BR112017001554B1 - Di-hidropirimidinonas bicíclicas substituídas, seu sal, composição farmacêutica que os compreende e seu uso como inibidores de atividade da elastase neutrófila - Google Patents

Abstract

Esta invenção refere-se às di-hidropirimidinonas bicíclicas substituídas de fórmula 1 1 e seu uso como inibidores de atividade da elastase neutrófila, composições farmacêuticas contendo os mesmos, e métodos de uso dos mesmos como agentes para o tratamento e/ou a prevenção de doenças pulmonares, gastrointestinais e genitourinárias, doenças inflamatórias da pele e dos olhos e outros distúrbios autoimunes e alérgicos, rejeição a aloenxerto, e doenças oncológicas

Description

[0001] Esta invenção refere-se às di-hidropirimidinonas bicíclicas substituídas de fórmula 1 e seu uso como inibidores de atividade da elastase neutrófila, composições farmacêuticas contendo as mesmas, e métodos de uso das mesmas como agentes para o tratamento e/ou prevenção de doenças pulmonares, gastrointestinais e genitourinárias, doenças inflamatórias da pele e dos olhos e outros distúrbios autoimunes e alérgicos, rejeição a aloenxerto, e doenças oncológicas.

Informação Antecedente

[0002] • As seguintes referências descrevem os inibidores de elastase neutrófila com um núcleo di-hidro-pirimidinona monocíclica: GB2392910, WO04024700, WO05082864, WO05082863, DE102006031314, US100010024, WO10115548, WO09080199, DE102007061766, WO06136857, WO06082412, WO12002502.

[0003] • As seguintes referências descrevem os inibidores de elastase neutrófila com núcleo tetra-hidropirrolopirimidinadiona bicícli- ca: WO07129060, WO08135537, US090093477, WO09013444, WO09060206, WO09060203, WO09060158, US110034433.

[0004] • As seguintes referências descrevem inibidores de elas tase neutrófila com estrururas núcleo diferentes daquelas descritas aqui anteriormente: WO04020412, WO04020410, WO03053930, WO10078953, WO09135599, DE102009004197, WO11110858, WO11110859, WO09060158, WO09037413, WO04024701, US130065913, WO13018804, WO12002502, US 2014/0171414, WO14009425, WO2014029831, WO2014029832 e WO2014029830, WO14122160, WO14135414.

[0005] • Para uma revisão sobre os vários inibidores de elastase neutrófila veja: P. Sjo (Future Med. Chem. 2012, 4, 651-660).

Breve Sumário da Invenção

[0006] Elastase neutrófila (NE) é uma serina protease de 29 kDa. Ela é expressa em células precursoras de medula óssea, armazenada nos grânulos de granulócitos de sangue periférico em concentrações elevadas e ela é liberada sob ativação celular. Aos substratos de NE pertencem os principais elementos da matriz extracelular (ECM): elas- tina, fibronectina, laminina, colágeno e proteoglicanos. A atividade da elastase neutrófila induz à degradação de ECM, aumenta a migração e quimotaxia de monócitos e células do músculo liso vascular e afeta diratemente os componentes da coagulação e séries de reação fibrino- líticas (PAI-1 e TFPI). A atividade aumentada de elastase neutrófila está associada com doenças inflamatórias crônicas e fibróticas de diversos órgãos. O potencial de inibidores de elastase neutrófila como terapias anti-inflamatórias foi revisado por P. A. Henriksen in Current Opinion in Hematology 2014, 21, 23-28. Inibidores de elastase neutró- fila, portanto, terão um papel importante para o tratamento de diferentes doenças como COPD, fibrose pulmonar idiopática e outras doenças fibróticas, câncer, lesão pulmonar aguda, síndrome da angústia respiratória aguda, bronquietasia, fibrose cística, deficiência de alfa 1- antitripsina e outros.

[0007] O problema da presente invenção é preparar novos compostos, que com base em sua eficácia farmacêutica como inibidores de atividade da elastase neutrófila, possam ser usados terapeutica- mente, isto é, para o tratamento de processos patofisiológicos causados por atividade aumentada de elastase neutrófila.

[0008] Surpreendentemente, descobriu-se que os compostos da presente invenção têm as seguintes propriedades que são vantajosas em vista das indicações da presente invenção.

[0009] Os compostos de acordo com a presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, são eficazes como inibidores de elastase neutrófila e exibem potência inibitória favorável, como determinado pela metade da concentração inibitória máxima (IC50), em um ensaio de inibição enzimática.

[0010] Alguns compostos de acordo com presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, são adicionalmente eficazes como inibidores de protease proteinase 3 de serina de neutrófilo e exibempotência inibitória favorável, como determinado pela metade da concentração inibitória máxima (IC50), em um ensaio de inibição enzi- mática. Esta atividade inibitória sobre uma segunda serina protease de neutrófilo pode ser benéfica quanto à eficácia farmacológica.

[0011] Alguns compostos de acordo com presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, exibem potência inibitória favorável, como determinado pela metade da concentração eficaz máxima (EC50), em um ensaio de plasma ou sangue completo, por exemplo, como descrito em T. Stevens et al. (J. Pharm. Exp. Ther. 2011, 339, 313-320).

[0012] Alguns compostos de acordo com presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, exibem potência in vivofavorável, como determinado, por exemplo, pela metade da dose eficaz máxima (ED50), em modelos de lesão pulmonar induzida por elastase neutrófila em camundongo ou rato, por exemplo, como descrito em Tremblay et al. (Chest 2002, 121, 582-588) ou T. Stevens et al. (J. Pharm. Exp. Ther. 2011, 339, 313-320).

[0013] Alguns compostos de acordo com presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, exibem estabilidade metabóli- ca favorável em um ensaio microssomal in vitro quanto à estabilidade metabólica como descrito em E. Kerns & L. Di (Drug-like properties: concepts, structure design and methods: from ADME to toxicity optimization, Elsevier, 1a edição, 2008), capítulo 29 e referências a este respeito.

[0014] Alguns compostos de acordo com presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, exibem estabilidade metabólica favorável em um ensaio de hepatócitos in vitro quanto à estabilidade metabólica como descrito em E. Kerns & L. Di (Drug-like properties: concepts, structure design ande methods: from ADME to toxicity optimization, Elsevier, 1a edição, 2008), capítulo 29 e referências a este respeito.

[0015] Uma estabilidade metabólica melhorada em um sistema de teste in vitro é esperada trasladar-se em uma clearance in vivo (CL) reduzida, por que a conversão metabólica no fígado é reduzida. Com base na equação farmacocinética CL/Foral = Dose / AUC (Foral: biodis- ponibilidade oral, AUC: área sob a curva), uma clearance in vivo é esperada induzir à exposição sistêmica normalizada por dose elevada (AUC) do fármaco.

[0016] Alguns compostos de acordo com presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, exibem permeabilidade favorável em um método de camada de célula Caco-2 in vitro quanto à permeabilidade como descrito em E. Kerns & L. Di (Drug-like properties: concepts, structure design and methods: from ADME to toxicity optimization, Elsevier, 1a edição, 2008), capítulo 26 e referências a este respeito. Para um fármaco oral, espera-se que a permeabilidade melhorada traslade-se em uma fração maior do fármaco absorvido no trato intestinal, desse modo, resultando em exposição sistêmica normalizada por dose elevada (AUC).

[0017] Alguns compostos de acordo com presente invenção, inclu- indo os sais fisiologicamente aceitáveis, exibem uma relação de efluxo favorável, isto é, baixo (permeabilidade na direção de efluxo dividida pela permeabilidade na direção de influxo) em um método de camada de célula Caco-2 ou MDCK in vitro como descrito em E. Kerns & L. Di (Drug-like properties: concepts, structure design and methods: from ADME to toxicity optimization, Elsevier, 1a edição, 2008), capítulo 26 e 27 e referências a este respeito. Para o fármaco oral, uma relação de efluxo melhorada, isto é, reduzida é esperada trasladar-se em uma fração maior do fármaco absorvido no trato intestinal, dese modo, resultando em exposição sistêmica normalizada por dose elevada (AUC).

[0018] Alguns compostos de acordo com presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, exibem solubilidade aquosa favorável em um método cinético ou termodinâmico como descrito em E. Kerns & L. Di (Drug-like properties: concepts, 15 structure design and methods: from ADME to toxicity optimization, Elsevier, 1a edição, 2008), capítulo 25 e referências a este respeito. Para o fármaco oral, solubilidade aquosa melhorada é esperada trasladar-se em uma fração maior do fármaco absorvido no trato intestinal resultando em exposição sistêmica normalizada por dose elevada (AUC) e/ou biodispo- nibilidade oral (Foral) e/ou concentração de plasma máxima após administração (Cmax). Além disso, espera-se que a solubilidade aquosa me-lhorada reduza o risco de desafios de desenvolvimento, tal como formulações caras, tempo de desenvolvimento aumentado, carga de fár- maco elevada.

[0019] Comparativamente, a exposição sistêmica normalizada por dose elevada (AUC) pode ser vantajosa de diversas maneiras: (1) Se uma certa exposição sistêmica (AUC) necessita ser obtida quanto à eficácia, o fármaco pode ser dosado em uma quantidade menor. Dosagens menores têm as vantagens de carga de fármaco menor (fár- maco origem e metabólitos dos mesmos) para um paciente causando potencialmente menos efeitos colaterais e custos de produção menores para o produto de fármaco. (2) Comparativamente, exposição sistêmica normalizada por dose elevada (AUC) pode induzir a eficácia aumentada ou duração prolongada de ação do fármaco quando a mesma dose é aplicada.

[0020] Alguns compostos de acordo com presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, exibem estabilidade metabólicafavorável, permeabilidade favorável e solubilidade aquosa favorável. Consequentemente, alguns compostos da presente invenção são esperados exibirem propriedades farmacocinéticas (PK) favoráveis após dosagem oral, em particular exposição sistêmica favorável (área sob a curva, AUC), desse modo, induzindo à eficácia favorável in vivo.

[0021] Alguns compostos de acordo com presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, exibem propriedades farma- cocinéticas (PK) favoráveis. As propriedades PK podem ser determinadas em espécies de animal pré-clínico, por exemplo, camundongo, rato, hamster, cachorro, cobaia, mini porco, macaco cinomolgo, macaco reso. As propriedades PK de um composto podem ser descritas, por exemplo, pelos seguintes parâmetros: Tempo de residência médio (MRT), meia vida de eliminação (t1/2), volume-de-distribuição (VD), área sob a curva (AUC), clearance (CL) e biodisponibilidade após administração oral (Foral), concentração de plasma máxima após adminitração (Cmax), tempo para alcançar a Cmax (Tmax).

[0022] Alguns compostos de acordo com presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, exibem inibição favorável, isto é, baixa inibição de citocromo P450 (CYP) em ensaios in vitrocorrespondentes para inibição de isoenzima de CYP como descrito em E. Kerns & L. Di (Drug-like properties: concepts, structure design and methods: from ADME to toxicity optimization, Elsevier, 1a edição, 2008), capítulo 32 e referências a este respeito. Inibição reduzida de isoenzi- mas de CYP é esperada trasladar-se em um risco reduzido quanto às interações de fármaco-fármaco indesejáveis que é a interferência de um fármaco com um comportamento metabólico ou farmacocinético normal de um fármaco coadministrado.

[0023] Alguns compostos de acordo com presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, exibem potencial indução favorável de Citocromo P450 (CYP), isto é, baixa. A indução de CYP pode afetar os farmacocinéticos de uma molécula de fármaco sob múltiplas dosagem, que pode resultar em interações de fármaco-fármaco farmacocinéticas indesejáveis com fármacos coadministrados. A indução de CYP pode induzir à exposição diminuída do composto de indução (por exemplo, autoindução) ou exposição diminuída de um composto coadministrado metabolizado pela enzima induzida. A indução de CYP pode também induzir a um aumento no metabolismo causandomudanças nos resultados farmacológicos (metabólitos ativos) e to- xicológicos (metabólitos tóxicos).

[0024] Alguns compostos de acordo com presente invenção, incluindo os sais fisiologicamente aceitáveis, exibem inibição favorável, isto é, baixa inibição do canal de hERG em um ensaio de grampo de emplastro como descrito em E. Kerns & L. Di (Drug-like properties: concepts, structure design and methods: from ADME to toxicity optimization, Elsevier, 1a edição, 2008), capítulo 34 e referências citadas a este respeito.

Descrição Detalhada da Invenção

[0025] Um composto de fórmula 1, em que R1é fenila, substituída com CN e substituída com um segundo substituinte R1.1 , R1.1é selecionado do grupo que consiste em -CH2OH, -CH(CH3)OH, -C(CH3)2OH, -SO2-CH2CH3, -SO2-CH3, -SO2- CH2CH2-OCH3, -SO2-CH2CH2-OH, -SO2-CH2CH2CH2-OH e -SO- CH2CH3, -SO-CH3, R2 é fenila ou piridila, cada anel substituído com R2.1, R2.1 é selecionado do grupo que consiste em CF3, CHF2, Br e Cl, R3 é selecionado do grupo que consiste em H, CH3, -CO-NH-CH3, -CO-NH-CH2CH3, -CH2CH2-OH, -CH2CH2CH2-OH, e -CH2-oxetano ou isômeros óticos e geométricos, solvatos, hidratos ou sais, preferi- velmente sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, contato que um composto de fórmula 1 não seja um com- posto selecionado do grupo que consiste em

Termos e Definições Usados

[0026] Aos termos não especificamente definidos aqui devem ser ser dados os significados que seriam dados a eles por alguém versado na técnica, à luz da invenção e do contexto. Como usado na especificação, entretanto, a menos que especificado ao contrário, os seguintes termos têm o significado indicado e as seguintes convenções são adotadas.

[0027] Nos grupos, radicais, ou porções definidas abaixo, o número de átomos de carbono é frequentamente especificado precedendo o grupo, por exemplo, C1-6-alquila significa um grupo alquila ou radical tendo de 1 a 6 átomos de carbono.

[0028] Em geral, em grupos simples como HO, H2N, S(O), S(O)2, NC (ciano), HOOC, F3C ou similares, o técnico versado pode observar o ponto(s) de ligação do radical ás moléculas das valências livres do próprio grupo. Para grupos combinados compreendendo dois ou mais subgrupos, o útimo subgrupo nomeado é o ponto de ligação do radical, por exemplo, o substituinte "aril-C1-3-alquil-" significa um grupo arila que é ligado a um grupo C1-3-alquila, o ultimo dos quais é ligado ao núcleo ou ao grupo ao qual o substituinte é ligado.

[0029] No caso, um composto da presente invenção é descrito na forma de um nome químico e como uma fórmula, em caso de qualquer discrepância a fórmula deve prevalecer. Um asterisco pode ser usado em subfórmulas para indicar a ligação que é conectada à molécula nú-cleo como definido.

[0030] Por exemplo, o termo "grupo 3-carboxipropila" representa o seguinte substituinte: em que o grupo carbóxi é ligado ao terceiro átomo de carbono do grupo propila. Os termos grupo "1-metilpropil-", "2,2-dimetilpropil-" ou "ci- clopropilmetil-" representa os seguintes grupos:

[0031] O asterisco pode ser usado em subfórmulas para indicar a ligação que está conectada à molécula núcleo como definido.

[0032] A maioria dos seguintes termos pode ser usada repetidamente na definição de uma fómula ou grupo e em cada caso tem um dos significados fornecidos acima, independentemente uns do outros.

[0033] O termo "substituído"como usado aqui significa que um ou mais hidrogênios no átomo designado é substituído com uma seleção do grupo indicado, contanto que a valência normal de átomo designadanão seja excedida, e que a substituição resulte em um composto estável.

[0034] As expressões "prevenção", "profilaxia", "tratamento profilático" ou "tratamento preventivo" usado aqui devem ser entendidas como sinônimos e no sentindo que o risco de desenvolver uma condição mencionada aqui anteriormente é reduzido, especialmente em um pa-ciente tendo risco elevado quanto às referidas condições ou uma anamnese correspondente, por exemplo risco elevado de desenvolver distúrbio metabólico tal como diabetes ou obesidade ou outro distúrbio mencionado aqui. Desse modo, a expressão "prevenção de uma do-ença"como usado aqui significa o controle e cuidado de um indivíduo em risco de desenvolver a doença antes do início clínico da doença. O propósito da prevenção é combater o desenvolvimento da doença, condição, ou distúrbio, e inclui a administração dos compostos ativos para impedir ou retardar o início dos sintomas ou complicações e impedir ou retardar o desenvolvimento de doenças, condições, ou distúrbios relacionados. O sucesso do tratamento preventivo é estatisticamente refletido pela incidência reduzida da referida condição dentro de uma população de paciente em risco quanto a esta condição em com-paração a uma população de paciente equivalente sem tratamento preventivo.

[0035] A expressão "tratamento" ou "terapia" significa tratamento terapêutico de pacientes que já desenvolveram uma ou mais das refe-ridascondições em forma visível, aguda ou crônica, incluindo trata-mentosintomático a fim de aliviar os sintomas da indicação específica ou tratamento casual a fim de reverter ou reverter parcialmente a condição ou retardar a progressão da indicação até o ponto em que isto pode ser possível, dependendo da condição e da gravidade da mesma. Desse modo, a expressão "tratamento de uma doença"como usado aqui significa o controle e cuidado de um paciente tendo desenvolvido a doença, condição ou distúrbio. O propósito de tratamento é combater a doença, condição ou distúrbio. O tratamento inclui a administração dos compostos ativos para eliminar ou controlar a doença, condição ou distúrbio, bem como aliviar os sintomas ou complicações associadas com a doença, condição ou distúrbio.

[0036] A menos que especificamente indicado, por toda a especificação e as reivindicações anexas, uma determinada fórmula química ou nome químico deve abranger tautômeros e todos os isômeros estéreos,óticos e geométricos (por exemplo, enantiômeros, diastereõme- ros, isômeros E/Z etc...) e racematos dos mesmos, bem como misturas em diferentes proporções dos enantiômeros separados, misturas de diastereômeros, ou misturas de qualquer uma das formas anteriores onde tais isômeros e enantiômeros existem, bem como sais, incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos e solvates dos mesmos tais como, por exemplo, hidratos incluindo solvatos dos compostos livres ou solvates de um sal do composto.

[0037] Todas as formas isoméricas (especialmente formas estere- oisoméricas, por exemplo, todas as formas quirais, enantioméricas, diastereoméricas e racêmicas, todas as formas tautoméricas e todas as formas geométricas) de um composto da presente invenção são pretendidas com esta invenção, a menos que o isômero específico é especificamente indicado. Obviamente, o isômero que é farmacologi- camente mais potente e/ou mais eficaz é preferido.

[0038] Será apreciado que os compostos da presente invenção contenham pelo menos um átomo de carbono assimetricamente subs-tituído e possam, portanto, ser isolado como enantiômeros puros ou como uma mistura racêmica ou não racêmica de ambos os enantiôme- ros. Será apreciado que alguns alguns dos compostos da presente invenção contenham mais do que um centro estereogênico, isto é, mais do que um átomo de carbono ou enxofre assimetricamente substituído e possam, portanto, ser isolados como diastereõmeros puros ou como misturas diastereoméricas, ambos em formas oticamente ativas ou ra- cêmicas.

[0039] A invenção contempla todos os estereoisômeros concebíveis, particularmente os diastereômeros e enatiômeros mencionados aqui, por exemplo, em forma substancialmente pura, em forma enriquecida (por exemplo, substancialmente livre de quaisquer ou todos os outros enantiômeros e/ou diastereômeros indesejáveis e/ou em qualquerrelação de mistura, incluindo as formas racêmicas, bem como os sais dos mesmos.

