"4-carbamoyloxy-oxazaphosphorines, procédé pour leur fabrication et préparations pharmaceutiques contenant celles-ci" "4-carbamoyloxy-oxazaphosphorines, procédé pour leur fabrication et préparations pharmaceutiques contenant celles-ci"
D'après les demandes de brevets n[deg.] 2.231.31.1 et n[deg.] 2.522.135 publiées en République fédérale d'Allemagne, on sait qu'en introduisant un groupe hydroperoxy -OOH dans la position quatre de la molécule des cytostatiques connus :
<EMI ID=1.1>
(ifosfamide), 3-(2-chloréthylamino)-2-(2'-méthanésulfonyléthylamino)-2-oxo-trétrahydro-2H-1,3,2-oxazaphosphorine
(sufosfamide) et d'autres cyclophosphamides d'une formule développée similaire, il est possible de créer des composés présentant des propriétés cytostatiques précieuses; mais, ces composés possèdent une stabilité tellement faible que leur transformation en préparations pharmaceutiques, tel que ceci est nécessaire dans la médecine des hommes, n'est pas possible. Le but de la présente invention consiste donc à créer des cyclophosphamides substitués dans la position 4 par un groupe hydroxy transformé ultérieurement et qui se distinguent par une haute activité cytostatique et une stabilité améliorée.
La présente invention concerne de nouvelles 4-carbamoyloxyoxazaphosphorines répondant à la formule générale I
<EMI ID=2.1>
<EMI ID=3.1>
les uns des autres, représentent un hydrogène, un méthyle, un éthyle, un 2-chloréthyle ou un 2-méthanesulfonyloxyéthyle, les
<EMI ID=4.1>
benzyle, ou un alkyle à chaîne droite ou ramifiée comprenant
1 à 18 atomes de carbone, le groupe alkyle pouvant être substitué par 1 à 3 substituants égaux ou différents les uns des autres et provenant du groupe comprenant -OH, un -halogène,
-COOH, -COOR , -CONH2, un phényle, le groupe benzyloxycarbonyle, <EMI ID=5.1>
carboxy dans la partie phényle et/ou alkyle du groupe, un groupe allyle ou un cycloalkyle à 3 à 8 atomes de carbone ou un tétrahydrofuranyle ou un tétrahydropyranyle ou un phényle qui peut être non substitué ou substitué une ou deux fois par
<EMI ID=6.1>
conjointement avec les atomes auxquels ils sont liés, sont un constituant d'un système cyclique hétérocyclique saturé qui peut contenir supplémentairement un atome d'oxygène, un atome d'azote substitué par un alkyle-inférieur ou un ato-
<EMI ID=7.1>
d'un noyau d'aziridine non substitué ou substitué par un cyano ou un carbamoyle.
En raison de leurs propriétés particulièrement favorables
et de leur possibilité d'obtention aisée, on préfère ici
les 4-carbomoyloxy-oxazaphosphorines de la formule générale
<EMI ID=8.1>
7
<EMI ID=9.1>
hydrogène ou un alkyle à chaîne droite ou ramifiée de 1 à
18 atomes de carbone, un phényle ou un benzyle.
Un autre groupe de composés préférés de la formule I est
<EMI ID=10.1>
être égaux ou différents les uns des autres, sont un hydro-
<EMI ID=11.1>
<EMI ID=12.1>
n'est pas substitué ou est substitué par un ou deux groupes carboxy, le cas échéant un alkyle en C,-C. substitué éventuellement par 1 ou 2 groupes carboxy ou un phényle alkyle en
<EMI ID=13.1>
dans la partie phényle et/ou alkyle du groupe.
Les 4-carbamoyloxy-oxazaphosphorines conformes à l'invention et répondant à la formule générale I sont obtenues, selon l'invention, et ce qu'on met à réagir une 4-hydroxy- ou 4méthoxy- ou 4-éthoxy-oxazaphosphorine de la formule générale II
<EMI ID=14.1>
<EMI ID=15.1>
mule I et Y est un hydrogène, un méthyle ou un éthyle, avec un dérivé d'un hydroxy-carbamate de la formule générale III
<EMI ID=16.1>
où Z et X ont la même signification qu'à la formule I, en présence d'un solvant inerte, le cas échéant par refroidissement ou réchauffement et/ou éventuellement en présence d'un catalyseur acide.
Comme solvants appropriés, entrent en considération de l'eau, des halogènures d'alcoyle inférieurs tels que, en particulier, du chlorure de méthylène, des alkylcétones inférieures, à savoir en particulier de l'acétone, du diéthyléther, du diméthylformamide, du triamide d'acide hexaméthylphosphorique ou des solvants semblables, voire des mélanges de plusieurs de ces solvants. La réaction est réalisée à des températures de l'ordre de -35[deg.]C à +50[deg.]C, c'est-à-dire le cas échéant par refroidissement, à la température ambiante ou par réchauffement. La réaction peut être réalisée en présence d'un catalyseur acide tel qu'un acide inorganique, soit l'acide trichloracétique, l'acide triflurométhane-sulfonique, l'acide
<EMI ID=17.1>
Un autre procédé de fabrication des composés de la formule
R
<EMI ID=18.1>
réagir un oxyme de la formule générale IV
<EMI ID=19.1>
<EMI ID=20.1> <EMI ID=21.1>
<EMI ID=22.1>
<EMI ID=23.1>
Le processus réactionnel peut être suivi, conformément au procédé de l'invention, à l'aide d'un chromatograp'.iie en couche mince. L'isolement des substances homogènes par la chromatographie en couches minces est établi par un procédé d'examen usuel de ces produits, en particulier par cristallisation ou purification chromatographique..La garantie de la structure se fait par le point de fusion, la chromatrographie en couche mince, l'analyse élémentaire et/ou l'analyse spectrale aux infrarouges et par le spectre de résonance
<EMI ID=24.1>
Les composés utilisés comme matières premières dans le procédé conforme à l'invention sont largement connus, peuvent être employés à l'état cristallin ou comme produits bruts et peuvent être synthétisés comme suit d'une manière connue en soi.
