DCM e o filtrado foi evaporado em vácuo. O resíduo foi estabelecido como descrito acima e novamente submetido à hidrogenação durante a noite. HPLC ainda mostra material de partida restante. Uma terceira hidrogenação forneceu completa conversão para o produto desejado. A mistura de reação foi filtrada através de celita e evaporada. SFC foi realizada para remover um menor isômero indesejado e forneceu (5R,7S)-7-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (24,67 g, 60,8 mmol) como um sólido branco. Tempo de retenção por HPLC (Sunfire C18 5 um 4,6 x 50 (4 min grad.) Solvente A = 10% de MeOH- 90% de H2O - 0,2% de H3PO4; Solvente B = 90% de MeOH-10% de H2O - 0,2% de H3PO4) = 4,15 min. ((1R,3S)-1-amino-3-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen- 2-il)ciclopentil)metanol

[0396] LiOH (21,91 g, 915 mmol) foi adicionado em uma porção a uma solução de (5R,7S)-7-((S)-6-(2-metoxifenetil)-5,6,7,8-tetra- hidronaftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (53 g, 131 mmol) em dioxano (523 ml) e H2O (131 ml). A mistura de reação foi deixada ao refluxo sob uma atmosfera de nitrogênio durante 72 horas. A mistura de reação foi deixada resfriar para temperatura ambiente antes de diluir com água (300 ml) e extrair com acetato de etila (3 x 300 ml). Os orgânicos combinados foram em seguida secados (MgSO4) e evaporados em vácuo. O resíduo foi recristalizado de IPA para fornecer um sólido branco (27 g). O restante do material formou um quelato com o agente de secagem. Este material foi tratado com etanol quente e a suspensão resultante filtrada para remover o agente de secagem. O filtrado foi evaporado em vácuo e apreendido em acetato de etila (300 ml) antes de lavar com solução de hidróxido de sódio a 1 N (200 ml). A camada orgânica foi secada (Na2SO4) e evaporada para fornecer um resíduo que foi recristalizado de IPA para fornecer um sólido branco (13 g). O restante do material (filtrados das duas manipulações acima) foi purificado por SFC para fornecer 10 g de um sólido branco. Tempo de retenção por HPLC (Sunfire C18 5 um 4,6 x 50 (4 min grad.) Solvente A = 10% de MeOH- 90% de H2O - 0,2% de H3PO4; Solvente B = 90% de MeOH-10% de H2O - 0,2% de H3PO4) = 3,21 min. Composto Comparativo 703 (1R,3R)-1-Amino-3-(6-(pentilóxi)naftalen-2-il)ciclopentil)metanol

[0397] Composto Comparativo 703 foi descrito em WO 2008/079382, Exemplo Q,1. Intermediário 703A: (5R,7R)-7-(6-(pentilóxi)naftalen-2-il)-3-oxa-1- azaespiro[4,4]nonan-2-ona

[0398] Uma mistura de 1-pentanol (6,13 mL, 56,4 mmol), mono- hidrato de ácido p-toluenossulfônico (4,60 mg, 0,024 mmol), e trimetoximetano (0,353 mL, 3,22 mmol) foi agitada a 100°C durante 3 horas com uma lenta corrente de ar fluindo sobre a mistura para remover metanol e algum pentanol. O líquido residual obtido foi misturado com (5R,7R)-7-(6-oxo-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il)-3-oxa- 1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (Int. 7, 230 mg, 0,806 mmol) e agitado a 100 °C sob nitrogênio durante 2,5 horas. A solução foi deixada resfriar para temperatura ambiente antes paládio sobre carbono (172 mg, 0,081 mmol) ser adicionado, seguido por acetato de etila (4 mL). A mistura foi deixada agitar sob uma pressão de balão de hidrogênio em temperatura ambiente durante a noite. As misturas resultantes foram filtradas através de um filtro de membrana e o filtrado foi concentrado. Purificação por cromatografia flash (coluna de sílica gel de 24 g, 0% a 70% de acetato de etila em hexanos) forneceu 180 mg de material que requereu adicional purificação. Separação cromatográfica de fluido supercrítica forneceu uma maior fração por análise de UV identificada como (5R,7R)-7-(6-(pentilóxi)naftalen-2-il)-3-oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2- ona (36 mg) como um sólido. Instrumento: SFC-MS Analítica Thar 350 Thar; Condições: Condições Analíticas: Coluna Analítica: AD-H (0,46 x 25 cm, 5 μm); pressão de BPR: 100 bars; Temperatura: 45°C; Taxa de fluxo: 3,0 mL/min; Fase Móvel: CO2/MeOH (70/30); Comprimento de onda do detector: UV 200-400 nm. Condições Preparativas: Coluna Preparativa: AD-H (3 x 25 cm, 5 μm); pressão de BPR: 100 bars; Temperatura: 35°C; Taxa de fluxo: 120 mL/min; Fase Móvel: CO2/MeOH (70/30); Comprimento de onda do detector: 220 nm; Programa de Separação: injeção Stack; Injeção: 2,5 mL com tempo de ciclo de 480 segundos. (Tempo de Retenção de SFC Analítica = 11,68 min, pureza >99,5%) Tempo de retenção por HPLC = 1,11 min (Condição G); LC/MS M+1 = 354. 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,68 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,55 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,21-7,04 (m, 2H), 6,48 (br. s., 1H), 4,50-4,28 (m, 2H), 4,07 (t, J=6,6 Hz, 2H), 3,49-3,31 (m, 1H), 2,46 (dd, J=13,3, 7,6 Hz, 1H), 2,39-2,24 (m, 1H), 2,24-2,12 (m, 1H), 2,12-2,00 (m, 1H), 2,00-1,90 (m, 1H), 1,90-1,76 (m, 3H), 1,58-1,30 (m, 4H), 0,96 (t, J=7,0 Hz, 3H). Composto Comparativo 703:

[0399] A uma solução de (5R,7R)-7-(6-(pentilóxi)naftalen-2-il)-3- oxa-1-azaespiro[4,4]nonan-2-ona (36 mg, 0,102 mmol) em dioxano (2 mL) e água (0,8 mL) foi adicionado LiOH (36,6 mg, 1,528 mmol). A solução foi aquecida para 90°C e deixada agitar durante 15 horas. A mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente e foi vertida em acetato de etila e lavada com água. O material cru foi em seguida purificado sobre HPLC de fase reversa [Coluna: Luna Axia 30*100 mm; Tempo de gradiente: 10 min; Taxa de fluxo = 40 ml/min; Solvente A = 10% de MeOH-90% de Água-0,1% de TFA; Solvente B = 90% de MeOH-10% de água-0,1% de TFA; Início % B = 20; Final % B = 100]. O produto contendo frações foi coletado e secado sob vácuo elevado para fornecer ((1R,3R)-1-amino-3-(6-(pentilóxi)naftalen-2- il)ciclopentil)metanol, TFA (31 mg) como um sólido. Tempo de retenção por HPLC = 0,90 min (Condição G); LC/MS M+1 = 328. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4) δ 7,75-7,66 (m, 2H), 7,66-7,59 (m, 1H), 7,40-7,33 (m, 1H), 7,17 (d, J=2,6 Hz, 1H), 7,14-7,08 (m, 1H), 4,07 (t, J=6,5 Hz, 2H), 3,74-3,60 (m, 2H), 3,59-3,41 (m, 1H), 2,39-2,22 (m, 3H), 2,04-1,80 (m, 5H), 1,55-1,34 (m, 4H), 1,01-0,89 (m, 3H).

Ensaios Biológicos

[0400] Os compostos de Fórmulas (Ia), (IIa), (IIIa), (IVa), e (Va) ou sais dos mesmos engajam seus alvos biológicos (por exemplo, S1P1) após bioativação através de fosforilação do álcool para fornecer um composto de éster de fosfato ativo de Fórmulas (Ib), (IIb), (IIIb), (IVb), e (Vb), ou sais das mesmas. Caracterização in vitro de atividade biológica dos exemplos foi conduzida sobre amostras sinteticamente preparadas dos compostos fosforilados.

Ensaio de Ligação de S1P1:

[0401] Membranas foram preparadas de células CHO expressando S1P1 humano. Péletes celulares (1x109 células/pélete) foram suspensas em tampão contendo HEPES a 20 mM (ácido 4-(2-hidroxietil)-1- piperazinaetanossulfônico), pH 7,5, NaCl a 50 mM, EDTA a 2 mM (ácido etilenodiaminatetraacético) e coquetel inibidor de protease (Roche), e suspensas sobre gelo usando o homogeneizador Polytron. O homogeneizador foi centrifugado a 20.000 rpm (48,000g) e o sobrenadante foi descartado. As péletes de membrana foram ressuspensas em tampão contendo HEPES a 50 mM, pH 7,5, NaCl a 100 mM, MgCl2 a 1 mM, EDTA a 2 mM e armazenadas em alíquotas a -80°C após determinação da concentração de proteína.

[0402] Membranas (2 μg/cavidade) e 0,03 nM de concentração final de ligante 33P-S1P (1 mCi/ml, Perkin elmer ou American Radiolabeled Chemicals) diluídas em tampão de ensaio (HEPES a 50 mM, pH 7,4, MgCl2 a 5 mM, CaCl2 a 1 mM, 0,5% de BSA livre de ácido graxo (albumina de soro bovino), NaF a 1 mM) foram adicionados às placas de composto (placas de base em v 384 Falcon (0,5 μl/cavidade em uma diluição de 3 vezes, 11 pontos). Ligação foi realizada durante 45 minutos em temperatura ambiente, terminada coletando as membranas sobre placas filtrantes Millipore FB de 384 cavidades, e a radioatividade foi medida por TOPCOUNT®. Os dados de competição dos compostos teste em uma faixa de concentrações foram plotados como a percentagem de inibição de ligação específica de radioligante. A IC50 é definida como a concentração de ligante de competição necessária para reduzir a ligação específica em 50%. A IC50 para o exemplo 689 foi determinada ser de 1,7 nM. Tabela A

Ensaios de Ligação de Receptor [35S] GTPyS: (S1Pi GTPyS / SIP3 GTPyS)

