BR102016020328B1

BR102016020328B1 - ANTIOXIDANT MICROPARTICLE AND ITS USES

Info

Publication number: BR102016020328B1
Application number: BR102016020328-7A
Authority: BR
Inventors: Marta Cristina Teixeira Duarte; Adriana Nogueira Figueiredo; Renata Maria Teixeira Duarte; Rodney Alexandre Ferreira Rodrigues; Aline Mondini Calil Racanicci
Original assignee: Universidade Estadual De Campinas - Unicamp; Fundação Universidade De Brasília – Fub
Priority date: 2016-08-31
Filing date: 2016-08-31
Publication date: 2022-07-05
Also published as: BR102016020328A2; WO2018039758A1

Abstract

MICROPARTÍCULA ANTIOXIDANTE E SEUS USOS A presente invenção refere-se a uma micropartícula que compreende material de parede, surfactante não iônico, óleo essencial de Ocimum gratissimum (alfavacão) e óleo essencial de Thymus vulgaris (tomilho). A invenção tem aplicação na indústria alimentícia, farmacêutica e cosmética, como meio para aumentar a vida de prateleira do produto e para proteção antioxidante, seja na estocagem do produto evitando sua oxidação ou como aditivo na alimentação animal com o objetivo de produzir carne com menor propensão a oxidaçãoANTIOXIDANT MICROParticle AND THEIR USES The present invention relates to a microparticle comprising wall material, non-ionic surfactant, essential oil of Ocimum gratissimum (favacão) and essential oil of Thymus vulgaris (thyme). The invention has application in the food, pharmaceutical and cosmetics industry, as a means to increase the shelf life of the product and for antioxidant protection, either in the storage of the product, preventing its oxidation or as an additive in animal feed with the objective of producing meat with less propensity. the oxidation

Description

FIELD OF THE INVENTION

[001] A presente invenção refere-se a uma microparticula com propriedades funcionais e antioxidante que compreende material de parede, surfactante não iônico, óleo essencial de Ocimum gratissimum (alfavacão) e óleo essencial de Thymus vulgaris (tomilho).[001] The present invention relates to a microparticle with functional and antioxidant properties that comprises wall material, non-ionic surfactant, essential oil of Ocimum gratissimum (favacão) and essential oil of Thymus vulgaris (thyme).

[002] Adicionalmente, a invenção refere-se ao uso da microparticula para indústria alimentícia, farmacêutica e cosmética como meio para aumentar a vida de prateleira de produtos cárneos por meio da proteção antioxidante, seja na estocagem do produto evitando sua oxidação ou como aditivo na alimentação animal.[002] Additionally, the invention refers to the use of the microparticle for the food, pharmaceutical and cosmetics industry as a means to increase the shelf life of meat products through antioxidant protection, either in the storage of the product preventing its oxidation or as an additive in the animal feed.

FUNDAMENTALS OF THE INVENTION AND STATE OF THE ART

[003] Os antioxidantes sintéticos têm sido largamente utilizados na indústria de alimentos como conservantes alimentares, devido à sua eficácia e baixo custo, sendo o BHT (butilhidroxitolueno), BHA (butilhidroxianisol), TBHQ (butilhidroxiquinona terciária) e PG (propil gaiato) os mais utilizados. No entanto, tais compostos apresentam restrição em alguns paises, pois existe a suspeita de apresentarem riscos potenciais à saúde humana, como efeitos carcinogênicos. Portanto, há um crescente interesse em produtos que sejam naturais e mais seguros para aplicações alimentares, sendo uma tendência progressiva na preferência dos consumidores os antioxidantes naturais.[003] Synthetic antioxidants have been widely used in the food industry as food preservatives, due to their effectiveness and low cost, with BHT (butylhydroxytoluene), BHA (butylhydroxyanisole), TBHQ (tertiary butylhydroxyquinone) and PG (propyl gaiate) being the most used. However, such compounds are restricted in some countries, as there is a suspicion that they pose potential risks to human health, such as carcinogenic effects. Therefore, there is a growing interest in products that are natural and safer for food applications, with a progressive trend in consumer preference for natural antioxidants.

[004] A busca por alternativas a estes produtos tem impulsionado as pesquisas, como os óleos voláteis presentes em plantas aromáticas, que apresentam atividade antioxidante comprovada. Estes óleos, apresentados na forma microencapsulada, demonstram-se uma estratégia promissora na incorporação das dietas das aves e também na produção de produtos cárneos, a fim de controlar a oxidação lipidica, sem oferecer prejuizos ao consumidor.[004] The search for alternatives to these products has boosted research, such as volatile oils present in aromatic plants, which have proven antioxidant activity. These oils, presented in microencapsulated form, are a promising strategy in the incorporation of poultry diets and also in the production of meat products, in order to control lipid oxidation, without harming the consumer.

[005] O estado da técnica apresenta que existe uma correlação linear entre a alta porcentagem de compostos fenólicos da planta e uma alta capacidade antioxidante, comprovada por várias metodologias analíticas (ZHENG; WANG, 2001; KATSUBE et al., 2004; WOJDYLO et al., 2007; DUDONNÉ et al., 2009). Wei; Shibamoto (2010) avaliaram o efeito antioxidante de 25 tipos de óleos voláteis por quatro diferentes metodologias e classificaram os óleos de tomilho e cravo com altos níveis de timol (23%) e eugenol (77%), respectivamente, como os principais em atividade antioxidante. Corroboram com estes resultados os trabalhos conduzidos por Kahkonen et al. (1999), Lee et al. (2005) e Wojdylo et al. (2007) que identificaram que o óleo essencial do tomilho apresentou-se como potente antioxidante comparável ao BHT e ao alfa-tocoferol.[005] The state of the art shows that there is a linear correlation between the high percentage of phenolic compounds in the plant and a high antioxidant capacity, proven by several analytical methodologies (ZHENG; WANG, 2001; KATSUBE et al., 2004; WOJDYLO et al. ., 2007; DUDONNÉ et al., 2009). Wei; Shibamoto (2010) evaluated the antioxidant effect of 25 types of volatile oils by four different methodologies and classified thyme and clove oils with high levels of thymol (23%) and eugenol (77%), respectively, as the main ones in antioxidant activity. . These results are corroborated by the studies conducted by Kahkonen et al. (1999), Lee et al. (2005) and Wojdylo et al. (2007) who identified that thyme essential oil was a potent antioxidant comparable to BHT and alpha-tocopherol.

[006] 0 composto eugenol é tradicionalmente conhecido como sendo o constituinte de maior proporção no óleo essencial do cravo {Eugenia caryophyllata). Entretanto, a espécie Ocimum gratissimum L., popularmente conhecida como alfavacão, tem também o eugenol como principal composto identificado em sua composição (SILVA et al., 1999; VIEIRA et al. , 2001). Revisão apresentada por Prabhu et al. (2009) destaca várias propriedades reconhecidas e estudadas do O. gratissimum, ressaltando o eugenol como o componente majoritário em diferentes partes da planta, dando ênfase à sua atividade antimicrobiana e alta capacidade antioxidante, quando avaliado in vitro. Dorman et al., (2000) avaliaram a capacidade antioxidante in vitro de diferentes compostos de óleos essenciais e concluíram com o maior valor para eugenol, sendo superior ao antioxidante sintético BHA.[006] The eugenol compound is traditionally known to be the major constituent in the essential oil of clove (Eugenia caryophyllata). However, the species Ocimum gratissimum L., popularly known as alfavacão, also has eugenol as the main compound identified in its composition (SILVA et al., 1999; VIEIRA et al., 2001). Review presented by Prabhu et al. (2009) highlights several recognized and studied properties of O. gratissimum, highlighting eugenol as the major component in different parts of the plant, emphasizing its antimicrobial activity and high antioxidant capacity, when evaluated in vitro. Dorman et al. (2000) evaluated the in vitro antioxidant capacity of different compounds of essential oils and concluded with the highest value for eugenol, being superior to the synthetic antioxidant BHA.

[007] Os compostos timol e eugenol são reconhecidos como GRAS (sigla em inglês para aditivos reconhecidos geralmente como seguros) pela FDA (Food and Drug Administration') podendo assim, serem utilizados na elaboração de produtos cárneos.[007] The compounds thymol and eugenol are recognized as GRAS (acronym in English for additives generally recognized as safe) by the FDA (Food and Drug Administration') and can thus be used in the elaboration of meat products.

[008] No entanto, os óleos essenciais são ingredientes voláteis e sua incorporação requer maiores cuidados, desta forma, o processo de microencapsulação por spray-drying preserva de forma mais eficiente estes compostos das condições adversas do meio ambiente como oxigênio, luz e umidade, pois este estará envolto em um material de parede; além da facilidade para a inclusão e dispersão nas misturas cárneas.[008] However, essential oils are volatile ingredients and their incorporation requires greater care, in this way, the spray-drying microencapsulation process more efficiently preserves these compounds from adverse environmental conditions such as oxygen, light and humidity, for this will be wrapped in a wall material; in addition to the ease of inclusion and dispersion in meat mixtures.

[009] Isto posto, o desenvolvimento de um produto natural à base de óleos essenciais microencapsulados, para ser adicionado em carnes, produtos cárneos, e nas dietas dos animais a fim de controlar a oxidação lipidica, sem oferecer prejuízos ao consumidor, seria de especial valor para a indústria de carne de aves.[009] That said, the development of a natural product based on microencapsulated essential oils, to be added to meats, meat products, and animal diets in order to control lipid oxidation, without harming the consumer, would be of special interest. value to the poultry meat industry.

