Nouvelle utilisation thérapeutique d'analogues de prostaglandines.
La présente invention concerne une nouvelle méthode de prévention et de traitement de l'anoxie des cellules du
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(ci-après désignée sous l'appellation PGI ), de la prostaglandine
<EMI ID=2.1>
plaquettaire du sang, une activité relaxante du muscle lisse des artères et une activité évitant la sécrétion d'acide gastrique
(S. MONCADA et J.R. VA NE , Prostacyclin in Perspective, Prostacyclin, édité par J.R. VA NE et S. BERGSTROM, Raven Press, New-York, 1979).
La présente invention cependant utilise une activité nouvelle et surprenante de ces dérivés dans le traitement de l'anoxie dans les cellules du cerveau.
Contrairement à d'autres organes du corps, le cerveau
se trouve dans un environnement spécifique dans un corps rigide,
tel que le crâne ou la dure-mère cérébrale, immergé dans le-liquide cérébrospinal, ayant parmi les différents organes du corps vivant celui qui a le taux maximum de consommation d'oxygène- La plus grande partie de l'énergie exigée par les cellules nerveuses
du cerveau provient de l'oxygène et du glucose mais les sources de ceux-ci sont difficilement stockées dans le cerveau et sont toujours délivrée par le flux sanguin. Par conséquent, un mécanisme de contrôle du flux sanguin cérébral est bien développé pour délivrer
de façon stable les sources d'énergie du tissu cérébral et maintenir constant un environnement externe des cellules du cerveau.
Lorsque le mécanisme homéostatique du cerveau défaille en raison d'une compression physique venant par exemple d'un hématome, d'une tumeur ou d'un traumatisme, les cellules du cerveau
sont exposées à un état dans lequel l'oxygène fait défaut et
le cerveau ne peut pas fonctionner normalement.
L'état dans lequel l'oxygène fait défaut (ci-après désigné sous le nom d'anoxie) provoque un changement de la perméabilité membranaire des cellules du cerveau de sorte qu'il
s'ensuit un oedème provoqué par endosmose des liquides extracellulaires. Comme l'oedème cérébral grossit jusqu'à atteindre une certaine extension, la pression dans le cerveau augmente et provoque des troubles de la circulation dans le cerveau. L'accentuation
de l'anoxie cérébrale et de la déficience en glucose aussi bien que l'acummulation des métabolites . dues au trouble circulatoire favorisent l'oedème cérébral de sorte que l'oedème et la pression du cerveau s'accroissent encore et qu'il se produit un refoulement du cerveau, un trouble dans le passage du liquide cérébrospinal : anoxie cérébrale accrue, accélération de l'oedème cérébral et accentuation de
la pression du cerveau sont le résultat de ce cercle vicieux. La focalisation du trouble est ainsi étendue de sorte que le tissu cérébral initialement normal souffre de l'anoxie cérébrale dans laquelle le cerveau souffre d'insuffisance circulatoire et les troubles deviennent sérieux. C'est la raison pour laquelle l'insuffisance d'oxygène dans les tissus est considérée comme un dénominateur commun de la plupart des maladies cérébrales.
<EMI ID=3.1>
Pour le moment, on emploie des agents hypnonarcotiques comme le phénobarbital et le thiobarbital pour traiter les maladies dues à une anoxie des cellules du cerveau. Les agents hypnonarcotiques inhibent l'action nerveuse du cerveau de sorte que les besoins énergétiques des cellules du cerveau diminuent et il s'ensuit une action protectrice de la fonction de la cellule nerveuse. En d'autres termes, les agents hypnonarcotiques exercent leur action
en contraignant la cellule nerveuse à fonctionner à un niveau plus bas que la normale. La dose de ces agents qu'il faut utiliser pour produire l'effet désiré affecte le système nerveux central tout entier.
En conséquence, ils exercent une influence adverse sur les organes respiratoires et les organes circulatoires, en empêchant la respiration ou par leurs effets sur les centres régulateurs de
la pression sanguine.
En conséquence, il était fortement souhaité de développer des médicaments dépourvus des effets secondaires provoqués par les agents hypnonarcotiques mais qui présentent d'excellents effets thérapeutiques à dose faible.pour la prévention et le traitement de l'anoxie des cellules du cerveau.
A la suite de recherches intensives, il a maintenant
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présentent une excellente action protectrice contre l'anoxie cérébrale à faible dose et que leur action n'est pas basée sur la réduction de la fonction de la cellule du cerveau.
En conséquence, la présente invention fournit une méthode de traitement (qui peut être un traitement préventif) de l'anoxie ces cellules du cerveau chez les mammifères, qui
comprend l'administration à un hôte souffrant d'anoxie ou qui y est Sujet; d'au moins
<EMI ID=5.1>
<EMI ID=6.1>
dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoyle inférieur et R2 représente un radical méthyl-2 hexyle, un
<EMI ID=7.1>
propyl-4 cyclohexyle,
un dérivé de la PGI2 de formule générale :
<EMI ID=8.1>
dans laquelle R3 représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoyle inférieur et R4 représente un radical méthyl-2 hexyle, un radical cyclopentyle, un radical propyl-3 cyclopentyle ou un radical cyclohexyle,
un dérivé de la PGI2 de formule générale :
<EMI ID=9.1>
<EMI ID=10.1>
représente un radical pentyle, un radical méthyl-� pentyle, un
-radical méthyl-1 chloro-5 pentyle, un radical méthyl-2 chloro-5 pentyle, un radical éthyl-3 cyclopentyle, un radical propyl-3 cyclopentyle, un radical butyl-3 cyclopentyle, un radical (chloro-2 éthyl)-3 cyclopentyle, un radical cyclohexyle, un radical éthyl-4 cyclohexyle ou un radical cyclohexylméthyle, ou un dérivé de la PGE1 de formule générale :
<EMI ID=11.1>
dans laquelle X représente un radical méthylène ou un radical carbonyle et
i) lorsque X représente un radical méthylène, Y représente un radical
<EMI ID=12.1>
hexyle ou cyclohexyléthyle, et
ii) lorsque X représente un radical carbonyle, Y représente un radical éthylène. R_ représente un radical carboxy, un radical alcoyl-
<EMI ID=13.1>
un radical méthyl-2 hexyle. cyclopentyle, propyl-3 cyclopentyle ou butyl-3 cyclopentyle,
<EMI ID=14.1>
générales (I), (II). (III) et (IV) étant en position trans, la con- <EMI ID=15.1> étant E ou Z ou un mélange de ces formes, les radicaux hydroxy attachés au carbone en C dans les formules générales (I). (II),
(III) et (IV) étant en configuration 0( , et les radicaux hydroxy attachés
<EMI ID=16.1>
étant en configuration*^ ou ^3 ou un mélange de ces deux formes, de préférence en configuration^ , ou un clathrate de cyclodextrine d'un dérivé de formule générale (I), (II). (III) ou (IV) ci-dessus, ou,
<EMI ID=17.1>
<EMI ID=18.1>
(IV) représente un radical carboxy, un sel non toxique de ces produits.
Dans la présente description et les revendications qui l'accompagnent les radicaux alcoyle inférieurs sont en chaîne droite ou ramifiée et contiennent 1 à 4 atomes de carbone (de préférence méthyle) et les radicaux alcoyloxy inférieurs sont en chaîne droite
ou ramifiée et contiennent 1 à 4 atomes de carbone (de préférence méthoxy).
