BR112013021369B1

BR112013021369B1 - Implante e sistema de formação de um implante para promover crescimento ósseo

Info

Publication number: BR112013021369B1
Application number: BR112013021369-8A
Authority: BR
Inventors: Meredith Hans Moore; Doug Buechter; Melissa Brown; Lisa Hughes; Stephen Hornsby
Original assignee: Synthes Gmbh
Priority date: 2011-02-25
Filing date: 2012-02-24
Publication date: 2019-04-16
Also published as: US8642065B2; AU2016200228B2; AU2012259434A1; CA2827924A1; TWI527585B; US20120219599A1; JP6129751B2; KR20140009398A; TW201247210A; EP2678051A1; JP2014506522A; AU2012259434B2; JP2017056261A; JP6328740B2; KR101883144B1; CN103476440A; WO2012161788A1; CN103476440B; AU2016200228A1; EP2678051B1

Abstract

implante e sistema de formação de um implante para promover crescimento ósseo a presente invenção refere-se a um implante para melhorar o crescimento ósseo, que inclui um arcabouço osteocondutivo e uma molécula pequena osteoindutiva. o arcabouço osteocondutivo pode incluir, ainda, um aglutinante polimérico. o implante pode também incluir um material osteogênico para fornecer uma população de células viáveis para auxiliar no reparo e remodelagem do osso. é apresentado, também, um sistema para formação de um implante para melhorar o crescimento ósseo, além de métodos para formar o implante de acordo com a descrição, além de métodos de uso terapêutico do implante.

Description

Este pedido reivindica a prioridade sobre o pedido de patente provisório US n° de série 61/446.706, depositado em 25 de fevereiro de 2011, estando sua descrição aqui incorporada por referência como apresentado em sua totalidade na presente invenção.

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente descrição refere-se a um implante para promover o crescimento do osso, incluindo um arcabouço osteocondutivo e uma molécula pequena osteoindutiva. O implante pode incluir, ainda, material osteogênico. É apresentado, também, um sistema para formação de um implante, além de um método de tratamento que utiliza o implante da presente descri15 ção.

ANTECEDENTES

Reparos da fratura do osso e fusões espinhais com frequência exigem um estímulo biológico para acelear o crescimento ósseo. O autoenxerto é a opção de tratamento mais desejada clinicamente devido ao seu perfil de segurança e eficácia comprovados. O autoenxerto é osteogênico, osteoindutivo e osteocondutivo, e tem risco zero de rejeição. Entretanto, o tratamento com autoenxerto pode apresentar problemas devido a questões de morbidade associadas à colheita do enxerto, por exemplo, da crista ilíaca do paciente e porque o volume de autoenxerto necessário nem sempre está disponível. Dessa forma, há uma existente necessidade clínica de opções de tratamento osteogênicas e osteoindutivas não baseadas em autoenxertos.

A osteoindução é uma trajetória complexa que envolve múltiplas camadas de redundância com fatores de crescimento, hormônios, célulastronco e uma série de outros fatores que contribuem para o processo. Os tratamentos atuais com fatores de crescimento, como proteínas ósseas morfogéticas (bmp, bone morphogenic proteins), estão algumas vezes sujeitos à dosagem super fisiológica que pode ter efeitos colaterais indesejados e poPetição 870190014220, de 12/02/2019, pág. 9/17

2/25 dem não ser a melhor solução. Os tratamentos de osteoindução têm sido classicamente definidos por fatores ou matrizes que podem estimular o crescimento do osso de novo, por exemplo, BMP-2 e BMP-7. A cura óssea é um processo multifacetado, rigorosamente coordenado, que envolve células e processos biológicos diferentes que são controlados e gerenciados através de uma variedade de vias de sinalização celular. Fatores de crescimento humano, como BMPs, com frequência conduzem essas vias e a administração delas terapeuticamente representa uma maneira de impactar o crescimento do osso.

Entretanto, devido às extensivas vias que se cruzam para desencadear o crescimento ósseo, há tecnologias potenciais com propriedades osteoindutivas além das BMPs.

SUMÁRIO

A presente descrição é direcionada a um implante para promover o crescimento ósseo, incluindo um arcabouço osteocondutivo e uma molécula pequena osteoindutiva. O arcabouço pode incluir material de autoenxerto, material de aloenxerto, substitutos ósseos à base de cerâmica, e blendas e misturas dos mesmos. A molécula pequena osteoindutiva pode ser selecionada a partir de corticoesteroides, oxiesteróis, compostos que regulam positivamente o cAMP intracelular e compostos que impactam a rota de HMG CoA reductase, e blendas e misturas dos mesmos.

O implante pode incluir, ainda, um material osteogênico. O material osteogênico pode ser obtido a partir de fontes autogênicas ou alogênicas e incluir autoenxerto, aspirado de medula óssea autogênico, lipoaspirado autogênico, aspirado de medula óssea alogênico, lipoaspirado alogênico, e blendas e misturas dos mesmos.

De acordo com uma outra modalidade, o arcabouço osteocondutivo é um substituto ósseo de cerâmica, como um composto à base de fosfato de cálcio, como uma apatita ou fosfato tricálcio, e blendas e misturas dos mesmos. De acordo com uma modalidade adicional, o substituto ósseo de cerâmica é uma pluralidade de grânulos porosos que têm um diâmetro de grânulo médio de cerca de 0,5 mm a cerca de 4,0 mm e um diâmetro de po3/25 ro médio de cerca de 20 pm a cerca de 500 pm.

De acordo com mais uma outra modalidade, o arcabouço inclui adicionalmente um aglutinante polimérico. O aglutinante polimérico pode ser um polímero reabsorvível e pode incluir, por exemplo, polilactídeos, poliglicolidas, polilactonas, colágeno, celulose e copolímeros, blendas e misturas dos mesmos.

De acordo com a presente descrição, o implante inclui uma molécula pequena osteoindutiva de um grupo de compostos como corticoesteroides, compostos de oxiesteróis que regulam positivamente o cAMP intracelular, e compostos que impactam a rota de HMG CoA reductase. Corticoesteroides adequados podem incluir, por exemplo, budesonida, propionato de fluticasona, fluorometalona, halcinonida, propionato de clobetasol, e blendas e misturas dos mesmos. De acordo com uma modalidade, a molécula pequena osteoindutiva pode ser combinada com um excipiente. Excipientes adequados podem incluir, por exemplo, Captisol®, Cremphor EL®, DMA, DMSO, Labrasol®, NMP, polietileno glicol, propileno glicol, PVP, Solutol HS 15®, Tween 20®, Tween 80®, e misturas e derivados dessas substâncias.

De acordo com a presente descrição, é fornecido um método para induzir o crescimento ósseo em um paciente, incluindo a etapa de implantar um implante no paciente de acordo com qualquer uma das modalidades da presente descrição.