[0040] Em geral, estereoisômeros substancialmente puros podem ser obtidos de acordo com os princípios sintéticos conhecidos por uma pessoa versada no campo, por exemplo, por separação de misturas correspondentes, usando materiais de partida estereoquimicamente puro e/ou por síntese estereosseletiva. Sabe-se na técnica como preparar formas oticamente ativas, tal como por síntese, por exemplo, partindo de materiais de partida e/ou usando reagentes quirais.

[0041] Compostos enantiomericamente puros desta invenção ou intermediários podem ser preparados por meio de síntese assimétrica, por exemplo, por preparação e subsequente separação de compostos diastereoméricos apropriados ou intermediários que podem ser separados por métodos conhecidos (por exemplo, por separação cromato- gráfica ou cristalização) e/ou usando reagentes quirais, tais como materiais de partida quirais, catalisadores quirais ou auxiliares quirais.

[0042] Além disso, é conhecido pela pessoa versada na técnica como preparar compostos enantiomericamente puros das misturas ra- cêmicas correspondentes, tal como por separação cromatográfica das misturas racêmicas nas fases estacionárias correspondentes; ou por resolução de uma mistura racêmica usando um agente de resolução apropriado, por exemplo, por meio de formação de sal diastereomérica do composto racêmico com ácidos ou bases oticamente ativos, resolução subsequente dos sais e liberação do composto desejado do sal; ou por derivação dos compostos racêmicos correspondentes com reagentes auxiliares quirais oticamente ativos, separação diastereômero subsequente e remoção do grupo auxiliar quiral; ou por resolução cinética de um racemato (por exemplo, por resolução enzimática); por cristalização enantiosseletiva de um conglomerate de cristais enantiomor- fos sob condições adequadas; ou por cristalização (fracional) de um solvente adequado na presença de um auxiliar quiral oticamente ativo.

[0043] O termo halogênio geralmente significa flúor, cloro, bromo e iodo.

[0044] Como usado aqui o termo "profármaco"refere-se a (i) uma forma inativa de um fármaco que exerce seus efeitos após processos metabólicos dentro do corpo convertendo-a em uma forma usável ou ativa, ou (ii) uma substância que dá origem a um metabólito farmacologi- camente ativo, embora não ativo em si (isto é, um precursor inativo).

[0045] Os termos "profármaco"ou "derivado de profármaco" significam um derivado covalentemente ligado, veículo ou precursor do composto origem ou substância de fármaco ativo que passa por pelo menos alguma biotransformação antes de exibir seu efeito(s) farmaco-lógico.Tais profármacos têm grupos metabolicamente cliváveis ou de outro modo conversíveis e são rapidamente transformados in vivo para produzir o composto origem, por exemplo, por hidrólise no sangue ou por ativação por meio de oxidação como no caso de grupos tioéter. Profármacos mais comuns incluem ésteres e análogos de amida dos compostos origem. O profármaco é formulado com os objetivos de es-tabilidadequímica melhorada, aceitação e complascência de paciente melhoradas, biodisponibilidade melhorada, duração prolongada de ação, seletividade de órgão melhorada, formulação melhorada (por exemplo, hidrossolubilidade aumentada), e/ou efeitos colaterais diminuídos (por exemplo, toxicidade). Em geral, profármacos por si sós têm fraca atividade biológica ou nenhuma e são estáveis sob condições ordinárias. Profármacos podem ser facilmente preparados do dos compostos origem usando métodos conhecidos na técnica, tais como aqueles descritos em A Textbook of Drug Design and Development, Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard (eds.), Gordon & Breach, 1991, particularmente Capítulo 5: "Design and Applications of Prodrugs"; Design of Prodrugs, H. Bundgaard (ed.), Elsevier, 1985; Prodrugs: Topical and Ocular Drug Delivery, K.B. Sloan (ed.), Marcel Dekker, 1998; Methods in Enzymology, K. Widder et al. (eds.), Vol. 42, Academic Press, 1985, particularmente páginas 309 a 396; Burger’s Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5a Edição, M. Wolff (ed.), John Wiley & Sons, 1995, particularmente Volume 1 e páginas 172-178 e páginas 949-982; Pro-Drugs as Novel Delivery Systems, T. Higuchi e V. Stella (eds.), Am. Chem. Soc., 1975; Bioreversible Carriers in Drug Design, E.B. Roche (ed.), Elsevier, 1987, cada um dos quais é incorporado aqui por referência em suas totalidades.

[0046] O termo "profármaco farmaceuticamente aceitável"como usado aqui significa um profármaco de um composto da invenção que é, dentro do escopo do julgamento médico seguro, adequado para uso em contato com os tecidos de humanos e animais menores sem toxicidade indevida, irritação, resposta alérgica, e os similares, comensuráveiscom uma relação de risco/benefício razoável, e eficaz para seu uso pretendido, bem como formas zitteriônicas, onde possível.

[0047] A frase "farmaceuticamente aceitável"que é empregada aqui refere-se àqueles compostos, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que são, dentro do escopo do julgamento médico seguro, adequados para uso em contato com os tecidos de seres humanos e sem tocixidade excessiva, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação, e comensuráveis com uma relação de risco/benefício razoável.

[0048] Como usado aqui, "sais farmaceuticamente aceitáveis" refere-se aos derivados dos compostos descritos, em que o composto origem é modificado preparando os sais de ácido ou base dos mesmos. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, porém não estão limitados a sais de ácido minerais ou orgânicos de resíduos básicos tal como aminas; sais de álcali ou orgânicos de resíduos acídicos tal como ácidos carboxílicos; e similares. Por exemplo, tais sais incluem sais de amônia, L-arginina, betaína, benetamina, benzatina, hidróxido de cálcio, colina, deanol, dietanolamina (2,2’-iminobis(etanol)), dietila- mina, 2-(dietilamino)-etanol, 2-aminoetanol, etilenodiamina, N-etil- glucamina, hidrabamina, 1H-imidazol, lisina, hidróxido de magnésio, 4- (2-hidroxietil)-morfolina, piperazina, hidróxido de potássio, 1-(2-hidro- xietil)-pirrolidina, hidróxido de sódio, trietanolamina (2,2’,2"-nitrilotris- (etanol)), trometamina, hidróxido de zinco, ácido acético, ácido 2.2- dicloro-acético, ácido adípico, ácido algínico, ácido ascórbico, ácido L- aspártico, ácido benzenossulfônico, ácido benzoico, ácido 2,5-di- hidroxibenzoico, ácido 4-acetamido-benzoico, ácido (+)-canfórico, áci- do (+)-canfor-10-sulfônico, ácido carbônico, ácido cinâmico, ácido cítri-co,ácido ciclâmico, ácido decanoico, ácido dodecilsulfúrico, ácido eta- no-1,2-dissulfõnico, ácido etanossulfônico, ácido 2-hidróxi-etanos- sulfônico, ácido etilenodiaminatetra-acético, ácido fórmico, ácido fumá- rico, ácido galactárico, ácido gentísico, ácido D-gluco-heptoico, ácido D-glucônico, ácido D-glucurônico, ácido glutâmico, ácido glutárico, ácido2-oxo-glutárico, ácido glicerofosfórico, glicina, ácido glicólico, ácido hexanoico, ácido hipúrico, ácido hidrobrômico, ácido hidroclórico, ácido isobutírico, ácido DL-láctico, ácido lactobiônico, ácido láurico, lisina, ácido maléico, ácido (-)-L-málico, ácido malônico, ácido DL-mandélico, metanossulfônico, ácido galactárico, ácido naftaleno-1,5-dissulfônico, ácido naftaleno-2-sulfônico, ácido 1-hidróxi-2-naftoico, ácido nicotínico, ácido nítrico, ácido octanoico, ácido oléico, ácido orótico, ácido oxálico, ácido palmítico, ácido pamoico (ácido embônico), ácido fosfórico, ácido propiônico, ácido (-)-L-piroglutâmico, ácido salicílico, ácido 4-amino- salicílico, ácido sebácico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido sulfú- rico, ácido tânico, ácido (+)-L-tartárico, ácido tiociânico, ácido p- toluenossulfônico e ácido undecilênico. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados com cátions de metais como alumínio, cálcio, lítio, magnésio, potássio, sódio, zinco e similares. (Também veja, Pharmaceutical salts, Berge, S.M. et al., J. Pharm. Sci., (1977), 66, 1-19).

[0049] Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados do composto origem que contém uma porção básica ou acídica por métodos químicos convencionais. Geralmente, tais sais podem ser preparados reagindo-se as formas livres de ácido ou base destes compostos como uma quantidade suficiente da base ou ácido apropriado em água ou em um diluente orgânico como éter, acetato de etila, etanol, isopropanol, ou acetonitrila, ou uma mistura dos mesmos.

[0050] Sais de ácidos diferentes daqueles acima mencionados que, por exemplo, são úteis para purificação ou isolamento dos compostos da presente invenção (por exemplo, sais de trifluoro acetato) também compreendem uma parte da invenção.

[0051] Pelo termo "halo" adicionado a um grupo "alquila", "alquile- no" ou "cicloalquila" (saturado ou insaturado) entende-se um grupo alquila ou cicloalquila em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por um átomo de halogênio selecionado dentre flúor, cloro ou bromo, preferivelmente flúor e cloro, particularmente preferido é flúor. Exemplos incluem: H2FC-, HF2C-, F3C-.

[0052] A condição acima menicionada de que um composto de fórmula 1 não seja um composto selecionado do grupo acima mencionado significa especificamente que um composto de fórmula 1 não é um composto selecionado de um grupo consistindo em que são descritos no Pedido de Patente Europeia n° 13154256.5.

Modalidades

[0053] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R1 é fenila substituída com CN e substituída com um segundo substituinte R1.1 , R1.1 é selecionado do grupo que consiste em -CH2OH, -SO2-CH2CH3 , -SO2-CH2CH2-OH, -SO2- CH2CH2CH2-OH -SO-CH2CH3 e-SO-CH3, R2é fenila substituída com R2.1, R2.1é selecionado do grupo que consiste em CF3 e CHF2, R3é selecionado do grupo que consiste em H e CH3, ou um sal farmacêutico aceitável do mesmo.

[0054] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R1é fenila, substituída com CN e substituída com um segundo substituinte R1.1,, R1.1é -CH2OH, ou um sal farmacêutico aceitável do mesmo.

[0055] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, selecionado do grupo que consiste em compostos 1.a a 1.h.

[0056] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que a configuração de fórmula 1 é fórmula 1' ou um sal farmacêutico aceitável do mesmo.

[0057] São incorporados os compostos acima de fórmula 1', sele cionados do grupo que consiste em compostos 1.a'a 1.h' ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[0058] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R1.1é R1.1.a, e R1.1.aé selecionado do grupo que consiste em -CH2OH, - CH(CH3)OH, -C(CH3)2OH, -SO2-CH2CH3, -SO2-CH3, -SO2-CH2CH2- OCH3, -SO2-CH2CH2-OH, -SO2-CH2CH2CH2-OH, -SO-CH2CH3 e -SO- CH3 ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0059] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R1.1é R1.1.b, e R1.1.bé selecionado do grupo que consiste em -CH2OH, - CH(CH3)OH, -SO2-CH2CH2CH2-OH, -SO2-CH2CH2-OH, -SO2-CH2CH3, -SO2-CH3, -SO2-CH2CH2-OCH3, -SO-CH2CH3 e -SO-CH3 ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0060] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R1.1é R1.1.b, e R1.1.bé selecionado do grupo que consiste em -CH2OH, - CH(CH3)OH, -SO2-CH2CH2CH2-OH -SO2-CH2CH3, -SO2-CH3, -SO2- CH2CH2-OCH3, -SO-CH2CH3 e -SO-CH3 ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0061] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R1.1é R1.1.c, e R1.1.cé selecionado do grupo que consiste em -CH2OH, - SO2-CH2CH2CH2-OH, -SO2-CH2CH2-OH, -SO2-CH2CH3, -SO-CH2CH3 e -SO-CH3 ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0062] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R1.1é R1.1.c, e R1.1.cé selecionado do grupo que consiste em -CH2OH, - SO2-CH2CH2CH2-OH -SO2-CH2CH3, -SO-CH2CH3 e -SO-CH3 ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0063] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R2é R2.a, e R2.a é fenila ou piridila, cada anel substituído com R2.1, R2.1 é selecionado do grupo que consiste em CF3, CHF2, Br e Cl ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0064] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R2é R2.b, e R2.b é fenila, substituída com R2.1, R2.1 é selecionado do grupo que consiste em CF3 e CHF2 ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0065] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R2é R2.c, e R2.c é piridila substituída com R2.1, R2.1 é selecionado do grupo que consiste em CF3 e CHF2 ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0066] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R2.1é CF3 ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0067] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R2.1é CHF2 ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0068] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R3é R3.a e R3.a é selecionado do grupo que consiste em H, CH3, - CO-NH-CH3, -CO-NH-CH2CH3, -CH2CH2-OH, e -CH2CH2CH2-OH e - CH2-oxetano ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0069] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R3é R3.b e R3.b é selecionado do grupo que consiste em H, CH3, CO-NH-CH3, -CO-NH-CH2CH3, e -CH2CH2CH2-OH ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0070] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que R3é R3.c e R3.c é selecionado do grupo que consiste em H e CH3 ou um sal farmacêutico aceitável do mesmo.

[0071] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que os compostos são selecionados do grupo que consiste nos exemplos A.1A, A.2, A.3, B.1.2B, B.1.3A, C.1B, C.2A, C5.1, C.5.2, D.1A, D.3B, D.4.1A, D.4.4, D.4.5 e D.5A ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0072] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que os compostos são selecionados do grupo que consiste nos exem- plos A.2, A.3, B.1.2B, B.1.3A, C.1B, C.2A, C5.1, C.5.2, D.1A, D.3B, D.4.1A, D.4.4, D.4.5 e D.5A ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0073] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que os compostos são selecionados do grupo que consiste nos exemplos A.1A, A.3, B.1.2B, B.1.3A, C.1B, C.2A, C5.1, C.5.2, D.4.1A, D.4.5 e D.5A ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0074] São incorporados os compostos acima de fórmula 1, em que os compostos são selecionados do grupo que consiste nos exemplos A.3, B.1.2B, B.1.3A, C.1B, C.2A, C5.1, C.5.2, D.4.1A, D.4.5 e D.5A ou um sal farmacêutico aceitável dos mesmos.

[0075] Qualquer e cada uma das definições de R1, R1.1, R1.1.a, R1.1.b 1.1.c 2 2.a 2.b 2.c 2.1 3 3.a 3.b 3.c , R , R , R , R , R , R , R , R , R e R podem ser combinadas umas com as outras.

[0076] Outra modalidade da invenção é um composto acima de fórmula 1 para uso como um medicamento.

[0077] Uma outra modalidade da invenção é um composto acima de fórmula 1 para uso como um medicamento para o tratamento de asma e doenças alérgicas, doenças inflamatórias gastrointestinais, glomerulonefrite, doenças eosinofílicas, doença pulmonar obstrutiva crônica, infecção por micróbios patogênicos e artrite reumatoide.

[0078] Uma outra modalidade da invenção é um composto acima de fórmula 1 para uso como um medicamento para o tratamento de doenças neutrofílicas, fibrose cística (CF), fibrose não cística, fibrose pulmonar idiopática, bronquietasia, vasculite associada com ANCA, câncer pulmonar, bronquietasia por fibrose não cística, enfisema, bronquite crônica, lesão pulmonar aguda (ALI), síndrome da angústia respiratória aguda (ARDS), hipertensão pulmonar, hipertensão arterial pulmonar (PAH) e deficiência de alfa-1-antitripsina (AATD).

[0079] Uma outra modalidade da invenção é um composto acima de fórmula 1 para uso como um medicamento para o tratamento de obesidade e inflamação relacionada, resistência à insulina, diabetes, fígado adiposo e esteatose hepática.

[0080] Uma outra modalidade da presente invenção é um composto acima de fórmula 1, para uso como um medicamento para o tratamento de lesão cerebral traumática, aneurisma aórtica abdominal e doença do enxerto vs. hospedeiro (GvHD).

[0081] Uma outra modalidade da invenção é uma composição farmacêutica, contendo um ou mais dos compostos acima de fórmula 1 ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[0082] Uma outra modalidade da invenção é um método de tratamento ou prevenção de doenças em que os inibidores de elastase neutrófila têm um benefício terapêutico, cujo método compreende administração de uma quantidade terapêutica ou preventivamente de um composto de fórmula 1 acima a um paciente em necessidade da mesma.

[0083] Uma outra modalidade da invenção é uma composição farmacêutica compreendendo adicionalmente a um composto de fórmula1 acima, um composto farmaceuticamente ativo selecionado do grupo que consiste em betamiméticos, anticolinérgicos, corticosteroi- des, inibidores de PDE4, antagonistas de LTD4, inibidores de EGFR, inibidores de Catepsina C, inibidores de CRTH2, inibidores de 5-LO, antagonistas de receptor de histamina e inibidores de SYK, porém também combinações de duas ou três substâncias ativas.

Preparação

[0084] Os compostos de acordo com a presente invenção e seus intermediários podem ser obtidos usando métodos de síntese que são conhecidos por aquele versado na técnica e descritos na literatura de síntese orgânica. Preferivelmente, os compostos são obtidos em modelo análogo aos métodos de preparação explicados mais totalmente aqui a seguir, em particular como descrito na seção experimental. Em alguns casos, a ordem na realização das etapas de reação pode ser variada. Variantes dos métodos de reação que são conhecidas por al-guém versado na técnica, porém não descritas em detalhes aqui po-demtambém ser usadas. Os processos gerais para preparação dos compostos de acordo com a invenção tornar-se-ão evidentes para alguém versado na técnica estudando os seguintes esquemas. Os materiais de partida são comercialmente disponíveis ou podem ser preparados por métodos que são descritos na literatura ou aqui, ou podem ser preparados em de uma maneira análoga ou similar. Quaisquer grupos funcionais nos materiais ou intermediários podem ser protegidos usando grupos de proteção convencionais. Estes grupos de proteção podem ser clivados novamente em um estágio adequado dentro da sequência de reação usando métodos familiares para alguém versado na técnica.

[0085] Os compostos da invenção VI são acessíveis usando a ro-tinasintética ilustrada no esquema 1; RI, RE.1, RE.2têm os significados definidos aqui a seguir e aqui posteriormente. ESQUEMA 1

[0086] Os intermediários II (Etapa A, intermediário I ^ intermediárioII) podem ser preparados como descritos no Vovk et al. (Synlett 2006, 3, 375-378) ou no PL2004/369318, aquecendo-se um aldeído alifático ou aromático I com um carbamato, por exemplo, carbamato de metila, carbamato de etila (uretano) ou carbamato de benzila na presença de um ácido de Lewis ou de Br0nsted, por exemplo, ácido sulfú- rico, cloreto de hidrogênio, ácido p-toluenossulfônico, Amberlyst 15, ácido tetrafluorobórico, ácido trifluoroacético ou trifluoreto de boro, sem solvente como uma fusão ou em um solvente adequado, tais como benzeno, tolueno, acetonitrila, dietil éter, clorofórmio, anidrido acético ou misturas dos mesmos. A reação ocorre dentro de 1 a 24 horas. As temperaturas de reação preferidas são entre temperatura ambiente e 160°C, ou o ponto de ebulição do solvente, respecti vamente. Preferi-velmente, a reação é feita com carbamato de etila fundido como reagente e uma quantidade catalítica de ácido sulfúrico concentrada em temperaturas de 140 a 160°C sem qualquer solvente a dicional.