Les dérivés de la PGI de formule (I), les dérivés de
la PGI2 de formules générales (II) et (III) et le dérivé de la
PGE de formule générale (IV) ainsi que leurs clathrates de cyclodextrine et leurs sels peuvent être préparés par application ou adaptation des méthodes utilisées antérieurement ou décrites dans
<EMI ID=19.1>
Les procédés qui conviennent sont décrits dans les descriptions des brevets américains ? 3 931 296, 3 966 792,
4 178 367, 4 205 178, 4 215 142, 4 232 009, 4 234 597, 4 294 849 et 4 313 954, dans la description des demandes de brevets allemands publiées sous les ? 2 365 035, 2 409 460, 2 525 897, 2 753 986,
<EMI ID=20.1>
et 3 006 032,
dans la description des brevets belges ? 782 822, 809 169, 811 665,
862 547, 870 531 et 881 799.
dans la description de la demande de brevet européen publiée sous le N[deg.] 0068871 et dans
J. Am. Chem. Soc. 99 (12), 4182 (1977).
Les dérivés de prostaglandine préférés pour utilisation dans la méthode selon l'invention sont l'ester méthylique de l'étha-
<EMI ID=21.1>
PGE et leurs, clathrates de cyclodextrine.
Les dérivés spécialement préférés sont l'ester méthy-
<EMI ID=22.1>
La méthode de traitement selon la présente invention peut être employée dans le traitement de l'anoxie cérébrale provoquée, par exemple, par une maladie intracrânienne puisque ces . agents possèdent une action protectrice contre l'anoxie du cerveau.
De plus, les dérivés utilisés dans la méthode selon la présente invention ne montrent pas d'effets secondaires comme la suppression de la respiration ou l'insuffisance circulatoire venant de l'inhibition du système central tout entier puisque l'action protectrice sur la fonction de la cellule du cerveau n'est pas
due à une inhibition de l'action nerveuse comme c'est le cas avec les agents hypnonarcotiques habituellement employés pour le traitement de l'anoxie des cellules du cerveau.
En outre, les agents hypnonarcotiques ne pouvaient être administrés qu'à un stade aigu, alors qu'il est possible de mettre en oeuvre la méthode de traitement selon l'invention à un stade chronique et dans le but d'empêcher une rechute de l'attaque puisque les dérivés de prostaglandines utilisés n'exercent aucune action hypnonarcotique.
Les dérivés de prostaglandines utilisés en accord avec la présente invention montrent une action protectrice contre l'anoxie du cerveau à des doses faibles et o,nt une action puissante. De plus, leur toxicité est faible et en conséquence la sécurité d'emploi est
<EMI ID=23.1>
administré par voie sous-cutanée à des souris à la dose de 30 mg/kg, dose qui représente plus de 300 fois la dose minimum curative.
Dans la méthode selon la présente invention, les dérivés de la PGI représentés par la formule générale (I) ou les dérivés
de la PGI représentés par la formule générale (II) sont caractérisés par une durée d'action prolongée ou une puissance d'activité renforcée par administration orale, et les composés plus particulièrement préférés parmi euxcomprennent l'ester méthylique de
<EMI ID=24.1>
rale (III) sont caractérisés par une activité qui apparaît rapidement ou une puissance d'activité spécialement renforcée en administration parentérale, :et les composés plus particulièrement préférés <EMI ID=25.1>
rale (IV) sont caractérisés par une durée d'action prolongée ou une puissance d'activité renforcée à la fois en administration orale et parentérale, et le composé plus particulièrement préféré
<EMI ID=26.1>
Les dérivés de la PGI représentés par la formule
<EMI ID=27.1>
générales (II) et (III) et les dérivés de la PGE représentés par
la formule générale (IV) peuvent être utilisés sous forme de compositions pharmaceutiques qui comprennent un dérivé représenté par les formules (I), (II). (III) ou (IV), un clathrate de cyclodextrine ou
un sel de celui-ci avec un adjuvant ou un enrobage pharmaceutiquement acceptable.
Dans la pratique clinique, pour la prévention ou le traitement de l'anoxie ,des cellules du cerveau, les composés représentés par les formules générales (I), (II), (III) ou (IV),
ou leurs clathrates de cyclodextrine ou leurs sels non toxiques seront normalement administrés par voie systémique ou locale, généralement par voie orale ou parentérale (telle que par voie intraveineuse, sous-cutanée, ou intramusculaire).
Les compositions solides pour administration orale comprennent les comprimés, pilules, poudres dispersibles et granulés. Dans ces compositions solides, on mélange un ou plusieurs composés actifs avec au moins un diluant inerte tel que le lactose, le mannitol, le glucose, l'hydroxypropylcellulose, la cellulose microcristalline, l'amidon, la polyvinylpyrrolidone, ou le métasilicate ou aluminate de magnésium. Les compositions peuvent également comprendre, comme c'est la pratique courante, des substances additionnelles autres que les diluants inertes tels que des agents lubrifiants
comme le stérarate de magnésium, des agents dispersants comme le gluconate de calcium cellulose.
Les comprimés ou pilules peuvent être, si on le désire, enrobés d'un film entérique ou gastrique , tel est le cas des comprimés ou pilules enrobées de sucre, de gélatine, d'hydroxypropylcellulose ou de phtalate d'hydroxypropylméthylcellulose ; on utilise deux ou plusieurs couches.
Les compositions pour administration orale comprennent aussi les capsules en matériaux absorbable tel que les capsules en gélatine contenant une ou plusieurs substances actives avec ou sans addition de diluants ou d'excipients.
Les compositions liquides pour administration orale comprennent les émulsions, solutions, suspensions, sirops et élixirs pharmaceutiquement acceptables contenant des diluants inertes communément utilisés dans le métier tel que l'eau distillée ou l'éthanol. A côté de ces diluants inertes, ces compositions peuvent également comprendre des adjuvants tels que des agents mouillants, des agents de mise en suspension, des agents édulcorants, aromatisants, parfumant et conservateurs.
D'autres compositions pour administration orale comprennent les compositions en atomiseur qui peuvent être préparées par les méthodes connues et qui comprennent au moins un composé selon la présente invention.
Les préparations pour administration parentérale comprennent les solutions, les suspensions et les émulsions stériles, aqueuses ou non aqueuses.
Comme exemple de solvants aqueux ou de milieu de mise
en suspension, on peut citer l'eau distillée pour injection et le soluté physiologique. Comme exemples de solvants non aqueux ou milieux de mise en suspension, on peut citer le propylèneglycol,
un polyéthylèneglycol; les huiles végétales telles que l'huile d'olive, les alcools tels que l'éthanol et, le polysorbate 80
(Marque déposée).
<EMI ID=28.1>
adjuvants tels que les agents de conservation, des mouillants, émulsifiants et agents dispersants.
Elles peuvent être stérilisées, par exemple par filtration à travers un filtre bactériologique, par incorporation d'agents stérilisants dans les compositions ou par irradiation. Elles peuvent également être préparées sous forme de compositions solides stériles qui peuvent être dissoutes au moment de l'emploi dans de l'eau stérile ou tout autre milieu stérile injectable.
D'autres compositions comprennent, pour l'administration parentérale, des liquides à usage externe et des liniments intradermiques tels que les pommades , des suppositoires pour administration rectale, des ovules pour administration vaginale. Ces compositions peuvent être préparées selon les méthodes connues.
Le pourcentage d'ingrédient actif dans les compositions selon l'invention peut varier, étant entendu qu'il est nécessaire
que ce pourcentage doit constituer une proportion telle que l'on
ait une dose convenable pour obtenir l'effet thérapeutique désiré. Bien entendu, on peut administrer plusieurs formes à des doses unitaires en même temps. En général, les préparations doivent normalement contenir au moins 0,025 % en poids de substance active lorsqu'il s'agit d'une administration par injection , Pour administration orale, les préparations contiennent au moins 0,1 % en poids de substance active.
