BR112015011298B1

BR112015011298B1 - Inibidores de cotransportador 1 de glicose de sódio e composição farmacêutica que os compreende

Info

Publication number: BR112015011298B1
Application number: BR112015011298-6A
Authority: BR
Inventors: Kenneth Gordon Carson; Nicole Cathleen Goodwin; Bryce Alden Harrison; David Brent Rawlins; Eric Strobel; Brian Zambrowicz
Original assignee: Lexicon Pharmaceuticals, Inc
Priority date: 2012-11-20
Filing date: 2013-11-18
Publication date: 2021-12-14

Abstract

INIBIDORES DE COTRANSPORTADOR 1 DE GLICOSE DE SÓDIO. A presente invenção refere-se a inibidores de cotransportador 1 de glicose de sódio (SGLT1), composições que os compreendem, e métodos de seu emprego para tratar doenças e distúrbios tais como diabetes. Compostos particulares são da fórmula (I): (I) cujos vários substituintes estão definidos aqui.

Description

1. CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção refere-se a compostos que podem ser empregados para inibir cotransportador 1 de glicose de sódio (SGLT1), composições que os compreendem, e métodos de seu emprego.

2. ANTECEDENTES

[002] Diabetes melito do tipo 2 é uma doença crônica caracterizada por hiperglicemia causada por produção de glicose hepática, uma deficiência em secreção de insulina, e/ou resistência à insulina periférica. Em anos recentes, esforço considerável tem sido direcionado para a descoberta de maneiras de tratamento da doença. Um método relativamente novo é a inibição do cotransportador de glicose de sódio (SGLT), que reduz os níveis de glicose sanguínea por remoção da glicose da corrente sanguínea.

[003] Sob condições normais, a glicose plasmática é filtrada no glomérulo renal e em indivíduos saudáveis é quase completamente reabsorvido. Obermeier, M., e outros, Drug Metabolism Disposition 38(3):405-414, 406 (2010). Essa reabsorção é mediada por dois cotransportadores de glicose dependente de sódio: SGLT1 e SGLT2. SGLT1 é expresso no intestino, coração, e rim, enquanto SGLT2 é expresso principalmente no túbulo proximal do néfron. Id. Embora os compostos que inibem ambos os transportadores tenham sido descritos, a pesquisa tem focalizado amplamente na descoberta de inibidores de SGLT2 seletivos. Isto é devido, em parte, à descoberta de que um transportador de SGLT1 deficiente no intestino é responsável por alguns distúrbios de má absorção de glicose e galactose, e a crença em que a inibição de SGLT1 seria, por conseguinte, acompanhada por efeitos adversos inaceitáveis. Id. Por conseguinte, a maior parte dos inibidores de SGLT atualmente em testes clínicos, incluindo dapagliflozina, canagliflozina, e empagliflozina, são inibidores de SGLT2 seletivos.

[004] Recentes resultados de teste clínico sugerem, entretanto, que a inibição de SGLT1 pode fornecer benefícios que se extendem além daqueles fornecidos simplesmente pela inibição da reabsorção de glicose. Veja, por exemplo, Publicação de Pedido de Patente dos Estados Unidos N° US-2011-0218159. Em particular, acredita-se que a inibição de SGLT1 pode aumentar os níveis de peptídeo 1 semelhante ao glucagon (GLP-1). Veja, por exemplo, Moriya, R., e outros, Am J Physiol Endocrinol Metab 297: E1358-E1365 (2009). Vários fármacos para diabetes bem conhecidos, incluindo sitagliptina, vildagliptina e saxagliptina, agem inibindo dipeptidil peptidase IV (DPP-4), que é a enzima responsável pela degradação de GLP-1.

3. SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[005] Esta invenção é baseada na descoberta de novos e poten tes inibidores de cotransportador 1 de glicose de sódio (SGLT1). Inibidores particulares são inibidores seletivos de SGLT1. Inibidores particulares têm baixa exposição sistêmica.

[006] Esta invenção é direcionada, em parte, à composições que compreendem e métodos de emprego de compostos da fórmula:

[007] e sais, dímeros ou trímeros farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que: R1 é hidrogênio ou C1-10-alquila, C1-5- cicloalquila, ou heterociclo de 5 membros opcionalmente substituído, cuja substituição opcional é com um ou mais R1A; cada R1A é independentemente amino, éster, amida, tiol, ácido carboxílico, ciano, halo, hidroxila, ou C1-4-alcóxi, C1-5-cicloalquila, ou heterociclo de 5 membros opcionalmente substituído, cuja substituição opcional é com um ou mais R1B; cada R1B é independentemente C1-4-alquila, halo, ou hidroxi- la; n é 0, 1, ou 2; cada R2 é independentemente F ou OR2A, em que cada R2A é independentemente hidrogênio, C1-4-alquila, ou acila; cada R3 é independentemente halo, hidroxila, ou C1-10-alquila ou C1-10-alcóxi opcionalmente substituído, cuja substituição opcional é com um ou mais R3A; cada R3A é independentemente amino, éster, amida, tiol, ácido carboxílico, ciano, halo, hidroxila, ou C1-4-alcóxi, C1-5-cicloalquila, ou heterociclo de 5 membros opcionalmente substituído, cuja substituição opcional é com um ou mais R3B; cada R3B é independentemente C1-4-alquila, amino, ciano, halo, ou hidroxila; p é 0, 1, ou 2; cada R4 é independentemente R4A, -N(R4A)(R4B), -OR4A, -SR4A, -S(O)R4A, ou - S(O)2R4A; R4A é C4-20-alquila ou heteroalquila de 4 a 20 membros opcionalmente substituída, cuja substituição opcional é com um ou mais R4C, e que é opcionalmente ligado a outra porção de R4A para fornecer um dímero ou trímero; R4B é hidrogênio ou R4A; cada R4C é independentemente amino, amido, azo, carbonila, carboxila, ciano, formila, guanidino, halo, hidroxila, imido, imino, isotiocianato, nitrilo, nitro, nitroso, nitróxi, oxo, sulfanila, sulfinila, sulfonila, tial, tiocianato, tiona, tiou- reia, ureia, ou X1, X1-L1-X2, ou X1-L1-X2-L2-X3, em que cada um dentre X1, X2 e X3 é independentemente C1-4-alquila, C1-6-cicloalquila, hetero- ciclo de 5 ou 6 membros, ou arila opcionalmente substituída, cuja substituição opcional é com um ou mais R4D, e cada um dentre L1 e L2 é independentemente C1-6-alquila ou heteroalquila de 1 a 10 membros opcionalmente substituída, cuja substituição opcional é com um ou mais de R4E; cada R4D é independentemente R4E ou C1-6-alquila opcionalmente substituída com um ou mais de R4E; cada R4E é independentemente amino, amido, azo, carbonila, carboxila, ciano, formila, guani- dino, halo, hidroxila, imido, imino, isotiocianato, nitrilo, nitro, nitroso, nitróxi, oxo, sulfanila, sulfinila, sulfonila, tial, tiocianato, tiona, ou ureia; e m é 1, 2 ou 3.

[008] Compostos particulares são da fórmula:

[009] Alguns são da fórmula:

[0010] Esta invenção é também direcionada a composições far macêuticas que compreendem os compostos descritos aqui e métodos de seu emprego para tratar e/ou controlar doenças e distúrbios cardiovasculares, doenças e distúrbios metabólicos, doenças e distúrbios do intestino, e certos tipos de câncer.

4. Breve Descrição das Figuras

[0011] Certos aspectos desta invenção podem ser entendidos em relação às figuras.

[0012] Figura 1A mostra o efeito de cinco compostos da invenção, administrados a uma dose de 1,0 mg/kg ("mpk") uma vez por dia durante quatro dias, sobre os níveis de glicose sanguínea de camundongos C57/Blk6 machos de 18 semanas de idade depois de serem alimentados com a refeição contendo glicose seis horas após a dose final. Áreas sob as curvas para cada animal no experimento são mostradas na Figura 1B.

[0013] Figura 2 mostra o efeito dos compostos sobre tGLP-1 plasmático, comparados ao veículo, para cada camundongo.

[0014] Figura 3 mostra o efeito dos compostos sobre a glicose cecal de camundongos.

[0015] Figura 4 mostra a redução dependente da dose na excursão da glicose na recepção de um desafio com glicose administrado 15 horas após a dosagem de um composto da invenção. O composto foi administrado diariamente durante 22 dias a camundongos KKay machos de 12 semanas de idade mantidos em uma dieta rica em gordura a 45%.

[0016] Figura 5A mostra o efeito dos compostos sobre os níveis de HbA1c de camundongos depois de 26 dias da dosagem. Figura 5B mostra a mudança nos níveis de HbA1c de camundongos entre os dias 0 e 27.

[0017] Figura 6 mostra o efeito dos compostos sobre o tGLP-1 pós-prandial de camundongos após 29 dias de dosagem.

5. DESCRIÇÃO DETALHADA

[0018] Esta invenção é baseada na descoberta de novos e poten tes inibidores de cotransportador 1 de glicose de sódio (SGLT1).

6. DEFINIÇÕES

[0019] A menos que indicado de outra forma, o termo "alquila" significa a hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificado tendo de 1 a 20 (por exemplo, 1 a 10 ou 1 a 4) átomos de carbono. Porções de alquila tendo de 1 a 4 carbons são referidos como "alquila inferior". Exemplos de grupos alquila incluem, mas não estão limitados a, metila, etila, propila, isopropila, n-butila, t-butila, isobutila, pentila, hexila, isoexila, heptila, 4,4-dimetilpentila, 2,2,4-trimetilpentila, nonila, decila, undecila e dodecila. Porções de cicloalquila podem ser monocíclicas ou multicíclicas, e exemplos incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, e adamantila. Exemplos adicionais de porções de alquila têm porções lineares, ramificados e/ou cíclicos (por exemplo, 1-etil-4-metil-ciclo-hexila). O termo "alquila" inclui hidrocarbonetos saturados assim como porções de alquenila e alquinila.

[0020] A menos que indicado de outra forma, o termo "arila" significa um anel aromático ou um sistema de anel aromático ou parcialmente aromático composto de átomos de carbono e hidrogênio. Uma porção de arila pode compreender múltiplos anéis ligados ou fundidos entre si. Porções de arila particulares compreendem de seis a doze átomos de carbono em seus anéis, e são referidas como "C6-12- arila". Exemplos de porções de arila incluem antracenila, azulenila, bifenila, fluorenila, indano, indenila, naftila, fenantrenila, fenila, 1,2,3,4- tetra-hidro-naftaleno, e tolila.

[0021] A menos que indicado de outra forma, os termos "halogênio" e "halo" abrangem flúor, cloro, bromo, e iodo.

[0022] A menos que indicado de outra forma, o termo "heteroalquila" refere-se a uma porção de alquila em que pelo menos um de seus átomos de carbono foi substituído com um heteroátomo (por exemplo, N, O ou S). Porções de heteroalquila particulares são de 1 a 4 membros, de 1 a 10 membros e de 4 a 20 membros, em que o número de "membros" é o número de carbonos ou heteroátomos compondo a cadeia (neste caso, 1 a 4, 1 a 10, ou 4 a 20, respectivamente). Exemplos compreendem porções de acetato, amina, amida, e cetona.

[0023] A menos que indicado de outra forma, o termo "heteroarila" significa uma porção de arila em que pelo menos um de seus átomos de carbono foi substituído com um heteroátomo (por exemplo, N, O ou S). Exemplos incluem acridinila, benzimidazolila, benzofuranila, benzoisotiazolila, benzoisoxazolila, benzoquinazolinila, benzotiazolila, benzoxazolila, furila, imidazolila, indolila, isotiazolila, isoxazolila, oxadiazolila, oxazolila, ftalazinila, pirazinila, pirazolila, piridazinila, piridila, pirimidinila, pirimidila, pirrolila, quinazolinila, quinolinila, tetrazolila, tiazolila, e triazinila.

[0024] A menos que indicado de outra forma, o termo "heterociclo" refere-se a um anel ou sistema de anel monocíclico ou policíclico aromático, parcialmente aromático ou não aromático compreendido de carbono, hidrogênio e pelo menos um heteroátomo (por exemplo, N, O ou S). Um heterociclo pode compreender múltiplos (isto é, dois ou mais) anéis fundidos ou ligados entre si. Heterociclos incluem heteroarilas. Exemplos incluem benzo[1,3]dioxolila, 2,3-di-hidro- benzo[1,4]dioxinila, cinolinila, furanila, hidantoinila, morfolinila, oxetanila, oxiranila, piperazinila, piperidinila, pirrolidinonila, pirrolidinila, tetra-hidrofuranila, tetra-hidropiranila, tetra-hidropiridinila, tetra- hidropirimidinila, tetra-hidrotiofenila, tetra-hidrotiopiranila e valerolactamila.

[0025] A menos que indicado de outra forma, a expressão "de ação local" refere-se a compostos que têm baixa exposição sistêmica. Compostos de ação local particulares têm uma concentração plasmática máxima (Cmax) de menos de 250, 100, 50, ou 10 nM quando administrados oralmente a uma dose de 10 mg/kg a um camundongo, rato ou ser humano. A exposição sistêmica (por exemplo, Cmax) pode ser medida através de métodos bem conhecidos na técnica, incluindo cromatografia líquida/espectrometria de massa.

[0026] A menos que indicado de outra forma, os termos "controle", "controlando" e "controle" abrangem prevenção da recorrência da doença ou distúrbio especificado em um paciente que já sofreu da doença ou distúrbio, e/ou prolongamento do tempo que um paciente que sofreu da doença ou distúrbio permanece em remissão. Os termos abrangem modulação do limiar, desenvolvimento e/ou duração da doença ou distúrbio, ou mudança da maneira que um paciente responde à doença ou distúrbio.

[0027] A menos que indicado de outra forma, a expressão "sais farmaceuticamente aceitáveis" refere-se a sais preparados de ácidos ou bases não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis incluindo ácidos e bases inorgânicos e ácidos e bases orgânicos. Adequados sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, sais metálicos produzidos de alumínio, cálcio, lítio, magnésio, potássio, sódio e zinco ou sais orgânicos produzidos de lisina, N,N’-dibenziletilenodiamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilenodiamina, meglumina (N-metilglicamina) e procaína. Adequados ácidos não tóxicos incluem, mas não estão limitados a, ácidos inorgânicos e orgânicos tais como ácido acético, algínico, antranílico, benzenossulfônico, benzoico, canforsulfônico, cítrico, etenossulfônico, fórmico, fumárico, furoico, galacturônico, glicônico, glicurônico, glutâmico, glicólico, bromídrico, clorídrico, isetiônico, lático, maleico, málico, mandélico, metanossulfônico, múcico, nítrico, pamoico, pantotênico, fenilacético, fosfórico, propiônico, salicílico, esteárico, sucínico, sulfanílico, sulfúrico, tartárico, e p-toluenossulfônico. Ácidos não tóxicos específicos incluem ácidos clorídricos, bromídricos, fosfóricos, sulfúricos, e metanossulfônicos. Exemplos de sais específicos, por conseguinte, incluem sais de cloridrato e mesilato. Outros são bem conhecidos na técnica. Veja, por exemplo, Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a ed. (Mack Publishing, Easton PA: 1990) e Remington: The Science and Practice of Farmácia, 19a ed. (Mack Publishing, Easton PA: 1995).

[0028] A menos que indicado de outra forma, os termos "prevenir", "prevenindo" e "prevenção" contemplam uma ação que ocorre antes que um paciente comece a sofrer da doença ou distúrbio especificado, que inibe ou reduz a gravidade da doença ou distúrbio. Em outras palavras, os termos abrangem profilaxia.

[0029] A menos que indicado de outra forma, uma "quantidade profilaticamente eficaz" de um composto é uma quantidade suficiente para prevenir uma doença ou condição, ou um ou mais sintomas associados com a doença ou condição, ou prevenir sua recorrência. Uma "quantidade profilaticamente eficaz" de um composto significa uma quantidade de agente terapêutico, sozinho ou em combinação com outros agentes, que fornece um benefício profilático na prevenção da doença. A expressão "quantidade profilaticamente eficaz" pode abranger uma quantidade que melhora a profilaxia global ou realça a eficácia profilática de outro agente profilático.

[0030] A menos que indicado de outra forma, a expressão "IC50 de SGLT1" é o IC50 de um composto determinado empregando-se o ensaio de inibição de SGLT1 humano in vitro descrito nos Exemplos, a seguir.

[0031] A menos que indicado de outra forma, a expressão "inibidor de SGLT1" refere-se a um composto que tem um IC50 de SGLT1 de menos de 100 nM. Inibidores particulares de SGLT1 têm um IC50 de SGLT1 de menos de 50, 25 ou 10 nM.

[0032] A menos que indicado de outra forma, a expressão "IC50 de SGLT2" é o IC50 de um composto determinado empregando-se o ensaio de inibição de SGLT2 humano in vitro descrito nos Exemplos, a seguir.

[0033] A menos que indicado de outra forma, o termo "substituído", quando empregado para descrever uma estrutura ou porção química, refere-se a um derivado daquela estrutura ou porção em que um ou mais de seus átomos de hidrogênio é substituído com um átomo, porção química ou grupo funcional tal como, mas não limitado a, álcool, aldeído, alcóxi, alcanoilóxi, alcoxicarbonila, alquenila, alquila (por exemplo, metila, etila, propila, t-butila), alquinila, alquilcarbonilóxi (-OC(O)alquila), amida (-C(O)NH-alquil- ou - alquilNHC(O)alquila), amidinila (-C(NH)NH-alquila ou -C(NR)NH2), amina (primária, secundária e terciária tal como alquilamino, arilamino, arilalquilamino), aroíla, arila, arilóxi, azo, carbamoíla (-NHC(O)O-alquil- ou -OC(O)NH-alquil), carbamila (por exemplo, CONH2, assim como CONH-alquila, CONH-arila, e CONH-arilalquila), carbonila, carboxila, ácido carboxílico, anidrido de ácido carboxílico, cloreto de ácido carboxílico, ciano, éster, epóxido, éter (por exemplo, metóxi, etóxi), guanidino, halo, haloalquila (por exemplo, -CCl3, -CF3, -C(CF3)3), heteroalquila, hemiacetal, imina (primária e secundária), isocianato, isotiocianato, cetona, nitrilo, nitro, oxigênio (isto é, para fornecer um grupo oxo), fosfodiéster, sulfeto, sulfonamido (por exemplo, SO2NH2), sulfona, sulfonila (incluindo alquilsulfonila, arilsulfonila e arilalquilsulfonila), sulfóxido, tiol (por exemplo, sulfidrila, tioéter) e ureia (-NHCONH-alquil-). Em uma particular modalidade, o termo substituído refere-se a um derivado daquela estrutura ou porção em que um ou mais de seus átomos de hidrogênio é substituído com álcool, alcóxi, alquila (por exemplo, metila, etila, propila, t-butila), amida (-C(O)NH- alquil- ou -alquilNHC(O)alquila), amidinila (-C(NH)NH-alquila ou - C(NR)NH2), amina (primária, secundária e terciária tal como alquilamino, arilamino, arilalquilamino), arila, carbamoíla (-NHC(O)O- alquil- ou -OC(O)NH-alquila), carbamila (por exemplo, CONH2, assim como CONH-alquila, CONH-arila, e CONH-arilalquila), halo, haloalquila (por exemplo, -CCl3, -CF3, -C(CF3)3), heteroalquila, imina (primária e secundária), isocianato, isotiocianato, tiol (por exemplo, sulfidrila, tioéter) ou ureia (-NHCONH-alquil-).

[0034] A menos que indicado de outra forma, uma "quantidade terapeuticamente eficaz" de um composto é uma quantidade suficiente para fornecer um benefício terapêutico no tratamento ou controle de uma doença ou condição, ou para retardar ou minimizar um ou mais sintomas associados com a doença ou condição. Uma "quantidade terapeuticamente eficaz" de um composto significa uma quantidade de agente terapêutico, sozinho ou em combinação com outras terapias, que fornece um benefício terapêutico no tratamento ou controle da doença ou condição. A expressão "quantidade terapeuticamente eficaz" pode abranger uma quantidade que melhora a terapia global, reduz ou evita sintomas ou causas de uma doença ou condição, ou realça a eficácia terapêutica de outro agente terapêutico.