[0403] Compostos foram carregados em uma placa de base v 384 Falcon (0,5 μl/cavidade em diluição de 3 vezes, de 11 pontos). Membranas preparadas de células S1P1/CHO ou células HEK293T EDG3-Ga15-bla (S1P3 equivalente a EDG3) foram adicionadas à placa de composto (40 μl/cavidade, proteína final 3 μg/cavidade) com MULTIDROP®. [35S]GTP (1250 Ci/mmol, Perkin Elmer) foi diluído em tampão de ensaio: HEPES a 20 mM, pH7.5, MgCl2 a 10 mM, NaCl a 150 mM, EGTA a 1 mM (ácido etileno glicol tetraacético), DTT a 1 mM (Ditiotreitol), GDP a 10 μM, BSA livre de ácido graxo a 0,1%, e 10 μg/ml de Saponina a 0,4 nM. 40 μl da solução de [35S] GTP foram adicionados à placa de composto com uma concentração final de 0,2 nM. A reação foi mantida em temperatura ambiente durante 45 min. No término da incubação, todas as misturas na placa de composto foram transferidas para placas filtrantes FB de 384 cavidades Millipore por meio do manipulador de líquido VELOCITY11® Vprep. A placa filtrante foi lavada com água 4 vezes usando a lavadora de placa Embla coletora e secada a 60°C durante 45 min. Fluido de cintilação MicroScint 20 (30 μl) foi adicionado a cada cavidade para contagem na Packard TOPCOUNT®. EC50 é definida como a concentração de agonista que corresponde a 50% do Ymax (resposta máxima) obtido para cada composto individual testado. A EC50 para o exemplo 689 foi determinada ser 5,7 nM no ensaio utilizando membranas preparadas de células S1P1/CHO. A EC50 para o exemplo 689 foi determinada ser > 2000 nM no ensaio utilizando membranas preparadas de células HEK293T EDG3-Ga15-bla.

[0404] Um menor valor para o valor EC50 de GTPyS S1Pi indicou maior atividade para o composto no ensaio de ligação GTPyS SIPi. Um maior valor para o valor EC50 de GTPyS S1P3 indicou menos atividade no ensaio de ligação de GTPyS S1P3. O exemplo 689, que é o éster de fosfato de exemplo 672, possuiu atividade como um agonista de SiPi e é seletivo sobre S1P3. O exemplo 697, que é o éster de fosfato de exemplo 681, atividade possuída como um agonista de S1P1 e é seletivo sobre S1P3. Desse modo, os compostos da presente invenção podem ser usados em tratamento, prevenção, ou cura de várias condições relacionadas com o receptor S1P1, embora reduzindo ou minimizando os efeitos colaterais devido à atividade de S1P3. A seletividade dos compostos da presente invenção indicam seu uso potencial no tratamento, prevenção, ou cura de doenças autoimunes e inflamatórias, tais como esclerose múltipla, artrite reumatóide, doença do intestino inflamatória, lúpus, psoríase, ou doenças vasculares, ao mesmo tempo em que reduzindo ou minimizando os possíveis efeitos colaterais devido à atividade de S1P3. Outros usos potenciais dos compostos da presente invenção incluem minimizar ou reduzir a rejeição de órgãos transplantados, ao mesmo tempo em que reduzindo ou minimizando os efeitos colaterais devido à atividade de S1P3. Tabela B

Fosforilação de ERK de hS1P1 (pERK de S1P1)

[0405] Células hS1P1/CHO foram semeadas em placas de 384 cavidades de BD Amina no dia anterior ao ensaio. No dia do ensaio, meio de crescimento foi removido e substituído com meio livre de soro (Ham’s F-12 Invitrogen) e incubado durante 2 horas. Compostos teste pré-diluídos em HBSS (Gibco)/HEPES a 20 mM (Gibco) foram transferidos para placas celulares e incubados durante 7 minutos a 37°C. As células foram lisadas em tampão de lise (Perkin Elmer) e fosfo- ERK foi medido usando o kit SureFire pERK (Perkin Elmer) como descrito pelo fabricante. Os dados foram plotados como a percentagem de ativação do composto teste relativa à eficácia de S1P a 10 μM. A EC50 é definida como a concentração de composto teste que produz 50% da resposta máxima e foi quantificada usando a equação logística de 4 parâmetros para ajustar os dados. Os dados para os exemplos de fosfato neste ensaio são como mostrado na Tabela I.

Ensaio de Redução de Linfócito Sanguíneo (BLR) em roedor:

[0406] Ratos Lewis ou camundongos BALB/c foram dosados oralmente com veículo apenas (polietileno glicol 300, "PEG300") ou com compostos teste. Compostos foram dosados como uma solução ou suspensão no veículo, ajustados para refletir a quantidade livre de artigo teste no evento em que formas de sal são utilizadas. O sangue foi retirado a 24 horas e contagens de linfócito sanguínio foram determinados em um ADVIA 120 Hematology Analyzer (Siemens Healthcare Diagnostics). Os resultados foram avaliados como uma redução nma percentagem de linfócitos circulantes quando comparado ao grupo tratado com veículo no momento da avaliação. Os resultados representam os resultados médios de todos os animais em cada grupo de tratamento (n = 2-4). Os resultados do ensaio de Redução de Linfócito Sanguíneo (BLR) em rato descrito acima são mostrados na Tabela C.

[0407] A orientação estereoquímica dos compostos na presente invenção foi descoberta influenciar a atividade no ensaio BLR de roedor. Por exemplo, o conjunto diastereomérico de compostos exemplos 672, 673, 674, e 675 foi avaliado no mesmo nível de dosagem de 0,1 mg/kg e a redução de linfócito resultante a 24 horas pós-dose foi descoberta variar de 30% para o Exemplo 674 a 63% para o Exemplo 675. Os compostos exemplo diastereoméricos 678 e 679 foram cada um avaliado a 0,1 mg/kg e a redução de linfócito resultante foi descoberta ser de 16% e 65% respectivamente. Igualmente, exemplos de compostos diastereoméricos 681 e 682 foram cada um avaliado a 0,1 mg/kg e a redução de linfócito resultante foi descoberta ser de 53% e 17%, respectivamente. Tabela C-1