La dose à administrer dépend par exemple de l'âge, des symptômes, des effets souhaités, de la voie d'administration et de
la durée du traitement.
La dose quotidienne chez les mammifères (par exemples les mammifères domestiques tels que vaches, juments, truies, brebis et chiennes ou de préférence l'homme adulte) est généralement comprise
<EMI ID=29.1>
et 10 mg/kg de poids corporel en administration intraveineuse, intramusculaire ou sous-cutanée et de préférence entre 0,0003 et 30 mg/kg
de poids corporel en administration orale pour le traitement de l'anoxie des cellules du cerveau. Les composés actifs peuvent être administrés jusqu'à plusieurs fois par jour, par exemple 3 ou 4 fois par jour.
Comme indiqué ci-dessus, les doses à utiliser dépendent de différents facteurs. Ainsi il peut y avoir des cas où l'on puisse utiliser des doses plus élevées ou plus faibles que celles indiquées ci-dessus.
La présente invention est illustrée avec plus de détails dans les exemples expérimentaux et dans les exemples de préparation suivants : Les références aux brevets où à la littérature données entre parenthèses décrivent un procédé de préparation adhéquat. Dans
<EMI ID=30.1>
<EMI ID=31.1>
16. 19, 22, 24, 25 et 27.
Composé ?
1 Ester méthylique de l'éthano-16,19 dihomo-Wnitrilo-6,
<EMI ID=32.1>
<EMI ID=33.1>
(12), 4182 (1977)7 <EMI ID=34.1>
céto-6 PGE
<EMI ID=35.1> <EMI ID=36.1>
Dans ce qui suit, les rapports sont exprimés en volumes.
1) Chromatographie sur couche mince (abrégé ci-après CCM)
/solvant : acétate d'éthyle - cyclohexane 3/1 contenant 2 % d'acide
<EMI ID=37.1>
3) CCM /solvant : éther diéthylique/acétone : 3/1 contenant 0,1
de triéthylamine (sur plaque de gel de silice traitée avec une solution d'éther éthylique et de triéthylamine (95/5)J:Rf = 0,42
4) CCM /solvant : chloroforme/tétrahydrofuranne/acide acétique :
<EMI ID=38.1>
5) CCM /solvant : acétate d'éthyle/acide acétique : 20/1 (sur gel
de silice/; Rf = 0,3
<EMI ID=39.1>
7) P.F. = 92-95[deg.]C
8) P.F. = 63-65[deg.]C
EXEMPLE EXPERIMENTAL 1
Effet protecteur sur l'anoxie du cerveau par administration sous-cutanée.
i) Prolongation de la durée de vie : Mort induite par hypoxie à
pression normale chez la souris
On dissout une quantité d'un composé (composé N[deg.] 1, 3
<EMI ID=40.1>
tion avec une solution tampon 0,1 M de soude et de glycine (pH = 10,0) (pour les composés 1. 3 à 13, 15) ou avec de l'eau distillée
(pour les composés N[deg.] 17, 20 à 27). Pour le composé N[deg.] 19, on dissout une quantité du composé dans de l'eau distillée. On administre chaque solution par voie sous-cutanée à un groupe comprenant cinq souris mâles STD-ddY pesant entre 20 et 24 g, dans la proportion de 0,1 cm3 par 10 g de poids corporel de souris. A l'acmé
de l'effet (2 heures avec les composés N[deg.] 1, 3 à 6 ; 15 minutes
<EMI ID=41.1>
19 à 27) respectivement, les souris sont mises dans un récipient
en plastique de 2,5 litres de volume qui est alimenté à la vitesse de 4 litres à la minute par un mélange gazeux à basse teneur en oxygène composé de 4 % d'oxygène et 96 % d' azote . On. mesure le temps au bout duquel survient la mort en utilisant comme indice l'arrêt respiratoire. Pour comparaison, une solution tampon 0,1 M de soude et de glycine contenant la même concentration d'éthanol (comme pour les composés N[deg.] 1, 3 à 13, 15) ou de l'eau distillée contenant la même concentration d'éthanol (comme pour les composés N[deg.] 17, 20 à
27) ou de l'eau distillée (comme pour le composé N[deg.] 19) était administrée de la même manière au groupe témoin.
Les résultats sont montrés dans le tableau 1.
-, TABLEAU 1 : PROLONGATION DE LA DUREE DE VIE : MORT INDUITE PARHYPOXIE A PRESSION NORMALE CHEZ LA SOURIS (SC)
<EMI ID=42.1>
TABLEAU 1 (Suite)
<EMI ID=43.1>
TABLEAU 1 (Suite)
<EMI ID=44.1>
TABLEAU 1 (Suite)
<EMI ID=45.1>
Le tableau 2 suivant montre une relation dose-effet calculée en utilisant les résultats du tableau 1.
TABLEAU 2
<EMI ID=46.1>
<EMI ID=47.1>
ii) Prolongation du temps de halètement induit par ischemie
complète chez la souris
On dissout une quantité d'un composé (composés N[deg.] 1 à 11,
14 à 18, 20 à 22. 24 à 27) dans 0,1 cm3 d'éthanol et on dilue ensuite la solution avec une solution tampon 0,1 M de soude et de glycine
<EMI ID=48.1>
<EMI ID=49.1>
composé 19, on dissout une quantité du composé dans l'eau distillée. On administre chaque solution par voie sous-cutanée à un groupe comprenant 5 souris mâles STD-ddY pesant 20 à 24 g, dans la proportion de 0,1 cm3 par 10 g de poids corporel de souris. A l'acmé de l'effet (2 heures avec les composés ? 1 à 6 ; 15 minutes avec
<EMI ID=50.1>
22, 24 à 27) respectivement, le cou de la souris est coupé avec
des ciseaux pour la décapiter et on mesure le temps pendant lequel subsistent des mouvements de halètement à partir du moment où la tête est séparée. Par comparaison, une solution tampon 0,1 M de soude et de glycine contenant la même concentration d'éthanol (comme pour les composés ? à 11, 14 à 16) ou de l'eau distillée contenant la même concentration d'éthanol (comme pour les composés N[deg.] 17,
18. 20 à 22 et 24 à 27) ou de l'eau distillée (comn.e pour le composé
<EMI ID=51.1>
Les résultats sont indiqués dans le tableau 3.
TABLEAU 3 - PROLONGATION DU TEMPS DE HALETEMENT INDUIT
PAR ISCHEMIE COMPLETE CHEZ LA SOURIS (S.C.)
<EMI ID=52.1>
TABLEAU 3 (Suite)
<EMI ID=53.1>
TABLEAU 3 (Suite)
<EMI ID=54.1>
TABLEAU 3 (Suite)
<EMI ID=55.1>
TABLEAU 3 (suite)
<EMI ID=56.1>
Le tableau 4 ci-dessous montre la relation dose-effet calculée en utilisant les résultats du tableau 3 :
TABLEAU 4
<EMI ID=57.1>
<EMI ID=58.1>
mouvements de halètement de 15 % EXEMPLE EXPERIMENTAL 2
Effet protecteur sur l'anoxie cérébrale par administration orale
i) Augmentation de la durée de vie : Mort induite par hypoxie à
pression normale chez la souris
On dissout une quantité d'un composé (composé N[deg.] 1,4) dans 0,1 cm3 d'éthanol et on dilue la solution avec une solution
<EMI ID=59.1>
N[deg.] 19, on dissout une quantité du composé dans de l'eau distillée. On administre chaque solution par voie orale à un groupe comprenant 5 à 10 souris mâles STD-ddY et pesant entre 20 et 24 g, dans la
<EMI ID=60.1>
(composé N[deg.] 1,4) ou 2 heures (composé N[deg.] 19) après l'administration, on place les souris dans un récipient en plastique de 2,5 litres de volume que l'on alimente à la vitesse de 4 litres par minute avec un mélange gazeux pauvre en oxygène, composé de 4 % d'oxygène et
96 % d'azote. On mesure le temps au bout duquel les souris meurent en prenant comme indice l'arrêt respiratoire. Pour comparaison, une solution tampon à 0,1 M de soude et de glycine contenant la même concentration d'éthanol que la solution à essayer, ou contenant de l'eau distillée est administrée à un groupe-témoin. Les résultats sont donnés dans le tableau 5 ,
TABLEAU 5 - PROLONGATION DE DUREE DE VIE : MORT INDUITE
PAR HYPOXIE A PRESSION NORMALE CHEZ LA SOURIS (P.O.)
