AR117729A2 - Moléculas de unión al antígeno que se unen repetidamente a múltiples moléculas de antígeno - Google Patents
Moléculas de unión al antígeno que se unen repetidamente a múltiples moléculas de antígenoInfo
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Abstract
Los anticuerpos con una actividad de unión al antígeno más débil al pH endosómico temprano que al pH del plasma tienen la capacidad de unirse a múltiples moléculas de antígeno para una sola molécula de anticuerpo, tienen vidas medias prolongadas en plasma y disponen de más tiempo para unirse al antígeno. Reivindicación 1: Un método para disociar dentro de una célula un antígeno de un anticuerpo unido extracelularmente, caracterizado porque comprende sustituir entre uno y nueve aminoácidos del anticuerpo con histidina, o insertar entre una y nueve histidinas en el anticuerpo, en donde una posición aminoacídica de la sustitución de histidina o inserción de histidina se selecciona entre el grupo que consiste en H27, H31, H32, H33, H35, H50, H58, H59, H61, H62, H63, H64, H65, H99, H100b, H102, L24, L27, L28, L32, L53, L54, L56, L90, L92, y L94 de acuerdo con la numeración de Kabat, y la sustitución o inserción de histidina incrementa el valor KD(pH5,8) / KD(pH7,4), definido como la relación entre la actividad de unión al antígeno a pH 5,8 y la actividad de unión al antígeno a pH 7,4, en comparación con el valor KD(pH5,8) / KD(pH7,4) antes de la sustitución o inserción de histidina, en donde el anticuerpo se une a un antígeno en el cuerpo humano. Reivindicación 9: Un método para producir un anticuerpo, caracterizado porque comprende los siguientes pasos: (a) sustituir entre uno y nueve aminoácidos de un anticuerpo con histidina, o insertar entre una y nueve histidinas en un anticuerpo, en donde una posición aminoacídica de la sustitución de histidina o inserción de histidina se selecciona entre el grupo que consiste en H27, H31, H32, H33, H35, H50, H58, H59, H61, H62, H63, H64, H65, H99, H100b, H102, L24, L27, L28, L32, L53, L54, L56, L90, L92, y L94 de acuerdo con la numeración de Kabat; (b) determinar la actividad de unión al antígeno del anticuerpo a pH 7,4; (c) determinar la actividad de unión al antígeno del anticuerpo a pH 5,8; (d) seleccionar el anticuerpo cuya actividad de unión al antígeno a pH 7,4 es superior a la actividad a pH 5,8; (e) obtener el gen que codifica el anticuerpo seleccionado en el paso (d); y (f) producir el anticuerpo usando el gen obtenido en el paso (e).
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