"Composition thérapeutique pour le traitement des troubles circulatoires"
La présente invention a pour objet, à titre de médicament utilisable pour le traitement des troubles circulatoires, notamment
des vasculopathies périphériques en général et des artériopathies oblitérantes, dyscrasiques ou fonctionnelles, une composition pharmaceutique résultant de l'association de la raubasine et de la diliydroergocristine.
La raubasine (que l'on connaît également sous le nom d'ajmalicine) est un alcaloïde que l'on extrait en particulier de certaines variétés d'apocynacées et que l'on connaît en raison de ses propriétés pharmacologiques intéressantes, notamment en tant que sympathicolytique très actif.
La dihydroergocristine, quant à elle, qui dérive de l'ergot de seigle, s'obtient par hydrogénation catalytique de l'alcaloïde correspondant constitué par l'ergocristine. La dihydroergocristine présente également des effets pharmacologiques connus et importants, en tant que vasodilatateur à action centrale et en tant qu'adrénosympathicolytique.
Les deux alcaloïdes ci-dessus, administrés ensemble (comme on le prévoit, par exemple, dans le brevet français BSM
5078M) montrent des propriétés additives intéressantes pour ce qui concerne la puissance d'action et le caractère complémentaire avantageux de leurs effets particuliers, avec pour résultat un synergie extrêmement favorable.
Du point de vue thérapeutique, l'avantage de l'administration associée se manifeste par l'obtention de résultats surprenants dans le traitement de toutes les formes des vasculopathies périphériques.
On a maintenant trouvé que l'on peut obtenir une amélioration importante de l'effet thérapeutique d'une telle combinaison, en utilisant tant un sel nouveau de la raubasine, qu'une technique spéciale de préparation pharmaceutique permettant la libération graduelle, dans le temps, des deux principes actifs.
Une telle libération graduelle, dans le temps, des principes actifs de la combinaison est due au fait que le nouveau sel de l'alcaloïde raubasine présente la propriété de se dissoudre facilement dans les liquides biologiques.
Le nouveau sel de raubasine, que l'on utilise pour la présente invention, est le méthanesulfonate. On a trouvé que ce sel peut se préparer de façon commode en faisant bouillir la rauba-sine base dans un solvant, tel que du chloroforme, avec une quantité légèrement en excès, par rapport à la quantité équivalente, d'acide méthanesulfonique.
Le méthanesulfonate de raubasine correspond à la formule
<EMI ID=1.1>
se présente sous la forme de cristaux lamellaires d'un point de fusion de 295-297[deg.]C (avec décomposition) et il est soluble instantanément dans l'eau, et soluble à chaud dans l'alcool à partir duquel il cristallise. Il est insoluble dans l'éther, le benzène, le chloroforme. Son spectre dans l'infrarouge, dans des disques de
<EMI ID=2.1>
(large), 715 cm , 1620 cm , 1210 cm , 1200 cm , 1155 cm ,
1045 cm , 745 cm
Le méthanesulfonate de dihydroergocristine est un sel con-
<EMI ID=3.1>
laire est de 707,9. Il se présente sous la forme d'une poudre blanche cristalline d'un point de fusion de 210[deg.]C.
La forme pharmaceutique à libération prolongée permet de maintenir l'effet pharmacologique des deux principes actifs sur une période de temps suffisamment longue, en apportant ainsi l'avantage de permettre des administrations du médicament à de longs intervalles de temps avec une utilité remarquable dans le traitement
de la symptomatologie morbide. Ce résultat est d'une importance particulière dans le traitement des insuffisances circulatoires périphériques dans lesquelles il est essentiel que le patient se trouve constamment sous l'effet des médicaments vasodilatateurs afin de jouir, sans interruption, des effets bénéfiques d'une circulation sanguine suffisante pour assurer l'irrigation des parties tissulaires impliquées dans la maladie.
On a trouvé également que l'on obtient des résultats particulièrement significatifs, suivant ce qui a été expliqué ci-dessus, en associant des doses appropriées des deux alcaloïdes sous <EMI ID=4.1>
la forme de leurs sels méthanesulfonates.