[0087] A cloração (Etapa B, intermediário II ^ intermediário III) pode ser feita como descrita no Vovk et al. (Synlett 2006, 3, 375-378) e Sinitsa et al. (J. Org. Chem. USSR 1978, 14, 1107) aquecendo-se intermediário II juntamente com um agente de cloração, por exemplo, pentacloreto fosforoso, cloreto de fosforila ou cloreto de sulfurila em um solvente orgânico, por exemplo, benzeno ou tolueno. A reação ocorre dentro de 1 a 24 horas. As temperaturas de reação preferidas são entre 50°C e 150°C.

[0088] Alternativamente, os intermediários III podem ser preparados como descritos no Jochims et al. (Chem. Ber. 1982, 115, 860-870) por a-halogenação de isocianatos alifáticos, por exemplo, isocianato de benzila, usando, por exemplo, um agente de bromação, por exemplo, N-bromossuccinimida. Os isocianatos podem ser sintetizados como descritos no US6207665 e no Charalambides et al. (Synth. Commun. 2007, 37, 1037-1044), reagindo-se um precursor de amina como fosgênio.

[0089] Os intermediários V (Etapa C, intermediário IV ^ intermediáriosV) podem ser preparados como descritos no Chen et al. (Synth. Commun. 2010, 40, 2506-2510) e Tietcheu et al. (J. Heterocyclic Chem. 2002, 39, 965-973) reagindo-se ciclopentano-1,3-diona (IV) e uma amina alifática ou aromática na presença de um catalisador, por exemplo, triflato de itérbio [Yb(OTf)3] ou um ácido, por exemplo, cloreto de hidrogênio, ácido acético ou ácido p-toluenossulfônico, opcionalmente em um solvente, por exemplo, água, ácido acético, acetonitrila, benzeno, tolueno. A reação ocorre dentro de 1 a 24 horas. As temperaturas de reação preferidas são entre temperatura ambiente e 120°C, a mais preferida é temperatura ambiente.

[0090] Alternativamente, os intermediários V podem ser preparados como descritos no Scott et al. (J. Med. Chem. 1993, 36, 19471955) por condensação direta do composto de 1,3-dicarbonila com uma amina alifática ou aromática sob refluxo em um solvente adequado, por exemplo, benzeno ou tolueno com remoção azeotrópica de água. Alternativamente, os intermediários V podem ser preparados como descritos no Mariano et al. (J. Org. Chem. 1984, 49, 220-228) reagindo-se uma amina alifática ou aromática com 3-cloro-2-ciclo- penten-1-ona, que pode ser preparada a partir de ciclopentano-1,3- diona.

[0091] Os compostos de acordo com a presente invenção (Etapa D, intermediários III ^ compostos da invenção VI) podem ser preparados como descritos no Vovk et al. (Synlett 2006, 3, 375-378), Vovk et al. (Russ. J. Org. Chem. 2010, 46, 709-715) e Kushnir et al. (Russ. J. Org. Chem. 2011, 47, 1727-1732) reagindo-se intermediários III com intermediários V em um solvente orgânico, por exemplo, diclorometa- no, clorofórmio, benzeno ou tolueno. A reação ocorre dentro de 1 a 24 horas. As temperaturas de reação preferidas são entre 0°C e 100°C.

[0092] Os compostos de acordo com a presente invenção VII são acessíveis por meio da rotina sintética representada no esquema 2; RE.1, RE.2, RE.3têm os significados como definidos aqui acima e aqui posteriormente. ESQUEMA 2

[0093] Os compostos da invenção VII (Etapa E, compostos da invençãoVI ^ compostos da invenção VII, RE'3 = alquila ou alquila substituída) podem ser preparados como descritos no WO04024700 reagindo-se compostos da invenção VI com um agente de alquilação, por exemplo, um sulfato de alquila, por exemplo, sulfato de dimetila, um haleto de alquila, por exemplo, iodeto de metila ou um sulfonilato de alquila, por exemplo, tosilato de benzila, na presença de uma base adequada, por exemplo, hidreto de sódio, hidróxido de sódio, carbonato de césio, di-isopropilamida de lítio, hexametildissilazida de potássio, hexametildissilazida de lítio, um reagente de organolítio, por exemplo, terc-butilítio ou um reagente de Grignard, por exemplo, isopropilmag- nesiocloreto, em um solvente orgânico, por exemplo, tetra-hidrofurano, N,N-dimetilformamida, acetonitrila, 1,4-dioxano, diclorometano ou tolu- eno. A reação ocorre dentro de 1 a 72 horas. As temperaturas de reação preferidas são entre 0°C e 100°C.

[0094] Os compostos de acordo com a presente invenção XIII são acessíveis por meio das rotinas sintéticas representadas no esquema 3; RIII, RIV, RE.1, RE.2 têm os significados como definidos aqui acima e aqui posteriormente. ESQUEMA 3

[0095] Os intermediários de carbamato de 4-nitrofenila XII (Etapa K, compostos da invenção VI ^ intermediários XII) podem ser preparados como descritos no WO09080199, reagindo-se compostos da invençãoVI com cloroformiato de 4-nitrofenila na presença de uma base, por exemplo, trietilamina, N,N-di-isopropiletilamina ou N-metil- morfolina, opcionalmente na presença de um catalisador, por exemplo, 4-dimetilaminopiridina, em um solvente orgânico, por exemplo, diclo- rometano, tetra-hidrofurano, acetonitrila ou N,N-dimetilformamida. A reação ocorre dentro de 1 a 24 horas. As temperaturas de reação preferidas são entre 0°C e 50°C, a mais preferida é te mperatura ambiente.

[0096] Os compostos da invenção XIII (Etapa L, intermediários de carbamato de 4-nitrofenila XII ^ compostos da invenção XIII) podem ser preparados como descritos no WO09080199, reagindo-se interme-diáriosXII com uma amina RIIINH2 ou RIIIRIVNH em um solvente orgânico, por exemplo, diclorometano, acetonitrila, tetra-hidrofurano, 1,4- dioxano, tolueno ou N,N-dimetilformamida. A reação ocorre dentro de 1 a 72 horas. As temperaturas de reação preferidas são entre 0°C e 50°C, a mais preferida é temperatura ambiente.

[0097] Além da rotina sintética representada no esquema 1, os compostos da invenção VI são também acessíveis usando a rotina sintética representada no esquema 4, RE.1, RE.2 têm os significados como definidos aqui acima e aqui posteriormente. ESQUEMA 4

[0098] Os intermediários XV (Etapa O, intermediário I ^ intermediário XV) podem ser preparados como descritos no Best et al. (J. Am. Chem. Soc. 2012, 134, 18193-18196) ou no Yang et al. (Org. Synth. 2009, 86, 11-17), reagindo-se um aldeído aromático I com um sulfinato adequado, por exemplo, ácido benzenossulfínico de sódio, e um car- bamato adequado, por exemplo, carbamato de metila ou carbamato de terc-butila, na presença de um ácido adequado, por exemplo, ácido fórmico, em um solvente adequado, por exemplo, tetra-hidrofurano, eta- nol, metanol ou uma mistura de solventes, por exemplo, tetra-hidrofurano e água. Alternativamente, como descrito no Reingruber et al. (Adv. Synth. Catal. 2009, 351, 1019-1024) ou no WO06136305, um ácido de Lewis adequado, por exemplo, cloreto de trimetilsilila, pode ser usado como ácido e acetonitrila ou tolueno pode ser usado como solvente. A reação ocorre dentro de 1 a 6 dias. As temperaturas de reação preferidas são entre 0°C e 50°C, a mais preferida é temperatura am biente.

[0099] Os intermediários XVI (Etapa P, intermediário XV ^ intermediário XVI) podem ser preparados em analogia ao método descrito para a preparação de compostos da invenção VI (Esquema 1, Etapa D, intermediário III ^ composto da invenção VI), reagindo-se intermediários XV com intermediários V na presença de uma base adequada, por exemplo, hidreto de sódio ou terc-butóxido de sódio, em um sol- vente orgânico adequado, por exemplo, tetra-hidrofurano ou 2-metil- tetra-hidrofurano. A reação ocorre dentro de 1 a 24 h. As temperaturas de reação preferidas são entre 0°C e 50°C, a mais p referida é temperatura ambiente.

[00100] Os intermediários XVII (Etapa Q, intermediário XVI ^ in-termediárioXVII) podem ser preparados reagindo-se intermediários XVI com um ácido adequado, por exemplo, cloreto de hidrogênio, em um solvente adequado, por exemplo, 1,4-dioxano. A reação ocorre entre 1 a 72 horas. As temperaturas de reação preferidas são entre 0°C e temperatura ambiente, a mais preferida é temperatura ambiente.

[00101] Os compostos da invenção VI (Etapa R, intermediário XVII ^ composto da invenção VI) podem ser preparados como descritos no Csütõrtõki et al. (Tetrahedron Lett. 2011, 67, 8564-8571) ou no WO11042145, reagindo-se intermediários XVII com um reagente ade-quado, por exemplo, fosgênio, trifosgênio ou carbonil di-imidazol, na presença de uma base adequada, por exemplo, trietilamina, N,N-di- isopropiletilamina, piridina ou carbonato de sódio, em um solvente adequado, por exemplo, acetonitrila, diclorometano ou tolueno. A reação ocorre entre 1 a 72 horas. As temperaturas de reação preferidas são entre 0°C e 50°C, a mais preferida é temperatur a ambiente.

[00102] Os compostos da invenção XX são acessíveis por meio das rotinas sintéticas representadas no esquema 5; RV, RE.2, RE.3 têm os significados como definidos aqui acima e aqui posteriormente. ESQUEMA 5

[00103] Os intermediários XIX (Etapa S, compostos XVIII ^ com-postosXIX, RE.3 = H ou alquila) podem ser preparados reagindo-se intermediários de flúor XVIII com um tiol RV-SH na presença de uma base adequada, por exemplo, hidreto de sódio, hidróxido de sódio, carbonato de césio, di-isopropilamida de lítio, hexametildissilazida de potássio, hexametildissilazida de lítio, um reagente de organolítio, por exemplo, terc-butilítio ou um reagente de Grignard, por exemplo, iso- propilmagnesiocloreto, em um solvente orgânico, por exemplo, N,N-dimetilformamida, tetra-hidrofurano, acetonitrila, 1,4-dioxano, di- clorometano ou tolueno. A reação ocorre dentro de 1 a 72 horas. As temperaturas de reação preferidas são entre 0°C e 1 00°C.

[00104] Os compostos da invenção XX podem ser preparados por oxidação de intermediários de sulfeto XIX (Etapa T, intermediários XIX ^ compostos da invenção XX, RE'3 = H ou alquila) com um agente de oxidação, por exemplo, peróxido de hidrogênio, ácido 3-cloro- perbenzoico, ácido periódico, periodato de sódio, permanganato de potássio, aduzudio de peróxido de ureia-hidrogênio, opcionalmente na presença de um catalisador de metal, em um solvente adequado, por exemplo, diclorometano, clorofórmio, metanol, etanol, água ou misturas dos mesmos. A reação ocorre dentro de 1 a 72 h. As temperaturas de reação preferidas são entre temperatura ambiente e o ponto de ebulição do solvente empregado.

[00105] Os compostos da invenção transportando grupos sulfóxido podem ser preparados por oxidação dos intermediários correspondentes de sulfeto com um agente de oxidação, por exemplo, peróxido de hidrogênio, ácido 3-cloro-perbenzoico, ácido periódico, periodato de sódio, hidroperóxido de terc-butila, aduzudio de peróxido de ureia- hidrogênio, opcionalmente na presença de um catalisador de metal, por exemplo, metiltrioxortênio, FeCl3, Sc(OTf)3, complexos de titânio (IV), em um solvente adequado, por exemplo, diclorometano, clorofór- mio, metanol, etanol, água ou misturas dos mesmos. A reação ocorre dentro de 1 a 72 h. As temperaturas de reação preferidas são entre temperatura ambiente e o ponto de ebulição do solvente empregado.

OBSERVAÇÕES PRELIMINARES

[00106] O termo temperatura ambiente indica uma temperatura de cerca de 20°C. Como regra, os espectros de 1H NMR e/ou espectros de massa foram obtidos dos compostos preparados. Os tempos de retenção fornecidos são medidos sob as seguintes condições (TFA: ácido trifluoroacético, DEA: dietilamina, scCO2: dióxido de carbono su- percrítico):

SÍNTESES DE MATERIAIS DE PARTIDA

[00107] O material de partida seguinte é preparado como descrito na literature citada: 3-(3-(trifluorometil)fenilamino)ciclopent-2-enona: Aust. J. Chem. 2005, 58, 870-876. SÍNTESE DE INTERMEDIÁRIOS INTERMEDIÁRIO A.1 Terc-butil éster de ácido {(2-bromo-4-ciano-fenil)- [5-oxo-2-(3-triflu- orometil-fenilamino)-ciclopent-1-enil]-metil}-carbâmico Etapa 1: Terc-butil éster de ácido [benzenossulfonil-(2-bromo-4-ciano-fenil) -metil]-carbâmico

[00108] Ácido fórmico (3,9 mL, 104 mmol) é adicionado a uma mistura de carbamato de terc-butila (1,90 g, 16,2 mmol), 2-bromo-4- cianobenzaldeído (CAS# 89891-69-0, 3,41 g, 16,2 mmol) e benzenos- sulfinato de sódio (2,67 g, 16,2 mmol) em uma mistura de THF (7,0 mL) e água (60 mL) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante 6 dias. Água (180 mL) é adicionada e o precipitado é filtrado e lavado com água. O precipitado é tratado com metil éter de terc-butila (30 mL), e a mistura é agitada durante 30 minutos. O precipitado é filtrado, lavado com metil éter de terc-butila e secado. Rendimento: 3,35 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 451 (padrão de isótopo de bromo); Tempo de retenção em HPLC: 0,66 min (X012_S01). Etapa 2: Terc-butil éster de ácido {(2-bromo-4-ciano-fenil)- [5-oxo-2-(3-triflu- orometil-fenilamino)-ciclopent-1-enil]-metil}-carbâmico

[00109] Hidreto de sódio (60% em óleo mineral, 360 mg, 9,00 mmol) é adicionado em pequenas porções a uma mistura de 3-(3- (trifluorometil)fenilamino)ciclopent-2-enona (2,16 g, 8,96 mmol) e 2- metiltetra-hidrofurano (30 mL). Após 30 minutos, terc-butil éster de ácido [benzenossulfonil-(2-bromo-4-ciano-fenil)-metil]-carbâmico (Etapa 1, 3,35 g, 7,43 mmol) é adicionado e a mistura é agitada em temperatura ambi-ente durante 2 horas. Água é adicionada e as fases são separadas. A fase aquosa é extraída com acetato de etila e as fases orgânicas combi-nadas são lavadas com água, secadas sobre MgSO4 e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo é tratado com metil éter de terc-butila e a mistura é agitada durante 15 minutos. O precipitado é filtrado, lavado com metil éter de terc-butila e secado. Rendimento: 3,18 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 550 (padrão de isótopo de bromo); Tempo de retenção em HPLC: 0,73 minuto (X012_S01). INTERMEDIÁRIO A.2 Cloridrato de 4-{amino- [5-oxo-2-(3-trifluorometil-fenilamino)-ciclo- pent-1-enil]-metil}-3-bromo-benzonitrila

[00110] Uma solução de cloreto de hidrogênio em 1,4-dioxano (4 M, 15,2 mL, 61 mmol) é adicionado a uma mistura de terc-butil éster de ácido {(2-bromo-4-ciano-fenil)- [5-oxo-2-(3-trifluorometil-fenilamino)- ciclopent-1-enil]-metil}-carbâmico (INTERMEDIÁRIO A.1, 6,71 g, 12,2 mmol) em 1,4-dioxano (30 mL). A mistura é agitada em temperatura ambiente durante 2 horas e, em seguida, resfriada em um banho de gelo. O precipitado é filtrado, lavado com acetonitrila fria e dietil éter e secado. Rendimento: 5,90 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 450 (padrão de isótopo de bromo); Tempo de retenção em HPLC: 1,17 min (V011_S01). INTERMEDIÁRIO A.3 3-bromo-4- [2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro- 1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila

[00111] Trietilamina (4,11 mL, 29,3 mmol) é adicionado a uma mistura de cloridrato de 4-{amino- [5-oxo-2-(3-trifluorometil-fenilamino)- ciclopent-1-enil]-metil}-3-bromo-benzonitrila (INTERMEDIÁRIO A.2, 28,5 g, 58,6 mmol) e 1,1’-carbonildi-imidazol (11,9 g, 73,2 mmol) em acetonitrila (290 mL) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante a noite. A água (1,5 L) é adicionada e o precipitado é filtrado, lavado com água e secado. Rendimento: 24,5 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 476 (padrão de isótopo de bromo); Tempo de retenção em HPLC: 1,11 minuto (V011_S01). INTERMEDIÁRIO A.4 3-bromo-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa -hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila

[00112] O metiliodeto (3,61 mL, 58,0 mmol) é adicionado a uma mistura de 3-bromo-4-(2,5-dioxo-1-(3-(trifluorometil)fenil)-2,3,4,5,6,7- hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il)benzonitrila (INTERMEDIÁRIO A.3, 23,0 g, 48,3 mmol) e carbonato de césio (20,5 g, 62,8 mmol) em DMF (230 mL) e a mistura reacional é agitada em temperatura ambiente durante a noite. Água e acetato de etila são adicionados e as fases são separadas. A fase orgânica é lavada com água, secada sobre MgSO4 e concentrada. Rendimento: 24,0 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 490 (padrão de isótopo de bromo); Tempo de retenção em HPLC: 1,18 minutos (V011_S01). INTERMEDIÁRIO A.5 Metil éster de ácido 5-ciano-2- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil- fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzoico

[00113] Uma solução de 3-bromo-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluoro- metil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzoni- trila (INTERMEDIÁRIO A.4, 11,85 g, 24,2 mmol), 1,1-bis(difenilphos- phino)-ferroceno (1,34 g, 2,42 mmol), acetato de paládio (0,27 g, 1,21 mmol) e acetato de sódio (5,95 g, 72,5 mmol) é tratada com monóxido de carbono a 5 bar e 100°C durante 40 h. Após a evaporação dos voláteis sob pressão reduzida, água e acetato de etila são adicionados e as fases são separadas. A fase orgânica é secada sobre MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo é purificado por croma- tografia rápida em sílica (cicloexano/acetato de etila 1:1). Rendimento: 8,0 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 470; Tempo de retenção em HPLC: 1,15 minuto (V011_S01). INTERMEDIÁRIO A.6 Ácido 5-ciano-2- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5, 6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzoico

[00114] Uma mistura de metil éster de ácido 5-ciano-2- [3-metil-2,5- dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapiri- midin-4-il]-benzoico (INTERMEDIÁRIO A.5, 6,70 g, 14,3 mmol) e hidróxido de lítio (1,03 g, 42,8 mmol) em 1,4-dioxano (135 ml) e água (67,0 mL) é agitada em temperatura ambiente durante 90 minutos. A água (250 mL) e ácido hidroclórico (1,0 M, 44 mL) são adicionados e a mistura reacional é extraída com acetato de etila. A fase orgânica é lavada com água, secada sobre MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida. Rendimento: 6,2 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 456; Tempo de retenção em HPLC: 0,63 minuto (X012_S01). INTERMEDIÁRIO A.7 3-formil-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7- hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila

[00115] Periodinano de Dess-Martin (2,36 g; 5,57 mmol) é adicionado a uma solução de 3-hidroximetil-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil- fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila (EXEMPLO A.1; 2,05 g; 4,644 mmol) em diclorometano (100 mL) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante 90 minutos. A mistura reacional é aquecida com uma mistura de 10% de solução de tiossulfato de sódio (50 mL) e solução de NaHCO3 saturada (50 mL) e as fases são separadas. A camada aquosa é extraída com diclorome- tano. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com água, secadas sobre MgSO4 e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo é purificado por cromatografia rápida em sílica (diclorometano/ metanol 98:2). Rendimento: 510 mg; Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 440; Tempo de retenção em HPLC: 0,63 minuto (X012_S02). INTERMEDIÁRIO B.1 Terc-butil éster de ácido {(4-ciano-2-fluoro-fenil)- [5-oxo-2-(3-triflu- orometil-fenilamino)-ciclopent-1-enil]-metil}-carbâmico

[00116] O INTERMEDIÁRIO B.1 é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO A.1, substituindo 2-bromo-4- cianobenzaldeído por 3-fluoro-4-formil-benzonitrila (CAS# 105942-107) como material de partida. A purificação do material cru é feita por HPLC de fase reversa (Waters SunFireTM-C18, gradiente de acetonitrila em água, 0,1 % de ácido fórmico). Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 490; Tempo de retenção em HPLC: 1,13 minuto (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO B.2 cloridrato de 4-{amino- [5-oxo-2-(3-trifluorometil-fenilamino)-ciclo- pent-1-enil]-metil}-3-fluoro-benzonitrila

[00117] O INTERMEDIÁRIO B.2 é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO A.2, substituindo INTERMEDIÁRIO A.1 por INTERMEDIÁRIO B.1 como material de partida. Espectro de massa por ESI: [M+H-NH3]+ = 373; Tempo de retenção em HPLC: 0,81 minuto (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO B.3 4- [2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclo- pentapirimidin-4-il]-3-fluoro-benzonitrila

[00118] O INTERMEDIÁRIO B.3 é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO A.3, substituindo INTERMEDIÁRIO A.2 por INTERMEDIÁRIO B.2 como material de partida. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 416; Tempo de retenção em HPLC: 0,97 minuto (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO B.4 4- [2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-3-(3-hidróxi-propilsulfanil)-benzonitrila

[00119] A uma mistura de hidreto de sódio (55% em óleo mineral, 32 mg, 0,73 mmol) em DMF (0,30 mL) é adicionado a 0°C 3-mercapto- 1-propanol (55 µL, 0,64 mmol) e a mistura é agitada a 0°C durante 25 minutos. Uma solução de 4- [2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5, 6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-fluoro-benzonitrila (IN TERMEDIÁRIO B.3, 110 mg, 0,21 mmol) em DMF (0,30 mL) é adicio- nada e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante 2,5 horas. A mistura reacional é aquecida com água, acidificada com ácido acético diluído e purificada por HPLC de fase reversa (Waters SunFi- reTM-C18, gradiente de acetonitrila em água, 0,1 % de TFA). Rendimento: 13 mg. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 488; Tempo de retenção em HPLC: 0,93 min (Z018_S04).

