" Dérivés de la somatostatine et leur préparation".
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tradécapeptide somatostatine . Elle'se rapporte plus particulière-
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de préparation de ces dérivés et de ces sels , aux intermédiaires utilisés dans un tel procédé et à l'utilisation de ces dérivés carba et de leurs sels. '
On a proposé le terme "somatostatine" pour désigner le
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qui empêche la sécrétion de l'hormone de croissance (somatotropine). La structure de ce facteur a été mise en évidence par P.Brazeau et collaborateurs , Science , 179 , 77 (1973) . Il s'agit d'un peptide de disulfure cyclique présentant la structure suivante :
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Les abréviations utilisées dans la présente descrip-
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ne; Cys; L-cystéine; Gly; glycine; Lys; L-lysine; Phe; L-phénylalanine; Thr; L-thréonine; Trp; 1,- tryptophane; D-Trp; D-tryptophane; et Ser : L-sérine.
La constitution du peptide de disulfure cyclique formé par la somatostatine a été confirmée par synthèse; on peut consulter , par exemple , D.Sarantakis et W.A.McKinley, Biochem.
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Compt. Rend. Ser,D, 276, 2737 (1973) et H.U. Immer et collaborateurs, Helv.Chim.Acta, 57, 730 (1974) .
L'activité physiologique importante de ce peptide de disulfure cyclique en fait un composé important en pharmacologie clinique en rapport avec le traitement de l'acromégalie et du di-
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131 (1970) et R.Guillemin dans "Chemistry and Biology of Peptides", J.Meienhofer, Ed., 3e American Peptide Symposium, Boston 1972, Ann Arbor Science Publications, Ann Arbor, Mich., 1972. Par contre , la somatostatine se métabolise facilement dans le corps . Cette propriété limite son intérêt clinique. En outre, les fournitures de cette hormone dépendent de préparations synthétiques qui sont compliquées en raison du fait que la somatostatine est constituée de 14 aminoacides.
La présente invention prévoit des dérivés carba de so- <EMI ID=8.1>
de l'hormone naturelle ou en tout cas du même ordre, ainsi qu'une durée d'activité supérieure.à celle de la somatostatine. Ces déri-
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et ils se préparent facilement par un procédé commode présentant
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ponibles., il évite des réactifs nocifs , il se réalise facilement, il utilise des groupes protecteurs aisément amovibles , et il donne un produit pur présentant un degré élevé d'activité physiologique.
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re cyclique désigne un composé dans lequel un ou deux des atomes de soufre de l'ossature cyclique ont été remplacés par un ou deux radicaux de méthylène . A titre d'exemple , on a préparé des analogues carba,d'oxytocine et on peut consulter à cet effet K.Jost, Coll. Czech. Chem. Commun., 36 , 218(1971), ainsi que des analogues carba de vasopressine ; voir à ce sujet K.Jost, et collaborateurs, Coll'.Czech.Chem. Commun., 39 , 2895(1974).
Les qualités et les avantages précédents rendent les dérivés carba suivant l'invention intéressants dans le traitement du diabète et de l'acromégalie.
Les composés suivant la présente invention sont représentés par la formule I:
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représente Trp ou D-Trp.
Un groupe préféré de composés suivant l'invention est
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D-Trp.
La présente invention englobe également les sels accep-
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Les composés de la formule I , dans laquelle X et Y ont la définition donnée, se préparent grâce à un procédé qui consiste à soumettre le peptide protégé cyclique de formule X:
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dérément acides pour-séparer les groupes protecteurs, et à isoler
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Les composés de formuler dans laquelle X et Y ont la définition donnée précédemment, se préparent par un procédé qui comprend la réaction _',= suivant la méthode de combinaison dite à l'a-
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dans laquelle R et Y ont la définition donnée précédemment , l'application d'une hydrazinolyse à ce dernier composé pour obtenir
<EMI ID=30.1> <EMI ID=31.1> <EMI ID=32.1>
dans laquelle R et Y ont la définition déjà donnée , la réaction de ce dernier composé , suivant la méthode de combinaison à l'azide, avec un-composé de formule VI:
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<EMI ID=38.1>
tion d'une hydrazinolyse ou d'une hydrolyse alcaline à ce dernier
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NH-X-CO-R<3> - (VIII)
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1
<EMI ID=43.1> <EMI ID=44.1>
sence d'un catalyseur de métal noble , pour obtenir le composé correspondant de formule IX: .
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tion du composé de formule IX avec un agent d'activation du groupe carboxyle en vue d'obtenir le peptide protégé cyclique corres-
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née ..une autre forme de mise en oeuvre du procédé de pré- <EMI ID=48.1>
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2 n .
tel que défini précédemment, comprend la réaction , suivant la méthode de combinaison à l'azide, de l'hydrazide d'hexapeptide de formule :
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dans laquelle Y a la définition donnée -, avec un composé de formu-
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le inférieur , en vue d'obtenir le composé correspondant de formule XI :
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ce dernier composé., suivant la méthode de combinaison à l'azide,
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le composé correspondant de formule XIII :
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de conditions- faiblement acides à ce dernier composé pour obtenir <EMI ID=62.1>
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dans laquelle m,n et Y ont la définition déjà donnée , l'application d'une hydrazinclyse à ce dernier composé pour obtenir l'hydrazide corresporidant de formule XV :
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de ce dernier composé, suivant la méthode de combinaison à l'azide, pour obtenir le peptide protégé cyclique correspondant de formule
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définition déj à donnée , et Y est également tel que défini précédemment .
L'invention englobe également une composition pharmaceutique comprenant un composé de formule I avec un véhicule ou support acceptable-du point de vue pharmaceutique.
L'invention englobe aussi le traitement de l'acromégalie ou du diabète chez les mammifères , ce traitement consistant à administrer à ceux-ci une quantité efficace d'un composé répon-
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D'une manière générale, les abréviations utilisées dans la présente description pour désigner les aminoacides et les groupes protecteurs sont basées sur les recommandations de la Coinmission on Biochemical Nomemclature IUPAC-IUB, Biochemistry, II ,
1726 - 1732 (1972). A titre d'exemple , Lys, Asn, Asp, Phe, Trp, D-Trp, Thr et Ser représentent les"restes" de L-lysine, L-asparagi-
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phane, L-thréonine et L-sérine. Le terme "reste" désigne un radical dérivant de l'aminoacide correspondant par élimination du radical hydroxyle du groupe carboxyle et d'un hydrogène du groupe amino.