De telles doses appropriées pour le méthanesulfonate de raubasine sont comprises entre 20 et 60 mg, tandis que, pour le méthanesulfonate de dihydroergocristine, ces doses sont comprises entre 2 et 6 mg, par dose thérapeutique unitaire. On a trouvé en pratique qu'un rapport spécialement approprié entre les deux alcaloïdes est de 10 pour 1.
Exemple 1
Préparation du méthanesulfonate de raubasine
On chauffe à ébullition, avec agitation, une suspension de 230 g de raubasine base et de 3000 ml de chloroforme. A la suspension bouillante, on ajoute graduellement 80 ml d'acide méthanesulfonique.
On évapore la moitié de la solution chloroformique ainsi obtenue. A la solution chloroformique concentrée, on ajoute le même volume d'alcool, on refroidit et on récolte ensuite, par filtration, le méthanesulfonate de raubasine cristallisé.
Le produit a un point de fusion de 297[deg.]C (avec décomposition); l'analyse centésimale a donné les résultats suivants:
Calculé pour C22H29N206.CH3S03H - N %:6,25;Trouvé, N %: 6,30
<EMI ID=5.1>
Un aspect important de la présente invention réside, comme cela apparaîtra par la suite, dans la forme pharmaceutique spéciale à action prolongée. Une telle forme pharmaceutique peut se réaliser en capsules en gélatine dure, contenant les granulés comportant les deux principes actifs en une dose de 30 mg pour le méthanesulfonate de raubasine et de 3 mg pour le méthanesulfonate de dihydroergocristine.
La préparation est réalisée de manière à obtenir une libération graduelle, dans le temps, des deux principes actifs. On a trouvé que convient bien, par exemple, une libération, au cours de
<EMI ID=6.1> principes actifs, avec ensuite une libération égale à 70% après la quatrième heure et à 100% après la huitième heure.
Une libération de ce type est capable d'assurer un effet thérapeutique sur environ 12 heures.
La formulation à effet prolongé des deux principes actifs s'obtient en utilisant une technique de micro-encapsulage grace à j laquelle le principe actif est réparti dans un nombre élevé de microsphères. Chaque microsphère est constituée, de l'intérieur vers l'extérieur, par un noyau inerte de support, un enrobage de principe actif et une membrane de dialyse. La sortie du principe actif hors des microsphères vers le liquide biologique est réglée par l'épaisseur de la membrane de dialyse.
!
<EMI ID=7.1>
phères distinctes qui sont ensuite réunies en une quantité appro- priée pour arriver au rapport réciproque désiré (par exemple 10/1). Les noyaux des microsphères sont constitués par des excipients adaptés à l'utilisation pharmaceutique spécifique, tels que, par exemple, le saccharose, l'amidon, l'acide stéarique, la polyvinylpyrrolidone, le talc, etc.
La membrane de dialyse est réalisée en utilisant des substances aptes et acceptables pour l'usage thérapeutique, qui peuvent par exemple être des polymères d'esters de l'acide méthacrylique, ou la colophane.
Les microsphères sont préparées en partant de noyaux que l'on obtient, dans une centrifugeuse appropriée, au départ d'une pâte chaude de saccharose^ 'amidon et d'eau suivant les techniques habituelles. Sur les noyaux convenablement sélectionnés, on fait ensuite adhérer le principe actif. Finalement, sur les microsphères revêtues du principe actif, on applique la membrane de dialyse en utilisant un vernis préparé avec les polymères d'esters de l'acide méthacrylique, et du talc. La technique de préparation des microsphères est décrite en détail dans l'exemple suivant.
Exemple 2
Préparation de capsules à action prolongée Chaque capsule contient:
<EMI ID=8.1>
Dans une machine capable d'une extrusion centrifuge, on prépare les microsphères en utilisant une pâte chaude de saccharose, d'amidon et d'eau.
Les microsphères sont séchées dans un courant d'air chaud et ensuite tamisées en ne récoltant que les microsphères d'un diamètre correspondant à 8 mailles. Les microsphères ainsi-obtenues constituent les noyaux de la préparation.
Dans une cuve d'enrobage, on applique sur une partie des microsphères l'un des deux principes actifs additionnés d'acide stéarique, en utilisant une solution collante préparée avec de l'eau et une partie de la polyvinylpyrrolidone.