[00120] O INTERMEDIÁRIO B.4.1 seguinte é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO B.4, substituindo 3- mercapto-1-propanol por 2-metóxi-etanotiol como material de partida. 3-fluoro-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7- hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila

[00121] O INTERMEDIÁRIO B.5 é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO A.4, substituindo INTERMEDIÁRIO A.3 por INTERMEDIÁRIO B.3. A mistura reacional é purificada por HPLC de fase reversa (Agilent ZORBAXTM SB-C18, gradiente de ace- tonitrila em água, 0,1 % de TFA). O espectro de massa por ESI [M+H]+ = 430; Tempo de retenção em HPLC: 1,02 minuto (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO B.6 3-(2-hidróxi-etilsulfanil)-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil- fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]- benzonitrila

[00122] INTERMEDIÁRIO B.6 é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO B.4, substituindo INTERMEDIÁRIO B.3 por INTERMEDIÁRIO B.5 e 3-mercapto-1-propanol com 2- mercaptoetanol como material de partidas, respectivamente. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 488; Tempo de retenção em HPLC: 0,97 minuto (Z018_S04).

[00123] Os INTERMEDIÁRIOS seguintes B.6.1 e B.6.2 são preparados em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO B.6, empregando o tiol apropriado como material de partida, respectiva-mente. 4-formil-3-metilsulfanil-benzonitrila

[00124] Carbonato de potássio (3,8 g; 27,2 mmol) é adicionado a uma mistura de 3-fluoro-4-formil-benzonitrila (2,0 g; 13,4 mmol) e tio- metanolato de sódio (1,175 g; 16,77 mmol) em DMF (10 mL) e a mistu- ra é agitada a 120°C durante 2 h. A mistura reacion al é resfriada com um banho de gelo. Água é adicionada e o precipitado é filtrado, lavado com água e secado. Rendimento: 1,98 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 178; Tempo de retenção em HPLC: 0,73 minuto (Z011_S03). INTERMEDIÁRIO C.2 3-etilsulfanil-4-formil-benzonitrila

[00125] O INTERMEDIÁRIO C.2 é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO C.1, substituindo tiometanolato de sódio por tioetanolato de sódio (temperatura de reação 50°C). Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 192; Tempo de retenção em HPLC: 0,81 minuto (Z011_S03). INTERMEDIÁRIO C.3 Terc-butil éster de ácido {(4-ciano-2-metilsulfanil-fenil)- [5-oxo-2-(3- trifluorometil-fenilamino)-ciclopent-1-enil]-metil}-carbâmico

[00126] O INTERMEDIÁRIO C.3 é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO A.1, substituindo 2-bromo-4- cianobenzaldeído por 4-formil-3-metilsulfanil-benzonitrila (INTERME- DIÁRIO C.1). Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 518; Tempo de retenção em HPLC: 1,14 min (Z017_S04). INTERMEDIÁRIO C.4

[00127] O INTERMEDIÁRIO C.4 é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO A.1, substituindo 2-bromo-4- cianobenzaldeído por 3-etilsulfanil-4-formil-benzonitrila (INTERMEDI- ÁRIO C.2). Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 532; Tempo de retenção em HPLC: 1,19 minuto (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO C.5Cloridrato de 4-{amino- [5-oxo-2-(3-trifluorometil-fenilamino)- ciclopent-1-enil]-metil}-3-metilsulfanil-benzonitrila

[00128] Uma solução de cloreto de hidrogênio em 1,4-dioxano (4 M, 5 mL, 20 mmol) é adicionada a uma mistura de terc-butil éster de ácido {(4-ciano-2-metilsulfanil-fenil)- [5-oxo-2-(3-trifluorometil-fenilamino)- ciclopent-1-enil]-metil}-carbâmico (INTERMEDIÁRIO C.3, 4,3 g, pureza de 80%, 6,7 mmol) em acetonitrila (10 mL) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante 2 h. O precipitado é filtrado, lavado com acetonitrila fria e secado. Rendimento: 4,14 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 418; Tempo de retenção em HPLC: 0,90 minuto (Z011_S03). INTERMEDIÁRIO C.6 Cloridrato de 4-{amino- [5-oxo-2-(3-trifluorometil-fenilamino)- ciclopent-1-enil]-metil}-3-etilsulfanil-benzonitrila

[00129] O INTERMEDIÁRIO C.6 é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO C.5, substituindo INTERMEDIÁRIO C.3 por INTERMEDIÁRIO C.4. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 432; Tempo de retenção em HPLC: 0,94 minuto (Z011_S03). INTERMEDIÁRIO C.7 4- [2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-3-metilsulfanil-benzonitrila

[00130] Trietilamina (95 µL, 0,68 mmol) é adicionada a uma mistura de cloridrato de 4-{amino- [5-oxo-2-(3-trifluorometil-fenilamino)- ciclopent-1-enil]-metil}-3-metilsulfanil-benzonitrila (INTERMEDIÁRIO C.5, 570 mg, 1,13 mmol com base na 90% em pureza) e 1,1’-carbonil- di-imidazol (220 mg, 1,36 mmol) em acetonitrila (3 mL) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura reacional é concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo é tratado com água. O precipitado é filtrado, lavado com água e secado. Rendimento: 460 mg; Espectro de massa por ESI: [M+ H]+ = 444; Tempo de retenção em HPLC: 0,98 min (Z017_S04). INTERMEDIÁRIO C.8 4- [2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-3-etilsulfanil-benzonitrila

[00131] O INTERMEDIÁRIO C.8 é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO C.7, substituindo INTERMEDIÁRIO C.5 por INTERMEDIÁRIO C.6. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 458; Tempo de retenção em HPLC: 1,03 minuto (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO C.9 4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro- 1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-metilsulfanil-benzonitrila

[00132] O metiliodeto (834 µL, 13,4 mmol) é adicionado a uma mistura de 4- [2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-3-metilsulfanil-benzonitrila (INTERMEDIÁRIO C.7; 1,981 g; 4,467 mmol) e carbonato de césio (2,911 g, 8,935 mmol) em DMF (5 mL) e a mistura reacional é agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura é purificada por HPLC de fase reversa (Stablebond, gradiente de acetonitrila em água, 0,1 % de TFA). Ren-dimento: 1,145 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 458; Tempo de retenção em HPLC: 1,03 minuto (Z017_S04). INTERMEDIÁRIO C.10 4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro- 1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-etilsulfanil-benzonitrila

[00133] O INTERMEDIÁRIO C.10 é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO C.9, substituindo INTERMEDIÁRIO C.7 por INTERMEDIÁRIO C.8. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 472; Tempo de retenção em HPLC: 1,09 minuto (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO C.11.1 E INTERMEDIÁRIO C.11.2 3-metanossulfinil-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)- 2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila

[00134] Ácido 3-cloroperoxibenzoico (77%, 46 mg, 0,203 mmol) é adicionado em temperatura ambiente a uma solução de 4- [3-metil-2,5- dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-3-metilsulfanil-benzonitrila (INTERMEDIÁRIO C.9, 93 mg, 0,203 mmol) em diclorometano (5 mL), e a mistura é agitada durante 20 minutos. A mistura reacional é concentrada sob pressão reduzida e purificada por HPLC de fase reversa (Sunfire, gradiente de acetonitrila em água, 0,1 % de TFA) produzindo os dois diastereô- meros. INTERMEDIÁRIO C.11.1: Rendimento: 46 mg; Espectro de massa por ESI [M+H]+ = 474; Tempo de retenção em HPLC: 0,94 minuto (eluição precoce de diastereôme- ro) (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO C.11.2: Rendimento: 46 mg; Espectro de massa por ESI [M+H]+ = 474; Tempo de retenção em HPLC: 0,96 minuto (eluição tardia de diastereômero) (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO C.12.1 E INTERMEDIÁRIO C.12.2 4- [2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-3-metanossulfinil-benzonitrila

[00135] Ácido 3-cloroperoxibenzoico (77%, 51 mg, 0,226 mmol) é adicionado em temperatura ambiente a uma solução de 4- [2,5-dioxo-1- (3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4- il]-3-metilsulfanil-benzonitrila (INTERMEDIÁRIO C.7, 100 mg, 0,226 mmol) em diclorometano (3 mL) e a mistura é agitada durante 20 minutos. A mistura reacional é concentrada sob pressão reduzida e purificada por HPLC de fase reversa (Sunfire, gradiente de acetonitrila em água, 0,1 % de TFA) produzindo os dois diastereômeros. INTERMEDIÁRIO C.12.1: Rendimento: 35 mg; Espectro de massa por ESI [M+H]+ = 460; Tempo de retenção em HPLC: 0,90 minuto (eluição precoce de diastereôme- ro) (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO C.12.2: Rendimento: 26 mg; Espectro de massa por ESI [M+H]+ = 460; Tempo de retenção em HPLC: 0,92 minuto (eluição tardia de diastereômero) (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO C.13 Metilamida de ácido 4-(4-ciano-2-etilsulfanil-fenil)-2,5-dioxo-1-(3- trifluorometil-fenil)-1,2,4,5,6,7-hexa-hidro-ciclopentapirimidina-3- carboxílico

[00136] A uma mistura de 4- [2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)- 2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-etilsulfanil- benzonitrila (INTERMEDIÁRIO C.8; 100 mg; pureza de 90%; 0,20 mmol) e di-isopropiletilamina (130 µL; 0,76 mmol) em acetonitrila (1 mL) são adicionados em temperatura ambiente em pequenas porções durante um período de 5 horas 4-nitrofenilcloroformiato (160 mg; 0,79 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (140 mg; 1,15 mmol). Metilamina (1M em THF; 1 mL; 1,00 mmol) é adicionada à mistura contendo o intermediário de carbamato de 4-nitrofenila e a reação é agitada em temperatura ambiente durante 1 horas. A mistura reacional é purificada por HPLC de fase reversa (Sunfire, gradiente de acetonitrila em água, 0,1 % de TFA). Rendimento: 58 mg. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 515; Tempo de retenção em HPLC: 1,08 minutos (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO D.1 Terc-butil éster de ácido [benzenossulfonil-(4-ciano-2- metanossulfonil-fenil)-metil]-carbâmico

[00137] Ácido fórmico (6,2 mL, 164 mmol) é adicionado a uma mistura de carbamato de terc-butila (3,05 g, 26,0 mmol), 4-formil-3- (metilsulfonil)benzonitrila (preparado de acordo com US 2011/34433, 5,44 g, 26,0 mmol) e benzenossulfinato de sódio (4,27 g, 26,0 mmol) em THF (10,0 mL) e água (25,0 mL) e a mistura reacional é agitada em temperatura ambiente durante 4 dias. Água é adicionada e o precipitadoé filtrado, lavado com água e acetonitrila e secado. Rendimento: 5,10 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 451; Tempo de retenção em HPLC: 0,59 minutos (X012_S01). INTERMEDIÁRIO D.2 Terc-butil éster de ácido [benzenossulfonil-(4-ciano-2- etanossulfonil-fenil)-metil]-carbâmico

[00138] O INTERMEDIÁRIO D.2 é preparado em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO D.1, substituindo 4-formil-3- (metilsulfonil)benzonitrila por 3-etanossulfonil-4-formil-benzonitrila (preparado de acordo com US 2011/34433). Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 465; Tempo de retenção em HPLC: 1,03 minuto (Z017_S04). INTERMEDIÁRIO D.3 3-(2-trifluorometil-piridin-4-ilamino)-ciclopent-2-enona

[00139] Uma solução de 1,3-ciclopentanodiona (3,03 g, 30,8 mmol) e 4-amino-2-trifluorometilpiridina (5,00 g, 30,8 mmol) em ácido acético (15,0 mL) é agitada a 130°C em um forno de micro-on das durante 5 horas. A mistura reacional é diluída com metanol e água e purificada por HPLC de fase reversa (Waters SunFireTM-C18, gradiente de aceto- nitrila em água, 0,1 % de ácido fórmico). Rendimento: 4,52 g; Espectro de massa por ESI [M+H]+ = 243; Tempo de retenção em HPLC: 0,77 minuto (Z018_S04).

[00140] Os INTERMEDIÁRIOS D.3,1 a D.3,4 são preparados em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO D.3, empregando a amina apropriada como material de partida, respectivamente. Tabela 1 Terc-butil éster de ácido {(4-ciano-2-metanossulfonil-fenil)- [5-oxo- 2-(2-trifluorometil-piridin-4-ilamino)-ciclopent-1-enil]-metil}- carbâmico

[00141] Hidreto de sódio (60% em óleo mineral, 515 mg, 12,9 mmol) é adicionado em pequenas porções a uma mistura de 3-(2- (trifluorometil)piridin-4-ilamino)ciclopent-2-enona (INTERMEDIÁRIO D.3, 2,60 g, 10,7 mmol) em 2-metiltetra-hidrofurano (40,0 mL). Após 10 minutos, terc-butil éster de ácido [benzenossulfonil-(4-ciano-2- metanossulfonil-fenil)-metil]-carbâmico (INTERMEDIÁRIO D.1, 4,83 g, 10,7 mmol) é adicionado e a mistura reacional é agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos. Água e acetato de etila são adicionados e as fases são separadas. A fase orgânica é lavada com água e concentrada sob pressão reduzida. Rendimento: 6,20 g; Espectro de massa por ESI [M+H]+ = 551; Tempo de retenção em HPLC: 1,12 minuto (Z018_S04). INTERMEDIÁRIOS D.4,1 - D.4,5 são preparados em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO D.4, empregando os materiais de partida indicados na tabela seguinte. Cloridrato de 4-{amino- [5-oxo-2-(2-trifluorometil-piridin-4-ilamino)- ciclopent-1-enil]-metil}-3-metanossulfonil-benzonitrila

[00142] A uma solução de terc-butil éster de ácido {(4-ciano-2- metanossulfonil-fenil)- [5-oxo-2-(2-trifluorometil-piridin-4-ilamino)- ciclopent-1-enil]-metil}-carbâmico (INTERMEDIÁRIO D.4, 5,20 g, 9,45 mmol) em 1,4-dioxano (100 mL) é adicionado cloreto de hidrogênio em 1,4-dioxano (4 M, 50,0 mL, 200 mmol) e a mistura é agitada em tem-peratura ambiente durante a noite. A mistura reacional é diluída com metil-terc-butiléter e o precipitado é filtrado, lavado com metil-terc- butiléter e secado. Rendimento: 4,40 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 451; Tempo de retenção em HPLC: 0,78 minuto (Z018_S04).