De acordo com uma outra modalidade, um método de formação de um implante inclui a etapa de combinar um arcabouço osteocondutivo com uma molécula pequena osteoindutiva para formar um implante. De acordo com uma modalidade adicional, o arcabouço pode incluir material de autoenxerto, material de aloenxerto, substitutos ósseos de cerâmica, e blendas e misturas dos mesmos, e a molécula pequena sintética pode incluir corticoesteroides, oxiesteróis, compostos que regulam positivamente o cAMP intracelular, e compostos que impactam a rota de HMG CoA reductase, e blendas e misturas dos mesmos. De acordo com mais uma outra modalidade, o método pode incluir a etapa de combinar um material osteogênico ao implante. Material osteogênico adequado pode incluir autoenxerto, aspirado

4/25 de medula óssea autogênico, lipoaspirado autogênico, aspirado de medula óssea alogênico, lipoaspirado alogênico, e blendas e misturas dos mesmos. De acordo com ainda outra modalidade, o método pode adicionalmente incluir a etapa de combinar a molécula pequena osteoindutiva com um excipiente.

A presente descrição inclui também um sistema de formação de um implante para promover o crescimento ósseo que inclui um arcabouço osteocondutivo contido em um primeiro recipiente estéril que tem uma abertura adaptada para se conectar a um segundo recipiente, uma molécula pequena osteoindutiva e um material osteogênico contido em um segundo recipiente estéril que tem uma abertura adaptada para se conectar ao primeiro recipiente, de modo que o material osteogênico pode ser transferido do segundo recipiente para o primeiro recipiente. De acordo com uma modalidade do sistema, o arcabouço pode incluir material de autoenxerto, material de aloenxerto, um substituto ósseo de cerâmica, e blendas e misturas dos mesmos, a molécula pequena osteoindutiva pode incluir corticoesteroides, oxiesteróis, compostos que regulam positivamente o cAMP intracelular, e compostos que impactam a rota de HMG CoA reductase, e blendas e misturas dos mesmos, e o material osteogênico pode ser derivado de autoenxerto, aspirado de medula óssea autogênico, lipoaspirado autogênico, aspirado de medula óssea alogênico, lipoaspirado alogênico, e blendas e misturas dos mesmos. De acordo com uma outra modalidade do sistema, o material osteoindutivo é incluído no primeiro recipiente, e de acordo com uma modalidade adicional, o material osteoindutivo é incluído no segundo recipiente.

De acordo com uma modalidade do sistema, o arcabouço é um substituto ósseo de cerâmica, e em uma outra modalidade, o arcabouço inclui um aglutinante polimérico. De acordo com uma outra modalidade, o substituto ósseo de cerâmica é um composto à base de fosfato de cálcio, como apatitas e fosfatos tricálcios, e blendas e misturas dos mesmos, e em mais uma outra modalidade, o aglutinante polimérico inclui polilactídeos, poliglicolidas, polilactonas, colágeno, celulose e copolímeros, e blendas e misturas dos mesmos.

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De acordo com ainda outra modalidade do sistema, a molécula pequena osteoindutiva pode incluir compostos do grupo dos corticoesteroides incluindo budesonida, propionato de fluticasona, fluorometalona, halcinonida, propionato de clobetasol, e blendas e misturas dos mesmos. Em mais uma outra modalidade do sistema, a molécula pequena osteoindutiva pode ser combinada com um excipiente. Excipientes adequados podem incluir, por exemplo, Captisol®, Cremphor EL®, DMA, DMSO, Labrasol®, NMP, polietileno glicol, propileno glicol, PVP, Solutol HS 15®, Tween 20®, Tween 80®, e misturas e derivados dessas substâncias.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

O resumo anteriormente mencionado, bem como a descrição detalhada a seguir de modalidades preferenciais do pedido, será melhor compreendido quando lido em conjunto com os desenhos anexos. Deve-se compreender, no entanto, que a aplicação não se limita às precisas modalidades descritas. Nos desenhos:

A Fig. 1 é uma representação gráfica de uma curva de resposta à dosagem de duas moléculas pequenas osteoindutivas, de acordo com modalidades da presente descrição;

A Fig. 2 é uma representação gráfica da potência relativa de uma molécula pequena de acordo com uma outra modalidade;

As Figuras 3A a 3C são representações gráficas da liberação de tempo in vitro de várias moléculas pequenas de um arcabouço osteocondutivo, medida com o uso de LC/MS, de acordo com uma modalidade;

A Fig. 4 é uma representação gráfica da liberação de tempo in vitro de uma molécula pequena a partir de um outro arcabouço osteocondutivo, medida com o uso de radiomarcação, de acordo com uma outra modalidade;

A Fig. 5 é uma representação gráfica de um perfil de liberação teórico in vivo de uma molécula pequena a partir de um arcabouço osteocondutivo, de acordo com uma outra modalidade;

A Fig. 6 é uma representação gráfica da osteoindutividade medida de várias moléculas pequenas conforme medida em um material osteo6/25 gênico em um teste de ALP, de acordo com modalidades da presente descrição;

A Fig. 7 é uma representação gráfica que mostra a quantidade da expressão de RNA de ALP em material osteogênico semeado sobre um arcabouço osteocondutivo revestido com moléculas pequenas osteoindutivas selecionadas, de acordo com modalidades da presente descrição;

A Fig. 8 é uma representação gráfica do perfil de liberação de uma molécula pequena osteoindutiva in vitro e o perfil de liberação da mesma molécula pequena osteoindutiva que foi radiomarcada e liberada in vivo de um arcabouço osteocondutivo, de acordo com modalidades da presente descrição;

A Fig. 9 é uma representação gráfica que mostra o potencial de diferenciação de uma molécula pequena osteoindutiva refletindo a produção de expressão de hidroxiapatita (HA) em material osteogênico, de acordo com modalidades da presente descrição;

A Fig. 10 é um sistema de implante que tem um primeiro recipiente que contém um arcabouço osteocondutivo, incluindo um aglutinante polimérico, e um segundo recipiente que contém um material osteogênico, de acordo com uma modalidade;

A Fig. 11 é o sistema de implante da Fig. 10, onde o segundo recipiente é conectado ao primeiro recipiente para transferir o material osteogênico do segundo recipiente para o primeiro recipiente;

A Fig. 12 é um implante formado de acordo com o sistema de implante, conforme mostrado e descrito nas Figuras 10 e 11.

DESCRIÇÃO DETALHADA

A fim de que a presente descrição possa ser compreendida em mais detalhes, as seguintes definições são apresentadas;

Osteocondução, como usado aqui, refere-se ao processo pelo qual uma matriz implantada permite ou incentiva o crescimento ósseo novo em sua superfície ou em seus poros, canaletas ou outros espaços vazios internos. Diz-se que um material de enxerto ou matriz de enxerto é 'Osteocondutivo quando ele pode servir como um arcabouço para o crescimento

7/25 de um osso novo. Osteoblastos (células de formação óssea) no local do defeito do osso hospedeiro que está sendo reparado utiliza o material do enxerto implantado como uma estrutura sobre a qual se pode espalhar e gerar o novo osso.

Osteoindução, como usado aqui, refere-se ao processo de estimulação de células osteoprogenitoras para diferenciá-las em osteoblastos que, então, começam a formação do novo osso. Diz-se que uma composição química ou biológica é osteoindutiva quando ela pode estimular células primitivas, indiferenciadas e pluripotentes na linhagem de células formadoras de osso.

Osteogênese, como usado aqui, ocorre quando os osteoblastos, além de células osteoprogenitoras, células-tronco e outros tipos de célula capazes de se diferenciarem em osteoblastos maduros, contribuem para o crescimento do novo osso no local de implante do enxerto. Diz-se que uma célula ou população de células é osteogênica se ela é capaz de diferenciação em um osteoblasto maduro.