[010] Abd El-Alim, S.S.L.,et al.,em 02/99 "Culinary herbs inhibit lipid oxidation in raw and cooked minced meat patties during storage" descrevem o uso de diversas plantas na inibição da peroxidação lipidica em carne de frango e suíno. As plantas empregadas foram: manjerona, manjerona selvagem, cominho, cravo, menta, noz-moscada, curry, canela, manjericão, sálvia, tomilho e gengibre. A invenção proposta difere do trabalho de Abd El- Alim, S.S.L.,et al, principalmente pelo fato da presente invenção utilizar uma mistura pré-estabelecida de óleos essenciais na forma microencapsulada e que, além da aplicação na formulação de produtos cárneos também pode ser utilizada na ração das aves para se obter benefícios no controle dos processos oxidativos na carne. Ademais a presente invenção se trata de um produto com a tecnologia da microencapsulação, tornando o mais homogêneo e de fácil manipulação e incorporação, além da determinação de um nível ótimo de adição para elaboração de produtos cárneos, e de ração de aves.[010] Abd El-Alim, S.S.L., et al., in 02/99 "Culinary herbs inhibit lipid oxidation in raw and cooked minced meat patties during storage" describe the use of several plants to inhibit lipid peroxidation in chicken and swine. The plants used were: marjoram, wild marjoram, cumin, cloves, mint, nutmeg, curry, cinnamon, basil, sage, thyme and ginger. The proposed invention differs from the work of Abd El-Alim, S.S.L., et al, mainly because the present invention uses a pre-established mixture of essential oils in microencapsulated form and that, in addition to its application in the formulation of meat products, can also be used in poultry feed to obtain benefits in the control of oxidative processes in meat. In addition, the present invention is a product with microencapsulation technology, making it more homogeneous and easy to handle and incorporation, in addition to determining an optimal level of addition for the elaboration of meat products, and poultry feed.

[011] 0 documento KR101335658 de 08/08/11 se refere a um método de produção de produtos cárneos cuja estabilidade é proporcionada pela supressão da oxidação de gordura devido a um extrato etanólico de origem natural que atua como antioxidante. A invenção proposta difere do documento KR101335658 principalmente pelo enquanto este documento trata do uso de um extrato etanólico de "chwi", um extrato adquirido da folha, do tronco e da raiz das plantas Aster scaber, goldenrod, Ligularia fischeri, Ainsliaea acerifolia, Saussurea seoulensis e Saussurea grandifolia, de aplicação por pulverização na carne, enquanto a presente invenção é uma combinação de dois óleos essenciais microencapsulados, que utilizada tanto como aditivo nas dietas das aves como na formulação de produtos cárneos e ambos com a finalidade de conter os processos oxidativos com valores de aplicação bem definidos.[011] The document KR101335658 of 08/08/11 refers to a method of producing meat products whose stability is provided by the suppression of fat oxidation due to an ethanolic extract of natural origin that acts as an antioxidant. The proposed invention differs from document KR101335658 mainly in that this document deals with the use of an ethanolic extract of "chwi", an extract acquired from the leaf, stem and root of the plants Aster scaber, goldenrod, Ligularia fischeri, Ainsliaea acerifolia, Saussurea seoulensis and Saussurea grandifolia, applied by spraying on meat, while the present invention is a combination of two microencapsulated essential oils, which is used both as an additive in poultry diets and in the formulation of meat products and both with the purpose of containing the oxidative processes with well-defined application values.

[012] Dawidowicz, A., et al em 21/05/16 "Does antioxidant properties of the main component of essential oil reflect its antioxidante properties? The comparison of antioxidante properties of essential oils and their main components" descrevem um estudo que discute as semelhanças e diferenças entre as atividades antioxidantes de óleos essenciais e seus componentes principais, entre as quais Thymus vulgaris e seu componente timol, Caryophyllus aromaticus e seu componente eugenol. A invenção proposta difere do trabalho de Dawidowicz, A., et al principalmente pelo fato da presente invenção ser uma associação compreendendo os óleos essenciais de Thymus vulgaris e Ocimum gratissimum microencapsulados, com atividade antioxidante comprovada tanto em in vitro como in vivo. Além disso, as análises antioxidantes realizadas in vitro foram confirmadas in vivo, como também utilizando a matriz do produto cárneo através do emprego de metodologias de análises apropriadas. Ainda destacando, a presente invenção vai além da avaliação in vitro da atividade antioxidante, pois valida duas formas de aplicação do produto: tanto como aditivo nas dietas para frango de corte e o efeito posterior na conservação da carne, tanto como na mistura para a elaboração de produtos cárneos.[012] Dawidowicz, A., et al on 05/21/16 "Does antioxidant properties of the main component of essential oil reflect its antioxidant properties? The comparison of antioxidant properties of essential oils and their main components" describe a study that discusses the similarities and differences between the antioxidant activities of essential oils and their main components, including Thymus vulgaris and its thymol component, Caryophyllus aromaticus and its eugenol component. The proposed invention differs from the work of Dawidowicz, A., et al mainly because the present invention is an association comprising microencapsulated essential oils of Thymus vulgaris and Ocimum gratissimum, with proven antioxidant activity both in vitro and in vivo. In addition, the antioxidant analyzes performed in vitro were confirmed in vivo, as well as using the meat product matrix through the use of appropriate analysis methodologies. Also highlighting, the present invention goes beyond the in vitro evaluation of the antioxidant activity, as it validates two forms of application of the product: both as an additive in diets for broilers and the subsequent effect on the conservation of the meat, as well as in the mixture for the elaboration. of meat products.

[013] O documento WO201436667 de 07/09/12 refere-se a uma composição contendo óleos essenciais de plantas aromáticas da familia Lamiaceae, com ação fungicida. Os óleos essenciais são produzidos por extração continua a partir de Thymus vulgaris (tomilho) e Origanum vulgare (orégano). Os óleos produzidos contêm uma elevada quantidade de carvacrol e timol. O produto relatado é uma mistura das duas plantas na sua forma oleosa, sem estipular a proporção e apenas assegurando os limites de cada composto majoritário. A invenção proposta difere do WO201436667 principalmente pela forma de produção e aplicação, como também pelo tipo de plantas utilizadas e pela proporção da associação. Além da forma de aplicação ser para uma finalidade diferente, uma vez que a presente invenção valida duas formas de ação antioxidante (aditivo para a ração e elaboração de produtos cárneos), também refere-se a plantas distintas, com a diferenciação tecnológica da microencapsulação, que transforma o produto líquido em micropartículas na forma de pó, facilitando a manipulação e homogeneização nas matrizes dos produtos.[013] WO201436667 of 09/07/12 refers to a composition containing essential oils from aromatic plants of the Lamiaceae family, with fungicidal action. Essential oils are produced by continuous extraction from Thymus vulgaris (thyme) and Origanum vulgare (oregano). The oils produced contain a high amount of carvacrol and thymol. The reported product is a mixture of the two plants in their oily form, without stipulating the proportion and only ensuring the limits of each major compound. The proposed invention differs from WO201436667 mainly in terms of production and application, as well as the type of plants used and the proportion of association. In addition to the form of application being for a different purpose, since the present invention validates two forms of antioxidant action (additive for feed and elaboration of meat products), it also refers to different plants, with the technological differentiation of microencapsulation, which transforms the liquid product into microparticles in the form of powder, facilitating the manipulation and homogenization in the matrixes of the products.

[014] O documento US20110076376 de 07/04/08 refere-se a uma composição de antioxidante natural para produtos cárneos, caracterizado por ser preparado a partir de extratos fenólicos de mel. A forma de aplicação é por pulverização, no liquido do marinado, por aspersão ou banho, cujo objetivo é entrar em contato com a carne formando uma pelicula protetora. Desta forma, não há um limite de segurança ou recomendação de niveis para o uso do produto. A invenção proposta difere do documento US20110076376 principalmente pelo fato da invenção proposta ser uma associação estabelecida dos óleos essências de Thymus vulgaris e Ocimum gratissimum na forma microencapsulada para ser utilizada tanto como aditivo nas dietas das aves como na formulação de produtos cárneos, ambos com a finalidade de conter os processos oxidativos com valores de aplicação bem definidos.[014] Document US20110076376 of 04/07/08 refers to a natural antioxidant composition for meat products, characterized by being prepared from phenolic extracts of honey. The form of application is by spraying, in the marinade liquid, by sprinkling or bathing, whose objective is to come into contact with the meat forming a protective film. In this way, there is no safety limit or recommended levels for the use of the product. The proposed invention differs from the document US20110076376 mainly in that the proposed invention is an established association of the essential oils of Thymus vulgaris and Ocimum gratissimum in microencapsulated form to be used both as an additive in poultry diets and in the formulation of meat products, both with the purpose of to contain the oxidative processes with well-defined application values.

[015] Kim, Il-Suk, et al., em 21/06/11 relatam em "Antioxidant Activities of Hot Water Extracts from Various Spices" o uso de extratos com atividade antioxidante. Entre as espécies avaliadas, e que são comumente utilizadas em carnes estão: o tomilho e o orégano. Kim, Il-Suk, et al., fazem menção apenas às análises antioxidantes realizadas in vitro, sendo que para se afirmar a efetividade e aplicabilidade da (s) substância (s) em produtos cárneos se faz necessário ensaio in vivo ou utilizando a matriz do produto através de metodologias de análises apropriadas. A invenção proposta difere do trabalho de Kim, Il-Suk, et al., principalmente pelo fato de que não só analisa a atividade antioxidante in vitro, mas valida duas formas de aplicação do produto: tanto como aditivo nas dietas para frango de corte e o efeito posterior na conservação da carne, tanto como na mistura para a elaboração de produtos cárneos, tendo como referência um dos antioxidantes sintéticos mais utilizados para esta finalidade.[015] Kim, Il-Suk, et al., on 06/21/11 reported in "Antioxidant Activities of Hot Water Extracts from Various Spices" the use of extracts with antioxidant activity. Among the evaluated species, which are commonly used in meats are: thyme and oregano. Kim, Il-Suk, et al., mention only the antioxidant analyzes performed in vitro, and in order to confirm the effectiveness and applicability of the substance(s) in meat products, it is necessary to test in vivo or using the matrix of the product through appropriate analysis methodologies. The proposed invention differs from the work of Kim, Il-Suk, et al., mainly due to the fact that it not only analyzes the antioxidant activity in vitro, but validates two forms of application of the product: both as an additive in diets for broilers and the subsequent effect on the conservation of meat, as well as in the mixture for the elaboration of meat products, having as a reference one of the most used synthetic antioxidants for this purpose.

