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PROCEDE DE DEPROTEINATION DE CELLULES DE
EMI1.1
LEWl#) P:aODUIS EN RESULTANT
Les levures sont constituées par des micro-organismes unioellulaires. Observée au micros- cope chaque cellule apparaît limitée par une envelop- pe ellipsoïdale au sein de laquelle se trouve le protoplasme, le noyau et des inclusions principale- ment lipidiques, éventuellement des vacuoles et des spores selon le stade de la croissance et la nature du milieu dans lequel se trouve la cellule.-
Le protoplasme est essentiellement constitue par un gel protéinique plus ou moins uni aux corpus- cules lipidiques inclus par des liaisons lipoprotéiques.
En raison de l'utilisation primordiale des propriétés fermentaires de la levure, notamment pour la panifi- cation, et certaines applications thérapeutiques
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qui emploient la levure vivante, la question de la conservation de la levure sous cette forme vivante pose divers problèmes. En effet, la levure ne se conserve fraiche sous sa forme d'utilisation industrielle, dite levure pressée à 71 pour 100 6'eau, qu'au maximum pendant quelques semaines à condition de la maintenir dans un milieu convenablement réfrigéré.
Abandonnée à elle-même la levure s'altère en subissant les modi- fications qui la transforment rapidement, si l'on ne considère que la levure pressée maintenue, par exemple en vase clos, de telle sorte qu'elle ne subisse pas d'évaporation en une masse visqueuse d'odeur peu agréable apparemment impropre à tous usages et notamment à la parfication. Au microscope on constate que dans cette masse les cellules de levure subsistent apparem- ment intactes; cependant, une observation poussée permet de constater que le contenu cellulaire s'est échappé plus ou moins complètement par un orifice situé le plus généralement à l'extrémité d'un grand diamètre de la cellule qui s'est créée à l'emplacement où la cellule s'est séparée de la cellule mère, emplacement qui constitue en quelque sorte une zone cicatricielle de moindre résistance.
Su le plan morphologique la cellule reste apparemment intacte et conserve dans son sein notamment les inclusions lipidiques réfringentes.-
Il résulte de ces observations que, si en milieu aseptique il se produit un phénomène autolytique, qui est en fait le premier stade de l'évolution putréfac- tive de la levure, la cellule de levure est privée de son gel protoplasmique protéinique.-
Selon la présente invention qui s'applique préférentiellement à des levures, du type saccharomyces
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cerevisiae mais aussi à toute espèce de levure produits ! industriellement et présentée notamment sous forme de levure dite pressée,
on provoque le phénomène d'autolyse et on l'oriente dans des conditions dé- finies de manière à obtenir régulièrement de la levure dont les cellules sont privées de la fraction protéinique. -
On a découvert que les cellules de levure ainsi déprotéinées présentent des propriétés tout à fait remarquables et inattendues en cosmétologie, en thérapeutique et en diététique.-
Dans les applications ci-dessus on a donc étudié dans la présente invention les conditions d'ob- tention de cellules de levure déprotéinées permettant d'obtenir un produit défini dont les propriétés peuvent être mises à profit notamment.
-
Plusieurs possibilités techniques peuvent être mises en oeuvre en partant de levure pressée à 70-71% d'humidité du commerce, sans exclure l'éven- tualité, si des réalisations industrielles le permettent de partir de levures plus riches en eau.-
Un premier procédé selon la présente invention consiste à faire séjourner la levure pressée à 55 en vase clos. Au bout de quelques heures, la substance se liquéfie et des phénomènes d'autolyse apparaissent.
Mais ces phénomènes, pour être assez poussés de telle sorte que le contenu protéinique des cellules soit expulsé de manière appréciable dans le milieu extérieur, demandent plusieurs jours. L'évolution du processus peut être suivie d'une part à l'aide d'un contrôle mi- , crosoopique, d'autre part en dosant l'azote total dans
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la phase aqueuse limpide pouvant être séparée des membranes cellulaires résiduelles.-
Lorsque le processus d'expulsion est terminé les membranes cellulaires résiduelles sont séparées par tout moyen approprié, notamment par centrifu- gation, puis lavées à l'eau également par centri- fugation.
Les levures déprotéinées sont ainsi obte- nues sous forme d'un produit pâteux ou de consistance crémeuse, dont la teneur en eau peut aller jusqu'à 88 ou 90%, tout en conservant une consistance crémeuse .-
Un second procédé beaucoup plus rapide est envisagé préférentiellement, mais non exclusivement, selon la présente invenen
Dans ce procédé, qui comme le précédent ne fait appel qu'à des processus biologiques pans inter- vention de substances chimiques, acides ou basiques notamment, la levure pressée est également maintenue quelques heures en vase clos à 55 jusqu'à liquéfac- tion et début des phénomènes d'autolyse.-
Puis,
le produit obtenu est soumis à une concentration par évaporation soue pression réduite de préférence de manière à réduire la proportion d'eau résiduelle à 40 - 50%, en agitant constamment le milieu pendant l'opération. La masse est maintenue dans ces conditions, de préférence sous atmosphère d'azote, jusqu'à obtention d'une masse brunâtre de consistance pâteuse. Cette masse subit les.contrôles indiqués précédemment; elle est diluée dans de l'eau portée à 55 et soumise à centrifugation de manière à séparer comme dans le cas précédent les membranes cellulaires; ces dernières sont lavées et séparées de
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la même manière que précédemment.