<EMI ID=61.1>
ii) Prolongation de la durée des mouvements de halètement
induits par ischémie complète chez la souris
<EMI ID=62.1>
N[deg.] 19, a dissout une quantité du produit dans de l'eau distillée. On administre chaque solution par voie orale à un groupe comprenant 5 à 10 souris mâles STD-ddY pesant entre 20 et 24 g, dans une proportion de 0,1 cm3 par 10 g de poids corporel de souris. 30 minutes
(composé N[deg.] 1,4) ou 2 heures (composé N[deg.] 19) après l'administration, on décapite les souris en leur coupant le cou avec des ciseaux et l'on mesure le temps, pendant lequel des mouvements de halètement subsistent après séparation de la tête. Pour comparaison, une solution tampon 0,1 M de soude et de glycine contenant la même concentration d'éthanol, ou d'eau distillée, est administrée de la même manière au groupe témoin. Les résultats sont indiqués au tableau 6 :
TABLEAU 6 - PROLONGATION DE LA DUREE DES MOUVEMENTS DE HALETE-MENT INDUITS PAR ISCHEMIE TOTALE CHEZ LA SOURIS (P.O.)
<EMI ID=63.1>
iii) Autre exemple expérimental a) Les composés 1,4 et 19 se montrent actifs chez la souris dans l'augmentation de durée de vie lorsqu'on induit la mort <EMI ID=64.1>
orale aux doses respectives de 3,0 : 1,0 et 0,3 mg/kg de poids corporel.
b) Les composés 1, 4 et 19 se montrent actifs chez la souris sur l'augmentation de durée de vie lorsque la mort est induite <EMI ID=65.1>
mg/kg de poids corporel), en administration orale aux doses respectives de 1,0 ; 1,0 et 0,3 mg/kg de poids corporel.
c) Les composés 1,4 et 19 se montrent actifs chez la souris sur l'inhibition de la décroissance du phosphate de créatinine, du triphosphate d'adénosine et du glucose dans le cerveau, induite par hypoxie par mélange gazeux appauvri en oxygène composé de 4 % d'oxygène et 96 % d'azote par administration orale aux doses de 3,0 ; 0,3 et 1,0 mg/kg de poids corporel.
EXEMPLE EXPERIMENTAL 3
Persistance de l'effet protecteur sur l'anoxie cérébrale. Prolongation du temps de mouvements de halètement induits par ischémie complète chez la souris
Un groupe comprend cinq souris mâles STD-ddY pesant
20 à 24 g. On administre une solution obtenue par dissolution d'une quantité de produit (composé N[deg.] 1,4) dans 0,1 cm3 d'éthanol et dilution avec une solution tampon 0,1 M de soude et de
glycine (pH 10,0), par voie sous-cutanée dans la proportion de 0,1 cm3 par 10 g de poids corporel de souris. On administre par voie orale une solution obtenue en dissolvant une quantité d'un composé
(composé N[deg.] 19) dans de l'eau distillée dans la même proportion
que ci-dessus. Après respectivement 15 minutes, 30 minutes, 1, 2,
<EMI ID=66.1>
30 minutes, 1, 2, 4 et 6 heures pour le composé N[deg.] 19 à partir de l'administration, on décapite les souris en leur coupant le cou avec des ciseaux et on mesure le temps pendant lequel subsistent des mouvements de halètement après séparation de la tête. Par comparaison, une solution à 0,1 M de soude et de glycine contenant la même concentration d'éthanol que la solution à étudier, ou de l'eau distillée, est administrée de la même manière au groupe témoin. Les résultats sont indiqués au tableau 7.
TABLEAU 7 - PROLONGATION DE LA DUREE DES MOUVEMENTS DE HALETEMENT
INDUITS PAR ISCHEMIE COMPLETE CHEZ LA SOURIS
<EMI ID=67.1>
TABLEAU 7 (Suite)
<EMI ID=68.1>
EXEMPLE DE PREPARATION 1
On dissout 50 mg d'ester méthylique de l'éthano-16,19
<EMI ID=69.1>
mélange à travers un tamis de 30 mesh et séchage à 30[deg.]C pendant
90 minutes, on passe à nouveau le mélange à travers un tamis de
30 mesh.
A la poudre obtenue, on ajoute 200 mg d'Aérosil (silice
dures ultra fine) et l'on remplit avec le mélange 100 capsules de gélatine\
<EMI ID=70.1>
<EMI ID=71.1>
N[deg.] 1) par capsule.
EXEMPLE DE PREPARATION 2
<EMI ID=72.1>
et l'on stérilise la solution par filtration à travers un filtre bactériologique. On remplit par portions de 0,1 cm3 des ampoules
<EMI ID=73.1>
ampoules sont ensuite scellées..
Le contenu de chaque ampoule, après dilution à un volume convenable, par exemple dilution à 1 cm3 par une solution tampon de pH 8.6 formé de chlorhydrate de tris-hydroxyméthyl aminométhane (tampon TRIS) est prêt à l'emploi sous forme de solution injectable.
EXEMPLE DE PREPARATION 3
<EMI ID=74.1>
cyclodextrine dans 10 cm3 d'eau distillée, on ajoute 10 mg d'acide citrique , 50 g de lactose et 800 cm3 d'eau distillée : On obtient ainsi une solution que l'on complète à 1 litre par addition d'eau distillée. Après cela, on stérilise la solution par filtration de manière conventionnelle et remplit des ampoules par portions de
1 cm3. Après lyophilisation, les ampoules sont scellées pour obtenir un lyophilisat prêt à l'emploi après dissolution, sous forme de solution injectable.
EXEMPLE DE PREPARATION 4
En opérant de manière analogue à celle décrite aux exemples de préparation 1, 2 et 3, mais à partir des composés N[deg.] 2 à 6, on prépare des capsules gastriques, solutions injectables et préparations lyophilisées contenant ces principes actifs.
EXEMPLE DE PREPARATION 5
On dissout 0,5 mg d'ester méthylique de la cyclohexyl-
<EMI ID=75.1>
stérilise la solution par passage à travers un filtre bactériologique. La solution est répartie à raison de 0,1 cm3 par ampoules dans des ampoules de 1 cm3 pour obtenir des ampoules contenant cha-
<EMI ID=76.1>
(composé N[deg.] 7).
Les ampoules sont ensuite scellées. Le contenu de chaque ampoule, après dilution à un volume convenable, par exemple dilution à 1 cm3 avec une solution de tampon TRIS (pH 8,6), est prêt à l'emploi sous forme de solution injectable.