Un certain nombre de procédés ou de techniques de préparation des peptides-sont déjà bien connus. A titre d'exemple , les groupes fonctionnels qui ne sont pas impliqués dans la réaction de formation de la liaison de peptide sont éventuellement protégés par un ou des groupes protecteurs avant la réaction de condensation . A titre d'exemple , des groupes protecteurs que <EMI ID=69.1>
noacide , non.impliquée dans. la formation de la.liaison de peptide, sont: les alcoxycarbonyles englobant le benzyloxycarbonyle (représenté par Z), le t-butoxycarbonyle (représenté-par Boc), le a, a-diméthyl-3,5-diméthoxy-benzyloxycarbonyle (représenté par Ddz) ,
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du type acyle, englobant le formyle, le.trifluoroacétyle, le phtalyle, l'acétyle (Ac) , ou le toluènesùlfonyle; les groupes protecteurs du type alcoyle -, englobant le triphénylméthyle ou trityle
(représenté: par Trt )ou le benzyle. Les groupes protecteurs préférés pour le procédé de l'invention sont : benzyloxycarbonyle, t-butoxycarbonyle, triphénylméthyle et a,a-diméthyl-3,5-diméthoxy-benzyloxycarbonyle. Les groupes protecteurs pour le radical hydroxyle de la sérine et de la thréonine sont représentés par l'acétyle, le tosyle., le benzoyle , le butyle tertiaire (représentés par But ) et le henzyle, le groupe protecteur préféré étant le butyle. tertiaire. La fonction acide carboxylique d'un peptide ou d'un aminoacide peut être considérée comme étant protégée par un ester d'alcoyle inférieur ou d'aralcoyle inférieur , notamment
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té par OEt) ou benzylique (représenté par OBzl) , ainsi que par des hydrazides substitués , notamment le t-butoxycarbonyl hydrazide (représenté par NHNH-Boc), le benzyloxycarbonyl hydrazide
(représenté par NHNH-Z), ou le a,a-diméthyl-3,5-diméthoxy-benzylocarbonyl hydrazide (représenté par NHNH-Ddz)
Pour favoriser une condensation- facile du groupe carboxyle du peptide avec un groupe amino libre d'un autre peptide en vue de créer une nouvelle liaison de peptide , le groupe carboxyle terminal doit être activé. On peut retrouver des descrip� tions des agents et des méthodes d'activation du carboxyle , ainsi que des formes activées, dans les manuels classiques de la chimie des peptides ; voir, par exemple-, K.D.Kopple,"Peptides and Amino Acids", W.A.Benjamin, Inc., New York, 1966, pages 45-51; et
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York, 1965, pages 77-128. Des exemples d'agents d'activation du groupe carboxyle pour un acide carboxylique sont le chlorure de <EMI ID=74.1>
ce d'un dialcoylcarbodiimide ; dans le cas d'un hydrazide, l'agent activant le groupe carboxyle est l'acide.nitreux. Des exemples de la forme activée du groupe carboxyle sont un chlorure d'acide , un anhydride , un azide, un ester activé ou la O-acylurée d'un dialcoylcarbodiimide. Les esters activés suivants se sont montrés particulièrement intéressants dans le procédé de la présente invention:
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le(représenté par OPcp), le �nitrophényle (représenté par ONp),ou
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L'expression "méthode de combinaison à l'azide" , que l'on utilise dans le cas présent , désigne la méthode d'activation du radical carboxyle terminal d'un fragment de peptide avec un azide , et la-condensation de cet azide de peptide avec un autre peptide comportant un groupe amino libre . L'azide de peptide se prépare de façon commode en faisant réagir un hydrazide de peptide avec un réactif qui fournit de l'acide nitreux in situ. Des réac.tifs appropriés à cet effet sont les nitrites organiques (par exemple le nitrite de t-butyle, le nitrite d'isoamyle ) ou les nitrites de métaux alcalins (par exemple le nitrite de sodium, le nitrite
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chlorhydrique , l'acide sulfurique ou l'acide phosphorique. On fait ensuite réagir l'azide de peptide correspondant ainsi obtenu-, avec un peptide ou un composé comportant un groupe amino libre en vue d'obtenir le peptide désiré. Des conditions préférées pour la mé-
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zide de-peptide avec de l'acide nitreux , formé in situ au départ d'un nitrite organique, en présence d'un acide fort, de préférence
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dans un solvant organique inerte anhydre, par exemple du diméthyl-
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dichlorure de méthylène dû tétrahydrofuranne, du dioxane , etc, à une température de -30 à 20[deg.]C , de préférence d'environ -15[deg.]C , pendant 10 à 30 minutes-en vue d'obtenir l'azide correspondant.On <EMI ID=82.1>
gir l'azide du mélange ci-dessus avec l'unité de peptide ou le
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lange de réaction, il y a un accepteur d'acide , de préférence une base organique , par exemple de la N-éthyldiisopropylamine ,de la
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lange de réaction légèrement alcalin , c'est-à-dire à un pH de pré-
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criptiors supplémentaires de cette méthode .
Les termes "peptide", 'polypeptide", "tripeptide", "hexapeptide", etc, que l'on utilise dans le cas présent englobent non seulement les peptides eux-mêmes mais aussi des peptides modifiés, avec ou sans groupes fonctionnalisés ou protecteurs. Le terme "peptide" s'utilise , dans le cas présent , pour désigner un peptide comportant 2 à 10 restes aminoacides .
L'abréviation Me désigne un groupe de méthyle , Et désigne un groupe d'éthyle , Pr désigne un groupe de propyle , et NHNH2-désigne un groupe d'hydrazide .
L'expression "alcoyle inférieur" désigne un radical
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tamment du méthyle , de l'éthyle, et du propyle.
L'expression "acide minéral" désigne les acides minéraux forts , notamment l'acide chlorhydrique , l'acide bromhydrique , l'acide sulfurique ou l'acide phosphorique. Lorsqu'on utilise cette expression dans lé cas d'un système anhydre , l'acide chlorhydrique anhydre constitue l'acide minéral préféré.
L'expression "conditions faiblement acides" , que l'on Utilise dans le cas présent , désigne des conditions dans lesquelles une solution aqueuse diluée d'un acide organique, par exemple de-l'acide formique, de l'acide acétique ou de l'acide propionique à 30-80%, de préférence à 70-80%, ou d'un mélange de tels acides, constitue un composant principal\du milieu de réaction.
L'expression "conditions modérément acide^<1> désigne, dans le cas présent , des conditions dans lesquelles des acides <EMI ID=90.1>
lisent comme composant principal du milieu da réaction à des tem-
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préférées dans ce cas sont constitués.par l'utilisation d'acide trifluoroacétique à 50-100% à une température de 0 à 30[deg.]C , ou d'acide chlorhydrique 0,1-12N en solution aqueuse ou en solution dans un solvant organique , ou encore l'utilisation d'acide chlorhydrique en solution dans des solvants organiques anhydres à une
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L'expression "nitrite organique" désigne les nitrites d'alcoyle disponibles sur le marché , par exemple le nitrite de t-butyle,-le nitrite d'isoamyle , etc.
L'expression "base organique" désigne, dans le cas présent, la triéthylamine, la N-éthylmorpholine , la N-éthyldiisopropylamine , etc.
On obtient les peptides de formules I sous la forme de la base libre ou sous forme d'un sel d'addition d'acide , soit directement grâce au procédé de l'invention , soit en faisant réa-
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niques acceptables en pharmacie , par exemple l'acide acétique , l'acide lactique, l'acide succinique , l'acide benzoïque , l'acide
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tannique ou la carboxyméthyl cellulose , et des sels avec des acides minéraux , par exemple les acides halhydriques , comme l'acide chlorhydrique , ou l'acide sulfurique et l'acide phosphorique. Il est à noter que les peptides comportent 2 atomes d'azote basiques donnant des sels d'addition avec 1 et éventuellement 2 équivalents d'acide .. Si on le désire , on convertit un sel d'addition d'acide particulier en un autre sel d'addition d'acide , par exemple un sel avec un acide non toxique , acceptable en pharmacie , par traitement avec la résine échangeuse d'ions appropriée de la manière décrite par R.A.Boissonas et collaborateurs, Helv.Chim.Acta,43_,
1349 (1960).
Des résines échangeuses d'ions appropriées sont les résines échangeuses de cations' à base de cellulose , par exemple la carboxyméthyl cellulose , ou des échangeurs de cations à base de dextrane , réticulés , chimiquement modifiés , par exemple les <EMI ID=97.1> <EMI ID=98.1>
tein et M.Winitz dans "Chemistry of the Amino Acids", John Wiley and Sons, Inc., New York et Londres, 1961, Vol. 2, p.1456.