Les 4-hydroxy-oxazaphosphorines sont obtenues par réduction des dérivés du 4-hydroperoxy (par exemple, A. Takamizawa et autres, J. Med. Chem., 18, 376, 1975). Les 4-méthoxy- ou 4éthoxy-oxazaphosphorines se forment par catalyse acide à partir des dérivés du 4-hydroxy dans du méthanol ou de l'éthanol ou dans des solvants inertes qui contiennent du méthanol et de l'éthanol. Les dérivés de l'hydroxy-urée sont fabriqués par la réaction des chlorures de l'acide carbamique ou des isocyanates substitués d'une manière correspondante avec une hydroxylamine ou des hydroxylamines N-monosubstituées. Pareillement, les esters de l'acide hydroxy-carbamique (hydroxycarbamate) peuvent être produits par la réaction des esters de l'acide chlorocarbonique avec une hydroxylamine ou des hydroxulamines N-mono substituées.
Pour la synthèse des esters de l'acide hydroxy-urée-carbamique ou N-hydroxy-carbami-
<EMI ID=25.1>
plémentaire, une voie de synthèse avec un groupe de protection est recommandable.
Les oxymes de la formule IV sont préparables selon diverses voies de synthèse. Ainsi, elles peuvent être obtenues par la réaction des 4-hydroxy-oxazaphosphorinès correspondantes avec.une hydroxylamine ou des sels d'hydroxylamine. La valeur pH doit être maintenue autant que possible entre 2 et
7. Les isomères racémiques cis et trans(cis = 2R, 4R / 2S, 4S; trans = 2R, 4S / 2S; 4R) peuvent être fabriqués en partant des 4-carbamoyloxy-oxazaphosphorines conformes à l'invention. Le rattachement est en concordance avec les règles de la nomenclature IUPAC et avec la littérature sur les dé-. rivés correspondants des oxazaphosphorines. La forme cis ou trans peut être établie également avec précision selon le choix des conditions de la réaction. Pharmacologiquement,
les isomères ne montrent aucune différence importante.
Les composés conformes à 1'invention se caractérisent par
des propriétés remarquables, chimiothérapeutiquement précieuses. En comparaison de la substance de référence connue antérieurement, soit le cyclophosphamide, elles possèdent une forte activité chimiothérapeutique cancérotoxique approximativement égale sur des tumeurs de transplantation expérimentales des rats. En soltuion aqueuse, elles agissent directement comme alcoylant- et ont in vitro une haute zytotoxicité, tandis que le cyclophosphamide exige une activation enzymatique et en pratique n'agit pas zytotoxiquement in vitro. La toxicité aiguë des composés conformes à l'invention est environ 4 fois plus petite que celle de la substance
de référence, le cyclophosphamide; l'ampleur thérapeutique est par conséquent nettement augmentée. Pareillement, en ce qui concerne les actions secondaires organotoxiques telles que la dépression des leucocytes et la suppression de l'immu-nisation, les composés conformes à l'invention présentent des avantages distincts par rapport à la substance de référence, le cyclophosphamide.
Les composés conformes à l'invention conviennent au traitement de tumeurs malignes et de maladies malignes semblables comme la leucémie des humains. Dès lors, on utilise des quantités de l'ordre de 0,01 à 100 mg/kg. les préparations pharmaceutiques ainsi mises en oeuvre sont fabriquées selon des méthodes usuelles en utilisant les supports et les additifs habituels.
Les exemples suivants servent à expliquer en détail la présente invention, sans cependant la limiter à ceux-ci.
Exemple 1
<EMI ID=26.1>
15 g (54 millimoles) de 4-hydroxycyclophosphamide
(c'est-à-dire le 2- (bis-chloréthyl) -amino) -4-hydroxy-tétrahydro-2H-,1,3,2-oxazaphosphorine-2-oxyde) et 4,4 g (58 millimoles) d'hydroxy-urée sont dissous dans 70 ml de diméthylformamide, acidifiés avec de ''acide trichloracétique (pH 3-4) et conservés au réfrigérateur pendant 20 h à 0[deg.]C. Ensuite,
le magma cristallin est dilué avec 70 ml d'ester acétique
et aspiré après 2 h, lavé, séché et recristallisé dans du méthanol.
Rendement : 11,3 g (62% de la théorie) de la forme cis. Point
de fusion : 139-143[deg.]C (décomposition).