[016] O documento CN1317971C de 26/12/15 refere a aplicação dos óleos essenciais de Thymus vugaris e basil como aditivos na alimentação de frango. 0 percentual de óleo de Thymus vugaris foi empregado na faixa de 1,5-2,5% e o percentual de basil na faixa de 1,5-2,5%. A invenção proposta difere do documento CN1317971C principalmente pelo fato deste ser uma mistura de vários ingredientes, incluindo óleos essenciais para serem utilizados nas dietas das aves e animais de criação, porém sem especificação ou finalidade de uso, apenas a forma de fabricação do produto, enquanto aquela demonstra desde a forma de fabricação do produto, tecnologia da microencapsulação dos óleos essenciais de Thymus vulgaris e Ocimum gratissimum, bem como também a finalidade a que servirá esta invenção.[016] Document CN1317971C of 12/26/15 refers to the application of Thymus vugaris and basil essential oils as additives in chicken feed. The percentage of Thymus vugaris oil was used in the range of 1.5-2.5% and the percentage of basil in the range of 1.5-2.5%. The proposed invention differs from document CN1317971C mainly because it is a mixture of several ingredients, including essential oils to be used in the diets of birds and farm animals, but without specification or purpose of use, only the way of manufacturing the product, while that demonstrates from the way of manufacturing the product, technology of microencapsulation of the essential oils of Thymus vulgaris and Ocimum gratissimum, as well as the purpose that this invention will serve.

[017] Dashti, N. D., et al., em 12/15 em "Antioxidant Effect of Thyme Essential Oil on Oxidative Stability of Chicken Nuggets" se refere ao uso de óleos essenciais de espécies de tomilho, porém maior atividade foi observada para Zataria multi flora referida neste trabalho "como tomilho", com a função antioxidante em "nuggets" de frango. O trabalho de Dashti, N. D., et al., é um produto liquido assim há indicios de maior dificuldade de dispersão e homogeneidade na matriz de carne. A invenção proposta difere do trabalho de Dashti, N. D., et al., principalmente pelo fato de ser avaliado apenas um dos óleos essenciais (mesmo gênero de planta mas não a mesma espécie do Thymus vulgaris') em relação à presente invenção que compõe a associação de dois óleos essenciais. O produto desenvolvido na presente invenção é uma mistura exata na proporção de 1 para 3 dos óleos essenciais de Thymus vulgaris e Ocimum gratissimum na forma microencapsulada e com eficácia comprovada em um menor nivel de utilização do que o proposto, pois os niveis (1000 e 2000 ppm) que apresentaram resultado positivo no controle da oxidação lipidica da carne são bem superiores àqueles utilizados na presente invenção (70 e 140 ppm da associação dos óleos essenciais).[017] Dashti, N. D., et al., on 12/15 in "Antioxidant Effect of Thyme Essential Oil on Oxidative Stability of Chicken Nuggets" refers to the use of essential oils from thyme species, however greater activity was observed for Zataria multi flora referred to in this work "like thyme", with the antioxidant function in chicken "nuggets". The work of Dashti, N. D., et al., is a liquid product so there are indications of greater difficulty in dispersion and homogeneity in the meat matrix. The proposed invention differs from the work of Dashti, N. D., et al., mainly due to the fact that only one of the essential oils was evaluated (same plant genus but not the same species as Thymus vulgaris') in relation to the present invention that composes the association of two essential oils. The product developed in the present invention is an exact mixture in the proportion of 1 to 3 of the essential oils of Thymus vulgaris and Ocimum gratissimum in microencapsulated form and with proven effectiveness in a lower level of use than the proposed one, since the levels (1000 and 2000 ppm) that showed a positive result in the control of meat lipid oxidation are much higher than those used in the present invention (70 and 140 ppm of the association of essential oils).

[018] Diante do exposto, seria útil se a técnica dispusesse de micropartículas compreendendo óleos essenciais, para serem adicionadas em carnes, produtos cárneos, e nas dietas dos animais a fim de controlar a oxidação lipidica, alternativa como antioxidantes naturais em substituição aos sintéticos.[018] In view of the above, it would be useful if the technique had microparticles comprising essential oils, to be added to meats, meat products, and animal diets in order to control lipid oxidation, alternative as natural antioxidants in place of synthetic ones.

BRIEF DESCRIPTION OF THE INVENTION

[019] A presente invenção refere-se a uma microparticula antioxidante que compreende: - Material de parede: Maltodextrina - Agente emulsificante: Polysorbate 80, em proporção variável de 8 a 12%, preferencialmente de 10% em massa referente aos sólidos totais; - Óleo essencial de tomilho e óleo essencial de alfavacão, na proporção de 1:3; - 4a 6%, preferencialmente 5% de Óleo essencial de tomilho em massa referente aos sólidos totais; - 14 a 16%, preferencialmente 15% de óleo essencial de alfavacão, em massa referente aos sólidos totais.[019] The present invention refers to an antioxidant microparticle comprising: - Wall material: Maltodextrin - Emulsifying agent: Polysorbate 80, in a variable proportion from 8 to 12%, preferably 10% by mass referring to total solids; - Thyme essential oil and basil essential oil, in the proportion of 1:3; - 4 to 6%, preferably 5% of Thyme Essential Oil by mass referring to total solids; - 14 to 16%, preferably 15% of basil essential oil, in mass referring to total solids.

[020] A microparticula obtida apresenta tamanho de 1 a 100 μm, sendo o tamanho médio de 50 μm em forma esférica, e é um sistema de liberação dos óleos de tomilho e alfavacão que estão na concentração entre 15 a 25 g de óleo/100 g de sólidos totais, preferencialmente 20 g de óleo/100 g de sólidos totais. Os referidos óleos apresentam uma porcentagem de eugenol variável entre 40% e 60%, preferencialmente um mínimo de 45%; uma porcentagem de carvacrol variável entre 2% e 10%, preferencialmente mínimo de 5%, uma porcentagem de p-cimeno variável entre 3% e 10%, preferencialmente mínimo de 8,0%, e uma porcentagem de timol variável entre 5% e 15%, preferencialmente mínimo de 7,0%. A microparticula compreende o mínimo de 15% de timol mais carvacrol e 45% de eugenol (ou a proporção de 1:3 destes constituintes). 0 aprisionamento máximo é de 20% de óleo.[020] The microparticle obtained has a size from 1 to 100 μm, with an average size of 50 μm in a spherical shape, and is a release system for thyme and basil oils that are in the concentration between 15 to 25 g of oil/100 g total solids, preferably 20 g oil/100 g total solids. Said oils have a percentage of eugenol varying between 40% and 60%, preferably a minimum of 45%; a percentage of carvacrol varying between 2% and 10%, preferably a minimum of 5%, a percentage of p-cymene varying between 3% and 10%, preferably a minimum of 8.0%, and a percentage of thymol varying between 5% and 15%, preferably a minimum of 7.0%. The microparticle comprises a minimum of 15% thymol plus carvacrol and 45% eugenol (or a 1:3 ratio of these constituents). Maximum entrapment is 20% oil.

[021] Adicionalmente a microparticula, possui aplicação na indústria alimentícia, farmacêutica e cosmética, com ação antioxidante para prolongar a vida de prateleira de produtos, particularmente em carnes e produtos cárneos, como aditivo na alimentação de animais de criação, como na ração animal, com ação na qualidade da carne. Entende-se como produtos cárneos na presente invenção: produtos cárneos frescais maturados, produtos cárneos curados, produtos cárneos frescais reestruturados, produtos cárneos salgados, produtos cárneos curados e/ou defumados, produtos curados de salsicharia embutidos e produtos cárneos enlatados e/ou envasados. Mais especificamente entende- se como almôndegas, hambúrgueres, empanados do tipo nuggets, steak, salsichas. BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS Figura 1. Aspecto das microparticulas de óleos essenciais de T. vulgaris e O. gratissimum visualizadas em microscópio óptico. Aumento 400x. Figura 2. Formação de malonaldeído (MDA) em almôndegas cozidas de peito de frangos alimentados com níveis crescentes de OEM e armazenados a 4°C durante 7 dias. Figura 3. Formação de malonaldeído (MDA) em almôndegas cozidas de sobrecoxa de frangos alimentados com níveis crescentes de OEM e armazenados a 4 °C durante 7 dias. Figura 4. Níveis de malonaldeído (MDA) nas almôndegas de peito cozidas, de frangos alimentados com níveis crescentes de OEM. Valores médios obtidos durante o período de 7 dias. Letras diferentes (A,B) significam diferença estatística pelo teste de Tukey (P<0,05). Figura 5. Níveis de malonaldeído (MDA) nas almôndegas de sobrecoxa cozidas, de frangos alimentados com níveis crescentes de OEM. Valores médios obtidos durante o periodo de 7 dias. Letras diferentes (A,B) significam diferença estatistica pelo teste de Tukey (P<0,05). Figura 6. Formação de malonaldeido (MDA) antes e após o processamento térmico de almôndegas de peito de frangos incorporadas com BHT ou dois diferentes níveis de OEM. * diferença estatistica em comparação com a carne crua (teste de Dunnet P<0,05). Letras diferentes (A,B) significam diferença estatistica entre os tratamentos após processamento térmico (teste de Tukey P<0,05). Figura 7. Formação de malonaldeido (MDA) antes e após o processamento térmico de almôndegas de sobrecoxa de frangos incorporadas com BHT ou OEM. * diferença estatistica em comparação com a carne crua (teste de Dunnet P<0,05). Letras diferentes (A,B) significam diferença estatística entre os tratamentos após processamento térmico (teste de Tukey P<0,05).[021] Additionally, the microparticle has application in the food, pharmaceutical and cosmetics industry, with antioxidant action to prolong the shelf life of products, particularly in meat and meat products, as an additive in livestock feed, such as animal feed, with action on meat quality. It is understood as meat products in the present invention: freshly matured meat products, cured meat products, restructured fresh meat products, salted meat products, cured and/or smoked meat products, cured sausage products and canned and/or packaged meat products. More specifically, it is understood as meatballs, hamburgers, nuggets, steak, sausages. BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS Figure 1. Aspect of microparticles of essential oils from T. vulgaris and O. gratissimum visualized under an optical microscope. 400x magnification. Figure 2. Formation of malonaldehyde (MDA) in cooked breast meatballs from chickens fed increasing levels of OEM and stored at 4°C for 7 days. Figure 3. Formation of malonaldehyde (MDA) in cooked drumstick meatballs from chickens fed increasing levels of OEM and stored at 4°C for 7 days. Figure 4. Malonaldehyde (MDA) levels in cooked breast meatballs from chickens fed increasing levels of OEM. Average values obtained during the period of 7 days. Different letters (A,B) mean statistical difference by Tukey's test (P<0.05). Figure 5. Malonaldehyde (MDA) levels in cooked drumstick meatballs from chickens fed increasing levels of OEM. Average values obtained during the period of 7 days. Different letters (A,B) mean statistical difference by Tukey's test (P<0.05). Figure 6. Formation of malonaldehyde (MDA) before and after thermal processing of chicken breast meatballs incorporated with BHT or two different levels of OEM. * statistical difference compared to raw meat (Dunnet test P<0.05). Different letters (A,B) mean statistical difference between treatments after thermal processing (Tukey's test P<0.05). Figure 7. Formation of malonaldehyde (MDA) before and after thermal processing of chicken thigh meatballs incorporated with BHT or OEM. * statistical difference compared to raw meat (Dunnet test P<0.05). Different letters (A,B) mean statistical difference between treatments after thermal processing (Tukey's test P<0.05).

DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

[022] Micropartícula antioxidante que compreende óleo essencial de Thymus vulgaris; óleo essencial de Ocimum gratissimum; Material de parede; e agente emulsificante, sendo que os óleos essenciais de Thymus vulgaris e de Ocimum gratissimum estão na proporção de 1:3.[022] Antioxidant microparticle comprising Thymus vulgaris essential oil; Ocimum gratissimum essential oil; Wall material; and emulsifying agent, and the essential oils of Thymus vulgaris and Ocimum gratissimum are in the proportion of 1:3.

[023] O material de parede da micropartícula antioxidante poder ser selecionado dentre alginato de cálcio; goma arábica; maltodextrina; goma de cajueiro; inulina; amido; derivados de amido; celulose; derivados de celulose; goma tragacanta; goma Karaia; goma mesquita; goma gelana; pectina; polissacarídeos de soja; polissacarídeos de leite; derivados de polissacarídeos de leite; caseína; gelatina; glúten; quitosana; ceras; ácidos graxos, preferencialmente maltodextrina.[023] The wall material of the antioxidant microparticle can be selected from calcium alginate; arabic gum; maltodextrin; cashew gum; inulin; starch; starch derivatives; cellulose; cellulose derivatives; gum tragacanth; Karaya gum; mosque gum; gellan gum; pectin; soy polysaccharides; milk polysaccharides; milk polysaccharide derivatives; casein; gelatin; gluten; chitosan; waxes; fatty acids, preferably maltodextrin.

[024] O agente emulsificante da microparticula antioxidante pode ser selecionado dentre surfactantes não iônicos, como 2-[4-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy]etanol e Polysorbate 80, preferencialmente Polysorbate 80.[024] The emulsifying agent of the antioxidant microparticle can be selected from non-ionic surfactants, such as 2-[4-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy]ethanol and Polysorbate 80, preferably Polysorbate 80.

[025] Em uma modalidade preferencial a microparticula antioxidante compreende: - 4 a 6 %, preferencialmente 5% de Óleo essencial de Thymus vulgaris em massa; - 14 a 16 %, preferencialmente 15% de Óleo essencial de Ocimum gratissimum em massa; - Maltodextrina como material de parede proporção variável de 75% a 85%, preferencialmente de 80% em massa referente aos sólidos totais; - 8 a 12%, preferencialmente 10% de Polysorbate 80 em massa em relação aos sólidos totais.[025] In a preferred embodiment, the antioxidant microparticle comprises: - 4 to 6%, preferably 5% of Thymus vulgaris essential oil by mass; - 14 to 16%, preferably 15% of Ocimum gratissimum essential oil by mass; - Maltodextrin as wall material, variable proportion from 75% to 85%, preferably 80% by mass referring to total solids; - 8 to 12%, preferably 10% of Polysorbate 80 by mass in relation to total solids.

[026] A microparticula compreende 10 a 30%, preferencialmente 20% de óleos essenciais. A associação dos óleos de Thymus vulgaris e Ocimum gratissimum compreende, pelo menos, timol; carvacrol; eugenol, sendo que a razão dos dois primeiros em relação ao último é de 1:3[026] The microparticle comprises 10 to 30%, preferably 20% of essential oils. The combination of Thymus vulgaris and Ocimum gratissimum oils comprises at least thymol; carvacrol; eugenol, the ratio of the first two to the last being 1:3

[027] O óleo de Thymus vulgaris apresenta porcentagem de timol variável entre 5 e 15%, preferencialmente 7%. Já o óleo de Ocimum gratissimum apresenta porcentagem de eugenol variável entre 40 e 60%, preferencialmente 45%.[027] Thymus vulgaris oil has a percentage of thymol varying between 5 and 15%, preferably 7%. Ocimum gratissimum oil has a percentage of eugenol varying between 40 and 60%, preferably 45%.

[028] A associação dos óleos essenciais de Thymus vulgaris e de Ocimum gratissimum apresenta porcentagem de eugenol variável entre 40 e 60%, preferencialmente 45%, porcentagem de carvacrol variável entre 2 e 10%, preferencialmente 5%, porcentagem de p-cimeno variável entre 3 e 10%, preferencialmente 8,0% porcentagem de timol variável entre 5 e 15%, preferencialmente 7,0%.[028] The association of Thymus vulgaris and Ocimum gratissimum essential oils presents a percentage of eugenol variable between 40 and 60%, preferably 45%, percentage of carvacrol variable between 2 and 10%, preferably 5%, percentage of p-cymene variable between 3 and 10%, preferably 8.0% percentage of thymol variable between 5 and 15%, preferably 7.0%.

[029] A associação dos óleos essenciais de Thymus vulgaris e de Ocimum gratissimum apresenta pelo menos 15% de timol mais carvacrol e pelo menos 45% de eugenol.[029] The combination of Thymus vulgaris and Ocimum gratissimum essential oils has at least 15% thymol plus carvacrol and at least 45% eugenol.

[030] As microparticulas, apresentam tamanho entre 1 a 100 μm e tamanho médio de 50 μm em forma esférica.[030] The microparticles have a size between 1 to 100 μm and an average size of 50 μm in a spherical shape.

[031] A composição oleosa compreende alfa-tujeno; alfa- pineno; canfeno; beta-pineno; beta-mirceno; alfa-felandreno; delta-3-careno; alfa-terpineno; p-cimeno; d-limoneno; eucaliptol; beta-z-ocimeno; gama-terpineno; hidrato de cis sabineno; terpinoleno; linalol; allo-ocimeno; cânfora; gama- terpineno; borneol; terpin-4-ol; alfa-terpineol; isobornil acetato; timol; carvacrol; alfa-cubeneno; eugenol; alfa- copaeno; beta-bourboneno; longifoleno; z-cariofileno; beta- gurjuneno; alfa-humuleno; gama-muuroleno; germacreno-D; alfa- muuroleno; gama-cadineno; delta-cadineno.[031] The oily composition comprises alpha-thujene; alpha-pinene; camphene; beta-pinene; beta-myrcene; alpha-phelandrene; delta-3-carene; alpha-terpinene; p-cymene; d-limonene; eucalyptol; beta-z-ocimene; gamma terpinene; cis sabinene hydrate; terpinolene; linalool; allo-ocimene; camphor; gamma terpinene; borneol; terpin-4-ol; alpha-terpineol; isobornyl acetate; thymol; carvacrol; alpha-cubenene; eugenol; alpha-copaene; beta-bourbonene; longifolene; z-caryophyllene; beta-gurjunene; alpha-humulene; gamma-muurolene; germacrene-D; alpha-muurolene; gamma-cadinene; delta-cadinene.

[032] A composição oleosa compreender pelo menos, timol; carvacrol e eugenol, sendo que a razão dos dois primeiros em relação ao último é de 1:3.[032] The oily composition comprises at least thymol; carvacrol and eugenol, the ratio of the former two to the latter being 1:3.

[033] Adicionalmente, é objeto da presente invenção o uso da microparticula para indústria alimenticia, farmacêutica, cosmética e por ser um sistema de proteção dos óleos essenciais de tomilho e alfavacão, uma vez que são compostos altamente voláteis, permitir a formulação de um produto com melhor proteção antioxidante, seja durante a estocagem deste produto, seja como aditivo na alimentação de animais de criação, para obter ação antioxidante na carne do animal alimentado com uma concentração mínima de 350ppm.[033] Additionally, the object of the present invention is the use of the microparticle for the food, pharmaceutical, cosmetics industry and for being a protection system for the essential oils of thyme and basil, since they are highly volatile compounds, allowing the formulation of a product with better antioxidant protection, whether during storage of this product, or as an additive in livestock feed, to obtain antioxidant action in the meat of the animal fed with a minimum concentration of 350ppm.

[034] A aplicação das microparticulas em carnes e produtos cárneos para prevenir a oxidação da carne, concentração de 350ppm a 700ppm, preferencialmente 700ppm. E a adição na alimentação animal, como na ração, para prevenir a oxidação da carne do animal alimentado é na concentração de 350 a 3500ppm, preferencialmente 3500ppm.[034] The application of microparticles in meat and meat products to prevent meat oxidation, concentration from 350ppm to 700ppm, preferably 700ppm. And the addition in animal feed, as in ration, to prevent oxidation of the meat of the fed animal is in the concentration of 350 to 3500ppm, preferably 3500ppm.

Example of implementation

[035] A Composição quimica da associação de óleos essenciais, foi determinada através das análises por CG-EM foi, antes do processo de microencapsulação (Tabela 1), e verificou- se que o composto majoritário identificado foi o eugenol (46,45%), seguido pelo carvacrol (8,40%), p-cimeno (8,18%) e timol (7,05%). A literatura relata que as plantas da familia Lamiaceae e principalmente os óleos essenciais comumente encontrados nos gêneros Thymus e Ocimum são ricos nestes compostos e com comprovada atividade antioxidante, pois possuem um ou mais grupos de hidroxila (OH) ligada ao anel aromático, insaturações e elétrons disponíveis para serem doados.Tabela 1.

[035] The chemical composition of the association of essential oils, was determined through analyzes by GC-MS, before the microencapsulation process (Table 1), and it was found that the major compound identified was eugenol (46.45% ), followed by carvacrol (8.40%), p-cymene (8.18%) and thymol (7.05%). The literature reports that plants of the Lamiaceae family and especially the essential oils commonly found in the Thymus and Ocimum genera are rich in these compounds and with proven antioxidant activity, as they have one or more hydroxyl groups (OH) attached to the aromatic ring, unsaturations and electrons. available to be donated.Table 1.