On obtient finalement un produit de consistance crémeuse dont la teneur en ! eau peut aller selon le procédé de filtration utilisé jusqu'à 88-90% tout en conservant au produit une consistance crémeuse permettant de manipuler le produit aveo facilité et de mettre à profit ses propriétés physico-chimiques dans les meilleures conditions.-
Le nouveau produit obtenu présente les carac- téristiques morphologiques et physioo-chimiques suivan- ' tes. L'examen au microscope montre les membranes cellulaires des cellules de levure; pour la grande majorité d'entre elles, on observe une ouverture par laquelle le gel protéinique s'est échappé. A l'inté- rieur de l'enveloppe cellulaire on observe en outre des corpuscules réfringentes lipidiques.
La suspension de ces membranes cellulaires dans l'eau est douée de propriétés dispersantes vis-à-vis d'un grand nombre de substances notamment lipidiques, oe qui permet d'envisager le produit comme base cosmétologique.-
Du point de vue analytique voici les résultats de quelques déterminations portant sur un échantillon renfermant 89% d'humidité. -
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<tb> - <SEP> Réaction <SEP> ionique <SEP> : <SEP> pH <SEP> = <SEP> 5,0
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> - <SEP> Résidu <SEP> sec <SEP> : <SEP> 13,0 <SEP> pour <SEP> cent
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> - <SEP> Matières <SEP> grasses <SEP> : <SEP> 1,3 <SEP> pour <SEP> cent
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> - <SEP> Protéines <SEP> brutes <SEP> résiduelles
<tb>
<tb>
<tb> (azote <SEP> total <SEP> x <SEP> 6,25) <SEP> :
<SEP> 3,0 <SEP> pour <SEP> cent
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> - <SEP> Matières <SEP> minérales <SEP> (résidu <SEP> pour <SEP> cent
<tb>
<tb>
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<tb> d'incinération) <SEP> ' <SEP> ' <SEP>
<tb>
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<tb> - <SEP> Extractif <SEP> non <SEP> azoté <SEP> s <SEP> 8,4 <SEP> jour <SEP> cent
<tb>
Il convient de mentionner que le taux ceprotéine résiduelle indiqué qui correspond à 23 % de matière sèche à été déterminé par le dosage de l'azote total par kjeldahli'sa- tion ; cette méthode ne permet pas d'opérer la discrimination entre l'azote pouvant provenir soit d'un résidu protéinique intracellulaire soit des protéines pouvant entrer dans la cons- titution des membranes cellulaires.
De toute manière, si l'on considère que la levure sèche non déprotéinée renferme environ 9% d'azote total, ce qui correspond à 50,9% environ de protéine, on conviendra que le rendement de la déprotéination est notablement supérieur à 50% dans l'exemple précité. En fait, résultant d'opérations basées sur l'évolution d'un processus biologique et de procédés d'ex- traction non quantitatifs ce rendement est très satisfaisant, en faisant remarquer en outre que l'azote résiduel, hornio celui pouvant correspondre aux membranes cellulaires ne peut subsister dans le produit sous forme protéinique en raison de l'intensité des phénomènes d'hydrolyse mis en jeu.
Ces phénomènes à eux seuls et indépendamment de l'appréciation de l'azote résiduel permettent de considérer le;produit comme pratiquement totale- ment privé de protéines de telle sorte qu'il répond bien à la dénomination de levure déprotéinisée.
On remarquera enfin la forte teneur en substances extrac- tives non azotées, parmi lesquelles se placent tout naturellement des produits de dégradation des constituants cellulaires et des membranes notamment , dont les propriétés fondamentales physico- chimiques sont celles de produits colloïdaux gommeux et mueila- gineux..
La conservation du nouveau produit selon l'invention est assurée pendant un certain temps à la température ordinaire grâce à sa réaction acide qui s'oppose à la prolifération de la plupart des espèces microbiennes qui pourraient le polluer.
On peut cependant lui adjoindre dans certains cas des subs- tances antiseptiques non susceptibles de nuire aux emplois ulté- rieurs.
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La consistance de crème du nouveau produit de l'in- vention peut varier dans de larges proportions et peut être rendue plus ou moins épaisse par simple concentration. le nouveau produit selon l'invention peut aussi être deshydraté plus ou moins complètement à l'aide notamment de procédés connus : nébulisation ou atomisation , lyophilisation, procédé de H. Griffon ayant fait l'objet du brevet français n 1. 323.626 du 27 Février 1962.
Il peut alors selon le procédé de deshydratation uti- lisé être obtenu directement ou réduit en poudres plus ou moins fines.
Par deshydratation partielle utilisant, par exemple, la concentration sous pression réduite, on peut l'obtenir aussi sous forme d'une pâte plus ou moins consistante.
L'activité thérapeutique de la levure déprotéinée définie précédemment a été recherchée sur diverses affections cutanées humaines, c'est-à-dire en application du produit par voie externe. Cette recherche n'exclut pas d'ailleurs l'éven- tualité d'une activité par voie interne à l'égard de diverses affections dont les preuves pourront êtreprésentées ultérieure- ment .
Une première série d'expérimentation a permis d'abord de démontrer la parfaite tolérance cutanée du nouveau mdica- ment .
Elle a été porté surdes volontaires constitués par des éléments d'un personnel médical et hospitalier et de malades volontaires.