Exemple 2
<EMI ID=27.1>
1,1 g (4,0 millimoles) de 4-hydroxycyclophosphamide est dissous dans du méthanol, additionné d'une trace d'acide
<EMI ID=28.1>
puis le méthanol est éliminé, le résidu est recueilli dans une petite dose de chlorure de méthylène, séché et concentré en 1,2 g de 4-méthoxy-cyclophosphamide (c'est-à-dire 2-(bis-
<EMI ID=29.1>
phosphorine-2-oxyde). Ensuite, 1,2 g de 4-méthoxycyclophosphamide et 304 mg d'hydroxyurée sont dissous dans 3 ml de
<EMI ID=30.1>
à -25[deg.]C. Le magma cristallin est dilué avec 3 ml d'ester acétique, aspiré, lavé, séché et recristallisé dans du méthanol.
Rendement : 670 mg (50% de la théorie) du même produit que
celui de l'exemple 1.
Exemple 3
<EMI ID=31.1>
16 g (58 millimoles) de 4-hydroxycyclophosphamide et 5,2 g (68 millimoles) d'hydroxy-urée sont dissous dans 160 ml d'eau, acidifiés avec de l'acide trichloracétique (pH 3-
<EMI ID=32.1>
roforme.
Rendement : 12,7 (65% de la théorie) de la forme trans du
produit de l'exemple 1. Point de fusion : 148[deg.]C
(décomposition).-
Exemple 4
<EMI ID=33.1>
20 g (50 millimoles) de 4-hydroxytrofosfamide (c'est-àdire 3-(2-chloréthyl)-2-(bis-(2-chloréthyl)-amino)-4-hydroxy-tétrahydro-2H-1,3,2-oxazaphosphorine-2-oxyde- et 5,3 g
(70 millimoles) d'hydroxy-urée sont dissous dans 100 ml de diméthylformamide et refroidis à- -15[deg.]C. Ensuite, on acidifie
<EMI ID=34.1>
la solution réactionnelle avec deux fois sa quantité d'eau.
Puis, on extrait 4.fois en secouant avec chaque fois 300 ml d'ester acétique-méthanol (10/1), on lave 2 fois à l'eau
les phases purifiées d'ester acétique, on sèche sur du sulfate de sodium et on concentre sous vide 22 g d'huile. Après absorption dans de l'ester acétique-méthanol, 4,2 g se séparent à l'état cristallin (point de fusion : 106-110[deg.]C). La liqueur mère est séparée par chromatographie sur colonne sur du gel de silice avec du chloroforme-méthanol (10/1) et recristallisée conjointement avec le premier produit de cristallisation dans de l'ester acétique-méthanol.
Rendement : 7,0 g (35% de la théorie). Point de fusion :
115-116[deg.]C (décomposition).
Exemple 5
<EMI ID=35.1>
A 900 mg (3,25 millimoles) de 4-hydroxycyclophosphamide dans 1 ml de chlorure de méthylène, on ajoute 540 mg (3,25 millimoles) de 3-benzyl-l-hydroxy-urée dans 40 ml d'acétone et une quantité catalytique d'acide trichloracétique. Le mélange est conservé pendant une nuit à -25[deg.]C, les cristaux sont ensuite aspirés, lavés à l'acétone et à l'éther et recristallisés dans de l'ester acétique.
Rendement : 500 mg (40% de la théorie). Point de fusion :
122-123[deg.]C (décomposition).
Exemple 6
<EMI ID=36.1>
10 ml d'acétone sont additionnés de 460 mg de 3-o-broméphényl1-hydroxy-urée et d'une quantité catalytique d'acide trichloracétique, puis sont laissés au repos à -25[deg.]C. Après 2 jours, les cristaux sont aspirés et recristallisés dans de l'acétone. Rendement : 320 mg (32% de la théorie) . Point de fusion :
<EMI ID=37.1>
Exemple 7
<EMI ID=38.1>
de N-hydroxy-morpholirio-carboxamide et d'une trace d'acide trichloracétique, puis sont conservés à -25[deg.]C. Après 4 jours, les cristaux sont aspirés et recristallisés dans de l'acétone. Rendement : 780 mg (45% de la théorie). Point de fusion :
123-124[deg.]C (décomposition).
<EMI ID=39.1>
<EMI ID=40.1>
<EMI ID=41.1>
<EMI ID=42.1>
<EMI ID=43.1>
<EMI ID=44.1>
<EMI ID=45.1>
Exemple 63
<EMI ID=46.1> a) acide 3-hydroxy-uréido-acétique
56,5 g (0,28 mole) de chlorhydrate d'ester de glycine benzyle sont mis en suspension dans 300 ml de toluène et du gaz phosgène sec est introduit pendant 2 heures sous agitation à une température de bain de 140[deg.]C. Ensuite, le mélange
<EMI ID=47.1>
sous vide poussé.
Rendement : 51 g (95% de la théorie) de benzyl-isocyanatoacétate.
Point d'ébullition 100 - 102[deg.]C.
A 28,7 g (0,15 mole) de benzyl-isocyanato-acétate dans 50
ml de dioxane, on ajoute goutte à goutte, sous agitation et refroidissement temporaire, 6,6 g (0,2 mole) d'hydroxylamine dans 200 ml de dioxane. Après une nouvelle agitation d'une heure à la température ambiante, on concentre sous vide et on recristallise le résidu dans de l'ester acétique. Rendement : 28,1 g (83,6% de la théorie) de benzyl-3-hydroxy-
uréido-acétate. Point de fusion : 113-120[deg.]C.
22,4 g (0,1 mole) de benzyl-3-hydroxy-uréido-acétate dans
300 ml de méthanol sont additionnés de 5 g de charbon palladié et hydrogénés dans un récipient pour hydrogénation catalytique. L'absorption correspondante d'hydrogène est achevée après 20 minutes environ. Le catalyseur est aspiré, le filtrat est concentré sous vide et le résidu solide est recristallisé dans du dioxane.