Les peptides de la présente invention donnent des. sels complexes avec les ions de métaux lourds. Un exemple de complexe de métal lourd acceptable en pharmacie est constitué par un complexe formé avec du zinc ou avec de la zinc protamine.
Pour ce qui concerne la terminologie , ainsi que les méthodes et les conditions de réaction , on peut encore se référer aux brevets des Etats-Unis d'Amérique n[deg.]3.917.578 et 3.917.581.
Les peptides produits grâce au procédé de l'invention, ainsi que leurs sels acceptables en pharmacie , sont intéressants à raison du fait qu'ils présentent l'activité pharmacologique du tétradécapeptide naturel constitué par la stomatostatine. Leur activité est aisément mise en évidence au cours d'essais pharmacologiques , par exemple par une variante [A.V.Schally et consorts,
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C.R.Acad.Sci.Paris, Ser.D, 276, 2737 (1973)3 de la méthode in vitro
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L'activité des peptides dé formule I suivant la présente invention est également mise en évidence in vivo par une variante de l'augmentation dans le plasma , provoquée par le pento-
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comme décrit par Brazeau et collaborateurs, citation précédente. Au cours de cet essai , les peptide de la présente invention montrent un taux d'activité qui est supérieur à celui de la somatostatine.ou tout au moins du même ordre.
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ressants dans le traitement de l'acromégalie et dans des états apparentés d'hypersécrétion des endocrines , ainsi que dans le traitement du diabète chez les mammifères (voir par exemple P.Brazeau et collaborateurs , citation précédente). Lorsqu'on utilise les peptides ou leurs sels pour un tel traitement de l'acromégalie ou du diabète , on les administre à l'organisme , par exemple par voie parentérale , en combinaison avec un véhicule liquide acceptable en pharmacie. Les peptides de formule I sont d'un faible degré de toxicité. La proportion du peptide ou de son sel est déter- <EMI ID=103.1>
que des tampons ou des -stabilisants ' , ainsi que-des quantités suffisantes de sels: acceptables en pharmacie ou de glucose pour ren-
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par kg de poids corporel pour atteindre des résultats efficaces..
On peut aussi administrer des peptides ou leurs sels sous l'une des formes de dosage dites à.action-prolongée , à libération lente ou dépôt , décrites par la suite , de préférence par injection intramusculaire ou par implantation. De telles for-
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par kg de poids, corporel par jour.
Il est souvent désirable d'administrer l'agent efficace de manière continue sur des périodes prolongées de temps sous .une-forme à action prolongée , une forme à libération lente ou une forme dite dépôt. De telles formes de dosage peuvent . contenir un sel acceptable en pharmacie du peptide , présentant un faible degré de solubilité dans les fluides du corps, par exemple l'un des sels décrits par la suite , ou bien elles peuvent contenir le pep- <EMI ID=110.1>
un véhicule protecteur .empêchant une libération rapide. Dans ce dernier cas, par exemple , on peut combiner le peptide avec uns gélatine partiellement hydrolysée, non antigène , sous forme d'un
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véhicule solide acceptable en pharmacie, par exemple de 1 '.hydroxyde de zinc -, ;-et on peut l'administrer en suspension dans un véhicule liquide acceptable en pharmacie ;- ou bien encore , on peut combiner le peptide sous forme de gels où de suspensions, avec un hydrocollolde protecteur , non antigène, par exemple de la sodium
<EMI ID=112.1>
,de sodium , de la gélatine, .des acides polygalacturoniques , par exemple de la pectine, ou certains' mucopolysaccharidesen même temps <EMI ID=113.1>
liquides, aqueux ou non aqueux ', acceptables en pharmacie. Des exemples de combinaisons ou formulations de ce genre se retrouvent dans les manuels pharmaceutiques classiques, par.exemple dans "Phar-
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l'invention peuvent également s'obtenir par une micro-encapsulation dans un enrobage-.acceptable en pharmacie, par.-exemple de la gélatine, de l'alcool polyvinylique ou de l'éthyl cellulose. D'autres exemples de matières d'enrobage et des procédés utilisés pour une micro-encapsulation ont été décrits par J.A. Herbig dans
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sels du peptide , qui ne sont que faiblement solubles dans les fluides du corps, par exemple des sels avec l'acide pamoique ou l'acide tannique, sont conçues pour libérer environ 1,0 à environ
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on les administre de préférence par une injection intramusculaire. A titre de variante , certaines des formes de dosage solides énumérées'précédemment , par exemple certains sels du peptide faible-
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véhicules solides ou encore des produits d'adsorption des sels sur ces véhicules solides , par exemple des dispersions dans un hydrogel neutre d'un polymère de méthacrylate d'éthylène glycol ou de monomères similaires, réticulés comme décrit dans le brevet des Etats-
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Informe de pellets libérant à peu près les mêmes quantités que celles citées ci-dessus et oh peut implanter ces pellets par voie sous-cutanée ou intramusculaire.
Le procédé de la présente invention sera illustré ci-
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Suivant une forme particulière de préparation d'un
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donnée précédemment , la première matière de départ nécessaire , à savoir l'hydrazide de tétrapeptide de formule II , R -Lys(Boc).-
<EMI ID=124.1> <EMI ID=125.1>
pare facilement en suivant le procédé décrit dans la citation ci-
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drazinolyse est réalisée de façon commode en dissolvant l'ester de tétrapeptide dans un solvant organique.inerte par exemple du
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ce du diméthylformamide. On traite la solution avec un excès d'hydrate d'hydrazine=, par exemple 15 à 30 équivalents molaires. On maintient le mélange de réaction à une température d'environ 0
<EMI ID=128.1>
tétrapeptide correspondant de formule II par des méthodes traditionnelles , par exemple une évaporation ou une précipitation avec de l'eau.
<EMI ID=129.1>
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suppression de la protection en'a-amino de l'hexapeptide Ddz-Trp-
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et collaborateurs, citation précédente), sous- des conditions fai-
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peptide dans une solution d'acide acétique., d'acide formiqùe et d'eau (7/1/2) à environ 20-30[deg.]C pendant 12 à 30 heures . En sui.vant le procédé décrit par H.U.Immer et collaborateurs , citation précédente , mais en remplaçant le L-tryptophane par le D-trypto- <EMI ID=133.1>
Thr(But)-Ser(But)-OMe . La suppression de la protection sur ce dernier composé , sous des conditions-faiblement acides, donne l'hexapeptide.de formule III, dans'laquelle Y représente D-Trp.