Molécula pequena, como usado aqui, refere-se a moléculas orgânicas que têm um peso molecular relativamente baixo (isto é, menos que cerca de 800 Dáltons), incluindo as de ocorrência natural e as sintetizadas artificialmente. Como usado aqui, o termo não inclui proteínas naturais e sintéticas maiores que cerca de 800 Dáltons, como fatores de crescimento humano naturais e à base de recombinantes ou morfógenos, por exemplo, proteínas ósseas morfogênicas.

EC50, como usado aqui, refere-se ao termo concentração eficaz (EC50) que é a concentração de uma composição que induz a metade de uma resposta terapêutica entre a linha de base e o máximo após determinado tempo de exposição especificado. A EC50 de uma curva doseresposta graduada, portanto, representa a concentração de um composto onde 50% de seu efeito máximo é observado.

CC50, como usado na presente invenção, refere-se ao termo concentração citotóxica (CC50) que é a concentração de um composto que induz a metade de uma resposta citotóxica entre a linha de base e certo má8/25 ximo após determinado tempo de exposição especificado.

índice terapêutico (também conhecido como razão terapêutica), como usado aqui, é uma comparação entre a quantidade de uma composição que causa o efeito terapêutico e a quantidade que causa dano citotóxico. Quantitativamente, é a taxa fornecida pela CC50 dividida pela EC50. Um índice terapêutico mais alto é preferencial a um mais baixo: seria preciso uma dose muito mais alta de tal composição para alcançar um limite citotóxico do que a dose tomada para obter o efeito terapêutico.

Excipiente, como usado aqui, refere-se à(s) substância(s) inativa(s) farmacologicamente adequada(s) usada(s) em combinação com um agente ativo, por exemplo, uma molécula pequena osteoindutiva, para auxiliar ou promover a preparação, administração, aplicação, adsorção ou absorção do agente ativo em um hospedeiro mamífero.

A presente descrição é direcionada a um implante para promover o crescimento do osso, incluindo um arcabouço osteocondutivo e uma molécula pequena osteoindutiva, e também pode incluir um arcabouço osteocondutivo que tem um aglutinante polimérico. O implante pode incluir, ainda, um material osteogênico. A descrição também é direcionada a um método de formação do implante, além do tratamento terapêutico e usos do implante. Finalmente, a descrição é direcionada a um sistema para formar o implante, incluindo a molécula pequena osteoindutiva, um primeiro recipiente que contém o arcabouço osteocondutivo e um segundo recipiente que contém o material osteogênico, onde o segundo recipiente é adaptado para transferir o material osteogênico para dentro do primeiro recipiente.

Os arcabouços osteocondutivos, de acordo com a presente descrição, podem incluir osso autólogo, osso alogênico, além de substitutos ósseos de cerâmica. O osso autólogo pode ser colhido de ossos como a crista ilíaca. O osso autólogo oferece menos risco de rejeição porque foi originado do corpo do próprio paciente. Adicionalmente, o osso autólogo também pode fornecer propriedades osteoindutivas e osteogênicas, além de ter propriedades osteocondutivas. Os arcabouços de osso autólogo com alto teor de osso sólido têm um potencial osteocondutivo mais alto que o osso autólogo que

9/25 contém um teor inferior de osso sólido. Os arcabouços de osso alogênico oferecem as mesmas propriedades osteocondutivas que os arcabouços autólogos. Os arcabouços alogênicos podem ser obtidos a partir de amostras cadavéricas, por exemplo, a partir de um banco de tecido.

De acordo com uma modalidade, o arcabouço osteocondutivo inclui um substituto ósseo de cerâmica. O substituto ósseo de cerâmica pode ser poroso ou não poroso. O termo poroso inclui, mas não se limita a, macroporosidade (diâmetro de poro médio maior que ou igual a 100 um), mesoporosidade (diâmetro de poro médio menor que 100 um, mas maior que ou igual a 10 um) e microporosidade (diâmetro de poro médio menor que 10 um). Os poros podem ser de qualquer tamanho, formato ou distribuição, ou estar dentro de uma tolerância predeterminada. Além disso, os poros podem ser interconectados ou não interconectados. Em uma modalidade, o diâmetro dos poros pode variar em tamanho até cerca de 750 um. Em uma outra modalidade, os tamanhos do poro variam até cerca de 500 um, com aproximadamente 75% dos poros sendo pelo menos 100 um em tamanho e os 25% restantes dos poros sendo não mais que 10 um em tamanho.

Em uma modalidade, o substituto ósseo de cerâmica inclui um composto à base de fosfato de cálcio. Exemplos de fosfatos de cálcio adequados incluem fosfato de cálcio amorfo, fosfato de cálcio cristalino ou qualquer combinação dos mesmos. Por exemplo, o composto de fosfato de cálcio pode ser uma apatita. Apatitas são um grupo de minerais de fosfato de cálcio, geralmente que se referem à hidroxiapatita Caio(P0₄)₆(OH)2, fluorapatita Caio(P0₄)₆(F)2, clorapatita Caio(P0₄)₆(CI)2 e bromapatita Caio(P0₄)₆(Br)₂ e podem incluir, ainda, hidroxiapatitas substituídas com silicato (SiO₄ ⁴ ) e carbonato (CO3² ), onde a substituição é para um ou mais dos grupos hidróxi e/ou de fosfato. Em uma outra modalidade, o substituto ósseo de cerâmica inclui beta-fosfato tricálcio Ca3(PO₄)2, (b-TCP).

O arcabouço osteocondutivo pode ser de qualquer formato desejado para o defeito do osso específico a ser reparado. De acordo com uma modalidade, o arcabouço é uma composição monolítica que pode ser tanto porosa como não porosa. Os formatos adequados podem incluir, por exem10/25 pio, esférico, cúbico, em formato de cunha, oblongo, cilíndrico ou combinações dos mesmos. Em uma outra modalidade, o arcabouço osteocondutivo pode ser uma pluralidade de grânulos porosos ou não porosos. A área de superfície específica do arcabouço osteocondutivo pode variar. Por exemplo, quando o arcabouço é um grânulo poroso, a área de superfície específica pode situar-se na faixa de cerca de 0,1 m²/g a cerca de 100 m²/g.

O arcabouço osteocondutivo pode ser partículas ou grânulos substitutos ósseos de cerâmica de qualquer tamanho ou formato. Os grânulos podem ser obtidos por trituração ou moagem de um composto de cálcio em um tamanho de partícula ou diâmetro de partícula desejados. Em uma modalidade, o diâmetro médio dos grânulos varia em tamanho de cerca de 0,05 mm a cerca de 10 mm. Em uma outra modalidade, o diâmetro médio dos grânulos varia em tamanho de cerca de 0,075 mm a cerca de 5 mm. Em uma outra modalidade, o diâmetro médio dos grânulos varia em tamanho de cerca de 0,075 mm a cerca de 1 mm. Em uma outra modalidade, o diâmetro médio dos grânulos varia em tamanho de cerca de 1,4 mm a cerca de 2,8 mm. Em uma outra modalidade, o diâmetro médio dos grânulos varia em tamanho de cerca de 2,8 mm a cerca de 5,6 mm. Em uma outra modalidade, o diâmetro médio dos grânulos varia em tamanho de cerca de 0,1 mm a cerca de 0,750 mm.