[0035] A menos que indicado de outra forma, os termos "tratar", "tratando" e "tratamento" contemplam uma ação que ocorre enquanto um paciente está sofrendo da doença ou distúrbio especificado, que reduz a gravidade da doença ou distúrbio, ou retarda ou reduz a progressão da doença ou distúrbio.

[0036] A menos que indicado de outra forma, o termo "incluem" tem o mesmo significado que "incluem, mas não estão limitados a," e o termo "inclui" tem o mesmo significado que "inclui, mas não está limitado a". Similarmente, a expressão "tal como" tem o mesmo significado que a expressão "tal como, mas não limitado a".

[0037] A menos que indicado de outra forma, um ou mais adjetivos imediatamente precedendo uma série de substantivos deve ser interpretado como SE aplicando a cada um dos substantivos. Por exemplo, a frase "alquila, arila, ou heteroarila opcionalmente substituída" tem o mesmo significado que "alquila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, ou heteroarila opcionalmente substituída".

[0038] Deve ser observado que uma porção química que faz parte de um composto maior pode ser descrita aqui se empregando um nome comumente de acordo com ela quando ela existe como uma única molécula ou um nome comumente de acordo com seu radical. Por exemplo, os termos "piridina" e "piridila" estão de acordo com o mesmo significado quando empregados para descrever uma porção ligada a outras porções químicas. Por conseguinte, as duas frases "XOH, em que X é piridila" e "XOH, em que X é piridina" estão de acordo com o mesmo significado, e abrangem os compostos piridin-2- ol, piridin-3-ol e piridin-4-ol.

[0039] Também deve ser observado que se a estereoquímica de uma estrutura ou uma porção de uma estrutura não é indicada com, por exemplo, linhas em negrito ou tracejadas, a estrutura ou a porção da estrutura deve ser interpretada como abrangendo todos os estereoisômeros desta. Além disso, qualquer átomo mostrado em um desenho com valências insatisfeitas é assumido como sendo ligado a suficientes átomos de hidrogênio para satisfazer as valências. Além disso, ligações químicas representadas com uma linha sólida paralela a uma linha tracejada abrangem tanto a ligação única quanto a dupla (por exemplo, aromática), se as valências permitirem. 7. Compostos

[0040] Esta invenção é direcionada, em parte, às composições que compreendem e métodos de emprego de compostos da fórmula:

[0041] e sais, dímeros ou trímeros farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que: R1 é hidrogênio ou C1-10-alquila, C1-5- cicloalquila, ou heterociclo de 5 membros opcionalmente substituído, cuja substituição opcional é com um ou mais R1A; cada R1A é independentemente amino, éster, amida, tiol, ácido carboxílico, ciano, halo, hidroxila, ou C1-4-alcóxi, C1-5-cicloalquila, ou heterociclo de 5 membros opcionalmente substituído, cuja substituição opcional é com um ou mais R1B; cada R1B é independentemente C1-4-alquila, halo, ou hidroxila; n é 0, 1, ou 2; cada R2 é independentemente F ou OR2A, em que cada R2A é independentemente hidrogênio, C1-4-alquila, ou acila; cada R3 é independentemente halo, hidroxila, ou C1-10-alquila ou C1-10- alcóxi opcionalmente substituído, cuja substituição opcional é com um ou mais R3A; cada R3A é independentemente amino, éster, amida, tiol, ácido carboxílico, ciano, halo, hidroxila, ou C1-4-alcóxi, C1-5-cicloalquila, ou heterociclo de 5 membros opcionalmente substituído, cuja substituição opcional é com um ou mais R3B; cada R3B é independentemente C1-4-alquila, amino, ciano, halo, ou hidroxila; p é 0, 1, ou 2; cada R4 é independentemente R4A, -N(R4A)(R4B), -OR4A, - SR4A, -S(O)R4A, ou -S(O)2R4A; R4A é C4-20-alquila ou heteroalquila de 4 a 20 membros opcionalmente substituída, cuja substituição opcional é com um ou mais R4C, e que é opcionalmente ligado a outra porção de R4A para fornecer um dímero ou trímero; R4B é hidrogênio ou R4A; cada R4C é independentemente amino, amido, azo, carbonila, carboxila, ciano, formila, guanidino, halo, hidroxila, imido, imino, isotiocianato, nitrilo, nitro, nitroso, nitróxi, oxo, sulfanila, sulfinila, sulfonila, tial, tiocianato, tiona, tioureia, ureia, ou X1, X1-L1-X2, ou X1-L1- X2-L2-X3, em que cada um dentre X1, X2 e X3 é independentemente C1-4-alquila, C1-6-cicloalquila, heterociclo de 5 ou 6 membros, ou arila opcionalmente substituída, cuja substituição opcional é com um ou mais R4D, e cada um dentre L1 e L2 é independentemente C1-6-alquila ou heteroalquila de 1 a 10 membros opcionalmente substituída, cuja substituição opcional é com um ou mais de R4E; cada R4D é independentemente R4E ou C1-6-alquila opcionalmente substituída com um ou mais de R4E; cada R4E é independentemente amino, amido, azo, carbonila, carboxila, ciano, formila, guanidino, halo, hidroxila, imido, imino, isotiocianato, nitrilo, nitro, nitroso, nitróxi, oxo, sulfanila, sulfinila, sulfonila, tial, tiocianato, tiona, ou ureia; e m é 1, 2 ou 3.

[0042] Uma modalidade da invenção abrange compostos da fórmula:

[0043] e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Compos tos particulares são da fórmula:

[0044] Referindo-se às fórmulas mostradas aqui, particulares compostos da invenção são monômeros.

[0045] Referindo-se às fórmulas mostradas aqui, em particulares compostos da invenção, R1 é C1-4-alquila opcionalmente substituída (por exemplo, metila, etila, propila).

[0046] Referindo-se às fórmulas mostradas aqui, em particulares compostos da invenção, n é 0. Em outros, n é 1. Em outros, n é 2.

[0047] Referindo-se às fórmulas mostradas aqui, em particulares compostos da invenção, R2 é OR2A. Em uma modalidade, pelo menos um R2A é hidrogênio. Em uma modalidade, pelo menos um R2A é acila.

[0048] Referindo-se às fórmulas mostradas aqui, em particulares compostos da invenção, R3 é C1-4-alquila opcionalmente substituída (por exemplo, metila, etila, propila). Em outros, R3 é halo (por exemplo, cloro). Em outros, R3 é C1-4-alcóxi opcionalmente substituído.

[0049] Referindo-se às fórmulas mostradas aqui, em particulares compostos da invenção, p é 1.

[0050] Referindo-se às fórmulas mostradas aqui, em particulares compostos da invenção, R4 é R4A. Em outros, R4 é -OR4A. Em uma modalidade, R4A é C4-10-alquila opcionalmente substituída. Em outra, R4A é heteroalquila de 4 a 10 membros opcionalmente substituída. Em modalidades particulares da invenção, R4A é: -Ci—io-alquil-N(R4c)2; -C1- io-alquil-N(R4c)C(O)R4c; -C1-10-alquil-C(O)N(R4C)2; -C1-w-alquil- C(O)N(R4C)-C0-6-alquil-C(O)R4C; -C1-w-alquil-C(O)N(R4C)-C0-6-alquil- C(O)N(R4C)2; -C1-10-alquil-N(R4C)C(O)-C0-6-alquil-N(R4C)2; ou -C1-10- alquil-N(R4C)C(O)-C0-6-alquil-N(R4C)C(O)R4C.

[0051] Particulares compostos da invenção são inibidores de SGLT1, e têm um IC50 de SGLT1 de menos de 50, 25 ou 10 nM.

[0052] Particulares compostos da invenção agem localmente no intestino, e têm baixa exposição sistêmica. A baixa exposição sistêmica pode fornecer benefícios incluindo menos efeitos adversos fora do alvo e reduzida inibição de SGLT2.

[0053] Exemplos de baixa exposição sistêmica incluem uma concentração máxima (Cmax) de menos de 3000 nM quando administrados oralmente a camundongos a uma dose de 150 mg/kg; uma Cmax de menos de 500 nM quando administrados oralmente a camundongos a uma dose de 50 mg/kg; ou uma Cmax de menos de 100 nM quando administrados oralmente a camundongos a uma dose de 15 mg/kg. Em uma particular modalidade da invenção, um composto da invenção tem uma Cmax de plasma de menos de 250, 100, 50, ou 10 nM quando administrados oralmente a uma dose de 10 mg/kg a um camundongo, rato ou ser humano. A exposição é determinada por medição do conteúdo de fármaco plasmático empregando-se cromatografia líquida - espectrometria de massa, uma técnica bem conhecida na arte. 8. Síntese

[0054] Os compostos da invenção podem ser preparados através de métodos conhecidos na técnica, através dos métodos gerais e específicos descritos aqui, e por adaptação ou modificação destes métodos, que podem ser facilmente executados por aqueles de ordinária versatilidade na técnica.

[0055] O esquema 1 representa um método geral tal como aplica do a um subgrupo particular de compostos da invenção. Esquema 1

[0056] Outro método geral é representado pelo Esquema 2: Esquema 2

[0057] Referindo-se aos esquemas 1 e 2, um procedimento geral para a reação de Heck de um cloreto de arila é mostrado abaixo, em relação a um específico composto descrito nos Exemplos:

[0058] Aqui, um frasco de micro-ondas é carregado com triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-clorobenzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio) tetra- hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (7, 1,0 equivalente), substrato de olefina de Heck (3,0 equivalentes), Pd2dba3 (0,2 equivalente), tetrafluoroborato de tri(terc-butil)fosfônio (0,8 equivalente), diciclo-hexilmetilamina (3,0 equiv), e N-metilpirrolidinona (0,1 M). A reação é aquecida em um micro-ondas a 160°C durante 20 minutos. A reação é filtrada sobre Celita com EtOAc excessivo. A camada orgânica é lavada com H2O, NaHSO4 aquoso saturado, e salmoura. Ela é secada com MgSO4 e concentrada a vácuo. A cromatografia rápida fornece o aduzido de Heck.

[0059] Um procedimento geral para a alquilação de um fenol é mostrado abaixo, em relação a um específico composto descrito nos Exemplos:

[0060] Aqui, a uma mistura de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2- (3-(4-hidroxibenzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5- tri-ila (33, 1 equivalente) e K2CO3 (5 equivalentes) em DMF sob nitrogênio é adicionado haleto de alquila (1,5 equivalentes). A reação é agitada durante a noite a temperatura ambiente, em seguida diluída com Et2O. A camada orgânica é lavada com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo. O resíduo é purificado através de cromatografia rápida em sílica-gel.

[0061] Um procedimento geral para acoplamento de amida de HATU é mostrado abaixo:

[0062] Aqui, substrato de ácido carboxílico (1 equivalente), amina (1,5 equivalentes), HATU (1,2 equivalentes), e DIPEA (3 equivalentes) são combinados em CH3CN (0,2 M) e agitados durante 1-16 horas a temperatura ambiente. A reação é extinguida com NaHCO3 aquoso saturado e extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com salmoura, secadas com MgSO4, filtradas, e concentradas a vácuo. O resíduo é purificado através de HPLC preparativa para fornecer o composto desejado após a liofilização.

[0063] Um procedimento geral para remoção nucleofílica de amina de um mesilato de alquila é mostrado abaixo:

[0064] Aqui, amina (2,5 equivalentes), iodeto de sódio catalítico, e mesilato de alquila (1,0 equivalente) são aquecidos para 80°C em iso- propanol/CH3CN (1:1 v:v). Em completa conversão, a reação é resfriada para a temperatura ambiente, diluída com MeOH, e metóxido de sódio é adicionado. A desproteção de acetato é tipicamente concluída em 30 minutos. Os voláteis são removidos a vácuo e o resíduo cru é purificado através de HPLC preparativa para fornecer o composto desejado após a liofilização.

[0065] Um procedimento geral para a formação de ureia a partir de amina primária é mostrado abaixo:

[0066] Aqui, a uma solução de amina de alquila (1 equivalente) e cloroformiato de 4-nitrofenila (1,2 equivalentes) em CH2Cl2 é adicionado trietilamina (1,4 equivalentes). A reação é agitada durante 4 horas, e em seguida amina (R2NH, 1,4 equivalentes) e DIPEA (1,5 equivalen tes) são adicionados. A reação é agitada durante 90 minutos, em seguida diluída com EtOAc, lavada com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo. O resíduo cru é diluído com MeOH, e metóxido de sódio foi adicionado. A desproteção de acetato é tipicamente concluída em 30 minutos. Os voláteis são removidos a vácuo e o resíduo cru é purificado através de HPLC preparativa para fornecer o composto desejado após a liofilização.

[0067] Um procedimento geral para formação de guanidina a partir de amina primária é mostrado abaixo:

[0068] Aqui, a uma solução de amina de alquila (1 equivalente; 0,090 mmol) e nitrato de 3,5-dimetil-1H-pirazol-1-carboximidamida (3,6 equivalentes) em CH3CN é adicionado DIPEA (4 equivalentes). A reação é aquecida a 70°C durante 2 horas, em seguida resfriada para a temperatura ambiente e concentrada a vácuo. O resíduo é dissolvido em MeOH e tratado com metóxido de sódio durante 1 hora. A reação é concentrada a vácuo, e o resíduo purificado através de HPLC preparativa para fornecer o composto desejado após a liofilização. 9. Métodos de Emprego

[0069] Esta invenção abrange métodos de tratamento ou controle de doenças e distúrbios cardiovasculares, doenças e distúrbios metabólicos, doenças e distúrbios do intestino, e certos tipos de câncer.

[0070] Uma modalidade da invenção abrange métodos de trata mento de uma doença ou distúrbio cardiovascular ou metabólico, os quais compreendem administrar a um paciente com necessidade dos mesmos uma quantidade segura e eficaz de um inibidor de SGLT1 da invenção (isto é, um composto descrito neste). Doenças e distúrbios cardiovasculares particulares incluem aterosclerose, doença cardio vascular, insuficiência cardíaca congestiva, diabetes (Tipo 1 e 2), distúrbios associados com hemoconcentração (por exemplo, hemocroma- tose, policitemia vera), hiperglicemia, hipertensão, hipomagnesemia, hiponatremia, distúrbios lipídicos, obesidade, insuficiência renal (por exemplo, insuficiência renal de fase 1, 2 ou 3), e Síndrome X. Pacientes particulares sofrem de, ou estão correndo risco de sofrerem de diabetes melito do tipo 2.

[0071] Outra modalidade da invenção abrange métodos de trata mento ou controle de síndrome do intestino irritável com constipação predominante (IBS-C) ou constipação crônica em um paciente, os quais compreendem administrar a um paciente com necessidade dos mesmos uma quantidade segura e eficaz de um inibidor de SGLT1 da invenção.

[0072] Outra modalidade da invenção abrange métodos de trata mento ou controle de câncer em um paciente, os quais compreendem administrar a um paciente com necessidade dos mesmos uma quantidade segura e eficaz de um inibidor de SGLT1 da invenção. Tipos particulares de câncer são aqueles em que as células cancerosas exibem expressão de gene de SGLT realçada. Veja, por exemplo, Calvo, M.B., e outros, Int. J. Endocrinology, vol. 2010, artigo ID 205357. Exemplos incluem câncer pancreático e câncer do pulmão.

[0073] Em certas modalidades da invenção, um composto da in venção é administrado adjuntivamente com outro fármaco ou ingrediente farmacologicamente ativo ("agente terapêutico"). No tratamento de uma doença ou distúrbio cardiovascular ou metabólico, exemplos de segundos agentes terapêuticos incluem aqueles conhecidos como sendo úteis em seu tratamento, tais como agentes antidiabéticos; agentes anti-hiperglicêmicos; agentes de redução de lipídeos/ hipolipi- dêmicos; agentes antiobesidade; agentes anti-hipertensivos e supressores do apetite.

[0074] Exemplos de agentes antidiabéticos incluem bisguanidas (por exemplo, metformina, fenformina), inibidores de glicosidase (por exemplo, acarbose, miglitol), insulinas (incluindo secretagogos de insulina e sensibilizadores à insulina), meglitinidas (por exemplo, repaglini- da), sulfonilureias (por exemplo, glimepirida, gliburida, gliclazida, clor- propamida, e glipizida), combinaçãos de biguanida/gliburida (por exemplo, Glucovance), tiazolidinedionas (por exemplo, troglitazona, rosiglitazona, e pioglitazona), agonistas de PPAR-alfa, agonistas de PPAR-gama, agonistas duais de PPAR alfa/gama, inibidores de glico- gênio fosforilase, inibidores de proteína ligadora de ácidos graxos (aP2), peptídeo 1 semelhante ao glucagon (GLP-1) ou outros agonis- tas do receptor de GLP-1, e inibidores de dipeptidil peptidase IV (DPP- 4). Exemplos de meglitinidas incluem nateglinida (Novartis) e KAD1229 (PF/Kissei).

[0075] Exemplos de tiazolidinedionas incluem MCC-555 da Mitsu bishi (descrito na Patente dos Estados Unidos N° 5.594.016), GL- 262570 da Glaxo-Welcome, englitazona (CP-68722, Pfizer), darglita- zona (CP-86325, Pfizer, isaglitazona (MIT/J&J), JTT-501 (JPNT/P&U), L-895645 (Merck), R-119702 (Sankyo/WL), NN-2344 (Dr. Reddy/NN), ou YM-440 (Yamanouchi).

[0076] Exemplos de agonistas de PPAR-alfa, agonistas de PPAR- gama e agonistas duais de PPAR alfa/gama incluem muraglitizar, peli- glitazar, AR-HO39242 (Astra/Zeneca), GW-409544 (Glaxo-Wellcome), GW-501516 (Glaxo-Wellcome), KRP297 (Kyorin Merck) assim como aqueles descritos por Murakami e outros, Diabetes 47, 1841-1847 (1998), WO 01/21602 e na Patente dos Estados Unidos N° 6.653.314.

[0077] Exemplos de inibidores de aP2 incluem aqueles descritos na Pedido dos Estados Unidos N° de Série 09/391.053, depositado em 7 de setembro de 1999, e em Pedido dos Estados Unidos N° de Série 09/519.079, depositado em 6 de março de 2000, empregando-se dosagens conforme estabelecidas aqui.

[0078] Exemplos de inibidores de DPP-4 incluem sitagliptina (Janiuvia®, Merck), vildagliptina (Galvus®, Novartis), saxagliptina (On- glyza®, BMS-477118), linagliptina (BI-1356), dutogliptina (PHX1149T), gemigliptina (LG Life Sciences), alogliptina (SYR-322, Takeda), aqueles descritos em WO99/38501, WO99/46272, WO99/67279 (PROBIODRUG), WO99/67278 (PROBIODRUG), e WO99/61431 (PROBIODRUG), NVP-DPP728A (1-[[[2-[(5-cianopiridin-2-il) amino] etil] ami- no]acetil]-2-ciano-(S)-pirrolidina) (Novartis) tais como descritos por Hughes e outros, Biochemistry, 38(36), 11597-11603, 1999, TSL-225 (ácido triptofil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina-3-carboxílico (descrito por Yamada e outros, Bioorg. & Med. Chem. Lett. 8 (1998) 1537-1540), 2- cianopirrolidetos e 4-cianopirrolidetos, tais como descritos por Ashworth e outros, Bioorg. & Med. Chem. Lett., Vol. 6, N° 22, págs. 1163-1166 e 2745-2748 (1996), os compostos descritos no Pedido dos Estados Unidos N° de Série 10/899.641, WO 01/868603 e Patente dos Estados Unidos N° 6.395.767, empregando-se dosagens conforme estabelecidas nas referências acima.

[0079] Exemplos de agentes anti-hiperglicêmicos incluem peptídeo 1 semelhante ao glucagon (GLP-1), amida de GLP-1(1-36), amida de GLP-1(7-36), GLP-1(7-37) (as descritos na Patente dos Estados Unidos N° 5.614.492), exenatida (Amilina/Lilly), LY-315902 (Lilly), liragluti- da (NovoNordisk), ZP-10 (Zealand Pharmaceuticals A/S), CJC-1131 (Conjuchem Inc), e os compostos descritos em WO 03/033671.