Microencapsulation of the association of essential oils

[036] Os óleos de T. vulgaris e O. gratissimum foram combinados na proporção 1:3 e submetidos a microencapsulação, para uso nos ensaios in vitro e de aplicação in vivo. Como material de parede foi utilizada maltodextrina (marca MorRex 1910® com DE 10), da Corn Products (Mogi Guaçu, SP, Brasil). Como agente emulsificante foi utilizado Polysorbate 80. As condições operacionais para a microencapsulação foram otimizadas utilizando-se um mini spray dryer, variando-se a temperatura de entrada de 180 °C ± 5 °C. 0 gás de arraste utilizado foi o N2 (RODRIGUES, 2004).[036] The oils of T. vulgaris and O. gratissimum were combined in a 1:3 ratio and subjected to microencapsulation, for use in in vitro assays and in vivo application. Maltodextrin (MorRex 1910® with DE 10) from Corn Products (Mogi Guaçu, SP, Brazil) was used as wall material. Polysorbate 80 was used as the emulsifying agent. The operating conditions for microencapsulation were optimized using a mini spray dryer, varying the inlet temperature from 180 °C ± 5 °C. The carrier gas used was N2 (RODRIGUES, 2004).

[037] Nesta etapa, 24 g de maltodextrina foi dissolvida em 70 g de água destilada com a ajuda de um Ultra Turrax (IKA T10). A associação de óleos essenciais, compreendendo um total de 6 g, no qual 1,5 g corresponde ao óleo de T. vulgaris e 4,5 g de óleo de O. gratissimum, mais 3 g do agente emulsivo (Polysorbate 80) foi adicionada à preparação e homogeneizada, totalizando 30 % de sólidos totais. Após a homogeneização, a formulação foi passada no mini spray dryer e o resultado final foram microparticulas de cor branca contendo, em média, 20 % da associação de óleos essenciais, sendo designado como OEM (óleos essenciais microencapsulados).[037] In this step, 24 g of maltodextrin was dissolved in 70 g of distilled water with the help of an Ultra Turrax (IKA T10). The association of essential oils, comprising a total of 6 g, in which 1.5 g corresponds to T. vulgaris oil and 4.5 g to O. gratissimum oil, plus 3 g of the emulsifying agent (Polysorbate 80) was added. preparation and homogenized, totaling 30% of total solids. After homogenization, the formulation was passed through the mini spray dryer and the final result was white microparticles containing, on average, 20% of the association of essential oils, being designated as OEM (microencapsulated essential oils).

Characterization of the Microencapsulation Process

[038] As microparticulas são brancas, de formato esférico, semelhantes a farinha branca e com o tamanho variado, sendo em média de 50 μm, conforme ilustrado na Figura 1. O aspecto a olho nu é uniforme e homogêneo, sendo as diferenças de tamanho percebidas apenas com o uso de microscópio eletrônico ou óptico.[038] The microparticles are white, spherical in shape, similar to white flour and of varying size, with an average of 50 μm, as illustrated in Figure 1. The appearance to the naked eye is uniform and homogeneous, with differences in size detected only with the use of an electron or optical microscope.

[039] A quantificação dos compostos fenólicos totais presentes na associação dos óleos essenciais de T. vulgaris e O. gratissimum na forma pura e microencapsulada (OEM) foi determinada pelo método colorimétrico (SINGLETON et al., 1999) utilizando o ácido gálico como padrão. A associação de óleos na forma pura (liquida) foi diluida em acetona (0,05 g de OE em ImL de acetona 99 %), enquanto a amostra de OEM foi diluida diretamente em água Milli-Q. As análises foram feitas em triplicata. A cor azul produzida na redução do reagente Folin- Ciocalteu pelos fenólicos foi medida em espectrofotômetro a 740 nm (marca Shimadzu, modelo UV mini 1240). Os resultados foram expressos em conteúdo de ácido gálico equivalente (mg GAE/100 g) ■[039] The quantification of the total phenolic compounds present in the association of the essential oils of T. vulgaris and O. gratissimum in the pure and microencapsulated form (OEM) was determined by the colorimetric method (SINGLETON et al., 1999) using gallic acid as a standard. . The combination of oils in pure (liquid) form was diluted in acetone (0.05 g of EO in ImL of 99% acetone), while the OEM sample was diluted directly in Milli-Q water. The analyzes were performed in triplicate. The blue color produced in the reduction of the Folin-Ciocalteu reagent by the phenolics was measured in a spectrophotometer at 740 nm (Shimadzu brand, UV mini 1240 model). Results were expressed as gallic acid equivalent content (mg GAE/100 g) ■

[040] A atividade antioxidante pela capacidade de absorção do radical oxigênio (ORAC), foi determinada através da quantificação do efeito de proteção de um antioxidante e/ou óleo essencial por meio da avaliação da área sob a curva de decaimento de fluorescência da amostra quando comparada com o branco (maltodextrina), ou seja, um controle sem a associação dos óleos essenciais ou outro agente antioxidante. Trolox, um análogo solúvel em água de vitamina E, foi usado como um padrão de controle antioxidante. A fluorescência foi monitorada e registada a cada 56 segundos durante aproximadamente 75 min, em Fluorimetro FloustarOptima (BMG LABTECH, Alemanha) a 37 °C e com filtro de excitação de 485 nm e de emissão de 520 ran. As análises foram feitas em triplicata. Os resultados obtidos para a associação de óleos essenciais na forma pura e microencapsulada (OEM) foram expressos como concentração de trolox equivalente/mg de amostra.[040] The antioxidant activity by oxygen radical absorption capacity (ORAC) was determined by quantifying the protective effect of an antioxidant and/or essential oil by evaluating the area under the fluorescence decay curve of the sample when compared with white (maltodextrin), that is, a control without the association of essential oils or other antioxidant agent. Trolox, a water-soluble analogue of vitamin E, was used as an antioxidant control standard. Fluorescence was monitored and recorded every 56 seconds for approximately 75 min, in a FloustarOptima Fluorimeter (BMG LABTECH, Germany) at 37 °C and with an excitation filter of 485 nm and emission of 520 ran. The analyzes were performed in triplicate. The results obtained for the association of essential oils in pure and microencapsulated form (OEM) were expressed as concentration of trolox equivalent/mg of sample.

[041] Estas análises para determinar a quantidade de fenólicos totais e a capacidade antioxidante da associação de óleos essenciais foram realizadas antes (OE liquido) e após a microencapsulação (OE microencapsulado) (Tabela 2), para verificar perdas durante o processo de microencapsulação, uma vez que a amostra liquida composta de óleos voláteis é submetida a um processo de alta temperatura, mas durante um curto periodo. Considerando a base de 100% para os valores determinados na forma liquida que foram respectivamente de 107,77 e de 986,76 para fenólicos totais e ORAC, observa-se que a proporção dos resultados na forma microencapsulada foi de 28 e 21% na matéria natural. Este valor está de acordo com a quantidade de óleo que foi incorporado à microparticula (20%) durante o processo no spray-drying, concluindo que a técnica de microencapsulação não afetou a quantidade de fenólicos e a atividade antioxidante da associação. Tabela 2, Determinação da atividade antioxidante pela capacidade de absorção do radical oxigênio (ORAC)

[041] These analyzes to determine the amount of total phenolics and the antioxidant capacity of the association of essential oils were performed before (liquid EO) and after microencapsulation (microencapsulated EO) (Table 2), to verify losses during the microencapsulation process, since the liquid sample composed of volatile oils is subjected to a high temperature process, but for a short period. Considering the basis of 100% for the values determined in the liquid form, which were respectively 107.77 and 986.76 for total phenolics and ORAC, it is observed that the proportion of results in the microencapsulated form was 28 and 21% in matter Natural. This value is in agreement with the amount of oil that was incorporated into the microparticle (20%) during the spray-drying process, concluding that the microencapsulation technique did not affect the amount of phenolics and the antioxidant activity of the association. Table 2, Determination of antioxidant activity by oxygen radical absorption capacity (ORAC)

[042] Com a associação na forma microencapsulada e com comprovada atividade antioxidante, iniciou-se o ensaio com os frangos de corte avaliando níveis crescentes de inclusão do OEM nas dietas. Foi avaliado o desempenho durante o período de 1 a 21 dias de idade (Tabela 3) e, aos 35 dias, o peso (%)do fígado em relação ao peso vivo das aves (Tabela 4).[042] With the association in the microencapsulated form and with proven antioxidant activity, the trial with broilers was started, evaluating increasing levels of inclusion of the OEM in the diets. The performance was evaluated during the period from 1 to 21 days of age (Table 3) and, at 35 days, the weight (%) of the liver in relation to the live weight of the birds (Table 4).

experimental management

[043] Foram utilizados 125 pintos de corte de 1 dia de idade da linhagem Cobb500, sendo todos machos. No primeiro dia do experimento, aves com pesos homogêneos foram alojadas em gaiolas em uma sala previamente limpa e desinfetada. As gaiolas foram alocadas em um galpão de alvenaria, sendo a temperatura ambiente ideal para as aves obtida através do manejo de cortinas, ventiladores e exaustores, de acordo com as recomendações descritas no manual para a linhagem Cobb500. O aquecimento nos primeiros dias de vida foi realizado por lâmpadas dispostas em cada gaiola.[043] 125 1-day-old broiler chicks of the Cobb500 strain were used, all males. On the first day of the experiment, birds with homogeneous weights were housed in cages in a previously cleaned and disinfected room. The cages were placed in a masonry shed, and the ideal ambient temperature for the birds was obtained through the handling of curtains, fans and exhausters, according to the recommendations described in the manual for the Cobb500 strain. Warming in the first days of life was performed by lamps placed in each cage.