[00143] Os INTERMEDIÁRIOS D.5.1 a D.5.5 são preparados em modelo análogo ao descrito para o INTERMEDIÁRIO D.5, empregan- do os materiais de partida indicados na tabela seguinte. Tabela 3 4- [2,5-dioxo-1-(2-trifluorometil-piridin-4-il)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro- 1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-metanossulfonil-benzonitrila

[00144] A uma solução de cloridrato de 4-{amino- [5-oxo-2-(2-triflu- orometil-piridin-4-ilamino)-ciclopent-1-enil]-metil}-3-metanossulfonil- benzonitrila (INTERMEDIÁRIO D.5, 4,78 g, 9,81 mmol) em acetonitrila (100 mL) são adicionados 1,1’-carbonildi-imidazol (1,99 g, 12,3 mmol) e trietilamina (0,34 mL, 2,45 mmol) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante 1 h. A mistura reacional é concentrada sob pressão reduzida. O resíduo é tratado com água, o precipitado é filtrado, lavado com água e secado. Rendimento: 3,73 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 477; Tempo de retenção em HPLC: 0,90 minuto (Z018_S04). INTERMEDIÁRIO D.6A E INTERMEDIÁRIO D.6B: ENANTIÔMEROS DE INTERMEDIÁRIO RACÊMICO D.6

[00145] Os anantiômeros de INTERMEDIÁRIO D.6 racêmico (300 mg, 0,63 mmol) são separados por cromatografia líquida supercrítica preparativa em uma fase quiral (Daicel Chiralpak IC, 20 x 250 mm, 5 µm, MeOH a 20 % + amônia a 20 mM em CO2supercrítico, 40°C, con- trapressão a 120 bar). INTERMEDIÁRIO D.6A: Rendimento: 92 mg; Espectro de massa por ESI [M+H]+ = 477; Tempo de retenção: 2,67 minutos (eluição precoce de enantiôme- ro) (I_IB_20_MeOH_NH3). INTERMEDIÁRIO D.6B: Rendimento: 96 mg; Espectro de massa por ESI [M+H]+ = 477; Tempo de retenção: 3,03 minutos (eluição tardia de enantiômero) (I_IB_20_MeOH_NH3). INTERMEDIÁRIO D.7 3-(3-(difluorometil)fenilamino)ciclopent-2-enona

[00146] Uma mistura de ciclopentano-1,3-diona (2,00 g, 20,4 mmol), 3-(difluorometil)anilina (2,92 g, 20,4 mmol) e trifluormetanossulfonato de itérbio(III) (63 mg, 0,10 mmol) é agitada em temperatura ambiente durante 2 h. Metanol e água são adicionados e o precipitado resultante é filtrado e secado. Rendimento: 2,75 g; Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 224; Tempo de retenção em HPLC: 0,82 min (V012_S01). INTERMEDIÁRIO D.8 Terc-butil éster de ácido {(4-ciano-2-etanossulfonil-fenil)- [2-(3- difluorometil-fenilamino)-5-oxo-ciclopent-1-enil]-metil}-carbâmico

[00147] Hidreto de sódio (60% em óleo mineral, 155 mg, 3,88 mmol) é adicionado em pequenas porções a uma mistura de 3-(3- (difluorometil)fenilamino)ciclopent-2-enona (INTERMEDIÁRIO D.7; 936 mg, 4,20 mmol) em 2-metiltetra-hidrofurano (10 mL). Após 30 minutos, terc-butil éster de ácido [benzenossulfonil-(4-ciano-2-etanossulfonil- fenil)-metil]-carbâmico (INTERMEDIÁRIO D.2, 1,50 g, 3,23 mmol) é adicionado e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante a noite. Acetato de etila e água são adicionados e as fases são separadas. A fase orgânica é lavada com água, secada sobre MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida. Rendimento: 2,35 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 546; Tempo de retenção em HPLC: 1,14 min (Z017_S04). INTERMEDIÁRIO D.9 Cloridrato de 4-{amino- [2-(3-difluorometil-fenilamino)-5-oxo- ciclopent-1-enil]-metil}-3-etanossulfonil-benzonitrila

[00148] Uma solução de cloreto de hidrogênio em 1,4-dioxano (4 M, 3,0 mL, 12,0 mmol) é adicionada a uma solução de terc-butil éster de ácido {(4-ciano-2-etanossulfonil-fenil)- [2-(3-difluorometil-fenilamino)-5- oxo-ciclopent-1-enil]-metil}-carbâmico (INTERMEDIÁRIO D.8, 2,35 g, pureza de 75%, 3,23 mmol) em acetonitrila (6 mL) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante 2 horas e, em seguida, resfriada em um banho de gelo. O precipitado é filtrado, lavado com acetonitrila fria e secado. Rendimento: 1,52 g. Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 446; Tempo de retenção em HPLC: 0,86 minuto (Z017_S04). INTERMEDIÁRIO E.1 (4-bromo-2-metilsulfonil)fenil)metilenodicarbamato de dietila

[00149] Em um frasconete de fundo redondo de três gargalos equipado com um tubo de secagem carregado com cloreto de cálcio e uma entrada para nitrogênio, 4-bromo-2-metanossulfonil-benzaldeído (4,50 g, 17,10 mmol) e carbamato de etila (3,35 g, 37,63 mmol) são aquecidos a 145°C durante 5 horas. O frasconete é purgado com um fluxo de nitrogênio e ácido sulfúrico concentrado (aproximadamente, 200 µL, aproximadamente, 3 mmol) é adicionado lentamente gota a gota. Após 7 h, a mistura reacional solidificada é resfriada para temperatura ambiente, esmagada, misturada completamente com água e secada. O resíduo é purificado por cromatografia rápida em sílica (gradiente de di- clorometano para diclorometano/metanol 95:5). Rendimento: 5,05 g; Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 423 (padrão de isótopo de bromo); Tempo de retenção em HPLC: 0,77 minuto (Z011_S03). INTERMEDIÁRIO E.2 4-(4-bromo-2-metanossulfonil-fenil)-1-(3-trifluorometil-fenil)-3,4,6,7 -tetra-hidro-1H-ciclopentapirimidina-2,5-diona Etapa 1: 4-bromo-1-(cloro(isocianato)metil)-2-(metilsulfonil)benzeno

[00150] Pentacloreto fosforoso (5,47 g, 26,2 mmol) é adicionado a uma suspensão de (4-bromo-2-metilsulfonil)fenil)metilenodicarbamato de dietila (INTERMEDIÁRIO E.1, 5,05 g, 11,9 mmol) em tolueno (30 mL) e a mistura é aquecida em refluxo durante 3 horas. O tolueno é evaporado sob pressão reduzida e a mistura é em seguida purificada por destilação sob pressão reduzida (aproximadamente, 160°C, 0,1 mbar). Rendimento: 945 mg. Etapa 2: 4-(4-bromo-2-metanossulfonil-fenil)-1-(3-trifluorometil-fenil)-3,4,6,7 -tetra-hidro-1H-ciclopentapirimidina-2,5-diona

[00151] 3-(3-(trifluorometil)fenilamino)ciclopent-2-enona (234 mg, 0,97 mmol) é adicionada a uma solução de 4-bromo-1-(cloro(isocia- nato)metil)-2-(metilsulfonil)benzeno (Etapa 1, 945 mg, 2,91 mmol) em diclorometano (10 mL). A mistura é aquecida em refluxo durante a noite e em seguida concentrada sob pressão reduzida. O resíduo é purificado por HPLC de fase reversa (Agilent ZORBAXTM SB-C18, gradiente de acetonitrila em água, 0,1 % de ácido fórmico). Rendimento: 110 mg; Espectro de massa por ESI: [M+ H]+ = 529 (padrão de isótopo de bromo); Tempo de retenção em HPLC: 1,21 minuto (Z017_S04). INTERMEDIÁRIO E.3 4-(2,5-dioxo-1-(3-(trifluorometil)fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il)-3-(metilsulfonil)benzonitrila

[00152] Sob uma atmosfera de argônio, uma mistura de 4-(4- bromo-2-(metilsulfonil)fenil)-1-(3-(trifluorometil)fenil)-3,4,6,7-tetra-hidro- 1H-ciclopentapirimidina-2,5-diona (INTERMEDIÁRIO E.2, 110 mg, 0,21 mmol), cianeto de zinco (32 mg, 0,27 mmol) e tetracis(trifenil- fosfina)paládio(0) (24 mg, 21 µmol) em DMF (2 mL) é aquecida a 110°C durante a noite e em seguida resfriada para t emperatura ambiente. Água é adicionada e a mistua é filtrada. O precipitado é purificado por cromatografia rápida em sílica (gradiente de cicloexano/acetato de etila 8:2 a 3:7). Rendimento: 40 mg; Espectro de massa por ESI: [M+H]+ = 476; Tempo de retenção em HPLC: 0,94 minuto (Z017_S04). INTERMEDIÁRIO E.3A E INTERMEDIÁRIO E.3B: ENENTIÔMEROS DE INTERMEDIÁRIO E.3

[00153] Os enantiômeros de 4-(2,5-dioxo-1-(3-(trifluorometil)fenil)- 2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il)-3- (metilsulfonil)benzonitrila racêmico (INTERMEDIÁRIO E.3, 1,82 g, 3,83 mmol) são separados por cromatografia líquida supercrítica preparativa em uma fase quiral (Daicel Chiralpak IB, 20 x 250 mm, 5 µm, 15% MeOH + 0,2% de dietilamina em CO2 supercrítico, 40°C, contrapres- são a 120 bar). INTERMEDIÁRIO E.3A: Rendimento de 620 mg; Espectro de massa por ESI [M+H]+ = 476; Tempo de retenção: 2,52 minutos (eluição precoce de enantiô- mero) (I_IB_20_MeOH_DEA). INTERMEDIÁRIO E.3B: Rendimento de 554 mg; Espectro de massa por ESI [M+H]+ = 476; Tempo de retenção: 2,78 minutos (eluição tardia de enantiôme- ro) (I_IB_20_MeOH_DEA). INTERMEDIÁRIO E.4 2- [4-(4-ciano-2-metanossulfonil-fenil)-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil- fenil)-1,2,4,5,6,7-hexa-hidro-ciclopentapirimidin-3-il]-etil éster de ácido acético

[00154] A uma mistura de 4-(2,5-dioxo-1-(3-(trifluorometil)fenil)- 2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il)-3-(metilsulfonil) ben- zonitrila (INTERMEDIÁRIO E.3, 300 mg, 0,57 mmol) e carbonato de césio (463 mg, 1,42 mmol) em DMF (5,0 mL) é adicionado 2- bromoetilacetato (0,20 mL, 1,82 mmol) e a mistura é agitada a 50°C durante 3 dias. A mistura reacional é diluída com acetonitrila e água é purificada por HPLC de fase reversa (Waters SunFireTM-C18, gradiente de acetonitrila em água, 0,1 % de TFA). Rendimento: 104 mg; Espectro de massa por ESI [M+H]+ = 562; Tempo de retenção em HPLC: 1,03 minuto (Z018_S04). Sínteses de Exemplos EXEMPLO A.1 3-Hidroximetil-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)- 2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila

[00155] A uma solução de ácido 5-ciano-2- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3- trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]- benzoico (INTERMEDIÁRIO A.6; 700 mg; 1,537 mmol) em THF (10,5 ml) é adicionado 1,1’-carbonildi-imidazol (274 mg; 1,691 mmol). A mistura de reação é agitada em temperatura ambiente durante 2 horas e resfriada para 5°C. Boro-hidreto de sódio (87 mg; 2 ,31 mmol) em água (1,4 mL) é adicionado gota a gota, mantendo a temperatura entre 5°C e 10°C. A mistura de reação é agitada durante 45 mi nutos e extinta com HC1 aquoso a 1M. Acetato de etila e água são adicionados e as fases são separados. A camada orgânica é lavada com água, secada sobre MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo é purificado por cromatografia rápida em sílica (diclorometano/metanol 95:5 75:25). Rendimento: 390 mg; espectro de massa de ESI: [M+H]+ = 442; Tempo de retenção de HPLC: 0,61 minutos (X012_S02). EXEMPLOS A.1A e A.1B: ENANTIÔMEROS DE EXEMPLO A.1

[00156] Os enantiômeros de EXEMPLO A.1 (1220 mg) são separados por cromatografia de fluido supercrítica preparativa em uma fase quiral (Daicel Chiralpak IC, 20 x 250 mm, 5 µm, 30% de MeOH + amô- nia a 20 mM em CO2 supercrítico, fluxo de 10 mL/min; 150 bar de pressão traseira). EXEMPLO A.1A:

[00157] Rendimento de 330 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 442; tempo de retenção: 2,93 minutos (enantiômero de eluição precoce) (I_IC_40_MEOH_NH3). EXEMPLO A.1B:

[00158] Rendimento de 314 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 442; tempo de retenção: 4,54 minutos (enantiômero de eluição tardia) (I_IC_40_MEOH_NH3). EXEMPLO A.2 3-(1-Hidróxi-1-metil-etil)-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil- fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]- benzonitrila

[00159] A uma solução de metil éster de ácido 5-ciano-2- [3-metil- 2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-benzoico (INTERMEDIÁRIO A.5; 400 mg; 0,852 mmol) em THF (5 ml) é adicionada uma solução de cloreto de magnésio de metila em THF (3M, 625 µL; 1,875 mmol) gota a gota a 0°C. A mistura de reação é agitada em temperatura a mbiente durante a noite e extinta com HCl a 1M. Acetato de etila e água são adicionados e as fases são separados. A camada orgânica é lavada com água, secada sobre MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo é purificado por HPLC de fase reversa (Waters XbridgeTM-C18, gradiente de acetonitrila em água, 0,1% de TFA). Rendimento: 90 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 470; Tempo de retenção de HPLC: 0,69 minutos (X012_S02). EXEMPLO A.3 3-(1-Hidróxi-etil)-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)- 2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila

[00160] Uma solução de cloreto de magnésio de metila em THF (3M, 0,239 mL; 0,717 mmol) é adicionada a 5°C a uma solução de 3- formil-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa- hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila (INTERMEDIÁRIO A.7, 300 mg; 0,683 mmol) em dietil éter (3 mL) e THF (2,5 mL). A mistura de reação é agitada a 0°C durante 15 minutos e 1 ho ras em temperatura ambiente. Água e HC1 aquoso a 1M são adicionados até o pH ficar acídico. Acetato de etila é adicionado e as fases são separadas. A camada orgânica é secada sobre MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo é purificado por cromatografia flash em sílica (primeiro ciclo: diclorometano/ metanol 98:2, segundo ciclo: ciclo- hexano/acetato de etila 2:8). Rendimento: 112 mg; espectro de massa de ESl: [M+H]+ = 456; Tempo de retenção de HPLC: 0.62 minutos (X012_S02). EXEMPLO B.1 4- [2,5-Dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-3-(3-hidróxi-propano-1-sulfonil)- benzonitrila

[00161] A uma solução de 4- [2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)- 2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-(3-hidróxi- propilsulfanil)-benzonitrila (INTERMEDIÁRIO B.4, 13 mg, 0,027 mmol) em diclorometano (2,0 mL) é adicionado ácido 3-cloroperoxibenzoico (40 mg, 0,18 mmol) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante 20 minutos. A mistura de reação é concentrada sob pressão reduzida e purificada por HPLC de fase reversa (Agilent ZORBAXTM SB-C18, gradiente de acetonitrila em água, 0,1% de TFA). Rendimento: 5 mg. Espectro de massa de ESl: [M+H]+ = 520; Tempo de retenção de HPLC: 0,93 minutos (Z018_S04).

[00162] Os seguintes EXEMPLOS B.1.1 - B.1.4 são preparados em modelo análogo como descrito pelo exemplo B.1, empregando os ma-teriais indicados na seguinte tabela. Tabela 4

[00163] EXEMPLO B.1.2A e EXEMPLO B.1.2B: Enantiômeros de EXEMPLO B.1.2

[00164] Os enantiômeros de EXEMPLO B.1.2 (142 mg) são separados por cromatografia de fluido supercrítica preparativa em uma fase quiral (Daicel Chiralpak IB, 10 x 250 mm, 5 µm, 20% de MeOH + NH3 a 20 mM em CO2 supercrítico, fluxo de 10 mL/min, 120 bar de pressão traseira, 40°C).

EXEMPLO B.1.2A:

[00165] Rendimento de 65 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 520; tempo de retenção: 2,15 minutos (enantiômero de eluição precoce) (I_IB_20_MEOH_NH3).

EXEMPLO B.1.2B:

[00166] Rendimento de 63 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 520; tempo de retenção: 2,77 minutos (enantiômero de eluição tardia) (I_IB_20_MEOH_NH3).

[00167] Uma estrutura de raios X de EXEMPLO B.1.2B ligada à elastase neutrófila revelou as seguintes estrutura e configuração no carbono marcado com um asterisco:

EXEMPLO B.1.3A e EXEMPLO B.1.3B: Enantiômeros de EXEMPLO B.1.3

[00168] Os enantiômeros de EXEMPLO B.1.3 (120 mg) são separados por cromatografia de fluido supercrítica preparativa em uma fase quiral (Daicel Chiralpak IB, 20 x 250 mm, 5 µm, 15% de MeOH + NH3 a 20 mM em CO2 supercrítico, fluxo de 60 mL/min, 150 bar de pressão traseira, 40°C).

EXEMPLO B.1.3A:

[00169] Rendimento de 60 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 534; tempo de retenção: 2,03 minutos (enantiômero de eluição precoce) (I_IB_20_MEOH_NH3).

EXEMPLO B.1.3B:

[00170] Rendimento de 54 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 534; tempo de retenção: 2,27 minutos (enantiômero de eluição tardia) (I_IB_20_MEOH_NH3).

EXEMPLO C.1A e EXEMPLO C.1B: Enantiômeros de INTERMEDIÁ- RIO C.11.1

[00171] Os enantiômeros de INTERMEDIÁRIO C.11.1 (diastereô- mero de eluição precoce, 490 mg, 1,035 mmol) são separados por cromatografia de fluido supercrítica preparativa em uma fase quiral (Daicel Chiralpak IB, 10 x 250 mm, 5 µm, 20% de MeOH + NH3 a 20 mM em CO2 supercrítico, fluxo de 10 mL/min, 120 bar de pressão traseira).

EXEMPLO C.1A:

[00172] Rendimento de 167 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 474; tempo de retenção: 2,83 minutos (enantiômero de eluição precoce) (I_IB_20_MEOH_NH3).

EXEMPLO C.1B:

[00173] Rendimento de 170 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 474; tempo de retenção: 3,25 minutos (enantiômero de eluição tardia) (I_IB_20_MEOH_NH3).

[00174] Uma estrutura de raios X de EXEMPLO C.1B ligada à elastase neutrófila revelou as seguintes estrutura e configuração no carbono marcado com um asterisco: EXEMPLO C.1B

EXEMPLO C.2A e EXEMPLO C.2B: Enantiômeros de INTERMEDIÁ RIO C.11.2

[00175] Os enantiômeros de INTERMEDIÁRIO C.11.2 (diastereô- mero de eluição tardia, 317 mg, 0,670 mmol) são separados por cro- matografia de fluido supercrítica preparativa em uma fase quiral (Dai- cel Chiralpak IA, 20% de MeOH + NH3 a 20 mM em CO2 supercrítico, fluxo de 60 mL/min, 150 bar de pressão traseira).

EXEMPLO C.2A

[00176] Rendimento de 126 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 474; tempo de retenção: 1,58 minutos (enantiômero de eluição precoce) (I_IA_20_MEOH_NH3).

EXEMPLO C.2B

[00177] Rendimento de 126 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 474; tempo de retenção: 2,33 minutos (enantiômero de eluição tardia) (I_IA_20_MEOH_NH3).

[00178] Uma estrutura de raios X de EXEMPLO C.2A ligada à elastase neutrófila revelou as seguintes estrutura e configuração no carbono marcado com um asterisco: EXEMPLO C.2A

[00179] Desse modo, o EXEMPLO C.1B e EXEMPLO C.2A têm a mesma configuração no carbono marcado com um asterisco e diferem com respeito à configuração do átomo de enxofre. Portanto, EXEMPLO C.1B e EXEMPLO C.2A são diastereômeros. EXEMPLO C.3 Etilamida de ácido 4-(4-Ciano-2-metanossulfinil-fenil)-2,5-dioxo-1- (3-trifluorometil-fenil)-1,2,4,5,6,7-hexa-hidro-ciclopentapirimidina- 3-carboxílico

[00180] A uma mistura de 4- [2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4, 5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-metanossulfinil-benzo- nitrila (INTERMEDIÁRIO C.12.2, diastereômero de eluição tardia, 26 mg; 0,057 mmol), di-isopropiletilamina (38 µL; 0,23 mmol) e 4-dime- tilaminopiridina (8 mg; 0,06 mmol) em acetonitrila (3 mL) é adicionado 4-nitrofenilcloroformiato (12,6 mg; 0,062 mmol) em temperatura ambiente e a mistura de reação é agitada durante 5 h. Etilamina (2M em THF; 114 µL; 0,228 mmol) é adicionada à mistura reacional contendo o intermediário de 4-nitrofenil carbamato e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reação é purificada por HPLC de fase reversa (Sunfire, gradiente de acetonitrila em água, 0,1% de TFA). Rendimento: 4 mg. Espectro de massa de ESl: [M+H]+ = 531; Tempo de retenção de HPLC: 1,02 minutos (Z018_S04). EXEMPLO C.4.1 e EXEMPLO C.4.2 4- [2,5-Dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-3-etanossulfinil-benzonitrila

[00181] Ácido 3-cloroperoxibenzoico (77%, 45 mg, 0,201 mmol) é adicionado em temperatura ambiente a uma solução de 4- [2,5-dioxo-1- (3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4- il]-3-etilsulfanil-benzonitrila (INTERMEDIÁRIO C.8, 106 mg, 0,210 mmol) em diclorometano (2 mL), e a mistura é agitada durante 20 minutos. A mistura de reação é concentrada sob pressão reduzida e purificada por HPLC de fase reversa (Sunfire, gradiente de acetonitrila em água, 0,1% de TFA) produzindo os dois diastereômeros.

