<EMI ID=1.1>
PROTEIQUE VEGETAL PURIFIE ET PRODUITS OBTENUS.
Comme on peut le constater dans la littérature précitée, un concentrât de soya est un produit protéique purifié de soya contenant environ 70%
<EMI ID=2.1>
après par l'expression "protéine". On obtient habituellement le produit d'isolation de soya par précipitation à l'acide comme représenté en figure 1 à laquelle on se référera également ci-après,, tandis que
<EMI ID=3.1>
dire que 60% seulement de la protéine contenue dans les fèves de soya sont récupérés dans le produit d'isolation de soya, Des essais ont été entrepris) en vue d'augmenter le rendement en produit d'isolation
de soya par le procédé de précipitation à l'acide mains jusqu'à présent, ces essais n'ont pas été couron-
<EMI ID=4.1>
Dès lors, la production d'un produit protéique végétal purifié, en particulier, d'un produit d'isolation de noya, peut encore être améliorée en ce qui concerne le rendement, mais ce produit protéique végétal purifié, en particulier, le produit d'isolation de soya peut encore être amélioré en ce qui concerne la teneur en acides aminés sulfurés et, d'une manière générale,en ce qui concerne la teneur totale en acides aminés essentiels.
<EMI ID=5.1>
matière à base de noya ne donne des produite protêt- <EMI ID=6.1>
matière sèche) supérieure à celle du concentrat protéique de soya, Les produits obtenus par les procédés connus indiquée ci-dessus sont des protéines parfaitement appropriées pour les fourrages, mais ils n'ont aucune valeur en ce qui concerne l'application pour
<EMI ID=7.1>
Aucun procédé connu pour l'élimination des polysaccharides des matières premières mentionnées ci-dessus ne comprend une décomposition enzymatique au moyen d'un
<EMI ID=8.1>
La présente invention a pour objet de fournir un procédé économiquement intéressant pour la production d'un produit protéique végétal purifié ayant une haute teneur en protéine et une haute teneur totale en acides aminée essentiels, en particulier, en acides aminés sulfurée.
Suivant la présente invention, on prévoit
<EMI ID=9.1>
tal purifié par élimination de la rémanence (constituée principalement de polysaccharides) d'une protéine végétale dégraissée ou dégraissée et, en outre, partiellement purifiée en particules d'une granularité
<EMI ID=10.1>
"matière de départ", ce procédé consistant à traiter la matière de départ avec un produit enzymatique ayant
<EMI ID=11.1> solubilisés pour séparer =suite, du produit surnagéante la phase solide contenant le produit protéique végétal purifiée
Ainai qu'on l'exposera ci-après de ma-
<EMI ID=12.1>
solubilise la rémanence, laquelle est identique aux
<EMI ID=13.1>
la page 38 de l'article précité de Waggle et Kolar. On se référera également à la figure 1 dans laquelle la rémanence apparaît comme partie principale d'une des fractions résiduaires du procédé traditionnel de formation d'un produit d'isolation,, On peut trouver une description d'une rémanase exempte de protéinase
<EMI ID=14.1>
en se référant en particulier à la fraction D mentionnée à la page 1858* Etant donné que la rémanence est constituée de matières d'une nature chimique différente, il est préférable que le produit enzymatique mentionné ci-dessus et ayant une activité solubilisante de rémanence contienne plus d'une espèce enzymatique.
De façon étonnante, suivant l'invention, on peut obtenir ce produit protéique végétal purifié
à l'échelle industrielle et de manière économiquement intéressante au moyen d'un produit de rémanase exempt de ou pauvre en protéase. C'est ainsi que, dans le cas d'un procédé de préparation d'un produit protéique de soya purifié, suivant l'invention, on peut obtenir ce produit avec une teneur en protéine d'environ
90% (correspondant au produit d'isolation de soya) ai bien que, en outre, le produit de soya purifié a une teneur plus élevée en acides aminés sulfurés que le produit d'isolation de soya traditionnel, Suivant l'invention, on peut obtenir un produit d'isolation
<EMI ID=15.1>
Selon l'invention, la protéine végétale dégraissée en particules d'une granularité inférieure à environ 2,5 mm comprend notamment de la farine de fèves de soya dégraissées, de la farine de semences de colza dégraissée*, de la farine de semences de coton dégraissées, de la farine de semences de tournesol dégraissées et de la farine d'arachides dégraissées*
Selon l'invention, la protéine végétale dégraissée et, en outre, partiellement purifiée en particules d'une granularité inférieure à environ
<EMI ID=16.1>
dégraissées mentionnées ci-dessus que l'on soumet à une purification complémentaire par extraction de composés à bas poids moléculaire afin que la protéine et les polysaccharides restent insolubles,
De préférence, la granularité des parti-
<EMI ID=17.1>
encore, inférieure à 0,1 mm.
