BR102017004519A2 - VAPORIZED ADMINISTRATION OF PESTICIDES - Google Patents
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Description
“ADMINISTRAÇÃO VAPORIZADA DE PESTICIDAS” REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDO RELACIONADO“VAPORIZED ADMINISTRATION OF PESTICIDES” CROSS-RELATED APPLICATION REFERENCE
[001 ]0 presente pedido reivindica o benefício conforme dispõe o 35 USC § 119(e) do pedido de patente provisória no de série 62/304,646, depositado em 7 de março de 2016, cuja divulgação completa encontra-se incorporada na presente invenção a título de referência.The present application claims benefit as provided in 35 USC § 119 (e) of provisional patent application no. 62 / 304,646 filed March 7, 2016, the full disclosure of which is incorporated herein by reference title.
CAMPO DO PRESENTE PEDIDOFIELD OF THIS REQUEST
[002] O presente pedido refere-se a métodos para administrar pirimetanila como um vapor para inibir patógenos de colheitas agrícolas em um ambiente contido.The present application relates to methods for administering pyrimethanil as a vapor to inhibit crop crop pathogens in a contained environment.
ANTECEDENTESBACKGROUND
[003] A pirimetanila é um composto sintético do grupo químico Anilinopirimidi-na. A pirimetanila é conhecida por atuar como um pesticida, particularmente um fungicida, para fornecer controle preventivo e curativo de doenças de plantas, sementes e colheitas.Pyrimethanil is a synthetic compound of the chemical group Anilinopyrimidine. Pyrimethanil is known to act as a pesticide, particularly a fungicide, to provide preventive and curative control of plant, seed and crop diseases.
[004] Um mecanismo de ação por meio do qual a pirimetanila demonstrou atuação como um fungicida é a inibição da biossíntese de metionina afetando, assim, a formação de proteína e a divisão celular subsequente. A pirimetanila também demonstrou capacidade de bloquear a capacidade de fungos de degradar e digerir plantas, inibindo, assim, a penetração e o desenvolvimento de uma doença e infecção patogênicas. A pirimetanila também foi descrita como tendo uma temperatura de decomposição térmica que varia de 189,54 °C a cerca de 344,74 (Folha de Dados de Segurança Agriphar Pyrimethanil (ISO), revisada em 7 de setembro de 2012, versão 8.1).One mechanism of action by which pyrimethanil has been shown to act as a fungicide is the inhibition of methionine biosynthesis thus affecting protein formation and subsequent cell division. Pyrimethanil has also been shown to block the ability of fungi to degrade and digest plants, thereby inhibiting the penetration and development of pathogenic disease and infection. Pyrimethanil has also been reported to have a thermal decomposition temperature ranging from 189.54 ° C to about 344.74 (Agriphar Pyrimethanil (ISO) Safety Data Sheet, revised September 7, 2012, version 8.1).
[005] Tradicionalmente, fungicidas pós-ceifa são aplicados a plantas, sementes e colheitas como emulsões de solvente à base de água para uso em aplicações de aspersão ou encharcamento durante operações de classificação e embalagem.Traditionally, post-harvest fungicides are applied to plants, seeds and crops as water-based solvent emulsions for use in sprinkling or soaking applications during sorting and packaging operations.
Algumas colheitas, tais como frutas de baga, incluindo frutos ou uvas de mesa, são bastante suscetíveis a patógenos fúngicos, mas não são tolerantes à umidade livre presente em aplicações de fungicida tradicionais. Portanto, o tratamento de frutas de baga com fungicidas tradicionais é problemático, Outras colheitas, tais como maçãs e laranjas, podem tolerar a umidade de fungicidas tradicionais, mas a operação de encharcamento tipicamente usada para aplicar um fungicida é custosa, demorada, exige volumes excessivos de água tratada com pesticida e espalha esporos de patógenos não suscetíveis que contribuem para populações de patógeno resistentes a fungicida.Some crops, such as berry fruits, including fruits or table grapes, are quite susceptible to fungal pathogens, but are not tolerant to the free moisture present in traditional fungicide applications. Therefore, treating berry fruits with traditional fungicides is problematic. Other crops, such as apples and oranges, can tolerate the moisture of traditional fungicides, but the soaking operation typically used to apply a fungicide is costly, time consuming, excessive in volume. of pesticide-treated water and spreads non-susceptible pathogen spores that contribute to fungicide-resistant pathogen populations.
[006] Alguns tratamentos com fungicida pós-ceifa são entregues por meio de nebulização que é tipicamente administrada em uma temperatura fria (abaixo da temperatura ambiente). Entretanto, essa técnica tem problemas com a distribuição uniforme nas colheitas. Por exemplo, as taxas de deposição de um fungicida podem ser muito altas e podem exceder os limites de resíduo máximos reguladores.Some post-harvest fungicide treatments are delivered by nebulization which is typically administered at a cold temperature (below room temperature). However, this technique has problems with uniform crop distribution. For example, the deposition rates of a fungicide may be very high and may exceed the maximum regulatory residue limits.
[007] Alternativamente, as taxas de deposição de um fungicida podem ser muito baixas e diminuir abaixo do mínimo exigido para eficácia. Adicionalmente, as operações de nebulização de fungicida não são realizadas de modo bem-sucedido quando ventiladores de circulação de resfriamento estão operando na sala ou câmara. Esses ventiladores são essenciais para o importante processo de preservação de resfriamento de frutas, então, ter que desativá-los durante a operação de nebulização de fungicida é uma característica negativa desse tipo de aplicação na medida em que contribui para o aquecimento indesejável da colheita armazenada. Em uma sala de armazenamento, a eficácia de aplicação de fungicida está intimamente ligada à uniformidade de distribuição. Em última análise, mais uniformidade e distribuição regular na colheita de tratamento com pesticida ou fungicida melhoram a eficácia de tais tratamentos para inibir e/ou controlar patógenos de planta.Alternatively, deposition rates of a fungicide may be very low and decrease below the minimum required for efficacy. Additionally, fungicide nebulization operations are not performed successfully when cooling circulation fans are operating in the room or chamber. These fans are essential for the important preservation process of fruit cooling, so having to turn them off during the fungicide misting operation is a negative feature of this type of application as it contributes to the unwanted heating of the stored crop. In a storage room, the effectiveness of fungicide application is closely linked to uniformity of distribution. Ultimately, more uniformity and regular distribution in the crop treatment with pesticide or fungicide improves the effectiveness of such treatments to inhibit and / or control plant pathogens.
[008] A presente revelação descreve métodos de administração de pesticidas tradicionais de modos não tradicionais para uso na proteção antimicrobiana de colheitas para inibir patógenos. Mais especificamente, a presente revelação apresenta métodos de uso de pirimetanila vaporizada como uma proteção antimicrobiana para plantas, partes de planta e sementes pós-ceifa que são vantajosos em relação a outros tratamentos antimicrobianos em plantas descritos anteriormente. Em última análise, os métodos descritos na presente invenção fornecem opções de entrega benéficas para sistemas de aplicação e pesticidas estabelecidos.[008] The present disclosure describes methods of administering traditional pesticides in non-traditional ways for use in antimicrobial crop protection to inhibit pathogens. More specifically, the present disclosure discloses methods of using vaporized pyrimethanil as an antimicrobial protection for plants, plant parts and post-harvest seeds that are advantageous over other antimicrobial treatments in plants described above. Ultimately, the methods described in the present invention provide beneficial delivery options for established pesticide application systems.
SUMÁRIO DA INVENÇÃOSUMMARY OF THE INVENTION
[009] A presente revelação fornece um método de tratamento de plantas ou partes de planta com um agente antimicrobiano. O método compreende aquecer o composto antimicrobiano para formar um vapor. O método compreende, adicionalmente, resfriar o vapor para formar um sólido. Adicionalmente, o método compreende administrar o composto sólido a um ou mais plantas ou partes de planta em uma câmara.The present disclosure provides a method of treating plants or plant parts with an antimicrobial agent. The method comprises heating the antimicrobial compound to form a vapor. The method further comprises cooling the vapor to form a solid. Additionally, the method comprises administering the solid compound to one or more plants or plant parts in a chamber.
[010] A um ou mais plantas ou partes de planta do método descrito na presente invenção pode compreender um morango, uma uva, uma maçã, uma laranja ou um mirtilo. O método pode compreender, adicionalmente, circular o composto sólido por toda a câmara com ventiladores. Finalmente, o método fornece, adicionalmente, que as etapas de aquecimento, resfriamento ou administração podem ser realizadas com o uso de um dispositivo de aquecimento.One or more plants or plant parts of the method described in the present invention may comprise a strawberry, a grape, an apple, an orange or a blueberry. The method may further comprise circulating the solid compound throughout the chamber with fans. Finally, the method further provides that the heating, cooling or administration steps can be performed using a heating device.
[011 ]0 composto antimicrobiano do presente método pode ser um sólido. Ademais, o composto sólido pode formar micropartículas que têm um tamanho de 2 mícrons ou menos. Adicionalmente, o composto antimicrobiano de uma presente revelação pode ter uma pressão de vapor à temperatura ambiente que é menor do que a pressão de vapor à temperatura ambiente de benzoxaborol.[011] The antimicrobial compound of the present method may be a solid. In addition, the solid compound may form microparticles having a size of 2 microns or less. Additionally, the antimicrobial compound of a present disclosure may have a room temperature vapor pressure that is less than the room temperature vapor pressure of benzoxaborol.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOSBRIEF DESCRIPTION OF DRAWINGS
[012]Uma breve descrição dos desenhos é da seguinte forma.[012] A brief description of the drawings is as follows.
[013] A Figura 1 mostra imagens do crescimento de Penicillium digitatum após ser inoculado em laranjas e tratado com pirimetanila vaporizada.[013] Figure 1 shows images of growth of Penicillium digitatum after inoculation in oranges and treated with vaporized pyrimethanil.
[014] A Figura 2 mostra imagens do crescimento de Penicillium expansum após ser inoculado em maçãs e tratado com pirimetanila vaporizada.[014] Figure 2 shows images of growth of Penicillium expansum after being inoculated into apples and treated with vaporized pyrimethanil.
[015] A Figura 3 mostra imagens do crescimento de Botrytis cinerea após ser incoculado em morangos e tratado com pirimetanila vaporizada.Figure 3 shows images of growth of Botrytis cinerea after being inoculated in strawberries and treated with vaporized pyrimethanil.
[016] A Figura 4 mostra imagens do crescimento de Botrytis cinerea após ser incoculado em uvas de mesa e tratado com pirimetanila vaporizada.[016] Figure 4 shows images of Botrytis cinerea growth after being inoculated into table grapes and treated with vaporized pyrimethanil.
[017] A Figura 5 mostra imagens do crescimento de Botrytis cinerea após ser incoculado em mirtilos e tratado com pirimetanila vaporizada.[017] Figure 5 shows images of growth of Botrytis cinerea after being inoculated into blueberries and treated with vaporized pyrimethanil.
[018] A Figura 6 mostra uma imagem do dispositivo de aquecimento que compreende um elemento de aquecimento ou uma unidade de sublimação.Figure 6 shows an image of the heating device comprising a heating element or a sublimation unit.
[019] A Figura 7 mostra uma imagem de uma fonte de alimentação externa.[019] Figure 7 shows an image of an external power supply.
[020] A Figura 8 mostra uma imagem de carreador de tecido ou pano para o ingrediente ativo.[020] Figure 8 shows a fabric or cloth carrier image for the active ingredient.
[021 ]A Figura 9 mostra uma imagem de um carreador de tubo de vidro para o ingrediente ativo.Figure 9 shows an image of a glass tube carrier for the active ingredient.
[022] A Figura 10 mostra uma imagem de um dispositivo de aquecimento que penetra uma câmara (isto é, um minipalete) que compreende morangos.Figure 10 shows an image of a heating device that penetrates a chamber (i.e. a mini-pallet) comprising strawberries.
[023] A Figura 11 mostra uma imagem de um dispositivo de aquecimento para aplicação de vaporização técnica de maçãs em uma câmara (isto é, um túnel) que tem 1 m x 1 m x 8 m de tamanho.[11] Figure 11 shows an image of a heating device for applying technical vaporization of apples to a chamber (ie a tunnel) that is 1m x 1m x 8m in size.
[024] A Figura 12 mostra uma curva isotérmica de DSC da temperatura de fusão de um composto de pirimetanila 1.Figure 12 shows a DSC isothermal curve of the melting temperature of a pyrimethanil compound 1.
[025] A Figura 13 mostra uma curva isotérmica de DSC da temperatura de fusão do composto de pirimetanila 2.Figure 13 shows a DSC isothermal curve of the melting temperature of the pyrimethanil compound 2.
[026] A Figura 14A mostra uma execução de curva isotérmica de TGA no ar da temperatura de degradação do composto de pirimetanila 1.[026] Figure 14A shows an isothermal TGA run in air of the degradation temperature of pyrimethanil compound 1.
[027] A Figura 14B mostra uma execução de curva isotérmica de TGA em nitrogênio da temperatura de degradação do composto de pirimetanila 1.[027] Figure 14B shows an isothermal TGA execution on nitrogen of the degradation temperature of pyrimethanil compound 1.
[028] A Figura 15A mostra uma execução de curva isotérmica de TGA no ar da temperatura de degradação do composto de pirimetanila 2.[028] Figure 15A shows an isothermal TGA run in air of the degradation temperature of the pyrimethanil compound 2.
[029] Figura 15B mostra uma execução de curva isotérmica de TGA em nitrogênio da temperatura de degradação de um composto de pirimetanila 2.[029] Figure 15B shows an isothermal TGA execution on nitrogen of the degradation temperature of a pyrimethanil 2 compound.
[030] A Figura 16A mostra uma execução de curva isotérmica de TGA-MS no ar da temperatura de degradação do composto de pirimetanila 1.Figure 16A shows an isothermal curve execution of TGA-MS in air of the degradation temperature of pyrimethanil compound 1.
[031 ]A Figura 16B mostra uma análise de curva isotérmica de TGA-MS da temperatura de degradação de um composto de pirimetanila 1.Figure 16B shows a TGA-MS isothermal curve analysis of the degradation temperature of a pyrimethanil compound 1.
[032] A Figura 17A mostra uma execução de curva isotérmica de TGA-MS no ar da temperatura de degradação do composto de pirimetanila 2.Figure 17A shows an isothermal curve execution of TGA-MS in air of the degradation temperature of pyrimethanil compound 2.
[033] A Figura 17B mostra uma análise de curva isotérmica de TGA-MS da temperatura de degradação de um composto de pirimetanila 2.Figure 17B shows a TGA-MS isothermal curve analysis of the degradation temperature of a pyrimethanil compound 2.
[034] A Figura 18 mostra uma curva de taxa de perda de peso para o composto de pirimetanila 2.Figure 18 shows a weight loss rate curve for pyrimethanil compound 2.
[035] A Figura 19 mostra uma curva de taxa de perda de peso para o composto de pirimetanila 1.Figure 19 shows a weight loss rate curve for pyrimethanil compound 1.
[036] A Figura 20 mostra uma comparação de termograma de íons totais dos espectros de massa dos compostos de pirimetanila 1 e 2.Figure 20 shows a total ion thermogram comparison of the mass spectra of pyrimethanil compounds 1 and 2.
[037] A Figura 21 mostra uma comparação de termograma de íons totais dos perfis de íons moleculares e íons totais dos compostos de pirimetanila 1 e 2.[037] Figure 21 shows a thermogram comparison of total ions of molecular ion profiles and total ions of pyrimethanil compounds 1 and 2.
[038] A Figura 22 mostra um gráfico de barras que compara o efeito no escu-recimento de maçãs tratadas com pirimetanila aplicada com o uso de um método de encharcamento versus um método vaporizado.[038] Figure 22 shows a bar graph comparing the darkening effect of pyrimethanil-treated apples applied using a soaking method versus a vaporized method.
[039] A Figura 23 mostra um gráfico de barras que compara o efeito no escu- recimento das incisões superiores e das incisões inferiores de maçãs tratadas com pirimetanila aplicada com o uso de um método de nebulização versus um método vaporizado.[039] Figure 23 shows a bar graph comparing the effect on darkening of the upper and lower incisions of pyrimethanil-treated apples applied using a nebulization versus a vaporized method.
[040]A Figura 24 mostra um gráfico de barras que compara o efeito da distância de tratamento na variação da distribuição de pirimetanila em maçãs tratadas com o uso de um método de nebulização versus um método vaporizado.[040] Figure 24 shows a bar graph comparing the effect of treatment distance on the variation of pyrimethanil distribution in apples treated using a nebulization versus a vaporized method.
DESCRIÇÃO DETALHADADETAILED DESCRIPTION
[041 ]As seguintes modalidades numeradas são contempladas e não são li-mitantes: [042] 1. Um método de tratamento de plantas ou partes de planta com um tratamento antimicrobiano que compreende: [043] a) preparar o tratamento antimicrobiano que compreende um composto antimicrobiano, [044] b) volatilizar o composto antimicrobiano para formar um vapor, [045] c) resfriar o vapor para formar um sólido e [046] d) administrar o composto antimicrobiano sólido a um ou mais plantas ou partes de planta em uma câmara.[041] The following numbered embodiments are contemplated and are not limiting: [042] 1. A method of treating plants or plant parts with an antimicrobial treatment comprising: [043] a) preparing an antimicrobial treatment comprising a [044] b) volatilize the antimicrobial compound to form a vapor, [045] c) cool the vapor to form a solid and [046] d) administer the solid antimicrobial compound to one or more plants or plant parts in a camera.
[047] 2. O método da cláusula 1, em que a uma ou mais plantas ou partes de planta é selecionada dentre o grupo que consiste em um morango, uma uva, uma maçã, uma laranja e um mirtilo.[047] 2. The method of clause 1, wherein one or more plants or plant parts is selected from the group consisting of a strawberry, a grape, an apple, an orange and a blueberry.
[048] 3. O método da cláusula 1 ou cláusula 2, em que o composto antimicrobiano é um sólido, um gás, um líquido, um vapor ou um aerossol.[048] 3. The method of clause 1 or clause 2, wherein the antimicrobial compound is a solid, gas, liquid, vapor or aerosol.
[049] 4. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 3, em que o antimicrobiano composto é um sólido.[049] 4. The method of any of clauses 1 to 3, wherein the compound antimicrobial is a solid.
[050] 5. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 4, em que o método compreende, adicionalmente, circular o composto antimicrobiano por toda a câmara com uma fonte de ar.[050] 5. The method of any of clauses 1 to 4, wherein the method further comprises circulating the antimicrobial compound throughout the chamber with an air source.
[051 ]6. Ο método de qualquer uma das cláusulas 1 a 5, em que o composto antimicrobiano forma micropartículas que têm um tamanho de 2 mícrons ou menos.[051] 6. The method of any of clauses 1 to 5, wherein the antimicrobial compound forms microparticles having a size of 2 microns or less.
[052] 7. O método da cláusula 5 ou cláusula 6, em que a fonte de ar é um ventilador.[052] 7. The method of clause 5 or clause 6, wherein the air source is a fan.
[053] 8. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 7, em que a volatiza-ção ocorre por sublimação.[053] 8. The method of any one of clauses 1 to 7, wherein volatilization occurs by sublimation.
[054] 9. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 7, em que a volatiza-ção ocorre por aquecimento.[054] 9. The method of any of clauses 1 to 7, wherein the volatization occurs by heating.
[055] 10. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a sublimação ocorre por evaporação.[055] 10. The method of any of clauses 1 to 8, wherein the sublimation occurs by evaporation.
[056] 11. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 10, em que o composto antimicrobiano está na forma de um pó.[056] 11. The method of any of clauses 1 to 10, wherein the antimicrobial compound is in the form of a powder.
[057] 12. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 11, em que o composto antimicrobiano é sublimado diretamente em um vapor.[057] 12. The method of any of clauses 1 to 11, wherein the antimicrobial compound is directly sublimated into a vapor.
[058] 13. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 12, em que o composto antimicrobiano é um pesticida.[058] 13. The method of any of clauses 1 to 12, wherein the antimicrobial compound is a pesticide.
[059] 14. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 13, em que o composto antimicrobiano é um fungicida.[059] 14. The method of any of clauses 1 to 13, wherein the antimicrobial compound is a fungicide.
[060] 15. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 14, em que o composto antimicrobiano é pirimetanila ou um análogo ou derivado da mesma.[060] 15. The method of any of clauses 1 to 14, wherein the antimicrobial compound is pyrimethanil or an analog or derivative thereof.
[061 ]16. O método da cláusula 15, em que a pirimetanila ou análogo ou derivado da mesma compreende a seguinte estrutura: [062]17. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 16, em que 100% do composto antimicrobiano é volatilizado no vapor.[061] 16. The method of clause 15, wherein the pyrimethanil or analog or derivative thereof comprises the following structure: [062] 17. The method of any of clauses 1 to 16, wherein 100% of the antimicrobial compound is vapor volatilized.
[063] 18. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 17, em que nenhuma degradação térmica do composto antimicrobiano ocorre a uma temperatura que varia a partir de cerca de 300 °C a cerca de 350 °C.[063] 18. The method of any one of clauses 1 to 17, wherein no thermal degradation of the antimicrobial compound occurs at a temperature ranging from about 300 ° C to about 350 ° C.
[064] 19. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 18, em que o composto antimicrobiano é administrado a uma taxa de cerca de 0,001 mg/l a cerca de 5 mg/l.19. The method of any of clauses 1 to 18, wherein the antimicrobial compound is administered at a rate of from about 0.001 mg / l to about 5 mg / l.