EXEMPLO C.4.1:

[00182] Rendimento: 15 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 474; Tempo de retenção de HPLC: 0,91 minutos (diastereômero de eluição precoce) (Z018_S04).

EXEMPLO C.4.2:

[00183] Rendimento: 32 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 474; Tempo de retenção de HPLC: 0,93 minutos (diastereômero de eluição tardia) (Z018_S04). EXEMPLO C.5.1 e EXEMPLO C.5.2 3-Etanossulfinil-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)- 2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila

[00184] Ácido 3-cloroperoxibenzoico (77%, 24 mg, 0,107 mmol) é adicionado em temperatura ambiente a uma solução de 4- [3-metil-2,5- dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-3-etilsulfanil-benzonitrila (INTERMEDIÁRIO C.10, 53 mg, 0,112 mmol) em diclorometano (1 mL) e a mistura é agitada durante 20 minutos. A mistura de reação é concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo é purificado por HPLC de fase reversa (Sunfire, gradiente de acetonitrila em água, 0,1% de TFA) produzindo os dois diastereômeros.

EXEMPLO C.5.1:

[00185] Rendimento: 26 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+= 488 ; Tempo de retenção de HPLC: 0,96 minutos (diastereômero de eluição precoce) (Z018_S04).

EXEMPLO C.5.2:

[00186] Rendimento: 17 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 488; Tempo de retenção de HPLC: 0,97 minutos (diastereômero de eluição tardia) (Z018_S04). EXEMPLO C.6.1 e EXEMPLO C.6.2 Metil amida de ácido 4-(4-Ciano-2-etanossulfinil-fenil)-2,5-dioxo-1- (3-trifluorometil-fenil)-1,2,4,5,6,7-hexa-hidro-ciclopentapirimidina- 3-carboxílico

[00187] Ácido 3-cloroperoxibenzoico (77%, 24 mg, 0,107 mmol) é adicionado em temperatura ambiente a uma solução de metil amida de ácido 4-(4-ciano-2-etilsulfanil-fenil)-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)- 1,2,4,5,6,7-hexa-hidro-ciclopentapirimidina-3-carboxílico (INTERME-DIÁRIO C.13, 58 mg, 0,113 mmol) em diclorometano (2 mL), e a misturaé agitada durante 20 minutos. A mistura de reação é concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo é purificado por HPLC de fase reversa (Sunfire, gradiente de acetonitrila em água, 0,1% de TFA) produzindo os dois diastereômeros.

EXEMPLO C.6.1:

[00188] Rendimento: 7 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 531; Tempo de retenção de HPLC: 0,98 minutos (diastereômero de eluição precoce) (Z018_S04).

EXEMPLO C.6.2:

[00189] Rendimento: 15 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 531; Tempo de retenção de HPLC: 1,00 minuto (diastereômero de eluição tardia) (Z018_S04). EXEMPLO D.1A 3-Metanossulfonil-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(2-trifluorometil-piridin-4- il)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila

[00190] A uma mistura de 4- [2,5-dioxo-1-(2-trifluorometil-piridin-4-il)- 2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-metanossulfonil- benzonitrila (INTERMEDIÁRIO D.6A, enantiômero de eluição precoce, 92 mg, 0,19 mmol) e carbonato de césio (126 mg, 0,39 mmol) em DMF (3,0 mL) é adicionada uma solução de iodeto de metila em metil-terc- butuléter (c =2 mol/L, 116 µL, 0,23 mmol) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante 5 horas. Gelo é adicionado à mistura reacional, a mistura é acidificada com ácido trifluoroacético e purificada por HPLC de fase reversa (Waters SunFireTM-C18, gradiente de ace- tonitrila em água, 0,1% de TFA). Rendimento: 54 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 491; Tempo de retenção de HPLC: 0,98 minutos (Z018_S04). Visto que o material de partida é enantiopuro, assume-se que o EXEMPLO D.1A é enantiopuro e tem a mesma configuração como o material de partida. EXEMPLO D.1B 3-Metanossulfonil-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(2-trifluorometil-piridin-4- il)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila

[00191] EXEMPLO D.1B é preparado em modelo análogo como descrito pelo exemplo D.1A, substituindo o INTERMEDIÁRIO D.6A (enantiômero de eluição precoce) com o INTERMEDIÁRIO D.6B (enantiômero de eluição tardia) como o material de partida. Espectro de massa de ESl [M+H]+ = 491; Tempo de retenção de HPLC: 0,98 minutos (Z018_S04). EXEMPLO D.1B é o enantiômero de EXEMPLO D.1A. Visto que o material de partida é enantiopuro, assume-se que o EXEMPLO D.1B é enantiopuro e tem a mesma configuração como o material de partida. EXEMPLO D.2 4- [2,5-Dioxo-1-(2-trifluorometil-piridin-4-il)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro- 1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-etanossulfonil-benzonitrila

[00192] A uma solução de cloridrato de 4-{amino- [5-oxo-2-(2- trifluorometil-piridin-4-ilamino)-ciclopent-1-enil]-metil}-3-etanossulfonil- benzonitrila (INTERMEDIÁRIO D.5.1, 706 mg, 1,41 mmol) e trietilami- na (50 µL, 0,36 mmol) em acetonitrila (3,0 mL) é adicionado 1,1’- carbonildi-imidazol (260 mg, 1,60 mmol) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante 15 minutos. A mistura de reação é concentrada sob pressão reduzida e purificada por HPLC de fase reversa (Waters SunFireTM-C18, gradiente de acetonitrila em água, ácido fórmi- co a 0,1%). Rendimento: 562 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 491; Tempo de retenção de HPLC: 0,94 minuto (Z018_S04).

[00193] Os EXEMPLOS D.2.1 - D.2.4 são preparados em modelo análogo como descrito pelo exemplo D.2, empregando os materiais indicados na seguinte tabela, respectivamente. Tabela 5 3-Etanossulfonil-4- [3-metil-2,5-dioxo-1-(2-trifluorometil-piridin-4- il)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-benzonitrila

[00194] Uma solução de metiliodeto em metil-terc-butiléter (c = 2 mol/L, 97 µL, 0,19 mmol) é adicionada a uma mistura de 4- [2,5-dioxo- 1-(2-trifluorometil-piridin-4-il)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-3-etanossulfonil-benzonitrila (EXEMPLO D.2, 80 mg, 0,16 mmol) e carbonato de césio (97 mg, 0,30 mmol) em DMF (1,0 mL) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação é acidificada com ácido acético e purificada por HPLC de fase reversa (Waters SunFireTM-C18, gradiente de aceto- nitrila em água, 0,1% de TFA). Rendimento: 63 mg. Espectro de massa de ESl: [M+H]+ = 505; Tempo de retenção de HPLC: 1,02 minuto (Z018_S04).

EXEMPLO D.3A e EXEMPLO D.3B: ENANTIÔMEROS DE EXEMPLO D.3

[00195] Os enantiômeros de 3-etanossulfonil-4- [3-metil-2,5-dioxo-1- (2-trifluorometil-piridin-4-il)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimi- din-4-il]-benzonitrila racêmico (EXEMPLO D.3, 104 mg, 0,206 mmol) são separados por cromatografia de fluido supercrítica preparativa em uma fase quiral (Daicel Chiralpak IC, 10 x 250 mm, 5 µm, 30% de MeOH + NH3 a 20 mM em CO2 supercrítico, 40°C, 120 bar de pres são traseira). EXEMPLO D.3A:

[00196] Rendimento de 45 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 505; tempo de retenção: 1,94 minutos (enantiômero de eluição precoce) (I_IC_30_MeOH_NH3).

EXEMPLO D.3B:

[00197] Rendimento de 47 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 505; tempo de retenção: 2,36 minutos (enantiômero de eluição tardia) (I_IC_30_MeOH_NH3).

[00198] Os EXEMPLOS D.3.1 - D.3.4 são preparados em modelo análogo como descrito pelo exemplo D.3, empregando os materiais indicados na seguinte tabela, respectivamente. Tabela 6 Metil amida de ácido 4-(4-Ciano-2-etanossulfonil-fenil)-2,5-dioxo-1- (2-trifluorometil-piridin-4-il)-1,2,4,5,6,7-hexa-hidro-ciclopentapiri- midina-3-carboxílico

[00199] Uma mistura de 4- [2,5-dioxo-1-(2-trifluorometil-piridin-4-il)- 2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-etanossulfonil-ben- zonitrila (EXEMPLO D.2, 80 mg, 0,16 mmol), 4-nitrofenil cloroformiato (100 mg, 0,50 mmol), 4-dimetilaminopiridina (70 mg, 0,57 mmol) e di- isopropiletilamina (0,12 mL, 0,71 mmol) em acetonitrila (1,0 mL) é agitada em temperatura ambiente durante a noite. Metilamina (c = 2 mol/L, 1,0 mL; 2.00 mmol) é adicionada à mistura contendo o intermediário de carbamato de 4-nitrofenila e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação é acidificada com ácido acético e purificada por HPLC de fase reversa (Waters SunFi- reTM-C18, gradiente de acetonitrila em água, 0,1% de TFA). Rendimento: 43 mg. Espectro de massa de ESl: [M+H]+ = 548; Tempo de retenção de HPLC: 0,99 minuto (Z018_S04).

[00200] Os EXEMPLOS D.4.1 - D.4.10 são preparados em modelo análogo como descrito pelo exemplo D.4, empregando os materiais indicados na seguinte tabela, respectivamente. Tabela 7 *Visto que o INTERMEDIÁRIO D.6.A de material de partida é enantio- puro, assume-se que o EXEMPLO D.4.10 é enantiopuro e tem a mes-maconfiguração como o material de partida.

EXEMPLO D.4.1A e EXEMPLO D.4.1B: ENANTIÔMEROS DE EXEMPLO D.4.1

[00201] Os enantiômeros de etil amina de ácido 4-(4-ciano-2- etanossulfonil-fenil)-2,5-dioxo-1-(2-trifluorometil-piridin-4-il)-1,2,4,5,6,7- hexa-hidro-ciclopentapirimidina-3-carboxílico racêmico (EXEMPLO D.4.1, 127 mg, 0,226 mmol) são separados por cromatografia de fluido supercrítica preparativa em uma fase quiral (Daicel Chiralpak IA, 10 x 250 mm, 5 µm, 25% de MeOH em CO2 supercrítico, 40°C, 120 bar de pressão traseira).

EXEMPLO D.4.1A:

[00202] Rendimento de 56 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 562; tempo de retenção: 1,51 minutos (enantiômero de eluição precoce) (I_IA_25_MeOH_NH3).

EXEMPLO D.4.1B:

[00203] Rendimento de 54 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 562; tempo de retenção: 2,59 minutos (enantiômero de eluição tardia) (I_IC_25_MeOH_NH3). EXEMPLO D.5 4- [1-(3-Difluorometil-fenil)-2,5-dioxo-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-3-etanossulfonil-benzonitrila

[00204] Trietilamina (238 µL, 1,699 mmol) é adicionado a uma mis tura de cloridrato de 4-{amino- [2-(3-difluorometil-fenilamino)-5-oxo- ciclopent-1-enil]-metil}-3-etanossulfonil-benzonitrila (INTERMEDIÁRIO D.9, 1,516 g, pureza de 90%, 2,831 mmol) e 1,1’-carbonildi-imidazol (551 mg, 3,40 mmol) em acetonitrila (10 mL) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura é concentrada sob pressão reduzida e o resíduo é tratado com água. O precipitado é filtrado e secado. Rendimento: 1,24 g. Espectro de massa de ESl: [M+H]+ = 472; Tempo de retenção de HPLC: 0,92 minutos (Z017_S04). EXEMPLO D.5A e EXEMPLO D.5B: ENANTIÔMEROS DE EXEMPLO D.5

[00205] Os enantiômeros de 4- [1-(3-difluorometil-fenil)-2,5-dioxo- 2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-etanossulfonil- benzonitrila racêmica (EXEMPLO D.5, 490 mg, 1,04 mmol) são separados por cromatografia de fluido supercrítica preparativa em uma fase quiral (Lux C1, 20 x 250 mm, 5 µm, MeOH, taxa de fluxo de 21 mL/minuto).

EXEMPLO D.5A:

[00206] Rendimento de 262 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 472; tempo de retenção: 2,95 minutos (enantiômero de eluição precoce) (I_IB_20_MeOH_NH3).

EXEMPLO D.5B:

[00207] Rendimento de 223 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 472; tempo de retenção: 3,66 minutos (enantiômero de eluição tardia) (I_IB_20_MeOH_NH3). EXEMPLO D.6 4- [1-(3-Difluorometil-fenil)-3-metil-2,5-dioxo-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro- 1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-etanossulfonil-benzonitrila

[00208] Metiliodeto (20 µL, 0,32 mmol) é adicionado a uma mistura de 4- [1-(3-difluorometil-fenil)-2,5-dioxo-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H- ciclopentapirimidin-4-il]-3-etanossulfonil-benzonitrila (EXEMPLO D.5, 50 mg, 0,106 mmol) e carbonato de césio (69 mg, 0.212 mmol) em DMF (1 mL), e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação é purificada por HPLC de fase reversa (Waters SunFireTM-C18, gradiente de acetonitrila em água, 0.1% de TFA). Rendimento: 36 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 486; Tempo de retenção de HPLC: 0,79 minutos (005_CA01). EXEMPLO D.7 Metil amida de ácido 4-(4-Ciano-2-etanossulfonil-fenil)-1-(3- difluorometil-fenil)-2,5-dioxo-1,2,4,5,6,7-hexa-hidro- ciclopentapirimidina-3-carboxílico

[00209] 4-Nitrofenilcloroformiato (23 mg; 0,12 mmol) é adicionado a uma mistura de 4- [1-(3-difluorometil-fenil)-2,5-dioxo-2,3,4,5,6,7-hexa- hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-etanossulfonil-benzonitrila (EXEMPLO D.5; 50 mg; 0,106 mmol), DIPEA (72 µL; 0.42 mmol) e 4- dimetilaminopiridina (14 mg; 0,12 mmol) em acetonitrila (1 mL) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. 4- Nitrofenilcloroformiato (23 mg; 0,12 mmol) é adicionado e a reação é agitada 1 hora. Metilamina (2M em THF, 159 µL; 0,318 mmol) é adicionada à mistura contendo o intermediário de 4-nitrofenil carbamato e a mistura agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reação é purificada por HPLC de fase reversa (Stablebond, gradiente de acetonitrila em água, 0,1% de TFA). Rendimento: 32 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 529; tempo de retenção HPLC 0,98 minuto (Z017_S04). EXEMPLO E.1 4- [3-(2-Hidróxi-etil)-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7- hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-metanossulfonil- benzonitrila

[00210] 2- [4-(4-ciano-2-metanossulfonil-fenil)-2,5-dioxo-1-(3- trifluorometil-fenil)-1,2,4,5,6,7-hexa-hidro-ciclopentapirimidin-3-il]-etil éster de ácido acético (INTERMEDIÁRIO E.4, 40 mg, 0,071 mmol) é agitado com ácido trifluoroacético (2.0 mL, 26 mmol) a 60°C durante a noite e a mistura é concentrada sob pressão reduzida. O resíduo é agi-tado com acetonitrila e água durante 2 horas (^ hidrólise de éster de ácido trifluoroacético) e em seguida purificado por HPLC de fase reversa (Waters SunFireTM-C18, gradiente de acetonitrila em água, 0.1% de TFA). Rendimento: 17 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 520; Tempo de retenção de HPLC: 0,96 minuto (Z018_S04). EXEMPLO E.2 4- [3-(3-Hidróxi-propil)-2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6, 7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]-3-metanossulfonil-ben- zonitrila

[00211] A uma mistura de 4-(2,5-dioxo-1-(3-(trifluorometil)fenil)-2,3, 4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il)-3-(metilsulfonil) benzoni- trila (INTERMEDIÁRIO E.3A, enantiômero de eluição precoce, 150 mg, 0,32 mmol) e carbonato de césio (206 mg, 0,63 mmol) em DMF (2,0 mL) é adicionado 3-bromo-1-propanol (55 µL, 0,63 mmol) e a mistura é agitada a 50°C durante a noite. A mistura de reação é tratada com água gelada, acidificada com ácido trifluoroacético e purificada por HPLC de fase reversa (Waters SunFireTM-C18, gradiente de acetonitrila em água, 0,1% de TFA). Rendimento: 40 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 534; Tempo de retenção de HPLC: 0,97 minuto (Z018_S04). Visto que o material de partida é enantiopuro, assume-se que o EXEMPLO E.2 é enantiopuro e tem a mesma configuração como o material de partida. EXEMPLO E.3 3-Metanossulfonil-4- [3-oxetan-3-ilmetil-2,5-dioxo-1-(3-trifluoro- metil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il]- benzonitrila

[00212] A uma mistura de 4-(2,5-dioxo-1-(3-(trifluorometil)fenil)-2,3, 4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopentapirimidin-4-il)-3-(metilsulfonil) benzoni- trila (INTERMEDIÁRIO E.3, 150 mg, 0,32 mmol) e carbonato de césio (206 mg, 0,63 mmol) em DMF (2,0 mL) é adicionado 3-bromometil- oxetano (95 mg, 0,63 mmol) e a mistura é agitada a 50°C durante a noite. A mistura de reação é tratada com água gelada, acidificada com ácido trifluoroacético e purificada por HPLC de fase reversa (Waters SunFireTM-C18, gradiente de acetonitrila em água, 0,1% de TFA). Ren-dimento: 55 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 546; Tempo de retenção de HPLC: 1,01 minuto (Z018_S04).

EXEMPLO E.3A e EXEMPLO E.3B: ENANTIÔMEROS DE EXEMPLO E.3

[00213] Os enantiômeros de 3-metanossulfonil-4- [3-oxetan-3-ilmetil- 2,5-dioxo-1-(3-trifluorometil-fenil)-2,3,4,5,6,7-hexa-hidro-1H-ciclopenta- pirimidin-4-il]-benzonitrila racêmico (EXEMPLO E.3, 55 mg, 0,065 mmol) são separados por cromatografia de fluido supercrítica preparativa em uma fase quiral (Daicel Chiralpak IC, 10 x 250 mm, 5 µm, 30% de MeOH + NH3 a 20 mM em CO2 supercrítico, 40°C, 120 bar de pressão traseira).

EXEMPLO E.3A:

[00214] Rendimento de 11 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 546; tempo de retenção: 4,12 minutos (enantiômero de eluição precoce) (I_IC_30_MeOH_NH3).

EXEMPLO E.3B:

[00215] Rendimento de 11 mg; espectro de massa de ESl [M+H]+ = 546; tempo de retenção: 4,66 minutos (enantiômero de eluição tardia) (I_IC_30_MeOH_NH3).

Dados Farmacológicos

[00216] Outras características e vantagens da presente invenção tornar-se-ão evidentes a partir dos seguintes exemplos mais detalhados, que ilustram, por meio de exemplo, os princípios da invenção. ENSAIO DE ELASTASE NEUTRÓFILA HUMANA

[00217] Materiais: Elastase neutrófila humana foi adquirida de Cal- biochem (Cat.No.: 324681) e o substrato de elastase MeO- Suc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC de Bachem (Cat.No.: I-1270). Todos os materiais foram do maior grau comercialmente disponível.

[00218] Os seguintes tampões foram usados: Tampão de composto Tampão de composto: Tris a 100 mM, NaCl a 500 mM, ajustado para o pH 7,5; Tampão de ensaio: Tris a 100 mM, NaCl a 500 mM, ajustado para o pH 7,5, contendo 0,01% de BSA.