Dans la phase suivante de ce procédé , on combine l' hydrazide de tétrapeptide de formule II et l'hexapeptide de formule III suivant la méthode de combinaison à l'azide pour obtenir
<EMI ID=134.1>
<EMI ID=135.1> <EMI ID=136.1>
un solvant organique inerte! de ^préférence du dimêthylformamide , et le refroidissement du mélange jusqu' à une température d'envi-
<EMI ID=137.1>
d'environ 2 à 5 équivalent molaires d'un acide minéral dans un solvant organique inerte, : de préférence 3 équivalents molaires d'aci-
<EMI ID=138.1>
<EMI ID=139.1>
1,2 équivalent molaire de nitrite de t-butyle. De cette manière ,
<EMI ID=140.1>
jà donnée. Après environ 10-20 minutes à une température d'environ
-20 a -lo[deg.]C., on ajoute une-base organique, de préférence de la
<EMI ID=141.1>
7,1 à 9. On refroidit le mélange-jusqu'à une température d'environ
-30 à -20[deg.]C , et on ajoute une solution de pratiquement 1 équivalent molaire de l'hexapeptide de formule III dans un solvant organique inerte, de préférence du dimêthylformamide , à la solution précédente contenant 1.' azide. On agite ensuite le mélange de réaction à une température d'environ -20 à -10[deg.]C pendant 1 à 2 heures, <EMI ID=142.1>
vant sous pression réduite ..On dissout le reste dans du méthanol et on ajoute de l'eau. On soumet le précipité à' chromatographie sur gel de silice pour obtenir le décapèptide cor redondant de
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en l'hydrazide de décapeptide correspondant de formule V: R -Lys
<EMI ID=145.1>
<EMI ID=146.1>
par hydrazinolyse-. On réalise celle-ci en dissolvant le décapep-
<EMI ID=147.1>
rence du dimêthylformamide, et en ajoutant un excès d'hydrate d'hydrazine , par exemple 10 à 30 équivalents molaires. Après agi-
<EMI ID=148.1>
de de décapeptide correspondant de formule V par des méthodes traditionnelles.
<EMI ID=149.1> la définition donnée, sont combinés suivant la méthode de combinaison à l'azide , de la même manière que décrit précédemment , pour
<EMI ID=150.1>
12
dans laquelle Rl,R<2>, X et.Y ont la définition donnée.
Les composés da la formule VI , dans laquelle X représente (CH2) k , où le a la définition déjà donnée , sont connus ou se préparent aisément par des procédés connus ; à titre d'exem-�
<EMI ID=151.1>
thylique d'acide 5-aminopentanolque , l'ester éthylique d'acide
<EMI ID=152.1>
ont été décrits par E.Neuzil et D.Reiss.- J.Chromatog., 21, 355
(1966) (Chem.Abstr., 64, 14262 C) , tandis que l'ester méthylique
<EMI ID=153.1>
n[deg.] 1.087.798 (Chem.Abstr., 53, 6089 h) .
Les composés de la formule VI , dans laquelle X re-
<EMI ID=154.1>
A titre d'exemple , une préparation commode comprend la réaction d'ammoniac liquide avec du lithium et du nitrate ferrique hydraté jusqu'à disparition de la couleur bleue, l'addition d'un
<EMI ID=155.1>
<EMI ID=156.1>
<EMI ID=157.1>
<EMI ID=158.1>
On fait réagir le composé de formule VII avec de l'hydrate d'hydrazine de la manière décrite précédemment pour obtenir l'hydrazide correspondant de formule VIII : R�--Lys(Boc)-Asn-
<EMI ID=159.1>
le R , X et Y ont la définition déjà donnée et R représente NFM 2'
<EMI ID=160.1>
composé mentionné en dernier lieu de formule VIII , pour obtenir le composé correspondant débarrassé-de la protection en a-amino, répondant à la formule IX : H-Lys(Boc)-Asn-Phe-Phe-Y-Lys(Boc)- <EMI ID=161.1>
<EMI ID=162.1> <EMI ID=163.1> façon commode.par hydrogénolyse , de préférence en agitant, sous
<EMI ID=164.1>
<EMI ID=165.1>
ble, par exemple du platine ou du palladium sur carbone , dans un solvant organique inerte, par exemple du méthanol, de l'éthanol ou de l'acide acétique.
On sépare aisément le groupe protecteur (Ddz) en a-amino à partir de composé de formule VIII , dans laquelle R représente Ddz , Y et X ont la définition déjà donnée , et R3 re-
<EMI ID=166.1>
<EMI ID=167.1>
dans une solution d'acide acétique , d'acide formique et d'eau
<EMI ID=168.1>
res en vue d'obtenir le composé correspondant de formule IX , dans laquelle X et Y ont la définition donnée précédemment , et R re-
<EMI ID=169.1>
A titre de variante , on peut utiliser le composé de formule VII sous des conditions alcalines , de préférence avec
<EMI ID=170.1>
dans un solvant inerte, par exemple de l'eau, du méthanol , de
<EMI ID=171.1>
mélanges de ces solvants , à une température d'environ 0 à 30[deg.]C pendant environ 10 à 60 heures. On acidifie cette solution alcaline avec de 1\acide-citrique , et le composé correspondant de for-
<EMI ID=172.1>
nition donnée précédemment , et R<3> représente OH, est isolé par des méthodes traditionnelles , par exemple par filtration , extraction, etc.
Le groupe protecteur d'amino R est séparé du compo-
<EMI ID=173.1>
manière que celle décrite précédemment pour le composé de formule VIII, dans laquelle R représente NHNH2, pour obtenir le composé correspondant 'de formule IX : H-Lys(Boc)-Asn-Phe-Phe-Y-Lys(Boc)- <EMI ID=174.1>
<EMI ID=175.1> .On cyclise le composé de formule IX en présence d'un agent d'activation du groupe carboxyle en vue d'obtenir le composé correspondant de formule X:
<EMI ID=176.1>
dans laquelle X et Y ont la définition déjà donnée . Pour réaliser cette cyclisation , on active le groupe carboxyle terminal du composé de formule IX , grâce à un agent d'activation de ce groupe carboxyle. Des. exemples d'agents d'activation et de formes activées
<EMI ID=177.1>
tivées préférées pour cette cyclisation sont choisies parmi les esters activés , la O-acylurée d'un dialcoylcarbodiimide , et un azide .
On cyclise le composé de formule IX ,
<EMI ID=178.1>
la méthode de .combinaison à l'azide pour obtenir le composé protégé cyclique correspondant de formule X , dans laquelle X et Y ont la définition dé�à donnée. Cette dernière combinaison à l'azide est de préférence réalisée en dissolvant le composé de formule IX ,
<EMI ID=179.1>
de préférence du diméthylformamide , en refroidissant ensuite le
<EMI ID=180.1>
une solution d'environ 2 à 5 équivalents molaires d'un acide minéral dans un solvant organique inerte , de préférence 3 équivalents molaires d'acide chlorhydrique dans de l'acétate d'éthyle, en ajou-
<EMI ID=181.1>
par exemple 1,2 équivalent molaire de nitrite de t-butyle, et en agitant enfin le mélange pendant 10 à 20 minutes à une température d'environ -20 à -10[deg.]C. De cette manière , l'azide correspondant de formule : H-Lys (Boc) -Asn-Phe-Phe-Y-Lys (Boc) -Thr (Bu )-Phe-Thr (Bu ) -
<EMI ID=182.1>
donnée , est présent sous forme du chlorhydrate dans la solution. Le mélange contenant ce dernier azide est dilué avec 10 fois son volume d'un solvant organique inerte , de préférence du diméthylformamide , préalablement refroidi jusqu'à une température d'environ -20à -10[deg.]C. On ajoute une base organique , de préférence de <EMI ID=183.1>
On agite le mélange à une température d'environ <EMI ID=184.1>
pendant 2.jours . et finalement à. environ 20-30[deg.]C pendant environ 1 jour. Le composé protégé cyclique de formule X est isolé du mélange de réaction par des méthodes traditionnelles , par exemple par une évaporation , une précipitation et une chromatographie.