EXEMPLE DE PREPARATION 6
A une solution de 50 mg d'ester méthylique de la cyclo-
<EMI ID=77.1>
dans 10 cm3 d'une solution à 1 % (en volumes) de triéthylamine dans l'eau, on ajoute 50 g de lactose et 800 cm3 d'une solution à 1 %
(en volumes) de triéthylamine dans l'eau , la solution obtenue est ajustée à un volume de 1 litre au moyen d'une solution à 1 % (en volumes) de triéthylamine dans l'eau. Après cela, on procède à une filtration stérile de la manière habituelle et on répartit la solution dans des ampoules, à raison de 1 cm3 par ampoule. Après lyophilisation,les ampoules sont scellées pour obtenir un lyophilisat prêt à l'emploi, après dissolution, sous forme de solution injectable.
EXEMPLE DE PREPARATION 7
En opérant de manière analogue à celle décrite aux exemples 5 et 6, mais en utilisant les composés N[deg.] 8 à 16, on
prépare des solutions injectables et des lyophilisats contenant ces principes actifs.
EXEMPLE DE PREPARATION 8
<EMI ID=78.1>
(composé N[deg.] 18) dans 10 cm3 d'éthanol. On mélange à la solution
18,5 g de mannitol. Après passage du mélange à travers un tamis
30 mesh et séchage à 30[deg.]C pendant 90 minutes, on passe à nouveau le mélange à travers un tamis 30 mesh.
A la poudre obtenue, on ajoute 200 mg d'Aérosil (silice ultra fine) et le mélange est réparti dans 100 capsules en gélatine dures ? 3 pour obtenir des capsules gastriques contenant chacune
<EMI ID=79.1>
EXEMPLE DE PREPARATION 9
<EMI ID=80.1>
par filtration à travers un filtre bactériologique. La solution est répartie dans des ampoules à raison de 0,1 cm3 par ampoule pour
<EMI ID=81.1>
scellées. Le contenu de chaque ampoule, après dilution à un volume convenable, par exemple par dilution à 1 cm3 avec du tampon TRIS
(pH 8,6) est prêt pour un emploi sous forme de solution injectable.
EXEMPLE DE PREPARATION 10
<EMI ID=82.1>
distillée, on ajoute 10 g d'acide citrique, 50 g de lactose et
800 cm3 d'eau distillée , La solution obtenue est ajustée à un volume de 1 litre par addition d'eau distillée. Après cela, on procède à une filtration stérile de la manière habituelle et on répartit la solution en ampoules à raison de 1 cm3 par ampoule. Après lyophilisation, les ampoules sont scellées ; On obtient ainsi un lyophilisat qui, après dissolution, est prêt à l'emploi pour une solution injectable.
EXEMPLE DE PREPARATION 11
En opérant de manière analogue à celle décrite aux exemples 8, 9 et 10, mais à partir des composés N[deg.] 17 et 19 à 27,
on prépare des capsules gastriques, des solutions injectables et des lyophilisats contenant le principe actif.
Il est entendu que l'expression "cellules du cerveau" telle qu'utilisée dans la présente description et les revendications y attenantes inclue les cellules nerveuses du cerveau les autres cellules du cerveau.
New therapeutic use of prostaglandin analogs.
The present invention relates to a new method for preventing and treating anoxia of the cells of the
<EMI ID = 1.1>
(hereinafter referred to as PGI), prostaglandin
<EMI ID = 2.1>
blood platelet, a relaxing activity of the smooth muscle of the arteries and an activity avoiding the secretion of gastric acid
(S. MONCADA and J.R. VA NE, Prostacyclin in Perspective, Prostacyclin, edited by J.R. VA NE and S. BERGSTROM, Raven Press, New-York, 1979).
The present invention, however, uses a novel and surprising activity of these derivatives in the treatment of anoxia in brain cells.
Unlike other organs in the body, the brain
is in a specific environment in a rigid body,
such as the skull or the cerebral dura mater, immersed in the cerebrospinal fluid, having among the various organs of the living body that which has the maximum rate of oxygen consumption - Most of the energy required by the cells nervous
of the brain comes from oxygen and glucose but the sources of these are hardly stored in the brain and are always delivered by the blood flow. Therefore, a cerebral blood flow control mechanism is well developed to deliver
stably sources of energy from brain tissue and keep constant an external environment of brain cells.
When the homeostatic mechanism of the brain fails due to physical compression such as a hematoma, tumor or trauma, the brain cells
are exposed to a state in which oxygen is lacking and
the brain cannot function normally.
The state in which oxygen is lacking (hereinafter referred to as anoxia) causes a change in the membrane permeability of brain cells so that it
there is edema caused by endosmosis of extracellular fluids. As the cerebral edema grows until it reaches a certain extent, the pressure in the brain increases and causes circulation problems in the brain. Accentuation
cerebral anoxia and glucose deficiency as well as the build up of metabolites. due to circulatory disorder promote cerebral edema so that the edema and the pressure of the brain increase further and that there is a repression of the brain, a disorder in the passage of cerebrospinal fluid: increased cerebral anoxia, acceleration of cerebral edema and increased
brain pressure are the result of this vicious cycle. The focus of the disorder is thus extended so that the initially normal brain tissue suffers from cerebral anoxia in which the brain suffers from circulatory failure and the disorders become serious. This is the reason why insufficient oxygen in the tissues is considered a common denominator of most brain diseases.
<EMI ID = 3.1>
Currently, hypnonarcotic agents such as phenobarbital and thiobarbital are used to treat diseases caused by anoxia of the brain cells. Hypnonarcotic agents inhibit the nerve action of the brain so that the energy requirements of the brain cells decrease and this results in a protective action of the function of the nerve cell. In other words, hypnonarcotic agents exert their action
by forcing the nerve cell to function at a lower level than normal. The dose of these agents that must be used to produce the desired effect affects the entire central nervous system.
Consequently, they exert an adverse influence on the respiratory and circulatory organs, by preventing respiration or by their effects on the regulatory centers of
blood pressure.
Consequently, there was a strong desire to develop drugs devoid of the side effects caused by hypnonarcotic agents but which exhibit excellent therapeutic effects at low doses for the prevention and treatment of anoxia of the brain cells.
As a result of intensive research, he has now
<EMI ID = 4.1>
exhibit excellent protective action against low dose cerebral anoxia and that their action is not based on the reduction of the function of the brain cell.
Accordingly, the present invention provides a method of treatment (which may be a preventive treatment) of these brain cells anoxia in mammals, which
includes administration to a host suffering from or subject to anoxia; at least
<EMI ID = 5.1>
<EMI ID = 6.1>
in which R represents a hydrogen atom or a lower alkyl radical and R2 represents a 2-methyl hexyl radical, a
<EMI ID = 7.1>
4-propyl cyclohexyl,
a PGI2 derivative of general formula:
<EMI ID = 8.1>
in which R3 represents a hydrogen atom or a lower alkyl radical and R4 represents a 2-methyl hexyl radical, a cyclopentyl radical, a 3-propyl cyclopentyl radical or a cyclohexyl radical,
a PGI2 derivative of general formula:
<EMI ID = 9.1>
<EMI ID = 10.1>
represents a pentyl radical, a methyl radical - � pentyle, a
-radical 1-methyl-5-chloro-pentyl, a 2-methyl-5-chloro-pentyl radical, a 3-ethyl-cyclopentyl radical, a 3-propyl-cyclopentyl radical, a 3-butyl-cyclopentyl radical, a (2-chloro-ethyl) radical - 3 cyclopentyl, a cyclohexyl radical, a 4-ethyl cyclohexyl radical or a cyclohexylmethyl radical, or a PGE1 derivative of general formula:
<EMI ID = 11.1>
in which X represents a methylene radical or a carbonyl radical and
i) when X represents a methylene radical, Y represents a radical
<EMI ID = 12.1>
hexyl or cyclohexylethyl, and
ii) when X represents a carbonyl radical, Y represents an ethylene radical. R_ represents a carboxy radical, an alkyl radical-
<EMI ID = 13.1>
a 2-methyl hexyl radical. cyclopentyle, propyl-3 cyclopentyle or butyl-3 cyclopentyle,
<EMI ID = 14.1>
general (I), (II). (III) and (IV) being in the trans position, the con- <EMI ID = 15.1> being E or Z or a mixture of these forms, the hydroxy radicals attached to the carbon at C in the general formulas (I). (II),
(III) and (IV) being in configuration 0 (, and the hydroxy radicals attached
<EMI ID = 16.1>
being in configuration * ^ or ^ 3 or a mixture of these two forms, preferably in configuration ^, or a cyclodextrin clathrate of a derivative of general formula (I), (II). (III) or (IV) above, or,
<EMI ID = 17.1>
<EMI ID = 18.1>
(IV) represents a carboxy radical, a non-toxic salt of these products.