Rendement : 9,8 g (73% de la théorie) d'acide 3-hydroxy-uréi-
do-acétique. Point de fusion : 135[deg.]C.
b) 2,4 g (18 millimoles) d'acide 3-hydroxy-uréido-acétique dans 10 ml d'eau et 25 ml d'acétone sont additionnés de
<EMI ID=48.1>
laissés au repos pendant une nuit à -25[deg.]C. Ensuite, on ajoute 25 ml d'acétone et 1,8 g (18 millimoles) de cyclohexylamine dans 10 ml d'acétone, on aspire après abandon de 2 h et on recristallise dans de l'acétone avec un peu de méthanol.
Rendement : 3,1 g (44% de la théorie) . Point de fusion
<EMI ID=49.1>
naldéhyde-oxime (aldophosphamide-oxime)
4,0 g (13,7 millimoles) de 4-hydroperoxycyclophosphamide sont mis en suspension dans 50 ml d'eau sous réfrigération par de la glace et sont additionnés de 500 mg de thiosulfate de sodium x 5 moles d'eau. La valeur pH est contrôlée sous agitation à 5-10[deg.]C avec un pH-mètre, est maintenue entre 4,5 et 5,5 avec de l'acide sulfurique 2 normal
et une solution concentrée de thiosulfate de sodium est ajoutée goutte à goutte jusqu'à ce que la valeur pH n'augmente plus. On agite de nouveau pendant une demi-heure à 10[deg.]C
<EMI ID=50.1>
950 mg de chlorhydrate d'hydroxylamine, on maintient la valeur pH à 5 avec une lessive:de soude 2 normale, on laisse
<EMI ID=51.1>
extrait quatre fois avec chaque fois 50 ml d'ester acétique et on concentre sous vide à 30[deg.]C les extraits organiques après séchage sur du sulfate de sodium. Le résidu est absor-
<EMI ID=52.1>
rés après 1 jour.
Rendement : 3,4 g (85% de la théorie). Point de fusion :
79-81[deg.]C.
Exemple 65
<EMI ID=53.1>
5,8 g (20 millimoles) d'aldaphosphamide-oxime dans 60 ml d'acétone sont additionnés de 4 g (20 millimoles) de pbroméphényl-isocyanate dans 40 ml d'acétone, puis sont agités 5 h -sous refroidissement. Après 2 h, le produit de cristal-
<EMI ID=54.1>
teur rotatif et est recristallisé dans du méthanol. Rendement : 8,1 g (82,8% de la théorie). Point de fusion :
<EMI ID=55.1>
<EMI ID=56.1>
80 ml d'acétone sont additionnés de 4,7 g (25 millimoles) de m-trifluorométhylphénylisocyanate dans 40 ml d'acétone.
<EMI ID=57.1>
pendant une nuit à -25[deg.]C, on ajoute 150 ml d'éther de pétrole et on aspire à -25[deg.]C après un autre séjour d'une nuit
<EMI ID=58.1>
séché à 30[deg.]C et recristallisé dans de l'isopropanol. Rendement 9,2 g (76,8% de la théorie). Point de fusion :
91-93[deg.]C.
Exemple 67
<EMI ID=59.1>
5 g (18 millimoles) d'aldophosphamide-oxime et 2,2 g
de cyclohexylisocyanate sont dissous chacun dans 10 ml d'acé-
<EMI ID=60.1>
2 h et lavés ultérieurement avec de l'acétone-éther. Rendement : 4,2 g (56% de la théorie). Point de fusion :
113[deg.]C.
Exemple 68
<EMI ID=61.1>
5 g (18 millimoles) d'aldophosphamide-oxime et 1,2 g d'isocyanate d'éthyle sont dissous chacun dans 15 ml d'acé-
<EMI ID=62.1>
cristallisation est aspiré et lavé ultérieurement avec de l'acétone-éther.
Rendement : 3,5 g (54% de la théorie). Point de fusion : 101[deg.]C
<EMI ID=63.1>
2,9 g (10 millimoles) d'aldophosphamide-oxime dans 30 ml d'acétone sont additionnés de 2,1 g (10 millimoles) de fluorényl-2-isocyanate dans 20 ml d'acétone à 0[deg.]C. Le produit précipité est aspiré le jour suivant, séché sous vide
<EMI ID=64.1>
Rendement : 2,5 g (40,1% de la théorie) . Point de fusion :
114[deg.]C.
Exemple 70
<EMI ID=65.1>
5,8 g (20 millimoles) d'aldophosphamide-oxime dans
60 ml d'acétone sont additionnés de 2,9 g (20 millimoles)
<EMI ID=66.1>
dant 5 h dans un bain de glace sous atmosphère d'azote, on aspire la matière solide après 2 h,:on sèche à 30[deg.]C dans un évaporateur rotatif et on recristallise dans le méthanol. Rendement : 2,4 g (27,3% de la théorie). Point de fusion :
124-125[deg.]C.
Exemple 71
<EMI ID=67.1>
A 5,8 g (20 millimoles) d'aldophosphamide-oxime dans
60 ml d'acétone, on ajoute une solution de 3,3 g (20 millimoles) de p-nitrophénylisocyanate dans 40 ml d'acétone, on aspire le produit solide après 2 h, on sèche à 40[deg.]C dans un évaporateur rotatif et on recristallise dans du diméthylformamide-éthanol.