Elle a consisté dans l'application bijournalière de 2 à 5cm3 du produit sur toute la surface de la face interne
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de l'avant-bras gauche; un massage prolongé entraînant l'absorption quasi complète du produit par le revête- ment épithélial a été pratiqué pour chaque applica- tion.-
D'autre part la même expérience a été pratiquée après dégraissage de la peau à l'éther. -
En outre, sur six sujets l'application a eu lieu après ponçage au papier émeri très fin de la peau sur 3cm2.-
Dans tous les cas comprenant plus de trente essais aucune réaction secondaire n'a été observée, ni rougeur, ni irritation, ni sensation désagréable.
La plupart des sujets ont" noté après pénétration du produit un assouplissement de la peau avec sensation de fraicheur et la répétition des applications du produit n'a entraî- né aucune manifestation de nature allergique ou corres- pondant à une sensibilisation.-
Après avoir noce l'action lénifiante et assou- plissante du nouveau médicament sur les peaux saines ou a étudié son activité thérapeutique sur des peaux atteintes de lésions brûl@ures, plaies eczémateuses infectées ou non ulcères variqueux, escarres fessières, psoriasis, etc...
Dans tous les cas la tolérance a été parfaite 'aucune douleur à l'application de 2 à 5 cm3 de crème, pas dé douleur ni d'irritation ni d'intolérance secon- daires même après une application journalière dépassant quinze jours 'Ce traitement n'a entraîné dans aucun des cas une infection avec surinfection si fréquemment observées. On a observé au contraire une remarquable action cicatrisante des plaies, ulcères, escarres, etc...
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L'application du nouveau médicament dans de telles, affections cutanées provoque un nettoyage de la plaie, suivi rapidement d'un bourgeonnement du fond et de l'apparition de zones de prolifération très nettes , sur les bords épitholiaux.-
Le temps de cicatrisation complète, obtenue par application bijournalière d'environ 5mm3 de crème selon l'invention,
varie naturellement selon les sujets et le degré de gravité de la lésion.-
Mais on peut conclure que l'action thérapeu- tique du nouveau médicament à base de levure déprotéï- née est comparable à celle des meilleurs cicatrisants actuellement disponibles.-
Le nouveau médicament possède également une action thérapeutique remarquable sur les affections dermatologiques telles que par exemple l'acnée séborrhé- ique présentant ou non un état purulent.-
A titre d'exemple non limitatif on citera le cas d'une jeune fille présentant des éruptions d'acnée depuis plus de deux ans, ayant plus ou moins bien réagi aux différents traitements prescrits (locaux ou généraux)
et évoluant par poussées successives et laissant des cicatrices disgracieuses.-
L'application du nouveau médicament à base de levures déprotélnées a amené assez rapidement en deux ou trois semaines l'arrêt de la poussée évolutive, d'une part une épithélisation parfaite,des lésions sans cicatrice visible, d'autre part, et surtout avec un recul de plusieurs mois, un arrêt total des poussées évolutives.-
Ces différents résultats sont obtenus par application journalière ou bijournalière du nouveau
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médicament selon l'invention,
ou de compo . tions phar- maceutiques constituées essentiellement du nouveau médicament et des quantités appropriées d( divers excipients pharmaceutiquement acceptables et permettant de donner au médicament selon l'invention différentes présentations pour l'administration par ve externe telles que pommades, crèmes, lotions, poudres.-
Le nouveau produit à base de levure déprotéinée selon l'invention peut aussi être introduit dans des préparations cosmétiques notamment pour les peaux dites "grasses".-
On décrit ci-après, à titre non limitatif, des exemples de produits'de soins de beauté réalisés à partir du nouveau produit selon l'invention*- On peut réaliser des crèmes de protection et de beauté, .par exemple en émulsion de type "huile dans l'eau", pour protéger les peaux grasses.
Ces crèmes de jour et de nuit contiennent de préférence un pour- centage de 25 à 50% du nouveau produit actif de l'in- vention, mais cette indication n'est nullement limi- tative. Ces crèmes peuvent contenir, outre les parfums, protecteurs usuels en cosmétologie, des produits actifs additionnels tels que écrans solaires, antiké-..',-: rotinisants.-
On peut réaliser des laits de nettoyage et de démaquillage sous forme d'émulsions du type huile dans l'eau. La teneur en produit actif varie préférentielle- ment entre 15 et 25%.
On peut également préparer des masques protec- teurs et traitants sous la forme masques films et masques fluides. Enfin, les applications s'étendent aux lotions pour le visage et pour le corps, aux lo- tions capillaires et shampoings, aux savons à pH acide,
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aux préparations pour pulvérisations, aux sels en nature ou en compositions pour les bains, laques, rouges et fards. Les produits selon l'invention peuvent également entrer dans la composition des dentifrices et en général dans toutes les compositions utilisées pour les soins d'hygiène du corps.-
Toutes ces formes cosmétologiques et dermo- phyles peuvent être obtenues soit en partant du produit crémeux à 88-90% d'eau, soit des produits pâteux en dérivant par concentration, soit des produits obtenus sous forme pulvérulente.
Dans ce dernier cas, il peut entrer directement seul ou en mélange dans la confection ', de poudre de toilette, fards, etc..... il peut également par addition d'eau en proportion convenable donner lieu , à la reconstitution d'un produit crémeux ou pâteux.-
La nouvelle levure déprotéinée selon l'invention possède également des propriétés diététiques particuliè- res.