In the present description and the claims which accompany it, the lower alkyl radicals are in straight or branched chain and contain 1 to 4 carbon atoms (preferably methyl) and the lower alkyl radicals are in straight chain
or branched and contain 1 to 4 carbon atoms (preferably methoxy).
PGI derivatives of formula (I), derivatives of
the PGI2 of general formulas (II) and (III) and the derivative of the
PGE of general formula (IV) as well as their cyclodextrin clathrates and their salts can be prepared by application or adaptation of the methods used previously or described in
<EMI ID = 19.1>
Which suitable processes are described in the descriptions of US patents? 3,931,296, 3,966,792,
4,178,367, 4,205,178, 4,215,142, 4,232,009, 4,234,597, 4,294,849 and 4,313,954, in the description of the German patent applications published under? 2,365,035, 2,409,460, 2,525,897, 2,753,986,
<EMI ID = 20.1>
and 3,006,032,
in the description of Belgian patents? 782 822, 809 169, 811 665,
862 547, 870 531 and 881 799.
in the description of the European patent application published under N [deg.] 0068871 and in
J. Am. Chem. Soc. 99 (12), 4182 (1977).
The prostaglandin derivatives preferred for use in the method according to the invention are the methyl ester of etha-
<EMI ID = 21.1>
PGE and their, cyclodextrin clathrates.
The especially preferred derivatives are the methyl ester.
<EMI ID = 22.1>
The treatment method according to the present invention can be used in the treatment of cerebral anoxia caused, for example, by intracranial disease since these. agents have a protective action against anoxia of the brain.
In addition, the derivatives used in the method according to the present invention do not show any side effects such as the suppression of respiration or the circulatory insufficiency coming from the inhibition of the entire central system since the protective action on the function of the brain cell is not
due to an inhibition of nerve action as is the case with the hypnonarcotic agents usually used for the treatment of anoxia of brain cells.
In addition, hypnonarcotic agents could only be administered at an acute stage, whereas it is possible to implement the treatment method according to the invention at a chronic stage and with the aim of preventing a relapse of the attack since the prostaglandin derivatives used have no hypnonarcotic action.
The prostaglandin derivatives used in accordance with the present invention show a protective action against anoxia of the brain at low doses and o, nt a powerful action. In addition, their toxicity is low and therefore the safety of use is
<EMI ID = 23.1>
administered subcutaneously to mice at a dose of 30 mg / kg, a dose which represents more than 300 times the minimum curative dose.
In the method according to the present invention, the PGI derivatives represented by the general formula (I) or the derivatives
of the PGI represented by the general formula (II) are characterized by a prolonged duration of action or a potency of activity reinforced by oral administration, and the compounds more particularly preferred among them include the methyl ester of
<EMI ID = 24.1>
rale (III) are characterized by an activity which appears rapidly or a power of activity specially reinforced in parenteral administration,: and the more particularly preferred compounds <EMI ID = 25.1>
rale (IV) are characterized by a prolonged duration of action or a power of activity reinforced both in oral and parenteral administration, and the more particularly preferred compound
<EMI ID = 26.1>
PGI derivatives represented by the formula
<EMI ID = 27.1>
(II) and (III) and the PGE derivatives represented by
the general formula (IV) can be used in the form of pharmaceutical compositions which comprise a derivative represented by the formulas (I), (II). (III) or (IV), a cyclodextrin clathrate or
a salt thereof with a pharmaceutically acceptable adjuvant or coating.
In clinical practice, for the prevention or treatment of anoxia, of brain cells, the compounds represented by the general formulas (I), (II), (III) or (IV),
or their cyclodextrin clathrates or their non-toxic salts will normally be administered systemically or locally, usually orally or parenterally (such as intravenously, subcutaneously, or intramuscularly).
Solid compositions for oral administration include tablets, pills, dispersible powders and granules. In these solid compositions, one or more active compounds are mixed with at least one inert diluent such as lactose, mannitol, glucose, hydroxypropylcellulose, microcrystalline cellulose, starch, polyvinylpyrrolidone, or metasilicate or aluminate. magnesium. The compositions can also include, as is common practice, additional substances other than inert diluents such as lubricants
like magnesium sterarate, dispersing agents like calcium gluconate cellulose.
The tablets or pills can be, if desired, coated with an enteric or gastric film, as is the case with tablets or pills coated with sugar, gelatin, hydroxypropylcellulose or hydroxypropylmethylcellulose phthalate; two or more layers are used.
The compositions for oral administration also include capsules made of absorbable material such as gelatin capsules containing one or more active substances with or without the addition of diluents or excipients.
Liquid compositions for oral administration include pharmaceutically acceptable emulsions, solutions, suspensions, syrups and elixirs containing inert diluents commonly used in the art such as distilled water or ethanol. Besides these inert diluents, these compositions can also comprise adjuvants such as wetting agents, suspending agents, sweetening, flavoring, perfuming and preserving agents.
Other compositions for oral administration include atomizer compositions which can be prepared by known methods and which comprise at least one compound according to the present invention.
Preparations for parenteral administration include sterile, aqueous or non-aqueous solutions, suspensions and emulsions.
As an example of aqueous solvents or setting medium
in suspension, there may be mentioned distilled water for injection and physiological solution. As examples of non-aqueous solvents or suspending media, mention may be made of propylene glycol,
polyethylene glycol; vegetable oils such as olive oil, alcohols such as ethanol and, polysorbate 80
(Trademark).
<EMI ID = 28.1>
adjuvants such as preservatives, wetting agents, emulsifiers and dispersing agents.
They can be sterilized, for example by filtration through a bacteriological filter, by incorporation of sterilizing agents in the compositions or by irradiation. They can also be prepared in the form of sterile solid compositions which can be dissolved at the time of use in sterile water or any other sterile injectable medium.
Other compositions include, for parenteral administration, liquids for external use and intradermal liniments such as ointments, suppositories for rectal administration, ova for vaginal administration. These compositions can be prepared according to known methods.
The percentage of active ingredient in the compositions according to the invention can vary, it being understood that it is necessary
that this percentage must constitute a proportion such that one
have a suitable dose to obtain the desired therapeutic effect. Of course, several forms can be administered in unit doses at the same time. In general, the preparations should normally contain at least 0.025% by weight of active substance when it is an administration by injection. For oral administration, the preparations contain at least 0.1% by weight of active substance.
The dose to be administered depends, for example, on age, symptoms, desired effects, route of administration and
duration of treatment.