Les microsphères sont séchées dans un courant d'air chaud. Ensuite, sur les microsphères revêtues du principe actif, on applique la membrane à libération contrôlée du principe actif en projetant, grâce à un gicleur approprié, dans la cuve, un vernis préparé avec les polymères d'esters d'acide méthacrylique et du talc. La libération du principe actif dans le temps dépend du nombre de couches d'un tel vernis, appliquées sur les microsphères revêtues du principe actif.
La partie des microsphères laissées sans vernis de dialyse sert pour la partie de la composition à libération immédiate.
Un procédé analogue est réalisé sur une partie proportionnelle des noyaux de saccharose et d'amidon, laissés de côté et destinés à l'incorporation du méthanesulfonate de dihydroergocris-
<EMI ID=9.1>
qui forme la membrane de dialyse à libération contrôlée, on mélange les micro-granulés de chaque espèce particulière pour obtenir les libérations suivantes:
(1) pour le méthanesulfonate de raubasine, libération de
30% du principe actif à la fin de la première heure, de 70% à la fin de la quatrième heure et de 100% à la fin de la huitième heure;
(2) pour le méthanesulfonate de dihydroergocristine, les mêmes pourcentages que suivant (1).
Finalement, on mélange des quantités appropriées des granulés suivantes (1) avec des granulés suivant (2) de manière à obtenir un mélange qui, à l'analyse, montre une teneur de 30 mg du principe actif suivant (1) et de 3 mg du principe actif suivant (2). Ce mélange est placé dans des capsules en gélatine dure du type
n[deg.] 2, chaque capsule contenant 300 mg.
Les expériences pharmaceutiques menées en utilisant la composition répondant aux proportions susdites a confirmé les promesses pharmacologiques, en montrant que le produit manifeste un effet vasodilatateur constant et sûr pendant une période de temps beaucoup plus longue que celle dont on pouvait jouir avec la préparation normale.
En effet, le résultat avantageux de la forme pharmaceutique à action prolongée est démontré par les expériences menées, d'un point de vue pharmacologique, avec une telle forme pharmaceutique, sur l'inhibition prolongée dans le temps des effets mortels
de la 1-adrénaline sur le rat.
On a utilisé des rats CD (Charles River) des deux sexes et d'un poids de 140-180 g, à jeun depuis 20 heures.
Les substances examinées (préparation à action retardée et préparation normale) ont été administrées directement dans l'estomac des animaux sous anesthésie à l'éther, à travers une incision pratiquée dans la paroi glandulaire de l'estomac. Après cette administration,on a suturé séparément l'incision pratiquée dans l'estomac, la tunique musculaire et la peau.
Pour la préparation à action prolongée, on se sert de capsules préparées avec les granulés obtenus suivant l'Exemple 2 précédent.
A chaque rat, on a administré une dose des principes actifs dans la forme à action prolongée, dose qui est égale à 44,4 mg/kg pour le méthanesulfonate de raubasine et à 4,4 mg/kg pour le méthanesulfonate de dihydroergocristine. A un autre groupe de rats, on a administré la même composition retard à dose plus basse, à savoir: 11,1 mg/kg de méthanesulfonate de raubasine et 1,1 mg/kg de méthanesulfonate de dihydroergocristine.
Pour le produit normal, on a utilisé une solution aqueuse de méthanesulfonate de raubasine et de méthanesulfonate de dihydroergocristine dans un rapport de 10/1,0.
Les doses (44,4; 11,1; 3,55 et 2,77 mg/kg en considérant
<EMI ID=10.1>
de poids de rat.
A divers moments du traitement, soit dans le cas de l'utilisation du produit à action prolongée, soit dans le cas de l'utilisation du produit normal , on a injecté dans la veine caudale de la 1-adrénaline en une dose de 250 �g/kg, dans un volume de solution physiologique égal à 2,5 ml/kg de poids de rat.
Un groupe d'animaux a été traité avec la solution physiologique et a été retenu comme témoin.
<EMI ID=11.1>
les diagrammes des Figures 1, 2 et 3 des dessins annexés, sur lesquels en ordonnée , on a prévu le degré de protection (%), tandis qu'en abscisse, on a prévu la durée du traitement (heures).