-
Un certain nombre d'expériences ont été réa- lisées sur l'effet de la levure déprotéinée sur la croissance des animaux et notamment sur celle des poulets Il, a été constaté que la levure déprotéinée ne contenait aucun facteur de croissance, et au contraire semblait provoquer un retard à la croissance.-
Le tableau suivant indique les résultats des expériences réalisées sur des poussins d'un jour, d'espèce Wyandotte pour la ponte. Un lot de 20 poussins est nourri normalement et constitue le lot témoin.-Un lot est soumis à une alimentation particulière dont 20% sont constitués par de la levure déprotéinée selon l'invention.
Un autre lot est soumis à une alimentation dont 50% sont constitués par de la levure déprotéinée.-
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Naissance : 28 Mai - Lots de 20 coquelets
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nombre -, .. ,. ' # # # .
Date de . -2-2---¯:2..±!±.JSU3sir.s jours Lot témoin Poudre h .Poure à
EMI12.2
<tb> 20 <SEP> p.100 <SEP> 50 <SEP> p.100
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<tb>
<tb>
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S9 toi :5, o , 45,0 ; "43-0 ler juin) l;',5 48,0 ! . i3.c 5 Juin 7 63/5- 63.5 52,5 8 Juin 10 90,0 ' Qo, 0 57,1
EMI12.4
<tb> 17 <SEP> Juin <SEP> 19 <SEP> 157.5 <SEP> 129,0
<tb>
<tb> 24 <SEP> Juin <SEP> 26 <SEP> 262,5 <SEP> 246,0
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> 2 <SEP> Juillet <SEP> 34 <SEP> 454,0 <SEP> 347,0
<tb>
<tb>
<tb>
EMI12.5
,1 *
Espace : Poussins Wyandotte, pour la ponte
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On constate qu'eu bout de 8 jours la croissance des poussins nourris à 20% aveo de la levure déprotéinée est nettement freinée par rapport à oelle des poussins du lot témoin .
Ce retard à la croissance s'accentue à mesure que se poursuit l'expérience ..:
Pour les poussins dont l'alimentation était constituée à 50% de levure déprotéinée l'expérience n'a pas été poursuivie au-delà de 8 jours car il était mani- feste que les poussins ne trouvaient pas suffisamment d'é- léments nutritifs pour assurer une croissance même ralentie..
Il apparaissait donc que la levure déprotéinée pouvait être introduite dans les produits diététiques comme agent actif de lutte contre l'embonpoint . : En diététique le-nouveau produit. selon l'inven- tien est avantageusement utilisé sous forme deshydratée.
La deshydratation est plus ou moins complète selon le procédé mis en oeuvre .
La composition du nouveau produit diététique selon l'invention considéré comme idéalement anhydre est la suivante: .
Humidité ............. 0, 0
Protéines brutes .... 22,5
Matières grasses .... 10,6
Extrait non azoté (coques ou membranes cellulaires)...... 63,6
Les substances extractives non azotées contenant notamment des coques cellulaires dégradées 'ne sont pas digestibles, gonflent en présence d'eau et jouent ainsi le r8le de ballaste. Ces substances ont également des pro- priétés mucilagineuses qui confèrent au produit une action favorable .sur le transit intestinal.
Les compositions comparées de la levure séché bien connue comme aliment et de la levure déprotéinée selon l'invention sont résumées dans le tableau suivant
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COMPOSITION COMPAREE DE LA " LEVURE SECHE ALIMENT " et de
LA " LEVURE DEPROTEINEE ".
EMI14.1
<tb>
Valeur
<tb>
<tb>
<tb> calorifi- <SEP> Eau <SEP> Protides <SEP> Lipides <SEP> Glucides
<tb>
<tb>
<tb> rapeutique
<tb>
EMI14.2
--.#.##.-.-...--.-.#-.-..-##..-.- .-. #< ....-,..#-.
EMI14.3
<tb> jevure <SEP> sèche <SEP> aliment <SEP> i <SEP> max. <SEP> 340 <SEP> @ <SEP> 8 <SEP> 45 <SEP> 2 <SEP> 35
<tb>
<tb> levure <SEP> déprotéinée <SEP> env. <SEP> 150 <SEP> 8 <SEP> 2Q <SEP> 9 <SEP> 58,5
<tb>
Cette comparaison est assez arbitraire car les trois constituants fondamentaux qui interviennent classiquement pour le calcul de la valeur calorifique ne sont pas entièrement assimilables surtout en ce qui concerne la levure déprotéinée.
Dans cette dernière ce qui est indiqué comme glucide est en fait un " extractif non azoté " représenté morphologiquement par les membranes cellulaires qui ont résisté aux phénomènes d'hydrolyse mis en oeuvre dans la préparation du produit et dont une faible proportion peut être considérée comme glucides assimilables.
Pour les protides il en est de même. Comme il est expliqué au brevet principal, la teneur en protide est exprimée par le calcul en partant de l'azote total déterminé analytiquement ; or( dans la levure déprotéinée une partie de l'azote total est à rapporter aux membranes cellulaires et par conséquent à une fraction non assimilables.
Quant aux lipides ils sont constitués par une fraction importante d'insaponifiable stérolique dont la valeur calorifique ne saurait être comparée à celle des glycérides alimentaires,
Il en résulte que les valeurs calorifiques données dans le tableau sont approximatives et n'indiquent qu'un ordre de grandeur.