La rémanaae utilisée dans le procédé suivant l'invention peut être obtenue au moyen de plusieurs micro-organismes produisant des enzymes pectolytiquea, de préférence, les champignons, par
<EMI ID=18.1> <EMI ID=19.1>
déjà existant et ayant une teneur relativement élevée en protéase, par exemple, la pectinase commerciale
<EMI ID=20.1>
de "Novo Industri A/S" , peut être soumis à un traitement physique ou chimique permettant d'éliminer ou d'inactiver sélectivement l'activité de protéase, Ce
<EMI ID=21.1>
aucune protéinase ou n'en formant que de très faibles quantités peut être utilisé pour obtenir le produit
<EMI ID=22.1>
par mutation d'un micro-organisme producteur de resta" nase.
De préférence, le rapport entre les ac-
<EMI ID=23.1>
On se référera utilement aux figures 1 à 3 annexées qui représentent :
figure 1, un tableau comparatif d'un procédé traditionnel avec produit d'isolation et d'un procédé à la rémanase; figure 2, la courbe du pourcentage de polysaccharides solubilisée vis-à-vis du dosage de <EMI ID=24.1> charides, exprimé en fonction du temps en minutes.
Au cours du procédé suivant l'invention,
<EMI ID=25.1>
<EMI ID=26.1>
situer entre 15 et 500, de préférence, entre 100 et
<EMI ID=27.1> <EMI ID=28.1>
flocons blancs*
Le rapport pondéral entre le liquide et
<EMI ID=29.1>
<EMI ID=30.1>
rence, de plus de 1 unité et, mieux encore, de plus de 0,5 unité du point isoélectrique de la partie principale de la fraction protéique de la matière de départ. Dana la forae de réalisation de loin préférée, le pH régnant au cours de l'hydrolyse est égal ou presque égal au point isoélectrique de la partie principale de la fraction protéique de la matière de dé-
<EMI ID=31.1>
faisant ressortir les points isoélectriques de la partie principale de la fraction protéique de certaines matières de départ que l'on peut traiter par le procédé de l'invention*
<EMI ID=32.1>
<EMI ID=33.1>
de 1,5 unité de pH) du point isoélectrique de la partie principale de la fraction protéique de la matière de départ à traiter, on peut avantageusement effectuer
<EMI ID=34.1>
isoélectrique ou à peu près au point isoélectrique de la partie principale de la fraction protéique de la matière de départ avant de séparer la phase solide du produit surnageant*
La température d'hydrolyse se situe dans
<EMI ID=35.1>
quantité de rémanence. Afin d'éviter une croissance microbienne, il est souhaitable de raccourcir le plus possible le temps d'hydrolyse* Dans la pratique nor-
<EMI ID=36.1>
On se référera à la figure 3 qui indique le pourcentage de polysaccharides solubilisés en fonction du temps dans les conditions de réaction suivantes
<EMI ID=37.1>
de la rémanence correspond à une amélioration de la teneur en protéine (basée sur la matière sèche) allant
<EMI ID=38.1>
végétal purifié), pour autant qu'il n'y ait aucune <EMI ID=39.1>
soya.
<EMI ID=40.1>
La séparation entre la phase solide contenant le produit protéique végétal purifié et le produit surnageant peut être effectuée par les procédés habituels de séparation entre les solides et les li-
<EMI ID=41.1>
et la décantation. A des fins de production, la centrifugation est préférée et il est particulièrement préférable de procéder à plusieurs lava.- et centri-
<EMI ID=42.1>
Normalement, la phase solide provenant du procédé de séparation précité est soumise à un traiteaent complémentaire afin d'améliorer la qualité du produit protéique végétal purifié. On se référera à la figure 1 qui indique les opérations préférées de <EMI ID=43.1>
tion et le séchage par pulvérisation.
On décrira ci-après le procédé de déter-
<EMI ID=44.1>
Le substrat protéique de noya est la fraction de globuline isolée des fèves de soya et
<EMI ID=45.1>
<EMI ID=46.1>
On incube un échantillon d'enzyme avec un substrat en suspension dans les conditions indiquées ci-dessous
<EMI ID=47.1>
On effectue le dosage d'enzyme de la
<EMI ID=48.1>
<EMI ID=49.1>
échantillon d'enzyme dilué de façon 1 obtenir une courbe réactionnelle linéaire dans le lapa de tempe de 0 à 20 minutée. On effectue des dosages à trois
<EMI ID=50.1>
l'échantillon d'enzyme Du récipient réactionnel, on prélève des échantillons ayant chacun un volume d'en-
<EMI ID=51.1>
filtre chaque échantillon au moyen d'un filtre en fibres de verre d'une dimension calculée de telle aorte que la filtration ait lieu dans la minute* Ensuite , on mesure la quantité d'azote solubilisé contenu dans le filtrat en recourant à 1* analyse de
<EMI ID=52.1>
protéolytique qui, par le procédé ci-dessus libère 1 umole d'azote par minute (mesure effectuée dans le <EMI ID=53.1>
nière suivante :
A 5,5 ml d'un substrat maintenu dans un
<EMI ID=54.1>
d'enzyme (dilué de façon à obtenir une courbe réactionnelle linéaire dana le temps de réaction de 5 à
<EMI ID=55.1>
<EMI ID=56.1>
leurs de E, on effectue deux essais; dans le premier essai, on arrête la réaction après une durée de 5 minutes tandis que, dans le deuxième essai* on arrête la réaction après 20 minutes en ajoutant 3 ml d'un
<EMI ID=57.1>
Ensuite, on filtre les échantillons et on mesure la quantité d'équivalents de galactose en adoptant le procédé au tryptophane/acide sulfurique pour la détermination de la teneur totale en sucre
<EMI ID=58.1>
le procédé ci-dessus, libère 1 umole d'équivalent de galactose par minute (mesure effectuée dans le temps de réaction de 5 à 20 minutes)"
Il apparaît que la relation SRU-E n'est
<EMI ID=59.1> On a trouvé qu'en plus de la lignine,
la rémanence des semences riches en protéines était constituée principalement des polysaccharides suivantes
1) Polysaccharidea pectiques constitués principalement d'acide D-galacturonique, de D-galac-
<EMI ID=60.1>
3) Cellulose,
4) Amidon.