De acordo com uma outra modalidade da presente descrição, o arcabouço osteocondutivo pode ser adicionalmente combinado com um aglutinante polimérico, de modo que o implante podería ser formado, por exemplo, em um implante amoldável ou maleável que poderia ser formatado como desejado para se ajustar à área do osso a ser reparada.

O aglutinante polimérico pode incluir polímeros, como homopolímeros e copolímeros (isto é, polímeros que incluem duas ou mais unidades monoméricas diferentes), além de blendas, misturas e combinações de polímeros e copolímeros. O polímero pode ser um polímero reabsorvível, um polímero não absorvível ou uma combinação dos mesmos. Em uma modalidade, o aglutinante polimérico inclui um polímero reabsorvível, e o aglutinante polimérico é substancialmente isento de um polímero não reabsorvível. De

11/25 acordo com uma modalidade, o aglutinante polimérico é reabsorvível in vivo e inclui um polímero reabsorvível. O(s) polímero(s) do aglutinante polimérico também podem incluir um polímero sintético, um polímero não sintético (isto é, um polímero obtido a partir de uma planta ou animal), ou uma combinação dos mesmos.

Polímeros adequados úteis para preparar o aglutinante polimérico incluem, mas não se limitam a, homopolímeros ou copolímeros de monômeros selecionadas a partir de L-lactídeo; ácido L-láctico; D-lactídeo; ácido D-láctico; glicolida; ácido alfa-hidroxibutírico; ácido alfa-hidróxi-valérico; ácido alfa-hidroxiacético; ácido alfa-hidroxicaproico; ácido alfa-hidroxiheptanoico; ácido alfa-hidroxidecanoico; ácido alfa-hidroximirístico; ácido alfa-hidroxioctanoico; ácido alfa-hidroxisteárico; hidroxibutirato; hidroxivalerato; beta-propiolactona; ácido betapropiolactona; gamacaprolactona; betacaprolactona; epsilon-caprolactona; gamabutiro lactona; pivalolactona; tetrametilglicolida; ácido tetrametilglicólico; ácido dimetilglicólico; carbonato de trimetileno; dioxanona; aqueles monômeros que formam polímeros de cristal líquido; aqueles monômeros que formam celulose; aqueles monômeros que formam acetato de celulose; aqueles monômeros que formam carboximetilcelulose; aqueles monômeros que formam hidroxipropilmetil-celulose; precursores de poliuretano, incluindo macrodióis selecionados a partir de policaprolactona, poli(óxido de etileno), poli(etilenoglicol), poli(adipato de etileno), poli(óxido de butileno), e uma mistura dos mesmos, compostos funcionais de isocianato selecionados a partir de di-isocianato de hexametileno, diisocianato de isoforona, di-isocianato de ciclo-hexano, metileno difenileno diisocianato hidrogenado, e uma mistura dos mesmos, e extensores de cadeia selecionados a partir de etilenodiamina, 1,4-butano diol, 1,2-butano diol, 2amino-1-butanol, tiodietileno diol, éter 2-mercaptoetil, 3-hexano-2,5-diol, ácido cítrico, e uma mistura dos mesmos, e qualquer combinação de dois ou mais dos itens supracitados.

Em uma modalidade, o aglutinante polimérico inclui polímeros reabsorvíveis. Exemplos de polímeros absorvíveis adequados incluem, por exemplo, polímeros derivados a partir de monômeros selecionados a partir

12/25 de ácido L-láctico, ácido D-láctico, L-lactídeo, D-lactídeo, D,L-lactídeo, glicolida, uma lactona, uma lactama, epsilon-caprolactona, carbonato de trimetileno, um carbonato cíclico, um éter cíclico, paradioxanona, ácido betahidroxibutírico, ácido beta-hidroxipropiônico, ácido beta-hidroxivalérico, sacarídeos, colágeno, fibrina, albumina; e qualquer combinação de dois ou mais dos itens supracitados.

Em uma outra modalidade, o aglutinante polimérico inclui um polímero sintético reabsorvível. Exemplos não limitadores de polímeros sintéticos reabsorvíveis incluem, por exemplo, um (co)polímero poli(L-lactídeo), um (co)polímero poli(D,L-lactídeo), um (co)polímero poliglicolida, um (co)polímero policaprolactona, um (co)polímero poli(ácido tetrametilglicólico), um (co)polímero polidioxanona, um (co)polímero poli (hidróxi butirato), um (co)polímero polihidróxi valerato, um copolímero poli(L-lactídeo-coglicolídeo), um copolímero poli(glicolida-co-carbonato de trimetileno), um copolímero poli(glicolida-co-caprolactona), um copolímero poli(glicolida-codioxanona-co-carbonato de trimetileno), um copolímero poli(ácido tetrametilglicólico-co-dioxanona-co-carbonato de trimetileno), um copolímero poli(glicolida-co-caprolactona-co-L-lactídeo-co-carbonato de trimetileno), um copolímero poli(lactídeo-co-caprolactona), um copolímero poli(hidroxibutirato-co-hidróxi-valerato), um (co)polímero de cristal líquido, uma combinação dos mesmos, ou um copolímero dos mesmos.

De acordo com uma modalidade da descrição, onde o arcabouço osteocondutivo é um substituto ósseo de cerâmica, como apatita ou bTCP, os polímeros adequados para o aglutinante polimérico podem incluir, por exemplo, polilactídeos, poliglicolidas, polímeros à base de celulose, polilactonas e polímeros à base de colágeno, além de blendas e copolímeros dos mesmos. De acordo com uma outra modalidade, o arcabouço osteocondutivo é um implante amoldável que inclui uma pluralidade de grânulos de bTCP porosos combinados com poli-epsilon caprolactona, conforme descrito no pedido de patente US publicado 2008/0003255, a descrição do qual está aqui incorporada em sua totalidade. De acordo com uma modalidade adicional da descrição, o arcabouço osteocondutivo é uma tira maleável que inclui

13/25 uma camada de grânulos de b-TCP porosos e uma camada ou camadas de polímero reabsorvível, conforme descrito no pedido de patente US publicado 2006/0008504, a descrição que está incorporada na presente invenção em sua inteireza. De acordo com ainda outra modalidade, o arcabouço osteocondutivo é um implante amoldável que inclui uma pluralidade de grânulos de b-TCP porosos combinados com colágeno que podem ser liofilizados em uma forma rígida antes da reconstituição por um fluido em uma forma amoldável.

Quando o aglutinante polimérico inclui polímeros reabsorvíveis, o arcabouço osteocondutivo que os contém tende a exibir reabsorção in vivo completa ou reabsorção in vitro de cerca de 1 mês a cerca de 2,5 anos, por exemplo, de cerca de 2 meses a cerca de 2 anos.

Conforme anteriormente descrito, o implante inclui uma molécula pequena osteoindutiva. A molécula pequena osteoindutiva pode incluir composições que incluem corticoesteroides, oxiesteróis, compostos que impactam a rota de HMG coA reductase, e compostos que regulam positivamente o cAMP intracelular. Exemplos de moléculas pequenas osteoindutivas adequadas são fornecidos abaixo, na Tabela 1. De acordo com uma modalidade, exemplos de moléculas pequenas osteoindutivas adequados incluem corticoesteroides, como budesonida, propionato de fluticasona, fluorometalona, halcinonida, propionato de clobetasol, e blendas e misturas dos mesmos.