Rendement : 6,7 g (73,5% de la théorie). Point de fusion ..
117-118[deg.]C.
Exemples d'utilisations pharmaceutiques.
Exemple 72 (comprimés revêtus d'une pellicule et résistant
au suc gastrique)
<EMI ID=68.1>
tionnés de 7,0 g d'Aérosil par l'intermédiaire d'un tamis, puis sont mélangés. A ce mélange, on ajoute 76,0 g d'Avicel pH 105, 10 g d'amidon de mais et 7,0 g d'acide stéarique et on mélange jusqu'à la répartition homogène de tous les constituants. Cette masse est pressée, comme on le sait, en noyaux de 200 mg comprenant 100 mg de constituant actif.
Ces noyaux sont revêtus d'une pellicule résistant au suc gastrique, par exemple, à base de dérivés de la cellulose ou d'un générateur de pellicules entièrement synthétique sous la forme d'une solution organique ou d'une dispersion aqueuse qui peut contenir des additifs tels que des plastifiants, des colorants, des.aromatisants ou des antimousses.
Exemple 73 (gélules de gélatine résistant au suc gastrique)
250 g du composé correspondant à l'exemple 5 sont additionnés de 7,5 g d'Aérosil.par l'intermédiaire d'un tamis, puis sont mélangés. A ce mélange, on ajoute 40 g de lactose et 2,5 g de stéarate de magnésium et on mélange jusqu'à la répartition homogène de tous les constituants.
Cette masse est prélevée en doses individuelles de 300 mg dans des gélules de gélatine.-Une gélule contient 250 mg de constituant actif. Conformément à l'exemple 1, les gélules de gélatine peuvent être munies d'un revêtement pelliculaire résistant au suc gastrique.
"4-carbamoyloxy-oxazaphosphorines, process for their manufacture and pharmaceutical preparations containing them" "4-carbamoyloxy-oxazaphosphorines, process for their manufacture and pharmaceutical preparations containing them"
According to patent applications n [deg.] 2,231.31.1 and n [deg.] 2,522,135 published in the Federal Republic of Germany, it is known that by introducing a hydroperoxy -OOH group in the four position of the molecule known cytostatics:
<EMI ID = 1.1>
(ifosfamide), 3- (2-chlorethylamino) -2- (2'-methanesulfonylethylamino) -2-oxo-tretrahydro-2H-1,3,2-oxazaphosphorine
(sufosfamide) and other cyclophosphamides with a similar structural formula, it is possible to create compounds with valuable cytostatic properties; but, these compounds have such a low stability that their transformation into pharmaceutical preparations, as is necessary in human medicine, is not possible. The aim of the present invention therefore consists in creating cyclophosphamides substituted in position 4 by a hydroxy group which is subsequently transformed and which are distinguished by high cytostatic activity and improved stability.
The present invention relates to new 4-carbamoyloxyoxazaphosphorines corresponding to the general formula I
<EMI ID = 2.1>
<EMI ID = 3.1>
from each other, represent hydrogen, methyl, ethyl, 2-chlorethyl or 2-methanesulfonyloxyethyl, the
<EMI ID = 4.1>
benzyl, or a straight or branched chain alkyl comprising
1 to 18 carbon atoms, the alkyl group possibly being substituted by 1 to 3 equal or different substituents from each other and originating from the group comprising -OH, a -halogen,
-COOH, -COOR, -CONH2, phenyl, benzyloxycarbonyl group, <EMI ID = 5.1>
carboxy in the phenyl and / or alkyl part of the group, an allyl group or a cycloalkyl with 3 to 8 carbon atoms or a tetrahydrofuranyl or a tetrahydropyranyl or a phenyl which may be unsubstituted or substituted once or twice by
<EMI ID = 6.1>
together with the atoms to which they are attached, are a constituent of a saturated heterocyclic ring system which may additionally contain an oxygen atom, a nitrogen atom substituted by a lower alkyl or an atom
<EMI ID = 7.1>
an aziridine ring which is unsubstituted or substituted by cyano or carbamoyl.
Due to their particularly favorable properties
and their possibility of easy obtaining, we prefer here
the 4-carbomoyloxy-oxazaphosphorines of the general formula
<EMI ID = 8.1>
7
<EMI ID = 9.1>
hydrogen or straight or branched chain alkyl from 1 to
18 carbon atoms, phenyl or benzyl.
Another group of preferred compounds of formula I is
<EMI ID = 10.1>
be equal or different from each other, are a hydro-
<EMI ID = 11.1>
<EMI ID = 12.1>
is unsubstituted or is substituted by one or two carboxy groups, optionally a C 1 -C alkyl. optionally substituted by 1 or 2 carboxy groups or a phenyl alkyl in
<EMI ID = 13.1>
in the phenyl and / or alkyl part of the group.
The 4-carbamoyloxy-oxazaphosphorines in accordance with the invention and corresponding to general formula I are obtained, according to the invention, and what is reacted with a 4-hydroxy- or 4-methoxy- or 4-ethoxy-oxazaphosphorine of the general formula II
<EMI ID = 14.1>
<EMI ID = 15.1>
mule I and Y is hydrogen, methyl or ethyl, with a derivative of a hydroxy carbamate of the general formula III
<EMI ID = 16.1>
where Z and X have the same meaning as in formula I, in the presence of an inert solvent, optionally by cooling or heating and / or optionally in the presence of an acid catalyst.