[0080] Exemplos de agentes de redução de lipídeos hipolipidêmi- cos incluem inibidores de MTP, inibidores de HMG CoA redutase, inibidores de esqualeno sintetase, derivados de ácido fíbrico, inibidores de ACAT, inibidores de lipoxigenase, inibidores de absorção de colesterol, Inibidores de cotransportador de Na+/ácido de bílis, super- reguladores da atividade de receptor de LDL, sequestrantes de ácido de bílis, proteína de transferência de éster de colesterol (por exemplo, inibidores de CETP, tais como CP-529414 (Pfizer) e JTT-705 (Akros Pharma)), e ácido nicotínico e derivados do mesmo.

[0081] Exemplos de inibidores de MTP incluem aqueles descritos na Patente dos Estados Unidos N° 5.595.872, Patente dos Estados Unidos N° 5.739.135, Patente dos Estados Unidos N° 5.712.279, Patente dos Estados Unidos N° 5.760.246, Patente dos Estados Unidos N° 5.827.875, Patente dos Estados Unidos N° 5.885.983 e Patente dos Estados Unidos N° 5.962.440.

[0082] Exemplos de inibidores de HMG CoA redutase incluem me- vastatina e compostos relacionados, tais como descritos na Patente dos Estados Unidos N° 3.983.140, lovastatina (mevinolina) e compostos relacionados, tais como descritos na Patente dos Estados Unidos N° 4.231.938, pravastatina e compostos relacionados, tais como descritos na Patente dos Estados Unidos N° 4.346.227, sinvastatina e compostos relacionados, tais como descritos nas Patentes dos Estados Unidos Nos 4.448.784 e 4.450.171. Outros inibidores de HMG CoA redutase que podem ser empregados aqui incluem, mas não estão limitados a, fluvastatina, descrita na Patente dos Estados Unidos N° 5.354.772, cerivastatina, tal como descrita nas Patentes dos Estados Unidos Nos 5.006.530 e 5.177.080, atorvastatina, tal como descrita nas Patentes dos Estados Unidos Nos 4.681.893, 5.273.995, 5.385.929 e 5.686.104, atavastatina (nisvastatina (NK-104) da Nissan/Sankyo), tal como descrita na Patente dos Estados Unidos N° 5.011.930, visastati- na (Shionogi-Astra/Zeneca (ZD-4522)), tal como descrita na Patente dos Estados Unidos N° 5.260.440, e compostos de estatina relacionados descritos na Patente dos Estados Unidos N° 5.753.675, análogos de pirazol de derivados de mevalonolactona, tais como descritos na Patente dos Estados Unidos N° 4.613.610, análogos de indeno de de- rivados de mevalonolactona, tais como descritos no pedido de PCT WO 86/03488, 6-[2-(pirrol-1-il substituído)-alquil)piran-2-onas e derivados do mesmo, tais como descritos na Patente dos Estados Unidos N° 4.647.576, SC-45355 da Searle (um derivado de ácido pentanodioico 3-substituído) dicloroacetato, análogos de imidazol de mevalonolacto- na, tais como descritos no pedido de PCT WO 86/07054, derivados de ácido 3-carbóxi-2-hidróxi-propano-fosfônico, tais como descritos na Patente Francesa N° 2.596.393, derivados de pirrol, furano e tiofeno 2,3-dissubstituído, tais como descritos no Pedido de Patente Europeu N° 0221025, análogos de naftila de mevalonolactona, tais como descritos na Patente dos Estados Unidos N° 4.686.237, octaidronaftalenos, tais como descritos na Patente dos Estados Unidos N° 4.499.289, análogos de ceto de mevinolina (lovastatina), tais como descritos no Pedido de Patente Europeu N° 0142146 A2, e derivados de quinolina e pi- ridina, tais como descritos nas Patentes dos Estados Unidos Nos 5.506.219 e 5.691.322.

[0083] Exemplos de agentes hipolipidêmicos incluem pravastatina, lovastatina, sinvastatina, atorvastatina, fluvastatina, cerivastatina, ata- vastatina, e ZD-4522.

[0084] Exemplos de compostos de ácido fosfínico úteis na inibição de HMG CoA redutase incluem aqueles descritos em GB 2205837.

[0085] Exemplos de inibidores de esqualeno sintetase incluem α- fosfono-sulfonatos descritos na Patente dos Estados Unidos N° 5.712.396, aqueles 1o. descritos por Biller e outros, J. Med. Chem. 1988, Vol. 31, N° 10, págs. 1869-1871, incluindo(fosfinil-metil) fosfona- tos isoprenoides, assim como outros conhecidos inibidores de esqua- leno sintetase, por exemplo, tais como descritos nas Patentes dos Estados Unidos Nos 4.871.721 e 4.924.024 e em Biller, S. A., e outros, Current Pharmaceutical Design, 2, 1-40 (1996).

[0086] Exemplos de inibidores de esqualeno sintetase adequados adicionais para emprego aqui incluem os pirofosfatos terpenoides descritos por P. Ortiz de Montellano e outros, J. Med. Chem., 1977, 20, 243-249, o análogo A de difosfato de farnesil e análogos de pirofosfato de presqualeno (PSQ-PP) tais como descritos por Corey e Volante, J. Am. Chem. Soc. 1976, 98, 1291-1293, fosfinilfosfonatos relatados por McClard, R. W. e outros, J.A.C.S., 1987, 109, 5544 e ciclopropanos relatados por Capson, T. L., dissertação de PhD, Junho, 1987, Dept. Med. Chem. U de Utah, Resumo, Tabela de Conteúdos, págs. 16, 17, 40-43, 48-51, Sumário.

[0087] Exemplos de derivados de ácido fíbrico que podem ser em pregados em combinação com os compostos desta invenção incluem fenofibrato, genfibrozila, clofibrato, bezafibrato, ciprofibrato, clinofibrato e outros mais, probucol, e compostos relacionados, tais como descritos na Patente dos Estados Unidos N° 3.674.836, sendo probucol e genfibrozila os preferidos, sequestrantes de ácido de bílis, tais como colestiramina, colestipol e DEAE-Sephadex (Secholex, Policexide), assim como lipostabila (Rhone-Poulenc), Eisai E-5050 (um derivado de etanolamina N-substituída), imanixila (HOE-402), tetra- hidrolipstatina (THL), istigmastanilfosforilcolina (SPC, Roche), aminoci- clodextrina (Tanabe Seiyoku), Ajinomoto AJ-814 (derivado de azule- no), melinamida (Sumitomo), Sandoz 58-035, Cianamida Americana CL-277,082 e CL-283,546 (derivados de ureia disubstituída), ácido ni- cotínico, acipimox, acifrana, neomicina, ácido p-aminossalicílico, aspirina, derivados de poli(dialilmetilamina), tais como descritos na Patente dos Estados Unidos N° 4.759.923, poli(cloreto de dialildimetilamônio) de amina quaternária e ionenos, tais como descritos na Patente dos Estados Unidos N° 4.027.009, e outros conhecidos agentes de redução de colesterol sérico.

[0088] Exemplos de inibidor de ACAT que podem ser empregados em combinação com os compostos desta invenção incluem aqueles descritos em Drugs of the Future 24, 9-15 (1999), (Avasimibe); Nicolosi e outros, Atherosclerosis (Shannon, Irel). (1998), 137(1), 77-85; Ghi- selli, Giancarlo, Cardiovasc.Drug Rev. (1998), 16(1), 16-30; Smith, C., e outros, Bioorg. Med. Chem. Lett. (1996), 6(1), 47-50; Krause e outros, Editor(es): Ruffolo, Robert R., Jr.; Hollinger, Mannfred A., Inflammation: Mediators Pathways (1995), 173-98, Publisher: CRC, Boca Raton, Fla.; Sliskovic e outros, Curr. Med. Chem. (1994), 1(3), 204-25; Stout e outros, Chemtracts: Org. Chem. (1995), 8(6), 359-62, ou TS- 962 (Taisho Pharmaceutical Co. Ltd).

[0089] Exemplos de agentes hipolipidêmicos incluem super- reguladores da atividade de receptor de LD2, tais como MD-700 (Tai- sho Pharmaceutical Co. Ltd) e LY295427 (Eli Lilly).

[0090] Exemplos de inibidores de absorção de colesterol incluem SCH48461 (Schering-Plough), assim como aqueles descritos em Athe-rosclerosis 115, 45-63 (1995) e J. Med. Chem. 41,973 (1998).

[0091] Exemplos de inibidores de cotransportador de Na+/ácido de bílis ileal incluem compostos tais como descritos em Drugs of the Future, 24, 425-430 (1999).

[0092] Exemplos de inibidores de lipoxigenase incluem inibidores de 15-lipoxigenase (15-LO), tais como derivados de benzimidazol, tais como descritos em WO 97/12615, inibidores de 15-LO, tais como descritos em WO 97/12613, isotiazolonas, tais como descritos em WO 96/38144, e inibidores de 15-LO, tais como descritos por Sendobry e outros, Brit. J. Pharmacology (1997) 120, 1199-1206, e Cornicelli e outros, Current Pharmaceutical Design, 1999, 5, 11-20.

[0093] Exemplos de adequados agentes anti-hipertensivos para emprego em combinação com compostos desta invenção incluem blo- queadores beta-adrenérgicos, bloqueadores de canal de cálcio (tipo L e tipo T; por exemplo, diltiazem, verapamila, nifedipino, anlodipino e mibefradil), diuréticos (por exemplo, clorotiazida, hidroclorotiazida, flu- metiazida, hidroflumetiazida, bendroflumetiazida, metilclorotiazida, tri- clorometiazida, politiazida, benztiazida, tricrinafeno de ácido etacrínico, clortalidona, furosemida, musolimina, bumetamida, triantreneno, amilo- rida, espironolactona), inibidores de renina, inibidores de ACE (por exemplo, captoprila, zofenoprila, fosinoprila, enalaprila, ceranoprila, cilazoprila, delaprila, pentoprila, quinaprila, ramiprila, lisinopril), antagonistas de receptor de AT-1 (por exemplo, losartana, irbesartana, val- sartana), antagonistas de receptor de ET (por exemplo, sitaxsentana, atrasentana e compostos descritos nas Patentes dos Estados Unidos Nos 5.612.359 e 6.043.265), antagonista dual de ET/AII (por exemplo, compostos descritos em WO 00/01389), inibidores de endopeptidase neutra (NEP), inibidores de vasopepsidase (inibidores duais de NEPACE) (por exemplo, omapatrilate e gemopatrilate), e nitratos.

[0094] Exemplos de agentes antiobesidade incluem agonistas beta 3 adrenérgicos, inibidores de lipase, inibidores de recaptação de sero- tonina (e dopamina), fármacos de receptor beta da tiroide, agonistas de 5HT2C (tais como Arena APD-356); antagonistas de MCHR1 tais como Synaptic SNAP-7941 e Takeda T-226926, agonistas de receptor de melanocortina (MC4R), antagonistas de receptor de hormônio de concentração de melanina (MCHR) (tais como Synaptic SNAP-7941 e Takeda T-226926), moduladores de receptor de galanina, antagonistas de orexina, agonistas de CCK, antagonista de NPY1 ou NPY5, modu- ladores de NPY2 e NPY4, agonistas do fator de liberação de cortico- tropina, moduladores de receptor 3 de histamina (H3), inibidores de 11-beta-HSD-1, moduladores de receptor de adinopectina, inibidores de recaptação ou agentes de liberação de monoamina, um fator neuro- trófico ciliar (CNTF, tal como AXOQUINA de Regeneron), BDNF (fator neurotrófico derivado do cérebro), moduladores de leptina e de receptor de leptina, antagonistas de receptor de canabinoide 1 (tais como SR-141716 (Sanofi) ou SLV-319 (Solvay)), e/ou um agente anorético.

[0095] Exemplos de agonistas beta 3 adrenérgicos incluem AJ9677 (Takeda/Dainippon), L750355 (Merck), ou CP331648 (Pfizer) ou outros agonistas beta 3 conhecidos, tais como descritos nas Patentes dos Estados Unidos Nos 5.541.204, 5.770.615, 5.491.134, 5.776.983 e 5.488.064.

[0096] Exemplos de inibidores de lipase incluem orlistate e ATL- 962 (Alizima).

[0097] Exemplos de inibidores de recaptação de serotonina (e do- pamina) (ou agonistas de receptor de serotonina) incluem BVT-933 (Biovitrum), sibutramina, topiramato (Johnson & Johnson) e axoquina (Regeneron).

[0098] Exemplos de compostos de receptor beta da tiroide incluem ligantes de receptor da tiroide, tais como aqueles descritos em WO97/21993 (U. Cal SF), WO99/00353 (KaroBio) e GB98/284425 (Ka- roBio).

[0099] Exemplos de inibidores de recaptação de monoamina in cluem fenfluramina, dexfenfluramina, fluvoxamina, fluoxetina, paroxeti- na, sertralina, clorfentermina, cloforex, clortermina, picilorex, sibutrami- na, dexanfetamina, fentermina, fenilpropanolamina e mazindol.

[00100] Exemplos de agentes anoréticos incluem dexanfetamina, fentermina, fenilpropanolamina, e mazindol. 10. Formulações Farmacêuticas

[00101] Esta invenção abrange composições farmacêuticas que compreendem um composto da invenção opcionalmente em combinação com um ou mais segundos ingredientes ativos, tais como aqueles descritos acima na Seção 5.4.

[00102] Certas composições farmacêuticas são formas de dosagens unitárias únicas adequadas para administração oral a um paciente. Formas de dosagens discretas adequadas para administração oral incluem comprimidos (por exemplo, comprimidos mastigáveis), capse- las, cápsulas, e líquidos (por exemplo, xaropes aromatizados). Tais formas de dosagens contêm quantidades predeterminadas de ingredientes ativos, e podem ser preparadas através de métodos de farmácia bem conhecidos para aqueles versados na técnica. Veja, por exemplo, Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a ed. (Mack Publishing, Easton PA: 1990).

[00103] Formas de dosagens orais típicas são preparadas combinando-se o(s) ingrediente(s) ativo(s) em uma mistura íntima com pelo menos um excipiente de acordo com técnicas de composição farmacêutica convencionais. Por causa de sua facilidade de administração, comprimidos e cápsulas representam as formas unitárias de dosagens orais mais vantajosas. Se desejado, os comprimidos podem ser revestidos através de técnicas aquosas ou não aquosas padrões. Tais formas de dosagens podem ser preparadas através de convencionais métodos de farmácia. Em geral, composições farmacêuticas e formas de dosagens são preparadas misturando-se uniformemente e intimamente os ingredientes ativos com veículos líquidos, veículos sólidos finamente divididos, ou ambos, e em seguida moldando-se o produto na apresentação desejada se necessário. Desintegrantes podem ser incorporados em formas de dosagens sólidas para facilitar a rápida dissolução. Lubrificantes também podem ser incorporados para facilitar a produção das formas de dosagens (por exemplo, comprimidos).

[00104] Particulares compostos da invenção podem ser ligados a polímeros e/ou contas, que podem ser empregados para calibrar sua liberação, metabolismo e/ou atividade. Por exemplo, certos compostos podem ser ligados via R4A às contas planejadas para liberação entérica para pacientes. 11. EXEMPLOS 12. Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4- clorobenzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri- ila (7)

[00105] Preparação de (5-bromo-2-metilfenil) (4-clorofenil) metanona (2). Ácido 2-metil-4-bromobenzoico (1, 26,0 g, 121 mmol) e cloreto de oxalila (13,2 mL, 152 mmol) foram suspensos em 520 mL de CH2Cl2. Uma quantidade catalítica de DMAP (0,5 mL) foi adicionada gota a gota e a reação foi agitada a temperatura ambiente até que a reação ficasse homogênea. Os voláteis foram removidos a vácuo. O material cru foi dissolvido em 200 mL de CH2Cl2 e cloridrato de N,O- dimetilidroxilamina (23,6 g, 242 mmol) foi adicionado. A reação foi resfriada para 0°C e trietilamina (55 mL, 399 mmol) foi lentamente adicionada. Ao término da adição de trietilamina, a reação foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante a noite. A reação foi extinguida com NaHSO4 aquoso saturado a 50%. A camada aquosa foi extraída duas vezes com CH2Cl2. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre Na2SO4, filtradas, e o solvente removido a vácuo. A amida de Weinreb resultante (31,3g, 99% de produção) foi empregada sem purificação adicional na etapa seguinte.

[00106] A amida de Weinreb (31,3g, 121 mmol) foi absorvida em 250 mL de THF seco. Brometo de 4-cloromagnésio (1M em Et2O, 182 mL, 182 mmol) foi adicionado a temperatura ambiente, e a reação agitou-se durante 2 horas. Quando a reação não era concluída, reagente de Grignard adicional era adicionado até que LCMS indicasse a conclusão da reação. A reação foi extinguida com uma solução de NH4Cl aquoso saturado/salmoura (1:1 v:v) e extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, se- cadas sobre MgSO4, filtradas, e o solvente removido a vácuo. (5- Bromo-2-metilfenil)(4-clorofenil)metanona (2, 37,0 g, 99% de produção) foi empregado sem purificação adicional na etapa seguinte.

[00107] 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,74 (d, J=8,3 Hz, 2 H), 7,53 (dd, J=8,1, 2,0 Hz, 1 H), 7,46 (d, J=8,3 Hz, 2 H), 7,42 (d, J=2,0 Hz, 1 H), 7,18 (d, J=8,1 Hz, 1 H), 2,26 (s, 3 H). GCMS (CH4-CI) [M+H] + = 309.

[00108] Preparação de 4-bromo-2-(4-clorobenzil)-1-metilbenzeno (3). (5-Bromo-2-metilfenil)(4-clorofenil)metanona (2, 37,0 g, 121 mmol) e trietilsilano (77,3 mL, 484 mmol) foram dissolvidos em 300 mL de CH3CN e resfriados para 0°C. BF3OEt2 (91 mL, 726 mmol) foi adicionado e a reação foi aquecida para 60°C durante 2 horas. GCMS foi empregada para monitorar a reação. Ao término, a reação foi resfriada para 0°C e extinguida com 500 mL de NaHCO3 aquoso saturado. A fase aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O e salmoura, secadas sobre Na2SO4, filtradas, e o solvente removido a vácuo. O sólido cru foi suspenso em EtOAc/hexanos a 20% e passado em um tampão de sílica para remover sais residuais. A concentração do filtrado forneceu o composto título como um sólido branco (22,0 g, 62% de produção). 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,22 (d, J=2,0 Hz, 1 H), 7,21 - 7,31 (m, 3 H), 7,04 (d, J=8,3 Hz, 2 H), 7,04 (d, J=8,1 Hz, 2 H), 3,91 (s, 2 H), 2,17 (s, 3 H). GCMS (CH4-CI) [M+H] + = 295.

[00109] Preparação de (3-(4-clorobenzil)-4-metilfenil) ((3aS,5R,6S,6aS) -6-hidróxi-2,2-dimetiltetra-hidrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-il) metanona (4). A uma solução de ((3aS,5R,6S,6aS)-6-hidróxi-2,2-dimetiltetra-hidrofuro [2,3-d] [1,3]dioxol-5-il)(morfolino)metanona (25,3 g, 92,6 mmol) em THF (200 mL) sob nitrogênio a 0°C foi adicionado cloreto de terc- butilmagnésio (1 M em THF, 100 mL, 100 mmol). Esta solução foi agitada a 0°C durante 30 minutos. Enquanto isso, uma solução de 4- bromo-2-(4-clorobenzil)-1-metilbenzeno (3, 32,9 g, 111,1 mmol) em THF (330 mL) sob nitrogênio foi resfriada para -78°C. n-butil lítio (2,5 M em hexanos, 48 mL, 120 mmol) foi adicionado gota a gota através de seringa e agitado durante 10 min. A solução de alcóxido de magnésio foi tranferida por meio de cânula para a solução de aril lítio a - 78°C. A reação foi agitada durante 30 min a -78°C, deixada aquecer para a temperatura ambiente e agitada durante 60 min, extinguida com 500 mL de uma solução de 1:1 (v:v) de NH4Cl aquoso saturado/ salmoura. A camada aquosa foi extraída duas vezes com 300 mL de EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre MgSO4, filtradas, e concentradas a vácuo. O resíduo cru foi absorvido em 100 mL de EtOAc e aquecido até que a maior parte dos sólidos dissolvesse. 250 mL de hexanos foram adicio-nados e o frasco foi resfriado em um banho de gelo durante duas horas. O precipitado branco foi filtrado e lavado com EtOAc/hexano a 20%, fornecendo o composto título como um sólido branco (26,09 g, 70% de produção). 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,88 (dd, J=7,8, 1,8 Hz, 1 H), 7,76 (d, J=1,5 Hz, 1 H), 7,29 (d, J=8,1 Hz, 1 H), 7,26 (d, J=8,3 Hz, 2 H), 7,05 (d, J=8,3 Hz, 2 H), 6,08 (d, J=3,8 Hz, 1 H), 5,28 (d, J=2,8 Hz, 1 H), 4,59 (d, J=3,5 Hz, 1 H), 4,57 (t, J=3,2 Hz, 1 H), 4,01 (s, 2 H), 3,06 (d, J=4,0 Hz, 1 H), 2,30 (s, 3 H), 1,37 (s, 3 H). MS (ES+) [M+H]+ = 403.