[0408] Os compostos da presente invenção, como exemplificados pelos Exemplos 679, 681, e 684, foram comparados ao Composto Comparativo 703, descrito no WO 2008/079382, e foram descobertos ser vantajosos. Como mostrado na Tabela C-2, Exemplos 679, 681, e 684 administrados aos camundongos em uma dose de 0,5 mg/kg, mostraram reduções de linfócito de 59%, 85%, e 79%, respectivamente, a 24 horas pós-dose neste estudo. Em comparação, o Composto Comparativo 703 administrado uma dose de 1,0 mg/kg, mostrou uma redução de linfócito de 52% a 24 horas pós-dose. Tabela C-2

[0409] Os compostos da presente invenção possuem atividade como agonistas do receptor S1P1, levando à redução de linfócitos sanguíneos circulantes, e desse modo podem ser usados em tratamento, prevenção, ou cura de várias condições relacionadas com o receptor S1P1. A seletividade surpreendente dos compostos da presente invenção indica seu uso potencial no tratamento, prevenção, ou cura de doenças autoimunes e inflamatórias, tais como esclerose múltipla, artrite reumatóide, doença do intestino inflamatórias, lúpus, psoríase, ou doença vasculars. Outros usos potenciais dos compostos da presente invenção incluem minimizar ou reduzir a rejeição de órgãos transplantados.

Ensaio de Artrite Induzida por Adjuvante de Rato (AA)

[0410] O modelo de artrite induzida por adjuvante de rato é um modelo animal para artrite reumatóide humana.

[0411] Ratos Lewis machos (150-175 g; Harlan, grupo de tratamento n=8) foram imunizados na base do rabo com 100 μl de 10 mg/ml de Mycobacterium butyricum recentemente moído (Difco Laboratories) em adjuvante de Freund incompleto (Sigma). Os animais foram dosados uma vez ao dia com o artigo teste (como uma solução ou suspensão no veículo) ou veículo sozinho (polietileno glicol 300, "PEG300") iniciando a partir do dia de imunização. Os volumes de suas patas traseiras foram medidos em um pletismômetro de deslocamento em água (Ugo Basile, Italy). As medições da pata de referência foram feitas antes a partir do início da doença (entre o dia 7 e o dia 10). As medições da pata foram então feitas três vezes por semana até o término do estudo no dia 20 a 21. Todos os procedimentos envolvendo animais foram revistos e aprovados pelo Institutional Animal Care Use Committee.

[0412] O exemplo 672 da presente invenção foi testado em ensaio AA de rato descrito aqui acima, e os resultados são mostrados na Tabela D. Os compostos desta invenção, como exemplificado pelo Exemplo 672, no teste reportado, mostraram inibição de progressão da doença quando medidos pela inchação da pata reduzida no rato Lewis usando um regime de dosagem oral profilático. Tabela D *SEM: erro padrão da média

[0413] O exemplo 679 foi testado no ensaio AA de rato descrito aqui acima e os resultados são mostrados na Tabela E. Os compostos desta invenção, como exemplificado pelo exemplo 679 no teste reportado, mostrou inibição de progressão da doença quando medido por inchação da pata reduzida no rato Lewis usando um regime de dosagem oral profilático. Tabela E

Ensaio de Encefalomielite Autoimune Experimental de Camundongo (EAE)

[0414] Camundongos (C57BL/6 fêmeas, 6 a 8 semanas de idade, Charles River, grupo de tratamento n=10) foram imunizados subcutaneamente com 150 μg de MOG35-55 emulsificados 1:1 com adjuvente de Freund incompleto (Sigma) suplementado com 150 μg de Mycobacterium tuberculosis H37RA (Difco Laboratories). 400 ng de toxina pertussis (CalBiochem) foram injetados intraperitonealmente no dia de imunização e 2 dias depois. Classificação clínica e peso corporal foram verificados 3 vezes por semana. Sistema de classificação clínica: 0,5: fraqueza do rabo parcial; 1: rabo defeituoso ou marcha gingada com tonicidade do rabo; 1,5: marcha gingada com fraqueza parcial do rabo; 2: marcha gingada com rabo defeituoso (ataxia); 2.5: ataxia com paralisia parcial do rabo; 3: paralisia total de um membro; 3.5: paralisia total de um dos membros com paralisia parcial de um segundo membro; 4: paralisia total de dois membros; 4,5: moribundo; 5: morte. Classificação clínica média foi calculada avaliando os escores de todos os camundongos em cada grupo. Todos os procedimentos envolvendo os animais foram revistos e aprovados pelo Institutional Animal Care Use Committee.

[0415] Exemplo 681 da presente invenção foi testado no ensaio EAE de camundongo descrito aqui acima e os resultados são mostrados na Tabela F. Os compostos desta invenção, como exemplificado pelo Exemplo 681, no teste reportado, apresentaram inibição de progressão da doença quando medido por classificações clínicas em camundongos C57Bl/6 usando um regime de dosagem oral profilática. Tabela F

[0416] O Exemplo 679 da presente invenção foi testado no ensaio EAE de camundongo descrito aqui acima, e os resultados são mostrados na Tabela G. O composto desta invenção, como exemplificado pelo Exemplo 679, no teste reportado, apresentou inibição de progressão da doença quando medido por classificações clínicas em camundongos C57Bl/6 usando um regime de dosagem oral profilático. Tabela G

[0417] No modelo de encefalomielite autoimune experimental de camundongo (EAE), um modelo animal para esclerose múltipla, os Exemplos 679 e 681 inibem a progressão da doença como determinado pelas classificações clínicas em camundongos C57Bl/6 usando um regime de dosagem oral profilática.