Dès lors, chaque produit enzymatique de
<EMI ID=61.1>
De même, il est à noter que le procédé suivant l'invention ne nécessite pas la dissolution et la reprécipitation de la protéine de soya que l'on effectue au cours du procédé classique a v e c
un produit d'isolation de soya* Ceci apparaît également en figure 1 qui est un schéma reprenant les dif-
<EMI ID=62.1>
Au cours de l'extraction du procédé traditionnel a v e c un produit d'isolation, la protéine est transférée dans le produit surnageant tandis que, dans
<EMI ID=63.1>
lait' ) . De même, en se référant à la figure 1, on peut noter que la rémanence est le composant poly-
<EMI ID=64.1>
traditionnel avec un un produit d'isolation" On peut également utiliser le produit enzymatique suivant l'invention pour la production d'un concentrât de aoya. On obtient normalement un concentrat de soya en lavant de la farine de soya
<EMI ID=65.1>
vant l'invention est ajoutée au cours du procédé de lavage, on obtient une teneur en protéine (calculée
<EMI ID=66.1>
tionnel a v e c un concentrât de soya. De façon étonnante, on a trouvé que les propriétés fonctionnellea du concentrât de soya obtenu par le produit enzymatique suivant l'invention (en particulier
<EMI ID=67.1>
<EMI ID=68.1>
du concentrât de soya classique.
Les essais 1 et 2 ci-après illustrent un.
<EMI ID=69.1>
l'invention*
Essai 1
<EMI ID=70.1>
substrat d'agar-agar de la composition suivants *
<EMI ID=71.1>
<EMI ID=72.1>
trat nutritif de la composition suivante s
<EMI ID=73.1>
On règle le pH à 5,5 avant l'addition de
<EMI ID=74.1>
tes à 12110 Ce Ensuite, on transfère tout le contenu du ballon de Fernbach dans la cuve d'incubation. Au cours de la culture effectuée dans la cuve d'inocula-
<EMI ID=75.1>
On prépare deux charges de substrat dans deux cuves principales de fermentation avec un volume de départ de 300 litres de substrat nutritif,
<EMI ID=76.1> <EMI ID=77.1>
Après 28 heures de croissance dans la cuve d'inoculation, on transfère deux fois 30 litres du contenu de cette cuve dans les deux cuves principales de fermentation mentionnées ci-dessus. Au cours de la fermentation effectuée dans les deux cuves principales, le rapport d'aération est de 1 litre normal par litre de bouillon de culture et par minute, tandis que l'agita-
<EMI ID=78.1>
seconde, La pression est de 0,5 atmosphère* Au cours de la fermentation, on ajoute régulièrement une quan-
<EMI ID=79.1>
mentation (poids/volume).
Après fermentation pendant 106 heures, on récupère les enzymes du bouillon de culture, Des deux cuves principales de fermentation mentionnées cidessus, on obtient un total de 700 litres d'un bouillon de fermentation, On filtre ce bouillon de fermentation sur un filtre à tambour sous vide comportant un revêtement préalable de terre d'infusoires "Colite
<EMI ID=80.1>
pulvérisation d'eau pour assurer le déplacements On obtient ainsi 750 litrea d'un filtrat clair. Par
<EMI ID=81.1>
<EMI ID=82.1>
30 1 de concentrât (produit de rétention). On soumet le concentrât à une filtration de germes sur un filtre-
<EMI ID=83.1> <EMI ID=84.1>
On dissout 100 g du produit lyophilisé
<EMI ID=85.1>
tampon d'acétate ci-dessus* On soumet ensuite les filtrats à une ultrafiltration� à une diafiltration et à une lyophilisation, On analyse ensuite les deux
<EMI ID=86.1>
<EMI ID=87.1>
Exemple 1
Cet exemple décrit la production, en labo-
<EMI ID=88.1>
partir de flocons blancs de soya décortiqués et dégraissés que l'on broie ensuite pour obtenir une
<EMI ID=89.1> <EMI ID=90.1>
pour en déterminer la teneur en asote, la teneur totale en carbohydrates (procédé mentionné ci-dessus
<EMI ID=91.1>
naae) et de la teneur en matière sèche* Ensuite, on lave la phase solide avec un volume d'eau équivalant au volume du produit surnageant obtenu à la suite de la première centrifugation* On effectue deux fois cette opération* A la phase solide soumise trois
<EMI ID=92.1>
<EMI ID=93.1>
sur la base de ces résultats, on effectue les calcula
<EMI ID=94.1>
<EMI ID=95.1>
Rendement en protéine du produit .