[00110] Preparação de (3aS,5S,6R,6aS) -5- ((S) -(3- (4-clorobenzil) - 4-metilfenil) (hidróxi) -metil) -2,2-dimetiltetra -hidrofuro [2,3-d] [1,3] dioxol- 6-ol (5). (3- (4-clorobenzil) -4-metilfenil) ((3aS,5R,6S,6aS) -6-hidróxi-2,2- dimetiltetra -hidrofuro[2,3-d] [1,3]dioxol-5-il)metanona (4, 26,1 g, 64,9 mmol) e CeClβ-7 H2O (29,0 g, 77,9 mmol) foram suspensos em 520 mL de MeOH. Boroidreto de sódio (982 mg, 26,0 mmol, dissolvido em 10 mL de NaOH aquoso a 1N) foi adicionado e os reagentes lentamente entraram em solução durante cerca de 5 minutos. Outros 100 mg (2,6 mmol) de boroidreto de sódio foram adicionados para impulsionar a reação para a conclusão. A reação foi agitada durante 10 minutos e extinguida com 500 mL de NH4Cl aquoso saturado. A maior parte do MeOH foi removida a vácuo e os solventes residuais foram diluídos com uma solução de 1:1 (v:v) de NH4Cl aquoso saturado:salmoura. A camada aquosa foi extraída três vezes com 500 mL de EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre MgSO4, filtradas, e concentradas a vácuo. O produto cru foi empregado sem purificação adicional na etapa seguinte (26,2 g, 99% de produção, >10:1 d.r.). 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,14 - 7,31 (m, 5 H), 7,04 (d, J=8,3 Hz, 2 H), 6,04 (d, J=3,8 Hz, 1 H), 5,24 (t, J=3,4 Hz, 1 H), 4,51 (d, J=3,8 Hz, 1 H), 4,14 - 4,21 (m, 2 H), 4,04 (d, J=1,5 Hz, 1 H), 3,97 (s, 2 H), 2,77 (d, J=3,0 Hz, 1 H), 2,20 - 2,27 (m, 3 H), 1,46 (s, 3 H), 1,33 (s, 3 H). MS (ES+) [M+NH4]+ = 422.

[00111] Preparação de tetra-acetato de (3S,4R,5S,6S) -6- (3-(4- clorobenzil) -4-metilfenil) tetra-hidro-2H- piran- 2,3,4,5- tetraíla (6). (3aS,5S,6R,6aS) -5-((S)- (3- (4-clorobenzil)-4-metilfenil)(hidróxi)-metil)- 2,2-dimetiltetra-hidrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol (5, 26,2 g, 64,8 mmol) foi suspenso em 150 mL de H2O e 150 mL ácido acético glacial. A reação foi aquecida para 100°C durante 7 horas. Os solventes foram removidos a vácuo e o resíduo cru foi azeotropado três vezes a partir de tolueno. O material cru foi colocado sob vácuo elevado durante a noite e empregado na etapa seguinte sem purificação adicional.

[00112] O material cru foi dissolvido em 350 mL de CH3CN. Trieti- lamina (57,5 mL, 414 mmol) e anidrido acético (46,0 mL, 414 mmol) foram adicionados, seguidos por uma quantidade catalítica de DMAP (100 mg). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 1 hora. Cerca de 200 mL de CH3CN foram removidos a vácuo e o restante foi diluído com 600 mL de EtoAc. A camada orgânica foi lavada duas vezes com NaHSO4 aquoso saturado a 50%. As camadas aquosas ací- dicas foram extraídas novamente com 300 mL de EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre MgSO4, filtradas, e concentradas a vácuo. O resíduo cru foi azeotro- pado duas vezes a partir de tolueno e uma vez a partir de hexanos para fornecer o composto título como um sólido bege facilmente transferível (34,0 g, 92% de produção, mistura de anômeros α e β).

[00113] 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,24 (d, J=8,3 Hz, 2 H), 7,13 - 7,21 (m, 2H), 7,09 (s, 1 H), 7,01 (d, J=8,3 Hz, 2 H), 6,47 (d, J=3,5 Hz, 1 Hα), 5,89 (d, J=8,3 Hz, 1 Hβ), 5,59 (t, J=9,8 Hz, 1 Hα), 5,37 (t, J=9,6 Hz, 1 Hβ), 5,23 - 5,31 (m, 1 Hα + 1 Hβ), 5,19 (t, J=9,6 Hz, 1 Hβ), 5,14 (t, J=9,7 Hz, 1 Hα), 4,82 (d, J=10,1 Hz, 1 Hα), 4,51 (d, J=9,9 Hz, 1 Hβ), 3,94 (s, 2 H), 2,21 (s, 3 Hα), 2,20 (s, 3 Hα), 2,19 (s, 3 Hβ), 2,11 (s, 3 Hβ), 2,07 (s, 3 Hβ), 2,06 (s, 3 Hα), 2,04 (s, 3 Hα), 2,03 (s, 3 Hβ), 1,79 (s, 3 Hα), 1,77 (s, 3 Hβ). MS (ES+) [M+NH4]+ = 550.

[00114] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R) -2- (3- (4- clorobenzil) -4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (7). Trifluorometanossulfonato de trimetilsilila (19,7 mL, 108,5 mmol) foi adicionado a uma solução de tetra-acetato de (3S,4R,5S,6S)-6-(3-(4- clorobenzil)-4-metilfenil)tetra-hidro-2H-piran-2,3,4,5-tetraíla (6, 33,9 g, 63,8 mmol) e tioureia (9,71 g, 128 mmol) em 340 mL de dioxano. A reação foi aquecida para 80°C durante duas horas, em cujo ponto a análise de LCMS revelou que a reação foi paralisada. TMSOTf adicional foi adicionado (2 mL, 10,8 mmol) e a reação agitou-se durante 1 hora a 80°C. A reação foi resfriada para a temperatura ambiente. Adição sequencial de iodeto de metila (11,9 mL, 191 mmol) seguido por DIPEA (55,6 mL, 319 mmol) foi executada, deixando a reação agitar durante 18 horas. 500 mL de H2O foram lentamente adicionados para extinguir a reação. A camada aquosa foi extraída duas vezes com 300 mL de EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaHSO4 aquoso saturado e salmoura, secadas sobre MgSO4, filtradas, e concentradas a vácuo. O sólido cru foi suspenso em 300 mL de MeOH. A sonicação resultou na precipitação de um precipitado bege claro, que foi filtrado e lavado com MeOH frio. O filtrado foi concentrado e o procedimento em suspensão repetido uma vez mais para fornecer e combinado com a primeira batelada. O produto foi isolado como anômero beta puro como um sólido bege claro (20,4 g, 60% de produção). 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,24 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 7,10 - 7,18 (m, 2 H), 7,05 (s, 1 H), 7,00 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 5,34 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 5,21 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 5,12 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 4,53 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 4,39 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 3,86 - 4,00 (m, 2 H), 2,19 (s, 3 H), 2,17 (s, 3 H), 2,10 (s, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 1,76 (s, 3 H). MS (ES+) [M+NH4]+ = 538. 13. Preparação de N-(1-amino-2-metil-1-oxopropan-2-il)-4- (4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra- hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenil)butanamida (11)

[00115] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-((E)- 4-metóxi-4-oxobut-1-en-1-il)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro- 2H-piran-3,4,5-tri-ila (8). Um frasco de micro-ondas foi carregado com triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-clorobenzil)-4-metilfenil)-6- (metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (7, 1,04 g, 2,0 mmol), but-5- enoato de metila (600 mg, 6,0 mmol), Pd2dba3 (183 mg, 0,20 mmol), tetrafluoroborato de tri(terc-butil)fosfônio (235 mg, 0,80 mmol), diciclo- hexilmetilamina (1,27 mL, 6,0 mmol), e N-metilpirrolidinona (10 mL). A reação foi aquecida no micro-ondas a 160°C durante 20 min. A reação foi filtrada sobre Celita com EtOAc excessivo. A camada orgânica foi lavada com H2O, NaHSO4 aquoso saturado, e salmoura. Ela foi secada com MgSO4 e concentrada a vácuo. A cromatografia rápida em sílica-gel (gradiente EtOAc/hexanos a 10-50%) forneceu o aduzido de Heck 8 como um sólido amarelo claro (700 mg, 60% de produção). Quantidades menores de olefina isomerizada foram observadas na 1H RNM. 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,28 - 7,31 (m, 2 H), 6,97 - 7,19 (m, 5 H), 6,46 (d, J=15,9 Hz, 1 H), 6,25 (dt, J=15,9, 7,1 Hz, 1 H), 5,33 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 5,21 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 5,12 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 4,52 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 3,87 - 4,01 (m, 2 H), 3,72 (s, 2 H), 3,24 (dd, J=7,1, 1,3 Hz, 2 H), 2,21 (s, 3 H), 2,17 (s, 3 H), 2,10 (s, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 1,75 (s, 3 H). MS (ES+) [M+NH4]+ = 602.

[00116] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4- metóxi-4-oxobutil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran- 3,4,5-tri-ila (9). Triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-((E)-4-metóxi-4- oxobut-1-en-1-il)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran- 3,4,5-tri-ila (8, 1,74 g, 3,0 mmol) foi dissolvido em uma solução de 1:1 (v:v) de THF/MeOH. Pd/C (10% de umidade, 174 mg) foi adicionado e a reação hidrogenada a 2,81 kg/cm2 (40 psi) durante 3 horas. A reação foi monitorada através de 1H RNM. Ao término, a reação foi filtrada sobre Celita com MeOH excessivo. A remoção de solventes a vácuo forneceu o produto como um sólido amarelo claro (1,65 g, 94% de produção). 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,11 - 7,20 (m, 2 H), 7,07 (t, J=7,8 Hz, 3 H), 6,99 (d, J=8,1 Hz, 2 H), 5,33 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 5,21 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 5,12 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 4,52 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 4,39 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 3,85 - 4,00 (m, 2 H), 3,67 (s, 3 H), 2,61 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 2,33 (t, J=7,5 Hz, 2 H), 2,21 (s, 3 H), 2,18 (s, 3 H), 2,10 (s, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 1,93 (quin, J=7,6 Hz, 2 H), 1,75 (s, 3 H). MS (ES+) [M+NH4]+ = 604.

[00117] Preparação de ácido 4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)- 3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il) benzil) fenil) buta- noico (10). Triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4-metóxi-4- oxobutil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (9, 1,65 g, 2,81 mmol) foi dissolvido em uma solução de MeOH/THF/H2O (25 mL, relação de vol. de 2:1:2). Hidróxido de lítio (674 mg, 28,1 mmol) foi adicionado e a reação agitou-se a temperatura ambiente durante 1 hora. A reação foi acidificada para pH = 1-2 com NaHSO4 aquoso saturado. A camada aquosa acídica foi extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre MgSO4, filtradas, e concentradas a vácuo. O produto cru foi submetido à rotovap uma vez a partir de hexa- nos para fornecer o produto como sólido transferível branco (1,27 g, 99% de produção). 1H RNM (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11,99 (s, 1 H), 6,96 - 7,16 (m, 7 H), 5,16 (d, J=5,8 Hz, 1 H), 5,06 (d, J=4,3 Hz, 1 H), 4,82 (d, J=5,6 Hz, 1 H), 4,32 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,04 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,90 (s, 2 H), 2,53 (t, J=7,3 Hz, 2 H), 2,19 (t, J=7,3 Hz, 2 H), 2,17 (s, 3 H), 2,03 (s, 3 H), 1,76 (quin, J=7,6 Hz, 2 H). MS (ES+) [M+NH4]+ = 464.

[00118] Preparação de N-(1-amino-2-metil-1-oxopropan-2-il)-4-(4- (2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H- piran-2-il) benzil)fenil)butanamida (11). Ácido 4-(4-(2-metil-5- ((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il) benzil) fenil) butanoico (10,157 mg, 0,35 mmol), cloridrato de 2-amino- 2-metilpropanamida (73 mg, 0,53 mmol), HATU (161 mg, 0,42 mmol), e DIPEA (0,15 mL, 1,06 mmol) foram combinados em DMF (2 mL) e agitados durante 2 horas a temperatura ambiente. A reação extinguiu- se com NaHCO3 aquoso saturado e foi extraída duas vezes com EtO- Ac. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas com MgSO4, filtradas, e concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado através de HPLC preparativa (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 5 a 100%/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) para fornecer o composto título 11 após a liofilização (75 mg, 40% de produção). 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 6,96 - 7,23 (m, 7 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,12 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,96 (s, 2 H), 3,33 - 3,51 (m, 3 H), 2,59 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 2,20 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 1,87 (quin, J=7,6 Hz, 2 H), 1,45 (s, 6 H). MS (ES+) [M+H]+ = 531. 14. Preparação de N-(2-metil-1-(4-metilpiperazin-1-il)-1- oxopropan-2-il)-4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi- 6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenil)butanamida (12)

[00119] O mesmo procedimento foi empregado tal como para a amida 11, empregando-se cloridrato de 2-amino-2-metil-1-(4- metilpiperazin-1-il)propan-1-ona, para fornecer o produto 12 como o sal de bisformiato. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 8,40 (s, 2 H), 7,11 - 7,21 (m, 3 H), 7,02 - 7,11 (m, 4 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,13 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,96 (s, 2 H), 3,74 (br. s., 4 H), 3,34 - 3,52 (m, 3 H), 2,67 (t, J=4,6 Hz, 4 H), 2,60 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 2,47 (s, 3 H), 2,19 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 2,21 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 1,88 (quin, J=7,5 Hz, 2 H), 1,44 (s, 6 H). MS (ES+) [M+H]+ = 614. 15. Preparação de N-(1-((2-(dimetilamino)etil)amino)-2- metil-1-oxopropan-2-il)-4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri- hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenil)butanamida

[00120] O mesmo procedimento foi empregado tal como para a amida 11, empregando-se cloridrato de 2-amino-2-metil-1-(4- metilpiperazin-1-il)propan-1-ona, para fornecer o produto 13 como o sal de formiato. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 8,52 (s, 1 H), 7,12 - 7,21 (m, 3 H), 7,03 - 7,12 (m, 4 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,13 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 3,96 (s, 2 H), 3,51 (t, J=5,6 Hz, 2 H), 3,33 - 3,47 (m, 3 H), 3,07 (t, J=4,8 Hz, 2 H), 2,79 (s, 6 H), 2,60 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 2,21 (s, 3 H), 2,22 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 2,14 (s, 3 H), 1,88 (quin, J=7,5 Hz, 2 H), 1,41 (s, 6 H). MS (ES+) [M+H]+ = 602. 16. Preparação de (S,R,R,S,R)-N,N'-((metilazanedi-il) bis (propano-3,1-di-il))bis(4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri- hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il) benzil) fenil) butanamida) (14)

[00121] O mesmo procedimento foi empregado tal como para a amida 11, empregando-se N1-(3-aminopropil)-N1-metilpropano-1,3- diamina (0,5 equivalente), para fornecer o produto 14 como o sal de formiato. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 8,50 (s, 1 H), 7,15 (q, J=7,8 Hz, 6 H), 7,02 - 7,09 (m, 8 H), 4,38 (d, J=9,6 Hz, 2 H), 4,12 (d, J=9,1 Hz, 2 H), 3,94 (s, 4 H), 3,34 - 3,51 (m, 6 H), 3,21 (t, J=6,6 Hz, 4 H), 2,86 (t, J=7,3 Hz, 4 H), 2,63 (s, 3 H), 2,57 (t, J=7,6 Hz, 4 H), 2,18 (t, J=7,6 Hz, 4 H), 2,20 (s, 6 H), 2,14 (s, 6 H), 1,88 (quin, J=7,6 Hz, 4 H), 1,82 (quin, J=7,3 Hz, 4 H). MS (ES+) [M+H]+ = 1002. 17. Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(5- aminopentil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran- 3,4,5-tri-ila (16)

[00122] Um frasco de micro-ondas foi carregado com triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-clorobenzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra- hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (7, 520 mg, 1,0 mmol), pent-4-en-1- ilcarbamato de terc-butila (555 mg, 3,0 mmol.), Pd2dba3 (183 mg, 0,20 mmol), tetrafluoroborato de tri(terc-butil)fosfônio (232 mg, 0,80 mmol), diciclo-hexilmetilamina (0,64 mL, 3,0 mmol), e N-metilpirrolidinona (15 mL). A reação foi aquecida no micro-ondas a 160°C durante 20 min. A reação foi filtrada sobre Celita com EtOAc excessivo. A camada orgânica foi lavada com H2O, NaHSO4 aquoso saturado, e salmoura. Ela foi secada com MgSO4 e concentrada a vácuo. A cromatografia rápida em sílica-gel (gradiente EtOAc/hexanos a 10-50%) forneceu o aduzido de Heck 15 como um sólido amarelo claro (360 mg, 54% de produção).

[00123] O produto de Heck (15, 360 mg, 0,63 mmol) foi dissolvido em 10 mL de MeOH. Pd/C (10% de umidade, 100 mg) foi adicionado e a reação foi hidrogenada a 3,51 kg/cm2 (50 psi) durante 4 horas. Em completa conversão, a reação foi filtrada sobre Celita para remover o catalisador e o solvente foi removido a vácuo. O resíduo cru foi absorvido em 4 mL de CH2Cl2 e 2 mL de TFA foram adicionados. Após agitação durante 3 horas a temperatura ambiente, a reação foi extinguida com NaHCO3 aquoso saturado e extraída três vezes com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados sobre MgSO4, filtrados e concentrados a vácuo para fornecer o composto título 16 (260 mg, 85% de produção) 1H RNM (400 MHz, DMSO- d6) δ ppm 7,49 (br. s., 1 H), 6,94 - 7,22 (m, 2 H), 5,37 (t, J=9,6 Hz, 2 H), 5,12 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 5,07 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 4,90 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,66 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 3,81 - 3,99 (m, 2 H), 2,62 - 2,80 (m, 4 H), 2,18 (s, 3 H), 2,10 (s, 3 H), 2,05 (s, 3 H), 1,95 (s, 3 H), 1,71 (s, 3 H), 1,48 - 1,61 (m, 4 H), 1,28 - 1,34 (m, 2 H). MS (ES+) [M+H]+ = 572. 18. Preparação de (2S,3R,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(5-(bis((S)-2,3- di-hidroxipropil)amino)pentil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra- hidro-2H-piran-3,4,5-triol (17)

[00124] Triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(5-aminopentil) benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (16, 75 mg, 0,13 mmol) e (R)-2,2-dimetil-1,3-dioxolano-4-carbaldeído (26 mg, 0,20 mmol) foram dissolvidos em 1 mL de dicloroetano. Triacetoxibo- roidreto de sódio (55 mg, 0,26 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A reação foi extinguida com NaHCO3 aquoso saturado e a fase aquosa foi extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre MgSO4, filtradas, e o solvente removido a vácuo.

[00125] O resíduo cru foi absorvido em 1 mL de H2O e 1 mL de MeOH. Hidróxido de lítio (26 mg, 1,1 mmol) foi adicionado. 1 mL de THF foi adicionado para auxiliar na solubilidade do material de partida. Depois de 16 horas, a reação foi diluída com H2O e extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre MgSO4, filtradas, e o solvente removido a vácuo.