(a) Produit normal
En considérant le graphique de la Figure 1, on peut observer que la préparation normale a déterminé un effet protecteur visà-vis de l'action léthale de l'adrénaline sur le rat, cet effet étant proportionnel aux doses administrées.
(b) Produit à action prolongée
Le graphique de la Figure 2 démontre qu'avec les deux doses de produit à action prolongée, qui ont été étudiées, on a obtenu une protection vis-à-vis de l'action léthale de l'adrénaline, qui est d'une durée supérieure à celle obtenue avec les deux doses correspondantes de produit normal. Dans le Tableau I, on a présenté des comparaisons entre les deux ioses de produit normal et de produit à action prolongée. On peut observer que, pour la dose inférieure, un effet encore statistiquement significatif a été obtenu une heure après l'administration du produit normal et trois heures après l'administration du produit à action prolongée. Pour la dose plus élevée, la protection est encore statistiquement significative six heures après l'administration du produit normal et huit heures après l'administration du produit à action prolongée.
(c) Comparaison entre des doses de même activité du produit normal et du produit à action prolongée
Sur le graphique de la Figure 3, on peut observer que la dose de produit normal de 5,55 mg/kg est d'une activité égale, en ce qui concerne l'intensité d'effet (75% de protection après 15 minutes de traitement), à celle de la dose de 11,1 mg/kg du produit
à action prolongée. En ce qui concerne la durée de l'effet, on peut remarquer que, alors que la protection obtenue avec la préparation normale n'est plus statistiquement significative déjà une heure après le traitement, celle obtenue avec le produit à action prolongée est encore significative trois heures après le traitement.
De la comparaison entre les aires intensité-durée, il ré-suite que l'aire correspondant au produit à action prolongée est supérieure de 3,6 fois à l'aire correspondant à la préparation normale.
On peut de ce fait en conclure que l'administration du produit sous la forme de chronules a un effet également immédiat mais d'une durée supérieure à celle obtenue de la préparation en solution.
TABLEAU I
Comparaison du produit normal et du produit à action prolongéeprotection contre l'effet léthal dû à la 1-adrénaline sur le rat
<EMI ID=12.1>
(Le caractère significatif-de la différence entre les animaux témoins et les animaux traités a été estimé grâce à la méthode directe de R.A. Fisher, Metodologia statistica applicata allé Scienze biologiche, Valsalva Ed., Firenzo, 1962 - page 281).
Des essais cliniques ont été menés sur quelques cas typiques de patients affectés de vasculopathies périphériques de natures diverses et ont permis de vérifier les avantages de la forme pharmaceutique suivant l'invention comparativement à la forme pharmaceutique normale.
Les caractéristiques de la préparation en cause (action <EMI ID=13.1> thérapeutique sur une période de temps suffisamment longue et sans interruptions) ont été vérifiées cliniquement en étudiant les variations du pléthysmogramme digital.
Il est connu qu'un stimulus froid au niveau de la peau, spécialement de la paume des mains ou de la plante des pieds, provoque un réflexe vasoconstructeur d'origine sympathique.
En partant de cette connaissance, on a examiné dans quelle mesure et pendant combien de temps le produit en cause à libération retardée est capable de prévenir ou de lutter contre le réflexe de vasoconstruction "à froid", et ce comparativement au produit à libération immédiate. L'étude a été menée sur cinq patients qui présentaient une altération de la réactivité vasculaire. Le choix des patients a été réalisé en prévoyant un essai de vasodi-
<EMI ID=14.1>
dos du patient. Dans de telles conditions, on constate une augmentation généralisée de la température cutanée, généralement supérieure à 2[deg.]C; pour l'expérience, on a choisi des patients pour lesquels la température cutanée augmentait dans une mesure inférieure à 1 [deg.]C.
Les sujets choisis ont été soumis à un stimulus cutané froid qui consistait en l'immersion, pendant 2 minutes, de la main
<EMI ID=15.1>
dans ces conditions, on a vérifié une vasoconstruction dans le membre contro-latéral, d'une durée de 10 minutes, avec chute de la température cutanée, contrôlée grace à une thermométrie BLC.