[044] O período experimental foi de 35 dias, com fornecimento de água e ração à vontade para as aves. As dietas dos tratamentos, todas na forma farelada, foram compostas por milho, farelo de soja, óleo de soja e um premix vitamínico mineral para frangos de corte (F30110NB, Cargill) . Todos os macro e micro ingredientes estavam presentes na mesma quantidade entre os tratamentos, sendo a única diferença a inclusão do OEM e/ou maltodextrina, utilizada como ingrediente "inerte". A formulação das dietas buscou atender ou exceder as exigências do National Research Council - NRC (1999). As dietas experimentais foram formuladas sem a inclusão de antibióticos, coccidiostáticos, enzimas e antioxidantes, além daquele contido no premix (F30110NB, Cargill) para preservar as vitaminas da dieta.[044] The experimental period was 35 days, with ad libitum supply of water and feed for the birds. The treatment diets, all in the mash form, were composed of corn, soybean meal, soybean oil and a mineral vitamin premix for broilers (F30110NB, Cargill). All macro and micro ingredients were present in the same amount between treatments, the only difference being the inclusion of OEM and/or maltodextrin, used as an "inert" ingredient. The formulation of the diets sought to meet or exceed the requirements of the National Research Council - NRC (1999). Experimental diets were formulated without the inclusion of antibiotics, coccidiostats, enzymes and antioxidants, in addition to that contained in the premix (F30110NB, Cargill) to preserve dietary vitamins.

[045] Os tratamentos, com niveis crescentes de inclusão da associação de óleo essencial microencapsulado (OEM) foram designados como: Tl- Dieta controle negativo (sem inclusão de OEM; T2- Dieta com inclusão de 350 ppm de OEM (correspondente a 70 ppm da associação pura); T3- Dieta com inclusão de 700 ppm de OEM ( (correspondente a 140 ppm da associação pura) ; T4- Dieta com inclusão de 3500 ppm de OEM (correspondente a 700 ppm da associação pura), conforme pode ser verificado nas tabelas 3 e 4 .Tabela 3. Peso corporal das aves (PM) aos 21 dias, consumo de ração (CR), ganho de peso (GP) e conversão alimentar (CA) no periodo de 1 a 21 dias de idade.

[045] The treatments, with increasing levels of inclusion of the association of microencapsulated essential oil (OEM) were designated as: Tl- Negative control diet (without inclusion of OEM; T2- Diet with inclusion of 350 ppm of OEM (corresponding to 70 ppm of the pure association); T3- Diet with inclusion of 700 ppm of OEM ((corresponding to 140 ppm of the pure association); T4- Diet with inclusion of 3500 ppm of OEM (corresponding to 700 ppm of the pure association), as can be seen in tables 3 and 4. Table 3. Body weight of birds (BW) at 21 days, feed intake (CR), weight gain (GP) and feed conversion (CA) in the period from 1 to 21 days of age.

[046] No periodo entre 1 e 21 dias de idade, os tratamentos foram distribuídos em um delineamento em blocos casualizados (cada bateria de gaiolas será um bloco), sendo as gaiolas consideradas as unidades experimentais. Cada tratamento foi composto por quatro repetições de seis aves cada, totalizando 24 aves/tratamento. De 21 a 35 dias, cada ave foi considerada uma unidade experimental (repetição), sendo oito aves/ tratamento.[046] In the period between 1 and 21 days of age, the treatments were distributed in a randomized block design (each battery of cages will be a block), with the cages considered the experimental units. Each treatment consisted of four replicates of six birds each, totaling 24 birds/treatment. From 21 to 35 days, each bird was considered an experimental unit (replication), with eight birds/treatment.

[047] Ao final do experimento (35 dias de idade) todas as aves de cada tratamento foram abatidas por deslocamento cervical, para determinação do tamanho de fígado. Após pesagem, cada ave foi desossada e retiradas a pele e cartilagem. Antes de serem embalados foram colocados em um balde com gelo (chiller), identificados e armazenados em câmara fria à -20°C por 24 h. Após este periodo, foi realizada análise de pH com o objetivo primário de verificar se houve alguma alteração do tipo DFD (do inglês dark, firm and dried) ou PSE (palid, soft, exudative) nas carnes. As peças que apresentaram alguma destas alterações não foram utilizadas no ensaio de vida de prateleira. As medições de pH foram determinadas pela leitura direta em pHmetro digital previamente calibrado com soluções tampão de pH 4,0 e 7,0, através da introdução do eletrodo ao músculo (IAL, 2008). Foram tomados seis pontos diferentes de leitura por amostra e considerada a média. A seguir, as partes de peito e sobrecoxa foram congeladas à -20°C e armazenadas a vácuo em sacos plásticos com baixa permeabilidade ao oxigênio e devidamente identificados até realização das análises posteriores.Tabela 4. Peso relativo ao peso corporal (%) de fígado das aves aos 35 dias de idade.

[047] At the end of the experiment (35 days of age) all birds of each treatment were slaughtered by cervical dislocation to determine liver size. After weighing, each bird was deboned and the skin and cartilage removed. Before being packed, they were placed in a bucket with ice (chiller), identified and stored in a cold chamber at -20°C for 24 h. After this period, a pH analysis was performed with the primary objective of verifying whether there were any DFD (dark, firm and dried) or PSE (palid, soft, exudative) changes in the meats. Parts that showed any of these changes were not used in the shelf life test. The pH measurements were determined by direct reading in a digital pHmeter previously calibrated with buffer solutions of pH 4.0 and 7.0, through the introduction of the electrode to the muscle (IAL, 2008). Six different reading points were taken per sample and the average was considered. Next, the breast and thigh parts were frozen at -20°C and stored under vacuum in plastic bags with low oxygen permeability and duly identified until further analysis was performed.Table 4. Weight relative to body weight (%) of liver of birds at 35 days of age.

[048] O desempenho não foi afetado significativamente (P>0,05) pelos diferentes níveis de inclusão de OEM na dieta dos frangos de corte (Tabela 3). Neste experimento, em que o objetivo central foi o de avaliar a vida de prateleira da carne destas aves, a análise do desempenho visou justamente verificar se não haveria prejuízos, principalmente com relação ao consumo de ração. Um dos motivos para microencapsular a associação de óleos essenciais foi o de amenizar alguns efeitos organolépticos que são exacerbados nestas substâncias e podem, de alguma forma, interferir no consumo dos produtos a que são misturados, no caso a ração. O consumo de ração foi muito semelhante entre os diferentes tratamentos, indicando que não houve qualquer tipo de interferência na adição dos OEM na dieta das aves e sendo um ponto positivo na avaliação desta categoria de aditivo.[048] Performance was not significantly affected (P>0.05) by different levels of OE inclusion in the broiler diet (Table 3). In this experiment, in which the main objective was to evaluate the shelf life of the meat of these birds, the performance analysis aimed precisely to verify that there would be no damages, mainly in relation to feed consumption. One of the reasons for microencapsulating the association of essential oils was to alleviate some organoleptic effects that are exacerbated in these substances and can, in some way, interfere with the consumption of the products to which they are mixed, in this case the feed. Feed consumption was very similar between the different treatments, indicating that there was no interference in the addition of OEM to the birds' diet and being a positive point in the evaluation of this category of additive.

[049] A porcentagem de fígado das aves foi afetada significativamente (P<0,05) pela inclusão de níveis de OEM em suas dietas (Tabela 4) . As aves do tratamento que receberam o maior nível de inclusão de OEM (3500 ppm) foram as que apresentaram o maior fígado em relação ao peso vivo (P<0,05). Esta análise de figado teve como objetivo verificar algum estímulo relacionado à produção de enzimas hepáticas quando da ingestão dos óleos essenciais. Apesar da maior % de fígado das aves do tratamento T4, quando se compara com aquelas do tratamento TI (Controle) a diferença não foi significativa, inferindo que a diferença não foi devido à presença da associação de óleos essenciais no organismo das aves.[049] The liver percentage of birds was significantly (P<0.05) affected by the inclusion of OEM levels in their diets (Table 4). The birds in the treatment that received the highest level of OE inclusion (3500 ppm) were those that presented the largest liver in relation to live weight (P<0.05). This liver analysis aimed to verify any stimulus related to the production of liver enzymes when ingesting essential oils. Despite the higher % of liver of birds in the T4 treatment, when compared to those in the treatment TI (Control), the difference was not significant, inferring that the difference was not due to the presence of the association of essential oils in the body of the birds.

Effect of OEM inclusion in chicken feed on lipid oxidation of chicken meat (breast meatballs and drumstick) after thermal processing and refrigerated storage

[050] As amostras de carne (peito e sobrecoxa) sem osso e sem pele foram descongeladas durante uma noite sob refrigeração à 4°C. Em seguida, toda gordura aparente foi retirada e as partes moidas conjuntamente em moedor de carne (Myralux, 1200 W) , sendo formado por tratamento um pool de peito e outro de sobrecoxa. Em média foi obtido um total de 5,0 kg de peito e 3,5 kg de sobrecoxa para cada tratamento.[050] The boneless and skinless meat samples (breast and drumstick) were thawed overnight under refrigeration at 4°C. Then, all the apparent fat was removed and the parts ground together in a meat grinder (Myralux, 1200 W), forming a pool of breast and another of thigh. On average, a total of 5.0 kg of breast and 3.5 kg of drumstick was obtained for each treatment.

[051] Para todos os tratamentos foram adicionados 0,5% de cloreto de sódio à massa cárnea que foi homogeneizada e pesada em porções de 30±l g de carne, e em seguida moldadas no formato de almôndegas. As almôndegas foram embaladas em saco de polietileno com baixa permeabilidade ao oxigênio e cozidas em água fervente a 100°C durante 8 min, de acordo com Racanicci et al. (2004). Em seguida foram resfriadas em água com gelo, reensacadas em sacos de polietileno com alta permeabilidade ao 02 e estocadas no escuro em câmara fria a 4±1°C. Cada saco foi identificado e composto por almôndegas referentes aos tratamentos experimentais.[051] For all treatments, 0.5% sodium chloride was added to the meat mass, which was homogenized and weighed in portions of 30±l g of meat, and then molded into the shape of meatballs. The meatballs were packed in a polyethylene bag with low oxygen permeability and cooked in boiling water at 100°C for 8 min, according to Racanicci et al. (2004). Then they were cooled in ice water, re-bagged in polyethylene bags with high permeability to 02 and stored in the dark in a cold chamber at 4±1°C. Each bag was identified and composed of meatballs referring to the experimental treatments.