[00126] O produto cru foi dissolvido em 1 mL de MeOH. TFA (1 mL) foi adicionado e a reação foi agitada durante 2 horas, em cujo tempo, reação desprezível ocorreu. H2O (0,5 mL) foi adicionado e a reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. Os solventes foram removidos a vácuo. O resíduo foi purificado através de HPLC prepara- tiva (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 5 a 100%/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) para fornecer o composto título 17 como o sal de bisformiato após a liofilização. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 8,50 (s, 2 H), 6,98 - 7,21 (m, 7 H), 4,39 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 4,12 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,87 - 4,01 (m, 2 H), 3,95 (s, 2 H), 3,47 - 3,62 (m, 4 H), 3,36 - 3,47 (m, 3 H), 3,02 - 3,25 (m, 4 H), 3,20 (td, J=13,6, 3,0 Hz, 2 H), 2,60 (t, J=7,5 Hz, 2 H), 2,21 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 1,59 - 1,79 (m, 2 H), 1,67 (quin, J=7,6 Hz, 2 H), 1,39 (sxt, J=7,1 Hz, 2 H). MS (ES+) [M+H]+ = 594. 19. Preparação de 2-metil -2- (3- (5- (4- (2-metil-5- ((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran- 2-il) benzil)fenil)pentil)ureido)propanamida (18)

[00127] A uma solução de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4- (5-aminopentil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran- 3,4,5-tri-ila (16, 100 mg, 0,18 mmol) e cloroformiato de 4-nitrofenila (43 mg, 0,22 mmol) em CH2CI2 (4 mL) foi adicionado trietilamina (35 μL, 0,25 mmol). A reação foi agitada durante 4 horas, e em seguida clori- drato de 2-amino-2-metilpropanamida (17 mg, 0,25 mmol) e DIPEA (23 μL, 0,27 mmol) foram adicionados. A reação foi agitada durante 90 min., em seguida diluída com EtOAc, lavada com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo.

[00128] Este material foi tratado com NaOMe (50 μL, 25% em peso em MeOH, 0,22 mmol) em MeOH (2 mL) durante 2 horas. A reação foi concentrada a vácuo, e o resíduo foi purificado através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 10-70%/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) para produzir 10 mg do composto título 18 como um sólido branco após a liofilização. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,00 - 7,20 (m, 7 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,12 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,95 (s, 2 H), 3,34 - 3,50 (m, 3 H), 3,06 (t, J=6,9 Hz, 2 H), 2,57 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 2,21 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 1,53 - 1,67 (m, 2 H), 1,48 (quin, J=7,3 Hz, 2 H), 1,43 (s, 3 H), 1,42 (s, 3 H), 1,34 (spt, J=7,3 Hz, 1 H). MS (ES+) [M+H]+ = 574. 20. Preparação de 1-(4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5- tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2- il)benzil)fenil)butil)guanidina (20)

[00129] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4- aminobutil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri- ila (19). O mesmo procedimento foi empregado tal como usado para a síntese de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(5-aminopentil) benzil) -4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (16), empregando-se but-3-en-1-ilcarbamato de terc-butila como o reagente para a reação de Heck.

[00130] Preparação de 1-(4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5- tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenil)butil)guanidina (20). A uma solução de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4- aminobutil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri- ila (19, 50 mg, 0,090 mmol) e nitrato de 3,5-dimetil-1H-pirazol-1- carboximidamida (66 mg, 0,33 mmol) em CH3CN foi adicionado DIPEA (62 μL, 0,35 mmol). A reação foi aquecida a 70°C durante 2 horas, em seguida resfriada para a temperatura ambiente e concentrada a vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH e tratado com algumas gotas de NaOMe (25% em peso em MeOH) durante 1 hora. A reação foi concentrada a vácuo, e o resíduo foi purificado através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 5 a 40%/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) para produzir o composto título 20 como o sal de formiato (22 mg, 43% de produção). 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 8,55 (s, 1 H), 7,00 - 7,24 (m, 7 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,12 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,92 - 4,02 (m, 2 H), 3,34 - 3,51 (m, 3 H), 3,17 (t, J=6,8 Hz, 2 H), 2,62 (t, J=7,3 Hz, 2 H), 2,21 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 1,63 - 1,73 (m, 2 H), 1,59 (s, 2 H). MS (ES+) [M+H]+ = 474. 21. Preparação de 3-hidróxi-2,2-dimetil-N-(4-(4-(2-metil-5- ((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran- 2-il)benzil)fenil)butil)propanamida (21)

[00131] A uma solução de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4- (4-aminobutil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5- tri-ila (19, 55 mg, 0,10 mmol), ácido 3-hidróxi-2,2-dimetilpropanoico (18 mg, 0,15 mmol), HATU (57 mg, 0,15 mmol), e DIPEA (52 μL, 0,30 mmol) foram combinados em DMF (1 mL) e agitados durante 4 horas a temperatura ambiente. A reação extinguiu-se com NaHCO3 aquoso saturado e foi extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas com MgSO4, filtradas, e concentradas a vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH e tratado com algumas gotas de NaOMe (25% em peso em MeOH) durante 1 hora. A reação foi concentrada a vácuo, e o resíduo foi purificado através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 5- 40%/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) para produzir o composto título 21 como um sólido branco (22 mg, 41% de produção). 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 6,98 - 7,22 (m, 7 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,13 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,90 - 3,99 (m, 2 H), 3,49 (s, 2 H), 3,35 - 3,46 (m, 3 H), 3,19 (t, J=6,9 Hz, 2 H), 2,58 (t, J=7,5 Hz, 2 H), 2,18 - 2,23 (m, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 1,60 (s, 2 H), 1,46 - 1,57 (m, 2 H), 1,11 (s, 6 H). MS (ES+) [M+H]+ = 532. 22. Preparação de (2S,3R,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4-((1-hidróxi-2- metilpropan-2-il)amino)butil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra- hidro-2H-piran-3,4,5-triol (24)

[00132] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4- hidroxibutil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri- ila (22). Um frasco de micro-ondas de 20 mL foi carregado com triace- tato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-clorobenzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio) tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (7, 520 mg, 1,0 mmol), 3-butenol (0,26 mL, 3,0 mmol), Pd2dba3 (183 mg, 0,20 mmol), tetrafluoroborato de tri(terc-butil)fosfônio (232 mg, 0,80 mmol), diciclo-hexilmetilamina (0,64 mL, 3,0 mmol), e 10 mL de N-metilpirrolidinona. A reação foi aquecida no micro-ondas a 160°C durante 20 min. A reação foi filtrada sobre Ce- lita com EtOAc excessivo. A camada orgânica foi lavada com H2O, NaHSO4 aquoso saturado, e salmoura. Ela foi secada com MgSO4 e concentrada a vácuo. A cromatografia rápida (gradiente EtOAc a 10 a 80%/hexanos) forneceu o aduzido de Heck (257 mg). Este produto purificado foi dissolvido em 5 mL de uma mistura de 1:1 (v:v) de MeOH/THF. Pd/C (10% de umidade, 26 mg) foi adicionado e submetido à pressão de hidrogênio de 2,81 kg/cm2 (40 psi) durante 5 horas. A reação foi filtrada sobre Celita com MeOH excessivo e concentrada a vácuo para fornecer o composto título 22 (247 mg, 44% de produção). 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,11 - 7,18 (m, 2 H), 7,09 (d, J=8,1 Hz, 2 H), 6,95 - 7,06 (m, 3 H), 5,33 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 5,20 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 5,10 (dd, J=9,7 Hz, 1 H), 4,52 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 4,38 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 3,93 (d, J=4,5 Hz, 2 H), 3,66 (t, J=5,9 Hz, 2 H), 2,61 (t, J=7,3 Hz, 2 H), 2,22 (s, 3 H), 2,17 (s, 3 H), 2,10 (s, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 1,74 (s, 3 H), 1,64 - 1,73 (m, 2 H), 1,56 - 1,64 (m, 2 H). MS (ES+) [M+NH4]+ = 576.

[00133] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(4-metil-3- (4-(4-((metilsulfonil)óxi)butil)-benzil)fenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H- piran-3,4,5-tri-ila (23). Cloreto de metanossulfonila (41 μL, 0,53 mmol) e trietilamina (80 μL, 0,58 mmol) foram adicionados a uma solução de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4-hidroxibutil)benzil)-4- metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (22, 247 mg, 0,44 mmol) em 5 mL de CH2Cl2 e agitados a temperatura ambiente durante 2 horas. A reação foi extinguida com HCl aquoso a 1N. A camada aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O e salmoura, secadas com MgSO4, filtradas, e concentradas a vácuo para fornecer o produto 23 (279 mg, 99% de produção), que foi empregado na etapa seguinte sem purificação adicional. 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,14 (s, 2 H), 7,02 - 7,11 (m, 3 H), 7,00 (d, J=7,8 Hz, 2 H), 5,33 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 5,21 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 5,12 (dd, J=9,6 Hz, 1 H), 4,48 - 4,56 (m, 1 H), 4,39 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 4,24 (t, J=6,1 Hz, 1 H), 3,93 (d, J=3,8 Hz, 2 H), 2,99 (s, 3 H), 2,62 (t, J=7,2 Hz, 2 H), 2,22 (s, 3 H), 2,15 - 2,20 (m, 3 H), 2,10 (s, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 1,70 - 1,81 (m, 4 H). MS (ES+) [M+NH4]+ = 654.

[00134] Preparação de (2S,3R,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4-((1-hidróxi-2- metilpropan-2-il)amino)butil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro- 2H-piran-3,4,5-triol (24). 2-Amino-2-metilpropan-1-ol (23 mg, 0,25 mmol), iodeto de sódio catalítico, e triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2- (4-metil-3-(4-(4-((metilsulfonil)óxi)butil)benzil)fenil)-6-(metiltio)tetra- hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (65 mg, 0,10 mmol) foram aquecidos para 80°C em 0,5 mL de isopropanol/CH3CN (1:1 v:v) durante 64 horas. A reação foi resfriada para a temperatura ambiente, diluída com 2 mL de MeOH, e NaOMe (25% em peso em MeOH, 0,5 mL) foi adicionado. A desproteção de acetato foi concluída em 30 min. Os voláteis foram removidos a vácuo e o resíduo cru foi purificado através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 5 a 100%/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) para fornecer o produto como o sal de bisformiato (17mg, 34% de produção) após a liofilização. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 8,53 (s, 2 H), 7,01 - 7,25 (m, 7 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,13 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,90 - 4,02 (m, 2 H), 3,50 (s, 2 H), 3,35 - 3,48 (m, 3 H), 2,87 - 2,97 (m, 2 H), 2,65 (t, J=6,9 Hz, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 2,15 (s, 3 H), 1,59 - 1,78 (m, 4 H), 1,27 (s, 6 H). MS (ES+) [M+H]+ = 504. 23. Preparação de (2S,3R,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4-((1,3-di- hidróxi-2-(hidroximetil)propan-2-il)amino)butil)benzil)-4-metilfenil)- 6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-triol (25)

[00135] O mesmo procedimento foi empregado tal como para a amina 24, empregando-se 2-amino-2-(hidroxil-metil)propano-1,3-diol, para fornecer o produto 25 como o sal de bisformiato. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 8,53 (s, 2 H), 6,98 - 7,23 (m, 7 H), 4,39 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 4,13 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,94 - 4,03 (m, 2 H), 3,69 (s, 6 H), 3,34 - 3,50 (m, 3 H), 3,03 - 3,13 (m, 2 H), 2,58 - 2,69 (m, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 2,12 - 2,18 (m, 3 H), 1,70 (m, 4 H). [M+H]+ = 537. 24. Preparação de 1-((4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)- 3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2- il)benzil)fenil)butil)amino)ciclopentanocarboxamida (26)

[00136] O mesmo procedimento foi empregado tal como para a amina 24, empregando-se 1-aminociclopentanocarboxamida, para for- necer o produto 26 com 0,5 equivalente de ácido fórmico. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 8,52 (s, 0,5 H, formiato), 6,98 - 7,22 (m, 7 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,13 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 3,91 - 4,01 (m, 2 H), 3,34 - 3,51 (m, 3 H), 2,50 - 2,68 (m, 4 H), 2,21 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 2,10 (d, J=7,3 Hz, 2 H), 1,73 - 1,87 (m, 6 H), 1,63 - 1,72 (m, 2 H), 1,58 (d, J=7,1 Hz, 2 H). MS (ES+) [M+H]+ = 543. 25. Preparação de 1-((4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)- 3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2- il)benzil)fenil)butil)amino)ciclopentanocarboxamida (27)

[00137] O mesmo procedimento foi empregado tal como para a amina 24, empregando-se 3-amino-2,2-dimetilpropanamida, para fornecer o produto 27 com 1,5 equivalentes de ácido fórmico. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 8,52 (s, 1,5 H, formiato), 7,00 - 7,22 (m, 7 H), 4,39 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 4,13 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 3,96 (s, 2 H), 3,35 - 3,52 (m, 3 H), 2,95 - 3,06 (m, 4 H), 2,65 (t, J=6,4 Hz, 2 H), 2,21 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 1,64 - 1,78 (m, 4 H), 1,30 (s, 6 H). MS (ES+) [M+H]+ = 531. 26. Preparação de Derivados de Tetrazol (30 e 31)

[00138] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-((E)- 3-cianoprop-1-en-1-il)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H- piran-3,4,5-tri-ila (28). Um frasco de micro-ondas de 5 mL foi carregado com triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-clorobenzil)-4- metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (7, 208 mg, 0,40 mmol), but-3-enonitrilo (0,10 mL, 1,2 mmol), Pd2dba3 (37 mg, 0,040 mmol), tetrafluoroborato de tri(terc-butil)fosfônio (46 mg, 0,16 mmol), diciclo-hexilmetilamina (0,25 mL, 1,2 mmol), e 2 mL de N- metilpirrolidinona. A reação foi aquecida no micro-ondas a 160°C durante 20 min. A reação foi filtrada sobre Celita com EtOAc excessivo. A camada orgânica foi lavada com H2O, NaHSO4 aquoso saturado, e salmoura. Ela foi secada com MgSO4 e concentrada a vácuo. A cromatografia rápida (gradiente EtOAc a 10 a 80%/hexanos) forneceu o aduzido de Heck 28 (140 mg, 64% de produção). 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,24 - 7,31 (m, 2 H), 7,11 - 7,20 (m, 2 H), 7,02 - 7,09 (m, 3 H), 6,70 (dt, J=15,9, 1,6 Hz, 1 H), 6,01 (dt, J=15,8, 5,7 Hz, 1 H), 5,33 (t, J=9,3 Hz, 1 H), 5,21 (t, J=9,7 Hz, 1 H), 5,12 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 4,52 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 4,39 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 3,95 (d, J=3,5 Hz, 2 H), 3,28 (dd, J=5,8, 1,8 Hz, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 2,16 (s, 3 H), 2,09 (s, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 1,75 (s, 3 H). MS (ES+) [M+NH4]+ = 567.

[00139] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(3- (2H-tetrazol-5-il)propil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H- piran-3,4,5-tri-ila (29). Triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-((E)-3- cianoprop-1-en-1-il)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran- 3,4,5-tri-ila (28, 140 mg, 0,25 mmol) foi dissolvido em 6 mL de MeOH. Pd/C (10% de umidade, 14 mg) foi adicionado e submetido à pressão de hidrogênio de 2,81 kg/cm2 (40 psi) durante 5 horas. A reação foi filtrada sobre Celita com MeOH excessivo e concentrada a vácuo. O produto cru foi empregado sem purificação adicional (120 mg, 87% de produção). MS (ES+) [M+NH4]+ = 569.

[00140] 60 mg deste produto hidrogenado (0,108 mmol) foram ab sorvidos em tolueno (1,1 mL, 0,1 M). Trimetilsililazida (43 μL, 0,324 mmol) e óxido de dibutilestanho (8 mg, 0,0324 mmol) foram adicionados. A reação foi aquecida para 90°C durante 18 horas. A reação foi resfriada para a temperatura ambiente e extinguida com H2O. A camada aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre Na2SO4 , e concentradas a vácuo. A cromatografia rápida em sílica-gel (gradiente EtOAc a 5 a 80%/hexanos em seguida MeOH a 10%/CH2Cl2) forneceu tetrazol 29 (32 mg, 50% de produção). MS (ES+) [M+NH4]+ = 597.

[00141] Preparação de 2-(5-(3-(4- (2-metil-5- ((2S,3R,4R,5S,6R)- 3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenil)propil)- 2H-tetrazol-2-il)-1-(4-metilpiperazin-1-il)etanona (30) e 2-(5-(3-(4-(2- metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H- piran-2-il)benzil)fenil)propil)-1 H-tetrazol-1-il)-1-(4-metilpiperazin-1-il) etanona (31). Triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(3-(2H-tetrazol- 5-il) propil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri- ila (29, 32 mg, 0,0537 mmol) foi combinado com 2-cloro-1-(4- metilpiperazin-1-il)etanona (14 mg, 0,0644 mmol) e trietilamina (22 μL, 0,161 mmol) em 0,5 mL de CH3CN. A reação foi agitada a 60°C durante 18 horas, fornecendo uma mistura de dois regioisômeros. A reação foi diluída com H2O, filtrada, e purificada através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 5 a 100%/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min). Os regioisômeros foram separados completamente. Os respectivos resíduos de produtos foram tratados com metóxido de sódio (0,10 mL, 25% em peso em MeOH) em MeOH (2 mL) sob nitrogênio durante 30 min. A reação foi concentrada a vácuo, e a reação foi purificada através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 5 a 100%/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) e liofilizada para produzir regioisômeros de tetrazol alquilados 30 e 31 (4,3 mg e 3,1 mg, respectivamente, como os sais de bisformiato). A regioquímica foi confirmada por correlações de NOESY.

[00142] Tetrazol 1,2-dissubstituído 30: 1H RNM (400 MHz, MeOH- d4) δ ppm 8,39 (s, 2 H, formiato), 7,01 - 7,21 (m, 8 H), 5,45 (s, 2 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,13 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,97 (s, 2 H), 3,60 (q, J=4,8 Hz, 4 H), 3,33 - 3,50 (m, 3 H), 2,79 (t, J=7,5 Hz, 2 H), 2,68 (t, J=7,5 Hz, 2 H), 2,62 (t, J=5,1 Hz, 2 H), 2,53 (t, J=5,1 Hz, 2 H), 2,41 (s, 3 H), 2,21 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 2,09 (quin, J=7,6 Hz, 2 H). MS (ES+) [M+H]+ = 611.

[00143] Tetrazol 1,3-dissubstituído 31: 1H RNM (400 MHz, MeOH- d4) δ ppm 8,38 (s, 2 H), 6,99 - 7,20 (m, 7 H), 5,74 (s, 2 H), 4,38 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 4,12 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,96 (s, 2 H), 3,65 (t, J=5,3 Hz, 4 H), 3,33 - 3,49 (m, 3 H), 2,88 (t, J=7,5 Hz, 2 H), 2,60 - 2,69 (m, 4 H), 2,57 (t, J=5,1 Hz, 2 H), 2,41 (s, 3 H), 2,21 (s, 3 H), 2,10 - 2,14 (m, 3 H), 2,07 (quin, J=7,3 Hz, 2 H). MS (ES+) [M+H]+ = 611. 27. Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4- hidroxibenzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri- ila (37)

[00144] Preparação de (4-(benzilóxi)fenil) (5-bromo-2-metilfenil) metanol (33). A uma solução de 4-benziloxibromobenzeno (2,63 g, 10 mmol) em THF (50 mL) a -78°C sob nitrogênio foi lentamente adicionado n-butil lítio (2,5 M em hexanos, 4,4 mL, 11 mmol). A reação foi agitada durante 30 minutos. 5-Bromo-2-metilbenzaldeído (32, 1,99 g, 10 mmol) em THF (enxágue de 4 mL mais 1 mL) foi adicionado lentamente. A reação foi deixada aquecer lentamente para cerca de 0°C durante 2 horas, em seguida extinguida com NH4Cl aquoso saturado, diluída com éter, lavada com H2O e salmoura, secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia rápida em sílica-gel (gradiente EtOAc/hexanos a 0-25%) para produzir 3,12 g (82% de produção) do composto título 33 como um óleo claro. 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,80 (d, J=2,3 Hz, 1 H), 7,36 - 7,47 (m, 4 H), 7,29 - 7,36 (m, 2 H), 7,18 - 7,24 (m, 2 H), 6,99 (d, J=8,1 Hz, 1 H), 6,88 - 6,97 (m, 2 H), 5,89 (d, J=3,5 Hz, 1 H), 5,06 (s, 2 H), 2,12 (s, 3 H), 2,06 (d, J=3,5 Hz, 1 H); MS (ES+) [M-OH]+ = 365, 367.