Suitable solvents include water, lower alkyl halides such as, in particular, methylene chloride, lower alkyl ketones, namely in particular acetone, diethyl ether, dimethylformamide, triamide hexamethylphosphoric acid or similar solvents, or mixtures of several of these solvents. The reaction is carried out at temperatures of the order of -35 [deg.] C to +50 [deg.] C, that is to say if necessary by cooling, at room temperature or by heating. The reaction can be carried out in the presence of an acid catalyst such as an inorganic acid, namely trichloroacetic acid, trifluromethane sulfonic acid, acid
<EMI ID = 17.1>
Another process for making the compounds of the formula
R
<EMI ID = 18.1>
react an enzyme of the general formula IV
<EMI ID = 19.1>
<EMI ID = 20.1> <EMI ID = 21.1>
<EMI ID = 22.1>
<EMI ID = 23.1>
The reaction process can be followed, in accordance with the method of the invention, using a thin layer chromatography. The isolation of homogeneous substances by thin layer chromatography is established by a process of usual examination of these products, in particular by crystallization or chromatographic purification. The guarantee of the structure is made by the melting point, chromatography in thin layer, elementary analysis and / or infrared spectral analysis and by the resonance spectrum
<EMI ID = 24.1>
The compounds used as raw materials in the process according to the invention are widely known, can be used in the crystalline state or as raw products and can be synthesized as follows in a manner known per se.
The 4-hydroxy-oxazaphosphorines are obtained by reduction of the 4-hydroperoxy derivatives (for example, A. Takamizawa and others, J. Med. Chem., 18, 376, 1975). 4-methoxy- or 4ethoxy-oxazaphosphorines are formed by acid catalysis from 4-hydroxy derivatives in methanol or ethanol or in inert solvents which contain methanol and ethanol. Hydroxyurea derivatives are produced by the reaction of carbamic acid chlorides or correspondingly substituted isocyanates with hydroxylamine or N-monosubstituted hydroxylamines. Likewise, esters of hydroxycarbamic acid (hydroxycarbamate) can be produced by the reaction of esters of chlorocarbonic acid with a hydroxylamine or N-mono substituted hydroxulamines.
For the synthesis of esters of hydroxy-urea-carbamic acid or N-hydroxy-carbami-
<EMI ID = 25.1>
In addition, a synthetic route with a protection group is recommended.
The oxides of formula IV can be prepared according to various synthetic routes. Thus, they can be obtained by the reaction of the corresponding 4-hydroxy-oxazaphosphorines with a hydroxylamine or hydroxylamine salts. The pH value should be kept as much as possible between 2 and
7. The racemic cis and trans isomers (cis = 2R, 4R / 2S, 4S; trans = 2R, 4S / 2S; 4R) can be produced starting from the 4-carbamoyloxy-oxazaphosphorines in accordance with the invention. The connection is in accordance with the rules of the IUPAC nomenclature and with the literature on de-. corresponding rivets of oxazaphosphorines. The cis or trans form can also be established with precision depending on the choice of reaction conditions. Pharmacologically,
the isomers show no significant difference.
The compounds according to the invention are characterized by
remarkable properties, chemotherapeutically valuable. Compared to the previously known reference substance, cyclophosphamide, they have a roughly equal carcinotoxic chemotherapeutic activity on experimental transplant tumors in rats. In aqueous solution, they act directly as an alkylating agent and have a high zytotoxicity in vitro, while cyclophosphamide requires an enzymatic activation and in practice does not act zytotoxically in vitro. The acute toxicity of the compounds according to the invention is approximately 4 times lower than that of the substance
cyclophosphamide; the therapeutic scope is therefore significantly increased. Similarly, as regards secondary organotoxic actions such as leukocyte depression and the suppression of immunization, the compounds according to the invention have distinct advantages compared to the reference substance, cyclophosphamide.
The compounds according to the invention are suitable for the treatment of malignant tumors and similar malignant diseases such as human leukemia. Therefore, quantities of the order of 0.01 to 100 mg / kg are used. the pharmaceutical preparations thus used are manufactured according to usual methods using the usual supports and additives.
The following examples serve to explain the present invention in detail, without however limiting it thereto.
Example 1
<EMI ID = 26.1>
15 g (54 millimoles) of 4-hydroxycyclophosphamide
(i.e. 2- (bis-chlorethyl) -amino) -4-hydroxy-tetrahydro-2H-, 1,3,2-oxazaphosphorine-2-oxide) and 4.4 g (58 millimoles) of hydroxyurea are dissolved in 70 ml of dimethylformamide, acidified with '' trichloroacetic acid (pH 3-4) and stored in the refrigerator for 20 h at 0 [deg.] C. Then,
the crystalline magma is diluted with 70 ml of acetic ester
and aspirated after 2 h, washed, dried and recrystallized from methanol.
Yield: 11.3 g (62% of theory) of the cis form. Point
of fusion: 139-143 [deg.] C (decomposition).
Example 2
<EMI ID = 27.1>
1.1 g (4.0 millimoles) of 4-hydroxycyclophosphamide is dissolved in methanol, supplemented with a trace of acid
<EMI ID = 28.1>
then the methanol is eliminated, the residue is collected in a small dose of methylene chloride, dried and concentrated in 1.2 g of 4-methoxy-cyclophosphamide (that is to say 2- (bis-
<EMI ID = 29.1>
phosphorine-2-oxide). Then 1.2 g of 4-methoxycyclophosphamide and 304 mg of hydroxyurea are dissolved in 3 ml of
<EMI ID = 30.1>
at -25 [deg.] C. The crystalline magma is diluted with 3 ml of acetic ester, aspirated, washed, dried and recrystallized from methanol.