[065] 20. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 19, em que o tratamento antimicrobiano compreende, adicionalmente, um componente selecionado dentre o grupo que consiste em um carreador, um gás conservante, um composto e um produto químico.[065] 20. The method of any of clauses 1 to 19, wherein the antimicrobial treatment further comprises a component selected from the group consisting of a carrier, a preservative gas, a compound and a chemical.
[066] 21. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 20, em que o gás conservante é CO2.[066] 21. The method of any of clauses 1 to 20, wherein the preservative gas is CO2.
[067] 22. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 20, em que 0 gás conservante é SO2.[067] 22. The method of any of clauses 1 to 20, wherein the preservative gas is SO2.
[068] 23. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 21, em que a concentração de CO2 do tratamento antimicrobiano varia a partir de cerca de 4% a cerca de 20%.[068] 23. The method of any of clauses 1 to 21, wherein the CO2 concentration of the antimicrobial treatment ranges from about 4% to about 20%.
[069] 24. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 21 e 23, em que a concentração de CO2 do tratamento antimicrobiano é cerca de 12% [070] 25. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 20 e 22, em que a concentração de SO2 do tratamento antimicrobiano varia a partir de cerca de 0,01% a cerca de 5%.[069] 24. The method of any of clauses 1 to 21 and 23, wherein the CO2 concentration of the antimicrobial treatment is about 12%. [070] 25. The method of any of clauses 1 to 20 and 22, wherein the SO2 concentration of antimicrobial treatment ranges from about 0.01% to about 5%.
[071 ]26. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 20, em que 0 composto químico é selecionado dentre 0 grupo que consiste em 1-metilciclopropeno (1-MCP), oxaborol, imazalila, fludioxonila, tiabendazol e dioadjuvante (ou dioadjuvan-tes).[071] 26. The method of any of clauses 1 to 20, wherein the chemical compound is selected from the group consisting of 1-methylcyclopropene (1-MCP), oxaborol, imazalyl, fludioxonyl, thiabendazole and dioadjuvant (or dioadjuvants).
[072J27. O método da cláusula 26, em que o oxaborol é benzoxaborol.[072J27. The method of clause 26, wherein oxaborol is benzoxaborol.
[073]28. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 27, em que o composto antimicrobiano tem uma pressão de vapor à temperatura ambiente que é menor do que a pressão de vapor à temperatura ambiente de benzoxaborol.[073] 28. The method of any of clauses 1 to 27, wherein the antimicrobial compound has a room temperature vapor pressure that is less than the benzoxaborol room temperature vapor pressure.
[074J29. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 28, em que o método é eficaz contra patógenos de planta.[074J29. The method of any of clauses 1 to 28, wherein the method is effective against plant pathogens.
[075] 30. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 29, em que os patógenos de planta são patógenos fúngicos ou patógenos bacterianos.[075] 30. The method of any of clauses 1 to 29, wherein the plant pathogens are fungal pathogens or bacterial pathogens.
[076] 31. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 30, em que os patógenos de planta são selecionados dentre o grupo que consiste em Acremonium spp., Albugo spp., Alternaria spp., Ascochyta spp., Aspergillus spp., Botryodiplodia spp., Botryospheria spp., Botrytis spp., Byssochlamys spp., Candida spp., Cephalosporium spp., Ceratocystis spp., Cercospora spp., Chalara spp., Cladosporium spp., Colleto-trichum spp., Cryptosporiopsis spp., CyHndrocarpon spp., Debaryomyces spp., Dia-porthe spp., Didymella spp., Diplodia spp., Dothiorella spp., Elsinoe spp., Fusarium spp., Geotrichum spp., Gloeosporium spp., Glomerella spp., Helminthosporium spp., Khuskia spp., Lasiodiplodia spp., Macrophoma spp., Macrophomina spp., Microdo-chium spp., Monilinia spp., Monilochaethes spp., Mucor spp., Mycocentrospora spp., Mycosphaerella spp., Nectria spp., Neofabraea spp., Nigrospora spp., Penicillium spp., Peronophythora spp., Peronospora spp., Pestalotiopsis spp., Pezicula spp., Phacidiopycnis spp., Phoma spp., Phomopsis spp., Phyllosticta spp., Phytophthora spp., Polyscytalum spp., Pseudocercospora spp., Pyricularia spp., Pythium spp., Rhizoctonia spp., Rhizopus spp., Sclerotium spp., Sclerotinia spp., Septoria spp., Sphaceloma spp., Sphaeropsis spp., Stemphyllium spp., Stilbella spp., Thielaviopsis spp., Thyronectria spp., Trachysphaera spp., Uromyces spp., Ustilago spp., Venturia spp., Verticillium spp., Bacillus spp., Campylobacter spp., Clavibacter spp., Clostri-dium spp., Erwinia spp., Escherichia spp., Lactobacillus spp., Leuconostoc spp., Lis- teria spp., Pantoea spp., Pectobacterium spp., Pseudomonas spp., Ralstonia spp., Salmonella spp., Shigella spp., Staphylococcus spp., Vibrio spp., Xanthomonas spp. e Yersinia spp.[076] 31. The method of any of clauses 1 to 30, wherein the plant pathogens are selected from the group consisting of Acremonium spp., Albugo spp., Alternaria spp., Ascochyta spp., Aspergillus spp. Botryodiplodia spp., Botryospheria spp., Botrytis spp., Byssochlamys spp., Candida spp., Cephalosporium spp., Ceratocystis spp., Cercospora spp. CyHndrocarpon spp., Debaryomyces spp., Dia-porthe spp., Didymella spp., Diplodia spp., Dothiorella spp., Elsinoe spp., Fusarium spp., Gloeosporium spp. Khuskia spp., Lasiodiplodia spp., Macrophoma spp., Macrophomina spp., Microdo-chium spp., Monilinia spp., Monilochaethes spp., Mycocentrospora spp. Nigrospora spp., Penicillium spp., Peronophythora spp., Peronospora spp., Pestalotiopsis spp., Pezicula spp., Phacidiopycnis spp., Ph oma spp., Phomopsis spp., Phyllosticta spp., Phytophthora spp., Polyscytalum spp., Pseudocercospora spp., Pyricularia spp., Rhizoctonia spp. Sphaceloma spp., Sphaeropsis spp., Stemphyllium spp., Stilbella spp., Thielaviopsis spp., Thyronectria spp., Trachysphaera spp., Uromyces spp. Campylobacter spp., Clavibacter spp., Clostri-dium spp., Erwinia spp., Escherichia spp., Lactobacillus spp., Leuconostoc spp., Liseria spp. ., Salmonella spp., Shigella spp., Staphylococcus spp., Vibrio spp., Xanthomonas spp. and Yersinia spp.
[077] 32.O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 31, em que os pató-genos de planta são selecionados dentre o grupo que consiste em Botrytis cinerea, Mucor piríformis, Fusarium sambucinum, Aspergillus brasiliensis e Peniciliium expan-sum.[077] 32. The method of any one of clauses 1 to 31, wherein the plant pathogens are selected from the group consisting of Botrytis cinerea, Mucor pirifformis, Fusarium sambucinum, Aspergillus brasiliensis, and Peniciliium expan-sum.
[078] 33. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 32, em que a câmara é vedada.33. The method of any of clauses 1 to 32, wherein the chamber is sealed.
[079] 34. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 33, em que a câmara é hermeticamente fechada.[079] 34. The method of any of clauses 1 to 33, wherein the chamber is hermetically sealed.
[080] 35. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 34, em que a temperatura da câmara varia a partir de cerca de -2 °C a cerca de 25 °C.[080] 35. The method of any one of clauses 1 to 34, wherein the chamber temperature ranges from about -2 ° C to about 25 ° C.
[081 ]36. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 35, em que a temperatura da câmara varia a partir de cerca de 0 °C a cerca de 23 °C.[081] 36. The method of any one of clauses 1 to 35, wherein the chamber temperature ranges from about 0 ° C to about 23 ° C.
[082] 37. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 36, em que a câmara é semipermeável ou impermeável.[082] 37. The method of any of clauses 1 to 36, wherein the camera is semipermeable or impermeable.
[083] 38. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 37, em que a câmara é produzida a partir de um material selecionado dentre o grupo que consiste em plástico, vidro, madeira e metal.[083] 38. The method of any one of clauses 1 to 37, wherein the chamber is produced from a material selected from the group consisting of plastic, glass, wood and metal.
[084J39. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 38, em que a câmara compreende uma porta, uma saída ou ambas.[084J39. The method of any of clauses 1 to 38, wherein the chamber comprises a door, an outlet or both.
[085] 40. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 39, em que a uma ou mais plantas ou partes de planta são colocadas de modo manual ou robótico na câmara.40. The method of any one of clauses 1 to 39, wherein one or more plants or plant parts are manually or robically placed in the chamber.
[086] 41. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 40, em que a câmara é selecionada dentre o grupo que consiste em uma sala de armazenamento frio, um recipiente marinho, um recipiente aéreo, um vagão de trem, um veículo local, um caminhão de transporte, um trailer, uma caixa, uma embalagem de paletes, uma estufa, um silo de grãos, um ginásio, um celeiro e uma instalação de armazenamento industrial.[086] 41. The method of any of clauses 1 to 40, wherein the chamber is selected from the group consisting of a cold storage room, a marine container, an aerial container, a train car, a local vehicle. , a haul truck, a trailer, a box, a pallet package, a greenhouse, a grain silo, a gym, a barn, and an industrial storage facility.
[087J42. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 41, em que o tempo para administrar o tratamento antimicrobiano varia a partir de cerca de 1 hora a cerca de 5 dias.[087J42. The method of any one of clauses 1 to 41, wherein the time to administer antimicrobial treatment ranges from about 1 hour to about 5 days.
[088] 43. O método de qualquer uma das cláusulas 1 a 42, em que o método é realizado com o uso de um dispositivo de aquecimento.[088] 43. The method of any of clauses 1 to 42, wherein the method is performed using a heating device.
[089] 44. Um dispositivo de aquecimento adaptado para realizar o método de qualquer uma das cláusulas 1 a 43, em que o dispositivo de aquecimento compreende: [090] um elemento de aquecimento, [091] uma câmara de aquecimento, [092] uma fonte de alimentação, [093] o composto antimicrobiano, [094] e um ou mais orifícios.44. A heating device adapted to perform the method of any of clauses 1 to 43, wherein the heating device comprises: [090] a heating element, [091] a heating chamber, [092] a power supply, [093] the antimicrobial compound, [094] and one or more holes.
[095] 45. O dispositivo de aquecimento da cláusula 44, em que a câmara de aquecimento compreende um tubo de cobre.45. The heating device of clause 44, wherein the heating chamber comprises a copper pipe.
[096] 46. O dispositivo de aquecimento da cláusula 44, em que a câmara de aquecimento compreende um tubo de vidro.[096] 46. The heating device of clause 44, wherein the heating chamber comprises a glass tube.
[097] 47. O dispositivo de aquecimento da cláusula 44, em que a câmara de aquecimento compreende uma fonte de ar.47. The heating device of clause 44, wherein the heating chamber comprises an air source.
[098] 48. O dispositivo de aquecimento da cláusula 47, em que a fonte de ar é um ventilador.[098] 48. The heating device of clause 47, wherein the air source is a fan.
[099] 49. O dispositivo de aquecimento de qualquer uma das cláusulas 44 a 48, em que a fonte de alimentação é interna ou externa ao dispositivo de aquecimen- to.[099] 49. The heating device of any of clauses 44 to 48, wherein the power supply is internal or external to the heating device.
[0100]50. O dispositivo de aquecimento de qualquer uma das cláusulas 44 a 49, em que a energia fornecida pela fonte de alimentação é selecionada dentre o grupo que consiste em energia elétrica, energia a gás e energia eólica.[0100] 50. The heating device of any of clauses 44 to 49, wherein the energy supplied by the power supply is selected from the group consisting of electric power, gas power and wind power.
[0101 ]51. O dispositivo de aquecimento de qualquer uma das cláusulas 44 a 50, em que a temperatura da câmara de aquecimento varia a partir de cerca de 90 °C a cerca de 300 °C.[0101] 51. The heating device of any of clauses 44 to 50, wherein the temperature of the heating chamber ranges from about 90 ° C to about 300 ° C.
[0102] 52. O dispositivo de aquecimento de qualquer uma das cláusulas 44 a 50, em que a temperatura da câmara de aquecimento não diminui abaixo de 100 °C.52. The heating device of any of clauses 44 to 50, wherein the temperature of the heating chamber does not decrease below 100 ° C.
[0103] 53. O dispositivo de aquecimento de qualquer uma das cláusulas 44 a 50, em que a temperatura da câmara de aquecimento não diminui abaixo de cerca de 96 °C a cerca de 98 °C.53. The heating device of any one of clauses 44 to 50, wherein the temperature of the heating chamber does not decrease below about 96 ° C to about 98 ° C.
[0104] 54. O dispositivo de aquecimento de qualquer uma das cláusulas 44 a 53, em que o um ou mais orifícios são localizados na extremidade proximal do dispositivo de aquecimento.54. The heating device of any one of clauses 44 to 53, wherein the one or more holes are located at the proximal end of the heating device.
[0105] 55. O dispositivo de aquecimento de qualquer uma das cláusulas 44 a 54, em que a estabilidade do composto antimicrobiano é mantida a temperaturas que variam a partir de cerca de 300 °C a cerca de 350 °C.55. The heating device of any of clauses 44 to 54, wherein the stability of the antimicrobial compound is maintained at temperatures ranging from about 300 ° C to about 350 ° C.
[0106] 56. Um método de uso do dispositivo de aquecimento de qualquer uma das cláusulas 44 a 55, sendo o método compreende: [0107] a) carregar o tratamento antimicrobiano que compreende o composto antimicrobiano na câmara de aquecimento, [0108] b) ligar a fonte de alimentação para aquecer o elemento de aquecimento e a câmara de aquecimento, [0109] c) volatilizar o composto antimicrobiano em um vapor, e [0110] d) liberar o vapor do um ou mais orifícios do dispositivo de aquecimento na câmara.56. A method of using the heating device of any of clauses 44 to 55, the method comprising: [0107] a) loading the antimicrobial treatment comprising the antimicrobial compound into the heating chamber, [0108] b ) turning on the power supply to heat the heating element and the heating chamber, [0109] c) volatilizing the antimicrobial compound into a vapor, and [0110] d) releasing steam from one or more heating device holes in the chamber.
[0111] 57. Ο método da cláusula 56, em que o composto antimicrobiano é colocado diretamente na superfície da câmara de aquecimento.[0111] 57., method of clause 56, wherein the antimicrobial compound is placed directly on the surface of the heating chamber.
[0112] 58. O método da cláusula 56, em que o composto antimicrobiano é colocado diretamente na câmara de aquecimento.[0112] 58. The method of clause 56, wherein the antimicrobial compound is placed directly into the heating chamber.
[0113] 59. O método da cláusula 58, em que o composto antimicrobiano é colocado no tubo de vidro compreendido dentro da câmara de aquecimento.59. The method of clause 58, wherein the antimicrobial compound is placed in the glass tube comprised within the heating chamber.
[0114] 60. O método da cláusula 56, em que o composto antimicrobiano é dissolvido dentro de um solvente.60. The method of clause 56, wherein the antimicrobial compound is dissolved within a solvent.
[0115] 61. O método da cláusula 60, em que o solvente é um solvente volátil.61. The method of clause 60, wherein the solvent is a volatile solvent.
[0116] 62. O método da cláusula 60 ou cláusula 61, em que o solvente que compreende o composto antimicrobiano dissolvido é colocado em um carreador de composto.62. The method of clause 60 or clause 61, wherein the solvent comprising the dissolved antimicrobial compound is placed in a compound carrier.
[0117] 63. O método da cláusula 62, em que o carreador de composto é sólido.63. The method of clause 62, wherein the compound carrier is solid.
[0118] 64. O método da cláusula 62 ou cláusula 63, em que o carreador de composto é um material absorvente.64. The method of clause 62 or clause 63, wherein the compound carrier is an absorbent material.
[0119] 65. O método de qualquer uma das cláusulas 62 a 64, em que o carreador de composto é algodão.65. The method of any one of clauses 62 to 64, wherein the compound carrier is cotton.
[0120] 66. O método de qualquer uma das cláusulas 62 a 64, em que o carreador de composto é não inflamável.66. The method of any one of clauses 62 to 64, wherein the compound carrier is nonflammable.
[0121] 67. O método de qualquer uma das cláusulas 62 a 66, em que o solvente é seco do carreador de composto para formar um carreador de composto seco.67. The method of any of clauses 62 to 66, wherein the solvent is dried from the compound carrier to form a dry compound carrier.
[0122J68. O método da cláusula 67, em que o solvente é evaporado do carreador de composto para formar o carreador de composto seco.[0122J68. The method of clause 67, wherein the solvent is evaporated from the compound carrier to form the dry compound carrier.
[0123]69. O método de qualquer uma das cláusulas 56 a 68, em que o dispositivo de aquecimento penetra na câmara.[0123] 69. The method of any of clauses 56 to 68, wherein the heating device enters the chamber.
[0124] 70. Ο método de qualquer uma das cláusulas 56 a 69, em que o dispositivo de aquecimento é vedado dentro da câmara.70. The method of any of clauses 56 to 69, wherein the heating device is sealed within the chamber.
[0125] 71. O método de qualquer uma das cláusulas 56 a 70, em que a câmara é hermeticamente fechada.71. The method of any of clauses 56 to 70, wherein the chamber is hermetically sealed.
[0126] 72. O método de qualquer uma das cláusulas 56 a 71, em que o vapor solidifica mediante a liberação do dispositivo de aquecimento.72. The method of any of clauses 56 to 71, wherein the vapor solidifies upon release of the heating device.
[0127] 73. O método de qualquer uma das cláusulas 56 a 72, em que o vapor forma micropartículas.73. The method of any one of clauses 56 to 72, wherein the vapor forms microparticles.
[0128] 74. O método da cláusula 73, em que as micropartículas são sólidas.74. The method of clause 73, wherein the microparticles are solid.
[0129] 75. O método da cláusula 73 ou cláusula 74, em que as micropartículas são pó.75. The method of clause 73 or clause 74, wherein the microparticles are dust.
[0130] 76. O método de qualquer uma das cláusulas 73 a 75, em que o tamanho das micropartículas é 2 mícrons ou menos.76. The method of any of clauses 73 to 75, wherein the size of the microparticles is 2 microns or less.
[0131 ]77. O método de qualquer uma das cláusulas 73 a 76, em que o tamanho das micropartículas é menor do que 1 mícron.[0131] 77. The method of any of clauses 73 to 76, wherein the size of the microparticles is less than 1 micron.
[0132J78. O método de qualquer uma das cláusulas 73 a 77, em que as micropartículas são distribuídas por toda a câmara por uma fonte de fluxo de ar.[0132J78. The method of any of clauses 73 to 77, wherein the microparticles are distributed throughout the chamber by an air flow source.
[0133]79. O método da cláusula 78, em que a fonte de fluxo de ar está compreendida no dispositivo de aquecimento, na câmara ou em ambos.[0133] 79. The method of clause 78, wherein the air flow source is comprised in the heating device, the chamber or both.
[0134J80. O método da cláusula 78 ou cláusula 79, em que a fonte de fluxo de ar é um ventilador.[0134J80. The method of clause 78 or clause 79, wherein the air flow source is a fan.
[0135] 81. O método de qualquer uma das cláusulas 73 a 80, em que as micropartículas permitem a distribuição regular do composto antimicrobiano sem ume-decimento.81. The method of any of clauses 73 to 80, wherein the microparticles permit the even distribution of the antimicrobial compound without a decay.
[0136] Os termos “planta (ou plantas)” e “partes de planta” incluem, mas sem limitação, plantas inteiras, células de planta e tecidos de planta, tais como folhas, calos, caules, vagens, raízes, frutas, flores ou partes de flor, pólen, sementes, óvu- los, zigotos, estacas, culturas de célula ou tecido ou qualquer outra parte ou produto de uma planta. Uma classe de plantas que podem ser usadas na presente invenção é geralmente tão ampla quanto a classe de plantas superiores e inferiores incluindo, mas sem limitação, plantas dicotiledôneas, plantas monocotiledôneas, colheitas agronômicas e colheitas de horticultura que incluem, mas sem limitação, colheitas de legumes, colheitas de frutas, nozes comestíveis, colheitas de flores e ornamentais, colheitas de viveiro, colheitas aromáticas e colheitas medicinais.[0136] The terms “plant (or plants)” and “plant parts” include, but are not limited to, whole plants, plant cells and plant tissues, such as leaves, corns, stems, pods, roots, fruits, flowers. or parts of flower, pollen, seeds, eggs, zygotes, cuttings, cell or tissue cultures or any other part or product of a plant. A class of plants that may be used in the present invention is generally as broad as the upper and lower class of plants including, but not limited to, dicotyledonous plants, monocotyledonous plants, agronomic crops, and horticultural crops that include, but are not limited to, crop crops. vegetables, fruit crops, edible nuts, flower and ornamental crops, nursery crops, aromatic crops and medicinal crops.
[0137] Mais especificamente, as colheitas de horticultura da presente revelação incluem, mas sem limitação, fruitas selecionadas dentre, mas sem limitação, amêndoa, maçã, abacate, banana, frutos (incluindo morango, mirtilo, framboesa, amora, groselha e outros tipos de frutos), carambola, cereja, cítricos (incluindo laranja, limão, lima, tangerina, toranja e outros cítricos), coco, figo, uva, goiaba, kiwi, manga, nectarina, melões (incluindo cantalupo, melão-de-casca-de-carvalho, melancia e outros melões), azeitona, mamão, maracujá, pêssego, pera, caqui, abacaxi, ameixa e romã.More specifically, the horticultural crops of the present disclosure include, but are not limited to, fruit selected from, but not limited to, almond, apple, avocado, banana, fruits (including strawberry, blueberry, raspberry, blackberry, currant and other types). fruit), star fruit, cherry, citrus (including orange, lemon, lime, mandarin, grapefruit and other citrus fruit), coconut, fig, grape, guava, kiwi, mango, nectarine, melons (including cantaloupe, oak, watermelon and other melons), olive, papaya, passion fruit, peach, pear, persimmon, pineapple, plum and pomegranate.