[00145] Preparação de (4-(benzilóxi)fenil)(5-bromo-2-metilfenil) metanol (34). A uma solução de (4-(benzilóxi)fenil)(5-bromo-2-metilfenil) metanol (33, 3,12 g, 8,2 mmol) e trietilsilano (1,6 mL, 9,8 mmol) em CH2Cl2 (40 mL) a 0°C sob nitrogênio foi lentamente adicionado BF3OEt2 (1,4 mL, 11,4 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite, após o que ela foi extinguida com NaHCO3 aquoso saturado e agitada durante 30 minutos. A reação foi diluída com éter, lavada com NaHCO3 aquoso saturado adicional e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia rápida em sílica-gel (gradiente EtOAc : hexanos a 0 a 10%) para produzir 2,71 g (91% de produção) do produto 34 como um sólido branco. 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,30 - 7,49 (m, 5 H), 7,27 (dd, J=8,0, 2,1 Hz, 1 H), 7,22 (d, J=2,0 Hz, 1 H), 6,98 - 7,09 (m, 3 H), 6,86 - 6,97 (m, 2 H), 5,05 (s, 2 H), 3,88 (s, 2 H), 2,19 (s, 3 H); MS (ES+) [M+NH4]+ = 384, 386.

[00146] Preparação de (3-(4- (benzilóxi) benzil) -4- metilfenil) ((3aS,5R,6S,6aS) -6-hidróxi-2,2-dimetiltetra-hidrofuro[2,3-d][1,3]dioxol- 5-il) metanona (35). A uma solução de 2-(4-(benzilóxi)benzil)-4-bromo- 1-metilbenzeno (34, 2,71 g, 7,4 mmol) em THF (37 mL) sob nitrogênio a -78°C foi lentamente adicionado n-butil lítio (3,3 mL de solução a 2,5 M em hexanos, 8,1 mmol), e a reação foi agitada durante 30 min. En- quanto isso, a uma solução de ((3aS,5R,6S,6aS)-6-hidróxi-2,2- dimetiltetra-hidrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-il)(morfolino)metanona (2,02 g, 7,4 mmol) em THF (37 mL) sob nitrogênio a 0°C foi adicionado cloreto de terc-butilmagnésio (8,1 mL de solução a 1 M em THF, 8,1 mmol). A reação foi agitada durante 20 min, em seguida adicionada lentamente através de cânula à solução de aril lítio a -78°C. A reação foi deixada aquecer gradualmente para a temperatura ambiente durante 3 horas, em seguida extinguida com NH4Cl aquoso saturado, diluída com EtO- Ac, lavada com H2O e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia rápida em sílica-gel (gradiente EtOAc/hexanos a 0-50%) para produzir 2,44 g (70% de produção) do produto 35 como uma espuma branca. 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,86 (dd, J=7,8, 1,8 Hz, 1 H), 7,75 - 7,80 (m, 1 H), 7,27 - 7,49 (m, 6 H), 7,04 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,86 - 6,96 (m, 2 H), 6,09 (d, J=3,5 Hz, 1 H), 5,32 (d, J=2,8 Hz, 1 H), 5,04 (s, 2 H), 4,60 (d, J=3,5 Hz, 1 H), 4,53 - 4,58 (m, 1 H), 3,98 (s, 2 H), 3,03 (d, J=4,3 Hz, 1 H), 2,31 (s, 3 H), 1,56 (s, 3 H), 1,36 (s, 3 H); MS (ES+) [M+H]+ = 475.

[00147] Preparação de tetra-acetato de (3S,4R,5S,6S)-6-(3-(4- (benzilóxi) benzil) -4- metilfenil) tetra-hidro-2H-piran-2,3,4,5-tetraíla (36). A uma solução de (3-(4-(benzilóxi) benzil) -4- metilfenil) ((3aS,5R,6S,6aS) -6-hidróxi-2,2-dimetiltetra-hidrofuro[2,3-d][1,3]dioxol- 5-il)metanona (35, 2,44 g, 5,1 mmol) e CeCh- 7 H2O (2,30 g, 6,2 mmol) em MeOH a 0°C foi adicionado lentamente boroidreto de sódio (78 mg, 2,1 mmol em 1 mL de NaOH aquoso a 1 M). A reação foi agitada durante 15 min a 0°C e 15 min a temperatura ambiente, em seguida extinguida com NH4Cl aquoso saturado. A reação foi parcialmente concentrada a vácuo, diluída com EtOAc, lavada com H2O e duas vezes com salmoura (com nova extração), secada sobre Na2SO4, e concentrada a vácuo para produzir 2,4 g de diol como um sólido bran- co.

[00148] Este material foi tratado com AcOH/H2O a 1:1 (20 mL) a 100°C sob nitrogênio durante 22 horas. A reação foi resfriada para a temperatura ambiente, concentrada a vácuo, azeotropada duas vezes com tolueno, e colocada sob vácuo elevado. O resíduo, junto com DMAP (61 mg, 0,5 mmol) foi dissolvido em CH2Cl2 (25 mL) sob nitrogênio a 0°C, e trietilamina (6,2 mL, 45 mmol) foi adicionado, seguido por anidrido acético (3,8 mL, 40 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas, em seguida extinguida com NaHCO3 aquoso saturado (60 mL), agitada durante 50 min, e extraída duas vezes com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados sobre MgSO4, filtrados, e concentrados a vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia rápida em sílica-gel (gradiente EtOAc/hexanos a 0-50%) para produzir 2,80 g (90% de produção) de uma mistura de 1:1 de anômeros α:β do produto 36 como uma espuma branca. 1H RNM (400 MHz, CLORO- FÓRMIO-d) δ ppm 7,29 - 7,47 (m, 5 H), 7,10 - 7,18 (m, 2 H), 7,06 (s, 1 H), 6,98 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,83 - 6,94 (m, 2 H), 6,46 (d, J=3,5 Hz, 0,5 H), 5,87 (d, J=8,3 Hz, 0,5 H), 5,57 (t, J=10,1 Hz, 0,5 H), 5,35 (t, J=9,6 Hz, 0,5 H), 5,21 - 5,30 (m, 1 H), 5,18 (t, J=9,6 Hz, 0,5 H), 5,12 (t, J=9,9 Hz, 0,5 H), 4,80 (d, J=10,1 Hz, 0,5 H), 4,48 (d, J=9,9 Hz, 0,5 H), 3,83 - 3,97 (m, 2 H), 2,21 (s, 1,5 H), 2,20 (s, 3 H), 2,10 (s, 1,5 H), 2,07 (s, 1,5 H), 2,05 (s, 1,5 H), 2,03 (s, 1,5 H), 2,02 (s, 1,5 H), 1,76 (s, 1,5 H), 1,74 (s, 1,5 H); MS (ES+) [M+NH4]+ = 622.

[00149] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4- hidroxibenzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (37). Tetra-acetato de (3S,4R,5S,6S) -6-(3-(4-(benzilóxi) benzil)-4- metilfenil) tetra-hidro-2H-piran-2,3,4,5-tetraíla (36, 5,29 g, 8,8 mmol) foi hidrogenado sobre Pd/C a 10% (50% de umidade) (0,93 g, 0,44 mmol) em THF (44 mL) sob hidrogênio a pressão atmosférica durante 1 hora. A reação foi filtrada através de Celita, concentrada a vácuo, azeotro- pada duas vezes com tolueno, e colocada sob vácuo elevado para secar completamente. O fenol resultante foi levado para a etapa seguinte sem purificação adicional. Ele foi combinado com tioureia (2,01 g, 26 mmol) e dissolvido em dioxano (44 mL). TMSOTf (4,8 mL, 26 mmol) foi adicionado. A reação foi aquecida a 80°C durante 3 horas e em seguida resfriada para a temperatura ambiente. Iodeto de metila (2,2 mL, 35 mmol) foi adicionado, seguido por DIPEA (12 mL, 70 mmol). A reação foi agitada durante a noite, em seguida extinguida com NaHSO4 aquoso saturado (150 mL), agitada vigorosamente durante 2 horas, diluída com EtOAc, lavada com H2O e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia em sílica-gel (gradiente EtOAc/hexanos a 050%) para produzir 3,88 g (88% de produção) do produto 37 como uma espuma branca. 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,10 - 7,19 (m, 2 H), 7,03 (s, 1 H), 6,94 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,68 - 6,77 (m, 2 H), 5,33 (t, J=9,3 Hz, 1 H), 5,21 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 5,12 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 4,59 (s, 1 H), 4,52 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 4,38 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 3,82 - 3,96 (m, 2 H), 2,21 (s, 3 H), 2,18 (s, 3 H), 2,10 (s, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 1,75 (s, 3 H); MS (ES+) [M+NH4]+ = 520. 28. Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(4-cloro-3- (4-hidroxibenzil)fenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila

[00150] Fenol 38 foi preparado de uma maneira análoga ao triaceta- to de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-hidroxibenzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio) tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (37). 1H RNM (400 MHz, CLORO- FÓRMIO-d) δ ppm 7,36 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 7,18 (dd, J=8,3, 2,3 Hz, 1 H), 7,07 (d, J=2,3 Hz, 1 H), 7,03 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,73 - 6,78 (m, 2 H), 5,32 (t, J=9,3 Hz, 1 H), 5,19 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 5,04 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 4,77 (s, 1 H), 4,51 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 4,37 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 3,954,07 (m, 2 H), 2,16 (s, 3 H), 2,09 (s, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 1,73 (s, 3 H); MS (ES+) [M+NH4]+ = 540. 29. Preparação de N-(2-metil-1-(4-metilpiperazin-1-il)-1- oxopropan-2-il)-4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi- 6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenóxi)butanamida (40)

[00151] Preparação de ácido 4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)- 3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il) benzil) fenóxi) bu- tanoico (39). A uma mistura de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4- hidroxibenzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (37, 2,01 g, 4,0 mmol) e K2CO3 (2,76 g, 20 mmol) em DMF (8 mL) sob nitrogênio foi adicionado 4-iodobutanoato de metila (0,81 mL, 6,0 mmol). A reação foi agitada durante a noite a temperatura ambiente, em seguida diluída com Et2O. A camada orgânica foi lavada com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia rápida em sílica-gel (gradiente EtO- Ac/hexanos a 0-50%) para produzir 2,18 g (90% de produção) do éster como uma espuma branca.

[00152] Este material foi tratado com LiOH (29 mL, 1 M aq, 29 mmol) em MeOH (14 mL) e THF (29 mL) sob nitrogênio a 60°C durante 1 hora. A reação foi resfriada para a temperatura ambiente, vertida em NaHSO4 aquoso a 1 M, e extraída com EtOAc. O extrato orgânico foi lavado com H2O e salmoura (com nova extração), secado sobre MgSO4, filtrado, e concentrado a vácuo para produzir 1,71 g (100% de produção) de ácido 39. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,10 - 7,21 (m, 3 H), 7,04 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,76 - 6,85 (m, 2 H), 4,38 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 4,12 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,97 (t, J=6,2 Hz, 2 H), 3,92 (s, 2 H), 3,34 - 3,50 (m, 3 H), 2,47 (t, J=7,3 Hz, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 1,98 - 2,08 (m, 2 H); MS (ES-) [M-H]- = 461.

[00153] Preparação de N- (2-metil-1- (4- metilpiperazin-1-il) -1- oxopropan-2-il)-4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6- (metiltio) tetra-hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenóxi)butanamida (40). Ácido 4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra- hidro -2H-piran-2-il)benzil)fenóxi)butanoico (39, 1,47 g, 3,2 mmol), 2- amino-2-metil-1-(4-metilpiperazin-1-il)propan-1-ona (1,07 g, 2 sal de HCl, 4,1 mmol), HATU (1,45 g, 3,8 mmol), e DIPEA (2,2 mL, 13 mmol) foram combinados em CH3CN (32 mL) e agitados durante a noite a temperatura ambiente. À reação foram adicionados DMAP (39 mg, 0,32 mmol), DIPEA (3,3 mL, 19 mmol), e anidrido acético (1,5 mL, 16 mmol). A reação foi agitada durante 1 hora, em seguida extinguida com NaHCO3 aquoso saturado, agitada durante 1 hora, e extraída duas vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre MgSO4, filtradas, e concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia em sílica-gel (gradiente MeOH/CH2Cl2 a 2-10%) para produzir 2,27 g (94% de produção) de triacetato como uma espuma amarela.

[00154] Este material foi tratado com metóxido de sódio (0,55 mL, 25% em peso em MeOH, 2,4 mmol) em MeOH (30 mL) sob nitrogênio durante 18 horas. A reação foi concentrada a vácuo, e o resíduo foi purificado através de tampão de C18 (MeOH/H2O a 0 - 25 - 75%) e liofilizado para produzir 1,40 g (74% de produção) do composto título 40 como um sólido branco. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,09 - 7,21 (m, 3 H), 7,04 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,77 - 6,84 (m, 2 H), 4,39 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 4,12 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,96 (t, J=6,2 Hz, 2 H), 3,92 (s, 2 H), 3,65 (br. s., 4 H), 3,34 - 3,50 (m, 3 H), 2,39 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 2,34 (br. s., 4 H), 2,203 (s, 3 H), 2,198 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 1,97 - 2,07 (m, 2 H), 1,42 (s, 6 H); MS (ES+) [M+H]+ = 630. 30. Preparação de 1-(4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5- tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2- il)benzil)fenóxi)butanamido)ciclopentanocarboxamida (41)

[00155] Ácido 4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6- (metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenóxi)butanoico (39, 46 mg, 0,10 mmol), 1-aminociclopentanocarboxamida (26 mg, 0,20 mmol), HATU (57 mg, 0,15 mmol), e DIPEA (52 μL, 0,30 mmol) foram combinados em DMF (0,5 mL) e agitados durante a noite a temperatura ambiente. A reação foi diluída com EtOAc, lavada com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo. O material foi purificado através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 100 mm, 20-60% CH3CN/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) e liofilizado para produzir 35 mg (61% de produção) de amida 41 como um sólido branco. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,10 - 7,19 (m, 3 H), 7,04 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,81 (m, J=8,6 Hz, 2 H), 4,39 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 4,12 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,96 (t, J=6,2 Hz, 2 H), 3,92 (s, 2 H), 3,34 - 3,50 (m, 3 H), 2,41 (t, J=7,5 Hz, 2 H), 2,12 - 2,22 (m, 8 H), 2,04 (quin, J=6,9 Hz, 2 H), 1,93 (dt, J=12,8, 5,1 Hz, 2 H), 1,64 - 1,75 (m, 4 H); MS (ES+) [M+H]+ = 573. 6.20. Preparação de 4-(4-(2-cloro-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5- tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenóxi)-N-(1- hidróxi-2-metilpropan-2-il)butanamida (42)

[00156] O mesmo procedimento foi empregado tal como para a amida 41, empregando-se 2-amino-2-metilpropan-1-ol, para fornecer o produto 42. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,36 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,20 - 7,29 (m, 2 H), 7,10 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,79 - 6,86 (m, 2 H), 4,38 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,13 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 3,98 - 4,09 (m, 2 H), 3,96 (t, J=6,3 Hz, 2 H), 3,56 (s, 2 H), 3,44 (t, J=8,6 Hz, 1 H), 3,33 - 3,39 (m, 2 H), 2,35 (t, J=7,5 Hz, 2 H), 2,13 (s, 3 H), 1,96 - 2,08 (m, 2 H), 1,25 (s, 6 H); MS (ES+) [M+H]+ = 554. 6.21. Preparação de 2-metil-2-(2-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R 3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il) benzil) fenóxi) acetamido)propanamida (43)

[00157] O mesmo procedimento foi empregado tal como para a amida 41, empregando-se 2-amino-2-metilpropanamida, para fornecer o produto 43. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,12 - 7,21 (m, 3 H), 7,09 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,86 - 6,94 (m, 2 H), 4,45 (s, 2 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,13 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,95 (s, 2 H), 3,35 - 3,50 (m, 3 H), 2,20 (s, 3 H), 2,15 (s, 3 H), 1,55 (s, 6 H); MS (ES+) [M+H]+ = 519. 6.22. Preparação de 1-(1-hidróxi-2-metilpropan-2-il)-3-(2-(4-(2- metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro- 2H-piran-2-il)benzil)fenóxi)etil)ureia (45)

[00158] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(2- aminoetóxi)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri- ila (44). triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-hidroxibenzil)-4- metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (37, 0,50 g, 1,0 mmol), (2-bromoetil)carbamato de terc-butila (0,62 g, 3,0 mmol), e K2CO3 (0,64 g, 5,0 mmol) foram combinados em DMF (2 mL) sob nitrogênio e agitados durante a noite a temperatura ambiente. (2- Bromoetil)carbamato de terc-butila adicional (0,62 g, 3,0 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada durante um adicional 3 dias. A reação foi diluída com Et2O, lavada com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia em sílica-gel (gradiente EtOAc/hexanos a 0 - 50%) para produzir 0,37 g (58% de produção) do produto alquilado como uma espuma branca.

[00159] Uma porção deste material (0,34 g, 0,53 mmol) foi tratada com TFA (0,5 mL) em CH2Cl2 (4,5 mL) durante 2 horas. A reação foi concentrada a vácuo. O resíduo cru foi diluído com EtOAc, lavado com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura (com nova extração), secado sobre MgSO4, e concentrado a vácuo para produzir 0,30 g (100% de produção) da amina 44 como um espuma casanha. 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,10 - 7,17 (m, 2 H), 7,02 (s, 1 H), 6,99 (d, J=8,8 Hz, 2 H), 6,79 - 6,84 (m, 2 H), 5,33 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 5,21 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 5,11 (t, J=9,7 Hz, 1 H), 4,52 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 4,38 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 4,03 (t, J=5,2 Hz, 2 H), 3,84 - 3,95 (m, 2 H), 3,16 (t, J=5,2 Hz, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 2,17 (s, 3 H), 2,09 (s, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 1,76 (s, 3 H); MS (ES+) [M+H]+ = 546.

[00160] Preparação de 1-(1-hidróxi-2-metilpropan-2-il)-3-(2-(4-(2- metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio) tetra-hidro-2H- piran-2-il)benzil)fenóxi)etil)ureia (45). A uma solução de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(2-aminoetóxi)benzil)-4-metilfenil)-6- (metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (44, 55 mg, 0,10 mmol) e clo- roformiato de 4-nitrofenila (24 mg, 0,12 mmol) em CH2Cl2 (1 mL) foi adicionado trietilamina (19 μL, 0,14 mmol). A reação foi agitada durante 4 horas, e em seguida 2-amino-2-metilpropan-1-ol (19 μL, 0,20 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada durante 90 min., em seguida diluída com EtOAc, lavada com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo.