De façon similaire , le groupe carboxyle terminal du composé de formule IX , dans laquelle R<3> représente OH, est activé en utilisant un agent d'activation , et une cyclisation se
<EMI ID=185.1>
procédé préféré d'activation du groupe carboxyle du composé de for-
<EMI ID=186.1>
siste dans l'utilisation de la méthode à ester activé . Un procédé commode pour la mise en oeuvre de cette dernière cyclisation consiste à agiter une solution du composé de formule IX , dans laquelle R . représente OH, avec 2 à 6 équivalents molaires de N-hydroxysuccinimide , de 2,4,5-trichlorophénol, de pentachlorophénol, de p-nitrophénol ou de 1-hydroxybenzotriazole , et avec 1 à 5 équivalents molaires de dicyclohexylcarbodiimide dans un solvant organique inerte , à 0-5[deg.]C pendant 10 à 30 heures , et à 20-30[deg.]C pendant -2 à 10 jours. On ajoute un accepteur organique de protons,
<EMI ID=187.1>
la N-éthyldiisopropylamine , etc, à la solution, de réaction pour
<EMI ID=188.1>
des solvants organiques , inertes appropriés parmi le chlorure de
<EMI ID=189.1>
mamide , etc. On isole le composé correspondant de formule X au départ du mélange de réaction par des méthodes traditionnelles .
Finalement , le composé procédé cyclique précité de formule X est transformé en le composé correspondant de formu-
<EMI ID=190.1>
mettant le premier composé à des conditions modérément acides ,
de manière à séparer les groupes protecteurs restants du composé cyclique de formule X . Généralement , cette phase opératoire est réalisée en dissolvant le composé cyclique dans un milieu de réac-
<EMI ID=191.1> <EMI ID=192.1> <EMI ID=193.1>
rhydrique concentré refroidi à o[deg.]C , en laissant ensuite reposer
<EMI ID=194.1>
glacial , et on refroidit la solution jusqu'à une température
<EMI ID=195.1>
que de formule [pound] . On purifie encore ce dernier composé par une chromatographie à échange d'ions , de préférence en utilisant un échangeur de cations à carboxyméthyl cellulose , et de l'acétate
<EMI ID=196.1>
sous la forme de son sel d'addition d'acide avec de l'acide acétique . A titre de variante,' on purifie le produit par une chromatographie de partage sur un dextrane réticulé , chimiquement modifié , par exemple du Sephadex LH-20, en utilisant du méthanol comme-éluant-, le produit étant obtenu sous la forme de la base
<EMI ID=197.1>
<EMI ID=198.1>
le produit étant obtenu sous la forme de son sel d'addition avec de l'acide acétique.. Une évaporation des éluats , -en reprenant le
<EMI ID=199.1>
: , Une autre forme de réalisation suivant l'invention
<EMI ID=200.1>
<EMI ID=201.1> .déjà donnée , et R représente un alcoyle inférieur , s'obtient <EMI ID=202.1> <EMI ID=203.1>
laquelle Y a- la définition déjà donnée; avec un composé de la <EMI ID=204.1> tions de la méthode de combinaison à l'azide , telle que définie
-précédemment .
<EMI ID=205.1>
<EMI ID=206.1>
<EMI ID=207.1>
le composé correspondant , pour lequel Y représente D-Trp , est <EMI ID=208.1>
D-Trp-OH. '
<EMI ID=209.1>
réagir le composé de la formule XI avec un excès molaire d'hydrate d'hydrazine , de préférence' à environ 20-30[deg.]C pendant 2 à 5 jours pour obtenir l'hydrazide correspondant de la formule XII:
<EMI ID=210.1>
<EMI ID=211.1>
Ce dernier composé de la formule XII est converti en 'l'azide cor-
<EMI ID=212.1>
définition déjà donnée , et on combine cet azide avec le tétrapaptide de la formule : H-Lys(Boc)-Asn-Phe-Phe-OMe, décrit par
<EMI ID=213.1>
ditions de la méthode de 'combinaison à l'azide , telle que décrite précédemment , en vue d'obtenir le composé'correspondant de la
<EMI ID=214.1>
et Y ont la définition déjà donnée.
<EMI ID=215.1>
cc-amino au départ du composé de la formule XIII par traitement sous des -'conditions faiblement acides de préférence en laissant reposer le composé de la formule XIII dans une solution d'acide
<EMI ID=216.1>
pendant 12 à 24 heures en vue d'obtenir le composé correspondant
<EMI ID=217.1>
m n
n et Y ont la définition déjà donnée. Ce composé de formule XIV .est mis en réaction avec un excès molaire d'hydrate d'hydrazine à environ 20-30[deg.]C pendait 20 à 30 heures en vue d'obtenir l'hydra- <EMI ID=218.1>
<EMI ID=219.1>
les conditions de la méthode de combinaison à l'azide , de la même manière que décrit précédemment pour la cyclisation du composé de formule IX.,'en vue d'obtenir le composé protégé cyclique
<EMI ID=220.1>
<EMI ID=221.1>
composé de formule X est identique sous tous les rapports au composé correspondant de formule X obtenu grâce-au procédé dé-
<EMI ID=222.1>
X est soumis à des conditions modérément acides et est purifié de la façon décrite précédemment en vue d'obtenir le composé cor-
<EMI ID=223.1>
<EMI ID=224.1>
étant identique au composé correspondant de la formule 1_ obtenu grâce au procédé décrit précédemment.
Les Exemples suivants illustrent encore plus complètement la présente invention .
Exemple 1
Ester méthylique de a,a-diméthyl-3,5-diméthoxy-benzyloxycarbonyl-
<EMI ID=225.1>
<EMI ID=226.1>
<EMI ID=227.1>
<EMI ID=228.1>
les) est chauffé au bain-marie jusqu'.à dissolution totale de l'aminoacide.- On concentre la solution et 'on forme un azéotrope du 'produit gélatineux avec du benzène (3 x 200 ml ), puis on dessè-
-che-sous pression réduite . On dissout le reste dans un système pyridine-diméthylformamide (2/1) (600 ml ) et .on agite à 47[deg.]C <EMI ID=229.1>
<EMI ID=230.1>
40,7 mmoles) dans de la pyridine (loc ml), sur une période d'une demi-heure , au mélange précédent. Or. maintient la température
à 47[deg.]C et-on poursuit l'agitation pendant 3 jours. On concentre le'.mélange de réaction en une huile visqueuse. On dissout cette <EMI ID=231.1>
<EMI ID=232.1>
lution aqueuse à 50% d'acide citrique jusqu' à un pH d'environ 4,0 ,
<EMI ID=233.1>
5 binées sont séchées sur du sulfate dé sodium et sont concentrées
<EMI ID=234.1>
<EMI ID=235.1>
<EMI ID=236.1>
(10/65 g; 0,0192 mole, décrit par H.U.Immer et autres, citation
<EMI ID=237.1>
diméthylformamide (40 ml), et on agite le mélange. On ajoute une portion, supplémentaire de N-éthylmorpholine (2,46 ml) pour amener le pH à 7 et-on agite le mélange à la température ambiante pendant 2 jours. On filtre ce mélange et on évapore le filtrat. On dissout ) le reste dans du méthanol et on ajoute de l'éther diéthylique . On récolte le précipité et on le dessèche pour obtenir le composé cité
<EMI ID=238.1>
<EMI ID=239.1>
(m, 13H).