[0138] Um legume é selecionado dentre o grupo que inclui, mas sem limitação, aspargo, beterraba (incluindo beterraba sacarina e forrageira), feijão, brócolis, repolho, cenoura, mandioca, couve-flor, aipo, pepino, berinjela, alho, pepino, folhas verdes (alface, couve, espinafre e outras folhas verdes), alho-porro, lentilha, cogumelo, cebola, ervilhas, pimenta (pimenta doce, pimentão ou pimenta malagueta), batata, abóbora, batata-doce, vagem, moranga, tomate e nabo. Uma planta ou flor ou parte de planta de viveiro é selecionada dentre o grupo que inclui, mas sem limitação, rosa, cravo, gerânio, gérbera, lírio, orquídea ou outras flores de corte ou flores ornamentais, bulbos de flores, arbusto, árvore conífera ou caducifólia.[0138] A vegetable is selected from the group including, but not limited to, asparagus, beets (including sugar and fodder beets), beans, broccoli, cabbage, carrots, cassava, cauliflower, celery, cucumber, eggplant, garlic, cucumber, green leaves (lettuce, kale, spinach and other green leaves), leek, lentil, mushroom, onion, peas, pepper (sweet pepper, sweet pepper or chilli pepper), potato, pumpkin, sweet potato, string bean, pumpkin , tomato and turnip. A plant or flower or part of a nursery plant is selected from the group which includes, but is not limited to, rose, carnation, geranium, gerbera, lily, orchid or other cut flowers or ornamental flowers, flower bulbs, shrub, coniferous tree. or deciduous.
[0139] As colheitas da presente revelação podem também incluir, mas sem limitação, colheitas de cereais e grãos (por exemplo, milho, arroz e trigo), pulses e leguminosas de grãos (por exemplo, feijões e lentilhas), colheitas de semente olea- ginosa (por exemplo, soja, girassol e canola), alimento para uso industrial, colheitas de pasto e feno, colheitas de fibras (por exemplo, algodão, linho e cânhamo), colheitas de açúcar (por exemplo, beterrabas sacarinas e cana-de-açúcar) e colheitas de tubérculo e raiz amilácea (por exemplo, beterrabas, cenouras e batatas-doces).Crops of the present disclosure may also include, but are not limited to, crops of cereals and grains (eg, maize, rice and wheat), pulses and legumes (e.g. beans and lentils), oilseed crops - ginosa (eg soybean, sunflower and canola), food for industrial use, pasture and hay crops, fiber crops (eg cotton, flax and hemp), sugar crops (eg saccharine beet and cane). sugar crops) and starchy root and tuber crops (for example, beets, carrots and sweet potatoes).
[0140]Os termos “micro-organismo” ou “patógeno de planta” referem-se a organismos tais como Botrytis cinerea, Mucor piriformis, Fusarium sambucinum, As-pergillus brasiliensis e Peniciliium expansum. Os patógenos adicionais abrangidos pela presente invenção incluem, mas sem limitação, Acremonium spp., Albugo spp., Alternaria spp., Ascochyta spp., Aspergillus spp., Botryodiplodia spp., Botryospheria spp., Botrytis spp., Byssochlamys spp., Candida spp., Cephalosporium spp., Cerato-cystis spp., Cercospora spp., Chalara spp., Cladosporium spp., Colletotrichum spp., Cryptosporiopsis spp., Cylindrocarpon spp., Debaryomyces spp., Diaporthe spp., Didymella spp., Diplodia spp., Dothiorella spp., Elsinoe spp., Fusarium spp., Geo-trichum spp., Gloeosporium spp., Glomerella spp., Helminthosporium spp., Khuskia spp., Lasiodiplodia spp., Macrophoma spp., Macrophomina spp., Microdochium spp., Monilinia spp., Monilochaethes spp., Mucor spp., Mycocentrospora spp., Mycosphae-rella spp., Nectria spp., Neofabraea spp., Nigrospora spp., Peniciliium spp., Perono-phythora spp., Peronospora spp., Pestalotiopsis spp., Pezicula spp., Phacidiopycnis spp., Phoma spp., Phomopsis spp., Phyllosticta spp., Phytophthora spp., Polyscyta-lum spp., Pseudocercospora spp., Pyricularia spp., Pythium spp., Rhizoctonia spp., Rhizopus spp., Sclerotium spp., Sclerotinia spp., Septoria spp., Sphaceloma spp., Sphaeropsis spp., Stemphyllium spp., Stilbella spp., Thielaviopsis spp., Thyronectria spp., Trachysphaera spp., Uromyces spp., Ustilago spp., Venturia spp., e Verticillium spp., e patógenos bacterianos, tal como Bacillus spp., Campylobacter spp., Clavibac-ter spp., Clostridium spp., Erwinia spp., Escherichia spp., Lactobacillus spp., Leuco-nostoc spp., Listeria spp., Pantoea spp., Pectobacterium spp., Pseudomonas spp., Ralstonia spp., Salmonella spp., Shigella spp., Staphylococcus spp., Vibrio spp., Xanthomonas spp., e Yersinia spp.[0140] The terms "microorganism" or "plant pathogen" refer to organisms such as Botrytis cinerea, Mucor piriformis, Fusarium sambucinum, As-pergillus brasiliensis and Peniciliium expansum. Additional pathogens encompassed by the present invention include, but are not limited to, Acremonium spp., Albugo spp., Alternaria spp., Ascochyta spp., Aspergillus spp., Botryodiplodia spp., Botryospheria spp., Botrytis spp., Byssochlamys spp. Cephalosporium spp., Cerato-cystis spp., Cercospora spp., Chalara spp., Cladosporium spp., Colletotrichum spp., Cryptosporiopsis spp., Cylindrocarpon spp., Diaporthe spp., Diporthe spp. spp., Dothiorella spp., Elsinoe spp., Fusarium spp., Geo-trichum spp., Gloeosporium spp., Glomerella spp., Helminthosporium spp., Lashusiplodia spp., Macrophoma spp., Macrophomina spp. spp., Monilinia spp., Monilochaethes spp., Mucor spp., Mycocentrospora spp., Mycosphae-rella spp., Nectria spp., Neofabraea spp., Peniciliium spp., Perono-phythora spp., Peronospora , Pestalotiopsis spp., Pezicula spp., Phacidiopycnis spp., Phoma spp., Phomopsis spp., Phyllosticta spp., P hytophthora spp., Polyscyta-lum spp., Pseudocercospora spp., Pyricularia spp., Pythium spp., Rhizoctonia spp., Rhizopus spp., Sclerotinia spp., Septoria spp., Sphaceloma spp., Sphaeropsis spp. Stemphyllium spp., Stilbella spp., Thielaviopsis spp., Thyronectria spp., Trachysphaera spp., Uromyces spp., Ustilago spp., And Verticillium spp. And bacterial pathogens such as Bacillus spp., Campylobacter spp. , Clavibac-ter spp., Clostridium spp., Erwinia spp., Escherichia spp., Lactobacillus spp., Leuco-nostoc spp., Listeria spp., Pectobacterium spp., Pseudomonas spp., Ralstonia spp. spp., Shigella spp., Staphylococcus spp., Vibrio spp., Xanthomonas spp., and Yersinia spp.
[0141] Os termos “vaporizado”, “volatilizado” e “aerossolizado” referem-se à transformação física de um elemento, objeto ou composto que é exposto ao calor intenso. Frequentemente, um vapor ou gás resultará quando o elemento, objeto ou composto na fase líquida ou fase sólida é exposto ao calor intenso.[0141] The terms "vaporized", "volatilized" and "aerosolized" refer to the physical transformation of an element, object or compound that is exposed to intense heat. Often a vapor or gas will result when the element, object or compound in the liquid phase or solid phase is exposed to intense heat.
[0142] A vaporização pode incluir a transição de fase de um elemento ou composto da fase líquida para um vapor. A vaporização pode ocorrer por evaporação quando a pressão parcial do vapor é menor do que a pressão de vapor de equilíbrio, em que a transição de fase de líquido para vapor ocorre abaixo do ponto de ebulição do dito composto a uma determinada pressão. A vaporização de um líquido para gás pode também ocorrer no ou acima do ponto de ebulição. A ebulição ocorre quando a pressão de vapor de equilíbrio da substância é maior ou igual à pressão do ambiente.Vaporization may include the phase transition of an element or compound from the liquid phase to a vapor. Vaporization may occur by evaporation when the vapor partial pressure is less than the equilibrium vapor pressure, wherein the phase transition from liquid to vapor occurs below the boiling point of said compound at a given pressure. Vaporization of a liquid to gas may also occur at or above the boiling point. Boiling occurs when the equilibrium vapor pressure of the substance is greater than or equal to the ambient pressure.
[0143] A vaporização pode também incluir a transição de fase de um elemento ou composto da fase sólida para um vapor. Por exemplo, os termos “sublimado” ou “sublimação” referem à transição de fase de um elemento ou composto da fase sólida para um vapor. Frequentemente, a sublimação é a transição de fase direta da fase sólida para a fase gasosa, pulando a fase líquida intermediária. Alternativamente, a “sublimação” pode também incluir a “evaporação” de um composto sólido, quando o composto sólido é primeiramente exposto a sua temperatura de fusão e induzido a fundir em uma forma líquida ou pseudolíquida (por exemplo, amolecimento, gel, pasta, etc.) antes de sua transição final em um vapor ou fase gasosa.Vaporization may also include the phase transition of a solid phase element or compound to a vapor. For example, the terms "sublimated" or "sublimation" refer to the phase transition of an element or compound from the solid phase to a vapor. Often, sublimation is the direct phase transition from the solid phase to the gas phase, skipping the intermediate liquid phase. Alternatively, "sublimation" may also include "evaporation" of a solid compound when the solid compound is first exposed to its melting temperature and induced to melt into a liquid or pseudoliquid form (e.g., softening, gel, paste, etc.) before their final transition into a vapor or gas phase.
COMPOSTOS E COMPONENTES DOS PRESENTES MÉTODOSCOMPOUNDS AND COMPONENTS OF THESE METHODS
[0144] Os métodos da presente revelação são direcionados ao uso de compostos de pirimetanila como um antimicrobiano para tratar plantas ou partes de planta. Os métodos da presente revelação para tratar plantas ou partes de planta compreendem, consistem essencialmente em ou consistem em compostos de pirimetani- Ia. Uma modalidade exemplificativa de um composto de pirimetanila (4,6-Dimetil-N-fenilpirimidin-2-amina ou 4, 6-Dimetil-N-fenil-2-pirimidinamina) do presente método é: ou um análogo ou derivado do mesmo.[0144] The methods of the present disclosure are directed to the use of pyrimethanil compounds as an antimicrobial to treat plants or plant parts. The methods of the present disclosure for treating plants or plant parts comprise, consist essentially of, or consist of pyrimethanyl compounds. An exemplary embodiment of a pyrimethanyl compound (4,6-Dimethyl-N-phenylpyrimidin-2-amine or 4 2,6-Dimethyl-N-phenyl-2-pyrimidinamine) of the present method is either an analog or derivative thereof.
[0145] Pirimetanila é um ingrediente ativo que pode ser usado individualmente ou como uma mistura ou combinação com outros compostos ou um carreador. Por exemplo, o composto de pirimetanila pode também ser usado em combinação com gases conservantes ou produtos químicos para formar um cotratamento com pirimetanila. O composto de pirimetanila pode também ser usado em combinação com um carreador para formar um tratamento com pirimetanila. O tratamento com pirimetanila fornece proteção antimicrobiana a plantas ou partes de planta quando administrado, aplicado ou exposto a plantas ou partes de planta.[0145] Pyrimethanil is an active ingredient that can be used individually or as a mixture or combination with other compounds or a carrier. For example, the pyrimethanil compound may also be used in combination with preservative gases or chemicals to form a pyrimethanil co-treatment. The pyrimethanil compound may also be used in combination with a carrier to form a pyrimethanil treatment. Pyrimethanil treatment provides antimicrobial protection to plants or plant parts when administered, applied or exposed to plants or plant parts.
[0146] A temperatura de fusão para pirimetanila varia a partir de cerca de 96 °C a cerca de 98 °C. A ou acima de cerca de 120 °C, os compostos de pirimetanila experimentam perda de massa em um estado estacionário que é gradual devido à evaporação. Já que a perda observada de pirimetanila ocorre acima de sua temperatura de fusão, considera-se que a perda do ingrediente ativo inclui a evaporação, em vez da sublimação direta, já que a perda do ingrediente ativo ocorre a partir da forma fundida. Além disso, não se observa a ocorrência de nenhuma alteração molecular ao composto ativo de pirimetanila durante o processo de sublimação.The melting temperature for pyrimethanil ranges from about 96 ° C to about 98 ° C. At or above about 120 ° C, pyrimethanil compounds experience steady-state mass loss that is gradual due to evaporation. Since the observed loss of pyrimethanil occurs above its melting temperature, the loss of the active ingredient is considered to include evaporation rather than direct sublimation, since the loss of the active ingredient occurs from the molten form. In addition, no molecular change to the active compound of pyrimethanil is observed during the sublimation process.
[0147] A pirimetanila pode ser usada em qualquer forma, incluindo, mas sem limitação, um sólido (por exemplo, um pó), um gás, um vapor ou uma composição aerossol. Particularmente, a pirimetanila pode ser usada na forma de um gás, e/ou um vapor, (“vapor”) quando calor suficiente é aplicado à pirimetanila sólida. Em uma modalidade, um composto de pirimetanila ou uma pluralidade de compostos de piri-metanila pode ser vaporizado com o uso de calor para converter um sólido em uma composição líquida de pirimetanila e, então, em um vapor. Em outra modalidade, um composto de pirimetanila ou uma pluralidade de compostos de pirimetanila pode ser vaporizado com o uso de calor para converter uma composição sólida de pirimetanila em um vapor por sublimação. Em uma modalidade ilustrativa, uma composição em pó de pirimetanila é aquecida a fim de converter a composição sólida diretamente em um vapor por sublimação.Pyrimethanil may be used in any form, including, but not limited to, a solid (e.g., a powder), a gas, a vapor or an aerosol composition. Particularly, pyrimethanil may be used in the form of a gas, and / or a vapor, ("vapor") when sufficient heat is applied to the solid pyrimethanil. In one embodiment, a pyrimethanil compound or a plurality of pyri-methanyl compounds may be vaporized using heat to convert a solid to a liquid pyrimethanil composition and then to a vapor. In another embodiment, a pyrimethanil compound or a plurality of pyrimethanil compounds may be vaporized using heat to convert a solid pyrimethanil composition to a sublimation vapor. In an illustrative embodiment, a pyrimethanil powder composition is heated to convert the solid composition directly to a sublimation vapor.
[0148] Tipicamente, à temperatura ambiente e inferior, a pirimetanila existe como um sólido. Entretanto, quando a temperatura aumenta, tal como em resposta ao calor, a pirimetanila sólida volatiliza ou vaporiza para se tornar um gás, um vapor ou um aerossol (“vapor”). O calor pode ser aplicado ao composto de pirimetanila por qualquer método que fará com que a pirimetanila vaporize. Entretanto, em uma modalidade do presente método, o calor pode ser aplicado ao composto de pirimetanila com o uso de um aparelho ou dispositivo. Em uma modalidade ilustrativa do presente método, um dispositivo de aquecimento ou aparelho é utilizado para vaporizar pirimetanila técnica (consultar o Exemplo 7).Typically, at room temperature and below, pyrimethanil exists as a solid. However, when the temperature rises, as in response to heat, solid pyrimethanil volatilizes or vaporizes to become a gas, vapor or aerosol ("vapor"). Heat can be applied to the pyrimethanil compound by any method that will cause pyrimethanil to vaporize. However, in one embodiment of the present method, heat may be applied to the pyrimethanil compound with the use of an apparatus or device. In an illustrative embodiment of the present method, a heating device or apparatus is used to vaporize technical pyrimethanil (see Example 7).
[0149] Por exemplo, um dispositivo de aquecimento da presente revelação compreende um elemento de aquecimento que circunda uma câmara de aquecimento ou um recipiente (por exemplo, um tubo de cobre). O elemento de aquecimento tem a capacidade de produzir altas temperaturas necessárias para alcançar a temperatura de vaporização de um ingrediente ativo sólido técnico, tal como a pirimetanila.For example, a heating device of the present disclosure comprises a heating element surrounding a heating chamber or a container (e.g., a copper pipe). The heating element has the ability to produce the high temperatures required to reach the vaporization temperature of a technical solid active ingredient such as pyrimethanil.
[0150] O ingrediente ativo é colocado na câmara de aquecimento de vários modos possíveis. Por exemplo, o ingrediente ativo sólido (por exemplo, pó) pode ser colocado diretamente na superfície da câmara de aquecimento ou elemento de aquecimento ou colocado em um tubo de vidro que é inserido na câmara de aqueci- mento do dispositivo. Alternativamente, o ingrediente ativo sólido pode ser dissolvido com um solvente volátil, e a quantidade desejada do ingrediente ativo dissolvido pode ser colocada em ou sobre um carreador sólido, tal como algodão ou um material absorvente não inflamável. Se um solvente for utilizado, o solvente pode ser evaporado, e o material carreador seco que contém o ingrediente ativo é carregado na câmara de aquecimento. Quaisquer outros modos para carregar a quantidade desejada de ingrediente técnico ativo na câmara de aquecimento do dispositivo de aquecimento são também abrangidos pela presente revelação.[0150] The active ingredient is placed in the heating chamber in several possible ways. For example, the solid active ingredient (eg powder) may be placed directly on the surface of the heating chamber or heating element or placed in a glass tube that is inserted into the heating chamber of the device. Alternatively, the solid active ingredient may be dissolved with a volatile solvent, and the desired amount of the dissolved active ingredient may be placed in or on a solid carrier such as cotton or a non-flammable absorbent material. If a solvent is used, the solvent may be evaporated, and the dry carrier material containing the active ingredient is charged to the heating chamber. Any other ways for loading the desired amount of active technical ingredient into the heating chamber of the heating device are also encompassed by the present disclosure.
[0151 ]0 dispositivo de aquecimento também compreende uma fonte de alimentação. A fonte de alimentação pode ser interna ou externa ao dispositivo de aquecimento e fornece energia ao elemento de aquecimento por quaisquer meios, incluindo energia elétrica, a gás ou eólica. Quando a energia é ligada, calor é aplicado à câmara de aquecimento que contém o ingrediente ativo que vaporiza em um estado gasoso (“vapor”).The heating device also comprises a power supply. The power supply may be internal or external to the heating device and provides power to the heating element by any means including electric, gas or wind power. When the power is turned on, heat is applied to the heating chamber containing the active ingredient that vaporizes in a gaseous state ("vapor").
[0152] Tipicamente, a temperatura da câmara de aquecimento pode variar a partir de cerca de 90 °C a cerca de 300 °C. Por exemplo, a câmara de aquecimento pode variar a partir de cerca de 100 °C a cerca de 300 °C e de cerca de 100 °C a cerca de 200 °C, de modo que temperaturas mais baixas na câmara de aquecimento induzam a vaporização mais lenta do ingrediente ativo, enquanto que temperaturas mais altas induzem a vaporização mais rápida do ingrediente ativo.Typically, the temperature of the heating chamber may range from about 90 ° C to about 300 ° C. For example, the heating chamber may range from about 100 ° C to about 300 ° C and from about 100 ° C to about 200 ° C, so that lower temperatures in the heating chamber induce vaporization. slower active ingredient, while higher temperatures induce faster vaporization of the active ingredient.
[0153] Embora a perda e/ou degradação total do ingrediente ativo de pirime-tanila possa ocorrer entre cerca de 200 °C a cerca de 300 °C, em algumas modalidades da composição de pirimetanila da presente revelação, nenhuma degradação térmica de pirimetanila foi observada a temperaturas a ou cerca de 300 °C a cerca de 350 °C. Esses resultados são inesperadamente surpreendentes e contrários à faixa de decomposição térmica conhecida de 189,54 a 344,74 °C para pirimetanila.Although the total loss and / or degradation of the active ingredient of pyrime tanyl may occur at about 200 ° C to about 300 ° C, in some embodiments of the pyrimethanil composition of the present disclosure, no thermal degradation of pyrimethanil has been observed. observed at temperatures at or about 300 ° C to about 350 ° C. These results are unexpectedly surprising and contrary to the known thermal decomposition range of 189.54 to 344.74 ° C for pyrimethanil.