[00161] Este material foi tratado com metóxido de sódio (23 μL, 25% em peso em MeOH, 0,10 mmol) em MeOH (1 mL) durante 2 horas. A reação foi concentrada a vácuo, e o resíduo foi purificado através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 10 - 70%/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) para produzir 21 mg (40% de produção) de ureia 45 como um sólido branco. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,10 - 7,19 (m, 3 H), 7,04 (d, J=8,8 Hz, 2 H), 6,79 - 6,86 (m, 2 H), 4,38 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,12 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,95 (t, J=5,3 Hz, 2 H), 3,93 (s, 2 H), 3,52 (s, 2 H), 3,33 - 3,49 (m, 5 H), 2,20 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 1,24 (s, 6 H); MS (ES+) [M+H]+ = 535. 6.23. Preparação de 1-(2-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5- tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2- il)benzil)fenóxi)etil)guanidina (46)

[00162] A uma solução de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4- (2-aminoetóxi)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5- tri-ila (44, 31 mg, 0,057 mmol) e nitrato de 3,5-dimetil-1H-pirazol-1- carboximidamida (23 mg, 0,11 mmol) em CH3CN foi adicionado DIPEA (30 μL, 0,17 mmol). A reação foi aquecida a 60°C durante 4 horas, em seguida resfriada para a temperatura ambiente e concentrada a vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH e tratado com algumas gotas de NaOMe (25% em peso em MeOH) durante 1 hora. A reação foi concentrada a vácuo, e o resíduo foi purificado através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 5 a 40%/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) para produzir ureia 46 (9 mg, 34% de produção) como o sal de formiato. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,11 - 7,20 (m, 3 H), 7,07 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,81 - 6,89 (m, 2 H), 4,39 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 4,12 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 4,08 (t, J=4,9 Hz, 2 H), 3,94 (s, 2 H), 3,58 (t, J=5,1 Hz, 2 H), 3,34 - 3,48 (m, 3 H), 2,20 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H); MS (ES+) [M+H]+ = 462. 6.24. Preparação de (2S,3R,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(3-((1-hidróxi-2- metilpropan-2-il)amino)propóxi)benzil)-4-metilfenil)-6- (metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-triol (49)

[00163] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(3- (benzilóxi)propóxi)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran- 3,4,5-tri-ila (47). Triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-hidroxibenzil)- 4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (37, 2,01 g, 4,0 mmol), ((3-bromopropóxi)metil)benzeno (1,41 mL, 8,0 mmol), Bu4NI (148 mg, 0,40 mmol), e K2CO3 (2,76 g, 20 mmol) foram combinados em DMF (8 mL) sob nitrogênio e agitados durante a noite a temperatura ambiente. A reação foi diluída com Et2O, lavada com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia em sílica-gel (gradiente EtOAc/hexanos a 0-50%) para produzir produto alquilado 47 como um sólido vítreo (2,36 g, 91% de produção). 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,28 - 7,36 (m, 5 H), 7,10 - 7,18 (m, 2 H), 7,03 (s, 1 H), 6,97 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,77 - 6,84 (m, 2 H), 5,33 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 5,21 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 5,12 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 4,48 - 4,54 (m, 3 H), 4,38 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 4,06 (t, J=6,3 Hz, 2 H), 3,83 - 3,96 (m, 2 H), 3,66 (t, J=6,2 Hz, 2 H), 2,21 (s, 3 H), 2,17 (s, 3 H), 2,10 (s, 3H) 2,04 - 2,12 (m, 2 H), 2,01 (s, 3 H), 1,75 (s, 3 H); MS (ES+) [M+NH4]+ = 668.

[00164] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(4-metil-3- (4-(3-((metilsulfonil)óxi)propóxi)benzil)fenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H- piran-3,4,5-tri-ila (48). triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(3- (benzilóxi)propóxi)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran- 3,4,5-tri-ila (47, 2,36 g, 3,6 mmol) foi hidrogenado sobre Pd/C a 10% (50% de umidade, 0,38 g, 0,18 mmol) em THF (36 mL) sob hidrogênio a pressão atmosférica durante 18 horas. A reação foi filtrada através de Celita e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia em sílica-gel (gradiente EtOAc/hexanos a 0-70%) para produzir o álcool correpondente como um sólido branco (1,90 g, 93% de produção).

[00165] Este material foi dissolvido em CH2Cl2 (34 mL) sob nitrogênio. Trietilamina (0,61 mL, 4,4 mmol) foi adicionada, seguido por cloreto de metanossulfonila (0,32 mL, 4,1 mmol). A reação foi agitada durante 2 horas. Ela foi diluída com EtOAc, lavada com HCl aquosa a 1 M, H2O, e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo para produzir mesilato 48 como uma espuma branca (2,20 g, 100% de produção). 1H RNM (400 MHz, CLORO- FÓRMIO-d) δ ppm 7,10 - 7,18 (m, 2 H), 7,03 (s, 1 H), 6,99 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,75 - 6,85 (m, 2 H), 5,33 (t, J=9,3 Hz, 1 H), 5,21 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 5,12 (t, J=9,6 Hz, 1 H), 4,52 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 4,45 (t, J=6,1 Hz, 2 H), 4,39 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 4,06 (t, J=5,9 Hz, 2 H), 3,83 - 3,96 (m, 2 H), 3,00 (s, 3 H), 2,20 (s, 3 H), 2,18 - 2,28 (m, 2 H), 2,17 (s, 3 H), 2,10 (s, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 1,76 (s, 3 H); MS (ES+) [M+NH4]+ = 656.

[00166] Preparação de (2S,3R,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(3-((1-hidróxi-2- metilpropan-2-il)amino)propóxi)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra- hidro-2H-piran-3,4,5-triol (49). Triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(4- metil-3-(4-(3-((metilsulfonil)óxi)propóxi)benzil)fenil)-6-(metiltio)tetra- hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (48, 1,23 g, 1,9 mmol) e 2-amino-2- metilpropan-1-ol (0,52 g, 5,8 mmol) foram dissolvidos em álcool de isopropila (3,9 mL) e CH3CN (3,9 mL) sob nitrogênio. A reação foi aquecida durante a noite a 90°C, em seguida resfriada para a temperatura ambiente. Ela foi diluída com EtOAc, lavada com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia em sílica-gel (gradiente 0 a 10% [NH4OH/MeOH]CH2Cl2 a 10%) para produzir 1,04 g da açúcar protegida como um sólido branco.

[00167] Este material foi dissolvido em MeOH (16 mL) sob nitrogênio e tratado com NaOMe (0,19 mL, 25% em peso em MeOH, 0,8 mmol) durante 2 horas. A reação foi concentrada a vácuo, e o resíduo foi purificado através de tampão de C18 (MeOH/H2O a 0-25-80%). O material foi purificado novamente através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 250 mm, CH3CN a 5 a 80%/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min), dissolvido em H2O, e liofilizado para produzir o sal de for- miato de aminoálcool 49 como um sólido branco (710 mg, 68% de produção). 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,11 - 7,21 (m, 3 H), 7,07 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,86 (m, J=8,6 Hz, 2 H), 4,39 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 4,06 - 4,15 (m, 3 H), 3,88 - 3,98 (m, 2 H), 3,55 (s, 2 H), 3,34 - 3,50 (m, 3 H), 3,18 (t, J=7,5 Hz, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 2,08 - 2,18 (m, 2 H), 1,32 (s, 6 H); MS (ES+) [M+H]+ = 506. 6.25. Preparação de (2S,3R,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(3-((3- (dimetilamino)-2,2-dimetilpropil) amino) propóxi) benzil)-4- metilfenil) -6- (metiltio) tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-triol (50)

[00168] Triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)- 2- (4-metil-3- (4-(3- ((metilsulfonil) óxi) propóxi) benzil) fenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H- piran-3,4,5-tri-ila (48, 1,28 g, 2,0 mmol) e N1,N1,2,2-tetrametilpropano- 1,3-diamina (0,64 mL, 4,0 mmol) foram dissolvidos em álcool de iso- propila (4 mL) e CH3CN (4 mL) sob nitrogênio. A reação foi aquecida durante a noite a 90°C, e em seguida resfriada para a temperatura ambiente. MeOH (8 mL) e metóxido de sódio (0,69 mL, 25% em peso em MeOH, 3,0 mmol) foram adicionados, e a reação foi agitada durante 2 horas, em seguida neutralizada com acético ácido e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado duas vezes através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 250 mm, CH3CN a 5-60%/ formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min e coluna C18, 30 x 100 mm, MeOH/H2O a 5-92% (com ácido fórmico a 0,1%), 45 mL/min) e liofilizado para produzir o sal de formiato do produto 50 como um sólido branco (0,52 g, 44% de produção). 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,11 - 7,20 (m, 3 H), 7,08 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,86 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,08 - 4,15 (m, 3 H), 3,94 (s, 2 H), 3,34 - 3,49 (m, 3 H), 3,20 (t, J=6,8 Hz, 2 H), 3,04 (s, 2 H), 2,62 (s, 2 H), 2,32 (s, 6 H), 2,19 (s, 3 H), 2,15 (s, 3 H) 2,10 - 2,18 (m, 2 H), 1,05 (s, 6 H); MS (ES+) [M+H]+ = 547. 6.26. Preparação de 2,2-dimetil -3- ((3- (4- (2-metil-5- ((2S,3R,4R,5S,6R) -3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran- 2-il) benzil)fenóxi)propil)-amino)propanamida (51)

[00169] O mesmo procedimento foi empregado tal como para a amina 50, empregando-se 3-amino-2,2-dimetilpropanamida, para fornecer o produto 51. O material foi purificado através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 5 a 60%/ formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) e liofilizada para produzir o sal de formia- to do produto como um sólido branco. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,11 - 7,21 (m, 3 H), 7,06 (d, J=8,1 Hz, 2 H), 6,88 (m, J=8,3 Hz, 2 H), 4,39 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 4,05 - 4,16 (m, 3 H), 3,94 (s, 2 H), 3,35 - 3,53 (m, 3 H), 3,23 (t, J=6,9 Hz, 2 H), 3,07 (s, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 2,16 - 2,24 (m, 2 H), 2,14 (s, 3 H), 1,33 (s, 6 H); MS (ES+) [M+H]+ = 533. 6.27. Preparação de 1-((2-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)- 3,4,5-tri-hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2- il)benzil)fenóxi)etil)amino)ciclopentanocarboxamida (52)

[00170] O mesmo procedimento foi empregado tal como para a amina 50, empregando-se 1-aminociclopentanocarboxamida, para fornecer o produto 52. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,11 - 7,21 (m, 3 H), 7,06 (d, J=8,3 Hz, 2 H), 6,85 (m, J=8,6 Hz, 2 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,12 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 4,06 (t, J=4,9 Hz, 2 H), 3,94 (s, 2 H), 3,34 - 3,54 (m, 3 H), 2,92 (t, J=4,8 Hz, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H), 2,06 - 2,13 (m, 2 H), 1,75 - 1,83 (m, 6 H); MS (ES+) [M+H]+ = 531. 6.28. Preparação de (2S,3R,4R,5S,6R) -2- (3-(4-(2,3-di- hidroxipropóxi) benzil) -4-metilfenil) -6- (metiltio)tetra-hidro-2H- piran-3,4,5-triol (53)

[00171] A uma solução de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4- hidroxibenzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (37, 50 mg, 0,10 mmol) em EtOH (1 mL) sob nitrogênio foi adicionado trietilamina (1,4 μL, 0,010 mmol) e glicidol (10 μL, 0,15 mmol). A rea- ção foi aquecida a 80°C durante a noite, em seguida carregada com trietilamina e glicidol e aquecida a 90°C durante 5 horas. A reação foi resfriada para a temperatura ambiente, diluída com EtOAc, lavada com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura (com nova extração), secada sobre MgSO4, filtrada, e concentrada a vácuo. O material foi purificado duas vezes através de HPLC prep (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 20-60%/ formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) e liofiliza- da para fornecer diol 53 como um sólido branco (12 mg, 27% de produção). 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7,10 - 7,19 (m, 3 H), 7,05 (d, J=8,8 Hz, 2 H), 6,81 - 6,88 (m, 2 H), 4,39 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 4,12 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,89 - 4,05 (m, 5 H), 3,59 - 3,71 (m, 2 H), 3,35 - 3,49 (m, 3 H), 2,20 (s, 3 H), 2,14 (s, 3 H); MS (ES+) [M+NH4]+ = 468. 6.29. Síntese de 2-amino-2-metil-1-(4-metilpiperazin-1-il) propan-1-ona (55)

[00172] Ácido 2-((terc-butoxicarbonil) amino) -2-metilpropanoico (Boc-Aib-OH, 54, 10,0 g, 49,2 mol), EDC^HCl (11,3 g, 59,0 mmol), HOBt (9,97 g, 73,8 mmol) e DIPEA (25,6 mL, 148 mmol) foram agitados em 250 mL de THF até que todos sólidos dissolvessem. N-metil- piperazina foi adicionado (10,9 mL, 98,4 mmol) e a reação foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi diluída com 300 mL de EtOAc e lavada duas vezes com NaHCO3 aquoso saturado. A camada orgânica foi em seguida lavada com salmoura, secada sobre MgSO4, filtrada, e o solvente foi removido a vácuo. Este material cru foi dissolvido em 300 mL de CH3CN. HCl (4N em dioxano, 49 mL, 196 mmol) foi adicionado durante 10 minutos. A reação foi agitada durante 8 horas, durante cujo tempo o produto forma um precipitado branco. O produto foi filtrado, lavado com CH2Cl2, e secado sob vácuo elevado durante a noite para fornecer o produto 55 como o sal de bis-cloridrato (10,4 g, 82% de produção). 1H RNM (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,30 (br. s., 3 H), 4,35 (d, J=13,6 Hz, 2 H), 3,52 (br. s., 2 H), 3,41 (d, J=11,1 Hz, 2 H), 3,01 (q, J=11,1 Hz, 2 H), 2,77 (d, J=3,5 Hz, 3 H), 1,56 (s, 6 H). MS (ES+) [M+H]+ = 186. 6.30. Preparação de (1-aminociclopentil) (4-metilpiperazin-1- 11) metanona (56)

[00173] O mesmo procedimento foi empregado tal como empregado para amida 55, iniciando com ácido 1-((terc-butoxicarbonil)amino) ciclopentanocarboxílico, para fornecer o produto 56. 1H RNM (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11,56 (br. s., 1 H), 8,32 (br. s., 3 H), 3,41 (d, J=11,6 Hz, 4 H), 3,05 (q, J=10,6 Hz, 2 H), 2,76 (d, J=4,3 Hz, 3 H), 2,10 - 2,22 (m, 2 H), 1,81 - 2,02 (m, 8 H). MS (ES+) [M+H]+ = 212. 6.31. Preparação de 2-amino-2-metil-N-(1-metilpiperidin-4-il) propanamida (58)

[00174] Ácido 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-2-metilpropanoico (Z- Aib-OH, 57, 25,0 g, 105 mol), EDC^HCl (24,2 g, 126 mmol), HOBt (21,2 g, 157 mmol) e DIPEA (54,9 mL, 315 mmol) foram agitados em 500 mL de THF até que todos os sólidos dissolvessem. N-Metilpiperidin-4- amina foi adicionado (15,9 mL, 126 mmol) e a reação foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi diluída com 600 mL de EtOAc e lavada duas vezes com NaHCO3 aquoso saturado. A camada orgânica foi em seguida lavada com salmoura, secada sobre MgSO4, filtrada, e o solvente foi removido a vácuo. Este material cru foi dissolvido em 150 mL de THF e 150 mL de MeOH. Pd/C (10% de umidade, 2,92 g) foi adicionado e a reação foi agitada sob pressão atmosférica de hidrogênio durante 8 horas. A reação foi filtrada sobre Celita com MeOH excessivo, os solventes removidos a vácuo, e o sólido resultante amarelo claro foi secado sob vácuo elevado durante a noite para fornecer o produto 57 como a base livre (17,4 g, 85% de produção). 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,54 (br. s., 1 H), 3,62 - 3,77 (m, 1 H), 2,75 (d, J=11,6 Hz, 2 H), 2,27 (s, 3 H), 2,11 (t, J=10,9 Hz, 2 H), 1,89 (dq, J=12,6, 3,8 Hz, 2 H), 1,48 (qd, J=11,5, 3,5 Hz, 2 H), 1,30 - 1,39 (m, 6 H). [M+H]+ = 200. 6.32. Preparação de 2-amino-N-(2-(dimetilamino)etil)-2- metilpropanamida (59)

[00175] O mesmo procedimento foi empregado tal como usado para amida 57, empregando-se N,N-dimetiletano-1,2-diamina, para fornecer o produto 59. 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,78 (br. s., 1 H), 3,31 (q, J=6,1 Hz, 2 H), 2,42 (t, J=6,2 Hz, 2 H), 2,25 (s, 6 H), 1,68 (br. s., 2 H), 1,36 (s, 6 H). [M+H]+ = 174. 6.33. Preparação de N-(1-((2-(dimetilamino)etil)amino)-2- metil-1-oxopropan-2-il)-4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri- hidróxi-6-((S)-metilsulfinil)tetra-hidro-2H-piran-2- il)benzil)fenil)butanamida (61)

[00176] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4- metóxi-4-oxobutil)benzil)-4-metilfenil)-6-((S)-metilsulfinil)tetra-hidro-2H- piran-3,4,5-tri-ila (60). Ácido peracético (32% em HOAc diluído, 0,12 mL, 0,512 mmol) foi adicionado a uma solução de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4-metóxi-4-oxobutil)benzil)-4-metilfenil)-6- (metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (9, 100 mg, 0,170 mmol) em 1 mL de HOAc e 2 mL de CH3CN a 0°C. A reação foi agitada durante 20 min a 0°C. A reação foi extinguida com NaOH aquoso a 1N, em seguida extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre MgSO4, filtradas, e os solventes foram removidos a vácuo para fornecer uma mistura dias- tereomérica de 2:1 de sulfóxidos 60 (60 mg, 58% de produção) que foi levado para a etapa seguinte sem purificação adicional. 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d, 2:1 de mistura de diastereômeros em S, designado como Ha principal e Hb secundário) δ ppm 7,11 - 7,17 (m, 2 H), 7,05 - 7,09 (m, 2 H), 6,97 - 7,02 (m, 3 H), 5,59 (t, J=9,3 Hz, 1 Hb), 5,46 (t, J=9,3 Hz, 1 Hb), 5,41 (t, J=9,6 Hz, 1 Ha), 5,21 (t, J=9,9 Hz, 1 Ha), 5,17 (t, J=9,3 Hz, 1 Hb), 5,13 (t, J=9,9 Hz, 1 Ha), 4,50 (t, J=10,4 Hz, 1 Ha), 4,48 (d, J=9,9 Hz, 1 Ha), 4,46 (d, J=10,1 Hz, 1 Hb), 4,31 (d, J=10,1 Hz, 1 Hb), 3,93 (m, 2 Hb), 3,92 (m, 2 Ha), 3,66 (s, 3 H), 2,67 (s, 3 Ha), 2,64 (s, 3 Hb), 2,61 (t, J=7,8 Hz, 2 H), 2,33 (t, J=7,3 Hz, 2 H), 2,23 (s, 3 H), 2,09 (s, 3 Ha), 2,08 (s, 3 Hb), 2,02 (s, 3 Hb), 2,01 (s, 3 Ha), 1,93 (quin, J=7,3 Hz, 2 H), 1,75 (s, 3 Ha), 1,74 (s, 3 Hb). MS (ES+) [M+H]+ = 603.