protéique végétal purifié, mur la
base de la teneur en protéine des pro-
<EMI ID=96.1> <EMI ID=97.1>
Pourcentage de matière sèche de la protéine : lui
<EMI ID=98.1>
<EMI ID=99.1>
<EMI ID=100.1>
Exemple 2
<EMI ID=101.1>
la solution ainsi obtenue à une suspension agitée de farine de soya, ce qui correspond à un dosage de
<EMI ID=102.1>
On agite la suspension pendant 120 minutes, Ensuite, on soumet la suspension à une centrifugation dans une
<EMI ID=103.1>
pour en déterminer la teneur en azote et en matière mèche, puis on l'élimine* On lave la phase solide
<EMI ID=104.1>
duit surnageant comme décrit ci-dessus* On répète une fois encore cette opération. Ensuite, on recueille la. phase solide obtenue et on la soumet à une lyophilisation* On obtient 46 g d'un produit noce On analyse ce produit pour en déterminer la teneur en protéine et la teneur en matière sèche on détermine la composition suivante
<EMI ID=105.1>
ment en protéine" Masse de protéine dans les produits
<EMI ID=106.1> <EMI ID=107.1>
Nasse de protéine retirée de la farine de soya 6,68 g Pourcentage de protéine solubilisée
<EMI ID=108.1>
.
Afin de déterminer le pourcentage de polysaccharides solubilisés, on effectue un essai témoin sans addition d'enzyme, mais en procédant,pour le reste, exactement comme décrit ci-dessus"
<EMI ID=109.1> <EMI ID=110.1>
<EMI ID=111.1>
<EMI ID=112.1>
<EMI ID=113.1>
Exemple
On effectue cet exemple afin de comparer les rendements en protéine et la qualité nutritive des produita protéiques de soya obtenue par les trois
<EMI ID=114.1>
<EMI ID=115.1>
<EMI ID=116.1>
trot protéique de soya,
C Procédé à la réaanase pour la production d'un
produit protéique végétal purifié,
<EMI ID=117.1>
bouillie pendant 30 minutes à la température ambiante,
<EMI ID=118.1>
de centrifugation (X) et on le soumet à l'analyse de Kjeldahl pour en déterminer la teneur en azote
<EMI ID=119.1> <EMI ID=120.1>
miner la teneur en auto et en matière sèche. On levé la phase solide avec de l'eau en une quantité correa-
<EMI ID=121.1>
Après avoir répété la centrifugation, on neutralise la phase solide et on la soumet à une lyophilisation. Le tableau 3*1 donne le bilan de masse obtenu.
On extrait 108,2 g de farine de soya à
<EMI ID=122.1>
teneur en azote et en matière sèche* On lave la phase solide (produit protéique végétal purifié) avec de
<EMI ID=123.1>
<EMI ID=124.1>
protéique végétal purifié lavé et on le soumet à une lyophilisation* Le tableau 3*1 donne le bilan de masse obtenu.
<EMI ID=125.1>
<EMI ID=126.1> <EMI ID=127.1>
en matière sèche* On levé la phase solide (produit'
<EMI ID=128.1>
quantité équivalant à celle du produit de centri-
<EMI ID=129.1>
<EMI ID=130.1>
<EMI ID=131.1>
masse obtenu.
On détermine les compositions en acides aminés des trois produits protéiques (voir tableau
<EMI ID=132.1>
essentiels" de mène que l'indice d'acides "minés essentiels* Cet indice d'acides aminée essentiels
<EMI ID=133.1>
<EMI ID=134.1>
<EMI ID=135.1>
<EMI ID=136.1>
<EMI ID=137.1>
<EMI ID=138.1>
<EMI ID=139.1>
<EMI ID=140.1>
<EMI ID=141.1>
tion".