The daily dose in mammals (for example domestic mammals such as cows, mares, sows, sheep and bitches or preferably adult humans) is generally included
<EMI ID = 29.1>
and 10 mg / kg of body weight for intravenous, intramuscular or subcutaneous administration and preferably between 0.0003 and 30 mg / kg
of oral body weight for the treatment of anoxia of brain cells. The active compounds can be administered up to several times a day, for example 3 or 4 times a day.
As indicated above, the doses to be used depend on different factors. Thus there may be cases where one can use higher or lower doses than those indicated above.
The present invention is illustrated in more detail in the experimental examples and in the following preparation examples: The references to patents or to the literature given in parentheses describe an adequate preparation process. In
<EMI ID = 30.1>
<EMI ID = 31.1>
16. 19, 22, 24, 25 and 27.
Composed?
1 Ethano-16,19 dihomo-Wnitrilo-6 methyl ester,
<EMI ID = 32.1>
<EMI ID = 33.1>
(12), 4182 (1977) 7 <EMI ID = 34.1>
keto-6 PGE
<EMI ID = 35.1> <EMI ID = 36.1>
In what follows, the reports are expressed in volumes.
1) Thin layer chromatography (abbreviated below TLC)
/ solvent: ethyl acetate - cyclohexane 3/1 containing 2% acid
<EMI ID = 37.1>
3) TLC / solvent: diethyl ether / acetone: 3/1 containing 0.1
triethylamine (on silica gel plate treated with a solution of ethyl ether and triethylamine (95/5) J: Rf = 0.42
4) TLC / solvent: chloroform / tetrahydrofuran / acetic acid:
<EMI ID = 38.1>
5) TLC / solvent: ethyl acetate / acetic acid: 20/1 (on gel
silica /; Rf = 0.3
<EMI ID = 39.1>
7) P.F. = 92-95 [deg.] C
8) P.F. = 63-65 [deg.] C
EXPERIMENTAL EXAMPLE 1
Protective effect on anoxia of the brain by subcutaneous administration.
i) Extension of the lifespan: Death induced by hypoxia at
normal pressure in mice
We dissolve an amount of a compound (compound N [deg.] 1, 3
<EMI ID = 40.1>
tion with a 0.1 M sodium hydroxide and glycine buffer solution (pH = 10.0) (for compounds 1. 3 to 13, 15) or with distilled water
(for compounds N [deg.] 17, 20 to 27). For compound N [deg.] 19, an amount of the compound is dissolved in distilled water. Each solution is administered subcutaneously to a group comprising five male STD-ddY mice weighing between 20 and 24 g, in the proportion of 0.1 cm 3 per 10 g of mouse body weight. At the peak
effect (2 hours with compounds N [deg.] 1, 3 to 6; 15 minutes
<EMI ID = 41.1>
19 to 27) respectively, the mice are put in a container
plastic of 2.5 liters volume which is fed at the speed of 4 liters per minute by a gaseous mixture with low oxygen content composed of 4% oxygen and 96% nitrogen. We. measures the time after which death occurs, using respiratory arrest as an index. For comparison, a 0.1 M buffer solution of sodium hydroxide and glycine containing the same concentration of ethanol (as for compounds N [deg.] 1, 3 to 13, 15) or distilled water containing the same concentration ethanol (as for compounds N [deg.] 17, 20 to
27) or distilled water (as for compound N [deg.] 19) was administered in the same manner to the control group.
The results are shown in Table 1.
-, TABLE 1: EXTENSION OF THE LIFETIME: INDUCED DEATH BY NORMAL PRESSURE PARHYPOXIS IN THE MOUSE (SC)
<EMI ID = 42.1>
TABLE 1 (Continued)
<EMI ID = 43.1>
TABLE 1 (Continued)
<EMI ID = 44.1>
TABLE 1 (Continued)
<EMI ID = 45.1>
The following table 2 shows a dose-effect relationship calculated using the results of table 1.
TABLE 2
<EMI ID = 46.1>
<EMI ID = 47.1>
ii) Extension of the panting time induced by ischemie
complete in mice
We dissolve a quantity of a compound (compounds N [deg.] 1 to 11,
14 to 18, 20 to 22. 24 to 27) in 0.1 cm3 of ethanol and the solution is then diluted with a 0.1 M sodium hydroxide and glycine buffer solution
<EMI ID = 48.1>
<EMI ID = 49.1>
compound 19, an amount of the compound is dissolved in distilled water. Each solution is administered subcutaneously to a group comprising 5 male STD-ddY mice weighing 20 to 24 g, in the proportion of 0.1 cm 3 per 10 g of mouse body weight. At the peak of the effect (2 hours with the compounds? 1 to 6; 15 minutes with
<EMI ID = 50.1>
22, 24 to 27) respectively, the neck of the mouse is cut with
scissors to decapitate it and we measure the time during which panting movements remain from the moment the head is separated. By comparison, a 0.1 M buffer solution of sodium hydroxide and glycine containing the same concentration of ethanol (as for the compounds? To 11, 14 to 16) or distilled water containing the same concentration of ethanol (as for compounds N [deg.] 17,
18. 20 to 22 and 24 to 27) or distilled water (as for the compound
<EMI ID = 51.1>
The results are shown in Table 3.
TABLE 3 - EXTENSION OF THE INDUCED BREATHING TIME
BY COMPLETE ISCHEMY AT THE MOUSE (S.C.)
<EMI ID = 52.1>
TABLE 3 (Continued)
<EMI ID = 53.1>
TABLE 3 (Continued)
<EMI ID = 54.1>
TABLE 3 (Continued)
<EMI ID = 55.1>
TABLE 3 (continued)
<EMI ID = 56.1>
Table 4 below shows the dose-effect relationship calculated using the results of Table 3:
TABLE 4
<EMI ID = 57.1>
<EMI ID = 58.1>
15% panting movements EXPERIMENTAL EXAMPLE 2
Protective effect on cerebral anoxia by oral administration
i) Increased lifespan: Death induced by hypoxia at
normal pressure in mice
An amount of a compound (compound N [deg.] 1.4) is dissolved in 0.1 cm3 of ethanol and the solution is diluted with a solution
<EMI ID = 59.1>
N [deg.] 19, an amount of the compound is dissolved in distilled water. Each solution is administered orally to a group comprising 5 to 10 male STD-ddY mice weighing between 20 and 24 g, in the
<EMI ID = 60.1>
(compound N [deg.] 1.4) or 2 hours (compound N [deg.] 19) after administration, the mice are placed in a plastic container of 2.5 liters of volume which is fed to the speed of 4 liters per minute with a gas mixture poor in oxygen, composed of 4% oxygen and
96% nitrogen. The time after which the mice die is measured by taking respiratory arrest as an index. For comparison, a 0.1 M sodium hydroxide and glycine buffer solution containing the same concentration of ethanol as the test solution, or containing distilled water is administered to a control group. The results are given in Table 5,
TABLE 5 - EXTENSION OF LIFE: INDUCED DEATH
BY NORMAL PRESSURE HYPOXIA IN THE MOUSE (P.O.)
<EMI ID = 61.1>
ii) Extension of the duration of panting movements
induced by complete ischemia in mice
<EMI ID = 62.1>
N [deg.] 19, dissolved an amount of the product in distilled water. Each solution is administered orally to a group comprising 5 to 10 male STD-ddY mice weighing between 20 and 24 g, in a proportion of 0.1 cm 3 per 10 g of mouse body weight. 30 minutes
(compound N [deg.] 1,4) or 2 hours (compound N [deg.] 19) after administration, the mice are decapitated by cutting their necks with scissors and the time, during which time, is measured panting movements remain after separation of the head. For comparison, a 0.1 M buffer solution of sodium hydroxide and glycine containing the same concentration of ethanol, or distilled water, is administered in the same way to the control group. The results are shown in Table 6:
TABLE 6 - EXTENSION OF THE DURATION OF TOTAL ISCHEMIA-INDUCED BREATH MOVEMENTS IN THE MOUSE (P.O.)