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Malgré ce caractère approximatif la conclusion s'impose puisque la valeur calorifique de la levure dé- protéinée de même que la teneur en protides sont à peine la moitié de celles de la levure sèche connue,-
Le nouveau produit diététique pour la lutte contre l'embonpoint est avantageusement utilisé pour la préparation de nouvelles compositions diététiques à effet amaigrissant.-
Les proportions de produits selon l'invention à introduire dans une composition diététique varient selon l'intensité des effets désirés pour le produit fini.
Elles se situent préférentiellement entre un minimum de 10 % et un maximum de 60 %, maximum qui pourrait être dépassé sans inconvénient majeur.-
Le nouveau produit diététique peut être associé à tous les produits alimentaires tels que oeufs, . farine, sucre, amidon, chocolat, lait etc... pour la réalisation de biscuits, sablés, tablettes, comprimés, poudres de petits déjeuners, entremets etc...
Les exemples suivants sont donnés à titre illustratif et non limitatif de l'invention.- Poudre fruitée
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Levure déprotéinée ........................... 60
EMI15.2
<tb> Poudre <SEP> de <SEP> fraise <SEP> 20
<tb> Sucre <SEP> glace <SEP> ,................................. <SEP> 10
<tb>
EMI15.3
Lait écrémé Poudre ........................... 10 Poudre chocolatée (petit déjeuner)
EMI15.4
Levure déprotéinée ........................... 60 Lait écrémé poudre ........................... 15 Chocolat ..................................... 25
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EMI16.1
<tb> Amidon <SEP> Maïs <SEP> .....................,......... <SEP> 5
<tb>
EMI16.2
Sucre ..................................... 15 Biscuit Sec
EMI16.3
Levure déprotéinée ......................<.
60
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<tb> Amidon <SEP> Mais <SEP> ............................... <SEP> 15
<tb> Lait <SEP> écrémé <SEP> ............,...............,.. <SEP> 10
<tb>
EMI16.5
Margarine Il'' Il ........ " .. Il Il Il Il '" " 18 Il ... Il " " . Il Il . Il '1 ..... 5 Arôme quelconque Il.''.''''. Il .... " .. Il Il " ... Il .. " ... '4 5
EMI16.6
<tb> Levure <SEP> chimique <SEP> .........,................. <SEP> 2 <SEP> à <SEP> 5
<tb>
D'une manière générale il peut systématiquement remplacer tout ou partie de la farine introduite dans les préparations culinaires.-
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PROCESS FOR DEPROTEINATION OF CELLS
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LEWl #) P: AODUIS RESULTING
Yeasts are made up of unioellular microorganisms. Observed under the microscope, each cell appears limited by an ellipsoidal envelope within which is the protoplasm, the nucleus and mainly lipid inclusions, possibly vacuoles and spores depending on the stage of growth and the nature of the cell. medium in which the cell is located.
The protoplasm is essentially constituted by a protein gel more or less united to the lipid corpuscles included by lipoprotein bonds.
Due to the primary use of the fermentation properties of yeast, especially for breadmaking, and certain therapeutic applications
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which employ live yeast, the question of preserving the yeast in this living form poses various problems. In fact, the yeast can only be kept fresh in its form of industrial use, called yeast pressed at 71 per 100 6 'water, only at most for a few weeks, provided it is kept in a suitably refrigerated medium.
Left to itself, the yeast deteriorates by undergoing modifications which transform it rapidly, if we consider only the pressed yeast maintained, for example in a vacuum, so that it does not undergo any damage. evaporation into a viscous mass of unpleasant odor apparently unsuitable for all uses and in particular for perfuming. Under the microscope it can be seen that in this mass the yeast cells apparently remain intact; however, close observation shows that the cell content has escaped more or less completely through an orifice usually located at the end of a large diameter of the cell which was created at the site where the cell has separated from the mother cell, a location that is somewhat of a scar zone of least resistance.
On the morphological level, the cell apparently remains intact and retains in its bosom, in particular the refractive lipid inclusions.
It follows from these observations that, if in an aseptic environment an autolytic phenomenon occurs, which is in fact the first stage of the putrefactive evolution of the yeast, the yeast cell is deprived of its protoplasmic protein gel.
According to the present invention which preferably applies to yeasts, of the saccharomyces type
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cerevisiae but also to all kinds of yeast products! industrially and presented in particular in the form of so-called pressed yeast,
the phenomenon of autolysis is brought about and it is directed under defined conditions so as to regularly obtain yeast, the cells of which are deprived of the protein fraction. -
It has been discovered that the thus deproteinized yeast cells exhibit quite remarkable and unexpected properties in cosmetology, therapy and dietetics.
In the above applications, therefore, the conditions for obtaining deproteinized yeast cells have been studied in the present invention, making it possible to obtain a defined product, the properties of which can be used in particular.
-
Several technical possibilities can be implemented starting with yeast pressed at 70-71% humidity, without excluding the possibility, if industrial achievements allow it to start from yeasts richer in water.
A first method according to the present invention consists in leaving the pressed yeast at 55 in a closed vessel. After a few hours, the substance liquefies and autolysis phenomena appear.