[0154] Uma fonte de fluxo de ar de baixo volume é também compreendida pelo dispositivo de aquecimento. Por exemplo, um ventilador ou algum mecanismo para empurrar o ar através da câmara de aquecimento do dispositivo é necessário. A fonte de fluxo de ar (por exemplo, um ventilador) empurrará o ar através da câmara de aquecimento que compreende o ingrediente ativo vaporizado e através da porção de extremidade proximal do dispositivo de aquecimento através de um ou mais orifícios ou aberturas localizadas na extremidade proximal do dispositivo de aquecimento. O fluxo de ar através do dispositivo de aquecimento deve ter a capacidade de ser mantido e deve ser mantido a uma velocidade escalar ou velocidade vetorial que seja suficiente e/ou lenta o suficiente para impedir que o ar que percorre através do dispositivo resfrie a câmara de aquecimento (que compreende o ingrediente ativo) abaixo da temperatura em que o ingrediente ativo vaporizado é formado. Por exemplo, ao vaporizar pirimetanila, tipicamente, a temperatura da câmara de aquecimento não deve diminuir abaixo de 100 °C, e, ademais, não abaixo de 96 °C a 98 °C, a temperatura de fusão da pirimetanila.[0154] A low volume air flow source is also comprised of the heating device. For example, a fan or some mechanism for pushing air through the heating chamber of the device is required. The air flow source (e.g., a blower) will push air through the heating chamber comprising the vaporized active ingredient and through the proximal end portion of the heating device through one or more holes or openings located at the proximal end. of the heating device. The air flow through the heating device must be capable of being maintained and must be maintained at a scalar speed or vector velocity that is sufficient and / or slow enough to prevent air flowing through the device from cooling the heating chamber. heating (comprising the active ingredient) below the temperature at which the vaporized active ingredient is formed. For example, when vaporizing pyrimethanil, typically, the temperature of the heating chamber should not decrease below 100 ° C, and furthermore not below 96 ° C to 98 ° C, the melting temperature of pyrimethanil.
[0155] A fonte de fluxo de ar no dispositivo de aquecimento pode empurrar o ar e o ingrediente ativo para fora do orifício (ou orifícios) do dispositivo e diretamente para um ambiente fechado, recipiente ou câmara. O dispositivo de aquecimento pode penetrar na câmara e pode ser vedado na mesma, de modo que uma quantidade significativa de ingrediente ativo vaporizado não seja perdida no ambiente. A câmara pode compreender plantas ou partes de planta, tal como frutas, flores ou vegetais, a serem tratadas com o ingrediente ativo vaporizado a fim de controlar os patógenos de planta.[0155] The source of air flow in the heating device may push air and the active ingredient out of the orifice (or holes) of the device and directly into an enclosed environment, container or chamber. The heating device may penetrate the chamber and may be sealed therein so that a significant amount of vaporized active ingredient is not lost in the environment. The chamber may comprise plants or plant parts, such as fruits, flowers or vegetables, to be treated with the vaporized active ingredient to control plant pathogens.
[0156] A câmara é tipicamente mantida a uma temperatura adequada para armazenar frutas, flores ou vegetais. Por exemplo, a temperatura da câmara pode variar de cerca de -2 °C a cerca de 25 °C e varia frequentemente a partir de cerca de 0 °C a cerca de 23 °C que é significativamente mais fria do que temperatura da câmara de aquecimento do dispositivo. Quando o vapor ativo se move da temperatura mais quente do dispositivo de aquecimento para a temperatura mais fria da câmara, o ingrediente ativo vaporizado ressolidifica imediatamente. O vapor resfriado forma pequenas micropartículas sólidas de pirimetanila ativa em pó que ressolidificaram individualmente em seu estado de submícron. As micropartículas ativas sólidas são distribuídas e dispersas por toda a câmara pela fonte de fluxo de ar do dispositivo de aquecimento adicionalmente a outras fontes de fluxo de ar e ao moimento que pode estar presente na câmara (por exemplo, ventiladores). Por exemplo, a pirimetanila vaporizada transita imediatamente de volta para sua forma sólida (por exemplo, pó) mediante sua entrada na câmara.[0156] The chamber is typically kept at a temperature suitable for storing fruits, flowers or vegetables. For example, the chamber temperature may range from about -2 ° C to about 25 ° C and often ranges from about 0 ° C to about 23 ° C which is significantly colder than the chamber temperature. device warming up. When the active vapor moves from the warmer temperature of the heating device to the coldest chamber temperature, the vaporized active ingredient immediately solidifies. The cooled vapor forms small solid active pyrimethanil microparticles in powder form that have individually resolidified into their submicron state. Solid active microparticles are distributed and dispersed throughout the chamber by the air flow source of the heating device in addition to other air flow sources and the grinding that may be present in the chamber (e.g. fans). For example, vaporized pyrimethanil immediately transits back to its solid form (e.g., powder) upon entry into the chamber.
[0157] O tamanho das micropartículas de pirimetanila sólidas após a vapori-zação pode ser de cerca de menos do que 1 mícron (tamanho de submícron), de cerca de 1 mícron ou menos ou de menos do que 1 mícron a cerca de 5 mícrons, de cerca de 0,5 mícron a cerca de 5 mícrons, de cerca de 0,5 mícron a cerca de 2 mícrons, de cerca de 1 mícron a cerca de 1,5 mícron, cerca de 1 mícron a cerca de 2 mícrons, cerca de 0,5 mícron a cerca de 1,5 mícron, cerca de 1,5 mícron a cerca de 2 mícrons, cerca de 1 mícron a cerca de 5 mícrons e cerca de 2 mícrons a cerca de 5 mícrons. Outras técnicas de aplicação, tal como nebulização e encharcamento, usam tamanhos de partícula que variam de cerca de 2 mícrons a cerca de 90 mícrons. O tamanho extremamente pequeno a submícron das micropartículas de pirimetanila sólidas que se formam após a vaporização no presente método permite a distribuição e a dispersão uniformes e regulares do ingrediente ativo para a eficácia melhorada de tratamentos com fungicida ou pesticida de plantas e partes de planta em relação a métodos da técnica anterior.The size of solid pyrimethanil microparticles after spraying may be about less than 1 micron (submicron size), about 1 micron or less, or less than 1 micron to about 5 microns. from about 0.5 microns to about 5 microns, from about 0.5 microns to about 2 microns, from about 1 micron to about 1.5 microns, about 1 micron to about 2 microns, about 0.5 microns to about 1.5 microns, about 1.5 microns to about 2 microns, about 1 micron to about 5 microns, and about 2 microns to about 5 microns. Other application techniques, such as fogging and soaking, use particle sizes ranging from about 2 microns to about 90 microns. The extremely small to submicron size of solid pyrimethanil microparticles formed after spraying in the present method allows for even and regular distribution and dispersion of the active ingredient for improved efficacy of fungicide or pesticide treatments of plants and plant parts in relation to to prior art methods.
[0158] Particularmente, as micropartículas sólidas pequenas são muito mais facilmente circuladas e distribuídas em uma câmara com ventiladores, enquanto que ventiladores não podem ser usados em alguns métodos da técnica anterior (por exemplo, nebulização). Além disso, as partículas sólidas pequenas permitem a dis- tribuição uniforme do ingrediente ativo nas plantas ou partes de planta sem umede-cimento, tal como com água ou um solvente. Assim, o presente método fornece um modo exclusivo de tratamento de plantas e partes de planta sem umedecer a fruta, mas ainda permitindo a aplicação uniforme e o controle de doença eficaz e a inibição de patógenos de planta.Particularly, small solid microparticles are much more easily circulated and distributed in a fan chamber, whereas fans cannot be used in some prior art methods (eg nebulization). In addition, small solid particles allow even distribution of the active ingredient in plants or plant parts without wetting, such as with water or a solvent. Thus, the present method provides a unique way of treating plants and plant parts without moistening the fruit, but still allowing uniform application and effective disease control and inhibition of plant pathogens.
[0159] Os compostos de pirimetanila ativos podem ser aplicados a plantas ou partes de planta em qualquer volume de um ambiente contido ou câmara e podem ser usados em plantas ou partes de planta em produção em estufa e pós-ceifa durante a embalagem em campo, paletização, em caixas, durante o armazenamento e por toda a rede de distribuição. Um ambiente contido ou câmara da presente revelação pode ser qualquer volume contido de espaço livre do qual um gás, vapor ou produto químico não pode escapar prontamente uma vez que o mesmo foi introduzido. Por exemplo, um ambiente contido ou câmara pode ser produzido a partir de plástico, vidro, madeira, metal ou quaisquer outros materiais de construção semipermeá-veis ou impermeáveis típicos usados para armazenar ou transportas plantas ou partes de planta.Active pyrimethanil compounds may be applied to plants or plant parts in any volume of a contained environment or chamber and may be used in greenhouse and post harvest plants or plant parts during field packing, palletizing, in boxes, during storage and throughout the distribution network. A contained environment or chamber of the present disclosure may be any contained volume of free space from which a gas, vapor or chemical cannot readily escape once it has been introduced. For example, a contained environment or chamber may be produced from plastic, glass, wood, metal or any other typical semipermeable or impermeable building materials used to store or transport plants or plant parts.
[0160] Qualquer espaço contido que é utilizado para reter plantas ou colheitas pode ser usado como uma câmara no presente método. A câmara da presente revelação compreende um espaço livre (isto é, volume de capacidade) que pode ser de qualquer tamanho que seja grande o suficiente para reter as plantas e partes de planta a serem tratadas. Por exemplo, um espaço contido ou câmara inclui, mas sem limitação, uma sala de armazenamento frio, um recipiente marinho, um recipiente aéreo, um vagão de trem ou veículo local, um caminhão ou trailer de transporte, uma caixa ou embalagem e paletes, uma estufa, um silo de grãos ou similar. Ademais, ginásios, celeiros e outras instalações de armazenamento industriais grandes são abrangidos no escopo da presente revelação da câmara. Adicionalmente, produtos embalados minimamente processados (por exemplo, vegetais ou frutas embaladas) podem também ser tratados com o método descrito na presente invenção.Any contained space that is used to hold plants or crops can be used as a chamber in the present method. The chamber of the present disclosure comprises a free space (i.e. capacity volume) which may be of any size that is large enough to hold the plants and plant parts to be treated. For example, a contained space or chamber includes, but is not limited to, a cold storage room, a marine container, an aerial container, a local train or vehicle, a truck or transport trailer, a box or package, and pallets, a greenhouse, a grain silo or the like. In addition, gyms, barns and other large industrial storage facilities are within the scope of this chamber disclosure. Additionally, minimally processed packaged products (e.g. packaged vegetables or fruits) may also be treated with the method described in the present invention.
[0161 ]A câmara pode ter uma porta (por exemplo, uma porta de septo de antepara) para a introdução ou liberação do tratamento químico como um vapor ou aerossol. A câmara de ambiente contido pode também ter uma saída para ventilar ou liberar a porção não usada do carreador de tratamento ou para manter a pressão atmosférica.[0161] The chamber may have a port (for example, a bulkhead septum port) for introducing or releasing chemical treatment as a vapor or aerosol. The enclosed room chamber may also have an outlet for venting or releasing the unused portion of the treatment carrier or for maintaining atmospheric pressure.
[0162] Uma vantagem do método da presente revelação em relação à técnica anterior é que um carreador não é exigido para ativar ou entregar o composto de pirimetanila a plantas ou partes de planta. Em outras palavras, o método da presente invenção pode ser usado com cerca de 100% de ingrediente ativo, tal como pirimetanila. Já que o presente método tem a capacidade de usar apenas o ingrediente ativo sólido para tratar as plantas e partes de planta.An advantage of the present disclosure method over the prior art is that a carrier is not required to activate or deliver the pyrimethanil compound to plants or plant parts. In other words, the method of the present invention may be used with about 100% active ingredient, such as pyrimethanil. Since the present method has the ability to use only the solid active ingredient to treat plants and plant parts.
[0163] Os tratamentos com pirimetanila vaporizada podem ser aplicados às plantas ou partes de plantas a uma taxa que é relatada como a quantidade (miligramas, mg) de ingrediente ativo (isto é, composto de pirimetanila) por volume (litro, I) de espaço livre de câmara. Por exemplo, a taxa a qual o tratamento com pirimetanila pode ser eficazmente aplicado em uma câmara e/ou a plantas pode variar a partir de 0,001 mg/l a 5 mg/l. Por exemplo, a taxa do tratamento com pirimetanila pode ser de cerca de 0,01 mg/l a cerca de 3 mg/l, de cerca de 0,01 mg/l a cerca de 4 mg/l, de cerca de 0,01 mg/l a cerca de 0,2 mg/l, de cerca de 0,01 mg/l a cerca de 1 mg/l, de cerca de 1 mg/l a cerca de 5 mg/l de cerca de 0,5 mg/l a cerca de 3 mg/l, de cerca de 0,01 mg/l a cerca de 0,05 mg/l, de cerca de 0,01 mg/l a cerca de 0,04 mg/l, de cerca de 0,01 mg/l a cerca de 0,03 mg/l, de cerca de 0,1 mg/l a cerca de 0,5 mg/l, de cerca de 0,1 mg/l a cerca de 0,4 mg/l, de cerca de 0,1 mg/l a cerca de 0,3 mg/l, de cerca de 0,1 mg/l a cerca de 0,2 mg/l, de cerca de 0,001 mg/l a cerca de 0,2 mg/l, de cerca de 0,001 mg/l a cerca de 0,05 mg/l, de cerca de 0,001 mg/l a cerca de 0,04 mg/l, de cerca de 0,001 mg/l a cerca de 3 mg/l e a cerca de 0,01 mg/l, cerca de 0,03 mg/l, cerca de 0,04 mg/l, cerca de 0,1 mg/l, cerca de 0,2 mg/l, cerca de 0,3 mg/l e cerca de 1 mg/l.Vaporized pyrimethanil treatments may be applied to plants or parts of plants at a rate that is reported as the amount (milligrams, mg) of active ingredient (ie, pyrimethanil compound) per volume (liter, I) of camera free space. For example, the rate at which pyrimethanil treatment can be effectively applied in a chamber and / or plant may range from 0.001 mg / l to 5 mg / l. For example, the rate of pyrimethanil treatment may be from about 0.01 mg / l to about 3 mg / l, from about 0.01 mg / l to about 4 mg / l, from about 0.01 mg / l about 0.2 mg / l, about 0.01 mg / l and about 1 mg / l, about 1 mg / l and about 5 mg / l about 0.5 mg / l 3 mg / l, from about 0.01 mg / l to about 0.05 mg / l, from about 0.01 mg / l to about 0.04 mg / l, from about 0.01 mg / l 1 to about 0.03 mg / l, from about 0.1 mg / l to about 0.5 mg / l, from about 0.1 mg / l to about 0.4 mg / l, from about 0 0.1 mg / l to about 0.1 mg / l to about 0.2 mg / l to about 0.001 mg / l to about 0.2 mg / l to about 0.2 mg / l from 0.001 mg / l to about 0.05 mg / l, from about 0.001 mg / l to about 0.04 mg / l, from about 0.001 mg / l to about 3 mg / l and about 0.01 mg / l 1, about 0.03 mg / l, about 0.04 mg / l, about 0.1 mg / l, about 0.2 mg / l, about 0.3 mg / l, and about 1 mg / l.
[0164] Gases conservantes adicionais do método descrito na presente invenção podem ser incluídos no tratamento câmara, mas sem limitação, dióxido de carbono (CO2) e dióxido de enxofre (SO2). Embora qualquer concentração de gás conservante ou produto químico que fornece 0 efeito antimicrobiano descrito na presente invenção possa ser utilizada, uma porcentagem de gás CO2 que pode ser usada na presente método inclui, mas sem limitação, de cerca de 4% a cerca de 20%, de cerca de 5% a cerca de 18%, de cerca de 6% a cerca de 17%, de cerca de 7% a cerca de 15%, de cerca de 8% a cerca de 14%, de cerca de 8% a cerca de 13%, de cerca de 8% a cerca de 12%, de cerca de 5% a cerca de 14%, de cerca de 6% a cerca de 13%, de cerca de 7% a cerca de 13% e a cerca de 8%, cerca de 9%, cerca de 10%, cerca de 11%, cerca de 12%, cerca de 13% e cerca de 14%. Uma porcentagem de gás SO2 que pode ser usada no presente método inclui, mas sem limitação, de cerca de 0,01% a cerca de 5%, de cerca de 0,02% a cerca de 4%, de cerca de 0,03% a cerca de 3%, de cerca de 0,04% a cerca de 2%, de cerca de 0,05% a cerca de 1%, e de cerca de 0,01% a cerca de 1%.Additional preservative gases of the method described in the present invention may be included in the chamber treatment, but without limitation, carbon dioxide (CO2) and sulfur dioxide (SO2). While any concentration of preservative gas or chemical providing the antimicrobial effect described in the present invention may be used, a percentage of CO2 gas that may be used in the present method includes, but is not limited to, from about 4% to about 20%. , from about 5% to about 18%, from about 6% to about 17%, from about 7% to about 15%, from about 8% to about 14%, from about 8% about 13%, about 8% to about 12%, about 5% to about 14%, about 6% to about 13%, about 7% to about 13%, and about 8%, about 9%, about 10%, about 11%, about 12%, about 13% and about 14%. A percentage of SO2 gas that may be used in the present method includes, but is not limited to, from about 0.01% to about 5%, from about 0.02% to about 4%, about 0.03%. % to about 3%, from about 0.04% to about 2%, from about 0.05% to about 1%, and from about 0.01% to about 1%.
[0165] Os produtos químicos adicionais que podem ser combinados com o composto de pirimetanila na presente revelação incluem, mas sem limitação, 1-metilciclopropeno (1-MCP), oxaboróis (por exemplo, benzoxaborol), imazalila, fludio-xonila, tiabendazol, dioadjuvante (ou dioadjuvantes) e outros pesticidas comerciais. Os produtos químicos adicionais que podem ser usados no presente método incluem alguns que foram federalmente reconhecidos. Por exemplo, os compostos da Lei de Alimentos, Medicamentos e Cosméticos § § 201 e 409 Geralmente Reconhecidos Como Seguros (GRAS) e os compostos químicos da Lei Federal de Inseticidas, Fungicidas e Rodenticidas (FIFRA) § 25(b), incluindo eugenol, óleos de cravo, tomilho ou hortelã, compostos naturais ou compostos derivados de fontes naturais po- dem também ser usados no presente método.Additional chemicals that may be combined with the pyrimethanil compound in the present disclosure include, but are not limited to, 1-methylcyclopropene (1-MCP), oxaborols (e.g. benzoxaborol), imazalyl, fludio-xonyl, thiabendazole, dioadjuvant (or dioadjuvants) and other commercial pesticides. Additional chemicals that may be used in the present method include some that have been federally recognized. For example, the compounds of the Food, Drug and Cosmetic Law §§ 201 and 409 Generally Recognized as Safe (GRAS) and the chemical compounds of the Federal Insecticides, Fungicides and Rodenticides (FIFRA) § 25 (b), including eugenol, Clove, thyme or mint oils, natural compounds or compounds derived from natural sources may also be used in the present method.
[0166] Deve ser notado que o uso de compostos voláteis adicionais sozinhos ou em combinação com pirimetanila no presente método pode exigir calor adicional ou menos calor para vaporizar os ingredientes ativos. Foi determinado que, geralmente, quanto maior a pressão de vapor e/ou quanto menores as moléculas do ingrediente ativo, menos calor vai ser exigido para vaporizar esse ingrediente ativo. Por exemplo, o fungicida de benzoxaborol sólido tem uma pressão de vapor relativamente alta à temperatura ambiente (isto é, cerca de 4,8 Pa (0,036 Torr) a 25 °C) e é inerentemente volátil, então, o benzoxaborol exigiria a adição de muito menos calor para vaporizar no presente método em comparação à pirimetanila. Por outro lado, pirimetanila tem uma pressão de vapor relativamente baixa à temperatura ambiente (isto é, cerca de 2,2 x 10-3 Pa a 25 °C). A pirimetanila exige a adição de muito mais calor para sublimar ou vaporizar a temperatura ambiente do que o benzoxaborol. Assim, o calor deve ser ajustado de modo correspondente para vaporizar apropriadamente os cotratamentos de ingredientes ativos usados no método da presente revelação, tal como, por exemplo, pirimetanila e 1 -metilciclopropeno ou pirimetanila e benzoxaborol.[0166] It should be noted that the use of additional volatile compounds alone or in combination with pyrimethanil in the present method may require additional heat or less heat to vaporize the active ingredients. It has been determined that, generally, the higher the vapor pressure and / or the smaller the active ingredient molecules, the less heat will be required to vaporize this active ingredient. For example, solid benzoxaborol fungicide has a relatively high vapor pressure at room temperature (ie, about 4.8 Pa (0.036 Torr) at 25 ° C) and is inherently volatile, so benzoxaborol would require the addition of much less heat to vaporize in the present method compared to pyrimethanil. On the other hand, pyrimethanil has a relatively low vapor pressure at room temperature (ie, about 2.2 x 10 -3 Pa at 25 ° C). Pyrimethanil requires the addition of much more heat to sublimate or vaporize at room temperature than benzoxaborol. Thus, the heat should be adjusted accordingly to properly vaporize the active ingredient co-treatments used in the method of the present disclosure, such as, for example, pyrimethanil and 1-methylcyclopropene or pyrimethanil and benzoxaborol.
[0167] Assim, o presente método abrange um composto antimicrobiano ativo que tem uma pressão de vapor à temperatura ambiente que é menor que a pressão de vapor à temperatura ambiente de benzoxaborol. Além disso, a presente revelação inclui o uso de tal composto de baixa pressão de vapor, tal como pirimetanila, sozinho ou em combinação com outros compostos ativos, conforme descrito na presente invenção.Thus, the present method encompasses an active antimicrobial compound which has a room temperature vapor pressure that is less than the room temperature vapor pressure of benzoxaborol. Furthermore, the present disclosure includes the use of such low vapor pressure compound, such as pyrimethanil, alone or in combination with other active compounds as described in the present invention.