A molécula pequena osteoindutiva pode ser adicionalmente combinada com um excipiente ou excipientes, conforme desejado. Excipientes farmaceuticamente aceitáveis são conhecidos na técnica e incluem, por exemplo, solventes e diluentes (por exemplo, álcoois, propileno glicol, dimetilacetamida, DMSO, dimetil isossorbida, metilpirrolidona), solubilizantes (Cremophors(R)), antioxidantes (por exemplo, tocoferol (vitamina E), ácido ascórbico, metilparabeno, butilhidroxianisol (BHA), butilhidroxitolueno (BHT), e gaiato de propila), tensoativos e emulsificantes (por exemplo, polissorbatos (TWEEN 20, TWEEN 40, TWEEN 80), plurônicos, labrasol), lipídios (por exemplo, dimiristoilfosfatidilcolina (DMPC), dimiristoilfosfatidilglicerol (DMPG),

14/25 distearoilfosfatidilglicerol (DSPG), material de enchimento (por exemplo, manitol, polivinil pirrolidona), ácidos orgânicos (por exemplo, ácido cítrico, ácido láctico, ácido benzoico), polímeros hidrofílicos (por exemplo, polietileno glicóis (PEG 300, PEG 400), agentes complexantes (por exemplo, niacinamida, ácido nicotínico, creatina, ciclodextrinas) e preservativos (por exemplo, álcool benzílico). De acordo com uma modalidade, o excipiente pode ser selecionado a partir de Captisol®, Cremphor EL®, DMA, DMSO, Labrasol®, NMP, polietileno glicol, propileno glicol, PVP, Solutol HS 15®, Tween 20®, Tween 80®, e misturas e derivados dessas substâncias.

A molécula pequena osteoindutiva, de acordo com a presente descrição, pode ser combinada com o arcabouço pré-operacionalmente, bem como intraoperacionalmente. Onde a molécula pequena osteoindutiva é combinada pré-operacionalmente, ela pode ser combinada com o arcabouço como parte de um processo de fabricação onde a molécula pequena poderia ser aplicada ao arcabouço em uma solução tamponada e, então, subsequentemente liofilizada ou seca ao ar. A molécula pequena também pode ser aplicada por secagem por atomização ou outros métodos de revestimento. O implante poderia, então, ser subsequentemente embalado e esterilizado. Onde a molécula pequena osteoindutiva é combinada intraoperacionalmente com o arcabouço, o arcabouço pode ser imerso em ou revestido com uma solução tamponada que inclui a molécula pequena osteoindutiva e, então, aplicado ao local do osso a ser reparado.

De acordo com uma outra modalidade da descrição, o implante pode incluir, ainda, um material osteogênico para fornecer uma população de células viáveis ao local de reparo do osso. O material osteogênico pode ser obtido de fontes autogênicas e alogênicas, como fontes cadavéricas ou bancos de tecido. Material osteogênico adequado pode incluir, por exemplo, fontes viáveis de células, como células-tronco, células multipotentes, células pluripotentes, células osteoprogenitoras, pré-osteoblastos, osteoblastos maduros, e blendas e misturas dos mesmos. De acordo com uma modalidade, o material osteogênico é obtido a partir da medula óssea humana autogênica e/ou alogênica, e de acordo com uma outra modalidade, o material osteogê15/25 nico é obtido a partir de lipoaspirado humano autogênico e/ou alogênico. Tanto a medula óssea como o lipoaspirado podem ser processados para acentuar ainda mais a população de células desejada, por exemplo, por filtração, separação e/ou concentração. A fim de preservar a viabilidade da população de células do material osteogênico, o material osteogênico é tipicamente combinado com o arcabouço osteocondutivo e com o material osteoindutivo na ou próximo à hora do procedimento de implantação.

Com referência às Figuras 10 a 12, um sistema 20 para formação de um implante 30, inclui um arcabouço osteocondutivo 45 contido em um primeiro recipiente estéril 40 que tem uma abertura 48 e um material osteogênico 55 contido em um segundo recipiente estéril 50 que tem uma abertura 58. A segunda abertura do recipiente 58 é adaptada para se conectar com a primeira abertura do recipiente 48, de modo que o material osteogênico 55 pode ser transferido do segundo recipiente 50 para o primeiro recipiente 40 através da conexão da primeira abertura 48 e da segunda abertura 58. O sistema 20 inclui uma molécula pequena osteoindutiva que pode estar no primeiro recipiente 40 e que pode já ter sido incorporada ao arcabouço 45 de uma maneira como a que já foi descrita anteriormente. A molécula pequena osteoindutiva também pode ser incluída com o material osteogênico 55 no segundo recipiente 50. A molécula pequena osteoindutiva também pode ser combinada com o arcabouço 45 após o material osteogênico 55 ter sido transferido para o primeiro recipiente 45 e incorporado ao arcabouço 45. A molécula pequena osteoindutiva também pode ser contida em um terceiro recipiente (não mostrado) que tem uma abertura que é adaptada para se conectar com a primeira abertura do recipiente, de modo que a molécula pequena osteoindutiva pode ser transferida do terceiro recipiente para dentro do primeiro recipiente e combinar com o arcabouço.

O arcabouço 45 pode incluir, ainda, um aglutinante polimérico que concede moldabilidade e/ou elasticidade ao implante 30, dependendo do polímero desejado ou dos polímeros selecionados. Um implante amoldável 30 formado do sistema 20 é mostrado na Figura 12, incluindo um arcabouço 45 de grânulos b-TCP porosos e polímero de colágeno, que tem uma

16/25 molécula pequena osteoindutiva seca adsorvida em sua superfície e um material osteogênico 55 de aspirado autólogo de medula óssea. Alternativamente, a molécula pequena osteoindutiva pode ser combinada com o arcabouço 45 intraoperacionalmente tanto antes como depois da transferência do material osteogênico 55 para o arcabouço 45. O implante 30 é amoldável sob infusão do material osteogênico 55 com o arcabouço 45.

EXEMPLOS

Exemplo 1

Diagnóstico de candidato in vitro e análise do perfil de exposição:

Amostras de várias classes de compostos de molécula pequena incluindo corticoesteroides, glicocorticoides, oxiesteróis, compostos que impactam a rota de HMG CoA reductase e compostos que regulam positivamente o cAMP intracelular foram testados quanto ao potencial osteoindutivo com um teste de fosfatase alcalina (ALP) em células-tronco mesenquimais (MSCs) humanas primárias. Os compostos amostrais foram testados com um intervalo de dosagem em um formato de placa multialveolar com o uso de DNA para normalizar a resposta de fosfatase alcalina (ALP) como uma função do número de células. Essas curvas de resposta à dosagem permitiram a determinação de uma EC50 para medir a potência relativa da resposta osteogênica entre os compostos. A Fig. 1 é uma curva de resposta à dosagem representativa de dois dos compostos corticoesteroides testados, propionato de clobetasol e dexametasona. Em adição à análise funcional, certos compostos identificados foram testados através de um teste de citotoxicidade L929 in vitro para determinar uma CC50. Dessa forma, os compostos foram avaliados primeiro por sua potência e subsequentemente por sua citotoxicidade, mostrados abaixo na Tabela 1.