Exemple 4
Le concentrât de protéine de soya
<EMI ID=142.1>
On aoumet ensuite le mélange à une centrifugation
<EMI ID=143.1>
le produit de centrifugation, on le neutralise et on
<EMI ID=144.1>
la composition du concentrât initial de protéine de soya, ainsi que celle du produit protéique végétal purifié obtenu par ce procédé* On constate que la quantité de polysaccharides solubilisée par auite du traitement enzymatique est de 37% lorsqu'on effectue
<EMI ID=145.1>
TABLEAU a. 1 - Composition du concentrât de protéine de aoya et du concentrât de protéine de soya traité
<EMI ID=146.1>
<EMI ID=147.1>
<EMI ID=148.1>
la solution ainsi obtenue au mélange dont la température est réglée par un thermostat, pour obtenir
<EMI ID=149.1>
ces de coton dégraissées* Après 4 heures., on soumet
<EMI ID=150.1>
<EMI ID=151.1>
Les résultats obtenue sont repris dans le tableau 6*1*
<EMI ID=152.1>
<EMI ID=153.1>
Exemple 7
On met 86,3 g de semences de colza partiellement décortiquer broyées et dégraissées en
<EMI ID=154.1> <EMI ID=155.1>
tiellement décortiquée., broyées et dégraissées* Après un temps de réaction de 4 heures,, on soumet le
<EMI ID=156.1>
lyse de Kjeldthl pour en déterminer la teneur en azote et la teneur totale en carbohydrates en adop-
<EMI ID=157.1>
On effectue un essai analogue à celui décrit ci-dessus mais sans addition d'enzyme*
D'après les résultats obtenue, on calcule la quantité d'azote solubilisé ainsi que la quantité de carbohydrates solubilisée* Les résultats obtenus
<EMI ID=158.1>
dans le produit protéique végétal purifié traité par
<EMI ID=159.1>
ces de colza a deux pointa isoélectriques tandis que
<EMI ID=160.1>
électrique (pH s 3,5), nais également à la très fai-
<EMI ID=161.1>
<EMI ID=162.1> <EMI ID=163.1>
<EMI ID=164.1>
<EMI ID=165.1>
<EMI ID=166.1>
<EMI ID = 1.1>
PURIFIED PLANT PROTEIN AND PRODUCTS OBTAINED.
As can be seen in the aforementioned literature, a soy concentrate is a purified soy protein product containing about 70%
<EMI ID = 2.1>
after by the expression "protein". The soybean insulation product is usually obtained by acid precipitation as shown in FIG. 1, which will also be referred to below, while
<EMI ID = 3.1>
say that only 60% of the protein in soybeans is recovered in the soy insulation product, trials have been undertaken) to increase the yield of the insulation product
soybeans by the acid acid precipitation process so far these trials have not been successful
<EMI ID = 4.1>
Therefore, the production of a purified vegetable protein product, in particular a kernel insulation product, can be further improved with regard to yield, but this purified vegetable protein product, in particular, the product of Soy insulation can be further improved with regard to the sulfur amino acid content and, in general, with regard to the total essential amino acid content.
<EMI ID = 5.1>
material based on kerna does not give protective products - <EMI ID = 6.1>
dry matter) higher than that of the soy protein concentrate, The products obtained by the known processes indicated above are proteins perfectly suitable for fodder, but they have no value as regards the application for
<EMI ID = 7.1>
No known process for the removal of polysaccharides from the raw materials mentioned above involves an enzymatic decomposition using a
<EMI ID = 8.1>
The object of the present invention is to provide an economically advantageous process for the production of a purified vegetable protein product having a high protein content and a high total content of essential amino acids, in particular sulfur amino acids.
According to the present invention, provision is made
<EMI ID = 9.1>
tal purified by elimination of the afterglow (mainly consisting of polysaccharides) of a defatted or defatted vegetable protein and, moreover, partially purified into particles of granularity
<EMI ID = 10.1>
"starting material" means this process consisting in treating the starting material with an enzymatic product having
<EMI ID = 11.1> dissolved to separate = continuation, from the supernatant, the solid phase containing the purified vegetable protein product
So we will expose it below by my-
<EMI ID = 12.1>
solubilizes the remanence, which is identical to
<EMI ID = 13.1>
page 38 of the aforementioned article by Waggle and Kolar. Reference will also be made to FIG. 1 in which the remanence appears as the main part of one of the residual fractions of the traditional process for the formation of an insulation product. One can find a description of a remanase free from proteinase
<EMI ID = 14.1>
with particular reference to fraction D mentioned on page 1858 * Since the remanence consists of materials of a different chemical nature, it is preferable that the enzyme product mentioned above and having a solubilizing remanence activity contains more than one enzyme species.