But these phenomena, to be sufficiently extensive so that the protein content of the cells is expelled appreciably into the external environment, require several days. The progress of the process can be followed on the one hand using a micro, crosoopic control, on the other hand by measuring the total nitrogen
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the clear aqueous phase can be separated from the residual cell membranes.
When the expulsion process is complete, the residual cell membranes are separated by any suitable means, in particular by centrifugation, then washed with water also by centrifugation.
The deproteinized yeasts are thus obtained in the form of a pasty or creamy product, the water content of which can be up to 88 or 90%, while retaining a creamy consistency.
A second much faster process is envisioned preferentially, but not exclusively, according to the present invention.
In this process, which, like the preceding one, only calls on biological processes involving the intervention of chemical substances, particularly acids or bases, the pressed yeast is also kept for a few hours in a closed chamber at 55 until liquefaction and start of autolysis phenomena.
Then,
the product obtained is subjected to a concentration by evaporation under reduced pressure, preferably so as to reduce the proportion of residual water to 40-50%, while constantly stirring the medium during the operation. The mass is maintained under these conditions, preferably under a nitrogen atmosphere, until a brownish mass of pasty consistency is obtained. This mass is subjected to the controls indicated above; it is diluted in water brought to 55 and subjected to centrifugation so as to separate the cell membranes as in the previous case; these are washed and separated from
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the same way as before.
A product of creamy consistency is finally obtained, the content of which! Depending on the filtration process used, water can go up to 88-90% while keeping the product a creamy consistency allowing the product to be handled with ease and to take advantage of its physico-chemical properties under the best conditions.
The new product obtained exhibits the following morphological and physio-chemical characteristics. The microscopic examination shows the cell membranes of the yeast cells; for the vast majority of them, an opening is observed through which the protein gel has escaped. Within the cell envelope, refracting lipid corpuscles are also observed.
The suspension of these cell membranes in water is endowed with dispersing properties vis-à-vis a large number of substances, in particular lipidic substances, which makes it possible to consider the product as a cosmetic base.
From the analytical point of view here are the results of some determinations relating to a sample containing 89% moisture. -
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<tb> - <SEP> Reaction <SEP> ionic <SEP>: <SEP> pH <SEP> = <SEP> 5.0
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> - <SEP> Residue <SEP> sec <SEP>: <SEP> 13.0 <SEP> for <SEP> hundred
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> - <SEP> Fat <SEP> <SEP>: <SEP> 1.3 <SEP> for <SEP> cent
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> - <SEP> Crude <SEP> residual <SEP> proteins
<tb>
<tb>
<tb> (nitrogen <SEP> total <SEP> x <SEP> 6.25) <SEP>:
<SEP> 3.0 <SEP> for <SEP> cent
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> - <SEP> Mineral <SEP> materials <SEP> (residue <SEP> for <SEP> cent
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> incineration) <SEP> '<SEP>' <SEP>
<tb>
<Desc / Clms Page number 6>
EMI6.1
<tb> - <SEP> Extractive <SEP> no <SEP> nitrogenous <SEP> s <SEP> 8.4 <SEP> day <SEP> hundred
<tb>
It should be mentioned that the indicated residual ceprotein level which corresponds to 23% of dry matter was determined by the determination of the total nitrogen by kjeldahli'sation; this method does not make it possible to discriminate between the nitrogen which can come either from an intracellular protein residue or from proteins which can enter into the constitution of cell membranes.
In any case, if we consider that the non-deproteinized dry yeast contains about 9% of total nitrogen, which corresponds to about 50.9% of protein, it will be agreed that the yield of the deproteination is significantly greater than 50%. in the above example. In fact, resulting from operations based on the evolution of a biological process and non-quantitative extraction processes, this yield is very satisfactory, noting in addition that the residual nitrogen, hornio that which can correspond to the membranes cells cannot remain in the product in protein form because of the intensity of the hydrolysis phenomena involved.
These phenomena on their own and independently of the appreciation of the residual nitrogen make it possible to consider the product as practically completely deprived of proteins so that it corresponds well to the name of deproteinized yeast.
Finally, the high content of non-nitrogenous extractive substances will be noted, among which quite naturally are the degradation products of cellular constituents and of membranes in particular, the fundamental physicochemical properties of which are those of gummy and mueilaginous colloidal products. .
The conservation of the new product according to the invention is ensured for a certain time at ordinary temperature by virtue of its acid reaction which opposes the proliferation of most of the microbial species which could pollute it.
However, in certain cases, antiseptic substances can be added to it which are not liable to be detrimental to subsequent uses.
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The cream consistency of the new product of the invention can vary widely and can be made more or less thick by simple concentration. the new product according to the invention can also be dehydrated more or less completely using in particular known processes: nebulization or atomization, lyophilization, process of H. Griffon which was the subject of French patent n.1.323.626 of February 27 1962.
It can then, depending on the dehydration process used, be obtained directly or reduced to more or less fine powders.
By partial dehydration using, for example, the concentration under reduced pressure, it can also be obtained in the form of a more or less consistent paste.
The therapeutic activity of the deproteinized yeast defined above has been investigated on various human skin conditions, that is to say by applying the product externally. This research does not rule out the possibility of internal activity with regard to various ailments the proof of which may be presented later.
A first series of experiments made it possible first of all to demonstrate the perfect skin tolerance of the new drug.
It was focused on volunteers made up of elements of medical and hospital staff and voluntary sick people.