Les patients ont été soumis à pléthysmographie digitale par transillumination avant le stimulus froid, après ce stimulus froid et ensuite, après le stimulus froid, chaque heure pendant 8 heures à compter de l'absorption d'une capsule du produit en cause.
Sur quatre de ces sujets, on a réalisé, le jour suivant, une expérience similaire en utilisant le produit à libération immédiate. L'estimation a été faite en choisissant l'onde sphygmique la plus haute du tracé pléthysmographique enregistré de façon continue pendant 10 minutes et en considérant comme étant égale à
100, la hauteur de cette onde enregistrée dans les conditions de base, c'est-à-dire avant l'application du stimulus froid; les variations de la hauteur des ondes enregistrées après des périodes de temps successives ont été rapportées à la première valeur et estimées en tant que variations en pour-cent, en plus ou en moins.
L'expérience a été menée sous des conditions ambiantes
(23[deg.]C) et les patients étaient au repos, à jeun depuis 5 heures, et ils ne fumaient pas.
Les médicaments ont été administrés après le premier enregistrement pléthysmographique suivant l'exposition au stimulus froid. Dans le Tableau II, on donne les résultats relatifs à cinq patients pour la recherche menée sur le produit à libération prolongée; dans le Tableau III, on donne les résultats relatifs aux patients traités en utilisant un produit à libération immédiate.
Les résultats de ces tableaux montrent clairement que le produit à libération prolongée suivant l'invention, essayé sous les conditions expérimentales susdites, est capable de prévenir et de contrecarrer le réflexe de vasoconstruction "à froid" sur une période de temps non inférieure à 8 heures après l'administration de deux capsules, tandis que le produit à libération immédiate n'est capable de protéger les patients que sur une période d'environ 1 ou 2 heures.
<EMI ID=16.1>
<EMI ID=17.1>
REVENDICATIONS
1. Composition pharmaceutique pour le traitement de troubles circulatoires, en particulier de maladies vasculaires périphériques, caractérisée en ce qu'elle comprend, en association, du méthanesulfonate de raubasine et du méthanesulfonate de dihydroergocristine, sous une forme pharmaceutique à action prolongée.
"Therapeutic composition for the treatment of circulatory disorders"
The present invention relates to, as a medicament usable for the treatment of circulatory disorders, in particular
peripheral vasculopathies in general and obliterating, dyscratic or functional arteriopathies, a pharmaceutical composition resulting from the combination of raubasine and diliydroergocristine.
Raubasine (which is also known under the name ajmalicine) is an alkaloid which is extracted in particular from certain varieties of Apocynaceae and which is known because of its interesting pharmacological properties, in particular as a very active sympathicolytic.
Dihydroergocristine, for its part, which is derived from rye ergot, is obtained by catalytic hydrogenation of the corresponding alkaloid consisting of ergocristine. Dihydroergocristine also exhibits known and important pharmacological effects, as a centrally acting vasodilator and as an adrenosympathicolytic.
The two alkaloids above, administered together (as provided, for example, in the French patent BSM
5078M) show interesting additive properties with regard to the potency of action and the advantageous complementary character of their particular effects, resulting in an extremely favorable synergy.
From a therapeutic point of view, the advantage of the combined administration is manifested by obtaining surprising results in the treatment of all forms of peripheral vasculopathies.
It has now been found that a significant improvement in the therapeutic effect of such a combination can be obtained, using both a new salt of raubasine, and a special pharmaceutical preparation technique allowing the gradual release, over time. , of the two active ingredients.
Such a gradual release, over time, of the active principles of the combination is due to the fact that the new salt of the alkaloid raubasine has the property of easily dissolving in biological fluids.
The new raubasine salt which is used for the present invention is methanesulfonate. It has been found that this salt can be conveniently prepared by boiling the raubasine base in a solvent, such as chloroform, with a slightly excess amount, over the equivalent amount, of methanesulfonic acid.