Exemple <2>
<EMI ID=240.1>
<EMI ID=241.1>
On ajoute de l'hydrazine (2 ml) à une suspension
<EMI ID=242.1>
laborateurs, .citation précédente) dans du diméthylformamide (10 ml)
<EMI ID=243.1>
re de départ se dissolvant. On ajoute de l'eau à la solution et on récolte le précipité . On lave ce dernier à l'eau et on'dessèche sous pression réduite sur du pentoxyde de phosphore pour obtenir le composé cité en rubrique.
De la même manière mais en remplaçant le Z-Lys
(Boc)-Asn-Phe-Phe-OMe par une quantité équivalente de Ddz-Lys(Boc)- <EMI ID=244.1>
Une solution à O[deg.]C de dicyclohexylcarbodiimide
<EMI ID=245.1>
<EMI ID=246.1>
<EMI ID=247.1>
précédente ) et de N-éthylmorpholine (0,935 ml; 7,3 mmoles) dans du tétrahydroduranne (20 ml). On agite le mélange résultant pendant
<EMI ID=248.1>
�t on évapore le filtrat. On dissout le reste dans de l'acétate d'éthyle . On lave la solution avec une solution saturée de bicarbonate de sodium et une solution saturée de chlorure de sodium, on sèche sur. sulfate de magnésium et on évapore. On soumet le reste à chromatographie sur gel de silice en utilisant le sys-
<EMI ID=249.1>
cristallise le reste dans de l'acétone-benzène. pour obtenir le compose-en rubrique .,. d'un point de fusion de 162-166[deg.]C.
Exemple 4
<EMI ID=250.1> <EMI ID=251.1>
précédente ) dans 28 ml d'un solvant formé d'acide acétique , d'acide formique- et d'eau (7/1/2) est agitée à la- température ambiante pendant la nuit. On sépare le solvant sous pression.réduite: -\ On dissout le reste dans du méthanol , on neutralise avec de l'hy-
<EMI ID=252.1>
tés , on ajoute-de l'eau au reste et on agite le mélange jusqu'à formation d'une poudre blanche solide. On récolte cette poudre et on la sèche sous pression réduite sur du pentoxyde de phosphore pour obtenir le composé cité en rubrique..
De la même manière , mais en remplaçant le Ddz-
<EMI ID=253.1>
On refroidit à -20[deg.]C une solution de Z-Lys(Boc)-
<EMI ID=254.1>
méthylformamide (20 ml) . On ajoute de l'acide chlorhydrique
(2,7 N) dans de l'acétate d'éthyle (1,2 ml) , puis du nitrite de
<EMI ID=255.1>
nutes, et on ajoute 0.,79 ml de N-éthyldiisopropylamine. On re-
<EMI ID=256.1>
0,1 ml de N-éthyldiisopropylamine pour amener le pH à 8. On agite le.mélange à -15[deg.]C pendant 1 heure , à 0[deg.]C pendant 1 heure , et
à la température ambiante pendant la nuit..On sépare le solvant sous pression-réduite et on met le reste en suspension dans du méthanol. On_ajoute de l'eau , on récolte le précipité et on lave au méthanol. On soumet le précipité �hromatographie sur gel de silice en utilisant 4% de méthanol et 0,1% de triéthylamine dans <EMI ID=257.1>
<EMI ID=258.1>
Exemple 6
<EMI ID=259.1>
On ajoute 1 ml d'hydrate d'hydrazine à une solution du composé de la formule-IV : Z-Lys(Boc)-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys
<EMI ID=260.1>
<EMI ID=261.1>
température ambiante pendant 5 jours. On refoidit la solution
<EMI ID=262.1>
sèche sous pression réduite sur du pentoxyde de phosphore pour
<EMI ID=263.1>
<EMI ID=264.1>
Thr (1,83), Ser (0,97) et Phe (3,19).
De la même manière , mais en remplaçant la matière de départ susdite de formule IV par une quantité équivalente ,ces autres composés de la formule IV décrits dans l'Exemple 5, on obtient les composés suivants de la formule V: Z-Lys(Boc)-Asn-Phe-
<EMI ID=265.1>
<EMI ID=266.1>
<EMI ID=267.1>
t t
<EMI ID=268.1> <EMI ID=269.1>
On agite du lithium (1,5 g; 0,2 mole) avec
150 ml d'ammoniac liquide contenant 50 mg de nitrate ferrique hydraté , jusqu'à ce que la couleur bleue du lithium disparaisse , et on obtient une suspension grise. On ajoute du chlorhydrate de 2-aminoéthanethiol (11,4 g; 0,1 mole) avec agitation et on agite le mélange pendant 30 minutes. On ajoute ensuite de l'ester éthy-
<EMI ID=270.1>
l'ammoniac . On lave la solution éthérée avec de l'eau, on sèche sur sulfate de sodium et on sépare le solvant . On soumet le reste huileux à chromatographie sur gel de silice en utilisant 10% de méthanol et 0,1% de triéthylamine dans du chloroforme. On évaporte les éluats pour obtenir le composé cité en.rubrique , RMN
<EMI ID=271.1>
(m, 8H) et 4,8 (q, J=7Hz, 2H) .
De la même manière , en suivant le procédé pré-
<EMI ID=272.1>
<EMI ID=273.1>
plaçant le 2-aminoéthanethiol par une quantité équivalente de 3aminopropanethiol et en remplaçant l'ester, éthylique d'acide 4bromobutanoîque par une quantité équivalente d'ester éthylique
<EMI ID=274.1>
En outre, de la même manière , on obtient les composés suivants de la formule VI , dans laquelle X représente
<EMI ID=275.1> <EMI ID=276.1> ambiante pendant la nuit. On sépare le solvant sous pression réduite et on triture le reste avec du méthanol pour obtenir le composé
<EMI ID=277.1>
<EMI ID=278.1>
En suivant le procédé de l'Exemple 8 et en utilisant la matière de départ appropriée de la formule V (décrite dans
<EMI ID=279.1>
on obtient .d'autres composés de la formule VII , dans laquelle R ,
<EMI ID=280.1>
--ainsi que les -matières de départ appropriées des formules V et VI, utilisées pour la préparation de ces composés de la formule VII.
<EMI ID=281.1>
<EMI ID=282.1>
<EMI ID=283.1>
<EMI ID=284.1>
<EMI ID=285.1>
<EMI ID=286.1>
<EMI ID=287.1>
Une solution du composé de formule VII: Z-Lys
<EMI ID=288.1>
<EMI ID=289.1>
à la température ambiante pendant 60 heures. On ajoute de l'eau .et on récolte le précipité ,.puis on sèche sur du pentoxyde de <EMI ID=290.1>
<EMI ID=291.1>
En suivant le procédé de l'Exemple 28 , et en utilisant la matière de départ appropriée de formule VII , on obtient d'autres composés de la formule VIII , dans laquelle R représente
<EMI ID=292.1>
présentés par le Tableau 2, ainsi que les matières appropriées de formule VII. Dans chaque cas , la matière de départ est désignée par le numéro de l'Exemple suivant lequel elle a été préparée.
<EMI ID=293.1>
<EMI ID=294.1>
<EMI ID=295.1> <EMI ID=296.1>
sur carbone (1,5 g) dans 45 ml d'acide acétique est'agité rapidement sous une atmosphère d'hydrogène pendant 21 heure. On filtre
<EMI ID=297.1>
obtenir le composé cité en rubrique.