[052] Para o ensaio de inclusão dos OEM na dieta das aves, as almôndegas foram avaliadas quanto à oxidação lipidica pelo teste de TBARS, após os períodos de 0, 2, 4 e 7 dias. Foram analisadas 6 almondegas/dia/tratamento.[052] For the trial of OEM inclusion in the birds' diet, the meatballs were evaluated for lipid oxidation by the TBARS test, after periods of 0, 2, 4 and 7 days. Six meatballs/day/treatment were analyzed.

[053] Do pool proveniente das aves do tratamento Tl (controle - sem adição de qualquer aditivo antioxidante), foi retirado um total de 2 kg de massa de peito e 1 kg de sobrecoxa para o ensaio de incorporação do OEM diretamente na carne de frango, conforme descrito a seguir: Ensaio com o peito: Para a carne de peito foram aplicados os seguintes tratamentos: Tl- tratamento controle (sem adição de qualquer aditivo antioxidante); T2- tratamento com adição de 150 ppm de BHT (99,9 %); T3- tratamento com a adição de 700 ppm de OEM (correspondente a 140 ppm da associação pura); T4- tratamento com a adição de 350 ppm de OEM (correspondente a 70 ppm de associação pura). As análises referentes à oxidação lipídica foram realizadas com a carne crua e logo após o cozimento, sendo analisadas 4 almôndegas/tratamento. Ensaio com a sobrecoxa: Para a carne de sobrecoxa foram aplicados os seguintes tratamentos: Tl- tratamento controle (sem adição de qualquer aditivo antioxidante); T2- tratamento com adição de 150 ppm de BHT (99,9 %); T3- tratamento com a adição de 700 ppm de OEM (correspondente a 140 ppm da associação pura). As análises referentes a oxidação lipídica foram realizadas com a carne crua e logo após o cozimento, sendo analisadas 4 almôndegas/tratamento.[053] From the pool from the birds of the Tl treatment (control - without addition of any antioxidant additive), a total of 2 kg of breast mass and 1 kg of drumstick were removed for the trial of incorporation of the OEM directly into the chicken meat , as described below: Test with the breast: For the breast meat, the following treatments were applied: Tl- control treatment (without the addition of any antioxidant additive); T2- treatment with the addition of 150 ppm of BHT (99.9%); T3- treatment with the addition of 700 ppm of OEM (corresponding to 140 ppm of the pure association); T4- treatment with the addition of 350 ppm of OEM (corresponding to 70 ppm of pure association). The analyzes regarding lipid oxidation were performed with the raw meat and immediately after cooking, being analyzed 4 meatballs/treatment. Test with drumstick: For drumstick meat, the following treatments were applied: Tl- control treatment (without the addition of any antioxidant additive); T2- treatment with the addition of 150 ppm of BHT (99.9%); T3- treatment with the addition of 700 ppm of OEM (corresponding to 140 ppm of pure association). The analyzes referring to lipid oxidation were performed with the raw meat and immediately after cooking, being analyzed 4 meatballs/treatment.

Lipid oxidation - TBARS analysis

[054] As amostras de carne de peito e sobrecoxa foram submetidas à avaliação de estabilidade oxidativa através da reação com o ácido 2- tiobarbitúrico (TBARS). A metodologia foi realizada de acordo com Vyncke (1970), com algumas modificações (SORENSEN; J0RGENSEN, 1996. As amostras de 5 g de carne foram pesadas, acrescidas de 15 mL de solução contendo 7,5 % de ácido tricloroacético (TCA) , 0,1 % de propil gaiato (GP) e 0,1 % de ácido etilenodiamino tetra-cético (EDTA). Após homogeneização em Ultra-Turrax por 45 segundos a 13.500 rpm, os aldeídos foram extraídos com TCA, diluídos com EDTA (agente quelante) e GP (antioxidante), a fim de evitar a oxidação das gorduras durante a extração. Após este procedimento, foram adicionados 5 mL do reagente TBA (0,02 M) , sendo o valor de TBARS determinado por espectrofotometria nos comprimentos de onda de 532 e 600 nm, e os valores expressos como malonaldeido (μmol/kg de amostra de carne).[054] The samples of breast meat and drumstick were subjected to evaluation of oxidative stability through the reaction with 2-thiobarbituric acid (TBARS). The methodology was carried out according to Vyncke (1970), with some modifications (SORENSEN; J0RGENSEN, 1996. The 5 g meat samples were weighed, plus 15 mL of solution containing 7.5% trichloroacetic acid (TCA), 0.1% propyl gallate (GP) and 0.1% ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) After homogenization in Ultra-Turrax for 45 seconds at 13,500 rpm, the aldehydes were extracted with TCA, diluted with EDTA ( chelating agent) and GP (antioxidant), in order to avoid fat oxidation during extraction. After this procedure, 5 mL of TBA reagent (0.02 M) were added, and the TBARS value was determined by spectrophotometry at wavelengths of 532 and 600 nm, and the values expressed as malonaldehyde (μmol/kg of meat sample).

[055] O armazenamento sob refrigeração durou 7 dias e foi utilizado um filme plástico permeável ao oxigênio para embalar as almôndegas e simular condições mais extremas. A oxidação lipidica foi desenvolvida durante os dias em todos os tratamentos como pode ser observado nos altos níveis de TBARS tanto na carne de peito (Figura 2) como na carne de sobrecoxa (Figura 3) . Portanto, este aumento se aplica principalmente à carne escura (coxa e sobrecoxa), por apresentarem maiores concentrações de ácidos graxos poli-insaturados em relação à carne branca (peito) (JENSEN, et al., 1997).[055] The refrigerated storage lasted 7 days and an oxygen permeable plastic film was used to package the meatballs and simulate more extreme conditions. Lipid oxidation was developed during the days in all treatments as can be seen in the high levels of TBARS in both breast meat (Figure 2) and thigh meat (Figure 3). Therefore, this increase applies mainly to dark meat (thigh and drumstick), as they present higher concentrations of polyunsaturated fatty acids in relation to white meat (breast) (JENSEN, et al., 1997).

[056] As almôndegas de peito (Figura 2) de frangos alimentados com níveis de OEM não controlaram a oxidação lipidica em comparação ao grupo controle (0), pelo contrário, o nível de inclusão de 350 ppm nas dietas piorou de forma significativa a produção de malonaldeido (MDA) (P<0,05). Este resultado não condiz com aqueles observados nas almôndegas de sobrecoxa (Figura 3). A carne de sobrecoxa possui três vezes mais gordura do que a carne de peito (Bragagnolo, 2001) e este é um indício de uma ação mais evidente da ingestão dos óleos essenciais no músculo dos animais. Nas almôndegas de sobrecoxa (Figura 3), a partir de 2 dias de refrigeração o tratamento em que as aves consumiram o maior nível de OEM (3500 ppm) diferiu estatisticamente do grupo controle, que apresentou o pior resultado entre os grupos (P<0,05).[056] Breast meatballs (Figure 2) from broilers fed OEM levels did not control lipid oxidation compared to the control group (0), on the contrary, the inclusion level of 350 ppm in the diets significantly worsened production of malonaldehyde (MDA) (P<0.05). This result is not consistent with those observed in thigh meatballs (Figure 3). Thigh meat has three times more fat than breast meat (Bragagnolo, 2001) and this is an indication of a more evident action of the ingestion of essential oils in the muscles of animals. In the thigh meatballs (Figure 3), after 2 days of refrigeration, the treatment in which the birds consumed the highest level of OEM (3500 ppm) differed statistically from the control group, which presented the worst result between the groups (P<0 .05).

[057] Os valores médios de malonaldeido (MDA) obtidos durante todo o período de refrigeração (7 dias) estão indicados nas Figura 4 (almôndegas de peito) e Figura 5 (almôndegas de sobrecoxa). Estes resultados demonstram claramente a não efetividade dos óleos essenciais em carne com menor teor de gordura (peito), havendo diferenças significativas no periodo acumulado apenas entre o grupo controle (0) e aqueles suplementados com 350 ppm de OEM na ração, que apresentou o pior resultado (PC0.05). Em contrapartida, ficou evidente quando se avaliou as almôndegas de sobrecoxa (Figura 5), que a carne das aves alimentadas com o maior nivel de OEM em suas dietas (3500 ppm) apresentou um melhor controle na formação de produtos de oxidação quando comparado ao grupo controle (P<0,05). Os tratamentos com niveis intermediários de OEM demonstraram valores intermediários de TBARS, podendo também serem considerados como medida preventiva de controle de oxidação lipidica.[057] The average values of malonaldehyde (MDA) obtained during the entire refrigeration period (7 days) are shown in Figure 4 (breast meatballs) and Figure 5 (thigh meatballs). These results clearly demonstrate the non-effectiveness of essential oils in meat with lower fat content (breast), with significant differences in the accumulated period only between the control group (0) and those supplemented with 350 ppm of OEM in the ration, which presented the worst result (PC0.05). On the other hand, it was evident when the thigh meatballs were evaluated (Figure 5), that the meat from birds fed with the highest level of OEM in their diets (3500 ppm) showed better control in the formation of oxidation products when compared to the group control (P<0.05). Treatments with intermediate levels of OEM showed intermediate values of TBARS, which can also be considered as a preventive measure to control lipid oxidation.

Direct incorporation into meat of OEM levels on lipid oxidation before and after thermal processing

[058] As carnes provenientes de aves do grupo controle (sem inclusão de aditivo antioxidante) foram separadas e homogeneizadas em partes iguais para a incorporação dos tratamentos experimentais. Antes de serem submetidas ao tratamento térmico foi retirada uma amostra que representou o tratamento da carne crua.[058] Meat from birds of the control group (without inclusion of antioxidant additive) were separated and homogenized in equal parts for the incorporation of experimental treatments. Before being subjected to heat treatment, a sample was taken that represented the treatment of raw meat.