[0168] Quaisquer plantas ou partes de planta (por exemplo, flores), células de planta ou tecidos de planta podem ser tratados com o uso do presente método. Uma classe de plantas que pode ser tratada na presente invenção é geralmente tão ampla quanto colheitas hortículas. As colheitas hortículas incluem, mas sem limitação, colheitas vegetais, colheitas de fruta, nozes comestíveis, flores e colheitas ornamentais, colheitas de viveiro, colheitas aromáticas e colheitas medicinais. Mais especificamente, frutas (por exemplo, uvas, maçãs, laranjas, peras, caquis e bananas) e frutos (por exemplo, morangos, amoras, mirtilos e framboesas) são plantas abrangidas pela presente revelação. Deve-se perceber que qualquer espécie de frutos ou frutas pode ser usada na presente invenção (por exemplo, uvas de mesa).Any plants or plant parts (e.g., flowers), plant cells or plant tissues may be treated using the present method. One class of plants that can be treated in the present invention is generally as broad as horticultural crops. Horticultural crops include, but are not limited to, vegetable crops, fruit crops, edible nuts, flowers and ornamental crops, nursery crops, aromatic crops, and medicinal crops. More specifically, fruits (e.g., grapes, apples, oranges, pears, persimmons and bananas) and fruits (e.g. strawberries, blackberries, blueberries and raspberries) are plants covered by the present disclosure. It should be appreciated that any kind of fruit or fruit may be used in the present invention (e.g. table grapes).
MÉTODOS DE USO DE COMPOSTOS DE PIRIMETANILAMETHODS OF USE OF PYRIMETHANIL COMPOUNDS
[0169]A presente revelação é direcionada a métodos para fornecer proteção antimicrobiana a plantas e partes de planta contra patógenos de planta. Mais especificamente, patógenos fúngicos de planta podem ser tratados, prevenidos ou erradicados pelo método descrito na presente invenção. Os patógenos exemplificativos abrangidos pela presente revelação incluem, mas sem limitação, Botrytis cinerea, Mucor piriformis, Fusarium sambucinum, Aspergillus brasiliensis e Peniciliium expan-sum. Os patógenos adicionais abrangidos pela presente invenção incluem, mas sem limitação Acremonium spp., Albugo spp., Alternaria spp., Ascochyta spp., Aspergillus spp., Botryodiplodia spp., Botryospheria spp., Botrytis spp., Byssochlamys spp., Candida spp., Cephalosporium spp., Ceratocystis spp., Cercospora spp., Chalara spp., Cladosporium spp., Colletotrichum spp., Cryptosporiopsis spp., Cylindrocarpon spp., Debaryomyces spp., Diaporthe spp., Didymella spp., Diplodia spp., Dothiorella spp., Elsinoe spp., Fusarium spp., Geotrichum spp., Gloeosporium spp., Glomerella spp., Helminthosporium spp., Khuskia spp., Lasiodiplodia spp., Macrophoma spp., Macrophomina spp., Microdochium spp., Monilinia spp., Monilochaethes spp., Mucor spp., Mycocentrospora spp., Mycosphaerella spp., Nectria spp., Neofabraea spp., Nigrospora spp., Peniciliium spp., Peronophythora spp., Peronospora spp., Pestaloti-opsis spp., Pezicula spp., Phacidiopycnis spp., Phoma spp., Phomopsis spp., Phyl-losticta spp., Phytophthora spp., Polyscytalum spp., Pseudocercospora spp., Pyricu-laria spp., Pythium spp., Rhizoctonia spp., Rhizopus spp., Sclerotium spp., Scleroti- nia spp., Septoria spp., Sphaceloma spp., Sphaeropsis spp., Stemphyllium spp., Stil-bella spp., Thielaviopsis spp., Thyronectria spp., Trachysphaera spp., Uromyces spp., Ustilago spp., Venturia spp., e Verticillium spp., e patógenos bacterianos, tal como Bacillus spp., Campylobacter spp., Clavibacter spp., Clostridium spp., Erwinia spp., Escherichia spp., Lactobacillus spp., Leuconostoc spp., Listeria spp., Pantoea spp., Pectobacterium spp., Pseudomonas spp., Ralstonia spp., Salmonella spp., Shi-gella spp., Staphylococcus spp., Vibrio spp., Xanthomonas spp. e Yersinia spp.[0169] The present disclosure is directed to methods for providing antimicrobial protection to plants and plant parts against plant pathogens. More specifically, plant fungal pathogens may be treated, prevented or eradicated by the method described in the present invention. Exemplary pathogens encompassed by the present disclosure include, but are not limited to, Botrytis cinerea, Mucor piriformis, Fusarium sambucinum, Aspergillus brasiliensis, and Peniciliium expan-sum. Additional pathogens encompassed by the present invention include, but are not limited to, Acremonium spp., Albugo spp., Alternaria spp., Ascochyta spp., Aspergillus spp., Botryodiplodia spp., Botryospheria spp., Botrytis spp., Byssochlamys spp. Cephalosporium spp., Ceratocystis spp., Cercospora spp., Chalara spp., Cladosporium spp., Colletotrichum spp., Cryptosporiopsis spp., Cylindrocarpon spp., Diaporthe spp., Didymella spp. Dothiorella spp., Elsinoe spp., Fusarium spp., Geotrichum spp., Gloeosporium spp., Glomerella spp., Helminthosporium spp., Lasiodiplodia spp., Macrophoma spp., Microphomina spp. , Monilochaethes spp., Mucor spp., Mycocentrospora spp., Mycosphaerella spp., Nectria spp., Neofabraea spp., Peniciliium spp., Peronophythora spp., Peronospora spp., Pestaloti spp. Ops ., Phacidiopycnis spp., Phoma spp., Phomopsis spp., Phyl-losticta spp., Phyt. ophthora spp., Polyscytalum spp., Pseudocercospora spp., Pyricullaria spp., Pythium spp., Rhizoctonia spp., Rhizopus spp., Sclerotinia spp., Septoria spp., Sphaceloma spp. ., Stemphyllium spp., Stil-bella spp., Thielaviopsis spp., Thyronectria spp., Trachysphaera spp., Uromyces spp., Ustilago spp., And Verticillium spp., And bacterial pathogens, such as Bacillus spp. , Campylobacter spp., Clavibacter spp., Clostridium spp., Erwinia spp., Escherichia spp., Lactobacillus spp., Leuconostoc spp., Pisterea spp., Pectobacterium spp., Pseudomonas spp., Ralstonia spp. spp., Shi-gella spp., Staphylococcus spp., Vibrio spp., Xanthomonas spp. and Yersinia spp.
[0170]Tratamentos com pirimetanila podem ser aplicados às plantas ou às partes de planta dentro de um recipiente ou câmara. Tipicamente, as plantas ou as partes de planta são manual ou roboticamente colocadas na câmara, e a câmara é, então, vedada. O tratamento com pirimetanila pode ser, então, aplicado à câmara vedada que compreende as plantas ou as partes de planta por meio da porta (por exemplo, uma porta de septo de divisória) ou por um dispositivo dentro do ambiente ou recipiente.Pyrimethanil treatments may be applied to plants or plant parts within a container or chamber. Typically, the plants or plant parts are manually or robotically placed in the chamber, and the chamber is then sealed. Pyrimethanyl treatment can then be applied to the sealed chamber comprising the plants or plant parts by means of the door (e.g., a partition septum door) or by a device within the room or container.
[0171 ]0 tratamento com pirimetanila é aplicado à câmara vedada por um período de tempo inicial. Por exemplo, as plantas podem ser expostas ao tratamento com pirimetanila no recipiente vedado pelo período de tempo inicial que varia de cerca de 1 hora a cerca de 5 dias (120 horas), de cerca de 1 dia a cerca de 4 dias, de cerca de 2 dias a cerca de 3,5 dias, de cerca de 2 dias a cerca de 3,5 dias e por cerca de 3 dias. A temperatura da câmara pode variar de cerca de -2 °C a cerca de 25 °C e, frequentemente, de cerca de 0 °C a cerca de 23 °C.Pyrimethanil treatment is applied to the sealed chamber for an initial period of time. For example, plants may be exposed to pyrimethanil treatment in the sealed container for the initial period of time ranging from about 1 hour to about 5 days (120 hours), from about 1 day to about 4 days, from about from 2 days to about 3.5 days, from about 2 days to about 3.5 days and for about 3 days. The chamber temperature may range from about -2 ° C to about 25 ° C and often from about 0 ° C to about 23 ° C.
[0172]Após o período de tempo inicial em que o tratamento é exposto às plantas ou partes de planta na câmara vedada, a câmara pode ser deixada vedada ou não vedada. As plantas ou as partes de planta podem, então, permanecer na câmara de ambiente contido ou armazenadas em outra instalação de armazenamento de atmosfera controlada ou atmosfera regular até estar pronta para envio, venda ou consumo. A temperatura da câmara ou instalação de armazenamento tipicamente varia a partir de cerca de -2 °C a cerca de 25 °C e frequentemente de cerca de 0 °C a cerca de 23 °C.After the initial time period in which the treatment is exposed to plants or plant parts in the sealed chamber, the chamber may be left sealed or unsealed. Plants or plant parts may then remain in the contained room chamber or stored in another controlled atmosphere or regular atmosphere storage facility until ready for shipping, sale or consumption. The temperature of the chamber or storage facility typically ranges from about -2 ° C to about 25 ° C and often from about 0 ° C to about 23 ° C.
[0173] Após a expiração do período de tempo secundário, a inibição de pató-genos de planta pode ser avaliada. Por exemplo, amostras in vitro podem ter ao crescimento do patógeno em ágar ou em meio testado, avaliado e comparado a uma amostra de controle, em que nenhum tratamento com pirimetanila foi administrado ou diferentes condições de tratamento foram aplicadas. Similarmente, amostras in vivo podem ter a gravidade e a incidência de doença fúngica, bacteriana ou patogênica testada, avaliada e comparada a uma amostra de controle em que nenhum tratamento com pirimetanila foi administrado ou diferentes condições de tratamento foram aplicadas.Following expiration of the secondary time period, inhibition of plant pathogens may be evaluated. For example, in vitro samples may have pathogen growth on agar or in tested medium evaluated and compared to a control sample where no pyrimethanil treatment was administered or different treatment conditions were applied. Similarly, in vivo samples may have the severity and incidence of fungal, bacterial or pathogenic disease tested, evaluated and compared to a control sample where no pyrimethanil treatment was administered or different treatment conditions were applied.
EXEMPLOSEXAMPLES
[0174] As modalidades ilustrativas dos métodos da presente revelação são fornecidas no presente documento a título de exemplos. Embora os conceitos e a tecnologia da presente revelação sejam suscetíveis à ampla aplicação, várias modificações e formas alternativas, modalidades específicas serão descritas aqui em detalhes. Deve-se entender, no entanto, que não há intenção de limitar os conceitos da presente revelação às formas particulares reveladas, mas, pelo contrário, a intenção é abranger todas as modificações, equivalentes e alternativas consistem com a presente revelação e as reivindicações anexas. Os seguintes experimentos foram usados para determinar o efeito de diferentes concentrações de composto de pirimetanila vaporizada a plantas ou partes de planta ou a fim de fornecer proteção antimicro-biana às plantas ou partes de planta contra patógenos de planta. EXEMPLO 1: TRATAMENTO COM PIRIMETANILA VAPORIZADA EM PATÓGENOS (IN VITRO) [0175] Um ensaio in vitro foi usado para avaliar a capacidade de pirimetanila de vaporizar a fim de controlar a infecção de vários micro-organismos patogênicos quando aplicado às plantas e partes de planta. Para experimentos in vitro, uma placa de microtitulação de 12 cavidades, 6 cavidades ou uma placa de Petri de 10 cm, cada uma contendo volumes de 7,5 ml, 16,5 ou 22 ml, respectivamente, de Ágar de Dextrose de Batata (PDA) com metade de resistência foi preparada. Cada cavidade ou placa foi inoculada com 1 microlitro (μΙ) de 1 x 105 esporos/ml da suspensão de esporo patogênico adequado (por exemplo, Botrytis cinerea, Penicillium expansum, Glomerella cingulata, Penicillium digitatum, Aspergillus flavus, Colletotrichum acuta-tum, Fusarium sambucinum e Geotrichum candidum) formando-se uma mancha de patógeno no centro da cavidade ou placa de ágar. A placa inoculada de microtitulação ou Petri foi, então, vedada com um filme respirável. Um conjunto de placas de triplicada para cada patógeno foi colocado dentro do fundo de uma câmara de des-secador de 36 I hermética ao ar e fechado com grampos de segurança.Illustrative embodiments of the methods of the present disclosure are provided herein by way of examples. Although the concepts and technology of the present disclosure are susceptible to wide application, various modifications and alternative forms, specific embodiments will be described in detail herein. It is to be understood, however, that it is not intended to limit the concepts of the present disclosure to the particular disclosed forms, but, on the contrary, is intended to encompass all modifications, equivalents and alternatives consisting of the present disclosure and the appended claims. The following experiments were used to determine the effect of different concentrations of vaporized pyrimethanil compound on plants or plant parts or to provide antimicrobial protection to plants or plant parts against plant pathogens. EXAMPLE 1: PATHOGEN VAPORIZED PYRIMETHANIL TREATMENT (IN VITRO) [0175] An in vitro assay was used to assess the ability of pyrimethanil to vaporize to control the infection of various pathogenic microorganisms when applied to plants and plant parts. . For in vitro experiments, a 12-well, 6-well microtiter plate or a 10 cm Petri dish each containing volumes of 7.5 ml, 16.5 or 22 ml, respectively, of Potato Dextrose Agar ( PDA) with half resistance was prepared. Each well or plate was inoculated with 1 microliter (μΙ) of 1 x 105 spores / ml of the appropriate pathogenic spore suspension (eg Botrytis cinerea, Penicillium expansum, Glomerella cingulata, Aspergillus flavus, Colletotrichum acuta-tum, Fusarium sambucinum and Geotrichum candidum) forming a pathogen spot in the center of the cavity or agar plate. The inoculated microtiter plate or petri dish was then sealed with a breathable film. A set of triplicate plates for each pathogen was placed into the bottom of an air-tight 361 desiccator chamber and closed with safety clamps.
[0176] Uma quantidade adequada de pirimetanila para atingir uma concentração de espaço livre final de 1 mg/l, 0,3 mg/l e 0,1 mg/l foi dissolvida em acetona e 100 μΙ da solução foram pipetados em um tubo de vidro pequeno. O tubo foi, então, colocado dentro de um dispositivo de vaporização pré-aquecido (tubo de cobre aquecido termostaticamente de 1,27 cm (0,5") OD por 15,24 cm (6") de comprimento montado em um ventilador de baixo fluxo de 0,5 l/min) ajustado a 60 °C por 1 minuto para permitir que a acetona evapore. A evaporação da acetona deixou para trás cristais sólidos de pirimetanila.An adequate amount of pyrimethanil to achieve a final free space concentration of 1 mg / l, 0.3 mg / l and 0.1 mg / l was dissolved in acetone and 100 μΙ of the solution was pipetted into a glass tube. little. The tube was then placed inside a preheated vaporization device (1.27 cm (0.5 ") OD thermostatically heated copper tube by 15.24 cm (6") long mounted on a low flow rate (0.5 l / min) adjusted to 60 ° C for 1 minute to allow acetone to evaporate. Evaporation of acetone left solid crystals of pyrimethanil behind.
[0177] Pirimetanila foi, então, introduzido nas cabines da câmara contendo as placas de ágar com o uso do dispositivo de vaporização definido a 180 °C. O tubo do dispositivo foi fixado a uma porta na lateral da câmara que permitiu o fluxo de ar do vapor de pirimetanila para a câmara. A câmara estava à temperatura ambiente durante a administração da pirimetanila. As câmaras foram, então, incubadas por três (3) dias a 23 °C. Após a incubação, a inibição de crescimento pós-tratamento de cada patógeno in vitro foi medida nas placas inoculadas e comparada às amostras de controle.Pyrimethanil was then introduced into the cabins of the chamber containing the agar plates using the set spray device at 180 ° C. The device tube was fixed to a port on the side of the chamber which allowed the air flow of pyrimethanil vapor to the chamber. The chamber was at room temperature during administration of pyrimethanil. The chambers were then incubated for three (3) days at 23 ° C. After incubation, post-treatment growth inhibition of each pathogen in vitro was measured on inoculated plates and compared to control samples.
[0178]O resultado desse experimento in vitro é sumarizado na Tabela 1. Os resultados demonstram que o presente método que compreende pirimetanila vapori-zada fornece boa inibição in vitro de crescimento antimicrobiano de múltiplos pató-genos inoculados nas placas de ágar. Em particular, todas as três concentrações de pirimetanila (isto é, 1 mg/l, 0,3 mg/l e 0,1 mg/l) tiveram a capacidade de inibir completamente o crescimento de A. flavus e P. digitatum. Ambas as concentrações de 1 mg/l e 0,3 mg/l de pirimetanila tiveram também a capacidade de inibir totalmente o crescimento de P. expansum, enquanto a concentração de 0,1 mg/l de pirimetanila inibiu 92,4% de crescimento de P expansum. As concentrações de pirimetanila de 1 mg/l, 0,3 mg/l e 0,1 mg/l tiveram também a capacidade de inibir o crescimento de B. cinerea em 95,2%, 92,1% e 91,9%, respectivamente. Similarmente, concentrações de pirimetanila de 1 mg/l, 0,3 mg/l e 0,1 mg/l tiveram também a capacidade de inibir o crescimento de C. acutatum em 89,7%, 90,0% e 100%, respectivamente. No entanto, todas as concentrações de pirimetanila foram eficazes em controlar G candi-dum e G cingulata, ambos os quais foram inibidos em 75,2% e 77,3%, respectivamente, na concentração máxima de 1 mg/l. Por fim, a Tabela 1 demonstra que o presente método que usa pirimetanila vaporizada pode ser usado para inibir o crescimento de patógenos de planta inoculados em placas de ágar. EXEMPLO 2: TRATAMENTO COM PIRIMETANILA VAPORIZADA EM P. DIGITATUM (IN VIVO) [0179] Um ensaio in vivo foi usado para avaliar a capacidade de pirimetanila vaporizada de controlar a infecção patogênica de laranjas por Penicillium digitatum. Duas laranjas (por repetição, em triplicata) foram colocadas em um contentor bipartido, e três incisões recentes foram feitas próximas à região equatorial de cada fruta. Cada incisão foi, então, inoculada com 30 μΙ de 1 x 106 esporos/ml de suspensão de P digitatum. Os contentores bipartidos foram, então, colocados no fundo de uma câmara de dessecador acrílico de 36 I em triplicata.[0178] The result of this in vitro experiment is summarized in Table 1. The results demonstrate that the present method comprising vaporized pyrimethanil provides good in vitro inhibition of antimicrobial growth of multiple pathogens inoculated on agar plates. In particular, all three concentrations of pyrimethanil (ie 1 mg / l, 0.3 mg / l and 0.1 mg / l) were able to completely inhibit the growth of A. flavus and P. digitatum. Both concentrations of 1 mg / l and 0.3 mg / l pyrimethanil also had the ability to totally inhibit growth of P. expansum, while the concentration of 0.1 mg / l pyrimethanil inhibited 92.4% growth of P. P expansum. Pyrimethanil concentrations of 1 mg / l, 0.3 mg / l and 0.1 mg / l also had the ability to inhibit B. cinerea growth by 95.2%, 92.1% and 91.9%, respectively. Similarly, pyrimethanil concentrations of 1 mg / l, 0.3 mg / l and 0.1 mg / l also had the ability to inhibit C. acutatum growth by 89.7%, 90.0% and 100%, respectively. . However, all pyrimethanil concentrations were effective in controlling G candi-dum and G cingulata, both of which were inhibited by 75.2% and 77.3%, respectively, at the maximum concentration of 1 mg / l. Finally, Table 1 demonstrates that the present method using vaporized pyrimethanil can be used to inhibit growth of plant pathogens inoculated on agar plates. EXAMPLE 2: TREATMENT WITH P. DIGITATUM VAPORIZED PYRIMETHANIL (IN VIVO) [0179] An in vivo assay was used to evaluate the ability of vaporized pyrimethanil to control the pathogenic infection of oranges by Penicillium digitatum. Two oranges (per repeat in triplicate) were placed in a two-part container, and three recent incisions were made near the equatorial region of each fruit. Each incision was then inoculated with 30 μΙ of 1 x 106 spores / ml P digitatum suspension. The split containers were then placed at the bottom of a triplicate 36 I acrylic desiccator chamber.
[0180] Uma quantidade adequada de pirimetanila para atingir uma concentração de tratamento final de 1 mg/l, 0,2 mg/l ou 0,04 mg/l foi dissolvida em acetona e 100 μΙ da solução foram pipetados em um tubo de vidro pequeno. Esse tubo foi, então, colocado dentro de um dispositivo de vaporização pré-aquecido (tubo de cobre aquecido termostaticamente de 1,27 cm (0,5") OD por 15,24 cm (6") de comprimento montado em um ventilador de baixo fluxo de 0,5 l/min) ajustado a 60 °C por 1 minuto para permitir que a acetona evapore, deixando para trás os cristais sólidos de pirimetanila.An adequate amount of pyrimethanil to reach a final treatment concentration of 1 mg / l, 0.2 mg / l or 0.04 mg / l was dissolved in acetone and 100 μΙ of the solution was pipetted into a glass tube. little. This tube was then placed inside a preheated vaporization device (1.27 cm (0.5 ") OD thermostatically heated copper tube) by a 15.24 cm (6") length mounted on a low flow rate (0.5 l / min) adjusted to 60 ° C for 1 minute to allow acetone to evaporate leaving behind solid pyrimethanil crystals.