It consisted in the daily application of 2 to 5cm3 of the product over the entire surface of the internal face.
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of the left forearm; a prolonged massage resulting in almost complete absorption of the product by the epithelial covering was performed for each application.
On the other hand, the same experiment was carried out after degreasing the skin with ether. -
In addition, on six subjects the application took place after sanding the skin with very fine emery paper over 3cm2.
In all the cases comprising more than thirty tests no side reaction was observed, neither redness, nor irritation, nor unpleasant sensation.
Most of the subjects "noted after penetration of the product a softening of the skin with a feeling of freshness and the repetition of the applications of the product did not lead to any manifestation of an allergic nature or corresponding to sensitization."
After having noted the soothing and softening action of the new drug on healthy skin or studied its therapeutic activity on skin affected by burn lesions, eczematous wounds infected or not varicose ulcers, gluteal bedsores, psoriasis, etc. .
In all cases, tolerance was perfect 'no pain on the application of 2 to 5 cm3 of cream, no secondary pain, irritation or intolerance even after a daily application exceeding fifteen days' This treatment does not in none of the cases resulted in infection with superinfection so frequently observed. On the contrary, a remarkable healing action has been observed on wounds, ulcers, bedsores, etc.
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The application of the new drug in such skin conditions causes the wound to cleanse, quickly followed by budding of the fundus and the appearance of very distinct areas of proliferation on the epitholial margins.
The complete healing time, obtained by daily application of approximately 5mm3 of cream according to the invention,
varies naturally according to the subjects and the degree of severity of the lesion.
But we can conclude that the therapeutic action of the new drug based on deproteinized yeast is comparable to that of the best healing agents currently available.
The new drug also has a remarkable therapeutic action on dermatological conditions such as, for example, seborrheic acnea which may or may not show a purulent state.
By way of non-limiting example, we can cite the case of a young girl presenting with acne eruptions for more than two years, having reacted more or less well to the various prescribed treatments (local or general)
and evolving by successive outbreaks and leaving unsightly scars.
The application of the new drug based on deprotelated yeasts brought about rather quickly in two or three weeks the arrest of the evolutionary surge, on the one hand a perfect epithelization, lesions without visible scar, on the other hand, and especially with a decline of several months, a total cessation of progressive outbreaks.
These different results are obtained by daily or twice daily application of the new
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drug according to the invention,
or compo. Pharmaceuticals consisting essentially of the new drug and appropriate amounts of (various pharmaceutically acceptable excipients and allowing the drug according to the invention to be given different presentations for external administration such as ointments, creams, lotions, powders.
The new product based on deproteinized yeast according to the invention can also be introduced into cosmetic preparations, in particular for so-called “oily” skin.
Examples of beauty care products made from the new product according to the invention * are described below, without limitation. Protective and beauty creams can be produced, for example in emulsion of the type "oil in water", to protect oily skin.
These day and night creams preferably contain a percentage of 25 to 50% of the new active product of the invention, but this indication is in no way limiting. These creams can contain, in addition to perfumes, protectors usual in cosmetology, additional active products such as sunscreens, antike - .. ', -: rotinisants.-
Cleansing and makeup-removing milks can be produced in the form of emulsions of the oil-in-water type. The active product content preferably varies between 15 and 25%.
Protective and treating masks can also be prepared in the form of film masks and fluid masks. Finally, the applications extend to lotions for the face and for the body, to hair and shampoo, to acid pH soaps,
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to preparations for spraying, to salts in kind or in compositions for baths, lacquers, rouge and make-up. The products according to the invention can also be used in the composition of dentifrices and in general in all the compositions used for body hygiene care.
All these cosmetic and dermophylic forms can be obtained either by starting from a creamy product containing 88-90% water, or from pasty products derived by concentration, or from products obtained in pulverulent form.
In the latter case, it can enter directly alone or as a mixture in the preparation ', of toilet powder, make-up, etc ..... it can also by addition of water in suitable proportion give rise to the reconstitution of a creamy or pasty product.
The novel deproteinized yeast according to the invention also has particular dietary properties.
-
A number of experiments were carried out on the effect of deproteinized yeast on the growth of animals and in particular on that of chickens. It was found that the deproteinized yeast did not contain any growth factor, and on the contrary seemed cause retardation of growth.
The following table indicates the results of the experiments carried out on day-old chicks of the Wyandotte species for laying. A batch of 20 chicks is fed normally and constitutes the control batch. — A batch is subjected to a particular diet, 20% of which are constituted by deproteinized yeast according to the invention.
Another batch is fed in which 50% consists of deproteinized yeast.
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Birth: May 28 - Lots of 20 cockerels
EMI12.1
number -, ..,. '# # #.
Date of . -2-2 --- ¯: 2 .. ±! ± .JSU3sir.s days Control batch Powder h .Poure at
EMI12.2
<tb> 20 <SEP> p.100 <SEP> 50 <SEP> p.100
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EMI12.3
S9 you: 5.0, 45.0; "43-0 June 1) l; ', 5 48.0!. I3.c June 5 7 63 / 5- 63.5 52.5 June 8 10 90.0' Qo, 0 57.1
EMI12.4
<tb> 17 <SEP> June <SEP> 19 <SEP> 157.5 <SEP> 129.0
<tb>
<tb> 24 <SEP> June <SEP> 26 <SEP> 262.5 <SEP> 246.0
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> 2 <SEP> July <SEP> 34 <SEP> 454.0 <SEP> 347.0
<tb>
<tb>
<tb>
EMI12.5
, 1 *
Space: Wyandotte chicks, for laying eggs
<Desc / Clms Page number 13>
It is observed that after 8 days the growth of the chicks fed at 20% aveo deproteinized yeast is markedly slowed down compared with that of the chicks of the control batch.