Raubasine methanesulfonate corresponds to the formula
<EMI ID = 1.1>
occurs in the form of lamellar crystals with a melting point of 295-297 [deg.] C (with decomposition) and it is instantaneously soluble in water, and soluble in hot alcohol from which it crystallizes . It is insoluble in ether, benzene, chloroform. Its spectrum in the infrared, in discs of
<EMI ID = 2.1>
(wide), 715cm, 1620cm, 1210cm, 1200cm, 1155cm,
1045 cm, 745 cm
Dihydroergocristine methanesulfonate is a common salt
<EMI ID = 3.1>
area is 707.9. It is in the form of a white crystalline powder with a melting point of 210 [deg.] C.
The sustained-release pharmaceutical form makes it possible to maintain the pharmacological effect of the two active ingredients over a sufficiently long period of time, thus providing the advantage of allowing administrations of the drug at long intervals of time with remarkable utility in the treatment.
morbid symptomatology. This result is of particular importance in the treatment of peripheral circulatory insufficiencies in which it is essential that the patient is constantly under the effect of vasodilator drugs in order to enjoy, without interruption, the beneficial effects of sufficient blood circulation to ensure irrigation of the tissue parts involved in the disease.
It has also been found that particularly significant results are obtained, as explained above, by combining appropriate doses of the two alkaloids under <EMI ID = 4.1>
the form of their methanesulfonate salts.
Such suitable doses for raubasine methanesulfonate are between 20 and 60 mg, while for dihydroergocristine methanesulfonate these doses are between 2 and 6 mg, per unit therapeutic dose. It has been found in practice that a particularly suitable ratio between the two alkaloids is 10 to 1.
Example 1
Preparation of raubasine methanesulfonate
A suspension of 230 g of raubasine base and 3000 ml of chloroform is heated to boiling, with stirring. To the boiling suspension, 80 ml of methanesulfonic acid are gradually added.
Half of the chloroform solution thus obtained is evaporated. The same volume of alcohol is added to the concentrated chloroform solution, cooled and then collected by filtration, the crystallized raubasine methanesulfonate.
The product has a melting point of 297 [deg.] C (with decomposition); the centesimal analysis gave the following results:
Calculated for C22H29N206.CH3S03H - N%: 6.25; Found, N%: 6.30
<EMI ID = 5.1>
An important aspect of the present invention resides, as will become apparent hereinafter, in the special long acting pharmaceutical form. Such a pharmaceutical form can be produced in hard gelatin capsules, containing the granules comprising the two active ingredients in a dose of 30 mg for raubasine methanesulfonate and 3 mg for dihydroergocristine methanesulfonate.
The preparation is carried out so as to obtain a gradual release, over time, of the two active ingredients. It has been found to be suitable, for example, a release, during
<EMI ID = 6.1> active ingredients, then with a release equal to 70% after the fourth hour and to 100% after the eighth hour.
A release of this type is able to provide a therapeutic effect for about 12 hours.
The long-acting formulation of the two active principles is obtained by using a microencapsulation technique whereby the active principle is distributed in a large number of microspheres. Each microsphere is made up, from the inside to the outside, of an inert support core, a coating of active principle and a dialysis membrane. The exit of the active principle out of the microspheres towards the biological liquid is regulated by the thickness of the dialysis membrane.
!
<EMI ID = 7.1>
separate spheres which are then brought together in an appropriate amount to arrive at the desired reciprocal ratio (eg 10/1). The cores of the microspheres consist of excipients suitable for specific pharmaceutical use, such as, for example, sucrose, starch, stearic acid, polyvinylpyrrolidone, talc, etc.
The dialysis membrane is made using substances suitable and acceptable for therapeutic use, which may for example be polymers of methacrylic acid esters, or rosin.
The microspheres are prepared starting from cores which are obtained, in a suitable centrifuge, from a hot paste of sucrose, starch and water according to the usual techniques. The active principle is then made to adhere to the cores suitably selected. Finally, on the microspheres coated with the active principle, the dialysis membrane is applied using a varnish prepared with the polymers of esters of methacrylic acid and of talc. The technique for preparing the microspheres is described in detail in the following example.
Example 2
Preparation of long-acting capsules Each capsule contains:
<EMI ID = 8.1>
In a machine capable of centrifugal extrusion, the microspheres are prepared using a hot paste of sucrose, starch and water.
The microspheres are dried in a stream of hot air and then sieved, collecting only the microspheres with a diameter corresponding to 8 meshes. The microspheres thus obtained constitute the nuclei of the preparation.