[00177] Preparação de N-(1-((2-(dimetilamino)etil)amino)-2-metil-1- oxopropan-2-il)-4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6- ((S)-metilsulfinil)-tetra-hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenil)butanamida (61). Sulfóxidos 60 (60 mg, 0,10 mmol) foram suspensos em 2,5 mL de uma mistura de 2:2:1 de MeOH/H2O/THF. LiOH (24 mg, 1,0 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 4 horas, em cujo tempo o material de partida entrou em solução. A reação foi extinguida com NaHSO4 aquoso saturado. Está camada acídica foi extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre MgSO4, filtradas, e os solventes foram removidos a vácuo. Este resíduo cru foi dissolvido em 1 mL de CH3CN. EDC^HCl (31 mg, 0,16 mmol), HOBt (31 mg, 0,16 mmol), e DIPEA (50 μL, 0,30 mmol) foram adicionados e agitados durante 10 minutos. 2-Amino -N-(2- (dimetilamino) etil)-2-metil- propanamida (30 mg, 0,17 mmol) em 0,5 mL de CH3CN foi adicionado. A reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. Até conclusão da reação, o solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi purificado através de HPLC preparativa (coluna C18, 30 x 100 mm, MeOH a 5-95%/ ácido fórmico aquoso a 10 mM, 45 mL/min) para fornecer sulfóxido 61 como o sal de formiato (23 mg, 35% de produção) como um mistura diastereomérica de sulfóxidos de 2:1. 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4, 2:1 de mistura de diastereômeros em S, designado como Ha principal e Hb secundário) δ ppm 8,54 (br. s, 1 H, formiato), 7,14 - 7,19 (m, 3 H), 7,04 - 7,10 (m, 4 H), 4,47 (d, J=9,6 Hz, 1 Ha), 4,28 (d, J=9,1 Hz, 1 Hb), 4,26 (d, J=9,3 Hz, 1 Ha), 4,12 (d, J=9,9 Hz, 1 Hb), 3,97 (s, 3 Hb), 3,96 (s, 3 Ha), 3,82 (t, J=9,6 Hz, 1 Hb), 3,68 (t, J=9,1 Hz, 1 Ha), 3,60 (t, J=9,0 Hz, 1 Hb), 3,58 (t, J=8,8 Hz, 1 Ha), 3,45 (t, J=5,6 Hz, 2 H), 3,39 - 3,47 (m, 1 Ha + 1 Hb), 2,91 (t, J=5,1 Hz, 2 H), 2,73 (s, 3 Ha), 2,64 (s, 6 H), 2,61 (s, 3 Hb), 2,60 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 2,22 (s, 3 Ha), 2,21 (s, 3 Hb), 2,21 (t, J = 7,6 Hz, 2 H), 1,87 (quin, J = 7,3 Hz, 2 H), 1,41 (s, 6 H). MS (ES+) [M+H]+ = 618. 6.34. Preparação de N-(1-((2-(dimetilamino)etil)amino)-2- metil-1-oxopropan-2-il)-4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri- hidróxi-6-(metilsulfonil)tetra-hidro-2H-piran-2- il)benzil)fenil)butanamida (63).

[00178] Preparação de triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4- metóxi-4-oxobutil)benzil)-4-metilfenil)-6-(metilsulfonil)tetra-hidro-2H- piran -3,4,5-tri-ila (62). Peróxido de hidrogênio de ureia (UHP, 48 mg, 0,512 mmol) e anidrido ftálico (151 mg, 1,02 mmol) foram dissolvidos em 1,5 mL de CH3CN e 0,3 mL de MeOH. Triacetato de (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4-metóxi-4-oxobutil)benzil)-4-metilfenil)-6- (metiltio)tetra-hidro-2H-piran-3,4,5-tri-ila (9, 100 mg, 0,170 mmol) dissolvido em 2 mL de CH3CN foi adicionado. A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 16 horas. A reação foi carregada com um adicional UHP (12 mg, 0,128 mmol) e anidrido ftálico (38 mg, 0,255 mmol) e agitada durante 1 hora. Em completa conversão à sulfona, a reação foi extinguida com NaHCO3 aquoso saturado. Esta camada aquosa foi extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre MgSO4, filtradas, e os solventes foram removidos a vácuo para fornecer sulfona 62 (95 mg, 92% de produção) que foi levada para a etapa seguinte sem purificação adicional. 1H RNM (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,11 - 7,20 (m, 2 H), 7,08 (d, J=8,1 Hz, 2 H), 6,93 - 7,04 (m, 3 H), 5,57 (t, J=9,7 Hz, 1 H), 5,41 (t, J=9,3 Hz, 1 H), 5,17 (t, J=9,7 Hz, 1 H), 4,49 (d, J=9,7 Hz, 1 H), 4,52 (d, J=9,7 Hz, 1 H), 3,93 (m, 2 H), 3,67 (s, 3 H), 2,92 (s, 3 H), 2,62 (t, J=7,5 Hz, 2 H), 2,33 (t, J=7,5 Hz, 2 H), 2,24 (s, 3 H), 2,09 (s, 3 H), 2,02 (s, 3 H), 1,94 (quin, J=7,5 Hz, 2 H), 1,75 (s, 3 H). MS (ES+) [M+H]+ = 619.

[00179] Preparação de N-(1-((2-(dimetilamino)etil)amino)-2-metil-1- oxopropan-2-il)-4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6- (metilsulfonil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenil)butanamida (63). Sulfona 62 (95 mg, 0,15 mmol) foi suspensa em 5 mL de uma mistura de MeOH/H2O/THF de 2:2:1. LiOH (37 mg, 1,53 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 4 horas, durante cujo tempo o material de partida entrou em solução. A reação foi extinguida com NaHSO4 aquoso saturado. Esta camada acídica foi extraída três vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre MgSO4, filtradas, e os solventes foram removidos a vácuo. Este resíduo cru foi dissolvido em 1,5 mL de CH3CN. EDC^HCl (43 mg, 0,22 mmol), HOBt (43 mg, 0,22 mmol), e DIPEA (75 μL, 0,30 mmol) foram adicionados e agitados durante 10 min. 2-Amino-N-(2-(dimetilamino)etil)-2-metilpropanamida (30 mg, 0,45 mmol) em 0,5 mL de CH3CN foi adicionado. A reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. Na conclusão da reação, o solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi purificado através de HPLC preparativa (coluna C18, 30 x 100 mm, MeOH a 5-95%/ácido fórmico aquoso a 10 mM, 45 mL/min) para fornecer o composto título 63 como o sal de formiato (30 mg, 30% de produção). 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 8,54 (br. s, 1 H, formiato), 7,12 - 7,22 (m, 3 H), 7,10 (d, J=8,0 Hz, 2 H), 7,06 (d, J=8,0 Hz, 2 H), 4,52 (d, J=9,5 Hz, 1 H), 4,28 (d, J=9,5 Hz, 1 H), 3,96 (s, 2 H), 3,88 (t, J=9,2 Hz, 1 H), 3,56 (t, J=8,9 Hz, 1 H), 3,45 (t, J=5,3 Hz, 2 H), 3,41 (t, J=9,3 Hz, 1 H), 2,93 (s, 3 H), 2,89 (t, J=5,3 Hz, 2 H), 2,64 (s, 6 H), 2,61 (t, J=7,8 Hz, 2 H), 2,21 (t, J=8,0 Hz, 5 H), 2,14 - 2,29 (m, 3 H), 1,88 (quin, J=7,5 Hz, 2 H), 1,41 (s, 6 H). MS (ES+) [M+H]+ = 634. 6.35. Preparação de Sulfóxido/N-Óxido (64) e Sulfona/N- Óxido (65)

[00180] A uma solução de N-(1-((2-(dimetilamino)etil)amino)-2- metil-1-oxopropan-2-il)-4-(4-(2-metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri- hidróxi-6-(metiltio)tetra-hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenil)butanamida (13, 30 mg, 0,050 mmol) em 0,5 mL de CH2Cl2 foi adicionado ácido m- cloroperbenzoico (22 mg, 0,125 mmol). A reação foi agitada durante 5 minutos e o solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi purificado através de HPLC preparativa (coluna C18, 30 x 100 mm, CH3CN a 5 a 100%/formiato de amônio aquoso a 10 mM, 45 mL/min) para fornecer produto oxidado 64 (16 mg, 50% de produção) e 65 (3 mg, 9% de produção).

[00181] Óxido de etanamina de N,N-dimetil-2-(2-metil-2-(4-(4-(2- metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6-((S)-metilsulfinil)tetra- hidro-2H-piran-2-il)benzil)fenil)butanamido)propanamido) (64, 2:1 de mistura de diastereômeros em S, designado com Ha principal e Hb se-cundário): 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 8,46 (s, 2 H, formiato), 7,14 - 7,26 (m, 3 H), 7,04 - 7,10 (m, 4 H), 4,46 (d, J=9,6 Hz, 1 Ha), 4,27 (d, J=9,6 Hz, 1 Hb), 4,26 (d, J=9,6 Hz, 1 Ha), 4,12 (d, J=9,9 Hz, 1 Hb), 3,97 (s, 3 Hb), 3,96 (s, 3 Ha), 3,82 (t, J=9,1 Hz, 1 Hb), 3,68 (t, J=9,1 Hz, 1 Ha), 3,59 (t, J=8,9 Hz, 1 Hb), 3,58 (t, J=8,9 Hz, 1 Ha), 3,43 (t, J=6,1 Hz, 2 H), 3,41 (t, J=9,1 Hz, 1 Ha + 1 Hb sobreposição), 3,20 (s, 6 H), 2,72 (s, 3 Ha), 2,62 (s, 3 Hb), 2,60 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 2,23 (s, 3 Ha), 2,22 (s, 3 Hb), 2,20 (t, J = 7,6 Hz, 2 H), 1,86 (quin, J = 7,6 Hz, 2 H), 1,41 (s, 6 H). MS (ES+) [M+H]+ = 634.

[00182] Óxido de etanamina de N,N-dimetil-2-(2-metil-2-(4-(4-(2- metil-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-tri-hidróxi-6-(metilsulfonil)tetra-hidro- 2H-piran-2-il)benzil)fenil)butanamido)propanamido) (65): 1H RNM (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 8,41 (s, 1 H, formiato), 7,12 - 7,23 (m, 3 H), 7,09 (d, J=7,8 Hz, 2 H), 7,05 (d, J=7,8 Hz, 2 H), 4,52 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,28 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 3,96 (s, 2 H), 3,88 (t, J=9,2 Hz, 1 H), 3,64 (t, J=5,7 Hz, 2 H), 3,56 (t, J=9,0 Hz, 1 H), 3,45 (t, J=5,7 Hz, 2 H), 3,41 (t, J=9,1 Hz, 1 H), 3,23 (s, 6 H), 2,93 (s, 3 H), 2,60 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 2,23 (s, 3 H), 2,20 (t, J=7,6 Hz, 2 H), 1,87 (quin, J=7,6 Hz, 2 H), 1,41 (s, 6 H). MS (ES+) [M+H]+ = 650. 6.36. Compostos Adicionais

[00183] Numerosos compostos adicionais da invenção foram prepa rados empregando-se procedimentos análogos àqueles descritos acima. Estes compostos estão incluídos na Tabela 1. As colunas entitula- da "SLGT1" e "SGLT2" fornecem medidas de IC50 de SGLT1 humana e IC50 de SGLT1 obtidas como descrito abaixo, onde: *** refere-se a um valor menor que 0,01 μM; ** refere-se a um valor menor que 0,1 μM; * refere-se a um valor menor que 1 μM; e -- refere-se a um valor não medido ou excedendo μM.

6.37. Ensaio de Inibição de SGLT1 Humano In Vitro

[00184] Cotransportador tipo 1 de sódio/glicose humano (SGLT1; número de acessão NP_000334; GI: 4507031) foi clonado em vetor de pIRESpuro2 para expressão mamífera (construção: HA-SGLT1- pIRESpuro2 ).

[00185] Células de HEK293 foram transfectadas com o vetor de HA-SGLT1-pIRESpuro2 humano e a linhagem de células estáveis de carga foi selecionada na presença de 0,5 μg/mL de puromicina. Células de HA-SGLT1 humano foram mantidas em meios de DMEM contendo FBS a 10%, GPS a 1% e 0,5 μg/mL de puromicina.

[00186] As células de HEK293 expressando o HA-SGLT1 humano foram semeadas em placas de 384 cavidades (30.000 células/cavidade) em meios de DMEM contendo FBS a 10%, GPS a 1% e 0,5 μg/mL de puromicina, em seguida incubadas durante a noite a 37°C, CO2 a 5%. As células foram em seguida lavadas com tampão de captação (NaCl a 140 mM, KCl a 2 mM, CaCl2 a 1 mM, MgCl2 a 1 mM, HEPES a 10 mM, Tris a 5 mM, albumina de soro bovina (BSA) a 1 mg/mL, pH 7,3). Vinte microlitros de tampão de captação com ou sem compostos de teste foram adicionados às células. Em seguida, 20 microlitros de tampão de captação contendo 14C-AMG (100 nCi) também foram adicionados às células. As placas de células foram incubadas a 37°C, CO2 a 5% durante 1-2 horas. Após lavagem das células com tampão de captação, líquido de cintilação foi adicionado (40 microlitros/cavidade) e a captação de 14C-AMG foi medida por contagem da radioatividade empregando-se um contador de cintilações (TopCoulter NXT; Packard Instruments). 6.38. Ensaio de Inibição de SGLT2 Humano In Vitro

[00187] Cotransportador tipo 2 de sódio/glicose (SGLT2) (SGLT2; número de acessão P31639; GI:400337) foi clonado em vetor de pIRESpuro2 para expressão mamífera (construção: HA-SGLT2- pIRESpuro2).

[00188] Células de HEK293 foram transfectadas com o vetor de HA-SGLT2-pIRESpuro2 humano e a linhagem de células estáveis de carga foi selecionada na presença de 0,5 μg/mL de puromicina. Células de HA-SGLT2 humano foram mantidas em meios de DMEM contendo FBS a 10%, GPS a 1% e 0,5 μg/mL de puromicina.

[00189] As células de HEK293 expressando o HA-SGLT2 humano foram semeadas em placas de 384 cavidades (30.000 células/cavidade) em meios de DMEM contendo FBS a 10%, GPS a 1% e 0,5 μg/mL de puromicina, em seguida incubadas durante a noite a 37°C, CO2 a 5%. As células foram em seguida lavadas com tampão de captação (NaCl a 140 mM, KCl a 2 mM, CaCl2 a 1 mM, MgCl2 a 1 mM, HEPES a 10 mM, Tris a 5 mM, albumina de soro bovina (BSA) a 1 mg/mL, pH 7,3). Vinte microlitros de tampão de captação com ou sem compostos de teste foram adicionados às células. Em seguida, 20 microlitros de tampão de captação contendo 14C-AMG (100 nCi) foram adicionados às células. As placas de células foram incubadas a 37°C, CO2 a 5% durante 1 a 2 horas. Após lavagem das células com tampão de captação, líquido de cintilação foi adicionado (40 microlitros/cavidade) e a captação de 14C-AMG foi medida por contagem da radioatividade empregando-se um contador de cintilações (TopCoulter NXT; Packard Instruments). 6.39. Tolerabilidade e Farmacologia

[00190] A tolerabilidade e farmacologia in vivo de compostos da invenção foi determinada empregando-se camundongos C57/Blk6 machos de 18 semanas de idade. Os camundongos foram transferidos para dieta pobre em gordura a 10% (LFD, D12450Bi) de comida regular e alojados individualmente durante uma semana antes do estudo. Os camundongos foram em seguida randomizados nos seguintes grupos por seu peso corporal:

[00191] Os camundongos receberam ou veículo ou composto por gavagem oral a 1 mg/kg e em um volume de 10 mL/kg uma vez por dia durante 4 dias. Peso corporal, consumo de alimento e diarreia foram monitorados diariamente. Em 6 horas após a última dose, o sangue foi coletado dos camundongos por sangria retro-orbital para glicose básica. Os camundongos foram em seguida administrados com uma refeição contendo glicose, preparada por suspensão de 50 g de pó para dieta pobre em gordura (LFD) (10% de kcal como gordura; dieta D12450B, Research Diets, New Brunswick, NJ) em 60 mL de água. Os camundongos conscientes receberam, por gavagem oral, 20 mL/kg desta suspensão, juntamente com 5 mL/kg de dextrose a 50%, o que lhes guarneceu com glicose a 9,2 g/kg, proteína a 2,5 g/kg e gordura a 0,6 g/kg.

[00192] O sangue foi coletado em 10, 30, e 60 minutos após a refeição para estimar a excursão da glicose pós-prandial. A glicose sanguínea foi medida empregando-se um glicômetro Accu-Chek Aviva (Roche Diagnostics, Indianápolis, IN) de acordo com o protocolo recomendado pelo fabricante. A figura 1A mostra o efeito de 1,0 mg/kg ("mpk") de compostos A-E sobre os níveis de glicose sanguínea dos camundongos, comparados ao veículo, como uma função do tempo após seu desafio pós-refeição. Áreas sob as curvas para cada animal no experimento são mostradas na Figura 1B.

[00193] Em 60 minutos após o desafio com refeição, sangue adicional foi coletado para análise de peptídeo 1 semelhante ao glucagon total (tGLP-1). Para esta medição, o plasma foi preparado por centrifugação das amostras de sangue a 1000 rpm durante 10 minutos a 4°C. tGLP-1 foi analisado por ELISA (Kit de ELISA Total de Peptídeo 1 Semelhante ao Glucagon, catálogo #EZGLP1T-36K, Millipore, St. Charles, MO) de acordo com o protocolo recomendado por Millipore. A figura 2 mostra o efeito dos compostos sobre tGLP-1 plasmático, comparados ao veículo, para cada camundongo.

[00194] Os conteúdos cecais foram coletados para análise de glicose imediatamente após coleta da amostra de sangue final. Esta análise foi executada pela adição de cinco mL de água MilliQ fria a 1 grama de conteúdos cecais. A mistura foi em seguida homogenizada durante 1 minuto empregando-se um Mini-Misturador de Contas (Biospec Products, Bartlesville, OK). O homogeneizado foi centrifugado a 4°C durante 25 minutos na velocidade de 3750 rpm. O sobrenadante foi coletado. A glicose cecal foi analisada pelo Auto-Analisador Cobas Integra 400 (Roche Diagnostics). A figura 3 mostra os resultados desta análise para cada camundongo. 6.40. Efeitos sobre Camundongos Diabéticos KKAy

[00195] Camundongos KKAy machos de doze semanas de idade foram adquiridos de The Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME). Eles foram transferidos para dieta rica em gordura a 45% (HFD; dieta D12451i, Research Diets) e alojados individualmente durante uma semana antes do estudo. Os camundongos foram randomizados nos seguintes grupos por seus níveis de HbA1c e pesos corporais:

onde o Composto C é (2S,3R,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(3-((1-hidróxi-2- metilpropan-2-il)amino)propóxi)benzil)-4-metilfenil)-6-(metiltio)tetra- hidro-2H-piran-3,4,5-triol.

[00196] Os camundongos receberam ou veículo ou composto C uma vez por dia às 5:00 da tarde durante 36 dias. Peso corporal e consumo de alimento foram monitorados diariamente. No dia 22, o sangue foi coletado antes do desafio com glicose para glicose básica. Os camundongos foram em seguida administrados com uma dose de bolo de glicose (2 g/kg, 10 mL/kg). O sangue foi coletado em 30, 60 e 120 minutos após o desafio com glicose para estimar a excursão da glicose. A glicose sanguínea foi analisada por Auto-Analisador Cobas Integra 400 (Roche Diagnostics). A figura 4 mostra a redução dependente da dose na excursão da glicose em 15 horas após a dosagem de Composto C, onde o tempo t = 0 é o momento em que o bolo de glicose foi administrado.

[00197] No dia 26 após a dosagem, o sangue foi coletado para HbA1c. HbA1c foi medido empregando-se um medidor fabricado pela Bayer de acordo com o protocolo recomendado pela Bayer. Tal como mostrado na Figura 5A, camundongos tratados com o Composto C exibiram uma redução em HbA1c dependente da dose, significante. A figura 5B mostra a mudança no HbA1c de camundongos entre os dias 0 e 27.

[00198] No dia 29, os camundongos novamente receberam um bolo de glicose (2 g/kg, 10 mL/kg). O sangue foi coletado em 60 minutos após o desafio com glicose e analisado quanto ao tGLP-1. O plasma foi preparado por centrifugação das amostras de sangue a 1000 rpm durante 10 minutos a 4°C. tGLP-1 foi analisado por ELISA (Kit de ELISA Total de Peptídeo 1 Semelhante ao Glucagon, catálogo #EZGLP1T-36K, Millipore, St. Charles, MO) de acordo com o protocolo recomendado por Millipore. Tal como mostrado na Figura 6, um aumento significante em tGLP-1 pós-prandial foi observado no grupo de 4,5 mpk (p < 0,5).

[00199] Todas as publicações (por exemplo, patentes e pedidos de patentes) citadas acima estão incorporadas aqui por referência em suas totalidades.

Claims

1. Composto, caracterizado pelo fato de que é N-(1-((2- (dimetilamino)etil)amino)-2-metil-1-oxopropan-2-il)-4-(4-(2-metil-5- ((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-trihidroxi-6-(metiltio)tetrahidro-2H-piran-2- il)benzil)fenil)butanamida:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido na reivindicação 1 e um ex- cipiente ou diluente farmaceuticamente aceitável.

3. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que é uma forma de dosagem oral sólida.

4. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que a forma de dosagem oral sólida é um comprimido.

5. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que a forma de dosagem oral sólida é uma cápsula.