De la même manière mais en remplaçant la matière de
<EMI ID=298.1>
<EMI ID=299.1>
Exemples 29,3031,32,33 et 34 , on obtient respectivement les composés suivants de formule IX :
<EMI ID=300.1>
CONHNH2 (2,0 g , décrit dans l'Exemple 35) dans 17 ml d'un solvant comprenant de l'acide acétique , de l'acide formique et de l'eau <EMI ID=301.1>
<EMI ID=302.1> .sépare le solvant'sous pression réduite et on dissout le reste <EMI ID=303.1>
précipité , puis on sèche sur pentoxyde de pho�ore pour obtenir le composé cité - en rubrique.
De la même manière mais en remplaçant la matière de départ précitée de formule VIII par d'autres composés de la formule VIII décrits dans les Exemples 36,37,38,39 et 40, on obtient respectivement les composés suivants de la formule IX :
<EMI ID=304.1>
décrit dans l'Exemple 41) est dissous dans 20 ml de diméthylformamide, refroidi à -20[deg.]C , et on ajoute de l'acide chlorhydrique 2,39M dans de 1\acétate d'éthyle (1,67 ml) , puis 0,19 ml de ni-
<EMI ID=305.1>
et on ajouté du diméthylformamide (231 ml) froid (-15[deg.]C) , puis 0,957 ml de N-éthyldiisopropylamine. On agite le mélange à -15[deg.]C pendant 1 heure , à o[deg.]C pendant 2 jours et à la température amb,iante pendant 1 jour. On sépare le solvant sous pression réduite, on dissout le reste dans du méthanol et on ajoute cette dernière solution à de l'eau. On récolte le précipité et on le soumet à chromatographie sur gel de silice en utilisant 5% de méthanol et 0,1% de triéthylamine dans du chloroforme . On évapore les éluats <EMI ID=306.1>
(3-p' 00)
De la même manière en suivant le procédé précédent , on obtient d'autres composés de la formule x . A titre d'exemple , en remplaçant la matière de départ par une quantité équivalente d'autres matières de départ de la formule IX , telles que décrites.. dans les Exemples 41 et 42, on obtient les composés suivants de
la formule X :
<EMI ID=307.1>
<EMI ID=308.1>
tanolcnie
<EMI ID=309.1>
<EMI ID=310.1>
concentré (4,16 ml) est agitée rapidement à o[deg.]C sous une atmosphère d'azote pendant 10 minutes. On ajoute 300 ml d'acide acétique et on lyophilise la solution. On dissout le reste dans 100 ml d'eau
<EMI ID=311.1>
périeure du système solvant : butanol-acide acétique-eau (4/1/5), on applique une colonne d'un dextrane réticulé , chimiquement modifié (Sephadex LH-20) et on élue la colonne avec le solvant de phase supérieure. On évapore les. éluats , on dissout le reste dans de l'eau et on lyophilise pour obtenir le composé cité en rubrique;
<EMI ID=312.1>
<EMI ID=313.1>
De la même manière en suivant le procédé précédent, on obtient d'autres composés de la formule I . A titre d'exemple, en.remplaçant la matière de départ par une quantité équivalente d'autres matières de départ de la formule X telles que décrites dans l'Exemple 42 , on .obtient respectivement les composés suivants de la formule 1
<EMI ID=314.1>
<EMI ID=315.1>
Exemple 43
<EMI ID=316.1>
<EMI ID=317.1>
Une solution du composé de formule Vil Ddz-Lys(Boc)-
<EMI ID=318.1>
<EMI ID=319.1>
<EMI ID=320.1>
42 heures.- On ajoute une solution à 5% d'acide citrique.jusqu'à ce que la solution soit neutre. On récolte le précipité , on le lave à l'eau et on sèche pour obtenir le composé cité en rubrique ;
<EMI ID=321.1>
<EMI ID=322.1>
En suivant le procédé de l'Exemple 43.et en utilisant la matière de départ appropriée de formule VII , on obtient d'autres composés de la formule-VIII , dans laquelle R représenta OH..
<EMI ID=323.1>
rés dans le Tableau 3 -suivant , en même temps que les matières de départ appropriée de formule VII. Dans chaque cas, la matière de départ est identifiée par le numéro de l'Exemple suivant lequel elle a été préparée.
<EMI ID=324.1>
<EMI ID=325.1>
<EMI ID=326.1>
<EMI ID=327.1>
vant :acide acétique-acide formique-eau (7/1/2; 28 ml) est agitée à la température ambiante pendant 40 heures. On évapore la solution et on dissout le reste dans-du méthanol. On ajoute de l'eau et on récolte le précipité, on le lave à l'eau et on sèche pour obtenir le composé cité en rubrique.
De la même manière , en suivant le procédé précédent,
<EMI ID=328.1>
,représente OH. A titre d'exemple , en remplaçant la matière de départ par une quantité équivalente d'autres matières de départ de formule VIII , décrites dans les Exemples 47, 48 ,49 , 50, 51, 52 et 53, on obtient respectivement les composés suivants de formule IX :
<EMI ID=329.1>
NH(CH ) -S(CH ) COOH et H-Lys (Boc)'-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys (Boc) -Thr (Bu ) -Phe-Thr (Bu ) -Ser (Bu ) NH (CH 2)3-S(CH2)2 COOH.
Exemple 55
<EMI ID=330.1> <EMI ID=331.1>
<EMI ID=332.1>
<EMI ID=333.1>
atmosphère d'hydrogène pendant 24 heures. On filtre le mélange et on évapore le filtrat sous pression réduite pour obtenir le compo-
<EMI ID=334.1>
Exemple 56
<EMI ID=335.1>
<EMI ID=336.1>
Une solution du compose de formule VIII : H-Lvs ( Boc) -
<EMI ID=337.1>
COOH (0,45 g; décrit dans l'Exemple 54) , de 0,115 g de N-hydroxysuccinimide et de 0,07 ml de triéthylamine dans 118 ml de chlorure
<EMI ID=338.1>
<EMI ID=339.1>
<EMI ID=340.1>
5[deg.]C pendant 18 heures et à 25[deg.]C pendant 7 jours. On filtre le mélan ge et on évapore le filtrat. On lave le reste avec de l'acide ci-
<EMI ID=341.1>
phosphore pour obtenir le composé cité en rubrique.
<EMI ID=342.1>
cinimide par une quantité équivalente de 1-hydroxybenzotriazole,
<EMI ID=343.1>
on.obtient le composé cité en rubrique.
De la même manière ,.en suivant le procédé précédent, on obtient d'autres composés de la formule X.A.titre d'exemple , en remplaçant la matière de départ par une quantité équivalente
<EMI ID=344.1>
Exemples 54 et 55, on obtient respectivement les composés suivants
<EMI ID=345.1>
Exemple 57
<EMI ID=346.1>
<EMI ID=347.1>
(10�20 g ; décrit dans l'Exemple 56) dans-9 ml d'acide chlorhydri-
<EMI ID=348.1>
<EMI ID=349.1>
90 ml) et on lyophilise la solution. On dissout le reste dans 30 ml d'eau et on lyophilise à nouveau. On dissout le reste dans la phase supérieure du système solvant constitué par du butanol, de l'acide acétique et de l'eau (4/1/5) , on applique à une colonne de dextrane réticulé, chimiquement modifié (Sephadex G-25) et on élue la colonne avec le solvant de phase supérieure. On évapore les <EMI ID=350.1>
<EMI ID=351.1>
Le composé cité en rubrique du présent Exemple est
<EMI ID=352.1>
l'Exemple 44.