[0181 ]A pirimetanila foi, então, introduzida no espaço livre contido através da porta de divisória com o uso do dispositivo de vaporização conforme descrito no Exemplo 1 ajustado a 180 °C. As câmaras foram, então, incubadas a 21 °C por três (3) dias. Após a incubação, as frutas foram avaliadas diariamente por mais 2 dias a 21 °C. As frutas foram avaliadas a fim de observar o crescimento de lesões embebidas em água e diâmetro de esporulação fúngica (ambos medidos em milímetros, mm).Pyrimethanil was then introduced into the free space contained through the partition door using the vaporization device as described in Example 1 adjusted to 180 ° C. The chambers were then incubated at 21 ° C for three (3) days. After incubation, the fruits were evaluated daily for a further 2 days at 21 ° C. Fruits were evaluated for growth of water-soaked lesions and fungal sporulation diameter (both measured in millimeters, mm).
[0182] O resultado desse experimento in vivo é sumarizado na Tabela 2 e na Figura 1. Os resultados demonstram que o presente método que compreende pirimetanila vaporizada fornece boa inibição in vivo de crescimento antimicrobiano de P. digitatum inoculado em laranjas. Mais especificamente, esses dados indicam que a pirimetanila vaporizada fornece inibição de crescimento de lesões embebidas em água de P. digitatum e esporulação fúngica em laranjas.The result of this in vivo experiment is summarized in Table 2 and Figure 1. The results demonstrate that the present method comprising vaporized pyrimethanil provides good in vivo inhibition of P. digitatum antimicrobial growth inoculated in oranges. More specifically, these data indicate that vaporized pyrimethanil provides growth inhibition of P. digitatum water-soaked lesions and fungal sporulation in oranges.
[0183] Em particular, no Dia 2, as laranjas de controle mostraram lesões embebidas em água e esporulação fúngica atingindo 38,2 mm e 22,4 mm, respectivamente. Entretanto, todas as três concentrações de pirimetanila (isto é, 1 mg/l, 0,2 mg/l e 0,04 mg/l) tiveram capacidade de inibir completamente o crescimento lesões embebidas em água em laranjas no Dia 2, exceto por 1,5 mm de lesões observadas em laranjas tratadas com o tratamento com 0,2 mg/l de pirimetanila (consultar a Tabela 2). Similarmente, concentrações de 1 mg/l, 0,2 mg/l e 0,04 mg/l de pirimetanila vaporizada tiveram a capacidade de inibir a esporulação fúngica em laranjas inocu-ladas que têm apenas 2,1 mm, 2,4 mm e 2,1 mm de esporulação fúngica observada no Dia 2, respectivamente. Os resultados de esporulação mostrados na Tabela 2 e na Figura 1 também indicam uma resposta dependente de dose à pirimetanila vaporizada. Por fim, esses dados demonstram que o presente método que usa pirimetani- Ia vaporizada pode ser usado para inibir o crescimento de patógenos de planta, tal como P. digitatum, inoculados em frutas, tal como laranjas.In particular, on Day 2, control oranges showed water-soaked lesions and fungal sporulation reaching 38.2 mm and 22.4 mm, respectively. However, all three concentrations of pyrimethanil (ie 1 mg / l, 0.2 mg / l and 0.04 mg / l) were able to completely inhibit water-soaked lesions in oranges on Day 2, except for 1 Mm of lesions observed in oranges treated with 0.2 mg / l pyrimethanil treatment (see Table 2). Similarly, concentrations of 1 mg / l, 0.2 mg / l and 0.04 mg / l of vaporized pyrimethanil were able to inhibit fungal sporulation in inoculated oranges that are only 2.1 mm, 2.4 mm and 2.1 mm fungal sporulation observed on Day 2, respectively. The sporulation results shown in Table 2 and Figure 1 also indicate a dose dependent response to vaporized pyrimethanil. Finally, these data demonstrate that the present method using vaporized pyrimethany can be used to inhibit the growth of plant pathogens such as P. digitatum inoculated into fruits such as oranges.
TABELA 2. ENSAIO IN VIVO DE PIRIMETANILA VAPORIZADA PARA INIBIR PENICILLIUM DIGITATUM EM LARANJAS EXEMPLO 3: TRATAMENTO COM PIRIMETANILA VAPORIZADA EM P. EXPANSUM (IN VIVO) [0184] Um ensaio in vivo foi usado para avaliar a capacidade de pirimetanila vaporizada de controlar uma infecção patogênica de maçãs por Penicillium expan-sum. Duas maçãs (por repetição, em triplicata) foram colocadas em um contentor bipartido, e três incisões recentes foram feitas próximas à região equatorial de cada fruta. Cada incisão foi, então, inoculada com 30 μΙ de 1 x 106 esporos/ml de suspensão de P. expansum. Os contentores bipartidos foram, então, colocados no fundo de uma câmara de dessecador acrílico de 36 I em triplicata.TABLE 2. VAPORIZED PYRIMETHANIL IN VIVO ASSAY TO INHIBIT PENICILLIUM DIGITATUM IN ORANGES EXAMPLE 3: P. VAPORIZED PYRIMETHANIL TREATMENT (IN VIVO) [0184] An in vivo assay was used to assess the ability to control pyrimethanyl infection. pathogen of apples by Penicillium expan-sum. Two apples (per repetition in triplicate) were placed in a split container, and three recent incisions were made near the equatorial region of each fruit. Each incision was then inoculated with 30 μΙ of 1 x 106 spores / ml of P. expansum suspension. The split containers were then placed at the bottom of a triplicate 36 I acrylic desiccator chamber.
[0185] Uma quantidade adequada de pirimetanila para atingir uma concentração de tratamento final de 1 mg/l, 0,2 mg/l ou 0,04 mg/l foi dissolvida em acetona e 100 μΙ da solução foram pipetados em um tubo de vidro pequeno. Esse tubo foi, então, colocado dentro de um dispositivo de vaporização pré-aquecido (tubo de cobre aquecido termostaticamente de 1,27 cm (0,5") OD por 15,24 cm (6") de compri- mento montado em um ventilador de baixo fluxo de 0,5 l/min) ajustado a 60 °C por 1 minuto para permitir que a acetona evapore, deixando para trás os cristais sólidos de pirimetanila.An adequate amount of pyrimethanil to reach a final treatment concentration of 1 mg / l, 0.2 mg / l or 0.04 mg / l was dissolved in acetone and 100 μΙ of the solution was pipetted into a glass tube. little. This tube was then placed inside a preheated vaporization device (1.27 cm (0.5 ") OD thermostatically heated copper tube by 6") mounted on a 0.5 l / min low flow fan) set at 60 ° C for 1 minute to allow acetone to evaporate leaving the solid pyrimethanil crystals behind.
[0186] A pirimetanila foi, então, introduzida nas cabines da câmara através da porta de divisória com o uso do dispositivo de vaporização, conforme descrito no Exemplo 1 ajustado a 180 °C. As câmaras foram, então, incubadas a 21 °C por três (3) dias. Após a incubação, as frutas foram avaliadas diariamente por mais 3 dias a 21 °C. As frutas foram avaliadas a fim de observar a incidência de doença (isto é, escurecimento) e a esporulação fúngica (ambos medidos em milímetros, mm).Pyrimethanil was then introduced into the chamber cabins through the partition door using the vaporization device as described in Example 1 adjusted to 180 ° C. The chambers were then incubated at 21 ° C for three (3) days. After incubation, the fruits were evaluated daily for a further 3 days at 21 ° C. Fruits were evaluated for disease incidence (ie, darkening) and fungal sporulation (both measured in millimeters, mm).
[0187] O resultado desse experimento in vivo é sumarizado na Tabela 3 e na Figura 2. Os resultados demonstram que o presente método que compreende pirimetanila vaporizada fornece boa inibição in vivo de crescimento antimicrobiano de P expansum inoculado em maçãs. Mais especificamente, esses dados indicam que a pirimetanila vaporizada fornece inibição de crescimento de P. expansum que causa escurecimento e esporulação fúngica em maçãs.[0187] The result of this in vivo experiment is summarized in Table 3 and Figure 2. The results demonstrate that the present method comprising vaporized pyrimethanil provides good in vivo inhibition of antimicrobial growth of inoculated P expansum in apples. More specifically, these data indicate that vaporized pyrimethanil provides growth inhibition of P. expansum that causes browning and fungal sporulation in apples.
[0188] Em particular, as maças de controle do Dia 3 mostraram escurecimento e esporulação fúngica atingindo 32,4 mm e 3,7 mm, respectivamente. No entanto, concentrações de 1 mg/l, 0.2 mg/l e 0,04 mg/l de pirimetanila tiveram a capacidade de inibir o escurecimento em maçãs no Dia 3 a 11,4 mm, 16,2 mm e 28,8 mm, respectivamente (consultar a Tabela 2). Similarmente, concentrações de 1 mg/l, 0,2 mg/l e 0,04 mg/l de pirimetanila vaporizada tiveram a capacidade de inibir a esporulação fúngica em maçãs inoculadas que têm apenas 1,6 mm, 2,6 mm e 3,1 mm de esporulação fúngica observada no Dia 3. Os resultados de esporulação mostrados na Tabela 3 e na Figura 2 também indicam uma resposta dependente de dose da pirimetanila vaporizada. Por fim, esses dados demonstram que o presente método que usa pirimetanila vaporizada pode ser usado para inibir o crescimento de patógenos de planta, tal como P. expansum, inoculados em frutas, tais como maçãs. EXEMPLO 4: TRATAMENTO COM PIRIMETANILA VAPORIZADA EM B. CINEREA (IN VIVO) [0189] Um ensaio in vivo foi usado para avaliar a capacidade de pirimetanila vaporizada de controlar uma infecção patogênica de morangos por Botrytis cinerea. B. cinerea é um patógeno fúngico conhecido por causar infecção por mofo cinzento de frutas, tal como uvas e morangos.In particular, Day 3 control apples showed fungal browning and sporulation reaching 32.4 mm and 3.7 mm, respectively. However, concentrations of 1 mg / l, 0.2 mg / l and 0.04 mg / l pyrimethanil had the ability to inhibit browning in apples on Day 3 at 11.4 mm, 16.2 mm and 28.8 mm, respectively (see Table 2). Similarly, concentrations of 1 mg / l, 0.2 mg / l and 0.04 mg / l of vaporized pyrimethanil had the ability to inhibit fungal sporulation in inoculated apples that are only 1.6 mm, 2.6 mm and 3 µm. 1 mm fungal sporulation observed on Day 3. The sporulation results shown in Table 3 and Figure 2 also indicate a dose-dependent response of vaporized pyrimethanil. Finally, these data demonstrate that the present method using vaporized pyrimethanil can be used to inhibit the growth of plant pathogens such as P. expansum inoculated into fruits such as apples. EXAMPLE 4: TREATMENT WITH VAPORIZED PYRIMETHANIL IN B. CINEREA (IN VIVO) [0189] An in vivo assay was used to assess the ability of vaporized pyrimethanil to control a pathogenic infection of strawberries by Botrytis cinerea. B. cinerea is a fungal pathogen known to cause fruit gray mold infection such as grapes and strawberries.
[0190] Oito morangos (por repetição, em triplicata) foram colocados em um contentor bipartido de padrão industrial com o caule voltado para baixo. Uma incisão recente na ponta voltada para cima da fruta foi, então, inoculada com 20 μΙ de 1 x 105 esporos/ml de suspensão de B. cinerea. Os contentores bipartidos foram, então, colocados no fundo de uma câmara de dessecador acrílico de 36 I em triplicata.Eight strawberries (per repeat in triplicate) were placed in an industry standard two-part container with the stem facing down. A recent incision in the upturned end of the fruit was then inoculated with 20 μΙ of 1 x 105 spores / ml of B. cinerea suspension. The split containers were then placed at the bottom of a triplicate 36 I acrylic desiccator chamber.
[0191] Uma quantidade adequada de pirimetanila para atingir uma concentração de espaço livre final de 1 mg/l, 0,3 mg/l, 0,1 mg/l ou 0,03 mg/l foi dissolvida em acetona e 100 μΙ da solução foram pipetados em um tubo de vidro pequeno. Esse tubo foi, então, colocado dentro de um dispositivo de vaporização preaquecido (tubo de cobre aquecido termostaticamente de 1,27 cm (0,5") OD por 15,24 cm (6") de comprimento montado em um ventilador de baixo fluxo de 0,5 l/min) ajustado a 60 °C por 1 minuto para permitir que a acetona evapore, deixando para trás os cristais sólidos de pirimetanila.A suitable amount of pyrimethanil to achieve a final free space concentration of 1 mg / l, 0.3 mg / l, 0.1 mg / l or 0.03 mg / l was dissolved in acetone and 100 μΙ of the solution were pipetted into a small glass tube. This tube was then placed inside a preheated spray device (1.27 cm (0.5 ") OD by 15.24 cm (6") long thermostatically heated copper tube mounted on a low flow fan 0.5 l / min) adjusted to 60 ° C for 1 minute to allow acetone to evaporate leaving behind solid pyrimethanil crystals.
[0192] A pirimetanila foi, então, introduzida nas cabines da câmara através da porta de divisória com o uso do dispositivo de vaporização, conforme descrito no Exemplo 1 ajustado a 180 °C. As câmaras foram, então, incubadas a 21 °C por três (3) dias. Após a incubação, as frutas foram avaliadas diariamente por mais 3 dias a 21 °C. As frutas foram avaliadas a fim de observar a porcentagem de incidência de doença (%) e a gravidade da doença. A gravidade da doença foi classificada em uma escala que varia de 0 a 4, em que “0” indicou nenhuma gravidade de doença, Ί” indicou gravidade de doença mínima, “2” indicou gravidade de doença média, “3” indicou gravidade de doença alta e “4” indicou gravidade de doença excepcionalmente alta.Pyrimethanil was then introduced into the chamber cabins through the partition door using the vaporization device as described in Example 1 adjusted to 180 ° C. The chambers were then incubated at 21 ° C for three (3) days. After incubation, the fruits were evaluated daily for a further 3 days at 21 ° C. The fruits were evaluated in order to observe the disease incidence percentage (%) and disease severity. Disease severity was rated on a scale ranging from 0 to 4, where “0” indicated no disease severity, Ί ”indicated minimal disease severity,“ 2 ”indicated average disease severity,“ 3 ”indicated severity of high disease and “4” indicated exceptionally high disease severity.
[0193] O resultado desse experimento in vivo é sumarizado na Tabela 4 e na Figura 3. Os resultados demonstram que o presente método que compreende pirimetanila vaporizada fornece inibição in vivo de crescimento antimicrobiano de B. cinerea inoculado em morangos. Mais especificamente, esses dados indicam que a pirimetanila vaporizada inibe B. cinerea que causa a incidência e gravidade de doença de mofo cinzento em morangos.[0193] The result of this in vivo experiment is summarized in Table 4 and Figure 3. The results demonstrate that the present method comprising vaporized pyrimethanil provides in vivo inhibition of B. cinerea inoculated antimicrobial growth in strawberries. More specifically, these data indicate that vaporized pyrimethanil inhibits B. cinerea which causes the incidence and severity of gray mold disease in strawberries.
[0194] Em particular, os morangos de controle do Dia 3 mostraram incidência e gravidade de doença de 100% e 2,7, respectivamente. Entretanto, concentrações de 1 mg/l e 0,3 mg/l de pirimetanila tiveram a capacidade de inibir a incidência de mofo cinzento em morangos no Dia 3 a 91,7% e 95,8%, respectivamente (consultar a Tabela 4). Similarmente, concentrações de 1 mg/l, 0,3 mg/l, 0,1 mg/l e 0,03 mg/l de pirimetanila vaporizada tiveram a capacidade de inibir a gravidade de mofo cinzento no Dia 3 em morangos inoculados a 1,0,1,1,1,7 e 2,1, respectivamente. A incidência e a gravidade de mofo cinzento mostradas na Tabela 4 e na Figura 3 também indicam uma resposta dependente de dose à pirimetanila vaporizada. Por fim, esses dados demonstram que o presente método que usa pirimetanila vaporizada pode ser usado para inibir o crescimento de patógenos de planta, tal como B. cinerea, inocu-lados em frutas, tal como morangos.In particular, Day 3 control strawberries showed disease incidence and severity of 100% and 2.7, respectively. However, concentrations of 1 mg / l and 0.3 mg / l pyrimethanil had the ability to inhibit the incidence of gray mold in strawberries on Day 3 at 91.7% and 95.8%, respectively (see Table 4). Similarly, concentrations of 1 mg / l, 0.3 mg / l, 0.1 mg / l and 0.03 mg / l of vaporized pyrimethanil were able to inhibit the severity of gray mold on Day 3 in strawberries inoculated at 1, 0,1,1,1,7 and 2,1 respectively. The incidence and severity of gray mold shown in Table 4 and Figure 3 also indicate a dose dependent response to vaporized pyrimethanil. Finally, these data demonstrate that the present method using vaporized pyrimethanil can be used to inhibit the growth of plant pathogens such as B. cinerea inoculated into fruits such as strawberries.
TABELA 4. ENSAIO IN VIVO DE PIRIMETANILA VAPORIZADA PARA INIBIR BOTRYTIS CINEREA EM MORANGOSTABLE 4. IN VIVO TEST OF VAPORIZED PYRIMETHANIL TO INHIBIT BOTRYTIS CINEREA IN STRAWBERRIES
Incidência de Mofo Cinzento (%) Gravidade de Mofo Cinzento (0 a 4) EXEMPLO 5: TRATAMENTO COM PRIMETANIL VAPORIZADO EM B. CINEREA {IN VIVO) [0195] Um ensaio in vivo foi usado para avaliar a capacidade de pirimetanila vaporizada de controlar uma infecção patogênica de uvas de mesa por Botrytis cinerea. Quinze (15) uvas de mesa (por repetição, em triplicata) foram colocadas em um contentor bipartido de 0,57 I (1 quartilho) de padrão industrial com a extremidade de caule voltada para cima. Uma incisão recente foi colocada na uva com um alfinete, e a incisão foi, então, inoculada com 20 μΙ de 1 x 105 esporos/ml de suspensão de B. cinerea. Os contentores bipartidos foram, então, colocados no fundo de uma câmara de dessecador acrílico de 36 I em triplicata.Gray Mold Incidence (%) Gray Mold Severity (0 to 4) EXAMPLE 5: B. CINEREA VAPORIZED PRIMETANIL TREATMENT {IN VIVO] [0195] An in vivo assay was used to assess the ability of vaporized pyrimethanil to control a pathogenic infection of table grapes by Botrytis cinerea. Fifteen (15) table grapes (per repeat in triplicate) were placed in an industry standard 0.57 I (1 pint) split container with the stem end facing up. A recent incision was pinned into the grape, and the incision was then inoculated with 20 μ of 1 x 105 spores / ml of B. cinerea suspension. The split containers were then placed at the bottom of a triplicate 36 I acrylic desiccator chamber.
[0196] Uma quantidade adequada de pirimetanila para atingir uma concentração de espaço livre final de 0,3 mg/l, 0,1 mg/l, 0,03 mg/l ou 0,01 mg/l foi dissolvida em acetona e 100 μΙ da solução foram pipetados em um tubo de vidro pequeno. Es- se tubo foi, então, colocado dentro de um dispositivo de vaporização preaquecido (tubo de cobre aquecido termostaticamente de 1,27 cm (0,5”) OD por 15,24 cm (6") de comprimento montado em um ventilador de baixo fluxo de 0,5 l/min) ajustado a 60 °C por 1 minuto para permitir que a acetona evapore, deixando para trás os cristais sólidos de pirimetanila.A suitable amount of pyrimethanil to achieve a final free space concentration of 0.3 mg / l, 0.1 mg / l, 0.03 mg / l or 0.01 mg / l was dissolved in acetone and 100 µl. μΙ of the solution were pipetted into a small glass tube. This tube was then placed into a preheated spray device (1.27 cm (0.5 ”) OD thermostatically heated copper tube by 6”) mounted on a 10 ”fan. low flow rate (0.5 l / min) adjusted to 60 ° C for 1 minute to allow acetone to evaporate leaving behind solid pyrimethanil crystals.
[0197] A pirimetanila foi, então, introduzida nas cabines da câmara através da porta de divisória com o uso do dispositivo de vaporização, conforme descrito no Exemplo 1, ajustado a 180 °C. As câmaras foram, então, incubadas a 21 °C por três (3) dias. Após a incubação, as frutas foram avaliadas diariamente por mais 3 dias a 21 °C. As frutas foram avaliadas a fim de observar a porcentagem de incidência de doença (%) e gravidade de doença. A gravidade da doença foi classificada em uma escala que varia de 0 a 4, em que “0” indicou nenhuma gravidade de doença, “1” indicou gravidade de doença mínima, “2” indicou gravidade de doença média, “3” indicou gravidade de doença alta e “4” indicou gravidade de doença excepcionalmente alta.Pyrimethanil was then introduced into the chamber booths through the partition door using the vaporization device as described in Example 1, adjusted to 180 ° C. The chambers were then incubated at 21 ° C for three (3) days. After incubation, the fruits were evaluated daily for a further 3 days at 21 ° C. The fruits were evaluated in order to observe the percentage of disease incidence (%) and disease severity. Disease severity was rated on a scale ranging from 0 to 4, where “0” indicated no disease severity, “1” indicated minimum disease severity, “2” indicated average disease severity, “3” indicated severity of high disease and “4” indicated exceptionally high disease severity.
[0198] 0 resultado desse experimento in vivo é sumarizado na Tabela 5 e na Figura 4. Os resultados demonstram que o presente método que compreende pirimetanila vaporizada fornece inibição in vivo de crescimento antimicrobiano de B. cinerea inoculado em uvas. Mais especificamente, esses dados indicam que a pirimetanila vaporizada inibe B. cinerea que causa incidência e gravidade de doença de mofo cinzento em uvas.[0198] The result of this in vivo experiment is summarized in Table 5 and Figure 4. The results demonstrate that the present method comprising vaporized pyrimethanil provides in vivo inhibition of antimicrobial growth of B. cinerea inoculated into grapes. More specifically, these data indicate that vaporized pyrimethanil inhibits B. cinerea which causes incidence and severity of gray mold disease in grapes.