17/25

Tabela 1

	Teste OI (ALP)	Cytotox (CTG)
	EC50(nM)	CC50 (uM)
Oxiesteróis
22(S)-hidroxicolesterol	>12.000
22(r)-hidroxicolesterol	785	>12
20a-hidroxicolesterol	>12.000	>12
25-hidroxicolesterol	>12.000
19-hidroxicolesterol	>12.000
Esteroides
Betametasona	1,96
Acetato de fludrocortisona	4,12
Budesonida	0,296	>30
Propionato de fluticasona	0,0065	>1
Dexametasona	0,95	>50
Fluorometolona	0,319	>5
Halcinonida	0,235	>10
Flurandrenolida	1,56
Propionato de clobetasol	0,012	>30
Diacetato de diflorasona	1,38
Triancilonola	4,13
Aldosterona 98%	287
Deflazacort	9,85
Reguladores positivos intracelulares de cAMP
Pentoxifilina (Trental)	>10.000
Dipiridamol	306	>30
Dipiridamol	>10.000
3-lsobutila 1-metilxantina (IBMX)	>10.000
Propentofilina	>10.000
dbcAMP	>10.000
Moduladores de HMG Co-A redutase
Ácido zaragózigo A	715	>30
β-Sitosterol	>12.000
bm 15766 sulfato	>10.000

18/25

	Teste OI (ALP)	Cytotox (CTG)
	EC50(nM)	CC50 (uM)
Triparanol	>10.000
Fosmidomicina	>10.000
GGTI-286	>12.000
Patulina	>10.000
Sal trifluoroacetato FTI-277	>12.000

Exemplo 2 Potência relativa:

Uma parte dessa tecnologia pode envolver revestir um arcabouço osteocondutivo com um composto de molécula pequena osteoindutiva para fornecer, assim, o composto localmente quando o arcabouço é implantado. Consequentemente, o tempo ideal e o perfil de concentração necessários para que o composto permaneça no local para influenciar um resultado osteogênico foram determinados. Inicialmente, a potência foi determinada pela análise da exposição durante 6 dias. A fim de entender melhor o perfil de exposição ideal, as MSCs foram tratadas durante uma série de intervalos de dosagem por tempos de exposição iniciando de 1 hora até 4 dias, após os quais o meio do composto tratado foi removido e as células puderam continuar a ser testadas até o término do teste sob condições de meio basal. Isso permitiu a determinação da potência relativa dos compostos durante períodos curtos de exposição e forneceu uma indicação dos requisitos de liberação que seriam necessários para alcançar o resultado osteogênico desejado.

A Tabela 2 abaixo lista os resultados da potência relativa dos compostos selecionados que foram testados durante um período específico de 1 hora, 4 horas, 24 horas e 72 horas, bem como o intervalo de tempo para que os compostos selecionados atingissem a resposta completa do controle do teste de ALP (dexametasona a 10 nM durante 6 dias). A Fig. 2 é um gráfico representativo da potência relativa de um corticoesteroide, o propionato de fluticasona, com base nos resultados mostrados na Tabela 2.

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Tabela 2

Composto	EC50 (nM) 6 dias	EC50 (nM) 1 hora	EC50 (nM) 4 horas	EC50 (nM) 24 horas	EC50 (nM) 72 horas	Resposta Osteogênica Máx.
Fluticasona	0,0065	0,194	0,0422	0,0676	0,0042	48 a 72 horas
Clobetasol	0,012	0,0605	0,019	0,0804	0,00371	72 horas
Halcinonida	0,235	2,29	-	1,26	0,115	72 horas
Budesonida	0,296	47,9	5,47	4,48	0,0533	72 horas
Fluorometalona	0,319	NC	0,464	NC	0,146	144 horas
Dexametasona	0,95	NC	0,787	NC	0,277	-

NC: Não calculado

--: Não determinado

Exemplo 3

Cinética de liberação in vitro

Para os compostos de molécula pequena selecionados identificados na Tabela 1, a solubilidade foi determinada em uma solução para revestimento (etanol) e em um meio de liberação aquoso. O composto de molécula pequena foi dissolvido em etanol e adicionado a um arcabouço em sua solubilidade de etanol máxima e permitiu-se que fosse seco por exposição ao ar. O arcabouço I foi produzido a partir de grânulos b-TCP porosos e um poli(lactídeo-co-e-caprolactona) reabsorvível sob a forma de uma tira maleável (ChronOS Strip, produto n°.: 07.801.100.99S, disponível comercialmente junto à Synthes Spine, West Chester, PA, EUA). O arcabouço II foi produzido a partir de grânulos b-TCP porosos e um polímero de colágeno que tinha sido liofilizado em uma massa rígida. Os arcabouços revestidos com o composto da molécula pequena foram colocados em meio de cultura celular sob condições onde a concentração de molécula pequena ficaria abaixo de sua solubilidade, mesmo se toda a molécula fosse liberada (condições de pia) e a liberação do composto de molécula pequena foi monitorada através de cromatografia líquida-espectrometria de massa (LC/MS) ou mediante a medição do conteúdo radiomarcado. Essa análise pode fornecer uma liberação percentual cumulativa do composto de molécula pequena a partir do arcabouço ao longo do tempo. As Figuras 3A a 3C são ilustrações gráficas dos perfis de liberação de tempo in vitro do arcabouço I para o propiona20/25 to clobetasol, halcinonida e propionato de fluticasona de moléculas pequenas, respectivamente, medidos com o uso de LC/MS. A Figura 4 é uma ilustração gráfica de um perfil de liberação de tempo in vitro para propionato de t

clobetasol de molécula pequena do arcabouço II medido com o uso de con5 teúdo radiomarcado.

Exemplo 4

Bioensaio

Quando o perfil de exposição necessário e a cinética de liberação correspondente foram identificados, esses dois conjuntos de dados fo10 ram analisados e combinados para determinar se o perfil tempoconcentração de um composto de molécula pequena selecionado liberado diretamente do arcabouço I tinha o potencial de obter o mesmo resultado osteoindutivo em um material osteogênico (MSCs) que o mesmo composto de molécula pequena em solução. As concentrações de revestimento foram determinadas com base na exposição supracitada e nos dados do perfil de liberação. A Fig. 5 é uma ilustração gráfica da exposição de concentração teórica de um composto de molécula pequena liberado do arcabouço I como determinado a partir dos conjuntos de dados anteriormente mencionados. Os compostos de molécula pequena selecionados foram aplicados como revestimento sobre o arcabouço I e liberados no meio de cultura celular. A cada ponto no tempo selecionado especificado na Fig. 5, o meio foi removido e substituído por meio fresco. O meio removido foi transferido para as MSCs em cultura e as MSCs foram expostas àquele meio até o próximo ponto no tempo, sendo que a cada vez, o meio foi removido das MSCs e o processo foi repetido com o meio removido do arcabouço I naquele ponto no tempo. Após o experimento completo de seis dias, as MSCs foram analisadas com o teste de ALP. Os resultados desse experimento demonstraram que todos os compostos de molécula pequena que foram testados tinham adsorvido sobre e tinham sido liberados do arcabouço, que os compostos de molécula pequena eram osteoindutivos e que eles foram liberados a um perfil concentração suficiente para obter uma resposta osteogênica mostrada a partir da população de células de MSC que eles contataram. A Fig. 6 é uma

21/25 ilustração gráfica dos resultados do teste de ALP mostrando que cada composto de molécula pequena testado obteve uma resposta osteogênica maior que o nível basal.