In a coating tank, one of the two active ingredients supplemented with stearic acid is applied to part of the microspheres, using a sticky solution prepared with water and part of the polyvinylpyrrolidone.
The microspheres are dried in a stream of hot air. Then, on the microspheres coated with the active principle, the membrane with controlled release of the active principle is applied by projecting, through an appropriate nozzle, into the tank, a varnish prepared with polymers of methacrylic acid esters and talc. The release of the active principle over time depends on the number of layers of such a varnish, applied to the microspheres coated with the active principle.
The part of the microspheres left without dialysis varnish serves for the part of the immediate release composition.
A similar process is carried out on a proportional part of the cores of sucrose and starch, left aside and intended for the incorporation of the methanesulfonate of dihydroergocris.
<EMI ID = 9.1>
which forms the controlled-release dialysis membrane, the micro-granules of each particular species are mixed to obtain the following releases:
(1) for raubasine methanesulfonate, release of
30% of the active principle at the end of the first hour, 70% at the end of the fourth hour and 100% at the end of the eighth hour;
(2) for dihydroergocristine methanesulphonate, the same percentages as following (1).
Finally, appropriate quantities of the following granules (1) are mixed with the following granules (2) so as to obtain a mixture which, on analysis, shows a content of 30 mg of the following active principle (1) and of 3 mg. of the following active ingredient (2). This mixture is placed in hard gelatin capsules of the type
n [deg.] 2, each capsule containing 300 mg.
The pharmaceutical experiments carried out using the composition corresponding to the above proportions confirmed the pharmacological promises, showing that the product exhibits a constant and safe vasodilator effect for a period of time much longer than that which could be enjoyed with the normal preparation.
Indeed, the advantageous result of the long-acting pharmaceutical form is demonstrated by the experiments carried out, from a pharmacological point of view, with such a pharmaceutical form, on the prolonged inhibition over time of the lethal effects.
of 1-adrenaline on the rat.
CD rats (Charles River) of both sexes and weighing 140-180 g were used, fasting for 20 hours.
The substances examined (delayed-action preparation and normal preparation) were administered directly into the stomachs of animals under ether anesthesia, through an incision made in the glandular wall of the stomach. After this administration, the incision made in the stomach, tunica muscle and skin was separately sutured.
For the long-acting preparation, capsules prepared with the granules obtained according to Example 2 above are used.
Each rat was administered a dose of the active ingredients in the long-acting form, which dose is equal to 44.4 mg / kg for raubasine methanesulfonate and 4.4 mg / kg for dihydroergocristine methanesulfonate. Another group of rats were administered the same depot composition at a lower dose, namely: 11.1 mg / kg of raubasine methanesulfonate and 1.1 mg / kg of dihydroergocristine methanesulfonate.
For the normal product, an aqueous solution of raubasine methanesulfonate and dihydroergocristine methanesulfonate in a ratio of 10 / 1.0 was used.
The doses (44.4; 11.1; 3.55 and 2.77 mg / kg considering
<EMI ID = 10.1>
rat weight.
At various times during the treatment, either in the case of using the long-acting product or in the case of using the normal product, 1-adrenaline was injected into the tail vein in a dose of 250%. # 65533; g / kg, in a volume of physiological solution equal to 2.5 ml / kg of rat weight.
A group of animals was treated with physiological solution and was taken as a control.
<EMI ID = 11.1>
the diagrams of Figures 1, 2 and 3 of the accompanying drawings, on which the ordinate, the degree of protection (%) is provided, while the abscissa, the duration of the treatment (hours) is provided.
(a) Normal product
By considering the graph of FIG. 1, it can be observed that the normal preparation has determined a protective effect with respect to the lethal action of adrenaline on the rat, this effect being proportional to the doses administered.
(b) Long-acting product
The graph of Figure 2 demonstrates that with the two doses of long-acting product, which were studied, we obtained protection vis-à-vis the lethal action of adrenaline, which lasts greater than that obtained with the two corresponding doses of normal product. In Table I, comparisons between the two ioses of normal product and long-acting product are presented. It can be observed that, for the lower dose, a still statistically significant effect was obtained one hour after administration of the normal product and three hours after administration of the long-acting product. For the higher dose, protection is still statistically significant six hours after administration of the normal product and eight hours after administration of the long-acting product.