De la même manière , en suivant le procédé précédent,
<EMI ID=353.1>
en remplaçant la matière de départ par une quantité équivalente d'autres matières de départ' de formule X, décrites dans l'Exemple
<EMI ID=354.1>
<EMI ID=355.1>
<EMI ID=356.1>
<EMI ID=357.1>
<EMI ID=358.1>
Exemple 58
Ester éthylique d'acide a,a-diméthyl-3,5-diméthoxy-benzyloxycarbo-
<EMI ID=359.1> <EMI ID=360.1> <EMI ID=361.1>
méthylformamide (40 ml). On ajoute de l'acide chlorhydrique
(2,7 g) dans 2,64 ml d'acétate d'éthyle, puis 0,40 ml de nitrile de t-butyle. On agite la solution à -15[deg.] C pendant 15 minutes et on ajoute 1,73 ml de N-éthyldiisopropylamine. On refroidit le mélange jusqu'à - 30[deg.] C et on ajoute le composé de la formule
<EMI ID=362.1>
7). On agite-le mélange à - 15[deg.] C pendant une heure, à 0[deg.] C pendant une. heure et la température ambiante pendant la nuit. On sépare le solvant sous pression réduite et on met le reste en suspension dans du méthanol. On ajoute de l'eau, on récolte le précipité et on lave au méthanol. On soumet le précipité à chromatographie sur gel de silice en utilisant 3 % de méthanol et
0,1 % de triéthylamine dans du chloroforme. On évapore les éluats
<EMI ID=363.1>
<EMI ID=364.1>
<EMI ID=365.1>
De la même manière, en suivant le procédé précédent,
on obtient d'autres composés de la formule XI. A titre d'exemple,
<EMI ID=366.1>
valente d'autres composés de la formule VI, .tels que décrits dans l'Exemple 7, on obtient respectivement les composés suivants de la formule XI :
<EMI ID=367.1>
(CH) -COOEt.
<EMI ID=368.1>
(décrit dans l'Exemple 3) de la manière décrite par H. U. Immer et <EMI ID=369.1>
On ajoute de l'eau et on récolte le précipité, puis on sèche sur pentoxyde de phosphore pour obtenir le- composé en rubrique.;
<EMI ID=370.1>
dans l'Exemple- 58, on obtient respectivement les composés sui-
<EMI ID=371.1> <EMI ID=372.1>
<EMI ID=373.1>
diméthylformamide est refroidie à - 20[deg.] C. On ajoute de l'acide chlorhydrique (2,7 M) dans 2,5 ml d'acétate d'éthyle, puis 0,38 ml de nitrite de t-butyle. On agite la solution à - 15[deg.] C pendant
15 minutes et on ajoute 1,64 ml de N-éthyldiisbpropylamine. On refroidit le mélange jusqu'à - 30[deg.] C et on ajoute du H-Lys(Boc)- <EMI ID=374.1> collaborateurs, citation précédente). On agite.le mélange à
<EMI ID=375.1>
:pérature ambiante pendant la nuit. On sépare le solvant sous pres-
<EMI ID=376.1>
la matière solide et on. la sèche sous pression réduite sur du
<EMI ID=377.1>
<EMI ID=378.1>
De la même manière, en suivant le procédé précédent, on obtient d'autres composés de la formule XIII. A'titre d'exemple, en remplaçant la matière de,départ de la formule XII par une quantité équivalente d'autres matières de-départ de la formule XII, telles que décrites dans l'Exemple 59, on obtient respectivement les composés suivants de la formule XIII :
<EMI ID=379.1> <EMI ID=380.1>
<EMI ID=381.1>
comprenant de-l'acide acétique, de l'acide formique et de l'eau
(7/1/2) est agitée à la température ambiante pendant 16 heures. On sépare le solvant sous pression réduite et on, dissout le reste dans du méthanol. On ajoute de 1\Eau et on récolte le précipité, puis on sèche, sur pentoxyle de phosphore. On lave le précipité séché, en utilisant 40 ml d'éther de pétrole-éther (1/1) et on sèche pour retenir le composé cité en rubrique; analyse des aminoacides': Lys (1,93), Asp (0,91), Thr (1,87), Ser (0,95) et Phe (3,00).
De la même manière, en suivant le procédé précédent, on-obtient d'autres composés de la formule XIV. A titre d'exemple, en remplaçant, la matière de départ par une 'quantité équivalente d'autres matières de départ de formule XIII, telles que décrites dans l'Exemple-60, on obtient respectivement les composés suivants de la formule XIV :'- <EMI ID=382.1>
Phe-NHNH�) XV : m = 2, n = 3 et Y = Trp.
<EMI ID=383.1>
<EMI ID=384.1>
à .la température ambiante pendant la nuit. On ajoute de l'eau et on récolte le précipité, puis on sèche..sur du pentoxyde de
<EMI ID=385.1>
(� 5.195)
De la même manière, en suivant le procédé précédent, on obtient d'autres composés de la formule XV. A titré-d'exemple, en remplaçant la-matière de départ par une quantité équivalente d'autres matières de départ de la formule XIV, telles que décrites dans l'Exemple 61, on obtient respectivement les composés suivants de formule XV :
<EMI ID=386.1> <EMI ID=387.1>
<EMI ID=388.1>
<EMI ID=389.1>
décrit dans l'Exemple 62) dans 10 ml de diméthylformamide est refroidie à - 20[deg.] C et on ajoute de l'acide chlorhydrique 2,64 M-
<EMI ID=390.1>
butyle� On agite la solùtion à - 15.[deg.] C pendant 15 minutes et on ajoute 123 ml de diméthylformamide froid (- 15[deg.] C), puis 0,363
<EMI ID=391.1>
pendant une heure, à 0[deg.] C pendant 2 jours et à la température ambiante pendant un jour. On sépare le solvant sous pression réduite, on dissout le reste dans du méthanol et on ajoute la solution obtenue à de l'eau. On récolte le précipité et on le soumet à chromatographie sur gel de silice en utilisant 5% de méthanol et 0,1% de triéthylamine dans du chloroformé. On évapore les
<EMI ID=392.1>
De la même manière, en suivant le procédé précédent, <EMI ID=393.1>
matières de départ de la formule XV, telles que décrites dans l'Exemple 62, on obtient respectivement les composes suivants de
la formule X : -
<EMI ID=394.1>
Exemple 64
<EMI ID=395.1>
<EMI ID=396.1>
(0,729 g ; décrit dans l'Exemple 63) dans 4,0 ml d'acide chlorhydrique concentré est agitée rapidement à 0[deg.]C sous une atmosphère d'azote pendant 10 minutes. On ajoute 300 ml d'acide acétique et on lyophilise la solution. On reprend le reste dans 100 ml d'eau et un lyophilise à nouveau. On dissout le reste'dans la phase su- <EMI ID=397.1>
<EMI ID=398.1>
tème solvant susdit et ensuite mis en équilibre dans la phase supérieure de ce système solvant) et on élue la colonne avec le solvant de phase supérieure. On évapore les éluats, on dissout le reste dans de l'eau et on lyophilise pour obtenir le composé
<EMI ID=399.1>
De la même manière, en suivant le procédé précédent, on
<EMI ID=400.1>
<EMI ID=401.1>
re de départ par une quantité équivalente d'autres matières de dé-
<EMI ID=402.1>
telles que décrites dans l'Exemple 63, on obtient respectivement
<EMI ID=403.1>
<EMI ID=404.1>
<EMI ID=405.1>
<EMI ID=406.1>
<EMI ID=407.1>
<EMI ID=408.1>
5 une valeur de 1 à 4, et Y représente Trp ou D-Trp, ainsi que les
sels acceptables en pharmacie de ces composés.