Exemplo 5 . 5 Eficácia 3-D in vitro

O potencial osteoindutivo dos compostos de molécula pequena selecionados foi determinado in vitro por semeadura de MSCs sobre um arcabouço compósito polimérico b-TCP tridimensional, arcabouço I, que tinha sido revestido com compostos selecionados antes da semeadura. Permitiu10 se que essas células fossem cultivadas durante um período de tempo, após o qual elas foram testadas quanto ao conteúdo de RNA de fosfatase alcalina (ALP), um marcador precoce de diferenciação osteogênica. A Fig. 7 é uma ilustração gráfica que mostra a quantidade de expressão de RNA de ALP nas MSCs, expressada como aumento multiplicado sobre as condições ba15 sais (condições de cultivo padrão). Nesse exemplo, dexametasona (um controle para o teste) foi adicionada ao meio de cultura em solução, enquanto que em todos os outros casos, os compostos foram pré-revestidos no arcabouço I seguido de adição das MSCs. As células foram, então, cultivadas por três dias e testadas quanto ao seu nível de resposta osteogênica através da expressão de RNA de ALP. Fluticasona, clobetasol e halcinonida regularam positivamente a diferenciação osteogênica das MSCs significativamente.

Exemplo 6

Análise da liberação in vivo

Em comparação com um cenário in vitro, o ambiente in vivo é mais complicado e pode incluir uma resposta inflamatória, um suprimento de sangue limitado e uma população de células temporária. Consequentemente, é de importância crítica verificar a aplicabilidade dos dados in vitro em um ambiente in vivo. A fim de fazer isso, o arcabouço I foi revestido separada30 mente com dois compostos, 20S-hidroxicolesterol e 3H - propionato de clobetasol (radiomarcado), e implantado em um modelo defeituoso de osso radial de coelho. O tecido muscular circundante e o arcabouço foram explan22/25 tados separadamente em 1, 4 e 24 horas após a implantação e testados quanto ao teor de droga. A Fig. 8 é uma ilustração gráfica do perfil de liberação in vivo de propionato de clobetasol plotado junto com o perfil de liberação in vitro anteriormente medido.

Exemplo 7

Estudo in vivo

Uma avaliação de dois compostos de molécula pequena, o dexametasona e o 20S-hidroxicolesterol, foi realizada no modelo de defeito radial do coelho. O arcabouço I foi revestido com os compostos intraoperacionalmente, combinado com medula óssea autogênica e implantado em um defeito radial de 15 mm. Foram feitas radiografias na semana 3 e 6 pósoperacionalmente, após as quais os animais foram sacrificados e os explantes analisados por microtomografia computadorizada. Três semanas após o procedimento, as radiografias do 20S-hidroxicolesterol pareciam ter uma resposta periosteal maior, mas após 6 semanas, não havia diferença estatisticamente significativa entre as amostras radiograficamente.

Exemplo 8

Teste de mineralização

Um teste foi conduzido para medir o potencial de clobetasol na indução de diferenciação, examinando-se a produção de hidroxiapatita (HA) nas MSCs e nos osteoblastos. MSCs e osteoblastos (Lonza) congelados foram descongelados e cultivados a 80% de confluência e, então, foram colocados em placas na passagem de 5 a 7 (para as MSCs) e 2 a 10 (osteoblastos) em placas de 96 poços a aproximadamente 8.000 células/poço e permitiu-se que descansassem de um dia para o outro. O meio foi completamente aspirado para fora de todas as placas. Os poços designados foram substituídos por 150 uL de um dos itens a seguir:

Basal - (MSC/7,5 mM de β-glicerofosfato (BGP) & ácido ascórbico) ou (osteoblastos/7,5 mM de BGP);

Controle de mineralização - (osteoblastos/7,5 mM de BGP & 400 nM de hidrocortisona) ou (MSC/7,5 mM de BGP, 100 nM de dexametasona & ácido ascórbico); ou

23/25

Agente de teste de clobetasol - (osteoblastos/7,5 mM de BGP + clobetasol), ou (MSC/7,5 mM de BGP, ácido ascórbico + clobetasol).

O clobetasol foi testado nas seguintes concentrações: 0,03 nM, 0,1 nM, 0,3 nM, 1 nM, 3 nM e 10 nM. Todo o meio foi substituído a cada 3 a 4 dias, até o dia 14.

Uma análise pós-tratamento foi conduzida com o uso de um kit Osteolmage (Lonza) e corante Hoechst/extração. Os dados de HA foram gerados com o uso do protocolo de teste Osteolmage e dados de DNA foram gerados com o uso do teste Hoechst. Os valores de HA/DNA foram gerados a partir da análise dos dados e foram plotados graficamente, conforme mostrado na Fig. 9.

Exemplo 9

Teste de excipiente a níveis de pH variáveis

O objetivo desses experimentos foi aumentar a solubilidade do composto, de modo que doses maiores pudessem ser adicionadas ao material dos arcabouços. Em um conjunto de experimentos, a solubilidade de propionato de clobetasol e de propionato de fluticasona foi avaliada em três níveis distintos de pH com uma série de excipientes. Soluções tamponadas com fosfato foram preparadas a níveis de pH 3 (baixo), e 7 (médio), e uma solução tamponada Tris foi preparada ao nível de pH 9 (alto). A solubilidade do composto na presença de um determinado excipiente foi medida em níveis individuais de pH, como um aumento multiplicado sobre a solubilidade do composto sem nenhum excipiente presente. Os dados sobre a solubilidade do propionato de clobetasol em combinação com os excipientes são fornecidos abaixo na Tabela 3. Os dados sobre a solubilidade do propionato de flusicasona em combinação com os excipientes são fornecidos abaixo na Tabela 4.

Tabela 3 (Proprionato de clobetasol)

Excipiente	pH (Baixo)	pH (Méd.)	pH (Alto)
Captisol	56,19	48,78	22,45
Cremophor EL	2,40	5,00	2,30
Dimetiljsossorbida	24,82	26,92	27,03
DMA	4,10	2,31	4,92

24/25

Excipiente	pH (Baixo)	pH (Méd.)	pH (Alto)
DMSO	1,88	1,41	2,77
Labrasol	3,17	0,44	0,85
NMP	6,39	5,87	6,01
PEG400	18,51	17,75	22,58
Propileno glicol	35,43	24,24	25,65
Polivinilpirrolidona (PVP)	7,71	3,93	8,46
Solutol HS 15	13,11	6,96	6,42
Tweens	32,52	19,94	23,32

Tabela 4 (Propionato de fluticasona)

Excipiente	pH (Baixo)	pH (Méd.)	pH (Alto)
Captisol	55,01	80,81	67,60
CremophorJEL	94,00	138,82	89,92
Dimetiljsossorbida	4,14	5,78	5,01
DMA	6,67	8,41	7,07
DMSO	1,79	1,96	1,84
Labrasol	54,03	85,96	79,23
NMP	6,39	9,02	7,96
PEG400	3,22	4,32	3,55
Propileno glicol	5,63	7,89	5,90
Polivinilpirrolidona	2,21	3,98	2,73
Solutol HS 15	3,82	5,00	4,47
Tweens	194,37	272,98	231,06

Embora a presente descrição tenha sido descrita de acordo com várias modalidades, deve-se compreender que várias alterações, substituições e modificações podem ser feitas na presente invenção sem que se a5 faste do espírito e do escopo da presente descrição, por exemplo, como indicado pelas reivindicações anexas. Dessa forma, deve ser entendido que o escopo da presente descrição não se destina a limitar modalidades particulares do processo, fabricação e composição de substância, métodos e etapas aqui descritos. Por exemplo, as várias características descritas acima de acordo com uma modalidade podem ser incorporadas nas outras modalidades exceto onde indicado ao contrário. Adicionalmente, conforme será prontamente compreendido pelo versado na técnica a partir da presente descri25/25 ção, os processos, a fabricação, a composição de substância, os métodos ou as etapas, atualmente existentes ou a serem desenvolvidos, que executam substancialmente a mesma função ou alcançam substancialmente o mesmo resultado que as modalidades correspondentes aqui descritas po5 dem ser utilizados de acordo com a presente descrição.