[0199] Em particular, as uvas de controle do Dia 3 mostraram incidência e gravidade de doença de 100% e 3,9, respectivamente. Uma concentração de 0,3 mg/l de pirimetanila teve a capacidade de inibir toda menos 16,7% de incidência de mofo cinzento em uvas no dia 0 (consultar a Tabela 5). Adicionalmente, concentrações de 0,3 mg/l, 0,1 mg/l, 0,03 mg/l ou 0,01 mg/l de pirimetanila vaporizada tiveram a capacidade de inibir a gravidade de mofo cinzento no Dia 3 em uvas inoculadas a 1,3, 1,8, 3,4 e 3,6, respectivamente. A incidência e a gravidade de mofo cinzento mostradas na Tabela 5 e na Figura 4 também indicam uma resposta dependente de dose à pirimetanila vaporizada. Por fim, esses dados demonstram que o presente método que usa pirimetanila vaporizada pode ser usado para inibir o crescimento de patógenos de planta, tal como B. cinerea, inoculados em frutas, tal como uvas._ EXEMPLO 6: TRATAMENTO COM PIRIMETANILA VAPORIZADA EM B. CINEREA (IN VIVO) [0200]Um ensaio in vivo foi usado para avaliar a capacidade de pirimetanila vaporizada controlar uma infecção patogênica de mirtilos por Botrytis cinerea. Vinte e sete (27) mirtilos (por repetição, em triplicata) foram colocados em um contentor bipartido de 0,57 I (1 quartilho) de padrão industrial com a extremidade de caule voltada para cima. Uma incisão recente foi colocada em cada mirtilo com um alfinete, e a incisão foi, então, inoculada com 20 μΙ de 1 x 105 esporos/ml de suspensão de B. cinerea. Os contentores bipartidos foram, então, colocados no fundo de uma câmara de dessecador acrílico de 36 I em triplicata.In particular, the Day 3 control grapes showed disease incidence and severity of 100% and 3.9, respectively. A concentration of 0.3 mg / l pyrimethanil was able to inhibit all minus 16.7% incidence of gray mold in grapes on day 0 (see Table 5). Additionally, concentrations of 0.3 mg / l, 0.1 mg / l, 0.03 mg / l or 0.01 mg / l vaporized pyrimethanil were able to inhibit the severity of gray mold on Day 3 in inoculated grapes. at 1.3, 1.8, 3.4 and 3.6, respectively. The incidence and severity of gray mold shown in Table 5 and Figure 4 also indicate a dose dependent response to vaporized pyrimethanil. Finally, these data demonstrate that the present method using vaporized pyrimethanil can be used to inhibit the growth of plant pathogens, such as B. cinerea, inoculated into fruits such as grapes. EXAMPLE 6: B-VAPORIZED PYRIMETHANIL TREATMENT CINEREA (IN VIVO) [0200] An in vivo assay was used to evaluate the ability of vaporized pyrimethanil to control a pathogenic Botrytis cinerea infection of blueberries. Twenty-seven (27) blueberries (per repeat in triplicate) were placed in an industry standard 0.57 I (1 pint) bipartite container with the stem end facing up. A recent incision was pinned to each blueberry, and the incision was then inoculated with 20 μ of 1 x 105 spores / ml of B. cinerea suspension. The split containers were then placed at the bottom of a triplicate 36 I acrylic desiccator chamber.
[0201 ]Uma quantidade adequada de pirimetanila para atingir uma concentração de espaço livre final de 0,3 mg/l, 0,1 mg/l, 0,03 mg/l ou 0,01 mg/l foi dissolvida em acetona e 100 μΙ da solução foram pipetados em um tubo de vidro pequeno. Esse tubo foi, então, colocado dentro de um dispositivo de vaporização preaquecido (tubo de cobre aquecido termostaticamente de 1,27 cm (0,5") OD por 15,24 cm (6") de comprimento montado em um ventilador de baixo fluxo de 0,5 l/min) ajustado a 60 °C por 1 minuto para permitir que a acetona evapore, deixando para trás os cristais sólidos de pirimetanila.A suitable amount of pyrimethanil to achieve a final free space concentration of 0.3 mg / l, 0.1 mg / l, 0.03 mg / l or 0.01 mg / l was dissolved in acetone and 100 µl. μΙ of the solution were pipetted into a small glass tube. This tube was then placed inside a preheated spray device (1.27 cm (0.5 ") OD by 15.24 cm (6") long thermostatically heated copper tube mounted on a low flow fan 0.5 l / min) adjusted to 60 ° C for 1 minute to allow acetone to evaporate leaving behind solid pyrimethanil crystals.
[0202] A pirimetanila foi, então, introduzida nas cabines da câmara através da porta de divisória com o uso do dispositivo de vaporização, conforme descrito no Exemplo 1, ajustado a 180°C. As câmaras foram, então, incubadas a 21 °C por três (3) dias. Após a incubação, as frutas foram avaliadas diariamente por mais 3 dias a 21 °C. As frutas foram avaliadas a fim de observar a porcentagem de incidência de doença (%) e gravidade de doença. A gravidade da doença foi classificada em uma escala que varia de 0 a 4, em que “0” indicou nenhuma gravidade de doença, “1” indicou gravidade de doença mínima, “2” indicou gravidade de doença média, “3” indicou gravidade de doença alta e “4” indicou gravidade de doença excepcionalmente alta.Pyrimethanil was then introduced into the chamber cabinets through the partition door using the vaporization device as described in Example 1, adjusted to 180 ° C. The chambers were then incubated at 21 ° C for three (3) days. After incubation, the fruits were evaluated daily for a further 3 days at 21 ° C. The fruits were evaluated in order to observe the percentage of disease incidence (%) and disease severity. Disease severity was rated on a scale ranging from 0 to 4, where “0” indicated no disease severity, “1” indicated minimum disease severity, “2” indicated average disease severity, “3” indicated severity of high disease and “4” indicated exceptionally high disease severity.
[0203] 0 resultado desse experimento in vivo é sumarizado na Tabela 6 e na Figura 5. Os resultados demonstram que o presente método que compreende pirimetanila vaporizada fornece inibição in vivo de crescimento antimicrobiano de B. cinerea inoculado em mirtilos. Mais especificamente, esses dados indicam que pirimetanila vaporizada inibe B. cinerea que causa incidência e gravidade de mofo cinzento em mirtilos.The result of this in vivo experiment is summarized in Table 6 and Figure 5. The results demonstrate that the present method comprising vaporized pyrimethanil provides in vivo inhibition of antimicrobial growth of B. cinerea inoculated into blueberries. More specifically, these data indicate that vaporized pyrimethanil inhibits B. cinerea which causes incidence and severity of gray mold in blueberries.
[0204] Em particular, as uvas de controle do Dia 3 mostraram incidência e gravidade de doença de 98,8% e 2,1, respectivamente. No entanto, a concentração de 0,3 mg/l de pirimetanila teve capacidade de inibir a incidência de mofo cinzento em mirtilos a 52,0% no Dia 3 (consultar a Tabela 6). Adicionalmente, concentrações de 0,3 mg/l, 0,1 mg/l e 0,03 mg/l de pirimetanila vaporizada tiveram capacidade de inibir a gravidade de mofo cinzento no Dia 3 em mirtilos inoculados a 0,3, 1,7 e 1,7, respectivamente. Nenhuma inibição de mofo cinzento ocorreu com a concentração de 0,01 mg/l de pirimetanila.In particular, Day 3 control grapes showed disease incidence and severity of 98.8% and 2.1, respectively. However, the concentration of 0.3 mg / l pyrimethanil was able to inhibit the incidence of gray mold in 52.0% blueberries on Day 3 (see Table 6). Additionally, concentrations of 0.3 mg / l, 0.1 mg / l and 0.03 mg / l of vaporized pyrimethanil were able to inhibit the severity of gray mold on Day 3 in 0.3, 1.7 and 1.7 respectively. No inhibition of gray mold occurred at the concentration of 0.01 mg / l pyrimethanil.
[0205] A incidência e a gravidade de mofo cinzento mostradas na Tabela 6 e na Figura 5 também indicam uma resposta dependente de dose à pirimetanila vaporizada. Por fim, esses dados demonstram que o presente método que usa pirimetanila vaporizada pode ser usado par inibir o crescimento de patógenos de planta, tal como B. cinerea, inoculados em frutas, tal como mirtilos.______________________ EXEMPLO 7: UM DISPOSITIVO DE AQUECIMENTO PARA VAPORIZAR O TRATAMENTO ANTIMICROBIANOThe incidence and severity of gray mold shown in Table 6 and Figure 5 also indicate a dose dependent response to vaporized pyrimethanil. Finally, these data demonstrate that the present method using vaporized pyrimethanil can be used to inhibit the growth of plant-borne pathogens such as B. cinerea inoculated with fruits such as blueberries. EXAMPLE 7: A VAPORIZING HEATING DEVICE ANTIMICROBIAN TREATMENT
[0206] Esse exemplo refere-se ao dispositivo de aquecimento da presente revelação (consultar as Figuras 6 a 10). O dispositivo de aquecimento compreende um elemento de aquecimento que circunda uma câmara de aquecimento ou recipi- ente, tal como um tubo de cobre (consultar a Figura 6 e 10). O dispositivo de aquecimento também compreende uma fonte de alimentação (consultar a Figura 7).[0206] This example relates to the heating device of the present disclosure (see Figures 6 to 10). The heating device comprises a heating element surrounding a heating chamber or container, such as a copper pipe (see Figures 6 and 10). The heating device also comprises a power supply (see Figure 7).
[0207] 0 elemento de aquecimento tem a capacidade de produzir as altas temperaturas necessárias para atingir a temperatura de vaporização de um ingrediente ativo sólido técnico, tal como pirimetanila. O ingrediente ativo é colocado na câmara de aquecimento de diversas formas possíveis, tal como colocado em um tubo de vidro (consultar a Figura 9) que é inserido na câmara de aquecimento do dispositivo. A solução de ingrediente ativo pode ser também colocada diretamente na superfície aquecida com o uso de uma pipeta, seringa ou similar. Alternativamente, o ingrediente ativo sólido pode ser dissolvido com um solvente volátil, e a quantidade desejada de produto ativo dissolvido pode ser colocada em ou sobre um carreador sólido, tal como algodão ou um material absorvente não inflamável (consultar a Figura 8).The heating element has the ability to produce the high temperatures necessary to reach the vaporization temperature of a technical solid active ingredient, such as pyrimethanil. The active ingredient is placed in the heating chamber in several possible ways, such as placed in a glass tube (see Figure 9) that is inserted into the heating chamber of the device. The active ingredient solution may also be placed directly on the heated surface using a pipette, syringe or the like. Alternatively, the solid active ingredient may be dissolved with a volatile solvent, and the desired amount of dissolved active product may be placed in or on a solid carrier such as cotton or a non-flammable absorbent material (see Figure 8).
[0208] Uma fonte de fluxo de ar de baixo volume, tal como um ventilador, é também compreendida pelo dispositivo de aquecimento (não mostrado). A fonte de fluxo de ar (por exemplo, um ventilador) impulsionará o ar através da câmara de aquecimento que compreende o ingrediente ativo vaporizado e através do dispositivo de aquecimento e, ainda, através de um ou mais orifícios localizados na extremidade distai do dispositivo de aquecimento. O um ou mais orifícios na extremidade distai do dispositivo de aquecimento podem penetrar em uma câmara (consultar as Figuras 10 a 11) que compreende frutas, flores ou vegetais a serem tratados conforme descrito no Exemplo 1 a 6.[0208] A low volume air flow source, such as a fan, is also comprised of the heating device (not shown). The source of air flow (e.g. a blower) will propel air through the heating chamber comprising the vaporized active ingredient and through the heating device and through one or more holes located at the distal end of the heating device. heating. The one or more holes in the distal end of the heating device may penetrate a chamber (see Figures 10 to 11) comprising fruits, flowers or vegetables to be treated as described in Example 1 to 6.
EXEMPLO 8: PONTO DE FUSÃO DE COMPOSTO DE PIRIMETANILAEXAMPLE 8: PYRIMETHANIL COMPOUND MELTING POINT
[0209] Esse exemplo refere-se a experimentos realizados para determinar as temperaturas de fusão de compostos técnicos de pirimetanila e amostras de fungicida. No presente exemplo, compostos de pirimetanila da China (composto 1) e da Europa (composto 2) foram analisados por Calorimetria de Varredura Diferencial (DSC). Os compostos de pirimetanila foram passados em uma bandeja de alumínio TzeroTM hermeticamente vedado no instrumento de DSC Q2000 (TA Instruments) equipado com um sistema de resfriamento por nitrogênio líquido e com o uso de métodos de teste de DSC padrão conforme segue: equilibrado a 0 °C, isotérmico por 5 minutes, elevação a 10 °C por minute para 140 °C e método final.[0209] This example refers to experiments performed to determine the melting temperatures of pyrimethanil technical compounds and fungicide samples. In the present example, pyrimethanil compounds from China (compound 1) and Europe (compound 2) were analyzed by Differential Scanning Calorimetry (DSC). Pyrimethanil compounds were passed on a hermetically sealed TzeroTM aluminum tray on the DSC Q2000 instrument (TA Instruments) equipped with a liquid nitrogen cooling system and using standard DSC test methods as follows: balanced at 0 ° C, isothermal for 5 minutes, elevation at 10 ° C per minute to 140 ° C and final method.
[0210] Os resultados desse exemplo para os compostos de pirimetanila chineses (CH; composto 1) e europeus (EU; composto 2) são mostrados nas Figuras 12 e 13, respectivamente. Conforme mostrado na Figura 12, a temperatura de fusão do composto de pirimetanila 1 variou de cerca de 96,8 °C a cerca de 97,6 °C e teve um calor de fusão de cerca de 112,4 J/g. A Figura 13 mostra que a temperatura de fusão do composto de pirimetanila 2 variou de cerca de 96,5 °C a cerca de 97,7 °C e teve um calor de fusão de cerca de 147,4 J/g. Assim, as Figuras 12 e 13 confirmam que a temperatura de fusão de pirimetanila varia a partir de cerca de 96 °C a cerca de 98 °C. Entretanto, visto que os calores de perfis de fusão dos dois compostos de pirimetanila não são similares (112,4 J/g para o composto de pirimetanila 1 e 147.4 J/g para o composto de pirimetanila 2), não está determinado se os compostos de pirimetanila 1 e 2 são idênticos.The results of this example for Chinese (CH; compound 1) and European (EU; compound 2) pyrimethanil compounds are shown in Figures 12 and 13, respectively. As shown in Figure 12, the melting temperature of the pyrimethanil compound 1 ranged from about 96.8 ° C to about 97.6 ° C and had a melting heat of about 112.4 J / g. Figure 13 shows that the melting temperature of the pyrimethanil 2 compound ranged from about 96.5 ° C to about 97.7 ° C and had a melting heat of about 147.4 J / g. Thus, Figures 12 and 13 confirm that the pyrimethanil melting temperature ranges from about 96 ° C to about 98 ° C. However, since the fusion profile heats of the two pyrimethanil compounds are not similar (112.4 J / g for pyrimethanil compound 1 and 147.4 J / g for pyrimetanyl compound 2), it is not determined whether the compounds pyrimethanil 1 and 2 are identical.
EXEMPLO 9: TEMPERATURA DE DEGRADAÇÃO DO COMPOSTO DE PIRIMETANILAEXAMPLE 9: DIMENSION TEMPERATURE OF PYRIMETHANIL COMPOUND
[0211] Esse exemplo refere-se a experimentos realizados para determinar as temperaturas de degradação de compostos técnicos de pirimetanila e amostras de fungicida. No presente exemplo, compostos de pirimetanila da China (composto 1) e da Europa (composto 2) foram analisados por Análise de Gravidade Térmica (TGA). As amostras de pirimetanila foram passadas em ambas as atmosferas de ar e nitrogênio no instrumento de TGA Q5000 (TA Instruments) equipado em bandejas de platina abertas e com o uso de métodos de teste de TGA padrão conforme segue: gás de seleção 1 e 2, armazenamento de dados ligado, elevação a 10 °C por minuto pa- ra 300 °C, armazenamento de dados desligado e método final. Um método isotérmi-co foi realizado de acordo com métodos padrão.[0211] This example refers to experiments performed to determine the degradation temperatures of technical pyrimethanil compounds and fungicide samples. In the present example, pyrimethanil compounds from China (compound 1) and Europe (compound 2) were analyzed by Thermal Gravity Analysis (TGA). Pyrimethanil samples were passed in both air and nitrogen atmospheres on the TGA Q5000 (TA Instruments) instrument equipped with open platinum trays and using standard TGA test methods as follows: selection gas 1 and 2, data storage on, elevation at 10 ° C per minute to 300 ° C, data storage off and final method. An isothermal method was performed according to standard methods.
[0212] Os resultados desse exemplo para o composto de pirimetanila chinês (CH; composto 1) em ar e nitrogênio são mostrados nas Figuras 14A e 14B, respectivamente. Os resultados desse exemplo para o composto de pirimetanila europeu (EU; composto 2) em ar e nitrogênio são mostrados nas Figuras 15A e 15B, respectivamente. Conforme mostrado nas Figuras 14 a 15, a degradação de ambos os compostos de pirimetanila começou a cerca de 120,3 ‘C em ar e a cerca de 120,6 °C em nitrogênio e foi concluída a cerca de 200 °C tanto em ar como em nitrogênio. Assim, as Figuras 14 a 17 demonstram que a temperatura de degradação de pirimetanila varia a partir de cerca de 120 °C a cerca de 200 °C.The results of this example for the Chinese pyrimethanil compound (CH; compound 1) in air and nitrogen are shown in Figures 14A and 14B, respectively. The results of this example for the European pyrimethanil compound (EU; compound 2) in air and nitrogen are shown in Figures 15A and 15B, respectively. As shown in Figures 14 to 15, degradation of both pyrimethanil compounds began at about 120.3 ° C in air and at about 120.6 ° C in nitrogen and was completed at about 200 ° C in both air as in nitrogen. Thus, Figures 14 to 17 demonstrate that the pyrimethanil degradation temperature ranges from about 120 ° C to about 200 ° C.
EXEMPLO 10: DEGRADAÇÃO POR EVAPORAÇÃO DE COMPOSTO DE PIRIMETANILAEXAMPLE 10: DEPDATION BY EVAPORATION OF PYRIMETHANIL COMPOUND
[0213] Esse exemplo refere-se a experimentos realizados para determinar se a degradação de compostos técnicos de pirimetanila observada em altas temperaturas foi devido à evaporação. No presente exemplo, sete miligramas (7 mg) de compostos de pirimetanila 1 e 2 foram analisados em ar por Espectrometria de Massa Acoplada a Análise de Gravidade Térmica (TGA-MS). As amostras de pirimetanila foram carregadas em uma bandeja de platina de TGA do instrumento de TGA Q5000 (TA Instruments) e com o uso de métodos de teste de TGA padrão conforme segue: gás de seleção 2 (ar), armazenamento de dados ligado, elevação a 5 °C por minuto para 100 °C, isotérmico por 180 min, armazenamento de dados desligado, equilibrado a 60 °C e método final. Um método isotérmico foi realizado de acordo com métodos padrão.[0213] This example refers to experiments performed to determine if the degradation of pyrimethanil technical compounds observed at high temperatures was due to evaporation. In the present example, seven milligrams (7 mg) of pyrimethanil compounds 1 and 2 were analyzed in air by Thermal Gravity Analysis Coupled Mass Spectrometry (TGA-MS). Pyrimethanil samples were loaded onto a TGA Q5000 instrument TGA platinum tray (TA Instruments) and using standard TGA test methods as follows: selection gas 2 (air), data storage on, elevation at 5 ° C per minute to 100 ° C, isothermal for 180 min, data storage off, balanced at 60 ° C and final method. An isothermal method was performed according to standard methods.
[0214] A fornalha de TGA foi fechada e purgada com hélio, então, aquecida da temperatura ambiente a cerca de 300 °C a 10 °C por minuto. O efluente da fornalha de TGA foi transferido para um espectrômetro de massa através de uma interfa- ce aquecida e uma linha de transferência, que tinha uma temperatura máxima de 300 °C. Um método isotérmico também foi realizado de acordo com os métodos padrão. Os resultados desse exemplo para o composto de pirimetanila 1 chinês (CH) são mostrados nas Figuras 16A e 16B. Os resultados desse exemplo para o composto de pirimetanila 2 europeu (EU) são mostrados nas Figuras 17A e 17B.The TGA furnace was closed and purged with helium, then heated from room temperature to about 300 ° C to 10 ° C per minute. TGA furnace effluent was transferred to a mass spectrometer through a heated interface and a transfer line, which had a maximum temperature of 300 ° C. An isothermal method was also performed according to standard methods. The results of this example for Chinese pyrimethanil compound 1 (CH) are shown in Figures 16A and 16B. The results of this example for the European pyrimethanil 2 compound (EU) are shown in Figures 17A and 17B.