Yield: 670 mg (50% of theory) of the same product as
that of Example 1.
Example 3
<EMI ID = 31.1>
16 g (58 millimoles) of 4-hydroxycyclophosphamide and 5.2 g (68 millimoles) of hydroxyurea are dissolved in 160 ml of water, acidified with trichloroacetic acid (pH 3-
<EMI ID = 32.1>
shape.
Yield: 12.7 (65% of theory) of the trans form of
product of Example 1. Melting point: 148 [deg.] C
(decomposition).-
Example 4
<EMI ID = 33.1>
20 g (50 millimoles) of 4-hydroxytrofosfamide (i.e. 3- (2-chlorethyl) -2- (bis- (2-chlorethyl) -amino) -4-hydroxy-tetrahydro-2H-1,3, 2-oxazaphosphorine-2-oxide- and 5.3 g
(70 millimoles) of hydroxyurea are dissolved in 100 ml of dimethylformamide and cooled to -15 [deg.] C. Then we acidify
<EMI ID = 34.1>
the reaction solution with twice its amount of water.
Then, extract 4.times by shaking with 300 ml of acetic ester-methanol (10/1) each time, washing twice with water
the purified phases of acetic ester, dried over sodium sulfate and concentrated in vacuo 22 g of oil. After absorption in acetic-methanol ester, 4.2 g separate in the crystalline state (melting point: 106-110 [deg.] C). The mother liquor is separated by column chromatography on silica gel with chloroform-methanol (10/1) and recrystallized together with the first crystallization product from acetic ester-methanol.
Yield: 7.0 g (35% of theory). Fusion point :
115-116 [deg.] C (decomposition).
Example 5
<EMI ID = 35.1>
To 900 mg (3.25 millimoles) of 4-hydroxycyclophosphamide in 1 ml of methylene chloride, 540 mg (3.25 millimoles) of 3-benzyl-1-hydroxy-urea in 40 ml of acetone and an amount are added. trichloroacetic acid catalyst. The mixture is stored overnight at -25 [deg.] C, the crystals are then aspirated, washed with acetone and ether and recrystallized from acetic ester.
Yield: 500 mg (40% of theory). Fusion point :
122-123 [deg.] C (decomposition).
Example 6
<EMI ID = 36.1>
10 ml of acetone are added with 460 mg of 3-o-bromephenyl1-hydroxyurea and a catalytic amount of trichloroacetic acid, then are left to stand at -25 [deg.] C. After 2 days, the crystals are aspirated and recrystallized from acetone. Yield: 320 mg (32% of theory). Fusion point :
<EMI ID = 37.1>
Example 7
<EMI ID = 38.1>
of N-hydroxy-morpholirio-carboxamide and a trace of trichloroacetic acid, then are stored at -25 [deg.] C. After 4 days, the crystals are aspirated and recrystallized from acetone. Yield: 780 mg (45% of theory). Fusion point :
123-124 [deg.] C (decomposition).
<EMI ID = 39.1>
<EMI ID = 40.1>
<EMI ID = 41.1>
<EMI ID = 42.1>
<EMI ID = 43.1>
<EMI ID = 44.1>
<EMI ID = 45.1>
Example 63
<EMI ID = 46.1> a) 3-hydroxy-ureido-acetic acid
56.5 g (0.28 mole) of benzyl glycine ester hydrochloride are suspended in 300 ml of toluene and dry phosgene gas is introduced for 2 hours with stirring at a bath temperature of 140 [deg.] vs. Then the mixture
<EMI ID = 47.1>
high vacuum.
Yield: 51 g (95% of theory) of benzyl-isocyanatoacetate.
Boiling point 100 - 102 [deg.] C.
28.7 g (0.15 mole) of benzylisocyanato-acetate in 50
ml of dioxane, 6.6 g (0.2 mole) of hydroxylamine in 200 ml of dioxane are added dropwise, with stirring and temporary cooling. After another one hour stirring at room temperature, the mixture is concentrated under vacuum and the residue is recrystallized from acetic ester. Yield: 28.1 g (83.6% of theory) of benzyl-3-hydroxy-
ureido-acetate. Melting point: 113-120 [deg.] C.
22.4 g (0.1 mole) of benzyl-3-hydroxy-ureido-acetate in
300 ml of methanol are added to 5 g of palladium on carbon and hydrogenated in a container for catalytic hydrogenation. The corresponding absorption of hydrogen is completed after approximately 20 minutes. The catalyst is aspirated, the filtrate is concentrated in vacuo and the solid residue is recrystallized from dioxane.
Yield: 9.8 g (73% of theory) of 3-hydroxyurea acid
do-acetic. Melting point: 135 [deg.] C.
b) 2.4 g (18 millimoles) of 3-hydroxy-ureido-acetic acid in 10 ml of water and 25 ml of acetone are added with
<EMI ID = 48.1>
left to stand overnight at -25 [deg.] C. Then, 25 ml of acetone and 1.8 g (18 millimoles) of cyclohexylamine are added to 10 ml of acetone, the mixture is aspirated after 2 h of abandonment and recrystallized from acetone with a little methanol.