Surprisingly, according to the invention, this purified vegetable protein product can be obtained.
on an industrial scale and economically advantageous by means of a remanase product free of or poor in protease. Thus, in the case of a process for the preparation of a purified soy protein product, according to the invention, this product can be obtained with a protein content of approximately
90% (corresponding to the soy insulation product) although, in addition, the purified soy product has a higher content of sulfur-containing amino acids than the traditional soy insulation product, According to the invention, it is possible to get an insulation product
<EMI ID = 15.1>
According to the invention, the defatted vegetable protein into particles with a granularity of less than approximately 2.5 mm comprises in particular defatted soybean flour, defatted rapeseed seed flour *, cotton seed flour defatted, defatted sunflower seed meal and defatted peanut flour *
According to the invention, the defatted and, in addition, partially purified vegetable protein into particles with a granularity of less than approximately
<EMI ID = 16.1>
degreased mentioned above which is subjected to additional purification by extraction of low molecular weight compounds so that the protein and the polysaccharides remain insoluble,
Preferably, the granularity of the parts
<EMI ID = 17.1>
again, less than 0.1 mm.
The residue used in the process according to the invention can be obtained by means of several microorganisms producing pectolytic enzymes, preferably fungi, by
<EMI ID = 18.1> <EMI ID = 19.1>
already existing and having a relatively high protease content, for example, commercial pectinase
<EMI ID = 20.1>
of "Novo Industri A / S", can be subjected to a physical or chemical treatment allowing to selectively eliminate or inactivate the protease activity, This
<EMI ID = 21.1>
no proteinase or forming only very small amounts can be used to obtain the product
<EMI ID = 22.1>
by mutation of a microorganism producing resta "nase.
Preferably, the ratio between the ac-
<EMI ID = 23.1>
Reference will usefully be made to the appended figures 1 to 3 which represent:
Figure 1, a comparative table of a traditional process with insulation product and a remanase process; FIG. 2, the curve of the percentage of polysaccharides solubilized with respect to the assay of <EMI ID = 24.1> charides, expressed as a function of time in minutes.
During the process according to the invention,
<EMI ID = 25.1>
<EMI ID = 26.1>
be between 15 and 500, preferably between 100 and
<EMI ID = 27.1> <EMI ID = 28.1>
white flakes *
The weight ratio between the liquid and
<EMI ID = 29.1>
<EMI ID = 30.1>
more than 1 unit and more preferably more than 0.5 unit from the isoelectric point of the main part of the protein fraction of the starting material. In the most preferred embodiment, the pH prevailing during the hydrolysis is equal to or almost equal to the isoelectric point of the main part of the protein fraction of the de-
<EMI ID = 31.1>
highlighting the isoelectric points of the main part of the protein fraction of certain starting materials which can be treated by the process of the invention *
<EMI ID = 32.1>
<EMI ID = 33.1>
1.5 pH unit) from the isoelectric point of the main part of the protein fraction of the starting material to be treated, it is advantageous to carry out
<EMI ID = 34.1>
isoelectric or about the isoelectric point of the main part of the protein fraction of the starting material before separating the solid phase from the supernatant *
The hydrolysis temperature is within
<EMI ID = 35.1>
amount of afterglow. In order to avoid microbial growth, it is desirable to shorten the hydrolysis time as much as possible * In normal practice,
<EMI ID = 36.1>
Reference is made to FIG. 3 which indicates the percentage of polysaccharides solubilized as a function of time under the following reaction conditions
<EMI ID = 37.1>
remanence corresponds to an improvement in the protein content (based on dry matter) ranging
<EMI ID = 38.1>
purified vegetable), provided that there is no <EMI ID = 39.1>
soy.
<EMI ID = 40.1>
The separation between the solid phase containing the purified vegetable protein product and the supernatant can be carried out by the usual methods of separation between the solids and the liquids.
<EMI ID = 41.1>
and decantation. For production purposes, centrifugation is preferred and it is particularly preferable to carry out several washes.- and centri-
<EMI ID = 42.1>
Normally, the solid phase from the above separation process is subjected to an additional treatment in order to improve the quality of the purified vegetable protein product. We will refer to figure 1 which indicates the preferred operations of <EMI ID = 43.1>
tion and spray drying.
The method of determination will be described below.
<EMI ID = 44.1>
The protein substrate of noya is the fraction of globulin isolated from soybeans and
<EMI ID = 45.1>
<EMI ID = 46.1>
An enzyme sample is incubated with a suspension substrate under the conditions indicated below
<EMI ID = 47.1>
The enzyme of the
<EMI ID = 48.1>
<EMI ID = 49.1>
enzyme sample diluted so as to obtain a linear reaction curve in the lap time from 0 to 20 minutes. We carry out assays at three
<EMI ID = 50.1>
the enzyme sample Samples are taken from the reaction vessel, each having a volume of
<EMI ID = 51.1>
filters each sample by means of a glass fiber filter of a dimension calculated such that the filtration takes place within a minute * Next, the quantity of dissolved nitrogen contained in the filtrate is measured by means of analysis of
<EMI ID = 52.1>
proteolytic which, by the above process releases 1 umole of nitrogen per minute (measurement carried out in <EMI ID = 53.1>
following way:
At 5.5 ml of a substrate maintained in a
<EMI ID = 54.1>
enzyme (diluted so as to obtain a linear reaction curve in the reaction time from 5 to
<EMI ID = 55.1>
<EMI ID = 56.1>
their of E, two tests are carried out; in the first test, the reaction is stopped after a period of 5 minutes while in the second test * the reaction is stopped after 20 minutes by adding 3 ml of a
<EMI ID = 57.1>
Next, the samples are filtered and the amount of galactose equivalents is measured using the tryptophan / sulfuric acid method for determining the total sugar content.