[0215] As Figuras 18 e 19 mostram curvas de taxa de perda de peso para os compostos de pirimetanila 2 e 1, respectivamente. As Figures 18 e 19 demonstram que os dois compostos de pirimetanila são muito similares. De fato, o formato das curvas de taxa de perda de peso e a ausência de variação espectral de massa sobre a faixa de perda de peso observada evidencia que a perda de composto ativo está ocorrendo devido ao processo de evaporação. Ademais, esses dados indicam que o material de pirimetanila é muito volátil para se decompor a pressão atmosférica. Assim, o início da decomposição térmica do composto de pirimetanila da presente revelação provavelmente exige um dispositivo fechado ou pressurizado.Figures 18 and 19 show weight loss rate curves for pyrimethanil compounds 2 and 1, respectively. Figures 18 and 19 demonstrate that the two pyrimethanil compounds are very similar. In fact, the shape of the weight loss rate curves and the absence of mass spectral variation over the observed weight loss range show that the loss of active compound is occurring due to the evaporation process. Moreover, these data indicate that pyrimethanil material is too volatile to decompose at atmospheric pressure. Thus, the onset of thermal decomposition of the pyrimethanil compound of the present disclosure probably requires a closed or pressurized device.
[0216] A Figura 20 mostra uma comparação dos termogramas de íon total dos dois compostos de pirimetanila testados. Os termogramas de íons total dos compostos ativos 1 e 2 são muito similares a suas respectivas curvas de perda de peso correspondentes mostradas nas Figuras 18 e 19. A Figura 21 mostra o perfil de evolução dos termogramas de íon total e íon molecular dos dois compostos de pirimetanila.Figure 20 shows a comparison of the total ion thermograms of the two pyrimethanil compounds tested. The total ion thermograms of active compounds 1 and 2 are very similar to their respective corresponding weight loss curves shown in Figures 18 and 19. Figure 21 shows the evolution profile of the total ion and molecular ion thermograms of the two compounds. pyrimethanil.
[0217] As Figuras 20 e 21 demostram que os compostos de pirimetanila se sobrepõem perfeitamente, indicando a ausência de quaisquer alterações moleculares significativas durante o evento térmico a 300 °C. Os espectros tomados em vários tempos de retenção confirmam a ausência de degradação química detectável dos compostos de pirimetanila. Assim, as Figuras 20 a 21 demonstram os resultados inesperados de que os compostos de pirimetanila testados não sofrem degradação molecular ou química significativa em resposta a eventos térmicos que têm tempera- tura até 300 °C, o que possibilita a capacidade dos presentes compostos de pirime-tanila de volatizar em altas temperaturas para uso em tratamentos vaporizados de plantas e partes de planta. Esses dados são surpreendentes e inesperados à luz da técnica, indicando que os esses compostos de pirimetanila começam a degradas em temperaturas tão baixas quanto 189,5 °C.Figures 20 and 21 show that the pyrimethanil compounds overlap perfectly, indicating the absence of any significant molecular changes during the thermal event at 300 ° C. Spectra taken at various retention times confirm the absence of detectable chemical degradation of the pyrimethanil compounds. Thus, Figures 20 to 21 demonstrate the unexpected results that the pyrimethanil compounds tested do not undergo significant molecular or chemical degradation in response to thermal events having a temperature up to 300 ° C, which enables the ability of the present pyrimidine compounds. high temperature volatilizer for use in vaporized treatments of plants and plant parts. These data are surprising and unexpected in the light of the art, indicating that these pyrimethanil compounds begin to degrade at temperatures as low as 189.5 ° C.
EXEMPLO 11: MÉTODOS DE ENCHARCAMENTO VERSUS VAPORIZAÇÃO PARA TRATAR FRUTASEXAMPLE 11: FILLING METHODS VERSUS VAPORIZATION TO TREAT FRUITS
[0218] Um ensaio in vivo foi usado para avaliar a capacidade de pirimetanila vaporizada de controlar uma infecção patogênica de maçãs por Penicillium expan-sum em comparação a métodos de encharcamento de tratamento de maçã. Os tratamentos vaporizados de maçãs foram realizados conforme descrito anteriormente nos Exemplos 1 a 6, com a exceção do uso de um túnel com 1 m de largura x 1 m de altura x 8 m de profundidade (consultar a Figura 11). Uma quantidade adequada de pirimetanila para atingir uma concentração/taxa de tratamento vaporizado final de 0,125 mg/l, 0,5 mg/l ou 2 mg/l foi preparada. Adicionalmente, tratamentos por encharcamento que compreendem uma concentração final de 125 mg/l, 500 mg/l e 2.000 mg/l de ingrediente ativo de pirimetanila foram também preparados. As frutas foram armazenadas por nove semanas a 1 °C e avaliadas a fim de observar e/ou determinar a área de escurecimento na fruta (consultar a Figura 22) e a porcentagem de inibição de escurecimento (consultar a Tabela 7).[0218] An in vivo assay was used to evaluate the ability of vaporized pyrimethanil to control a pathogenic Penicillium expan-sum apple infection compared to soaking methods of apple treatment. The vaporized apple treatments were performed as described previously in Examples 1 to 6, except for the use of a 1 m wide x 1 m high x 8 m deep tunnel (see Figure 11). A suitable amount of pyrimethanil to achieve a final spray concentration / treatment rate of 0.125 mg / l, 0.5 mg / l or 2 mg / l was prepared. Additionally, soaking treatments comprising a final concentration of 125 mg / l, 500 mg / l and 2,000 mg / l of pyrimethanil active ingredient were also prepared. Fruits were stored for nine weeks at 1 ° C and evaluated to observe and / or determine the fruit's browning area (see Figure 22) and the percentage of browning inhibition (see Table 7).
[0219] Os resultados demonstram que o presente método que compreende pirimetanila vaporizada fornece melhor inibição in vivo de crescimento antimicrobia-no de P. expansum inoculado em maçãs em comparação a maçãs que foram encharcadas com concentrações ainda mais altas de composto de pirimetanila líquido. A Figura 22 demonstra que as maçãs tratadas de uma maneira preventiva com pirimetanila vaporizada tiveram a mesma área (mm) de escurecimento que aquelas maçãs tratadas por pirimetanila encharcada. Adicionalmente, a Tabela 7 indica que concentrações mais baixas da pirimetanila vaporizada tiveram uma inibição percentual mais alta em maçãs do que as concentrações mais altas de concentrações de pirimetanila encharcada.[0219] The results demonstrate that the present method comprising vaporized pyrimethanil provides better in vivo inhibition of inoculated P. expansum antimicrobial growth in apples compared to apples that were drenched with even higher concentrations of liquid pyrimethanil compound. Figure 22 demonstrates that preventively treated apples with vaporized pyrimethanil had the same darkening area (mm) as those soaked pyrimethanil treated apples. In addition, Table 7 indicates that lower concentrations of vaporized pyrimethanil had a higher percentage inhibition in apples than higher concentrations of soaked pyrimethanil concentrations.
[0220]Esses dados indicam que a pirimetanila vaporizada fornece uma inibição percentual mais alta de crescimento de P. expansum que causa escurecimento em maçãs do que maçãs tratadas por encharcamento. Por fim, esses dados demonstram que o presente método que usa pirimetanila vaporizada pode ser um método melhor e de menor custo para inibir o crescimento de patógenos de planta, tal como P. expansum, inoculados em frutas (por exemplo, maçãs) em comparação a métodos mais tradicionais de tratamento, tal como encharcamento.__________ EXEMPLO 12: MÉTODOS DE NEBULIZAÇÃO VERSUS VAPORIZAÇÃO PARA TRATAR FRUTAS[0220] These data indicate that vaporized pyrimethanil provides higher percent inhibition of P. expansum growth that causes darkening in apples than soaked apples. Finally, these data demonstrate that the present method using vaporized pyrimethanil may be a better and less costly method to inhibit the growth of plant pathogens, such as P. expansum, inoculated with fruits (eg apples) compared to more traditional methods of treatment, such as soaking .__________ EXAMPLE 12: NEBULIZATION METHODS VERSUS VAPORIZATION TO TREAT FRUITS
[0221 ]Um ensaio in vivo foi usado para avaliar a capacidade de pirimetanila vaporizada de controlar uma infecção patogênica de maçãs por Penicillium expansum em comparação a métodos de nebulização de tratamento de maçã. Tratamentos vaporizados de maçãs foram realizados conforme descrito anteriormente nos Exemplos 1 a 6, com a exceção do uso de um túnel com 1 m de largura x 1 m de altura x 8 m de profundidade (Figura 11). Uma quantidade de 2,66 g de pirimetanila foi nebulizada ou vaporizada no túnel. As frutas foram expostas ao tratamento por 72 horas a 21 °C e, então, removidas do túnel e avaliadas 4 dias após a remoção a fim de observar e/ou determinar a área de incisão de escurecimento na parte superior e na parte inferior da fruta (consultar a Figura 23).[0221] An in vivo assay was used to evaluate the ability of vaporized pyrimethanil to control a pathogenic apple infection by Penicillium expansum compared to apple treatment nebulization methods. Vaporized apple treatments were performed as described previously in Examples 1 to 6, except for the use of a 1 m wide x 1 m high x 8 m deep tunnel (Figure 11). An amount of 2.66 g of pyrimethanil was nebulized or vaporized in the tunnel. The fruits were exposed to treatment for 72 hours at 21 ° C and then removed from the tunnel and evaluated 4 days after removal to observe and / or determine the darkening incision area at the top and bottom of the fruit. (see Figure 23).
[0222] Os resultados demonstram que o presente método que compreende pirimetanila vaporizada fornece melhor inibição in vivo de crescimento antimicrobia-no de P. expansum inoculado em maçãs em comparação a maçãs que foram nebuli-zadas com composto de pirimetanila. Embora as maçãs tratadas com pirimetanila vaporizada tenham escurecimento comparável na parte superior da fruta, como maçãs, que foram nebulizadas, a Figura 23 demonstra que as maçãs tratadas com pirimetanila vaporizada tiveram muito menos área (mm) de escurecimento na parte inferior da fruta do que aquelas tratadas por pirimetanila nebulizada.The results demonstrate that the present method comprising vaporized pyrimethanil provides better in vivo inhibition of inoculated P. expansum antimicrobial growth in apples compared to apples that were nebulized with pyrimethanil compound. Although vaporized pyrimethanil-treated apples have comparable darkening at the top of the fruit, like apples that have been nebulized, Figure 23 shows that vaporized pyrimethanil-treated apples had much less area (mm) of darkening at the bottom of the fruit than those treated with nebulized pyrimethanil.
[0223] Esses dados indicam que a pirimetanila vaporizada fornece um método de tratamento melhor de crescimento de P. expansum que causa escurecimento em maçãs do que maçãs tratadas por nebulização. Em particular, os dados fornecidos no presente documento demonstram que a técnica de tratamento por vaporiza-ção reivindicada é melhor para tratar a fruta inteira, incluindo a parte inferior das frutas. Portanto, esse método se torna particularmente valioso para o tratamento de frutas em que as partes inferiores da fruta podem não ser facilmente expostas, tal como, por exemplo, frutas em ambientes e/ou câmaras de armazenamento. Por fim, esses dados demonstram que o presente método que usa pirimetanila vaporizada pode ser melhor e menos dispendioso para inibir o crescimento de patógenos de planta, tal como P. expansum, inoculados em frutas (por exemplo, maçãs) em comparação a métodos mais tradicionais de tratamento, tal como nebulização.[0223] These data indicate that vaporized pyrimethanil provides a better method of treating P. expansum growth that causes darkening in apples than nebulized apples. In particular, the data provided herein demonstrate that the claimed spray treatment technique is better for treating the whole fruit, including the underside of the fruits. Therefore, this method becomes particularly valuable for fruit treatment where the undersides of the fruit may not be easily exposed, such as, for example, fruits in environments and / or storage chambers. Finally, these data demonstrate that the present method using vaporized pyrimethanil may be better and less expensive to inhibit the growth of plant pathogens, such as P. expansum, inoculated with fruits (eg apples) compared to more traditional methods. treatment such as nebulization.
EXEMPLO 13: DISTÂNCIA DE APLICAÇÃO DE PIRIMETANILEXAMPLE 13: PYRIMETHANIL APPLICATION DISTANCE
[0224] Um ensaio in vitro foi usado para avaliar a distribuição uniforme sobre a distância do tratamento vaporizado com pirimetanila em comparação aos métodos de nebulização de tratamento de maçã. Os tratamentos vaporizados de maçãs foram realizados conforme descrito anteriormente nos Exemplos 1 a 6, com a exceção do uso de um túnel com 1 m de largura x 1 m de altura x 8 m de profundida (consultar a Figura 11). Uma quantidade de 2,66 g de pirimetanila foi nebulizada ou vaporizada no túnel. O vapor ou a névoa foi entregue, e a distribuição foi monitorada em distância variável (metros) em relação à fonte a fim de testar o efeito da distância de tratamento sobre a distribuição.[0224] An in vitro assay was used to evaluate the uniform distribution over the distance of pyrimethanil spray treatment compared to apple treatment nebulization methods. The vaporized apple treatments were performed as described previously in Examples 1 to 6, except for the use of a 1 m wide x 1 m high x 8 m deep tunnel (see Figure 11). An amount of 2.66 g of pyrimethanil was nebulized or vaporized in the tunnel. Steam or mist was delivered, and the distribution was monitored at variable distance (meters) from the source to test the effect of treatment distance on the distribution.
[0225] Antes da aplicação de pirimetanila, placas de Petri de área de superfície conhecida foram colocadas dentro do túnel e foram cuidadosamente removidas após 72 horas a fim de determinar a variação de distribuição de pirimetanila na área de tratamento como uma função da distância de tratamento com pirimetanila em relação à fonte de aplicação (consultar a Figura 24). Após a remoção, a pirimetanila foi extraída das placas e quantificada por HPLC.Prior to pyrimethanil application, known surface area Petri dishes were placed inside the tunnel and were carefully removed after 72 hours to determine the variation of pyrimethanil distribution in the treatment area as a function of treatment distance. with pyrimethanil in relation to the source of application (see Figure 24). After removal, pyrimethanil was extracted from the plates and quantified by HPLC.
[0226] Os resultados demonstram que o presente método que compreende pirimetanila vaporizada fornece melhor consistência in vitro de distribuição de pirimetanila em comparação a pirimetanila que foi nebulizada. A pirimetanila vaporizada mostrou não mais que uma variação de 40% em relação à distribuição média de pirimetanila até a distância de tratamento ter sido aumentada até 8 metros, enquanto a pirimetanila nebulizadora mostrou variação de quase 50% a 110% em relação à média em distâncias de 1 a 2 metros e teve uma variação de cerca de 20% a 50% em distâncias de 5 a 8 metros (consultar a Figura 24).The results demonstrate that the present method comprising vaporized pyrimethanil provides better in vitro consistency of pyrimethanil distribution compared to pyrimethanil which has been nebulized. Vaporized pyrimethanil showed no more than a 40% variation from the average distribution of pyrimethanil until the treatment distance was increased to 8 meters, while nebulizing pyrimethanyl showed a variation of almost 50% to 110% from the average distance. 1 to 2 meters and had a range of about 20% to 50% over distances of 5 to 8 meters (see Figure 24).
[0227] As barras mostradas na Figura 24 indicam a quantidade de variação de uma aplicação uniforme a 100% de composto de pirimetanila. Assim, a Figura 24 demonstra que a pirimetanila vaporizada teve distribuição muito mais uniforme de ingrediente ativo sobre distâncias de tratamento muito mais altas em comparação a pirimetanila nebulizada.The bars shown in Figure 24 indicate the amount of variation of a 100% uniform application of pyrimethanil compound. Thus, Figure 24 demonstrates that vaporized pyrimethanil had much more uniform distribution of active ingredient over much higher treatment distances compared to nebulized pyrimethanil.
[0228] Esses dados indicam que a pirimetanila vaporizada fornece um méto- do de tratamento melhor de frutas que o tratamento de frutas por nebulização. Em particular, os dados fornecidos no presente documento demonstram que a técnica de tratamento por vaporização reivindicada é melhor para tratar uniformemente frutas de distâncias aumentadas de menos de 1 metro a cerca de 8 metros, de cerca de 1 meter a cerca de 7 metros, de cerca de 1 metro a cerca de 6 metros, de cerca de 1 metro a cerca de 5 metros, de cerca de 1 metro a cerca de 4 metros, de cerca de 1 metro a cerca de 3 metros e de cerca de 1 metro a cerca de 2 metros.[0228] These data indicate that vaporized pyrimethanil provides a better fruit handling method than fruit spraying. In particular, the data provided herein demonstrate that the claimed spray treatment technique is better for uniformly treating fruit from increased distances of from less than 1 meter to about 8 meters, from about 1 meter to about 7 meters, from about 1 meter to about 6 meters, about 1 meter to about 5 meters, about 1 meter to about 4 meters, about 1 meter to about 3 meters, and about 1 meter to about of 2 meters.
[0229] Portanto, esse método é particularmente valioso para o tratamento uniforme de frutas em que as partes inferiores da fruta não podem ser facilmente expostas, tal como, por exemplo, frutas em ambientes e/ou câmaras de armazenamento. Por fim, esses dados demonstram que o presente método que usa pirimetanila vaporizada para tratar frutas fornece melhor distribuição em comparação a métodos mais tradicionais de tratamento de frutas, tal como nebulização.Therefore, this method is particularly valuable for the uniform treatment of fruits where the undersides of the fruit cannot be easily exposed, such as, for example, fruits in environments and / or storage chambers. Finally, these data demonstrate that the present method that uses vaporized pyrimethanil to treat fruit provides better distribution compared to more traditional fruit treatment methods such as nebulization.
EXEMPLO 14: TAMANHO DE PARTÍCULA DE COMPOSIÇÃO DE PIRIMETANILEXAMPLE 14: PYRIMETHANIL COMPOSITION PARTICLE SIZE
[0230] Um ensaio in vitro foi realizado para estimar os tamanhos de partícula de pirimetanila quando entregue por nebulização ou vaporização. Uma quantidade de 2,66 g de pirimetanila foi nebulizada ou vaporizada em um túnel de tratamento que mede 1 m de altura x 1 m de largura x 8 m de profundidade (consultar a Figura 11). Antes da aplicação de pirimetanila, placas de Petri de área de superfície conhecida foram colocadas dentro do túnel e foram cuidadosamente removidas após 7,5, 15, 30, 60 ou 360 minutos. Após a remoção, a pirimetanila foi extraída das placas e quantificada por HPLC.[0230] An in vitro assay was performed to estimate pyrimethanil particle sizes when delivered by nebulization or spraying. An amount of 2.66 g of pyrimethanil was nebulized or sprayed into a treatment tunnel measuring 1 m high x 1 m wide x 8 m deep (see Figure 11). Prior to application of pyrimethanil, known surface area Petri dishes were placed into the tunnel and were carefully removed after 7.5, 15, 30, 60 or 360 minutes. After removal, pyrimethanil was extracted from the plates and quantified by HPLC.
[0231 ]Os resultados da Tabela 8 demonstram que o presente método que compreende pirimetanila vaporizada fornece tamanhos de partícula menores em comparação a uma aplicação por nebulização. Por exemplo, após 30 minutos, 100% das partículas de névoa se assentaram, o que poderia corresponder a um tamanho de partícula de aproximadamente 2,8 mícrons. Em comparação, após 30 minutos, ainda não havia uma quantidade detectável de pirimetanila vaporizada assentada nas placas. Entretanto, após 60 e 360 minutos, 26% e 91% da pirimetanila vaporizada total foram assentados, respectivamente. Essas velocidades/taxas de assentamento correspondem a um tamanho de partícula de pirimetanila estimado de 1,9 mícron e 0,75 mícron, respectivamente (Tabela 8).__________________________________ [0232JA descrição anterior possibilita que outros versados na técnica utilizem a tecnologia em várias modalidades e com várias modificações conforme sejam adequadas para o uso particular contemplado. Em conformidade com as provisões dos estatutos de patente, os princípios e modos de operação desta revelação foram explicados e ilustrados em modalidades exemplificativas. De modo correspondente, a presente invenção não é limitada às modalidades particulares descritas e/ou exemplificadas no presente documento.[0231] The results from Table 8 demonstrate that the present method comprising vaporized pyrimethanil provides smaller particle sizes compared to a nebulizer application. For example, after 30 minutes, 100% of the mist particles settled, which could correspond to a particle size of approximately 2.8 microns. By comparison, after 30 minutes, there was still no detectable amount of vaporized pyrimethanil sitting on the plates. However, after 60 and 360 minutes, 26% and 91% of the total vaporized pyrimethanil was settled, respectively. These velocities / nesting rates correspond to an estimated pyrimethanil particle size of 1.9 microns and 0.75 microns, respectively (Table 8). The above description enables others skilled in the art to utilize the technology in various embodiments and with various modifications as are appropriate for the particular use contemplated. In accordance with the provisions of the patent statutes, the principles and modes of operation of this disclosure have been explained and illustrated in exemplary embodiments. Correspondingly, the present invention is not limited to the particular embodiments described and / or exemplified herein.
[0233]Pretende-se que o escopo da revelação da presente tecnologia seja definido, não apenas com referência à descrição acima, mas também pelas seguintes reivindicações e seus equivalentes sejam assim abrangidos. Será entendido por aqueles versados na técnica que várias alternativas às modalidades descritas na presente invenção podem ser empregadas na prática das reivindicações sem afastamento do espírito e do escopo conforme definido nas seguintes reivindicações. Em suma, deve-se entender que a revelação tem capacidade de modificação e variação e é limitada apenas pelas seguintes reivindicações.The scope of the disclosure of the present technology is intended to be defined, not only with reference to the above description, but also by the following claims and their equivalents thereof. It will be understood by those skilled in the art that various alternatives to the embodiments described in the present invention may be employed in the practice of the claims without departing from the spirit and scope as defined in the following claims. In summary, it is to be understood that the disclosure is modifiable and variable and is limited only by the following claims.
REIVINDICAÇÕES
Claims (20)
Family
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