Yield: 3.1 g (44% of theory). Fusion point
<EMI ID = 49.1>
naldehyde-oxime (aldophosphamide-oxime)
4.0 g (13.7 millimoles) of 4-hydroperoxycyclophosphamide are suspended in 50 ml of water under ice refrigeration and are added with 500 mg of sodium thiosulfate x 5 moles of water. The pH value is controlled with stirring at 5-10 [deg.] C with a pH meter, is maintained between 4.5 and 5.5 with normal sulfuric acid 2
and a concentrated solution of sodium thiosulfate is added dropwise until the pH value no longer increases. Stir again for half an hour at 10 [deg.] C
<EMI ID = 50.1>
950 mg of hydroxylamine hydrochloride, the pH value is maintained at 5 with a detergent: normal soda 2, left
<EMI ID = 51.1>
extract four times with each 50 ml of acetic ester and the organic extracts are concentrated under vacuum at 30 ° C. after drying over sodium sulfate. The residue is absorbed
<EMI ID = 52.1>
res after 1 day.
Yield: 3.4 g (85% of theory). Fusion point :
79-81 [deg.] C.
Example 65
<EMI ID = 53.1>
5.8 g (20 millimoles) of aldaphosphamide-oxime in 60 ml of acetone are added 4 g (20 millimoles) of pbromephenyl isocyanate in 40 ml of acetone, then are stirred for 5 h under cooling. After 2 h, the crystal product-
<EMI ID = 54.1>
rotary tor and is recrystallized from methanol. Yield: 8.1 g (82.8% of theory). Fusion point :
<EMI ID = 55.1>
<EMI ID = 56.1>
4.7 ml (25 millimoles) of m-trifluoromethylphenylisocyanate in 40 ml of acetone are added to 80 ml of acetone.
<EMI ID = 57.1>
overnight at -25 [deg.] C, add 150 ml of petroleum ether and aspirate at -25 [deg.] C after another overnight stay
<EMI ID = 58.1>
dried at 30 [deg.] C and recrystallized from isopropanol. Yield 9.2 g (76.8% of theory). Fusion point :
91-93 [deg.] C.
Example 67
<EMI ID = 59.1>
5 g (18 millimoles) of aldophosphamide-oxime and 2.2 g
of cyclohexylisocyanate are each dissolved in 10 ml of acetate
<EMI ID = 60.1>
2 h and washed subsequently with acetone ether. Yield: 4.2 g (56% of theory). Fusion point :
113 [deg.] C.
Example 68
<EMI ID = 61.1>
5 g (18 millimoles) of aldophosphamide-oxime and 1.2 g of ethyl isocyanate are each dissolved in 15 ml of acetate
<EMI ID = 62.1>
crystallization is aspirated and subsequently washed with acetone-ether.
Yield: 3.5 g (54% of theory). Melting point: 101 [deg.] C
<EMI ID = 63.1>
2.9 g (10 millimoles) of aldophosphamide-oxime in 30 ml of acetone are added with 2.1 g (10 millimoles) of fluorenyl-2-isocyanate in 20 ml of acetone at 0 [deg.] C. The precipitated product is aspirated the next day, dried under vacuum
<EMI ID = 64.1>
Yield: 2.5 g (40.1% of theory). Fusion point :
114 [deg.] C.
Example 70
<EMI ID = 65.1>
5.8 g (20 millimoles) of aldophosphamide-oxime in
2.9 g (20 millimoles) are added to 60 ml of acetone
<EMI ID = 66.1>
dant 5 h in an ice bath under a nitrogen atmosphere, the solid material is aspirated after 2 h,: dried at 30 [deg.] C in a rotary evaporator and recrystallized from methanol. Yield: 2.4 g (27.3% of theory). Fusion point :
124-125 [deg.] C.
Example 71
<EMI ID = 67.1>
5.8 g (20 millimoles) of aldophosphamide-oxime in
60 ml of acetone, a solution of 3.3 g (20 millimoles) of p-nitrophenylisocyanate in 40 ml of acetone is added, the solid product is aspirated after 2 h, dried at 40 [deg.] C in a rotary evaporator and recrystallized from dimethylformamide-ethanol.
Yield: 6.7 g (73.5% of theory). Fusion point ..
117-118 [deg.] C.
Examples of pharmaceutical uses.
Example 72 (film-coated, hard-wearing tablets
gastric juice)
<EMI ID = 68.1>
7.0 g of Aerosil through a sieve and then mixed. To this mixture, 76.0 g of Avicel pH 105, 10 g of corn starch and 7.0 g of stearic acid are added and the mixture is mixed until the homogeneous distribution of all the constituents. This mass is pressed, as is known, into 200 mg nuclei comprising 100 mg of active ingredient.
These cores are coated with a film resistant to gastric juice, for example, based on cellulose derivatives or a fully synthetic film generator in the form of an organic solution or an aqueous dispersion which may contain additives such as plasticizers, colorants, flavorings or defoamers.
Example 73 (gelatin capsules resistant to gastric juice)
250 g of the compound corresponding to Example 5 are added 7.5 g of Aerosil. By means of a sieve, then are mixed. To this mixture, 40 g of lactose and 2.5 g of magnesium stearate are added and the mixture is mixed until the homogeneous distribution of all the constituents.
This mass is taken in individual doses of 300 mg in gelatin capsules. - One capsule contains 250 mg of active ingredient. In accordance with Example 1, the gelatin capsules can be provided with a film coating resistant to gastric juice.