<EMI ID = 58.1>
the above method releases 1 μmol of galactose equivalent per minute (measurement carried out in the reaction time from 5 to 20 minutes) "
It appears that the SRU-E relationship is not
<EMI ID = 59.1> We have found that in addition to lignin,
the persistence of protein-rich seeds consisted mainly of the following polysaccharides
1) Pectic polysaccharidea mainly consisting of D-galacturonic acid, D-galac-
<EMI ID = 60.1>
3) Cellulose,
4) Starch.
Therefore, each enzyme product from
<EMI ID = 61.1>
Likewise, it should be noted that the process according to the invention does not require the dissolution and the reprecipitation of the soy protein which is carried out during the conventional process with c
a soy insulation product * This also appears in Figure 1 which is a diagram showing the diff
<EMI ID = 62.1>
During the extraction of the traditional process with an insulation product, the protein is transferred to the supernatant while, in
<EMI ID = 63.1>
milk '). Similarly, with reference to FIG. 1, it can be noted that the remanence is the poly-
<EMI ID = 64.1>
traditional with an insulation product "The enzymatic product according to the invention can also be used for the production of an aoya concentrate. A soy concentrate is normally obtained by washing soy flour
<EMI ID = 65.1>
Before the invention is added during the washing process, a protein content is obtained (calculated
<EMI ID = 66.1>
tional with a soy concentrate. Surprisingly, it has been found that the functional properties of the soy concentrate obtained by the enzymatic product according to the invention (in particular
<EMI ID = 67.1>
<EMI ID = 68.1>
classic soy concentrate.
Tests 1 and 2 below illustrate one.
<EMI ID = 69.1>
the invention *
Trial 1
<EMI ID = 70.1>
agar-agar substrate of the following composition *
<EMI ID = 71.1>
<EMI ID = 72.1>
nutritious trat of the following composition s
<EMI ID = 73.1>
The pH is adjusted to 5.5 before the addition of
<EMI ID = 74.1>
tes à 12110 Ce Then, transfer the entire contents of the Fernbach flask to the incubation tank. During the culture carried out in the inocula tank-
<EMI ID = 75.1>
Two loads of substrate are prepared in two main fermentation tanks with a starting volume of 300 liters of nutritive substrate,
<EMI ID = 76.1> <EMI ID = 77.1>
After 28 hours of growth in the inoculation tank, 30 liters of the contents of this tank are transferred twice to the two main fermentation tanks mentioned above. During the fermentation carried out in the two main tanks, the aeration ratio is 1 normal liter per liter of culture broth per minute, while the agitation
<EMI ID = 78.1>
second, The pressure is 0.5 atmosphere * During fermentation, a regular amount of
<EMI ID = 79.1>
statement (weight / volume).
After fermentation for 106 hours, the enzymes are recovered from the culture broth. From the two main fermentation tanks mentioned above, a total of 700 liters of a fermentation broth is obtained. This fermentation broth is filtered on a drum filter under vacuum with a preliminary coating of diatomaceous earth "Colitis
<EMI ID = 80.1>
spraying water to ensure movement We thus obtain 750 liters of a clear filtrate. By
<EMI ID = 81.1>
<EMI ID = 82.1>
30 1 of concentrate (retention product). The concentrate is subjected to a germ filtration on a filter-
<EMI ID = 83.1> <EMI ID = 84.1>
100 g of the lyophilized product are dissolved
<EMI ID = 85.1>
acetate buffer above * The filtrates are then subjected to ultrafiltration � to a diafiltration and a lyophilization, We then analyze the two
<EMI ID = 86.1>
<EMI ID = 87.1>
Example 1
This example describes the production, in lab-
<EMI ID = 88.1>
from the husked and defatted white soy flakes which are then ground to obtain a
<EMI ID = 89.1> <EMI ID = 90.1>
to determine the asote content, the total carbohydrate content (process mentioned above
<EMI ID = 91.1>
naae) and the dry matter content * Next, the solid phase is washed with a volume of water equivalent to the volume of the supernatant obtained after the first centrifugation * This operation is carried out twice * To the solid phase subjected three
<EMI ID = 92.1>
<EMI ID = 93.1>
on the basis of these results, we calculate them
<EMI ID = 94.1>
<EMI ID = 95.1>
Protein yield of the product.
purified vegetable protein, wall
basis of protein content of pro-
<EMI ID = 96.1> <EMI ID = 97.1>
Percentage of protein dry matter: him
<EMI ID = 98.1>
<EMI ID = 99.1>
<EMI ID = 100.1>
Example 2
<EMI ID = 101.1>
the solution thus obtained to a stirred suspension of soy flour, which corresponds to a dosage of
<EMI ID = 102.1>
The suspension is stirred for 120 minutes, then the suspension is centrifuged in a
<EMI ID = 103.1>
to determine the nitrogen and wick content, then remove it * The solid phase is washed
<EMI ID = 104.1>
supernatant solution as described above * This operation is repeated once again. Then we collect the. solid phase obtained and subjected to lyophilization * 46 g of a noce product are obtained. This product is analyzed to determine the protein content and the dry matter content, the following composition is determined.