Encefalomielite autoimune experimental de rato (EAE):

[0418] Ratos Lewis fêmeas (150-200 g; Harlan) foram imunizados na base do rabo com 0,1 ml de uma emulsão adjuvante de Freund completa contendo 0,5 mg/mL de proteína básica de mielina de cobaia (Genemed Synthesis) e 2 mg/mL de Mycobacterium butyricum (Difco). Começando no dia 7, ratos (n=11/grupo) foram classificados individualmente pelo menos 3X/semana, de acordo com o seguinte esquema:

[0419] Classificações clínicas médias foram calculadas para cada grupo de tratamento em cada dia de avaliação.

[0420] O Exemplo 679 da presente invenção foi testado em ensaio EAE de rato descrito aqui acima e os resultados são mostrados na Tabela H. O composto desta invenção, como exemplificado pelo Exemplo 679, no teste reportado, apresentou inibição da progressão da doença quando medido por classificações clínicas reduzidas no rato Lewis usando um regime de dosagem oral profilático. Tabela H

Modelo de lúpus MRL/lpr:

[0421] MRL/lpr é um modelo espontâneo de lúpus. Camundongos MRL/lpr machos (Jackson Laboratory) na idade de 12 a 14 semanas foram arrolados para o estudo (N=12). Os camundongos foram dosados p.o. diariamente com o veículo (18,4% (peso/volume) de hidroxipropil- b-ciclodextrina em ácido cítrico a 13,8 mM) ou com o Exemplo 681 a 0,06, 0,3, 1,5 mg/kg. Os camundongos foram sangrados a cada duas semanas para anticorpos anti-dsDNA medidos por ELISA usando soro agrupado de camundongos MRL/lpr doentes como um comparador positivo em cada ensaio. Os dados foram expressos em unidades arbitrárias como uma relação do título do soro teste para o título do soro imune agrupado de MRL/lpr.

[0422] Ao término do estudo, um rim foi coletado em formalina tamponada neutra a 10% e fixativos ZincTris. Tecidos fixados foram processados em blocos de parafina, seccionados a 3 μm, e manchados com H&E ou PASH. Secções do rim foram classificadas usando os seguintes critérios: Dano Glomerular: 1. Espessura da matriz mesangial, proliferação celular, 2. Formação crescente, moldes/depósitos celulares em espaço de Bowman, 3. Infiltração celular, células mononucleares em tufos glomerular, 4. Fibrose de cápsula de Bowman. Dano Tubular: 1. Infiltração de células mononucleares, 2. Severidade de dano tubular, 3. Moldes de proteína. Dano túbulo-intersticial: 1. Fibrose, 2. Infiltração de células mononucleares. Cada subcategoria foi designada um escore de 0-4, com os escores para índices glomerulares representando a média de 20 glomérulos por rim. O escore total para cada camundongo foi a soma das 9 subcategorias acima, com o maior escore possível = 36.

[0423] O exemplo 681 foi testado em modelo de lúpus de MRL/lpr descrito aqui acima, e os resultados são mostrados na Tabela I-1 para títulos de anticorpo anti-dsDNA e a Tabela I-2 para análise histológica do rim. Os compostos desta invenção, como exemplificado pelo exemplo 681, no teste reportado, apresentou inibição de progressão da doença quando medido por títulos anti-dsDNA e histologia do rim. Tabela I-1 Tabela I-2

[0424] Na Tabela J, os dados de atividade in vitro determinados por um ou mais dos seguintes ensaios: ensaio de ligação de S1P1, ensaios de ligação de receptor [35S] GTPyS (S1Pi GTPyS/S1Ps GTPyS), ou ensaio de fosforilação ERK de hS1P1 (S1P1 pERK) são mostrados para exemplos de fosfato representativos desta invenção. Tabela J