[00219] Condições de ensaio: Os compostos de teste foram pré- diluídos em DMSO e subsequentemente em tampão de composto (5% de DMSO final). 5 µL destas diluições de composto foram misturados com 10 µl de elastase neutrófila (9 ng/ml em tampão de ensaio) em uma OptiPlate preta de 384 cavidades (Perkin Elmer, Cat No.: 6007270) e incubados durante 15 minutos em temperatura ambiente. Subsequentemente 10 µL de solução de substrato em tampão de ensaio foram adicionados (250 µM de concentração final) e as placas foram incubadas durante 60 minutos em temperatura ambiente. Após inativação da enzima, intensidades de fluorescência foram medidas a 380 nm de excitação e 460 nm de comprimentos de onda de emissão.

[00220] Cada placa contém cavidades com um controle de valor elevado (DMSO+enzima+substrato) e cavidades com controle de baixo valor (DMSO+enzima inativada+substrato). Os valores IC5 foram estimados usando uma curva de resposta de concentração sigmoidal com declividade variável. Médias de baixos valores foram consideradas como 0%, medias de valores elevados como 100%. Os valores IC50 de compostos selecionados no ensaio de elastase neutrófila são listados na Tabela 8. TABELA 8

ENSAIO PARA A DETERMINAÇÃO DE ATIVIDADE INIBITÓRIA DE ELASTASE NEUTRÓFILA EM PLASMA HUMANO

[00221] Sangue citratado de doadores humanos saudáveis é misturado com suspensão de zimosan e incubado em temperatura ambiente. Isto induz à estimulação de neutrófilos e à liberação de elastase neutrófila no plasma. O sangue estimulado é centrifugado para gerar o plasma enriquecido por elastase neutrófila.

Preparação de solução de trabalho de zimosan:

[00222] Zimosan (100 mg) é misturado com salina (0,9%, 10 mL) e armazenado a 4°C durante até uma semana (observe: z imosan não se dissolve na salina e é usado como uma suspensão). Estimulação de Sangue Completo: • Uma amostra de sangue de 45 ml simples é tirada em um tubo 50 ml contendo citrato (3,13%, 5 mL) e o tubo é suavemente invertido 4 vezes. • Imediatamente após a amostragem de sangue, solução de trabalho de zimosan (5 mL) é adicionada. • Após a adição de solução de trabalho de zimosan, os tubos são tampados, misturados suavemente e incubados a 22°C durante 15 minutos em um agitador a 20 rpm. • Preparar alíquotas de 10 ml após o tempo de incubação. • Centrifugar os tubos de 15 ml a 800g durante 15 minutos a 4°C em uma centrífuga Jouan. • Colher o plasma e preparar alíquotas de 1-5 ml. • Armazenar o plasma a -80°C.

[00223] Várias concentrações do inibidor de elastase neutrófila são incubadas com plasma. Subsequentemente, a atividade enzimática é medida usando o substrato fluorogênico MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val- AMC (Bachem Cat. No. I-1270, concentração de substrato: 250 µM, pH 7.5, tampão de TRIS a 25 mM, NaCl a 250 mM) em modelo análo- go como descrito para o ensaio de neutrófilo. Uma curva de resposta à dose é gerada para calcular o EC50 do inibidor. A análise dos dados é realizada pelo cálculo da porcentagem de fluorescência na presença do composto de teste em comparação com a fluorescência do controle de veíclo após substrair a fluorescência antecedente: Um inibidor da enzima elastase neutrófila fornecerá valores entre 100 % de controle (sem inibição) e 0 % de controle (inibição completa).

[00224] Os EC50 de compostos selecionados no ensaio de plasma humano descrito acima são listados na tabela 9. Tabela 9

ENSAIO PARA A DETERMINAÇÃO DE ESTABILIDADE METABÓLICA COM MICROSSOMAS DE FÍGADO HUMANO

[00225] A degradação metabólica do composto de teste é ensaiado a 37°C com microssomas de fígado humano agrupados. O volume de incubação final de 100 µl por ponto de tempo contém trampão de TRIS pH 7,6 (0,1 M), cloreto de magnésio (5 mM), proteína microssomal (1 mg/ml) e o composto de teste em uma concentração final de 1 µM. Após um curto período de pré-incubação a 37°C, as reações são iniciadas pela adição de fosfato de dinucleotídeo de beta-nicotinamida adenina, forma reduzida (NADPH, 1 mM) e terminadas transferindo uma alíquota em acetonitrila após diferentes pontos de tempo. Adicionalmente, a degradação independente de NADPH é monitorada em incubações sem NADPH, terminada no ultimo ponto de tempo. O [%] de composto de teste restante após incubação independente de NADPH é refletido pelo parâmetro c(controle) (estabilidade metabólica). As incubações extintas são peletadas por centrifugação (10’000 g, 5 min). Uma alíquota do sobrenadante é ensaiado por LC-MS/MS quanto à quantidade de composto origem.

[00226] A meia vida (t1/2 INVITRO) é determinada pela declividade da plotagem semilogarítmica do perfil concentração-tempo. A clearance intrínseca (CL_INTRÍNSECA) é calculada considerando a quantidade de proteína na incubação: CL_INTRÍNSECA [µl/min/mg de proteína] = (ln 2 / (meia vida [min] * teor de proteína [mg/ml])) *1’000.

[00227] Os valores de meia vida (t1/2 INVITRO) de compostos sele-cionados no ensaio de estabilidade metabólica descrito acima são lis-tados na tabela 10. Tabela 10

ENSAIO PARA A DETERMINAÇÃO DE ESTABILIDADE METABÓLICA COM HEPATÓCITOS HUMANOS

[00228] A degradação metabólica do composto de teste é ensaiada em uma suspensão de hepatócito humano. Hepatócitos humanos (tipi-camente crioconservados) são incubados em um sistema de tampão apropriado (por exemplo, meio Eagle modificado de Dulbecco mais 3,5 µg de glucagon / 500 mL, 2,5 mg de insulina / 500 mL e 3,75 mg / 500 mL de hidrocortison) contendo soro de espécie a 5%. Após uma pré- incubação de 30 minutos (tipicamente) em um incubador (37°C, CO 2 a 10%), 5 µl de solução de composto de teste (80 µM; de solução de matéria prima a 2 mM em DMSO diluído 1:25 com meio) são adicionados em 395 µl de suspensão de hepatócito (densidade celular na faixa de 0,25-5*106 cells/mL, tipicamente 1*106 células/mL; concentração final de composto de teste 1 µM, concentração de DMSO final 0,05%). As células são incubadas durante seis horas (incubador, agitador orbital) e amostras (25 µl) são tiradas a 0, 0,5, 1, 2, 4 e 6 horas. As amostras são transferidas em acetonitrila e peletizadas por centrifugação (5 min). O sobrenadante é transferido para uma nova placa de 96 cavidades fundas, evaporado sob nitrogênio e ressuspenso. A declividade de composto origem é analisada por LC-MS/MS.

[00229] A clearanceintrínseca CL_INTRÍNSECA é calculada como segue: CL_INTRÍNSECA = Dose / AUC = (C0/CD) / (AUD + cúltimo/k) * 1’000/60

[00230] (C0: concentração inicial na incubação [µM], CD: densidade celular de células vitais [106 células/mL], AUD: área sob os dados [µM * h], cúltimo: concentração do último ponto de dados [µM], k: declividade da linha de regressão para o declínio origem [h-1])

[00231] A clearancehepática intrínseca in vitro calculada pode ser graduada para a clearancehepática intrínseca in vivo e usada para predizer a clearance (CL) sanguínea hepática in vivo pelo uso de um modelo de fígado (modelo bem agitado): CL_INTRÍNSECA_INVIVO [ml/min/kg] = (CL_INTRÍNSECA [µL/min/106 células] * hepatocelularidade [106células/g de fígado] * fator hepático [g/kg de peso corporal]) / 1’000 CL [ml/min/kg] = CL_INTRÍNSECA_INVIVO [ml/min/kg] * fluxo sanguí-neohepático de [ml/min/kg] / (CL_INTRÍNSECA_INVIVO [ml/min/kg] + fluxo sanguíneo hepático de [ml/min/kg]) Qh [%] = CL [ml/min/kg] / fluxo sanguíneo hepático de [ml/min/kg])

[00232] (Hepatocelularidade, ser humano: 120*106células / g de fígado; fator hepático, ser humano: 25,7 g / kg de peso corporal; fluxo sanguíneo, humano: 21 ml/(min * kg))

[00233] Com base neste ensaio, o Exemplo C.2A exibe uma clea-rancehepática sanguine in vivo predita de fluxo sanguine hepática humana a 3%.

ENSAIO PARA DETERMINAÇÃO DE TRANSPORTE DE FÁRMACO ATRAVÉS DE CÉLULAS CACO-2 HUMANAS

[00234] O ensaio fornece informação sobre o potencial de um composto para passar a membrana celular, sobre a extensão de absorção oral bem como sobre se o composto é ativamente transportado por captação e;ou transportes de efluxo. Para a medição de permeabilida- de através de células 2 de carcinoma de cólon (Caco-2) de câncer confluentes, polarizadas, monocamadas cultivadas em suportes de filtro permeável são usadas como modelo de absorção in vitro.

[00235] Coeficientes de permeabilidade evidentes (PE) dos com-postosatravés das monocamadas de Caco-2 são medidos (pH 7,2, 37°C) em direção de transporte apical-para-basal (A B) (absortivo) e basal-para-apical (BA) (secretório). A permeabilidade de AB (PEAB) representa a absorção do fármaco do intestino no sangue e a permeabilidade de BA (PEBA) a secreção de fármaco do sangue novamente no intestino tanto por meio de permeabilidade passiva, bem como mecanismos de transporte ativa mediados por efluxo e captação de transportadores que são expressos em células Caco-2. Os compostos são designados por classes permeabilidade/absorção por comparação das permeabilidades AB com as permeabilidades AB de compostos de referência com permeabilidade in vitro conhecida e absorção oral no humano. Permeabilidades idênticas ou similares em ambas as direções de transporte indicam a permeação passiva, pontos de permeabilidade vetorial para medicamentos de transporte ativo adicionais. PEBA maior do que PEAB sugere o envolvimento de um transportador de efluxo apical (como P-gp) e/ou transportador de captação basolateral; permeabilidade de PEAB maior do que PEBA sugere o envolvimento de um transportador de captação apical (como PepT1) e/ou transportador de efluxo basolateral (como MRP3). Transporte ativo é saturável dependentemente de concentração.

[00236] Células Caco-2 (1-2 * 105células/cm2de área) são semeadas em inserções de filtro (filtros Costar transwell de policarbonato ou PET, tamanho de poro 0,4 µm) e cultivadas (DMEM) durante 10 a 25 dias.

[00237] Os compostos são dissolvidos em solvente apropriado (como DMSO, soluções de matéria prima a 1-20 mM). As soluções de matéria prima são diluídas com tampão de HTP-4 (NaCl a 128,13 mM, KCl a 5,36 mM, MgSO4 a 1 mM, CaCl2 a 1,8 mM, NaHCO3 a 4,17 mM, Na2HPO4x7H2O a 1,19 mM, NaH2PO4xH2O a 0,41 mM, HEPES a 15 mM, glicose a 20 mM, pH 7,2) para preparar as soluções de transporte (tipicamente 10 µM de composto, DMSO final <= 0,5 %). A solução de transporte (TL) é aplicada ao lado doador apical ou basolateral para avaliar a permeabilidade de A-B ou B-A (3 réplicas de filtro), respecti-vamente. O lado receptor contém tampão de HTP-4 suplementado com 2% de BSA. As amostras são coletadas no início e término do ex-perimento do lado doador e em vários intervalos de tempo durante até 2 horas também do lado receptor para medição de concentração por LC-MS/MS ou contagem de cintilação. Os volumes de receptor de coleta são substituídos com solução de receptor fresca.

[00238] Os coeficientes de permeabilidade visíveis (PEAB e PEBA) de compostos selecionados no ensaio de transporte de fármaco de Caco-2 descritos acima são listados na tabela 11. TABELA 11

ENSAIO PARA DETERMINAÇÃO DE SOLUBILIDADE AQUOSA ("método de produtividade elevada")

[00239] A solubilidade aquosa de um composto é determinada comparando-se a quantidade dissolvida em tampão em tampão aquoso (contendo 2,5% de DMSO) para a quantidade dissolvida em uma solução de acetonitrila/água (1/1). Partindo de uma solução de matéria prima de DMSO a 10 mM, alíquotas são diluídas com acetonitrila/água (1/1) e tampão de McIlvaine pH 6,8, respectivamente. Após 24 horas de agitação, as soluções ou suspensões são filtradas e analisadas por LC-UV. A quantidade dissolvida em tampão é comparada com a quantidade dissolvida na solução de acetonitrila/água (1/1). A solubilidade é medida de 0,001 a 0,125 mg/ml em uma concentração de DMSO de 2,5%. Se mais do que 90 % do composto for dissolvido no tampão, o valor sera marcado com ">".

[00240] A solubilidade aquosa de compostos selecionados no ensaio de solubilidade descrita acima é listada na Tabela 12. TABELA 12

ENSAIO PARA DETERMINAÇÃO DE SOLUBILIDADE AQUOSA ("Método do frasco agitado")

[00241] Soluções saturadas são preparadas em placas de cavidade adicionando um volume apropriado de meios aquosos selecionados (tipicamente na faixa de 0,25 - 1,5 ml) em cada cavidade que contém uma quantidade conhecida de substância de fármaco sólido (tipicamente na faixa 0,5 - 5,0 mg). As cavidades são sacudidas ou agitadas durante um período de tempo pré-definido (tipicamente em uma faixa de 2 - 24 horas) e em seguida filtradas usando membranas de filtro apropriadas (tipicamente filtros de PTFE com tamanho de poro de 0,45 µm). A absorção do filtro é evitada descartando as primeiras poucas gotas de filtrado. A quantidade de substância de fármaco dissolvida é determinada por espectroscopia de UV ou por HPLC com detecção de UV. Além disso, o pH da solução saturada aquosa é medida usando um medidor do pH de eletrodo de vidro. Os exemplos na Tabela 12 exibem uma solubilidade de >0,01 mg/mL em pH 6,8 (tampão de McIl- vaine) neste ensaio de solubilidade.

ENSAIO PARA DETERMINAÇÃO DE INIBIÇÃO DE CITOCROMO P450 2C9

[00242] A inibição de hidroxilação catalisada por izoenzima citocro- ma P450 2C9 de Diclofenaco pelo composto de teste é ensaiado a 37°C com microssomas de fígado humano. Todos os ens aios são realizados em um sistema robótico em placas de 96 cavidades. O volume de incubação final contém tampão de TRIS (0,1 M), MgCl2 (5 mM), mi- crossomas de fígado humano (0,1 mg/ml), diclofenaco (10 µM) e o composto de teste em cinco concentrações diferentes ou nenhum con- trole (controle elevado) em duplicata (por exemplo, concentração mais elevada 10 a 50 µM com diluições de 1:4 seriais subsequentes). Após um curto período de pré-incubação, as reações são iniciadas com o cofator (NADPH, 1 mM) e interrompida por resfriamento da incubação para 8°C e subsequentemente por adição de um volume de acetonitri- la. Uma solução de padrão interno - geralmente o isótopo estável do metabólito formado - é adicionada após extinção das incubações. Ana- lito de área de pico (= metabólito formado) e o padrão interno são de-terminados por LC-MS/MS. O analito de relação de área de pico resul-tante para padrão interno nestas incubações é comparado a uma ativi-dade de controle que não contém nenhum composto. Dentro de cada um dos ciclos de ensaio, o IC50 de um inibidor de controle positivo (sul- fafenazol) é determinado. Valores IC50 experimentais são calculados por regressão de mínimo quadrado de acordo com a seguinte equação: % de atividade de controle = (100 % de atividade de contro- le/(1+(I/IC50)*S))-B (I = concentração de inibidor, S = fator de declividade, B = atividade antecedente)

[00243] Se a inibição da reação já for >50% na concentração mais baixa do composto de teste, o IC50 será designado "< concentração mais baixa testada" (geralmente <0,4 µM). Se a inibição da reação ainda for <50% na concentração mais elevada do composto de teste, o IC50 será designado "> concentração mais elevada testada"(geralmente>50 µM). Exemplo A.1A, Exemplo B.1.2B e Exemplo C.2A exibem valores IC50 > 50 µM neste ensaio.

ENSAIO PARA DETERMINAÇÃO DE INIBIÇÃO DE CITOCROMO P450 2C19

[00244] A inibição de hidroxilação catalisada por isoenzima de cito- cromo P450 2C219 de Mefentoína pelo composto de teste é ensaiada a 37°C com microssomas de fígado humano. Todos os e nsaios são realizados em um sistema robótico em placas de 96 cavidades. O volume de incubação final contém tampão de TRIS (0.1 M), MgCl2 (5 mM), microssomas de fígado humano (0,5 mg/ml), (S)-Mefenitoína (70 µM) e o composto de teste em cinco concentrações diferentes ou nenhum controle (controle elevado) em duplicata (por exemplo, concentração mais elevada 10-50 µM com diluições de 1:4 seriais subsequentes).Após um curto período de pré-incubação, as reações são iniciadas com o cofator (NADPH, 1 mM) e interrompida por resfriamento da incubação para 8°C e subsequentemente por adição de um volume de acetonitrila. Uma solução de padrão interno - geralmente o isótopo estável do metabólito formado - é adicionada após extinção das incubações. Analito de área de pico (= metabólito formado) e o padrão interno são determinados por LC-MS/MS. O analito de relação de área de pico resultante para padrão interno nestas incubações é comparado a uma atividade de controle que não contém nenhum composto. Dentro de cada um dos ciclos de ensaio, the IC50 de um inibidor de controle positivo (tranylcypromine) é determinada. Valores IC50 experimentais são calculados por regressão de mínimo quadrado de acordo com a seguinte equação: % de atividade de controle = (100 % de atividade de contro- le/(1+(I/IC50)*S))-B (I = concentração de inibidor, S = fator de declividade, B = atividade antecedente)

[00245] Se a inibição da reação já for >50% na concentração mais baixa do composto de teste, o IC50 será designado "<concentração mais baixa testada" (geralmente <0.4 µM). Se a inibição da reação ainda for <50% na concentração mais elevada do composto de teste, o IC50 será designado ">concentração mais elevada testada"(geralmente>50 µM). Exemplo A.1A, Exemplo B.1.2B e Exemplo C.2A exi- bem valores IC50 > 50 µM neste ensaio.