<EMI ID = 105.1>
protein mass "Protein mass in products
<EMI ID = 106.1> <EMI ID = 107.1>
Basket of protein removed from soy flour 6.68 g Percentage of protein dissolved
<EMI ID = 108.1>
.
In order to determine the percentage of polysaccharides solubilized, a control test is carried out without addition of enzyme, but proceeding, for the rest, exactly as described above "
<EMI ID = 109.1> <EMI ID = 110.1>
<EMI ID = 111.1>
<EMI ID = 112.1>
<EMI ID = 113.1>
Example
This example is used to compare the protein yields and the nutritional quality of the soy protein products obtained by the three
<EMI ID = 114.1>
<EMI ID = 115.1>
<EMI ID = 116.1>
soy protein trot,
C Reaanase process for the production of a
purified vegetable protein product,
<EMI ID = 117.1>
boiled for 30 minutes at room temperature,
<EMI ID = 118.1>
centrifuge (X) and subjected to Kjeldahl analysis to determine the nitrogen content
<EMI ID = 119.1> <EMI ID = 120.1>
mine the auto and dry matter content. The solid phase is raised with water in a correct amount.
<EMI ID = 121.1>
After repeating the centrifugation, the solid phase is neutralized and subjected to lyophilization. Table 3 * 1 gives the mass balance obtained.
108.2 g of soy flour are extracted at
<EMI ID = 122.1>
nitrogen and dry matter content * The solid phase is washed (purified vegetable protein product) with
<EMI ID = 123.1>
<EMI ID = 124.1>
purified vegetable protein washed and subjected to lyophilization * Table 3 * 1 gives the mass balance obtained.
<EMI ID = 125.1>
<EMI ID = 126.1> <EMI ID = 127.1>
in dry matter * The solid phase is lifted (product '
<EMI ID = 128.1>
quantity equivalent to that of the product of centri-
<EMI ID = 129.1>
<EMI ID = 130.1>
<EMI ID = 131.1>
mass obtained.
The amino acid compositions of the three protein products are determined (see table
<EMI ID = 132.1>
essential "leads only the index of essential mined acids" * This index of essential amino acids
<EMI ID = 133.1>
<EMI ID = 134.1>
<EMI ID = 135.1>
<EMI ID = 136.1>
<EMI ID = 137.1>
<EMI ID = 138.1>
<EMI ID = 139.1>
<EMI ID = 140.1>
<EMI ID = 141.1>
tion ".
Example 4
Soy protein concentrate
<EMI ID = 142.1>
The mixture is then allowed to centrifuge
<EMI ID = 143.1>
the centrifugation product, we neutralize it and
<EMI ID = 144.1>
the composition of the initial soy protein concentrate, as well as that of the purified vegetable protein product obtained by this process * It is found that the amount of polysaccharides solubilized by the enzyme treatment is 37% when performing
<EMI ID = 145.1>
TABLE a. 1 - Composition of the Aoya Protein Concentrate and the Processed Soy Protein Concentrate
<EMI ID = 146.1>
<EMI ID = 147.1>
<EMI ID = 148.1>
the solution thus obtained to the mixture, the temperature of which is regulated by a thermostat, in order to obtain
<EMI ID = 149.1>
these degreased cotton * After 4 hours, we submit
<EMI ID = 150.1>
<EMI ID = 151.1>
The results obtained are shown in Table 6 * 1 *
<EMI ID = 152.1>
<EMI ID = 153.1>
Example 7
86.3 g of partially peeled rapeseed seeds, crushed and defatted in
<EMI ID = 154.1> <EMI ID = 155.1>
partially shelled, crushed and defatted * After a reaction time of 4 hours, the
<EMI ID = 156.1>
Kjeldthl lysis to determine the nitrogen content and the total carbohydrate content
<EMI ID = 157.1>
A test similar to that described above is carried out but without addition of enzyme *
From the results obtained, the quantity of dissolved nitrogen is calculated as well as the quantity of carbohydrates dissolved * The results obtained
<EMI ID = 158.1>
in the purified vegetable protein product treated with
<EMI ID = 159.1>
these rapeseed has two isoelectric pointa while
<EMI ID = 160.1>
electric (pH s 3.5), also born at very low
<EMI ID = 161.1>
<EMI ID = 162.1> <EMI ID = 163.1>
<EMI ID = 164.1>
<EMI ID = 165.1>
<EMI ID = 166.1>