[059] Como observado para as almôndegas de carne de peito (Figura 6) e de sobrecoxa (Figura 7) o processamento térmico de forma geral aumentou os niveis de malonaldeído na carne, comparação de cada tratamento pós-processamento térmico em relação ao tratamento da carne não processada termicamente - esta diferença é sinalizada pelo entre os tratamentos. Isto indica que as etapas de processamento de carnes, tais como moagem e cozimento favorecem as condições para o desenvolvimento de produtos de oxidação (MITSUMOTO et al., 2005). Sheehy et al. (1993) relataram que o cozimento aumentou a oxidação lipidica em tecidos musculares de frango de 4-10 vezes, comparados com tecidos crus. Entretanto, na carne de peito (Figura 6) os grupos com a inclusão de BHT e 350 ppm de OEM foram eficientes em conter os processos oxidativos permanecendo com os niveis de TBARS sem diferença significativa quando comparado ao grupo da carne crua, ou seja, antes de passar por processamento térmico (P>0,05). Para a carne de sobrecoxa (Figura 7) que apresenta um maior teor de gorduras, apenas o tratamento com OEM (700 ppm)e não o tratamento com BHT, foi capaz de inibir o processo de oxidação causado pelo aquecimento, não diferindo dos valores da carne crua (P>0,05).Desta forma, como conclusão para o impacto do aquecimento térmico nos niveis de TBARS, a adição de 350 ppm de OEM na carne foi eficiente em conter o processo oxidativo acentuado por este fenômeno na carne de peito e, para carne de sobrecoxa, foi o nivel de 700 ppm de OEM.[059] As observed for breast meat (Figure 6) and drumstick (Figure 7) meatballs, thermal processing generally increased maloaldehyde levels in the meat, comparing each post-processing thermal treatment in relation to the meat treatment. meat not processed thermally - this difference is signaled by the between treatments. This indicates that the meat processing steps, such as grinding and cooking, favor the conditions for the development of oxidation products (MITSUMOTO et al., 2005). Sheehy et al. (1993) reported that cooking increased lipid oxidation in chicken muscle tissue by 4-10 times compared to raw tissue. However, in breast meat (Figure 6) the groups with the inclusion of BHT and 350 ppm of OEM were efficient in containing the oxidative processes, remaining with the TBARS levels without significant difference when compared to the raw meat group, that is, before to undergo thermal processing (P>0.05). For thigh meat (Figure 7) which has a higher fat content, only the treatment with OEM (700 ppm) and not the treatment with BHT was able to inhibit the oxidation process caused by heating, not differing from the values of raw meat (P>0.05). Thus, as a conclusion for the impact of thermal heating on TBARS levels, the addition of 350 ppm of OEM in the meat was efficient in containing the oxidative process accentuated by this phenomenon in the breast meat. and, for thigh meat, it was the 700 ppm OEM level.

[060] Na comparação entre todos os tratamentos logo após o processamento térmico, tanto na carne de peito (Figura 6) como na carne de sobrecoxa (Figura 7), aqueles com a inclusão de algum aditivo (BHT ou OEM) foram eficientes em conter os processos oxidativos quando comparado ao grupo Controle (sem inclusão de aditivo) (P<0,05), comparação entre os tratamentos pós- processamento térmico, sinalizado pelas diferentes letras "A, B, C"- significam diferença entre os tratamentos. Um destaque se faz para a inclusão de 700 ppm de OEM na fabricação das almôndegas de sobrecoxa, já que os niveis de malonaldeido ficaram abaixo daqueles produzidos pelo tratamento com BHT. Importante lembrar, que o total de óleos essenciais presentes na microparticula gira ao redor de 20%, ou seja, na quantidade de 140 ppm neste nivel de 700 ppm de inclusão.[060] Comparing all treatments right after thermal processing, both in breast meat (Figure 6) and in thigh meat (Figure 7), those with the inclusion of some additive (BHT or OEM) were efficient in containing the oxidative processes when compared to the Control group (without inclusion of additive) (P<0.05), comparison between the post-thermal processing treatments, signaled by the different letters "A, B, C"- means difference between the treatments. A highlight is the inclusion of 700 ppm of OEM in the manufacture of drumstick meatballs, as the malondialdehyde levels were below those produced by the BHT treatment. It is important to remember that the total amount of essential oils present in the microparticle is around 20%, that is, in the amount of 140 ppm at this level of 700 ppm of inclusion.

[061] A associação de óleos essenciais de T. vulgaris e O. gratissimum na forma microencapsulada se mostrou efetiva em conter os processos oxidativos da carne de frango, quando misturadas à raçao das aves. Neste caso, tais efeitos foram observados para a carne das aves alimentadas com o maior nivel de inclusão (3500 ppm), em almôndegas de sobrecoxa submetidas a tratamento térmico.[061] The association of essential oils of T. vulgaris and O. gratissimum in the microencapsulated form proved to be effective in containing the oxidative processes of chicken meat, when mixed with poultry. In this case, such effects were observed for meat from birds fed with the highest inclusion level (3500 ppm) in drumstick meatballs submitted to heat treatment.

[062] A associação de óleos essenciais microencapsulados quando incorporada nos niveis de 350 ppm e 700 ppm diretamente na carne de frango, foram efetivos em conter os processos oxidativos em relação ao controle, nas almôndegas de peito e sobrecoxa, além do nivel de 700 ppm de OE ser mais eficiente que o antioxidante sintético (BHT) nas almôndegas de sobrecoxa.[062] The association of microencapsulated essential oils when incorporated at levels of 350 ppm and 700 ppm directly in chicken meat, were effective in containing the oxidative processes in relation to the control, in breast and drumstick meatballs, in addition to the level of 700 ppm of EO to be more efficient than the synthetic antioxidant (BHT) in drumstick meatballs.

Claims

1. Antioxidant microparticle characterized by comprising - Thymus vulgaris essential oil; - Ocimum gratissimum essential oil; - Wall material; and - Emulsifying agent. Thymus vulgaris and Ocimum gratissimum essential oils are in a 1:3 ratio.

2. Antioxidant microparticle according to claim 1, characterized in that it comprises: - 4 to 6%, preferably 5%, of Thymus vulgaris essential oil by mass in relation to total solids; - 14 to 16%, preferably 15% of Ocimum gratissimum essential oil by mass in relation to total solids; - Wall material; and - Emulsifying agent.

3. Antioxidant microparticle according to any of claims 1 or 2, characterized in that the wall material can be selected from calcium alginate; arabic gum; maltodextrin; cashew gum; inulin; starch; starch derivatives; cellulose; cellulose derivatives; gum tragacanth; Karaya gum; mosque gum; gellan gum; pectin; soy polysaccharides; milk polysaccharides; milk polysaccharide derivatives; casein; gelatin; gluten; chitosan; waxes; fatty acids, preferably maltodextrin.

4. Antioxidant microparticle according to any of claims 1 or 2, characterized in that the emulsifying agent can be selected from non-ionic surfactants; 2-[4-(2,4,4-trimethylpentane-2-yl)phenoxy]ethanol; Polysorbate 80, preferably Polysorbate 80.

5. Antioxidant microparticle characterized by comprising: - Maltodextrin as a wall material, variable proportion from 75% to 85%, preferably 80% by mass referring to total solids; - 4% to 6%, preferably 5% of Thymus vulgaris Essential Oil by mass referring to total solids; - 14% to 16%, preferably 15% of Ocimum gratissimum essential oil by mass referring to total solids; - 8 to 12%, preferably 10% of Polysorbate 80 by mass in relation to the total solids.

6. Microparticle according to any one of claims 1, 2 or 5, characterized in that it comprises 10 to 30%, preferably 20%, of essential oils.

7. Microparticle, according to any of claims 1, 2 or 5, characterized by the association of Thymus vulgaris and Ocimum gratissimum oils comprising thymol; carvacrol; eugenol, the ratio of the first two to the last being 1:3

8. Microparticle, according to any of claims 1, 2 or 5, characterized in that the Thymus vulgaris oil presents a percentage of thymol varying between 5 and 15%, preferably 7%.

9. Microparticle, according to any of claims 1, 2 or 5, characterized in that Ocimum gratissimum oil presents a percentage of eugenol varying between 40 and 60%, preferably 45%.

10. Microparticle, according to any of claims 1, 2 or 5, characterized by the association of the essential oils of Thymus vulgaris and Ocimum gratissimum presenting a percentage of eugenol varying between 40 and 60%, preferably 45%, a percentage of carvacrol varying between 2 and 10%, preferably 5%, percentage of p-cymene varying between 3 and 10%, preferably 8.0% percentage of thymol varying between 5 and 15%, preferably 7.0%.

11. Microparticle, according to any of claims 1, 2 or 5, characterized by the association of Thymus vulgaris and Ocimum gratissimum essential oils present 15% thymol plus carvacrol and 45% eugenol.

12. Microparticle, according to any of claims 1, 2 or 5, characterized in that it has a size between 1 to 100 μm and an average size of 50 μm in spherical shape.

13. Antioxidant microparticle characterized by comprising: - Maltodextrin as a wall material in a variable proportion from 75 to 85%, preferably 80% in relation to the total solids; - Polysorbate 80 as an emulsifying agent in a variable proportion from 8% to 12%, preferably 10% in relation to total solids; and - Oily composition comprising alpha-thujene; alpha-pinene; camphene; beta-pinene; beta-myrcene; alpha-phelandrene; delta-3-carene; alpha-terpinene; p-cymene; d-limonene; eucalyptol; beta-z-ocimene; gamma terpinene; cis sabinene hydrate; terpinolene; linalool; allo-ocimene; camphor; gamma terpinene; borneol; terpin-4-ol; alpha-terpineol; isobornyl acetate; thymol; carvacrol; alpha-cubenene; eugenol; alpha-copaene; beta-bourbonene; longifolene; z-caryophyllene; beta-gurjunene; alpha-humulene; gamma-muurolene; germacrene-D; alpha-muurolene; gamma-cadinene; delta-cadinene.

A microparticle according to claim 13, characterized in that the oily composition comprises thymol; carvacrol and eugenol, the ratio of the former two to the latter being 1:3.

15. Use of the microparticle, as defined in claims 1 to 14, characterized by having application in the food, pharmaceutical and cosmetics industry with antioxidant action for product storage;

16. Use of the microparticle, as defined in claims 1 to 14, characterized in that it has application as an additive in animal feed to obtain antioxidant action in the meat of the fed animal.

17. Use of the microparticle, as defined in claims 1 to 16, characterized in that it has application in meat and meat products to prevent meat oxidation.

18. Food composition characterized in that it comprises meat products and the microparticle, as defined in claims 1 to 14.

19. Food composition, according to claim 18, characterized in that the microparticle is comprised in the range of 350 ppm to 700 ppm, preferably 700 ppm.

20. Food composition, according to claim 18, characterized in that the microparticle is comprised in the range of 350 ppm to 3500ppm, preferably 3500ppm.