(c) Comparison between doses of the same activity of the normal product and of the long-acting product
On the graph of Figure 3, it can be seen that the normal product dose of 5.55 mg / kg is of equal activity, with regard to the intensity of the effect (75% protection after 15 minutes of treatment), to that of the dose of 11.1 mg / kg of the product
long-acting. As regards the duration of the effect, it can be noted that, while the protection obtained with the normal preparation is no longer statistically significant already one hour after the treatment, that obtained with the long-acting product is still significant three hours after treatment.
From the comparison between the intensity-duration areas, it follows that the area corresponding to the long-acting product is 3.6 times greater than the area corresponding to the normal preparation.
It can therefore be concluded that the administration of the product in the form of chronules also has an immediate effect but of a longer duration than that obtained from the preparation in solution.
TABLE I
Comparison of the normal product and the long-acting product protection against the lethal effect of 1-adrenaline in the rat
<EMI ID = 12.1>
(The significance-of the difference between the control animals and the treated animals was estimated by the direct method of R.A. Fisher, Metodologia statistica applicata all Scienze biologiche, Valsalva Ed., Firenzo, 1962 - page 281).
Clinical trials have been carried out on a few typical cases of patients affected by peripheral vasculopathies of various kinds and have made it possible to verify the advantages of the pharmaceutical form according to the invention compared to the normal pharmaceutical form.
The characteristics of the preparation in question (<EMI ID = 13.1> therapeutic action over a sufficiently long period of time and without interruptions) were verified clinically by studying the variations of the digital plethysmogram.
It is known that a cold stimulus in the skin, especially the palms of the hands or the soles of the feet, causes a vaso-constructive reflex of sympathetic origin.
On the basis of this knowledge, we examined to what extent and for how long the product in question with delayed release is capable of preventing or combating the “cold” vasoconstruction reflex, compared with the product with immediate release. The study was carried out on five patients who presented with impaired vascular reactivity. The choice of patients was made by scheduling a trial of vasodi-
<EMI ID = 14.1>
back of the patient. Under such conditions, there is a generalized increase in skin temperature, generally greater than 2 [deg.] C; for the experiment, patients were selected for whom the skin temperature increased by less than 1 [deg.] C.
The selected subjects were subjected to a cold skin stimulus which consisted of the immersion, for 2 minutes, of the hand
<EMI ID = 15.1>
under these conditions, vasoconstruction in the contro-lateral limb, lasting 10 minutes, with a drop in skin temperature, controlled using BLC thermometry, was verified.
The patients were subjected to digital transillumination plethysmography before the cold stimulus, after this cold stimulus and then, after the cold stimulus, every hour for 8 hours from the absorption of a capsule of the product in question.
On four of these subjects, a similar experiment was performed the following day using the immediate release product. The estimate was made by choosing the highest sphygmic wave of the plethysmographic tracing recorded continuously for 10 minutes and considering to be equal to
100, the height of this wave recorded under basic conditions, that is to say before the application of the cold stimulus; changes in wave height recorded after successive time periods were related to the first value and estimated as percent, plus, or minus changes.
The experiment was carried out under ambient conditions
(23 [deg.] C) and the patients were at rest, fasting for 5 hours, and they did not smoke.
The drugs were administered after the first plethysmographic recording following exposure to the cold stimulus. In Table II, the results relating to five patients are given for the research carried out on the prolonged-release product; in Table III, the results relating to the patients treated using an immediate release product are given.
The results of these tables clearly show that the prolonged-release product according to the invention, tested under the aforementioned experimental conditions, is capable of preventing and countering the "cold" vasoconstruction reflex over a period of not less than 8 hours. after the administration of two capsules, while the immediate release product is only able to protect patients for a period of about 1 or 2 hours.
<EMI ID = 16.1>
<EMI ID = 17.1>
CLAIMS
1. Pharmaceutical composition for the treatment of circulatory disorders, in particular peripheral vascular diseases, characterized in that it comprises, in combination, raubasine methanesulphonate and dihydroergocristine methanesulphonate, in a long-acting pharmaceutical form.