ENSAIO PARA DETERMINAÇÃO DE INIBIÇÃO DE CITOCROMO P450 2C8

[00246] A inibição de desetilação catalisada por isoenzima de cito- cromo P450 2C8 de Amodiaquina pelo composto de teste é ensaiada a 37°C com microssomas de fígado humano. Todos os e nsaios são realizados em um sistema robótico em placas de 96 cavidades. O volume de incubação final contém tampão de TRIS (0.1 M), MgCl2 (5 mM), microssomas de fígado humano (0,05 mg/ml), Amodiaquina (1 µM) e o composto de teste em cinco concentrações diferentes ou nenhum controle (controle elevado) em duplicata (por exemplo, concentração mais elevada 10-50 µM com diluições de 1:4 seriais subsequentes). Após um curto período de pré-incubação, as reações são iniciadas com o cofator (NADPH, 1mM) e interrompidas por resfriamento da incubação para 8°C e subsequentemente por adição de um volume de acetonitrila. Uma solução de padrão interno - geralmente o isótopo estável do metabólito formado - é adicionada após extinção das incubações. Analito de área de pico (=metabólito formado) e o padrão interno são determinados por LC-MS/MS. O analito de relação de área de pico resultante para padrão interno nestas incubações é comparado a uma atividade de controle que não contém nenhum composto. Dentro de cada um dos ciclos de ensaio, o IC50 de um inibidor de controle positivo (Montelucaste) é determinado. Valores IC50 experimentais são calculados por regressão de mínimo quadrado de acordo com a seguinte equação: % de atividade de controle = (100 % de atividade de contro- le/(1+(I/IC50)*S))-B (I = concentração de inibidor, S = fator de declividade, B = atividade antecedente)

[00247] Se a inibição da reação já for >50% na concentração mais baixa do composto de teste, o IC50 será designado "<concentração mais baixa testada" (geralmente <0.4 µM). Se a inibição da reação ainda for <50% na concentração mais elevada do composto de teste, o IC50 será designado "> concentração mais elevada testada" (geralmente >50 µM). Exemplo A.1A, Exemplo B.1.2B e Exemplo C.2A exibem valores IC50 > 50 µM neste ensaio.

ENSAIO PARA DETERMINAÇÃO DE INDUÇÃO DE CITOCROMO P450

[00248] Para avaliar a indução de enzima CYP3A4 metabolizante, células HepaRG® crioconservadas são semeadas em uma densidade de 1,0 x 105 por 96 cavidades. As células são deixadas equilibrar durante 72 horas antes da exposição de 10 µM de artigo teste durante 48 horas com renovação do artigo teste a cada 24 horas. Rifampicina de indutores de CYP3A4 fototípicos conhecida é usada como um controle positiva em uma concentração de 25 µM. Após 48 horas de exposição, o meio contendo o artigo teste é removido e as células foram lavadas com salina tamponada por fosfato (PBS) antes do isolamento de mRNA. Cálculos: Indução de duplicação = (Composto de mRNA de Enzima)/(Controle de Solvente de mRNA de enzima) Potência Indutora = (Composto de duplicação)/(Rifampicina de dupli- cação)*100

ENSAIO PARA DETERMINAÇÃO DE INIBIÇÃO DE hERG

[00249] A inibição do canal de potássio de hERG (gene relacionado a éter -a-go-go-humano) pode ser determinada como descrito em Rast, G., & Guth, B.D., Journal of Pharmacological and Toxicological- Methods (2014), http://dx.doi.Org/10.1016/j.vascn.2014.08.001.

[00250] A inibição de hERG de compostos selecionados neste ensaio de grampo de emplastro é listada na tabela 13. TABELA 13

COMBINAÇÕES

[00251] Os compostos de fórmula geral 1 podem ser usados sozinhos ou combinados com outras substâncias ativas de fórmula 1 de acordo com a invenção. Os compostos de fórmula geral 1 podem opcionalmente também ser combinados com outras substâncias farma- cologicamente ativas. Estas incluem, agonistas de ß2-adrenoceptor (longa e curta ação), anticolinérgicos (longa e curta ação), esteroides anti-inflamatórios (corticosteroides orais e tópicas), cromoglicato, me- tilxantina, glicocorticoide miméticos dissociados, inibidores de PDE3, inibidores de PDE4, inibidores de PDE7, antagonistas de LTD4, inibidores de EGFR, agonistas de dopamin, antagonistas de PAF, derivados de Lipoxina A4, moduladores de FPRL1, antagonistas de receptor de LTB4 (BLT1, BLT2), antagonistas de receptor de Histamina H1, antagonistas de receptor de Histamina H4, antagonistas de receptor de Histamina H1/H3 dual, inibidores de PI3 cinase, inibidores de tirosina cinase não receptoras como, por exemplo, LYN, LCK, SYK, ZAP-70, FYN, BTK ou ITK, inibidores de MAP cinases como, por exemplo p38, ERK1, ERK2, JNK1, JNK2, JNK3 ou SAP, inibidores da série de reação de sinalização de NF-KB como, por exemplo, inibidores de IKK2 cinase, inibidores de iNOS, inibidores de MRP4, inibidores de biossín- tese de leucotrieno como, por exemplo, inibidores de 5-Lipoxigenase (5-LO), inibidores de cPLA2, inibidores de Leucotrieno A4 Hidrolase ou inibidores de FLAP, inibidores de MMP9, inibidores de MMP12, agen-tesanti-inflamatórios não esteroidais (NSAIDs), inibidores de Catepsi- na C (ou DPPI / Dipeptidilaminopeptidase I), antagonistas de CRTH2, moduladores de receptor de DP1, antagonistas de de receptor de tromboxano, antagonistas de CCR3, antagonistas de CCR4, antagonistas de CCR1, antagonistas de CCR5, antagonistas de CCR6, antagonistas de CCR7, antagonistas de CCR8, antagonistas de CCR9, antagonistas de CCR30, antagonistas de CXCR3, antagonistas de CXCR4, antagonistas de CXCR2, antagonistas de CXCR1, antagonistas de CXCR5, antagonistas de CXCR6, antagonistas de CX3CR3, antagonistas de Neurocinina (NK1, NK2), moduladores de receptor de esingosina 1-fosfato, inibidores de esfingosina 1 fosfato liase, modula- dores de receptor de adenosina como, por exemplo, agonistas de A2a, moduladores de purinergicreceptores como, por exemplo, inibidores de P2X7, ativadores de Histona Desacetilase (HDAC), antagonistas Bra- dicinina (BK1, BK2), inibidores de TACE, moduladores de PPAR gama, inibidores de Rho-cinase, inibidores de enzima conversora de in- terleucina 1-beta (ICE), moduladores de receptor tipo dobre de sino (TLR), inibidores de HMG-CoA reductase, antagonistas de VLA-4, ini-bidores de ICAM-1, agonistas de SHIP, antagonistas de receptor de GABAa, inibidores de ENaC, inibidores de Prostasina, moduladores de receptores de melanocortina (MC1R, MC2R, MC3R, MC4R, MC5R), antagonistas de CGRP, antagonistas de Endotelina, antagonistas de TNFa, anticorpos anti-TNF, anticorpos anti-GM-CSF, anticorpos anti- CD46, anticorpos anti-IL-1, anticorpos anti-IL-2, anticorpos anti-IL-4, anticorpos anti-IL-5, anticorpos anti-IL-13, anticorpos anti-IL-4/IL-13, anticorpos anti-TSLP, anticorpos anti-OX40, mucorreguladores, agen-tesimunoterapêuticos, compostos contra inchaço das vias aéreas, compostos contra tosse, inibidores de VEGF, porém também combi-nações de duas ou três substâncias ativas.

[00252] São preferidos betamiméticos, anticolinérgicos, corticoste- roides, inibidores de PDE4, antagonistas de LTD4, inibidores de EGFR, inibidores de Catepsina C, inibidores de CRTH2, inibidores de 5-LO, antagonistas de receptor de Histamina e inibidores de SYK, es-pecialmente inibidores de Catepsina C, porém também combinações de duas ou mais substâncias ativas isto é: Betamiméticos com corticosteroides, inibidores de PDE4, inibidores de CRTH2 ou antagonistas de LTD4, • Anticolinérgicos com betamiméticos, corticosteroides, ini-bidores de PDE4, inibidores de CRTH2 ou antagonistas de LTD4, • Corticosteroides com inibidores de PDE4, inibidores de CRTH2 ou antagonistas de LTD4 • Inibidores de PDE4 com inibidores de CRTH2 ou antago-nistas de LTD4 • Inibidores de CRTH2 com antagonistas de LTD4.

COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS

[00253] Preparações adequadas para administração dos compostos de fórmula serão evidentes para aqueles com versalidade ordinária na técnica e incluem, por exemplo, comprimidos, pílulas, cápsulas, supo-sitórios, losangos, trociscos, soluções, xaropes, elixires, sachês, inje-táveis, inalativos, e pós etc.

[00254] Comprimidos adequados podem ser obtidos, por exemplo, misturando um ou mais compostos de acordo com a fórmula I com ex- cipientes conhecidos, por exemplo, diluentes inertes, veículos, desin- tegrantes, adjuvantes, tensoativos, aglutinantes e/ou lubrificantes. Os comprimidos podem também consistir em diversas camadas.

INDICAÇÕES

[00255] Os compostos da invenção e seus sais farmaceuticamente aceitável têm a atividade como produtos farmacêuticos, em particular como inibidores de elastase neutrófila, e desse modo, podem ser usados no tratamento de: 1. trato respiratório: doenças obstrutivas das vias aéreas incluindo: asma, incluindo brônquica, alérgica, intrínseca, extrínseca, induzida por exercício, induzida por fármaco (incluindo aspirina e induzida por NSAID) e asma induzida por poeira, ambas intermitentes e persistentes e de todas as gravidades, e outras causas de hipersensi- bilidade da via aérea; doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD); bronquite, incluindo infecciosa e bronquite eosinofílica; enfisema; defi-ciência de alfa 1-antitripsina; bronquietasia; fibrose cística; sarcoidose; pulmão de fazendeiro e doenças relacionadas; pneumonite por hiper- sensibilidade; fibrose pulmonar, incluindo alveolite fibrosante criptogê- nica, pneumonias intersticiais idiopáticas, terapia antineoplásica de complicação de fibrose e infecção crônica, incluindo tuberculose e as- pergilose e outras infecções fúngicas; complicações de transplante de pulmão; distúrbios vasculíticos e trombóticos da vasculature do pulmão, e hipertensão pulmonar; atividade antissussígena incluindo tratamento de tosse crônica associada com condições inflamatórias e se- cretórias das vias aéreas, e tosse iatrogênica; rinite aguda e crônica incluindo rinite medicamentosa, e rinite vasomotora; rinite alérgica perene e sazonal incluindo rinite nervosa (febre do feno); polipose nasal; infecção viral aguda incluindo o resfriado comum, e infecção devido ao vírus sincicial respiratório, influenza, coronavírus (incluindo SARS) e adenovírus; lesão pulmonar aguda; síndrome da angústia respiratória aguda; 2. pele: psoríase, dermatite atópica, dermatite de contato ou outras dermatoses eczematosas, e reações de hipersensibilidade do tipo retardada; fito- e fotodermatite; dermatite seborréica, dermatite herpetiforme, líquem plano, líquem escleroso e atrófico, pioderma gangrenoso, sarcoide de pele, lúpus eritematoso discoide, pênfigo, penfigoide, epidermólise bolhosa, urticária, angioedema, vasculite, eri- temas tóxicos, eosinofilia cutânea, alopécia areata, calvície de padrão masculina, síndrome de Sweet, síndrome Weber-Christian, eritema multiforme; celulite, tanto infecciosa quanto não infecciosa; paniculite; linfomas cutâneos, câncer de pele de não melanoma e outras lesões displásicas; distúrbios induzidos por fármaco incluindo erupções por fármacos fixos; 3. olhos: blefarite; conjuntivite, incluindo conjuntivite alérgica perene e vernal; irite; uveíte anterior e posterior; coroidite; distúrbios autoimunes, degenerativos ou inflamatórios afetando a retina; oftalmite incluindo oftalmite simpatética; sarcoidose; infecções incluindo virais, fúngicas, e bacterianas; 4. genitourinário: nefrite incluindo intersticial e glomerulo- nefrite; síndrome nefrótifca; cistite incluindo cistite aguda e crônica (in-tersticial) e úcelra de Hunner; uretrite aguda e crônica, prostatite, epi-didimite, ooforite e salpingite; vulvo-vaginite; doença de Peyronie; dis-função eréctil (tanto masculina quanto feminina); 5. rejeição a aloenxerto: aguda ou crônica após, por exemplo, transplantate de rim, coração, fígado, pulmão, medula óssea, pele ou cornea ou após transfusão de sangue; ou doença do enxerto versus hospedeiro crônica; 6. outros distúrbios autoimunes e alérgicos incluindo artrite reumatoide, síndrome do intestine irritável, lúpus eritematoso sistêmico, esclerose múltipla, tiroidite de Hashimoto, doença de Graves, doença de Addison, diabetes melito, púrpura trombocitopênica idiopática, fasciíte eosinofílica, síndrome de hiper IgE, síndrome antifosfolipídio e síndrome Sazary; 7. oncologia: tratamento de cânceres comuns incluindo tumors de próstata, mama, pulmão, ovariano, pancreático, intestino e cólon, estômago, pele e cérebro e malignidades afetando a medula óssea (incluindo as leucemias) e sistemas linfoproliferativos, tal como linfoma de Hodgkin e não Hodgkin; incluindo a prevenção e tratamento de dença metastática e recorrências de tumor, e síndromes paraneo- plásicos; e, 8. doenças infecciosas: doenças virais tais como verrugas genitais verrugas comuns, verrugas plantares, hepatite B, hepatite C, vírus do herpes simples, molusco contagioso, varíola, vírus da imuno-deficiência humana (HIV), vírus do papiloma humano (HPV), citomega- lovírus (CMV), vírus da varicela zóster (VZV), rinovírus, adenovírus, coronavírus, influenza, para-influenza; doenças bacterianas tais como tuberculose e mycobacterium avium, lepra; outras doenças infecciosas, tais como doenças fúngicas, clamídia, Cândida, aspergilo, meningite por cryptococcus, Pneumocystis carinii, criptosporidiose, histo- plasmose, toxoplasmose, infecção por tripanossoma e leishmaniase e, 9. outras doenças: lesão cerebral traumática, aneurisma aórtica abdominal

[00256] A presente invenção está direcionada aos compostos de fórmula geral 1 que são úteis na prevenção e/ou tratamento de uma doença e/ou condição em que a atividade de inibidores de elastase neutrófila é de benefício terapêutico, incluindo porém não limitado ao tratamento e/ou prevenção de asma e doenças alérgicas, doenças in-flamatóriasgastrointestinais, glomerulonefrite, doenças eosinofílicas, doença pulmonar obstrutiva crônica, infecção por micróbios patogênicos, artrite reumatoide, doenças neutrofílicas, fibrose cística (CF), fibrose não cística, fibrose pulmonar idiopática, bronquietasia, vasculite associada com ANCA, câncer pulmonar, bronquietasia por fibrose não cística, enfisema, bronquite crônica, lesão pulmonar aguda (ALI), sín- drome da angústia respiratória aguda (ARDS), hipertensão pulmonar, hipertensão arterial pulmonar (PAH), deficiência de alfa-1-antitripsina (AATD.), obesidade e inflamação relacionada, por exemplo, inflamação de tecido adiposo crônica, inflamação adiposa, inflamação induzida por dieta hiperlipídica, resistência à insulina, diabetes, fígado adiposo e esteatose hepática.

[00257] Uma correlação entre a atividade biológica e as indicações médicas é descrita na literatura, por exemplo, "Henriksen, P. A. Current Opinion in Hematology (2014), 21(1), 23-28"

[00258] Consequentemente, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula geral 1 como um medicamento.

[00259] Em um outro aspecto da presente invenção, a presente invenção refere-se aos métodos para o tratamento ou prevenção de doenças e condições acima mencionadas, cujo método compreende a administração de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral 1 a um ser humano.

[00260] Para o tratamento das doenças e condições acima descritas, uma dose terapeuticamente eficaz geralmente estará na faixa de cerca de 0,01 mg a cerca de 100 mg/kg de peso corporal por dosagem de um composto da invenção; preferivelmente, de cerca de 0,1 mg a cerca de 20 mg/kg de peso corporal por dosagem. Por exemplo, para administração a uma pessoa de 70 kg, a faixa de dosagem pode ser de cerca de 0,7 mg a cerca de 7000 mg por dosagem de um composto da invenção, preferivelmente de cerca de 7,0 mg a cerca de 1400 mg por dosagem. Algum grau de otimização de dose de rotina pode ser requerido para determinar um nível e padrão de dosagem ideal. O in-grediente ativo pode ser administrado de 1 a 6 vezes por dia.

[00261] A quantidade farmaceuticamente eficaz real ou dosagem terapêutica dependerá, certamente, dependerá de fatores conhecidos por aqueles versados na técnica tais como idade e peso do paciente, rotina de administração e gravidade de doença. Em qualquer caso, o ingrediente ativo será administrado em dosagens e de uma maneira que permite uma quantidade farmaceuticamente eficaz ser liberada com base na condição exclusiva dos pacientes. LISTA DE ABREVIAÇÕ

Claims (16)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula 1 e R3é CH3.; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é de fórmula 1.a: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é de fórmula 1.b: 1. b ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que é de fórmula 1.c: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica ções 1 a 4, caracterizado pelo fato de que a configuração de fórmula 1 é de fórmula 1’ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que é de fórmula 1.a’ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

7. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que é de fórmula 1.b’ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

8. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que é de fórmula 1.c’ ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

9. Composto de fórmula 1, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que é para uso como medicamento.

10. Composto de fórmula 1, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que é para uso como um medicamento para o tratamento de asma e doenças alérgicas, doenças inflamatórias gastrointestinais, glomerulonefrite, doenças eosinofílicas, doença pulmonar obstrutiva crônica, infecção por micróbios patogênicos e artrite reumatoide.

11. Composto de fórmula 1, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que é para uso como um medicamento para o tratamento de doenças neutrofílicas, fibrose cística (CF), fibrose não cística, fibrose pulmonar idiopática, bronquietasia, vasculite associada com ANCA, câncer pulmonar, bron- quietasia por fibrose não cística, enfisema, bronquite crônica, lesão pulmonar aguda (ALI), síndrome da angústia respiratória aguda (ARDS), hipertensão pulmonar, hipertensão arterial pulmonar (PAH) e deficiência de alfa-1-antitripsina (AATD).

12. Composto de fórmula 1, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que é para uso como um medicamento para o tratamento de obesidade e inflamação relacionada, resistência à insulina, diabetes, fígado adiposo e esteato- se hepática.

13. Composto de fórmula 1, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que é para uso como um medicamento para o tratamento de lesão cerebral traumática, aneurisma aórtico abdominal e doença do enxerto vs. hospedeiro (GvHD).

14. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que contém um ou mais compostos de fórmula 1, como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

15. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende, adicionalmente a um composto de fórmula 1, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, um composto far- maceuticamente ativo selecionado do grupo que consiste em betami- méticos, anticolinérgicos, corticosteroides, inibidores de PDE4, anta-gonistas de LTD4, inibidores de EGFR, inibidores de Catepsina C, ini-bidores de CRTH2, inibidores de 5-LO, antagonistas de receptor de Histamina e inibidores de SYK, porém também combinações de duas ou três substâncias ativas.

16. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que é na preparação de uma composição farmacêutica, combinação ou medicamento para: (i) tratamento ou prevenção de doenças em que os inibido- res de elastase neutrófila têm um benefício terapêutico; (ii) tratamento de asma e doenças alérgicas, doenças in-flamatóriasgastrointestinais, glomerulonefrite, doenças eosinofílicas, doença pulmonar obstrutiva crônica, infecção por micróbios patogênicos e artrite reumatoide; (iii) tratamento de doenças neutrofílicas, fibrose cística (CF), fibrose não cística, fibrose pulmonar idiopática, bronquietasia, vasculite associada com ANCA, câncer pulmonar, bronquietasia por fibrose não cística, enfisema, bronquite crônica, lesão pulmonar aguda (ALI), síndrome da angústia respiratória aguda (ARDS), hipertensão pulmonar, hipertensão arterial pulmonar (PAH) e deficiência de alfa-1- antitripsina (AATD); (iv) tratamento de obesidade e inflamação relacionada, re-sistência à insulina, diabetes, fígado adiposo e esteatose hepática; e/ou (v) tratamento de lesão cerebral traumática, aneurisma aór- tico abdominal e doença do enxerto vs. hospedeiro (GvHD).