Claims (12)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula (Ic), (IIc), (IIIc), (IVc), ou (Vc): R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; X1 é CH2 ou O; X2 é CH2 ou O; X3 é CH2 ou O, desde que X2 seja O apenas se ambos X1 e X3 forem cada um CH2; R2 é R2a ou R2b; — representa ou uma ligação simples a R2a ou uma ligação dupla a R2b; R2a é -(CH2)3-6CH3, -(CH2)1-4CH=CRxRx, -(CH2)1-4CH=CRx(CH2CH3), -CH=CH(CH2)1-3C(Rx)3, -CH=CH(CH2)1-3OCH3, -(CH2)1-3CH=CHCH=CRxRx, -CH=CH(CH2)1-3CH=CRxRx, -CH=CHRz, -(CH2)1-3Rz, -(CH2)1-3O(CH2)0-3Rz, -(CH2)1-3S(CH2)0-3Rz, -CH2S(O)Rz, -CH2S(O)2Rz, -O(CH2)1-2Rz, -O(CH2)1-2O(CH2)0-2Rz, -OC(O)Rz, -(CH2)1-4O(CH2)0-9C(Rx)3, -(CH2)1-4O(CH2)0-9CF3, -(CH2)1-4CRxRxO(CH2)0-4C(Rx)3, -(CH2)1-3O(CH2)1-4CH=CRx(CH2)0-3CH3, -(CH2)1-3O(CH2)1-4CH=CRxRx, -(CH2)1-3O(CH2)1-4C(OH)RxRx, -(CH2)1-3O(CH2)1-4O(CH2)0-3CH3, -(CH2)1-3S(CH2)0-4C(Rx)3, -(CH2)0-3O(CH2)1-4S(CH2)0-3C(Rx)3, -(CH2)1-3S(CH2)1-4Si(CH3)3, -(CH2)1-3S(O)(CH2)0-4C(Rx)3, -(CH2)1-3S(O)2(CH2)0-4C(Rx)3, -(CH2)1-5NRxRx, -O(CH2)1-7C(Rx)3, -O(CH2)1-4O(CH2)0-4C(Rx)3, -O(CH2)1-4CH=CRx(CH2)0-3CH3, -O(CH2)1-4O(CH2)0-3C(Rx)3, -O(CH2)i-4θ(CH2)i-3CH=CRxRx, —O(CH2)i-4O(CH2)i-3C ^ CRx, -C(O)(CH2)0-4C(Rx)3, -OC(O)(CH2)0-4C(Rx)3, -OC(O)CRxRx(CH2)0-4C(Rx)3, -OC(O)NRx(CH2)0-5C(Rx)3, -NRxC(O)NRx(CH2)0-5C(Rx)3, -C(CH3)=N-O(CH2)0-5C(Rx)3, -C(CH3)=N-O(CH2)1-2(phenyl), -C(CH3)=N-O(CH2)1-2 (fluorofenila), -C(CH3)=N-OCH1-2(metóxifenila), fenila, ou piridinila; R2b é (i) um anel espiral de 6 membros tendo um átomo de oxigênio e substituído com zero ou 1 -(CH2)3CH3; ou (ii) =N-O-(CH2)3CH3, =N-O-CH2CH(CH3)2, =N- OCH2CH2(fenila), ou =N-O-CH2CH2CH2(fenila); Ra é H ou -OH; cada Rb é independentemente H ou -CH3; cada Rc é independentemente H, Cl, I, ou -CH3; cada Rx é independentemente H ou -CH3; e Rz é fenila, imidazolila, pirazolila, piridinila, pirimidinila, pirazinila, quinolinila, tiofenila, tiazolila, oxetanila, C3-6 cicloalquila, adamantanila, ou tetra-hidropiranila, cada um substituído por zero a 4 substituintes independentemente selecionados de F, Cl, I, C1-4 alquila, - O(C1-3 alquila), -CF3, -OCF3, -(CH2)1-6OCH3, -CH2NRxRx, -C(O)NRxRx, - C(O)NRx(C1-4 alquila), e -CH2C(O)NRxRx; desde que (i) se o referido composto apresenta a estrutura da Fórmula (Ic) e R2 é -(CH2)5CH3, então pelo menos um de Rb e Rc é diferente de H; e (ii) se o referido composto apresenta a estrutura da Fórmula (IIc) e X1, X2 e X3 são cada um CH2, então R2a é diferente de -(CH2)5CH3.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a estrutura (Ic) ou um sal do mesmo, em que: R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; R2 é R2a ou R2b; R2a é -(CH2)3CH3, -(CH2)5CH3, -CH2CH=CHCH2CH3, - CH2CH2CH=CHCH2CH3, -(CH2)3CH=CHCH3, -(CH2)3CH=C(CH3)2, - (CH2)4CH=CH2, -(CH2)4CH=CHCH3, -CH=CH(CH2)3CH3, - CH=CH(CH2)3OCH3, -CH=CHCH2CH2CH(CH3)2, - CH=CHCH2CH2CH2OCH3, -CH2CH=CHCH=CHCH3, - CH=CHCH2CH2CH=CH2, -CH=CH(fenila) em que a referida fenila é substituída por -CH3 ou -OCH3; -CH=CH(tetra-hidropiranila), -(CH2)1- 3(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 2 substituintes independentemente selecionados de F, I, -CH3, -OCH3, -OCH2CH3, - OCH(CH3)2, e -CH2C(O)N(CH3)2; -(CH2)2(metil imidazolila), -(CH2)2(metil pirazolila), -(CH2)1-2(piridinila) em que a referida piridinila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de -OCH3; -(CH2)2(pirimidinila), - (CH2)2(quinolinila), -(CH2)2-3(tetra-hidropiranila), -CH2O(CH2)3-4CH3, - CH2OCH2CH2CH(CH3)2, -CH2OCH2CH2C(CH3)3, -CH2O(CH2)9CH3, - CH2OCH2CH2CH2CF3, -CH2OCH2CH=CHCH2CH3, - CH2OCH2CH=C(CH3)2, -CH2OCH2CH=CHCH2CH2CH3, - CH2OCH2CH2CH=CH2, -CH2OCH2CH2CH2CH=CH2, - CH2OCH2CH2CH=C(CH3)2, -CH2OCH2CH2CH(OH)CH3, - CH2OCH2CH2CH2CH2OH, -CH2OCH2CH2CH2C(CH3)2(OH), - CH2OCH2CH2OCH3, -CH2OCH2CH2CH2OCH3, - CH2OCH2CH2OCH2CH2CH3, -CH2O(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 