<EMI ID = 63.1>
iii) Another experimental example a) Compounds 1,4 and 19 are shown to be active in mice in increasing lifespan when death is induced <EMI ID = 64.1>
oral at respective doses of 3.0: 1.0 and 0.3 mg / kg body weight.
b) Compounds 1, 4 and 19 are active in mice on the increase in lifespan when death is induced <EMI ID = 65.1>
mg / kg body weight), administered orally at respective doses of 1.0; 1.0 and 0.3 mg / kg body weight.
c) Compounds 1,4 and 19 appear to be active in mice on the inhibition of the decrease in creatinine phosphate, adenosine triphosphate and glucose in the brain, induced by hypoxia by an oxygen-depleted gas mixture composed of 4% oxygen and 96% nitrogen by oral administration at doses of 3.0; 0.3 and 1.0 mg / kg body weight.
EXPERIMENTAL EXAMPLE 3
Persistence of the protective effect on cerebral anoxia. Extension of the time of panting movements induced by complete ischemia in mice
One group includes five male STD-ddY mice weighing
20 to 24 g. A solution obtained is administered by dissolving an amount of product (compound N [deg.] 1.4) in 0.1 cm3 of ethanol and diluting with a 0.1 M buffer solution of sodium hydroxide and
glycine (pH 10.0), subcutaneously in the proportion of 0.1 cm3 per 10 g of body weight of mice. A solution obtained by dissolving an amount of a compound is administered orally
(compound N [deg.] 19) in distilled water in the same proportion
as above. After 15 minutes, 30 minutes, 1, 2, respectively,
<EMI ID = 66.1>
30 minutes, 1, 2, 4 and 6 hours for compound N [deg.] 19 from the administration, the mice are decapitated by cutting their necks with scissors and the time during which movements of gasping after separation of the head. By comparison, a 0.1 M solution of sodium hydroxide and glycine containing the same concentration of ethanol as the solution to be studied, or distilled water, is administered in the same way to the control group. The results are shown in Table 7.
TABLE 7 - EXTENSION OF THE DURATION OF THE HALKING MOVEMENTS
INDUCED BY COMPLETE ISCHEMIA IN THE MOUSE
<EMI ID = 67.1>
TABLE 7 (Continued)
<EMI ID = 68.1>
PREPARATION EXAMPLE 1
Dissolve 50 mg of methyl ester of ethano-16.19
<EMI ID = 69.1>
mixing through a 30 mesh screen and drying at 30 [deg.] C for
90 minutes, the mixture is again passed through a sieve of
30 mesh.
200 mg of Aerosil (silica) are added to the powder obtained.
hard) and fill with the mixture 100 gelatin capsules \
<EMI ID = 70.1>
<EMI ID = 71.1>
N [deg.] 1) per capsule.
PREPARATION EXAMPLE 2
<EMI ID = 72.1>
and the solution is sterilized by filtration through a bacteriological filter. Ampoules are filled in 0.1 cm3 portions
<EMI ID = 73.1>
ampoules are then sealed ..
The contents of each ampoule, after dilution to a suitable volume, for example dilution to 1 cm 3 with a buffer solution of pH 8.6 formed of tris-hydroxymethyl aminomethane hydrochloride (TRIS buffer) is ready for use in the form of a solution for injection.
PREPARATION EXAMPLE 3
<EMI ID = 74.1>
cyclodextrin in 10 cm3 of distilled water, 10 mg of citric acid, 50 g of lactose and 800 cm3 of distilled water are added: A solution is thus obtained which is made up to 1 liter by adding distilled water. After that, the solution is sterilized by filtration in a conventional manner and filled with ampoules in portions of
1 cm3. After lyophilization, the ampoules are sealed to obtain a lyophilisate ready for use after dissolution, in the form of a solution for injection.
PREPARATION EXAMPLE 4
By operating in a similar manner to that described in examples of preparation 1, 2 and 3, but starting from compounds N [deg.] 2 to 6, gastric capsules, injectable solutions and lyophilized preparations containing these active ingredients are prepared.
PREPARATION EXAMPLE 5
0.5 mg of methyl ester of cyclohexyl- is dissolved.
<EMI ID = 75.1>
sterilizes the solution by passage through a bacteriological filter. The solution is distributed at the rate of 0.1 cm3 per ampoule in 1 cm3 ampoules to obtain ampoules containing each
<EMI ID = 76.1>
(compound N [deg.] 7).
The ampoules are then sealed. The contents of each ampoule, after dilution to a suitable volume, for example dilution to 1 cm 3 with a TRIS buffer solution (pH 8.6), is ready for use in the form of a solution for injection.
PREPARATION EXAMPLE 6
To a solution of 50 mg of methyl ester of cyclo
<EMI ID = 77.1>
in 10 cm3 of a 1% solution (by volume) of triethylamine in water, 50 g of lactose and 800 cm3 of a 1% solution are added
(by volume) of triethylamine in water, the solution obtained is adjusted to a volume of 1 liter by means of a 1% solution (by volume) of triethylamine in water. After that, sterile filtration is carried out in the usual manner and the solution is distributed in ampoules, at the rate of 1 cm 3 per ampoule. After lyophilization, the ampoules are sealed to obtain a ready-to-use lyophilisate, after dissolution, in the form of a solution for injection.
PREPARATION EXAMPLE 7
By operating in a manner analogous to that described in Examples 5 and 6, but using the compounds N [deg.] 8 to 16, we
prepares injectable solutions and lyophilisates containing these active ingredients.
PREPARATION EXAMPLE 8
<EMI ID = 78.1>
(compound N [deg.] 18) in 10 cm3 of ethanol. We mix with the solution
18.5 g mannitol. After passing the mixture through a sieve
30 mesh and drying at 30 [deg.] C for 90 minutes, the mixture is again passed through a 30 mesh sieve.
To the powder obtained, 200 mg of Aerosil (ultra fine silica) are added and the mixture is distributed in 100 hard gelatin capsules? 3 to obtain gastric capsules each containing
<EMI ID = 79.1>
PREPARATION EXAMPLE 9
<EMI ID = 80.1>
by filtration through a bacteriological filter. The solution is distributed in ampoules at the rate of 0.1 cm3 per ampoule for
<EMI ID = 81.1>
sealed. The contents of each vial, after dilution to a suitable volume, for example by dilution to 1 cm3 with TRIS buffer
(pH 8.6) is ready for use as a solution for injection.
PREPARATION EXAMPLE 10
<EMI ID = 82.1>
distilled, 10 g of citric acid, 50 g of lactose and
800 cm3 of distilled water. The solution obtained is adjusted to a volume of 1 liter by adding distilled water. After that, sterile filtration is carried out in the usual manner and the solution is distributed in ampoules at the rate of 1 cm 3 per ampoule. After lyophilization, the ampoules are sealed; A lyophilisate is thus obtained which, after dissolution, is ready for use for an injectable solution.
PREPARATION EXAMPLE 11
By following a procedure analogous to that described in Examples 8, 9 and 10, but starting from compounds N [deg.] 17 and 19 to 27,
gastric capsules, injectable solutions and lyophilisates containing the active ingredient are prepared.
It is understood that the term "brain cells" as used in the present description and the claims appertaining thereto includes nerve cells of the brain other brain cells.