Será entendido por versados na técnica que várias modificações e alterações da invenção podem ser feitas sem que se afaste do amplo escopo das reivindicações anexas. Alguns desses foram discutidos acima e outros serão evidentes aos versados na técnica.

Claims

1. Implante para promover crescimento ósseo, caracterizado pelo fato de que compreende:

um arcabouço osteocondutivo; e uma molécula pequena osteoindutiva;

em que o arcabouço é selecionado do grupo que consiste em material de autoenxerto, material de aloenxerto, substituto ósseo de cerâmica e blendas e misturas dos mesmos; e, em que a molécula pequena osteoindutiva é selecionada a partir do grupo consistindo em corticoesteroides, oxiesteróis, compostos que regulam positivamente o cAMP intracelular e compostos que impactam a rota de HMG CoA reductase, e blendas e misturas dos mesmos, em que a molécula pequena osteoindutiva é combinada com um excipiente selecionado do grupo consistindo em sulfobutiléter βciclodextrina, tendo a fórmula molecular C42H70-nO35(C4H8SO3Na)n; em que n = o grau médio de substituição de número CAS: 182410-00-0; óleo de rícino polietoxilado, de número CAS: 61791-12-6; DMA; DMSO; ;Caprilocaproil macrogol glicerídeos; NMP, polietileno glicol, propileno glicol, PVP, polioxil15-hidróxi estearato de número CAS: 70142-34-6; polietileno glicol sorbitan monolaurato de número CAS: 9005-64-5; e polietileno glicol sorbitan monooleato de número CAS: 9005-65-6; e misturas e derivados dessas substâncias.

2. Implante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente um material osteogênico.

3. Implante, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o material osteogênico é derivado do grupo consistindo em aspirado de medula óssea autogênico, lipoaspirado autogênico, aspirado de medula óssea alogênico, lipoaspirado alogênico, e blendas e misturas dos mesmos.

4. Implante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o arcabouço compreende um substituto ósseo de cerâmica que é um composto à base de fosfato de cálcio selecio12/02/2019, pág. 10/17

2/4 nado do grupo que consiste em apatitas e fosfatos tricálcios, e blendas e misturas dos mesmos.

5. Implante, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que o substituto ósseo de cerâmica compreende uma pluralidade de grânulos porosos tendo um diâmetro de grânulo médio de 0,5 mm a 4,0 mm, e um diâmetro de poro médio de 20 pm a 500 pm.

6. Implante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que o arcabouço inclui adicionalmente um aglutinante polimérico.

7. Implante, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que o aglutinante polimérico é selecionado do grupo que consiste em polilactídeos, poliglicolidas, policaprolactonas, colágeno, celulose e copolímeros, blendas e misturas dos mesmos.

8. Implante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a

7, caracterizado pelo fato de que a molécula pequena osteoindutiva é um corticoesteroide selecionado do grupo que consiste em budesonida, propionato de fluticasona, fluorometalona, halcinonida, propionato de clobetasol, e blendas e misturas dos mesmos.

9. Implante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a

8, caracterizado pelo fato de que a molécula pequena osteoindutiva é combinada com um excipiente.

10. Sistema de formação de um implante para promover o crescimento ósseo, caracterizado pelo fato de que compreende:

um arcabouço osteocondutivo contido em um primeiro recipiente estéril que tem uma abertura adaptada para se conectar a um segundo recipiente;

uma molécula pequena osteoindutiva;

um material osteogênico contido em um segundo recipiente estéril que tem uma abertura adaptada para se conectar ao primeiro recipiente, de modo que o material osteogênico pode ser transferido do segundo recipiente para o primeiro recipiente;

sendo que o arcabouço é selecionado do grupo que consiste em

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3/4 material de autoenxerto, material de aloenxerto, substituto ósseo de cerâmica e blendas e misturas dos mesmos;

sendo que a molécula pequena osteoindutiva é selecionada a partir do grupo que consiste em corticoesteroides, oxiesteróis, compostos que regulam positivamente o cAMP intracelular e compostos que impactam a trajetória de HMG CoA reductase, e blendas e misturas dos mesmos; e sendo que o material osteogênico é derivado do grupo que consiste em aspirado de medula óssea autogênico, lipoaspirado autogênico, aspirado de medula óssea alogênico, lipoaspirado alogênico, e blendas e misturas dos mesmos, em que a molécula pequena osteoindutiva é combinada com um excipiente selecionado do grupo consistindo em sulfobutiléter βciclodextrina, tendo a fórmula molecular C42H70-nO35(C4H8SO3Na)n; em que n = o grau médio de substituição de número CAS: 182410-00-0; óleo de rícino polietoxilado, de número CAS: 61791-12-6; DMA; DMSO; ;Caprilocaproil macrogol glicerídeos; NMP, polietileno glicol, propileno glicol, PVP, polioxil15-hidróxi estearato de número CAS: 70142-34-6; polietileno glicol sorbitan monolaurato de número CAS: 9005-64-5; e polietileno glicol sorbitan monooleato de número CAS: 9005-65-6; e misturas e derivados dessas substâncias.

11. Sistema, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que a molécula pequena osteoindutiva é incluída no primeiro recipiente.

12. Sistema, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que a molécula pequena osteoindutiva é incluída no segundo recipiente.

13. Sistema, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que compreende, ainda, um terceiro recipiente que contém a molécula pequena osteoindutiva e que tem uma abertura adaptada para se conectar ao primeiro recipiente, de modo que a molécula pequena osteoindutiva pode ser transferida do terceiro recipiente para o primeiro recipiente.

14. Sistema, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10

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4/4 a 13, caracterizado pelo fato de que o arcabouço é um substituto ósseo de cerâmica que compreende, ainda, um aglutinante polimérico.

15. Sistema, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que o substituto ósseo de cerâmica é um composto à base de fosfato de cálcio selecionado do grupo que consiste em apatitas e fosfatos tricálcios, e blendas e misturas dos mesmos; e, em que o aglutinante polimérico é selecionado do grupo que consiste em polilactídeos, poliglicolidas, policaprolactonas, colágeno, celulose e copolímeros, blendas e misturas dos mesmos.

16. Sistema, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14 a 15, caracterizado pelo fato de que a molécula pequena osteoindutiva é um corticoesteroide selecionado do grupo que consiste em budesonida, propionato de fluticasona, fluorometalona, halcinonida, propionato de clobetasol, e blendas e misturas dos mesmos.

17. Sistema, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14 a 16, caracterizado pelo fato de que a molécula pequena osteoindutiva é combinada com um excipiente.