3 substituintes independentemente selecionados de F, Cl, -CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -OCH3, -OCF3, -(CH2)1-6OCH3, - C(O)N(CH3)2, -CH2N(CH3)2, -C(O)N(CH2CH3)(CH3), - C(O)N(CH3)(CH2CH2CH2CH3), e -C(O)N(CH3)(CH2CH(CH3)2); - CH2O(metóxi piridinila), -CH2O(tetra-hidropiranila), - CH2O(trifluorometila, metil pirazolila), -CH2OCH2(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de - CH3 e -OCH3; -CH2OCH2(metil pirazolila), -CH2OCH2(tetra- hidropiranila), -CH2OCH2(tiofenila), -CH2OCH2(trifluorometil tiofenila), - CH2OCH2(etil tiofenila), -CH2OCH2(dimetil tiofenila), -CH2CH2OCH2CH3, -CH2CH2OCH2CH(CH3)2, -CH2CH2O(metoxifenila), - CH2CH2OCH2(ciclopropila), -CH2CH2SCH(CH3)2, -(CH2)3OCH2CH3, - (CH2)3OCH(CH3)2, -(CH2)3OCH2CH2CH=CH2, -(CH2)3O(oxetanila), - (CH2)3O(tetrametil ciclo-hexila), -(CH2)3OCH2SCH3, -CH2S(CH2)2-4CH3, -CH2SCH(CH3)2, -CH2SCH2CH(CH3)2, -CH2SCH2C(CH3)3, - CH2SCH2CH2CH(CH3)2, -CH2SCH2CH2C(CH3)3, - CH2SCH2CH2Si(CH3)3, -CH2CH2S(CH2)1-2CH3, -CH2CH2SCH2CH(CH3)2, -CH2S(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 2 substituintes independentemente selecionados de -CH3, -CH(CH3)2, e - OCH3; -CH2S(adamantanila), -CH2S(piridinila), -CH2S(metil piridinila), - CH2SCH2CH2(fenila), -CH2SCH2CH2(pirazinila), - CH2SCH2CH2(piridinila), -CH2S(O)(CH2)3CH3, -CH2S(O)2(CH2)3CH3, - CH2S(O)(fenila), -CH2S(O)2(fenila), -(CH2)4OCH(CH3)2, - (CH2)4CH(CH3)OCH3, -(CH2)4C(CH3)2OCH3, -(CH2)5N(CH3)2, -O(CH2)4- 7CH3, -OCH2CH2O(CH2)2-4CH3, -OCH2CH2OCH2CH(CH3)2, - OCH2CH=CH(CH2)2-3CH3, -OCH2CH2OCH2CH=CH2, - OCH2CH2OCH2CH=CH(CH3), -OCH2CH2OCH2CH=C(CH3)2, - OCH2CH2OCH2CH2C ^ CH, -OCH2CH2O(CH2)2-3CH(CH3)2, - OCH2CH2S(CH2)2CH3, -OCH2(ciclo-hexila), -OCH2(tetra-hidropiranila), - OCH2(fenila) em que a referida fenila é substituída por zero a 1 substituinte selecionado de -CH3, -CH2CH3, -OCH3, -OCF3, e - OCH2CH3; -OCH2CH2O(ciclo-hexila), -OCH2CH2O(metil fenila), - OCH2CH2OCH2(ciclobutila), -OCH2CH2OCH2(fenila), - OCH2CH2OCH2(tiazolila), -OCH2CH2OCH2(tiofenila), -OC(O)(CH2)4CH3, -OC(O)C(CH3)2(CH2)3CH3, -OC(O)(fenila), -OC(O)NH(CH2)3CH3, - OC(O)NH(CH2)5CH3, -OC(O)N(CH3)(CH2)3CH3, - OC(O)N(CH3)(CH2)4CH3, -NHC(O)NH(CH2)3CH3, -C(CH3)=N- O(CH2)3CH3, -C(CH3)=N-OCH2(fenila), -C(CH3)=N-OCH2(fluorofenila), - C(CH3)=N-OCH2(metoxifenila), -C(CH3)=N-OCH2CH2(fenila), - OC(O)NH(CH2)3CH3, -OC(O)NH(CH2)5CH3, -OC(O)N(CH3)(CH2)3-4CH3, -NHC(O)NH(CH2)3CH3, fenila, ou piridinila; R2b é: (i) anel espiro de 6 membros tendo um átomo de oxigênio e substituído com zero ou 1 -(CH2)3CH3; ou (ii) =N-O-(CH2)3CH3, =N-O-CH2CH(CH3)2, =N- OCH2CH2(fenila), ou =N-O-CH2CH2CH2(fenila); Ra é H ou -OH; cada Rb é independentemente H ou -CH3; e cada Rc é independentemente H, Cl, I, ou -CH3.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a estrutura (IIc) ou um sal do mesmo, em que: R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; X1 é CH2 ou O; X2 é CH2 ou O; X3 é CH2 ou O; desde que X2 seja O, apenas se ambos X1 e X3 forem cada um CH2; e R2a é -(CH2)5-6CH3 ou -CH2O(CH2)3-4CH3.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta uma estrutura de Fórmula (IIIc), Fórmula (IVc), ou Fórmula (Vc) ou um sal do mesmo, em que: R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; R2 é R2a; R2a é -(CH2)3CH3, -(CH2)5CH3, -(CH2)3(fenila), ou - C(O)(CH2)4CH3; e cada Rb é -CH3.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a estrutura: ou um sal do mesmo; em que: R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2; e R2 é -(CH2)5CH3, -(CH2)3OCH2CH3, -CH2O(metoxifenila), ou -CH2CH2(metoxifenila).

6. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindi-cações 1 a 2 e 5, caracterizado pelo fato de que apresenta a estrutura: ou um sal do mesmo; em que: R1 é -OH ou -OP(O)(OH)2.

7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 2, 5 e 6, caracterizado pelo fato de que apresenta a estrutura: ou um sal do mesmo.

8. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 2, 5 e 6, caracterizado pelo fato de que apresenta a estrutura: ou um sal do mesmo.

9. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; e um veículo farmaceuticamente aceitável.

10. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindi-cação 9, caracterizado pelo fato de que R1 é -OH no composto ou um sal farmaceuticamente do mesmo.

11. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8 ou um sal farmaceuticamente do mesmo, caracterizado pelo fato de que ser para uso como medicamento.

12. Uso do composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que é para fabricação de um medicamento para o tratamento de uma doença ou distúrbio associado com a atividade de receptor S1P1 ligado à proteína G, em que a doença ou distúrbio é selecionado de transplante de órgãos ou tecido, doenças do enxerto versus hospedeiro realizado por transplante, síndromes autoimunes incluindo artrite reumatóide, artrite idiopática juvenil, lúpus eritematoso sistêmico, lúpus eritematoso cutâneo (lúpus eritematoso discoide, lúpus eritematoso subagudo) e nefrite por lúpus, tireoidite de Hashimoto, esclerose múltipla, miastenia grave, diabetes tipo I, uveíte, uveíte posterior, encefalomielite alérgica, glomerulonefrite, doenças autoimunes pós- infecciosa incluindo febre reumática e glomerulonefrite pós-infecciosa, doenças da pele inflamatórias e hiperproliferativas, psoríase, artrite psoriática, dermatite atópica, dermatite de contato, dermatite eczematosa, dermatite seborreica, líquen plano, pênfigo, penfigoide bolhoso, epidermólise bolhosa, urticária, angioedemas, vasculite incluindo vasculite associada a ANCA, arterite de célula gigante, Arterite de Takayasu, poliangiite microscópica, vasculite do sistema nervoso central, Síndrome Churg-Strauss, e vasculite reumatoide, eritema, eosinofilia cutânea, acne, alopécia em áreas, ceratoconjuntivite, conjuntivite vernal, uveíte associada com doença de Behcet, ceratite, ceratite herpética, córnea cônica, distrofia epitelial da córnea, leucoma corneal, pênfigo ocular, úlcera de Mooren, esclerite, oftalmopatia de Graves, síndrome Vogt-Koyanagi-Harada, sarcoidose, alergias de pólen, doença das vias aéreas obstrutiva reversível, asma brônquica, asma alérgica, asma intrínsica, asma extrínsica, asma por poeira, asma crônica ou inveterada, asma tardia e hipersensibilidade das vias aéreas, bronquite, úlceras gástricas, dano vascular causado por doenças isquêmicas e trombose, doenças intestinais isquêmicas, doenças do intestino inflamatórias, enterocolite necrozante, lesões intestinais associadas com queimaduras térmicas, doenças celíacas, proctite, gastroenterite eosinofílica, mastocitose, doença de Crohn, colite ulcerativa, enxaqueca, rinite, eczema, nefrite intersticial, síndrome de Goodpasture, síndrome urêmica hemolítica, nefropatia diabética, miosite múltipla, síndrome Guillain-Barre, doença de Meniere, polineurite, neurite múltipla, mononeurite, radiculopatia, hipertireoidismo, doença de Basedow, aplasia de célula vermelha pura, anemia aplástica, anemia hipoplástica, púrpura trombocitopênica idiopática, anemia hemolítica autoimune, agranulocitose, anemia perniciosa, anemia megaloblástica, aneritroplasia, osteoporose, sarcoidose, pulmão fibroide, pneumonia intersticial idiopática, dermatomiosite, leucoderma vulgar, ictiose vulgar, sensibilidade fotoalérgica, linfoma de célula T cutânea, arteriosclerose, aterosclerose, síncrome aortite, poliarterite nodosa, miocardose, escleroderma, granuloma de Wegener, síndrome de Sjogren, adipose, fascite eosinofílica, lesões de gengiva, periodôntio, osso alveolar, substância óssea do dente, glomerulonefrite, alopécia padrão masculino ou alopécia senil prevenindo epilação ou fornecendo germinação de cabelo e/ou promovendo geração de cabelo e crescimento de cabelo, distrofia muscular, pioderma e síndrome de Sezary, doença de Addison, dano de isquemia-reperfusão de órgãos, que ocorre na preservação, transplante ou doença isquêmica, choque de endotoxina, colite pseudomembranosa, colite causada por fármaco ou radiação, insuficiência renal aguda isquêmica, insuficiência renal crônica, toxinose causada por oxigênio ou fármacos no pulmão, câncer pulmonar, enfisema pulmonar, catarata, siderose, retinite pigmentosa, degeneração macular senil, cicatrização vítrea, queimadura alcalina da córnea, eritema multiforme de dermatite, dermatite bolhosa linear de IgA e dermatite de cimento, gingivite, periodontite, septicemia, pancreatite, doenças causadas por poluição ambiental, envelhecimento, carcinogênese, metástase de carcinoma e hipobaropatia, doença causada por liberação de histamina ou leucotrieno-C4, doença de Behcet, hepatite autoimune, cirrose biliar primária, colangite esclerosante, ressecção hepática parcial, necrose hepática aguda, necrose causada por toxina, hepatite viral, choque, ou anoxia, vírus da hepatite B, hepatite não A/não B, cirrose, cirrose alcoólica, insuficiência hepática, insuficiência hepática fulminante, insuficiência hepática de início tardio, "insuficiência hepática aguda-ou- crônica", aumento de efeito quimioterápico, infecção por citomegalovírus, infecção por HCMV, AIDS, câncer, demência senil, trauma, dor neuropática, infecção bacteriana, trombocitopenia, neuropatia IgA, glomerulonefrite mesangioproliferativa, doença relacionada com IgG4, espondilite ancilosante, e policondrite Policondrite recidivante.