This growth retardation is accentuated as the experiment continues ..:
For the chicks whose diet consisted of 50% deproteinized yeast, the experiment was not continued beyond 8 days because it was obvious that the chicks did not find sufficient nutrients to ensure even slow growth.
It therefore appeared that the deproteinized yeast could be introduced into dietetic products as an active agent in the fight against overweight. : In dietetics the-new product. according to the invention is advantageously used in dehydrated form.
The dehydration is more or less complete depending on the process used.
The composition of the new dietetic product according to the invention considered to be ideally anhydrous is as follows :.
Humidity ............. 0, 0
Crude protein .... 22.5
Fat .... 10.6
Non-nitrogenous extract (cell shells or membranes) ...... 63.6
Non-nitrogenous extractives containing in particular degraded cell shells' are not digestible, swell in the presence of water and thus play the role of ballast. These substances also have mucilaginous properties which confer on the product a favorable action on the intestinal transit.
The compared compositions of the well-known dried yeast as food and of the deproteinized yeast according to the invention are summarized in the following table.
<Desc / Clms Page number 14>
COMPARATIVE COMPOSITION OF "FEED DRY YEAST" and
THE "DEPROTEINED YEAST".
EMI14.1
<tb>
Value
<tb>
<tb>
<tb> calorifi- <SEP> Water <SEP> Proteins <SEP> Lipids <SEP> Carbohydrates
<tb>
<tb>
<tb> rapeutical
<tb>
EMI14.2
-. #. ##.-.-... - .-. # -.-..- ## ..-.- .-. # <....-, .. # -.
EMI14.3
<tb> jevure <SEP> dry <SEP> food <SEP> i <SEP> max. <SEP> 340 <SEP> @ <SEP> 8 <SEP> 45 <SEP> 2 <SEP> 35
<tb>
<tb> deproteinized <SEP> yeast <SEP> approx. <SEP> 150 <SEP> 8 <SEP> 2Q <SEP> 9 <SEP> 58.5
<tb>
This comparison is quite arbitrary because the three fundamental constituents which are conventionally involved in the calculation of the calorific value are not fully assimilable, especially with regard to deproteinized yeast.
In the latter what is indicated as carbohydrate is in fact a "non-nitrogenous extractant" represented morphologically by the cell membranes which have resisted the hydrolysis phenomena used in the preparation of the product and of which a small proportion can be considered as carbohydrates assimilable.
The same is true for proteins. As explained in the main patent, the protein content is expressed by calculation starting from the total nitrogen determined analytically; gold (in deproteinized yeast a part of the total nitrogen is to be related to the cell membranes and consequently to a non-assimilable fraction.
As for lipids, they are made up of a large fraction of sterolic unsaponifiable matter, the calorific value of which cannot be compared to that of food glycerides,
As a result, the calorific values given in the table are approximate and only indicate an order of magnitude.
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Despite this approximate nature, the conclusion is obvious since the calorific value of the de-protein yeast as well as the protein content are barely half that of known dry yeast, -
The new dietetic product for the fight against overweight is advantageously used for the preparation of new dietetic compositions with a slimming effect.
The proportions of products according to the invention to be introduced into a dietetic composition vary according to the intensity of the effects desired for the finished product.
They are preferably between a minimum of 10% and a maximum of 60%, a maximum that could be exceeded without major inconvenience.
The new dietetic product can be combined with all food products such as eggs,. flour, sugar, starch, chocolate, milk etc ... for making biscuits, shortbread, tablets, tablets, breakfast powders, desserts etc ...
The following examples are given by way of illustration and without limitation of the invention.
EMI15.1
Deproteinized yeast ........................... 60
EMI15.2
<tb> Strawberry <SEP> <SEP> powder <SEP> 20
<tb> Icing <SEP> sugar <SEP>, ................................. <SEP> 10
<tb>
EMI15.3
Skimmed milk Powder ........................... 10 Chocolate powder (breakfast)
EMI15.4
Deproteinized yeast ........................... 60 Skimmed milk powder ................. .......... 15 Chocolate ..................................... 25
<Desc / Clms Page number 16>
EMI16.1
<tb> Starch <SEP> Maize <SEP> ....................., ......... <SEP> 5
<tb>
EMI16.2
Sugar ..................................... 15 Dry Biscuit
EMI16.3
Deproteinized yeast ...................... <.
60
EMI16.4
<tb> Starch <SEP> But <SEP> ............................... <SEP> 15
<tb> Skimmed <SEP> milk <SEP> ............, ..............., .. <SEP> 10
<tb>
EMI16.5
Margarine He '' He ........ ".. He He He He '" "18 He ... He" ". He He. He' 1 ..... 5 Any flavor He. '' . '' ''. He .... ".. He He" ... He .. "... '4 5
EMI16.6
<tb> Chemical <SEP> yeast <SEP> ........., ................. <SEP> 2 <SEP> to <SEP> 5
<tb>
In general, it can systematically replace all or part of the flour introduced into culinary preparations.